RU2804280C2 - Phenyl-2-hydroxy-acetylamino-2-methyl-phenyl compounds - Google Patents

Phenyl-2-hydroxy-acetylamino-2-methyl-phenyl compounds Download PDF

Info

Publication number
RU2804280C2
RU2804280C2 RU2019136694A RU2019136694A RU2804280C2 RU 2804280 C2 RU2804280 C2 RU 2804280C2 RU 2019136694 A RU2019136694 A RU 2019136694A RU 2019136694 A RU2019136694 A RU 2019136694A RU 2804280 C2 RU2804280 C2 RU 2804280C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
compound
methyl
amino
pharmaceutically acceptable
formula
Prior art date
Application number
RU2019136694A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2019136694A3 (en
RU2019136694A (en
Inventor
Марта Мария СИФУЭНТЕС-ГАРСИЯ
Мария Кристина ГАРСИЯ-ПАРЕДЕС
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Priority claimed from PCT/US2018/027005 external-priority patent/WO2018194885A1/en
Publication of RU2019136694A publication Critical patent/RU2019136694A/en
Publication of RU2019136694A3 publication Critical patent/RU2019136694A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2804280C2 publication Critical patent/RU2804280C2/en

Links

Abstract

FIELD: pharmaceuticals.
SUBSTANCE: invention relates to a compound of the following formula
, where R is selected from the group consisting of and ; X is CH or N; R1 is hydrogen or fluorine; and R2 is C1-C3 alkyl; or to its pharmaceutically acceptable salt. The invention also relates to a pharmaceutical composition having PERK inhibitor activity based on the said compound.
EFFECT: obtaining new compounds and a pharmaceutical composition based on them which can be used in medicine as effective agents for the treatment of prostate cancer.
11 cl, 4 tbl, 9 ex

Description

Настоящее изобретение относится к новым фенил-2-гидрокси-ацетиламино-2-метил-фениловым соединениям, к фармацевтическим композициям, включающим соединения, к способам применения соединений для лечения физиологических расстройств, а также к промежуточным соединениям и способам, которые могут использоваться для синтеза соединений.The present invention relates to novel phenyl-2-hydroxy-acetylamino-2-methyl-phenyl compounds, pharmaceutical compositions comprising the compounds, methods of using the compounds for the treatment of physiological disorders, as well as intermediates and methods that can be used to synthesize the compounds .

Настоящее изобретение относится к области лечения рака и других заболеваний и нарушений, связанных с протеинкиназа R (PKR)-подобной протеинкиназой эндоплазматического ретикулума (PERK). PERK, киназа eIF2, участвующая в реакции несвернутых белков (UPR), регулирует синтез белка, помогает клеткам смягчать влияние стресса эндоплазматического ретикулума и участвует в опухолеобразование и выживании раковых клеток.The present invention relates to the field of treatment of cancer and other diseases and disorders associated with protein kinase R (PKR)-like protein kinase endoplasmic reticulum (PERK). PERK, an eIF2 kinase involved in the unfolded protein response (UPR), regulates protein synthesis, helps cells mitigate the effects of endoplasmic reticulum stress, and is involved in tumorigenesis and cancer cell survival.

Опухолевые клетки процветают в агрессивной микроокружающей среде, вызванной главным образом ограничением питательных веществ и кислорода, высокой метаболической потребностью и окислительным стрессом. Известно, что эти стрессы нарушают способность эндоплазматического ретикулума (ER) к сворачиванию белков, вызывая клеточный ответ на ремедиацию, известный как реакция несвернутых белков (UPR). Стресс ER способствует увеличению онкогенного потенциала раковых клеток, метастаз опухоли, устойчивости опухоли к лекарственным средствам и способности раковых клеток избегать эффективных иммунных реакций.Tumor cells thrive in a hostile microenvironment caused mainly by nutrient and oxygen limitation, high metabolic demand and oxidative stress. These stresses are known to impair the ability of the endoplasmic reticulum (ER) to fold proteins, causing a cellular remediation response known as the unfolded protein response (UPR). ER stress contributes to increased tumorigenic potential of cancer cells, tumor metastasis, tumor drug resistance, and the ability of cancer cells to evade effective immune responses.

Существует три основных ER трансмембранных сенсора UPR: 1) инозитол-требующий фермент (IRE1α/IRE1β, кодируемый ERN1 и ERN2, соответственно); 2) PKR-подобная ER-киназа (PERK, также известная как PEK, кодируемая EIF2AK3); и 3) активирующий фактор транскрипции 6α (кодируемый ATF6). Каждый из этих трех сенсоров регулируется аналогичным образом посредством связывания люминального белка-шаперона ER GRP78 или BiP (кодируемого HSPA5). Когда потребности ER в сворачивании белка превышают емкость, сниженное связывание BiP приводит к активации этих белков-сенсоров ER, что приводит к индукции скоординированных сигнальных путей для увеличения способности ER к сворачиванию и ослаблению основного стресса. Эффективные ответы приводят к адаптации и выживанию клеток, а непоправимый стресс ER вызывает гибель клеток и апоптоз.There are three major ER transmembrane sensors of the UPR: 1) inositol-requiring enzyme (IRE1α/IRE1β, encoded by ERN1 and ERN2 , respectively); 2) PKR-like ER kinase (PERK, also known as PEK, encoded by EIF2AK3 ); and 3) activating transcription factor 6α (encoded by ATF6 ). Each of these three sensors is similarly regulated through binding of the luminal ER chaperone protein GRP78 or BiP (encoded by HSPA5 ). When ER protein folding demands exceed capacity, reduced BiP binding results in activation of these ER sensor proteins, resulting in the induction of coordinated signaling pathways to increase ER folding capacity and alleviate underlying stress. Effective responses lead to cell adaptation and survival, while irreparable ER stress causes cell death and apoptosis.

PERK является трансмембранной серин/треонин киназой типа I и членом семейства киназ, которые фосфорилируют эукариотический фактор инициации трансляции 2α (eIF2-α) и регулируют инициацию трансляции. Другие члены семьи включают HRI (EIF2AK1), PKR (EIF2AK2) и GCN2 (EIF2AK4). Каждая киназа eIF2 реагирует на различные сигналы клеточного стресса, чтобы регулировать общую трансляцию и ген-специфичный контроль трансляции. Фосфорилирование eIF2 приводит к снижению инициации общей трансляции из-за снижения активности фактора обмена eIF2B, уменьшая количество белка, поступающего в ER (и, следовательно, нагрузку сворачивания белка) и потребности в трансляции ATP. Фосфорилирование eIF2 также увеличивает трансляцию некоторых мРНК ген-специфическим образом, включая транскрипционный фактор ATF4. Транскрипционные мишени ATF4 включают многочисленные гены, участвующие в адаптации и выживании клеток, в том числе несколько генов, участвующих в фолдинге белка, поглощении питательных веществ, метаболизме аминокислот, окислительно-восстановительном гомеостазе и аутофагии (4). Предполагается, что селективное ингибирование ветви PERK UPR сильно повлияет на рост и выживание опухолевых клеток. Таким образом, считается, что соединения, которые ингибируют PERK, являются полезными при лечении рака.PERK is a type I transmembrane serine/threonine kinase and a member of a family of kinases that phosphorylate eukaryotic translation initiation factor 2α (eIF2-α) and regulate translation initiation. Other family members include HRI (EIF2AK1), PKR (EIF2AK2), and GCN2 (EIF2AK4). Each eIF2 kinase responds to different cellular stress signals to regulate general translation and gene-specific translational control. Phosphorylation of eIF2 results in decreased initiation of overall translation due to decreased activity of the exchange factor eIF2B, reducing the amount of protein entering the ER (and thus protein folding load) and the need for ATP translation. Phosphorylation of eIF2 also increases the translation of several mRNAs in a gene-specific manner, including the transcription factor ATF4. Transcriptional targets of ATF4 include numerous genes involved in cell adaptation and survival, including several genes involved in protein folding, nutrient uptake, amino acid metabolism, redox homeostasis, and autophagy ( 4 ). Selective inhibition of the PERK branch of the UPR is predicted to profoundly affect tumor cell growth and survival. Thus, compounds that inhibit PERK are believed to be useful in the treatment of cancer.

При современном состоянии медицинского лечения у больных раком поджелудочной железы часто бывает плохой прогноз, даже если заболевание выявляется на ранних стадиях. Таким образом, сохраняется значительная потребность в новых и эффективных способах лечения рака поджелудочной железы. Соединения по настоящему изобретению являются ингибиторами PERK и, как полагают, являются полезными при лечении рака, в частности, рака поджелудочной железы.With the current state of medical treatment, patients with pancreatic cancer often have a poor prognosis, even if the disease is detected in the early stages. Thus, there remains a significant need for new and effective treatments for pancreatic cancer. The compounds of the present invention are PERK inhibitors and are believed to be useful in the treatment of cancer, in particular pancreatic cancer.

В WO 2015/136463 раскрыты некоторые производные пирролидинона, которые обладают ингибирующей активностью в отношении PERK, и, кроме того, раскрыты соединения, полезные для лечения рака и заболеваний, связанных с активированной реакцией несвернутых белков, включая рак поджелудочной железы.WO 2015/136463 discloses certain pyrrolidinone derivatives that have PERK inhibitory activity and further discloses compounds useful for the treatment of cancer and diseases associated with activated unfolded protein response, including pancreatic cancer.

Соответственно, настоящее изобретение относится к соединению формулы I:Accordingly, the present invention relates to a compound of formula I:

гдеWhere

R выбран из группы, состоящей изR is selected from the group consisting of

и ; And ;

X представляет собой CH или N;X represents CH or N;

R1 представляет собой водород или фтор; иR 1 represents hydrogen or fluorine; And

R2 представляет собой С13 алкил;R 2 represents C 1 -C 3 alkyl;

или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению формулы Ia:Furthermore, the present invention relates to a compound of formula Ia:

гдеWhere

R выбран из группы, состоящей изR is selected from the group consisting of

и ; And ;

X представляет собой CH или N;X represents CH or N;

R1 представляет собой водород или фтор; иR 1 represents hydrogen or fluorine; And

R2 представляет собой С13 алкил;R 2 represents C 1 -C 3 alkyl;

или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению формулы I или Ia:Furthermore, the present invention relates to a compound of formula I or Ia:

где R представляет собойwhere R represents

. .

