RU2803237C2 - Stable compositions based on semaglutide and their use - Google Patents
Stable compositions based on semaglutide and their use Download PDFInfo
- Publication number
- RU2803237C2 RU2803237C2 RU2021113482A RU2021113482A RU2803237C2 RU 2803237 C2 RU2803237 C2 RU 2803237C2 RU 2021113482 A RU2021113482 A RU 2021113482A RU 2021113482 A RU2021113482 A RU 2021113482A RU 2803237 C2 RU2803237 C2 RU 2803237C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- composition
- histidine
- semaglutide
- composition according
- yes
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Настоящее изобретение относится к области фармацевтических композиций, содержащих семаглутид, представляющий собой пептид на основе GLP-1, и вариантам их применения.The present invention relates to the field of pharmaceutical compositions containing semaglutide, which is a GLP-1-based peptide, and uses thereof.
Уровень техникиState of the art
Как известно, пептиды на основе GLP-1 склонны к потере стабильности в жидких растворах, например, к потере физической или химической стабильности.GLP-1-based peptides are known to be prone to loss of stability in liquid solutions, such as loss of physical or chemical stability.
Поэтому необходимы жидкие фармацевтические составы, содержащие пептиды на основе GLP-1, характеризующиеся еще лучшей стабильностью. Такая улучшенная стабильность может представлять собой физическую и/или химическую стабильность и может привести к увеличению срока хранения фармацевтического состава. Therefore, liquid pharmaceutical formulations containing GLP-1-based peptides with even better stability are needed. Such improved stability may be physical and/or chemical stability and may result in increased shelf life of the pharmaceutical composition.
Краткое описание изобретенияBrief description of the invention
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к жидким фармацевтическим композициям, содержащим семаглутид и гистидин. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к наборам, содержащим фармацевтическую композицию, определенную в данном документе. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, определенной в данном документе, для применения в медицине.In some embodiments, the present invention relates to liquid pharmaceutical compositions containing semaglutide and histidine. In some embodiments, the present invention provides kits containing a pharmaceutical composition as defined herein. In some embodiments, the present invention relates to a pharmaceutical composition as defined herein for use in medicine.
ОписаниеDescription
Известно, что жидкие композиции, содержащие пептиды на основе глюкагоноподобного пептида 1 (GLP-1), склонны к потере стабильности, например, при хранении и/или при воздействии света. При хранении жидкой фармацевтической композиции, содержащей семаглутид, например, в предварительно заполненном шприце или в картридже, со временем наблюдается увеличение образования примесей.It is known that liquid compositions containing glucagon-like peptide 1 (GLP-1)-based peptides are prone to loss of stability, for example, upon storage and/or exposure to light. When a liquid pharmaceutical composition containing semaglutide is stored, for example in a pre-filled syringe or cartridge, an increase in the formation of impurities is observed over time.
Авторы настоящего изобретения наблюдали, что, если в жидкой композиции присутствует стабилизатор, такой как гистидин, то образующиеся высокомолекулярные белки (HMWP) и другие примеси характеризуются низким содержанием. Таким образом, композиция, содержащая стабилизатор согласно настоящему изобретению, характеризуется улучшенной химической и/или физической стабильностью. Улучшенная стабильность дает преимущества для пациента в виде более длительного срока хранения и более длительного периода использования. The present inventors have observed that if a stabilizer such as histidine is present in the liquid composition, the resulting high molecular weight proteins (HMWP) and other impurities are low in content. Thus, the composition containing the stabilizer according to the present invention is characterized by improved chemical and/or physical stability. Improved stability provides benefits to the patient in the form of longer shelf life and longer period of use.
В некоторых вариантах осуществления стабилизатор представляет собой гистидин. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит гистидин в концентрации 0,5-100 мМ, например, 1-50 мМ или 5-15 мМ. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит 0,01-10 мг/мл семаглутида. В некоторых вариантах осуществления композиция необязательно содержит фенол, например, композиция содержит до 10 мг/мл фенола, например, 5,5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит менее 0,01% (вес/вес) фенола, например, не содержит фенола. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит не более 0,01% (вес/вес) фенола, например, не содержит фенола. В некоторых вариантах осуществления композиция характеризуется рН в диапазоне от 6,0 до 10,0, например, от 7,0 до 7,8.In some embodiments, the stabilizer is histidine. In some embodiments, the composition contains histidine at a concentration of 0.5-100 mM, for example, 1-50 mM or 5-15 mM. In some embodiments, the composition contains 0.01-10 mg/ml semaglutide. In some embodiments, the composition optionally contains phenol, for example, the composition contains up to 10 mg/ml phenol, for example, 5.5 mg/ml. In some embodiments, the composition contains less than 0.01% (w/w) phenol, for example, no phenol. In some embodiments, the composition contains no more than 0.01% (w/w) phenol, such as no phenol. In some embodiments, the composition has a pH in the range of 6.0 to 10.0, such as 7.0 to 7.8.
Если в описании не указано иное, термины, представленные в форме единственного числа, также включают случаи множественного числа. Unless otherwise indicated in the description, terms presented in the singular form also include plural occurrences.
Фармацевтические композицииPharmaceutical compositions
Термины «фармацевтическая композиция» и «композиция» в данном документе применяют взаимозаменяемо, и они относятся к фармацевтическим композициям, подходящим для введения нуждающемуся в этом субъекту. The terms “pharmaceutical composition” and “composition” are used interchangeably herein and refer to pharmaceutical compositions suitable for administration to a subject in need thereof.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит 0,01-100 мг/мл семаглутида. В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит 0,1-50 мг/мл, например, 0,5-25 мг/мл или 1-15 мг/мл семаглутида. В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит 0,1-10 мг/мл, например, 0,5-5 мг/мл или 1-2 мг/мл семаглутида. В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит 0,5 мг/мл семаглутида. In some embodiments, the composition of the present invention contains 0.01-100 mg/ml semaglutide. In some embodiments, the composition of the present invention contains 0.1-50 mg/ml, for example, 0.5-25 mg/ml or 1-15 mg/ml semaglutide. In some embodiments, the composition of the present invention contains 0.1-10 mg/ml, for example, 0.5-5 mg/ml or 1-2 mg/ml semaglutide. In some embodiments, the composition of the present invention contains 0.5 mg/ml semaglutide.
В некоторых вариантах осуществления композиции по настоящему изобретению содержат стабилизатор. Термин «стабилизатор» относится в данном документе к соединению, сводящему к минимуму образование примесей в композиции, таких как HMWP или других нежелательных примесей, образующихся при хранении, по сравнению с композицией в отсутствие стабилизатора. В некоторых вариантах осуществления стабилизатор представляет собой гистидин. HMWP относятся к высокомолекулярным белкам и могут быть определены, как описано в анализе (I) в разделе «Общие способы и определение характеристик». Термин «другие нежелательные примеси, образующиеся во время хранения» относится к «гидрофобным примесям 1» или «гидрофобным примесям 2» и может быть определен, как описано в анализе (II) в разделе «Общие способы и определение характеристик». In some embodiments, the compositions of the present invention contain a stabilizer. The term “stabilizer” refers herein to a compound that minimizes the formation of impurities in the composition, such as HMWP or other undesirable storage impurities, compared to the composition in the absence of the stabilizer. In some embodiments, the stabilizer is histidine. HMWPs are high molecular weight proteins and can be determined as described in assay (I) in the General Methods and Characterization section. The term “other undesirable impurities generated during storage” refers to “hydrophobic impurities 1” or “hydrophobic impurities 2” and can be determined as described in analysis (II) in the “General Methods and Characterization” section.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит гистидин в качестве стабилизатора в концентрации 1-50 мМ, например, 5-20 мМ. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит 0,5-15 мМ гистидина в качестве стабилизатора. В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит 10 мМ гистидина. В конкретном варианте осуществления стабилизатор представляет собой гистидин в концентрации 10 мМ.In some embodiments, the composition of the present invention contains histidine as a stabilizer at a concentration of 1-50 mM, for example, 5-20 mM. In some embodiments, the composition contains 0.5-15 mM histidine as a stabilizer. In some embodiments, the composition of the present invention contains 10 mM histidine. In a specific embodiment, the stabilizer is histidine at a concentration of 10 mM.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению характеризуется рН в диапазоне от 3 до 10, например, рН от 6 до 10 или от 6 до 9. В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению характеризуется рН в диапазоне рН от 6,5 до 8,5, например, рН от 7,0 до 7,8. В конкретном варианте осуществления pH композиции составляет 7,4.In some embodiments, the composition of the present invention has a pH in the range of 3 to 10, such as a pH of 6 to 10 or 6 to 9. In some embodiments, the composition of the present invention has a pH in the range of pH 6.5 to 8, 5, for example, pH from 7.0 to 7.8. In a specific embodiment, the pH of the composition is 7.4.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. In some embodiments, the composition of the present invention contains one or more pharmaceutically acceptable excipients.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит средство для обеспечения изотоничности, такое как 1,2-пропандиол (пропиленгликоль).In some embodiments, the composition of the present invention contains an isotonicity agent such as 1,2-propanediol (propylene glycol).
