RU2800424C2 - Регуляторные элементы растений и их применение - Google Patents
Регуляторные элементы растений и их применение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2800424C2 RU2800424C2 RU2017145549A RU2017145549A RU2800424C2 RU 2800424 C2 RU2800424 C2 RU 2800424C2 RU 2017145549 A RU2017145549 A RU 2017145549A RU 2017145549 A RU2017145549 A RU 2017145549A RU 2800424 C2 RU2800424 C2 RU 2800424C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- exp
- ubq1
- seq
- sequence
- expression
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Изобретение относится к области биохимии, в частности к молекуле ДНК для инициации транскрипции гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Также раскрыты трансгенная клетка растений, содержащая указанную молекулу ДНК, трансгенное растение, содержащее указанную молекулу ДНК, часть трансгенного растения, содержащая указанную молекулу ДНК, трансгенное семя, содержащее указанную молекулу ДНК, пищевой продукт, полученный из указанного растения. Раскрыты способ получения товарного продукта из указанного растения и способ экспрессии транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Изобретение обеспечивает повышенную экспрессию гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. 8 н. и 9 з.п. ф-лы, 8 ил., 52 табл., 17 пр.
Description
ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[001] Данная заявка заявляет приоритет Предварительной заявки Соединенных штатов № 61/467875, поданной 25 марта 2011 года, которая включена в настоящее изобретение посредством ссылки в ее полном виде.
ВКЛЮЧЕНИЕ СПИСКА ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[002] Список последовательностей, который содержится в файле, названном "MONS282WO_seq.txt", который равен 347 килобайтам (как измерено в Microsoft Windows®) и создан 21 марта 2012 года, зарегистрирован в настоящем изобретении электронным представлением и включен в данное описание посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ДАННОЕ ИЗОБРЕТЕНИЕ
[003] Настоящее изобретение относится к области молекулярной биологии растений и генетической инженерии растений и ДНК-молекулам, применимым для модуляции экспрессии генов в растениях.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[004] Регуляторные элементы являются генетическими элементами, которые регулируют активность модуляции транскрипции функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Такие элементы включают в себя промоторы, лидеры, интроны и 3’-нетранслируемые районы и применимы в области молекулярной биологии растений и генетической инженерии растений.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[005] Настоящее изобретение обеспечивает новые регуляторные элементы генов для применения в растениях. Настоящее изобретение обеспечивает также ДНК-конструкты, содержащие эти регуляторные элементы. Настоящее изобретение обеспечивает также трансгенные клетки растений, растения и семена, содержащие эти регуляторные элементы. Эти последовательности могут быть функционально связаны с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой. В одном варианте осуществления, эта транскрибируемая полинуклеотидная молекула может быть гетерологичной относительно обеспеченной настоящим изобретением регуляторной последовательности. Таким образом, последовательность регуляторных элементов, обеспеченная настоящим изобретением, может быть, в конкретных вариантах осуществления, определена как функционально связанная с гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулой. Настоящее изобретение обеспечивает также способы изготовления и применения этих регуляторных элементов, ДНК-конструктов, содержащих эти регуляторные элементы, и трансгенных клеток растений, растений и семян, содержащих эти регуляторные элементы, функционально связанные с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой.
[006] Таким образом, в одном аспекте, это изобретение обеспечивает молекулу ДНК, содержащую последовательность ДНК, выбранную из группы, состоящей из: a) последовательности по меньшей мере с 85% идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183; b) последовательности, содержащей любую из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183; и c) фрагмент любой из последовательностей SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, где этот фрагмент имеет ген-регуляторную активность; где эта последовательность функционально связана с гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулой. В конкретных вариантах осуществления, эта молекула ДНК содержит по меньшей мере приблизительно 90-процентную, по меньшей мере приблизительно 95-процентную, по меньшей мере приблизительно 98-процентную или по меньшей мере приблизительно 99-процентную идентичность последовательности с последовательностью ДНК любой из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183. В некоторых вариантах этой молекулы ДНК, эта последовательность ДНК содержит регуляторный элемент. В некоторых вариантах осуществления этот регуляторный элемент содержит промотор. В конкретных вариантах осуществления, эта гетерологичная транскрибируемая полинуклеотидая молекула содержит представляющий агрономический интерес ген, такой как ген, способный обеспечивать устойчивость к гербицидам в растениях, или ген, способный обеспечивать устойчивость к вредителям в растениях.
[007] Настоящее изобретение обеспечивает также клетку трансгенного растения, содержащую гетерологичный ДНК-конструкт, обеспечиваемый изобретением, включающий в себя последовательность любой из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, или ее фрагмент или вариант, где указанная последовательность функционально связана с гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулой. В некоторых вариантах осуществления, эта клетка трансгенного растения является клеткой однодольного растения. В других вариантах осуществления, эта клетка трансгенного растения является клеткой однодольного растения.
[008] Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает трансгенное растение, или его часть, содержащие обеспеченную здесь ДНК-молекулу, включающую в себя последовательность ДНК, выбранную из группы, состоящей из: a) последовательности по меньшей мере с 85% идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183; b) последовательности, содержащей любую из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183; и c) фрагмент любой из последовательностей SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, где этот фрагмент имеет ген-регуляторную активность; где эта последовательность функционально связана с гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулой. В конкретных вариантах осуществления, это трансгенное растение может быть растением-потомком любой генерации, которое содержит молекулу ДНК, родственную с первоначальным трансгенным растением, содержащим эту молекулу ДНК. Кроме того, обеспечены трансгенные семена, содержащие молекулу ДНК настоящего изобретения.
[009] Еще в одном аспекте, настоящее изобретение обеспечивает способ получения товарного продукта, предусматривающий получение трансгенного растения или его части в соответствии с изобретением и получение из них товарного продукта. В одном варианте осуществления, товарным продуктом настоящего изобретения является концентрат белка, изолят белка, зерно, крахмал, семена, мучка, мука, биомасса или масло из семян растений. В другом аспекте, настоящее изобретение обеспечивает товарный продукт, обеспечиваемый вышеуказанным способом. Например, в одном варианте осуществления настоящего изобретения, изобретение обеспечивает товарный продукт, содержащий молекулу ДНК, обеспеченную здесь, включающую в себя последовательность ДНК, выбранную из группы, состоящей из: a) последовательности по меньшей мере с 85% идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183; b) последовательности, содержащей любую из SEQ ID NO: 1-158 и 180-183; и c) фрагмент любой из последовательностей SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, где этот фрагмент имеет ген-регуляторную активность; где эта последовательность функционально связана с гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулой.
[0010] Еще в одном аспекте, настоящее изобретение обеспечивает способ экспрессии транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, который предусматривает получение трансгенного растения в соответствии с настоящим изобретением, такого как растение, содержащее молекулу ДНК, представленную в настоящем описании, и культивирование растения, где в этой молекуле ДНК экспрессируется транскрибируемый полинуклеотид.
[0011] Должно быть понятно, что во всем этом описании и в формуле изобретения, если нет других указаний, слово "содержат" и его вариации, такие как "содержит" и "содержащий", должны пониматься как включение указанных композиции, стадии и/или величины или их групп, а не как исключение любых других композиции, стадии и/или величины или их групп.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
[0012] Фигуры 1a-1h изображают сопоставление вариантов размеров промоторов, соответствующих промоторным элементам, выделенным из вида травянистого растения Andropogon gerardii. В частности, фиг. 1а-1h показывают сопоставление промоторной последовательности 2603 п.н. P-ANDge.Ubq1-1:1:11 (SEQ ID NO: 2), обнаруженной в группе транскрипционного регуляторного элемента экспрессии EXP-ANDge.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 1), с промоторными последовательностями, полученными с использованием делеционного анализа P-ANDge.Ubql-1:1:11. Делеция, например, 5’-конца P-ANDge.Ubq1-l:l:11, продуцировала промотор P-ANDge.Ubq1-1:l:9 (SEQ ID NO: 6), последовательность 2114 п.н. которого была обнаружена в EXP-ANDge.Ubq1-:1:7 (SEQ ID NO: 5). Другие промоторные последовательности на фиг. 1 включают в себя P-ANDge.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 9), последовательность 1644 п.н. содержащуюся в EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8); P-ANDge.Ubq1-1:1:12 (SEQ ID NO: 11), последовательность 1472 п.н., содержащуюся в EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10); P-ANDge.Ubq1-1:1:8 (SEQ ID NO: 13), последовательность 1114 п.н., содержащуюся в EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12); P-ANDge.Ubq1-1:1:13 (SEQ ID NO: 15), последовательность 771 п.н., содержащуюся в EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14); и P-ANDge.Ubq1-1:1:14 (SEQ ID NO: 17), последовательность 482 п.н., содержащуюся в EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16).
[0013] Фигуры 2a-2g изображают сопоставление вариантов промоторов, выделенных из вида травянистого растения Saccharum ravennae (Erianthus ravennae). В частности, фигуры 2a-2g показывают сопоставление промоторной последовательности 2536 п.н. P-ERIra.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 19) (обнаруженной, например, в группе транскрипционного регуляторного элемента экспрессии, например, EXP-ERIra.Ubq1 (SEQ ID NO: 18)) с промоторными последовательностями, полученными из делеционного анализа P-ERIra.Ubq1-1:1:10; промоторной последовательностью 2014 п.н. P-ERIra.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 23); промоторной последовательностью 1525 п.н. P-ERIra.Ubq1-1:1:11 (SEQ ID NO: 26); промоторной последовательностью 1044 п.н. P-ERIra.Ubq1-1:1:8 (SEQ ID NO: 28); последовательностью 796 п.н. P-ERIra.Ubq1-1:1:12 (SEQ ID NO: 30); и последовательностью 511 п.н. P-ERIra.Ubq1-1:1:13 (SEQ ID NO: 32).
[0014] Фигуры 3a-3c изображают сопоставление вариантов размеров промоторов, соответствующих промоторным элементам, выделенным из вида травянистого растения Setaria viridis. В частности, фигуры 3a-3c показывают сопоставление промоторной последовательности 1493 п.н., P-Sv.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 34) с промоторами, полученными из делеционного анализа 5’-конца P-Sv.Ubq1-1:1:1; промотором с размером 1035 п.н. P-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 38); и промоторной последовательностью 681 п.н. P-Sv.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 40).
[0015] Фигуры 4a-4e изображают сопоставление вариантов групп транскрипционных регуляторных элементов экспрессии, полученных из подвида травянистого растения Zea mays subsp. mexicana. В частности, фигуры 4a-4e сравнивают группу транскрипционных регуляторных элементов экспрессии 2005 п.н., названную EXP-Zm.UbqM1:1:2 (SEQ ID NO: 49), с аллельным вариантом EXP-Zm.UbqM1:1:5 (SEQ ID NO: 53), а также с вариантами размеров EXP-Zm.UbqM1:1:1 (SEQ ID NO: 41), который имеет длину 1922 п.н., и EXP-Zm.UbqM1:1:4 (SEQ ID NO: 45), который имеет длину 1971 п.н.
[0016] Фигуры 5a-5b изображают сопоставление вариантов размеров промоторов, выделенных из травянистого растения Sorghum bicolor. В частности, фигуры 5a-5b показывают сопоставление промоторного элемента с размером 791 п.н., P-Sb.Ubq6-1:1:2 (SEQ ID NO: 60), содержащегося в группе транскрипционных регуляторных элементов экспрессии EXP-Sb.Ubq6 (SEQ ID NO: 59), с промоторным элементом 855 п.н. P-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO: 64), содержащимся в EXP-Sb.Ubq6:1:1 (SEQ ID NO: 63).
[0017] Фигуры 6a-6с изображают сопоставление вариантов размеров промоторов, выделенных из травянистого растения Setaria italica. В частности, Фигуры 6a-6c показывают сопоставление варианта промотора 1492 п.н. P-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 70) с вариантом промотора 1492 п.н. P-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 74), промоторным элементом 1034 п.н. P-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 76) и промоторным элементом 680 п.н. P-SETit.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 78).
[0018] Фигуры 7a-7b изображают варианты размеров промоторов и энхансерного элемента, соответствующего промоторным элементам, выделенным из вида травянистого растения Coix lachryma-jobi. В частности, фигуры 7a и 7b показывают сопоставление варианта промотора 837 п.н., P-Cl.Ubq1-1:1:l (SEQ ID NO: 80), обнаруженного в группе транскрипционных регуляторных элементов экспрессии EXP-Cl.Ubq1:1:1 (SEQ ID NO: 79), с энхансерным фрагментом, полученным из P-Cl.Ubq1-1:1:1, названным E-Cl.Ubq1: 1:1 (SEQ ID NO: 89), который имеет длину 798 п.н., а также с тремя 5’-концевыми делеционными вариантами P-Cl.Ubq1-1:1:1: элементом 742 п.н. P-Cl.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 84); элементом 401 п.н. P-Cl.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 86); и минимальным промоторным элементом 54 п.н. P-Cl.Ubq1-1:1:5 (SEQ ID NO: 88).
[0019] Фигура 8 изображает конфигурации трансгенных кассет настоящего изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[0020] SEQ ID NO: 1, 5, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 22, 25, 27, 29, 31, 33, 37, 39, 41, 45, 49, 53, 55, 59, 63, 65, 69, 73, 75, 77, 79, 83, 85, 87, 90, 93, 95, 97, 98, 99, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 115, 116, 117, 119, 121, 123, 124, 125, 126, 128, 130, 132, 133, 134, 136, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 180, 181 и 183 являются последовательностями групп транскрипционных регуляторных элементов экспрессии или EXP-последовательностями, содержащими промоторную последовательность, функционально связанную 5’ (слева) от лидерной последовательности, которая функционально связана 5’ (слева) от последовательности интрона.
[0021] SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135 являются промоторными последовательностями.
[0022] SEQ ID NO: 3, 20, 35, 43, 47, 51, 57, 61, 67, 71 и 81 являются лидерными последовательностями.
[0023] SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182 являются последовательностями интронов.
[0024] SEQ ID NO: 89 является последовательностью энхансера.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0025] Описанное изобретение обеспечивает полинуклеотидные молекулы, имеющие выгодную ген-регуляторную активность, полученные из растительных источников. Изобретение обеспечивает дизайн, конструирование и использование этих полинуклеотидных молекул. Нуклеотидные последовательности этих полинуклеотидных молекул обеспечены среди SEQ ID NO: 1-158 и 180-183. Эти полинуклеотидные молекулы способны, например, влиять на экспрессию функционально связанной транскрибируемой молекулы в тканях растений и, следовательно, регулировать экспрессию гена, или активность кодируемого геном продукта, в трансгенных растениях. Настоящее изобретение обеспечивает также способы их модификации, получения и применения. Настоящее изобретение обеспечивает также композиции, трансформированные клетки-хозяева, трансгенные растения и семена, содержащие эти промоторы, и/или другие описанные нуклеотидные последовательности и способы их получения и применения.
[0026] Следующие определения и способы обеспечены для лучшего определения настоящего изобретения и помощи специалистам с обычной квалификацией в данной области в применении на практике настоящего изобретения. Если нет других указаний, термины должны пониматься в соответствии с общепринятым применением их специалистами с обычной квалификацией в релевантной области.
Молекулы ДНК
[0027] В данном контексте, термин "ДНК" или "молекула ДНК" относится к двухцепочечной молекуле ДНК геномного или синтетического происхождения, т.е. к полимеру дезоксирибонуклеотидных оснований, или к молекуле полинуклеотида, считываемой от 5’ (левого) конца к 3’ (правому) концу. В данном контексте, термин "последовательность ДНК" относится к нуклеотидной последовательности молекулы ДНК. Используемая здесь номенклатура соответствует номенклатуре Title 37 of the United States Code of Federal Regulations § 1.822, и представлена в таблицах в WIPO Standard ST.25 (1998), Appendix 2, Tables 1 and 3.
[0028] В этом контексте, термин “выделенная молекула ДНК" относится к молекуле ДНК, по меньшей мере частично отделенной от других молекул, обычно ассоциированных с ней в ее нативном или природном состоянии. В одном варианте осуществления, термин "выделенная” молекула ДНК относится к молекуле ДНК, которая по меньшей мере частично отделена от некоторых нуклеиновых кислот, которые обычно фланкируют эту молекулу ДНК в ее нативном или природном состоянии. Таким образом, молекулы ДНК, слитые с регуляторными или кодирующими последовательностями, с которыми они обычно не ассоциированы, например, в результате рекомбинантных способов, считаются здесь выделенными. Такие молекулы считаются выделенными при интеграции в хромосому клетки-хозяина или при присутствии в растворе нуклеиновых кислот с другими молекулами ДНК, в том смысле, что они не находятся в их нативном состоянии.
[0029] Любое количество способов, хорошо известных квалифицированным в данной области специалистам, могут быть использованы для выделения и манипуляции молекулы ДНК, или ее фрагмента, описанных в настоящем изобретении. Например, технология ПЦР (полимеразной цепной реакции) может быть использована для амплификации конкретной исходной молекулы ДНК и/или получения вариантов этой первоначальной молекулы. Молекулы ДНК или их фрагмент могут быть также получены другими способами, такими как непосредственный синтез этого фрагмента химическим способом, как обычно практикуется с использованием автоматизированного синтезатора олигонуклеотидов.
[0030] В данном контексте, термин "идентичность последовательности" относится к степени, до которой являются идентичными две оптимально сопоставленные полинуклеотидные последовательности или две оптимально сопоставленные полипептидные последовательности. Оптимальное сопоставление последовательностей создается ручным сопоставлением двух последовательностей, например, ссылочной последовательности и другой последовательности, для максимизации количества нуклеотидных совпадений в этом сопоставлении последовательностей с подходящими внутренними нуклеотидными инсерциями, делециями или гэпами. В данном контексте, термин "ссылочная последовательность" относится к последовательности, обеспеченной в качестве полинуклеотидных последовательностей SEQ ID NO: 1-158 и 180-183.
[0031] В данном контексте, термин "процентная идентичность последовательности" или “процентная идентичность" или "%-ная идентичность" обозначает умножение полученной идентичности в виде дроби на 100. Эта "дробь идентичности" для последовательности, оптимально сопоставленной со ссылочной последовательностью, является числом совпадений нуклеотидов в оптимальном сопоставлении, деленным на общее число нуклеотидных совпадений в ссылочной последовательности, например, общее число нуклеотидов в полной длине всей ссылочной последовательности. Таким образом, одним вариантом настоящего изобретения является молекула ДНК, содержащая последовательность, которая при оптимальном сопоставлении со ссылочной последовательностью, обеспеченной в виде SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, имеет по меньшей мере приблизительно 85-процентную идентичность, по меньшей мере приблизительно 90-процентную идентичность, по меньшей мере приблизительно 95-процентную идентичность, по меньшей мере приблизительно 96-процентную идентичность, по меньшей мере приблизительно 97-процентную идентичность, по меньшей мере приблизительно 98-процентную идентичность или по меньшей мере приблизительно 99-процентную идентичность со ссылочной последовательностью. В конкретных вариантах такие последовательности могут быть определены как имеющие ген-регуляторную активность.
Регуляторные элементы
[0032] Одним регуляторным элементом является молекула ДНК, имеющая ген-регуляторную активность, т.е. молекула ДНК, которая имеет способность влиять на транскрипцию и/или трансляцию функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Таким образом, термин "ген-регуляторная активность” относится к способности влиять на характер экспрессии функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы влиянием на транскрипцию и/или трансляцию этой функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. В данном контексте, группа транскрипционных регуляторных элементов экспрессии или "EXP"-последовательность, может состоять из элементов экспрессии, таких как энхансеры, промоторы, лидеры и интроны, функционально связанные. Таким образом, группа элементов транскрипционной регуляторной экспрессии может состоять, например, из промотора, функционально связанного 5’ (слева) от лидерной последовательности, которая, в свою очередь, функционально связана 5’ (слева) от интронной последовательности. Эта интронная последовательность может содержать последовательность, начинающуюся в точке первой интрон/экзонной границы сплайсинга нативной последовательности, и может дополнительно состоять из малого лидерного фрагмента, содержащего вторую интрон/экзонную границу сплайсинга, чтобы обеспечить должный процессинг интрона/экзона для облегчения транскрипции и должный процессинг полученного транскрипта. Лидеры и интроны могут положительно влиять на транскрипцию функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, а также на трансляцию полученной транскрибируемой РНК. Эта пре-процессированная молекула РНК содержит лидеры и интроны, которые могут влиять на посттранскрипционный процессинг транскрибируемой РНК и/или экспорт этой молекулы транскрибируемой РНК из ядра клетки в цитоплазму. После посттранскрипционного процессинга этой транскрибируемой молекулы РНК, лидерная последовательность может удерживаться в виде части конечной мессенджер-РНК и может положительно влиять на трансляцию этой молекулы мессенджер-РНК.
[0033] Регуляторные элементы, такие как промоторы, лидеры, интроны и районы терминации транскрипции (или 3’-UTR) являются молекулами ДНК, которые имеют ген-регуляторную активность и играют интегральную (существенную) роль во всей экспрессии генов в живых клетках. Термин "регуляторный элемент" относится к молекуле ДНК, имеющей ген-регуляторную активность, т.е. она способна влиять на транскрипцию и/или трансляцию функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Поэтому, выделенные регуляторные элементы, такие как промоторы и лидеры, которые функционируют в растениях, применимы для модификации фенотипов растений посредством способов генетической инженерии.
[0034] Регуляторные элементы могут характеризоваться по их характеру (паттерну) действий на экспрессию (количественно и/или качественно), например, положительных или отрицательных действий и/или других действий, например, по их временному, пространственному, относящемуся к развитию, тканевому, относящемуся к окружающей среде, физиологическому, патологическому, относящемуся к клеточному циклу и/или химически реагировать характеру экспрессии, и любой их комбинации, а также по количественным или качественным показателям. Промотор применим в качестве регуляторного элемента для модификации экспрессии функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы.
[0035] В данном контексте, "паттерн экспрессии гена" является любым паттерном транскрипции функционально связанной молекулы ДНК в транскрибируемую молекулу РНК. Эта транскрибируемая молекула РНК может быть транслирована для получения молекулы белка или может обеспечивать антисмысловую или другую регуляторную молекулу РНК, такую как dsRNA, tRNA, rRNA, miRNA и т.п.
[0036] В данном контексте, термин "экспрессия белка" обозначает любой паттерн трансляции транскрибируемой молекулы РНК в молекулу белка. Экспрессия белка может характеризоваться по его временным, пространственным, относящимся к развитию или морфологическим качествам, а также по количественным или качественным показателям.
[0037] В данном контексте, термин "промотор" относится обычно к молекуле ДНК, которая участвует в узнавании и связывании РНК-полимеразой II или другими белками (транс-активирующими факторами транскрипции) для инициации транскрипции. Промотор может быть сначала выделенным из 5’-нетранслируемого района (5’-UTR) геномной копии гена. Альтернативно, промоторы могут быть полученными синтетически или подвергнутыми модуляции молекулами ДНК. Промоторы могут быть также химерными, т.е. промотором, полученным через слияние двух или более гетерологичных молекул ДНК. Промоторы, применимые в практике настоящего изобретения, включают в себя SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135, или их фрагменты или варианты. В конкретных вариантах осуществления изобретения, такие молекулы и их любые варианты или производные, описанные здесь, дополнительно определяются как содержащие промоторную активность, т.е. способные действовать в качестве промотора в клетке-хозяине, например, в трансгенном растении. В других конкретных вариантах осуществления, фрагмент может быть определен как проявляющий промоторную активность, которой обладала исходная молекула промотора, из которого он получен, или фрагмент может содержать "минимальный промотор", который обеспечивает фоновый уровень транскрипции и состоит из TATA-бокса или эквивалентной последовательности для узнавания и связывания комплекса РНК-полимеразы II для инициации транскрипции.
[0038] В одном варианте осуществления, обеспечены фрагменты описанной здесь промоторной последовательности. Фрагменты промотора могут иметь промоторную активность, как описано выше, и могут быть применимы по отдельности или в комбинации с другими промоторами и фрагментами промоторов, например, в конструировании химерных промоторов. В конкретных вариантах осуществления, обеспечены фрагменты промотора, содержащие по меньшей мере приблизительно 50, 95, 150, 250, 500, 750 или по меньшей мере приблизительно 1000 смежных нуклеотидов, или более длинные, полинуклеотидной молекулы, имеющей промоторную активность, описанную в данном документе.
[0039] Композиции, произведенные из любого из промоторов, представленных как SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135, такие как внутренние или 5’-делеции, например, могут быть получены с использованием способов, известных в данной области, для улучшения или изменения экспрессии, в том числе удалением элементов, которые имеют либо положительные, либо отрицательные действия на экспрессию; дупликацией элементов, которые имеют положительные или отрицательные действия на экспрессию; и/или дупликацией или удалением элементов, которые имеют тканеспецифические или клеткоспецифические действия на экспрессию. Композиции, произведенные из любого из промоторов, представленных как SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135, состоящих из 3’-делеций, в которых элемент ТАТА-бокс или его эквивалентная последовательность и последовательность слева удалены, могут быть использованы, например, для получения энхансерных элементов. Кроме того, делеции могут быть получены для удаления любых элементов, которые являются положительными или отрицательными; тканеспецифическими; клеткоспецифическими; или специфическими в отношении тайминга (но не ограничиваемые циркадным ритмом) действиями на экспрессии. Любой из промоторов, представленных как SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135, и фрагментов или энхансеров, произведенных из них, может быть использован для получения химерных композиций транскрибируемых регуляторных элементов, состоящих из любого из промоторов, представленных как SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135, и произведенных из них фрагментов или энхансеров, функционально связанных с другими энхансерами и промоторами. Эффективность этих модификаций, дупликаций или делеций, описанных здесь, на желаемых аспектах экспрессии конкретного трансгена могут быть тестированы эмпирически в стабильных и транзиторных анализах растений, таких как анализы, описанные в рабочих примерах здесь, для валидизации результатов, которые могут варьироваться в зависимости от произведенных изменений и цели этого изменения в исходной молекуле.
[0040] В данном контексте, термин "лидер" относится к молекуле ДНК, выделенной из нетранслированного 5’-района (5’-UTR) геномной копии гена, и определяется обычно как нуклеотидный сегмент между стартовым сайтом транскрипции (TSS) и стартовым сайтом кодирующей белок последовательности. Альтернативно, лидеры могут быть получены синтетически или манипуляцией элементами ДНК. Молекулы лидера могут быть использованы для модуляции экспрессии функциональной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Молекулы лидера могут быть использованы с гетерологичным промотором или с их природным промотором. Таким образом, промоторные молекулы настоящего изобретения могут быть функционально связаны с их природным лидером или могут быть функционально связаны с гетерологичным лидером. Лидеры, применимые в практике настоящего изобретения, включают в себя SEQ ID NO: 3, 20, 35, 43, 47, 51, 57, 61, 67, 71 и 81 или их фрагменты или варианты. В конкретных вариантах осуществления, могут быть обеспечены такие последовательности, определяемые как последовательности, способные действовать в качестве лидера в клетке-хозяине, в том числе, например, трансгенной клетке растения. В одном варианте осуществления, такие последовательности декодируются как содержащие лидерную активность.
[0041] Эти лидерные последовательности (5’-UTR), представленные как SEQ ID NO: 3, 20, 35, 43, 47, 51, 57, 61, 67, 71 и 81, могут состоять из регуляторных элементов или могут принимать вторичные структуры, которые могут влиять на транскрипцию или трансляцию трансгена. Лидерные последовательности, представленные как SEQ ID NO: 3, 20, 35, 43, 47, 51, 57, 61, 67, 71 и 81, могут быть использованы в соответствии с данным изобретением для получения химерных регуляторных элементов, которые влияют на транскрипцию или трансляцию трансгена. Кроме того, лидерные последовательности, представленные как SEQ ID NO: 3, 20, 35, 43, 47, 51, 57, 61, 67, 71 и 81, могут быть использованы для получения химерных лидерных последовательностей, которые влияют на транскрипцию или трансляцию трансгена.
[0042] Введение чужеродного гена в новое растение-хозяин не всегда приводит к высокой экспрессии получаемого гена. Кроме того, при рассмотрении комплексных признаков, иногда необходимо модулировать несколько генов, с пространственно или транзиторно отличающимися паттернами (характерами) экспрессии. Такую модуляцию могут обеспечивать в основном интроны. Однако показано, что множественное применение одного и того же интрона обнаруживает недостатки. В этих случаях, необходимо иметь коллекцию интронов, известную в данной области, с усиливающими экспрессию свойствами. Поскольку доступная коллекция интронов, известная в данной области, с усиливающими экспрессию свойствами, является ограниченной, необходимы альтернативы.
[0043] Композиции, произведенные из любых из интронов, представленных как SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182, могут состоять из внутренних делеций или дупликаций цис-регуляторных элементов; и/или изменений 5’- и 3’-последовательностей, содержащих границы сплайсинга интрон/экзон, могут быть использованы для улучшения экспрессии или специфичности экспрессии при функциональном связывании с промотором + лидером или химерным промотором + лидером и кодирующей последовательностью. Изменения 5’- и 3’-районов, содержащих границу сплайсинга интрон/экзон, могут быть также произведены для уменьшения потенциала для введения фальстарта и стоп-кодонов, продуцирующихся в полученном транскрипте, после процессинга и сплайсинга этой мессенджер-РНК. Эти интроны могут быть тестированы эмпирически, как описано в рабочих примерах, для определения действия интрона на экспрессию трансгена.
[0044] В соответствии с изобретением, промотор или фрагмент промотора могут быть анализированы на присутствие известных промоторных элементов, т.е. такие характеристики последовательности ДНК, как ТАТА-бокс и другие известные мотивы сайта связывания факторов транскрипции. Идентификация таких известных промоторных элементов может быть использована квалифицированным в данной области специалистом для конструирования вариантов промотора, имеющих сходный паттерн (характер) экспрессии с исходным промотором.
[0045] В данном контексте, термин "энхансер" или "энхансерный элемент" относится к цис-действующему транскрипционному регуляторному элементу, a.k.a. цис-элементу, который придает аспект общего паттерна экспрессии, но обычно является недостаточным в отдельности для управления транскрипцией, функционально связанной полинуклеотидной последовательности. В отличие от промоторов, энхансерные элементы обычно не включают в себя стартовый сайт транскрипции (TSS) или TATA-бокс или эквивалентную последовательность. Промотор может природно содержать один или несколько энхансерных элементов, которые влияют на транскрипцию функционально связанной полинуклеотидной последовательности. Выделенный энхансерный элемент может быть также слит с промотором для продуцирования химерного промоторного цис-элемента, который придает аспект общей модуляции транскрипци гена. Промотор или фрагмент промотора может содержать один или несколько энхансерных элементов, которые влияют на транскрипцию функционально связанных генов. Считается, что многие энхансерные элементы промотора связывают ДНК-связывающие белки и/или влияют на топологию ДНК, производя локальные конформации, которые селективно позволяют или ограничивают доступ РНК-полимеразы к ДНК-матрице или, которые облегчают селективное открывание двойной спирали в сайте инициации транскрипции. Некоторые энхансерные элементы связывают более одного фактора транскрипции, и факторы транскрипции могут взаимодействовать с различными аффинностями с более чем одним энхансерным доменом. Энхансерные элементы могут быть идентифицированы рядом способов, включающих в себя делеционный анализ, т.е. делеции одного или нескольких нуклеотидов из 5’-конца или внутренних относительно промотора; анализ ДНК-связывающего белка с использованием футпринтинга с ДНКазой I, интерференцию метилирования, анализы смещения мобильности в электрофорезе, in vivo геномный футпринтинг с использованием опосредованной лигированием ПЦР и другие общепринятые анализы; или анализ сходства последовательности ДНК с использованием известных мотивов цис-элементов или энхансерных элементов в качестве последовательности-мишени или мотива-мишени с общепринятыми способами сравнения последовательностей ДНК, такими как BLAST. Тонкая структура энхансерного домена может быть дополнительно исследована мутагенезом (или заменой) одного или нескольких нуклеотидов или другими общепринятыми способами. Энхансерные элементы могут быть получены химическим синтезом или выделением из регуляторных элементов, которые включают в себя такие элементы, и они могут быть синтезированы с дополнительными фланкирующими нуклеотидами, которые содержат применимые сайты рестрикционных ферментов для облегчения манипуляции субпоследовательности. Таким образом, дизайн, конструирование и применение энхансерных элементов в соответствии со способами, описанными здесь, для модуляции экспрессии функционально связанных полинуклеотидных молекул включены в настоящее изобретение.
[0046] В растениях, включение некоторых интронов в генные конструкты приводит к увеличенному накапливанию мРНК и белка относительно конструктов, лишенных этого интрона.
[0047] Этот эффект был назван "опосредуемым интроном усилением" (IME) экспрессии генов (Mascarenhas et al., (1990) Plant Mol. Biol. 15:913-920). Интроны, о которых известно, что они стимулируют экспрессию в растениях, были идентифицированы в генах кукурузы {например, tubA1, Adh1, Shi, Ubi1 (Jeon et al. (2000) Plant Physiol. 123: 1005-1014; Callis et al. (1987) Genes Dev. 1:1183-1200; Vasil et al. (1989) Plant Physiol. 91:1575-1579; Christiansen et al. (1992) Plant Mol. Biol. 18:675-689) и генах риса (e.g. salt, tpi: McElroy et al., Plant Cell 2:163-171 (1990); Xu et al., Plant Physiol. 106:459-467 (1994)). Подобным образом, было обнаружено, что интроны из генов двудольных растений, такие как интроны из петунии (например, rbcS), картофеля (например, st-ls1) и из Arabidopsis thaliana (например, ubq3 и pat1) повышают скорости экспрессии генов (Dean et al. (1989) Plant Cell 1:201-208; Leon et al. (1991) Plant Physiol. 95:968-972; Norris et al. (1993) Plant Mol Biol 21:895-906; Rose and Last (1997) Plant J.11:455-464). Было показано, что сплайсинг может быть необходимым для некоторых IME (Mascarenhas et al. (1990) Plant Mol Biol. 15:913-920; Clancy and Hannah (2002) Plant Physiol. 130:918-929). Однако было показано с использованием точковых мутаций в сайтах сплайсинга гена pat1 из A. thaliana, что сплайсинг сам по себе, не является необходимым для некоторых IME в двудольных растениях (Rose and Beliakoff (2000) Plant Physiol. 122:535-542).
[0048] Усиление экспрессии генов интронами не является общим феноменом, так как некоторые инсерции интронов в рекомбинантные экспрессионные кассеты не усиливали экспрессию (например, интроны из генов двудольных растений (гена rbcS из гороха, гена фазеолина из фасоли и гена stls-1 из Solarium tuberosum) и интроны из генов кукурузы (гена adh1 девятого интрона, гена hsp81 первого интрона)) (Chee et al. (1986) Gene 41:47-57; Kuhlemeier et al. (1988) Mol Gen Genet 212:405-411; Mascarenhas et al. (1990) Plant Mol. Biol. 15:913-920; Sinibaldi and Mettler (1992) В WE Cohn, K Moldave, eds, Progress in Nucleic Acid Research and Molecular Biology, Vol 42. Academic Press, New York, pp 229-257; Vancanneyt et al. 1990 Mol. Gen. Genet. 220:245-250). Таким образом, не каждый интрон может быть использован для манипуляции уровня экспрессии неэндогенных генов или эндогенных генов в трансгенных растениях. В известном уровне техники невозможно предсказать, какие характеристики или признаки конкретных последовательностей должны присутствовать в интронной последовательности для усиления экспрессии конкретного гена и, следовательно, на основании известного уровня техники невозможно предсказать, будет ли конкретный интрон растения, при использовании в качестве гетерологичного гена, вызывать усиление экспрессии на уровне ДНК или на уровне транскрипта (IME).
[0049] В данном контексте, термин "химерная" относится к единой молекуле ДНК, произведенной слиянием первой молекулы ДНК со второй молекулой ДНК, где ни первая молекула ДНК, ни вторая молекула ДНК в норме не обнаруживается в этой конфигурации, т.е. слитыми друг с другом. Таким образом, эта химерная молекула ДНК является новой молекулой ДНК, в противном случае не обнаруживаемой в природе. В данном контексте, термин "химерный промотор" относится к промотору, произведенному посредством такой манипуляции молекул ДНК. Химерный промотор может объединять два или более фрагментов ДНК; одним примером может быть слияние промотора с энхансерным элементом. Таким образом, дизайн, конструирование и применение функционально связанных транскрибируемых полинуклеотидных молекул включено в настоящее изобретение.
[0050] В данном контексте, термин "вариант" относится ко второй молекуле ДНК, которая находится в композиции, сходной, но не идентичной первой молекуле ДНК, и эта вторая молекула ДНК все еще сохраняет общую функциональность, т.е. тот же самый или сходный паттерн (характер) экспрессии первой молекулы ДНК. Вариант может быть более короткой или усеченной версией последовательности первой молекулы ДНК, и/или измененной версией последовательности первой молекулы ДНК, например, молекулой ДНК, такой как молекула ДНК, с отличающимися сайтами рестрикционных ферментов (рестриктаз) и/или внутренними делециями, заменами и/или инсерциями. "Вариант" может также включать в себя регуляторный элемент, имеющий нуклеотидную последовательность, содержащую замену, делецию и/или инсерцию одного или нескольких нуклеотидов ссылочной последовательности, где этот произведенный регуляторный элемент имеет большую или меньшую или эквивалентную транскрипционную или трансляционную активность, чем соответствующая исходная регуляторная молекула. "Варианты" регуляторного элемента будут также включать в себя варианты, возникающие из мутаций, которые встречаются в природе в трансформации бактериальных клеток и клетках растений. В настоящем изобретении, полинуклеотидная последовательность, обеспеченная как SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, может быть использована для создания вариантов, которые являются по составу сходными, но не идентичными полинуклеотидной последовательности первоначального регуляторного элемента, хотя еще могут сохранять общую функциональность, т.е. тот же самый или сходный паттерн (характер) экспрессии, первоначального регуляторного элемента. Получение таких вариантов настоящего изобретения находится вполне в рамках обычной квалификации в данной области в свете этого описания и включено в объем настоящего изобретения. “Варианты” химерного регуляторного элемента включают в себя те же самые составляющие элементы, что и ссылочная последовательность, но эти составляющие элементы, содержащие химерный регуляторный элемент, могут быть функционально связаны различными способами, известными в данной области, такими как расщепление рестрикционными ферментами и лигирование, независимое от лигирования клонирование, модулярная сборка ПЦР-продуктов во время амплификации или прямой химический синтез регуляторного элемента, а также другие способы, известные в данной области. Полученный “вариант” химерного регуляторного элемента может состоять из тех же самых, или вариантов тех же самых, составляющих элементов ссылочной последовательности, но отличается по последовательности и/или последовательностям, которые содержат связывающую последовательность или последовательности, которые позволяют составляющим частям функционально связываться. В настоящем изобретении, полинуклеотидные последовательности, представленные как SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, обеспечивают ссылочную последовательность, где составляющие элементы, которые содержат эту ссылочную последовательность, могут быть соединены способами, известными в данной области, и могут содержать замены, делеции и/или инсерции одного или нескольких нуклеотидов или мутаций, которые встречаются в природе в трансформации бактериальных клеток и клеток растений.
Конструкты
[0051] В данном контексте, термин "конструкт" обозначает любую рекомбинантую полинуклеотидную молекулу, такую как полимераза, космида, вирус, автономно реплицирующуюся полинуклеотидную молекулу, фаг или линейную или кольцевую одноцепочечную или двухцепочечную молекулу ДНК или РНК, полученную из любого источника, способную к геномной интеграции или автономной репликации, содержащей полинуклеотидную молекулу, где одна или несколько полинуклеотидных молекул были связаны функционально действующим образом, т.е. функционально связаны. В данном контексте, термин "вектор" обозначает любой рекомбинантный полинуклеотидный конструкт, который может быть использован для целей трансформации, т.е. введения гетерологичной ДНК в клетку-хозяина. Этот термин включает в себя экспрессионные кассеты, выделенные из любой из вышеуказанных молекул.
[0052] В данном контексте, термин "функционально связанные" относится к первой молекуле, соединенной со второй молекулой, где эти молекулы помещены таким образом, что эта первая молекула влияет на функцию этой второй молекулы. Эти две молекулы могут быть или могут не быть частью единой смежной молекулы и могут быть или могут не быть смежными. Например, промотор функционально связан с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой, если этот промотор модулирует транскрипцию этой, представляющей интерес, транскрибируемой полинуклеотидной молекулы в клетке. Лидер, например, функционально связан с кодирующей последовательностью, когда он может служить в качестве лидера для полипептида, кодируемого этой кодирующей последовательностью.
[0053] Конструкты настоящего изобретения могут быть обеспечены, в одном варианте осуществления, в виде двойных конструктов Ti плазмида-граничная ДНК, которые имеют районы правой границы (RB или AGRtu.RB) и левой границы (LB или AGRtu.LB) Ti-плазмиды, выделенные из Agrobacterium tumefaciens, содержащие T-ДНК, которые вместе с транспортными молекулами, обеспечиваемыми клетками A. tumefaciens, позволяют интеграцию этой Т-ДНК в геном клетки растения {см., например, Патент США 6603061). Эти конструкты могут также содержать сегменты ДНК скелета плазмиды, которые обеспечивают функцию репликации и селекции с использованием антибиотика в бактериальных клетках, например, сайт инициации репликации Escherichia coli, точка начала репликации, такая как ori322, широкий набор точек репликации, такой как oriV или oriRi, и кодирующий район для селектируемого маркера, такого как Spec/Strp, который кодирует Tn7-аминогликозидаденилтрансферазу (aadA), придающую устойчивость к спектиномицину или стрептомицину, или селектируемый с использованием гентамицина (Gm, Gent) маркерный ген. Для трансформации растений, бактериальным штаммом-хозяином является часто A. tumefaciens ABI, C58 или LBA4404; однако, и другие штаммы, известные специалистам в области трансформации растений, могут функционировать в данном изобретении.
[0054] В данной области известны способы для сборки и введения конструктов в клетку таким образом, что транскрибируемая полинуклеотидная молекула транскрибируется в функциональную молекулу мРНК, которая транслируется и экспрессируется в виде белкового продукта. Для применения на практике настоящего изобретения, общепринятые композиции и способы получения и использования конструктов и клеток-хозяев, хорошо известны квалифицированному в данной области специалисту, см., например, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd edition Volumes 1, 2, and 3 (2000) J. Sambrook, D.W. Russell, and N. Irwin, Cold Spring Harbor Laboratory Press. Способы для получения рекомбинантных векторов, особенно подходящих для трансформации растений, включают в себя, без ограничения, способы, описанные в Патентах США № 4971908; 4940835; 4769061 и 4757011 в их полном виде. Эти типы векторов были описаны в виде обзоров в научной литературе {см., например, Rodriguez, et al., Vectors: A Survey of Molecular Cloning Vectors and Their Uses, Butterworths, Boston, (1988) and Glick, et al., Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology, CRC Press, Boca Raton, FL. (1993)). Типичные векторы, применимые для экспрессии нуклеиновых кислот в высших растениях, хорошо известны в данной области и включают в себя векторы, произведенные из индуцирующей опухоли (Ti) плазмиды Agrobacterium tumefaciens (Rogers, et al., Methods in Enzymology 153: 253-277 (1987)). Другие рекомбинантные векторы, применимые для трансформации растений, включающие в себя транспортный контрольный вектор pCaMVCN, были также описаны в научной литературе (см., например, Fromm, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 5824-5828 (1985)).
[0055] Различные регуляторные элементы могут быть включены в конструкт, включающие в себя любые предусмотренные в данном описании. Любые такие регуляторные элементы могут быть обеспечены в комбинации с другими регуляторными элементами. Такие комбинации могут быть сконструированы или модифицированы для получения желаемых регуляторных признаков. В одном варианте осуществления, конструкты настоящего изобретения содержат по меньшей мере один регуляторный элемент, функционально связанный с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой, функционально связанной с 3’-UTR.
[0056] Конструкты настоящего изобретения могут включать в себя любой промотор или лидер, обеспеченный здесь или известный в данной области. Например, промотор настоящего изобретения может быть функционально связан с гетерологичным нетранслируемым 5’-лидером, таким как лидер, произведенный из гена белка теплового шока (см., например, Патенты США с номерами 5659122 и 5362865). Альтернативно, лидер настоящего изобретения может быть функционально связан с гетерологичным промотором, таким как промотор транскрипта 35S вируса мозаики цветной капусты (cм. Патент США № 5352605).
[0057] В данном контексте, термин "интрон" относится к молекуле ДНК, которая может быть выделена или идентифицирована из геномной копии гена и может быть определена в общем как район, сплайсированный наружу во время процессинга мРНК перед трансляцией. Альтернативно, интрон может быть полученным синтетически или манипулированным элементом ДНК. Интрон может содержать энхансерные элементы, которые влияют на транскрипцию функционально связанных генов. Интрон может быть использован в качестве регуляторного элемента для модуляции экспрессии функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Конструкт ДНК может содержать интрон, и этот интрон может быть или может не быть гетерологичным относительно последовательности транскрибируемой полинуклеотидной молекулы. Примеры интронов в данной области включают в себя интрон актина риса (Патент США № 5641876) и интрон HSP70 кукурузы (Патент США № 5859347). Интроны, применимые в практике настоящего изобретения, включают в себя SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182. Далее, при модификации интрон/экзонного сочленения, может быть предпочтительным избежание использования нуклеотидной последовательности АТ или нуклеотида А непосредственно перед 5’-концом сайта сплайсинга (GT) и нуклеотида G или нуклеотидной последовательности TG, соответственно, непосредственно после 3’-конца сайта сплайсинга (AG) для элиминирования потенциала нежелательных стартовых кодонов от образования во время процессинга этой мессенджер-РНК в конечном транскрипте. Последовательность около 5’- или 3’- концевых сайтов границ сплайсинга этого интрона может быть модифицирована таким образом.
[0058] В данном контексте, термин "3’-молекула терминации транскрипции" или "3’-UTR" относится к молекуле ДНК, которая используется во время транскрипции для продуцирования 3’-нетранслируемого района (3’-UTR) молекулы мРНК. 3’-нетранслируемый район молекулы мРНК может быть генерирован специфическим расщеплением и 3’-полиаденилированием, a.k.a. с использованием полиА-хвоста. 3’-UTR может быть функционально связан и помещен справа от транскрибируемой полинуклеотидной молекулы и может включать в себя полинуклеотиды, которые обеспечивают сигнал полиаденилирования и другие регуляторные сигналы, способные влиять на транскрипцию, процессинг мРНК или экспрессию гена. Предполагается, что полиА-хвосты функционируют в стабильности мРНК и в инициации трансляции. Примерами 3’-молекул терминации транскрипции в данной области являются 3’-район нопалинсинтазы {см. Fraley, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 80: 4803-4807 (1983)); 3’-район hspl7 пшеницы; 3’-район малой субъединицы rubisco (рибулозобисфосфаткарбоксилазы) гороха; 3’-район E6 хлопчатника (Патент США № 6096950); 3’-районы, описанные в WO0011200A2; и 3’-UTR соиксина (Патент США № 6635806).
[0059] 3-UTR обычно находят полезное использование для рекомбинантной экспрессии конкретных генов. В системах животных, аппарат 3’-UTR был хорошо определен (например, Zhao et al., Microbiol Mol Biol Rev 63:405-445 (1999); Proudfoot, Nature 322:562-565 (1986); Kim et al., Biotechnology Progress 19: 1620-1622 (2003); Yonaha and Proudfoot, EMBO J. 19:3770-3777 (2000); Cramer et al, FEBS Letters 498: 179-182 (2001); Kuerstem and Goodwin, Nature Reviews Genetics 4:626-637 (2003)). Эффективная терминация транскриптов РНК является необходимой для предотвращения нежелательной транскрипции несвязанных с признаком (расположенных слева) последовательностей, которые могут интерферировать с генерированием признака. Аранжировка кассет экспрессии множественных генов в локальной близости друг с другом (например, в одной Т-ДНК) может вызывать супрессию экспрессии гена из одного или нескольких генов в указанном конструкте в сравнении с независимыми инсертами. (Padidam and Cao, BioTechniques 31:328-334 (2001). Это может мешать достижению адекватных уровней экспрессии, например, в случаях, когда была желательной сильная экспрессия генов из всех кассет.
[0060] В растениях неизвестны явно определенные последовательности сигнала полиаденилирования. Hasegawa et al., Plant J. 33: 1063-1072, (2003)) не смогли идентифицировать консервативные последовательности сигнала полиаденилирования в системах как in vitro, так и in vivo в Nicotiana sylvestris и определить фактическую длину первичного (не-полиаденилированного) транскрипта. Слабый 3’-UTR имеет потенциал генерирования сквозного прочитывания, который может влиять на экспрессию генов, локализованных в соседних экспрессионных кассетах (Padidam and Cao, BioTechniques 31:328-334 (2001)). Подходящий контроль терминации транскрипции может предотвращать сквозное прочитывание в последовательности {например, другие экспрессионные кассеты), локализованные справа, и может дополнительно позволять эффективный рециклинг РНК-полимеразы для улучшения экспрессии гена. Эффективная терминация транскрипции (высвобождение РНК-полимеразы II из этой ДНК) является предпосылкой для повторной ре-инициации транскрипции и посредством этого непосредственно влияет на общий уровень транскриптов. После терминации транскрипции, зрелая мРНК высвобождается из сайта синтеза и матрицы в цитоплазму. Эукариотические мРНК накапливаются в виде poly(A)-форм in vivo, так что трудно детектировать сайты терминации транскрипции общепринятыми способами. Однако предсказание функциональных и эффективных 3’-UTR способов биоинформатики является трудным в том смысле, что не имеются консервативные последовательности, которые могли бы позволить легкое предсказание эффективных 3’-UTR.
[0061] С практической точки зрения, обычно является полезным, чтобы 3’-UTR, используемый в кассете трансгена, имел следующие характеристики. 3’-UTR должен быть способен продуктивно и эффективно терминировать транскрипцию трансгена и предотвращать сквозное прочитывание транскрипта в любую соседнюю последовательность ДНК, которая может состоять из другой кассеты трансгена, как в случае множественных кассет, находящихся в одной Т-ДНК, или в соседнюю хромосомную ДНК, в которую была инсертирована эта Т-ДНК. 3-UTR не должен вызывать уменьшения в транскрипционной активности, придаваемой промотором, лидером и интронами, которые используются для запуска экспрессии этого трансгена. В биотехнологии растений, 3’-UTR часто используется для праймирования реакций амплификации обратно транскрибируемой РНК, экстрагируемой из трансформированного растения и используемой для (1) оценивания транскрипционной активности или экспрессии трансгенной кассеты после интегрирования в хромосому растения; (2) оценивания числа копий инсерций в ДНК растения и (3) оценивания зиготности полученных семян после скрещивания. 3’-UTR используется также в реакциях амплификации ДНК, экстрагированной из трансформированного растения для характеристики интактности этой инсертированной кассеты.
[0062] 3-UTR, применимые в обеспечении экспрессии трансгена в растениях, могут быть идентифицированы на основе экспрессии маркеров экспрессирующейся последовательности (EST) в кДНК-библиотеках, созданных из мессенджер-РНК, выделенной из семян, цветков и других тканей, полученных из бородача большого (Andropogon gerardii), эриантуса (Saccharum ravennae (Erianthus ravennae)), щетинника зеленого (Setaria viridis), теосинте (Zea mays subsp. mexicana), проса итальянского (Setaria italica) или коикса (Coix lacryma-jobi). Библиотеки кДНК готовят из тканей, выделенных из выбранных видов растений с использованием способов, известных специалистам, квалифицированным в данной области, из ткани цветков, семян, листа и корня. Полученные кДНК секвенируют с использованием различных способов секвенирования, известных в данной области. Полученные EST собирают в кластеры с использованием программного обеспечения биоинформатики, такого как clc_ref_assemble_complete version 2.01.37139 (CLC bio USA, Cambridge, Massachusetts 02142). Число копий транскриптов каждого кластера определяют подсчетом числа считываний кДНК для каждого кластера. Идентифицированные 3’-UTR могут состоять из последовательности, произведенной из последовательности кДНК, а также последовательности, произведенной из геномной ДНК. Эту последовательность кДНК используют для создания праймеров, которые затем используют с библиотеками GenomeWalker™ (Clontech Laboratories, Inc, Mountain View, CA), сконструированными согласно протоколу производителя, для клонирования 3’-района соответствующей геномной последовательности ДНК для обеспечения более длинной последовательности терминации. Анализ относительного числа копий транскрипта либо непосредственным подсчетом, либо нормализованным подсчетом считываний наблюдаемой последовательности для библиотеки каждой ткани может быть использован для заключения о свойствах относительно паттернов экспрессии. Например, некоторые 3’-UTR могут быть обнаружены в высоком числе копий в транскриптах, наблюдаемых в высоком числе копий в ткани корня в сравнении с листом. Это предполагает, что этот транскрипт высоко экспрессируется в корне и что свойства экспрессии в корне могут быть отнесены к транскрипционной регуляции промотора, лидера, интронов или 3’-UTR. Эмпирическое тестирование 3-UTR, идентифицированного свойствами экспрессии в конкретных типах органов, тканей или клеток, может приводить к идентификации 3’-UTR, которые усиливают экспрессию в этих конкретных типах органов, тканей или клеток.
[0063] Конструкты и векторы могут также включать в себя кодирующую транзитный пептид последовательность, которая экспрессирует связанный пептид, который применим для нацеливания белкового продукта, в частности, в хлоропласт, лейкопласт или другую пластидную органеллу; митохондрии; пероксисому; вакуоль или внеклеточное местоположение. В отношении описания применения хлоропластных транзитных пептидов, см. Патент США № 5188642 и Патент США № 5728925. Многие локализованные в хлоропластах белки экспрессируются из ядерных генов в виде предшественников и нацеливаются на хлоропласт хлоропластным транзитным пептидом (СТР). Примеры таких выделенных хлоропластных белков включают в себя, но не ограничиваются ими, белки, ассоциированные с малой субъединицей (SSU) рибулозо-1,5-бисфосфаткарбоксилазы, ферредоксином, ферредоксин-оксидоредуктазой, белком I и белком II светособирающего комплекса, тиоредоксином F, енолпирувилшикимат-фосфатсинтазой (EPSPS) и транзитными пептидами, описанными в Патенте США № 7193133. Было продемонстрировано in vivo и in vitro, что нехлоропластные белки могут быть нацелены в хлоропласт с использованием слитых белков с гетерологичным CTP, и что этот CTP является достаточным для нацеливания белка в хлоропласт. Было показано, что включение подходящего хлоропластного транзитного пептида, такого как EPSPS CTP (CTP2) Arabidopsis thaliana {См., Klee et al, Mol. Gen. Genet. 210:437-442 (1987)) или EPSPS CTP (CTP4) Petunia hybrida) {См., della-Cioppa et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:6873-6877 (1986)), нацеливает гетерологичные последовательности белка EPSPS в хлоропласты в трансгенных растениях {См., Патенты США с номерами 5627061; 5633435 и 5312910 и EP 0218571; EP 189707; EP 508909 и EP 924299).
Транскрибируемые полинуклеотидные молекулы
[0064] В данном контексте, термин "транскрибируемая полинуклеотидная молекула" относится к любой молекуле ДНК, способной транскрибироваться в молекулу РНК, включающей в себя, но не ограничивающейся ими, молекулы, имеющие кодирующие белок последовательности, и продуцирующие РНК молекулы, имеющие последовательности, применимые для супрессии генов. "Трансген" относится к транскрибируемой полинуклеотидной молекуле, гетерологичной в отношении клетки-хозяина по меньшей мере в отношении ее местоположения в геноме, и/или транскрибируемой полинуклеотидной молекуле, искусственно включенной в геном клетки-хозяина в существующей или любой предыдущей генерации этой клетки.
[0065] Промотор настоящего изобретения может быть функционально связан с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой, которая является гетерологичной в отношении молекулы этого промотора. В данном контексте, термин "гетерологичный" относится к комбинации двух или более полинуклеотидных молекул, когда такая комбинация не обнаруживается обычно в природе. Например, эти две молекулы могут быть произведены из разных видов и/или эти две молекулы могут быть произведены из разных генов, например, разных генов из одного и того же вида, или одних и тех же генов из разных видов. Таким образом, промотор является гетерологичным в отношении функционально связанной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, если такая комбинация не обнаруживается обычно в природе, т.е. эта транскрибируемая полинуклеотидная молекула является, не встречающейся в природе, функционально связанной в комбинации с этой промоторной молекулой.
[0066] Эта транскрибируемая полинуклеотидная молекула может быть обычно любой молекулой ДНК, для которой является желаемой экспрессия транскрипта РНК. Такая экспрессия транскрипта РНК может приводить к трансляции полученной молекулы мРНК и, следовательно, к экспрессии белка. Альтернативно, например, эта транскрибируемая полинуклеотидная молекула может быть сконструирована для вызывания, в конечном счете, уменьшенной экспрессии конкретного гена или белка. В одном варианте осуществления, это может выполняться с использованием транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, которая ориентирована в антисмысловом направлении. Квалифицированный в данной области специалист знаком с использованием такой антисмысловой технологией. Вкратце, когда транскрибируется антисмысловая транскрибируемая полинуклеотидая молекула, продукт РНК гибридизуется с комплементарной молекулой РНК или изолирует комплементарную молекулу РНК внутри этой клетки. Эта дуплексная молекула РНК не может транслироваться в белок аппаратом трансляции клетки и деградируется в этой клетке. Любой ген может быть отрицательно регулирован таким образом.
[0067] Таким образом, одним вариантом осуществления настоящего изобретения является регуляторный элемент настоящего изобретения, такой как регуляторные элементы, обеспеченные как SEQ ID NO: 1-158 и 180-183, функционально связанные с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой при желаемом уровне или в желаемом паттерне, когда этот конструкт интегрируется в геном клетки растения. В одном варианте осуществления, эта транскрибируемая полинуклеотидная молекула содержит кодирующий белок район гена, и этот промотор влияет на транскрипцию молекулы РНК, которая транслируется и экспрессируется в виде белкового продукта. В одном варианте осуществления, эта транскрибируемая полинуклеотидная молекула содержит антисмысловой район гена, и промотор влияет на транскрипцию антисмысловой молекулы РНК, двухцепочечной РНК или другой подобной ингибиторной молекулы РНК для ингибирования экспрессии конкретной, представляющей интерес молекулы РНК в клетке-хозяине, являющейся мишенью.
Представляющие агрономический интерес гены
[0068] Транскрибируемые полинуклеотидные молекулы могут быть представляющими агрономический интерес генами. В данном контексте, термин "представляющий агрономический интерес ген" относится к транскрибируемой полинуклеотидной молекуле, которая при экспрессии в конкретной ткани, клетке или в конкретном типе клеток растения придает желаемые характеристики, такие как ассоциированная с растением морфология, физиология, рост, развитие, урожайность, продукты, питательный профиль, болезни или вредители, и/или устойчивость к химикатам. Представляющие интерес гены включают в себя, но не ограничиваются ими, гены, кодирующие получаемый белок, устойчивый к стрессу белок, относящийся к развитию контрольный белок, относящийся к дифференцировке ткани белок, меристемный белок, белок сбрасывания, белок источника, осаждающийся белок, контрольный белок цветков, белок семян, белок с устойчивостью к гербицидам, белок с устойчивостью к заболеваниям, фермент биосинтеза жирных кислот, фермент биосинтеза токоферола, фермент биосинтеза аминокислот, пестицидный белок, или любой другой агент, такой как антисмысловая или RNAi молекула, поражающая конкретный ген для супрессии. Продукт представляющего агрономический интерес гена может действовать в растении для вызывания влияния на физиологию или метаболизм растения или может действовать в качестве пестицидного агента в диете вредителя, который питается на этом растении.
[0069] В одном варианте осуществления настоящего изобретения, промотор настоящего изобретения включают в конструкт, так что этот промотор функционально связан с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой, которая является представляющим агрономический интерес геном. Экспрессия этого представляющего агрономический интерес гена является желаемой для придания агрономически полезного признака. Например, агрономически полезным признаком может быть, но не ограничивается ими, устойчивость к гербицидам, контроль насекомых, модифицированный выход, устойчивость к грибковым болезням, устойчивость к вирусам, устойчивость к нематодам, устойчивость к бактериальным болезням, рост и развитие растений, продуцирование крахмала, продуцирование модифицированных масел, высокое продуцирование масла, модифицированное содержание жирных кислот, высокое продуцирование белка, созревание плодов, усиленное питание животных и человека, биополимеры, устойчивость к стрессу, вызываемому окружающей средой, фармацевтические пептиды и секретируемые пептиды, признаки улучшенного процессинга, улучшенная перевариваемость, продуцирование ферментов, вкус, фиксация азота, продуцирование гибридных семян, продуцирование волокна и получение биотоплива. Примеры представляющих агрономический интерес генов, известные в данной области, включают в себя гены для устойчивости к гербицидам (Патенты США с номерами 6803501; 6448476; 6248876; 6225114; 6107549; 5866775; 5804425; 5633435; и 5463175), увеличенного выхода (Патенты США с номерами USRE38446; 6716474; 6663906; 6476295; 6441277; 6423828; 6399330; 6372211; 6235971; 6222098; и 5716837), контроля насекомых (Патенты США с номерами 6809078; 6713063; 6686452; 6657046; 6645497; 6642030; 6639054; 6620988; 6593293; 6555655; 6538109; 6537756; 6521442; 6501009; 6468523; 6326351; 6313378; 6284949; 6281016; 6248536; 6242241; 6221649; 6177615; 6156573; 6153814; 6110464; 6093695; 6063756; 6063597; 6023013; 5959091; 5942664; 5942658, 5880275; 5763245; и 5763241), устойчивости к грибковым болезням (Патенты США с номерами 6653280; 6573361; 6506962; 6316407; 6215048; 5516671; 5773696; 6121436; 6316407; и 6506962), устойчивости к вирусам (Патенты США с номерами 6617496; 6608241; 6015940; 6013864; 5850023 и 5304730), устойчивости к нематодам (Патент США № 6228992), устойчивости к бактериальным болезням (Патент США № 5516671), роста и развития растений (Патенты США с номерами 6723897 и 6518488), получения крахмала (Патенты США с номерами 6538181; 6538179; 6538178; 5750876; 6476295), продуцирования модифицированных масел (Патенты США с номерами 6444876; 6426447 и 6380462), высокого продуцирования масла (Патенты США с номерами 6495739; 5608149; 6483008 и 6476295), модифицированного содержания жирных кислот (Патенты США с номерами 6828475; 6822141; 6770465; 6706950; 6660849; 6596538; 6589767; 6537750; 6489461 и 6459018), высокого получения белка (Патент США № 6380466), созревания плодов (Патент США № 5512466), усиленного питания животных и человека (Патенты США с номерами 6723837; 6653530; 6541259; 5985605 и 6171640), биополимеров (Патенты США с номерами USRE37543; 6228623 и 5958745 и 6946588), устойчивости к стрессу, вызываемому окружающей средой (U.S. Patent No. 6072103), фармацевтических пептидов и секретируемых пептидов (Патенты США с номерами 6812379; 6774283; 6140075 и 6080560), улучшенных признаков процессинга (Патент США № 6476295), улучшенной перевариваемости (Патент США № 6531648), низкой раффинозы (Патент США № 6166292), продуцирования промышленного фермента (Патент США № 5543576), улучшенного фактора (Патент США № 6011199), фиксации азота (Патент США № 5229114), продуцирования гибридных семян (Патент США № 5689041), получения волокон (Патенты США с номерами 6576818; 6271443; 5981834 и 5869720) и получения биотоплива (Патент США № 5998700).
[0070] Альтернативно, представляющий агрономический интерес ген может влиять на вышеупомянутые характеристики или фенотип растений кодированием молекулы РНК, которая вызывает нацеленную модуляцию экспрессии генов эндогенного гена, например, посредством антисмысловой последовательности (см., например, Патент США № 5107065); ингибиторной РНК ("RNAi", включающей в себя модуляцию экспрессии гена с использованием опосредуемых miRNA, siRNA, трансактивирующей siRNA и фазовой sRNA механизмов, например, как описано в опубликованных заявках US 2006/0200878 и US 2008/0066206, и в Заявке на патент США 11/974469); или опосредуемых косупрессией механизмов. Эта РНК могла бы также быть каталитической молекулой РНК (такой как, например, рибозим или рибосвитч; см., например, Патент США 2006/0200878), сконструированной для расщепления желаемого эндогенного продукта мРНК. Таким образом, любая транскрибируемая полинуклеотидная молекула, которая кодирует транскрибируемую молекулу РНК, которая влияет на агрономически важный фенотип или представляющее интерес морфологическое изменение, может быть использована для осуществления на практике настоящего изобретения. В данной области известны способы для конструирования и введения конструктов в клетку таким образом, что эта транскрибируемая полинуклеотидная молекула транскрибируется в молекулу, которая способна вызывать супрессию генов. Например, посттранскрипционная супрессия генов с использованием конструкта с антисмысловой ориентацией транскрибируемой полинуклеотидной молекулы для регуляции экспрессии генов в клетках растений, описана в Патентах США № 5107065 и 5759829, и посттранскрипционная супрессия генов с использованием конструкта со смысловой ориентацией транскрибируемой полинуклеотидной молекулы для регуляции экспрессии генов в растениях, описана в Патентах США с номерами 5283184 и 5231020. Экспрессия транскрибируемого полинуклеотида в клетке растения может быть также использована для супрессии питания вредителей растений на клетках растений, например, композиций, выделенных из вредителей Coleoptera (Публикация Патента США № US20070124836), и композиций, выделенных из нематодных вредителей (Публикация Патента США № US20070250947). Вредители растений включают в себя, но не ограничиваются ими, членистоногих вредителей, нематодных вредителей и грибковых или микробных вредителей. Примерные транскрибируемые полинуклеотидые молекулы для включения в конструкты настоящего изобретения включают в себя, например, молекулы или гены ДНК из вида, другого, чем виды- или гены-мишени, которые появляются с некоторыми видами или присутствуют на некоторых видах в том же самом виде, но являются включенными в клетки-реципиенты способами генной инженерии, а не классическими способами репродукции или селекции. Тип полинуклеотидной молекулы может включать в себя, но не ограничивается ими, полинуклеотидную молекулу, которая уже присутствует в клетке растения, полинуклеотидную молекулу из другого растения, полинуклеотидную молекулу из другого организма или полинуклеотидную молекулу, генерированную вне растения, такую как полинуклеотидная молекула, содержащая антисмысловую матрицу гена, или полинуклеотидную молекулу, кодирующую искусственную, синтетическую или иным образом модифицированную версию трансгена.
Селектируемые маркеры
[0071] В данном контексте, термин "маркер" относится к любой транскрибируемой полинуклеотидной молекуле, экспрессия которой, или отсутствие ее, может быть подвергнуто скринингу или оценено в баллах некоторым образом. Гены маркеров для применения в практике настоящего изобретения включают в себя, но не ограничиваются ими, транскрибируемые полинуклеотидные молекулы, кодирующие β-глюкуронидазу (GUS, описанную в Патенте США № 5599670), зеленый флуоресцентный белок и его варианты (GFP, описанный в Патентах США с номерами 5491084 и 6146826), белки, которые придают устойчивость к антибиотикам, или белки, которые придают устойчивость к гербицидам. Применимые маркеры устойчивости к антибиотикам, включающие в себя маркеры, кодирующие белки, придающие устойчивость к канамицину (nptII), гигромицину В (aph IV), стрептомицину или спектиномицину (aad, spec/strep) и гентамицину (aac3 и aacC4), известны в данной области. Гербициды, для которых была продемонстрирована устойчивость трансгенного растения, и может быть применен способ настоящего изобретения, включают в себя, но не ограничиваются ими: аминометилфосфоновую кислоту, глифозат, глюфозинат, сульфонилмочевины, имидазолиноны, бромоксинил, далапон, дикамба, циклогександион, ингибиторы оксидазы протопорфириногена и изоксасфлутоловые гербициды. Транскрибируемые полинуклеотидные молекулы, кодирующие белки, участвующие в устойчивости к гербицидам, известны в данной области и включают в себя, но не ограничиваются ими, транскрибируемую полинуклеотидную молекулу, кодирующую 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазу (EPSPS для устойчивости к глифозату, описанную в Патентах США с номерами 5627061; 5633435; 6040497 и 5094945); транскрибируемую полинуклеотидную молекулу, кодирующую глифозат-оксидоредуктазу и глифозат-N-ацетилтрансферазу (GOX, описанную в Патенте США № 5463175; GAT, описанную в Патенте США № 20030083480, и монооксигеназу дикамба Патент США № 20030135879); транскрибируемую полинуклеотидную молекулу, кодирующую бромоксинилнитрилазу (Bxn для устойчивости к бромоксинилу, описанную в Патенте США № 4810648); транскрибируемую полинуклеотидную молекулу, кодирующую фитоендесатуразу (crtI), описанную в Misawa, et al., Plant Journal 4:833-840 (1993) и Misawa, et al., Plant Journal 6:481-489 (1994) для устойчивости к норфлуразону; транскрибируемую полинуклеотидную молекулу, кодирующую синтазу ацетогидроксикислоты (AHAS, aka ALS), описанную в Sathasiivan, et al., Nucl. Acids Res. 18:2188-2193 (1990) для устойчивости к гербицидам, содержащим сульфонилмочевину; и ген bar, описанный в DeBlock, et al., EMBO Journal 6:2513-2519 (1987) для устойчивости к глюфосфинату и устойчивости к биалафосу. Промоторные молекулы настоящего изобретения могут экспрессировать связанные транскрибируемые полинуклеотидные молекулы, которые кодируют фосфинотрицин-ацетилтрансферазу, устойчивую к глифозату EPSPS, аминогликозид-фосфотрансферазу, гидроксифенилпируватдегидрогеназу, гигромицинфосфотрансферазу, неомицинфосфотрансферазу, далапондегалогеназу, устойчивую к бромоксинилу нитрилазу, антралинатсинтазу, арилоксиалканоатдиоксигеназы, ацетил-CoA-карбоксилазу, глифозатоксидоредуктазу и глифозат-N-ацетилтрансферазу.
[0072] В термине "селектируемые маркеры" включены также гены, которые кодируют секретируемый маркер, секреция которого может быть детектирована как способ идентификации или селекции для трансформированных клеток. Примеры включают в себя маркеры, которые кодируют секретируемый антиген, который может быть идентифицирован взаимодействием с антителом, или даже секретируемые ферменты, которые могут быть детектированы каталитически. Селектируемые секретируемые маркерные белки попадают в ряд классов, включающих в себя малые диффундируемые белки, которые являются детектируемыми (например, при помощи ELISA), малые активные ферменты, которые являются детектируемыми во внеклеточном растворе (например, альфа-амилаза, бета-лактамаза, фосфинотрицинтрансфераза, или белки, которые инсертированы или уловлены в клеточной стенке (такие как белки, которые включают в себя лидерную последовательность, такую как лидерная последовательность, которая обнаружена в экспрессионной единице выступающего конца или связанных с патогенезом табака белках, также известных как PR-S табака). Другие возможные гены селектируемых маркеров будут очевидны квалифицированным специалистам в данной области, и включены в настоящее изобретение.
Трансформация клеток
[0073] Изобретение относится также к способу получения трансформированных клеток и растений, которые содержат промотор, функционально связанный с транскрибируемой полинуклеотидной молекулой.
[0074] Термин "трансформация" относится к введению нуклеиновой кислоты в реципиента-хозяина. В данном контексте, термин "хозяин" относится к бактериям, грибам или растениям, включающим в себя любые клетки, ткани и органы, или потомство этих бактерий, грибов или растений. Представляющие особый интерес ткани и клетки растений включают в себя протопласты, каллусы, корни, клубни, семена, стебли, листья, проростки, эмбрионы и пыльцу.
[0075] В данном контексте, термин "трансформированные" относится к клетке, ткани, органу или организму, в которые была введена чужеродная полинуклеотидная молекула, такая как конструкт. Эта введенная полинуклеотидная молекула может быть интегрирована в геномную ДНК реципиентных клетки, ткани, органа или организма, так что эта введенная полинуклеотидная молекула наследуется следующим потомством. "Трансгенные" или "трансформированные" клетка или организм также включают в себя потомство этих клетки и организма и потомство, полученное из программы селекции, использующей такой трансгенный организм в качестве родителя в скрещивании, и проявляющее измененный фенотип, происходящий из присутствия чужеродной полинуклеотидной молекулы. Термин "трансгенные" относится к бактериям, грибам или растениям, содержащим одну или несколько гетерологичных молекул полинуклеиновой кислоты.