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению формулы I или Ia: где X представляет собой CH или N; R1 представляет собой водород или фтор; и R2 представляет собой метил или изопропил; или его фармацевтически приемлемой соли.In addition, the present invention relates to a compound of formula I or Ia: wherein X represents CH or N; R 1 represents hydrogen or fluorine; and R 2 represents methyl or isopropyl; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению формулы I или Ia: где R представляет собой Furthermore, the present invention relates to a compound of formula I or Ia: wherein R is

или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению 3-амино-6-[4-[[(2R)-2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-метил-пиразин-2-карбоксамид, которое может быть представлено формулойFurthermore, the present invention relates to the compound 3-amino-6-[4-[[(2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N -methyl-pyrazine-2-carboxamide, which can be represented by the formula

или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению 2-амино-5-[4-[[(2R)-2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамид, которое может быть представлено формулойFurthermore, the present invention relates to the compound 2-amino-5-[4-[[(2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N -isopropyl-pyridine-3-carboxamide, which can be represented by the formula

или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению (2R)-N-[4-(4-амино-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)-3-метил-фенил]-2-(3-фторфенил)-2-гидрокси-ацетамид, которое может быть представлено формулойFurthermore, the present invention relates to the compound (2R)-N-[4-(4-amino-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-3-methyl-phenyl]-2- (3-fluorophenyl)-2-hydroxy-acetamide, which can be represented by the formula

или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Настоящее изобретение относится к способу лечения рака у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающему введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или Ia, или его фармацевтически приемлемой соли. Настоящее изобретение также относится к способу ингибирования активности PERK, приводящей к противоопухолевой активности у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающему введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или Ia, или его фармацевтически приемлемой соли.The present invention relates to a method of treating cancer in a patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The present invention also provides a method of inhibiting PERK activity resulting in antitumor activity in a patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of Formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения рака поджелудочной железы у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающему введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или Ia, или его фармацевтически приемлемой соли.The present invention also provides a method of treating pancreatic cancer in a patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению формулы I или Ia, или его фармацевтически приемлемой соли для применения в терапии, в частности, для лечения рака поджелудочной железы. Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению формулы I или Ia или его фармацевтически приемлемой соли для применения при лечении рака поджелудочной железы. В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения рака поджелудочной железы.Furthermore, the present invention relates to a compound of formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for use in therapy, in particular for the treatment of pancreatic cancer. Furthermore, the present invention relates to a compound of formula I or Ia or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment of pancreatic cancer. In a further embodiment, the present invention relates to the use of a compound of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the manufacture of a medicament for the treatment of pancreatic cancer.

Изобретение, кроме того, относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или эксципиентами. В дополнительном варианте осуществления композиция дополнительно содержит одно или несколько других терапевтических средств. Изобретение также относится к способу получения фармацевтической композиции, включающему смешивание соединения формулы I или Ia или его фармацевтически приемлемой соли с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или эксципиентами. Настоящее изобретение также охватывает новые промежуточные соединения и способы синтеза соединений формулы I и Ia.The invention further relates to a pharmaceutical composition containing a compound of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof with one or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients. In a further embodiment, the composition further comprises one or more other therapeutic agents. The invention also relates to a method for preparing a pharmaceutical composition, comprising mixing a compound of formula I or Ia or a pharmaceutically acceptable salt thereof with one or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients. The present invention also covers new intermediates and methods for the synthesis of compounds of formula I and Ia.

Используемые в настоящем описании термины «лечение» или «лечить» включают ограничение, замедление, остановку или обращение прогрессирования или серьезности существующего симптома или расстройства.As used herein, the terms “treating” or “treating” include limiting, slowing, stopping or reversing the progression or severity of an existing symptom or disorder.

Используемый в настоящем описании термин «эффективное количество» относится к количеству или дозе соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, которое при однократном или многократном введении дозы пациенту обеспечивает желаемый эффект у пациента, подвергаемого диагностике или лечению.As used herein, the term “effective amount” refers to an amount or dose of a compound of the invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, that, when administered single or multiple doses to a patient, provides the desired effect in the patient being diagnosed or treated.

Эффективное количество может быть легко определено специалистом в данной области техники с использованием известных методик и путем наблюдения результатов, полученных при аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества для пациента учитывается ряд факторов, включая, но не ограничиваясь: род пациента; его размер, возраст и общее состояние здоровья; конкретное заболевание или расстройство; степень или поражение или тяжесть заболевания или расстройства; ответ отдельного пациента; конкретное вводимое соединение; способ введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранный режим дозирования; использование сопутствующих лекарственных средств; и другие соответствующие обстоятельства.The effective amount can be readily determined by one skilled in the art using known techniques and by observing results obtained under similar circumstances. When determining the effective amount for a patient, a number of factors are considered, including, but not limited to: the patient's gender; its size, age and general health; a specific disease or disorder; the extent or extent or severity of the disease or disorder; individual patient response; the specific compound administered; method of administration; characteristics of the bioavailability of the administered drug; selected dosing regimen; use of concomitant medications; and other relevant circumstances.

Соединения по настоящему изобретению обычно эффективны в широком диапазоне доз. Например, дозировки в день обычно находятся в диапазоне от около 0,1 до около 50 мг/кг массы тела. В некоторых случаях уровни дозировки ниже нижнего предела вышеупомянутого диапазона могут быть более чем адекватными, в то время как в других случаях могут использоваться еще большие дозы с приемлемыми побочными эффектами, и, следовательно, указанный выше диапазон дозировок никоим образом не предназначен для ограничения объема изобретения. Понятно, что количество фактически вводимого соединения будет определяться врачом с учетом соответствующих обстоятельств, включая состояние, подлежащее лечению, выбранный способ введения, фактическое вводимое соединение или соединения, возраст, массу и реакцию отдельного пациента, а также тяжесть симптомов пациента.The compounds of the present invention are generally effective over a wide range of dosages. For example, dosages per day typically range from about 0.1 to about 50 mg/kg body weight. In some cases, dosage levels below the lower end of the above range may be more than adequate, while in other cases even higher doses may be used with acceptable side effects, and therefore the above dosage range is in no way intended to limit the scope of the invention. It is understood that the amount of compound actually administered will be determined by the physician taking into account the relevant circumstances, including the condition being treated, the route of administration chosen, the actual compound or compounds administered, the age, weight and response of the individual patient, and the severity of the patient's symptoms.

Соединения по настоящему изобретению предпочтительно получают в виде фармацевтических композиций, вводимых любым путем, который делает соединение биодоступным, включая пероральный, внутривенный и трансдермальный пути введения. Наиболее предпочтительно такие композиции предназначены для перорального введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области (см., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, L.V. Allen, Editor, 22nd Edition, Pharmaceutical Press, 2012).The compounds of the present invention are preferably prepared in the form of pharmaceutical compositions administered by any route that makes the compound bioavailable, including oral, intravenous and transdermal routes of administration. Most preferably, such compositions are for oral administration . Such pharmaceutical compositions and methods for their preparation are well known in the art (see, for example, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, LV Allen, Editor, 22nd Edition, Pharmaceutical Press, 2012).

Понятно, что соединения формулы I могут существовать в виде стереоизомеров. Варианты осуществления настоящего изобретения включают все энантиомеры, диастереомеры и их смеси. Конкретный энантиомер соединения формулы I представлен соединением формулы IaIt is understood that the compounds of formula I may exist as stereoisomers. Embodiments of the present invention include all enantiomers, diastereomers, and mixtures thereof. The specific enantiomer of a compound of formula I is represented by a compound of formula Ia

где R и R1 являются такими, как определено ранее.where R and R 1 are as previously defined.

Специалисту в данной области также понятно, что обозначения Кана-Ингольда-Прелога (R) или (S) для всех хиральных центров будут варьироваться в зависимости от схемы замещения конкретного соединения. Отдельные энантиомеры или диастереомеры могут быть получены, исходя из хиральных реагентов или с помощью стереоселективных или стереоспецифических методов синтеза. Альтернативно, отдельные энантиомеры или диастереомеры могут быть выделены из смесей стандартными методами хиральной хроматографии или кристаллизации в любой удобной точке синтеза соединений по изобретению. См., например, J. Jacques, et al., “Enantiomers, Racemates, and Resolutions”, John Wiley and Sons, Inc., 1981, and E.L. Eliel and S.H. Wilen,” Stereochemistry of Organic Compounds”, Wiley-Interscience, 1994. Отдельные энантиомеры соединений по изобретению являются предпочтительным вариантом осуществления изобретения.One skilled in the art will also understand that the Cahn-Ingold-Prelog designation (R) or (S) for all chiral centers will vary depending on the substitution pattern of the particular compound. The individual enantiomers or diastereomers can be prepared starting from chiral reagents or using stereoselective or stereospecific synthetic methods. Alternatively, individual enantiomers or diastereomers can be isolated from mixtures by standard chiral chromatography or crystallization techniques at any convenient point in the synthesis of the compounds of the invention. See, for example, J. Jacques, et al ., “ Enantiomers, Racemates, and Resolutions ,” John Wiley and Sons, Inc., 1981, and E. L. Eliel and S. H. Wilen, “ Stereochemistry of Organic Compounds ,” Wiley-Interscience, 1994. The individual enantiomers of the compounds of the invention are a preferred embodiment of the invention.

Фармацевтически приемлемая соль соединений по изобретению может быть образована, например, путем взаимдействия подходящего свободного основания соединения по изобретению и подходящей фармацевтически приемлемой кислоты в подходящем растворителе в стандартных условиях, хорошо известных в данной области техники. Образование таких солей хорошо известно и оценено в данной области. См., например, Gould, P.L., “Salt selection for basic drugs,” International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., et al. “Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities,” Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); and Berge, S.M., et al., “Pharmaceutical Salts,” Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).A pharmaceutically acceptable salt of the compounds of the invention may be formed, for example, by reacting a suitable free base of the compound of the invention and a suitable pharmaceutically acceptable acid in a suitable solvent under standard conditions well known in the art. The formation of such salts is well known and appreciated in the art. See, for example, Gould, P.L., “Salt selection for basic drugs,” International Journal of Pharmaceutics , 33 : 201-217 (1986); Bastin, R. J., et al . “Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities,” Organic Process Research and Development , 4 : 427–435 (2000); and Berge, S. M., et al ., “Pharmaceutical Salts,” Journal of Pharmaceutical Sciences , 66 : 1-19, (1977).

In vitro ингибирование ферментативной активности PERK (выделенный) In vitro inhibition of PERK enzymatic activity (isolated)