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит буфер, такой как фосфатный буфер, TRIS, цитрат, или не содержит буфер. В некоторых вариантах осуществления фосфатный буфер представляет собой натрий-фосфатный буфер, такой как динатрия гидрофосфата дигидрат. В некоторых вариантах осуществления гистидин, добавленный в качестве стабилизатора, также может действовать как буфер.In some embodiments, the composition of the present invention contains a buffer, such as phosphate buffer, TRIS, citrate, or does not contain a buffer. In some embodiments, the phosphate buffer is a sodium phosphate buffer, such as disodium hydrogen phosphate dihydrate. In some embodiments, the histidine added as a stabilizer may also act as a buffer.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению необязательно содержит консервант, например, фенол в концентрации до 10 мг/мл, например, 5,5 мг/мл фенола. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит фенол в концентрации от 0,1 мг/мл до 5,5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению не содержит консерванта, например, не содержит фенола. В некоторых вариантах осуществления жидкая композиция содержит менее 0,01% (вес/вес) фенола, например, не содержит фенола. В некоторых вариантах осуществления жидкая композиция содержит не более 0,01% (вес/вес) фенола, например, не содержит фенола.In some embodiments, the composition of the present invention optionally contains a preservative, for example, phenol at a concentration of up to 10 mg/ml, for example, 5.5 mg/ml phenol. In some embodiments, the composition contains phenol at a concentration of from 0.1 mg/ml to 5.5 mg/ml. In some embodiments, the composition of the present invention does not contain a preservative, for example, does not contain phenol. In some embodiments, the liquid composition contains less than 0.01% (w/w) phenol, such as no phenol. In some embodiments, the liquid composition contains no more than 0.01% (w/w) phenol, such as no phenol.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению представляет собой жидкую композицию в форме раствора, такого как водный раствор, т.е. содержащий воду. В некоторых вариантах осуществления термин «водный раствор», применяемый в данном документе, относится к раствору, содержащему по меньшей мере 60% (вес/вес) воды. В некоторых вариантах осуществления водный раствор содержит 60-99% (вес/вес) воды. В некоторых вариантах осуществления водный раствор содержит по меньшей мере 75% (вес/вес) воды, например, по меньшей мере 80% (вес/вес) воды или по меньшей мере 85% (вес/вес) воды. В некоторых вариантах осуществления водный раствор содержит по меньшей мере 90% (вес/вес) воды, например, по меньшей мере 92% (вес/вес) воды или по меньшей мере 94% (вес/вес) воды.In some embodiments, the composition of the present invention is a liquid composition in the form of a solution, such as an aqueous solution, i.e. containing water. In some embodiments, the term “aqueous solution” as used herein refers to a solution containing at least 60% (w/w) water. In some embodiments, the aqueous solution contains 60-99% (w/w) water. In some embodiments, the aqueous solution contains at least 75% (w/w) water, such as at least 80% (w/w) water or at least 85% (w/w) water. In some embodiments, the aqueous solution contains at least 90% (w/w) water, such as at least 92% (w/w) water or at least 94% (w/w) water.
В некоторых вариантах осуществления композиция содержит семаглутид, средство для обеспечения изотоничности и гистидин. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит семаглутид, средство для обеспечения изотоничности и гистидин, где концентрация гистидина составляет 0,5-100 мМ, а pH композиции находится в диапазоне 6,0-10,0. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит семаглутид в концентрации 0,5-15 мг/мл, гистидин в концентрации 0,5-100 мМ и средство для обеспечения изотоничности, где pH композиции находится в диапазоне 6,0-10,0. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит семаглутид в концентрации 0,5-15 мг/мл, гистидин в концентрации 0,5-100 мМ и пропиленгликоль, где pH композиции находится в диапазоне 6,0-10,0. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит семаглутид в концентрации 0,5-15 мг/мл, гистидин в концентрации 0,5-15 мМ и пропиленгликоль, где pH композиции находится в диапазоне 6,0-10,0. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит семаглутид в концентрации 0,5-15 мг/мл, гистидин в концентрации 0,5-15 мМ, фосфатный буфер и пропиленгликоль, где pH композиции находится в диапазоне 6,0-10,0.In some embodiments, the composition contains semaglutide, an isotonicity agent, and histidine. In some embodiments, the composition contains semaglutide, an isotonicity agent, and histidine, where the concentration of histidine is 0.5-100 mM and the pH of the composition is in the range of 6.0-10.0. In some embodiments, the composition contains semaglutide at a concentration of 0.5-15 mg/ml, histidine at a concentration of 0.5-100 mM, and an isotonicity agent, where the pH of the composition is in the range of 6.0-10.0. In some embodiments, the composition contains semaglutide at a concentration of 0.5-15 mg/ml, histidine at a concentration of 0.5-100 mM and propylene glycol, where the pH of the composition is in the range of 6.0-10.0. In some embodiments, the composition contains semaglutide at a concentration of 0.5-15 mg/ml, histidine at a concentration of 0.5-15 mM and propylene glycol, where the pH of the composition is in the range of 6.0-10.0. In some embodiments, the composition contains semaglutide at a concentration of 0.5-15 mg/ml, histidine at a concentration of 0.5-15 mM, phosphate buffer and propylene glycol, where the pH of the composition is in the range of 6.0-10.0.
СемаглутидSemaglutide
Семаглутид, представляющий собой пептид на основе GLP-1, можно получить, как описано в WO2006/097537, пример 4. Семаглутид также известен как N6,26-{18-[N-(17-карбоксигептадеканоил)-L-γ-глутамил]-10-оксо-3,6,12,15-тетраокса-9,18-диазаоктадеканоил}-[8-(2-амино-2-пропановая-кислота),34-L-аргинин] глюкагоноподобный пептид 1(7-37) человека, см. WHO Drug Information Vol. 24, No. 1, 2010.Semaglutide, which is a GLP-1 based peptide, can be prepared as described in WO2006/097537, Example 4. Semaglutide is also known as N 6,26 -{18-[N-(17-carboxyheptadecanoyl)-L-γ-glutamyl ]-10-oxo-3,6,12,15-tetraoxa-9,18-diazaoctadecanoyl}-[8-(2-amino-2-propanoic acid),34-L-arginine] glucagon-like peptide 1(7- 37) human, see WHO Drug Information Vol. 24, No. 1, 2010.
В некоторых вариантах осуществления семаглутид может присутствовать в композиции в своей полностью или частично ионизированной форме; например, одна или более групп карбоновой кислоты (-COOH) могут быть депротонированы в карбоксилатную группу (-COO-), и/или одна или более аминогрупп (-NH2) могут быть протонированы в группы -NH3 +. В некоторых вариантах осуществления семаглутид добавлен в композицию в форме соли.In some embodiments, semaglutide may be present in the composition in its fully or partially ionized form; for example, one or more carboxylic acid groups (-COOH) may be deprotonated to a carboxylate group ( -COO- ), and/or one or more amino groups ( -NH2 ) may be protonated to -NH3 + groups. In some embodiments, semaglutide is added to the composition in salt form.