[0076] Имеется много способов для введения молекулы полинуклеиновой кислоты в клетки растений. Этот способ обычно предусматривает стадии селекции подходящей клетки-хозяина, трансформацию этой клетки-хозяина рекомбинантным вектором, и получение трансформированной клетки-хозяина. Подходящие способы включают в себя бактериальную инъекцию (например, Agrobacterium), бинарные бактериальные векторы искусственной хромосомы, прямую доставку ДНК (например, посредством PEG-опосредованной трансформации, опосредованное высушиванием/ингибированием поглощение ДНК, электропорацию, встряхивание с силикон-карбидными волокнами и акселерацию покрытых ДНК частиц, и т.д. (обзор в Potrykus, et al., Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 42: 205 (1991)).
[0077] Технология для введения молекул ДНК хорошо известна квалифицированным специалистам в данной области. Способы и материалы для трансформации клеток растений введением конструкта ДНК растения в геном растения в практике настоящего изобретения может включать в себя любой из хорошо известных и демонстрированных способов. Любые способы трансформации могут быть использованы для трансформации клетки-хозяина с одним или несколькими промоторами и/или имеющимися конструктами. Клетками-хозяевами могут быть любая клетка или любой организм, такие как клетка растения, клетка водоросли, водоросли, грибная клетка, грибы, бактериальная клетка или клетка насекомого. Предпочтительные хозяева и трансформированные клетки включают в себя клетки из: растений, Aspergillus, дрожжей, насекомых, бактерий и водорослей.
[0078] Регенерированные трансгенные растения могут быть самоопыляемыми для обеспечения гомозиготных трансгенных растений. Альтернативно, пыльца, полученная из регенерированных трансгенных растений, может быть скрещена с нетрансгенными растениями, предпочтительно инбредными линиями агрономически важных видов. Описания способов селекции, которые обычно используются для различных признаков и культур, могут быть найдены в нескольких ссылочных книгах, см., например, Allard, Principles of Plant Breeding, John Wiley & Sons, NY, U. of CA, Davis, CA, 50-98 (1960); Simmonds, Principles of crop improvement, Longman, Inc., NY, 369-399 (1979); Sneep and Hendriksen, Plant breeding perspectives, Wageningen (ed), Center for Agricultural Publishing and Documentation (1979); Fehr, Soybeans: Improvement, Production and Uses, 2nd Edition, Monograph, 16:249 (1987); Fehr, Principles of variety development, Theory and Technique, (Vol. 1) and Crop Species Soybean (Vol 2), Iowa State Univ., Macmillan Pub. Co., NY, 360-376 (1987). Напротив, пыльца из нетрансгенных растений может быть использована для опыления регенерированных трансгенных растений.
[0079] Эти трансформированные растения могут быть анализированы на присутствие представляющих интерес генов и уровень экспрессии и/или профиль, придаваемый регуляторными элементами настоящего изобретения. Квалифицированные специалисты в данной области знакомы с многочисленными способами, доступными для анализа трансформированных растений. Например, способы для анализа растений включают в себя, но не ограничиваются ими, Саузерн-блоттинг или Нозерн-блоттинг, подходы на основе ПЦР, биохимические анализы, фенотипические способы скрининга, полевые оценивания и иммунодиагностические анализы. Экспрессия транскрибируемой полинуклеотидной молекулы может быть измерена с использованием реагентов и способов TaqMan® (Applied Biosystems, Foster City, CA), как описано изготовителем, и количества циклов ПЦР могут быть определены с использованием TaqMan® Testing Matrix. Альтернативно, могут быть использованы реагенты и способы Invader® (Third Wave Technologies, Madison, WI), как описано изготовителем, для трансгенной экспрессии.
[0080] Семена растений изобретения могут быть собраны из фертильных трансгенных растений, и использованы для выращивания генераций потомков трансформированных растений этого изобретения, в том числе гибридных линий растений, содержащих конструкт этого изобретения и экспрессирующих ген, представляющий агрономический интерес.
[0081] Настоящее изобретение обеспечивает также части растений настоящего изобретения. Части растений, без ограничения, включают в себя листья, стебли, корни, клубни, семена, эндосперм, семяпочку и пыльцу. Настоящее изобретение включает в себя, и обеспечивает также трансформированные клетки растений, которые содержат молекулу нуклеиновой кислоты настоящего изобретения.
[0082] Трансгенное растение может переходить вместе с трансгенной полинуклеотидной молекулой в его потомство. Потомство включает в себя любую регенерированную часть растения или семена, содержащие трансген, произведенный из растения-предка. Это трансгенное растение предпочтительно является гомозиготным в отношении трансформированной полинуклеотидной молекулы, и переносит эту последовательность во все потомство, как результат полового размножения. Потомство может быть выращено из семян, продуцируемых этим трансгенным растением. Эти дополнительные растения могут затем самоопыляться для генерирования точной генеалогической линии растений. Потомство из этих растений оценивают, среди прочего, на экспрессию генов. Эта экспрессия генов может детектироваться несколькими обычными способами, такими как вестерн-блоттинг, нозерн-блоттинг, иммунопреципитация и ELISA.
Товарные продукты
[0083] Настоящее изобретение обеспечивает товарный продукт, содержащий молекулы ДНК изобретения. В данном контексте, термин "товарный продукт" относится к любой композиции или продукту, которые состоят из материала, произведенного из растения, семян, клетки растения или части растения, содержащих молекулу ДНК этого изобретения. Товарные продукты могут продаваться потребителям и могут быть жизнеспособными или нежизнеспособными. Нежизнеспособные товарные продукты включают в себя, но не ограничиваются ими, нежизнеспособные семена и зерно; обработанные семена, части семян и части растений; дегидратированную ткань растения, замороженную ткань растения и обработанную ткань растения; семена и части растений, обработанные для кормления животных для потребления наземными и/или водными животными, масло, мучку, муку, хлопья, отруби, волокна, молоко, сыр, бумагу, сливки, вино и любые другие пищевые продукты для потребления человеком; и биомассы и топливные продукты. Жизнеспособные товарные продукты включают в себя, но не ограничиваются ими, семена и клетки растений. Таким образом, растения, содержащие молекулу ДНК в соответствии с настоящим изобретением, могут быть использованы для изготовления любого товарного продукта, обычно получаемого из растений или их частей.
[0084] После общего описания настоящего изобретения, то же самое будет более легко пониматься с использованием ссылки на следующие примеры, которые обеспечены посредством иллюстрации и без ограничения настоящего изобретения, если нет иных указаний. Специалистам в данной области должно быть понятно, что способы, описанные в следующих примерах, представляют способы, раскрытые авторами изобретения, для хорошего функционирования в применении на практике изобретения. Однако, квалифицированные в данной области специалисты должны, в свете данного описания, понимать, что многие изменения могут быть произведены в конкретных вариантах осуществления, которые описаны, с получением все еще подобного или сходного результата, без отклонения от идеи и объема изобретения, и, следовательно, весь материал, представленный или показанный в сопутствующих фигурах, должен интерпретироваться как иллюстративный, и не в смысле ограничения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Идентификация и клонирование регуляторных элементов
[0085] Новые убиквитиновые транскрипционные регуляторные элементы, или транскрипционные регуляторные последовательности группы элементов экспрессии (EXP) идентифицировали и выделяли из геномной ДНК однодольных видов бородача большого (Andropogon gerardii), эриантуса (Saccharum ravennae (Erianthus ravennae)), щетинника зеленого (Setaria viridis), теосинте (Zea mays subsp. mexicana), проса итальянского (Setaria italica) или коикса (Coix lacryma-jobi).
[0086] Последовательности транскрипта убиквитина 1 идентифицировали из каждого из этих видов. 5-нетранслируемый район (5’-UTR) каждого из транскриптов убиквитина 1 использовали для конструирования праймеров для амплификации соответствующих транскрипционных регуляторных элементов для идентифицированного гена Убиквитина, который содержит функционально связанные промотор, лидер (5’-UTR) и первый интрон. Эти праймеры использовали с применением библиотек GenomeWalker™ (Clontech Laboratories, Inc, Mountain View, CA), сконструированных согласно протоколу изготовителя для клонирования 5’-района соответствующей геномной последовательности ДНК. Транскрипционные регуляторные элементы Убиквитина выделяли также из однодольного Sorghum bicolor с использованием публично доступных последовательностей, которые являются гомологами генов Убиквитина 4, 6 и 7 Zea mays.
[0087] С использованием идентичных последовательностей проводили биоинформатический анализ для идентификации регуляторных элементов в этой амплифицированной ДНК. С использованием результатов этого анализа регуляторные элементы были определены в последовательностях ДНК и праймерах, сконструированных для амплификации этих регуляторных элементов. Соответствующую молекулу ДНК для каждого регуляторного элемента амплифицировали с использованием стандартных условий полимеразной цепной реакции с праймерами, содержащими уникальные сайты рестрикционных ферментов (рестриктаз) и геномной ДНК, выделенной из A. gerardii, S. ravennae, S. viridis, Z. mays subsp. mexicana, S. italica, C. lacryma-jobi и S. bicolor. Полученные фрагменты ДНК лигировали в базовые экспрессирующие векторы растений и секвенировали. Затем выполняли анализ регуляторного элемента TSS и интрон/экзон границ сплайсинга с использованием трансформированных протопластов растений. Вкратце, эти протопласты трансформировали экспрессирующими векторами растений, содержащими клонированные фрагменты ДНК, функционально связанные с гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной последовательностью, и использовали 5’-RACE System for Rapid Amplification of cDNA Ends, Version 2.0 (Invitrogen, Carlsbad, California 92008) для подтверждения регуляторного элемента TSS и интрон/экзон-границ сплайсинга анализом последовательности мРНК-транскриптов, получаемых посредством этого.
[0088] Последовательности идентифицированных групп транскрипционных регуляторных элементов экспрессии ("EXP") обеспечены здесь как SEQ ID NO: 1, 5, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 22, 25, 27, 29, 31, 33, 37, 39, 41, 45, 49, 53, 55, 59, 63, 65, 69, 73, 75, 77, 79, 83, 85, 87, 90, 93, 95, 97, 98, 99, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 115, 116, 117, 119, 121, 123, 124, 125, 126, 128, 130, 132, 133, 134, 136, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 180, 181 и 183, как показано в Таблице 1 ниже. Промоторные последовательности обеспечены здесь как SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135. Лидерные последовательности обеспечены здесь как SEQ ID NO: 3, 20, 35, 43, 47, 51, 57, 61, 67, 71 и 81. Интронные последовательности обеспечены здесь как SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182. Энхансерная последовательность обеспечена как SEQ ID NO: 89.
Tаблица 1 Группы транскрипционных регуляторных элементов экспрессии ("EXP”), промоторов, энхансеров, лидеров и интронов, выделенных из различных видов травянистых растений |
|||||
Аннотация | SEQ ID NO: | Размер (п.н.) | Источник (род/вид) | Описание и/или регуляторные элементы EXP, связанные в направлении 5’ → 3’ (SEQ ID NO): | Конструкт(ы) плазмиды и ампликоны, содержащие EXP |
EXP-ANDge.Ubq1:1:9 | 1 | 3741 | A. gerardii | EXP: P-ANDge.Ubq1-1:1:11 (SEQ ID NO:2); L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:3); I-ANDge.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO:4). | |
P-ANDge.Ubq1-1:1:11 | 2 | 2603 | A. gerardii | промотор | |
L-ANDge.Ubq1-1:1:2 | 3 | 99 | A. gerardii | лидер | |
I-ANDge.Ubq1-1:1:3 | 4 | 1039 | A. gerardii | интрон | |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 3255 | A. gerardii | EXP: P-ANDge.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO:6); L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:3); I-ANDge.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:7). | pMON136264, PCR0145892, pMON140896, PCR41 |
P-ANDge.Ubq1-1:1:9 | 6 | 2114 | A. gerardii | промотор | |
I-ANDge.Ubq1-1:1:4 | 7 | 1042 | A. gerardii | интрон | |
EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 2785 | A. gerardii | EXP: P-ANDge.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO:9); L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:3); I-ANDge.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:7). | pMON140917, PCR42 |
P-ANDge.Ubq1-1:1:10 | 9 | 1644 | A. gerardii | промотор | |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 2613 | A. gerardii | EXP: P-ANDge.Ubq1-1:1:12 (SEQ ID NO:11); L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:3); I-ANDge.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:7). | PCR0145815, PCR43 |
P-ANDge.Ubq1-1:1:12 | 11 | 1472 | A. gerardii | промотор | |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 2255 | A. gerardii | EXP: P-ANDge.Ubq1-1:1:8 (SEQ ID NO:13); L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:3); I-ANDge.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:7). | pMON136259, PCR0145893, pMON140898, PCR44 |
P-ANDge.Ubq1-1:1:8 | 13 | 1114 | A. gerardii | промотор | |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 1912 | A. gerardii | EXP: P-ANDge.Ubq1-1:1:13 (SEQ ID NO:15); L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:3); I-ANDge.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:7). | PCR0145817, pMON140899, PCR45 |
P-ANDge.Ubq1-1:1:13 | 15 | 771 | A. gerardii | промотор | |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 1623 | A. gerardii | EXP: P-ANDge.Ubq1-1:1:14 (SEQ ID NO:17); L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:3); I-ANDge.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:7). | PCR0145819, pMON140900, PCR46 |
P-ANDge.Ubq1-1:1:14 | 17 | 482 | A. gerardii | промотор | |
EXP-ERIra.Ubq1 | 18 | 3483 | E. ravennae | EXP: P-ERIra.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO:19); L-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:20); I-ERIra.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:21). | |
P-ERIra.Ubq1-1:1:10 | 19 | 2536 | E. ravennae | промотор | |
L-ERIra.Ubq1-1:1:2 | 20 | 94 | E. ravennae | лидер | |
I-ERIra.Ubq1-1:1:1 | 21 | 1041 | E. ravennae | интрон | |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 3152 | E. ravennae | EXP: P-ERIra.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO:23); L-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:20); I-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:24). | pMON136263, PCR0145896, pMON140904, PCR50 |
P-ERIra.Ubq1-1:1:9 | 23 | 2014 | E. ravennae | промотор | |
I-ERIra.Ubq1-1:1:2 | 24 | 1044 | E. ravennae | интрон | |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 2663 | E. ravennae | EXP: P-ERIra.Ubq1-1:1:11 (SEQ ID NO:26); L-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:20); I-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:24). | PCR0145820, pMON140905, PCR51 |
P-ERIra.Ubq1-1:1:11 | 26 | 1525 | E. ravennae | промотор | |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 2182 | E. ravennae | EXP: P-ERIra.Ubq1-1:1:8 (SEQ ID NO:28); L-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:20); I-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:24). | pMON136258, PCR0145897, pMON140906, PCR52, pMON142864, pMON142862 |
P-ERIra.Ubq1-1:1:8 | 28 | 1044 | E. ravennae | промотор | |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 1934 | E. ravennae | EXP: P-ERIra.Ubq1-1:1:12 (SEQ ID NO:30); L-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:20); I-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:24). | PCR0145821, pMON140907, PCR53 |
P-ERIra.Ubq1-1:1:12 | 30 | 796 | E. ravennae | промотор | |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 1649 | E. ravennae | EXP: P-ERIra.Ubq1-1:1:13 (SEQ ID NO:32); L-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:20); I-ERIra.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:24). | PCR0145822, pMON140908, PCR54 |
P-ERIra.Ubq1-1:1:13 | 32 | 511 | E. ravennae | промотор | |
EXP-Sv.Ubq1:1:2 | 33 | 2631 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:34); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:35); I-Sv.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:36). | pMON140878, PCR0145909, pMON129203, pMON131958 |
P-Sv.Ubq1-1:1:1 | 34 | 1493 | S. viridis | промотор | |
L-Sv.Ubq1-1:1:2 | 35 | 127 | S. viridis | лидер | |
I-Sv.Ubq1-1:1:1 | 36 | 1011 | S. viridis | интрон | |
EXP-Sv.Ubq1:1:3 | 37 | 2173 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:2 (SQ ID NO:38); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:35); I-Sv.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:36). | PCR0145929, pMON129204 |
P-Sv.Ubq1-1:1:2 | 38 | 1035 | S. viridis | промотор | |
EXP-Sv.Ubq1:1:5 | 39 | 1819 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO:40); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:35); I-Sv.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:36). | pMON129205, pMON131959 |
P-Sv.Ubq1-1:1:3 | 40 | 681 | S. viridis | промотор | |
EXP-Zm.UbqM1:1:1 (Аллель-1) | 41 | 1922 | Z. mays subsp. mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:1 (SEQ ID NO:42); L-Zm.UbqM1-1:1:1 (SEQ ID NO:43); I-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO:44). | pMON140881, PCR0145914, pMON129210, pMON131961 |
P-Zm.UbqM1-1:1:1 (Аллель-1) | 42 | 850 | Z. mays subsp. mexicana | промотор | |
L-Zm.UbqM1-1:1:1 (Аллель-1) | 43 | 78 | Z. mays subsp. mexicana | лидер | |
I-Zm.UbqM1-1:1:5 (Аллель-1) | 44 | 994 | Z. mays subsp. mexicana | интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:4 (Аллель-2) | 45 | 1971 | Z. mays subsp. mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO:46); L-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO:47); I-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO:48). | pMON140882, PCR0145915, pMON129212, pMON131963 |
P-Zm.UbqM1-1:1:4 (Аллель-2) | 46 | 887 | Z. mays subsp. mexicana | промотор | |
L-Zm.UbqM1-1:1:5 (Аллель-2) | 47 | 77 | Z. mays subsp. mexicana | лидер | |
I-Zm.UbqM1-1:1:4 (Аллель-2) | 48 | 1007 | Z. mays subsp. mexicana | интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:2 (Аллель-3) | 49 | 2005 | Z. mays subsp. mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO:50); L-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO:51); I-Zm.UbqM1-1:1:11 (SEQ ID NO:52). | PCR0145916, pMON129211, pMON131962, pMON132047 |
P-Zm.UbqM1-1:1:5 (Аллель-3) | 50 | 877 | Z. mays subsp. mexicana | промотор | |
L-Zm.UbqM1-1:1:4 (Аллель-3) | 51 | 78 | Z. mays subsp. mexicana | лидер | |
I-Zm.UbqM1-1:1:11 (Аллель-3) | 52 | 1050 | Z. mays subsp. mexicana | интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:5 (Аллель-3) | 53 | 2005 | Z. mays subsp. mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO:50); L-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO:51); I-Zm.UbqM1-1:1:12 (SEQ ID NO:54). | |
I-Zm.UbqM1-1:1:12 (Аллель-3) | 54 | 1050 | Z. mays subsp. mexicana | интрон | |
EXP-Sb.Ubq4:1:1 | 55 | 1632 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq4-1:1:1 (SEQ ID NO:56); L-Sb.Ubq4-1:1:1 (SEQ ID NO:57); I-Sb.Ubq4-1:1:1 (SEQ ID NO:58). | pMON140886, PCR0145921, pMON129219, pMON132932 |
P-Sb.Ubq4-1:1:1 | 56 | 401 | S. bicolor | промотор | |
L-Sb.Ubq4-1:1:1 | 57 | 154 | S. bicolor | лидер | |
I-Sb.Ubq4-1:1:1 | 58 | 1077 | S. bicolor | интрон | |
EXP-Sb.Ubq6 | 59 | 2000 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq6-1:1:2 (SEQ ID NO:60); L-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO:61); I-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO:62). | |
P-Sb.Ubq6-1:1:2 | 60 | 791 | S. bicolor | промотор | |
L-Sb.Ubq6-1:1:1 | 61 | 136 | S. bicolor | лидер | |
I-Sb.Ubq6-1:1:1 | 62 | 1073 | S. bicolor | интрон | |
EXP-Sb.Ubq6:1:1 | 63 | 2064 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO:64); L-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO:61); I-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO:62). | pMON140887, PCR0145920, pMON129218 |
P-Sb.Ubq6-1:1:1 | 64 | 855 | S. bicolor | промотор | |
EXP-Sb.Ubq7:1:1 | 65 | 2000 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq7-1:1:1 (SEQ ID NO:66); L-Sb.Ubq7-1:1:1 (SEQ ID NO:67); I-Sb.Ubq7-1:1:1 (SEQ ID NO:68). | pMON132974 |
P-Sb.Ubq7-1:1:1 | 66 | 565 | S. bicolor | промотор | |
L-Sb.Ubq7-1:1:1 | 67 | 77 | S. bicolor | лидер | |
I-Sb.Ubq7-1:1:1 | 68 | 1358 | S. bicolor | интрон | |
EXP-SETit.Ubq1:1:1 | 69 | 2622 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:70); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:71); I-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:72). | pMON140877, PCR0145900, pMON129200 |
P-SETit.Ubq1-1:1:1 | 70 | 1492 | S. italica | промотор | |
L-SETit.Ubq1-1:1:1 | 71 | 127 | S. italica | лидер | |
I-SETit.Ubq1-1:1:1 | 72 | 1003 | S. italica | интрон | |
EXP-SETit.Ubq1:1:4 | 73 | 2622 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:74); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:71); I-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:72). | pMON132037 |
P-SETit.Ubq1-1:1:4 | 74 | 1492 | S. italica | промотор | |
EXP-SETit.Ubq1:1:2 | 75 | 2164 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO:76); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:71); I-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:72). | |
P-SETit.Ubq1-1:1:2 | 76 | 1034 | S. italica | промотор | |
EXP-SETit.Ubq1:1:3 | 77 | 1810 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO:78); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:71); I-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:72). | PCR0145905, pMON129202, pMON131957 |
P-SETit.Ubq1-1:1:3 | 78 | 680 | S. italica | промотор | |
EXP-Cl.Ubq1:1:1 | 79 | 1940 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:82). | pMON140889, PCR0145922, pMON140913, PCR19, pMON129221, pMON146795, pMON146796, pMON146797, pMON146798, pMON146799, pMON132047, pMON146800, pMON146801, pMON146802 |
P-Cl.Ubq1-1:1:1 | 80 | 837 | C. lacryma-jobi | промотор | |
L-Cl.Ubq1-1:1:1 | 81 | 86 | C. lacryma-jobi | лидер | |
I-Cl.Ubq1-1:1:1 | 82 | 1017 | C. lacryma-jobi | интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:3 | 83 | 1845 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO:84); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:82). | PCR0145945, pMON140914, PCR20 |
P-Cl.Ubq1-1:1:4 | 84 | 742 | C. lacryma-jobi | промотор | |
EXP-Cl.Ubq1:1:4 | 85 | 1504 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO:86); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:82). | PCR0145946, pMON140915, PCR21 |
P-Cl.Ubq1-1:1:3 | 86 | 401 | C. lacryma-jobi | промотор | |
EXP-Cl.Ubq1:1:5 | 87 | 1157 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:5 (SEQ ID NO:88); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:82). | PCR0145947, pMON140916, PCR22 |
P-Cl.Ubq1-1:1:5 | 88 | 54 | C. lacryma-jobi | промотор | |
E-Cl.Ubq1-1:1:1 | 89 | 798 | C. lacryma-jobi | энхансер | |
EXP-Cl.Ubq1:1:12 | 90 | 3393 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 91); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:7 (SEQ ID NO: 92) | pMON142729 |
P-Cl.Ubq1-1:1:9 | 91 | 2287 | C. lacryma-jobi | Промотор | |
I-Cl.Ubq1-1:1:7 | 92 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:16 | 93 | 3393 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 91); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:6 (SEQ ID NO: 94) | pMON146750, pMON142748 |
I-Cl.Ubq1-1:1:6 | 94 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:11 | 95 | 2166 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 96); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:7 (SEQ ID NO: 92) | pMON142730 |
P-Cl.Ubq1-1:1:10 | 96 | 1060 | C. lacryma-jobi | Промотор | |
EXP-Cl.Ubq1:1:17 | 97 | 2166 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 96); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:6 (SEQ ID NO: 94) | pMON146751, pMON142749 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:6 (SEQ ID NO: 94) | pMON140889, PCR0145922, pMON140913, PCR19, pMON129221 |
EXP-Cl.Ubq1:1:18 | 99 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:7 (SEQ ID NO: 92) | pMON146795 |
EXP-Cl.Ubq1:1:19 | 100 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:8 (SEQ ID NO: 101) | pMON146796 |
I-Cl.Ubq1-1:1:8 | 101 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:20 | 102 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 103) | pMON146797 |
I-Cl.Ubq1-1:1:9 | 103 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:21 | 104 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 105) | pMON146798 |
I-Cl.Ubq1-1:1:10 | 105 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:22 | 106 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:11 (SEQ ID NO: 107) | pMON146799 |
I-Cl.Ubq1-1:1:11 | 107 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:12 (SEQ ID NO: 109) | pMON132047, pMON146800 |
I-Cl.Ubq1-1:1:12 | 109 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:24 | 110 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:13 (SEQ ID NO: 111) | pMON146801 |
I-Cl.Ubq1-1:1:13 | 111 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:25 | 112 | 1943 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:14 (SEQ ID NO: 113) | pMON146802 |
I-Cl.Ubq1-1:1:14 | 113 | 1020 | C. lacryma-jobi | Интрон | |
EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 1848 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 84); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:6 (SEQ ID NO: 94) | PCR0145945, pMON140914, PCR20 |
EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 1507 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 86); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:6 (SEQ ID NO: 94) | PCR0145946, pMON140915, PCR21 |
EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 1160 | C. lacryma-jobi | EXP: P-Cl.Ubq1-1:1:5 (SEQ ID NO: 88); L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO:81); I-Cl.Ubq1-1:1:6 (SEQ ID NO: 94) | PCR0145947, pMON140916, PCR22 |
EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 2625 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 70); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 118) | pMON140877, PCR0145900, pMON129200 |
I-SETit.Ubq1-1:1:2 | 118 | 1006 | S. italica | Интрон | |
EXP-SETit.Ubq1:1:10 | 119 | 2625 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 64); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 120) | pMON132037 |
I-SETit.Ubq1-1:1:3 | 120 | 1006 | S. italica | Интрон | |
EXP-SETit.Ubq1:1:12 | 121 | 2625 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 64); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 122) | |
I-SETit.Ubq1-1:1:4 | 122 | 1006 | S. italica | Интрон | |
EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 2167 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 71); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 118) | PCR0145928, pMON129201 |
EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 1813 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 73); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 118) | PCR0145905, pMON129202 |
EXP-SETit.Ubq1:1:11 | 125 | 1813 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 73); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 120) | pMON131957 |
EXP-SETit.Ubq1:1:13 | 126 | 1813 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 73); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:5 (SEQ ID NO: 127) | |
I-SETit.Ubq1-1:1:5 | 127 | 1006 | S. italica | Интрон | |
EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 2634 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 34); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 35); I-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 129) | pMON140878, PCR0145909, pMON129203 |
I-Sv.Ubq1-1:1:2 | 129 | 1014 | S. viridis | Интрон | |
EXP-Sv.Ubq1:1:11 | 130 | 2634 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 34); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 35); I-Sv.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 131) | pMON131958 |
I-Sv.Ubq1-1:1:3 | 131 | 1014 | S. viridis | Интрон | |
EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 2176 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 38); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 35); I-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 129) | PCR0145929, pMON129204 |
EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | 1822 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 40); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 35); I-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 129) | pMON129205 |
EXP-Sv.Ubq1:1:10 | 134 | 1822 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 135); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 35); I-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 129) | PCR0145911 |
P-Sv.Ubq1-1:1:4 | 135 | 681 | S. viridis | Промотор | |
EXP-Sv.Ubq1:1:12 | 136 | 1822 | S. viridis | EXP: P-Sv.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 40); L-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 35); I-Sv.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 131) | pMON131959 |
EXP-Zm.UbqM1:1:6 (Аллель-1) | 137 | 1925 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:1 (SEQ ID NO: 42); L-Zm.UbqM1-1:1:1 (SEQ ID NO: 43); I-Zm.UbqM1-1:1:13 (SEQ ID NO: 138) | pMON140881, PCR0145914, pMON129210 |
I-Zm.UbqM1-1:1:13 (Аллель-1) | 138 | 997 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:10 (Аллель-1) | 139 | 1925 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:1 (SEQ ID NO: 42); L-Zm.UbqM1-1:1:1 (SEQ ID NO: 43); I-Zm.UbqM1-1:1:17 (SEQ ID NO: 140) | pMON131961 |
I-Zm.UbqM1-1:1:17 (Аллель-1) | 140 | 997 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 (Аллель-2) | 141 | 1974 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO: 46); L-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO: 47); I-Zm.UbqM1-1:1:14 (SEQ ID NO: 142) | pMON140882, PCR0145915, pMON129212 |
I-Zm.UbqM1-1:1:14 (Аллель-2) | 142 | 1010 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:12 (Аллель-2) | 143 | 1974 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO: 46); L-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO: 47); I-Zm.UbqM1-1:1:19 (SEQ ID NO: 144) | pMON131963 |
I-Zm.UbqM1-1:1:19 (Аллель-2) | 144 | 1010 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:8 (Аллель-3) | 145 | 2008 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO: 50); L-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO: 51); I-Zm.UbqM1-1:1:15 (SEQ ID NO: 146) | PCR0145916, pMON129211 |
I-Zm.UbqM1-1:1:15 (Аллель-3) | 146 | 1053 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:9 (Аллель-3) | 147 | 2008 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO: 50); L-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO: 51); I-Zm.UbqM1-1:1:16 (SEQ ID NO: 148) | |
I-Zm.UbqM1-1:1:16 (Аллель-3) | 148 | 1053 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-Zm.UbqM1:1:11 (Аллель-3) | 149 | 2008 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO: 50); L-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO: 51); I-Zm.UbqM1-1:1:18 (SEQ ID NO: 150) | pMON131962, pMON132047 |
I-Zm.UbqM1-1:1:18 (Аллель-3) | 150 | 1053 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 1635 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq4-1:1:1 (SEQ ID NO: 56); L-Sb.Ubq4-1:1:1 (SEQ ID NO: 57); I-Sb.Ubq4-1:1:2 (SEQ ID NO: 152) | pMON140886, PCR0145921, pMON129219, pMON132932 |
I-Sb.Ubq4-1:1:2 | 152 | 1080 | S. bicolor | Интрон | |
EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 2067 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO: 64); L-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO: 57); I-Sb.Ubq6-1:1:2 (SEQ ID NO: 154) | pMON140887, PCR0145920, pMON129218, pMON132931 |
I-Sb.Ubq6-1:1:2 | 154 | 1076 | S. bicolor | Интрон | |
EXP-Sb.Ubq6:1:3 | 155 | 2067 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO: 64); L-Sb.Ubq6-1:1:1 (SEQ ID NO: 57); I-Sb.Ubq6-1:1:3 (SEQ ID NO: 1569) | pMON132931 |
I-Sb.Ubq6-1:1:3 | 156 | 1076 | S. bicolor | Интрон | |
EXP-Sb.Ubq7:1:2 | 157 | 2003 | S. bicolor | EXP: P-Sb.Ubq7-1:1:1 (SEQ ID NO: 66); L-Sb.Ubq7-1:1:1 (SEQ ID NO: 67); I-Sb.Ubq7-1:1:A (SEQ ID NO: 158) | pMON132974 |
I-Sb.Ubq7-1:1:2 | 158 | 1361 | S. bicolor | Интрон | |
EXP-SETit.Ubq1:1:E | 180 | 2625 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 64); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:5 (SEQ ID NO: 127) | |
EXP-Zm.UbqM1:1:13 (Аллель-3) | 181 | 2008 | Z. mays subsp. Mexicana | EXP: P-Zm.UbqM1-1:1:5 (SEQ ID NO: 50); L-Zm.UbqM1-1:1:4 (SEQ ID NO: 51); I-Zm.UbqM1-1:1:20 (SEQ ID NO: 182) | |
I-Zm.UbqM1-1:1:20 (Аллель-3) | 182 | 1053 | Z. mays subsp. Mexicana | Интрон | |
EXP-SETit.Ubq1:1:9 | 183 | 2625 | S. italica | EXP: P-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 64); L-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 71); I-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 118) |
[0089] Как показано в Таблице 1, например, эта транскрипционная регуляторная EXP-последовательность, обозначенная как EXP-ANDge.Ubq1:l:9 (SEQ ID NO: 1), с компонентами, выделенными из A. gerardii, содержит промоторный элемент P-ANDge.Ubq1-1:1:11 (SEQ ID NO: 2), функционально связанный 5’ (слева) от лидерного элемента, L-ANDge.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 3), функционально связанный 5’ (слева) от интронного элемента, I-ANDge.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 4). Другие EXP связаны сходным образом, как описано в Таблице 1.
[0090] Как показано в Таблице 1, списке последовательностей и фигурах 1-7, были сконструированы варианты промоторных последовательностей из видов A. gerardii, E. ravennae, Z. mays subsp. mexicana, S. bicolor, C. lacryma-jobi, S. italica, и S. viridis, которые содержат более короткие фрагменты промоторов, например, P-ANDge.Ubql-1:1:11 (SEQ ID NO:2), P-ERIra.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 19) или другие соответствующие промоторы из других видов, и, например, приводящие к P-ANDge.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 6), P-ERIra.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 23), P-Cl.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 96), P-SETit.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 76) и P-Sv.Ubq1-1:1:2 (SEQ ID NO: 38), а также другие промоторные фрагменты. P-SETit.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 74) содержит единственное изменение нуклеотида относительно P-SETit.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 70). Подобным образом, P-Sv.Ubq1-1:1:3 (SEQ ID NO: 40) содержит единственное изменение нуклеотида относительно P-Sv.Ubq1-1:1:4 (SEQ ID NO: 135).
[0091] В некоторых случаях, варианты конкретных интронов создавали изменением последних 3 нуклеотидов каждого соответствующего интрона после последовательности 5’-AG-3’ 3’-интрон-границы сплайсинга. Эти варианты интронов показаны в Таблице 2 ниже.
Таблица 2 3’-концевая последовательность вариантов интронов |
||
Аннотация | SEQ ID NO: | 3’-концевые нуклеотиды интрона сразу после 3’-сайта сплайсинга AG |
I-Cl.Ubq1-1:1:7 | 92 | GTG |
I-Cl.Ubq1-1:1:6 | 94 | GTC |
I-Cl.Ubq1-1:1:8 | 101 | GCG |
I-Cl.Ubq1-1:1:9 | 103 | GAC |
I-Cl.Ubq1-1:1:10 | 105 | ACC |
I-Cl.Ubq1-1:1:11 | 107 | GGG |
I-Cl.Ubq1-1:1:12 | 109 | GGT |
I-Cl.Ubq1-1:1:13 | 111 | CGT |
I-Cl.Ubq1-1:1:14 | 113 | TGT |
I-SETit.Ubq1-1:1:2 | 118 | GTG |
I-SETit.Ubq1-1:1:3 | 120 | GGT |
I-SETit.Ubq1-1:1:4 | 122 | ACC |
I-SETit.Ubq1-1:1:5 | 127 | GGC |
I-Sv.Ubq1-1:1:2 | 129 | GTG |
I-Sv.Ubq1-1:1:3 | 131 | GGT |
I-Zm.UbqM1-1:1:13 (Аллель-1) | 138 | GTC |
I-Zm.UbqM1-1:1:17 (Аллель-1) | 140 | GGT |
I-Zm.UbqM1-1:1:14 (Аллель-2) | 142 | GTC |
I-Zm.UbqM1-1:1:19 (Аллель-2) | 144 | GGT |
I-Zm.UbqM1-1:1:15 (Аллель-3) | 146 | GTC |
I-Zm.UbqM1-1:1:18 (Аллель-3) | 148 | GGT |
I-Sb.Ubq6-1:1:2 | 154 | GTG |
I-Sb.Ubq6-1:1:3 | 156 | GGT |
I-Zm.UbqM1-1:1:20 (Аллель-3) | 182 | CGG |
[0092] В Таблице 1 перечислены также три аллельных варианта, выделенные с использованием тех же самых наборов праймеров, сконструированных для амплификации геномной ДНК из Z. mays subsp. mexicana. Аллельные варианты этих последовательностей EXP состоят из последовательности, которая имеет некоторую идентичность в различных районах других последовательностей, но инсерции, делеции и ошибочные спаривания нуклеотидов могут быть также обнаружены в каждом промоторе, лидере и/или интроне каждой из этих EXP-последовательностей. Эта EXP-последовательность, обозначенная как EXP-Zm.UbqM1:1:1 (SEQ ID NO: 41), представляет первый аллель (Аллель 1) группы транскрипционных регуляторных элементов экспрессии гена Udq1 Z. mays subsp. mexicana. EXP-последовательности, обозначенные как EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137) и EXP-Zm.UbqM1:1:10 (SEQ ID NO: 139), представляют первый аллель (Аллель-1), только с одним различием между двумя EXP, встречающимися в последних 3’-нуклеотидах каждого соответствующего интрона после последовательности 5’-AG-3’ 3’-интрон-границы сплайсинга. EXP-последовательность, обозначенная как EXP-Zm.UbqM1:1:4 (SEQ ID NO: 45), представляет второй аллель (Аллель 2) группы транскрипционных регуляторных элементов экспрессии гена Ubq1 Z. mays subsp. mexicana. EXP-последовательности, обозначенные как EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141) и EXP-Zm.UbqM1:1:12 (SEQ ID NO: 143) представляют второй аллель (Аллель-2) только с одним различием между двумя EXP, встречающимся в последних 3’-нуклеотидах каждого соответствующего интрона после последовательности 5’-AG-3’ 3’-интрон-границы сплайсинга. EXP-последовательности EXP-Zm.UbqM1:1:2 (SEQ ID NO: 49) и EXP-Zm.UbqM1:1:5 (SEQ ID NO: 53) представляет третий аллель (Аллель-3) группы транскрипционных регуляторных элементов экспрессии гена Ubq1 Z. mays subsp. mexicana и содержат единственное различие нуклеотидов в положении 1034 в их соответствующих интронах (G вместо I-Zm.UbqM1-1:1:1l, SEQ ID NO: 52 и T вместо I-Zm.UbqM1-1:1:12, SEQ ID NO: 54). EXP-последовательности, обозначенные как EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145), EXP-Zm.UbqM1:1:9 (SEQ ID NO: 147), EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149) и EXP-Zm.UbqM1:1:13 (SEQ ID NO: 181) также представляют третий аллель (Аллель 3). Интрон EXP-Zm.UbqMe1:1:9, 1-Zm.UbqM1-1:1:16 (SEQ ID NO: 148) содержит остаток тимина в положении 1034, тогда как интроны EXP-Zm.UbqM1:1:8, EXP-Zm.UbqM1:1:11 и EXP-Zm.UbqM1:1:13 (I-Zm.UbqM1-1:1:15, SEQ ID NO: 146; I-Zm.UbqM1-1:1:18, SEQ ID NO: 11 и I-Zm.UbqMl-1:1:20, SEQ ID NO: 182), каждый, содержит остаток гуанина в положении 1034. Кроме того, последние 3, 3’-концевые нуклеотиды EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145) и EXP-Zm.UbqM1:1:9 (SEQ ID NO: 147) отличаются от нуклеотидов EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149) и EXP-Zm.UbqM1:1:13 (SEQ ID NO: 181).
Пример 2: Анализ регуляторных элементов, управляющих GUS в протопластах кукурузы.
[0093] Протопласты листьев кукурузы трансформировали экспрессирующими векторами растений, содержащими последовательность EXP, управляющую экспрессией трансгена β-глюкуронидазы, и сравнивали с экспрессией GUS в протопластах листьев, в которых экспрессия GUS управляется известными конститутивными промоторами.
[0094] Экспрессию трансгена, управляемую EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22) или EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), сравнивали с экспрессией от известных конститутивных промоторов. Эти вышеупомянутые EXP-последовательности клонировали в экспрессирующие векторы растений, как показано в Таблице 3 ниже, для получения векторов, в которых последовательность EXP функционально связана 5’ (слева) с репортером β-глюкуронидазы (GUS), который содержал процессируемый интрон (называемый GUS-2, SEQ ID NO: 160), произведенный из светоиндуцируемого тканеспецифического гена ST-LS 1 картофеля (GenBank Accession: X04753), или кодирующую последовательность соседнего GUS (GUS-1, SEQ ID NOS: 159), которая была функционально связана 5’ (слева) с 3’-UTR, произведенную из гена нопалинсинтазы A. tumefaciens (T-AGRtu.nos-1:1:13, SEQ ID NO: 161) или гена Hspl7 пшеницы (T-Ta.Hspl7-1:1:1, SEQ ID NO: 162).
Таблица 3 Конструкт экспрессирующей плазмиды GUS растения и соответствующие последовательность EXP, GUS-кодирующая последовательность и 3’-UTR, используемые для трансформации протопластов листьев кукурузы. “SEQ ID NO:” относится к конкретной EXP-последовательности |
||||
Плазмида | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | 3´ UTR |
pMON19469 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
pMON65328 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | GUS-2 | T-Ta.Hsp17-1:1:1 |
pMON25455 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
pMON122605 | EXP-Os.TubA-3:1:1 | 165 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
pMON136259 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
pMON136258 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
[0095] Контрольные плазмиды (pMON19469, pMON65328, pMON25455 и pMON122605), используемые для сравнения, конструировали, как описано выше, и они содержали известную EXP-последовательность: EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1(SEQ ID NO: 163), EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) или EXP-Os.TubA-3:1:1 (SEQ ID NO: 165), соответственно, функционально связанные 5’ (слева) с кодирующей GUS последовательностью и 3’-UTR. Три дополнительных контроля были обеспечены для оценивания базовой экспрессии GUS и люциферазы: без контроля ДНК, пустого вектора, который не конструировали для трансгенной экспрессии, и экспрессирующего вектора, используемого для экспрессии зеленого флуоресцентного белка (GFR).
[0096] Две плазмиды, для применения в котрансформации и нормализации данных, также конструировали с использованием способов, известных в данной области. Каждая плазмида содержала специфическую кодирующую люциферазу последовательность, которая управлялась конститутивной EXP-последовательностью. Вектор растения pMON19437 содержит трансгенную кассету с конститутивным промотором, функционально связанным 5’ (слева) с интроном, (EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1, SEQ ID NO: 170), функционально связанным 5’ (слева) с кодирующей последовательностью люциферазы светляка (Photinus pyralis) (LUCIFERASE:1:3, SEQ ID NO: 166), функционально связанной 5’ (слева) с 3’-UTR из гена нопалинсинтазы Agrobacterium tumefaciens (T-AGRtu.nos-1:1:13, SEQ ID NO: 161). Вектор растений pMON63934 содержит трансгенную кассету с конститутивной последовательностью EXP (EXP-CaMV.35S-enh-Lhcb1, SEQ ID NO: 168), функционально связанной 5’ (слева) c кодирующей последовательностью люциферазы морской фиалки (Renilla reniformis) (CR-Ren.hRenilla Lucife-0:0:1, SEQ ID NO: 167), функционально связанной 5’ (слева) с 3’-UTR гена нопалинсинтазы Agrobacterium tumefaciens (T-AGRtu.nos-1:1:13, SEQ ID NO: 161).
[0097] Протопласты листьев кукурузы трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, хорошо известным в данной области. Протопластные клетки трансформировали плазмидной ДНК pMON19437, плазмидной ДНК pMON63934, и эквимолярным количеством одной из плазмид, представленных в Таблице 3, и инкубировали в течение ночи в полной темноте. Измерения как GUS, так и люциферазы проводили помещением аликвот лизированного препарата клеток, трансформированных, как описано выше, в два различных планшета с малыми лунками. Один планшет использовали для измерений GUS, и второй планшет использовали для выполнения двойного анализа люциферазы с использованием системы анализа с двойным люциферазным репортером (Promega Corp., Madison, WI; см., например, Promega Notes Magazine, No: 57, 1996, p.02). Выполняли одну или две трансформации для каждой EXP-последовательности, и средние величины экспрессии для каждой EXP-последовательности определяли из нескольких проб из каждого эксперимента с трансформацией. Измерения проб выполняли с использованием четырех повторностей каждой трансформации конструкта EXP-последовательности, или альтернативно, трех повторностей каждой трансформации конструкта EXP-последовательности на один из двух экспериментов по трансформации. Средние уровни экспрессии GUS и люциферазы представлены в Таблице 4. В этой таблице, величины люциферазы светляка (например, из экспрессии pMON19437) представлены в столбце, обозначенном "FLuc", а величины люциферазы Renilla представлены в столбце, обозначенном "RLuc".
Таблица 4 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев кукурузы |
|||||
Плазмида | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | Gus | RLuc | FLuc |
pMON19469 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 789147 | 298899 | 36568 |
pMON65328 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 508327 | 158227 | 17193 |
pMON25455 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 460579 | 183955 | 53813 |
pMON122605 | EXP-Os.TubA-3:1:1 | 165 | 25082 | 25821 | 21004 |
pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 926083 | 101213 | 23704 |
pMON136259 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 845274 | 193153 | 51479 |
pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 901985 | 132765 | 41313 |
pMON136258 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 1011447 | 210635 | 66803 |
[0098] Для сравнения относительной активности каждой EXP-последовательности, величины GUS выражали в виде отношения активности GUS к активности люциферазы и нормализовали относительно уровней экспрессии, наблюдаемых для EXP-последовательности EXP-Os.TubA-3:1:l (SEQ ID NO: 165). Таблица 5 ниже показывает эти отношения GUS/RLuc экспрессии, нормализованной относительно экспрессии EXP-Os.TubA-3:1:l в протопластах кукурузы.
[0099] Как видно из Таблицы 5, экспрессия GUS, управляемая EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22) или EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), была в 4,51 - 9,42 раза более высокой, чем экспрессия GUS, управляемая EXP-Os.TubA-3:1:l (SEQ ID NO: 165). Экспрессия GUS, управляемая EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22) или EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), была также более высокой, чем экспрессия, управляемая EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), EXP-CaMV.35S- enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163), или EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179).
Таблица 5 Изменение отношения GUS/RLuc-кратная экспрессия в указанное число раз в сравнении с экспрессией EXP-Os.TubA-3:1:1 в протопластных клетках листьев кукурузы |
||||
Плазмида | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | Gus/RLuc | GUS/Rluc, нормализован-ное в отношении EXP-Os.TubA-3:1:1 |
pMON19469 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 2,640000 | 2,72 |
pMON65328 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 3,210000 | 3,31 |
pMON25455 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 2,500000 | 2,57 |
pMON122605 | EXP-Os.TubA-3:1:1 | 165 | 0,971000 | 1,00 |
pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 9,150000 | 9,42 |
pMON136259 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 4,380000 | 4,51 |
pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 6,790000 | 6,99 |
pMON136258 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 4,800000 | 4,94 |
[00100] Таблица 6 ниже показывает отношения GUS/FLuc экспрессии, нормализованной в отношении экспрессии EXP-Os.TubA-3:1:1 в протопластах кукурузы.
Таблица 6 Изменение отношения экспрессия GUS/RLuc в указанное число раз в сравнении с экспрессией EXP-Os.TubA-3:1:1 в протопластных клетках листьев кукурузы |
||||
Плазмида | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | Gus/FLuc | Нормализа-ция в отношении EXP-Os.TubA-3:1:1 |
pMON19469 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 21,600000 | 18,15 |
pMON65328 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 29,600000 | 24,87 |
pMON25455 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 8,560000 | 7,19 |
pMON122605 | EXP-Os.TubA-3:1:1 | 165 | 1,190000 | 1,00 |
pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 39,100000 | 32,86 |
pMON136259 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 16,400000 | 13,78 |
pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 21,800000 | 18,32 |
pMON136258 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 15,100000 | 12,69 |
[00101] Как можно видеть в Таблице 6, экспрессия GUS, управляемая EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22) или EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), показала ту же самую общую тенденцию при выражении в виде отношения величин GUS/FLuc и нормализации в отношении EXP-Os.TubA-3:1:1 (SEQ ID NO: 165). Экспрессия была в 12,69-32,86 раз более высокой, чем экспрессия GUS, управляемая EXP-Os.TubA-3:1:1 (SEQ ID NO: 165). Экспрессия GUS, управляемая EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22) или EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), была также более высокой в некоторых сравнениях, чем экспрессия EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163) или EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179).
Пример 3: Анализ регуляторных элементов, управляющих GUS, в протопластах кукурузы, с использованием ампликонов кассет трансгенов GUS
[00102] Протопласты листьев кукурузы трансформировали ДНК-ампликонами, произведенными из экспрессирующих векторов растений, содержащих EXP-последовательность, управляющую экспрессией трансгена β-глюкуронидазы, и сравнивали с протопластом листа, в котором экспрессия GUS управляется посредством конститутивных промоторов, в ряде экспериментов, представленных ниже.
[0100] В первой серии экспериментов, протопластные клетки кукурузы, произведенные из ткани листьев, трансформировали, как описано выше, ампликонами, полученными из амплификации кассет трансгенов GUS, содержащих экспрессирующие векторы растений, для сравнения экспрессии трансгена (GUS), управляемой одним из EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124), EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 134), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqMl:1:7 (SEQ ID NO: 141), EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151), EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) и EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98) с экспрессией известных конститутивных промоторов. Каждую 85-последовательность, содержащую матрицу амплификации, из которой был получен ампликон кассеты трансгенов, клонировали с использованием способов, известных в данной области, в экспрессирующий вектор растений, показанный в Таблице 7 ниже под заглавием "Матрица ампликона". Полученные экспрессирующие векторы растений содержат кассету трансгенов, состоящую из 85-последовательностей, функционально связанной 5’ (слева) с кодирующей последовательностью для β-глюкуронидазы (GUS), которая содержит либо процессируемый интрон ("GUS-2", обсуждаемый в Примере 2 выше), либо смежную кодирующую GUS последовательность ("GUS-1", обсуждаемый выше), функционально связанную 5’ относительно 3’-UTR T-AGRtu.nos-1:1:13 или T-Ta.Hspl7-1:1:l, как также обсуждалось выше. Ампликоны получали с использованием способов, известных специалистам с квалификацией в данной области, с использованием матриц плазмидных конструктов, представленных в Таблице 7 ниже. Вкратце, конструировали 5-олигонуклеотидный праймер для отжига с промоторной последовательностью, и 3’-олигонуклеотидным праймером, который отжигают на 3’-конце 3’-UTR, использовали для амплификации каждой трансгенной кассеты. Успешные 5’-делеции вводили в промоторные последовательности, содержащие эти трансгенные кассеты, с получением различных EXP-последовательностей, с использованием различных олигонуклеотидных праймеров, которые создавали отжигом в различных положениях в промоторной последовательности, содержащей матрицу каждого ампликона.
Таблица 7 Ампликоны экспрессии GUS в растении и соответствующие матрицы ампликонов плазмидных конструктов, EXP-последовательность, кодирующая GUS последовательность и 3’-UTR, используемые для трансформации протопластов листьев кукурузы |
|||||
ID ампликона | Матрица ампликона | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | Кодирующая GUS последовательность | 3´ UTR |
PCR0145942 | pMON25455 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145941 | pMON33449 | P-CAMV.35S-ENH-1:1:102/L-CAMV.35S-1:1:2 | 169 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145943 | pMON65328 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | GUS-2 | T-Ta.Hsp17-1:1:1 |
PCR0145944 | pMON81552 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145892 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145815 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145893 | pMON136259 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145817 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145819 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145896 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145820 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145897 | pMON136258 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145821 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145822 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145900 | pMON140877 | EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145928 | pMON140877 | EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145905 | pMON140877 | EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145909 | pMON140878 | EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145929 | pMON140878 | EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145911 | pMON140878 | EXP-Sv.Ubq1:1:10 | 134 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145914 | pMON140881 | EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145915 | pMON140882 | EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145921 | pMON140886 | EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145920 | pMON140887 | EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
PCR0145922 | pMON140889 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | GUS-1 | T-AGRtu.nos-1:1:13 |
[0101] Плазмидные конструкты, перечисленные в виде матриц ампликонов в Таблице 7, служили в качестве матриц для амплификации трансгенных экспрессионных кассет, содержащих перечисленные EXP-последовательности Таблицы 7. Контрольные плазмиды, используемые для генерирования трансгенных ампликонов GUS для сравнения, конструировали, как описано ранее, с известными EXP-последовательностями, описанными в Примере 2. Использовали также отрицательные контроли для определения фона GUS и люциферазы, контроля без ДНК и контрольной пробы, в которой две плазмиды люциферазы использовались в трансформации вместе с плазмидной ДНК, которая не экспрессировала кодирующую последовательность. Плазмиды pMON19437 и pMON63934, обсуждаемые в Примере 2, также использовали для котрансформации и нормализации данных.
[0102] Протопласты листьев кукурузы трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, как описано в Примере 2 выше. Таблица 8 ниже показывает средние величины экспрессии GUS и люциферазы, определенные для каждой трансгенной кассеты.
Таблица 8 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев кукурузы |
||||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc | FLuc |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1540,3 | 105416,8 | 2671,8 |
P-CAMV.35S-ENH-1:1:102/L-CAMV.35S-1:1:2 | 169 | 10426,3 | 344088,6 | 8604,1 |
EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 12530,8 | 137722,6 | 3067,1 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 61036,1 | 208125,3 | 5787,6 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 59447,4 | 84667,6 | 2578,4 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 40123,3 | 76753,8 | 2419,8 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 42621,0 | 121751,3 | 3974,8 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 44358,5 | 87105,8 | 2687,1 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 48219,0 | 107762,1 | 3279,6 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 31253,0 | 171684,1 | 6476,1 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 7905,8 | 21235,6 | 462,4 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 39935,8 | 173766,6 | 5320,3 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 34141,3 | 111626,8 | 3377,6 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 11540,3 | 42362,1 | 1045,3 |
EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 20496,5 | 88695,8 | 2358,8 |
EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 75728,5 | 185223,8 | 4723,1 |
EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 44148,3 | 161216,3 | 4962,1 |
EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 15043,8 | 74670,6 | 1888,3 |
EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 31997,8 | 113787,1 | 3219,8 |
EXP-Sv.Ubq1:1:10 | 134 | 38952,8 | 220208,6 | 7011,3 |
EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 30528,3 | 90113,1 | 2453,6 |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 34986,3 | 105724,7 | 2553,8 |
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 9982,3 | 72593,8 | 2171,6 |
EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 33689,0 | 114709,6 | 3879,6 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 50622,3 | 107084,3 | 2621,3 |
[0103] Для сравнения относительной активности каждой EXP-последовательности величины GUS выражали в виде отношения GUS к люциферазе и нормализовали относительно уровней экспрессии, наблюдаемой для EXP-Os.Act1:1:1 и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1. Таблица 9 ниже показывает отношения GUS/RLuc экспрессии, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:1 и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 экспрессии в протопластах кукурузы. Таблица 10 ниже показывает отношения GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:1 и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 экспрессии в протопластах кукурузы.
Таблица 9 Отношения экспрессии GUS/RLuc и GUS/FLuc, нормализованные относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163), в протопластах кукурузы |
|||
EXP-Последовательность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | GUS/FLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 0,16 | 0,14 |
P-CAMV.35S-ENH-1:1:102/L-CAMV.35S-1:1:2 | 169 | 0,33 | 0,30 |
EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 1,00 | 1,00 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 3,22 | 2,58 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 7,72 | 5,64 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 5,75 | 4,06 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 3,85 | 2,62 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 5,60 | 4,04 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 4,92 | 3,60 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 2,00 | 1,18 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 4,09 | 4,18 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 2,53 | 1,84 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 3,36 | 2,47 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 2,99 | 2,70 |
EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 2,54 | 2,13 |
EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 4,49 | 3,92 |
EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 3,01 | 2,18 |
EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 2,21 | 1,95 |
EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 3,09 | 2,43 |
EXP-Sv.Ubq1:1:10 | 134 | 1,94 | 1,36 |
EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 3,72 | 3,05 |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 3,64 | 3,35 |
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 1,51 | 1,13 |
EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 3,23 | 2,13 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 5,20 | 4,73 |
Таблица 10 Отношения экспрессии GUS/RLuc и GUS/FLuc, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 179), в протопластах листьев кукурузы |
|||
EXP-Последовательность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/FLuc относительно EXP-Os.Act1:1:9 |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 1,00 |
P-CAMV.35S-ENH-1:1:102/L-CAMV.35S-1:1:2 | 169 | 2,07 | 2,10 |
EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 6,23 | 7,09 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 20,07 | 18,29 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 48,05 | 39,99 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 35,78 | 28,76 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 23,96 | 18,60 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 34,85 | 28,64 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 30,62 | 25,50 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 12,46 | 8,37 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 25,48 | 29,66 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 15,73 | 13,02 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 20,93 | 17,53 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 18,64 | 19,15 |
EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 15,82 | 15,07 |
EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 27,98 | 27,81 |
EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 18,74 | 15,43 |
EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 13,79 | 13,82 |
EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 19,25 | 17,24 |
EXP-Sv.Ubq1:1:10 | 134 | 12,11 | 9,64 |
EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 23,19 | 21,58 |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 22,65 | 23,76 |
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 9,41 | 7,97 |
EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 20,10 | 15,06 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 32,35 | 33,50 |
[0104] Как можно видеть в Таблицах 9 и 10, почти все из EXP-последовательностей были способны управлять экспрессией трансгена GUS в клетках кукурузы. Средняя экспрессия GUS была более высокой для EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124), EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 134), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151), EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) и EXP-C1.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98) в сравнении с экспрессией GUS, управляемой EXP-Os.Act1:1:1 или EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1.
[0105] Во второй серии экспериментов, ампликон кассеты GUS, содержащий последовательность EXP EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145), сравнивали с контрольными ампликонами, PCR0145942 (EXP-Os.Act1:1:9, SEQ ID NO: 179) и PCR0145944 (EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1, SEQ ID NO: 170) в отношении экспрессии GUS. Экспрессия GUS, управляемая EXP-последовательностью EXP-Zm.UbqM1:1:8, была более высокой, чем экспрессия этих двух контролей. Таблица 11 ниже показывает средние величины GUS и люциферазы, определенные для каждого ампликона. Таблица 12 ниже показывает отношения экспрессии GUS/RLuc и GUS/FLuc, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:9 и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 экспрессии в протопластах кукурузы.
Таблица 11 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев кукурузы |
|||||
Ампликон | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc | FLuc |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1512,25 | 190461 | 11333,8 |
PCR0145944 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 41176,5 | 330837 | 13885,8 |
PCR0145916 | EXP-Zm.UbqM1:1:8 | 145 | 79581,5 | 330756 | 15262,5 |
Таблица 12 Отношения экспрессии GUS/RLuc и GUS/FLuc, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), в протопластах листьев кукурузы |
|||||
EXP-последова-тельность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относи-тельно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/FLuc относите-льно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относитель-но EXP-CaMV.35S-enh+ Zm.DnaK:1:1 |
GUS/FLuc относи-тельно EXP-CaMV.35S-enh+ Zm.DnaK:1:1 |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 1,00 | 0,06 | 0,04 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 15,68 | 22,22 | 1,00 | 1,00 |
EXP-Zm.UbqM1:1:8 | 145 | 30,30 | 39,08 | 1,93 | 1,76 |
[0106] В третьей серии экспериментов, трансгенные кассеты ампликона GUS готовили, как описано выше, и анализировали на экспрессию, управляемую последовательностями EXP, EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116). Эти ампликоны состояли из EXP-последовательности, функционально связанной с T-AGRtu.nos-1:1:13 3’-UTR. Экспрессию сравнивали с контролями EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170). Таблица 13 ниже показывает средние величины GUS и люциферазы, определенные для каждого ампликона. Таблица 14 показывает отношения экспрессии GUS/RLuc, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:9 и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 экспрессии, в протопластах кукурузы.
Таблица 13 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев кукурузы |
||||
ID ампликона | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 9445,25 | 929755 |
PCR0145944 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 78591,25 | 445127 |
PCR0146628 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 192056,75 | 972642 |
PCR0145922 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 175295,25 | 395563 |
PCR0145945 | EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 173674,5 | 402966 |
PCR0145946 | EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 185987,5 | 390052 |
PCR0145947 | EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 9435 | 320749 |
Таблица 14 Отношения GUS/RLuc и GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), в протопластах листьев кукурузы |
|||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 0,06 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 17,38 | 1,00 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 19,44 | 1,12 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 43,62 | 2,51 |
EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 42,43 | 2,44 |
EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 46,94 | 2,70 |
EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 2,90 | 0,17 |
[0107] Как можно видеть в Таблице 14 выше, последовательности EXP EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116) способны управлять экспрессией трансгенов. Экспрессия, управляемая EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114) и EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115), была более высокой, чем экспрессия обоих контролей. Экспрессия, управляемая EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), была более низкой, чем EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), но более высокой, чем контроль, EXP-Os.Actl:l:9 (SEQ ID NO: 179).
[0108] В четвертой серии экспериментов, трансгенные кассеты ампликона GUS готовили, как описано выше, и анализировали на экспрессию, управляемую последовательностями EXP, EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97). Экспрессию сравнивали с контролями EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170). Таблица 15 ниже показывает средние величины GUS и люциферазы, определенные для каждого ампликона. Таблица 16 ниже показывает отношения GUS/RLuc и GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:9 и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 экспрессии в протопластах кукурузы.
Таблица 15 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев кукурузы |
|||||
ID ампликона | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc | FLuc |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 5333,5 | 171941,75 | 77817,88 |
PCR0145944 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 88517 | 177260,25 | 54207,38 |
PCR0145922 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 130125,75 | 194216 | 32055 |
pMON146750 | EXP-Cl.Ubq1:1:16 | 93 | 134101,75 | 182317,5 | 32434,5 |
pMON146751 | EXP-Cl.Ubq1:1:17 | 97 | 107122,5 | 151783,25 | 51354,38 |
Таблица 16 Отношения GUS/RLuc и GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170) в протопластах листьев кукурузы |
||||||
ID ампли-кона | EXP-последо-ватель-ность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относи-тельно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/FLuc относи-тельно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относи-тельно EXP-CaMV.35S-enh+Zm. DnaK:1:1 | GUS/FLuc относи-тельно EXP-CaMV.35S-enh+Zm. DnaK:1:1 |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 1,00 | 0,06 | 0,04 |
PCR0145944 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm. DnaK:1:1 | 170 | 16,10 | 23,83 | 1,00 | 1,00 |
PCR0145922 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 21,60 | 59,23 | 1,34 | 2,49 |
pMON146750 | EXP-Cl.Ubq1:1:16 | 93 | 23,71 | 60,32 | 1,47 | 2,53 |
pMON146751 | EXP-Cl.Ubq1:1:17 | 97 | 22,75 | 30,43 | 1,41 | 1,28 |
[0109] Как можно видеть в Таблице 16, последовательности EXP EXP, EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97) были способны управлять экспрессией трансгена. Экспрессия, управляемая каждой из последовательностей EXP, была более высокой, чем экспрессия обоих контролей.
[0110] В пятой серии экспериментов, трансгенные кассеты ампликона GUS готовили, как описано выше, и анализировали на экспрессию, управляемую последовательностями EXP, EXP-Zm.UbqM1: 1:11l (SEQ ID NO: 149) и EXP-Cl.Ubq1:1:23 (SEQ ID NO: 108). Экспрессию сравнивали с контролями EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163). Таблица 17 ниже показывает средние величины GUS и люциферазы, определенные для каждого ампликона. Таблица 18 ниже показывает отношения GUS/RLuc экспрессии, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:9 и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 экспрессии, в протопластах кукурузы.
Таблица 17 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев кукурузы |
|||||
Матрица | Ампликон | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc |
pMON65328 | PCR0145943 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+ Os.Act1:1:1 |
163 | 70352,00 | 79028,75 |
pMON25455 | PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 33155,25 | 92337,00 |
pMON131962 | pMON131962 | EXP-Zm.UbqM1:1:11 | 149 | 18814,75 | 33663,00 |
pMON132047 | pMON132047 | EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | 15387,50 | 40995,50 |
Таблица 18 Отношения GUS/RLuc экспрессии, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163), в протопластах листев кукурузы |
||||
Ампликон | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относитель-но EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 |
PCR0145943 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+ Os.Act1:1:1 |
163 | 2,48 | 1,00 |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 0,40 |
pMON131962 | EXP-Zm.UbqM1:1:11 | 149 | 1,56 | 0,63 |
pMON132047 | EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | 1,05 | 0,42 |
[0111] Как можно видеть в Таблице 18 выше, последовательности EXP, EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149) и EXP-Cl.Ubq1:1:23 (SEQ ID NO: 108) были способны управлять экспрессией GUS в протопластах листьев кукурузы. Экспрессия была сходной с экспрессией контроля, EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и более низкой, чем экспрессия EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163).
[0112] Эффективность регуляторных элементов, управляющих экспрессией GUS из ампликонов, может быть сходным образом исследована в протопластах листьев сахарного тростника. Например, протопласты сахарного тростника могут быть трансформированы ДНК-ампликонами, полученными из экспрессирующих векторов растений, содержащих EXP-последовательность, управляющую экспрессией трансгена β-глюкуронидазы (GUS), и сравнены с протопластом листа, в котором экспрессия GUS управляется известными конститутивными промоторами. Более того, регуляторные элементы, управляющие экспрессией СР4 из ампликонов в протопластах кукурузы или пшеницы, могут исследоваться подобным образом.
Пример 4: Анализ регуляторных элементов, управляющих GUS в протопластах пшеницы, с использованием ампликонов кассеты трансгена GUS.
[0113] Протопласты листьев пшеницы трансформировали ДНК-ампликонами, полученными из экспрессирующих векторов растений, содержащих EXP-последовательность, управляющую экспрессией трансгена β-глюкуронидазы, и сравнивали с протопластом листа, в котором экспрессия GUS управлялась известными конститутивными промоторами.
[0114] Протопластные клетки пшеницы, полученные из ткани листа, трансформировали с использованием способов, известных в данной области, ампликонами, полученными из амплификации кассет трансгена GUS, содержащих экспрессирующие векторы растений, для сравнения экспрессии трансгена (GUS), управляемой EXP-последовательностями, перечисленными в Таблицах 10-11, с экспрессией известных конститутивных промоторов, с методологией, описанной в предыдущем примере (Пример 3), с использованием тех же самых ампликонов кассеты GUS, которые использовались для анализа кукурузы в Примере 3 выше. Контрольные ампликоны кассеты GUS и плазмиды люциферазы, используемые для трансформации протопластов пшеницы, были такими же, что и представленные в предыдущем примере и приведены в Таблице 7 выше в Примере 3. Подобным образом, для определения фона GUS и люциферазы использовали отрицателные контроли, описанные выше. Протопласты листьев пшеницы трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, как описано в Примере 3 выше. Таблица 19 дает перечень средней активности GUS и LUC, наблюдаемой в трансформированных протопластных клетках листьев пшеницы, и таблица 20 показывает нормализованные отношения GUS/RLuc экспрессии в протопластах пшеницы.
Таблица 19 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев пшеницы |
||||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc | GUS/RLuc |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 2976,33 | 53334,8 | 0,0558047 |
P-CAMV.35S-ENH-1:1:102/L-CAMV.35S-1:1:2 | 169 | 1431,33 | 55996,1 | 0,0255612 |
EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 29299,3 | 50717,4 | 0,5776973 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 34294,3 | 63307,9 | 0,5417066 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 68444,3 | 60329,1 | 1,1345158 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 60606,3 | 60659,4 | 0,9991245 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 33386,3 | 56712,1 | 0,5886984 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 43237,3 | 48263,4 | 0,8958609 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 51712,7 | 64702,8 | 0,7992341 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 20998,3 | 60273,4 | 0,3483845 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 17268,3 | 25465,4 | 0,6781084 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 34635,7 | 59467,1 | 0,5824341 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 28979 | 56153,8 | 0,516065 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 41409,7 | 55152,4 | 0,7508221 |
EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 39427,7 | 57463,1 | 0,6861388 |
EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 108091 | 49330,4 | 2,191169 |
EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 58703 | 46110,1 | 1,2731047 |
EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 29330 | 43367,1 | 0,676319 |
EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 53359 | 40076,4 | 1,3314306 |
EXP-Sv.Ubq1:1:10 | 134 | 49122,7 | 53180,8 | 0,9236922 |
EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 37268 | 54088,1 | 0,6890239 |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 51408 | 47297,4 | 1,0869087 |
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 35660,3 | 62591,1 | 0,5697347 |
EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 27543 | 57826,4 | 0,4763046 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 54493,3 | 41964,1 | 1,2985699 |
Таблица 20 Отношения GUS/RLuc экспрессии, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163), в протопластах листьев пшеницы |
|||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 0,10 |
P-CAMV.35S-ENH-1:1:102/L-CAMV.35S-1:1:2 | 169 | 0,46 | 0,04 |
EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 10,35 | 1,00 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 9,71 | 0,94 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 20,33 | 1,96 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 17,90 | 1,73 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 10,55 | 1,02 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 16,05 | 1,55 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 14,32 | 1,38 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 6,24 | 0,60 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 12,15 | 1,17 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 10,44 | 1,01 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 9,25 | 0,89 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 13,45 | 1,30 |
EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 12,30 | 1,19 |
EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 39,26 | 3,79 |
EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 22,81 | 2,20 |
EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 12,12 | 1,17 |
EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 23,86 | 2,30 |
EXP-Sv.Ubq1:1:10 | 134 | 16,55 | 1,60 |
EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 12,35 | 1,19 |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 19,48 | 1,88 |
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 10,21 | 0,99 |
EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 8,54 | 0,82 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 23,27 | 2,25 |
[0115] Как можно видеть из таблицы 20 выше, почти все EXP-последовательности были способны управлять экспрессией трансгена GUS в клетках пшеницы. Экспрессия трансгена GUS, управляемая EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1: 1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubql:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124), EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 134), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151), EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) и EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), была гораздо более высокой, чем экспрессия GUS, управляемая EXP-Os.Act1:1:9. Экспрессия ампликонов GUS в протопластных клетках пшеницы в сравнении с EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 была несколько отличающейся от экспрессии, наблюдаемой в протопластных клетках кукурузы. Каждая из EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124), EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 134), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141) и EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98) демонстрировала более высокие уровни экспрессии GUS относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1. EXP-последовательности EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151) и EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) демонстрировали более низкие уровни экспрессии GUS относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1.
[0116] Во второй серии экспериментов, кассеты ампликонов трансгена GUS готовили, как описано выше и анализировали на экспрессию, управляемую последовательностями EXP, EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116). Эти ампликоны состояли из EXP-последовательности, функционально связанной с кодирующей GUS-1 последовательностью, которая была функционально связана с T-AGRtu.nos-1:1:13 3’-UTR. Экспрессию сравнивали с контролями EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170). Таблица 21 ниже показывает средние величины GUS и люциферазы, определенные для каждого ампликона. Таблица 22 ниже показывает отношения GUS/RLuc экспрессии, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:9 и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 экспрессии, в протопластах кукурузы.
Таблица 21 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев пшеницы |
||||
ID ампликона | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1234 | 176970,5 |
PCR0145944 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 12883,5 | 119439 |
PCR0146628 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 38353,3 | 171535,3 |
PCR0145922 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 34938 | 154245,8 |
PCR0145945 | EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 32121 | 122220,8 |
PCR0145946 | EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 56814 | 143318,3 |
PCR0145947 | EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 1890,5 | 167178,5 |
Таблица 22 Отношения GUS/RLuc и GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), в протопластах листьев пшеницы |
|||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 0,06 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 15,47 | 1,00 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 32,07 | 2,07 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 32,48 | 2,10 |
EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 37,69 | 2,44 |
EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 56,85 | 3,68 |
EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 1,62 | 0,10 |
[0117] Как видно в Таблице 22 выше, эти EXP-последовательности EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116) способны управлять экспрессией трансгена. Экспрессия, управляемая EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114) и EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115), была более высокой, чем экспрессия обоих контролей. Экспрессия, управляемая EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), была более низкой, чем EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), но более высокой, чем контроль, EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179).
[0118] В третьей серии экспериментов, кассеты ампликонов трансгена GUS готовили, как описано выше, для анализа экспрессии, управляемой последовательностями EXP, EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97). Экспрессию сравнивали с контролями EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170). Таблица 23 ниже показывает средние величины GUS и люциферазы для каждого ампликона. Таблица 24 ниже показывает отношения GUS/RLuc и GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:9 и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 экспрессии, в протопластах кукурузы.
Таблица 23 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев пшеницы |
|||||
ID ампликона | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc | FLuc |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 478 | 46584,5 | 2709,75 |
PCR0145944 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 8178,5 | 43490,8 | 2927,25 |
PCR0145922 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 22068,3 | 47662,3 | 1289 |
pMON146750 | EXP-Cl.Ubq1:1:16 | 93 | 34205 | 45064,5 | 1379,63 |
pMON146751 | EXP-Cl.Ubq1:1:17 | 97 | 31758 | 45739,3 | 2820,75 |
Таблица 24 Отношения GUS/RLuc и GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), в протопластах листьев пшеницы |
||||||
ID ампликона | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/FLuc относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | GUS/FLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 1,00 | 0,05 | 0,06 |
PCR0145944 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 18,33 | 15,84 | 1,00 | 1,00 |
PCR0145922 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 45,12 | 97,05 | 2,46 | 6,13 |
pMON146750 | EXP-Cl.Ubq1:1:16 | 93 | 73,97 | 140,55 | 4,04 | 8,87 |
pMON146751 | EXP-Cl.Ubq1:1:17 | 97 | 67,67 | 63,82 | 3,69 | 4,03 |
[0119] Как можно видеть в Таблице 24 выше, последовательности EXP EXP-Cl.Ubq1:1: 10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97) были способны управлять экспрессией трансгена. Экспрессия, управляемая каждой из этих последовательностей EXP, была более высокой, чем экспрессия обоих контролей.