Получали рекомбинантный каталитический домен EIF2AK2 (PKR) человека (аминокислоты 252-551), каталитический домен EIF2AK3 (PERK) (аминокислоты 536-1116), субстрат GFP-eIF2α и меченое тербием фосфо-eIF2α антитело (Invitrogen, Carlsbad, CA). Каталитический домен HIS-SUMO-GCN2 (аминокислоты 584-1019) экспрессировали и очищали из E. coli. Осуществляли анализы киназы TR-FRET в отсутствие или в присутствии ингибиторов в реакционном буфере, состоящем из 50 мМ HEPES, pH 7,5, 10 мМ MgCl2, 1,0 мМ EGTA и 0,01% Brij-35 и 100-200 нМ GFP-eIF2α субстрата. Анализы PKR содержат 14 нг/мл фермента и 2,5 мкМ ATP (Km, приблизительно ~2,5 мкМ), анализы PERK содержат 62,5 нг/мл фермента и 1,5 мкМ ATP (Km, приблизительно ~1,5 мкМ), и анализы GCN2 содержат 3 нМ фермента и 90 мкМ ATP (Km, приблизительно ~200 мкМ). Добавляли исследуемое соединение, инициировали реакцию путем добавления фермента и инкубировали при комнатной температуре в течение 45 минут. Останавливали реакцию добавлением EDTA до конечной концентрации 10 мМ, добавляли меченное тербием фосфо-eIF2α антитело в конечной концентрации 2 нМ и инкубировали в течение 90 минут. Мониторинг получаемой флуоресценции осуществляли с помощью ридера EnVison® Multilabel reader (PerkinElmer, Waltham, MA). Определяли отношения TR-FRET и полученные значения IC50, используя 4-параметрическое нелинейное логистическое уравнение, как показано(A+((B-A)/(1+((C/x)D)))), где Y=% специфическое ингибирование, A=нижняя часть кривой, B=верхняя часть кривой, C=абсолютная IC50 (концентрация, вызывающая 50% ингибирования) и D=угловой коэффициент Хилла. Recombinant human EIF2AK2 (PKR) catalytic domain (amino acids 252–551), EIF2AK3 (PERK) catalytic domain (amino acids 536–1116), GFP-eIF2α substrate, and terbium-labeled phospho-eIF2α antibody (Invitrogen, Carlsbad, CA) were prepared. The HIS-SUMO-GCN2 catalytic domain (amino acids 584-1019) was expressed and purified from E. coli . TR-FRET kinase assays were performed in the absence or presence of inhibitors in a reaction buffer consisting of 50 mM HEPES, pH 7.5, 10 mM MgCl 2 , 1.0 mM EGTA and 0.01% Brij-35 and 100-200 nM GFP-eIF2α substrate. PKR assays contain 14 ng/mL enzyme and 2.5 μM ATP ( Km , approximately ~2.5 μM), PERK assays contain 62.5 ng/mL enzyme and 1.5 μM ATP ( Km , approximately ~1.5 μM ), and GCN2 assays contain 3 nM enzyme and 90 μM ATP ( Km , approximately ∼200 μM). The test compound was added, the reaction was initiated by adding enzyme and incubated at room temperature for 45 minutes. The reaction was stopped by adding EDTA to a final concentration of 10 mM, terbium-labeled phospho-eIF2α antibody was added at a final concentration of 2 nM and incubated for 90 minutes. The resulting fluorescence was monitored using an EnVison® Multilabel reader (PerkinElmer, Waltham, MA). TR-FRET ratios and resulting IC 50 values were determined using a 4-parameter nonlinear logistic equation as shown (A+((BA)/(1+((C/x) D)))), where Y=% specific inhibition , A=bottom of the curve, B=top of the curve, C=absolute IC 50 (concentration causing 50% inhibition) and D=Hill's slope.

Соединения примеров 1, 5 и 9 тестировали, по существу, как описано выше, и показали значения IC50, показанные в таблице 1. Эти данные демонстрируют, что соединения примеров 1, 5 и 9 ингибируют активность выделенного фермента PERK in vitro.The compounds of Examples 1, 5 and 9 were tested essentially as described above and showed the IC 50 values shown in Table 1. These data demonstrate that the compounds of Examples 1, 5 and 9 inhibit the activity of the isolated PERK enzyme in vitro .

Таблица 1Table 1

Пример No.Example No. Фермент IC50 (мкМ)Enzyme IC 50 (µM) PERKPERK GCN2GCN2 PKRPKR Пример 1Example 1 0,0022±0,0012
(N=3)
0.0022±0.0012
(N=3)
18,1±1,5
(N=2)
18.1±1.5
(N=2)
>20
(N=1)
>20
(N=1)
Пример 5Example 5 0,0020±0,0005
(Ν=3)
0.0020±0.0005
(Ν=3)
10,8±2,1
(N=4)
10.8±2.1
(N=4)
>20
(N=1)
>20
(N=1)
Пример 9Example 9 0,0024±0,0010
(N=4)
0.0024±0.0010
(N=4)
16,4±2,9
(N=4)
16.4±2.9
(N=4)
Не определялиNot determined

In vitro ингибирование активности фермента PERK (целая клетка) In vitro inhibition of PERK enzyme activity (whole cell)

Высевали клетки GripTite™ 293 (Invitrogen, Carlsbad, CA), экспрессирующие GFP-eIF2α, при 10000 клеток на лунку в 384-луночные планшеты и оставляли на ночь для прикрепления. Клетки предварительно обрабатывали исследуемыми соединениями в течение 1 часа. Добавляли туникамицин (1 мкМ), чтобы вызвать активность PERK, и планшеты инкубировали при 37°C в течение 2 часов. Удаляли культуральную среду и лизировали клетки в буфере, состоящем из 20 мМ Tris-HCl, рН 7,5, 150 мМ NaCl, 5 мМ EDTA, 1% NP-40, 5 мМ NaF, ингибиторов протеаз (Sigma, St. Louis, MO), ингибиторов фосфатазы (Sigma, St. Louis, MO) и 2 нМ тербий-меченого антитела против фосфо-eIF2 (Invitrogen, Carlsbad, CA). Инкубировали лизаты клеток в течение 2 часов в темноте при комнатной температуре и контролировали флуоресценцию в ридере EnVison® Multilabel reader (PerkinElmer, Waltham, MA). Определяли соотношения TR-FRET и полученные значения IC50 по соответствующим кривым ингибирования, используя неиндуцированные (100% ингибирование) и индуцированные (0% ингибирование) лунки в качестве контролей. GripTite™ 293 cells (Invitrogen, Carlsbad, CA) expressing GFP-eIF2α were seeded at 10,000 cells per well in 384-well plates and allowed to attach overnight. Cells were pretreated with test compounds for 1 hour. Tunicamycin (1 μM) was added to induce PERK activity, and the plates were incubated at 37°C for 2 h. The culture medium was removed and the cells were lysed in a buffer consisting of 20 mM Tris-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% NP-40, 5 mM NaF, protease inhibitors (Sigma, St. Louis, MO ), phosphatase inhibitors (Sigma, St. Louis, MO), and 2 nM terbium-labeled anti-phospho-eIF2 antibody (Invitrogen, Carlsbad, CA). Cell lysates were incubated for 2 hours in the dark at room temperature and fluorescence was monitored with an EnVison® Multilabel reader (PerkinElmer, Waltham, MA). TR-FRET ratios and resulting IC 50 values were determined from the corresponding inhibition curves using uninduced (100% inhibition) and induced (0% inhibition) wells as controls.

Соединения примеров 1, 5 и 9 тестировали по существу так же, как описано выше, и показали значения IC50, показанные в таблице 2. Эти данные демонстрируют, что соединения примеров 1, 5 и 9 ингибируют активность фермента PERK целой клетки in vitro.The compounds of Examples 1, 5 and 9 were tested substantially as described above and showed the IC 50 values shown in Table 2. These data demonstrate that the compounds of Examples 1, 5 and 9 inhibit whole cell PERK enzyme activity in vitro .

Таблица 2table 2

Пример No.Example No. Клетка IC50 (мкМ)Cell IC 50 (µM) Пример 1Example 1 0,054±0,060
(N=9)
0.054±0.060
(N=9)
Пример 5Example 5 0,117±0,102
(N=14)
0.117±0.102
(N=14)
Пример 9Example 9 0,028±0,011
(N=12)
0.028±0.011
(N=12)

In vivo Ингибирование рака поджелудочной железы (модель ксенотрансплантата у мышей) In vivo Inhibition of pancreatic cancer (xenograft mouse model)

Имплантировали самкам бестимусных мышей (Harlan Laboratories) подкожно 5×106 клеток BxPC-3 с матригелем в правый бок, и контролировали рост опухоли с помощью калипера. Начинали введение соединения, когда опухоли достигали ~250 мм3, и введение мышам осуществляли два раза в день перорально с помощью желудочного зонда (8 животных на группу) в течение 28 дней. Соединения получают в 10% аравийской камеди, содержащей 0,05% антивспенивателя или 20% каптизола в 25 мМ буфере NaPO4, рН 2, для 30 соединений примеров 5 и 9, соответственно. Контрольным животным вводили только носитель аравийскую камедь. Оценивали объемы опухоли, используя формулу l×w 2×(π/6), где l представляет собой больший измеренный диаметр, а w представляет собой меньший перпендикулярный диаметр. Рассчитывали процент дельта T/C, используя формулу 100×[(T-T0)/(C-C0)], и процент регрессии, используя формулу 100×[(T-T0)/T0], где T и C представляют собой средние объемы опухоли в обработанной и контрольной группах, соответственно. T0 и C0 представляют собой соответствующие исходные средние объемы опухоли. Преобразованиее процент дельта Т/С в процент дельта ингибирования роста опухоли (TGI), используя уравнение, 100 - процент дельта Т/С. Для статистического анализа преобразование данных об объеме опухоли в шкалу log10 для выравнивания дисперсии по времени и группам лечения. Анализ данных объема log10 с помощью двухстороннего дисперсионного анализа повторных измерений (корреляционная модель пространственной статистической мощности) по времени и лечению с использованием смешанных процедур в программном пакете SAS (версия 9.3). Сравнение группы, получающей лечения, с контрольной группой в каждый момент времени. Female nude mice (Harlan Laboratories) were implanted subcutaneously with 5×10 6 BxPC-3 cells with Matrigel in the right flank, and tumor growth was monitored using a caliper. Compound administration was started when tumors reached ~250 mm 3 and mice were administered twice daily by oral gavage (8 animals per group) for 28 days. The compounds are prepared in 10% gum acacia containing 0.05% antifoam or 20% captisol in 25 mM NaPO 4 buffer, pH 2, for 30 compounds of Examples 5 and 9, respectively. Control animals were administered only the carrier gum acacia. Tumor volumes were estimated using the formula l × w 2 × (π/6), where l represents the larger measured diameter and w represents the smaller perpendicular diameter. The percentage delta T/C was calculated using the formula 100×[(TT 0 )/(CC 0 )], and the percentage regression using the formula 100×[(TT 0 )/T 0 ], where T and C represent the average tumor volumes in the treated and control groups, respectively. T 0 and C 0 represent the corresponding initial mean tumor volumes. Convert percent delta T/C to percent delta tumor growth inhibition (TGI) using the equation 100 - percent delta T/C. For statistical analysis, convert tumor volume data to log10 scale to equalize variance across time and treatment groups. Analyze log 10 volume data using two-way repeated measures ANOVA (spatial statistical power correlation model) across time and treatment using mixed procedures in the SAS software package (version 9.3). Comparison of the treatment group with the control group at each time point.

Соединения Примеров 5 и 9 были протестированы, по существу, как описано выше, и показали значения ингибирования роста опухоли, показанные в Таблицах 3 и 4, соответственно. Эти данные демонстрируют, что соединения примеров 5 и 9 ингибируют рост опухоли поджелудочной железы in vivo.The compounds of Examples 5 and 9 were tested essentially as described above and showed the tumor growth inhibition values shown in Tables 3 and 4, respectively. These data demonstrate that the compounds of Examples 5 and 9 inhibit pancreatic tumor growth in vivo .