Введение и наборыIntroduction and Sets
Композиция по настоящему изобретению предназначена для парентерального введения. В некоторых вариантах осуществления композиция предназначена для подкожного введения, например, для введения с помощью шприца, необязательно предварительно заполненного шприца, такого как предварительно заполненный шприц с несъемной иглой. В некоторых вариантах осуществления средство для введения представляет собой шприц-ручку с длительным сроком эксплуатации или предварительно заполненную шприц-ручку.The composition of the present invention is intended for parenteral administration. In some embodiments, the composition is for subcutaneous administration, for example, for administration via a syringe, optionally a pre-filled syringe, such as a pre-filled syringe with a fixed needle. In some embodiments, the means of administration is a long-lasting pen or a pre-filled pen.
В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению предназначена для введения один раз в неделю. В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению предназначена для введения один раз в день, один раз в два дня или один раз в три дня.In some embodiments, the composition of the present invention is intended to be administered once a week. In some embodiments, the composition of the present invention is intended to be administered once a day, once every two days, or once every three days.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к набору, содержащему фармацевтическую композицию, определенную в данном документе, и инструкции по применению. В некоторых вариантах осуществления инструкции по применению включают вкладыш в упаковку лекарственного средства.In some embodiments, the present invention provides a kit containing a pharmaceutical composition as defined herein and instructions for use. In some embodiments, the instructions for use include a package insert for the medicinal product.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к набору, содержащему фармацевтическую композицию, определенную в данном документе, и устройство для осуществления инъекции. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция находится в предварительно заполненном шприце или картридже, которые вставляются в устройство для осуществления инъекции. Примером предварительно заполненного шприца является предварительно заполненный шприц с несъемной иглой, такой как стеклянный шприц или полимерный шприц. В некоторых вариантах осуществления предварительно заполненный шприц с несъемной иглой представляет собой стеклянный шприц. В некоторых вариантах осуществления предварительно заполненный шприц с несъемной иглой представляет собой полимерный шприц. В некоторых вариантах осуществления устройство для осуществления инъекции представляет собой шприц-ручку с длительным сроком эксплуатации или предварительно заполненную шприц-ручку. Примерами шприц-ручек с длительным сроком эксплуатации являются NovoPen®4 или NovoPen®5 (обе от Novo Nordisk A/S, Дания). Примером предварительно заполненной шприц-ручки является FlexPen® (Novo Nordisk A/S, Дания).In some embodiments, the present invention provides a kit comprising a pharmaceutical composition as defined herein and an injection device. In some embodiments, the pharmaceutical composition is contained in a pre-filled syringe or cartridge that is inserted into the injection device. An example of a prefilled syringe is a prefilled syringe with a permanent needle, such as a glass syringe or a polymer syringe. In some embodiments, the prefilled syringe with a fixed needle is a glass syringe. In some embodiments, the prefilled syringe with a fixed needle is a polymer syringe. In some embodiments, the injection device is a long-life pen or a prefilled pen. Examples of long-life pens are NovoPen ® 4 or NovoPen ® 5 (both from Novo Nordisk A/S, Denmark). An example of a pre-filled pen is FlexPen ® (Novo Nordisk A/S, Denmark).
ПоказанияIndications
В некоторых вариантах осуществления композиции по настоящему изобретению предназначены для применения в медицине. В некоторых вариантах осуществления композицию по настоящему изобретению можно применять для следующих видов терапевтического лечения:In some embodiments, the compositions of the present invention are for medical use. In some embodiments, the composition of the present invention can be used for the following types of therapeutic treatments:
(i) предупреждения и/или лечения всех форм сахарного диабета, таких как гипергликемия, сахарный диабет 2 типа, нарушение толерантности к глюкозе, сахарный диабет 1 типа, инсулинонезависимый сахарный диабет, MODY (сахарный диабет взрослого типа у молодых), гестационный сахарный диабет и/или для снижения уровня HbA1c;(i) prevention and/or treatment of all forms of diabetes mellitus, such as hyperglycemia, type 2 diabetes mellitus, impaired glucose tolerance, type 1 diabetes mellitus, non-insulin-dependent diabetes mellitus, MODY (adult-onset diabetes mellitus of the young), gestational diabetes mellitus and /or to reduce HbA1c levels;
(ii) задержки или предотвращения прогрессирования диабетического заболевания, как, например, прогрессирования сахарного диабета 2 типа, задержки прогрессирования нарушения толерантности к глюкозе (IGT) до инсулинозависимого сахарного диабета 2 типа и/или задержки прогрессирования инсулинонезависимого сахарного диабета 2 типа до инсулинозависимого сахарного диабета 2 типа;(ii) delaying or preventing the progression of diabetic disease, such as progression of type 2 diabetes mellitus, delaying the progression of impaired glucose tolerance (IGT) to insulin-dependent type 2 diabetes mellitus and/or delaying the progression of non-insulin-dependent type 2 diabetes mellitus to insulin-dependent type 2 diabetes mellitus type;
(iii) предотвращения и/или лечения расстройств приема пищи, таких как ожирение, например, путем уменьшения потребления пищи, снижения массы тела, подавления аппетита, вызывания чувства сытости; лечения или предупреждения расстройства приема пищи, нервной булимии и/или ожирения, вызванного введением антипсихотического средства или стероида; снижения перистальтики желудка и/или задержки опорожнения желудка.(iii) preventing and/or treating eating disorders such as obesity, for example, by reducing food intake, reducing body weight, suppressing appetite, inducing a feeling of satiety; treating or preventing eating disorder, bulimia nervosa and/or obesity caused by the administration of an antipsychotic drug or steroid; decreased gastric motility and/or delayed gastric emptying.
(iv) предотвращения и/или лечения нарушений печени, таких как стеатоз печени, неалкогольная жировая болезнь печени (NAFLD), неалкогольный стеатогепатит (NASH), воспаление печени или ожирение печени.(iv) preventing and/or treating liver disorders such as hepatic steatosis, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), non-alcoholic steatohepatitis (NASH), liver inflammation or fatty liver.
В некоторых вариантах осуществления показание представляет собой (i). В некоторых вариантах осуществления показание представляет собой (ii). В еще одном дополнительном конкретном аспекте показание представляет собой (iii). В некоторых вариантах осуществления показание представляет собой (iv). В некоторых вариантах осуществления показание представляет собой сахарный диабет 2 типа и/или ожирение.In some embodiments, the indication is (i). In some embodiments, the indication is (ii). In yet another further specific aspect, the indication is (iii). In some embodiments, the indication is (iv). In some embodiments, the indication is type 2 diabetes and/or obesity.
В некоторых вариантах осуществления способ или применение включает предотвращение, лечение, снижение интенсивности и/или индуцирование при одном или более из заболеваний или состояний, определенных в данном документе. В некоторых вариантах осуществления показание представляет собой (i) и (iii). В некоторых вариантах осуществления показание представляет собой (ii) и (iii). В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает введение эффективного количества пептида на основе GLP-1. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к введению эффективного количества пептида на основе GLP-1. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к введению эффективного количества семаглутида.In some embodiments, the method or use includes preventing, treating, mitigating, and/or inducing one or more of the diseases or conditions defined herein. In some embodiments, the indication is (i) and (iii). In some embodiments, the indication is (ii) and (iii). In some embodiments, the present invention includes administering an effective amount of a GLP-1-based peptide. In some embodiments, the present invention relates to the administration of an effective amount of a GLP-1-based peptide. In a specific embodiment, the present invention relates to the administration of an effective amount of semaglutide.