[0120] В четвертой серии экспериментов, кассеты ампликонов трансгена GUS готовили, как описано выше, для анализа экспрессии, управляемой EXP-последовательностями, EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149) and EXP-Cl.Ubq1:1:23 (SEQ ID NO: 108). Экспрессию сравнивали с контролями EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163). Таблица 25 ниже показывает средние величины GUS и люциферазы, определенные для каждого ампликона. Таблица 26 ниже показывает отношения экспрессии GUS/RLuc, нормализованные относительно управляемой EXP-Os.Act1:1:9 и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 экспрессии, в протопластах кукурузы.
Таблица 25 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев пшеницы |
|||||
Матрица | ID ампликона | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc |
pMON65328 | PCR0145943 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 67459,13 | 11682,00 |
pMON25455 | PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 56618,33 | 16654,83 |
pMON131962 | pMON131962 | EXP-Zm.UbqM1:1:11 | 149 | 53862,13 | 10313,75 |
pMON132047 | pMON132047 | EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | 38869,38 | 12279,00 |
Таблица 26 Отношения экспрессии GUS/RLuc, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163), в протопластах листьев пшеницы |
||||
ID ампликона | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относите-льно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 |
PCR0145943 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 1,70 | 1,00 |
PCR0145942 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 0,59 |
pMON131962 | EXP-Zm.UbqM1:1:11 | 149 | 1,54 | 0,90 |
pMON132047 | EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | 0,93 | 0,55 |
[0121] Как видно в Таблице 26 выше, последовательности EXP, EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149) и EXP-Cl.Ubq1:1:23 (SEQ ID NO: 108) были способны управлять экспрессией GUS в протопластах листьев пшеницы. Экспрессия была сходной с экспрессией контроля, EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179), и более низкой, чем экспрессия EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163).
Пример 5. Анализ регуляторных элементов, управляющих GUS в протопластах сахарного тростника, с использованием ампликонов кассеты трансгена GUS.
[0122] Протопласты листьев сахарного тростника трансформировали ДНК-ампликонами, полученными из экспрессирующих векторов растений, содержащих EXP-последовательность, управляющую экспрессией трансгена β-глюкуронидазы (GUS), и сравнивали с протопластом листа, в котором экспрессия GUS управлялась известными конститутивными промоторами.
[0123] Протопластные клетки сахарного тростника, полученные из ткани листа, трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, как описано в Примере 3 выше, с ампликонами, полученными из амплификации кассет трансгена GUS, содержащих экспрессирующие векторы растений, для сравнения экспрессии трансгена (GUS), управляемой одной из EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1: 12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1: 10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1: 14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116) и в представленной Таблице 27 ниже, с экспрессией с известными конститутивными промоторами.
Таблица 27 Ампликоны экспрессии GUS в растениях и соответствующие матрицы ампликонов плазмидных конструктов и EXP-последовательности |
|||
ID ампликона | Матрица ампликона | EXP-последовательность | SEQ ID NO: |
PCR0145942 | pMON25455 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 |
PCR0145944 | pMON81552 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 |
PCR0145892 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 |
PCR0145815 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 |
PCR0145893 | pMON136259 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 |
PCR0145817 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 |
PCR0145819 | pMON136264 | EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 |
PCR0145896 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 |
PCR0145820 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 |
PCR0145897 | pMON136258 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 |
PCR0145821 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 |
PCR0145822 | pMON136263 | EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 |
PCR0145922 | pMON140889 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 |
PCR0145945 | pMON140889 | EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 |
PCR0145946 | pMON140889 | EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 |
PCR0145947 | pMON140889 | EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 |
[0124] Контрольные ампликоны кассеты GUS и плазмиды люциферазы, используемые для трансформации протопластов сахарного тростника, были также теми же самыми, что и ампликоны и плазмиды, представленные в Примерах 2 - 4 и обеспеченные в Таблице 7 выше в Примере 3. Подобным образом, использовали отрицательные контроли для определения фона GUS и люциферазы, как описано выше. Таблица 28 дает перечень средней активности GUS и Luc, наблюдаемой в трансформированных протопластных клетках листьев сахарного тростника, и Таблица 29 показывает нормализованные отношения экспрессии GUS/RLuc в протопластах листьев сахарного тростника.
Таблица 28 Средняя активность GUS и люциферазы в трансформированных протопластных клетках листьев пшеницы |
||||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | GUS | RLuc | FLuc |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 6667,5 | 3024,5 | 1129,25 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 14872,8 | 5171 | 2019,5 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 15225 | 4618,25 | 1775,75 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 17275,3 | 4333 | 1678 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 17236 | 5633,25 | 2240 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 22487,8 | 6898,25 | 2878 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 22145,3 | 6240,25 | 2676,5 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 16796,5 | 7759,75 | 3179 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 16267,5 | 5632,75 | 2436,75 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 25351 | 9019,5 | 4313,5 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 16652,3 | 3672,25 | 1534 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 12654,5 | 3256,75 | 1261,5 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 22383,8 | 7097,5 | 3109,25 |
EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 14532,3 | 2786,5 | 1198,25 |
EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 19244,5 | 3455,25 | 1475 |
EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 6676,5 | 3870,25 | 1497,75 |
Таблица 29 Отношения GUS/RLuc и GUS/FLuc экспрессии, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), в протопластах листьев сахарного тростника |
|||||
EXP-последова-тельность | SEQ ID NO: | GUS/RLuc относите-льно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/FLuc относи-тельно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc относите-льно EXP-CaMV.35S-enh+Zm. DnaK:1:1 | GUS/FLuc относи-тельно EXP-CaMV.35S-enh+Zm. DnaK:1:1 |
EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | 1,00 | 1,00 | 0,77 | 0,80 |
EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 1,30 | 1,25 | 1,00 | 1,00 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 1,50 | 1,45 | 1,15 | 1,16 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 1,81 | 1,74 | 1,39 | 1,40 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 1,39 | 1,30 | 1,06 | 1,04 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 1,48 | 1,32 | 1,13 | 1,06 |
EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 1,61 | 1,40 | 1,23 | 1,12 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 0,98 | 0,89 | 0,75 | 0,72 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 1,31 | 1,13 | 1,00 | 0,91 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 1,27 | 1,00 | 0,98 | 0,80 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 2,06 | 1,84 | 1,58 | 1,47 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 1,76 | 1,70 | 1,35 | 1,36 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 1,43 | 1,22 | 1,10 | 0,98 |
EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 2,37 | 2,05 | 1,81 | 1,65 |
EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 2,53 | 2,21 | 1,94 | 1,77 |
EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 0,78 | 0,75 | 0,60 | 0,61 |
[0125] Как можно видеть в Таблице 29 выше, EXP-последовательности EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), все, были способны управлять экспрессией трансгена в протопластах сахарного тростника. EXP-последовательности, EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1: 1:13 (SEQ ID NO: 114) и EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) экспрессировали GUS в большей степени, чем EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), в этом эксперименте.
Пример 6: Анализ регуляторных элементов, управляющих экспрессией СР4 в протопластах кукурузы
[0126] Этот пример иллюстрирует способность EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145), EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124), EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151) и EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) управления экспрессией гена устойчивости к глифозату СР4 в протопластах кукурузы. Эти EXP-последовательности были клонированы в бинарные плазмидные конструкты для трансформации растений с использованием способов, известных в данной области. Полученные экспрессирующие векторы растений содержали правый граничный район из A. tumefaciens, EXP-последовательность убиквитина, функционально связанную 5’ (слева) с нацеленной на пластиду кодирующей последовательностью EPSPS, устойчивой к глифозату (CP4, US RE39247), функционально связанной 5’ с T-AGRtu.nos-1:1:13 3’-UTR, и левый граничный район из A. tumefaciens (B-AGRtu.left border). Полученные плазмидные конструкты использовали для трансформации протопластных клеток листьев кукурузы с использованием способов, известных в данной области.
[0127] Использовали плазмидные конструкты, приведенные в списке в Таблице 30, с EXP-последовательностью, определенной в Таблице 1. Три контрольные плазмиды (pMON30098, pMON42410 и pMON30167), с известными конститутивными регуляторными элементами, управляющими либо СР4, либо GFP, конструировали и использовали для сравнения относительных уровней экспрессии СР4, управляемой этими EXP-последовательностями, с экспрессией СР4, управляемой известными конститутивными элементами экспрессии. Две другие плазмиды (pMON19437 и pMON63934) также использовали, как описано выше, для оценивания эффективности и жизнеспособности трансформации. Каждая плазмида содержит специфическую кодирующую последовательность люциферазы, управляемую конститутивной EXP-последовательностью.
[0128] Протопласты листьев кукурузы трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, как описано в Примере 2 выше. Измерения как СР4, так и люциферазы проводили сходно с Примером 2 выше. Средние уровни экспрессии белка СР4, выраженные в ч./млн (ppm), показаны в Таблице 30 ниже.
Таблица 30 Средняя экспрессия белка СР4 в протопластах листьев кукурузы |
||||
Плазмида | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | Среднее СР4 (ч./млн) | CP4 Станд.откл.(ч./млн) |
Без ДНК | Без ДНК | 0 | 0 | |
pMON30098 | GFP | 0 | 0 | |
pMON42410 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 34,1 | 15,6 |
pMON30167 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 40,4 | 11,6 |
pMON129203 | EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 45,2 | 6,2 |
pMON129204 | EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 101,9 | 13,8 |
pMON129205 | EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | 71,1 | 8,7 |
pMON129210 | EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 137,1 | 14,8 |
pMON129211 | EXP-Zm.UbqM1:1:8 | 145 | 136,5 | 12,3 |
pMON129212 | EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 170,2 | 18,1 |
pMON129200 | EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 44,3 | 9,5 |
pMON129201 | EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 105,1 | 8,4 |
pMON129202 | EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 124,9 | 33,7 |
pMON129219 | EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 14,3 | 1 |
pMON129218 | EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 75,7 | 8,9 |
[0129] Как можно видеть в Таблице 30, EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145), EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124) и EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) управляли экспрессией трансгена CP4 при уровнях, близких или более высоких, чем уровни экспрессии СР4, управляемой EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 и EXP-Os.Act1:1:1. EXP-последовательность, EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151), демонстрировала способность управлять экспрессией CP4, но уровень экспрессии был более низким, чем уровень конститутивных контролей.
[0130] Сходные данные с данными, приведенными выше, могут быть получены из растений, стабильно трансформированных описанными выше плазмидными конструктами, например, растений генерации (генераций) потомков R0, R1 или F1 или более поздней. Подобным образом, может быть исследована экспрессия из других плазмидных конструктов. Например, pMON141619, содержит EXP-последовательность EXP-ANDge.Ubq1:1:8, тогда как pMON142862 состоит из EXP-последовательности EXP-ERIra.Ubq1:1:8. Эти и другие конструкты могут быть анализированы подобным образом.
Пример 7: Анализ регуляторных элементов, управляющих CP4 в протопластах кукурузы с использованием ампликонов кассеты трансгена СР4.
[0131] Этот пример иллюстрирует способность EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115), EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97) управления экспрессией гена устойчивости к глифозату СР4 в протопластах кукурузы. Эти EXP-последовательности клонировали в бинарные плазмидные конструкты для трансформации растений. Полученные экспрессирующие векторы растений использовали в качестве матриц амплификации для получения ампликона трансгенной кассеты, состоящего из EXP-последовательности убиквитина, функционально связанной 5’ (слева) с нацеленной на пластиду устойчивой к глифозату EPSPS кодирующей последовательностью (CP4, US RE39247), функционально связанной 5’ с T-AGRtu.nos-1:1:13 3’-UTR и левым граничным районом из A. tumefaciens. Эти полученные ампликоны использовали для трансформации протопластных клеток кукурузы.
[0132] Протопласты листьев кукурузы трансформировали с использованием способа трансформаци на основе PEG, как описано в Примере 2 выше. Измерения обоих CP4 проводили с использованием анализа на основе ELISA. Средние уровни экспрессии белка СР4, выраженные в виде ч./млн (ppm), показаны в Таблицах 31 и 32 ниже.
[0133] В первой серии экспериментов, экспрессию СР4, управляемую ампликонами, состоящими из EXP-последовательностей EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), анализировали в трансформированных протопластах листьев кукурузы и сравнивали с уровнями экспрессии CP4, управляемой конститутивными контролями, EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170) и EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164). Средние уровни экспрессии белка CP4, выраженные в виде ч./млн (ppm), показаны в Таблицах 31 ниже.
Таблица 31 Средняя экспрессия белка CP4 в протопластах листьев кукурузы |
|||||
Матрица ампликона | ID ампликона | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | CP4 нг/мг общего белка Среднее | CP4 нг/мг общего белка Станд. откл. |
без ДНК | 0,0 | 0,0 | |||
pMON30098 | GFP (отрицательный контроль) | 0,0 | 0,0 | ||
pMON19469 | PCR24 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 605,5 | 27,6 |
pMON30167 | PCR25 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 50,6 | 14,2 |
pMON140896 | PCR41 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 459,0 | 60,9 |
pMON140917 | PCR42 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 258,2 | 38,4 |
pMON140897 | PCR43 | EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 324,8 | 21,6 |
pMON140898 | PCR44 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 394,9 | 66,4 |
pMON140899 | PCR45 | EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 508,7 | 89,6 |
pMON140900 | PCR46 | EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 329,3 | 14,5 |
pMON140904 | PCR50 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 148,6 | 24,4 |
pMON140905 | PCR51 | EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 215,8 | 22,6 |
pMON140906 | PCR52 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 376,6 | 44,1 |
pMON140907 | PCR53 | EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 459,9 | 104,7 |
pMON140908 | PCR54 | EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 221,6 | 15,9 |
pMON140913 | PCR19 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 287,8 | 50,9 |
pMON140914 | PCR20 | EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 585,8 | 47,9 |
pMON140915 | PCR21 | EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 557,5 | 76,6 |
pMON140916 | PCR22 | EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 33,2 | 9,5 |
[0134] Как можно видеть в Таблице 31 выше, эти EXP-последовательности EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116) были способны управлять экспрессией СР4. Все из EXP-последовательностей, за исключением одной EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), управляли уровнями экспрессии CP4 при гораздо более высоком уровне, чем конститутивный контроль, EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164). Уровни экспрессии были более низкими, чем уровни экспрессии EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170).
[0135] Во второй серии экспериментов, экспрессию СР4, управляемую ампликонами, состоящими из EXP-последовательностей EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97), анализировали в трансформированных протопластах листьев кукурузы и сравнивали с уровнями экспрессии СР4, управляемыми конститутивным контролем, EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164). Эти средние уровни экспрессии белка СР4, выраженные в виде ч./млн (ppm), показаны в Таблицах 32 ниже.
Таблица 32 Средняя экспрессия белка СР4 в протопластах листьев кукурузы |
|||||
Матрица ампликона | ID ампликона | EXP-последовате-льность | SEQ ID NO: | СР4 листа кукурузы, мг/общий белок Среднее | СР4 листа кукурузы, мг/общий белок Станд. откл. |
pMON30167 | PCR25 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 12,2 | 1,69 |
pMON140913 | PCR19 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 307,5 | 24,21 |
pMON142748 | pMON142748 | EXP-Cl.Ubq1:1:16 | 93 | 245,95 | 30,14 |
pMON142749 | pMON142749 | EXP-Cl.Ubq1:1:17 | 97 | 302,85 | 25,32 |
[0136] Как показано в Таблице 32 выше, EXP-последовательности EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97) были способны управлять экспрессией CP4. Уровни экспрессии, управляемой всеми тремя EXP-последовательностями, были более высокими, чем уровни экспрессии конститутивного контроля, EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164).
Пример 8: Анализ регуляторных элементов, управляющих СР4 в протопластах пшеницы.
[0137] Этот пример иллюстрирует способность EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145), EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124), EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151) и EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) управлять экспрессией СР4 в протопластах листьев пшеницы. Эти EXP-последовательности клонировали в бинарные плазмидные конструкты для трансформации растений с использованием способов, известных в данной области, и способов, описанных в Примерах 2 и 5 выше.
[0138] Три контрольные плазмиды (pMON30098, pMON42410, описанные ранее, и pMON43647, содержащие правый граничный район из Agrobacterium tumefaciens с EXP-Os.Actl+CaMV.35S.2xAl-B3+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 138), функционально связанной 5’ (слева) с нацеленной на пластиду кодирующей последовательностью устойчивости к глифозату (CP4, US RE39247), функционально связанной 5’ (слева) с T-AGRtu.nos-1:1:13, и левый граничный район (B-AGRtu.left border) с известными конститутивными регуляторными элементами, управляющими либо CP4, либо GFP, конструировали, как описано в Примере 5.
[0139] Протопласты листьев пшеницы трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, как описано в предыдущих примеров, за исключением, того, что использовали 1,5 × 105 протопластных клеток на анализ. Анализы экспрессии люциферазы и трансгена CP4 выполняли, как описано в Таблице 34 ниже.
Таблица 34 Средняя экспрессия белка СР4 в протопластных клетках листьев пшеницы |
||||
Плазмида | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | CP4 Среднее, ч./млн | CP4 Станд. откл., ч./млн |
Без ДНК | Без ДНК | 0 | 0 | |
pMON30098 | GFP | 0 | 0 | |
pMON43647 | EXP-Os.Act1+CaMV.35S,2xA1-B3+Os.Act1:1:1 | 172 | 656,2 | 124,5 |
pMON42410 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | 438,3 | 78,9 |
pMON30167 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 583 | 107,4 |
pMON129203 | EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 156,9 | 25,1 |
pMON129204 | EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 39,5 | 7 |
pMON129205 | EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | 154,5 | 56,5 |
pMON129210 | EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 1500 | 0 |
pMON129211 | EXP-Zm.UbqM1:1:8 | 145 | 199,7 | 64,9 |
pMON129212 | EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 234,6 | 66,9 |
pMON129200 | EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 725,7 | 149,7 |
pMON129201 | EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 64,9 | 14,5 |
pMON129202 | EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 122,9 | 48,7 |
pMON129219 | EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 113,1 | 32,8 |
[0140] Общая величина экспрессии CP4 в протопластах пшеницы, управляемой EXP-последовательностями и известной конститутивной EXP-последовательностью EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1, продемонстрировала различные уровни экспрессии СР4 в протопластах пшеницы при сравнении с протопластами кукурузы.
[0141] Несколько EXP-последовательностей управляли экспрессией CP4 при более низких уровнях в протопластах пшеницы, чем известные конститутивные EXP-последовательности EXP-Os.Actl+CaMV.35S.2xAl-B3+Os.Act1:1:1 и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1. Две EXP-последовательности, EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137) и EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), обеспечивают более высокие уровни экспрессии CP4 в протопластах пшеницы, чем известные конститутивные EXP-последовательности в этом анализе. EXP-Zm.UbqM1:1:2 управляла экспрессией CP4 при наивысшем уровне, с уровнями экспрессии, в 2,2-3,4 раза более высокими, чем EXP-Os.Actl+CaMV.35S.2xAl-B3+Os.Act1:1:1 и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1, соответственно. Все анализированные EXP-последовательности демонстрировали способность управлять экспрессией СР4 в клетках пшеницы.
Пример 9: Анализ регуляторных элементов, управляющих СР4 в протопластах пшеницы с использованием ампликонов кассеты трансгена СР4.
[0142] Этот пример иллюстрирует способность EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:ll (SEQ ID NO: 14), EXP- ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115), EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97) управления экспрессией гена устойчивости к глифозату СР4 в протопластах пшеницы. Эти EXP-последовательности клонировали в бинарные плазмидные конструкты для трансформации растений. Полученные экспрессирующие векторы растений использовали в качестве матриц амплификации для получения ампликона трансгенной кассеты, состоящего из EXP-последовательности убиквитина, функционально связанной 5’ с нацеленной на пластиду кодирующей последовательностью EPSPS, устойчивой к глифозату (CP4, US RE39247), функционально связанной 5’ с T-AGRtu.nos-1:1:13 3-UTR, и левого граничного района из A. tumefaciens. Полученные ампликоны использовали для трансформации протопластных клеток листьев кукурузы.
[0143] Протопласты листьев пшеницы трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, как описано в Примере 2 выше. Измерения обоих СР4 проводили с использованием анализа на основе ELISA. Средние уровни экспрессии белка CP4, выраженные как ч./млн (ppm), показаны в Таблицах 35 и 36 ниже.
[0144] В первой серии экспериментов, экспрессию СР4, управляемую ампликонами, состоящими из EXP-последовательностей EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), анализировали в трансформированных протопластах листьев пшеницы и сравнивали с уровнями экспрессии СР4, управляемыми конститутивными контролями, EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170) и EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164). Средние уровни экспрессии белка СР4, выраженные в виде ч./млн (ppm), показаны в таблице 35 ниже.
Таблица 35 Средняя экспрессия белка СР4 в протопластах листьев пшеницы |
|||||
Матрица ампликона | ID амплико-на | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | CP4 нг/мл общего белка (Среднее) | CP4 нг/мг общего белка (Станд. откл.) |
без ДНК | 0,00 | 0,00 | |||
pMON30098 | GFP (отрицательный контроль) | 0,00 | 0,00 | ||
pMON19469 | PCR24 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 76,11 | 18,65 |
pMON30167 | PCR25 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 3,83 | 0,73 |
pMON140896 | PCR41 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 103,46 | 16,31 |
pMON140917 | PCR42 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 61,48 | 1,99 |
pMON140897 | PCR43 | EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 62,65 | 4,58 |
pMON140898 | PCR44 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 48,74 | 3,09 |
pMON140899 | PCR45 | EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 54,91 | 3,50 |
pMON140900 | PCR46 | EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 42,81 | 5,97 |
pMON140904 | PCR50 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 31,26 | 1,69 |
pMON140905 | PCR51 | EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 49,82 | 5,96 |
pMON140906 | PCR52 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 37,43 | 4,52 |
pMON140907 | PCR53 | EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 27,17 | 0,96 |
pMON140908 | PCR54 | EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 17,41 | 4,13 |
pMON140913 | PCR19 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 66,66 | 13,45 |
pMON140914 | PCR20 | EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 79,42 | 10,74 |
pMON140915 | PCR21 | EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 75,53 | 9,32 |
pMON140916 | PCR22 | EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 0,00 | 0,00 |
[0145] Как можно видеть в Таблице 31 выше, EXP-последовательности EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116) были способны управлять экспрессией СР4. Все из EXP-последовательностей, за исключением одной EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), управляли уровнями экспрессии CP4 при гораздо более высоком уровне, чем конститутивный контроль, EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164). Уровни экспрессии были около того же самого уровня или более низкими, чем уровень экспрессии EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170), для большинства EXP-последовательностей.
[0146] Во второй серии экспериментов, экспрессию СР4, управляемую ампликонами, состоящими из EXP-последовательностей EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97), анализировали в трансформированных протопластах листьев пшеницы и сравнивали с уровнями экспрессии CP4, управляемой конститутивным контролем, EXP-Os.Actl:l:l (SEQ ID NO: 164). Средние уровни экспрессии белка СР4, выраженные в виде ч./млн (ppm), показаны в таблице 36 ниже.
Таблица 36 Средняя экспрессия белка СР4 в протопластах листьев пшеницы |
|||||
Матрица ампликона | ID ампликона | EXP-последова-тельность | SEQ ID NO: | СР4 листьев кукурузы (мг/общий белок) Среднее | СР4 листьев кукурузы (мг/общий белок) Станд. откл. |
pMON30167 | PCR25 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 15,84 | 2,12 |
pMON140913 | PCR19 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 736,32 | 79,56 |
pMON142748 | pMON142748 | EXP-Cl.Ubq1:1:16 | 93 | 593,72 | 80,22 |
pMON142749 | pMON142749 | EXP-Cl.Ubq1:1:17 | 97 | 763,95 | 86,94 |
[0147] Как можно видеть в Таблице 36 выше, EXP-последовательности EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:16 (SEQ ID NO: 93) и EXP-Cl.Ubq1:1:17 (SEQ ID NO: 97) были способны управлять экспрессией СР4. Уровни экспрессии, управляемые всеми тремя EXP-последовательностями, были более высокими, чем уровни экспрессии конститутивного контроля, EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164).
Пример 10: Анализ регуляторных элементов, управляющих СР4 в протопластах сахарного тростника.
[0148] Этот пример иллюстрирует способность EXP-Sv.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 128), EXP-Sv.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 132), EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133), EXP-Zm.UbqM1:1:6 (SEQ ID NO: 137), EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145), EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), EXP-SETit.Ubq1:1:5 (SEQ ID NO: 117), EXP-SETit.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 123), EXP-SETit.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 124), EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151), EXP-Sb.Ubq6:1:2 (SEQ ID NO: 153) and EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98) управления экспрессией СР4 в протопластах сахарного тростника. Эти EXP-последовательности клонировали в бинарные плазмидные конструкты для трансформации в растениях. Полученные векторы содержали правый граничный район из Agrobacterium tumefaciens, EXP-последовательность убиквитина, функционально связанную 5’ с нацеленной на пластиду кодирующей последовательностью устойчивой к глифозату EPSPS (CP4, US RE39247), функционально связанной 5’ (слева) с T-AGRtu.nos-1:1:13 (CP4, US RE39247), (SEQ ID NO: 127) или T-CaMV.35S-1:1:1 (SEQ ID NO: 140) 3’-UTR, и левый граничный район из A. tumefaciens (B-AGRtu.left border). Полученные плазмидные конструкты использовали для трансформации протопластных клеток листьев сахарного тростника с использованием способа трансформации на основе PEG.
[0149] Плазмидные конструкты pMON129203, pMON12904, pMON12905, pMON129210, pMON129211, pMON129212, pMON129200, pMON129201, pMON129202, pMON129219 и pMON129218 представлены в Таблице 12 выше.
[0150] Три контрольные плазмиды (pMON30167, описанную выше; pMON130803, также содержащую EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164); и pMON132804, содержащую EXP-P-CaMV.35S-enh-1:1:13/L-CaMV.35S-1:l:2/I-Os.Actl-1:1:19 (SEQ ID NO: 139), с известными конститутивными регуляторными элементами, управляющими СР4, конструировали и использовали для сравнения относительных уровней экспрессии СР4, управляемых убиквитиновыми EXP-последовательностями, приведенными в списке в Таблице 37 ниже.
[0151] Протопласты листьев сахарного тростника трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG. Средние уровни экспрессии СР4, определенные при помощи ELISA СР4, представлены в Таблице 37 ниже.
Таблица 37 Средняя экспрессия белка СР4 в протопластных клетках листьев сахарного тростника |
||||||
Эксперимент 1 | Эксперимент 2 | |||||
Плазмидный конструкт | EXP-последовательность | SEQ ID NO: | CP4 Сред-нее (ч/ млн) |
CP4 Станд. откл. (ч/ млн) |
CP4 Сред-нее (ч/ млн) |
CP4 Станд. откл. (ч/ млн) |
pMON132804 | EXP-P-CaMV.35S-enh-1:1:13/L-CaMV.35S-1:1:2/I-Os.Act1-1:1:19 | 173 | 557,97 | 194,05 | 283,63 | 95,8 |
pMON30167 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 57,15 | 20,99 | 18,36 | 5,41 |
pMON130803 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 34,26 | 1,61 | 16,57 | 3,71 |
pMON129203 | EXP-Sv.Ubq1:1:7 | 128 | 89,2 | 32,46 | 56,86 | 9,55 |
pMON129204 | EXP-Sv.Ubq1:1:8 | 132 | 87,2 | 45,87 | 98,46 | 12,93 |
pMON129205 | EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | 263,57 | 70,14 | 72,53 | 9,25 |
pMON129210 | EXP-Zm.UbqM1:1:6 | 137 | 353,08 | 29,16 | 199,31 | 41,7 |
pMON129211 | EXP-Zm.UbqM1:1:8 | 145 | 748,18 | 15,1 | 411,24 | 17,12 |
pMON129212 | EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 454,88 | 75,77 | 215,06 | 23,22 |
pMON129200 | EXP-SETit.Ubq1:1:5 | 117 | 150,74 | 63,21 | 91,71 | 41,35 |
pMON129201 | EXP-SETit.Ubq1:1:7 | 123 | 119,57 | 58,1 | 102,72 | 31,12 |
pMON129202 | EXP-SETit.Ubq1:1:6 | 124 | 43,79 | 25,77 | 97,63 | 46,07 |
pMON129219 | EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 95,63 | 38,69 | ||
pMON129218 | EXP-Sb.Ubq6:1:2 | 153 | 343,34 | 119,2 | 179,75 | 51,16 |
pMON129221 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 374,8 | 205,28 | 258,93 | 38,03 |
[0152] Как можно видеть в Таблице 37 выше, эти EXP-последовательности демонстрировали способность управления экспрессией СР4 в протопластах сахарного тростника. Уровни экспрессии были сходными или более высокими, чем экспрессия СР4, управляемая EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164). Одна EXP-последовательность, EXP-Zm.UbqM1:1:8 (SEQ ID NO: 145), демонстрировала более высокие уровни экспрессии в сравнении с EXP-P-CaMV.35S-enh-1:1:13/L-CaMV.35S-1:1:2/I-Os.Act1-1:1:19 (SEQ ID NO: 139) в протопластах сахарного тростника.
Пример 11: Анализ регуляторных элементов, управляющих СР4 в протопластах сахарного тростника с использованием ампликонов кассеты трансгена СР4.
[0153] Этот пример иллюстрирует способность EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116) управления экспрессией гена устойчивости к глифозату CP4 в протопластах сахарного тростника. Эти EXP-последовательности клонировали в бинарные плазмидные конструкты для трансформации растений. Полученные экспрессирующие векторы растений использовали в качестве матриц амплификации для обеспечения ампликона трансгенной кассеты, состоящего из убиквитиновой EXP-последовательности, функционально связанной 5’ с нацеленной на пластиду кодирующей последовательностью, устойчивой к глифозату EPSPS (CP4, US RE39247), функционально связанной 5’ с T-AGRtu.nos-1:1:13 3’-UTR, и левого граничного района из A. tumefaciens. Полученные ампликоны использовали для трансформации протопластных клеток сахарного тростника.
[0154] Протопласты листьев сахарного тростника трансформировали с использованием способа трансформации на основе PEG, как описано в Примере 2 выше. Измерения обоих СР4 проводили с использованием анализа на основе ELISA.
[0155] Экспрессия CP4, управляемая ампликонами, состоящими из EXP-последовательностей EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114), EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) и EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), анализировали в трансформированных протопластах листьев пшеницы и сравнивали с уровнями экспрессии, управляемыми конститутивными контролями, EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 (SEQ ID NO: 170) и EXP-Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 164). Средние уровни экспрессии белка СР4, выраженные в ч./млн (ppm), показаны в Таблице 38 ниже.
Таблица 38 Средняя экспрессия белка СР4 в протопластах листьев сахарного тростника |
|||||
Матрица ампликона | ID ампли-кона | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | CP4 нг/мг общего белка (Среднее) |
CP4 нг/мг общего белка (Станд. откл.) |
pMON19469 | PCR24 | EXP-CaMV.35S-enh+Zm.DnaK:1:1 | 170 | 99,6 | 7,2 |
pMON30167 | PCR25 | EXP-Os.Act1:1:1 | 164 | 0,0 | 0,0 |
pMON140896 | PCR41 | EXP-ANDge.Ubq1:1:7 | 5 | 21,9 | 3,3 |
pMON140917 | PCR42 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 15,4 | 1,9 |
pMON140897 | PCR43 | EXP-ANDge.Ubq1:1:10 | 10 | 20,7 | 2,2 |
pMON140898 | PCR44 | EXP-ANDge.Ubq1:1:6 | 12 | 21,8 | 2,8 |
pMON140899 | PCR45 | EXP-ANDge.Ubq1:1:11 | 14 | 36,9 | 7,2 |
pMON140900 | PCR46 | EXP-ANDge.Ubq1:1:12 | 16 | 51,7 | 5,6 |
pMON140904 | PCR50 | EXP-ERIra.Ubq1:1:9 | 22 | 10,3 | 1,1 |
pMON140905 | PCR51 | EXP-ERIra.Ubq1:1:10 | 25 | 25,3 | 4,7 |
pMON140906 | PCR52 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 29,9 | 4,6 |
pMON140907 | PCR53 | EXP-ERIra.Ubq1:1:11 | 29 | 44,0 | 7,1 |
pMON140908 | PCR54 | EXP-ERIra.Ubq1:1:12 | 31 | 37,0 | 5,4 |
pMON140913 | PCR19 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 19,2 | 1,3 |
pMON140914 | PCR20 | EXP-Cl.Ubq1:1:13 | 114 | 20,5 | 2,1 |
pMON140915 | PCR21 | EXP-Cl.Ubq1:1:14 | 115 | 23,2 | 1,6 |
pMON140916 | PCR22 | EXP-Cl.Ubq1:1:15 | 116 | 0,0 | 0,0 |
[0156] Как можно видеть в Таблице 38 выше, EXP-последовательности EXP-ANDge.Ubq1:1:7 (SEQ ID NO: 5), EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ANDge.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 10), EXP-ANDge.Ubq1:1:6 (SEQ ID NO: 12), EXP-ANDge.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 14), EXP-ANDge.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 16), EXP-ERIra.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 22), EXP-ERIra.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 25), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-ERIra.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 29), EXP-ERIra.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 31), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Cl.Ubq1:1:13 (SEQ ID NO: 114) и EXP-Cl.Ubq1:1:14 (SEQ ID NO: 115) были способны управлять экспрессией СР4. EXP-Cl.Ubq1:1:15 (SEQ ID NO: 116), по-видимому, не управляла экспрессией СР4 в этом анализе.
Пример 12: Анализ регуляторных элементов, управляющих GUS в трансгенной кукурузе.
[0157] Растения кукурузы трансформировали экспрессирующими векторами растений, содержащими EXP-последовательности, управляющие экспрессией трансгена β-глюкуронидазы (GUS), и полученные растения анализировали на экспрессию белка GUS. Эти убиквитиновые EXP-последовательности клонировали в бинарные плазмидные конструкты для трансформации растений с использованием способов, известных в данной области.
[0158] Эти полученные экспрессирующие векторы растений содержат правый граничный район из A. tumefaciens, первую трансгенную кассету для анализа EXP-последовательности, функционально связанной с кодирующей последовательностью для β-глюкуронидазы (GUS), которая имеет процессируемый интрон GUS-2, описанный выше, функционально связанный 5’ с 3’-UTR из гена переносящего липид белка риса (T-Os.LTP-1:1:1, SEQ ID NO: 141); вторую трансгенную селекционную кассету, используемую для селекции трансформированных клеток растений, которая придает устойчивость к гербициду глифозату (управляемую промотором Актина 1 риса), и левый граничный район из A. tumefaciens. Полученные плазмиды использовали для трансформации растений кукурузы. Таблица 39 дает список обозначений плазмид, EXP-последовательностей и SEQ ID NO, которые также приведены в Таблице 1.
Таблица 39 Бинарные плазмиды для трансформации растений и ассоциированные EXP-последовательности |
|||
Плазмидный конструкт | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | Срок |
pMON142865 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | R0 и R1 |
pMON142864 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | R0 и R1 |
pMON142729 | EXP-Cl.Ubq1:1:12 | 90 | R0 |
pMON142730 | EXP-Cl.Ubq1:1:11 | 95 | R0 |
pMON132047 | EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | R0 |
pMON132037 | EXP-SETit.Ubq1:1:10 | 119 | R0 и F1 |
pMON131957 | EXP-SETit.Ubq1:1:11 | 125 | F1 |
pMON131958 | EXP-Sv.Ubq1:1:11 | 130 | R0 и F1 |
pMON131959 | EXP-Sv.Ubq1:1:12 | 136 | R0 |
pMON131961 | EXP-Zm.UbqM1:1:10 | 139 | R0 |
pMON131963 | EXP-Zm.UbqM1:1:12 | 143 | R0 |
pMON131962 | EXP-Zm.UbqM1:1:11 | 149 | R0 |
pMON132932 | EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | R0 |
pMON132931 | EXP-Sb.Ubq6:1:3 | 155 | R0 |
pMON132974 | EXP-Sb.Ubq7:1:2 | 157 | R0 и F1 |
[0159] Растения трансформировали с использованием Agrobacterium-опосредуемых трансформаций, например, как описано в Публикации заявки на патент США 200901389985.
[0160] Для количественного анализа экспрессии трансформированных растений использовали гистохимический анализ GUS. Срезы цельной ткани инкубировали с раствором для окрашивания GUS X-Gluc (5-бром-4-хлор-3-индолил-β-глюкуронид) (1 миллиграмм/миллилитр) в течение подходящего периода времени, промывали, и визуально исследовали на синюю окраску. Активность GUS количественно определяли прямой визуальной инспекцией или инспекцией под микроскопом с использованием выбранных органов и тканей растений. R0-растения обследовали на экспрессию в корнях и листьях, а также в пыльнике, шелке и развивающихся семенах и зародыше, спустя 21 день после опыления (21 DAP).
[0161] Для количественных анализов, общий белок экстрагировали из выбранных тканей трансформированных растений кукурузы. Один микрограмм общего белка использовали с флуорогенным субстратом 4-метилеумбеллиферил-β-D-глюкуронидом (MUG) в общем объеме реакции 50 микролитров. Продукт реакции 4-метилеумбеллиферон (4-MU), является максимально флуоресцентным при высоком рН, где гидроксильная группа является ионизированной. Добавление щелочного раствора карбоната натрия одновременно останавливает этот анализ, и корректирует рН для количественного определения флуоресцентного продукта. Флуоресценцию измеряли с возбуждением при 365 нм, эмиссией при 445 нм с использованием Fluoromax-3 (Horiba; Kyoto, Japan) с Micromax Reader, с шириной щелевой головки, установленной при возбуждении 2 нм и эмиссии 3 нм.
[0162] Средняя экспрессия R0 GUS, наблюдаемая для каждой трансформации, представлена в Таблицах 40 и 41 ниже. Анализ R0 GUS, выполняемый на трансформантах, трансформированных pMON131957 (EXP-SETit.Ubq1:1:11, SEQ ID NO: 125), не прошел стандарты качества. Эти трансформанты были анализированы в генерации F1, и представлены дополнительно ниже в этом примере.
Таблица 40 Средняя экспрессия R0 GUS в ткани корня и листьев |
||||||||||||||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | V3 Корень | V4 Корень | V7 Корень | VT Корень | V3 Лист | V4 Лист | V7 Лист | VT Лист | |||||
EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | nd | 255 | 199 | 70 | nd | 638 | 168 | 130 | |||||
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | nd | 477 | 246 | 62 | nd | 888 | 305 | 242 | |||||
EXP-Cl.Ubq1:1:12 | 90 | nd | 27 | 147 | 52 | nd | 75 | 189 | 199 | |||||
EXP-Cl.Ubq1:1:11 | 95 | nd | 28 | 77 | 50 | nd | 101 | 177 | 223 | |||||
EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | 0 | nd | 75 | 34 | 201 | nd | 194 | 200 | |||||
EXP-SETit.Ubq1:1:10 | 119 | 0 | nd | 29 | 57 | 58 | nd | 37 | 46 | |||||
EXP-Sv.Ubq1:1:11 | 130 | nd | nd | nd | 9 | 20 | nd | 55 | 29 | |||||
EXP-Sv.Ubq1:1:12 | 136 | 63 | nd | 0 | 28 | 184 | nd | 27 | 16 | |||||
EXP-Zm.UbqM1:1:10 | 139 | 0 | nd | 237 | 18 | 221 | nd | 272 | 272 | |||||
EXP-Zm.UbqM1:1:12 | 143 | 0 | nd | 21 | 43 | 234 | nd | 231 | 196 | |||||
EXP-Zm.UbqM1:1:11 | 149 | 124 | nd | 103 | 112 | 311 | nd | 369 | 297 | |||||
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 125 | nd | 0 | 95 | 233 | nd | 150 | 88 | |||||
EXP-Sb.Ubq6:1:3 | 155 | 154 | nd | 13 | 128 | 53 | nd | 39 | 55 | |||||
EXP-Sb.Ubq7:1:2 | 157 | 37 | nd | 22 | 18 | 165 | nd | 89 | 177 | |||||
nd - не определяли. | ||||||||||||||
Таблица 41 Средняя экспрессия R0 GUS в репродуктивных органах кукурузы (пыльнике, шелке) и развивающихся семенах (зародыше и эндосперме) |
||||||||||||||
EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | VT Пыльник | VT/R1 Шелк | 21 DAP Зародыш | 21 DAP Эндосперм | |||||||||
EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 247 | 256 | 24 | 54 | |||||||||
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 246 | 237 | 36 | 61 | |||||||||
EXP-Cl.Ubq1:1:12 | 90 | 420 | 121 | 26 | 220 | |||||||||
EXP-Cl.Ubq1:1:11 | 95 | 326 | 227 | 41 | 221 | |||||||||
EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | 598 | 416 | 212 | 234 | |||||||||
EXP-SETit.Ubq1:1:10 | 119 | 132 | 85 | 50 | 63 | |||||||||
EXP-Sv.Ubq1:1:11 | 130 | 217 | 3 | 45 | 92 | |||||||||
EXP-Sv.Ubq1:1:12 | 136 | 120 | 21 | 49 | 112 | |||||||||
EXP-Zm.UbqM1:1:10 | 139 | 261 | 506 | 403 | 376 | |||||||||
EXP-Zm.UbqM1:1:12 | 143 | 775 | 362 | 253 | 247 | |||||||||
EXP-Zm.UbqM1:1:11 | 149 | 551 | 452 | 234 | 302 | |||||||||
EXP-Sb.Ubq4:1:2 | 151 | 213 | 0 | 25 | 79 | |||||||||
EXP-Sb.Ubq6:1:3 | 155 | 295 | 87 | 51 | 61 | |||||||||
EXP-Sb.Ubq7:1:2 | 157 | 423 | 229 | 274 | 90 |
[0163] В растения R0 кукурузы, уровни экспрессии GUS в листе и корне различались среди убиквитиновых EXP-последовательностей. Хотя все из EXP-последовательностей демонстрировали способность управлять экспрессией трансгена GUS в стабильно трансформированных растениях, каждая EXP-последовательность демонстрировала уникальный паттерн (характер) экспрессии относительно других последовательностей. Например, высокие уровни экспрессии GUS наблюдались в ранних стадиях развития корня (V4 и V7) для EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8) и EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27) и снижались посредством VT-стадии. Экспрессия корней, управляемая EXP-Zm.UbqM1:1:10 (SEQ ID NO: 139), не демонстрировала экспрессии при V3, но была высокой при V7 и затем снижалась посредством VT-стадии. Экспрессия корней, управляемая EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149), сохранялась до сходного уровня на протяжении развития от стадий V3, V7 - VT. Наблюдали, что экспрессия корня увеличивается от раннего развития (V3/V4) до стадии V7 и затем снижается от стадии V7 до стадии V8 в растениях, трансформированных EXP-Cl.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 90), EXP-Cl.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 95) и EXP-Cl.Ubq1:1:23 (SEQ ID NO: 108). Уровни экспрессии GUS показывали также существенные различия в ткани листа. Наивысшие уровни экспрессии листа придавались в раннем развитии (V3/V4) с EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8) и EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), которые снижались при стадии V7 - VT. Экспрессия GUS поддерживается от стадии V3 - стадии VT с использованием EXP-Zm.UbqM1:1:10 (SEQ ID NO: 139), EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149), EXP-Zm.UbqM1:1:12 (SEQ ID NO: 143) и EXP-Cl.Ubq1:1l:23 (SEQ ID NO: 108); и до более низкой степени с использованием EXP-SETit.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 119) и EXP-Sb.Ubq6:1:3 (SEQ ID NO: 155). Экспрессия в листе увеличивалась от V3- до V7- до VT-стадии с использованием EXP-Cl.Ubq1:1: 12 (SEQ ID NO: 90), EXP-Cl.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 95) и EXP-Cl.Ubq1:1:23 (SEQ ID NO: 108), тогда как экспрессия снижалась от стадии V3 до стадии VT с использованием EXP-Sv.Ubq1:1:12 (SEQ ID NO: 136) и EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151).
[0164] Подобным образом, в отношении репродуктивной ткани (пыльника и шелка) и развития семян ((21DAP-зародыша и эндосперма) наблюдали различные паттерны (характеры) экспрессии, уникальные для каждой EXP-последовательности. Например, высокие уровни экспрессии наблюдали в пыльнике и шелке, а также развитии семян с использованием EXP-Zm.UbqM1:1:10 (SEQ ID NO: 139), EXP-Zm.UbqM1:1:11 (SEQ ID NO: 149), EXP-Zm.UbqM1:1:12 (SEQ ID NO: 143) и EXP-Cl.Ubq1:1:23 (SEQ ID NO: 108). Экспрессия была высокой в пыльнике и шелке, но низкой в развивающихся семенах с использованием EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8) и EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27). Экспрессия, управляемая EXP-Sb.Ubq7:1:2 (SEQ ID NO: 157), была высокой в репродуктивной ткани и высокой в развивающемся зародыше, но низкой в развивающемся эндосперме. EXP-последовательность, EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151) демонстрировала экспрессию в пыльнике, но не в шелке и экспрессировалась гораздо более низко в развивающихся семенах. EXP-Sv.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 130) демонстрировала сходный паттерн с паттерном EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151) в отношении репродуктивной ткани и развивающихся семян, тогда как EXP-Sb.Ubq4:1:2 (SEQ ID NO: 151) обнаруживала экспрессию в тканях корня и листа, EXP-Sv.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 130) экспрессировалась гораздо более низко в тех же самых тканях.
[0165] Трансформанты R0 генерации, отобранные на инсерции с одной копией, скрещивались с нетрансгенной линией LH244 (с получением F1) или самоопылялись (с получением R1) для получения F1- или R1-популяции семян. В каждом случае, гетерозиготные растения F1 или R1 отбирали для исследования. Уровни экспрессии GUS измеряли в отобранных тканях на протяжении хода развития, как описано ранее. Ткани F1 или R1, используемые для этого исследования, включали в себя: насыщенный влагой зародыш, насыщенный влагой эндосперм семян, корень и колеоптиль при 4 днях после проращивания (DAG); лист и корень в стадии V3; корень и зрелый лист в стадии V8; корень, зрелые листья, стадию VT (при выбрасывании метелки, перед репродукцией) пыльник, пыльцу, лист и стареющий лист; R1 сердцевина кукурузного початка, шелк, корень и междоузлие; зерно 12 дней после опыления (DAP) и; зародыш и эндосперм 21 и 38 DAP. Пробы отобранных тканей также анализировали для F1-растений, подвергаемых условиям вызванного засухой стресса и вызванного холодом стресса, для трансформантов, содержащих pMON132037 (EXP-SETit.Ubq1:1:10, SEQ ID NO: 119), pMON131957 (EXP-SETit.Ubq1:1:11, SEQ ID NO: 125), pMON131958 (EXP-Sv.Ubq1:1:11, SEQ ID NO: 130) и pMON132974 (EXP-Sb.Ubq7:1:2, SEQ ID NO: 157). Ткани корня и листа V3 использовали для взятия проб после подвергания действию холода и засухи.
[0166] Вызванный засухой стресс индуцировали в F1, V3 растениях, трансформированных pMON132037 (EXP-SETit.Ubq1:1:10, SEQ ID NO: 119), pMON131957 (EXP-SETit.Ubq1:1:11, SEQ ID NO: 125), pMON131958 (EXP-Sv.Ubq1:1:11, SEQ ID NO: 130) и pMON132974 (EXP-Sb.Ubq7:1:2, SEQ ID NO: 157), отменой полива в течение 4 дней, позволяющей уменьшение содержания влаги по меньшей мере 50% исходного содержания влаги, полностью поливаемого растения. Протокол засухи содержал в основном следующие стадии. Растения стадии V3 были лишены воды. Когда растение кукурузы испытывает засуху, форма листа будет изменяться от обычно здорового и не сложенного вида в лист, демонстрирующий укладку в пучок сосудистых средних жилок и предстающий в форме V, при рассматривании от кончика листа к стеблю. Это изменение в морфологии обычно начинает встречаться при приблизительно 2 днях после прекращения полива, и в более ранних экспериментах было показано, что это изменение ассоциировано с потерей воды около 50%, как измерено по массе сосудов перед прекращением полива и массе сосудов, когда наблюдали морфологию курчавости листьев в неполивавшихся растениях. Считается, что растения находятся в условиях засухи, когда листья, обнаруживали завядание, о котором свидетельствует закручивание внутрь (V-форма) этого листа. Считается, что этот уровень стресса является формой сублетального стресса. Как только каждое растение демонстрировало индукцию засухи, определенную выше, это растение разрушали для получения проб как корня, так и листа.
[0167] Кроме засухи, растения стадии V3, трансформированные pMON132037 (EXP-SETit.Ubq1:1:10, SEQ ID NO: 119), pMON131957 (EXP-SETit.Ubq1:1:11, SEQ ID NO: 125), pMON131958 (EXP-Sv.Ubq1:1:11, SEQ ID NO: 130) и pMON132974 (EXP-Sb.Ubq7:1:2, SEQ ID NO: 157), подвергали условиям холода для определения, демонстрировали ли регуляторные элементы индуцированную холодом экспрессию GUS. Целые растения анализировали на индукцию экспрессии GUS под холодным стрессом в стадии V3. Растения кукурузы стадии V3 подвергали температуре 12ºC в камере для выращивания в течение 24 часов. Растения в камере для выращивания росли под интенсивностью дневного света 800 микромолей на квадратный метр в секунду со световым циклом десять часов дневного света и четырнадцать часов темноты. После подвергания холоду, брали пробы тканей листа и корня для количественной экспрессии GUS.
[0168] Экспрессию GUS измеряли, как описано выше. Средняя экспрессия F1 GUS, определенная для каждой пробы ткани, представлена в таблицах 42 и 43 ниже.
Таблица 42 Средняя экспрессия F1 GUS в растениях, трансформированных pMON142864 и pMON142865 |
||
Орган | pMON142864 | pMON142865 |
V3 Лист | 86 | 74 |
V3 Корень | 41 | 52 |
V8 Лист | 109 | 123 |
V8 Корень | 241 | 252 |
VT Цветок, пыльники | 168 | 208 |
VT Лист | 158 | 104 |
R1 Середина кукурузного початка | 171 | 224 |
R1 шелк | 314 | 274 |
R1 Корень | 721 | 308 |
R1 междоузлие | 428 | 364 |
R2 Семена-12DAP | 109 | 72 |
R3 Зародыш семян 21DAP | 45 | 32 |
R3 Эндосперм семян 21DAP | 175 | 196 |
R5 Зародыш семян 38DAP | 163 | 58 |
R5 Эндосперм семян 38DAP | 90 | 69 |
Таблица 43 Средняя экспрессия F1 GUS в растениях, трансформированных pMON132037, pMON131957, pMON131958 и pMON132974 |
||||
Орган | pMON132037 | pMON131957 | pMON131958 | pMON132974 |
Насыщенный влагой зародыш семян | 536 | 285 | 288 | 1190 |
Насыщенный влагой эндосперм семян | 95 | 71 | 73 | 316 |
Колеоптиль-4 DAG | 218 | 60 | 143 | 136 |
Корень-4 DAG | 74 | 33 | 101 | 48 |
V3 Лист | 104 | 120 | 66 | 52 |
V3 Корень | 74 | 71 | 81 | 194 |
V3 Лист в условиях холода | 73 | 15 | 72 | N/A |
V3 Корень в условиях холода | 113 | 44 | 89 | 49 |
V3 Лист при засухе | 97 | 344 | 103 | 157 |
V3 Корень при засухе | 205 | 153 | 129 | 236 |
V8 Лист | 185 | 142 | 77 | 282 |
V8 Корень | 33 | 16 | 61 | 28 |
VT Цветок-пыльники | 968 | 625 | 619 | 888 |
VT Лист | 138 | 89 | 132 | 268 |
VT Стареющий лист | 121 | 100 | 156 | 345 |
VT Пыльца початка кукурузы | 610 | 1119 | 332 | 4249 |
R1 Сердцевина кукурузного початка | 291 | 70 | 168 | 127 |
R1 шелк | 164 | 124 | 167 | 101 |
R1 Корень | 36 | 39 | 39 | 21 |
R1 междоузлие | 255 | 89 | 232 | 141 |
R2 Семена-12DAP | 138 | 170 | 165 | 169 |
R3 Зародыш семян 21DAP | 94 | 97 | 489 | 389 |
R3 Эндосперм семян 21DAP | 57 | 118 | 52 | 217 |
R5 Зародыш семян 38DAP | 600 | 147 | 377 | 527 |
R5 Эндосперм семян 38DAP | 58 | 36 | 57 | 106 |
[0169] В растениях F1 кукурузы, уровни экспрессии GUS в различных тканях, из которых брали пробы, различались среди убиквитиновых EXP-последовательностей. Хотя все из EXP-последовательностей демонстрировали способность управлять экспрессией трансгена GUS в стабильно трансформированных растениях F1 кукурузы, каждая EXP-последовательность демонстрировала уникальный паттерн (характер) экспрессии относительно других. Например, экспрессия корней R1 является приблизительно в 2 раза более высокой для EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), чем EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8).
[0170] Экспрессия GUS в развивающемся зародыше семян при 38 DAP является почти в три раза более высокой для EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), чем EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8). Напротив, экспрессия листа и корня в стадии V3 и стадии V8 является приблизительно одинаковой для EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27) и EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8).
[0171] Экспрессия F1 GUS в насыщенных влагой семенах (тканях зародыша и эндосперма) была гораздо более высокой в растениях, трансформированных EXP-Sb.Ubq7:1:2 (SEQ ID NO: 157), чем в растениях, трансформированных EXP-SETit.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 119), EXP-SETit.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 125) и EXP-Sv.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 130). Засуха вызывала увеличение экспрессии корней V3 в растениях, трансформированных EXP-SETit.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 119), EXP-SETit.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 125), EXP-Sv.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 130) и EXP-Sb.Ubq7:1:2 (SEQ ID NO: 157), но увеличивала только экспрессию листьев в растениях, трансформированных EXP-SETit.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 125), EXP-Sv.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 130) и EXP-Sb.Ubq7:1:2 (SEQ ID NO: 157). Эта увеличенная засухой экспрессия V3 была наивысшей с использованием EXP-SETit.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 125). Экспрессия пыльцы была также гораздо более высокой в растениях, трансформированных EXP-Sb.Ubq7:1:2 (SEQ ID NO: 157), чем в растениях, трансформированных EXP-SETit.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 119), EXP-SETit.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 125) и EXP-Sv.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 130). Экспрессия в междоузлии R1 была наивысшей с EXP-SETit.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 119) и EXP-Sv.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 130) и наименьшей в растениях, трансформированных EXP-SETit.Ubq1:1:11 (SEQ ID NO: 125).
[0172] Каждая EXP-последовательность демонстрировала способность управлять экспрессией трансгена в стабильно трансформированных растениях кукурузы. Однако каждая EXP-последовательность имела паттерн экспрессии для каждой ткани, который был уникальным, и дает возможность отобрать EXP-последовательность, которая будет лучше всего обеспечивать экспрессию конкретного трансгена в зависимости от стратегии экспрессии тканей, необходимой для достижения желаемых результатов. Этот пример демонстрирует, что EXP-последовательности, выделенные из гомологичных генов, не обязательно ведут себя эквивалентно в трансформированном растении, и что экспрессия может быть определена только посредством эмпирического исследования свойств для каждой EXP-последовательности и не может быть предсказана на основе гомологии гена, из которого был получен этот промотор.
Пример 13: Анализ регуляторных элементов, управляющих СР4 в трансгенной кукурузе.
[0173] Растения кукурузы трансформировали экспрессирующими векторами растений, содержащими EXP-последовательности, управляющие экспрессией трансгена СР4, и полученные растения анализировали на экспрессию белка СР4.
[0174] EXP-последовательности EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133) и EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141) клонировали в бинарные плазмидные конструкты для трансформации растений. Полученные векторы содержали правый граничный район из Agrobacterium tumefaciens, убиквитиновую EXP-последовательность, функционально связанную 5’ с нацеленной на пластиду кодирующей последовательностью устойчивой к глифозату EPSPS (CP4, US RE39247), функционально связанной 5’ с T-AGRtu.nos-1:1:13 (SEQ ID NO: 127) 3’-UТР и левый граничный район из A. tumefaciens. Таблица 44 ниже показывает плазмидные конструкты, используемые для трансформации кукурузы, и соответствующие EXP-последовательности.
Таблица 44 Плазмидные конструкты СР4 и соответствующие EXP-последовательности, используемые для трансформации кукурузы |
|||
Плазмидный конструкт | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | Срок |
pMON141619 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | R0 и F1 |
pMON142862 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | R0 и F1 |
pMON129221 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | R0 и F1 |
pMON129205 | EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | R0 и F1 |
pMON129212 | EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | R0 |
[0175] Полученные плазмиды использовали для трансформации растений кукурузы. Трансформированные растения отбирали на одну или две копии инсертированной Т-ДНК и выращивали в оранжерее. Пробы отобранных тканей брали из трансформированных R0 растений в конкретных стадиях развития и уровни белка СР4 измеряли в этих тканях с использованием анализа ELISA СН4. Средняя экспрессия СР4, наблюдаемая для каждой трансформации, представлена в Таблицах 45 и 46 ниже и графически на фигуре 7.
Таблица 45 Средняя экспрессия СР4 листа и корня в трансформированных растениях R0 кукурузы |
|||||||
EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | V4 Лист | V7 Лист | VT Лист | V4 Корень | V7 Корень | VT Корень |
EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 20,90 | 18,53 | 25,49 | 11,50 | 26,54 | 17,20 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 19,92 | 16,60 | 25,58 | 9,92 | 26,31 | 13,33 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 10,70 | 12,49 | 17,42 | 7,56 | 13,95 | 6,68 |
EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | 3,72 | 4,34 | 4,48 | 2,90 | 6,99 | 2,78 |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 13,42 | 21,89 | 38,78 | 9,56 | 16,69 | 11,15 |
Таблица 46 Средняя экспрессия СР4 в репродуктивной ткани и развивающихся семенах в трансформированных растениях R0 кукурузы |
|||||
EXP-последовательность | SEQ ID NO: | VT Метелка | R1 Шелк | R3 Зародыш | R3 Эндосперм |
EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | 24,14 | 5,55 | 7,29 | 4,91 |
EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | 19,20 | 10,27 | 12,60 | 4,70 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | 18,70 | 16,21 | 8,26 | 8,82 |
EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | 7,10 | 4,72 | 3,13 | 1,74 |
EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | 67,25 | 11,21 | 7,85 | 10,69 |
[0176] Как видно в Таблицах 45 и 46, каждая из EXP-последовательностей EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133) и EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141) была способна управлять экспрессией СР4 во всех тканях, взятых в виде проб из трансформированных растений R0. Более высокая экспрессия СР4 в корне и листе трансформантов, содержащих EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8) и EXP-ERIra.Ubq1: 1:8 (SEQ ID NO: 27), управляющие CP4, чем в присутствии EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), управляющей CP4, может быть связана с уровнем вегетативной устойчивости к применению глифозата, как наблюдалось для этих популяций трансформантов (см. Пример 14 ниже).
[0177] Каждая EXP-последовательность проявляла уникальный паттерн экспрессии относительно уровня экспрессии для каждой используемой в качестве пробы ткани. Например, в то время как экспрессия СР4 в листе, корне и метелке была сходной для EXP-последовательностей, EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8) и EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), экспрессия в шелке с использованием EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8) была равна половине уровня экспрессии, управляемой ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 21). Это может быть выгодным для экспрессии трансгенов, в которых конститутивная экспрессия является желаемой, но предпочтительной была бы более низкая экспрессия в ткани шелка. Эти EXP-последовательности демонстрируют уникальные паттерны конститутивной экспрессии СР4 в трансформированных растениях R0 кукурузы.
[0178] Эти трансформированные растения R0 кукурузы скрещивали с нетрансгенным сортом LH244 для получения семян F1. Полученные семена генерации F1 анализировали на расщепление трансгенной кассеты и растения, гетерозиготные в отношении этой кассеты СР4, отбирали для анализа экспрессии СР4. Семена выращивали в оранжерее, и получали две группы растений, причем одна группа опрыскивалась глифозатом, тогда как другая оставалась неопрыснутой. Экспрессию СР4 анализировали в отобранных тканях с использованием стандартного анализа на основе ELISA. Средняя экспрессия СР4 показана в таблицах 47 и 48 ниже.
Таблица 47 Средняя экспрессия СР4 в трансформированных растениях F1 кукурузы |
|||
Орган | pMON141619 | pMON142862 | pMON129221 |
V4 Лист | 11,50 | 13,51 | 7,68 |
V4 Корень | 12,48 | 12,60 | 10,29 |
V7 Лист | 16,59 | 20,21 | 12,01 |
V7 Корень | 11,00 | 13,62 | 8,15 |
VT Лист | 39,88 | 44,85 | 29,42 |
VT Корень | 17,43 | 21,83 | 13,43 |
VT Цветок, пыльники | 52,74 | 55,72 | 53,62 |
R1 Шелк | 16,01 | 23,81 | 14,42 |
R3 Зародыш семян 21 DAR | 33,29 | 57,96 | 51,64 |
R3 Эндосперм семян 21 DAR | 2,99 | 3,20 | 6,44 |
[0179] Как можно видеть в Таблице 47 выше, экспрессия СР4 в листе и корне была более высокой в трансформантах F1, трансформированных pMON141619 (EXP-ANDge.Ubq1:1:8, SEQ ID NO: 5) и pMON142862 (EXP-ERIra.Ubq1:1:8, SEQ ID NO: 27), чем в трансформантах, трансформированных pMON129221 (EXP-Cl.Ubq1:1:10, SEQ ID NO: 98). Экспрессия в ткани пыльников была сходной для всех трех EXP-последовательностей, тогда как экспрессия в шелке была наивысшей с использованием EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27). Экспрессия в развивающемся зародыше (21 DAP) была наивысшей в трансформантах, содержащих EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27) и EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), управляющие СР4.
Таблица 48 Средняя экспрессия СР4 в трансформированных растениях F1 кукурузы |
|
Орган | pMON129205 |
V4 Лист | 1,73 |
V4 Корень | 2,44 |
V7 Лист | 2,84 |
V7 Корень | 1,51 |
VT Лист | 3,29 |
VT Корень | 2,63 |
VT Цветок, пыльники | 7,52 |
R1 Шелк | 1,99 |
R3 Зародыш семян 21 DAP | 3,40 |
R3 Эндосперм семян 21 DAP | 1,79 |
[0180] Как можно видеть в Таблицах 47-48 выше, экспрессия CR4 была более низкой во всех тканях трансформантов F1 с pMON129205 (EXP-Sv.Ubq1:1:9, SEQ ID NO: 133), чем экспрессия трансформантов, трансформированных pMON141619 (EXP-ANDge.Ubq1:1:8, SEQ ID NO: 8), pMON142862 (EXP-ERIra.Ubq1:1:8, SEQ ID NO: 27) и pMON129221 (EXP-Cl.Ubq1:1:10, SEQ ID NO: 98).
[0181] Эти уникальные паттерны экспрессии, придаваемые каждой из анализированных EXP-последовательностей, обеспечивают возможность получения трансгенного растения, в котором экспрессия может быть тонко отрегулирована для получения малых корректировок в экспрессии трансгена для оптимальной производительности или эффективности. Кроме того, эмпирическое тестирование этих EXP-последовательностей, управляющих экспрессией различных трансгенов, может давать результаты, в которых одна конкретная EXP-последовательность является наиболее подходящей для экспрессии конкретного трансгена или класса трансгенов, тогда как обнаружено, что другая EXP-последовательность является наилучшей для другого трансгена или класса трансгенов.
Пример 14: Анализ вегетативной толерантности к глифозату в R
0
растениях трансгенной кукурузы.
[0182] Растения кукурузы трансформировали экспрессирующими векторами растений, содержащими EXP-последовательности, управляющие трансгеном СР4, и полученные растения оценивали на вегетативную и репродуктивную толерантность к глифозату.
[0183] F1 растения трансформированной кукурузы, описанные в Примере 13 выше, трансформированные pMON141619, pMON142862, pMON129221, pMON129205 и pMON129212 и состоящие из EXP-последовательностей EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133) и EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), соответственно управляющих CP4, оценивали как на вегетативную, так и на репродуктивную толерантность при опрыскивании глифозатом. Десять F1 растения для каждого события делили на две группы, первую группу, состоящую из пяти растений, которые получали опрыскивание глифозатом, и V4 и V8-стадию развития; и вторую группу из пяти растений, которые оставались не опрысканными (т.е. контроль). Глифозат применяли нанесением спрея для листьев разбросного посева с использованием Roundup WeatherMax® при скорости нанесения 1,5 a.e./акр (a.e. кислотный эквивалент). После семи - десяти дней, листья каждого растения оценивали на повреждение. Вегетативную толерантность (Veg Tol в Таблице 49) оценивали сравнением неопрысканных и опрысканных растений для каждого события (случая) и шкалу рейтинга разрушения использовали для обеспечения конечного рейтинга для вегетативной толерантности (T = толерантный, NT = не толерантный). Кроме того, набор семян анализировали для всех растений в каждом случае. Измерения наборов семян между контрольными растениями и опрысканными растениями сравнивали, и присваивание репродуктивной толерантности (Repro Tol в Таблице 49) давалось для каждого случая на основе процентного набора семян опрысканных растений относительно контролей (Т = толерантный, NT = нетолерантный). Таблица 49 ниже показывает рейтинги вегетативной толерантности и репродуктивной толерантности для каждого опрысканного события в стадии V4 и V8. Буква “T” обозначает толерантные и “NT” обозначает нетолерантные.
Таблица 49 Рейтинги повреждения листьев индивидуальных событий трансформированной кукурузы в стадии V4 и V8 |
||||||
Плазмидный продукт | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | Событие | Veg Tol V4 | Veg Tol V8 | Repro Tol |
pMON141619 | EXP-ANDge.Ubq1:1:8 | 8 | Событие 1 | T | T | NT |
Событие 2 | T | T | T | |||
Событие 3 | T | T | NT | |||
Событие 4 | T | T | NT | |||
Событие 5 | T | T | T | |||
Событие 6 | T | T | NT | |||
Событие 7 | T | T | T | |||
Событие 8 | T | T | T | |||
Событие 9 | T | T | NT | |||
pMON142862 | EXP-ERIra.Ubq1:1:8 | 27 | Событие 1 | T | T | T |
Событие 2 | T | T | NT | |||
Событие 3 | T | T | T | |||
Событие 4 | T | T | T | |||
Событие 5 | T | T | NT | |||
Событие 6 | T | T | T | |||
Событие 7 | T | T | NT | |||
Событие 8 | T | T | T | |||
Событие 9 | T | T | T | |||
pMON129221 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | Событие 1 | T | T | NT |
Событие 2 | T | T | NT | |||
Событие 3 | NT | NT | T | |||
Событие 4 | NT | NT | T | |||
Событие 5 | T | T | NT | |||
Событие 6 | NT | NT | T | |||
Событие 7 | T | T | T | |||
pMON129205 | EXP-Sv.Ubq1:1:9 | 133 | Событие 1 | NT | NT | |
Событие 2 | NT | NT | NT | |||
Событие 3 | T | T | NT | |||
Событие 4 | NT | NT | ||||
Событие 5 | NT | NT | NT | |||
Событие 6 | NT | NT | NT | |||
Событие 7 | NT | NT | NT | |||
pMON129212 | EXP-Zm.UbqM1:1:7 | 141 | Событие 1 | T | T | |
Событие 2 | T | T | ||||
Событие 3 | T | T | ||||
Событие 4 | T | T | ||||
Событие 5 | T | T | ||||
Событие 6 | T | T | ||||
Событие 7 | T | T | ||||
Событие 8 | T | T | ||||
Событие 9 | T | T | ||||
Событие 10 | T | T |
[0184] Как видно из Таблицы 49 выше, все анализированные трансформированные события (случаи), включающие в себя кассеты СР4, содержащие EXP-последовательности EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27) и EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), демонстрировали полную вегетативную толерантность, основанную на рейтингах разрушения, которые не превышали оценки 10. Четыре события из девяти, содержащие EXP-ANDge.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 8), и шесть событий из девяти, содержащие EXP-ERIra.Ubq1:1:8 (SEQ ID NO: 27), были как вегетативно, так и репродуктивно толерантными к нанесению глифозата. В противоположность этому, случаи, включающие в себя EXP-Cl.Ubq1:1:10 (SEQ ID NO: 98), были либо вегетативно, либо репродуктивно толерантными, но не в обоих случаях. Только одно событие, включающее в себя EXP-Sv.Ubq1:1:9 (SEQ ID NO: 133), демонстрировало вегетативную толерантность, и ни одно из тестированных событий не было репродуктивно толерантным. Все события, включающие в себя EXP-Zm.UbqM1:1:7 (SEQ ID NO: 141), демонстрировали вегетативную толерантность, но оценивание репродуктивной толерантности все еще находится в развитии.
Пример 15:
Анализ экспрессии с использованием различных последовательностей 3’-концевой интрон/экзон-границы сплайсинга.
[0185] Протопластные клетки листьев кукурузы и пшеницы трансформировали экспрессирующими конструктами растений, содержащими EXP-последовательности, управляющие экспрессией GUS, которые содержат один и тот же промотор и лидер, но имеют отличающиеся 3’-концевые нуклеотиды после последовательности интрон/экзон-границы сплайсинга, 5’-AG-3’, для наблюдения, влияет ли на экспрессию небольшое изменение в последовательности. Экспрессию также сравнивали с экспрессией двух конститутивных контрольных плазмид.
[0186] Конструируют экспрессионные конструкты растений, содержащие экспрессионную кассету GUS. Полученные векторы состоят из промотора убиквитина Coix lacryma-jobi, P-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 80), функционально связанного 5’ (слева) с лидерной последовательностью, L-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 81), функционально связанной 5’ с интронным элементом, показанным в Таблице 50 ниже, каждый из которых, содержит различающиеся нуклеотиды на самом 3’-конце непосредственно после последовательности интрон/экзон-границы сплайсинга 5’-AG-3’, функционально связанной 5’ (слева) с кодирующей GUS последовательностью, которая функционально связана 5’ (слева) с T-AGRtu.nos-1:1:13 (SEQ ID NO: 127) 3’-UTR. Таблица 50 ниже показывает экспрессионные конструкты растений и соответствующую 3’-концевую последовательность.
Таблица 50 Экспрессионные конструкты растений, интроны и 3’-концевая последовательность после последовательности интрон/экзон-границы сплайсинга 5’-AG-3’ |
||||
Плазмидный конструкт | EXP-последователь-ность | SEQ ID NO: | Вариант интрона | Нуклеотиды 3’-конца интрона непосред-ственно после 3’-сайта сплайсинга AG |
pMON140889 | EXP-Cl.Ubq1:1:10 | 98 | I-Cl.Ubq1-1:1:6 (SEQ ID NO: 94) | GTC |
pMON146795 | EXP-Cl.Ubq1:1:18 | 99 | I-Cl.Ubq1-1:1:7 (SEQ ID NO: 92) | GTG |
pMON146796 | EXP-Cl.Ubq1:1:19 | 100 | I-Cl.Ubq1-1:1:8 (SEQ ID NO: 101) | GCG |
pMON146797 | EXP-Cl.Ubq1:1:20 | 102 | I-Cl.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 103) | GAC |
pMON146798 | EXP-Cl.Ubq1:1:21 | 104 | I-Cl.Ubq1-1:1:10 (SEQ ID NO: 105) | ACC |
pMON146799 | EXP-Cl.Ubq1:1:22 | 106 | I-Cl.Ubq1-1:1:11 (SEQ ID NO: 107) | GGG |
pMON146800 | EXP-Cl.Ubq1:1:23 | 108 | I-Cl.Ubq1-1:1:12 (SEQ ID NO: 109) | GGT |
pMON146801 | EXP-Cl.Ubq1:1:24 | 110 | I-Cl.Ubq1-1:1:13 (SEQ ID NO: 111) | CGT |
pMON146802 | EXP-Cl.Ubq1:1:25 | 112 | I-Cl.Ubq1-1:1:14 (SEQ ID NO: 113) | TGT |
pMON25455 | EXP-Os.Act1:1:9 | 179 | Конститутивный контроль | |
pMON65328 | EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | 163 | Конститутивный контроль |
[0187] Протопласты кукурузы и пшеницы трансформировали, как описано ранее и анализировали на экспрессию GUS и люциферазы. Таблица 51 ниже показывает средние величины GUS и RLuc для экспрессии протопластов как кукурузы, так и пшеницы.