Таблица 3Table 3

Сводные значения объема опухолиTumor Volume Summary Values День после имплантацииDay after implantation Контрольный носительControl media Пример 5
30 мг/кг п/о
2 р/сут
Example 5
30 mg/kg po
2 times/day
p-значениеp-value T/Cb (%)T/C b (%) TGIc (%)TGI c (%)
Среднее (мм3)Average (mm 3 ) SEa SE a Среднее (мм3)Average (mm 3 ) SEaSEa 2121 108,3108.3 4,64.6 123,9123.9 13,313.3 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 2424 115,8115.8 7,97.9 132,8132.8 11,611.6 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 3232 153,4153.4 13,513.5 143,4143.4 10,410.4 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 3535 163,9163.9 10,710.7 174,6174.6 17,217.2 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 3939 180,5180.5 13,413.4 183,8183.8 19,019.0 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 4747 206,4206.4 19,219.2 213,7213.7 20,720.7 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 52d 52d 252,2252.2 39,639.6 252,0252.0 21,621.6 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 6060 337,0337.0 52,952.9 311,8311.8 26,726.7 0,6670.667 71,571.5 28,528.5 6767 498,1498.1 78,278.2 387,8387.8 33,233.2 0,1820.182 55,855.8 44,244.2 7272 602,3602.3 94,694.6 435,0435.0 37,337.3 0,0840.084 52,752.7 47,347.3 7474 720,0720.0 113,0113.0 487,5487.5 41,841.8 0,039*0.039* 50,750.7 49,349.3 7676 762,5762.5 119,7119.7 528,8528.8 45,345.3 0,0520.052 54,554.5 45,545.5 7979 971,5971.5 152,5152.5 593,2593.2 50,850.8 0,010*0.010* 47,747.7 52,352.3

а) Стандартная ошибка среднего геометрического объема опухолиa) Standard error of the geometric mean tumor volume

b) Рассчитывали с использованием 100×[(T-T0)/(C-C0)], где T и C представляют собой средние объемы опухолей в получающей лечение и контрольной группах, соответственно, T0 и C0 представляют собой соответствующие исходные средние объемы опухолей.b) Calculated using 100×[(TT 0 )/(CC 0 )], where T and C represent the mean tumor volumes in the treatment and control groups, respectively, T 0 and C 0 represent the corresponding baseline mean tumor volumes.

c) TCI представляет собой ингибирование роста опухоли, рассчитанное с использованием 100 - %T/Cc) TCI is tumor growth inhibition calculated using 100 - %T/C

d) День рандомизации и начало леченияd) Day of randomization and start of treatment

*Значимый, p < 0,05*Significant, p < 0.05

Таблица 4Table 4

Сводные значения объема опухолиTumor Volume Summary Values День после имплантацииDay after implantation Контрольный носительControl media Пример 9
30 мг/кг п/о
2 р/сут
Example 9
30 mg/kg po
2 times/day
p-значениеp-value T/Cb (%)T/C b (%) TGIc (%)TGI c (%)
среднее (мм3)average (mm 3 ) SEa SE a среднее (мм3)average (mm 3 ) SEa SE a 2121 108,3108.3 4,64.6 111,9111.9 7,57.5 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 2424 115,8115.8 7,97.9 134,3134.3 8,48.4 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 3232 153,4153.4 13,513.5 153,7153.7 12,412.4 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 3535 163,9163.9 10,710.7 162,6162.6 14,614.6 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 3939 180,5180.5 13,413.4 167,1167.1 12,812.8 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 4747 206,4206.4 19,219.2 196,4196.4 15,515.5 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 52d 52d 252,2252.2 39,639.6 244,2244.2 28,428.4 NAN.A. NAN.A. NAN.A. 6060 337,0337.0 52,952.9 284,8284.8 33,233.2 0,3670.367 40,840.8 59,259.2 6767 498,1498.1 78,278.2 317,2317.2 36,936.9 0,018*0.018* 27,427.4 72,672.6 7272 602,3602.3 94,694.6 380,5380.5 44,344.3 0,016*0.016* 37,337.3 62,762.7 7474 720,0720.0 113,0113.0 418,3418.3 48,748.7 0,005*0.005* 36,036.0 64,064.0 7676 762,5762.5 119,7119.7 480,4480.4 55,955.9 0,015*0.015* 45,145.1 54,954.9 7979 971,5971.5 152,5152.5 541,6541.6 63,163.1 0,002*0.002* 40,540.5 59,559.5

а) Стандартная ошибка среднего геометрического объема опухолиa) Standard error of the geometric mean tumor volume

b) Рассчитывали с использованием 100×[(T-T0)/(C-C0)], где T и C представляют собой средние объемы опухолей в получающей лечение и контрольной группах, соответственно, T0 и C0 представляют собой соответствующие исходные средние объемы опухолей.b) Calculated using 100×[(TT 0 )/(CC 0 )], where T and C represent the mean tumor volumes in the treatment and control groups, respectively, T 0 and C 0 represent the corresponding baseline mean tumor volumes.

c) TCI представляет собой ингибирование роста опухоли, рассчитанное с использованием 100 - %T/Cc) TCI is tumor growth inhibition calculated using 100 - %T/C

d) День рандомизации и начало леченияd) Day of randomization and start of treatment

*Значимый, p < 0,05*Significant, p < 0.05

Соединения по настоящему изобретению или их соли могут быть получены различными способами, известными специалисту в данной области, некоторые из которых проиллюстрированы на схемах, препаратах и примерах ниже. Специалист в данной области признает, что конкретные стадии синтеза для каждого из описанных способов могут комбинироваться различными способами или в сочетании со стадиями из различных схем для получения соединений по изобретению или их солей. Продукты каждой стадии в схемах ниже могут быть извлечены обычными способами, хорошо известными в данной области, включая экстракцию, выпаривание, осаждение, хроматографию, фильтрацию, измельчение и кристаллизацию. На схемах ниже все заместители, если не указано иное, являются такими, как определено ранее. Реагенты и исходные материалы легко доступны для специалиста в данной области. Без ограничения объема изобретения для дальнейшей иллюстрации изобретения приводятся следующие схемы, препараты и примеры. Кроме того, специалист в данной области понимает, что соединения формулы Ia могут быть получены с использованием исходного вещества с соответствующей стереохимической конфигурацией, которое может быть получено специалистом в данной области. Например, на приведенных ниже схемах используются исходные вещества с конфигурацией, по существу, соответствующей формуле Ia.The compounds of the present invention or their salts can be prepared by various methods known to one skilled in the art, some of which are illustrated in the diagrams, preparations and examples below. One skilled in the art will recognize that the specific synthetic steps for each of the described methods can be combined in different ways or in combination with steps from different schemes to obtain the compounds of the invention or salts thereof. The products of each step in the schemes below can be recovered by conventional methods well known in the art, including extraction, evaporation, precipitation, chromatography, filtration, grinding and crystallization. In the diagrams below, all substituents, unless otherwise noted, are as previously defined. Reagents and starting materials are readily available to one skilled in the art. Without limiting the scope of the invention, the following schemes, preparations and examples are provided to further illustrate the invention. In addition, one skilled in the art will appreciate that compounds of formula Ia can be prepared using a starting material with an appropriate stereochemical configuration that can be prepared by one skilled in the art. For example, the schemes below use starting materials with a configuration substantially corresponding to Formula Ia.

Обычно соединение формулы I может быть получено из соединения формулы III (схема 1). Более конкретно, соединение формулы III взаимодействует с соединением формулы II и подходящим реагентом для реакций сочетания, таким как HATU (1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфат) в присутствии подходящего аминного основания, такого как N, N-диизопропилэтиламин или триметиламина. Соединение формулы I может быть разделено на его изомеры с помощью хиральной хроматографии. Typically, a compound of formula I can be prepared from a compound of formula III (Scheme 1). More specifically, a compound of formula III is reacted with a compound of formula II and a suitable coupling reagent such as HATU (1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium 3 -oxide hexafluorophosphate) in the presence of a suitable amine base such as N,N-diisopropylethylamine or trimethylamine. A compound of formula I can be separated into its isomers using chiral chromatography.

Соответственно, соединение формулы Ia может быть получено из соединения формулы IIa. Более конкретно, соединение формулы III взаимодействует с соединением формулы IIa и подходящим реагентом для реакций сочетания, таким как HATU (1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфат) в присутствии подходящего аминного основания, такого как N, N-диизопропилэтиламин или триметиламина. Соединение формулы IIa может быть получено из соединения формулы II с липолитическим ферментом, таким как Lipase PS Amano SD. Дополнительную информацию относительно этого метода оптического разрешения можно найти у Mendiola, J. et al, Org. Process Res. Dev. 2012, 16, 1312−1316.Accordingly, a compound of formula Ia can be prepared from a compound of formula IIa. More specifically, a compound of formula III is reacted with a compound of formula IIa and a suitable coupling reagent such as HATU (1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium 3 -oxide hexafluorophosphate) in the presence of a suitable amine base such as N,N-diisopropylethylamine or trimethylamine. The compound of formula IIa can be prepared from the compound of formula II with a lipolytic enzyme such as Lipase PS Amano SD. Additional information regarding this optical resolution method can be found in Mendiola, J. et al, Org. Process Res. Dev . 2012, 16, 1312−1316.

Схема 1Scheme 1

Обычно соединение формулы III может быть получено из соединения формулы IV. Соединение формулы III может быть получено путем обработки соединения формулы R-Br 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилином в присутствии основания, такого как K2CO3, и палладиевого катализатора, такого как Pd(dppf)2Cl2.Typically, a compound of formula III can be prepared from a compound of formula IV. The compound of formula III can be prepared by treating the compound of formula R-Br with 3-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)aniline in the presence of a base such as K 2 CO 3 , and a palladium catalyst such as Pd(dppf) 2 Cl 2 .

Схема 2Scheme 2

R-Br представляет собой или R-Br is or

Соединение формулы R-Br, представленное соединением формулы VI или VII, может быть получено способами, известными в области химии, а также способами, описанными в приведенных ниже Получениях и Примерах.The compound of formula R-Br, represented by a compound of formula VI or VII, can be prepared by methods known in the field of chemistry, as well as by methods described in the following Preparations and Examples.

Получение 1Receipt 1

Синтез 4-хлор-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидин. Synthesis of 4-chloro-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine.

Добавляли Cs2CO3 (845 г, 2,60 моль) при 15°C к раствору 4-хлор-7H-пирроло[2,3-d]пиримидина (200 г, 1,29 моль) в N-метил-2-пирролидоне (1,20 л). Нагревали до 23°C, добавляли MeI (202 г, 1,43 моль) по каплям в течение 30 минут, и перемешивали в течение 4 ч. По истечении этого времени выливали на ледяную воду (2,00 л) и перемешивали в течение 30 мин. Фильтровали, затем суспендировали вещество в H2O (1,00 л). Фильтровали и сушили с получением указаннго в заголовке соединения (180 г, 81%). ES/MS m/z (35Cl) 168,0 (M+H). Add Cs 2 CO 3 (845 g, 2.60 mol) at 15°C to a solution of 4-chloro-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine (200 g, 1.29 mol) in N-methyl-2 -pyrrolidone (1.20 l). Heat to 23°C, add MeI (202 g, 1.43 mol) dropwise over 30 minutes, and stir for 4 hours. After this time, pour into ice water (2.00 L) and stir for 30 min. Filtered, then suspended the substance in H 2 O (1.00 L). Filter and dry to give the title compound (180 g, 81%). ES/MS m/z ( 35 Cl) 168.0 (M+H).

Получение 2Receipt 2

Синтез 5-бром-4-хлор-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидина.Synthesis of 5-bromo-4-chloro-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine.