Как правило, все субъекты, страдающие от ожирения, также считаются страдающими от избыточного веса. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения или предотвращения ожирения. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к применению композиции для лечения или предотвращения ожирения. В некоторых вариантах осуществления субъект, страдающий ожирением, представляет собой человека, такого как взрослый человек или человек детского возраста (включая младенцев, детей и подростков). Индекс массы тела (BMI) представляет собой показатель телесного жира с учетом роста и веса. Формула для расчета представляет собой BMI = вес в килограммах/рост в метрах2. Субъект-человек, страдающий от ожирения, может иметь BMI≥30; при этом данный субъект может также обозначаться как имеющий ожирение. В некоторых вариантах осуществления субъект, представляющий собой человека, страдающего ожирением, может иметь BMI≥35 или BMI в диапазоне от ≥30 до <40. В некоторых вариантах осуществления ожирение представляет собой тяжелую форму ожирения или морбидное ожирение, при этом субъект, представляющий собой человека, может иметь BMI ≥40.Generally, all subjects who are obese are also considered to be overweight. In some embodiments, the present invention provides a method for treating or preventing obesity. In some embodiments, the present invention relates to the use of a composition for treating or preventing obesity. In some embodiments, the obese subject is a human, such as an adult or a child (including infants, children, and adolescents). Body mass index (BMI) is a measure of body fat based on height and weight. The formula for calculation is BMI = weight in kilograms/height in meters 2 . An obese human subject may have a BMI≥30; however, the subject may also be designated as obese. In some embodiments, the subject is an obese person may have a BMI≥35 or a BMI in the range of ≥30 to <40. In some embodiments, the obesity is severe obesity or morbid obesity, wherein the human subject may have a BMI ≥40.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения или предотвращения возникновения избыточного веса, необязательно в присутствии по меньшей мере одной сопутствующей патологии, связанной с весом. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к применению композиции для лечения или предотвращения возникновения избыточного веса, необязательно в присутствии по меньшей мере одной сопутствующей патологии, связанной с весом. В некоторых вариантах осуществления субъект, страдающий избыточным весом, представляет собой человека, такого как взрослый человек или человек детского возраста (включая младенцев, детей и подростков). В некоторых вариантах осуществления субъект, представляющий собой человека, страдающий избыточным весом, может иметь BMI ≥25, например, BMI ≥27. В некоторых вариантах осуществления субъект, представляющий собой человека, страдающий избыточным весом, имеет BMI в диапазоне от 25 до <30 или в диапазоне от 27 до <30. В некоторых вариантах осуществления сопутствующая патология, связанная с весом, выбрана из группы, состоящей из гипертензии, сахарного диабета (такого как сахарный диабет 2 типа), дислипидемии, высокого уровня холестерина и обструктивного апноэ во сне.In some embodiments, the present invention provides a method for treating or preventing the onset of excess weight, optionally in the presence of at least one weight-related comorbidity. In some embodiments, the present invention relates to the use of a composition for treating or preventing the onset of excess weight, optionally in the presence of at least one weight-related comorbidity. In some embodiments, the obese subject is a human, such as an adult or a child (including infants, children, and adolescents). In some embodiments, the subject, who is an overweight person, may have a BMI ≥25, for example, a BMI ≥27. In some embodiments, the subject, who is an overweight person, has a BMI in the range of 25 to <30, or in the range of 27 to <30. In some embodiments, the weight-related comorbidity is selected from the group consisting of hypertension, diabetes mellitus (such as type 2 diabetes mellitus), dyslipidemia, high cholesterol, and obstructive sleep apnea.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу снижения массы тела. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к применению композиции по настоящему изобретению для снижения массы тела. Человек, который будет подвергаться снижению массы тела в соответствии с настоящим изобретением, может иметь BMI≥25, например, BMI≥27 или BM ≥30. В некоторых вариантах осуществления человек, который будет подвергаться снижению массы тела в соответствии с настоящим изобретением, может иметь BMI≥35 или BMI≥40. Термин «снижение веса тела» может включать лечение или предотвращение ожирения и/или избыточного веса. In some embodiments, the present invention relates to a method for reducing body weight. In some embodiments, the present invention relates to the use of a composition of the present invention for weight loss. A person who will undergo weight loss in accordance with the present invention may have a BMI≥25, for example, a BMI≥27 or a BM≥30. In some embodiments, a person who will undergo weight loss in accordance with the present invention may have a BMI≥35 or a BMI≥40. The term "body weight loss" may include the treatment or prevention of obesity and/or overweight.
В некоторых вариантах осуществления, как используется в данном документе, конкретные значения, данные в отношении чисел или интервалов, могут пониматься как конкретное значение или как приблизительно конкретное значение (например, плюс или минус 10 процентов от конкретного значения).In some embodiments, as used herein, specific values given in terms of numbers or intervals may be understood as a specific value or as an approximate specific value (eg, plus or minus 10 percent of a specific value).
Варианты осуществления настоящего изобретенияEmbodiments of the Present Invention
Ниже приведены неограничивающие варианты осуществления настоящего изобретения.The following are non-limiting embodiments of the present invention.
1. Жидкая фармацевтическая композиция, содержащая семаглутид и гистидин.1. Liquid pharmaceutical composition containing semaglutide and histidine.
2. Жидкая фармацевтическая композиция по варианту осуществления 1, содержащая семаглутид, средство для обеспечения изотоничности и гистидин.2. The liquid pharmaceutical composition according to embodiment 1, containing semaglutide, an isotonicity agent and histidine.
3. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция представлена в форме жидкого раствора. 3. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition is in the form of a liquid solution.
4. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация гистидина составляет 0,5-100 мМ.4. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the histidine concentration is 0.5-100 mM.
5. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация гистидина составляет 0,5-15 мМ.5. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the histidine concentration is 0.5-15 mM.
6. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация гистидина составляет 1-50 мМ.6. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the histidine concentration is 1-50 mM.
7. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация гистидина составляет 2-20 мМ.7. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the histidine concentration is 2-20 mM.
8. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация гистидина составляет 2-15 мМ.8. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the histidine concentration is 2-15 mM.
9. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация гистидина составляет 5-15 мМ.9. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the histidine concentration is 5-15 mM.
10. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация гистидина составляет 10 мМ.10. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the histidine concentration is 10 mM.
11. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит менее 0,01% (вес/вес) фенола.11. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains less than 0.01% (w/w) phenol.
12. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит не более 0,01% (вес/вес) фенола.12. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains no more than 0.01% (w/w) phenol.
13. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция не содержит фенола.13. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition does not contain phenol.
14. Композиция по любому из вариантов осуществления 1-10, где композиция содержит консервант, такой как фенол.14. The composition according to any one of embodiments 1-10, wherein the composition contains a preservative such as phenol.
15. Композиция по любому из вариантов осуществления 1-10 или 14, где композиция содержит фенол в концентрации до 10 мг/мл.15. The composition according to any of embodiments 1-10 or 14, where the composition contains phenol at a concentration of up to 10 mg/ml.
16 Композиция по любому из вариантов осуществления 1-10 или 14-15, где композиция содержит фенол в концентрации 0,1-5,5 мг/мл.16 The composition according to any of embodiments 1-10 or 14-15, where the composition contains phenol at a concentration of 0.1-5.5 mg/ml.
17. Композиция по любому из вариантов осуществления 1-10 или 14-16, где композиция содержит 5,5 мг/мл фенола.17. The composition according to any one of embodiments 1-10 or 14-16, where the composition contains 5.5 mg/ml phenol.
18. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция представляет собой водный раствор, содержащий по меньшей мере 60% (вес/вес) воды, например, по меньшей мере 70% (вес/вес) воды или по меньшей мере 80% (вес/вес) воды.18. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition is an aqueous solution containing at least 60% (w/w) water, for example, at least 70% (w/w) water or at least 80% ( weight/weight) of water.
19. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация семаглутида в композиции составляет 0,1-20 мг/мл.19. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the concentration of semaglutide in the composition is 0.1-20 mg/ml.
20. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация семаглутида в композиции составляет 0,1-10 мг/мл.20. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the concentration of semaglutide in the composition is 0.1-10 mg/ml.
21. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация семаглутида в композиции составляет 0,5-5 мг/мл. 21. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the concentration of semaglutide in the composition is 0.5-5 mg/ml.
22. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где концентрация семаглутида в композиции составляет 0,5 мг/мл.22. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the concentration of semaglutide in the composition is 0.5 mg/ml.
23. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где семаглутид представлен в форме фармацевтически приемлемой соли.23. The composition according to any of the previous embodiments, wherein semaglutide is in the form of a pharmaceutically acceptable salt.
24. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.24. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains one or more pharmaceutically acceptable excipients.
25. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит одно или более средств для корректировки pH, таких как HCl, NaOH или ацетат. 25. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains one or more pH adjusting agents such as HCl, NaOH or acetate.
26. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит средство для обеспечения изотоничности.26. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains an isotonicity agent.
27. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит буфер.27. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains a buffer.
28. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит буфер и/или средство для обеспечения изотоничности.28. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains a buffer and/or an isotonicity agent.
29. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где буфер присутствует в композиции в концентрации 0,01-50 мМ.29. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the buffer is present in the composition at a concentration of 0.01-50 mM.
30. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где буфер представляет собой фосфатный буфер или гистидин.30. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the buffer is a phosphate buffer or histidine.
31. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где буфер выбран из дигидрофосфата натрия, гидрофосфата динатрия, фосфорной кислоты или фосфата натрия. 31. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the buffer is selected from sodium dihydrogen phosphate, disodium hydrogen phosphate, phosphoric acid or sodium phosphate.
32. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция содержит средство для обеспечения изотоничности, которое присутствует в композиции в концентрации от 8 мг/мл до 50 мг/мл, например, от 14 мг/мл до 30 мг/мл.32. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition contains an isotonicity agent that is present in the composition at a concentration of 8 mg/ml to 50 mg/ml, for example, 14 mg/ml to 30 mg/ml.
33. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где средство для обеспечения изотоничности представляет собой пропиленгликоль.33. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the isotonicity agent is propylene glycol.
34. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция не содержит консервантов.34. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition does not contain preservatives.
35. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция характеризуется рН в диапазоне от 6,0 до 10,0.35. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition has a pH in the range of 6.0 to 10.0.
36. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция характеризуется рН в диапазоне от 7,0 до 7,8.36. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition has a pH in the range of 7.0 to 7.8.
37. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция состоит из семаглутида, гистидина и одного или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, выбранных из группы, состоящей из буфера, средства для обеспечения изотоничности и средства для корректировки pH.37. The composition according to any of the preceding embodiments, wherein the composition consists of semaglutide, histidine and one or more pharmaceutically acceptable excipients selected from the group consisting of a buffer, isotonicity agent and pH adjusting agent.
38. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция состоит из семаглутида, гистидина, буфера и средства для обеспечения изотоничности.38. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition consists of semaglutide, histidine, a buffer and an isotonicity agent.
39. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция предназначена для парентерального введения.39. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition is for parenteral administration.
40. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция предназначена для подкожного введения.40. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition is for subcutaneous administration.
41. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция находится в предварительно заполненном шприце или картридже.41. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition is in a pre-filled syringe or cartridge.
42. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция находится в предварительно заполненном шприце с несъемной иглой.42. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition is contained in a pre-filled syringe with a fixed needle.
43. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где композиция вводится с использованием шприц-ручки с длительным сроком эксплуатации или предварительно заполненной шприц-ручки.43. The composition according to any of the previous embodiments, wherein the composition is administered using a long life pen or pre-filled pen.
44. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где при хранении образуется меньше примесей.44. The composition according to any of the previous embodiments, wherein fewer impurities are formed during storage.
45. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где при хранении образуется меньше HMWP.45. The composition according to any of the previous embodiments, wherein less HMWP is formed during storage.
46. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где при хранении образуется меньше гидрофобных примесей 1.46. The composition according to any of the previous embodiments, where less hydrophobic impurities 1 are formed during storage.
47. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где при хранении образуется меньше гидрофобных примесей 2.47. Composition according to any of the previous embodiments, where less hydrophobic impurities 2 are formed during storage.
48. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где после воздействия света образуется меньше примесей.48. The composition according to any of the previous embodiments, wherein fewer impurities are formed after exposure to light.
49. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где получена улучшенная химическая стабильность композиции.49. The composition according to any of the previous embodiments, wherein improved chemical stability of the composition is obtained.
50. Композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления, где получена улучшенная физическая стабильность композиции. 50. The composition according to any of the previous embodiments, wherein improved physical stability of the composition is obtained.
51. Набор, содержащий фармацевтическую композицию согласно любому из предыдущих вариантов осуществления и инструкции по применению.51. A kit containing a pharmaceutical composition according to any of the previous embodiments and instructions for use.
52. Набор по варианту осуществления 51, где набор содержит устройство для осуществления инъекции для введения фармацевтической композиции субъекту.52. The kit of embodiment 51, wherein the kit comprises an injection device for administering a pharmaceutical composition to a subject.
53. Набор по вариантам осуществления 51-52, где устройство для осуществления инъекции выбрано из группы, состоящей из шприц-ручки с длительным сроком эксплуатации и предварительно заполненной шприц-ручки.53. The kit of embodiments 51-52, wherein the injection device is selected from the group consisting of a long life pen and a pre-filled pen.
54. Фармацевтическая композиция по любому из вариантов осуществления 1-50 для применения в качестве лекарственного препарата.54. The pharmaceutical composition according to any one of embodiments 1-50 for use as a medicinal product.
55. Фармацевтическая композиция по любому из предыдущих вариантов осуществления 1-50 для применения в лечении сахарного диабета или ожирения.55. The pharmaceutical composition according to any of the previous embodiments 1-50 for use in the treatment of diabetes mellitus or obesity.
56. Фармацевтическая композиция по любому из вариантов осуществления 1-50 для применения в лечении NASH.56. The pharmaceutical composition according to any one of embodiments 1-50 for use in the treatment of NASH.
57. Способ предотвращения или лечения сахарного диабета или ожирения, где фармацевтическую композицию согласно любому из вариантов осуществления 1-50 вводят нуждающемуся в этом субъекту.57. A method for preventing or treating diabetes mellitus or obesity, wherein the pharmaceutical composition according to any one of embodiments 1-50 is administered to a subject in need thereof.
58. Способ предотвращения или лечения NASH, где фармацевтическую композицию согласно любому из вариантов осуществления 1-50 вводят нуждающемуся в этом субъекту.58. A method for preventing or treating NASH, wherein the pharmaceutical composition according to any one of embodiments 1-50 is administered to a subject in need thereof.
ПримерыExamples
Общие способы и определение характеристикGeneral methods and characterization
Получение композиций на основе семаглутидаPreparation of compositions based on semaglutide
Если не указано иное, композиции на основе семаглутида получали путем растворения буфера (например, динатрия гидрофосфата дигидрата), средства для обеспечения изотоничности (пропиленгликоля), фенола (необязательно) и необязательно стабилизатора (гистидина) в воде. В вышеуказанном растворяли семаглутид, рН доводили до 7,4 с использованием гидроксида натрия и/или соляной кислоты, и, наконец, композицию стерилизовали фильтрацией через стерильный фильтр с порами 0,22 мкм. Композиции, содержащие семаглутид и гистидин, добавляли в предварительно заполненный шприц (Ompi #7600002.8506) или картридж.Unless otherwise stated, semaglutide compositions were prepared by dissolving a buffer (eg, disodium hydrogen phosphate dihydrate), an isotonicity agent (propylene glycol), phenol (optional), and optionally a stabilizer (histidine) in water. Semaglutide was dissolved in the above, the pH was adjusted to 7.4 using sodium hydroxide and/or hydrochloric acid, and finally the composition was sterilized by filtration through a sterile 0.22 μm filter. Compositions containing semaglutide and histidine were added to a pre-filled syringe (Ompi #7600002.8506) or cartridge.
Анализ (I): определение содержания высокомолекулярных белков (HMWP) в композициях на основе семаглутидаAssay (I): Determination of high molecular weight protein (HMWP) content in semaglutide-based formulations
Определение содержания HMWP проводили с помощью эксклюзионной хроматографии (SE-HPLC) с использованием колонки Waters Insulin HMWP с подвижной фазой на основе хлорида натрия, фосфата натрия, фосфорной кислоты и изопропанола с помощью изократического элюирования и детекции при 280 нм. Содержание HMWP приведено в % как объединенная площадь хроматографических пиков, элюирующихся раньше, чем пик мономера семаглутида (т.е. пиков HMWP), относительно общей площади пиков HMWP и мономера семаглутида. Результаты представлены как абсолютные значения и/или как % увеличения в месяц.Determination of HMWP content was performed by size exclusion chromatography (SE-HPLC) using a Waters Insulin HMWP column with a mobile phase of sodium chloride, sodium phosphate, phosphoric acid and isopropanol using isocratic elution and detection at 280 nm. The HMWP content is given in % as the combined area of the chromatographic peaks eluting before the semaglutide monomer peak (i.e., HMWP peaks), relative to the total area of the HMWP and semaglutide monomer peaks. Results are presented as absolute values and/or as % increase per month.