Таблица 51 Средние величины GUS и RLuc для протопластных клеток кукурузы и пшеницы |
|||||||
Кукуруза | Пшеница | ||||||
EXP-последова-тельность | Нуклео-тиды 3’-конца интрона непос-редст-венно после 3’-сайта сплай-синга AG | Среднее GUS | Среднее RLuc | GUS/RLuc | Среднее GUS | Среднее RLuc | GUS/RLuc |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | GTC | 140343,0 | 93870,75 | 1,50 | 40906,25 | 17381,75 | 2,35 |
EXP-Cl.Ubq1:1:18 | GTG | 143106,25 | 60565,25 | 2,36 | 56709,00 | 17898,75 | 3,17 |
EXP-Cl.Ubq1:1:19 | GCG | 136326,83 | 88589,75 | 1,54 | 43211,00 | 17352,50 | 2,49 |
EXP-Cl.Ubq1:1:20 | GAC | 138110,83 | 104751,42 | 1,32 | 31711,50 | 17953,75 | 1,77 |
EXP-Cl.Ubq1:1:21 | ACC | 137906,75 | 72519,50 | 1,90 | 54164,17 | 17772,83 | 3,05 |
EXP-Cl.Ubq1:1:22 | GGG | 137306,83 | 92643,42 | 1,48 | 55198,25 | 14476,75 | 3,81 |
EXP-Cl.Ubq1:1:23 | GGT | 144085,50 | 64351,25 | 2,24 | 43008,83 | 13911,50 | 3,09 |
EXP-Cl.Ubq1:1:24 | CGT | 142061,50 | 65884,00 | 2,16 | 51210,50 | 15041,00 | 3,40 |
EXP-Cl.Ubq1:1:25 | TGT | 140353,00 | 61249,50 | 2,29 | 49577,75 | 15348,25 | 3,23 |
EXP-Os.Act1:1:9 | Консти-тутив-ный конт-роль | 37665,25 | 65835,50 | 0,57 | 10830,25 | 17716,50 | 0,61 |
EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | Консти-тутив-ный конт-роль | 49833,75 | 41268,75 | 1,21 | 15598,83 | 14877,50 | 1,05 |
[0188] Величины GUS/RLuc для каждой убиквитиновой EXP-последовательности Coix lacryma-jobi из таблицы 46 выше использовали для нормализации экспрессии относительно двух конститутивных контролей EXP-Os.Act1:1:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcbl+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163), и они представлены в таблице 52 ниже.
Таблица 52 Нормализованные величины экспрессии убиквитиновых EXP-последовательностей Coix lacryma-jobi относительно EXP-Os.Actl:l:9 (SEQ ID NO: 179) и EXP-CaMV.35S-S-enh+Ta.Lh1+Os.Act1:1:1 (SEQ ID NO: 163) |
|||||
Кукуруза | Пшеница | ||||
EXP-последова-тельность | Нуклеотиды 3’-конца интрона непосре-дственно после 3’-сайта сплайсинга AG | GUS/RLuc, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc, нормализованные относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhb1+Os.Act1:1:1 | GUS/RLuc, нормализованные относительно EXP-Os.Act1:1:9 | GUS/RLuc, нормализованные относительно EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhb1+Os.Act1:1:1 |
EXP-Cl.Ubq1:1:10 | GTC | 2,61 | 1,24 | 3,85 | 2,24 |
EXP-Cl.Ubq1:1:18 | GTG | 4,13 | 1,96 | 5,18 | 3,02 |
EXP-Cl.Ubq1:1:19 | GCG | 2,69 | 1,27 | 4,07 | 2,38 |
EXP-Cl.Ubq1:1:20 | GAC | 2,30 | 1,09 | 2,89 | 1,68 |
EXP-Cl.Ubq1:1:21 | ACC | 3,32 | 1,57 | 4,99 | 2,91 |
EXP-Cl.Ubq1:1:22 | GGG | 2,59 | 1,23 | 6,24 | 3,64 |
EXP-Cl.Ubq1:1:23 | GGT | 3,91 | 1,85 | 5,06 | 2,95 |
EXP-Cl.Ubq1:1:24 | CGT | 3,77 | 1,79 | 5,57 | 3,25 |
EXP-Cl.Ubq1:1:25 | TGT | 4,01 | 1,90 | 5,28 | 3,08 |
EXP-Os.Act1:1:9 | Конститу-тивный контроль | 1,00 | 0,47 | 1,00 | 0,58 |
EXP-CaMV.35S-enh+Ta.Lhcb1+Os.Act1:1:1 | Конститу-тивный контроль | 2,11 | 1,00 | 1,72 | 1,00 |
[0189] Как показано в Таблице 52 выше, каждая из убиквитиновых EXP-последовательностей Coix lacryma-jobi обеспечивала экспрессию, которая была большей, чем любой конститутивный контроль, как в кукурузе, так и в пшенице. Экспрессия в протопластах кукурузы была относительно сходной для всех из убиквитиновых EXP-последовательностей Coix. Экспрессия в пшенице была несколько более вариабельной. Применение различных 3’-концевых нуклеотидов после последовательности интрон/экзон-границы сплайсинга, 5’-AG-3’, по-видимому, не влияла существенно на экспрессию GUS, за исключением GUS, управляемого EXP-Cl.Ubq1:1:20 (SEQ ID NO: 102). EXP-Cl.Ubq1:1:20 содержит 3’-концевые нуклеотидные последовательности, 5’-GAC-3’, после последовательности 5’-AG-3’ интрон/экзон-границы сплайсинга и заставляет экспрессию слегка падать относительно других убиквитиновых EXP-последовательностей Coix. Оценивание полученной сплайсированной мессенджер-РНК показало, что приблизительно 10% мРНК, экспрессированой с использованием EXP-Cl.Ubq1:1:20 (SEQ ID NO: 102) для управления экспрессией GUS, были неправильно сплайсированы. мРНК, полученная из экспрессии GUS с использованием других убиквитиновых EXP-последовательностей Coix, по-видимому, процессировалась правильно. Этот эксперимент обеспечивает доказательство того, что любой из 3’-концевых нуклеотидов для любого из интронных вариантов, представленных в таблице 2 Примера 1, за исключением 3’-концевой последовательности 5’-GAC-3’, которая, как было обнаружено, ассоциирована только с интронным элементом, I-Cl.Ubq1-1:1:9 (SEQ ID NO: 103), должен быть подходящим для применения в трансгенной экспрессионной кассете без значимой потери активности и процессинга.
Пример 16: Энхансеры, полученные из регуляторных элементов.
[0190] Энхансеры получают из обеспеченных здесь промоторных элементов, представленных как SEQ ID NO: 2, 6, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 23, 26, 28, 30, 32, 34, 38, 40, 42, 46, 50, 56, 60, 64, 66, 70, 74, 76, 78, 80, 84, 86, 88, 91, 96 и 135. Этот энхансерный элемент может состоять из одного или нескольких цис-регуляторных элементов, которые, при функциональном связывании 5’ (слева) или 3’ (справа) с промоторным элементом или при функциональном связывании 5’ или 3’ с дополнительными энхансерными элементами, которые функционально связаны с промотором, могут усиливать или модулировать экспрессию трансгена или обеспечивать экспрессию трансгена в конкретном типе клеток или органе растений или в конкретной временной точке в развитии или циркадном ритме. Энхансеры готовят удалением ТАТА-бокса или функционально сходных элементов и любой последовательности справа от промоторов, что делает возможной инициацию транскрипции от обеспеченных здесь промоторов, как описано выше, в том числе их фрагментов, в которых удалены ТАТА-бокс или функционально сходные элементы и последовательность справа от ТАТА-бокса. Энхансерный элемент, E-Cl.Ubq1-1:1:1 (SEQ ID NO: 89), который произведен из промоторного элемента, P-Cl.Ubq1-1:1:1, обеспечен здесь для демонстрации энхансеров, полученных из промоторного элемента.
[0191] Энхансерные элементы могут быть произведены из обеспеченных здесь промоторных элементов и клонированы с использованием способов, известных в данной области, чтобы они были функционально связаны 5’ или 3’ с промоторным элементом, или функционально связаны 5’ или 3’ с дополнительными энхансерными элементами, которые функционально связаны с промотором. Альтернативно, энхансерные элементы клонируют, с использованием способов, известных в данной области, чтобы они были функционально связаны с одной или несколькими копиями энхансерных элементов, которые функционально связаны 5’ или 3’ с промоторным элементом, или функционально связаны 5’ или 3’ с дополнительными энхансерными элементами, которые функционально связаны с промотором. Энхансерные элементы могут быть также клонированы, чтобы быть функционально связанными 5’ или 3’ с промоторным элементом, произведенным из организма отличающегося рода, или функционально связанными 5’ или 3’ с дополнительными энхансерными элементами, произведенными из организмов другого рода или организма того же самого рода, которые функционально связаны с промотором, произведенным из организма либо того же самого рода, либо отличающегося рода, с получением химерного регуляторного элемента. Трансформирующий вектор растений для экспрессии GUS конструируют с использованием способов, известных в данной области, сходный с конструктами, описанными в предыдущих примерах, в которых полученные экспрессирующие векторы растений содержат правый граничный район из A. tumefaciens, первую трансгенную кассету для тестирования регуляторного или химерного регуляторного элемента, состоящего из регуляторного или химерного регуляторного элемента, функционально связанного с интроном, произведенным из белка теплового шока HSP70 Z. mays (I-Zm.DnaK-1:1:1 SEQ ID NO: 144), или любого из интронов, представленных здесь, или любого другого интрона, функционально связанного с кодирующей последовательностью для β-глюкуронидазы (GUS), которая либо имеет процессируемый интрон (GUS-2, SEQ ID NO: 160), либо не имеет интрона (GUS-1, SEQ ID NO: 159), функционально связанной с 3’-UTR нопалинсинтазой из A. tumefaciens (T-AGRtu.nos-1:1:13, SEQ ID NO: 161) или 3’-UTR из гена белка транспорта липидов риса (T-Os.LTP-1:1:1, SEQ ID NO: 175); вторую трансгенную кассету для отбора, используемую для селекции трансформированных клеток растений, которая придает устойчивость к гербициду глизофату (управляемую промотором Актина 1 риса), или, альтернативно, антибиотику канамицину (управляемому промотором Актина 1 риса), и левый граничный район из A. tumefaciens. Полученные плазмиды используются для трансформации растений кукурузы или растений других родов способами, описанными выше, или другими опосредованными Agrobacterium способами или способами бомбардировки частицами, известными в данной области. Альтернативно, протопластные клетки, полученные из кукурузы или растений другого вида, трансформировали с использованием способов, известных в данной области, для выполнения транзиторных анализов.
[0192] Экспрессию GUS, управляемую регуляторным элементом, содержащим один или несколько энхансеров, оценивают в стабильных или транзиторных анализах растений для определения действий энхансерного элемента на экспрессию трансгена. Модификации в отношении одного или нескольких энхансерных элементов или дупликацию одного или нескольких энхансерных элементов выполняют на основе эмпирического экспериментирования и регуляции экспрессии полученного гена, которую наблюдают с использованием композиции каждого регуляторного элемента. Изменение относительного положения одного или нескольких энхансеров в полученном регуляторном или химерном регуляторном элементе может влиять на транскрипционную активность или специфичность регуляторного или химерного регуляторного элемента и определяется эмпирически для идентификации лучших энхансеров для желаемого профиля экспрессии трансгенов в растении кукурузы или растении другого рода.
Пример 17: Анализ интронного усиления активности GUS с использованием полученных из растения протопластов.
[0193] Интрон отбирают на основе экспериментирования и сравнения, с не имеющим интронов вектором, для эмпирического отбора интрона и конфигурации в аранжировке векторного элемента Т-ДНК для оптимальной экспрессии трансгена. Например, в экспрессии гена устойчивости к гербицидам, такого как CP4, который может придавать устойчивость к глифозату, желательно иметь экспрессию трансгена в репродуктивных тканях, а также вегетативных тканях для предотвращения потери выхода при применении этого гербицида. Интрон в этом случае мог бы отбираться по его способности, при функциональном связывании с конститутивным промотором, усиливать экспрессию придающего устойчивость к гербицидам трансгена, в частности, в репродуктивных клетках и тканях трансгенного растения, с обеспечением, таким образом, как вегетативной, так и репродуктивной толерантности к трансгенному растению при опрыскивании этим гербицидом. В большинстве генов убиквитина, 5’-UTR состоит из лидера, который имеет интронную последовательность, заделанную в нем. Таким образом, экспрессионные элементы, полученные из таких генов, анализируют с использованием полного 5’-UTR, содержащего промотор, лидер и интрон. Для достижения отличающихся профилей экспрессии или для модуляции уровня экспрессии трансгена, интрон из такого экспрессионного элемента может быть удален или заменен гетерологичным интроном.
[0194] Интроны, представленные здесь как SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182, идентифицируют с использованием контигов геномной ДНК в сравнении с tag-кластерами маркерной экспрессирующейся последовательности (EST) или контигами кДНК для идентификации последовательностей экзонов и интронов в этой геномной ДНК. Кроме того, последовательности 5’-UTR или лидера также используют для определения интрон/экзон-границы сплайсинга одного или нескольких интронов при условиях, когда эта последовательность гена кодирует лидерную последовательность, которая прерывается одним или несколькими интронами. Интроны клонируют с использованием способов, известных в данной области, в трансформирующий вектор растения для функционального связывания 3’ (справа) либо со вторым лидерным фрагментом, либо с кодирующими последовательностями, например, как показано в двух трансгенных кассетах, представленных на фиг. 1.
[0195] Таким образом, например, первая возможная трансгенная кассета (Конфигурация 1 Трансгенной Кассеты на фиг. 8) состоит из промоторного или химерного промоторного элемента [A], функционально связанного 5’ (слева) с лидерным элементом [B], функционально связанным 5’ с элементом тест-интрона [C], функционально связанным с кодирующей последовательностью [D], которая функционально связана с 3’-UTR элементом [E]. Альтернативно, вторая возможная трансгенная кассета (Конфигурация 2 Трансгенной Кассеты на фиг. 8) состоит из промоторного или химерного промоторного элемента [F], функционально связанного 5’ с первым лидерным элементом или фрагментом первого лидерного элемента [G], функционально связанным 5’ с элементом тест-интрона [H], функционально связанным 5’ со вторым лидерным элементом или фрагментом первого лидерного элемента [I], функционально связанным с кодирующим районом [J], который функционально связан с 3’-UTR-элементом [K]. Далее, третья возможная трансгенная кассета (Конфигурация 3 Трансгенной Кассеты на фиг. 8) состоит из промоторного или химерного промоторного элемента [L], функционально связанного с лидерным элементом [M], функционально связанным 5’ с первым фрагментом элемента кодирующей последовательности [N], функционально связанным 5’ с элементом интронного элемента [O] функционально связанным 5’ со вторым фрагментом элемента кодирующей последовательности [P], который функционально связан с 3’-элементом [Q]. Конструируют Конфигурацию 3 Трансгенной Кассеты для возможности сплайсинга этого интрона таким образом, что образуется полная открытая рамка считывания без смещения рамки между первым и вторым фрагментом кодирующей последовательности.
[0196] Первые 6 нуклеотидов на 5’-конце и последние 6 нуклеотидов на 3’-конце интронов, представленных как SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182, представляют нуклеотиды до и после интрон/экзон-границы сплайсинга, соответственно. Эти короткие 6-нуклеотидные последовательности, могут быть, например, модифицированы наличием дополнительной добавленной последовательности, (т.е. нативной или искусственной) для облегчения клонирования этого интрона в трансформирующий вектор растения, пока сохраняются эти первый и второй нуклеотиды из 5’-конца (GT) и эти четвертый и пятый нуклеотиды из 3’-конца (AG) SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182 с сохранением, таким образом, интрон/экзон-границы сплайсинга этого интрона. Как обсуждалось выше, может быть предпочтительным избежание использования нуклеотидной последовательности АТ или нуклеотида А непосредственно перед 5’-концом сайта сплайсинга (GT) и нуклеотида G или нуклеотидной последовательности TG, соответственно, непосредственно после 3’-конца сайта сплайсинга (AG) для элиминирования потенциала нежелательных стартовых кодонов от образования во время процессинга мессенджер-РНК в конечный транскрипт. Таким образом, может быть модифицирована последовательность около 5’- или 3’-концевых сайтов сплайсинга этого интрона.
[0197] Эти интроны анализируют на эффект усиления посредством способности увеличения экспрессии в транзиторном анализе или стабильном анализе растений. Для транзиторного анализа интронного усиления конструируют базовый вектор растений с использованием способов, известных в данной области. Интрон клонируют в этот базовый вектор растений, который содержит экспрессионную кассету, состоящую из конститутивного промотора, такого как промотор вируса мозаики цветной капусты, P-CaMV.35S-enh-1:1:9 (SEQ ID NO: 176), функционально связанный 5’ (слева) с лидерным элементом, L-CaMV.35S-1:1:15 (SEQ ID NO: 177), функционально связанным 5’ с тест-интронным элементом (например, одной из SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182), функционально связанным с кодирующей последовательностью для β-глюкуронидазы (GUS), которая либо имеет процессируемый интрон (GUS-2, SEQ ID NO: 160), либо не имеет интрона (GUS-1, SEQ ID NO: 159), функционально связанной с 3’-UTR нопалинсинтазы из A tumefaciens (T-AGRtu.nos-1:1:13, SEQ ID NO: 161). Протопластные клетки, полученные из ткани кукурузы или ткани растения другого рода, трансформируют базовым вектором растений и контрольными векторами люциферазы, как описано ранее в Примере 2 выше, и анализируют на активность. Для сравнения относительной способности этого интрона усиливать экспрессию, величины GUS выражали в виде отношения GUS к активности люциферазы и сравнивали с уровнями, придаваемыми конструктом, содержащим конститутивный промотор, связанный с известным интроном-стандартом, таким как интрон, полученный из белка теплового шока HSP70 Zea mays, I-Zm.DnaK-1:1:l (SEQ ID NO: 178), а также конструктом, содержащим конститутивный промотор, но без интрона, функционально связанного с этим промотором.
[0198] Для стабильного анализа интронов, представленных как SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182, трансформирующий вектор растений для экспрессии GUS конструируют сходным образом с конструктами, описанными в предыдущих примерах, в которых полученные экспрессирующие векторы растений содержат правый граничный район из A. tumefaciens, первую трансгенную кассету для тестирования интрона, состоящую из конститутивного промотора, такого как промотор вируса мозаики цветной капусты, P-CaMV.35S-enh-1:1:9 (SEQ ID NO: 176), функционально связанный 5’ с лидерным элементом, L-CaMV.35S-1:1:15 (SEQ ID NO: 177), функционально связанным 5’ с элементом тест-интрона, обеспеченным здесь, функционально связанным с кодирующей последовательностью для β-глюкуронидазы (GUS), которая либо имеет процессируемый интрон (GUS-2, SEQ ID NO: 160), либо не имеет интрона (GUS-1, SEQ ID NO: 158), функционально связанного с 3’-UTR нопалинсинтазы из A. tumefaciens (T-AGRtu.nos-1:1:13, SEQ ID NO: 161); вторую трансгенную кассету для отбора (селекции) трансформированных клеток растений, которая придает устойчивость к глифозату (управляемую промотором Актина 1 риса), или, альтернативно, к антибиотику канамицину (управляемую промотором Актина 1 риса), и левый граничный район из A. tumefaciens. Полученные плазмиды используют для трансформации растений кукурузы или растений другого рода, описанными выше способами или опосредуемыми Agrobacterium способами, известными в данной области. Трансформанты с одной копией или трансформанты с малым числом копий отбирали для сравнения с трансформированными растениями с одной копией или имеющими малое число копий, трансформированными трансформирующим вектором растений, идентичным с тест-вектором, но без тест-интрона, для определения, обеспечивает ли этот тест-интрон опосредуемый интроном усиливающий эффект.
[0199] Любой из интронов, представленных как SEQ ID NO: 4, 7, 21, 24, 36, 44, 48, 52, 54, 58, 62, 68, 72, 82, 92, 94, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 118, 120, 122, 127, 129, 131, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158 и 182, может быть модифицирован рядом способов, таких как делетирование фрагментов в интронной последовательности, которые могут уменьшать экспрессию или дупликацию фрагментов с интроном, который может усиливать экспрессию. Кроме того, последовательности в интроне, которые могут влиять на специфичность экспрессии в отношении либо конкретных типов клеток, либо тканей и органов, могут быть дуплицированы или изменены для влияния на экспрессию и паттерны экспрессии этого трансгена. Кроме того, обеспеченные здесь интроны могут быть модифицированы для удаления любых потенциальных старт-кодонов (ATG), которые могут вызывать прекращение экспрессии непредусмотренных транскриптов из неправильно сплайсированных интронов в виде различных, более длинных или укороченных белков. После эмпирического тестирования интрона или его изменения на основе экспериментирования, этот интрон используют для усиления экспрессии трансгена в стабильно трансформированных растениях, которые могут быть однодольным или двудольным растением любого рода, пока этот интрон обеспечивает усиление этого трансгена. Этот интрон может быть также использован для усиления экспрессии в других организмах, таких как водоросли, грибы или клетки животных, пока этот интрон обеспечивает усиление или затухание или специфичность экспрессии трансгена, с которым он функционально связан.
[0200] При наличии иллюстрирования и описания принципов настоящего изобретения, для квалифицированных в данной области специалистов должно быть очевидным, что изобретение может быть модифицировано в компоновке и деталях без отклонения от таких принципов. Авторы настоящего изобретения заявляют все модификации, которые находятся в пределах идеи и объема прилагаемой формулы изобретения. Все публикации и опубликованные патентные документы, приведенные здесь, включены посредством ссылки до той же самой степени, как если бы каждая отдельная публикация или заявка на патент была конкретно и отдельно указана как включенная посредством ссылки.
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> FLASINSKI, STANISLAW
<120> РЕГУЛЯТОРНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ РАСТЕНИЙ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
<130> MONS:282WO
<140> Unknown
<141> 2012-03-21
<150> 61467875
<151> 2011-03-25
<160> 183
<210> 1
<211> 3741
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 1
agcagactcg cattatcgat ggaggggtgg gtttagaacc ctgaaaactg gtactgtttc 60
gaactgaaaa acactgtagc acttttcgtt tgtttgtggt aaatattatc ttactatggt 120
ctaactaggc tcaaaagaat cgtctcgcaa tgtacatcta aattatgcaa ttagttattt 180
tgtttacctg catttcatac tccgagcatg cgtcttttgg tacatttaat gcttcgatgt 240
gatgggaatt ttaaaaattt tggagaaaag ttggtttcta aacacccccg aggacgaaat 300
tggattcggt ctttgacgcg gatgcagcaa ctgcagtgcg caggatacca tcttagccgt 360
tgcgtcgaag ttcgctttgc taacgttttg agaaaattaa accagctttg accaacgtga 420
gacgagcgcc ttacgtggca gtgtaatgga accgggcacg gcaagtttga cgctgtagtg 480
ttagccggtc tcgttacgtt tggcacaact tagttgaatc cggcttccgg caaactatat 540
ggcaagttag acccaagtgt gagccggcca ccgcaagtta ttgggacatt atacgtagga 600
agcaagtgta taataagaat atgagataat gtaagcagct atatgaatca tcacgtcata 660
tttatgttaa gatgaagagg atagaataaa cggtatgtaa atttatagcg agtgatagac 720
gggcacaagg cctcctagct atttccataa atcggatttt gtaagaacaa aaaagaggac 780
ttattataag agaatgtggt aagtaagtat actctctccg tttcaaatta taagttgttt 840
tgattttttt ggtacatcta ttttactatg cattagatat aataatgtgt ctagatacat 900
aacaaaatgg atgaatcaaa aaagtcaaag tgatttacaa tttggaacgg agagagtaag 960
ttcaagccgt caaggcactt ctatgcaacc acagtcaact tgaatgccgc ttgagtgcct 1020
tctcaagttt ttttttcttg caaaaatcat ttcttttttt taaaaaaagt ataatttgga 1080
tcgtgcaaat ttctctctag gtgtgtgtgt gactgtgtga gtaacaattt ctctagttgt 1140
gcgcgactgc tgcttacttt ggagattaca atatctttct aaaatgcttc gattacttat 1200
ttataaaccg tctctaaggc caattgctca agattcattc aacaattgaa acgtctcaca 1260
tgattaaatc atataaagtt tctaagtctt gtttgacaag atttttttag attttcatct 1320
aaattggatg aaactatcaa acactaattt taaaaaatat aagagaagct ccggagataa 1380
aaggtcgtct atgttattat aagagtaaag tcgtctattc tcttcgtccc aacatatata 1440
attctaagca tgaattgctt tctttttgga caaaaggagc atgccacaac acaagaatga 1500
tgtcaccgtc atgcttggat ccttttatgg taaagcttca ccttctataa tctaacaata 1560
gagaaatcag ggaaaaatca tgttttggtt gtttttattt ctaacctcca caataacttt 1620
ggtttaccat tttttgtttg attttagttt tagagaagcg tttataacag gacctaaaat 1680
cttttttcag tacacagtac aacgcagacg ctcatacacg cacgcacact cacctctatg 1740
aacacacgta agaaaaccct acaccttgag caccttcgaa ggactgagcc ggtaaatata 1800
gagattctcg aagtcactat tagcgcctcg ttgtcaacgg gaatgtcgct taccacttaa 1860
agcataacgc cgagaaatcc cgtaataaat ccagtaaaat acgagcaccc gtgccaagtt 1920
gaatatttga acccgagtgg gtagattcca ccgcaaagga cctaaccaga tcatttcgca 1980
aacaggaact aaaatcggta gagagcccag acaaaagcct ttcctaagag ccactccagt 2040
ggaagcccct actttaggta taaaatgcaa tactagtggg gctcctaaat aaacttctat 2100
ttttcatggc cttctaaaat tcactcccaa acccctagct atagaagtct cttatccatc 2160
ctctaaataa aaatgggagt ctattttatt tcaccagagt tgatcgtaaa tttagtctct 2220
caaattttat aagttgaggg tagaggatga ctggagttgc tctaaacgga cctatcttca 2280
agtgacctca gtgagcccgt ttaacggcgt cgacaagttt aatctaacgg acaccaacca 2340
gagaagagaa ccaccgccag cgccgagcca agcgacgttg acatcttggc gcggcacggc 2400
atctccctgg cgtctggccc cctctcgaga cttccgctcc acctcccacc ggtggcggtt 2460
tccaagtccg ttccgcctcc tctcacacgg cacgaaaccg tgacgggcac cggcagcacg 2520
gggggattcc tttcccaccg ctccttccct ttcccttcct ctcccgccgc tataaatagc 2580
cagccccatc cccagcttct ttccccaacc tcatcttctc tcgtgttgtt cggcacaacc 2640
cgatcgatcc ccaactccct cgtcgtctct cctcgcgagc ctcgtcgatc ccccgcttca 2700
aggtacggcg atcgattatc ttccctctct ctaccttctc tctcttatag ggcctgctag 2760
ctctgttcct gtttttccat ggctgcgagg tacaatagat cggcgatcca tggttagggc 2820
ctgctagttg tgttcctgtt tttccatggc tgcgaggcac aatagatctg atggcgttat 2880
gatggttaac ttgtcatact cttgcgatct atggtccctt taggagttta ggacatctat 2940
ttaatttcgg atagttcgag atctgtgatc catggttagt accctaggca gtggggttag 3000
atccgtgctg ttatggttcg tagatggatt ctgattgctc agtaactggg aatcctggga 3060
tggttctagc tggttcgcag ataagatcga tttcatgata tgctatatct tgtttggttg 3120
ccgtggttcc gttaaatctg tctgttatga tcttagtctt tgataaggtt cggtcgtgct 3180
agctacgtcc tgtgcagcac ttaattgtca ggtcataatt tttagcatgc ctttttttta 3240
ttggtttggt tttgtctgac tgggctgtag atagtttcaa tctttgtctg actgggctgt 3300
agatagtttc aatctacctg tcggtttatt ttattaaatt tggatctgta tgtgtgtcat 3360
atatcttcat cttttagata tatcgatagg tttatatgtt gctgtcggtt ttttactgtt 3420
cctttatgag atatattcat gcttagatac atgaaacaac gtgctgttac agtttaatag 3480
ttcttgttta tctaataaac aaataaggat aggtatatgc tgcagttagt tttactggta 3540
ctttttttga catgaaccta cggcttaata attagtcttc atcaaataaa aagcatattt 3600
tttaattatt tcgatatact tgaatgatgt catatgcagc atctgtgtga atttttggcc 3660
ctgtcttcat atgctgttta tttgtttggg actgtttctt tggttgataa ctcatcctgt 3720
tgtttggtga tccttttgca g 3741
<210> 2
<211> 2603
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 2
agcagactcg cattatcgat ggaggggtgg gtttagaacc ctgaaaactg gtactgtttc 60
gaactgaaaa acactgtagc acttttcgtt tgtttgtggt aaatattatc ttactatggt 120
ctaactaggc tcaaaagaat cgtctcgcaa tgtacatcta aattatgcaa ttagttattt 180
tgtttacctg catttcatac tccgagcatg cgtcttttgg tacatttaat gcttcgatgt 240
gatgggaatt ttaaaaattt tggagaaaag ttggtttcta aacacccccg aggacgaaat 300
tggattcggt ctttgacgcg gatgcagcaa ctgcagtgcg caggatacca tcttagccgt 360
tgcgtcgaag ttcgctttgc taacgttttg agaaaattaa accagctttg accaacgtga 420
gacgagcgcc ttacgtggca gtgtaatgga accgggcacg gcaagtttga cgctgtagtg 480
ttagccggtc tcgttacgtt tggcacaact tagttgaatc cggcttccgg caaactatat 540
ggcaagttag acccaagtgt gagccggcca ccgcaagtta ttgggacatt atacgtagga 600
agcaagtgta taataagaat atgagataat gtaagcagct atatgaatca tcacgtcata 660
tttatgttaa gatgaagagg atagaataaa cggtatgtaa atttatagcg agtgatagac 720
gggcacaagg cctcctagct atttccataa atcggatttt gtaagaacaa aaaagaggac 780
ttattataag agaatgtggt aagtaagtat actctctccg tttcaaatta taagttgttt 840
tgattttttt ggtacatcta ttttactatg cattagatat aataatgtgt ctagatacat 900
aacaaaatgg atgaatcaaa aaagtcaaag tgatttacaa tttggaacgg agagagtaag 960
ttcaagccgt caaggcactt ctatgcaacc acagtcaact tgaatgccgc ttgagtgcct 1020
tctcaagttt ttttttcttg caaaaatcat ttcttttttt taaaaaaagt ataatttgga 1080
tcgtgcaaat ttctctctag gtgtgtgtgt gactgtgtga gtaacaattt ctctagttgt 1140
gcgcgactgc tgcttacttt ggagattaca atatctttct aaaatgcttc gattacttat 1200
ttataaaccg tctctaaggc caattgctca agattcattc aacaattgaa acgtctcaca 1260
tgattaaatc atataaagtt tctaagtctt gtttgacaag atttttttag attttcatct 1320
aaattggatg aaactatcaa acactaattt taaaaaatat aagagaagct ccggagataa 1380
aaggtcgtct atgttattat aagagtaaag tcgtctattc tcttcgtccc aacatatata 1440
attctaagca tgaattgctt tctttttgga caaaaggagc atgccacaac acaagaatga 1500
tgtcaccgtc atgcttggat ccttttatgg taaagcttca ccttctataa tctaacaata 1560
gagaaatcag ggaaaaatca tgttttggtt gtttttattt ctaacctcca caataacttt 1620
ggtttaccat tttttgtttg attttagttt tagagaagcg tttataacag gacctaaaat 1680
cttttttcag tacacagtac aacgcagacg ctcatacacg cacgcacact cacctctatg 1740
aacacacgta agaaaaccct acaccttgag caccttcgaa ggactgagcc ggtaaatata 1800
gagattctcg aagtcactat tagcgcctcg ttgtcaacgg gaatgtcgct taccacttaa 1860
agcataacgc cgagaaatcc cgtaataaat ccagtaaaat acgagcaccc gtgccaagtt 1920
gaatatttga acccgagtgg gtagattcca ccgcaaagga cctaaccaga tcatttcgca 1980
aacaggaact aaaatcggta gagagcccag acaaaagcct ttcctaagag ccactccagt 2040
ggaagcccct actttaggta taaaatgcaa tactagtggg gctcctaaat aaacttctat 2100
ttttcatggc cttctaaaat tcactcccaa acccctagct atagaagtct cttatccatc 2160
ctctaaataa aaatgggagt ctattttatt tcaccagagt tgatcgtaaa tttagtctct 2220
caaattttat aagttgaggg tagaggatga ctggagttgc tctaaacgga cctatcttca 2280
agtgacctca gtgagcccgt ttaacggcgt cgacaagttt aatctaacgg acaccaacca 2340
gagaagagaa ccaccgccag cgccgagcca agcgacgttg acatcttggc gcggcacggc 2400
atctccctgg cgtctggccc cctctcgaga cttccgctcc acctcccacc ggtggcggtt 2460
tccaagtccg ttccgcctcc tctcacacgg cacgaaaccg tgacgggcac cggcagcacg 2520
gggggattcc tttcccaccg ctccttccct ttcccttcct ctcccgccgc tataaatagc 2580
cagccccatc cccagcttct ttc 2603
<210> 3
<211> 99
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 3
cccaacctca tcttctctcg tgttgttcgg cacaacccga tcgatcccca actccctcgt 60
cgtctctcct cgcgagcctc gtcgatcccc cgcttcaag 99
<210> 4
<211> 1039
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 4
gtacggcgat cgattatctt ccctctctct accttctctc tcttataggg cctgctagct 60
ctgttcctgt ttttccatgg ctgcgaggta caatagatcg gcgatccatg gttagggcct 120
gctagttgtg ttcctgtttt tccatggctg cgaggcacaa tagatctgat ggcgttatga 180
tggttaactt gtcatactct tgcgatctat ggtcccttta ggagtttagg acatctattt 240
aatttcggat agttcgagat ctgtgatcca tggttagtac cctaggcagt ggggttagat 300
ccgtgctgtt atggttcgta gatggattct gattgctcag taactgggaa tcctgggatg 360
gttctagctg gttcgcagat aagatcgatt tcatgatatg ctatatcttg tttggttgcc 420
gtggttccgt taaatctgtc tgttatgatc ttagtctttg ataaggttcg gtcgtgctag 480
ctacgtcctg tgcagcactt aattgtcagg tcataatttt tagcatgcct tttttttatt 540
ggtttggttt tgtctgactg ggctgtagat agtttcaatc tttgtctgac tgggctgtag 600
atagtttcaa tctacctgtc ggtttatttt attaaatttg gatctgtatg tgtgtcatat 660
atcttcatct tttagatata tcgataggtt tatatgttgc tgtcggtttt ttactgttcc 720
tttatgagat atattcatgc ttagatacat gaaacaacgt gctgttacag tttaatagtt 780
cttgtttatc taataaacaa ataaggatag gtatatgctg cagttagttt tactggtact 840
ttttttgaca tgaacctacg gcttaataat tagtcttcat caaataaaaa gcatattttt 900
taattatttc gatatacttg aatgatgtca tatgcagcat ctgtgtgaat ttttggccct 960
gtcttcatat gctgtttatt tgtttgggac tgtttctttg gttgataact catcctgttg 1020
tttggtgatc cttttgcag 1039
<210> 5
<211> 3255
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 5
ctcgttacgt ttggcacaac ttagttgaat ccggcttccg gcaaactata tggcaagtta 60
gacccaagtg tgagccggcc accgcaagtt attgggacat tatacgtagg aagcaagtgt 120
ataataagaa tatgagataa tgtaagcagc tatatgaatc atcacgtcat atttatgtta 180
agatgaagag gatagaataa acggtatgta aatttatagc gagtgataga cgggcacaag 240
gcctcctagc tatttccata aatcggattt tgtaagaaca aaaaagagga cttattataa 300
gagaatgtgg taagtaagta tactctctcc gtttcaaatt ataagttgtt ttgatttttt 360
tggtacatct attttactat gcattagata taataatgtg tctagataca taacaaaatg 420
gatgaatcaa aaaagtcaaa gtgatttaca atttggaacg gagagagtaa gttcaagccg 480
tcaaggcact tctatgcaac cacagtcaac ttgaatgccg cttgagtgcc ttctcaagtt 540
tttttttctt gcaaaaatca tttctttttt ttaaaaaaag tataatttgg atcgtgcaaa 600
tttctctcta ggtgtgtgtg tgactgtgtg agtaacaatt tctctagttg tgcgcgactg 660
ctgcttactt tggagattac aatatctttc taaaatgctt cgattactta tttataaacc 720
gtctctaagg ccaattgctc aagattcatt caacaattga aacgtctcac atgattaaat 780
catataaagt ttctaagtct tgtttgacaa gattttttta gattttcatc taaattggat 840
gaaactatca aacactaatt ttaaaaaata taagagaagc tccggagata aaaggtcgtc 900
tatgttatta taagagtaaa gtcgtctatt ctcttcgtcc caacatatat aattctaagc 960
atgaattgct ttctttttgg acaaaaggag catgccacaa cacaagaatg atgtcaccgt 1020
catgcttgga tccttttatg gtaaagcttc accttctata atctaacaat agagaaatca 1080
gggaaaaatc atgttttggt tgtttttatt tctaacctcc acaataactt tggtttacca 1140
ttttttgttt gattttagtt ttagagaagc gtttataaca ggacctaaaa tcttttttca 1200
gtacacagta caacgcagac gctcatacac gcacgcacac tcacctctat gaacacacgt 1260
aagaaaaccc tacaccttga gcaccttcga aggactgagc cggtaaatat agagattctc 1320
gaagtcacta ttagcgcctc gttgtcaacg ggaatgtcgc ttaccactta aagcataacg 1380
ccgagaaatc ccgtaataaa tccagtaaaa tacgagcacc cgtgccaagt tgaatatttg 1440
aacccgagtg ggtagattcc accgcaaagg acctaaccag atcatttcgc aaacaggaac 1500
taaaatcggt agagagccca gacaaaagcc tttcctaaga gccactccag tggaagcccc 1560
tactttaggt ataaaatgca atactagtgg ggctcctaaa taaacttcta tttttcatgg 1620
ccttctaaaa ttcactccca aacccctagc tatagaagtc tcttatccat cctctaaata 1680
aaaatgggag tctattttat ttcaccagag ttgatcgtaa atttagtctc tcaaatttta 1740
taagttgagg gtagaggatg actggagttg ctctaaacgg acctatcttc aagtgacctc 1800
agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtt taatctaacg gacaccaacc agagaagaga 1860
accaccgcca gcgccgagcc aagcgacgtt gacatcttgg cgcggcacgg catctccctg 1920
gcgtctggcc ccctctcgag acttccgctc cacctcccac cggtggcggt ttccaagtcc 1980
gttccgcctc ctctcacacg gcacgaaacc gtgacgggca ccggcagcac ggggggattc 2040
ctttcccacc gctccttccc tttcccttcc tctcccgccg ctataaatag ccagccccat 2100
ccccagcttc tttccccaac ctcatcttct ctcgtgttgt tcggcacaac ccgatcgatc 2160
cccaactccc tcgtcgtctc tcctcgcgag cctcgtcgat cccccgcttc aaggtacggc 2220
gatcgattat cttccctctc tctaccttct ctctcttata gggcctgcta gctctgttcc 2280
tgtttttcca tggctgcgag gtacaataga tcggcgatcc atggttaggg cctgctagtt 2340
gtgttcctgt ttttccatgg ctgcgaggca caatagatct gatggcgtta tgatggttaa 2400
cttgtcatac tcttgcgatc tatggtccct ttaggagttt aggacatcta tttaatttcg 2460
gatagttcga gatctgtgat ccatggttag taccctaggc agtggggtta gatccgtgct 2520
gttatggttc gtagatggat tctgattgct cagtaactgg gaatcctggg atggttctag 2580
ctggttcgca gataagatcg atttcatgat atgctatatc ttgtttggtt gccgtggttc 2640
cgttaaatct gtctgttatg atcttagtct ttgataaggt tcggtcgtgc tagctacgtc 2700
ctgtgcagca cttaattgtc aggtcataat ttttagcatg cctttttttt attggtttgg 2760
ttttgtctga ctgggctgta gatagtttca atctttgtct gactgggctg tagatagttt 2820
caatctacct gtcggtttat tttattaaat ttggatctgt atgtgtgtca tatatcttca 2880
tcttttagat atatcgatag gtttatatgt tgctgtcggt tttttactgt tcctttatga 2940
gatatattca tgcttagata catgaaacaa cgtgctgtta cagtttaata gttcttgttt 3000
atctaataaa caaataagga taggtatatg ctgcagttag ttttactggt actttttttg 3060
acatgaacct acggcttaat aattagtctt catcaaataa aaagcatatt ttttaattat 3120
ttcgatatac ttgaatgatg tcatatgcag catctgtgtg aatttttggc cctgtcttca 3180
tatgctgttt atttgtttgg gactgtttct ttggttgata actcatcctg ttgtttggtg 3240
atccttttgc aggtg 3255
<210> 6
<211> 2114
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 6
ctcgttacgt ttggcacaac ttagttgaat ccggcttccg gcaaactata tggcaagtta 60
gacccaagtg tgagccggcc accgcaagtt attgggacat tatacgtagg aagcaagtgt 120
ataataagaa tatgagataa tgtaagcagc tatatgaatc atcacgtcat atttatgtta 180
agatgaagag gatagaataa acggtatgta aatttatagc gagtgataga cgggcacaag 240
gcctcctagc tatttccata aatcggattt tgtaagaaca aaaaagagga cttattataa 300
gagaatgtgg taagtaagta tactctctcc gtttcaaatt ataagttgtt ttgatttttt 360
tggtacatct attttactat gcattagata taataatgtg tctagataca taacaaaatg 420
gatgaatcaa aaaagtcaaa gtgatttaca atttggaacg gagagagtaa gttcaagccg 480
tcaaggcact tctatgcaac cacagtcaac ttgaatgccg cttgagtgcc ttctcaagtt 540
tttttttctt gcaaaaatca tttctttttt ttaaaaaaag tataatttgg atcgtgcaaa 600
tttctctcta ggtgtgtgtg tgactgtgtg agtaacaatt tctctagttg tgcgcgactg 660
ctgcttactt tggagattac aatatctttc taaaatgctt cgattactta tttataaacc 720
gtctctaagg ccaattgctc aagattcatt caacaattga aacgtctcac atgattaaat 780
catataaagt ttctaagtct tgtttgacaa gattttttta gattttcatc taaattggat 840
gaaactatca aacactaatt ttaaaaaata taagagaagc tccggagata aaaggtcgtc 900
tatgttatta taagagtaaa gtcgtctatt ctcttcgtcc caacatatat aattctaagc 960
atgaattgct ttctttttgg acaaaaggag catgccacaa cacaagaatg atgtcaccgt 1020
catgcttgga tccttttatg gtaaagcttc accttctata atctaacaat agagaaatca 1080
gggaaaaatc atgttttggt tgtttttatt tctaacctcc acaataactt tggtttacca 1140
ttttttgttt gattttagtt ttagagaagc gtttataaca ggacctaaaa tcttttttca 1200
gtacacagta caacgcagac gctcatacac gcacgcacac tcacctctat gaacacacgt 1260
aagaaaaccc tacaccttga gcaccttcga aggactgagc cggtaaatat agagattctc 1320
gaagtcacta ttagcgcctc gttgtcaacg ggaatgtcgc ttaccactta aagcataacg 1380
ccgagaaatc ccgtaataaa tccagtaaaa tacgagcacc cgtgccaagt tgaatatttg 1440
aacccgagtg ggtagattcc accgcaaagg acctaaccag atcatttcgc aaacaggaac 1500
taaaatcggt agagagccca gacaaaagcc tttcctaaga gccactccag tggaagcccc 1560
tactttaggt ataaaatgca atactagtgg ggctcctaaa taaacttcta tttttcatgg 1620
ccttctaaaa ttcactccca aacccctagc tatagaagtc tcttatccat cctctaaata 1680
aaaatgggag tctattttat ttcaccagag ttgatcgtaa atttagtctc tcaaatttta 1740
taagttgagg gtagaggatg actggagttg ctctaaacgg acctatcttc aagtgacctc 1800
agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtt taatctaacg gacaccaacc agagaagaga 1860
accaccgcca gcgccgagcc aagcgacgtt gacatcttgg cgcggcacgg catctccctg 1920
gcgtctggcc ccctctcgag acttccgctc cacctcccac cggtggcggt ttccaagtcc 1980
gttccgcctc ctctcacacg gcacgaaacc gtgacgggca ccggcagcac ggggggattc 2040
ctttcccacc gctccttccc tttcccttcc tctcccgccg ctataaatag ccagccccat 2100
ccccagcttc tttc 2114
<210> 7
<211> 1042
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 7
gtacggcgat cgattatctt ccctctctct accttctctc tcttataggg cctgctagct 60
ctgttcctgt ttttccatgg ctgcgaggta caatagatcg gcgatccatg gttagggcct 120
gctagttgtg ttcctgtttt tccatggctg cgaggcacaa tagatctgat ggcgttatga 180
tggttaactt gtcatactct tgcgatctat ggtcccttta ggagtttagg acatctattt 240
aatttcggat agttcgagat ctgtgatcca tggttagtac cctaggcagt ggggttagat 300
ccgtgctgtt atggttcgta gatggattct gattgctcag taactgggaa tcctgggatg 360
gttctagctg gttcgcagat aagatcgatt tcatgatatg ctatatcttg tttggttgcc 420
gtggttccgt taaatctgtc tgttatgatc ttagtctttg ataaggttcg gtcgtgctag 480
ctacgtcctg tgcagcactt aattgtcagg tcataatttt tagcatgcct tttttttatt 540
ggtttggttt tgtctgactg ggctgtagat agtttcaatc tttgtctgac tgggctgtag 600
atagtttcaa tctacctgtc ggtttatttt attaaatttg gatctgtatg tgtgtcatat 660
atcttcatct tttagatata tcgataggtt tatatgttgc tgtcggtttt ttactgttcc 720
tttatgagat atattcatgc ttagatacat gaaacaacgt gctgttacag tttaatagtt 780
cttgtttatc taataaacaa ataaggatag gtatatgctg cagttagttt tactggtact 840
ttttttgaca tgaacctacg gcttaataat tagtcttcat caaataaaaa gcatattttt 900
taattatttc gatatacttg aatgatgtca tatgcagcat ctgtgtgaat ttttggccct 960
gtcttcatat gctgtttatt tgtttgggac tgtttctttg gttgataact catcctgttg 1020
tttggtgatc cttttgcagg tg 1042
<210> 8
<211> 2785
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 8
gttcaagccg tcaaggcact tctatgcaac cacagtcaac ttgaatgccg cttgagtgcc 60
ttctcaagtt tttttttctt gcaaaaatca tttctttttt ttaaaaaaag tataatttgg 120
atcgtgcaaa tttctctcta ggtgtgtgtg tgactgtgtg agtaacaatt tctctagttg 180
tgcgcgactg ctgcttactt tggagattac aatatctttc taaaatgctt cgattactta 240
tttataaacc gtctctaagg ccaattgctc aagattcatt caacaattga aacgtctcac 300
atgattaaat catataaagt ttctaagtct tgtttgacaa gattttttta gattttcatc 360
taaattggat gaaactatca aacactaatt ttaaaaaata taagagaagc tccggagata 420
aaaggtcgtc tatgttatta taagagtaaa gtcgtctatt ctcttcgtcc caacatatat 480
aattctaagc atgaattgct ttctttttgg acaaaaggag catgccacaa cacaagaatg 540
atgtcaccgt catgcttgga tccttttatg gtaaagcttc accttctata atctaacaat 600
agagaaatca gggaaaaatc atgttttggt tgtttttatt tctaacctcc acaataactt 660
tggtttacca ttttttgttt gattttagtt ttagagaagc gtttataaca ggacctaaaa 720
tcttttttca gtacacagta caacgcagac gctcatacac gcacgcacac tcacctctat 780
gaacacacgt aagaaaaccc tacaccttga gcaccttcga aggactgagc cggtaaatat 840
agagattctc gaagtcacta ttagcgcctc gttgtcaacg ggaatgtcgc ttaccactta 900
aagcataacg ccgagaaatc ccgtaataaa tccagtaaaa tacgagcacc cgtgccaagt 960
tgaatatttg aacccgagtg ggtagattcc accgcaaagg acctaaccag atcatttcgc 1020
aaacaggaac taaaatcggt agagagccca gacaaaagcc tttcctaaga gccactccag 1080
tggaagcccc tactttaggt ataaaatgca atactagtgg ggctcctaaa taaacttcta 1140
tttttcatgg ccttctaaaa ttcactccca aacccctagc tatagaagtc tcttatccat 1200
cctctaaata aaaatgggag tctattttat ttcaccagag ttgatcgtaa atttagtctc 1260
tcaaatttta taagttgagg gtagaggatg actggagttg ctctaaacgg acctatcttc 1320
aagtgacctc agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtt taatctaacg gacaccaacc 1380
agagaagaga accaccgcca gcgccgagcc aagcgacgtt gacatcttgg cgcggcacgg 1440
catctccctg gcgtctggcc ccctctcgag acttccgctc cacctcccac cggtggcggt 1500
ttccaagtcc gttccgcctc ctctcacacg gcacgaaacc gtgacgggca ccggcagcac 1560
ggggggattc ctttcccacc gctccttccc tttcccttcc tctcccgccg ctataaatag 1620
ccagccccat ccccagcttc tttccccaac ctcatcttct ctcgtgttgt tcggcacaac 1680
ccgatcgatc cccaactccc tcgtcgtctc tcctcgcgag cctcgtcgat cccccgcttc 1740
aaggtacggc gatcgattat cttccctctc tctaccttct ctctcttata gggcctgcta 1800
gctctgttcc tgtttttcca tggctgcgag gtacaataga tcggcgatcc atggttaggg 1860
cctgctagtt gtgttcctgt ttttccatgg ctgcgaggca caatagatct gatggcgtta 1920
tgatggttaa cttgtcatac tcttgcgatc tatggtccct ttaggagttt aggacatcta 1980
tttaatttcg gatagttcga gatctgtgat ccatggttag taccctaggc agtggggtta 2040
gatccgtgct gttatggttc gtagatggat tctgattgct cagtaactgg gaatcctggg 2100
atggttctag ctggttcgca gataagatcg atttcatgat atgctatatc ttgtttggtt 2160
gccgtggttc cgttaaatct gtctgttatg atcttagtct ttgataaggt tcggtcgtgc 2220
tagctacgtc ctgtgcagca cttaattgtc aggtcataat ttttagcatg cctttttttt 2280
attggtttgg ttttgtctga ctgggctgta gatagtttca atctttgtct gactgggctg 2340
tagatagttt caatctacct gtcggtttat tttattaaat ttggatctgt atgtgtgtca 2400
tatatcttca tcttttagat atatcgatag gtttatatgt tgctgtcggt tttttactgt 2460
tcctttatga gatatattca tgcttagata catgaaacaa cgtgctgtta cagtttaata 2520
gttcttgttt atctaataaa caaataagga taggtatatg ctgcagttag ttttactggt 2580
actttttttg acatgaacct acggcttaat aattagtctt catcaaataa aaagcatatt 2640
ttttaattat ttcgatatac ttgaatgatg tcatatgcag catctgtgtg aatttttggc 2700
cctgtcttca tatgctgttt atttgtttgg gactgtttct ttggttgata actcatcctg 2760
ttgtttggtg atccttttgc aggtg 2785
<210> 9
<211> 1644
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 9
gttcaagccg tcaaggcact tctatgcaac cacagtcaac ttgaatgccg cttgagtgcc 60
ttctcaagtt tttttttctt gcaaaaatca tttctttttt ttaaaaaaag tataatttgg 120
atcgtgcaaa tttctctcta ggtgtgtgtg tgactgtgtg agtaacaatt tctctagttg 180
tgcgcgactg ctgcttactt tggagattac aatatctttc taaaatgctt cgattactta 240
tttataaacc gtctctaagg ccaattgctc aagattcatt caacaattga aacgtctcac 300
atgattaaat catataaagt ttctaagtct tgtttgacaa gattttttta gattttcatc 360
taaattggat gaaactatca aacactaatt ttaaaaaata taagagaagc tccggagata 420
aaaggtcgtc tatgttatta taagagtaaa gtcgtctatt ctcttcgtcc caacatatat 480
aattctaagc atgaattgct ttctttttgg acaaaaggag catgccacaa cacaagaatg 540
atgtcaccgt catgcttgga tccttttatg gtaaagcttc accttctata atctaacaat 600
agagaaatca gggaaaaatc atgttttggt tgtttttatt tctaacctcc acaataactt 660
tggtttacca ttttttgttt gattttagtt ttagagaagc gtttataaca ggacctaaaa 720
tcttttttca gtacacagta caacgcagac gctcatacac gcacgcacac tcacctctat 780
gaacacacgt aagaaaaccc tacaccttga gcaccttcga aggactgagc cggtaaatat 840
agagattctc gaagtcacta ttagcgcctc gttgtcaacg ggaatgtcgc ttaccactta 900
aagcataacg ccgagaaatc ccgtaataaa tccagtaaaa tacgagcacc cgtgccaagt 960
tgaatatttg aacccgagtg ggtagattcc accgcaaagg acctaaccag atcatttcgc 1020
aaacaggaac taaaatcggt agagagccca gacaaaagcc tttcctaaga gccactccag 1080
tggaagcccc tactttaggt ataaaatgca atactagtgg ggctcctaaa taaacttcta 1140
tttttcatgg ccttctaaaa ttcactccca aacccctagc tatagaagtc tcttatccat 1200
cctctaaata aaaatgggag tctattttat ttcaccagag ttgatcgtaa atttagtctc 1260
tcaaatttta taagttgagg gtagaggatg actggagttg ctctaaacgg acctatcttc 1320
aagtgacctc agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtt taatctaacg gacaccaacc 1380
agagaagaga accaccgcca gcgccgagcc aagcgacgtt gacatcttgg cgcggcacgg 1440
catctccctg gcgtctggcc ccctctcgag acttccgctc cacctcccac cggtggcggt 1500
ttccaagtcc gttccgcctc ctctcacacg gcacgaaacc gtgacgggca ccggcagcac 1560
ggggggattc ctttcccacc gctccttccc tttcccttcc tctcccgccg ctataaatag 1620
ccagccccat ccccagcttc tttc 1644
<210> 10
<211> 2613
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 10
tctagttgtg cgcgactgct gcttactttg gagattacaa tatctttcta aaatgcttcg 60
attacttatt tataaaccgt ctctaaggcc aattgctcaa gattcattca acaattgaaa 120
cgtctcacat gattaaatca tataaagttt ctaagtcttg tttgacaaga tttttttaga 180
ttttcatcta aattggatga aactatcaaa cactaatttt aaaaaatata agagaagctc 240
cggagataaa aggtcgtcta tgttattata agagtaaagt cgtctattct cttcgtccca 300
acatatataa ttctaagcat gaattgcttt ctttttggac aaaaggagca tgccacaaca 360
caagaatgat gtcaccgtca tgcttggatc cttttatggt aaagcttcac cttctataat 420
ctaacaatag agaaatcagg gaaaaatcat gttttggttg tttttatttc taacctccac 480
aataactttg gtttaccatt ttttgtttga ttttagtttt agagaagcgt ttataacagg 540
acctaaaatc ttttttcagt acacagtaca acgcagacgc tcatacacgc acgcacactc 600
acctctatga acacacgtaa gaaaacccta caccttgagc accttcgaag gactgagccg 660
gtaaatatag agattctcga agtcactatt agcgcctcgt tgtcaacggg aatgtcgctt 720
accacttaaa gcataacgcc gagaaatccc gtaataaatc cagtaaaata cgagcacccg 780
tgccaagttg aatatttgaa cccgagtggg tagattccac cgcaaaggac ctaaccagat 840
catttcgcaa acaggaacta aaatcggtag agagcccaga caaaagcctt tcctaagagc 900
cactccagtg gaagccccta ctttaggtat aaaatgcaat actagtgggg ctcctaaata 960
aacttctatt tttcatggcc ttctaaaatt cactcccaaa cccctagcta tagaagtctc 1020
ttatccatcc tctaaataaa aatgggagtc tattttattt caccagagtt gatcgtaaat 1080
ttagtctctc aaattttata agttgagggt agaggatgac tggagttgct ctaaacggac 1140
ctatcttcaa gtgacctcag tgagcccgtt taacggcgtc gacaagttta atctaacgga 1200
caccaaccag agaagagaac caccgccagc gccgagccaa gcgacgttga catcttggcg 1260
cggcacggca tctccctggc gtctggcccc ctctcgagac ttccgctcca cctcccaccg 1320
gtggcggttt ccaagtccgt tccgcctcct ctcacacggc acgaaaccgt gacgggcacc 1380
ggcagcacgg ggggattcct ttcccaccgc tccttccctt tcccttcctc tcccgccgct 1440
ataaatagcc agccccatcc ccagcttctt tccccaacct catcttctct cgtgttgttc 1500
ggcacaaccc gatcgatccc caactccctc gtcgtctctc ctcgcgagcc tcgtcgatcc 1560
cccgcttcaa ggtacggcga tcgattatct tccctctctc taccttctct ctcttatagg 1620
gcctgctagc tctgttcctg tttttccatg gctgcgaggt acaatagatc ggcgatccat 1680
ggttagggcc tgctagttgt gttcctgttt ttccatggct gcgaggcaca atagatctga 1740
tggcgttatg atggttaact tgtcatactc ttgcgatcta tggtcccttt aggagtttag 1800
gacatctatt taatttcgga tagttcgaga tctgtgatcc atggttagta ccctaggcag 1860
tggggttaga tccgtgctgt tatggttcgt agatggattc tgattgctca gtaactggga 1920
atcctgggat ggttctagct ggttcgcaga taagatcgat ttcatgatat gctatatctt 1980
gtttggttgc cgtggttccg ttaaatctgt ctgttatgat cttagtcttt gataaggttc 2040
ggtcgtgcta gctacgtcct gtgcagcact taattgtcag gtcataattt ttagcatgcc 2100
ttttttttat tggtttggtt ttgtctgact gggctgtaga tagtttcaat ctttgtctga 2160
ctgggctgta gatagtttca atctacctgt cggtttattt tattaaattt ggatctgtat 2220
gtgtgtcata tatcttcatc ttttagatat atcgataggt ttatatgttg ctgtcggttt 2280
tttactgttc ctttatgaga tatattcatg cttagataca tgaaacaacg tgctgttaca 2340
gtttaatagt tcttgtttat ctaataaaca aataaggata ggtatatgct gcagttagtt 2400
ttactggtac tttttttgac atgaacctac ggcttaataa ttagtcttca tcaaataaaa 2460
agcatatttt ttaattattt cgatatactt gaatgatgtc atatgcagca tctgtgtgaa 2520
tttttggccc tgtcttcata tgctgtttat ttgtttggga ctgtttcttt ggttgataac 2580
tcatcctgtt gtttggtgat ccttttgcag gtg 2613
<210> 11
<211> 1472
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 11
tctagttgtg cgcgactgct gcttactttg gagattacaa tatctttcta aaatgcttcg 60
attacttatt tataaaccgt ctctaaggcc aattgctcaa gattcattca acaattgaaa 120
cgtctcacat gattaaatca tataaagttt ctaagtcttg tttgacaaga tttttttaga 180
ttttcatcta aattggatga aactatcaaa cactaatttt aaaaaatata agagaagctc 240
cggagataaa aggtcgtcta tgttattata agagtaaagt cgtctattct cttcgtccca 300
acatatataa ttctaagcat gaattgcttt ctttttggac aaaaggagca tgccacaaca 360
caagaatgat gtcaccgtca tgcttggatc cttttatggt aaagcttcac cttctataat 420
ctaacaatag agaaatcagg gaaaaatcat gttttggttg tttttatttc taacctccac 480
aataactttg gtttaccatt ttttgtttga ttttagtttt agagaagcgt ttataacagg 540
acctaaaatc ttttttcagt acacagtaca acgcagacgc tcatacacgc acgcacactc 600
acctctatga acacacgtaa gaaaacccta caccttgagc accttcgaag gactgagccg 660
gtaaatatag agattctcga agtcactatt agcgcctcgt tgtcaacggg aatgtcgctt 720
accacttaaa gcataacgcc gagaaatccc gtaataaatc cagtaaaata cgagcacccg 780
tgccaagttg aatatttgaa cccgagtggg tagattccac cgcaaaggac ctaaccagat 840
catttcgcaa acaggaacta aaatcggtag agagcccaga caaaagcctt tcctaagagc 900
cactccagtg gaagccccta ctttaggtat aaaatgcaat actagtgggg ctcctaaata 960
aacttctatt tttcatggcc ttctaaaatt cactcccaaa cccctagcta tagaagtctc 1020
ttatccatcc tctaaataaa aatgggagtc tattttattt caccagagtt gatcgtaaat 1080
ttagtctctc aaattttata agttgagggt agaggatgac tggagttgct ctaaacggac 1140
ctatcttcaa gtgacctcag tgagcccgtt taacggcgtc gacaagttta atctaacgga 1200
caccaaccag agaagagaac caccgccagc gccgagccaa gcgacgttga catcttggcg 1260
cggcacggca tctccctggc gtctggcccc ctctcgagac ttccgctcca cctcccaccg 1320
gtggcggttt ccaagtccgt tccgcctcct ctcacacggc acgaaaccgt gacgggcacc 1380
ggcagcacgg ggggattcct ttcccaccgc tccttccctt tcccttcctc tcccgccgct 1440
ataaatagcc agccccatcc ccagcttctt tc 1472
<210> 12
<211> 2255
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 12
cacaagaatg atgtcaccgt catgcttgga tccttttatg gtaaagcttc accttctata 60
atctaacaat agagaaatca gggaaaaatc atgttttggt tgtttttatt tctaacctcc 120
acaataactt tggtttacca ttttttgttt gattttagtt ttagagaagc gtttataaca 180
ggacctaaaa tcttttttca gtacacagta caacgcagac gctcatacac gcacgcacac 240
tcacctctat gaacacacgt aagaaaaccc tacaccttga gcaccttcga aggactgagc 300
cggtaaatat agagattctc gaagtcacta ttagcgcctc gttgtcaacg ggaatgtcgc 360
ttaccactta aagcataacg ccgagaaatc ccgtaataaa tccagtaaaa tacgagcacc 420
cgtgccaagt tgaatatttg aacccgagtg ggtagattcc accgcaaagg acctaaccag 480
atcatttcgc aaacaggaac taaaatcggt agagagccca gacaaaagcc tttcctaaga 540
gccactccag tggaagcccc tactttaggt ataaaatgca atactagtgg ggctcctaaa 600
taaacttcta tttttcatgg ccttctaaaa ttcactccca aacccctagc tatagaagtc 660
tcttatccat cctctaaata aaaatgggag tctattttat ttcaccagag ttgatcgtaa 720
atttagtctc tcaaatttta taagttgagg gtagaggatg actggagttg ctctaaacgg 780
acctatcttc aagtgacctc agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtt taatctaacg 840
gacaccaacc agagaagaga accaccgcca gcgccgagcc aagcgacgtt gacatcttgg 900
cgcggcacgg catctccctg gcgtctggcc ccctctcgag acttccgctc cacctcccac 960
cggtggcggt ttccaagtcc gttccgcctc ctctcacacg gcacgaaacc gtgacgggca 1020
ccggcagcac ggggggattc ctttcccacc gctccttccc tttcccttcc tctcccgccg 1080
ctataaatag ccagccccat ccccagcttc tttccccaac ctcatcttct ctcgtgttgt 1140
tcggcacaac ccgatcgatc cccaactccc tcgtcgtctc tcctcgcgag cctcgtcgat 1200
cccccgcttc aaggtacggc gatcgattat cttccctctc tctaccttct ctctcttata 1260
gggcctgcta gctctgttcc tgtttttcca tggctgcgag gtacaataga tcggcgatcc 1320
atggttaggg cctgctagtt gtgttcctgt ttttccatgg ctgcgaggca caatagatct 1380
gatggcgtta tgatggttaa cttgtcatac tcttgcgatc tatggtccct ttaggagttt 1440
aggacatcta tttaatttcg gatagttcga gatctgtgat ccatggttag taccctaggc 1500
agtggggtta gatccgtgct gttatggttc gtagatggat tctgattgct cagtaactgg 1560
gaatcctggg atggttctag ctggttcgca gataagatcg atttcatgat atgctatatc 1620
ttgtttggtt gccgtggttc cgttaaatct gtctgttatg atcttagtct ttgataaggt 1680
tcggtcgtgc tagctacgtc ctgtgcagca cttaattgtc aggtcataat ttttagcatg 1740
cctttttttt attggtttgg ttttgtctga ctgggctgta gatagtttca atctttgtct 1800
gactgggctg tagatagttt caatctacct gtcggtttat tttattaaat ttggatctgt 1860
atgtgtgtca tatatcttca tcttttagat atatcgatag gtttatatgt tgctgtcggt 1920
tttttactgt tcctttatga gatatattca tgcttagata catgaaacaa cgtgctgtta 1980
cagtttaata gttcttgttt atctaataaa caaataagga taggtatatg ctgcagttag 2040
ttttactggt actttttttg acatgaacct acggcttaat aattagtctt catcaaataa 2100
aaagcatatt ttttaattat ttcgatatac ttgaatgatg tcatatgcag catctgtgtg 2160
aatttttggc cctgtcttca tatgctgttt atttgtttgg gactgtttct ttggttgata 2220
actcatcctg ttgtttggtg atccttttgc aggtg 2255
<210> 13
<211> 1114
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 13
cacaagaatg atgtcaccgt catgcttgga tccttttatg gtaaagcttc accttctata 60
atctaacaat agagaaatca gggaaaaatc atgttttggt tgtttttatt tctaacctcc 120
acaataactt tggtttacca ttttttgttt gattttagtt ttagagaagc gtttataaca 180
ggacctaaaa tcttttttca gtacacagta caacgcagac gctcatacac gcacgcacac 240
tcacctctat gaacacacgt aagaaaaccc tacaccttga gcaccttcga aggactgagc 300
cggtaaatat agagattctc gaagtcacta ttagcgcctc gttgtcaacg ggaatgtcgc 360
ttaccactta aagcataacg ccgagaaatc ccgtaataaa tccagtaaaa tacgagcacc 420
cgtgccaagt tgaatatttg aacccgagtg ggtagattcc accgcaaagg acctaaccag 480
atcatttcgc aaacaggaac taaaatcggt agagagccca gacaaaagcc tttcctaaga 540
gccactccag tggaagcccc tactttaggt ataaaatgca atactagtgg ggctcctaaa 600
taaacttcta tttttcatgg ccttctaaaa ttcactccca aacccctagc tatagaagtc 660
tcttatccat cctctaaata aaaatgggag tctattttat ttcaccagag ttgatcgtaa 720
atttagtctc tcaaatttta taagttgagg gtagaggatg actggagttg ctctaaacgg 780
acctatcttc aagtgacctc agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtt taatctaacg 840
gacaccaacc agagaagaga accaccgcca gcgccgagcc aagcgacgtt gacatcttgg 900
cgcggcacgg catctccctg gcgtctggcc ccctctcgag acttccgctc cacctcccac 960
cggtggcggt ttccaagtcc gttccgcctc ctctcacacg gcacgaaacc gtgacgggca 1020
ccggcagcac ggggggattc ctttcccacc gctccttccc tttcccttcc tctcccgccg 1080
ctataaatag ccagccccat ccccagcttc tttc 1114
<210> 14
<211> 1912
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 14
gtcaacggga atgtcgctta ccacttaaag cataacgccg agaaatcccg taataaatcc 60
agtaaaatac gagcacccgt gccaagttga atatttgaac ccgagtgggt agattccacc 120
gcaaaggacc taaccagatc atttcgcaaa caggaactaa aatcggtaga gagcccagac 180
aaaagccttt cctaagagcc actccagtgg aagcccctac tttaggtata aaatgcaata 240
ctagtggggc tcctaaataa acttctattt ttcatggcct tctaaaattc actcccaaac 300
ccctagctat agaagtctct tatccatcct ctaaataaaa atgggagtct attttatttc 360
accagagttg atcgtaaatt tagtctctca aattttataa gttgagggta gaggatgact 420
ggagttgctc taaacggacc tatcttcaag tgacctcagt gagcccgttt aacggcgtcg 480
acaagtttaa tctaacggac accaaccaga gaagagaacc accgccagcg ccgagccaag 540
cgacgttgac atcttggcgc ggcacggcat ctccctggcg tctggccccc tctcgagact 600
tccgctccac ctcccaccgg tggcggtttc caagtccgtt ccgcctcctc tcacacggca 660
cgaaaccgtg acgggcaccg gcagcacggg gggattcctt tcccaccgct ccttcccttt 720
cccttcctct cccgccgcta taaatagcca gccccatccc cagcttcttt ccccaacctc 780
atcttctctc gtgttgttcg gcacaacccg atcgatcccc aactccctcg tcgtctctcc 840
tcgcgagcct cgtcgatccc ccgcttcaag gtacggcgat cgattatctt ccctctctct 900
accttctctc tcttataggg cctgctagct ctgttcctgt ttttccatgg ctgcgaggta 960
caatagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttgtg ttcctgtttt tccatggctg 1020
cgaggcacaa tagatctgat ggcgttatga tggttaactt gtcatactct tgcgatctat 1080
ggtcccttta ggagtttagg acatctattt aatttcggat agttcgagat ctgtgatcca 1140
tggttagtac cctaggcagt ggggttagat ccgtgctgtt atggttcgta gatggattct 1200
gattgctcag taactgggaa tcctgggatg gttctagctg gttcgcagat aagatcgatt 1260
tcatgatatg ctatatcttg tttggttgcc gtggttccgt taaatctgtc tgttatgatc 1320
ttagtctttg ataaggttcg gtcgtgctag ctacgtcctg tgcagcactt aattgtcagg 1380
tcataatttt tagcatgcct tttttttatt ggtttggttt tgtctgactg ggctgtagat 1440
agtttcaatc tttgtctgac tgggctgtag atagtttcaa tctacctgtc ggtttatttt 1500
attaaatttg gatctgtatg tgtgtcatat atcttcatct tttagatata tcgataggtt 1560
tatatgttgc tgtcggtttt ttactgttcc tttatgagat atattcatgc ttagatacat 1620
gaaacaacgt gctgttacag tttaatagtt cttgtttatc taataaacaa ataaggatag 1680
gtatatgctg cagttagttt tactggtact ttttttgaca tgaacctacg gcttaataat 1740
tagtcttcat caaataaaaa gcatattttt taattatttc gatatacttg aatgatgtca 1800
tatgcagcat ctgtgtgaat ttttggccct gtcttcatat gctgtttatt tgtttgggac 1860
tgtttctttg gttgataact catcctgttg tttggtgatc cttttgcagg tg 1912
<210> 15
<211> 771
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 15
gtcaacggga atgtcgctta ccacttaaag cataacgccg agaaatcccg taataaatcc 60
agtaaaatac gagcacccgt gccaagttga atatttgaac ccgagtgggt agattccacc 120
gcaaaggacc taaccagatc atttcgcaaa caggaactaa aatcggtaga gagcccagac 180
aaaagccttt cctaagagcc actccagtgg aagcccctac tttaggtata aaatgcaata 240