Добавляли N-бромсукцинимид (418 г, 2,35 моль) порциями в течение 20 мин при 15°C к раствору 4-хлор-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидина (355 г, 2,12 моль) в дихлорметане (3,19 л), и перемешивали при 23°C в течение 3 ч. По прошествии этого времени, фильтровали, промывали H2O (5,32 л) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (448 г, 86%) в виде белого твердого вещества. ES/MS m/z (35Cl, 79Br) 245,9 (M+H). Add N-bromosuccinimide (418 g, 2.35 mol) in portions over 20 min at 15°C to a solution of 4-chloro-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine (355 g, 2.12 mol) in dichloromethane (3.19 L), and stirred at 23°C for 3 hours. After this time, filtered, washed with H 2 O (5.32 L) and dried to give the title compound (448 g, 86 %) as a white solid. ES/MS m/z ( 35 Cl, 79 Br) 245.9 (M+H).

Получение 3Receipt 3

Синтез 5-бром-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина.Synthesis of 5-bromo-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amine.

Перемешивали суспензию 5-бром-4-хлор-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидина (454 г 1,84 моль) в аммиаке (30% в H2O, 3,63 л) при 120°C в сосуде под давлением Hastelloy™ в течение 18 ч. Охлаждали до 20°C, фильтровали, промывали H2O (1,80 л) и метанолом (900 мл), и сушили с получением указанного в заголовке соединения (351 г, 82%) в виде белого твердого вещества. ES/MS m/z (79Br) 227,2 (M+H). Stir a suspension of 5-bromo-4-chloro-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine (454 g 1.84 mol) in ammonia (30% in H 2 O, 3.63 L) at 120°C in a Hastelloy™ pressure vessel for 18 hours. Cool to 20°C, filter, wash with H 2 O (1.80 L) and methanol (900 ml), and dry to give the title compound (351 g, 82% ) as a white solid. ES/MS m/z ( 79 Br) 227.2 (M+H).

Получение 4Receipt 4

Синтез 3-амино-6-бром-пиразин-2-карбоновой кислоты.Synthesis of 3-amino-6-bromo-pyrazine-2-carboxylic acid.

Добавляли 3-аминопиразин-2-карбоновую кислоту (50,0 г, 369,4 ммоль) к раствору N-бромсукцинимида (61,2 г, 377,3 ммоль) и диметилформамида (236,3 г, 3,2 моль) при 0°C. Через 1 час при комнатной температуре образовалось оранжевое твердое вещество. Твердый остаток промывали этилацетатом (500 мл) и отбрасывали его. Сушили органическую фазу сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (32,0 г, 146,7 ммоль, 41%). ES/MS m/z (79Br/81Br) 217,1/219,0 (M+H).Add 3-aminopyrazine-2-carboxylic acid (50.0 g, 369.4 mmol) to a solution of N-bromosuccinimide (61.2 g, 377.3 mmol) and dimethylformamide (236.3 g, 3.2 mol) at 0°C. After 1 hour at room temperature, an orange solid formed. The solid residue was washed with ethyl acetate (500 ml) and discarded. Dry the organic phase over sodium sulfate, filter and concentrate under reduced pressure to give the title compound as a white solid (32.0 g, 146.7 mmol, 41%). ES/MS m/z ( 79 Br/ 81 Br) 217.1/219.0 (M+H).

Получение 5Receipt 5

Синтез 3-амино-6-бром-N-метил-пиразин-2-карбоксамида.Synthesis of 3-amino-6-bromo-N-methyl-pyrazine-2-carboxamide.

Обрабатывали раствор 3-амино-6-бром-пиразин-2-карбоновой кислоты (214 г, 983 ммоль) в диметилформамиде (1,07 л) метиламин гидрохлоридом (79,7 г, 1,18 моль) и N, N-диизопропилэтиламином (445 г, 3,44 моль) при 23°C. К полученной суспензии, добавляли 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфат (449 г, 1,18 моль) в течение 30 минут. Через 30 мин, добавляли H2O (4,29 л) в течение 2 ч. Перемешивали при 23°C в течение 30 мин и затем 1 ч при 10°C. Фильтровали, промывали твердое вещество H2O (2×428 мл), и сушили с получением указанного в заголовке соединения (227 г, 82%). ES/MS m/z (79Br) 231,0 (M+H).A solution of 3-amino-6-bromo-pyrazine-2-carboxylic acid (214 g, 983 mmol) in dimethylformamide (1.07 L) was treated with methylamine hydrochloride (79.7 g, 1.18 mol) and N, N-diisopropylethylamine (445 g, 3.44 mol) at 23°C. To the resulting suspension, 1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium hexafluorophosphate 3-oxide (449 g, 1.18 mol) was added over 30 minutes. After 30 minutes, add H 2 O (4.29 L) over 2 hours. Stir at 23°C for 30 minutes and then 1 hour at 10°C. Filter, wash the solid with H 2 O (2 x 428 ml), and dry to give the title compound (227 g, 82%). ES/MS m/z ( 79 Br) 231.0 (M+H).

Получение 6Receipt 6

Синтез 2-амино-5-бром-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамида. Synthesis of 2-amino-5-bromo-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide.

Добавляли пропан-2-амин (42,5 г, 0,719 моль), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (127 г, 0,664 моль) и гидроксибензотриазол (89,7 г, 0,660 моль) к суспензии 2-амино-5-бром-пиридин-3-карбоновой кислоты (120 г, 0,553 моль) в тетрагидрофуране (1,2 л) при 12°C. Перемешивали смесь при 23°C в течение ночи. Добавляли этилацетат (250 мл) и насыщенный водный NaHCO3 (250 мл), отделяли фазы, и экстрагировали водный слой этилацетатом (2×150 мл). Объединенные органические фазы промывали H2O (300 мл) и насыщенным водным NaCl (300 мл), и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (125 г, 88%). ES/MS m/z (79Br) 258,0 (M+H).Add propan-2-amine (42.5 g, 0.719 mol), 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide (127 g, 0.664 mol) and hydroxybenzotriazole (89.7 g, 0.660 mol) to the suspension of 2- amino-5-bromo-pyridine-3-carboxylic acid (120 g, 0.553 mol) in tetrahydrofuran (1.2 L) at 12°C. Stir the mixture at 23°C overnight. Ethyl acetate (250 ml) and saturated aqueous NaHCO 3 (250 ml) were added, the phases were separated, and the aqueous layer was extracted with ethyl acetate (2×150 ml). The combined organic phases were washed with H 2 O (300 ml) and saturated aqueous NaCl (300 ml), and concentrated under reduced pressure to give the title compound (125 g, 88%). ES/MS m/z ( 79 Br) 258.0 (M+H).

Получение 7Receipt 7

Выделение (2R)-2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-уксусной кислоты.Isolation of (2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetic acid.

Поддерживали липазу PS Amano (см. Mendiola, J. et al, Org. Process Res. Dev. 2012, 16, 1312-1316) в диатомовой земле перед использованием, смешивая 200 г диатомовой земли и 200 г липазы PS Amano SD. Добавляли H2O для покрытия твердого вещества, и смесь перемешивали. Удаляли H2O в духовом шкафу при 4 мбар и 40°C в течение 16 ч. Контролировали H2O ниже 1% путем титрования по Карлу Фишера для определения воды.Maintain PS Amano lipase (see Mendiola, J. et al, Org. Process Res. Dev. 2012, 16, 1312-1316) in diatomaceous earth before use by mixing 200 g diatomaceous earth and 200 g PS Amano SD lipase. H 2 O was added to coat the solid and the mixture was stirred. Remove H 2 O in an oven at 4 mbar and 40°C for 16 hours. Control H 2 O below 1% by Karl Fischer titration to determine water.

Добавляли нанесенную липазу PS amano SD (250 г) и винилацетат (312 мл; 3,36 моль к суспензии рацемической 2-(3,5-дифторфенил)-2-гидроксиуксусной кислоты (125 г, 664 ммоль) в метил-трет-бутиловом эфире (2,50 л), и смесь перемешивали при 26°C в течение 72 ч. По прошествии этого времени, фильтровали, промывали твердое вещество метил-трет-бутиловым эфиром (1,50 л) и концентрировали объединенные фильтраты при пониженном давлении. Суспендировали остаток в дихлорметане (160 мл) при 23°C в течение 4 ч. Фильтровали, промывали твердое вещество петролейным эфиром (150 мл), и сушили с получением указанного в заголовке соединения (47,0 г, 36%). 1H ЯМР (d6-DMSO) δ 5,11 (с, 1H), 6,20 (шир.с, 1H), 7,11-7,21 (м, 3H), 12,8 (шир.с, 1H). Абсолютную конфигурацию определяли с помощью вибрационного кругового дихроизма (см. Freedman T.B et al, Chirality, 2003 Nov., 15(9), 743-758). Хиральная ВЭЖХ: Rt=7,39 мин (УФ); Колонка: Chiralpak® AD 4,6×150 мм 5 мкм; 5% EtOH в н-гексане (0,05% TFA) изократический; Скорость потока: 1,5 мл/мин, ee >98%.Added supported lipase PS amano SD (250 g) and vinyl acetate (312 ml; 3.36 mol) to a suspension of racemic 2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxyacetic acid (125 g, 664 mmol) in methyl tert-butyl ether (2.50 L) and the mixture was stirred at 26°C for 72 hours. After this time, filtered, washed the solid with methyl t-butyl ether (1.50 L) and concentrated the combined filtrates under reduced pressure. Suspend the residue in dichloromethane (160 ml) at 23°C for 4 hours. Filter, wash the solid with petroleum ether (150 ml), and dry to give the title compound (47.0 g, 36%). 1H NMR (d 6 -DMSO) δ 5.11 (s, 1H), 6.20 (brs, 1H), 7.11-7.21 (m, 3H), 12.8 (brs, 1H) The absolute configuration was determined using vibrational circular dichroism (see Freedman TB et al, Chirality , 2003 Nov., 15(9), 743-758). Chiral HPLC: Rt=7.39 min (UV); Column: Chiralpak® AD 4.6x150 mm 5 µm; 5% EtOH in n-hexane (0.05% TFA) isocratic; Flow rate: 1.5 ml/min, ee >98%.

Получение 8Receipt 8

Выделение (2R)-2-(3-фторфенил)-2-гидрокси-уксусной кислоты. Isolation of (2R)-2-(3-fluorophenyl)-2-hydroxy-acetic acid.

Поддерживали липазу PS Amano SD (см. Mendiola, J. et al, Org. Process Res. Dev. 2012, 16, 1312-1316) в диатомовой земле перед использованием, смешивая 100 г диатомовой земли и 100 г липазы PS Amano SD. Добавляли H2O для покрытия твердого вещества, и смесь перемешивали. Удаляли H2O в духовом шкафу при 4 мбар и 40°C в течение 16 ч. Контролировали H2O ниже 1% путем титрования по Карлу Фишера для определения воды.Maintain PS Amano SD lipase (see Mendiola, J. et al, Org. Process Res. Dev . 2012, 16, 1312-1316) in diatomaceous earth before use by mixing 100 g diatomaceous earth and 100 g PS Amano SD lipase. H 2 O was added to coat the solid and the mixture was stirred. Remove H 2 O in an oven at 4 mbar and 40°C for 16 hours. Control H 2 O below 1% by Karl Fischer titration to determine water.