Анализ (II): Определение гидрофобных примесей 1 и 2 композиций на основе семаглутидаAnalysis (II): Determination of hydrophobic impurities 1 and 2 of semaglutide-based compositions
Определение гидрофобных примесей 1 и 2 композиций на основе семаглутида выполняли с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой (RP-HPLC). Метод RP-HPLC выполняли на колонке Kinetex C18, начиная с изократического элюирования с последующим градиентным элюированием с использованием элюента A (90% 0,09 М фосфатного буфера, pH 3,6 и 10% ацетонитрила) и элюента B (60% ацетонитрила и 20% изопропанола) от примерно 50:50 до 10:90 и обратно до примерно 50:50 соотношения A:B. Детекцию проводили при 210 нм. Determination of hydrophobic impurities 1 and 2 of semaglutide-based compositions was performed using reverse phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC). The RP-HPLC method was performed on a Kinetex C18 column, starting with isocratic elution followed by gradient elution using eluent A (90% 0.09 M phosphate buffer, pH 3.6 and 10% acetonitrile) and eluent B (60% acetonitrile and 20 % isopropanol) from about 50:50 to 10:90 and back to about 50:50 A:B ratio. Detection was performed at 210 nm.
Гидрофобные примеси 1 рассчитывали как площадь всех пиков, элюируемых между семаглутидом и началом конечного градиента, на хроматограмме по отношению к общей площади всех пиков. Гидрофобные примеси 2 рассчитывали как площадь всех пиков, элюируемых в конечном градиенте, на хроматограмме по отношению к общей площади всех пиков.Hydrophobic impurities 1 were calculated as the area of all peaks eluting between semaglutide and the start of the final gradient in the chromatogram relative to the total area of all peaks. Hydrophobic impurities 2 were calculated as the area of all peaks eluting in the final gradient in the chromatogram relative to the total area of all peaks.
Анализ (III): физическая стабильность композиций на основе семаглутида, оцениваемая с помощью ThTAnalysis (III): Physical stability of semaglutide formulations assessed by ThT
Целью данного анализа являлась оценка физической стабильности пептида на основе GLP-1 в водном растворе.The purpose of this analysis was to evaluate the physical stability of the GLP-1-based peptide in aqueous solution.
Низкая физическая стабильность пептида или белка может привести к образованию амилоидных фибрилл. Фибриллы представляют собой высокоупорядоченные в отношении структуры нитевидные макромолекулярные структуры, образовавшиеся в результате агрегации растворимых белков и характеризующиеся преобладанием структуры бета-листа. Зрелые фибриллы нерастворимы и устойчивы к разрушению. В целях обеспечения качества лекарственного средства и безопасности пациента необходимо минимизировать и контролировать явления фибриллообразования в фармацевтических композициях на основе терапевтических пептидов и белков. Агрегацию белков, в том числе фибриллообразование, можно оценить при визуальном осмотре образца. Фибриллообразование можно оценить с использованием тиофлавина Т (ThT), низкомолекулярного индикаторного зонда с высокой специфичностью в отношении фибрилл. ThT характеризуется отчетливым профилем флуоресценции при связывании с фибриллами, по сравнению с ThT в растворе [Naiki et al. (1989) Anal. Biochem. 177, 244-249; LeVine (1999) Methods. Enzymol. 309, 274-284]. Low physical stability of a peptide or protein can lead to the formation of amyloid fibrils. Fibrils are highly ordered filamentous macromolecular structures in terms of structure, formed as a result of aggregation of soluble proteins and characterized by a predominant beta-sheet structure. Mature fibrils are insoluble and resistant to destruction. In order to ensure the quality of the drug and patient safety, it is necessary to minimize and control fibrillation phenomena in pharmaceutical compositions based on therapeutic peptides and proteins. Protein aggregation, including fibril formation, can be assessed by visual inspection of the sample. Fibrillation can be assessed using thioflavin T (ThT), a small molecule indicator probe with high specificity for fibrils. ThT has a distinct fluorescence profile when bound to fibrils, compared to ThT in solution [Naiki et al. (1989) Anal. Biochem. 177, 244-249; LeVine (1999) Methods. Enzymol. 309, 274-284].
В качестве общего механизма инициации фибриллообразования предполагается образование частично свернутого промежуточного соединения пептида. Небольшое количество этих промежуточных соединений подвергается нуклеации с образованием матрицы, на которой могут собираться дополнительные промежуточные соединения, и происходит фибриллообразование. Время задержки соответствует интервалу, за который образуется критическое количество центров фибриллообразования, а константа кажущейся скорости реакции представляет собой скорость, с которой формируется сама фибрилла. Поэтому время задержки, описанное в анализе с ThT, проводимом на планшет-ридере, принимали за показатель склонности к фибриллообразованию композиции на основе пептидов в растворе. The general mechanism for initiating fibril formation is the formation of a partially folded peptide intermediate. A small number of these intermediates undergo nucleation to form a matrix on which additional intermediates can assemble, and fibril formation occurs. The delay time corresponds to the interval during which a critical number of fibril formation centers is formed, and the apparent reaction rate constant represents the rate at which the fibril itself is formed. Therefore, the lag time reported in the ThT assay performed on a plate reader was taken as an indicator of the fibril formation propensity of the peptide composition in solution.
Перед проведением анализа ThT добавляли в образцы из исходного раствора в H2O до конечной концентрации 20 мкМ в образцах. Аликвоты образцов по 200 мкл композиции, содержащей пептид на основе GLP-1, помещали в 96-луночный микротитровальный планшет (оптический, 0,4 мл, черный Thermo Scientific Nunc), при этом в каждую лунку помещали стеклянную гранулу (2,8-3,2 мм, Whitehouse Scientific). Как правило, в планшете размещали по восемь копий каждого образца. Планшет герметизировали герметизирующей лентой (Thermo Scientific Nunc).Before analysis, ThT was added to the samples from a stock solution in H2O to a final concentration of 20 μM in the samples. Sample aliquots of 200 µl of the GLP-1 peptide composition were placed in a 96-well microtiter plate (optical, 0.4 ml, black Thermo Scientific Nunc), with a glass bead placed in each well (2.8-3 .2 mm, Whitehouse Scientific). Typically, eight copies of each sample were placed in a plate. The plate was sealed with sealing tape (Thermo Scientific Nunc).
Инкубацию при заданной температуре, встряхивание и измерение флуоресцентного излучения ThT проводили на BMG FLUOStar Omega или BMG FLUOStar Optima. Планшет инкубировали при 40°С со встряхиванием на двойном орбитальном шейкере при 300 об./мин. с амплитудой 2 мм. Измерение флуоресценции проводили с помощью возбуждения через фильтр с порами 450 нм, а измерение излучения - через фильтр с порами 480 нм. В планшете проводили измерения каждые 20 минут в течение требуемого периода времени. Между каждым измерением планшет встряхивали и нагревали, как было описано. Incubation at a given temperature, shaking and measurement of ThT fluorescence emission were carried out on a BMG FLUOStar Omega or BMG FLUOStar Optima. The plate was incubated at 40°C with shaking on a double orbital shaker at 300 rpm. with an amplitude of 2 mm. Fluorescence measurements were performed using excitation through a 450 nm pore filter and emission measurements through a 480 nm pore filter. The tablet was measured every 20 minutes for the required period of time. Between each measurement, the plate was shaken and heated as described.
Пороговое значение определяли как наивысший уровень флуоресценции ThT (в относительных единицах флуоресценции (RFU)), измеренной на планшете в момент времени 1 ч. 13 мин., плюс 100 RFU. Затем пороговое значение использовали для вычисления времени задержки с помощью способа «время до порогового значения» в программном обеспечении BMG FLUOstar. The threshold value was defined as the highest level of ThT fluorescence (in relative fluorescence units (RFU)) measured on the plate at the 1 hour 13 minute time point, plus 100 RFU. The threshold value was then used to calculate the delay time using the “time to threshold” method in BMG FLUOstar software.