ctagtggggc tcctaaataa acttctattt ttcatggcct tctaaaattc actcccaaac 300
ccctagctat agaagtctct tatccatcct ctaaataaaa atgggagtct attttatttc 360
accagagttg atcgtaaatt tagtctctca aattttataa gttgagggta gaggatgact 420
ggagttgctc taaacggacc tatcttcaag tgacctcagt gagcccgttt aacggcgtcg 480
acaagtttaa tctaacggac accaaccaga gaagagaacc accgccagcg ccgagccaag 540
cgacgttgac atcttggcgc ggcacggcat ctccctggcg tctggccccc tctcgagact 600
tccgctccac ctcccaccgg tggcggtttc caagtccgtt ccgcctcctc tcacacggca 660
cgaaaccgtg acgggcaccg gcagcacggg gggattcctt tcccaccgct ccttcccttt 720
cccttcctct cccgccgcta taaatagcca gccccatccc cagcttcttt c 771
<210> 16
<211> 1623
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 16
cactcccaaa cccctagcta tagaagtctc ttatccatcc tctaaataaa aatgggagtc 60
tattttattt caccagagtt gatcgtaaat ttagtctctc aaattttata agttgagggt 120
agaggatgac tggagttgct ctaaacggac ctatcttcaa gtgacctcag tgagcccgtt 180
taacggcgtc gacaagttta atctaacgga caccaaccag agaagagaac caccgccagc 240
gccgagccaa gcgacgttga catcttggcg cggcacggca tctccctggc gtctggcccc 300
ctctcgagac ttccgctcca cctcccaccg gtggcggttt ccaagtccgt tccgcctcct 360
ctcacacggc acgaaaccgt gacgggcacc ggcagcacgg ggggattcct ttcccaccgc 420
tccttccctt tcccttcctc tcccgccgct ataaatagcc agccccatcc ccagcttctt 480
tccccaacct catcttctct cgtgttgttc ggcacaaccc gatcgatccc caactccctc 540
gtcgtctctc ctcgcgagcc tcgtcgatcc cccgcttcaa ggtacggcga tcgattatct 600
tccctctctc taccttctct ctcttatagg gcctgctagc tctgttcctg tttttccatg 660
gctgcgaggt acaatagatc ggcgatccat ggttagggcc tgctagttgt gttcctgttt 720
ttccatggct gcgaggcaca atagatctga tggcgttatg atggttaact tgtcatactc 780
ttgcgatcta tggtcccttt aggagtttag gacatctatt taatttcgga tagttcgaga 840
tctgtgatcc atggttagta ccctaggcag tggggttaga tccgtgctgt tatggttcgt 900
agatggattc tgattgctca gtaactggga atcctgggat ggttctagct ggttcgcaga 960
taagatcgat ttcatgatat gctatatctt gtttggttgc cgtggttccg ttaaatctgt 1020
ctgttatgat cttagtcttt gataaggttc ggtcgtgcta gctacgtcct gtgcagcact 1080
taattgtcag gtcataattt ttagcatgcc ttttttttat tggtttggtt ttgtctgact 1140
gggctgtaga tagtttcaat ctttgtctga ctgggctgta gatagtttca atctacctgt 1200
cggtttattt tattaaattt ggatctgtat gtgtgtcata tatcttcatc ttttagatat 1260
atcgataggt ttatatgttg ctgtcggttt tttactgttc ctttatgaga tatattcatg 1320
cttagataca tgaaacaacg tgctgttaca gtttaatagt tcttgtttat ctaataaaca 1380
aataaggata ggtatatgct gcagttagtt ttactggtac tttttttgac atgaacctac 1440
ggcttaataa ttagtcttca tcaaataaaa agcatatttt ttaattattt cgatatactt 1500
gaatgatgtc atatgcagca tctgtgtgaa tttttggccc tgtcttcata tgctgtttat 1560
ttgtttggga ctgtttcttt ggttgataac tcatcctgtt gtttggtgat ccttttgcag 1620
gtg 1623
<210> 17
<211> 482
<212> ДНК
<213> Andropogon gerardii
<400> 17
cactcccaaa cccctagcta tagaagtctc ttatccatcc tctaaataaa aatgggagtc 60
tattttattt caccagagtt gatcgtaaat ttagtctctc aaattttata agttgagggt 120
agaggatgac tggagttgct ctaaacggac ctatcttcaa gtgacctcag tgagcccgtt 180
taacggcgtc gacaagttta atctaacgga caccaaccag agaagagaac caccgccagc 240
gccgagccaa gcgacgttga catcttggcg cggcacggca tctccctggc gtctggcccc 300
ctctcgagac ttccgctcca cctcccaccg gtggcggttt ccaagtccgt tccgcctcct 360
ctcacacggc acgaaaccgt gacgggcacc ggcagcacgg ggggattcct ttcccaccgc 420
tccttccctt tcccttcctc tcccgccgct ataaatagcc agccccatcc ccagcttctt 480
tc 482
<210> 18
<211> 3483
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 18
gtggccagct tttgttctag ttcaacggcc ccggccttcc gggcacctaa taccctaatt 60
aatctattgc agctaacctc aaaagaaatg catttgcagt tgtctgtccc aatcaatcta 120
ctagcagact tacattatag atggaggaaa ttaaattcag cctttgacgt ggatgcaaca 180
actgcactgc acaggatacc atcttagccg ttgtgtcaaa gtttgctttg ctaaacgttt 240
tgagaaaacc agctttgacc aacgcgagat gagcgcctta cgtttggcac aatgtaatgt 300
aatccggcac ggcaagttag actctgtagt gttagccggc ctctttacgt ttggcatagt 360
ttaattgaat ccggcatggc aagttagacc gtagtgtgag ccggccaacg caagttatta 420
tgacatatgt ataagagcaa gtgtattgtc acgtgatatt tatgttgaga tgaagaagag 480
aaaataaaca gcctgcaaat ttatagcgag tgatagatgg gcacaaggct tcctatttct 540
taaatcagac tttgtaagaa caaaaaaagg acttataaga gaatgggata aaccatatat 600
caatggtgta gtatgttagt atgcattaag atctgactat tatatgagtg agttgttaaa 660
ttcattttag gtgacatggc ccggttaaat tattagccat accctaacag ctctaaaaaa 720
gatatattcg ttgaggcact tttatgcaac cacatagtca acttgaatgc cgcttgagtg 780
cgttctcaag ttttttttct tgcaaattac gcttttttaa gaaagtataa tttggatcgt 840
gcgatttttt ttctctaggt gtgcgtgact gtgtgagtaa caattttgga tctcagaaag 900
gtaataaaag aataatactg ctgcctactt tgaggattac aatatctttc tctaaaatgt 960
tttggtttgt tatttaaacc gtctttaagg ccaattgctc aagattcatt caacaattga 1020
aacgtctcac atgattaaat catataaggt tgctaaggtc ttgtttgaca aggttttttt 1080
tgtggaaatt tcatctaaat ttttgagtga aactatcaaa tactaattta aaaaaggcaa 1140
attttgctgg aggacactgc agaaacgtgt aattggccgg cacaaaccgc caaacggaga 1200
atttgcccag taccattata aattcatgat aaattcatgg ttgtttgcca gtggggctag 1260
ggttcctcgc gtatggtgcg gaatgtggtt tggttcgacc aactcgaact caatccgatc 1320
caaaggggca tcaatagtca ttttagaaag tttctctctc ccgagcagtg gaaatgatta 1380
ttctatttgg cgcgatgtcc accggcaaac aaccacgaat ttgtaatggt actaggcaaa 1440
ttctccgttt ggcggtgtgt gccggccaat tacacgtttt tgcggtgtcc tccgacaaaa 1500
tttgcctttt aaaaacaatt ttataagaga agctccggag ataaaaggcc gtcaatgtta 1560
caagagtgaa gtcgtctact ccctccatcc caaaaaatgt aattctaagt atgagttgta 1620
ttattatttt tggacaaaag gagtatacca caagaatgat atcatcgtca tgcttagatc 1680
ctttttagta aagcttgagc ttctctaaaa gtagagaaat tagaaaaaaa tcacgttttt 1740
gtggtcttga tttctagcct ccacaaaatc tttggtttta cattttttgt ttgattttgg 1800
tttcagaagt ccttatttat atgtgctagt ttggcagcac ttaaaatcgt tagagagagc 1860
ctaaacaaaa gccttttcaa aacgaccttg agccagattg gttgatggcc aaaatttgat 1920
tgtcaaaact taggcaagcc aagattttag cagctatttg gtttggtacc aaaatttgcc 1980
aatgatctgt tcttttgcct tttcaaccgg tttatcagcc gtacttcagc ttattctctc 2040
tcacagaaca ctattgaatc agccgaaaag ccaccgcaga acaggaccag tatctcacaa 2100
atggcatgcc aaatatactc accgtcagtg agcccgttta acggcgtcga caagtctaac 2160
ggccaccaac cagcgaacca ccagcgtcaa gctagccaag cgaagcagac ggccgagacg 2220
ttgacacctt ggcgcgggca tctctctggc cccctctcga gagttccgct ccacctccac 2280
tggtggcggt ttccaagtcc gttccgcctc ctgctcctcc tcacacggca cgaaaccgtc 2340
acggcaccgg cagcacgggg gattcctttc ccaccgctcc ttccctttcc cttcctcgcc 2400
cgccgtttta aatagccagc cccatcccca gcttctctcc ccgtacggcg atcatcctcc 2460
ctttctctac cttctcttct ctagactagg tcggcgatcc atggttaggg cctgctagtt 2520
ctgttcctgt ttttccgtgg ctgcgaggta caatagatct gatggcgtta tgatggttaa 2580
cttgtcatac tcctgcggtg tgcggtctat agtgctttta ggacatcaat ttgacctggc 2640
tcgttcgaga tcggcgatcc atggttagga ccctaggcgg tggagtcggg ttagatccgc 2700
gctgtttgtg ttagtagatg gatgcgacct ttacttcaga cacgttctga ttgttaactt 2760
gtcagcacct gggagtcctg ggatggttct agctggttcg cagatgagat cgatttcatg 2820
atctgctgta tcttgtttcg ttaggttcct tttaatctat ccgtggtatt atgctaacct 2880
atgatatggt tcgatcgtgc tagctacgtc ctgtgtcata atttttagca tgcccttttt 2940
tgtttggttt tgtctgattg ggctgtagat cagagtatac tgtttcaaac tacctactgg 3000
atatatttat taaatttgaa tctgtatgtg tgtcacatat atcttcataa ttaaaatgga 3060
tggaaagata tatggatagg tacatgtgtt gctgtgggtt ttactggtac tttgttagat 3120
atacatgctt agatacatga agcaacatga tgttacagtt caataattct tgtttaccta 3180
ataaacaaat aaggataggt gtatgttgct gtgggttttg ctggtacttt gttagatata 3240
tatgcttaga tatatgaagc aacatcctgc tacggtttaa taattattgt ttatatctaa 3300
tagacaagcc tgctttttaa ttattttgat atacttggat gatggcatac agcagctatg 3360
tgtggatttt taaataccca gcatcatgag catgcatgac cctgccttag tatgctgttt 3420
atttgcttga gacttctttt tttgttggta ctcacctttt gtagtttggt gactcttctg 3480
cag 3483
<210> 19
<211> 2536
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 19
gtggccagct tttgttctag ttcaacggcc ccggccttcc gggcacctaa taccctaatt 60
aatctattgc agctaacctc aaaagaaatg catttgcagt tgtctgtccc aatcaatcta 120
ctagcagact tacattatag atggaggaaa ttaaattcag cctttgacgt ggatgcaaca 180
actgcactgc acaggatacc atcttagccg ttgtgtcaaa gtttgctttg ctaaacgttt 240
tgagaaaacc agctttgacc aacgcgagat gagcgcctta cgtttggcac aatgtaatgt 300
aatccggcac ggcaagttag actctgtagt gttagccggc ctctttacgt ttggcatagt 360
ttaattgaat ccggcatggc aagttagacc gtagtgtgag ccggccaacg caagttatta 420
tgacatatgt ataagagcaa gtgtattgtc acgtgatatt tatgttgaga tgaagaagag 480
aaaataaaca gcctgcaaat ttatagcgag tgatagatgg gcacaaggct tcctatttct 540
taaatcagac tttgtaagaa caaaaaaagg acttataaga gaatgggata aaccatatat 600
caatggtgta gtatgttagt atgcattaag atctgactat tatatgagtg agttgttaaa 660
ttcattttag gtgacatggc ccggttaaat tattagccat accctaacag ctctaaaaaa 720
gatatattcg ttgaggcact tttatgcaac cacatagtca acttgaatgc cgcttgagtg 780
cgttctcaag ttttttttct tgcaaattac gcttttttaa gaaagtataa tttggatcgt 840
gcgatttttt ttctctaggt gtgcgtgact gtgtgagtaa caattttgga tctcagaaag 900
gtaataaaag aataatactg ctgcctactt tgaggattac aatatctttc tctaaaatgt 960
tttggtttgt tatttaaacc gtctttaagg ccaattgctc aagattcatt caacaattga 1020
aacgtctcac atgattaaat catataaggt tgctaaggtc ttgtttgaca aggttttttt 1080
tgtggaaatt tcatctaaat ttttgagtga aactatcaaa tactaattta aaaaaggcaa 1140
attttgctgg aggacactgc agaaacgtgt aattggccgg cacaaaccgc caaacggaga 1200
atttgcccag taccattata aattcatgat aaattcatgg ttgtttgcca gtggggctag 1260
ggttcctcgc gtatggtgcg gaatgtggtt tggttcgacc aactcgaact caatccgatc 1320
caaaggggca tcaatagtca ttttagaaag tttctctctc ccgagcagtg gaaatgatta 1380
ttctatttgg cgcgatgtcc accggcaaac aaccacgaat ttgtaatggt actaggcaaa 1440
ttctccgttt ggcggtgtgt gccggccaat tacacgtttt tgcggtgtcc tccgacaaaa 1500
tttgcctttt aaaaacaatt ttataagaga agctccggag ataaaaggcc gtcaatgtta 1560
caagagtgaa gtcgtctact ccctccatcc caaaaaatgt aattctaagt atgagttgta 1620
ttattatttt tggacaaaag gagtatacca caagaatgat atcatcgtca tgcttagatc 1680
ctttttagta aagcttgagc ttctctaaaa gtagagaaat tagaaaaaaa tcacgttttt 1740
gtggtcttga tttctagcct ccacaaaatc tttggtttta cattttttgt ttgattttgg 1800
tttcagaagt ccttatttat atgtgctagt ttggcagcac ttaaaatcgt tagagagagc 1860
ctaaacaaaa gccttttcaa aacgaccttg agccagattg gttgatggcc aaaatttgat 1920
tgtcaaaact taggcaagcc aagattttag cagctatttg gtttggtacc aaaatttgcc 1980
aatgatctgt tcttttgcct tttcaaccgg tttatcagcc gtacttcagc ttattctctc 2040
tcacagaaca ctattgaatc agccgaaaag ccaccgcaga acaggaccag tatctcacaa 2100
atggcatgcc aaatatactc accgtcagtg agcccgttta acggcgtcga caagtctaac 2160
ggccaccaac cagcgaacca ccagcgtcaa gctagccaag cgaagcagac ggccgagacg 2220
ttgacacctt ggcgcgggca tctctctggc cccctctcga gagttccgct ccacctccac 2280
tggtggcggt ttccaagtcc gttccgcctc ctgctcctcc tcacacggca cgaaaccgtc 2340
acggcaccgg cagcacgggg gattcctttc ccaccgctcc ttccctttcc cttcctcgcc 2400
cgccgtttta aatagccagc cccatcccca gcttctctcc ccaacctcag cttctctcgt 2460
tgttcggagc gcacacacaa cccgatcccc aatcccctcg tctctcctcg cgagcctcgt 2520
cgatccccgc ttcaag 2536
<210> 20
<211> 94
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 20
aacctcagct tctctcgttg ttcggagcgc acacacaacc cgatccccaa tcccctcgtc 60
tctcctcgcg agcctcgtcg atccccgctt caag 94
<210> 21
<211> 1041
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 21
gtacggcgat catcctccct ttctctacct tctcttctct agactaggtc ggcgatccat 60
ggttagggcc tgctagttct gttcctgttt ttccgtggct gcgaggtaca atagatctga 120
tggcgttatg atggttaact tgtcatactc ctgcggtgtg cggtctatag tgcttttagg 180
acatcaattt gacctggctc gttcgagatc ggcgatccat ggttaggacc ctaggcggtg 240
gagtcgggtt agatccgcgc tgtttgtgtt agtagatgga tgcgaccttt acttcagaca 300
cgttctgatt gttaacttgt cagcacctgg gagtcctggg atggttctag ctggttcgca 360
gatgagatcg atttcatgat ctgctgtatc ttgtttcgtt aggttccttt taatctatcc 420
gtggtattat gctaacctat gatatggttc gatcgtgcta gctacgtcct gtgtcataat 480
ttttagcatg cccttttttg tttggttttg tctgattggg ctgtagatca gagtatactg 540
tttcaaacta cctactggat atatttatta aatttgaatc tgtatgtgtg tcacatatat 600
cttcataatt aaaatggatg gaaagatata tggataggta catgtgttgc tgtgggtttt 660
actggtactt tgttagatat acatgcttag atacatgaag caacatgatg ttacagttca 720
ataattcttg tttacctaat aaacaaataa ggataggtgt atgttgctgt gggttttgct 780
ggtactttgt tagatatata tgcttagata tatgaagcaa catcctgcta cggtttaata 840
attattgttt atatctaata gacaagcctg ctttttaatt attttgatat acttggatga 900
tggcatacag cagctatgtg tggattttta aatacccagc atcatgagca tgcatgaccc 960
tgccttagta tgctgtttat ttgcttgaga cttctttttt tgttggtact caccttttgt 1020
agtttggtga ctcttctgca g 1041
<210> 22
<211> 3152
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 22
gtataagagc aagtgtattg tcacgtgata tttatgttga gatgaagaag agaaaataaa 60
cagcctgcaa atttatagcg agtgatagat gggcacaagg cttcctattt cttaaatcag 120
actttgtaag aacaaaaaaa ggacttataa gagaatggga taaaccatat atcaatggtg 180
tagtatgtta gtatgcatta agatctgact attatatgag tgagttgtta aattcatttt 240
aggtgacatg gcccggttaa attattagcc ataccctaac agctctaaaa aagatatatt 300
cgttgaggca cttttatgca accacatagt caacttgaat gccgcttgag tgcgttctca 360
agtttttttt cttgcaaatt acgctttttt aagaaagtat aatttggatc gtgcgatttt 420
ttttctctag gtgtgcgtga ctgtgtgagt aacaattttg gatctcagaa aggtaataaa 480
agaataatac tgctgcctac tttgaggatt acaatatctt tctctaaaat gttttggttt 540
gttatttaaa ccgtctttaa ggccaattgc tcaagattca ttcaacaatt gaaacgtctc 600
acatgattaa atcatataag gttgctaagg tcttgtttga caaggttttt tttgtggaaa 660
tttcatctaa atttttgagt gaaactatca aatactaatt taaaaaaggc aaattttgct 720
ggaggacact gcagaaacgt gtaattggcc ggcacaaacc gccaaacgga gaatttgccc 780
agtaccatta taaattcatg ataaattcat ggttgtttgc cagtggggct agggttcctc 840
gcgtatggtg cggaatgtgg tttggttcga ccaactcgaa ctcaatccga tccaaagggg 900
catcaatagt cattttagaa agtttctctc tcccgagcag tggaaatgat tattctattt 960
ggcgcgatgt ccaccggcaa acaaccacga atttgtaatg gtactaggca aattctccgt 1020
ttggcggtgt gtgccggcca attacacgtt tttgcggtgt cctccgacaa aatttgcctt 1080
ttaaaaacaa ttttataaga gaagctccgg agataaaagg ccgtcaatgt tacaagagtg 1140
aagtcgtcta ctccctccat cccaaaaaat gtaattctaa gtatgagttg tattattatt 1200
tttggacaaa aggagtatac cacaagaatg atatcatcgt catgcttaga tcctttttag 1260
taaagcttga gcttctctaa aagtagagaa attagaaaaa aatcacgttt ttgtggtctt 1320
gatttctagc ctccacaaaa tctttggttt tacatttttt gtttgatttt ggtttcagaa 1380
gtccttattt atatgtgcta gtttggcagc acttaaaatc gttagagaga gcctaaacaa 1440
aagccttttc aaaacgacct tgagccagat tggttgatgg ccaaaatttg attgtcaaaa 1500
cttaggcaag ccaagatttt agcagctatt tggtttggta ccaaaatttg ccaatgatct 1560
gttcttttgc cttttcaacc ggtttatcag ccgtacttca gcttattctc tctcacagaa 1620
cactattgaa tcagccgaaa agccaccgca gaacaggacc agtatctcac aaatggcatg 1680
ccaaatatac tcaccgtcag tgagcccgtt taacggcgtc gacaagtcta acggccacca 1740
accagcgaac caccagcgtc aagctagcca agcgaagcag acggccgaga cgttgacacc 1800
ttggcgcggg catctctctg gccccctctc gagagttccg ctccacctcc actggtggcg 1860
gtttccaagt ccgttccgcc tcctgctcct cctcacacgg cacgaaaccg tcacggcacc 1920
ggcagcacgg gggattcctt tcccaccgct ccttcccttt cccttcctcg cccgccgttt 1980
taaatagcca gccccatccc cagcttctct ccccaacctc agcttctctc gttgttcgga 2040
gcgcacacac aacccgatcc ccaatcccct cgtctctcct cgcgagcctc gtcgatcccc 2100
gcttcaaggt acggcgatca tcctcccttt ctctaccttc tcttctctag actaggtcgg 2160
cgatccatgg ttagggcctg ctagttctgt tcctgttttt ccgtggctgc gaggtacaat 2220
agatctgatg gcgttatgat ggttaacttg tcatactcct gcggtgtgcg gtctatagtg 2280
cttttaggac atcaatttga cctggctcgt tcgagatcgg cgatccatgg ttaggaccct 2340
aggcggtgga gtcgggttag atccgcgctg tttgtgttag tagatggatg cgacctttac 2400
ttcagacacg ttctgattgt taacttgtca gcacctggga gtcctgggat ggttctagct 2460
ggttcgcaga tgagatcgat ttcatgatct gctgtatctt gtttcgttag gttcctttta 2520
atctatccgt ggtattatgc taacctatga tatggttcga tcgtgctagc tacgtcctgt 2580
gtcataattt ttagcatgcc cttttttgtt tggttttgtc tgattgggct gtagatcaga 2640
gtatactgtt tcaaactacc tactggatat atttattaaa tttgaatctg tatgtgtgtc 2700
acatatatct tcataattaa aatggatgga aagatatatg gataggtaca tgtgttgctg 2760
tgggttttac tggtactttg ttagatatac atgcttagat acatgaagca acatgatgtt 2820
acagttcaat aattcttgtt tacctaataa acaaataagg ataggtgtat gttgctgtgg 2880
gttttgctgg tactttgtta gatatatatg cttagatata tgaagcaaca tcctgctacg 2940
gtttaataat tattgtttat atctaataga caagcctgct ttttaattat tttgatatac 3000
ttggatgatg gcatacagca gctatgtgtg gatttttaaa tacccagcat catgagcatg 3060
catgaccctg ccttagtatg ctgtttattt gcttgagact tctttttttg ttggtactca 3120
ccttttgtag tttggtgact cttctgcagg tg 3152
<210> 23
<211> 2014
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 23
gtataagagc aagtgtattg tcacgtgata tttatgttga gatgaagaag agaaaataaa 60
cagcctgcaa atttatagcg agtgatagat gggcacaagg cttcctattt cttaaatcag 120
actttgtaag aacaaaaaaa ggacttataa gagaatggga taaaccatat atcaatggtg 180
tagtatgtta gtatgcatta agatctgact attatatgag tgagttgtta aattcatttt 240
aggtgacatg gcccggttaa attattagcc ataccctaac agctctaaaa aagatatatt 300
cgttgaggca cttttatgca accacatagt caacttgaat gccgcttgag tgcgttctca 360
agtttttttt cttgcaaatt acgctttttt aagaaagtat aatttggatc gtgcgatttt 420
ttttctctag gtgtgcgtga ctgtgtgagt aacaattttg gatctcagaa aggtaataaa 480
agaataatac tgctgcctac tttgaggatt acaatatctt tctctaaaat gttttggttt 540
gttatttaaa ccgtctttaa ggccaattgc tcaagattca ttcaacaatt gaaacgtctc 600
acatgattaa atcatataag gttgctaagg tcttgtttga caaggttttt tttgtggaaa 660
tttcatctaa atttttgagt gaaactatca aatactaatt taaaaaaggc aaattttgct 720
ggaggacact gcagaaacgt gtaattggcc ggcacaaacc gccaaacgga gaatttgccc 780
agtaccatta taaattcatg ataaattcat ggttgtttgc cagtggggct agggttcctc 840
gcgtatggtg cggaatgtgg tttggttcga ccaactcgaa ctcaatccga tccaaagggg 900
catcaatagt cattttagaa agtttctctc tcccgagcag tggaaatgat tattctattt 960
ggcgcgatgt ccaccggcaa acaaccacga atttgtaatg gtactaggca aattctccgt 1020
ttggcggtgt gtgccggcca attacacgtt tttgcggtgt cctccgacaa aatttgcctt 1080
ttaaaaacaa ttttataaga gaagctccgg agataaaagg ccgtcaatgt tacaagagtg 1140
aagtcgtcta ctccctccat cccaaaaaat gtaattctaa gtatgagttg tattattatt 1200
tttggacaaa aggagtatac cacaagaatg atatcatcgt catgcttaga tcctttttag 1260
taaagcttga gcttctctaa aagtagagaa attagaaaaa aatcacgttt ttgtggtctt 1320
gatttctagc ctccacaaaa tctttggttt tacatttttt gtttgatttt ggtttcagaa 1380
gtccttattt atatgtgcta gtttggcagc acttaaaatc gttagagaga gcctaaacaa 1440
aagccttttc aaaacgacct tgagccagat tggttgatgg ccaaaatttg attgtcaaaa 1500
cttaggcaag ccaagatttt agcagctatt tggtttggta ccaaaatttg ccaatgatct 1560
gttcttttgc cttttcaacc ggtttatcag ccgtacttca gcttattctc tctcacagaa 1620
cactattgaa tcagccgaaa agccaccgca gaacaggacc agtatctcac aaatggcatg 1680
ccaaatatac tcaccgtcag tgagcccgtt taacggcgtc gacaagtcta acggccacca 1740
accagcgaac caccagcgtc aagctagcca agcgaagcag acggccgaga cgttgacacc 1800
ttggcgcggg catctctctg gccccctctc gagagttccg ctccacctcc actggtggcg 1860
gtttccaagt ccgttccgcc tcctgctcct cctcacacgg cacgaaaccg tcacggcacc 1920
ggcagcacgg gggattcctt tcccaccgct ccttcccttt cccttcctcg cccgccgttt 1980
taaatagcca gccccatccc cagcttctct cccc 2014
<210> 24
<211> 1044
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 24
gtacggcgat catcctccct ttctctacct tctcttctct agactaggtc ggcgatccat 60
ggttagggcc tgctagttct gttcctgttt ttccgtggct gcgaggtaca atagatctga 120
tggcgttatg atggttaact tgtcatactc ctgcggtgtg cggtctatag tgcttttagg 180
acatcaattt gacctggctc gttcgagatc ggcgatccat ggttaggacc ctaggcggtg 240
gagtcgggtt agatccgcgc tgtttgtgtt agtagatgga tgcgaccttt acttcagaca 300
cgttctgatt gttaacttgt cagcacctgg gagtcctggg atggttctag ctggttcgca 360
gatgagatcg atttcatgat ctgctgtatc ttgtttcgtt aggttccttt taatctatcc 420
gtggtattat gctaacctat gatatggttc gatcgtgcta gctacgtcct gtgtcataat 480
ttttagcatg cccttttttg tttggttttg tctgattggg ctgtagatca gagtatactg 540
tttcaaacta cctactggat atatttatta aatttgaatc tgtatgtgtg tcacatatat 600
cttcataatt aaaatggatg gaaagatata tggataggta catgtgttgc tgtgggtttt 660
actggtactt tgttagatat acatgcttag atacatgaag caacatgatg ttacagttca 720
ataattcttg tttacctaat aaacaaataa ggataggtgt atgttgctgt gggttttgct 780
ggtactttgt tagatatata tgcttagata tatgaagcaa catcctgcta cggtttaata 840
attattgttt atatctaata gacaagcctg ctttttaatt attttgatat acttggatga 900
tggcatacag cagctatgtg tggattttta aatacccagc atcatgagca tgcatgaccc 960
tgccttagta tgctgtttat ttgcttgaga cttctttttt tgttggtact caccttttgt 1020
agtttggtga ctcttctgca ggtg 1044
<210> 25
<211> 2663
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 25
ctgctgccta ctttgaggat tacaatatct ttctctaaaa tgttttggtt tgttatttaa 60
accgtcttta aggccaattg ctcaagattc attcaacaat tgaaacgtct cacatgatta 120
aatcatataa ggttgctaag gtcttgtttg acaaggtttt ttttgtggaa atttcatcta 180
aatttttgag tgaaactatc aaatactaat ttaaaaaagg caaattttgc tggaggacac 240
tgcagaaacg tgtaattggc cggcacaaac cgccaaacgg agaatttgcc cagtaccatt 300
ataaattcat gataaattca tggttgtttg ccagtggggc tagggttcct cgcgtatggt 360
gcggaatgtg gtttggttcg accaactcga actcaatccg atccaaaggg gcatcaatag 420
tcattttaga aagtttctct ctcccgagca gtggaaatga ttattctatt tggcgcgatg 480
tccaccggca aacaaccacg aatttgtaat ggtactaggc aaattctccg tttggcggtg 540
tgtgccggcc aattacacgt ttttgcggtg tcctccgaca aaatttgcct tttaaaaaca 600
attttataag agaagctccg gagataaaag gccgtcaatg ttacaagagt gaagtcgtct 660
actccctcca tcccaaaaaa tgtaattcta agtatgagtt gtattattat ttttggacaa 720
aaggagtata ccacaagaat gatatcatcg tcatgcttag atccttttta gtaaagcttg 780
agcttctcta aaagtagaga aattagaaaa aaatcacgtt tttgtggtct tgatttctag 840
cctccacaaa atctttggtt ttacattttt tgtttgattt tggtttcaga agtccttatt 900
tatatgtgct agtttggcag cacttaaaat cgttagagag agcctaaaca aaagcctttt 960
caaaacgacc ttgagccaga ttggttgatg gccaaaattt gattgtcaaa acttaggcaa 1020
gccaagattt tagcagctat ttggtttggt accaaaattt gccaatgatc tgttcttttg 1080
ccttttcaac cggtttatca gccgtacttc agcttattct ctctcacaga acactattga 1140
atcagccgaa aagccaccgc agaacaggac cagtatctca caaatggcat gccaaatata 1200
ctcaccgtca gtgagcccgt ttaacggcgt cgacaagtct aacggccacc aaccagcgaa 1260
ccaccagcgt caagctagcc aagcgaagca gacggccgag acgttgacac cttggcgcgg 1320
gcatctctct ggccccctct cgagagttcc gctccacctc cactggtggc ggtttccaag 1380
tccgttccgc ctcctgctcc tcctcacacg gcacgaaacc gtcacggcac cggcagcacg 1440
ggggattcct ttcccaccgc tccttccctt tcccttcctc gcccgccgtt ttaaatagcc 1500
agccccatcc ccagcttctc tccccaacct cagcttctct cgttgttcgg agcgcacaca 1560
caacccgatc cccaatcccc tcgtctctcc tcgcgagcct cgtcgatccc cgcttcaagg 1620
tacggcgatc atcctccctt tctctacctt ctcttctcta gactaggtcg gcgatccatg 1680
gttagggcct gctagttctg ttcctgtttt tccgtggctg cgaggtacaa tagatctgat 1740
ggcgttatga tggttaactt gtcatactcc tgcggtgtgc ggtctatagt gcttttagga 1800
catcaatttg acctggctcg ttcgagatcg gcgatccatg gttaggaccc taggcggtgg 1860
agtcgggtta gatccgcgct gtttgtgtta gtagatggat gcgaccttta cttcagacac 1920
gttctgattg ttaacttgtc agcacctggg agtcctggga tggttctagc tggttcgcag 1980
atgagatcga tttcatgatc tgctgtatct tgtttcgtta ggttcctttt aatctatccg 2040
tggtattatg ctaacctatg atatggttcg atcgtgctag ctacgtcctg tgtcataatt 2100
tttagcatgc ccttttttgt ttggttttgt ctgattgggc tgtagatcag agtatactgt 2160
ttcaaactac ctactggata tatttattaa atttgaatct gtatgtgtgt cacatatatc 2220
ttcataatta aaatggatgg aaagatatat ggataggtac atgtgttgct gtgggtttta 2280
ctggtacttt gttagatata catgcttaga tacatgaagc aacatgatgt tacagttcaa 2340
taattcttgt ttacctaata aacaaataag gataggtgta tgttgctgtg ggttttgctg 2400
gtactttgtt agatatatat gcttagatat atgaagcaac atcctgctac ggtttaataa 2460
ttattgttta tatctaatag acaagcctgc tttttaatta ttttgatata cttggatgat 2520
ggcatacagc agctatgtgt ggatttttaa atacccagca tcatgagcat gcatgaccct 2580
gccttagtat gctgtttatt tgcttgagac ttcttttttt gttggtactc accttttgta 2640
gtttggtgac tcttctgcag gtg 2663
<210> 26
<211> 1525
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 26
ctgctgccta ctttgaggat tacaatatct ttctctaaaa tgttttggtt tgttatttaa 60
accgtcttta aggccaattg ctcaagattc attcaacaat tgaaacgtct cacatgatta 120
aatcatataa ggttgctaag gtcttgtttg acaaggtttt ttttgtggaa atttcatcta 180
aatttttgag tgaaactatc aaatactaat ttaaaaaagg caaattttgc tggaggacac 240
tgcagaaacg tgtaattggc cggcacaaac cgccaaacgg agaatttgcc cagtaccatt 300
ataaattcat gataaattca tggttgtttg ccagtggggc tagggttcct cgcgtatggt 360
gcggaatgtg gtttggttcg accaactcga actcaatccg atccaaaggg gcatcaatag 420
tcattttaga aagtttctct ctcccgagca gtggaaatga ttattctatt tggcgcgatg 480
tccaccggca aacaaccacg aatttgtaat ggtactaggc aaattctccg tttggcggtg 540
tgtgccggcc aattacacgt ttttgcggtg tcctccgaca aaatttgcct tttaaaaaca 600
attttataag agaagctccg gagataaaag gccgtcaatg ttacaagagt gaagtcgtct 660
actccctcca tcccaaaaaa tgtaattcta agtatgagtt gtattattat ttttggacaa 720
aaggagtata ccacaagaat gatatcatcg tcatgcttag atccttttta gtaaagcttg 780
agcttctcta aaagtagaga aattagaaaa aaatcacgtt tttgtggtct tgatttctag 840
cctccacaaa atctttggtt ttacattttt tgtttgattt tggtttcaga agtccttatt 900
tatatgtgct agtttggcag cacttaaaat cgttagagag agcctaaaca aaagcctttt 960
caaaacgacc ttgagccaga ttggttgatg gccaaaattt gattgtcaaa acttaggcaa 1020
gccaagattt tagcagctat ttggtttggt accaaaattt gccaatgatc tgttcttttg 1080
ccttttcaac cggtttatca gccgtacttc agcttattct ctctcacaga acactattga 1140
atcagccgaa aagccaccgc agaacaggac cagtatctca caaatggcat gccaaatata 1200
ctcaccgtca gtgagcccgt ttaacggcgt cgacaagtct aacggccacc aaccagcgaa 1260
ccaccagcgt caagctagcc aagcgaagca gacggccgag acgttgacac cttggcgcgg 1320
gcatctctct ggccccctct cgagagttcc gctccacctc cactggtggc ggtttccaag 1380
tccgttccgc ctcctgctcc tcctcacacg gcacgaaacc gtcacggcac cggcagcacg 1440
ggggattcct ttcccaccgc tccttccctt tcccttcctc gcccgccgtt ttaaatagcc 1500
agccccatcc ccagcttctc tcccc 1525
<210> 27
<211> 2182
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 27
ccaccggcaa acaaccacga atttgtaatg gtactaggca aattctccgt ttggcggtgt 60
gtgccggcca attacacgtt tttgcggtgt cctccgacaa aatttgcctt ttaaaaacaa 120
ttttataaga gaagctccgg agataaaagg ccgtcaatgt tacaagagtg aagtcgtcta 180
ctccctccat cccaaaaaat gtaattctaa gtatgagttg tattattatt tttggacaaa 240
aggagtatac cacaagaatg atatcatcgt catgcttaga tcctttttag taaagcttga 300
gcttctctaa aagtagagaa attagaaaaa aatcacgttt ttgtggtctt gatttctagc 360
ctccacaaaa tctttggttt tacatttttt gtttgatttt ggtttcagaa gtccttattt 420
atatgtgcta gtttggcagc acttaaaatc gttagagaga gcctaaacaa aagccttttc 480
aaaacgacct tgagccagat tggttgatgg ccaaaatttg attgtcaaaa cttaggcaag 540
ccaagatttt agcagctatt tggtttggta ccaaaatttg ccaatgatct gttcttttgc 600
cttttcaacc ggtttatcag ccgtacttca gcttattctc tctcacagaa cactattgaa 660
tcagccgaaa agccaccgca gaacaggacc agtatctcac aaatggcatg ccaaatatac 720
tcaccgtcag tgagcccgtt taacggcgtc gacaagtcta acggccacca accagcgaac 780
caccagcgtc aagctagcca agcgaagcag acggccgaga cgttgacacc ttggcgcggg 840
catctctctg gccccctctc gagagttccg ctccacctcc actggtggcg gtttccaagt 900
ccgttccgcc tcctgctcct cctcacacgg cacgaaaccg tcacggcacc ggcagcacgg 960
gggattcctt tcccaccgct ccttcccttt cccttcctcg cccgccgttt taaatagcca 1020
gccccatccc cagcttctct ccccaacctc agcttctctc gttgttcgga gcgcacacac 1080
aacccgatcc ccaatcccct cgtctctcct cgcgagcctc gtcgatcccc gcttcaaggt 1140
acggcgatca tcctcccttt ctctaccttc tcttctctag actaggtcgg cgatccatgg 1200
ttagggcctg ctagttctgt tcctgttttt ccgtggctgc gaggtacaat agatctgatg 1260
gcgttatgat ggttaacttg tcatactcct gcggtgtgcg gtctatagtg cttttaggac 1320
atcaatttga cctggctcgt tcgagatcgg cgatccatgg ttaggaccct aggcggtgga 1380
gtcgggttag atccgcgctg tttgtgttag tagatggatg cgacctttac ttcagacacg 1440
ttctgattgt taacttgtca gcacctggga gtcctgggat ggttctagct ggttcgcaga 1500
tgagatcgat ttcatgatct gctgtatctt gtttcgttag gttcctttta atctatccgt 1560
ggtattatgc taacctatga tatggttcga tcgtgctagc tacgtcctgt gtcataattt 1620
ttagcatgcc cttttttgtt tggttttgtc tgattgggct gtagatcaga gtatactgtt 1680
tcaaactacc tactggatat atttattaaa tttgaatctg tatgtgtgtc acatatatct 1740
tcataattaa aatggatgga aagatatatg gataggtaca tgtgttgctg tgggttttac 1800
tggtactttg ttagatatac atgcttagat acatgaagca acatgatgtt acagttcaat 1860
aattcttgtt tacctaataa acaaataagg ataggtgtat gttgctgtgg gttttgctgg 1920
tactttgtta gatatatatg cttagatata tgaagcaaca tcctgctacg gtttaataat 1980
tattgtttat atctaataga caagcctgct ttttaattat tttgatatac ttggatgatg 2040
gcatacagca gctatgtgtg gatttttaaa tacccagcat catgagcatg catgaccctg 2100
ccttagtatg ctgtttattt gcttgagact tctttttttg ttggtactca ccttttgtag 2160
tttggtgact cttctgcagg tg 2182
<210> 28
<211> 1044
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 28
ccaccggcaa acaaccacga atttgtaatg gtactaggca aattctccgt ttggcggtgt 60
gtgccggcca attacacgtt tttgcggtgt cctccgacaa aatttgcctt ttaaaaacaa 120
ttttataaga gaagctccgg agataaaagg ccgtcaatgt tacaagagtg aagtcgtcta 180
ctccctccat cccaaaaaat gtaattctaa gtatgagttg tattattatt tttggacaaa 240
aggagtatac cacaagaatg atatcatcgt catgcttaga tcctttttag taaagcttga 300
gcttctctaa aagtagagaa attagaaaaa aatcacgttt ttgtggtctt gatttctagc 360
ctccacaaaa tctttggttt tacatttttt gtttgatttt ggtttcagaa gtccttattt 420
atatgtgcta gtttggcagc acttaaaatc gttagagaga gcctaaacaa aagccttttc 480
aaaacgacct tgagccagat tggttgatgg ccaaaatttg attgtcaaaa cttaggcaag 540
ccaagatttt agcagctatt tggtttggta ccaaaatttg ccaatgatct gttcttttgc 600
cttttcaacc ggtttatcag ccgtacttca gcttattctc tctcacagaa cactattgaa 660
tcagccgaaa agccaccgca gaacaggacc agtatctcac aaatggcatg ccaaatatac 720
tcaccgtcag tgagcccgtt taacggcgtc gacaagtcta acggccacca accagcgaac 780
caccagcgtc aagctagcca agcgaagcag acggccgaga cgttgacacc ttggcgcggg 840
catctctctg gccccctctc gagagttccg ctccacctcc actggtggcg gtttccaagt 900
ccgttccgcc tcctgctcct cctcacacgg cacgaaaccg tcacggcacc ggcagcacgg 960
gggattcctt tcccaccgct ccttcccttt cccttcctcg cccgccgttt taaatagcca 1020
gccccatccc cagcttctct cccc 1044
<210> 29
<211> 1934
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 29
accacaagaa tgatatcatc gtcatgctta gatccttttt agtaaagctt gagcttctct 60
aaaagtagag aaattagaaa aaaatcacgt ttttgtggtc ttgatttcta gcctccacaa 120
aatctttggt tttacatttt ttgtttgatt ttggtttcag aagtccttat ttatatgtgc 180
tagtttggca gcacttaaaa tcgttagaga gagcctaaac aaaagccttt tcaaaacgac 240
cttgagccag attggttgat ggccaaaatt tgattgtcaa aacttaggca agccaagatt 300
ttagcagcta tttggtttgg taccaaaatt tgccaatgat ctgttctttt gccttttcaa 360
ccggtttatc agccgtactt cagcttattc tctctcacag aacactattg aatcagccga 420
aaagccaccg cagaacagga ccagtatctc acaaatggca tgccaaatat actcaccgtc 480
agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtc taacggccac caaccagcga accaccagcg 540
tcaagctagc caagcgaagc agacggccga gacgttgaca ccttggcgcg ggcatctctc 600
tggccccctc tcgagagttc cgctccacct ccactggtgg cggtttccaa gtccgttccg 660
cctcctgctc ctcctcacac ggcacgaaac cgtcacggca ccggcagcac gggggattcc 720
tttcccaccg ctccttccct ttcccttcct cgcccgccgt tttaaatagc cagccccatc 780
cccagcttct ctccccaacc tcagcttctc tcgttgttcg gagcgcacac acaacccgat 840
ccccaatccc ctcgtctctc ctcgcgagcc tcgtcgatcc ccgcttcaag gtacggcgat 900
catcctccct ttctctacct tctcttctct agactaggtc ggcgatccat ggttagggcc 960
tgctagttct gttcctgttt ttccgtggct gcgaggtaca atagatctga tggcgttatg 1020
atggttaact tgtcatactc ctgcggtgtg cggtctatag tgcttttagg acatcaattt 1080
gacctggctc gttcgagatc ggcgatccat ggttaggacc ctaggcggtg gagtcgggtt 1140
agatccgcgc tgtttgtgtt agtagatgga tgcgaccttt acttcagaca cgttctgatt 1200
gttaacttgt cagcacctgg gagtcctggg atggttctag ctggttcgca gatgagatcg 1260
atttcatgat ctgctgtatc ttgtttcgtt aggttccttt taatctatcc gtggtattat 1320
gctaacctat gatatggttc gatcgtgcta gctacgtcct gtgtcataat ttttagcatg 1380
cccttttttg tttggttttg tctgattggg ctgtagatca gagtatactg tttcaaacta 1440
cctactggat atatttatta aatttgaatc tgtatgtgtg tcacatatat cttcataatt 1500
aaaatggatg gaaagatata tggataggta catgtgttgc tgtgggtttt actggtactt 1560
tgttagatat acatgcttag atacatgaag caacatgatg ttacagttca ataattcttg 1620
tttacctaat aaacaaataa ggataggtgt atgttgctgt gggttttgct ggtactttgt 1680
tagatatata tgcttagata tatgaagcaa catcctgcta cggtttaata attattgttt 1740
atatctaata gacaagcctg ctttttaatt attttgatat acttggatga tggcatacag 1800
cagctatgtg tggattttta aatacccagc atcatgagca tgcatgaccc tgccttagta 1860
tgctgtttat ttgcttgaga cttctttttt tgttggtact caccttttgt agtttggtga 1920
ctcttctgca ggtg 1934
<210> 30
<211> 796
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 30
accacaagaa tgatatcatc gtcatgctta gatccttttt agtaaagctt gagcttctct 60
aaaagtagag aaattagaaa aaaatcacgt ttttgtggtc ttgatttcta gcctccacaa 120
aatctttggt tttacatttt ttgtttgatt ttggtttcag aagtccttat ttatatgtgc 180
tagtttggca gcacttaaaa tcgttagaga gagcctaaac aaaagccttt tcaaaacgac 240
cttgagccag attggttgat ggccaaaatt tgattgtcaa aacttaggca agccaagatt 300
ttagcagcta tttggtttgg taccaaaatt tgccaatgat ctgttctttt gccttttcaa 360
ccggtttatc agccgtactt cagcttattc tctctcacag aacactattg aatcagccga 420
aaagccaccg cagaacagga ccagtatctc acaaatggca tgccaaatat actcaccgtc 480
agtgagcccg tttaacggcg tcgacaagtc taacggccac caaccagcga accaccagcg 540
tcaagctagc caagcgaagc agacggccga gacgttgaca ccttggcgcg ggcatctctc 600
tggccccctc tcgagagttc cgctccacct ccactggtgg cggtttccaa gtccgttccg 660
cctcctgctc ctcctcacac ggcacgaaac cgtcacggca ccggcagcac gggggattcc 720
tttcccaccg ctccttccct ttcccttcct cgcccgccgt tttaaatagc cagccccatc 780
cccagcttct ctcccc 796
<210> 31
<211> 1649
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 31
aggcaagcca agattttagc agctatttgg tttggtacca aaatttgcca atgatctgtt 60
cttttgcctt ttcaaccggt ttatcagccg tacttcagct tattctctct cacagaacac 120
tattgaatca gccgaaaagc caccgcagaa caggaccagt atctcacaaa tggcatgcca 180
aatatactca ccgtcagtga gcccgtttaa cggcgtcgac aagtctaacg gccaccaacc 240
agcgaaccac cagcgtcaag ctagccaagc gaagcagacg gccgagacgt tgacaccttg 300
gcgcgggcat ctctctggcc ccctctcgag agttccgctc cacctccact ggtggcggtt 360
tccaagtccg ttccgcctcc tgctcctcct cacacggcac gaaaccgtca cggcaccggc 420
agcacggggg attcctttcc caccgctcct tccctttccc ttcctcgccc gccgttttaa 480
atagccagcc ccatccccag cttctctccc caacctcagc ttctctcgtt gttcggagcg 540
cacacacaac ccgatcccca atcccctcgt ctctcctcgc gagcctcgtc gatccccgct 600
tcaaggtacg gcgatcatcc tccctttctc taccttctct tctctagact aggtcggcga 660
tccatggtta gggcctgcta gttctgttcc tgtttttccg tggctgcgag gtacaataga 720
tctgatggcg ttatgatggt taacttgtca tactcctgcg gtgtgcggtc tatagtgctt 780
ttaggacatc aatttgacct ggctcgttcg agatcggcga tccatggtta ggaccctagg 840
cggtggagtc gggttagatc cgcgctgttt gtgttagtag atggatgcga cctttacttc 900
agacacgttc tgattgttaa cttgtcagca cctgggagtc ctgggatggt tctagctggt 960
tcgcagatga gatcgatttc atgatctgct gtatcttgtt tcgttaggtt ccttttaatc 1020
tatccgtggt attatgctaa cctatgatat ggttcgatcg tgctagctac gtcctgtgtc 1080
ataattttta gcatgccctt ttttgtttgg ttttgtctga ttgggctgta gatcagagta 1140
tactgtttca aactacctac tggatatatt tattaaattt gaatctgtat gtgtgtcaca 1200
tatatcttca taattaaaat ggatggaaag atatatggat aggtacatgt gttgctgtgg 1260
gttttactgg tactttgtta gatatacatg cttagataca tgaagcaaca tgatgttaca 1320
gttcaataat tcttgtttac ctaataaaca aataaggata ggtgtatgtt gctgtgggtt 1380
ttgctggtac tttgttagat atatatgctt agatatatga agcaacatcc tgctacggtt 1440
taataattat tgtttatatc taatagacaa gcctgctttt taattatttt gatatacttg 1500
gatgatggca tacagcagct atgtgtggat ttttaaatac ccagcatcat gagcatgcat 1560
gaccctgcct tagtatgctg tttatttgct tgagacttct ttttttgttg gtactcacct 1620
tttgtagttt ggtgactctt ctgcaggtg 1649
<210> 32
<211> 511
<212> ДНК
<213> Saccharum ravennae
<400> 32
aggcaagcca agattttagc agctatttgg tttggtacca aaatttgcca atgatctgtt 60
cttttgcctt ttcaaccggt ttatcagccg tacttcagct tattctctct cacagaacac 120
tattgaatca gccgaaaagc caccgcagaa caggaccagt atctcacaaa tggcatgcca 180
aatatactca ccgtcagtga gcccgtttaa cggcgtcgac aagtctaacg gccaccaacc 240
agcgaaccac cagcgtcaag ctagccaagc gaagcagacg gccgagacgt tgacaccttg 300
gcgcgggcat ctctctggcc ccctctcgag agttccgctc cacctccact ggtggcggtt 360
tccaagtccg ttccgcctcc tgctcctcct cacacggcac gaaaccgtca cggcaccggc 420
agcacggggg attcctttcc caccgctcct tccctttccc ttcctcgccc gccgttttaa 480
atagccagcc ccatccccag cttctctccc c 511
<210> 33
<211> 2631
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 33
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ctgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacag gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag acatcggaac actggtgatt 1080
ggtggagccg gcagtatgcg ccccagcacg gccgaggtgg tggtggcccg tggccctgct 1140
gtctgcgcgg ctcgggacaa cttgaaactg ggccaccgcc tcgtcgcaac tcgcaacccg 1200
ttggcggaag aaaggaatgg ctcgtagggg cccgggtaga atccaagaat gttgcgctgg 1260
gcttcgattc acataacatg ggcctgaagc tctaaaacga cggcccggtc accgggcgat 1320
ggaaagagac cggatcctcc tcgtgaattc tggaaggcca cacgagagcg acccaccacc 1380
gacgcggagg agtcgtgcgt ggtccaacac ggccggcggg ctgggctgcg accttaacca 1440
gcaaggcacg ccacgacccg cctcgccctc gaggcataaa taccctccca tcccgttgcc 1500
gcaagactca gatcagattc cgatccccag ttcttcccca atcaccttgt ggtctctcgt 1560
gtcgcggttc ccagggacgc ctccggctcg tcgctcgaca gcgatctccg ccccagcaag 1620
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 1680
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 1740
cagttgtttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcat cgtagtttat gtttggagta 1800
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 1860
cttgcagagg ctgggttagt gggttctgtt atgtcgtgat ctaagaatct agattaggct 1920
cagtcgttct tgctgtcgac tagtttgttt tgatatccat gtagtacaag ttacttaaaa 1980
tttaggtcca atatattttg catgcttttg gcctgttatt cttgccaaca agttgtcctg 2040
gtaaaaagta gatgtgaaag tcacgtattg ggacaaattg atggttaagt gctatagttc 2100
tatagttctg tgatacatct atctgatttt ttttggtcta ttggtgccta acttatctga 2160
aaatcatgga acatgaggct agtttgatca tggtttagtt cattgtgatt aataatgtat 2220
gatttagtag ctattttggt gatcgtgtca ttttatttgt gaatggaatc attgtatgta 2280
aatgaagcta gttcaggggt tatgatgtag ctggctttgt attctaaagg ctgctattat 2340
tcatccatcg atttcaccta tatgtaatcc agagctttcg atgtgaaatt tgtctgatcc 2400
ttcactagga aggacagaac attgttaata ttttggcaca tctgtcttat tctcatcctt 2460
tgtttgaaca tgttagcctg ttcaaacaga tactgttgta atgtcctagt tatataggta 2520
catatgtgtt ctctattgag tttatggact tttgtgtgtg aagttatatt tcattttgct 2580
caaaactcat gtttgcaagc tttctgacat tattctattg ttctgaaaca g 2631
<210> 34
<211> 1493
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 34
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ctgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacag gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag acatcggaac actggtgatt 1080
ggtggagccg gcagtatgcg ccccagcacg gccgaggtgg tggtggcccg tggccctgct 1140
gtctgcgcgg ctcgggacaa cttgaaactg ggccaccgcc tcgtcgcaac tcgcaacccg 1200
ttggcggaag aaaggaatgg ctcgtagggg cccgggtaga atccaagaat gttgcgctgg 1260
gcttcgattc acataacatg ggcctgaagc tctaaaacga cggcccggtc accgggcgat 1320
ggaaagagac cggatcctcc tcgtgaattc tggaaggcca cacgagagcg acccaccacc 1380
gacgcggagg agtcgtgcgt ggtccaacac ggccggcggg ctgggctgcg accttaacca 1440
gcaaggcacg ccacgacccg cctcgccctc gaggcataaa taccctccca tcc 1493
<210> 35
<211> 127
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 35
cgttgccgca agactcagat cagattccga tccccagttc ttccccaatc accttgtggt 60
ctctcgtgtc gcggttccca gggacgcctc cggctcgtcg ctcgacagcg atctccgccc 120
cagcaag 127
<210> 36
<211> 1011
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 36
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttgtttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcat cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttagt gggttctgtt atgtcgtgat ctaagaatct agattaggct 300
cagtcgttct tgctgtcgac tagtttgttt tgatatccat gtagtacaag ttacttaaaa 360
tttaggtcca atatattttg catgcttttg gcctgttatt cttgccaaca agttgtcctg 420
gtaaaaagta gatgtgaaag tcacgtattg ggacaaattg atggttaagt gctatagttc 480
tatagttctg tgatacatct atctgatttt ttttggtcta ttggtgccta acttatctga 540
aaatcatgga acatgaggct agtttgatca tggtttagtt cattgtgatt aataatgtat 600
gatttagtag ctattttggt gatcgtgtca ttttatttgt gaatggaatc attgtatgta 660
aatgaagcta gttcaggggt tatgatgtag ctggctttgt attctaaagg ctgctattat 720
tcatccatcg atttcaccta tatgtaatcc agagctttcg atgtgaaatt tgtctgatcc 780
ttcactagga aggacagaac attgttaata ttttggcaca tctgtcttat tctcatcctt 840
tgtttgaaca tgttagcctg ttcaaacaga tactgttgta atgtcctagt tatataggta 900
catatgtgtt ctctattgag tttatggact tttgtgtgtg aagttatatt tcattttgct 960
caaaactcat gtttgcaagc tttctgacat tattctattg ttctgaaaca g 1011
<210> 37
<211> 2173
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 37
gccgtttttg aagtatccag gattagaagc ttctactgcg cttttatatt atagctgtgg 60
acctgtggta acctttctct tttggcgctt gcttaatctc ggccgtgctg gtccatgctt 120
aggcactagg cagagataga gccgggggtg aatggggcta aagctcagct gctcgagggg 180
ccgtgggctg gtttccacta gcctacagct gtgccacgtg cggccgcgca agccgaagca 240
agcacgctga gccgttggac agcttgtcat aatgccatta cgtggattac aggtaactgg 300
ccctgtaact actcgttcgg ccatcatcaa acgacgacgt ccgctaggcg acgacacggg 360
taatgcacgc agccacccag gcgcgcgcgc tagcggagca cggtcaggtg acacgggcgt 420
cgtgacgctt ccgagttgaa ggggttaacg ccagaaacag tgtttggcca gggtatgaac 480
ataacaaaaa atattcacac gaaagaatgg aagtatggag ctgctactgt gtaaatgcca 540
agcaggaaac tcacgcccgc taacatccaa cggccaacag ctcgacgtgc cggtcagcag 600
agacatcgga acactggtga ttggtggagc cggcagtatg cgccccagca cggccgaggt 660
ggtggtggcc cgtggccctg ctgtctgcgc ggctcgggac aacttgaaac tgggccaccg 720
cctcgtcgca actcgcaacc cgttggcgga agaaaggaat ggctcgtagg ggcccgggta 780
gaatccaaga atgttgcgct gggcttcgat tcacataaca tgggcctgaa gctctaaaac 840
gacggcccgg tcaccgggcg atggaaagag accggatcct cctcgtgaat tctggaaggc 900
cacacgagag cgacccacca ccgacgcgga ggagtcgtgc gtggtccaac acggccggcg 960
ggctgggctg cgaccttaac cagcaaggca cgccacgacc cgcctcgccc tcgaggcata 1020
aataccctcc catcccgttg ccgcaagact cagatcagat tccgatcccc agttcttccc 1080
caatcacctt gtggtctctc gtgtcgcggt tcccagggac gcctccggct cgtcgctcga 1140
cagcgatctc cgccccagca aggtatagat tcagttcctt gctccgatcc caatctggtt 1200
gagatgttgc tccgatgcga cttgattatg tcatatatct gcggtttgca ccgatctgaa 1260
gcctagggtt tctcgagcga cccagttgtt tgcaatttgc gatttgctcg tttgttgcgc 1320
atcgtagttt atgtttggag taatcgagga tttgtatgcg gcgtcggcgc tacctgctta 1380
atcacgccat gtgacgcggt tacttgcaga ggctgggtta gtgggttctg ttatgtcgtg 1440
atctaagaat ctagattagg ctcagtcgtt cttgctgtcg actagtttgt tttgatatcc 1500
atgtagtaca agttacttaa aatttaggtc caatatattt tgcatgcttt tggcctgtta 1560
ttcttgccaa caagttgtcc tggtaaaaag tagatgtgaa agtcacgtat tgggacaaat 1620
tgatggttaa gtgctatagt tctatagttc tgtgatacat ctatctgatt ttttttggtc 1680
tattggtgcc taacttatct gaaaatcatg gaacatgagg ctagtttgat catggtttag 1740
ttcattgtga ttaataatgt atgatttagt agctattttg gtgatcgtgt cattttattt 1800
gtgaatggaa tcattgtatg taaatgaagc tagttcaggg gttatgatgt agctggcttt 1860
gtattctaaa ggctgctatt attcatccat cgatttcacc tatatgtaat ccagagcttt 1920
cgatgtgaaa tttgtctgat ccttcactag gaaggacaga acattgttaa tattttggca 1980
catctgtctt attctcatcc tttgtttgaa catgttagcc tgttcaaaca gatactgttg 2040
taatgtccta gttatatagg tacatatgtg ttctctattg agtttatgga cttttgtgtg 2100
tgaagttata tttcattttg ctcaaaactc atgtttgcaa gctttctgac attattctat 2160
tgttctgaaa cag 2173
<210> 38
<211> 1035
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 38
gccgtttttg aagtatccag gattagaagc ttctactgcg cttttatatt atagctgtgg 60
acctgtggta acctttctct tttggcgctt gcttaatctc ggccgtgctg gtccatgctt 120
aggcactagg cagagataga gccgggggtg aatggggcta aagctcagct gctcgagggg 180
ccgtgggctg gtttccacta gcctacagct gtgccacgtg cggccgcgca agccgaagca 240
agcacgctga gccgttggac agcttgtcat aatgccatta cgtggattac aggtaactgg 300
ccctgtaact actcgttcgg ccatcatcaa acgacgacgt ccgctaggcg acgacacggg 360
taatgcacgc agccacccag gcgcgcgcgc tagcggagca cggtcaggtg acacgggcgt 420
cgtgacgctt ccgagttgaa ggggttaacg ccagaaacag tgtttggcca gggtatgaac 480
ataacaaaaa atattcacac gaaagaatgg aagtatggag ctgctactgt gtaaatgcca 540
agcaggaaac tcacgcccgc taacatccaa cggccaacag ctcgacgtgc cggtcagcag 600
agacatcgga acactggtga ttggtggagc cggcagtatg cgccccagca cggccgaggt 660
ggtggtggcc cgtggccctg ctgtctgcgc ggctcgggac aacttgaaac tgggccaccg 720
cctcgtcgca actcgcaacc cgttggcgga agaaaggaat ggctcgtagg ggcccgggta 780
gaatccaaga atgttgcgct gggcttcgat tcacataaca tgggcctgaa gctctaaaac 840
gacggcccgg tcaccgggcg atggaaagag accggatcct cctcgtgaat tctggaaggc 900
cacacgagag cgacccacca ccgacgcgga ggagtcgtgc gtggtccaac acggccggcg 960
ggctgggctg cgaccttaac cagcaaggca cgccacgacc cgcctcgccc tcgaggcata 1020
aataccctcc catcc 1035
<210> 39
<211> 1819
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 39
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagac atcggaacac tggtgattgg tggagccggc agtatgcgcc ccagcacggc 300
cgaggtggtg gtggcccgtg gccctgctgt ctgcgcggct cgggacaact tgaaactggg 360
ccaccgcctc gtcgcaactc gcaacccgtt ggcggaagaa aggaatggct cgtaggggcc 420
cgggtagaat ccaagaatgt tgcgctgggc ttcgattcac ataacatggg cctgaagctc 480
taaaacgacg gcccggtcac cgggcgatgg aaagagaccg gatcctcctt gtgaattctg 540
gaaggccaca cgagagcgac ccaccaccga cgcggaggag tcgtgcgtgg tccaacacgg 600
ccggcgggct gggctgcgac cttaaccagc aaggcacgcc acgacccgcc tcgccctcga 660
ggcataaata ccctcccatc ccgttgccgc aagactcaga tcagattccg atccccagtt 720
cttccccaat caccttgtgg tctctcgtgt cgcggttccc agggacgcct ccggctcgtc 780
gctcgacagc gatctccgcc ccagcaaggt atagattcag ttccttgctc cgatcccaat 840
ctggttgaga tgttgctccg atgcgacttg attatgtcat atatctgcgg tttgcaccga 900
tctgaagcct agggtttctc gagcgaccca gttgtttgca atttgcgatt tgctcgtttg 960
ttgcgcatcg tagtttatgt ttggagtaat cgaggatttg tatgcggcgt cggcgctacc 1020
tgcttaatca cgccatgtga cgcggttact tgcagaggct gggttagtgg gttctgttat 1080
gtcgtgatct aagaatctag attaggctca gtcgttcttg ctgtcgacta gtttgttttg 1140
atatccatgt agtacaagtt acttaaaatt taggtccaat atattttgca tgcttttggc 1200
ctgttattct tgccaacaag ttgtcctggt aaaaagtaga tgtgaaagtc acgtattggg 1260
acaaattgat ggttaagtgc tatagttcta tagttctgtg atacatctat ctgatttttt 1320
ttggtctatt ggtgcctaac ttatctgaaa atcatggaac atgaggctag tttgatcatg 1380
gtttagttca ttgtgattaa taatgtatga tttagtagct attttggtga tcgtgtcatt 1440
ttatttgtga atggaatcat tgtatgtaaa tgaagctagt tcaggggtta tgatgtagct 1500
ggctttgtat tctaaaggct gctattattc atccatcgat ttcacctata tgtaatccag 1560
agctttcgat gtgaaatttg tctgatcctt cactaggaag gacagaacat tgttaatatt 1620
ttggcacatc tgtcttattc tcatcctttg tttgaacatg ttagcctgtt caaacagata 1680
ctgttgtaat gtcctagtta tataggtaca tatgtgttct ctattgagtt tatggacttt 1740
tgtgtgtgaa gttatatttc attttgctca aaactcatgt ttgcaagctt tctgacatta 1800
ttctattgtt ctgaaacag 1819
<210> 40
<211> 681
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 40
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagac atcggaacac tggtgattgg tggagccggc agtatgcgcc ccagcacggc 300
cgaggtggtg gtggcccgtg gccctgctgt ctgcgcggct cgggacaact tgaaactggg 360
ccaccgcctc gtcgcaactc gcaacccgtt ggcggaagaa aggaatggct cgtaggggcc 420
cgggtagaat ccaagaatgt tgcgctgggc ttcgattcac ataacatggg cctgaagctc 480
taaaacgacg gcccggtcac cgggcgatgg aaagagaccg gatcctcctt gtgaattctg 540
gaaggccaca cgagagcgac ccaccaccga cgcggaggag tcgtgcgtgg tccaacacgg 600
ccggcgggct gggctgcgac cttaaccagc aaggcacgcc acgacccgcc tcgccctcga 660
ggcataaata ccctcccatc c 681
<210> 41
<211> 1922
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 41
gtcgtgcccc tctctagaga taatgagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt tgtcacactt gtgtttgaag tgcagtttat ctatctctat acatatattt 120
aaacttcact atatgaataa tatagtctat agtattaaaa taatatcaat gttttagatg 180
attatataac tgaactgcta gacatggtct aaaggacaac cgagtatttt gacaacatga 240
ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg tgttcttttt acttttgcaa atagcttcac 300
ctatataata cttcatccat tttattagta catccattta ctaaattttt agtacatcta 360
ttttattcta ttttagcctc taaattaaga aaacttaaac tctattttag ttttttattt 420
aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaaataacta aatacctttt 480
aagaaataaa aaaactaagg aaccattttt cttgttccga gtagataatg acagcctgtt 540
caacgccgtc gacgagtcta acggacacca accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc 600
aagcgaagca gacggcacgg catctctgta gctgcctctg gacccctctc gagagttccg 660
ctccaccgtt ggacttgctc cgctgtcggc atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac 720
gtgagccggc acggcaggcg gcctcctctc acggcaccgg cagctacggg ggattccttt 780
cccaccgctc cttcgctttc ccttcctcgc ccgccgtaat aaatagaccc cctccacacc 840
ctctttcccc aacctcgtgt tcgttcggag cgcgcacaca cacaaccaga tctcccccaa 900
atccacccgt cggcacctcc gcttcaaggt acgccgctca tcctcctccc ccccctctct 960
ctaccttctc tagatcggcg tttcggtcca tggttagggc ccggtagttc tacttctgtt 1020
catgtttgtg ttagatccgt gtttgtgtta gatccgtgct gctagatttc gtacacggat 1080
gcgacctgta catcagacat gttctgattg ctaacttgcc agtgtttctc tttggggaat 1140
cctgggatgg ctctagccgt tccgcagacg ggatcgattt catgaatttt ttttgtttcg 1200
ttgcataggg tttggtttgc ccttttcctt tatttcaata tatgccgtgc acttgtttgt 1260
cgggtcatct tttcatgttt tttttggctt ggttgtgatg atgtggtctg gttgggcggt 1320
cgttctagat cggagtagaa tactgtttca aactacctgg tggatttatt aaaggatctg 1380
tatgtatgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat 1440
ctaggatagg tatacatgtt gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt 1500
ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtc gggcggtcgt tctagatcgg agtagaatac 1560
tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttggatctg tatgtgtgtc atacatcttc 1620
atagttacga gtttaagatc gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgt 1680
gggttttact gatgcatata catggcatat gcagcatcta ttcatatgct ctaaccttga 1740
gtacctatct attataataa acaagtatgt tttataatta ttttgatctt gatatacttg 1800
gatgatggca tatgcagcag ctatatgtgg atttttttag ccctgccttc atacgctatt 1860
tatttgcttg gtactgtttc ttttgtcgat gctcaccctg ttgtttggtg atacttctgc 1920
ag 1922
<210> 42
<211> 850
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 42
gtcgtgcccc tctctagaga taatgagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt tgtcacactt gtgtttgaag tgcagtttat ctatctctat acatatattt 120
aaacttcact atatgaataa tatagtctat agtattaaaa taatatcaat gttttagatg 180
attatataac tgaactgcta gacatggtct aaaggacaac cgagtatttt gacaacatga 240
ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg tgttcttttt acttttgcaa atagcttcac 300
ctatataata cttcatccat tttattagta catccattta ctaaattttt agtacatcta 360
ttttattcta ttttagcctc taaattaaga aaacttaaac tctattttag ttttttattt 420
aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaaataacta aatacctttt 480
aagaaataaa aaaactaagg aaccattttt cttgttccga gtagataatg acagcctgtt 540
caacgccgtc gacgagtcta acggacacca accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc 600
aagcgaagca gacggcacgg catctctgta gctgcctctg gacccctctc gagagttccg 660
ctccaccgtt ggacttgctc cgctgtcggc atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac 720
gtgagccggc acggcaggcg gcctcctctc acggcaccgg cagctacggg ggattccttt 780
cccaccgctc cttcgctttc ccttcctcgc ccgccgtaat aaatagaccc cctccacacc 840
ctctttcccc 850
<210> 43
<211> 78
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 43
aacctcgtgt tcgttcggag cgcgcacaca cacaaccaga tctcccccaa atccacccgt 60
cggcacctcc gcttcaag 78
<210> 44
<211> 994
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 44
gtacgccgct catcctcctc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgtttcggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagatcc gtgtttgtgt 120
tagatccgtg ctgctagatt tcgtacacgg atgcgacctg tacatcagac atgttctgat 180
tgctaacttg ccagtgtttc tctttgggga atcctgggat ggctctagcc gttccgcaga 240
cgggatcgat ttcatgaatt ttttttgttt cgttgcatag ggtttggttt gcccttttcc 300
tttatttcaa tatatgccgt gcacttgttt gtcgggtcat cttttcatgt tttttttggc 360
ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt 420
caaactacct ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgccatacat cttcatagtt 480
acgagtttaa gatgatggat ggaaatatcg atctaggata ggtatacatg ttgatgcggg 540
ttttactgat gcatatacag agatgctttt ttttcgcttg gttgtgatga tgtggtctgg 600
tcgggcggtc gttctagatc ggagtagaat actgtttcaa actacctggt ggatttatta 660
attttggatc tgtatgtgtg tcatacatct tcatagttac gagtttaaga tcgatggaaa 720
tatcgatcta ggataggtat acatgttgat gtgggtttta ctgatgcata tacatggcat 780
atgcagcatc tattcatatg ctctaacctt gagtacctat ctattataat aaacaagtat 840
gttttataat tattttgatc ttgatatact tggatgatgg catatgcagc agctatatgt 900
ggattttttt agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcg 960
atgctcaccc tgttgtttgg tgatacttct gcag 994
<210> 45
<211> 1971
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 45
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt gtcacacttg tttgaagtgc agtttatcta tctttataca tatatttaaa 120
ctttactcta cgaataatat aatctatagt actacaataa tatcagtgtt ttagagaatc 180
atataaatga acagttagac atggtctaaa ggacaattga gtattttgac aacaggactc 240
tacagtttta tctttttagt gtgcatgtgt tctccttttt tttttgcaaa tagcttcacc 300
tatataatac ttcatccatt ttattagtac atccatttag ggtttagggt taatggtttt 360
tatagactaa tttttttagt acatctattt tattctattt tagcctctaa attaagaaaa 420
ctaaaactct attttagttt ttttatttaa taatttagat ataaaataga ataaaataaa 480
gtgactaaaa attaaacaaa taccctttaa gaaattaaaa aaactaagga aacatttttc 540
ttgtttcgag tagataatgc cagcctgtta aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa 600
ccagcgaacc agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtcg 660
ctgcctctgg acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca 720
tccagaaatt gcgtggcgga gcggcagacg tgagccggca cggcaggcgg cctcctcctc 780
ctctcacggc accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc 840
ctcgcccgcc gtaataaata gacaccccct ccacaccttc tttccccaac ctcgtgttgt 900
tcggagcgca cacacacaca accagatctc ccccaaatcc acccgtcggc acctccgctt 960
caaggtacgc cgctcatcct cccccccccc tctctacctt ctctagatcg gcgttccggt 1020
ccatggttag ggcccggtag ttctacttct gttcatgttt gtgttagatc cgtgtttgtg 1080
ttagatccgt gctgctagcg ttcgtacacg gatgcgacct gtacgtcaga cacgttctga 1140
ttgctaactt gccagtgttt ctctttgggg aatcctggga tggctctagc cgttccgcag 1200
acgggatcga tttcatgatt ttttttgttt cgttgcatag ggtttggttt gcccttttcc 1260
tttatttcaa tatatgccgt gcacttgttt gtcgggtcat cttttcatgc ttttttttgt 1320
cttggttgtg atgatgtggt ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagaa gaattctgtt 1380
tcaaactacc tggtggattt attaattttg gatctgtatg tgtgtgccat acatattcat 1440
agttacgaat tgaagatgat ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg 1500
cgggttttac tgatgcatat acagagatgc tttttgttcg cttggttgtg atgatgtggt 1560
ctggttgggc ggtcgttcat tcgttctaga tcggagtaga atactgtttc aaactacctg 1620
gtgtatttat taattttgga actgtatgtg tgtgtcatac atcttcatag ttacgagttt 1680
aagatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgtgggt tttactgatg 1740
catatacatg atggcatatg cagcatctat tcatatgctc taaccttgag tacctatcta 1800
ttataataaa caagtatgtt ttataattat tttgatcttg atatacttgg atgatggcat 1860
atgcagcagc tatatgtgga tttttttagc cctgccttca tacgctattt atttgcttgg 1920
tactgtttct tttgtcgatg ctcaccctgt tgtttggtga tacttctgca g 1971
<210> 46
<211> 887
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 46
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt gtcacacttg tttgaagtgc agtttatcta tctttataca tatatttaaa 120
ctttactcta cgaataatat aatctatagt actacaataa tatcagtgtt ttagagaatc 180
atataaatga acagttagac atggtctaaa ggacaattga gtattttgac aacaggactc 240
tacagtttta tctttttagt gtgcatgtgt tctccttttt tttttgcaaa tagcttcacc 300
tatataatac ttcatccatt ttattagtac atccatttag ggtttagggt taatggtttt 360
tatagactaa tttttttagt acatctattt tattctattt tagcctctaa attaagaaaa 420
ctaaaactct attttagttt ttttatttaa taatttagat ataaaataga ataaaataaa 480
gtgactaaaa attaaacaaa taccctttaa gaaattaaaa aaactaagga aacatttttc 540
ttgtttcgag tagataatgc cagcctgtta aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa 600
ccagcgaacc agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtcg 660
ctgcctctgg acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca 720
tccagaaatt gcgtggcgga gcggcagacg tgagccggca cggcaggcgg cctcctcctc 780
ctctcacggc accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc 840
ctcgcccgcc gtaataaata gacaccccct ccacaccttc tttcccc 887
<210> 47
<211> 77
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 47
aacctcgtgt tgttcggagc gcacacacac acaaccagat ctcccccaaa tccacccgtc 60
ggcacctccg cttcaag 77
<210> 48
<211> 1007
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 48
gtacgccgct catcctcccc cccccctctc taccttctct agatcggcgt tccggtccat 60
ggttagggcc cggtagttct acttctgttc atgtttgtgt tagatccgtg tttgtgttag 120
atccgtgctg ctagcgttcg tacacggatg cgacctgtac gtcagacacg ttctgattgc 180
taacttgcca gtgtttctct ttggggaatc ctgggatggc tctagccgtt ccgcagacgg 240
gatcgatttc atgatttttt ttgtttcgtt gcatagggtt tggtttgccc ttttccttta 300
tttcaatata tgccgtgcac ttgtttgtcg ggtcatcttt tcatgctttt ttttgtcttg 360
gttgtgatga tgtggtctgg ttgggcggtc gttctagatc ggagaagaat tctgtttcaa 420
actacctggt ggatttatta attttggatc tgtatgtgtg tgccatacat attcatagtt 480
acgaattgaa gatgatggat ggaaatatcg atctaggata ggtatacatg ttgatgcggg 540
ttttactgat gcatatacag agatgctttt tgttcgcttg gttgtgatga tgtggtctgg 600
ttgggcggtc gttcattcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgt 660
atttattaat tttggaactg tatgtgtgtg tcatacatct tcatagttac gagtttaaga 720
tggatggaaa tatcgatcta ggataggtat acatgttgat gtgggtttta ctgatgcata 780
tacatgatgg catatgcagc atctattcat atgctctaac cttgagtacc tatctattat 840
aataaacaag tatgttttat aattattttg atcttgatat acttggatga tggcatatgc 900
agcagctata tgtggatttt tttagccctg ccttcatacg ctatttattt gcttggtact 960
gtttcttttg tcgatgctca ccctgttgtt tggtgatact tctgcag 1007
<210> 49
<211> 2005
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 49
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta aagtataaaa aattaccaca 60
tatttttttg tcacacttat ttgaagtgta gtttatctat ctctatacat atatttaaac 120
ttcactctac aaataatata gtctataata ctaaaataat attagtgttt tagaggatca 180
tataaataaa ctgctagaca tggtctaaag gataattgaa tattttgaca atctacagtt 240