Добавляли нанесенную липазу PS amano SD (200 г) и винилацетат (269 мл; 2,90 моль к суспензии рацемической 2-(3-фторфенил)-2-гидроксиуксусной кислоты (96 г, 560 ммоль) в метил-трет-бутиловом эфире (2,00 л), и смесь перемешивали при 26°C в течение 90 ч. По прошествии этого времени, фильтровали, промывали твердое вещество метил-трет-бутиловым эфиром (1,50 л) и концентрировали объединенные фильтраты при пониженном давлении. Суспендировали остаток в дихлорметане (160 мл) при 23°C в течение 4 ч. Фильтровали, промывали твердое вещество петролейным эфиром (150 мл), и сушили с получением указанного в заголовке соединения (31,0 г, 32%). 1H ЯМР (d6-DMSO) δ 5,07 (с, 1H), 6,17 (шир.с, 1H), 7,12 (м, 1H), 7,23 (м, 1H), 7,39 (м, 1H), 12,8 (шир.с, 1H). [α]D 20 = -119° (C=2,83, ацетон). Хиральная ВЭЖХ: Rt=10,22 мин (УФ); Колонка: Chiralpak® AD 4,6×150 мм 5 мкм; 5% EtOH в н-гексане (0,05% TFA) изократический; Скорость потока: 1,5 мл/мин, ee >98%. Supported lipase PS amano SD (200 g) and vinyl acetate (269 ml; 2.90 mol) were added to a suspension of racemic 2-(3-fluorophenyl)-2-hydroxyacetic acid (96 g, 560 mmol) in methyl tert-butyl ether ( 2.00 L), and the mixture was stirred at 26°C for 90 hours. After this time, filtered, washed the solid with methyl tert-butyl ether (1.50 L) and concentrated the combined filtrates under reduced pressure. Suspended the residue. in dichloromethane (160 ml) at 23°C for 4 hours. Filter, wash the solid with petroleum ether (150 ml), and dry to give the title compound (31.0 g, 32%). 1 H NMR (d 6 -DMSO) δ 5.07 (s, 1H), 6.17 (brs, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.39 (m, 1H ), 12.8 (brs, 1H). [α] D 20 = -119° (C=2.83, acetone). Chiral HPLC: Rt=10.22 min (UV); Column: Chiralpak® AD 4.6x150 mm 5 µm; 5% EtOH in n-hexane (0.05% TFA) isocratic; Flow rate: 1.5 ml/min, ee >98%.

Получение 9Receipt 9

Синтез 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилина.Synthesis of 3-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)aniline.

Нагревали суспензию трициклогексилфосфина (59,85 г, 213 ммоль) в 1,4-диоксане (2,98 л) при 95°C в течение 10 мин, пока не получали раствор. Затем, добавляли 4-бром-3-метиланилин (752 г, 2,67 моль), бис(пинаколато)диборон (745,17 г, 2,93 моль), ацетат калия (524 г, 5,34 моль), и ацетат палладия(II) (23,96 г, 107 ммоль), и продолжали нагревать смесь при 95°C в течение 4 ч. По прошествии этого времени, охлаждали до 23°C, разбавляли метил трет-бутиловым эфиром (2,5 л), фильтровали через кизельгур, и промывали твердое вещество метил-трет-бутиловым эфиром (1 л). Объединяли фильтраты, промывали H2O (1,5 л) и насыщенным водным NaCl (1,2 л), и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (593 г, 95%). Для получения аналитического образца, суспендировали с гексаном (1,6 мл/г) при 40°C в течение 2 ч, затем охлаждали до 23°C, фильтровали и твердое вещество промывали гексаном (2×0,5 мл/г). ES/MS m/z 234,1 (M+H).Heat a suspension of tricyclohexylphosphine (59.85 g, 213 mmol) in 1,4-dioxane (2.98 L) at 95°C for 10 min until a solution is obtained. Then, 4-bromo-3-methylaniline (752 g, 2.67 mol), bis(pinacolato)diborone (745.17 g, 2.93 mol), potassium acetate (524 g, 5.34 mol), and palladium(II) acetate (23.96 g, 107 mmol), and continued to heat the mixture at 95°C for 4 hours. After this time, cooled to 23°C, diluted with methyl tert-butyl ether (2.5 L ), filtered through kieselguhr, and washed the solid with methyl tert-butyl ether (1 L). The filtrates were combined, washed with H2O (1.5 L) and saturated aqueous NaCl (1.2 L), and concentrated under reduced pressure to give the title compound (593 g, 95%). To obtain an analytical sample, suspend with hexane (1.6 ml/g) at 40°C for 2 hours, then cool to 23°C, filter and wash the solid with hexane (2 x 0.5 ml/g). ES/MSm/z 234.1 (M+H).

Получение 10Receipt 10

Синтез 2-амино-5-(4-амино-2-метил-фенил)-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамида.Synthesis of 2-amino-5-(4-amino-2-methyl-phenyl)-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide.

Добавляли 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилин (93,6 г, 0,401 моль), K2CO3 (119g, 0,860 моль) и Pd(dppf)2Cl2 (10,6 г, 140 ммоль) к раствору 2-амино-5-бром-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамида (74,0 г, 0,287 моль) в диоксане (888 мл) и H2O (296 мл), и нагревали смесь до 55°C в течение ночи. Охлаждали до 23°C, добавляли этилацетат (150 мл), фильтровали полученную суспензию через кизельгур, и промывали твердое вещество этилацетатом (50 мл). Промывали объединенные фильтраты H2O (30 мл) и насыщенным водным NaCl (300 мл), и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (78,0 г, 96%). ES/MS m/z 285,1 (M+H).Add 3-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)aniline (93.6 g, 0.401 mol), K 2 CO 3 (119 g, 0.860 mol ) and Pd(dppf) 2 Cl 2 (10.6 g, 140 mmol) to a solution of 2-amino-5-bromo-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide (74.0 g, 0.287 mol) in dioxane (888 ml) and H 2 O (296 ml), and heated the mixture to 55°C overnight. Cool to 23°C, add ethyl acetate (150 ml), filter the resulting suspension through kieselguhr, and wash the solid with ethyl acetate (50 ml). Wash the combined filtrates with H 2 O (30 ml) and saturated aqueous NaCl (300 ml), and concentrate under reduced pressure to give the title compound (78.0 g, 96%). ES/MS m/z 285.1 (M+H).

Получение 11Receipt eleven

Синтез 3-амино-6-(4-амино-2-метилфенил)-N-метилпиразин-2-карбоксамида.Synthesis of 3-amino-6-(4-amino-2-methylphenyl)-N-methylpyrazine-2-carboxamide.

Добавляли 3-амино-6-бром-N-метилпиразин-2-карбоксамид (99,1 г, 429 ммоль), Na2CO3, (2 M в H2O, 500 мл, 1,00 моль), и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)палладий (II) хлорид (19 г, 22,8 ммоль) к раствору 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилина (122 г, 450 ммоль) в 1,4-диоксане (3,00 л), и нагревали смесь до 85°C в течение 32 ч. Охлаждали до 30°C, добавляли этилацетат (4,00 л), фильтровали через слой силикагеля, и промывали твердое вещество этилацетатом (3×1,00 л). Промывали объединенные фильтраты H2O (2×1,50 л), и концентрировали при пониженном давлении. Очищали остаток с помощью хроматографии (элюент: петролейный эфир/этилацетат 5:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (80 г, 72%) в виде желтого твердого вещества. ES/MS m/z 258,1 (M+H).Add 3-amino-6-bromo-N-methylpyrazine-2-carboxamide (99.1 g, 429 mmol), Na 2 CO 3 (2 M in H 2 O, 500 ml, 1.00 mol), and 1 ,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene)palladium(II) chloride (19 g, 22.8 mmol) to a solution of 3-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolane) -2-yl)aniline (122 g, 450 mmol) in 1,4-dioxane (3.00 L), and the mixture was heated to 85°C for 32 hours. Cooled to 30°C, added ethyl acetate (4.00 l), filtered through a pad of silica gel, and washed the solid with ethyl acetate (3×1.00 l). The combined filtrates were washed with H 2 O (2 x 1.50 L) and concentrated under reduced pressure. Purify the residue by chromatography (eluent: petroleum ether/ethyl acetate 5:1-1:1) to give the title compound (80 g, 72%) as a yellow solid. ES/MS m/z 258.1 (M+H).

Получение 12Receipt 12

Синтез 5-(4-амино-2-метил-фенил)-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина.Synthesis of 5-(4-amino-2-methyl-phenyl)-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amine.

Добавляли Pd(II) ацетат (635 мг, 2,83 ммоль), cataCXium A™ (2,03 г, 5,65 ммоль) и насыщенный водный NaHCO3 (186 мл, 188 ммоль) к суспензии 5-бром-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина (21,4 г, 94,3 ммоль) и 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилина (28,6 г, 123 ммоль) в 2-метил-тетрагидрофуране (214 мл) при 23°C, и смесь перемешивали в запаянной трубке при 100°C в течение 3 ч. Охлаждали до 23°C, фильтровали через слой кизельгура, и промывали твердое вещество H2O (50 мл) и этилацетатом (100 мл). Отделяли органический слой, промывали его насыщенным водным NaCl (50 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии (элюент: гексан/ацетон 0-100%) с получением указанного в заголовке соединения (12,1 г, 51%) в виде желтого твердого вещества. ES/MS m/z 254,1 (M+H).Add Pd(II) acetate (635 mg, 2.83 mmol), cataCXium A™ (2.03 g, 5.65 mmol) and saturated aqueous NaHCO 3 (186 mL, 188 mmol) to the 5-bromo-7- methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amine (21.4 g, 94.3 mmol) and 3-methyl-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2- dioxaborolan-2-yl)aniline (28.6 g, 123 mmol) in 2-methyl-tetrahydrofuran (214 ml) at 23°C, and the mixture was stirred in a sealed tube at 100°C for 3 hours. Cooled to 23° C, filtered through a pad of kieselguhr, and washed the solid with H 2 O (50 ml) and ethyl acetate (100 ml). The organic layer was separated, washed with saturated aqueous NaCl (50 ml) and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by chromatography (eluent: 0-100% hexane/acetone) to give the title compound (12.1 g, 51%) as a yellow solid. ES/MS m/z 254.1 (M+H).

Пример 1Example 1

Синтез 2-амино-5-[4-[[(2R)-2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамида.Synthesis of 2-amino-5-[4-[[(2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-isopropyl-pyridine-3- carboxamide.