Пример 1Example 1
В данном примере тестировали композиции, содержащие семаглутид. Тестируемые композиции содержали семаглутид (0,5 мг/мл), пропиленгликоль (18,5 мг/мл), динатрия гидрофосфата дигидрат (1,42 мг/мл) и необязательно гистидин (10 мг/мл), как указано в таблице 1, при рН 7,4 в водном растворе. Композиции получали, как описано в разделе «Общие способы и определение характеристик», и композиции на основе семаглутида добавляли в предварительно заполненный шприц с несъемной иглой (объем наполнения 0,5 мл). Заполненные шприцы хранили при 30°C или 37°C и отслеживали химическую стабильность с течением времени. Некоторые композиции подвергались воздействию искусственного света в течение 96 часов при 1000 люкс. После воздействия света отслеживали химическую стабильность во время хранения при 37°C (также упоминается в данном документе как 37°C+свет). Химическую стабильность определяли путем измерения образования HMWP, как описано в анализе (I), после хранения при 30°C, 37°C и 37°C +свет; результаты представлены в таблице 2. Образование гидрофобных примесей 1 и 2 определяли, как описано в анализе (II), после хранения при 30°C, 37°C и 37°C+свет; результаты представлены в таблицах 3 и 4. In this example, compositions containing semaglutide were tested. The compositions tested contained semaglutide (0.5 mg/ml), propylene glycol (18.5 mg/ml), disodium hydrogen phosphate dihydrate (1.42 mg/ml) and optionally histidine (10 mg/ml), as indicated in Table 1. at pH 7.4 in aqueous solution. The compositions were prepared as described in the General Methods and Characterization section, and the semaglutide compositions were added to a pre-filled syringe with a fixed needle (fill volume 0.5 ml). Filled syringes were stored at 30°C or 37°C and chemical stability was monitored over time. Some compositions were exposed to artificial light for 96 hours at 1000 lux. Following light exposure, chemical stability was monitored during storage at 37°C (also referred to herein as 37°C+light). Chemical stability was determined by measuring HMWP formation as described in assay (I) after storage at 30°C, 37°C, and 37°C +light; the results are presented in Table 2. The formation of hydrophobic impurities 1 and 2 was determined as described in analysis (II), after storage at 30°C, 37°C and 37°C+light; the results are presented in tables 3 and 4.
Результаты, приведенные в таблицах 2, 3 и 4, неожиданно показывают, что химическая стабильность семаглутида улучшается, если гистидин присутствует в композиции как при воздействии света, так и без него.The results shown in Tables 2, 3 and 4 surprisingly show that the chemical stability of semaglutide is improved if histidine is present in the composition both with and without exposure to light.
Таблица 1. Композиции, протестированные в примере 1Table 1. Compositions tested in example 1
Таблица 2. Образование HMWP в композициях на основе семаглутида в данных условияхTable 2. Formation of HMWP in semaglutide-based compositions under these conditions
Результаты, представленные в таблице 2, показывают, что, если в композиции присутствует гистидин, во время хранения образуется меньше HMWP. Более низкая концентрация HMWP соответствует лучшей стабильности, т.е. композиция химически более стабильна в присутствии гистидина как с воздействием света, так и без него.The results presented in Table 2 show that if histidine is present in the composition, less HMWP is formed during storage. A lower HMWP concentration corresponds to better stability, i.e. the composition is chemically more stable in the presence of histidine, both with and without exposure to light.
Таблица 3. Образование гидрофобных примесей 2 в композициях на основе семаглутида в данных условияхTable 3. Formation of hydrophobic impurities 2 in compositions based on semaglutide under these conditions
Результаты, представленные в таблице 3, показывают, что, когда гистидин присутствует в композиции, во время хранения образуется меньше гидрофобных примесей 2 при 30°C, 37°C и 37°C+свет, т.е. композиция более стабильна в присутствии гистидина.The results presented in Table 3 show that when histidine is present in the composition, less hydrophobic impurities 2 are formed during storage at 30°C, 37°C and 37°C+light, i.e. the composition is more stable in the presence of histidine.
Таблица 4. Образование гидрофобных примесей 1 в композициях на основе семаглутида в данных условияхTable 4. Formation of hydrophobic impurities 1 in compositions based on semaglutide under these conditions
Результаты, представленные в таблице 4, показывают, что, если гистидин присутствует в композиции, во время хранения образуется меньше гидрофобных примесей 1 при 30°C, 37°C и 37°C+свет, т.е. композиция химически более стабильна в присутствии гистидина.The results presented in Table 4 show that if histidine is present in the composition, less hydrophobic impurities 1 are formed during storage at 30°C, 37°C and 37°C+light, i.e. the composition is chemically more stable in the presence of histidine.
Пример 2Example 2
В данном примере тестировали композиции, содержащие семаглутид. Тестируемые композиции содержали семаглутид (0,5 мг/мл), пропиленгликоль (18,5 мг/мл), динатрия гидрофосфата дигидрат (1,42 мг/мл), фенол (0, 0,1 или 5,5 мг/мл) и необязательно гистидин (10 мг/мл), как указано в таблицах 5-9, при рН 7,4 в водном растворе. Композиции получали, как описано в разделе «Общие способы и определение характеристик», и композиции на основе семаглутида добавляли в предварительно заполненный шприц (PFS) с несъемной иглой (объем наполнения 0,5 мл) или картриджи на 1,5 мл (объем наполнения 1,5 мл). Заполненные шприцы или картриджи хранили при 37°C и отслеживали химическую стабильность с течением времени. Некоторые композиции подвергались воздействию искусственного света в течение 96 часов при 1000 люкс. После воздействия света отслеживали химическую стабильностью во время хранения при 37°C. Химическую стабильность определяли путем измерения образования HMWP, как описано в анализе (I), после хранения при 37°C и 37°C +свет; результаты представлены в таблице 5. Образование гидрофобных примесей 1 и 2 определяли, как описано в анализе (II), после хранения при 37°C и 37°C+свет; результаты представлены в таблицах 6 и 7. Обзор результатов химической стабильности, рассчитанной как % увеличения в месяц, приведен в таблице 8. Физическую стабильность, выраженную с помощью анализа с тиофлавином Т (ThT), определяли с помощью описанного в данном документе анализа (III), и результаты представлены в таблице 9. In this example, compositions containing semaglutide were tested. The tested compositions contained semaglutide (0.5 mg/ml), propylene glycol (18.5 mg/ml), disodium hydrogen phosphate dihydrate (1.42 mg/ml), phenol (0, 0.1 or 5.5 mg/ml) and optionally histidine (10 mg/ml), as indicated in tables 5-9, at pH 7.4 in aqueous solution. Compositions were prepared as described in the General Methods and Characterization section, and semaglutide compositions were added to pre-filled syringes (PFS) with fixed needle (0.5 ml filling volume) or 1.5 ml cartridges (1 ml filling volume). .5 ml). Filled syringes or cartridges were stored at 37°C and chemical stability was monitored over time. Some compositions were exposed to artificial light for 96 hours at 1000 lux. After light exposure, chemical stability was monitored during storage at 37°C. Chemical stability was determined by measuring HMWP formation as described in assay (I) after storage at 37°C and 37°C +light; the results are presented in Table 5. The formation of hydrophobic impurities 1 and 2 was determined as described in analysis (II), after storage at 37°C and 37°C+light; the results are presented in Tables 6 and 7. An overview of the results of chemical stability, calculated as % increase per month, is given in Table 8. Physical stability, expressed using the thioflavin T (ThT) assay, was determined using the assay described herein (III) , and the results are presented in Table 9.
В соответствии с результатами из примера 1, эти результаты показывают, что химическая стабильность семаглутида улучшается, если гистидин присутствует в композиции как с воздействием света, так и без него. Улучшенную химическую стабильность в присутствии гистидина также наблюдают независимо от первичной упаковки (предварительно заполненный шприц или картридж).Consistent with the results from Example 1, these results show that the chemical stability of semaglutide is improved if histidine is present in the composition with or without exposure to light. Improved chemical stability in the presence of histidine is also observed regardless of the primary packaging (prefilled syringe or cartridge).