ttatcttttt agtgtgcatg tgatctctct gttttttttg caaatagctt gacctatata 300
atacttcatc cattttatta gtacatccat ttaggattta gggttgatgg tttctataga 360
ctaattttta gtacatccat tttattcttt ttagtctcta aattttttaa aactaaaact 420
ctattttagt tttttattta ataatttaga tataaaatga aataaaataa attgactaca 480
aataaaacaa atacccttta agaaataaaa aaactaagca aacatttttc ttgtttcgag 540
tagataatga caggctgttc aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa ccagcgaacc 600
agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtag ctgcctctgg 660
acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca tccagaaatt 720
gcgtggcgga gcggcagacg tgaggcggca cggcaggcgg cctcttcctc ctctcacggc 780
accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc ctcgcccgcc 840
gtaataaata gacaccccct ccacaccctc tttccccaac ctcgtgttcg ttcggagcgc 900
acacacacgc aaccagatct cccccaaatc cagccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg 960
ccgctcatcc tccccccccc cctctctcta ccttctctag atcggcgatc cggtccatgg 1020
ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gagcaaacat gttcatgttc 1080
atgtttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag gatactgttt 1140
caagctacct ggtggattta ttaattttgt atctgtatgt gtgtgccata catcttcata 1200
gttacgagtt taagatgatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgc 1260
gggttttact gatgcatata cagagatgct ttttttctcg cttggttgtg atgatatggt 1320
ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagta gaatactgtt tcaaactacc tggtggattt 1380
attaaaggat aaagggtcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg 1440
atttattaaa ggatctgtat gtatgtgcct acatcttcat agttacgagt ttaagatgat 1500
ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat 1560
acagagatgc tttttttcgc ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag 1620
atcggagtag aatactgttt caaactacct ggtggattta ttaattttgt atctttatgt 1680
gtgtgccata catcttcata gttacgagtt taagatgatg gatggaaata ttgatctagg 1740
ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcggcat 1800
ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860
ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920
agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcc gatgctcacc 1980
ctgttgttgg gtgatacttc tgcag 2005
<210> 50
<211> 877
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 50
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta aagtataaaa aattaccaca 60
tatttttttg tcacacttat ttgaagtgta gtttatctat ctctatacat atatttaaac 120
ttcactctac aaataatata gtctataata ctaaaataat attagtgttt tagaggatca 180
tataaataaa ctgctagaca tggtctaaag gataattgaa tattttgaca atctacagtt 240
ttatcttttt agtgtgcatg tgatctctct gttttttttg caaatagctt gacctatata 300
atacttcatc cattttatta gtacatccat ttaggattta gggttgatgg tttctataga 360
ctaattttta gtacatccat tttattcttt ttagtctcta aattttttaa aactaaaact 420
ctattttagt tttttattta ataatttaga tataaaatga aataaaataa attgactaca 480
aataaaacaa atacccttta agaaataaaa aaactaagca aacatttttc ttgtttcgag 540
tagataatga caggctgttc aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa ccagcgaacc 600
agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtag ctgcctctgg 660
acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca tccagaaatt 720
gcgtggcgga gcggcagacg tgaggcggca cggcaggcgg cctcttcctc ctctcacggc 780
accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc ctcgcccgcc 840
gtaataaata gacaccccct ccacaccctc tttcccc 877
<210> 51
<211> 78
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 51
aacctcgtgt tcgttcggag cgcacacaca cgcaaccaga tctcccccaa atccagccgt 60
cggcacctcc gcttcaag 78
<210> 52
<211> 1050
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 52
gtacgccgct catcctcccc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgatccggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagagca aacatgttca 120
tgttcatgtt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt tctagatcgg agtaggatac 180
tgtttcaagc tacctggtgg atttattaat tttgtatctg tatgtgtgtg ccatacatct 240
tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt 300
gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt tctcgcttgg ttgtgatgat 360
atggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaata ctgtttcaaa ctacctggtg 420
gatttattaa aggataaagg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt caaactacct 480
ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgcctacatc ttcatagtta cgagtttaag 540
atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg 600
catatacaga gatgcttttt ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 660
tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttgtatctt 720
tatgtgtgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatattgat 780
ctaggatagg tatacatgtt gatgtgggtt ttactgatgc atatacatga tggcatatgc 840
ggcatctatt catatgctct aaccttgagt acctatctat tataataaac aagtatgttt 900
tataattatt ttgatcttga tatacttgga tgatggcata tgcagcagct atatgtggat 960
tttttagccc tgccttcata cgctatttat ttgcttggta ctgtttcttt tgtccgatgc 1020
tcaccctgtt gttgggtgat acttctgcag 1050
<210> 53
<211> 2005
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 53
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta aagtataaaa aattaccaca 60
tatttttttg tcacacttat ttgaagtgta gtttatctat ctctatacat atatttaaac 120
ttcactctac aaataatata gtctataata ctaaaataat attagtgttt tagaggatca 180
tataaataaa ctgctagaca tggtctaaag gataattgaa tattttgaca atctacagtt 240
ttatcttttt agtgtgcatg tgatctctct gttttttttg caaatagctt gacctatata 300
atacttcatc cattttatta gtacatccat ttaggattta gggttgatgg tttctataga 360
ctaattttta gtacatccat tttattcttt ttagtctcta aattttttaa aactaaaact 420
ctattttagt tttttattta ataatttaga tataaaatga aataaaataa attgactaca 480
aataaaacaa atacccttta agaaataaaa aaactaagca aacatttttc ttgtttcgag 540
tagataatga caggctgttc aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa ccagcgaacc 600
agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtag ctgcctctgg 660
acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca tccagaaatt 720
gcgtggcgga gcggcagacg tgaggcggca cggcaggcgg cctcttcctc ctctcacggc 780
accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc ctcgcccgcc 840
gtaataaata gacaccccct ccacaccctc tttccccaac ctcgtgttcg ttcggagcgc 900
acacacacgc aaccagatct cccccaaatc cagccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg 960
ccgctcatcc tccccccccc cctctctcta ccttctctag atcggcgatc cggtccatgg 1020
ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gagcaaacat gttcatgttc 1080
atgtttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag gatactgttt 1140
caagctacct ggtggattta ttaattttgt atctgtatgt gtgtgccata catcttcata 1200
gttacgagtt taagatgatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgc 1260
gggttttact gatgcatata cagagatgct ttttttctcg cttggttgtg atgatatggt 1320
ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagta gaatactgtt tcaaactacc tggtggattt 1380
attaaaggat aaagggtcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg 1440
atttattaaa ggatctgtat gtatgtgcct acatcttcat agttacgagt ttaagatgat 1500
ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat 1560
acagagatgc tttttttcgc ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag 1620
atcggagtag aatactgttt caaactacct ggtggattta ttaattttgt atctttatgt 1680
gtgtgccata catcttcata gttacgagtt taagatgatg gatggaaata ttgatctagg 1740
ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcggcat 1800
ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860
ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920
agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcc gatgctcacc 1980
ctgttgtttg gtgatacttc tgcag 2005
<210> 54
<211> 1050
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 54
gtacgccgct catcctcccc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgatccggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagagca aacatgttca 120
tgttcatgtt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt tctagatcgg agtaggatac 180
tgtttcaagc tacctggtgg atttattaat tttgtatctg tatgtgtgtg ccatacatct 240
tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt 300
gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt tctcgcttgg ttgtgatgat 360
atggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaata ctgtttcaaa ctacctggtg 420
gatttattaa aggataaagg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt caaactacct 480
ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgcctacatc ttcatagtta cgagtttaag 540
atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg 600
catatacaga gatgcttttt ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 660
tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttgtatctt 720
tatgtgtgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatattgat 780
ctaggatagg tatacatgtt gatgtgggtt ttactgatgc atatacatga tggcatatgc 840
ggcatctatt catatgctct aaccttgagt acctatctat tataataaac aagtatgttt 900
tataattatt ttgatcttga tatacttgga tgatggcata tgcagcagct atatgtggat 960
tttttagccc tgccttcata cgctatttat ttgcttggta ctgtttcttt tgtccgatgc 1020
tcaccctgtt gtttggtgat acttctgcag 1050
<210> 55
<211> 1632
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 55
ccaagtccaa atgtcaattc ccttgaagat gatctatttt tatcttttgc attttgttat 60
ggaagtttgc aaatagcaac aaatgctaag tcaatttgcc aaagtctttg gagatgctct 120
tagtctataa ttgaacaata tttgtaaaat acaaaaaaaa atagtactat ttttatttta 180
aaaaattttt ggaagtaaac aaggccgagg atggggaaac ggaagtccaa cacgtcgttt 240
tctaagttgg gctcaaaagc ccatcacgga actgacctgc tatgggtcgg aggagagcgc 300
gtccagatgg ttccagaggc tggtggtggt gggccaaacg cggaactccg ccaccgccac 360
ggcctcgtgc gcaagcgcag cgcgttgccg tgagccgtga cgtaaccctc cgttgcccac 420
gataaaagct ccacccccga ccccggcccc ccgatttccc ctacggacca gtctcccccc 480
gatcgcaatc gcgaattcgt cgcaccatcg gcacgcagac gaacgaagca aggctctccc 540
catcggctcg tcaaggtatg cgttccctag atttgttccc ttcctctctc ggtttgtcta 600
tatatatgca tgtatggtcg attcccgatc tcgtcgattc tcggtttcgc cttccgtacg 660
aagattcgtt tagattgttc atatgttctg ttgtgttacc agattgatcg gatcaacttg 720
atccagttat cttcgctcct ccgattagat ccgtttctat ttcagtatat atatactagt 780
atagtatcta gggttcacac tgttgaccga ctggttactt ggaattgatc cgtgctgagt 840
tcagttgttg ccgtccataa aggcccgtgc tattgtctgt tctgaaacga aatcctgtag 900
atttcttagg gttagtgttc aattcatcaa aaggttgatt agtgaattat caaatttgag 960
agggttaaat cattctcatc atgttgtctc gaatgtaatc ccaaagatat tatagactgt 1020
gtttcgattt gatggattga tttgtgtatc atctaaatca acaaggctaa gtcatcagtt 1080
catagaatca tgtttaggtt tccgttcaat agactagttt tatcaatata taaaattata 1140
agaagggtag ggtaaatcac gttgcctcaa atgccatcct gtatggtttg gtttcaattc 1200
aattagtttg gttgattagg gtatgctctg gattaagatg gttaaatctt ccctagcatc 1260
ttccctgcct atccttactt gatccgtttc ggatatgttg gaagtacagc gagcttattt 1320
catgttgata gtgacccctt tcagattata ctattgaata ttgtatgttt gccacttctg 1380
tatgttgaat tatcctgcta aattagcaat ggaattagca tattggcaat tggtatgcat 1440
ggacctaatc aggacggatg tggttatgtt agtttcaatt cattgtcaat tcattgttca 1500
cctgcgttag atatatatga tgatttttac gtgtagttca tagttcttga gttttggatc 1560
tttcttatct gatatatgct ttcctgtgcc tgtgctttat tgtgtcttac catgcgattt 1620
ttgtctatgc ag 1632
<210> 56
<211> 401
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 56
ccaagtccaa atgtcaattc ccttgaagat gatctatttt tatcttttgc attttgttat 60
ggaagtttgc aaatagcaac aaatgctaag tcaatttgcc aaagtctttg gagatgctct 120
tagtctataa ttgaacaata tttgtaaaat acaaaaaaaa atagtactat ttttatttta 180
aaaaattttt ggaagtaaac aaggccgagg atggggaaac ggaagtccaa cacgtcgttt 240
tctaagttgg gctcaaaagc ccatcacgga actgacctgc tatgggtcgg aggagagcgc 300
gtccagatgg ttccagaggc tggtggtggt gggccaaacg cggaactccg ccaccgccac 360
ggcctcgtgc gcaagcgcag cgcgttgccg tgagccgtga c 401
<210> 57
<211> 154
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 57
gtaaccctcc gttgcccacg ataaaagctc cacccccgac cccggccccc cgatttcccc 60
tacggaccag tctccccccg atcgcaatcg cgaattcgtc gcaccatcgg cacgcagacg 120
aacgaagcaa ggctctcccc atcggctcgt caag 154
<210> 58
<211> 1077
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 58
gtatgcgttc cctagatttg ttcccttcct ctctcggttt gtctatatat atgcatgtat 60
ggtcgattcc cgatctcgtc gattctcggt ttcgccttcc gtacgaagat tcgtttagat 120
tgttcatatg ttctgttgtg ttaccagatt gatcggatca acttgatcca gttatcttcg 180
ctcctccgat tagatccgtt tctatttcag tatatatata ctagtatagt atctagggtt 240
cacactgttg accgactggt tacttggaat tgatccgtgc tgagttcagt tgttgccgtc 300
cataaaggcc cgtgctattg tctgttctga aacgaaatcc tgtagatttc ttagggttag 360
tgttcaattc atcaaaaggt tgattagtga attatcaaat ttgagagggt taaatcattc 420
tcatcatgtt gtctcgaatg taatcccaaa gatattatag actgtgtttc gatttgatgg 480
attgatttgt gtatcatcta aatcaacaag gctaagtcat cagttcatag aatcatgttt 540
aggtttccgt tcaatagact agttttatca atatataaaa ttataagaag ggtagggtaa 600
atcacgttgc ctcaaatgcc atcctgtatg gtttggtttc aattcaatta gtttggttga 660
ttagggtatg ctctggatta agatggttaa atcttcccta gcatcttccc tgcctatcct 720
tacttgatcc gtttcggata tgttggaagt acagcgagct tatttcatgt tgatagtgac 780
ccctttcaga ttatactatt gaatattgta tgtttgccac ttctgtatgt tgaattatcc 840
tgctaaatta gcaatggaat tagcatattg gcaattggta tgcatggacc taatcaggac 900
ggatgtggtt atgttagttt caattcattg tcaattcatt gttcacctgc gttagatata 960
tatgatgatt tttacgtgta gttcatagtt cttgagtttt ggatctttct tatctgatat 1020
atgctttcct gtgcctgtgc tttattgtgt cttaccatgc gatttttgtc tatgcag 1077
<210> 59
<211> 2000
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 59
cactagctgc gcatgataaa gccacaagcc aaaattaatt attatgggtg agaataaata 60
cgtaccagca ccggccatag aaaaagtaca ttattaaagg tctaatttgg aaacagtctg 120
aaaacgacgt gcgctgcaga ggtaaatgta attttcggca ctaaaaccat tatcaactaa 180
ttcattcaat aacagttatt tagaaaatgt atagctcgct ctaaaaaaac agtttagaaa 240
aacagtcaaa ataattcgac caacaaacag ttaataaggt tcattaaata tataatgcac 300
ggtgctattt gatcttttaa aggaaaaaga ggaatagtcg tgggcgccag gcgggaattg 360
gggcgcggga gtctgccgga cgacgcgttc cgtccgaacg gccggacccg acgaggcccc 420
cccgccgccc cacgtcgcag aaccgtccgt gggtggtaat ctggccgggt acaccagccg 480
tccccttggg cggcctcaca gcactgggct cacacgtgag ttttgttctg ggcttcggat 540
cgcaccatat gggcctcggc atcagaaaga cggggcccgt ctgggataga agagacagga 600
acctcctcgt ggattccaga agccagccac gagcgaccac cgacgcggag gatactcgtc 660
gtccaagtcc aacacggcgg gcgggcgggc ggacgcgtgg gctgggctaa ctgcctaacc 720
ttaacctcca aggcacgcca aggcccgctt ctcccacccg acataaatat ccccccatcc 780
aggcaaggcg cagagcctca gaccagattc cgatcaatca cccataagct ccccccaaat 840
ctgttcctcg tctcccgtct cgcggtttcc tacttccctc ggacgcctcc ggcaagtcgc 900
tcgaccgcgc gattccgccc gctcaaggta tcaactcggt tcaccactcc aatctacgtc 960
tgatttagat gttacttcca tctatgtcta atttagatgt tactccgatg cgattggatt 1020
atgtttatgc ggtttgcact gctctggaaa ctggaatcta gggtttcgag tgatttgatc 1080
gatcgcgatc tgtgatttcg ttgcgccttg tgtatgcttg gagtgatcta ggcttgtata 1140
tgcggcatcg cgatctgacg cggttgcttt gtagaggctg ggggtctagg ctgtgatttt 1200
agaatcaaat aaagctgttc cttaccgtag atgtttccta catgttctgt ccagtactcc 1260
agtgctatat tcacattgtt tgaggcttga gttttgtcga tcagtggtca tgagaaaaat 1320
atatctcatg attttagagg cacctattgg gaaaggtaga tggttccgtt ttacatgttt 1380
tatagacctt gtggcatggc tcctttgttc tatgggtgct ttattttcct gaataacagt 1440
aatgcgagac tggtctatgg gtgctttgac cagtaatgcg agactagtta tttgatcatg 1500
gtgcagttcc tagtgattac gaacaacaat ttggtagctc agttcattca gcattggttt 1560
ctacgatcct tatcatttta cttctgaatg aatttattta tttaagatat tacagtgcaa 1620
taaactgctg tataatatca gtaacaaact gctattacta gtaaatgcct agattcataa 1680
taattcatta ttctacttga aaatgatctt aggccttttt atgcggtcct acgcatcctt 1740
ccacaggact tgctgtttgt ttgttttttg taatccctcg ctgggacgca gaatggttca 1800
tctgtgctaa taattttttt gcatatataa gtttatagtt ctcattattc atgtggctat 1860
ggtagcctgt aaaatctatt gtaataacat attagtcagc catacatctg ttccaacttg 1920
ctcaattgca aatcatatct ccacttaaag cacatgtttg caagctttct gacaagtttc 1980
tttgtgtttg attgaaacag 2000
<210> 60
<211> 791
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 60
cactagctgc gcatgataaa gccacaagcc aaaattaatt attatgggtg agaataaata 60
cgtaccagca ccggccatag aaaaagtaca ttattaaagg tctaatttgg aaacagtctg 120
aaaacgacgt gcgctgcaga ggtaaatgta attttcggca ctaaaaccat tatcaactaa 180
ttcattcaat aacagttatt tagaaaatgt atagctcgct ctaaaaaaac agtttagaaa 240
aacagtcaaa ataattcgac caacaaacag ttaataaggt tcattaaata tataatgcac 300
ggtgctattt gatcttttaa aggaaaaaga ggaatagtcg tgggcgccag gcgggaattg 360
gggcgcggga gtctgccgga cgacgcgttc cgtccgaacg gccggacccg acgaggcccc 420
cccgccgccc cacgtcgcag aaccgtccgt gggtggtaat ctggccgggt acaccagccg 480
tccccttggg cggcctcaca gcactgggct cacacgtgag ttttgttctg ggcttcggat 540
cgcaccatat gggcctcggc atcagaaaga cggggcccgt ctgggataga agagacagga 600
acctcctcgt ggattccaga agccagccac gagcgaccac cgacgcggag gatactcgtc 660
gtccaagtcc aacacggcgg gcgggcgggc ggacgcgtgg gctgggctaa ctgcctaacc 720
ttaacctcca aggcacgcca aggcccgctt ctcccacccg acataaatat ccccccatcc 780
aggcaaggcg c 791
<210> 61
<211> 136
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 61
agagcctcag accagattcc gatcaatcac ccataagctc cccccaaatc tgttcctcgt 60
ctcccgtctc gcggtttcct acttccctcg gacgcctccg gcaagtcgct cgaccgcgcg 120
attccgcccg ctcaag 136
<210> 62
<211> 1073
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 62
gtatcaactc ggttcaccac tccaatctac gtctgattta gatgttactt ccatctatgt 60
ctaatttaga tgttactccg atgcgattgg attatgttta tgcggtttgc actgctctgg 120
aaactggaat ctagggtttc gagtgatttg atcgatcgcg atctgtgatt tcgttgcgcc 180
ttgtgtatgc ttggagtgat ctaggcttgt atatgcggca tcgcgatctg acgcggttgc 240
tttgtagagg ctgggggtct aggctgtgat tttagaatca aataaagctg ttccttaccg 300
tagatgtttc ctacatgttc tgtccagtac tccagtgcta tattcacatt gtttgaggct 360
tgagttttgt cgatcagtgg tcatgagaaa aatatatctc atgattttag aggcacctat 420
tgggaaaggt agatggttcc gttttacatg ttttatagac cttgtggcat ggctcctttg 480
ttctatgggt gctttatttt cctgaataac agtaatgcga gactggtcta tgggtgcttt 540
gaccagtaat gcgagactag ttatttgatc atggtgcagt tcctagtgat tacgaacaac 600
aatttggtag ctcagttcat tcagcattgg tttctacgat ccttatcatt ttacttctga 660
atgaatttat ttatttaaga tattacagtg caataaactg ctgtataata tcagtaacaa 720
actgctatta ctagtaaatg cctagattca taataattca ttattctact tgaaaatgat 780
cttaggcctt tttatgcggt cctacgcatc cttccacagg acttgctgtt tgtttgtttt 840
ttgtaatccc tcgctgggac gcagaatggt tcatctgtgc taataatttt tttgcatata 900
taagtttata gttctcatta ttcatgtggc tatggtagcc tgtaaaatct attgtaataa 960
catattagtc agccatacat ctgttccaac ttgctcaatt gcaaatcata tctccactta 1020
aagcacatgt ttgcaagctt tctgacaagt ttctttgtgt ttgattgaaa cag 1073
<210> 63
<211> 2064
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 63
cattaaaagt cattatgtgc atgcgtcgta actaacatgg atatgttgct gcactatctc 60
ctcgcactag ctgcgcatga taaagccaca agccaaaatt aattattatg ggtgagaata 120
aatacgtacc agcaccggcc atagaaaaag tacattatta aaggtctaat ttggaaacag 180
tctgaaaacg acgtgcgctg cagaggtaaa tgtaattttc ggcactaaaa ccattatcaa 240
ctaattcatt caataacagt tatttagaaa atgtatagct cgctctaaaa aaacagttta 300
gaaaaacagt caaaataatt cgaccaacaa acagttaata aggttcatta aatatataat 360
gcacggtgct atttgatctt ttaaaggaaa aagaggaata gtcgtgggcg ccaggcggga 420
attggggcgc gggagtctgc cggacgacgc gttccgtccg aacggccgga cccgacgagg 480
cccccccgcc gccccacgtc gcagaaccgt ccgtgggtgg taatctggcc gggtacacca 540
gccgtcccct tgggcggcct cacagcactg ggctcacacg tgagttttgt tctgggcttc 600
ggatcgcacc atatgggcct cggcatcaga aagacggggc ccgtctggga tagaagagac 660
aggaacctcc tcgtggattc cagaagccag ccacgagcga ccaccgacgc ggaggatact 720
cgtcgtccaa gtccaacacg gcgggcgggc gggcggacgc gtgggctggg ctaactgcct 780
aaccttaacc tccaaggcac gccaaggccc gcttctccca cccgacataa atatcccccc 840
atccaggcaa ggcgcagagc ctcagaccag attccgatca atcacccata agctcccccc 900
aaatctgttc ctcgtctccc gtctcgcggt ttcctacttc cctcggacgc ctccggcaag 960
tcgctcgacc gcgcgattcc gcccgctcaa ggtatcaact cggttcacca ctccaatcta 1020
cgtctgattt agatgttact tccatctatg tctaatttag atgttactcc gatgcgattg 1080
gattatgttt atgcggtttg cactgctctg gaaactggaa tctagggttt cgagtgattt 1140
gatcgatcgc gatctgtgat ttcgttgcgc cttgtgtatg cttggagtga tctaggcttg 1200
tatatgcggc atcgcgatct gacgcggttg ctttgtagag gctgggggtc taggctgtga 1260
ttttagaatc aaataaagct gttccttacc gtagatgttt cctacatgtt ctgtccagta 1320
ctccagtgct atattcacat tgtttgaggc ttgagttttg tcgatcagtg gtcatgagaa 1380
aaatatatct catgatttta gaggcaccta ttgggaaagg tagatggttc cgttttacat 1440
gttttataga ccttgtggca tggctccttt gttctatggg tgctttattt tcctgaataa 1500
cagtaatgcg agactggtct atgggtgctt tgaccagtaa tgcgagacta gttatttgat 1560
catggtgcag ttcctagtga ttacgaacaa caatttggta gctcagttca ttcagcattg 1620
gtttctacga tccttatcat tttacttctg aatgaattta tttatttaag atattacagt 1680
gcaataaact gctgtataat atcagtaaca aactgctatt actagtaaat gcctagattc 1740
ataataattc attattctac ttgaaaatga tcttaggcct ttttatgcgg tcctacgcat 1800
ccttccacag gacttgctgt ttgtttgttt tttgtaatcc ctcgctggga cgcagaatgg 1860
ttcatctgtg ctaataattt ttttgcatat ataagtttat agttctcatt attcatgtgg 1920
ctatggtagc ctgtaaaatc tattgtaata acatattagt cagccataca tctgttccaa 1980
cttgctcaat tgcaaatcat atctccactt aaagcacatg tttgcaagct ttctgacaag 2040
tttctttgtg tttgattgaa acag 2064
<210> 64
<211> 855
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 64
cattaaaagt cattatgtgc atgcgtcgta actaacatgg atatgttgct gcactatctc 60
ctcgcactag ctgcgcatga taaagccaca agccaaaatt aattattatg ggtgagaata 120
aatacgtacc agcaccggcc atagaaaaag tacattatta aaggtctaat ttggaaacag 180
tctgaaaacg acgtgcgctg cagaggtaaa tgtaattttc ggcactaaaa ccattatcaa 240
ctaattcatt caataacagt tatttagaaa atgtatagct cgctctaaaa aaacagttta 300
gaaaaacagt caaaataatt cgaccaacaa acagttaata aggttcatta aatatataat 360
gcacggtgct atttgatctt ttaaaggaaa aagaggaata gtcgtgggcg ccaggcggga 420
attggggcgc gggagtctgc cggacgacgc gttccgtccg aacggccgga cccgacgagg 480
cccccccgcc gccccacgtc gcagaaccgt ccgtgggtgg taatctggcc gggtacacca 540
gccgtcccct tgggcggcct cacagcactg ggctcacacg tgagttttgt tctgggcttc 600
ggatcgcacc atatgggcct cggcatcaga aagacggggc ccgtctggga tagaagagac 660
aggaacctcc tcgtggattc cagaagccag ccacgagcga ccaccgacgc ggaggatact 720
cgtcgtccaa gtccaacacg gcgggcgggc gggcggacgc gtgggctggg ctaactgcct 780
aaccttaacc tccaaggcac gccaaggccc gcttctccca cccgacataa atatcccccc 840
atccaggcaa ggcgc 855
<210> 65
<211> 2000
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 65
agaagtaaaa aaaaagttcg tttcagaatc ataaaggtaa gttaaaaaaa gaccatacaa 60
aaaagaggta tttaatgata aactataatc cagaatttgt taggatagta tataagaata 120
agaccttgtt tagtttcaaa aaaatttgca aaattttcca gattcctcgt cacatcaaat 180
ctttagaggt atgcatggag tattaaatat agacaagacc taaataagaa aacatgaaat 240
gttcacgaaa aaaatcaagc caatgcatga tcgaagcaaa cggtatagta acggtgttaa 300
cctgatccat tgatctttgt aatctttaac ggccacctac cgcgggcagc aaacggcgtc 360
cccctcctcg atatctccgc ggcggcctct ggctttttcc gcggaattgc gcggtgggga 420
cggattccac gagaccgcaa cgcaaccgcc tctcgccgct gggccccaca ccgctcggtg 480
ccgtagcccg tagcctcacg ggattctttc tccctcctcc cccgtgtata aattggcttc 540
atcccctccc tgcctcatcc atccaaatcc cactccccaa tcccatcccg tcggagaaat 600
tcatcgaagc gaagcgaagc gaatcctccc gatcctctca aggtacgcga gttttcgaat 660
cccctccaga cccctcgtat gctttccctg ttcgttttcg tcgtagcgtt tgattaggta 720
tgctttccct gttcgtgttc gtcgtagggt tcgattaggt cgtgtgaggc catggcctgc 780
tgtgataaat ttatttgttg ttatatcgga tctgtagtcg atttgggggt cgtggtgtag 840
atccgcgggc tgtgatgaag ttatttggtg tgattgtgct cgcgtgattc tgcgcgttga 900
gctcgagtag atctgatggt tggacgaccg attggttcgt tggctggctg cgctaaggtt 960
gggctgggct catgttgcgt tcgctgttgc gcgtgattcc gcggatggac ttgcgcttga 1020
ttgccgccag atcacgttac gattatgtga tttcgtttgg aactttttag atttgtagct 1080
tctgcttatt atatgacaga tgcgcctact gctcatatgc ctgtggtaaa taatggatgg 1140
ctgtgggtca aactagttga ttgtcgagtc atgtatcata tacaggtgta tagacttgcg 1200
tctaattgtt tgcatgttgc agttatatga tttgttttag attgtttgtt ccactcatct 1260
aggctgtaaa agggacacta cttattagct tgttgtttaa tctttttatt agtagattat 1320
attggtaatg ttttactaat tattattatg ttatatgtga cttctgctca tgcctgatta 1380
taatcataga tcactgtagt tgattgttga atcatgtgtc aaatacccgt atacataaca 1440
ctacacattt gcttagttgt ttccttaact catgcaaatt gaacaccatg tatgatttgc 1500
atggtgctgt aatgttaaat actacagtcc tgttggtact tgtttagtaa gaatctgctt 1560
catacaacta tatgctatgc ctgatgataa tcatatatct ttgtgtaatt aataattagt 1620
tgactgttga ataatgtatc gagtacatac catggcacaa ttgcttagtc acttccttaa 1680
ccatgcatat tgaactgacc ccttcatgtt ctgctgaatt gttctattct gattagacca 1740
tacatcatgt attgcaatct ttatttgcaa ttgtaatgta atggttcggt tctcaaatgt 1800
taaatgctat agttgtgcta ctttctaatg ttaaatgcta tagctgtgct acttgtaaga 1860
tctgcttcat agtttagtta aattaggatg atgagctttg atgctgtaac tttgtttgat 1920
tatgttcata gttgatcagt ttttgttaga ctcacagtaa cttatggtct cactcttctt 1980
ctggtctttg atgtttgcag 2000
<210> 66
<211> 565
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 66
agaagtaaaa aaaaagttcg tttcagaatc ataaaggtaa gttaaaaaaa gaccatacaa 60
aaaagaggta tttaatgata aactataatc cagaatttgt taggatagta tataagaata 120
agaccttgtt tagtttcaaa aaaatttgca aaattttcca gattcctcgt cacatcaaat 180
ctttagaggt atgcatggag tattaaatat agacaagacc taaataagaa aacatgaaat 240
gttcacgaaa aaaatcaagc caatgcatga tcgaagcaaa cggtatagta acggtgttaa 300
cctgatccat tgatctttgt aatctttaac ggccacctac cgcgggcagc aaacggcgtc 360
cccctcctcg atatctccgc ggcggcctct ggctttttcc gcggaattgc gcggtgggga 420
cggattccac gagaccgcaa cgcaaccgcc tctcgccgct gggccccaca ccgctcggtg 480
ccgtagcccg tagcctcacg ggattctttc tccctcctcc cccgtgtata aattggcttc 540
atcccctccc tgcctcatcc atcca 565
<210> 67
<211> 77
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 67
aatcccactc cccaatccca tcccgtcgga gaaattcatc gaagcgaagc gaagcgaatc 60
ctcccgatcc tctcaag 77
<210> 68
<211> 1358
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 68
gtacgcgagt tttcgaatcc cctccagacc cctcgtatgc tttccctgtt cgttttcgtc 60
gtagcgtttg attaggtatg ctttccctgt tcgtgttcgt cgtagggttc gattaggtcg 120
tgtgaggcca tggcctgctg tgataaattt atttgttgtt atatcggatc tgtagtcgat 180
ttgggggtcg tggtgtagat ccgcgggctg tgatgaagtt atttggtgtg attgtgctcg 240
cgtgattctg cgcgttgagc tcgagtagat ctgatggttg gacgaccgat tggttcgttg 300
gctggctgcg ctaaggttgg gctgggctca tgttgcgttc gctgttgcgc gtgattccgc 360
ggatggactt gcgcttgatt gccgccagat cacgttacga ttatgtgatt tcgtttggaa 420
ctttttagat ttgtagcttc tgcttattat atgacagatg cgcctactgc tcatatgcct 480
gtggtaaata atggatggct gtgggtcaaa ctagttgatt gtcgagtcat gtatcatata 540
caggtgtata gacttgcgtc taattgtttg catgttgcag ttatatgatt tgttttagat 600
tgtttgttcc actcatctag gctgtaaaag ggacactact tattagcttg ttgtttaatc 660
tttttattag tagattatat tggtaatgtt ttactaatta ttattatgtt atatgtgact 720
tctgctcatg cctgattata atcatagatc actgtagttg attgttgaat catgtgtcaa 780
atacccgtat acataacact acacatttgc ttagttgttt ccttaactca tgcaaattga 840
acaccatgta tgatttgcat ggtgctgtaa tgttaaatac tacagtcctg ttggtacttg 900
tttagtaaga atctgcttca tacaactata tgctatgcct gatgataatc atatatcttt 960
gtgtaattaa taattagttg actgttgaat aatgtatcga gtacatacca tggcacaatt 1020
gcttagtcac ttccttaacc atgcatattg aactgacccc ttcatgttct gctgaattgt 1080
tctattctga ttagaccata catcatgtat tgcaatcttt atttgcaatt gtaatgtaat 1140
ggttcggttc tcaaatgtta aatgctatag ttgtgctact ttctaatgtt aaatgctata 1200
gctgtgctac ttgtaagatc tgcttcatag tttagttaaa ttaggatgat gagctttgat 1260
gctgtaactt tgtttgatta tgttcatagt tgatcagttt ttgttagact cacagtaact 1320
tatggtctca ctcttcttct ggtctttgat gtttgcag 1358
<210> 69
<211> 2622
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 69
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ctgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cccgttgccg 1500
caagactcag atcagattcc gatccccagt tcttccccaa tcaccttgtg gtctctcgtg 1560
tcgcggttcc cagggacgcc tccggctcgt cgctcgacag cgatctccgc cccagcaagg 1620
tatagattca gttccttgct ccgatcccaa tctggttgag atgttgctcc gatgcgactt 1680
gattatgtca tatatctgcg gtttgcaccg atctgaagcc tagggtttct cgagcgaccc 1740
agttatttgc aatttgcgat ttgctcgttt gttgcgcagc gtagtttatg tttggagtaa 1800
tcgaggattt gtatgcggcg tcggcgctac ctgcttaatc acgccatgtg acgcggttac 1860
ttgcagaggc tgggttctgt tatgtcgtga tctaagaatc tagattaggc tcagtcgttc 1920
ttgctgtcga ctagtttgtt ttgatatcca tgtagtacaa gttacttaaa atttaggtcc 1980
aatatatttt gcatgctttt ggcctgttat tcttgccaac aagttgtcct ggtaaaaagt 2040
agatgtgaaa gtcacgtatt gggacaaatt gatggtttag tgctatagtt ctatagttct 2100
gtgatacatc tatctgattt tttttggtct attggtgcct aacttatctg aaaatcatgg 2160
aacatgaggc tagtttgatc atggtttagt tcattgtgat taataatgta tgatttagta 2220
gctattttgg tgatcgtgtc attttatttg tgaatggaat cattgtatgt aaatgaagct 2280
agttcagggg ttacgatgta gctggctttg tattctaaag gctgctatta ttcatccatc 2340
gatttcacct atatgtaatc cagagctttt gatgtgaaat ttgtctgatc cttcactagg 2400
aaggacagaa cattgttaat attttggcac atctgtctta ttctcatcct ttgtttgaac 2460
atgttagcct gttcaaacag atactgttgt aatgtcctag ttatataggt acatatgtgt 2520
tctctattga gtttatggac ttttgtgtgt gaagttatat ttcattttgc tcaaaactca 2580
tgtttgcaag ctttctgaca ttattctatt gttctgaaac ag 2622
<210> 70
<211> 1492
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 70
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ctgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cc 1492
<210> 71
<211> 127
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 71
cgttgccgca agactcagat cagattccga tccccagttc ttccccaatc accttgtggt 60
ctctcgtgtc gcggttccca gggacgcctc cggctcgtcg ctcgacagcg atctccgccc 120
cagcaag 127
<210> 72
<211> 1003
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 72
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttatttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcag cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttctg ttatgtcgtg atctaagaat ctagattagg ctcagtcgtt 300
cttgctgtcg actagtttgt tttgatatcc atgtagtaca agttacttaa aatttaggtc 360
caatatattt tgcatgcttt tggcctgtta ttcttgccaa caagttgtcc tggtaaaaag 420
tagatgtgaa agtcacgtat tgggacaaat tgatggttta gtgctatagt tctatagttc 480
tgtgatacat ctatctgatt ttttttggtc tattggtgcc taacttatct gaaaatcatg 540
gaacatgagg ctagtttgat catggtttag ttcattgtga ttaataatgt atgatttagt 600
agctattttg gtgatcgtgt cattttattt gtgaatggaa tcattgtatg taaatgaagc 660
tagttcaggg gttacgatgt agctggcttt gtattctaaa ggctgctatt attcatccat 720
cgatttcacc tatatgtaat ccagagcttt tgatgtgaaa tttgtctgat ccttcactag 780
gaaggacaga acattgttaa tattttggca catctgtctt attctcatcc tttgtttgaa 840
catgttagcc tgttcaaaca gatactgttg taatgtccta gttatatagg tacatatgtg 900
ttctctattg agtttatgga cttttgtgtg tgaagttata tttcattttg ctcaaaactc 960
atgtttgcaa gctttctgac attattctat tgttctgaaa cag 1003
<210> 73
<211> 2622
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 73
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ccgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cccgttgccg 1500
caagactcag atcagattcc gatccccagt tcttccccaa tcaccttgtg gtctctcgtg 1560
tcgcggttcc cagggacgcc tccggctcgt cgctcgacag cgatctccgc cccagcaagg 1620
tatagattca gttccttgct ccgatcccaa tctggttgag atgttgctcc gatgcgactt 1680
gattatgtca tatatctgcg gtttgcaccg atctgaagcc tagggtttct cgagcgaccc 1740
agttatttgc aatttgcgat ttgctcgttt gttgcgcagc gtagtttatg tttggagtaa 1800
tcgaggattt gtatgcggcg tcggcgctac ctgcttaatc acgccatgtg acgcggttac 1860
ttgcagaggc tgggttctgt tatgtcgtga tctaagaatc tagattaggc tcagtcgttc 1920
ttgctgtcga ctagtttgtt ttgatatcca tgtagtacaa gttacttaaa atttaggtcc 1980
aatatatttt gcatgctttt ggcctgttat tcttgccaac aagttgtcct ggtaaaaagt 2040
agatgtgaaa gtcacgtatt gggacaaatt gatggtttag tgctatagtt ctatagttct 2100
gtgatacatc tatctgattt tttttggtct attggtgcct aacttatctg aaaatcatgg 2160
aacatgaggc tagtttgatc atggtttagt tcattgtgat taataatgta tgatttagta 2220
gctattttgg tgatcgtgtc attttatttg tgaatggaat cattgtatgt aaatgaagct 2280
agttcagggg ttacgatgta gctggctttg tattctaaag gctgctatta ttcatccatc 2340
gatttcacct atatgtaatc cagagctttt gatgtgaaat ttgtctgatc cttcactagg 2400
aaggacagaa cattgttaat attttggcac atctgtctta ttctcatcct ttgtttgaac 2460
atgttagcct gttcaaacag atactgttgt aatgtcctag ttatataggt acatatgtgt 2520
tctctattga gtttatggac ttttgtgtgt gaagttatat ttcattttgc tcaaaactca 2580
tgtttgcaag ctttctgaca ttattctatt gttctgaaac ag 2622
<210> 74
<211> 1492
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 74
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ccgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cc 1492
<210> 75
<211> 2164
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 75
gccgtttttg aagtatccag gattagaagc ttctactgcg cttttatatt atagctgtgg 60
acctgtggta acctttctct tttggcgctt gcttaatctc ggccgtgctg gtccatgctt 120
aggcactagg cagagataga gccgggggtg aatggggcta aagctcagct gctcgagggg 180
ccgtgggctg gtttccacta gcctacagct gtgccacgtg cggccgcgca agccgaagca 240
agcacgctga gccgttggac agcttgtcat aatgccatta cgtggattac acgtaactgg 300
ccctgtaact actcgttcgg ccatcatcaa acgacgacgt ccgctaggcg acgacacggg 360
taatgcacgc agccacccag gcgcgcgcgc tagcggagca cggtcaggtg acacgggcgt 420
cgtgacgctt ccgagttgaa ggggttaacg ccagaaacag tgtttggcca gggtatgaac 480
ataacaaaaa atattcacac gaaagaatgg aagtatggag ctgctactgt gtaaatgcca 540
agcaggaaac tcacgcccgc taacatccaa cggccaacag ctcgacgtgc cggtcagcag 600
agcatcggaa cactggtgat tggtggagcc ggcagtatgc gccccagcac ggccgaggtg 660
gtggtggccc gtggccctgc tgtctgcgcg gctcgggaca acttgaaact gggccaccgc 720
ctcgtcgcaa ctcgcaaccc gttggcggaa gaaaggaatg gctcgtaggg gcccgggtag 780
aatcgaagaa tgttgcgctg ggcttcgatt cacataacat gggcctgaag ctctaaaacg 840
acggcccggt cgccgcgcga tggaaagaga ccggatcctc ctcgtgaatt ctggaaggcc 900
acacgagagc gacccaccac cgacgcggag gagtcgtgcg tggtccaaca cggccggcgg 960
gctgggctgc gaccttaacc agcaaggcac gccacgaccc gccccgccct cgaggcataa 1020
ataccctccc atcccgttgc cgcaagactc agatcagatt ccgatcccca gttcttcccc 1080
aatcaccttg tggtctctcg tgtcgcggtt cccagggacg cctccggctc gtcgctcgac 1140
agcgatctcc gccccagcaa ggtatagatt cagttccttg ctccgatccc aatctggttg 1200
agatgttgct ccgatgcgac ttgattatgt catatatctg cggtttgcac cgatctgaag 1260
cctagggttt ctcgagcgac ccagttattt gcaatttgcg atttgctcgt ttgttgcgca 1320
gcgtagttta tgtttggagt aatcgaggat ttgtatgcgg cgtcggcgct acctgcttaa 1380
tcacgccatg tgacgcggtt acttgcagag gctgggttct gttatgtcgt gatctaagaa 1440
tctagattag gctcagtcgt tcttgctgtc gactagtttg ttttgatatc catgtagtac 1500
aagttactta aaatttaggt ccaatatatt ttgcatgctt ttggcctgtt attcttgcca 1560
acaagttgtc ctggtaaaaa gtagatgtga aagtcacgta ttgggacaaa ttgatggttt 1620
agtgctatag ttctatagtt ctgtgataca tctatctgat tttttttggt ctattggtgc 1680
ctaacttatc tgaaaatcat ggaacatgag gctagtttga tcatggttta gttcattgtg 1740
attaataatg tatgatttag tagctatttt ggtgatcgtg tcattttatt tgtgaatgga 1800
atcattgtat gtaaatgaag ctagttcagg ggttacgatg tagctggctt tgtattctaa 1860
aggctgctat tattcatcca tcgatttcac ctatatgtaa tccagagctt ttgatgtgaa 1920
atttgtctga tccttcacta ggaaggacag aacattgtta atattttggc acatctgtct 1980
tattctcatc ctttgtttga acatgttagc ctgttcaaac agatactgtt gtaatgtcct 2040
agttatatag gtacatatgt gttctctatt gagtttatgg acttttgtgt gtgaagttat 2100
atttcatttt gctcaaaact catgtttgca agctttctga cattattcta ttgttctgaa 2160
acag 2164
<210> 76
<211> 1034
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 76
gccgtttttg aagtatccag gattagaagc ttctactgcg cttttatatt atagctgtgg 60
acctgtggta acctttctct tttggcgctt gcttaatctc ggccgtgctg gtccatgctt 120
aggcactagg cagagataga gccgggggtg aatggggcta aagctcagct gctcgagggg 180
ccgtgggctg gtttccacta gcctacagct gtgccacgtg cggccgcgca agccgaagca 240
agcacgctga gccgttggac agcttgtcat aatgccatta cgtggattac acgtaactgg 300
ccctgtaact actcgttcgg ccatcatcaa acgacgacgt ccgctaggcg acgacacggg 360
taatgcacgc agccacccag gcgcgcgcgc tagcggagca cggtcaggtg acacgggcgt 420
cgtgacgctt ccgagttgaa ggggttaacg ccagaaacag tgtttggcca gggtatgaac 480
ataacaaaaa atattcacac gaaagaatgg aagtatggag ctgctactgt gtaaatgcca 540
agcaggaaac tcacgcccgc taacatccaa cggccaacag ctcgacgtgc cggtcagcag 600
agcatcggaa cactggtgat tggtggagcc ggcagtatgc gccccagcac ggccgaggtg 660
gtggtggccc gtggccctgc tgtctgcgcg gctcgggaca acttgaaact gggccaccgc 720
ctcgtcgcaa ctcgcaaccc gttggcggaa gaaaggaatg gctcgtaggg gcccgggtag 780
aatcgaagaa tgttgcgctg ggcttcgatt cacataacat gggcctgaag ctctaaaacg 840
acggcccggt cgccgcgcga tggaaagaga ccggatcctc ctcgtgaatt ctggaaggcc 900
acacgagagc gacccaccac cgacgcggag gagtcgtgcg tggtccaaca cggccggcgg 960
gctgggctgc gaccttaacc agcaaggcac gccacgaccc gccccgccct cgaggcataa 1020
ataccctccc atcc 1034
<210> 77
<211> 1810
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 77
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagca tcggaacact ggtgattggt ggagccggca gtatgcgccc cagcacggcc 300
gaggtggtgg tggcccgtgg ccctgctgtc tgcgcggctc gggacaactt gaaactgggc 360
caccgcctcg tcgcaactcg caacccgttg gcggaagaaa ggaatggctc gtaggggccc 420
gggtagaatc gaagaatgtt gcgctgggct tcgattcaca taacatgggc ctgaagctct 480
aaaacgacgg cccggtcgcc gcgcgatgga aagagaccgg atcctcctcg tgaattctgg 540
aaggccacac gagagcgacc caccaccgac gcggaggagt cgtgcgtggt ccaacacggc 600
cggcgggctg ggctgcgacc ttaaccagca aggcacgcca cgacccgccc cgccctcgag 660
gcataaatac cctcccatcc cgttgccgca agactcagat cagattccga tccccagttc 720
ttccccaatc accttgtggt ctctcgtgtc gcggttccca gggacgcctc cggctcgtcg 780
ctcgacagcg atctccgccc cagcaaggta tagattcagt tccttgctcc gatcccaatc 840
tggttgagat gttgctccga tgcgacttga ttatgtcata tatctgcggt ttgcaccgat 900
ctgaagccta gggtttctcg agcgacccag ttatttgcaa tttgcgattt gctcgtttgt 960
tgcgcagcgt agtttatgtt tggagtaatc gaggatttgt atgcggcgtc ggcgctacct 1020
gcttaatcac gccatgtgac gcggttactt gcagaggctg ggttctgtta tgtcgtgatc 1080
taagaatcta gattaggctc agtcgttctt gctgtcgact agtttgtttt gatatccatg 1140
tagtacaagt tacttaaaat ttaggtccaa tatattttgc atgcttttgg cctgttattc 1200
ttgccaacaa gttgtcctgg taaaaagtag atgtgaaagt cacgtattgg gacaaattga 1260
tggtttagtg ctatagttct atagttctgt gatacatcta tctgattttt tttggtctat 1320
tggtgcctaa cttatctgaa aatcatggaa catgaggcta gtttgatcat ggtttagttc 1380
attgtgatta ataatgtatg atttagtagc tattttggtg atcgtgtcat tttatttgtg 1440
aatggaatca ttgtatgtaa atgaagctag ttcaggggtt acgatgtagc tggctttgta 1500
ttctaaaggc tgctattatt catccatcga tttcacctat atgtaatcca gagcttttga 1560
tgtgaaattt gtctgatcct tcactaggaa ggacagaaca ttgttaatat tttggcacat 1620
ctgtcttatt ctcatccttt gtttgaacat gttagcctgt tcaaacagat actgttgtaa 1680
tgtcctagtt atataggtac atatgtgttc tctattgagt ttatggactt ttgtgtgtga 1740
agttatattt cattttgctc aaaactcatg tttgcaagct ttctgacatt attctattgt 1800
tctgaaacag 1810
<210> 78
<211> 680
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 78
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagca tcggaacact ggtgattggt ggagccggca gtatgcgccc cagcacggcc 300
gaggtggtgg tggcccgtgg ccctgctgtc tgcgcggctc gggacaactt gaaactgggc 360
caccgcctcg tcgcaactcg caacccgttg gcggaagaaa ggaatggctc gtaggggccc 420
gggtagaatc gaagaatgtt gcgctgggct tcgattcaca taacatgggc ctgaagctct 480
aaaacgacgg cccggtcgcc gcgcgatgga aagagaccgg atcctcctcg tgaattctgg 540
aaggccacac gagagcgacc caccaccgac gcggaggagt cgtgcgtggt ccaacacggc 600
cggcgggctg ggctgcgacc ttaaccagca aggcacgcca cgacccgccc cgccctcgag 660
gcataaatac cctcccatcc 680
<210> 79
<211> 1940
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 79
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag 1940
<210> 80
<211> 837
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 80
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacat 837
<210> 81
<211> 86
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 81
cctctcatca tcttctctcg tgtagcacgc gcagcccgat ccccaatccc ctctcctcgc 60
gagcctcgtc gatccctcgc ttcaag 86
<210> 82
<211> 1017
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 82
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcag 1017
<210> 83
<211> 1845
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 83
ctatctgttt tctttttgcc ctgaaagagt gaagtcatca tcatatttac catggcgcgc 60
gtaggagcgc ttcgtcgaag acccataggg gggcggtact cgcaccgtgg ttgtttcctg 120
ttatgtaata tcggatgggg gagcagtcgg ctaggttggt cccatcggta ctggtcgtcc 180
cctagtgcgc tagatgcgcg atgtttgtcc tcaaaaactc ttttcttctt aataacaatc 240
atacgcaaat tttttgcgta ttcgagaaaa aaagaagatt ctatctgttt tttttttgaa 300
atggctccaa tttataggag gagcccgttt aacggcgtcg acaaatctaa cggacaccaa 360
ccagcgaatg agcgaaccca ccagcgccaa gctagccaag cgaagcagac ggccgagacg 420
ctgacaccct tgccttggcg cggcatctcc gtcgctggct cgctggctct ggccccttcg 480
cgagagttcc ggtccacctc cacctgtgtc ggtttccaac tccgttccgc cttcgcgtgg 540
gacttgttcc gttcatccgt tggcggcatc cggaaattgc gtggcgtaga gcacggggcc 600
ctcctctcac acggcacgga accgtcacga gctcacggca ccggcagcac ggcggggatt 660
ccttccccac caccgctcct tccctttccc ttcctcgccc gccatcataa atagccaccc 720
ctcccagctt ccttcgccac atcctctcat catcttctct cgtgtagcac gcgcagcccg 780
atccccaatc ccctctcctc gcgagcctcg tcgatccctc gcttcaaggt atggctatcg 840
tccttcctct ctctctcttt accttatcta gatcggcgat ccatggttag ggcctgctag 900
ttctccgttc gtgtttgtcg atggctgtga ggcacaatag atccgtcggc gttatgatgg 960
ttagcctgtc atgctcttgc gatctgtggt tcctttagga aaggcattaa tttaatccct 1020
gatggttcga gatcggtgat ccatggttag taccctaagc tgtggagtcg ggtttagatc 1080
cgcgctgttc gtaggcgatc tgttctgatt gttaacttgt cagtacctgc gaatcctcgg 1140
tggttctagc tggttcggag atcagatcga ttccattatc tgctatacat cttgtttcgt 1200
tgcctaggct ccgtttaatc tatccatcgt atgatgttag cctttgatat gattcgatcg 1260
tgctagctat gtcctgtgga cttaattgtc aggtcctaat ttttaggaag actgttccaa 1320
accatctgct ggatttatta aatttggatc tggatgtgtc acatacacct tcataattaa 1380
aatggatgga aatatctctt atcttttaga tatggatagg catttatatg atgctgtgag 1440
ttttactagt actttcttag aatatatgta cttttttaga cggaatattg atatgtatac 1500
atgtgtagat acatgaagca acatgctgct gtagtctaat aattcctgtt catctaataa 1560
tcaagtatgt atatgttctg tgtgttttat tggtatttga ttagatatat acatgcttag 1620
atacatacat gaagcagcat gctgctacag tttaatcatt attgtttatc caataaacaa 1680
acatgctttt taatttatct tgatatgctt ggatgacgga atatgcagag attttaagta 1740
cccagcatca tgagcatgca tgaccctgcg ttagtatgct gtttatttgc ttgagactct 1800
ttcttttgta gatactcacc ctgttttctg gtgatcctac tgcag 1845
<210> 84
<211> 742
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 84
ctatctgttt tctttttgcc ctgaaagagt gaagtcatca tcatatttac catggcgcgc 60
gtaggagcgc ttcgtcgaag acccataggg gggcggtact cgcaccgtgg ttgtttcctg 120
ttatgtaata tcggatgggg gagcagtcgg ctaggttggt cccatcggta ctggtcgtcc 180
cctagtgcgc tagatgcgcg atgtttgtcc tcaaaaactc ttttcttctt aataacaatc 240
atacgcaaat tttttgcgta ttcgagaaaa aaagaagatt ctatctgttt tttttttgaa 300
atggctccaa tttataggag gagcccgttt aacggcgtcg acaaatctaa cggacaccaa 360
ccagcgaatg agcgaaccca ccagcgccaa gctagccaag cgaagcagac ggccgagacg 420
ctgacaccct tgccttggcg cggcatctcc gtcgctggct cgctggctct ggccccttcg 480
cgagagttcc ggtccacctc cacctgtgtc ggtttccaac tccgttccgc cttcgcgtgg 540
gacttgttcc gttcatccgt tggcggcatc cggaaattgc gtggcgtaga gcacggggcc 600
ctcctctcac acggcacgga accgtcacga gctcacggca ccggcagcac ggcggggatt 660
ccttccccac caccgctcct tccctttccc ttcctcgccc gccatcataa atagccaccc 720
ctcccagctt ccttcgccac at 742
<210> 85
<211> 1504
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 85
caaatctaac ggacaccaac cagcgaatga gcgaacccac cagcgccaag ctagccaagc 60
gaagcagacg gccgagacgc tgacaccctt gccttggcgc ggcatctccg tcgctggctc 120
gctggctctg gccccttcgc gagagttccg gtccacctcc acctgtgtcg gtttccaact 180
ccgttccgcc ttcgcgtggg acttgttccg ttcatccgtt ggcggcatcc ggaaattgcg 240
tggcgtagag cacggggccc tcctctcaca cggcacggaa ccgtcacgag ctcacggcac 300
cggcagcacg gcggggattc cttccccacc accgctcctt ccctttccct tcctcgcccg 360
ccatcataaa tagccacccc tcccagcttc cttcgccaca tcctctcatc atcttctctc 420
gtgtagcacg cgcagcccga tccccaatcc cctctcctcg cgagcctcgt cgatccctcg 480
cttcaaggta tggctatcgt ccttcctctc tctctcttta ccttatctag atcggcgatc 540
catggttagg gcctgctagt tctccgttcg tgtttgtcga tggctgtgag gcacaataga 600
tccgtcggcg ttatgatggt tagcctgtca tgctcttgcg atctgtggtt cctttaggaa 660
aggcattaat ttaatccctg atggttcgag atcggtgatc catggttagt accctaagct 720
gtggagtcgg gtttagatcc gcgctgttcg taggcgatct gttctgattg ttaacttgtc 780
agtacctgcg aatcctcggt ggttctagct ggttcggaga tcagatcgat tccattatct 840
gctatacatc ttgtttcgtt gcctaggctc cgtttaatct atccatcgta tgatgttagc 900
ctttgatatg attcgatcgt gctagctatg tcctgtggac ttaattgtca ggtcctaatt 960
tttaggaaga ctgttccaaa ccatctgctg gatttattaa atttggatct ggatgtgtca 1020
catacacctt cataattaaa atggatggaa atatctctta tcttttagat atggataggc 1080
atttatatga tgctgtgagt tttactagta ctttcttaga atatatgtac ttttttagac 1140
ggaatattga tatgtataca tgtgtagata catgaagcaa catgctgctg tagtctaata 1200
attcctgttc atctaataat caagtatgta tatgttctgt gtgttttatt ggtatttgat 1260
tagatatata catgcttaga tacatacatg aagcagcatg ctgctacagt ttaatcatta 1320
ttgtttatcc aataaacaaa catgcttttt aatttatctt gatatgcttg gatgacggaa 1380
tatgcagaga ttttaagtac ccagcatcat gagcatgcat gaccctgcgt tagtatgctg 1440
tttatttgct tgagactctt tcttttgtag atactcaccc tgttttctgg tgatcctact 1500
gcag 1504
<210> 86
<211> 401
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 86
caaatctaac ggacaccaac cagcgaatga gcgaacccac cagcgccaag ctagccaagc 60
gaagcagacg gccgagacgc tgacaccctt gccttggcgc ggcatctccg tcgctggctc 120
gctggctctg gccccttcgc gagagttccg gtccacctcc acctgtgtcg gtttccaact 180
ccgttccgcc ttcgcgtggg acttgttccg ttcatccgtt ggcggcatcc ggaaattgcg 240
tggcgtagag cacggggccc tcctctcaca cggcacggaa ccgtcacgag ctcacggcac 300
cggcagcacg gcggggattc cttccccacc accgctcctt ccctttccct tcctcgcccg 360
ccatcataaa tagccacccc tcccagcttc cttcgccacat 401
<210> 87
<211> 1157
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 87
ccttcctcgc ccgccatcat aaatagccac ccctcccagc ttccttcgcc acatcctctc 60
atcatcttct ctcgtgtagc acgcgcagcc cgatccccaa tcccctctcc tcgcgagcct 120
cgtcgatccc tcgcttcaag gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc 180
tagatcggcg atccatggtt agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt 240
gaggcacaat agatccgtcg gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg 300
gttcctttag gaaaggcatt aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt 360
agtaccctaa gctgtggagt cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga 420
ttgttaactt gtcagtacct gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc 480
gattccatta tctgctatac atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc 540
gtatgatgtt agcctttgat atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg 600
tcaggtccta atttttagga agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga 660
tctggatgtg tcacatacac cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta 720
gatatggata ggcatttata tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg 780
tactttttta gacggaatat tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg 840
ctgtagtcta ataattcctg ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt 900
attggtattt gattagatat atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac 960
agtttaatca ttattgttta tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc 1020
ttggatgacg gaatatgcag agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg 1080
cgttagtatg ctgtttattt gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc 1140
tggtgatcct actgcag 1157
<210> 88
<211> 54
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 88
ccttcctcgc ccgccatcat aaatagccac ccctcccagc ttccttcgcc acat 54
<210> 89
<211> 798
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 89
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgcc 798
<210> 90
<211> 3393
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 90
ggttctatac aacaccacac actgtgtgag tgtgtgacca gtggccaact tttgttcagt 60
tcaacgatcc tggcctttcc gggcacccaa tacactaatt aatctattgc agctaacctc 120
aaaagaaatg catttgcagt tgtctgtcct aatcaatcta ctagcagact cacattattg 180
atgtaggaaa taaaattcag cctgtgacgt ggatgcaaca actgcactgc acaggatacc 240
atcttagccg ttgtgtcaca atttgctttg ctaatgtttt gagaaaccca gctttgacaa 300
acgtaagatc gatgagggcc ttacgtttgg cacaatatgt attgtaatcc ggcacggcaa 360
gttagactcg gtagtgttta gccggcatct ttatgtttgg cacaatttaa tttaattcgg 420
catggtaggt tagactgcag cgtgagccgg tcattgcaag ttattatgac atgttagagc 480
atctccaaca agttggaaaa aatgacttgg tatatcatgg tatatcatga gttttagcaa 540
cttattaatt catttgacaa gtaaaaaaaa gatccctctt caacaatttg ctattccaac 600
tcgctaaaat aaaaaaaaat taggctcacc taggccgatc tgcgttgccg cgggagagga 660
gggtaaaaga ttttgcgcta ggagaggtgg aggaacaggg cgcgggagcc ggccacggtg 720
aaatcacggg atagcaacct cacccgcgcg cgcaaattta cgcgtgtggc atggaggaat 780
agaaagttgg aaaagatagc aagttcattt agggagttgt tggagaagaa tatttgtgct 840
tttaccaaat ttataagaat agcaagtgag aatagagagt tgttggagat gctcaacaaa 900
tatacacaat aaagtggtat aataagcggc aagttattat gacatatata agagcaagta 960
tacaataagg tgaactgtta tatcgatcga tttttttttg agcacatatc gatcgaattt 1020
attgtaagat agaaaagaga agatataaaa acttatagtg atgaacaata ataatataaa 1080
gattattttt aaactatgaa aacaataacc gaactactcg ctctcttcta attagtaaag 1140
taaaggcttc tcattgtata tatataaaaa aattcgttct gatttcttat attcaagacg 1200
gggagagtgc tgagtgctaa cttactagtc tacgagagaa gcttcaaatc aaacagtgta 1260
ctatagggct tacacaattt ttctgaggga agcgattgtc tgaaatgaac taaaaggctg 1320
agagctggaa aaagtagctt attctgattc tgtgaagtga ttctccatgc tgattttaaa 1380
agtttatgat aaaaaatcaa agagaataac tttcagccac agaatcactt ctctcagaga 1440
atcaacttat atggagaatc agaatcagat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta 1500
acctaccatg gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt 1560
ttgccctgaa agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt 1620
cgaagaccca taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga 1680
tgggggagca gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat 1740
gcgcgatgtt tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt 1800
gcgtattcga gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat 1860
aggaggagcc cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga 1920
acccaccagc gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct 1980
tggcgcggca tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc 2040
acctccacct gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca 2100
tccgttggcg gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc 2160
acggaaccgt cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg 2220
ctccttccct ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc 2280
gccacatcct ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc 2340
tcctcgcgag cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc 2400
tctttacctt atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt 2460
tgtcgatggc tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct 2520
cttgcgatct gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg 2580
gtgatccatg gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg 2640
cgatctgttc tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt 2700
cggagatcag atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt 2760
taatctatcc atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct 2820
gtggacttaa ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt 2880
tattaaattt ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat 2940
ctcttatctt ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt 3000
cttagaatat atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg 3060
aagcaacatg ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg 3120
ttctgtgtgt tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc 3180
agcatgctgc tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt 3240
tatcttgata tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc 3300
atgcatgacc ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac 3360
tcaccctgtt ttctggtgat cctactgcag gtg 3393
<210> 91
<211> 2287
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 91
ggttctatac aacaccacac actgtgtgag tgtgtgacca gtggccaact tttgttcagt 60
tcaacgatcc tggcctttcc gggcacccaa tacactaatt aatctattgc agctaacctc 120
aaaagaaatg catttgcagt tgtctgtcct aatcaatcta ctagcagact cacattattg 180
atgtaggaaa taaaattcag cctgtgacgt ggatgcaaca actgcactgc acaggatacc 240
atcttagccg ttgtgtcaca atttgctttg ctaatgtttt gagaaaccca gctttgacaa 300
acgtaagatc gatgagggcc ttacgtttgg cacaatatgt attgtaatcc ggcacggcaa 360
gttagactcg gtagtgttta gccggcatct ttatgtttgg cacaatttaa tttaattcgg 420
catggtaggt tagactgcag cgtgagccgg tcattgcaag ttattatgac atgttagagc 480
atctccaaca agttggaaaa aatgacttgg tatatcatgg tatatcatga gttttagcaa 540
cttattaatt catttgacaa gtaaaaaaaa gatccctctt caacaatttg ctattccaac 600
tcgctaaaat aaaaaaaaat taggctcacc taggccgatc tgcgttgccg cgggagagga 660
gggtaaaaga ttttgcgcta ggagaggtgg aggaacaggg cgcgggagcc ggccacggtg 720
aaatcacggg atagcaacct cacccgcgcg cgcaaattta cgcgtgtggc atggaggaat 780
agaaagttgg aaaagatagc aagttcattt agggagttgt tggagaagaa tatttgtgct 840
tttaccaaat ttataagaat agcaagtgag aatagagagt tgttggagat gctcaacaaa 900
tatacacaat aaagtggtat aataagcggc aagttattat gacatatata agagcaagta 960
tacaataagg tgaactgtta tatcgatcga tttttttttg agcacatatc gatcgaattt 1020
attgtaagat agaaaagaga agatataaaa acttatagtg atgaacaata ataatataaa 1080
gattattttt aaactatgaa aacaataacc gaactactcg ctctcttcta attagtaaag 1140
taaaggcttc tcattgtata tatataaaaa aattcgttct gatttcttat attcaagacg 1200
gggagagtgc tgagtgctaa cttactagtc tacgagagaa gcttcaaatc aaacagtgta 1260
ctatagggct tacacaattt ttctgaggga agcgattgtc tgaaatgaac taaaaggctg 1320
agagctggaa aaagtagctt attctgattc tgtgaagtga ttctccatgc tgattttaaa 1380
agtttatgat aaaaaatcaa agagaataac tttcagccac agaatcactt ctctcagaga 1440
atcaacttat atggagaatc agaatcagat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta 1500
acctaccatg gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt 1560
ttgccctgaa agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt 1620
cgaagaccca taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga 1680
tgggggagca gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat 1740
gcgcgatgtt tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt 1800
gcgtattcga gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat 1860
aggaggagcc cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga 1920
acccaccagc gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct 1980
tggcgcggca tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc 2040
acctccacct gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca 2100
tccgttggcg gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc 2160
acggaaccgt cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg 2220
ctccttccct ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc 2280
gccacat 2287
<210> 92
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 92
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcaggtg 1020
<210> 93
<211> 3393
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 93
ggttctatac aacaccacac actgtgtgag tgtgtgacca gtggccaact tttgttcagt 60
tcaacgatcc tggcctttcc gggcacccaa tacactaatt aatctattgc agctaacctc 120
aaaagaaatg catttgcagt tgtctgtcct aatcaatcta ctagcagact cacattattg 180
atgtaggaaa taaaattcag cctgtgacgt ggatgcaaca actgcactgc acaggatacc 240
atcttagccg ttgtgtcaca atttgctttg ctaatgtttt gagaaaccca gctttgacaa 300
acgtaagatc gatgagggcc ttacgtttgg cacaatatgt attgtaatcc ggcacggcaa 360
gttagactcg gtagtgttta gccggcatct ttatgtttgg cacaatttaa tttaattcgg 420
catggtaggt tagactgcag cgtgagccgg tcattgcaag ttattatgac atgttagagc 480
atctccaaca agttggaaaa aatgacttgg tatatcatgg tatatcatga gttttagcaa 540
cttattaatt catttgacaa gtaaaaaaaa gatccctctt caacaatttg ctattccaac 600
tcgctaaaat aaaaaaaaat taggctcacc taggccgatc tgcgttgccg cgggagagga 660
gggtaaaaga ttttgcgcta ggagaggtgg aggaacaggg cgcgggagcc ggccacggtg 720
aaatcacggg atagcaacct cacccgcgcg cgcaaattta cgcgtgtggc atggaggaat 780
agaaagttgg aaaagatagc aagttcattt agggagttgt tggagaagaa tatttgtgct 840
tttaccaaat ttataagaat agcaagtgag aatagagagt tgttggagat gctcaacaaa 900
tatacacaat aaagtggtat aataagcggc aagttattat gacatatata agagcaagta 960
tacaataagg tgaactgtta tatcgatcga tttttttttg agcacatatc gatcgaattt 1020
attgtaagat agaaaagaga agatataaaa acttatagtg atgaacaata ataatataaa 1080
gattattttt aaactatgaa aacaataacc gaactactcg ctctcttcta attagtaaag 1140
taaaggcttc tcattgtata tatataaaaa aattcgttct gatttcttat attcaagacg 1200
gggagagtgc tgagtgctaa cttactagtc tacgagagaa gcttcaaatc aaacagtgta 1260
ctatagggct tacacaattt ttctgaggga agcgattgtc tgaaatgaac taaaaggctg 1320
agagctggaa aaagtagctt attctgattc tgtgaagtga ttctccatgc tgattttaaa 1380
agtttatgat aaaaaatcaa agagaataac tttcagccac agaatcactt ctctcagaga 1440
atcaacttat atggagaatc agaatcagat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta 1500
acctaccatg gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt 1560
ttgccctgaa agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt 1620
cgaagaccca taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga 1680
tgggggagca gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat 1740
gcgcgatgtt tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt 1800
gcgtattcga gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat 1860
aggaggagcc cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga 1920
acccaccagc gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct 1980
tggcgcggca tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc 2040
acctccacct gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca 2100
tccgttggcg gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc 2160
acggaaccgt cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg 2220