Обрабатывали смесь (2R)-2-(3,5-дифторфенил)-2-гидроксиуксусной кислоты (29,0 г, 0,154 моль), 2-амино-5-(4-амино-2-метил-фенил)-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамида (43,83 г, 0,154 моль), и N, N-диизопропилэтиламина (39,8 г, 0,308 моль) в тетрагидрофуране (960 мл), (1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфатом) (87,9 г, 0,231 моль) при 0°C в течение 30 мин, и затем нагревали до 20°C и перемешивали в течение 2 ч. Добавляли этилацетат (50 мл), и смесь фильтровали. Концентрировали фильтрата при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью хроматографии (элюент: 2:1 петролейный эфир/этилацетат) и затем с помощью сверхкритической жидкостной хроматографии, SFC (Колонка: Chiralpak® IC 30×250 мм 5 мкм (Daicel); MeOH/CO2= 30:70 изократический; Скорость потока: 80 г/мин; Обратное давление: 100 Бар; Температура колонки: 40°C) с получением указанного в заголовке соединения (27,5 г, 39%) в виде белого твердого вещества. ES/MS m/z 455,2 (M+H).Treated with a mixture of (2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxyacetic acid (29.0 g, 0.154 mol), 2-amino-5-(4-amino-2-methyl-phenyl)-N- isopropyl-pyridine-3-carboxamide (43.83 g, 0.154 mol), and N,N-diisopropylethylamine (39.8 g, 0.308 mol) in tetrahydrofuran (960 ml), (1-[bis(dimethylamino)methylene]- 1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium hexafluorophosphate 3-oxide) (87.9 g, 0.231 mol) at 0°C for 30 min, and then heated to 20°C and stirred for 2 hours. Ethyl acetate (50 ml) was added and the mixture was filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure and the residue was purified by chromatography (eluent: 2:1 petroleum ether/ethyl acetate) and then by supercritical liquid chromatography, SFC (Column: Chiralpak® IC 30×250 mm 5 µm (Daicel); MeOH/ CO 2 = 30:70 isocratic; Flow rate: 80 g/min; Back pressure: 100 bar; Column temperature: 40°C) to obtain the title compound (27.5 g, 39%) as a white solid. ES/MS m/z 455.2 (M+H).

Пример 2Example 2

Синтез 2-амино-5-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамида.Synthesis of 2-amino-5-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide.

Добавляли 2-амино-5-(4-амино-2-метил-фенил)-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамид (1000,5 мг, 3,5 ммоль) к раствору 2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-уксусной кислоты (793 мг, 4,2 ммоль), (1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфата) (1,7 г, 4,6 ммоль), N, N-диизопропилэтиламина (909,5 мг, 7,0 ммоль) в тетрагидрофуране (7,9 г, 93,6 моль). Через 2 часа при комнатной температуре добавляли 3 мл этилацетата и реакционную смесь перемешивали в течение 10 минут. Отфильтровывали твердое вещество и восстанавливали органическую фазу при пониженном давлении. Промывали остаток насыщенным водным NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали DCM (2×10 мл). Сушили органическую фазу сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Add 2-amino-5-(4-amino-2-methyl-phenyl)-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide (1000.5 mg, 3.5 mmol) to the 2-(3,5-difluorophenyl) solution -2-hydroxy-acetic acid (793 mg, 4.2 mmol), (1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium hexafluorophosphate 3-oxide) (1.7 g, 4.6 mmol), N,N-diisopropylethylamine (909.5 mg, 7.0 mmol) in tetrahydrofuran (7.9 g, 93.6 mol). After 2 hours at room temperature, 3 ml of ethyl acetate was added and the reaction mixture was stirred for 10 minutes. The solid was filtered off and the organic phase was reduced under reduced pressure. Wash the residue with saturated aqueous NaHCO 3 (10 ml) and extract with DCM (2×10 ml). The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure.

Остаток очищают с помощью ВЭЖХ, Rt (время удерживания) = 2,036 минут (УФ), ЖХ-колонка: XTerra MS C18 (2,1×50 мм, 3,5 мкм; H2O:ацетонитрил; градиент 0,25 мин при 5%B; от 5%B до 100%B в 3 мин; выдержка 0,25 мин при 100%B; Температура колонки: 50°C; Скорость потока 1,1 мл/мин с получением указанного в заголовке соединения в виде смеси изомера 1 и изомера 2 в виде твердого вещества белого цвета (0,97 г, 60%). ES/MS (m/z): 455,4 (M+H).The residue was purified by HPLC, Rt (retention time) = 2.036 minutes (UV), LC column: XTerra MS C18 (2.1 x 50 mm, 3.5 µm; H 2 O:acetonitrile; 0.25 min gradient at 5%B; 5%B to 100%B in 3 min; hold 0.25 min at 100%B; Column temperature: 50°C; Flow rate 1.1 ml/min to obtain the title compound as a mixture isomer 1 and isomer 2 as a white solid (0.97 g, 60%) ES/MS (m/z): 455.4 (M+H).

Пример 3 и 4Example 3 and 4

Разделение 2-амино-5-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамида на изомер 1 и изомер 2.Separation of 2-amino-5-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide into isomer 1 and isomer 2.

Смесь изомера 1 и изомера 2 разделяли, используя Chiralcel® OD-H (4,6×100 мм, 5 мкм), 20% MeOH-DMEA (0,2%) в CO2), 2,5 мл/мин, 100 бар давление на выходе, 35°C температура для получения индивидуального изомера 1 и изомера 2 в виде белого твердого вещества.A mixture of isomer 1 and isomer 2 was separated using Chiralcel® OD-H (4.6 x 100 mm, 5 µm), 20% MeOH-DMEA (0.2%) in CO 2 ), 2.5 ml/min, 100 bar outlet pressure, 35°C temperature to obtain individual isomer 1 and isomer 2 as a white solid.

Пример 3: 2-амино-5-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамид изомер 1. Rt (время удерживания) = 1,131 минут (430 мг, ee > 98%), ES/MS m/z 455,4 (M+H).Example 3: 2-amino-5-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide isomer 1. Rt (retention time) = 1.131 minutes (430 mg, ee > 98%), ES/MSm/z 455.4 (M+H).

Пример 4: 2-амино-5-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-изопропил-пиридин-3-карбоксамид изомер 2. Rt (время удерживания) = 1,823 минут (404 мг, ee > 98%), ES/MS m/z 455,4 (M+H).Example 4: 2-amino-5-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide isomer 2. Rt (retention time) = 1.823 minutes (404 mg, ee > 98%), ES/MSm/z 455.4 (M+H).

Пример 5Example 5

Синтез 3-амино-6-[4-[[(2R)-2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-метил-пиразин-2-карбоксамида.Synthesis of 3-amino-6-[4-[[(2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-methyl-pyrazin-2- carboxamide.

Добавляли N, N- (15,3 мл 87,5 ммоль) и 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфат (33,2 г, 87,5 ммоль) к раствору 3-амино-6-(4-амино-2-метилфенил)-N-метилпиразин-2-карбоксамида (18,0 г, 70,0 ммоль) и (2R)-2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-уксусной кислоты (13,2 г, 70,0 ммоль) в тетрагидрофуране (90,0 мл), и смесь перемешивали при 23°C в течение 5 ч. По прошествии этого времени, концентрировали смесь при пониженном давлении, суспендировали остаток в этилацетате (100 мл) в течение 15 мин, фильтровали, и промывали твердое вещество этилацетатом (2×25 мл). Концентрировали объединенные фильтраты при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью хроматографии (элюент: гексан/ацетон 2:1, затем гексан/этанол 4:1). Растворяли вещество в метаноле (115 мл), добавляли диоксид кремния-тиоловую смолу (0,4 г/г), и полученную суспензию перемешивали при 23°C в течение 8 ч. По прошествии этого времени, фильтровали, и промывали твердое вещество метанолом (2×12 мл). Концентрировали объединенные фильтраты при пониженном давлении. Очищали с помщью SFC (Колонка: Chiralpak® IC 4,6×100 мм 5 мкм; 35% метанол (0,2% N, N-диметилэтиламин) в CO2 изократический; Скорость потока: 2,5 мл/мин; Обратное давление: 100 Бар; Температура колонки: 40°C) с получением указанного в заголовке соединения (19,7 г, 62%). ES/MS m/z 428,1 (M+H).N, N- (15.3 ml 87.5 mmol) and 1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium hexafluorophosphate 3-oxide (33, 2 g, 87.5 mmol) to a solution of 3-amino-6-(4-amino-2-methylphenyl)-N-methylpyrazin-2-carboxamide (18.0 g, 70.0 mmol) and (2R)-2 -(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetic acid (13.2 g, 70.0 mmol) in tetrahydrofuran (90.0 ml), and the mixture was stirred at 23°C for 5 hours. After this time, concentrated the mixture under reduced pressure, suspended the residue in ethyl acetate (100 ml) for 15 minutes, filtered, and washed the solid with ethyl acetate (2 x 25 ml). The combined filtrates were concentrated under reduced pressure and the residue was purified by chromatography (eluent: hexane/acetone 2:1, then hexane/ethanol 4:1). Dissolve the substance in methanol (115 ml), add silica-thiol resin (0.4 g/g), and the resulting suspension is stirred at 23°C for 8 hours. After this time, filter, and wash the solid with methanol ( 2×12 ml). The combined filtrates were concentrated under reduced pressure. Purified with SFC (Column: Chiralpak® IC 4.6 x 100 mm 5 µm; 35% methanol (0.2% N, N-dimethylethylamine) in CO 2 isocratic; Flow rate: 2.5 ml/min; Back pressure : 100 Bar; Column Temp: 40°C) to give the title compound (19.7 g, 62%). ES/MS m/z 428.1 (M+H).

Пример 6Example 6

Синтез 3-амино-6-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-метил-пиразин-2-карбоксамида. Synthesis of 3-amino-6-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-methyl-pyrazine-2-carboxamide.

Добавляли 3-амино-6-(4-амино-2-метил-фенил)-N-метил-пиразин-2-карбоксамид (800,0 мг, 3,2 ммоль) к раствору 2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-уксусной кислоты (701,9 мг, 3,4 ммоль), (1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфата) (1,7 г, 4,6 ммоль), N, N-диизопропилэтиламина (803,2 мг, 6,3 ммоль) в тетрагидрофуране (7,9 г, 93,6 моль). Через 2 часа при комнатной температуре, добавляли 3 мл этилацетата и реакционную смесь перемешивали в течение 10 минут. Отфильтровывали твердое вещество и восстанавливали органическую фазу при пониженном давлении. Промывали остаток насыщенным водным NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2×10 мл). Сушили органическую фазу сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя этилацетат:гексан (30:70) с получением указанного в заголовке соединения в виде смеси изомера 1 и изомера 2 в виде коричневого твердого вещества (0,72 г, 1,6 ммоль). ES/MS (m/z): 428,3 (M+H).Add 3-amino-6-(4-amino-2-methyl-phenyl)-N-methyl-pyrazine-2-carboxamide (800.0 mg, 3.2 mmol) to the 2-(3,5-difluorophenyl) solution -2-hydroxy-acetic acid (701.9 mg, 3.4 mmol), (1-[bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium 3-oxide hexafluorophosphate) (1.7 g, 4.6 mmol), N,N-diisopropylethylamine (803.2 mg, 6.3 mmol) in tetrahydrofuran (7.9 g, 93.6 mol). After 2 hours at room temperature, 3 ml of ethyl acetate was added and the reaction mixture was stirred for 10 minutes. The solid was filtered off and the organic phase was reduced under reduced pressure. The residue was washed with saturated aqueous NaHCO 3 (10 ml) and extracted with dichloromethane (2×10 ml). The organic phase was dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash silica gel chromatography eluting with ethyl acetate:hexane (30:70) to give the title compound as a mixture of isomer 1 and isomer 2 as a brown solid (0.72 g, 1.6 mmol). ES/MS (m/z): 428.3 (M+H).