Что касается физической стабильности, представленные в таблице 9 результаты показывают, что более длительное время задержки получают для композиций с гистидином в присутствии 5,5 мг/мл фенола с воздействием света или без него, т.е. композиция физически более стабильна в присутствии гистидина.Regarding physical stability, the results presented in Table 9 show that longer retention times are obtained for histidine formulations in the presence of 5.5 mg/ml phenol with or without light exposure, i.e. the composition is physically more stable in the presence of histidine.
Таблица 5. Образование HMWP в композициях на основе семаглутида в данных условияхTable 5. Formation of HMWP in semaglutide-based compositions under these conditions
Таблица 6. Образование гидрофобных примесей 2 в композициях на основе семаглутида в данных условияхTable 6. Formation of hydrophobic impurities 2 in compositions based on semaglutide under these conditions
Таблица 7. Образование гидрофобных примесей 1 в композициях на основе семаглутида в данных условияхTable 7. Formation of hydrophobic impurities 1 in compositions based on semaglutide under these conditions
Таблица 8. Обзор химической стабильности в виде % увеличения в месяц для HMWP, гидрофобных примесей 1 и гидрофобных примесей 2Table 8. Summary of Chemical Stability as % Increase per Month for HMWP, Hydrophobic Impurities 1, and Hydrophobic Impurities 2
картридж)Primary packaging (PFS/
cartridge)
Таблица 9. Физическая стабильность композиций на основе семаглутида, выраженная с помощью анализа с тиофлавином Т (ThT). Более длительное время задержки соответствует лучшей физической стабильности.Table 9. Physical stability of semaglutide formulations expressed by thioflavin T (ThT) assay. Longer retention times correspond to better physical stability.
Результаты представляют собой среднее значение для 6 протестированных образцовResults are the average of 6 samples tested
Пример 3Example 3
В данном примере тестировали композиции, содержащие семаглутид. Тестируемые композиции содержали семаглутид (0,1, 0,5, 2,0, 5,0 и 10 мг/мл), пропиленгликоль (18,5 мг/мл), динатрия гидрофосфата дигидрат (1,42 мг/мл) и необязательно гистидин (5 и 10 мг/мл), как указано в таблице 10, при рН 7,4 в водном растворе. Композиции получали, как описано в разделе «Общие способы и определение характеристик», и композиции на основе семаглутида добавляли в предварительно заполненный шприц (PFS) с несъемной иглой (объем заполнения 0,5 мл). Заполненные шприцы хранили при 30°C в течение 3 месяцев и отслеживали химическую стабильность с течением времени. Химическую стабильность определяли путем измерения образования HMWP, как описано в анализе (I), после хранения при 30°C. Образование гидрофобных примесей 1 и 2 определяли, как описано в анализе (II), после хранения при 30°C. Результаты, рассчитанные как % увеличения в месяц, представлены в таблице 10.In this example, compositions containing semaglutide were tested. The compositions tested contained semaglutide (0.1, 0.5, 2.0, 5.0 and 10 mg/ml), propylene glycol (18.5 mg/ml), disodium hydrogen phosphate dihydrate (1.42 mg/ml) and optional histidine (5 and 10 mg/ml), as indicated in Table 10, at pH 7.4 in aqueous solution. The compositions were prepared as described in the General Methods and Characterization section, and the semaglutide compositions were added to a pre-filled syringe (PFS) with a fixed needle (fill volume 0.5 ml). Filled syringes were stored at 30°C for 3 months and chemical stability was monitored over time. Chemical stability was determined by measuring HMWP formation as described in assay (I) after storage at 30°C. The formation of hydrophobic impurities 1 and 2 was determined as described in analysis (II) after storage at 30°C. The results, calculated as % increase per month, are presented in Table 10.
Таблица 10. Обзор химической стабильности в виде % увеличения в месяц для HMWP, гидрофобных примесей 1 и 2 при хранении при 30°C.Table 10. Overview of chemical stability as % increase per month for HMWP, hydrophobic impurities 1 and 2 when stored at 30°C.
Результаты показывают, что химическая стабильность семаглутида улучшается, когда гистидин присутствует в композиции, независимо от количества семаглутида и независимо от количества гистидина. The results show that the chemical stability of semaglutide is improved when histidine is present in the composition, regardless of the amount of semaglutide and regardless of the amount of histidine.
Аналогичным образом, композиции, содержащие 0,5 мг/мл семаглутида, 18,5 мг/мл пропиленгликоля, 1,42 мг/мл динатрия гидрофосфата дигидрата с 10 мМ гистидина и без него в водном растворе при pH 7,4, хранили при 30°C в течение трех месяцев в предварительно заполненных шприцах от разных поставщиков. Результаты показали, что химическая стабильность семаглутида улучшалась независимо от того, какой шприц/поставщик использовался.Similarly, formulations containing 0.5 mg/ml semaglutide, 18.5 mg/ml propylene glycol, 1.42 mg/ml disodium hydrogen phosphate dihydrate with and without 10 mM histidine in aqueous solution at pH 7.4 were stored at 30 °C for three months in pre-filled syringes from different suppliers. The results showed that the chemical stability of semaglutide was improved regardless of which syringe/supplier was used.
Хотя определенные признаки настоящего изобретения были проиллюстрированы и описаны в данном документе, специалистам в данной области теперь станут очевидны многие модификации, замены, изменения и эквиваленты. Следовательно, следует понимать, что прилагаемая формула изобретения предназначена для охвата всех таких модификаций и изменений, которые находятся в пределах истинной сущности настоящего изобретения.While certain features of the present invention have been illustrated and described herein, many modifications, substitutions, alterations and equivalents will now become apparent to those skilled in the art. Accordingly, it is to be understood that the appended claims are intended to cover all such modifications and changes that fall within the true spirit of the present invention.
Claims (15)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP18202801.9 | 2018-10-26 | ||
| EP19158226.1 | 2019-02-20 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021113482A RU2021113482A (en) | 2022-11-15 |
| RU2803237C2 true RU2803237C2 (en) | 2023-09-11 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2122426C1 (en) * | 1991-12-20 | 1998-11-27 | Ново Нордиск А/С | Pharmaceutical preparation containing growth hormone or growth hormone derivative and histidine or histidine derivative, a preparation that is growth hormone crystals containing histidine or histidine derivative and a method of preparing growth hormone crystals and histidine or histidine derivative |
| WO2017186896A1 (en) * | 2016-04-28 | 2017-11-02 | Novo Nordisk A/S | Semaglutide in cardiovascular conditions |
| WO2018058109A1 (en) * | 2016-09-26 | 2018-03-29 | Nusirt Sciences, Inc. | Compositions and methods for treating metabolic disorders |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2122426C1 (en) * | 1991-12-20 | 1998-11-27 | Ново Нордиск А/С | Pharmaceutical preparation containing growth hormone or growth hormone derivative and histidine or histidine derivative, a preparation that is growth hormone crystals containing histidine or histidine derivative and a method of preparing growth hormone crystals and histidine or histidine derivative |
| WO2017186896A1 (en) * | 2016-04-28 | 2017-11-02 | Novo Nordisk A/S | Semaglutide in cardiovascular conditions |
| WO2018058109A1 (en) * | 2016-09-26 | 2018-03-29 | Nusirt Sciences, Inc. | Compositions and methods for treating metabolic disorders |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ГАЛСТЯН Г.Р. и др. Эволюция агонистов рецепторов глюкагоноподобного пептида-1 в терапии сахарного диабета 2 типа // Сахарный диабет. 2017;20(4):286-298. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102665710B1 (en) | GLP-1 composition and its uses | |
| JP7422754B2 (en) | Stable semaglutide compositions and uses thereof | |
| US11318191B2 (en) | GLP-1 compositions and uses thereof | |
| RU2803237C2 (en) | Stable compositions based on semaglutide and their use | |
| RU2777600C2 (en) | Glp-1-based compositions and their application methods | |
| AU2024204972A1 (en) | Stable semaglutide compositions and uses thereof | |
| TWI847306B (en) | Glp-1 compositions and uses thereof | |
| TW202417035A (en) | Tirzepatide compositions and use |