ctccttccct ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc 2280
gccacatcct ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc 2340
tcctcgcgag cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc 2400
tctttacctt atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt 2460
tgtcgatggc tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct 2520
cttgcgatct gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg 2580
gtgatccatg gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg 2640
cgatctgttc tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt 2700
cggagatcag atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt 2760
taatctatcc atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct 2820
gtggacttaa ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt 2880
tattaaattt ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat 2940
ctcttatctt ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt 3000
cttagaatat atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg 3060
aagcaacatg ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg 3120
ttctgtgtgt tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc 3180
agcatgctgc tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt 3240
tatcttgata tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc 3300
atgcatgacc ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac 3360
tcaccctgtt ttctggtgat cctactgcag gtc 3393
<210> 94
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 94
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcaggtc 1020
<210> 95
<211> 2166
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 95
gtctacgaga gaagcttcaa atcaaacagt gtactatagg gcttacacaa tttttctgag 60
ggaagcgatt gtctgaaatg aactaaaagg ctgagagctg gaaaaagtag cttattctga 120
ttctgtgaag tgattctcca tgctgatttt aaaagtttat gataaaaaat caaagagaat 180
aactttcagc cacagaatca cttctctcag agaatcaact tatatggaga atcagaatca 240
gatggagctc taccaaactg gccctaggca ttaacctacc atggatcaca tcgtaaaaaa 300
aaaaccctac catggatcct atctgttttc tttttgccct gaaagagtga agtcatcatc 360
atatttacca tggcgcgcgt aggagcgctt cgtcgaagac ccataggggg gcggtactcg 420
caccgtggtt gtttcctgtt atgtaatatc ggatggggga gcagtcggct aggttggtcc 480
catcggtact ggtcgtcccc tagtgcgcta gatgcgcgat gtttgtcctc aaaaactctt 540
ttcttcttaa taacaatcat acgcaaattt tttgcgtatt cgagaaaaaa agaagattct 600
atctgttttt tttttgaaat ggctccaatt tataggagga gcccgtttaa cggcgtcgac 660
aaatctaacg gacaccaacc agcgaatgag cgaacccacc agcgccaagc tagccaagcg 720
aagcagacgg ccgagacgct gacacccttg ccttggcgcg gcatctccgt cgctggctcg 780
ctggctctgg ccccttcgcg agagttccgg tccacctcca cctgtgtcgg tttccaactc 840
cgttccgcct tcgcgtggga cttgttccgt tcatccgttg gcggcatccg gaaattgcgt 900
ggcgtagagc acggggccct cctctcacac ggcacggaac cgtcacgagc tcacggcacc 960
ggcagcacgg cggggattcc ttccccacca ccgctccttc cctttccctt cctcgcccgc 1020
catcataaat agccacccct cccagcttcc ttcgccacat cctctcatca tcttctctcg 1080
tgtagcacgc gcagcccgat ccccaatccc ctctcctcgc gagcctcgtc gatccctcgc 1140
ttcaaggtat ggctatcgtc cttcctctct ctctctttac cttatctaga tcggcgatcc 1200
atggttaggg cctgctagtt ctccgttcgt gtttgtcgat ggctgtgagg cacaatagat 1260
ccgtcggcgt tatgatggtt agcctgtcat gctcttgcga tctgtggttc ctttaggaaa 1320
ggcattaatt taatccctga tggttcgaga tcggtgatcc atggttagta ccctaagctg 1380
tggagtcggg tttagatccg cgctgttcgt aggcgatctg ttctgattgt taacttgtca 1440
gtacctgcga atcctcggtg gttctagctg gttcggagat cagatcgatt ccattatctg 1500
ctatacatct tgtttcgttg cctaggctcc gtttaatcta tccatcgtat gatgttagcc 1560
tttgatatga ttcgatcgtg ctagctatgt cctgtggact taattgtcag gtcctaattt 1620
ttaggaagac tgttccaaac catctgctgg atttattaaa tttggatctg gatgtgtcac 1680
atacaccttc ataattaaaa tggatggaaa tatctcttat cttttagata tggataggca 1740
tttatatgat gctgtgagtt ttactagtac tttcttagaa tatatgtact tttttagacg 1800
gaatattgat atgtatacat gtgtagatac atgaagcaac atgctgctgt agtctaataa 1860
ttcctgttca tctaataatc aagtatgtat atgttctgtg tgttttattg gtatttgatt 1920
agatatatac atgcttagat acatacatga agcagcatgc tgctacagtt taatcattat 1980
tgtttatcca ataaacaaac atgcttttta atttatcttg atatgcttgg atgacggaat 2040
atgcagagat tttaagtacc cagcatcatg agcatgcatg accctgcgtt agtatgctgt 2100
ttatttgctt gagactcttt cttttgtaga tactcaccct gttttctggt gatcctactg 2160
caggtg 2166
<210> 96
<211> 1060
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 96
gtctacgaga gaagcttcaa atcaaacagt gtactatagg gcttacacaa tttttctgag 60
ggaagcgatt gtctgaaatg aactaaaagg ctgagagctg gaaaaagtag cttattctga 120
ttctgtgaag tgattctcca tgctgatttt aaaagtttat gataaaaaat caaagagaat 180
aactttcagc cacagaatca cttctctcag agaatcaact tatatggaga atcagaatca 240
gatggagctc taccaaactg gccctaggca ttaacctacc atggatcaca tcgtaaaaaa 300
aaaaccctac catggatcct atctgttttc tttttgccct gaaagagtga agtcatcatc 360
atatttacca tggcgcgcgt aggagcgctt cgtcgaagac ccataggggg gcggtactcg 420
caccgtggtt gtttcctgtt atgtaatatc ggatggggga gcagtcggct aggttggtcc 480
catcggtact ggtcgtcccc tagtgcgcta gatgcgcgat gtttgtcctc aaaaactctt 540
ttcttcttaa taacaatcat acgcaaattt tttgcgtatt cgagaaaaaa agaagattct 600
atctgttttt tttttgaaat ggctccaatt tataggagga gcccgtttaa cggcgtcgac 660
aaatctaacg gacaccaacc agcgaatgag cgaacccacc agcgccaagc tagccaagcg 720
aagcagacgg ccgagacgct gacacccttg ccttggcgcg gcatctccgt cgctggctcg 780
ctggctctgg ccccttcgcg agagttccgg tccacctcca cctgtgtcgg tttccaactc 840
cgttccgcct tcgcgtggga cttgttccgt tcatccgttg gcggcatccg gaaattgcgt 900
ggcgtagagc acggggccct cctctcacac ggcacggaac cgtcacgagc tcacggcacc 960
ggcagcacgg cggggattcc ttccccacca ccgctccttc cctttccctt cctcgcccgc 1020
catcataaat agccacccct cccagcttcc ttcgccacat 1060
<210> 97
<211> 2166
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 97
gtctacgaga gaagcttcaa atcaaacagt gtactatagg gcttacacaa tttttctgag 60
ggaagcgatt gtctgaaatg aactaaaagg ctgagagctg gaaaaagtag cttattctga 120
ttctgtgaag tgattctcca tgctgatttt aaaagtttat gataaaaaat caaagagaat 180
aactttcagc cacagaatca cttctctcag agaatcaact tatatggaga atcagaatca 240
gatggagctc taccaaactg gccctaggca ttaacctacc atggatcaca tcgtaaaaaa 300
aaaaccctac catggatcct atctgttttc tttttgccct gaaagagtga agtcatcatc 360
atatttacca tggcgcgcgt aggagcgctt cgtcgaagac ccataggggg gcggtactcg 420
caccgtggtt gtttcctgtt atgtaatatc ggatggggga gcagtcggct aggttggtcc 480
catcggtact ggtcgtcccc tagtgcgcta gatgcgcgat gtttgtcctc aaaaactctt 540
ttcttcttaa taacaatcat acgcaaattt tttgcgtatt cgagaaaaaa agaagattct 600
atctgttttt tttttgaaat ggctccaatt tataggagga gcccgtttaa cggcgtcgac 660
aaatctaacg gacaccaacc agcgaatgag cgaacccacc agcgccaagc tagccaagcg 720
aagcagacgg ccgagacgct gacacccttg ccttggcgcg gcatctccgt cgctggctcg 780
ctggctctgg ccccttcgcg agagttccgg tccacctcca cctgtgtcgg tttccaactc 840
cgttccgcct tcgcgtggga cttgttccgt tcatccgttg gcggcatccg gaaattgcgt 900
ggcgtagagc acggggccct cctctcacac ggcacggaac cgtcacgagc tcacggcacc 960
ggcagcacgg cggggattcc ttccccacca ccgctccttc cctttccctt cctcgcccgc 1020
catcataaat agccacccct cccagcttcc ttcgccacat cctctcatca tcttctctcg 1080
tgtagcacgc gcagcccgat ccccaatccc ctctcctcgc gagcctcgtc gatccctcgc 1140
ttcaaggtat ggctatcgtc cttcctctct ctctctttac cttatctaga tcggcgatcc 1200
atggttaggg cctgctagtt ctccgttcgt gtttgtcgat ggctgtgagg cacaatagat 1260
ccgtcggcgt tatgatggtt agcctgtcat gctcttgcga tctgtggttc ctttaggaaa 1320
ggcattaatt taatccctga tggttcgaga tcggtgatcc atggttagta ccctaagctg 1380
tggagtcggg tttagatccg cgctgttcgt aggcgatctg ttctgattgt taacttgtca 1440
gtacctgcga atcctcggtg gttctagctg gttcggagat cagatcgatt ccattatctg 1500
ctatacatct tgtttcgttg cctaggctcc gtttaatcta tccatcgtat gatgttagcc 1560
tttgatatga ttcgatcgtg ctagctatgt cctgtggact taattgtcag gtcctaattt 1620
ttaggaagac tgttccaaac catctgctgg atttattaaa tttggatctg gatgtgtcac 1680
atacaccttc ataattaaaa tggatggaaa tatctcttat cttttagata tggataggca 1740
tttatatgat gctgtgagtt ttactagtac tttcttagaa tatatgtact tttttagacg 1800
gaatattgat atgtatacat gtgtagatac atgaagcaac atgctgctgt agtctaataa 1860
ttcctgttca tctaataatc aagtatgtat atgttctgtg tgttttattg gtatttgatt 1920
agatatatac atgcttagat acatacatga agcagcatgc tgctacagtt taatcattat 1980
tgtttatcca ataaacaaac atgcttttta atttatcttg atatgcttgg atgacggaat 2040
atgcagagat tttaagtacc cagcatcatg agcatgcatg accctgcgtt agtatgctgt 2100
ttatttgctt gagactcttt cttttgtaga tactcaccct gttttctggt gatcctactg 2160
caggtc 2166
<210> 98
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 98
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag gtc 1943
<210> 99
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 99
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag gtg 1943
<210> 100
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 100
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag gcg 1943
<210> 101
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 101
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcaggcg 1020
<210> 102
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 102
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag gac 1943
<210> 103
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 103
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcaggac 1020
<210> 104
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 104
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag acc 1943
<210> 105
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 105
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcagacc 1020
<210> 106
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 106
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag ggg 1943
<210> 107
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 107
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcagggg 1020
<210> 108
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 108
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag ggt 1943
<210> 109
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 109
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcagggt 1020
<210> 110
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 110
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag cgt 1943
<210> 111
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 111
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcagcgt 1020
<210> 112
<211> 1943
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 112
agcagactcg cattatcgat ggagctctac caaactggcc ctaggcatta acctaccatg 60
gatcacatcg taaaaaaaaa accctaccat ggatcctatc tgttttcttt ttgccctgaa 120
agagtgaagt catcatcata tttaccatgg cgcgcgtagg agcgcttcgt cgaagaccca 180
taggggggcg gtactcgcac cgtggttgtt tcctgttatg taatatcgga tgggggagca 240
gtcggctagg ttggtcccat cggtactggt cgtcccctag tgcgctagat gcgcgatgtt 300
tgtcctcaaa aactcttttc ttcttaataa caatcatacg caaatttttt gcgtattcga 360
gaaaaaaaga agattctatc tgtttttttt ttgaaatggc tccaatttat aggaggagcc 420
cgtttaacgg cgtcgacaaa tctaacggac accaaccagc gaatgagcga acccaccagc 480
gccaagctag ccaagcgaag cagacggccg agacgctgac acccttgcct tggcgcggca 540
tctccgtcgc tggctcgctg gctctggccc cttcgcgaga gttccggtcc acctccacct 600
gtgtcggttt ccaactccgt tccgccttcg cgtgggactt gttccgttca tccgttggcg 660
gcatccggaa attgcgtggc gtagagcacg gggccctcct ctcacacggc acggaaccgt 720
cacgagctca cggcaccggc agcacggcgg ggattccttc cccaccaccg ctccttccct 780
ttcccttcct cgcccgccat cataaatagc cacccctccc agcttccttc gccacatcct 840
ctcatcatct tctctcgtgt agcacgcgca gcccgatccc caatcccctc tcctcgcgag 900
cctcgtcgat ccctcgcttc aaggtatggc tatcgtcctt cctctctctc tctttacctt 960
atctagatcg gcgatccatg gttagggcct gctagttctc cgttcgtgtt tgtcgatggc 1020
tgtgaggcac aatagatccg tcggcgttat gatggttagc ctgtcatgct cttgcgatct 1080
gtggttcctt taggaaaggc attaatttaa tccctgatgg ttcgagatcg gtgatccatg 1140
gttagtaccc taagctgtgg agtcgggttt agatccgcgc tgttcgtagg cgatctgttc 1200
tgattgttaa cttgtcagta cctgcgaatc ctcggtggtt ctagctggtt cggagatcag 1260
atcgattcca ttatctgcta tacatcttgt ttcgttgcct aggctccgtt taatctatcc 1320
atcgtatgat gttagccttt gatatgattc gatcgtgcta gctatgtcct gtggacttaa 1380
ttgtcaggtc ctaattttta ggaagactgt tccaaaccat ctgctggatt tattaaattt 1440
ggatctggat gtgtcacata caccttcata attaaaatgg atggaaatat ctcttatctt 1500
ttagatatgg ataggcattt atatgatgct gtgagtttta ctagtacttt cttagaatat 1560
atgtactttt ttagacggaa tattgatatg tatacatgtg tagatacatg aagcaacatg 1620
ctgctgtagt ctaataattc ctgttcatct aataatcaag tatgtatatg ttctgtgtgt 1680
tttattggta tttgattaga tatatacatg cttagataca tacatgaagc agcatgctgc 1740
tacagtttaa tcattattgt ttatccaata aacaaacatg ctttttaatt tatcttgata 1800
tgcttggatg acggaatatg cagagatttt aagtacccag catcatgagc atgcatgacc 1860
ctgcgttagt atgctgttta tttgcttgag actctttctt ttgtagatac tcaccctgtt 1920
ttctggtgat cctactgcag tgt 1943
<210> 113
<211> 1020
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 113
gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc tagatcggcg atccatggtt 60
agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt gaggcacaat agatccgtcg 120
gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg gttcctttag gaaaggcatt 180
aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt agtaccctaa gctgtggagt 240
cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga ttgttaactt gtcagtacct 300
gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc gattccatta tctgctatac 360
atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc gtatgatgtt agcctttgat 420
atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg tcaggtccta atttttagga 480
agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga tctggatgtg tcacatacac 540
cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta gatatggata ggcatttata 600
tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg tactttttta gacggaatat 660
tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg ctgtagtcta ataattcctg 720
ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt attggtattt gattagatat 780
atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac agtttaatca ttattgttta 840
tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc ttggatgacg gaatatgcag 900
agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg cgttagtatg ctgtttattt 960
gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc tggtgatcct actgcagtgt 1020
<210> 114
<211> 1848
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 114
ctatctgttt tctttttgcc ctgaaagagt gaagtcatca tcatatttac catggcgcgc 60
gtaggagcgc ttcgtcgaag acccataggg gggcggtact cgcaccgtgg ttgtttcctg 120
ttatgtaata tcggatgggg gagcagtcgg ctaggttggt cccatcggta ctggtcgtcc 180
cctagtgcgc tagatgcgcg atgtttgtcc tcaaaaactc ttttcttctt aataacaatc 240
atacgcaaat tttttgcgta ttcgagaaaa aaagaagatt ctatctgttt tttttttgaa 300
atggctccaa tttataggag gagcccgttt aacggcgtcg acaaatctaa cggacaccaa 360
ccagcgaatg agcgaaccca ccagcgccaa gctagccaag cgaagcagac ggccgagacg 420
ctgacaccct tgccttggcg cggcatctcc gtcgctggct cgctggctct ggccccttcg 480
cgagagttcc ggtccacctc cacctgtgtc ggtttccaac tccgttccgc cttcgcgtgg 540
gacttgttcc gttcatccgt tggcggcatc cggaaattgc gtggcgtaga gcacggggcc 600
ctcctctcac acggcacgga accgtcacga gctcacggca ccggcagcac ggcggggatt 660
ccttccccac caccgctcct tccctttccc ttcctcgccc gccatcataa atagccaccc 720
ctcccagctt ccttcgccac atcctctcat catcttctct cgtgtagcac gcgcagcccg 780
atccccaatc ccctctcctc gcgagcctcg tcgatccctc gcttcaaggt atggctatcg 840
tccttcctct ctctctcttt accttatcta gatcggcgat ccatggttag ggcctgctag 900
ttctccgttc gtgtttgtcg atggctgtga ggcacaatag atccgtcggc gttatgatgg 960
ttagcctgtc atgctcttgc gatctgtggt tcctttagga aaggcattaa tttaatccct 1020
gatggttcga gatcggtgat ccatggttag taccctaagc tgtggagtcg ggtttagatc 1080
cgcgctgttc gtaggcgatc tgttctgatt gttaacttgt cagtacctgc gaatcctcgg 1140
tggttctagc tggttcggag atcagatcga ttccattatc tgctatacat cttgtttcgt 1200
tgcctaggct ccgtttaatc tatccatcgt atgatgttag cctttgatat gattcgatcg 1260
tgctagctat gtcctgtgga cttaattgtc aggtcctaat ttttaggaag actgttccaa 1320
accatctgct ggatttatta aatttggatc tggatgtgtc acatacacct tcataattaa 1380
aatggatgga aatatctctt atcttttaga tatggatagg catttatatg atgctgtgag 1440
ttttactagt actttcttag aatatatgta cttttttaga cggaatattg atatgtatac 1500
atgtgtagat acatgaagca acatgctgct gtagtctaat aattcctgtt catctaataa 1560
tcaagtatgt atatgttctg tgtgttttat tggtatttga ttagatatat acatgcttag 1620
atacatacat gaagcagcat gctgctacag tttaatcatt attgtttatc caataaacaa 1680
acatgctttt taatttatct tgatatgctt ggatgacgga atatgcagag attttaagta 1740
cccagcatca tgagcatgca tgaccctgcg ttagtatgct gtttatttgc ttgagactct 1800
ttcttttgta gatactcacc ctgttttctg gtgatcctac tgcaggtc 1848
<210> 115
<211> 1507
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 115
caaatctaac ggacaccaac cagcgaatga gcgaacccac cagcgccaag ctagccaagc 60
gaagcagacg gccgagacgc tgacaccctt gccttggcgc ggcatctccg tcgctggctc 120
gctggctctg gccccttcgc gagagttccg gtccacctcc acctgtgtcg gtttccaact 180
ccgttccgcc ttcgcgtggg acttgttccg ttcatccgtt ggcggcatcc ggaaattgcg 240
tggcgtagag cacggggccc tcctctcaca cggcacggaa ccgtcacgag ctcacggcac 300
cggcagcacg gcggggattc cttccccacc accgctcctt ccctttccct tcctcgcccg 360
ccatcataaa tagccacccc tcccagcttc cttcgccaca tcctctcatc atcttctctc 420
gtgtagcacg cgcagcccga tccccaatcc cctctcctcg cgagcctcgt cgatccctcg 480
cttcaaggta tggctatcgt ccttcctctc tctctcttta ccttatctag atcggcgatc 540
catggttagg gcctgctagt tctccgttcg tgtttgtcga tggctgtgag gcacaataga 600
tccgtcggcg ttatgatggt tagcctgtca tgctcttgcg atctgtggtt cctttaggaa 660
aggcattaat ttaatccctg atggttcgag atcggtgatc catggttagt accctaagct 720
gtggagtcgg gtttagatcc gcgctgttcg taggcgatct gttctgattg ttaacttgtc 780
agtacctgcg aatcctcggt ggttctagct ggttcggaga tcagatcgat tccattatct 840
gctatacatc ttgtttcgtt gcctaggctc cgtttaatct atccatcgta tgatgttagc 900
ctttgatatg attcgatcgt gctagctatg tcctgtggac ttaattgtca ggtcctaatt 960
tttaggaaga ctgttccaaa ccatctgctg gatttattaa atttggatct ggatgtgtca 1020
catacacctt cataattaaa atggatggaa atatctctta tcttttagat atggataggc 1080
atttatatga tgctgtgagt tttactagta ctttcttaga atatatgtac ttttttagac 1140
ggaatattga tatgtataca tgtgtagata catgaagcaa catgctgctg tagtctaata 1200
attcctgttc atctaataat caagtatgta tatgttctgt gtgttttatt ggtatttgat 1260
tagatatata catgcttaga tacatacatg aagcagcatg ctgctacagt ttaatcatta 1320
ttgtttatcc aataaacaaa catgcttttt aatttatctt gatatgcttg gatgacggaa 1380
tatgcagaga ttttaagtac ccagcatcat gagcatgcat gaccctgcgt tagtatgctg 1440
tttatttgct tgagactctt tcttttgtag atactcaccc tgttttctgg tgatcctact 1500
gcaggtc 1507
<210> 116
<211> 1160
<212> ДНК
<213> Coix lacryma-jobi
<400> 116
ccttcctcgc ccgccatcat aaatagccac ccctcccagc ttccttcgcc acatcctctc 60
atcatcttct ctcgtgtagc acgcgcagcc cgatccccaa tcccctctcc tcgcgagcct 120
cgtcgatccc tcgcttcaag gtatggctat cgtccttcct ctctctctct ttaccttatc 180
tagatcggcg atccatggtt agggcctgct agttctccgt tcgtgtttgt cgatggctgt 240
gaggcacaat agatccgtcg gcgttatgat ggttagcctg tcatgctctt gcgatctgtg 300
gttcctttag gaaaggcatt aatttaatcc ctgatggttc gagatcggtg atccatggtt 360
agtaccctaa gctgtggagt cgggtttaga tccgcgctgt tcgtaggcga tctgttctga 420
ttgttaactt gtcagtacct gcgaatcctc ggtggttcta gctggttcgg agatcagatc 480
gattccatta tctgctatac atcttgtttc gttgcctagg ctccgtttaa tctatccatc 540
gtatgatgtt agcctttgat atgattcgat cgtgctagct atgtcctgtg gacttaattg 600
tcaggtccta atttttagga agactgttcc aaaccatctg ctggatttat taaatttgga 660
tctggatgtg tcacatacac cttcataatt aaaatggatg gaaatatctc ttatctttta 720
gatatggata ggcatttata tgatgctgtg agttttacta gtactttctt agaatatatg 780
tactttttta gacggaatat tgatatgtat acatgtgtag atacatgaag caacatgctg 840
ctgtagtcta ataattcctg ttcatctaat aatcaagtat gtatatgttc tgtgtgtttt 900
attggtattt gattagatat atacatgctt agatacatac atgaagcagc atgctgctac 960
agtttaatca ttattgttta tccaataaac aaacatgctt tttaatttat cttgatatgc 1020
ttggatgacg gaatatgcag agattttaag tacccagcat catgagcatg catgaccctg 1080
cgttagtatg ctgtttattt gcttgagact ctttcttttg tagatactca ccctgttttc 1140
tggtgatcct actgcaggtc 1160
<210> 117
<211> 2625
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 117
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ctgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cccgttgccg 1500
caagactcag atcagattcc gatccccagt tcttccccaa tcaccttgtg gtctctcgtg 1560
tcgcggttcc cagggacgcc tccggctcgt cgctcgacag cgatctccgc cccagcaagg 1620
tatagattca gttccttgct ccgatcccaa tctggttgag atgttgctcc gatgcgactt 1680
gattatgtca tatatctgcg gtttgcaccg atctgaagcc tagggtttct cgagcgaccc 1740
agttatttgc aatttgcgat ttgctcgttt gttgcgcagc gtagtttatg tttggagtaa 1800
tcgaggattt gtatgcggcg tcggcgctac ctgcttaatc acgccatgtg acgcggttac 1860
ttgcagaggc tgggttctgt tatgtcgtga tctaagaatc tagattaggc tcagtcgttc 1920
ttgctgtcga ctagtttgtt ttgatatcca tgtagtacaa gttacttaaa atttaggtcc 1980
aatatatttt gcatgctttt ggcctgttat tcttgccaac aagttgtcct ggtaaaaagt 2040
agatgtgaaa gtcacgtatt gggacaaatt gatggtttag tgctatagtt ctatagttct 2100
gtgatacatc tatctgattt tttttggtct attggtgcct aacttatctg aaaatcatgg 2160
aacatgaggc tagtttgatc atggtttagt tcattgtgat taataatgta tgatttagta 2220
gctattttgg tgatcgtgtc attttatttg tgaatggaat cattgtatgt aaatgaagct 2280
agttcagggg ttacgatgta gctggctttg tattctaaag gctgctatta ttcatccatc 2340
gatttcacct atatgtaatc cagagctttt gatgtgaaat ttgtctgatc cttcactagg 2400
aaggacagaa cattgttaat attttggcac atctgtctta ttctcatcct ttgtttgaac 2460
atgttagcct gttcaaacag atactgttgt aatgtcctag ttatataggt acatatgtgt 2520
tctctattga gtttatggac ttttgtgtgt gaagttatat ttcattttgc tcaaaactca 2580
tgtttgcaag ctttctgaca ttattctatt gttctgaaac aggtg 2625
<210> 118
<211> 1006
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 118
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttatttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcag cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttctg ttatgtcgtg atctaagaat ctagattagg ctcagtcgtt 300
cttgctgtcg actagtttgt tttgatatcc atgtagtaca agttacttaa aatttaggtc 360
caatatattt tgcatgcttt tggcctgtta ttcttgccaa caagttgtcc tggtaaaaag 420
tagatgtgaa agtcacgtat tgggacaaat tgatggttta gtgctatagt tctatagttc 480
tgtgatacat ctatctgatt ttttttggtc tattggtgcc taacttatct gaaaatcatg 540
gaacatgagg ctagtttgat catggtttag ttcattgtga ttaataatgt atgatttagt 600
agctattttg gtgatcgtgt cattttattt gtgaatggaa tcattgtatg taaatgaagc 660
tagttcaggg gttacgatgt agctggcttt gtattctaaa ggctgctatt attcatccat 720
cgatttcacc tatatgtaat ccagagcttt tgatgtgaaa tttgtctgat ccttcactag 780
gaaggacaga acattgttaa tattttggca catctgtctt attctcatcc tttgtttgaa 840
catgttagcc tgttcaaaca gatactgttg taatgtccta gttatatagg tacatatgtg 900
ttctctattg agtttatgga cttttgtgtg tgaagttata tttcattttg ctcaaaactc 960
atgtttgcaa gctttctgac attattctat tgttctgaaa caggtg 1006
<210> 119
<211> 2625
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 119
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ccgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cccgttgccg 1500
caagactcag atcagattcc gatccccagt tcttccccaa tcaccttgtg gtctctcgtg 1560
tcgcggttcc cagggacgcc tccggctcgt cgctcgacag cgatctccgc cccagcaagg 1620
tatagattca gttccttgct ccgatcccaa tctggttgag atgttgctcc gatgcgactt 1680
gattatgtca tatatctgcg gtttgcaccg atctgaagcc tagggtttct cgagcgaccc 1740
agttatttgc aatttgcgat ttgctcgttt gttgcgcagc gtagtttatg tttggagtaa 1800
tcgaggattt gtatgcggcg tcggcgctac ctgcttaatc acgccatgtg acgcggttac 1860
ttgcagaggc tgggttctgt tatgtcgtga tctaagaatc tagattaggc tcagtcgttc 1920
ttgctgtcga ctagtttgtt ttgatatcca tgtagtacaa gttacttaaa atttaggtcc 1980
aatatatttt gcatgctttt ggcctgttat tcttgccaac aagttgtcct ggtaaaaagt 2040
agatgtgaaa gtcacgtatt gggacaaatt gatggtttag tgctatagtt ctatagttct 2100
gtgatacatc tatctgattt tttttggtct attggtgcct aacttatctg aaaatcatgg 2160
aacatgaggc tagtttgatc atggtttagt tcattgtgat taataatgta tgatttagta 2220
gctattttgg tgatcgtgtc attttatttg tgaatggaat cattgtatgt aaatgaagct 2280
agttcagggg ttacgatgta gctggctttg tattctaaag gctgctatta ttcatccatc 2340
gatttcacct atatgtaatc cagagctttt gatgtgaaat ttgtctgatc cttcactagg 2400
aaggacagaa cattgttaat attttggcac atctgtctta ttctcatcct ttgtttgaac 2460
atgttagcct gttcaaacag atactgttgt aatgtcctag ttatataggt acatatgtgt 2520
tctctattga gtttatggac ttttgtgtgt gaagttatat ttcattttgc tcaaaactca 2580
tgtttgcaag ctttctgaca ttattctatt gttctgaaac agggt 2625
<210> 120
<211> 1006
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 120
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttatttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcag cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttctg ttatgtcgtg atctaagaat ctagattagg ctcagtcgtt 300
cttgctgtcg actagtttgt tttgatatcc atgtagtaca agttacttaa aatttaggtc 360
caatatattt tgcatgcttt tggcctgtta ttcttgccaa caagttgtcc tggtaaaaag 420
tagatgtgaa agtcacgtat tgggacaaat tgatggttta gtgctatagt tctatagttc 480
tgtgatacat ctatctgatt ttttttggtc tattggtgcc taacttatct gaaaatcatg 540
gaacatgagg ctagtttgat catggtttag ttcattgtga ttaataatgt atgatttagt 600
agctattttg gtgatcgtgt cattttattt gtgaatggaa tcattgtatg taaatgaagc 660
tagttcaggg gttacgatgt agctggcttt gtattctaaa ggctgctatt attcatccat 720
cgatttcacc tatatgtaat ccagagcttt tgatgtgaaa tttgtctgat ccttcactag 780
gaaggacaga acattgttaa tattttggca catctgtctt attctcatcc tttgtttgaa 840
catgttagcc tgttcaaaca gatactgttg taatgtccta gttatatagg tacatatgtg 900
ttctctattg agtttatgga cttttgtgtg tgaagttata tttcattttg ctcaaaactc 960
atgtttgcaa gctttctgac attattctat tgttctgaaa cagggt 1006
<210> 121
<211> 2625
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 121
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ccgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cccgttgccg 1500
caagactcag atcagattcc gatccccagt tcttccccaa tcaccttgtg gtctctcgtg 1560
tcgcggttcc cagggacgcc tccggctcgt cgctcgacag cgatctccgc cccagcaagg 1620
tatagattca gttccttgct ccgatcccaa tctggttgag atgttgctcc gatgcgactt 1680
gattatgtca tatatctgcg gtttgcaccg atctgaagcc tagggtttct cgagcgaccc 1740
agttatttgc aatttgcgat ttgctcgttt gttgcgcagc gtagtttatg tttggagtaa 1800
tcgaggattt gtatgcggcg tcggcgctac ctgcttaatc acgccatgtg acgcggttac 1860
ttgcagaggc tgggttctgt tatgtcgtga tctaagaatc tagattaggc tcagtcgttc 1920
ttgctgtcga ctagtttgtt ttgatatcca tgtagtacaa gttacttaaa atttaggtcc 1980
aatatatttt gcatgctttt ggcctgttat tcttgccaac aagttgtcct ggtaaaaagt 2040
agatgtgaaa gtcacgtatt gggacaaatt gatggtttag tgctatagtt ctatagttct 2100
gtgatacatc tatctgattt tttttggtct attggtgcct aacttatctg aaaatcatgg 2160
aacatgaggc tagtttgatc atggtttagt tcattgtgat taataatgta tgatttagta 2220
gctattttgg tgatcgtgtc attttatttg tgaatggaat cattgtatgt aaatgaagct 2280
agttcagggg ttacgatgta gctggctttg tattctaaag gctgctatta ttcatccatc 2340
gatttcacct atatgtaatc cagagctttt gatgtgaaat ttgtctgatc cttcactagg 2400
aaggacagaa cattgttaat attttggcac atctgtctta ttctcatcct ttgtttgaac 2460
atgttagcct gttcaaacag atactgttgt aatgtcctag ttatataggt acatatgtgt 2520
tctctattga gtttatggac ttttgtgtgt gaagttatat ttcattttgc tcaaaactca 2580
tgtttgcaag ctttctgaca ttattctatt gttctgaaac agacc 2625
<210> 122
<211> 1006
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 122
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttatttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcag cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttctg ttatgtcgtg atctaagaat ctagattagg ctcagtcgtt 300
cttgctgtcg actagtttgt tttgatatcc atgtagtaca agttacttaa aatttaggtc 360
caatatattt tgcatgcttt tggcctgtta ttcttgccaa caagttgtcc tggtaaaaag 420
tagatgtgaa agtcacgtat tgggacaaat tgatggttta gtgctatagt tctatagttc 480
tgtgatacat ctatctgatt ttttttggtc tattggtgcc taacttatct gaaaatcatg 540
gaacatgagg ctagtttgat catggtttag ttcattgtga ttaataatgt atgatttagt 600
agctattttg gtgatcgtgt cattttattt gtgaatggaa tcattgtatg taaatgaagc 660
tagttcaggg gttacgatgt agctggcttt gtattctaaa ggctgctatt attcatccat 720
cgatttcacc tatatgtaat ccagagcttt tgatgtgaaa tttgtctgat ccttcactag 780
gaaggacaga acattgttaa tattttggca catctgtctt attctcatcc tttgtttgaa 840
catgttagcc tgttcaaaca gatactgttg taatgtccta gttatatagg tacatatgtg 900
ttctctattg agtttatgga cttttgtgtg tgaagttata tttcattttg ctcaaaactc 960
atgtttgcaa gctttctgac attattctat tgttctgaaa cagacc 1006
<210> 123
<211> 2167
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 123
gccgtttttg aagtatccag gattagaagc ttctactgcg cttttatatt atagctgtgg 60
acctgtggta acctttctct tttggcgctt gcttaatctc ggccgtgctg gtccatgctt 120
aggcactagg cagagataga gccgggggtg aatggggcta aagctcagct gctcgagggg 180
ccgtgggctg gtttccacta gcctacagct gtgccacgtg cggccgcgca agccgaagca 240
agcacgctga gccgttggac agcttgtcat aatgccatta cgtggattac acgtaactgg 300
ccctgtaact actcgttcgg ccatcatcaa acgacgacgt ccgctaggcg acgacacggg 360
taatgcacgc agccacccag gcgcgcgcgc tagcggagca cggtcaggtg acacgggcgt 420
cgtgacgctt ccgagttgaa ggggttaacg ccagaaacag tgtttggcca gggtatgaac 480
ataacaaaaa atattcacac gaaagaatgg aagtatggag ctgctactgt gtaaatgcca 540
agcaggaaac tcacgcccgc taacatccaa cggccaacag ctcgacgtgc cggtcagcag 600
agcatcggaa cactggtgat tggtggagcc ggcagtatgc gccccagcac ggccgaggtg 660
gtggtggccc gtggccctgc tgtctgcgcg gctcgggaca acttgaaact gggccaccgc 720
ctcgtcgcaa ctcgcaaccc gttggcggaa gaaaggaatg gctcgtaggg gcccgggtag 780
aatcgaagaa tgttgcgctg ggcttcgatt cacataacat gggcctgaag ctctaaaacg 840
acggcccggt cgccgcgcga tggaaagaga ccggatcctc ctcgtgaatt ctggaaggcc 900
acacgagagc gacccaccac cgacgcggag gagtcgtgcg tggtccaaca cggccggcgg 960
gctgggctgc gaccttaacc agcaaggcac gccacgaccc gccccgccct cgaggcataa 1020
ataccctccc atcccgttgc cgcaagactc agatcagatt ccgatcccca gttcttcccc 1080
aatcaccttg tggtctctcg tgtcgcggtt cccagggacg cctccggctc gtcgctcgac 1140
agcgatctcc gccccagcaa ggtatagatt cagttccttg ctccgatccc aatctggttg 1200
agatgttgct ccgatgcgac ttgattatgt catatatctg cggtttgcac cgatctgaag 1260
cctagggttt ctcgagcgac ccagttattt gcaatttgcg atttgctcgt ttgttgcgca 1320
gcgtagttta tgtttggagt aatcgaggat ttgtatgcgg cgtcggcgct acctgcttaa 1380
tcacgccatg tgacgcggtt acttgcagag gctgggttct gttatgtcgt gatctaagaa 1440
tctagattag gctcagtcgt tcttgctgtc gactagtttg ttttgatatc catgtagtac 1500
aagttactta aaatttaggt ccaatatatt ttgcatgctt ttggcctgtt attcttgcca 1560
acaagttgtc ctggtaaaaa gtagatgtga aagtcacgta ttgggacaaa ttgatggttt 1620
agtgctatag ttctatagtt ctgtgataca tctatctgat tttttttggt ctattggtgc 1680
ctaacttatc tgaaaatcat ggaacatgag gctagtttga tcatggttta gttcattgtg 1740
attaataatg tatgatttag tagctatttt ggtgatcgtg tcattttatt tgtgaatgga 1800
atcattgtat gtaaatgaag ctagttcagg ggttacgatg tagctggctt tgtattctaa 1860
aggctgctat tattcatcca tcgatttcac ctatatgtaa tccagagctt ttgatgtgaa 1920
atttgtctga tccttcacta ggaaggacag aacattgtta atattttggc acatctgtct 1980
tattctcatc ctttgtttga acatgttagc ctgttcaaac agatactgtt gtaatgtcct 2040
agttatatag gtacatatgt gttctctatt gagtttatgg acttttgtgt gtgaagttat 2100
atttcatttt gctcaaaact catgtttgca agctttctga cattattcta ttgttctgaa 2160
acaggtg 2167
<210> 124
<211> 1813
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 124
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagca tcggaacact ggtgattggt ggagccggca gtatgcgccc cagcacggcc 300
gaggtggtgg tggcccgtgg ccctgctgtc tgcgcggctc gggacaactt gaaactgggc 360
caccgcctcg tcgcaactcg caacccgttg gcggaagaaa ggaatggctc gtaggggccc 420
gggtagaatc gaagaatgtt gcgctgggct tcgattcaca taacatgggc ctgaagctct 480
aaaacgacgg cccggtcgcc gcgcgatgga aagagaccgg atcctcctcg tgaattctgg 540
aaggccacac gagagcgacc caccaccgac gcggaggagt cgtgcgtggt ccaacacggc 600
cggcgggctg ggctgcgacc ttaaccagca aggcacgcca cgacccgccc cgccctcgag 660
gcataaatac cctcccatcc cgttgccgca agactcagat cagattccga tccccagttc 720
ttccccaatc accttgtggt ctctcgtgtc gcggttccca gggacgcctc cggctcgtcg 780
ctcgacagcg atctccgccc cagcaaggta tagattcagt tccttgctcc gatcccaatc 840
tggttgagat gttgctccga tgcgacttga ttatgtcata tatctgcggt ttgcaccgat 900
ctgaagccta gggtttctcg agcgacccag ttatttgcaa tttgcgattt gctcgtttgt 960
tgcgcagcgt agtttatgtt tggagtaatc gaggatttgt atgcggcgtc ggcgctacct 1020
gcttaatcac gccatgtgac gcggttactt gcagaggctg ggttctgtta tgtcgtgatc 1080
taagaatcta gattaggctc agtcgttctt gctgtcgact agtttgtttt gatatccatg 1140
tagtacaagt tacttaaaat ttaggtccaa tatattttgc atgcttttgg cctgttattc 1200
ttgccaacaa gttgtcctgg taaaaagtag atgtgaaagt cacgtattgg gacaaattga 1260
tggtttagtg ctatagttct atagttctgt gatacatcta tctgattttt tttggtctat 1320
tggtgcctaa cttatctgaa aatcatggaa catgaggcta gtttgatcat ggtttagttc 1380
attgtgatta ataatgtatg atttagtagc tattttggtg atcgtgtcat tttatttgtg 1440
aatggaatca ttgtatgtaa atgaagctag ttcaggggtt acgatgtagc tggctttgta 1500
ttctaaaggc tgctattatt catccatcga tttcacctat atgtaatcca gagcttttga 1560
tgtgaaattt gtctgatcct tcactaggaa ggacagaaca ttgttaatat tttggcacat 1620
ctgtcttatt ctcatccttt gtttgaacat gttagcctgt tcaaacagat actgttgtaa 1680
tgtcctagtt atataggtac atatgtgttc tctattgagt ttatggactt ttgtgtgtga 1740
agttatattt cattttgctc aaaactcatg tttgcaagct ttctgacatt attctattgt 1800
tctgaaacag gtg 1813
<210> 125
<211> 1813
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 125
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagca tcggaacact ggtgattggt ggagccggca gtatgcgccc cagcacggcc 300
gaggtggtgg tggcccgtgg ccctgctgtc tgcgcggctc gggacaactt gaaactgggc 360
caccgcctcg tcgcaactcg caacccgttg gcggaagaaa ggaatggctc gtaggggccc 420
gggtagaatc gaagaatgtt gcgctgggct tcgattcaca taacatgggc ctgaagctct 480
aaaacgacgg cccggtcgcc gcgcgatgga aagagaccgg atcctcctcg tgaattctgg 540
aaggccacac gagagcgacc caccaccgac gcggaggagt cgtgcgtggt ccaacacggc 600
cggcgggctg ggctgcgacc ttaaccagca aggcacgcca cgacccgccc cgccctcgag 660
gcataaatac cctcccatcc cgttgccgca agactcagat cagattccga tccccagttc 720
ttccccaatc accttgtggt ctctcgtgtc gcggttccca gggacgcctc cggctcgtcg 780
ctcgacagcg atctccgccc cagcaaggta tagattcagt tccttgctcc gatcccaatc 840
tggttgagat gttgctccga tgcgacttga ttatgtcata tatctgcggt ttgcaccgat 900
ctgaagccta gggtttctcg agcgacccag ttatttgcaa tttgcgattt gctcgtttgt 960
tgcgcagcgt agtttatgtt tggagtaatc gaggatttgt atgcggcgtc ggcgctacct 1020
gcttaatcac gccatgtgac gcggttactt gcagaggctg ggttctgtta tgtcgtgatc 1080
taagaatcta gattaggctc agtcgttctt gctgtcgact agtttgtttt gatatccatg 1140
tagtacaagt tacttaaaat ttaggtccaa tatattttgc atgcttttgg cctgttattc 1200
ttgccaacaa gttgtcctgg taaaaagtag atgtgaaagt cacgtattgg gacaaattga 1260
tggtttagtg ctatagttct atagttctgt gatacatcta tctgattttt tttggtctat 1320
tggtgcctaa cttatctgaa aatcatggaa catgaggcta gtttgatcat ggtttagttc 1380
attgtgatta ataatgtatg atttagtagc tattttggtg atcgtgtcat tttatttgtg 1440
aatggaatca ttgtatgtaa atgaagctag ttcaggggtt acgatgtagc tggctttgta 1500
ttctaaaggc tgctattatt catccatcga tttcacctat atgtaatcca gagcttttga 1560
tgtgaaattt gtctgatcct tcactaggaa ggacagaaca ttgttaatat tttggcacat 1620
ctgtcttatt ctcatccttt gtttgaacat gttagcctgt tcaaacagat actgttgtaa 1680
tgtcctagtt atataggtac atatgtgttc tctattgagt ttatggactt ttgtgtgtga 1740
agttatattt cattttgctc aaaactcatg tttgcaagct ttctgacatt attctattgt 1800
tctgaaacag ggt 1813
<210> 126
<211> 1813
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 126
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagca tcggaacact ggtgattggt ggagccggca gtatgcgccc cagcacggcc 300
gaggtggtgg tggcccgtgg ccctgctgtc tgcgcggctc gggacaactt gaaactgggc 360
caccgcctcg tcgcaactcg caacccgttg gcggaagaaa ggaatggctc gtaggggccc 420
gggtagaatc gaagaatgtt gcgctgggct tcgattcaca taacatgggc ctgaagctct 480
aaaacgacgg cccggtcgcc gcgcgatgga aagagaccgg atcctcctcg tgaattctgg 540
aaggccacac gagagcgacc caccaccgac gcggaggagt cgtgcgtggt ccaacacggc 600
cggcgggctg ggctgcgacc ttaaccagca aggcacgcca cgacccgccc cgccctcgag 660
gcataaatac cctcccatcc cgttgccgca agactcagat cagattccga tccccagttc 720
ttccccaatc accttgtggt ctctcgtgtc gcggttccca gggacgcctc cggctcgtcg 780
ctcgacagcg atctccgccc cagcaaggta tagattcagt tccttgctcc gatcccaatc 840
tggttgagat gttgctccga tgcgacttga ttatgtcata tatctgcggt ttgcaccgat 900
ctgaagccta gggtttctcg agcgacccag ttatttgcaa tttgcgattt gctcgtttgt 960
tgcgcagcgt agtttatgtt tggagtaatc gaggatttgt atgcggcgtc ggcgctacct 1020
gcttaatcac gccatgtgac gcggttactt gcagaggctg ggttctgtta tgtcgtgatc 1080
taagaatcta gattaggctc agtcgttctt gctgtcgact agtttgtttt gatatccatg 1140
tagtacaagt tacttaaaat ttaggtccaa tatattttgc atgcttttgg cctgttattc 1200
ttgccaacaa gttgtcctgg taaaaagtag atgtgaaagt cacgtattgg gacaaattga 1260
tggtttagtg ctatagttct atagttctgt gatacatcta tctgattttt tttggtctat 1320
tggtgcctaa cttatctgaa aatcatggaa catgaggcta gtttgatcat ggtttagttc 1380
attgtgatta ataatgtatg atttagtagc tattttggtg atcgtgtcat tttatttgtg 1440
aatggaatca ttgtatgtaa atgaagctag ttcaggggtt acgatgtagc tggctttgta 1500
ttctaaaggc tgctattatt catccatcga tttcacctat atgtaatcca gagcttttga 1560
tgtgaaattt gtctgatcct tcactaggaa ggacagaaca ttgttaatat tttggcacat 1620
ctgtcttatt ctcatccttt gtttgaacat gttagcctgt tcaaacagat actgttgtaa 1680
tgtcctagtt atataggtac atatgtgttc tctattgagt ttatggactt ttgtgtgtga 1740
agttatattt cattttgctc aaaactcatg tttgcaagct ttctgacatt attctattgt 1800
tctgaaacag ggc 1813
<210> 127
<211> 1006
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 127
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttatttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcag cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttctg ttatgtcgtg atctaagaat ctagattagg ctcagtcgtt 300
cttgctgtcg actagtttgt tttgatatcc atgtagtaca agttacttaa aatttaggtc 360
caatatattt tgcatgcttt tggcctgtta ttcttgccaa caagttgtcc tggtaaaaag 420
tagatgtgaa agtcacgtat tgggacaaat tgatggttta gtgctatagt tctatagttc 480
tgtgatacat ctatctgatt ttttttggtc tattggtgcc taacttatct gaaaatcatg 540
gaacatgagg ctagtttgat catggtttag ttcattgtga ttaataatgt atgatttagt 600
agctattttg gtgatcgtgt cattttattt gtgaatggaa tcattgtatg taaatgaagc 660
tagttcaggg gttacgatgt agctggcttt gtattctaaa ggctgctatt attcatccat 720
cgatttcacc tatatgtaat ccagagcttt tgatgtgaaa tttgtctgat ccttcactag 780
gaaggacaga acattgttaa tattttggca catctgtctt attctcatcc tttgtttgaa 840
catgttagcc tgttcaaaca gatactgttg taatgtccta gttatatagg tacatatgtg 900
ttctctattg agtttatgga cttttgtgtg tgaagttata tttcattttg ctcaaaactc 960
atgtttgcaa gctttctgac attattctat tgttctgaaa cagggc 1006
<210> 128
<211> 2634
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 128
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ctgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacag gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag acatcggaac actggtgatt 1080
ggtggagccg gcagtatgcg ccccagcacg gccgaggtgg tggtggcccg tggccctgct 1140
gtctgcgcgg ctcgggacaa cttgaaactg ggccaccgcc tcgtcgcaac tcgcaacccg 1200
ttggcggaag aaaggaatgg ctcgtagggg cccgggtaga atccaagaat gttgcgctgg 1260
gcttcgattc acataacatg ggcctgaagc tctaaaacga cggcccggtc accgggcgat 1320
ggaaagagac cggatcctcc tcgtgaattc tggaaggcca cacgagagcg acccaccacc 1380
gacgcggagg agtcgtgcgt ggtccaacac ggccggcggg ctgggctgcg accttaacca 1440
gcaaggcacg ccacgacccg cctcgccctc gaggcataaa taccctccca tcccgttgcc 1500
gcaagactca gatcagattc cgatccccag ttcttcccca atcaccttgt ggtctctcgt 1560
gtcgcggttc ccagggacgc ctccggctcg tcgctcgaca gcgatctccg ccccagcaag 1620
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 1680
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 1740
cagttgtttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcat cgtagtttat gtttggagta 1800
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 1860
cttgcagagg ctgggttagt gggttctgtt atgtcgtgat ctaagaatct agattaggct 1920
cagtcgttct tgctgtcgac tagtttgttt tgatatccat gtagtacaag ttacttaaaa 1980
tttaggtcca atatattttg catgcttttg gcctgttatt cttgccaaca agttgtcctg 2040
gtaaaaagta gatgtgaaag tcacgtattg ggacaaattg atggttaagt gctatagttc 2100
tatagttctg tgatacatct atctgatttt ttttggtcta ttggtgccta acttatctga 2160
aaatcatgga acatgaggct agtttgatca tggtttagtt cattgtgatt aataatgtat 2220
gatttagtag ctattttggt gatcgtgtca ttttatttgt gaatggaatc attgtatgta 2280
aatgaagcta gttcaggggt tatgatgtag ctggctttgt attctaaagg ctgctattat 2340
tcatccatcg atttcaccta tatgtaatcc agagctttcg atgtgaaatt tgtctgatcc 2400
ttcactagga aggacagaac attgttaata ttttggcaca tctgtcttat tctcatcctt 2460
tgtttgaaca tgttagcctg ttcaaacaga tactgttgta atgtcctagt tatataggta 2520
catatgtgtt ctctattgag tttatggact tttgtgtgtg aagttatatt tcattttgct 2580
caaaactcat gtttgcaagc tttctgacat tattctattg ttctgaaaca ggtg 2634
<210> 129
<211> 1014
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 129
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttgtttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcat cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttagt gggttctgtt atgtcgtgat ctaagaatct agattaggct 300
cagtcgttct tgctgtcgac tagtttgttt tgatatccat gtagtacaag ttacttaaaa 360
tttaggtcca atatattttg catgcttttg gcctgttatt cttgccaaca agttgtcctg 420
gtaaaaagta gatgtgaaag tcacgtattg ggacaaattg atggttaagt gctatagttc 480
tatagttctg tgatacatct atctgatttt ttttggtcta ttggtgccta acttatctga 540
aaatcatgga acatgaggct agtttgatca tggtttagtt cattgtgatt aataatgtat 600
gatttagtag ctattttggt gatcgtgtca ttttatttgt gaatggaatc attgtatgta 660
aatgaagcta gttcaggggt tatgatgtag ctggctttgt attctaaagg ctgctattat 720
tcatccatcg atttcaccta tatgtaatcc agagctttcg atgtgaaatt tgtctgatcc 780
ttcactagga aggacagaac attgttaata ttttggcaca tctgtcttat tctcatcctt 840
tgtttgaaca tgttagcctg ttcaaacaga tactgttgta atgtcctagt tatataggta 900
catatgtgtt ctctattgag tttatggact tttgtgtgtg aagttatatt tcattttgct 960
caaaactcat gtttgcaagc tttctgacat tattctattg ttctgaaaca ggtg 1014
<210> 130
<211> 2634
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 130
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ctgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacag gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag acatcggaac actggtgatt 1080
ggtggagccg gcagtatgcg ccccagcacg gccgaggtgg tggtggcccg tggccctgct 1140
gtctgcgcgg ctcgggacaa cttgaaactg ggccaccgcc tcgtcgcaac tcgcaacccg 1200
ttggcggaag aaaggaatgg ctcgtagggg cccgggtaga atccaagaat gttgcgctgg 1260
gcttcgattc acataacatg ggcctgaagc tctaaaacga cggcccggtc accgggcgat 1320
ggaaagagac cggatcctcc tcgtgaattc tggaaggcca cacgagagcg acccaccacc 1380
gacgcggagg agtcgtgcgt ggtccaacac ggccggcggg ctgggctgcg accttaacca 1440
gcaaggcacg ccacgacccg cctcgccctc gaggcataaa taccctccca tcccgttgcc 1500
gcaagactca gatcagattc cgatccccag ttcttcccca atcaccttgt ggtctctcgt 1560
gtcgcggttc ccagggacgc ctccggctcg tcgctcgaca gcgatctccg ccccagcaag 1620
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 1680
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 1740
cagttgtttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcat cgtagtttat gtttggagta 1800
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 1860
cttgcagagg ctgggttagt gggttctgtt atgtcgtgat ctaagaatct agattaggct 1920
cagtcgttct tgctgtcgac tagtttgttt tgatatccat gtagtacaag ttacttaaaa 1980
tttaggtcca atatattttg catgcttttg gcctgttatt cttgccaaca agttgtcctg 2040
gtaaaaagta gatgtgaaag tcacgtattg ggacaaattg atggttaagt gctatagttc 2100
tatagttctg tgatacatct atctgatttt ttttggtcta ttggtgccta acttatctga 2160
aaatcatgga acatgaggct agtttgatca tggtttagtt cattgtgatt aataatgtat 2220
gatttagtag ctattttggt gatcgtgtca ttttatttgt gaatggaatc attgtatgta 2280
aatgaagcta gttcaggggt tatgatgtag ctggctttgt attctaaagg ctgctattat 2340
tcatccatcg atttcaccta tatgtaatcc agagctttcg atgtgaaatt tgtctgatcc 2400
ttcactagga aggacagaac attgttaata ttttggcaca tctgtcttat tctcatcctt 2460
tgtttgaaca tgttagcctg ttcaaacaga tactgttgta atgtcctagt tatataggta 2520
catatgtgtt ctctattgag tttatggact tttgtgtgtg aagttatatt tcattttgct 2580
caaaactcat gtttgcaagc tttctgacat tattctattg ttctgaaaca gggt 2634
<210> 131
<211> 1014
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 131
gtatagattc agttccttgc tccgatccca atctggttga gatgttgctc cgatgcgact 60
tgattatgtc atatatctgc ggtttgcacc gatctgaagc ctagggtttc tcgagcgacc 120
cagttgtttg caatttgcga tttgctcgtt tgttgcgcat cgtagtttat gtttggagta 180
atcgaggatt tgtatgcggc gtcggcgcta cctgcttaat cacgccatgt gacgcggtta 240
cttgcagagg ctgggttagt gggttctgtt atgtcgtgat ctaagaatct agattaggct 300
cagtcgttct tgctgtcgac tagtttgttt tgatatccat gtagtacaag ttacttaaaa 360
tttaggtcca atatattttg catgcttttg gcctgttatt cttgccaaca agttgtcctg 420
gtaaaaagta gatgtgaaag tcacgtattg ggacaaattg atggttaagt gctatagttc 480
tatagttctg tgatacatct atctgatttt ttttggtcta ttggtgccta acttatctga 540
aaatcatgga acatgaggct agtttgatca tggtttagtt cattgtgatt aataatgtat 600
gatttagtag ctattttggt gatcgtgtca ttttatttgt gaatggaatc attgtatgta 660
aatgaagcta gttcaggggt tatgatgtag ctggctttgt attctaaagg ctgctattat 720
tcatccatcg atttcaccta tatgtaatcc agagctttcg atgtgaaatt tgtctgatcc 780
ttcactagga aggacagaac attgttaata ttttggcaca tctgtcttat tctcatcctt 840
tgtttgaaca tgttagcctg ttcaaacaga tactgttgta atgtcctagt tatataggta 900
catatgtgtt ctctattgag tttatggact tttgtgtgtg aagttatatt tcattttgct 960
caaaactcat gtttgcaagc tttctgacat tattctattg ttctgaaaca gggt 1014
<210> 132
<211> 2176
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 132
gccgtttttg aagtatccag gattagaagc ttctactgcg cttttatatt atagctgtgg 60
acctgtggta acctttctct tttggcgctt gcttaatctc ggccgtgctg gtccatgctt 120
aggcactagg cagagataga gccgggggtg aatggggcta aagctcagct gctcgagggg 180
ccgtgggctg gtttccacta gcctacagct gtgccacgtg cggccgcgca agccgaagca 240
agcacgctga gccgttggac agcttgtcat aatgccatta cgtggattac aggtaactgg 300
ccctgtaact actcgttcgg ccatcatcaa acgacgacgt ccgctaggcg acgacacggg 360
taatgcacgc agccacccag gcgcgcgcgc tagcggagca cggtcaggtg acacgggcgt 420
cgtgacgctt ccgagttgaa ggggttaacg ccagaaacag tgtttggcca gggtatgaac 480
ataacaaaaa atattcacac gaaagaatgg aagtatggag ctgctactgt gtaaatgcca 540
agcaggaaac tcacgcccgc taacatccaa cggccaacag ctcgacgtgc cggtcagcag 600
agacatcgga acactggtga ttggtggagc cggcagtatg cgccccagca cggccgaggt 660
ggtggtggcc cgtggccctg ctgtctgcgc ggctcgggac aacttgaaac tgggccaccg 720
cctcgtcgca actcgcaacc cgttggcgga agaaaggaat ggctcgtagg ggcccgggta 780
gaatccaaga atgttgcgct gggcttcgat tcacataaca tgggcctgaa gctctaaaac 840
gacggcccgg tcaccgggcg atggaaagag accggatcct cctcgtgaat tctggaaggc 900
cacacgagag cgacccacca ccgacgcgga ggagtcgtgc gtggtccaac acggccggcg 960
ggctgggctg cgaccttaac cagcaaggca cgccacgacc cgcctcgccc tcgaggcata 1020
aataccctcc catcccgttg ccgcaagact cagatcagat tccgatcccc agttcttccc 1080
caatcacctt gtggtctctc gtgtcgcggt tcccagggac gcctccggct cgtcgctcga 1140
cagcgatctc cgccccagca aggtatagat tcagttcctt gctccgatcc caatctggtt 1200
gagatgttgc tccgatgcga cttgattatg tcatatatct gcggtttgca ccgatctgaa 1260
gcctagggtt tctcgagcga cccagttgtt tgcaatttgc gatttgctcg tttgttgcgc 1320
atcgtagttt atgtttggag taatcgagga tttgtatgcg gcgtcggcgc tacctgctta 1380
atcacgccat gtgacgcggt tacttgcaga ggctgggtta gtgggttctg ttatgtcgtg 1440
atctaagaat ctagattagg ctcagtcgtt cttgctgtcg actagtttgt tttgatatcc 1500
atgtagtaca agttacttaa aatttaggtc caatatattt tgcatgcttt tggcctgtta 1560
ttcttgccaa caagttgtcc tggtaaaaag tagatgtgaa agtcacgtat tgggacaaat 1620
tgatggttaa gtgctatagt tctatagttc tgtgatacat ctatctgatt ttttttggtc 1680
tattggtgcc taacttatct gaaaatcatg gaacatgagg ctagtttgat catggtttag 1740
ttcattgtga ttaataatgt atgatttagt agctattttg gtgatcgtgt cattttattt 1800
gtgaatggaa tcattgtatg taaatgaagc tagttcaggg gttatgatgt agctggcttt 1860
gtattctaaa ggctgctatt attcatccat cgatttcacc tatatgtaat ccagagcttt 1920
cgatgtgaaa tttgtctgat ccttcactag gaaggacaga acattgttaa tattttggca 1980
catctgtctt attctcatcc tttgtttgaa catgttagcc tgttcaaaca gatactgttg 2040
taatgtccta gttatatagg tacatatgtg ttctctattg agtttatgga cttttgtgtg 2100
tgaagttata tttcattttg ctcaaaactc atgtttgcaa gctttctgac attattctat 2160
tgttctgaaa caggtg 2176
<210> 133
<211> 1822
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 133
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagac atcggaacac tggtgattgg tggagccggc agtatgcgcc ccagcacggc 300
cgaggtggtg gtggcccgtg gccctgctgt ctgcgcggct cgggacaact tgaaactggg 360
ccaccgcctc gtcgcaactc gcaacccgtt ggcggaagaa aggaatggct cgtaggggcc 420
cgggtagaat ccaagaatgt tgcgctgggc ttcgattcac ataacatggg cctgaagctc 480
taaaacgacg gcccggtcac cgggcgatgg aaagagaccg gatcctcctt gtgaattctg 540
gaaggccaca cgagagcgac ccaccaccga cgcggaggag tcgtgcgtgg tccaacacgg 600
ccggcgggct gggctgcgac cttaaccagc aaggcacgcc acgacccgcc tcgccctcga 660
ggcataaata ccctcccatc ccgttgccgc aagactcaga tcagattccg atccccagtt 720
cttccccaat caccttgtgg tctctcgtgt cgcggttccc agggacgcct ccggctcgtc 780
gctcgacagc gatctccgcc ccagcaaggt atagattcag ttccttgctc cgatcccaat 840
ctggttgaga tgttgctccg atgcgacttg attatgtcat atatctgcgg tttgcaccga 900
tctgaagcct agggtttctc gagcgaccca gttgtttgca atttgcgatt tgctcgtttg 960
ttgcgcatcg tagtttatgt ttggagtaat cgaggatttg tatgcggcgt cggcgctacc 1020
tgcttaatca cgccatgtga cgcggttact tgcagaggct gggttagtgg gttctgttat 1080
gtcgtgatct aagaatctag attaggctca gtcgttcttg ctgtcgacta gtttgttttg 1140
atatccatgt agtacaagtt acttaaaatt taggtccaat atattttgca tgcttttggc 1200
ctgttattct tgccaacaag ttgtcctggt aaaaagtaga tgtgaaagtc acgtattggg 1260
acaaattgat ggttaagtgc tatagttcta tagttctgtg atacatctat ctgatttttt 1320
ttggtctatt ggtgcctaac ttatctgaaa atcatggaac atgaggctag tttgatcatg 1380
gtttagttca ttgtgattaa taatgtatga tttagtagct attttggtga tcgtgtcatt 1440
ttatttgtga atggaatcat tgtatgtaaa tgaagctagt tcaggggtta tgatgtagct 1500
ggctttgtat tctaaaggct gctattattc atccatcgat ttcacctata tgtaatccag 1560
agctttcgat gtgaaatttg tctgatcctt cactaggaag gacagaacat tgttaatatt 1620
ttggcacatc tgtcttattc tcatcctttg tttgaacatg ttagcctgtt caaacagata 1680
ctgttgtaat gtcctagtta tataggtaca tatgtgttct ctattgagtt tatggacttt 1740
tgtgtgtgaa gttatatttc attttgctca aaactcatgt ttgcaagctt tctgacatta 1800
ttctattgtt ctgaaacagg tg 1822
<210> 134
<211> 1822
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 134
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagac atcggaacac tggtgattgg tggagccggc agtatgcgcc ccagcacggc 300
cgaggtggtg gtggcccgtg gccctgctgt ctgcgcggct cgggacaact tgaaactggg 360
ccaccgcctc gtcgcaactc gcaacccgtt ggcggaagaa aggaatggct cgtaggggcc 420
cgggtagaat ccaagaatgt tgcgctgggc ttcgattcac ataacatggg cctgaagctc 480
taaaacgacg gcccggtcac cgggcgatgg aaagagaccg gatcctcctc gtgaattctg 540
gaaggccaca cgagagcgac ccaccaccga cgcggaggag tcgtgcgtgg tccaacacgg 600
ccggcgggct gggctgcgac cttaaccagc aaggcacgcc acgacccgcc tcgccctcga 660
ggcataaata ccctcccatc ccgttgccgc aagactcaga tcagattccg atccccagtt 720
cttccccaat caccttgtgg tctctcgtgt cgcggttccc agggacgcct ccggctcgtc 780
gctcgacagc gatctccgcc ccagcaaggt atagattcag ttccttgctc cgatcccaat 840
ctggttgaga tgttgctccg atgcgacttg attatgtcat atatctgcgg tttgcaccga 900
tctgaagcct agggtttctc gagcgaccca gttgtttgca atttgcgatt tgctcgtttg 960
ttgcgcatcg tagtttatgt ttggagtaat cgaggatttg tatgcggcgt cggcgctacc 1020
tgcttaatca cgccatgtga cgcggttact tgcagaggct gggttagtgg gttctgttat 1080
gtcgtgatct aagaatctag attaggctca gtcgttcttg ctgtcgacta gtttgttttg 1140
atatccatgt agtacaagtt acttaaaatt taggtccaat atattttgca tgcttttggc 1200
ctgttattct tgccaacaag ttgtcctggt aaaaagtaga tgtgaaagtc acgtattggg 1260
acaaattgat ggttaagtgc tatagttcta tagttctgtg atacatctat ctgatttttt 1320
ttggtctatt ggtgcctaac ttatctgaaa atcatggaac atgaggctag tttgatcatg 1380
gtttagttca ttgtgattaa taatgtatga tttagtagct attttggtga tcgtgtcatt 1440
ttatttgtga atggaatcat tgtatgtaaa tgaagctagt tcaggggtta tgatgtagct 1500
ggctttgtat tctaaaggct gctattattc atccatcgat ttcacctata tgtaatccag 1560
agctttcgat gtgaaatttg tctgatcctt cactaggaag gacagaacat tgttaatatt 1620
ttggcacatc tgtcttattc tcatcctttg tttgaacatg ttagcctgtt caaacagata 1680
ctgttgtaat gtcctagtta tataggtaca tatgtgttct ctattgagtt tatggacttt 1740
tgtgtgtgaa gttatatttc attttgctca aaactcatgt ttgcaagctt tctgacatta 1800
ttctattgtt ctgaaacagg tg 1822
<210> 135
<211> 681
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 135
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagac atcggaacac tggtgattgg tggagccggc agtatgcgcc ccagcacggc 300
cgaggtggtg gtggcccgtg gccctgctgt ctgcgcggct cgggacaact tgaaactggg 360
ccaccgcctc gtcgcaactc gcaacccgtt ggcggaagaa aggaatggct cgtaggggcc 420
cgggtagaat ccaagaatgt tgcgctgggc ttcgattcac ataacatggg cctgaagctc 480
taaaacgacg gcccggtcac cgggcgatgg aaagagaccg gatcctcctc gtgaattctg 540
gaaggccaca cgagagcgac ccaccaccga cgcggaggag tcgtgcgtgg tccaacacgg 600
ccggcgggct gggctgcgac cttaaccagc aaggcacgcc acgacccgcc tcgccctcga 660
ggcataaata ccctcccatc c 681
<210> 136
<211> 1822
<212> ДНК
<213> Setaria viridis
<400> 136
cacgggtaat gcacgcagcc acccaggcgc gcgcgctagc ggagcacggt caggtgacac 60
gggcgtcgtg acgcttccga gttgaagggg ttaacgccag aaacagtgtt tggccagggt 120
atgaacataa caaaaaatat tcacacgaaa gaatggaagt atggagctgc tactgtgtaa 180
atgccaagca ggaaactcac gcccgctaac atccaacggc caacagctcg acgtgccggt 240
cagcagagac atcggaacac tggtgattgg tggagccggc agtatgcgcc ccagcacggc 300
cgaggtggtg gtggcccgtg gccctgctgt ctgcgcggct cgggacaact tgaaactggg 360
ccaccgcctc gtcgcaactc gcaacccgtt ggcggaagaa aggaatggct cgtaggggcc 420
cgggtagaat ccaagaatgt tgcgctgggc ttcgattcac ataacatggg cctgaagctc 480
taaaacgacg gcccggtcac cgggcgatgg aaagagaccg gatcctcctt gtgaattctg 540
gaaggccaca cgagagcgac ccaccaccga cgcggaggag tcgtgcgtgg tccaacacgg 600
ccggcgggct gggctgcgac cttaaccagc aaggcacgcc acgacccgcc tcgccctcga 660
ggcataaata ccctcccatc ccgttgccgc aagactcaga tcagattccg atccccagtt 720
cttccccaat caccttgtgg tctctcgtgt cgcggttccc agggacgcct ccggctcgtc 780
gctcgacagc gatctccgcc ccagcaaggt atagattcag ttccttgctc cgatcccaat 840
ctggttgaga tgttgctccg atgcgacttg attatgtcat atatctgcgg tttgcaccga 900
tctgaagcct agggtttctc gagcgaccca gttgtttgca atttgcgatt tgctcgtttg 960
ttgcgcatcg tagtttatgt ttggagtaat cgaggatttg tatgcggcgt cggcgctacc 1020
tgcttaatca cgccatgtga cgcggttact tgcagaggct gggttagtgg gttctgttat 1080
gtcgtgatct aagaatctag attaggctca gtcgttcttg ctgtcgacta gtttgttttg 1140
atatccatgt agtacaagtt acttaaaatt taggtccaat atattttgca tgcttttggc 1200
ctgttattct tgccaacaag ttgtcctggt aaaaagtaga tgtgaaagtc acgtattggg 1260
acaaattgat ggttaagtgc tatagttcta tagttctgtg atacatctat ctgatttttt 1320
ttggtctatt ggtgcctaac ttatctgaaa atcatggaac atgaggctag tttgatcatg 1380
gtttagttca ttgtgattaa taatgtatga tttagtagct attttggtga tcgtgtcatt 1440
ttatttgtga atggaatcat tgtatgtaaa tgaagctagt tcaggggtta tgatgtagct 1500
ggctttgtat tctaaaggct gctattattc atccatcgat ttcacctata tgtaatccag 1560
agctttcgat gtgaaatttg tctgatcctt cactaggaag gacagaacat tgttaatatt 1620
ttggcacatc tgtcttattc tcatcctttg tttgaacatg ttagcctgtt caaacagata 1680
ctgttgtaat gtcctagtta tataggtaca tatgtgttct ctattgagtt tatggacttt 1740
tgtgtgtgaa gttatatttc attttgctca aaactcatgt ttgcaagctt tctgacatta 1800
ttctattgtt ctgaaacagg gt 1822
<210> 137
<211> 1925
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 137
gtcgtgcccc tctctagaga taatgagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt tgtcacactt gtgtttgaag tgcagtttat ctatctctat acatatattt 120
aaacttcact atatgaataa tatagtctat agtattaaaa taatatcaat gttttagatg 180
attatataac tgaactgcta gacatggtct aaaggacaac cgagtatttt gacaacatga 240
ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg tgttcttttt acttttgcaa atagcttcac 300
ctatataata cttcatccat tttattagta catccattta ctaaattttt agtacatcta 360
ttttattcta ttttagcctc taaattaaga aaacttaaac tctattttag ttttttattt 420
aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaaataacta aatacctttt 480
aagaaataaa aaaactaagg aaccattttt cttgttccga gtagataatg acagcctgtt 540
caacgccgtc gacgagtcta acggacacca accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc 600
aagcgaagca gacggcacgg catctctgta gctgcctctg gacccctctc gagagttccg 660
ctccaccgtt ggacttgctc cgctgtcggc atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac 720
gtgagccggc acggcaggcg gcctcctctc acggcaccgg cagctacggg ggattccttt 780
cccaccgctc cttcgctttc ccttcctcgc ccgccgtaat aaatagaccc cctccacacc 840
ctctttcccc aacctcgtgt tcgttcggag cgcgcacaca cacaaccaga tctcccccaa 900
atccacccgt cggcacctcc gcttcaaggt acgccgctca tcctcctccc ccccctctct 960
ctaccttctc tagatcggcg tttcggtcca tggttagggc ccggtagttc tacttctgtt 1020
catgtttgtg ttagatccgt gtttgtgtta gatccgtgct gctagatttc gtacacggat 1080
gcgacctgta catcagacat gttctgattg ctaacttgcc agtgtttctc tttggggaat 1140
cctgggatgg ctctagccgt tccgcagacg ggatcgattt catgaatttt ttttgtttcg 1200
ttgcataggg tttggtttgc ccttttcctt tatttcaata tatgccgtgc acttgtttgt 1260
cgggtcatct tttcatgttt tttttggctt ggttgtgatg atgtggtctg gttgggcggt 1320
cgttctagat cggagtagaa tactgtttca aactacctgg tggatttatt aaaggatctg 1380
tatgtatgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat 1440
ctaggatagg tatacatgtt gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt 1500
ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtc gggcggtcgt tctagatcgg agtagaatac 1560
tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttggatctg tatgtgtgtc atacatcttc 1620
atagttacga gtttaagatc gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgt 1680
gggttttact gatgcatata catggcatat gcagcatcta ttcatatgct ctaaccttga 1740
gtacctatct attataataa acaagtatgt tttataatta ttttgatctt gatatacttg 1800
gatgatggca tatgcagcag ctatatgtgg atttttttag ccctgccttc atacgctatt 1860
tatttgcttg gtactgtttc ttttgtcgat gctcaccctg ttgtttggtg atacttctgc 1920
aggtc 1925
<210> 138
<211> 997
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 138
gtacgccgct catcctcctc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgtttcggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagatcc gtgtttgtgt 120