Примеры 7 и 8Examples 7 and 8

Разделение 3-амино-6-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-метил-пиразин-2-карбоксамид на изомер 1 и изомер 2.Separation of 3-amino-6-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-methyl-pyrazine-2-carboxamide into isomer 1 and isomer 2.

Смесь изомера 1 и изомера 2 разделяли, используя Chiralpak® OD (4,6×50 мм, 5 мкм), 20% MeOH-DMEA (0,2%) в CO2), 5 мл/мин, 100 бар давление на выходе, 35°C температура для получения индивидуального изомера 1 и изомера 2.A mixture of isomer 1 and isomer 2 was separated using Chiralpak® OD (4.6 x 50 mm, 5 µm), 20% MeOH-DMEA (0.2%) in CO 2 ), 5 ml/min, 100 bar outlet pressure , 35°C temperature to obtain individual isomer 1 and isomer 2.

Пример 7. 3-амино-6-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-метил-пиразин-2-карбоксамид изомер 1. Rt (время удерживания) = 1,610 минут (258 мг, ee > 98%), ES/MS m/z 428,3 (M+H).Example 7 3-amino-6-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-methyl-pyrazine-2-carboxamide isomer 1. Rt (retention time) = 1.610 minutes (258 mg, ee > 98%), ES/MS m/z 428.3 (M+H).

Пример 8. 3-амино-6-[4-[[2-(3,5-дифторфенил)-2-гидрокси-ацетил]амино]-2-метил-фенил]-N-метил-пиразин-2-карбоксамид изомер 2. Rt (время удерживания) = 2,410 минут (278 мг, ee > 98%), ES/MS m/z 428,3 (M+H).Example 8 3-amino-6-[4-[[2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl-phenyl]-N-methyl-pyrazine-2-carboxamide isomer 2. Rt (retention time) = 2.410 minutes (278 mg, ee > 98%), ES/MS m/z 428.3 (M+H).

Пример 9Example 9

Синтез (2R)-N-[4-(4-амино-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)-3-метил-фенил]-2-(3-фторфенил)-2-гидрокси-ацетамида.Synthesis of (2R)-N-[4-(4-amino-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-3-methyl-phenyl]-2-(3-fluorophenyl)-2 -hydroxy-acetamide.

Обрабатывали раствор 5-(4-амино-2-метил-фенил)-7-метил-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амина (15,5 г, 44,1 ммоль) и (2R)-2-(3-фторфенил)-2-гидрокси-уксусной кислоты (8,25 г, 48,5 ммоль) в тетрагидрофуране (56 мл) N, N-диизопропилэтиламином (9,22 мл, 52,9 ммоль) и 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфатом (20,1 г, 52,9 ммоль) при 23°C в течение 3,5 ч. По прошествии этого времени, концентрировали смесь при пониженном давлении, и суспендировали в этилацетате (100 мл) в течение 15 мин. Фильтровали, промывали твердое вещество этилацетатом (2×15 мл), и концентрировали объединенные фильтраты при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии (элюент: дихлорметан/метанол 0-10%) и затем с помощью SFC (размер колонки: 5 мкм, 2×25 см; неподвижная фаза: 2-этилпиридин; подвижная фаза: CO2 (A)/метанол-N, N-диметилэтиламин (0,2%) (B); состав подвижной фазы (то есть соотношение A/B): изократический 72/25 A/B; Скорость потока: 65 мл/мин; загрузка: 70 мг/4,35 мин) с получением указанного в заголовке соединения (11,7 г, 65%). ES/MS m/z 406,1 (M+H).A solution of 5-(4-amino-2-methyl-phenyl)-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amine (15.5 g, 44.1 mmol) and (2R)-2 was treated -(3-fluorophenyl)-2-hydroxy-acetic acid (8.25 g, 48.5 mmol) in tetrahydrofuran (56 ml) N,N-diisopropylethylamine (9.22 ml, 52.9 mmol) and 1-[ bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridinium 3-oxide with hexafluorophosphate (20.1 g, 52.9 mmol) at 23°C for 3.5 hours. After this time, the mixture was concentrated under reduced pressure, and suspended in ethyl acetate (100 ml) for 15 minutes. Filter, wash the solid with ethyl acetate (2×15 ml), and concentrate the combined filtrates under reduced pressure. The residue was purified by chromatography (eluent: dichloromethane/methanol 0-10%) and then by SFC (column size: 5 μm, 2x25 cm; stationary phase: 2-ethylpyridine; mobile phase: CO 2 (A)/methanol -N,N-dimethylethylamine (0.2%) (B); mobile phase composition (i.e. A/B ratio): isocratic 72/25 A/B; Flow rate: 65 ml/min; loading: 70 mg/4 .35 min) to obtain the title compound (11.7 g, 65%). ES/MS m/z 406.1 (M+H).

Claims (36)

1. Соединение формулы1. Compound formula , , где R выбран из группы, состоящей изwhere R is selected from the group consisting of и ; And ; X представляет собой CH или N;X represents CH or N; R1 представляет собой водород или фтор; иR 1 represents hydrogen or fluorine; And R2 представляет собой С13 алкил;R 2 represents C 1 -C 3 alkyl; или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 2. Соединение по п.1 формулы2. Compound according to claim 1 of the formula , , где R выбран из группы, состоящей изwhere R is selected from the group consisting of и ; And ; X представляет собой CH или N;X represents CH or N; R1 представляет собой водород или фтор; иR 1 represents hydrogen or fluorine; And R2 представляет собой С13 алкил;R 2 represents C 1 -C 3 alkyl; или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 3. Соединение или соль по п.1 или 2, где R представляет собой3. A compound or salt according to claim 1 or 2, wherein R is . . 4. Соединение или соль по п.1 или 2, 4. Compound or salt according to claim 1 or 2, где X представляет собой CH или N;where X represents CH or N; R1 представляет собой водород или фтор; иR 1 represents hydrogen or fluorine; And R2 представляет собой метил или изопропил.R 2 represents methyl or isopropyl. 5. Соединение или соль по п.1 или 2, где R представляет собой 5. A compound or salt according to claim 1 or 2, wherein R is . . 6. Соединение по п.1 или 2, которое представляет собой 3–амино–6–[4–[[(2R)–2–(3,5–дифторфенил)–2–гидрокси–ацетил]амино]–2–метил–фенил]–N–метил–пиразин–2–карбоксамид, которое представлено формулой6. A compound according to claim 1 or 2, which is 3-amino-6-[4-[[(2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl -phenyl]-N-methyl-pyrazine-2-carboxamide, which is represented by the formula , , или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 7. Соединение по п.1 или 2, которое представляет собой 2–амино–5–[4–[[(2R)–2–(3,5–дифторфенил)–2–гидрокси–ацетил]амино]–2–метил–фенил]–N–изопропил–пиридин–3–карбоксамид, которое представлено формулой7. A compound according to claim 1 or 2, which is 2-amino-5-[4-[[(2R)-2-(3,5-difluorophenyl)-2-hydroxy-acetyl]amino]-2-methyl -phenyl]-N-isopropyl-pyridine-3-carboxamide, which is represented by the formula , , или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 8. Соединение по п.1 или 2, которое представляет собой (2R)–N–[4–(4–амино–7–метил–пирроло[2,3–d]пиримидин–5–ил)–3–метил–фенил]–2–(3–фторфенил)–2–гидрокси–ацетамид, которое представлено формулой8. A compound according to claim 1 or 2, which is (2R)-N-[4-(4-amino-7-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-3-methyl- phenyl]-2-(3-fluorophenyl)-2-hydroxy-acetamide, which is represented by the formula , , или его фармацевтически приемлемая соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 9. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора протеинкиназа R (PKR)–подобной протеинкиназы эндоплазматического ретикулума (PERK), содержащая эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-8 с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или эксципиентами.9. A pharmaceutical composition having protein kinase R (PKR)-like endoplasmic reticulum protein kinase (PERK) inhibitor activity, containing an effective amount of a compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1 to 8 with one or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients . 10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-8 для применения в производстве лекарственного средства для лечения рака поджелудочной железы.10. A compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1 to 8 for use in the manufacture of a medicament for the treatment of pancreatic cancer. 11. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-8 для применения при лечении рака поджелудочной железы. 11. A compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of claims 1 to 8 for use in the treatment of pancreatic cancer.
RU2019136694A 2017-04-18 2018-04-11 Phenyl-2-hydroxy-acetylamino-2-methyl-phenyl compounds RU2804280C2 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17382207 2017-04-18
EP17382207.3 2017-04-18
PCT/US2018/027005 WO2018194885A1 (en) 2017-04-18 2018-04-11 Phenyl-2-hydroxy-acetylamino-2-methyl-phenyl compounds

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2019136694A RU2019136694A (en) 2021-05-18
RU2019136694A3 RU2019136694A3 (en) 2021-05-19
RU2804280C2 true RU2804280C2 (en) 2023-09-26

Family

ID=

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003064397A1 (en) * 2002-01-25 2003-08-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indazole compounds useful as protein kinase inhibitors
WO2007026920A2 (en) * 2005-09-02 2007-03-08 Astellas Pharma Inc. Amide derivatives as rock inhibitors
US20170022206A1 (en) * 2015-07-24 2017-01-26 Blueprint Medicines Corporation Compositions useful for treating disorders related to kit and pdfgr

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003064397A1 (en) * 2002-01-25 2003-08-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indazole compounds useful as protein kinase inhibitors
WO2007026920A2 (en) * 2005-09-02 2007-03-08 Astellas Pharma Inc. Amide derivatives as rock inhibitors
US20170022206A1 (en) * 2015-07-24 2017-01-26 Blueprint Medicines Corporation Compositions useful for treating disorders related to kit and pdfgr

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102575246B1 (en) Phenyl-2-hydroxy-acetylamino-2-methyl-phenyl compound
JP7033764B2 (en) Substituted heterocyclyl derivative as a CDK inhibitor
CN114846005B (en) SHP2 inhibitor and application thereof
CA2844704C (en) Aminopyrimidine derivatives for use as modulators of kinase activity
JPWO2016152907A1 (en) Treatment for bile duct cancer
KR101894116B1 (en) Quinazoline carboxamide azetidines
CN107108637A (en) Triazolopyrimidine compound and application thereof
WO2016170163A1 (en) Substituted quinoxalines and benzotriazine p70s6 kinase inhibitors
TW201026665A (en) Indolinone compounds as kinase inhibitors
Saal et al. Atropisomerism–a neglected way to escape out of solubility flatlands
WO2020258971A1 (en) Hydrazone amide derivatives and use thereof in preparation of anti-osteoporosis drugs
EP3263133B1 (en) Pyridinone compound and use thereof
RU2804280C2 (en) Phenyl-2-hydroxy-acetylamino-2-methyl-phenyl compounds
CN105272995B (en) Quinoline derivatives, its pharmaceutical composition, preparation method and application
CN105566307B (en) The indoles and naphthalene ketone derivant, preparation method, medical composition and its use that heterocycle replaces
TWI692476B (en) Cyclobutyl-imidazolidinone compounds
CN103664903A (en) Benzoazepine compounds and preparation method and application thereof
CN116768870A (en) Compound with benzyloxy aryl ether structure, preparation method and application thereof