tagatccgtg ctgctagatt tcgtacacgg atgcgacctg tacatcagac atgttctgat 180
tgctaacttg ccagtgtttc tctttgggga atcctgggat ggctctagcc gttccgcaga 240
cgggatcgat ttcatgaatt ttttttgttt cgttgcatag ggtttggttt gcccttttcc 300
tttatttcaa tatatgccgt gcacttgttt gtcgggtcat cttttcatgt tttttttggc 360
ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt 420
caaactacct ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgccatacat cttcatagtt 480
acgagtttaa gatgatggat ggaaatatcg atctaggata ggtatacatg ttgatgcggg 540
ttttactgat gcatatacag agatgctttt ttttcgcttg gttgtgatga tgtggtctgg 600
tcgggcggtc gttctagatc ggagtagaat actgtttcaa actacctggt ggatttatta 660
attttggatc tgtatgtgtg tcatacatct tcatagttac gagtttaaga tcgatggaaa 720
tatcgatcta ggataggtat acatgttgat gtgggtttta ctgatgcata tacatggcat 780
atgcagcatc tattcatatg ctctaacctt gagtacctat ctattataat aaacaagtat 840
gttttataat tattttgatc ttgatatact tggatgatgg catatgcagc agctatatgt 900
ggattttttt agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcg 960
atgctcaccc tgttgtttgg tgatacttct gcaggtc 997
<210> 139
<211> 1925
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 139
gtcgtgcccc tctctagaga taatgagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt tgtcacactt gtgtttgaag tgcagtttat ctatctctat acatatattt 120
aaacttcact atatgaataa tatagtctat agtattaaaa taatatcaat gttttagatg 180
attatataac tgaactgcta gacatggtct aaaggacaac cgagtatttt gacaacatga 240
ctctacagtt ttatcttttt agtgtgcatg tgttcttttt acttttgcaa atagcttcac 300
ctatataata cttcatccat tttattagta catccattta ctaaattttt agtacatcta 360
ttttattcta ttttagcctc taaattaaga aaacttaaac tctattttag ttttttattt 420
aataatttag atataaaata gaataaaata aagtgactaa aaaataacta aatacctttt 480
aagaaataaa aaaactaagg aaccattttt cttgttccga gtagataatg acagcctgtt 540
caacgccgtc gacgagtcta acggacacca accagcgaac cagcagcgtc gcgtcgggcc 600
aagcgaagca gacggcacgg catctctgta gctgcctctg gacccctctc gagagttccg 660
ctccaccgtt ggacttgctc cgctgtcggc atccagaaat tgcgtggcgg agcggcagac 720
gtgagccggc acggcaggcg gcctcctctc acggcaccgg cagctacggg ggattccttt 780
cccaccgctc cttcgctttc ccttcctcgc ccgccgtaat aaatagaccc cctccacacc 840
ctctttcccc aacctcgtgt tcgttcggag cgcgcacaca cacaaccaga tctcccccaa 900
atccacccgt cggcacctcc gcttcaaggt acgccgctca tcctcctccc ccccctctct 960
ctaccttctc tagatcggcg tttcggtcca tggttagggc ccggtagttc tacttctgtt 1020
catgtttgtg ttagatccgt gtttgtgtta gatccgtgct gctagatttc gtacacggat 1080
gcgacctgta catcagacat gttctgattg ctaacttgcc agtgtttctc tttggggaat 1140
cctgggatgg ctctagccgt tccgcagacg ggatcgattt catgaatttt ttttgtttcg 1200
ttgcataggg tttggtttgc ccttttcctt tatttcaata tatgccgtgc acttgtttgt 1260
cgggtcatct tttcatgttt tttttggctt ggttgtgatg atgtggtctg gttgggcggt 1320
cgttctagat cggagtagaa tactgtttca aactacctgg tggatttatt aaaggatctg 1380
tatgtatgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat 1440
ctaggatagg tatacatgtt gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt 1500
ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtc gggcggtcgt tctagatcgg agtagaatac 1560
tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttggatctg tatgtgtgtc atacatcttc 1620
atagttacga gtttaagatc gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgt 1680
gggttttact gatgcatata catggcatat gcagcatcta ttcatatgct ctaaccttga 1740
gtacctatct attataataa acaagtatgt tttataatta ttttgatctt gatatacttg 1800
gatgatggca tatgcagcag ctatatgtgg atttttttag ccctgccttc atacgctatt 1860
tatttgcttg gtactgtttc ttttgtcgat gctcaccctg ttgtttggtg atacttctgc 1920
agggt 1925
<210> 140
<211> 997
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 140
gtacgccgct catcctcctc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgtttcggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagatcc gtgtttgtgt 120
tagatccgtg ctgctagatt tcgtacacgg atgcgacctg tacatcagac atgttctgat 180
tgctaacttg ccagtgtttc tctttgggga atcctgggat ggctctagcc gttccgcaga 240
cgggatcgat ttcatgaatt ttttttgttt cgttgcatag ggtttggttt gcccttttcc 300
tttatttcaa tatatgccgt gcacttgttt gtcgggtcat cttttcatgt tttttttggc 360
ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt 420
caaactacct ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgccatacat cttcatagtt 480
acgagtttaa gatgatggat ggaaatatcg atctaggata ggtatacatg ttgatgcggg 540
ttttactgat gcatatacag agatgctttt ttttcgcttg gttgtgatga tgtggtctgg 600
tcgggcggtc gttctagatc ggagtagaat actgtttcaa actacctggt ggatttatta 660
attttggatc tgtatgtgtg tcatacatct tcatagttac gagtttaaga tcgatggaaa 720
tatcgatcta ggataggtat acatgttgat gtgggtttta ctgatgcata tacatggcat 780
atgcagcatc tattcatatg ctctaacctt gagtacctat ctattataat aaacaagtat 840
gttttataat tattttgatc ttgatatact tggatgatgg catatgcagc agctatatgt 900
ggattttttt agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcg 960
atgctcaccc tgttgtttgg tgatacttct gcagggt 997
<210> 141
<211> 1974
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 141
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt gtcacacttg tttgaagtgc agtttatcta tctttataca tatatttaaa 120
ctttactcta cgaataatat aatctatagt actacaataa tatcagtgtt ttagagaatc 180
atataaatga acagttagac atggtctaaa ggacaattga gtattttgac aacaggactc 240
tacagtttta tctttttagt gtgcatgtgt tctccttttt tttttgcaaa tagcttcacc 300
tatataatac ttcatccatt ttattagtac atccatttag ggtttagggt taatggtttt 360
tatagactaa tttttttagt acatctattt tattctattt tagcctctaa attaagaaaa 420
ctaaaactct attttagttt ttttatttaa taatttagat ataaaataga ataaaataaa 480
gtgactaaaa attaaacaaa taccctttaa gaaattaaaa aaactaagga aacatttttc 540
ttgtttcgag tagataatgc cagcctgtta aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa 600
ccagcgaacc agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtcg 660
ctgcctctgg acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca 720
tccagaaatt gcgtggcgga gcggcagacg tgagccggca cggcaggcgg cctcctcctc 780
ctctcacggc accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc 840
ctcgcccgcc gtaataaata gacaccccct ccacaccttc tttccccaac ctcgtgttgt 900
tcggagcgca cacacacaca accagatctc ccccaaatcc acccgtcggc acctccgctt 960
caaggtacgc cgctcatcct cccccccccc tctctacctt ctctagatcg gcgttccggt 1020
ccatggttag ggcccggtag ttctacttct gttcatgttt gtgttagatc cgtgtttgtg 1080
ttagatccgt gctgctagcg ttcgtacacg gatgcgacct gtacgtcaga cacgttctga 1140
ttgctaactt gccagtgttt ctctttgggg aatcctggga tggctctagc cgttccgcag 1200
acgggatcga tttcatgatt ttttttgttt cgttgcatag ggtttggttt gcccttttcc 1260
tttatttcaa tatatgccgt gcacttgttt gtcgggtcat cttttcatgc ttttttttgt 1320
cttggttgtg atgatgtggt ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagaa gaattctgtt 1380
tcaaactacc tggtggattt attaattttg gatctgtatg tgtgtgccat acatattcat 1440
agttacgaat tgaagatgat ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg 1500
cgggttttac tgatgcatat acagagatgc tttttgttcg cttggttgtg atgatgtggt 1560
ctggttgggc ggtcgttcat tcgttctaga tcggagtaga atactgtttc aaactacctg 1620
gtgtatttat taattttgga actgtatgtg tgtgtcatac atcttcatag ttacgagttt 1680
aagatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgtgggt tttactgatg 1740
catatacatg atggcatatg cagcatctat tcatatgctc taaccttgag tacctatcta 1800
ttataataaa caagtatgtt ttataattat tttgatcttg atatacttgg atgatggcat 1860
atgcagcagc tatatgtgga tttttttagc cctgccttca tacgctattt atttgcttgg 1920
tactgtttct tttgtcgatg ctcaccctgt tgtttggtga tacttctgca ggtc 1974
<210> 142
<211> 1010
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 142
gtacgccgct catcctcccc cccccctctc taccttctct agatcggcgt tccggtccat 60
ggttagggcc cggtagttct acttctgttc atgtttgtgt tagatccgtg tttgtgttag 120
atccgtgctg ctagcgttcg tacacggatg cgacctgtac gtcagacacg ttctgattgc 180
taacttgcca gtgtttctct ttggggaatc ctgggatggc tctagccgtt ccgcagacgg 240
gatcgatttc atgatttttt ttgtttcgtt gcatagggtt tggtttgccc ttttccttta 300
tttcaatata tgccgtgcac ttgtttgtcg ggtcatcttt tcatgctttt ttttgtcttg 360
gttgtgatga tgtggtctgg ttgggcggtc gttctagatc ggagaagaat tctgtttcaa 420
actacctggt ggatttatta attttggatc tgtatgtgtg tgccatacat attcatagtt 480
acgaattgaa gatgatggat ggaaatatcg atctaggata ggtatacatg ttgatgcggg 540
ttttactgat gcatatacag agatgctttt tgttcgcttg gttgtgatga tgtggtctgg 600
ttgggcggtc gttcattcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgt 660
atttattaat tttggaactg tatgtgtgtg tcatacatct tcatagttac gagtttaaga 720
tggatggaaa tatcgatcta ggataggtat acatgttgat gtgggtttta ctgatgcata 780
tacatgatgg catatgcagc atctattcat atgctctaac cttgagtacc tatctattat 840
aataaacaag tatgttttat aattattttg atcttgatat acttggatga tggcatatgc 900
agcagctata tgtggatttt tttagccctg ccttcatacg ctatttattt gcttggtact 960
gtttcttttg tcgatgctca ccctgttgtt tggtgatact tctgcaggtc 1010
<210> 143
<211> 1974
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 143
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta agttataaaa aattaccaca 60
tatttttttt gtcacacttg tttgaagtgc agtttatcta tctttataca tatatttaaa 120
ctttactcta cgaataatat aatctatagt actacaataa tatcagtgtt ttagagaatc 180
atataaatga acagttagac atggtctaaa ggacaattga gtattttgac aacaggactc 240
tacagtttta tctttttagt gtgcatgtgt tctccttttt tttttgcaaa tagcttcacc 300
tatataatac ttcatccatt ttattagtac atccatttag ggtttagggt taatggtttt 360
tatagactaa tttttttagt acatctattt tattctattt tagcctctaa attaagaaaa 420
ctaaaactct attttagttt ttttatttaa taatttagat ataaaataga ataaaataaa 480
gtgactaaaa attaaacaaa taccctttaa gaaattaaaa aaactaagga aacatttttc 540
ttgtttcgag tagataatgc cagcctgtta aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa 600
ccagcgaacc agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtcg 660
ctgcctctgg acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca 720
tccagaaatt gcgtggcgga gcggcagacg tgagccggca cggcaggcgg cctcctcctc 780
ctctcacggc accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc 840
ctcgcccgcc gtaataaata gacaccccct ccacaccttc tttccccaac ctcgtgttgt 900
tcggagcgca cacacacaca accagatctc ccccaaatcc acccgtcggc acctccgctt 960
caaggtacgc cgctcatcct cccccccccc tctctacctt ctctagatcg gcgttccggt 1020
ccatggttag ggcccggtag ttctacttct gttcatgttt gtgttagatc cgtgtttgtg 1080
ttagatccgt gctgctagcg ttcgtacacg gatgcgacct gtacgtcaga cacgttctga 1140
ttgctaactt gccagtgttt ctctttgggg aatcctggga tggctctagc cgttccgcag 1200
acgggatcga tttcatgatt ttttttgttt cgttgcatag ggtttggttt gcccttttcc 1260
tttatttcaa tatatgccgt gcacttgttt gtcgggtcat cttttcatgc ttttttttgt 1320
cttggttgtg atgatgtggt ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagaa gaattctgtt 1380
tcaaactacc tggtggattt attaattttg gatctgtatg tgtgtgccat acatattcat 1440
agttacgaat tgaagatgat ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg 1500
cgggttttac tgatgcatat acagagatgc tttttgttcg cttggttgtg atgatgtggt 1560
ctggttgggc ggtcgttcat tcgttctaga tcggagtaga atactgtttc aaactacctg 1620
gtgtatttat taattttgga actgtatgtg tgtgtcatac atcttcatag ttacgagttt 1680
aagatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgtgggt tttactgatg 1740
catatacatg atggcatatg cagcatctat tcatatgctc taaccttgag tacctatcta 1800
ttataataaa caagtatgtt ttataattat tttgatcttg atatacttgg atgatggcat 1860
atgcagcagc tatatgtgga tttttttagc cctgccttca tacgctattt atttgcttgg 1920
tactgtttct tttgtcgatg ctcaccctgt tgtttggtga tacttctgca gggt 1974
<210> 144
<211> 1010
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 144
gtacgccgct catcctcccc cccccctctc taccttctct agatcggcgt tccggtccat 60
ggttagggcc cggtagttct acttctgttc atgtttgtgt tagatccgtg tttgtgttag 120
atccgtgctg ctagcgttcg tacacggatg cgacctgtac gtcagacacg ttctgattgc 180
taacttgcca gtgtttctct ttggggaatc ctgggatggc tctagccgtt ccgcagacgg 240
gatcgatttc atgatttttt ttgtttcgtt gcatagggtt tggtttgccc ttttccttta 300
tttcaatata tgccgtgcac ttgtttgtcg ggtcatcttt tcatgctttt ttttgtcttg 360
gttgtgatga tgtggtctgg ttgggcggtc gttctagatc ggagaagaat tctgtttcaa 420
actacctggt ggatttatta attttggatc tgtatgtgtg tgccatacat attcatagtt 480
acgaattgaa gatgatggat ggaaatatcg atctaggata ggtatacatg ttgatgcggg 540
ttttactgat gcatatacag agatgctttt tgttcgcttg gttgtgatga tgtggtctgg 600
ttgggcggtc gttcattcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgt 660
atttattaat tttggaactg tatgtgtgtg tcatacatct tcatagttac gagtttaaga 720
tggatggaaa tatcgatcta ggataggtat acatgttgat gtgggtttta ctgatgcata 780
tacatgatgg catatgcagc atctattcat atgctctaac cttgagtacc tatctattat 840
aataaacaag tatgttttat aattattttg atcttgatat acttggatga tggcatatgc 900
agcagctata tgtggatttt tttagccctg ccttcatacg ctatttattt gcttggtact 960
gtttcttttg tcgatgctca ccctgttgtt tggtgatact tctgcagggt 1010
<210> 145
<211> 2008
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 145
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta aagtataaaa aattaccaca 60
tatttttttg tcacacttat ttgaagtgta gtttatctat ctctatacat atatttaaac 120
ttcactctac aaataatata gtctataata ctaaaataat attagtgttt tagaggatca 180
tataaataaa ctgctagaca tggtctaaag gataattgaa tattttgaca atctacagtt 240
ttatcttttt agtgtgcatg tgatctctct gttttttttg caaatagctt gacctatata 300
atacttcatc cattttatta gtacatccat ttaggattta gggttgatgg tttctataga 360
ctaattttta gtacatccat tttattcttt ttagtctcta aattttttaa aactaaaact 420
ctattttagt tttttattta ataatttaga tataaaatga aataaaataa attgactaca 480
aataaaacaa atacccttta agaaataaaa aaactaagca aacatttttc ttgtttcgag 540
tagataatga caggctgttc aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa ccagcgaacc 600
agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtag ctgcctctgg 660
acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca tccagaaatt 720
gcgtggcgga gcggcagacg tgaggcggca cggcaggcgg cctcttcctc ctctcacggc 780
accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc ctcgcccgcc 840
gtaataaata gacaccccct ccacaccctc tttccccaac ctcgtgttcg ttcggagcgc 900
acacacacgc aaccagatct cccccaaatc cagccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg 960
ccgctcatcc tccccccccc cctctctcta ccttctctag atcggcgatc cggtccatgg 1020
ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gagcaaacat gttcatgttc 1080
atgtttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag gatactgttt 1140
caagctacct ggtggattta ttaattttgt atctgtatgt gtgtgccata catcttcata 1200
gttacgagtt taagatgatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgc 1260
gggttttact gatgcatata cagagatgct ttttttctcg cttggttgtg atgatatggt 1320
ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagta gaatactgtt tcaaactacc tggtggattt 1380
attaaaggat aaagggtcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg 1440
atttattaaa ggatctgtat gtatgtgcct acatcttcat agttacgagt ttaagatgat 1500
ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat 1560
acagagatgc tttttttcgc ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag 1620
atcggagtag aatactgttt caaactacct ggtggattta ttaattttgt atctttatgt 1680
gtgtgccata catcttcata gttacgagtt taagatgatg gatggaaata ttgatctagg 1740
ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcggcat 1800
ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860
ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920
agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcc gatgctcacc 1980
ctgttgttgg gtgatacttc tgcaggtc 2008
<210> 146
<211> 1053
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 146
gtacgccgct catcctcccc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgatccggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagagca aacatgttca 120
tgttcatgtt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt tctagatcgg agtaggatac 180
tgtttcaagc tacctggtgg atttattaat tttgtatctg tatgtgtgtg ccatacatct 240
tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt 300
gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt tctcgcttgg ttgtgatgat 360
atggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaata ctgtttcaaa ctacctggtg 420
gatttattaa aggataaagg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt caaactacct 480
ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgcctacatc ttcatagtta cgagtttaag 540
atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg 600
catatacaga gatgcttttt ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 660
tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttgtatctt 720
tatgtgtgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatattgat 780
ctaggatagg tatacatgtt gatgtgggtt ttactgatgc atatacatga tggcatatgc 840
ggcatctatt catatgctct aaccttgagt acctatctat tataataaac aagtatgttt 900
tataattatt ttgatcttga tatacttgga tgatggcata tgcagcagct atatgtggat 960
tttttagccc tgccttcata cgctatttat ttgcttggta ctgtttcttt tgtccgatgc 1020
tcaccctgtt gttgggtgat acttctgcag gtc 1053
<210> 147
<211> 2008
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 147
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta aagtataaaa aattaccaca 60
tatttttttg tcacacttat ttgaagtgta gtttatctat ctctatacat atatttaaac 120
ttcactctac aaataatata gtctataata ctaaaataat attagtgttt tagaggatca 180
tataaataaa ctgctagaca tggtctaaag gataattgaa tattttgaca atctacagtt 240
ttatcttttt agtgtgcatg tgatctctct gttttttttg caaatagctt gacctatata 300
atacttcatc cattttatta gtacatccat ttaggattta gggttgatgg tttctataga 360
ctaattttta gtacatccat tttattcttt ttagtctcta aattttttaa aactaaaact 420
ctattttagt tttttattta ataatttaga tataaaatga aataaaataa attgactaca 480
aataaaacaa atacccttta agaaataaaa aaactaagca aacatttttc ttgtttcgag 540
tagataatga caggctgttc aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa ccagcgaacc 600
agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtag ctgcctctgg 660
acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca tccagaaatt 720
gcgtggcgga gcggcagacg tgaggcggca cggcaggcgg cctcttcctc ctctcacggc 780
accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc ctcgcccgcc 840
gtaataaata gacaccccct ccacaccctc tttccccaac ctcgtgttcg ttcggagcgc 900
acacacacgc aaccagatct cccccaaatc cagccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg 960
ccgctcatcc tccccccccc cctctctcta ccttctctag atcggcgatc cggtccatgg 1020
ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gagcaaacat gttcatgttc 1080
atgtttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag gatactgttt 1140
caagctacct ggtggattta ttaattttgt atctgtatgt gtgtgccata catcttcata 1200
gttacgagtt taagatgatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgc 1260
gggttttact gatgcatata cagagatgct ttttttctcg cttggttgtg atgatatggt 1320
ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagta gaatactgtt tcaaactacc tggtggattt 1380
attaaaggat aaagggtcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg 1440
atttattaaa ggatctgtat gtatgtgcct acatcttcat agttacgagt ttaagatgat 1500
ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat 1560
acagagatgc tttttttcgc ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag 1620
atcggagtag aatactgttt caaactacct ggtggattta ttaattttgt atctttatgt 1680
gtgtgccata catcttcata gttacgagtt taagatgatg gatggaaata ttgatctagg 1740
ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcggcat 1800
ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860
ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920
agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcc gatgctcacc 1980
ctgttgtttg gtgatacttc tgcaggtc 2008
<210> 148
<211> 1053
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 148
gtacgccgct catcctcccc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgatccggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagagca aacatgttca 120
tgttcatgtt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt tctagatcgg agtaggatac 180
tgtttcaagc tacctggtgg atttattaat tttgtatctg tatgtgtgtg ccatacatct 240
tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt 300
gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt tctcgcttgg ttgtgatgat 360
atggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaata ctgtttcaaa ctacctggtg 420
gatttattaa aggataaagg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt caaactacct 480
ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgcctacatc ttcatagtta cgagtttaag 540
atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg 600
catatacaga gatgcttttt ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 660
tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttgtatctt 720
tatgtgtgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatattgat 780
ctaggatagg tatacatgtt gatgtgggtt ttactgatgc atatacatga tggcatatgc 840
ggcatctatt catatgctct aaccttgagt acctatctat tataataaac aagtatgttt 900
tataattatt ttgatcttga tatacttgga tgatggcata tgcagcagct atatgtggat 960
tttttagccc tgccttcata cgctatttat ttgcttggta ctgtttcttt tgtccgatgc 1020
tcaccctgtt gtttggtgat acttctgcag gtc 1053
<210> 149
<211> 2008
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 149
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta aagtataaaa aattaccaca 60
tatttttttg tcacacttat ttgaagtgta gtttatctat ctctatacat atatttaaac 120
ttcactctac aaataatata gtctataata ctaaaataat attagtgttt tagaggatca 180
tataaataaa ctgctagaca tggtctaaag gataattgaa tattttgaca atctacagtt 240
ttatcttttt agtgtgcatg tgatctctct gttttttttg caaatagctt gacctatata 300
atacttcatc cattttatta gtacatccat ttaggattta gggttgatgg tttctataga 360
ctaattttta gtacatccat tttattcttt ttagtctcta aattttttaa aactaaaact 420
ctattttagt tttttattta ataatttaga tataaaatga aataaaataa attgactaca 480
aataaaacaa atacccttta agaaataaaa aaactaagca aacatttttc ttgtttcgag 540
tagataatga caggctgttc aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa ccagcgaacc 600
agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtag ctgcctctgg 660
acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca tccagaaatt 720
gcgtggcgga gcggcagacg tgaggcggca cggcaggcgg cctcttcctc ctctcacggc 780
accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc ctcgcccgcc 840
gtaataaata gacaccccct ccacaccctc tttccccaac ctcgtgttcg ttcggagcgc 900
acacacacgc aaccagatct cccccaaatc cagccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg 960
ccgctcatcc tccccccccc cctctctcta ccttctctag atcggcgatc cggtccatgg 1020
ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gagcaaacat gttcatgttc 1080
atgtttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag gatactgttt 1140
caagctacct ggtggattta ttaattttgt atctgtatgt gtgtgccata catcttcata 1200
gttacgagtt taagatgatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgc 1260
gggttttact gatgcatata cagagatgct ttttttctcg cttggttgtg atgatatggt 1320
ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagta gaatactgtt tcaaactacc tggtggattt 1380
attaaaggat aaagggtcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg 1440
atttattaaa ggatctgtat gtatgtgcct acatcttcat agttacgagt ttaagatgat 1500
ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat 1560
acagagatgc tttttttcgc ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag 1620
atcggagtag aatactgttt caaactacct ggtggattta ttaattttgt atctttatgt 1680
gtgtgccata catcttcata gttacgagtt taagatgatg gatggaaata ttgatctagg 1740
ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcggcat 1800
ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860
ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920
agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcc gatgctcacc 1980
ctgttgttgg gtgatacttc tgcagggt 2008
<210> 150
<211> 1053
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 150
gtacgccgct catcctcccc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgatccggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagagca aacatgttca 120
tgttcatgtt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt tctagatcgg agtaggatac 180
tgtttcaagc tacctggtgg atttattaat tttgtatctg tatgtgtgtg ccatacatct 240
tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt 300
gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt tctcgcttgg ttgtgatgat 360
atggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaata ctgtttcaaa ctacctggtg 420
gatttattaa aggataaagg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt caaactacct 480
ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgcctacatc ttcatagtta cgagtttaag 540
atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg 600
catatacaga gatgcttttt ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 660
tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttgtatctt 720
tatgtgtgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatattgat 780
ctaggatagg tatacatgtt gatgtgggtt ttactgatgc atatacatga tggcatatgc 840
ggcatctatt catatgctct aaccttgagt acctatctat tataataaac aagtatgttt 900
tataattatt ttgatcttga tatacttgga tgatggcata tgcagcagct atatgtggat 960
tttttagccc tgccttcata cgctatttat ttgcttggta ctgtttcttt tgtccgatgc 1020
tcaccctgtt gttgggtgat acttctgcag ggt 1053
<210> 151
<211> 1635
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 151
ccaagtccaa atgtcaattc ccttgaagat gatctatttt tatcttttgc attttgttat 60
ggaagtttgc aaatagcaac aaatgctaag tcaatttgcc aaagtctttg gagatgctct 120
tagtctataa ttgaacaata tttgtaaaat acaaaaaaaa atagtactat ttttatttta 180
aaaaattttt ggaagtaaac aaggccgagg atggggaaac ggaagtccaa cacgtcgttt 240
tctaagttgg gctcaaaagc ccatcacgga actgacctgc tatgggtcgg aggagagcgc 300
gtccagatgg ttccagaggc tggtggtggt gggccaaacg cggaactccg ccaccgccac 360
ggcctcgtgc gcaagcgcag cgcgttgccg tgagccgtga cgtaaccctc cgttgcccac 420
gataaaagct ccacccccga ccccggcccc ccgatttccc ctacggacca gtctcccccc 480
gatcgcaatc gcgaattcgt cgcaccatcg gcacgcagac gaacgaagca aggctctccc 540
catcggctcg tcaaggtatg cgttccctag atttgttccc ttcctctctc ggtttgtcta 600
tatatatgca tgtatggtcg attcccgatc tcgtcgattc tcggtttcgc cttccgtacg 660
aagattcgtt tagattgttc atatgttctg ttgtgttacc agattgatcg gatcaacttg 720
atccagttat cttcgctcct ccgattagat ccgtttctat ttcagtatat atatactagt 780
atagtatcta gggttcacac tgttgaccga ctggttactt ggaattgatc cgtgctgagt 840
tcagttgttg ccgtccataa aggcccgtgc tattgtctgt tctgaaacga aatcctgtag 900
atttcttagg gttagtgttc aattcatcaa aaggttgatt agtgaattat caaatttgag 960
agggttaaat cattctcatc atgttgtctc gaatgtaatc ccaaagatat tatagactgt 1020
gtttcgattt gatggattga tttgtgtatc atctaaatca acaaggctaa gtcatcagtt 1080
catagaatca tgtttaggtt tccgttcaat agactagttt tatcaatata taaaattata 1140
agaagggtag ggtaaatcac gttgcctcaa atgccatcct gtatggtttg gtttcaattc 1200
aattagtttg gttgattagg gtatgctctg gattaagatg gttaaatctt ccctagcatc 1260
ttccctgcct atccttactt gatccgtttc ggatatgttg gaagtacagc gagcttattt 1320
catgttgata gtgacccctt tcagattata ctattgaata ttgtatgttt gccacttctg 1380
tatgttgaat tatcctgcta aattagcaat ggaattagca tattggcaat tggtatgcat 1440
ggacctaatc aggacggatg tggttatgtt agtttcaatt cattgtcaat tcattgttca 1500
cctgcgttag atatatatga tgatttttac gtgtagttca tagttcttga gttttggatc 1560
tttcttatct gatatatgct ttcctgtgcc tgtgctttat tgtgtcttac catgcgattt 1620
ttgtctatgc aggtc 1635
<210> 152
<211> 1080
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 152
gtatgcgttc cctagatttg ttcccttcct ctctcggttt gtctatatat atgcatgtat 60
ggtcgattcc cgatctcgtc gattctcggt ttcgccttcc gtacgaagat tcgtttagat 120
tgttcatatg ttctgttgtg ttaccagatt gatcggatca acttgatcca gttatcttcg 180
ctcctccgat tagatccgtt tctatttcag tatatatata ctagtatagt atctagggtt 240
cacactgttg accgactggt tacttggaat tgatccgtgc tgagttcagt tgttgccgtc 300
cataaaggcc cgtgctattg tctgttctga aacgaaatcc tgtagatttc ttagggttag 360
tgttcaattc atcaaaaggt tgattagtga attatcaaat ttgagagggt taaatcattc 420
tcatcatgtt gtctcgaatg taatcccaaa gatattatag actgtgtttc gatttgatgg 480
attgatttgt gtatcatcta aatcaacaag gctaagtcat cagttcatag aatcatgttt 540
aggtttccgt tcaatagact agttttatca atatataaaa ttataagaag ggtagggtaa 600
atcacgttgc ctcaaatgcc atcctgtatg gtttggtttc aattcaatta gtttggttga 660
ttagggtatg ctctggatta agatggttaa atcttcccta gcatcttccc tgcctatcct 720
tacttgatcc gtttcggata tgttggaagt acagcgagct tatttcatgt tgatagtgac 780
ccctttcaga ttatactatt gaatattgta tgtttgccac ttctgtatgt tgaattatcc 840
tgctaaatta gcaatggaat tagcatattg gcaattggta tgcatggacc taatcaggac 900
ggatgtggtt atgttagttt caattcattg tcaattcatt gttcacctgc gttagatata 960
tatgatgatt tttacgtgta gttcatagtt cttgagtttt ggatctttct tatctgatat 1020
atgctttcct gtgcctgtgc tttattgtgt cttaccatgc gatttttgtc tatgcaggtc 1080
<210> 153
<211> 2067
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 153
cattaaaagt cattatgtgc atgcgtcgta actaacatgg atatgttgct gcactatctc 60
ctcgcactag ctgcgcatga taaagccaca agccaaaatt aattattatg ggtgagaata 120
aatacgtacc agcaccggcc atagaaaaag tacattatta aaggtctaat ttggaaacag 180
tctgaaaacg acgtgcgctg cagaggtaaa tgtaattttc ggcactaaaa ccattatcaa 240
ctaattcatt caataacagt tatttagaaa atgtatagct cgctctaaaa aaacagttta 300
gaaaaacagt caaaataatt cgaccaacaa acagttaata aggttcatta aatatataat 360
gcacggtgct atttgatctt ttaaaggaaa aagaggaata gtcgtgggcg ccaggcggga 420
attggggcgc gggagtctgc cggacgacgc gttccgtccg aacggccgga cccgacgagg 480
cccccccgcc gccccacgtc gcagaaccgt ccgtgggtgg taatctggcc gggtacacca 540
gccgtcccct tgggcggcct cacagcactg ggctcacacg tgagttttgt tctgggcttc 600
ggatcgcacc atatgggcct cggcatcaga aagacggggc ccgtctggga tagaagagac 660
aggaacctcc tcgtggattc cagaagccag ccacgagcga ccaccgacgc ggaggatact 720
cgtcgtccaa gtccaacacg gcgggcgggc gggcggacgc gtgggctggg ctaactgcct 780
aaccttaacc tccaaggcac gccaaggccc gcttctccca cccgacataa atatcccccc 840
atccaggcaa ggcgcagagc ctcagaccag attccgatca atcacccata agctcccccc 900
aaatctgttc ctcgtctccc gtctcgcggt ttcctacttc cctcggacgc ctccggcaag 960
tcgctcgacc gcgcgattcc gcccgctcaa ggtatcaact cggttcacca ctccaatcta 1020
cgtctgattt agatgttact tccatctatg tctaatttag atgttactcc gatgcgattg 1080
gattatgttt atgcggtttg cactgctctg gaaactggaa tctagggttt cgagtgattt 1140
gatcgatcgc gatctgtgat ttcgttgcgc cttgtgtatg cttggagtga tctaggcttg 1200
tatatgcggc atcgcgatct gacgcggttg ctttgtagag gctgggggtc taggctgtga 1260
ttttagaatc aaataaagct gttccttacc gtagatgttt cctacatgtt ctgtccagta 1320
ctccagtgct atattcacat tgtttgaggc ttgagttttg tcgatcagtg gtcatgagaa 1380
aaatatatct catgatttta gaggcaccta ttgggaaagg tagatggttc cgttttacat 1440
gttttataga ccttgtggca tggctccttt gttctatggg tgctttattt tcctgaataa 1500
cagtaatgcg agactggtct atgggtgctt tgaccagtaa tgcgagacta gttatttgat 1560
catggtgcag ttcctagtga ttacgaacaa caatttggta gctcagttca ttcagcattg 1620
gtttctacga tccttatcat tttacttctg aatgaattta tttatttaag atattacagt 1680
gcaataaact gctgtataat atcagtaaca aactgctatt actagtaaat gcctagattc 1740
ataataattc attattctac ttgaaaatga tcttaggcct ttttatgcgg tcctacgcat 1800
ccttccacag gacttgctgt ttgtttgttt tttgtaatcc ctcgctggga cgcagaatgg 1860
ttcatctgtg ctaataattt ttttgcatat ataagtttat agttctcatt attcatgtgg 1920
ctatggtagc ctgtaaaatc tattgtaata acatattagt cagccataca tctgttccaa 1980
cttgctcaat tgcaaatcat atctccactt aaagcacatg tttgcaagct ttctgacaag 2040
tttctttgtg tttgattgaa acaggtg 2067
<210> 154
<211> 1076
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 154
gtatcaactc ggttcaccac tccaatctac gtctgattta gatgttactt ccatctatgt 60
ctaatttaga tgttactccg atgcgattgg attatgttta tgcggtttgc actgctctgg 120
aaactggaat ctagggtttc gagtgatttg atcgatcgcg atctgtgatt tcgttgcgcc 180
ttgtgtatgc ttggagtgat ctaggcttgt atatgcggca tcgcgatctg acgcggttgc 240
tttgtagagg ctgggggtct aggctgtgat tttagaatca aataaagctg ttccttaccg 300
tagatgtttc ctacatgttc tgtccagtac tccagtgcta tattcacatt gtttgaggct 360
tgagttttgt cgatcagtgg tcatgagaaa aatatatctc atgattttag aggcacctat 420
tgggaaaggt agatggttcc gttttacatg ttttatagac cttgtggcat ggctcctttg 480
ttctatgggt gctttatttt cctgaataac agtaatgcga gactggtcta tgggtgcttt 540
gaccagtaat gcgagactag ttatttgatc atggtgcagt tcctagtgat tacgaacaac 600
aatttggtag ctcagttcat tcagcattgg tttctacgat ccttatcatt ttacttctga 660
atgaatttat ttatttaaga tattacagtg caataaactg ctgtataata tcagtaacaa 720
actgctatta ctagtaaatg cctagattca taataattca ttattctact tgaaaatgat 780
cttaggcctt tttatgcggt cctacgcatc cttccacagg acttgctgtt tgtttgtttt 840
ttgtaatccc tcgctgggac gcagaatggt tcatctgtgc taataatttt tttgcatata 900
taagtttata gttctcatta ttcatgtggc tatggtagcc tgtaaaatct attgtaataa 960
catattagtc agccatacat ctgttccaac ttgctcaatt gcaaatcata tctccactta 1020
aagcacatgt ttgcaagctt tctgacaagt ttctttgtgt ttgattgaaa caggtg 1076
<210> 155
<211> 2067
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 155
cattaaaagt cattatgtgc atgcgtcgta actaacatgg atatgttgct gcactatctc 60
ctcgcactag ctgcgcatga taaagccaca agccaaaatt aattattatg ggtgagaata 120
aatacgtacc agcaccggcc atagaaaaag tacattatta aaggtctaat ttggaaacag 180
tctgaaaacg acgtgcgctg cagaggtaaa tgtaattttc ggcactaaaa ccattatcaa 240
ctaattcatt caataacagt tatttagaaa atgtatagct cgctctaaaa aaacagttta 300
gaaaaacagt caaaataatt cgaccaacaa acagttaata aggttcatta aatatataat 360
gcacggtgct atttgatctt ttaaaggaaa aagaggaata gtcgtgggcg ccaggcggga 420
attggggcgc gggagtctgc cggacgacgc gttccgtccg aacggccgga cccgacgagg 480
cccccccgcc gccccacgtc gcagaaccgt ccgtgggtgg taatctggcc gggtacacca 540
gccgtcccct tgggcggcct cacagcactg ggctcacacg tgagttttgt tctgggcttc 600
ggatcgcacc atatgggcct cggcatcaga aagacggggc ccgtctggga tagaagagac 660
aggaacctcc tcgtggattc cagaagccag ccacgagcga ccaccgacgc ggaggatact 720
cgtcgtccaa gtccaacacg gcgggcgggc gggcggacgc gtgggctggg ctaactgcct 780
aaccttaacc tccaaggcac gccaaggccc gcttctccca cccgacataa atatcccccc 840
atccaggcaa ggcgcagagc ctcagaccag attccgatca atcacccata agctcccccc 900
aaatctgttc ctcgtctccc gtctcgcggt ttcctacttc cctcggacgc ctccggcaag 960
tcgctcgacc gcgcgattcc gcccgctcaa ggtatcaact cggttcacca ctccaatcta 1020
cgtctgattt agatgttact tccatctatg tctaatttag atgttactcc gatgcgattg 1080
gattatgttt atgcggtttg cactgctctg gaaactggaa tctagggttt cgagtgattt 1140
gatcgatcgc gatctgtgat ttcgttgcgc cttgtgtatg cttggagtga tctaggcttg 1200
tatatgcggc atcgcgatct gacgcggttg ctttgtagag gctgggggtc taggctgtga 1260
ttttagaatc aaataaagct gttccttacc gtagatgttt cctacatgtt ctgtccagta 1320
ctccagtgct atattcacat tgtttgaggc ttgagttttg tcgatcagtg gtcatgagaa 1380
aaatatatct catgatttta gaggcaccta ttgggaaagg tagatggttc cgttttacat 1440
gttttataga ccttgtggca tggctccttt gttctatggg tgctttattt tcctgaataa 1500
cagtaatgcg agactggtct atgggtgctt tgaccagtaa tgcgagacta gttatttgat 1560
catggtgcag ttcctagtga ttacgaacaa caatttggta gctcagttca ttcagcattg 1620
gtttctacga tccttatcat tttacttctg aatgaattta tttatttaag atattacagt 1680
gcaataaact gctgtataat atcagtaaca aactgctatt actagtaaat gcctagattc 1740
ataataattc attattctac ttgaaaatga tcttaggcct ttttatgcgg tcctacgcat 1800
ccttccacag gacttgctgt ttgtttgttt tttgtaatcc ctcgctggga cgcagaatgg 1860
ttcatctgtg ctaataattt ttttgcatat ataagtttat agttctcatt attcatgtgg 1920
ctatggtagc ctgtaaaatc tattgtaata acatattagt cagccataca tctgttccaa 1980
cttgctcaat tgcaaatcat atctccactt aaagcacatg tttgcaagct ttctgacaag 2040
tttctttgtg tttgattgaa acagggt 2067
<210> 156
<211> 1076
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 156
gtatcaactc ggttcaccac tccaatctac gtctgattta gatgttactt ccatctatgt 60
ctaatttaga tgttactccg atgcgattgg attatgttta tgcggtttgc actgctctgg 120
aaactggaat ctagggtttc gagtgatttg atcgatcgcg atctgtgatt tcgttgcgcc 180
ttgtgtatgc ttggagtgat ctaggcttgt atatgcggca tcgcgatctg acgcggttgc 240
tttgtagagg ctgggggtct aggctgtgat tttagaatca aataaagctg ttccttaccg 300
tagatgtttc ctacatgttc tgtccagtac tccagtgcta tattcacatt gtttgaggct 360
tgagttttgt cgatcagtgg tcatgagaaa aatatatctc atgattttag aggcacctat 420
tgggaaaggt agatggttcc gttttacatg ttttatagac cttgtggcat ggctcctttg 480
ttctatgggt gctttatttt cctgaataac agtaatgcga gactggtcta tgggtgcttt 540
gaccagtaat gcgagactag ttatttgatc atggtgcagt tcctagtgat tacgaacaac 600
aatttggtag ctcagttcat tcagcattgg tttctacgat ccttatcatt ttacttctga 660
atgaatttat ttatttaaga tattacagtg caataaactg ctgtataata tcagtaacaa 720
actgctatta ctagtaaatg cctagattca taataattca ttattctact tgaaaatgat 780
cttaggcctt tttatgcggt cctacgcatc cttccacagg acttgctgtt tgtttgtttt 840
ttgtaatccc tcgctgggac gcagaatggt tcatctgtgc taataatttt tttgcatata 900
taagtttata gttctcatta ttcatgtggc tatggtagcc tgtaaaatct attgtaataa 960
catattagtc agccatacat ctgttccaac ttgctcaatt gcaaatcata tctccactta 1020
aagcacatgt ttgcaagctt tctgacaagt ttctttgtgt ttgattgaaa cagggt 1076
<210> 157
<211> 2003
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 157
agaagtaaaa aaaaagttcg tttcagaatc ataaaggtaa gttaaaaaaa gaccatacaa 60
aaaagaggta tttaatgata aactataatc cagaatttgt taggatagta tataagaata 120
agaccttgtt tagtttcaaa aaaatttgca aaattttcca gattcctcgt cacatcaaat 180
ctttagaggt atgcatggag tattaaatat agacaagacc taaataagaa aacatgaaat 240
gttcacgaaa aaaatcaagc caatgcatga tcgaagcaaa cggtatagta acggtgttaa 300
cctgatccat tgatctttgt aatctttaac ggccacctac cgcgggcagc aaacggcgtc 360
cccctcctcg atatctccgc ggcggcctct ggctttttcc gcggaattgc gcggtgggga 420
cggattccac gagaccgcaa cgcaaccgcc tctcgccgct gggccccaca ccgctcggtg 480
ccgtagcccg tagcctcacg ggattctttc tccctcctcc cccgtgtata aattggcttc 540
atcccctccc tgcctcatcc atccaaatcc cactccccaa tcccatcccg tcggagaaat 600
tcatcgaagc gaagcgaagc gaatcctccc gatcctctca aggtacgcga gttttcgaat 660
cccctccaga cccctcgtat gctttccctg ttcgttttcg tcgtagcgtt tgattaggta 720
tgctttccct gttcgtgttc gtcgtagggt tcgattaggt cgtgtgaggc catggcctgc 780
tgtgataaat ttatttgttg ttatatcgga tctgtagtcg atttgggggt cgtggtgtag 840
atccgcgggc tgtgatgaag ttatttggtg tgattgtgct cgcgtgattc tgcgcgttga 900
gctcgagtag atctgatggt tggacgaccg attggttcgt tggctggctg cgctaaggtt 960
gggctgggct catgttgcgt tcgctgttgc gcgtgattcc gcggatggac ttgcgcttga 1020
ttgccgccag atcacgttac gattatgtga tttcgtttgg aactttttag atttgtagct 1080
tctgcttatt atatgacaga tgcgcctact gctcatatgc ctgtggtaaa taatggatgg 1140
ctgtgggtca aactagttga ttgtcgagtc atgtatcata tacaggtgta tagacttgcg 1200
tctaattgtt tgcatgttgc agttatatga tttgttttag attgtttgtt ccactcatct 1260
aggctgtaaa agggacacta cttattagct tgttgtttaa tctttttatt agtagattat 1320
attggtaatg ttttactaat tattattatg ttatatgtga cttctgctca tgcctgatta 1380
taatcataga tcactgtagt tgattgttga atcatgtgtc aaatacccgt atacataaca 1440
ctacacattt gcttagttgt ttccttaact catgcaaatt gaacaccatg tatgatttgc 1500
atggtgctgt aatgttaaat actacagtcc tgttggtact tgtttagtaa gaatctgctt 1560
catacaacta tatgctatgc ctgatgataa tcatatatct ttgtgtaatt aataattagt 1620
tgactgttga ataatgtatc gagtacatac catggcacaa ttgcttagtc acttccttaa 1680
ccatgcatat tgaactgacc ccttcatgtt ctgctgaatt gttctattct gattagacca 1740
tacatcatgt attgcaatct ttatttgcaa ttgtaatgta atggttcggt tctcaaatgt 1800
taaatgctat agttgtgcta ctttctaatg ttaaatgcta tagctgtgct acttgtaaga 1860
tctgcttcat agtttagtta aattaggatg atgagctttg atgctgtaac tttgtttgat 1920
tatgttcata gttgatcagt ttttgttaga ctcacagtaa cttatggtct cactcttctt 1980
ctggtctttg atgtttgcag cgg 2003
<210> 158
<211> 1361
<212> ДНК
<213> Sorghum bicolor
<400> 158
gtacgcgagt tttcgaatcc cctccagacc cctcgtatgc tttccctgtt cgttttcgtc 60
gtagcgtttg attaggtatg ctttccctgt tcgtgttcgt cgtagggttc gattaggtcg 120
tgtgaggcca tggcctgctg tgataaattt atttgttgtt atatcggatc tgtagtcgat 180
ttgggggtcg tggtgtagat ccgcgggctg tgatgaagtt atttggtgtg attgtgctcg 240
cgtgattctg cgcgttgagc tcgagtagat ctgatggttg gacgaccgat tggttcgttg 300
gctggctgcg ctaaggttgg gctgggctca tgttgcgttc gctgttgcgc gtgattccgc 360
ggatggactt gcgcttgatt gccgccagat cacgttacga ttatgtgatt tcgtttggaa 420
ctttttagat ttgtagcttc tgcttattat atgacagatg cgcctactgc tcatatgcct 480
gtggtaaata atggatggct gtgggtcaaa ctagttgatt gtcgagtcat gtatcatata 540
caggtgtata gacttgcgtc taattgtttg catgttgcag ttatatgatt tgttttagat 600
tgtttgttcc actcatctag gctgtaaaag ggacactact tattagcttg ttgtttaatc 660
tttttattag tagattatat tggtaatgtt ttactaatta ttattatgtt atatgtgact 720
tctgctcatg cctgattata atcatagatc actgtagttg attgttgaat catgtgtcaa 780
atacccgtat acataacact acacatttgc ttagttgttt ccttaactca tgcaaattga 840
acaccatgta tgatttgcat ggtgctgtaa tgttaaatac tacagtcctg ttggtacttg 900
tttagtaaga atctgcttca tacaactata tgctatgcct gatgataatc atatatcttt 960
gtgtaattaa taattagttg actgttgaat aatgtatcga gtacatacca tggcacaatt 1020
gcttagtcac ttccttaacc atgcatattg aactgacccc ttcatgttct gctgaattgt 1080
tctattctga ttagaccata catcatgtat tgcaatcttt atttgcaatt gtaatgtaat 1140
ggttcggttc tcaaatgtta aatgctatag ttgtgctact ttctaatgtt aaatgctata 1200
gctgtgctac ttgtaagatc tgcttcatag tttagttaaa ttaggatgat gagctttgat 1260
gctgtaactt tgtttgatta tgttcatagt tgatcagttt ttgttagact cacagtaact 1320
tatggtctca ctcttcttct ggtctttgat gtttgcagcg g 1361
<210> 159
<211> 1812
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1812)
<223> Реконструированная кодирующая последовательность.
<400> 159
atggtccgtc ctgtagaaac cccaacccgt gaaatcaaaa aactcgacgg cctgtgggca 60
ttcagtctgg atcgcgaaaa ctgtggaatt gatcagcgtt ggtgggaaag cgcgttacaa 120
gaaagccggg caattgctgt gccaggcagt tttaacgatc agttcgccga tgcagatatt 180
cgtaattatg cgggcaacgt ctggtatcag cgcgaagtct ttataccgaa aggttgggca 240
ggccagcgta tcgtgctgcg tttcgatgcg gtcactcatt acggcaaagt gtgggtcaat 300
aatcaggaag tgatggagca tcagggcggc tatacgccat ttgaagccga tgtcacgccg 360
tatgttattg ccgggaaaag tgtacgtatc accgtttgtg tgaacaacga actgaactgg 420
cagactatcc cgccgggaat ggtgattacc gacgaaaacg gcaagaaaaa gcagtcttac 480
ttccatgatt tctttaacta tgccggaatc catcgcagcg taatgctcta caccacgccg 540
aacacctggg tggacgatat caccgtggtg acgcatgtcg cgcaagactg taaccacgcg 600
tctgttgact ggcaggtggt ggccaatggt gatgtcagcg ttgaactgcg tgatgcggat 660
caacaggtgg ttgcaactgg acaaggcact agcgggactt tgcaagtggt gaatccgcac 720
ctctggcaac cgggtgaagg ttatctctat gaactgtgcg tcacagccaa aagccagaca 780
gagtgtgata tctacccgct tcgcgtcggc atccggtcag tggcagtgaa gggcgaacag 840
ttcctgatta accacaaacc gttctacttt actggctttg gtcgtcatga agatgcggac 900
ttgcgtggca aaggattcga taacgtgctg atggtgcacg accacgcatt aatggactgg 960
attggggcca actcctaccg tacctcgcat tacccttacg ctgaagagat gctcgactgg 1020
gcagatgaac atggcatcgt ggtgattgat gaaactgctg ctgtcggctt taacctctct 1080
ttaggcattg gtttcgaagc gggcaacaag ccgaaagaac tgtacagcga agaggcagtc 1140
aacggggaaa ctcagcaagc gcacttacag gcgattaaag agctgatagc gcgtgacaaa 1200
aaccacccaa gcgtggtgat gtggagtatt gccaacgaac cggatacccg tccgcaaggt 1260
gcacgggaat atttcgcgcc actggcggaa gcaacgcgta aactcgaccc gacgcgtccg 1320
atcacctgcg tcaatgtaat gttctgcgac gctcacaccg ataccatcag cgatctcttt 1380
gatgtgctgt gcctgaaccg ttattacgga tggtatgtcc aaagcggcga tttggaaacg 1440
gcagagaagg tactggaaaa agaacttctg gcctggcagg agaaactgca tcagccgatt 1500
atcatcaccg aatacggcgt ggatacgtta gccgggctgc actcaatgta caccgacatg 1560
tggagtgaag agtatcagtg tgcatggctg gatatgtatc accgcgtctt tgatcgcgtc 1620
agcgccgtcg tcggtgaaca ggtatggaat ttcgccgatt ttgcgacctc gcaaggcata 1680
ttgcgcgttg gcggtaacaa gaaagggatc ttcactcgcg accgcaaacc gaagtcggcg 1740
gcttttctgc tgcaaaaacg ctggactggc atgaacttcg gtgaaaaacc gcagcaggga 1800
ggcaaacaat ga 1812
<210> 160
<211> 2001
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(2001)
<223> Реконструированная кодирующая последовательность.
<400> 160
atggtccgtc ctgtagaaac cccaacccgt gaaatcaaaa aactcgacgg cctgtgggca 60
ttcagtctgg atcgcgaaaa ctgtggaatt gatcagcgtt ggtgggaaag cgcgttacaa 120
gaaagccggg caattgctgt gccaggcagt tttaacgatc agttcgccga tgcagatatt 180
cgtaattatg cgggcaacgt ctggtatcag cgcgaagtct ttataccgaa aggttgggca 240
ggccagcgta tcgtgctgcg tttcgatgcg gtcactcatt acggcaaagt gtgggtcaat 300
aatcaggaag tgatggagca tcagggcggc tatacgccat ttgaagccga tgtcacgccg 360
tatgttattg ccgggaaaag tgtacgtaag tttctgcttc tacctttgat atatatataa 420
taattatcat taattagtag taatataata tttcaaatat ttttttcaaa ataaaagaat 480
gtagtatata gcaattgctt ttctgtagtt tataagtgtg tatattttaa tttataactt 540
ttctaatata tgaccaaaat ttgttgatgt gcaggtatca ccgtttgtgt gaacaacgaa 600
ctgaactggc agactatccc gccgggaatg gtgattaccg acgaaaacgg caagaaaaag 660
cagtcttact tccatgattt ctttaactat gccggaatcc atcgcagcgt aatgctctac 720
accacgccga acacctgggt ggacgatatc accgtggtga cgcatgtcgc gcaagactgt 780
aaccacgcgt ctgttgactg gcaggtggtg gccaatggtg atgtcagcgt tgaactgcgt 840
gatgcggatc aacaggtggt tgcaactgga caaggcacta gcgggacttt gcaagtggtg 900
aatccgcacc tctggcaacc gggtgaaggt tatctctatg aactgtgcgt cacagccaaa 960
agccagacag agtgtgatat ctacccgctt cgcgtcggca tccggtcagt ggcagtgaag 1020
ggcgaacagt tcctgattaa ccacaaaccg ttctacttta ctggctttgg tcgtcatgaa 1080
gatgcggact tgcgtggcaa aggattcgat aacgtgctga tggtgcacga ccacgcatta 1140
atggactgga ttggggccaa ctcctaccgt acctcgcatt acccttacgc tgaagagatg 1200
ctcgactggg cagatgaaca tggcatcgtg gtgattgatg aaactgctgc tgtcggcttt 1260
aacctctctt taggcattgg tttcgaagcg ggcaacaagc cgaaagaact gtacagcgaa 1320
gaggcagtca acggggaaac tcagcaagcg cacttacagg cgattaaaga gctgatagcg 1380
cgtgacaaaa accacccaag cgtggtgatg tggagtattg ccaacgaacc ggatacccgt 1440
ccgcaaggtg cacgggaata tttcgcgcca ctggcggaag caacgcgtaa actcgacccg 1500
acgcgtccga tcacctgcgt caatgtaatg ttctgcgacg ctcacaccga taccatcagc 1560
gatctctttg atgtgctgtg cctgaaccgt tattacggat ggtatgtcca aagcggcgat 1620
ttggaaacgg cagagaaggt actggaaaaa gaacttctgg cctggcagga gaaactgcat 1680
cagccgatta tcatcaccga atacggcgtg gatacgttag ccgggctgca ctcaatgtac 1740
accgacatgt ggagtgaaga gtatcagtgt gcatggctgg atatgtatca ccgcgtcttt 1800
gatcgcgtca gcgccgtcgt cggtgaacag gtatggaatt tcgccgattt tgcgacctcg 1860
caaggcatat tgcgcgttgg cggtaacaag aaagggatct tcactcgcga ccgcaaaccg 1920
aagtcggcgg cttttctgct gcaaaaacgc tggactggca tgaacttcgg tgaaaaaccg 1980
cagcagggag gcaaacaatg a 2001
<210> 161
<211> 253
<212> ДНК
<213> Agrobacterium tumefaciens
<400> 161
gatcgttcaa acatttggca ataaagtttc ttaagattga atcctgttgc cggtcttgcg 60
atgattatca tataatttct gttgaattac gttaagcatg taataattaa catgtaatgc 120
atgacgttat ttatgagatg ggtttttatg attagagtcc cgcaattata catttaatac 180
gcgatagaaa acaaaatata gcgcgcaaac taggataaat tatcgcgcgc ggtgtcatct 240
atgttactag atc 253
<210> 162
<211> 210
<212> ДНК
<213> Triticum aestivum
<400> 162
ctgcatgcgt ttggacgtat gctcattcag gttggagcca atttggttga tgtgtgtgcg 60
agttcttgcg agtctgatga gacatctctg tattgtgttt ctttccccag tgttttctgt 120
acttgtgtaa tcggctaatc gccaacagat tcggcgatga ataaatgaga aataaattgt 180
tctgattttg agtgcaaaaa aaaaggaatt 210
<210> 163
<211> 1204
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1204)
<223> Группа химерных транскрипционных регуляторных элементов
экспрессии
<400> 163
ggtccgattg agacttttca acaaagggta atatccggaa acctcctcgg attccattgc 60
ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg aaggtggctc ctacaaatgc 120
catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct ctgccgacag tggtcccaaa 180
gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac cacgtcttca 240
aagcaagtgg attgatgtga tggtccgatt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga 300
aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag 360
gaaggtggct cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc 420
tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa 480
gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg atatctccac tgacgtaagg 540
gatgacgcac aatcccacta tccttcgcaa gacccttcct ctatataagg aagttcattt 600
catttggaga ggacacgctg acaagctgac tctagcagat cctctagaac catcttccac 660
acactcaagc cacactattg gagaacacac agggacaaca caccataaga tccaagggag 720
gcctccgccg ccgccggtaa ccaccccgcc cctctcctct ttctttctcc gttttttttt 780
ccgtctcggt ctcgatcttt ggccttggta gtttgggtgg gcgagaggcg gcttcgtgcg 840
cgcccagatc ggtgcgcggg aggggcggga tctcgcggct ggggctctcg ccggcgtgga 900
tccggcccgg atctcgcggg gaatggggct ctcggatgta gatctgcgat ccgccgttgt 960
tgggggagat gatggggggt ttaaaatttc cgccgtgcta aacaagatca ggaagagggg 1020
aaaagggcac tatggtttat atttttatat atttctgctg cttcgtcagg cttagatgtg 1080
ctagatcttt ctttcttctt tttgtgggta gaatttgaat ccctcagcat tgttcatcgg 1140
tagtttttct tttcatgatt tgtgacaaat gcagcctcgt gcggagcttt tttgtaggta 1200
gaag 1204
<210> 164
<211> 1399
<212> ДНК
<213> Oryza sativa
<400> 164
tcgaggtcat tcatatgctt gagaagagag tcgggatagt ccaaaataaa acaaaggtaa 60
gattacctgg tcaaaagtga aaacatcagt taaaaggtgg tataaagtaa aatatcggta 120
ataaaaggtg gcccaaagtg aaatttactc ttttctacta ttataaaaat tgaggatgtt 180
tttgtcggta ctttgatacg tcatttttgt atgaattggt ttttaagttt attcgctttt 240
ggaaatgcat atctgtattt gagtcgggtt ttaagttcgt ttgcttttgt aaatacagag 300
ggatttgtat aagaaatatc tttagaaaaa cccatatgct aatttgacat aatttttgag 360
aaaaatatat attcaggcga attctcacaa tgaacaataa taagattaaa atagctttcc 420
cccgttgcag cgcatgggta ttttttctag taaaaataaa agataaactt agactcaaaa 480
catttacaaa aacaacccct aaagttccta aagcccaaag tgctatccac gatccatagc 540
aagcccagcc caacccaacc caacccaacc caccccagtc cagccaactg gacaatagtc 600
tccacacccc cccactatca ccgtgagttg tccgcacgca ccgcacgtct cgcagccaaa 660
aaaaaaaaga aagaaaaaaa agaaaaagaa aaaacagcag gtgggtccgg gtcgtggggg 720
ccggaaacgc gaggaggatc gcgagccagc gacgaggccg gccctccctc cgcttccaaa 780
gaaacgcccc ccatcgccac tatatacata cccccccctc tcctcccatc cccccaaccc 840
taccaccacc accaccacca cctccacctc ctcccccctc gctgccggac gacgagctcc 900
tcccccctcc ccctccgccg ccgccgcgcc ggtaaccacc ccgcccctct cctctttctt 960
tctccgtttt tttttccgtc tcggtctcga tctttggcct tggtagtttg ggtgggcgag 1020
aggcggcttc gtgcgcgccc agatcggtgc gcgggagggg cgggatctcg cggctggggc 1080
tctcgccggc gtggatccgg cccggatctc gcggggaatg gggctctcgg atgtagatct 1140
gcgatccgcc gttgttgggg gagatgatgg ggggtttaaa atttccgccg tgctaaacaa 1200
gatcaggaag aggggaaaag ggcactatgg tttatatttt tatatatttc tgctgcttcg 1260
tcaggcttag atgtgctaga tctttctttc ttctttttgt gggtagaatt tgaatccctc 1320
agcattgttc atcggtagtt tttcttttca tgatttgtga caaatgcagc ctcgtgcgga 1380
gcttttttgt aggtagaag 1399
<210> 165
<211> 2181
<212> ДНК
<213> Oryza sativa
<400> 165
gacaacaaca tgcttctcat caacatggag ggaagaggga gggagaaagt gtcgcctggt 60
cacctccatt gtcacactag ccactggcca gctctcccac accaccaatg ccaggggcga 120
gctttagcac agccaccgct tcacctccac caccgcacta ccctagcttc gcccaacagc 180
caccgtcaac gcctcctctc cgtcaacata agagagagag agaagaggag agtagccatg 240
tggggaggag gaatagtaca tggggcctac cgtttggcaa gttattttgg gttgccaagt 300
taggccaata aggggaggga tttggccatc cggttggaaa ggttattggg gtagtatctt 360
tttactagaa ttgtcaaaaa aaaatagttt gagagccatt tggagaggat gttgcctgtt 420
agaggtgctc ttaggacatc aaattccata aaaacatcag aaaaattctc tcgatgaaga 480
tttataacca ctaaaactgc cctcaattcg aagggagttc aaaacaatta aaatcatgtt 540
cgaattgagt ttcaatttca ctttaacccc tttgaaatct caatggtaaa acatcaaccc 600
gtcaggtagc atggttcttt ttattccttt caaaaagagt taattacaaa cagaatcaaa 660
actaacagtt aggcccaagg cccatccgag caaacaatag atcatgggcc aggcctgcca 720
ccaccctccc cctcctggct cccgctcttg aatttcaaaa tccaaaaata tcggcacgac 780
tggccgccga cggagcgggc ggaaaatgac ggaacaaccc ctcgaattct accccaacta 840
cgcccaccaa cccacacgcc actgacaatc cggtcccacc cttgtgggcc cacctacaag 900
cgagacgtca gtcgctcgca gcaaccagtg ggcccacctc ccagtgagcg gcgggtagat 960
ctggactctt acccacccac actaaacaaa acggcatgaa tattttgcac taaaaccctc 1020
agaaaaattc cgatattcca aaccagtaca gttcctgacc gttggaggag ccaaagtgga 1080
gcggagtgta aaattgggaa acttaatcga gggggttaaa cgcaaaaacg ccgaggcgcc 1140
tcccgctcta tagaaagggg aggagtggga ggtggaaacc ctaccacacc gcagagaaag 1200
gcgtcttcgt actcgcctct ctccgcgccc tcctccgccg ccgctcgccg ccgttcgtct 1260
ccgccgccac cggctagcca tccaggtaaa acaaacaaaa acggatctga tgcttccatt 1320
cctccgtttc tcgtagtagc gcgcttcgat ctgtgggtgg atctgggtga tcctggggtg 1380
tggttcgttc tgtttgatag atctgtcggt ggatctggcc ttctgtggtt gtcgatgtcc 1440
ggatctgcgt tttgatcagt ggtagttcgt ggatctggcg aaatgttttg gatctggcag 1500
tgagacgcta agaatcggga aatgatgcaa tattaggggg gtttcggatg gggatccact 1560
gaattagtct gtctccctgc tgataatctg ttcctttttg gtagatctgg ttagtgtatg 1620
tttgtttcgg atagatctga tcaatgcttg tttgtttttt caaattttct acctaggttg 1680
tataggaatg gcatgcggat ctggttggat tgccatgatc cgtgctgaaa tgcccctttg 1740
gttgatggat cttgatattt tactgctgtt cacctagatt tgtactcccg tttatactta 1800
atttgttgct tattatgaat agatctgtaa cttaggcaca tgtatggacg gagtatgtgg 1860
atctgtagta tgtacattgc tgcgagctaa gaactatttc agagcaagca cagaaaaaaa 1920
tatttagaca gattgggcaa ctatttgatg gtctttggta tcatgctttg tagtgctcgt 1980
ttctgcgtag taatcttttg atctgatctg aagataggtg ctattatatt cttaaaggtc 2040
attagaacgc tatctgaaag gctgtattat gtggattggt tcacctgtga ctccctgttc 2100
gtcttgtctt gataaatcct gtgataaaaa aaattcttaa ggcgtaattt gttgaaatct 2160
tgttttgtcc tatgcagcct g 2181
<210> 166
<211> 1653
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1653)
<223> Реконструированная кодирующая последовательность.
<400> 166
atggaagacg ccaaaaacat aaagaaaggc ccggcgccat tctatcctct agaggatgga 60
accgctggag agcaactgca taaggctatg aagagatacg ccctggttcc tggaacaatt 120
gcttttacag atgcacatat cgaggtgaac atcacgtacg cggaatactt cgaaatgtcc 180
gttcggttgg cagaagctat gaaacgatat gggctgaata caaatcacag aatcgtcgta 240
tgcagtgaaa actctcttca attctttatg ccggtgttgg gcgcgttatt tatcggagtt 300
gcagttgcgc ccgcgaacga catttataat gaacgtgaat tgctcaacag tatgaacatt 360
tcgcagccta ccgtagtgtt tgtttccaaa aaggggttgc aaaaaatttt gaacgtgcaa 420
aaaaaattac caataatcca gaaaattatt atcatggatt ctaaaacgga ttaccaggga 480
tttcagtcga tgtacacgtt cgtcacatct catctacctc ccggttttaa tgaatacgat 540
tttgtaccag agtcctttga tcgtgacaaa acaattgcac tgataatgaa ttcctctgga 600
tctactgggt tacctaaggg tgtggccctt ccgcatagaa ctgcctgcgt cagattctcg 660
catgccagag atcctatttt tggcaatcaa atcattccgg atactgcgat tttaagtgtt 720
gttccattcc atcacggttt tggaatgttt actacactcg gatatttgat atgtggattt 780
cgagtcgtct taatgtatag atttgaagaa gagctgtttt tacgatccct tcaggattac 840
aaaattcaaa gtgcgttgct agtaccaacc ctattttcat tcttcgccaa aagcactctg 900
attgacaaat acgatttatc taatttacac gaaattgctt ctgggggcgc acctctttcg 960
aaagaagtcg gggaagcggt tgcaaaacgc ttccatcttc cagggatacg acaaggatat 1020
gggctcactg agactacatc agctattctg attacacccg agggggatga taaaccgggc 1080
gcggtcggta aagttgttcc attttttgaa gcgaaggttg tggatctgga taccgggaaa 1140
acgctgggcg ttaatcagag aggcgaatta tgtgtcagag gacctatgat tatgtccggt 1200
tatgtaaaca atccggaagc gaccaacgcc ttgattgaca aggatggatg gctacattct 1260
ggagacatag cttactggga cgaagacgaa cacttcttca tagttgaccg cttgaagtct 1320
ttaattaaat acaaaggata tcaggtggcc cccgctgaat tggaatcgat attgttacaa 1380
caccccaaca tcttcgacgc gggcgtggca ggtcttcccg acgatgacgc cggtgaactt 1440
cccgccgccg ttgttgtttt ggagcacgga aagacgatga cggaaaaaga gatcgtggat 1500
tacgtcgcca gtcaagtaac aaccgcgaaa aagttgcgcg gaggagttgt gtttgtggac 1560
gaagtaccga aaggtcttac cggaaaactc gacgcaagaa aaatcagaga gatcctcata 1620
aaggccaaga agggcggaaa gtccaaattg taa 1653
<210> 167
<211> 936
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(936)
<223> Реконструированная кодирующая последовательность.
<400> 167
atggcttcca aggtgtacga ccccgagcaa cgcaaacgca tgatcactgg gcctcagtgg 60
tgggctcgct gcaagcaaat gaacgtgctg gactccttca tcaactacta tgattccgag 120
aagcacgccg agaacgccgt gatttttctg catggtaacg ctgcctccag ctacctgtgg 180
aggcacgtcg tgcctcacat cgagcccgtg gctagatgca tcatccctga tctgatcgga 240
atgggtaagt ccggcaagag cgggaatggc tcatatcgcc tcctggatca ctacaagtac 300
ctcaccgctt ggttcgagct gctgaacctt ccaaagaaaa tcatctttgt gggccacgac 360
tggggggctt gtctggcctt tcactactcc tacgagcacc aagacaagat caaggccatc 420
gtccatgctg agagtgtcgt ggacgtgatc gagtcctggg acgagtggcc tgacatcgag 480
gaggatatcg ccctgatcaa gagcgaagag ggcgagaaaa tggtgcttga gaataacttc 540
ttcgtcgaga ccatgctccc aagcaagatc atgcggaaac tggagcctga ggagttcgct 600
gcctacctgg agccattcaa ggagaagggc gaggttagac ggcctaccct ctcctggcct 660
cgcgagatcc ctctcgttaa gggaggcaag cccgacgtcg tccagattgt ccgcaactac 720
aacgcctacc ttcgggccag cgacgatctg cctaagatgt tcatcgagtc cgaccctggg 780
ttcttttcca acgctattgt cgagggagct aagaagttcc ctaacaccga gttcgtgaag 840
gtgaagggcc tccacttcag ccaggaggac gctccagatg aaatgggtaa gtacatcaag 900
agcttcgtgg agcgcgtgct gaagaacgag cagtaa 936
<210> 168
<211> 675
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(675)
<223> Группа химерных транскрипционных регуляторных элементов
экспрессии
<400> 168
ggtccgatgt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga aacctcctcg gattccattg 60
cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag gaaggtggct cctacaaatg 120
ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa 180
agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc 240
aaagcaagtg gattgatgtg atggtccgat gtgagacttt tcaacaaagg gtaatatccg 300
gaaacctcct cggattccat tgcccagcta tctgtcactt tattgtgaag atagtggaaa 360
aggaaggtgg ctcctacaaa tgccatcatt gcgataaagg aaaggccatc gttgaagatg 420
cctctgccga cagtggtccc aaagatggac ccccacccac gaggagcatc gtggaaaaag 480
aagacgttcc aaccacgtct tcaaagcaag tggattgatg tgatatctcc actgacgtaa 540
gggatgacgc acaatcccac tatccttcgc aagacccttc ctctatataa ggaagttcat 600
ttcatttgga gaggaaccat cttccacaca ctcaagccac actattggag aacacacagg 660
gacaacacac cataa 675
<210> 169
<211> 622
<212> ДНК
<213> Вирус мозаики цветной капусты
<400> 169
ggtccgattg agacttttca acaaagggta atatccggaa acctcctcgg attccattgc 60
ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg aaggtggctc ctacaaatgc 120
catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct ctgccgacag tggtcccaaa 180
gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac cacgtcttca 240
aagcaagtgg attgatgtga tggtccgatt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga 300
aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag 360
gaaggtggct cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc 420
tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa 480
gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg atatctccac tgacgtaagg 540
gatgacgcac aatcccacta tctagacgca agacccttcc tctatataag gaagttcatt 600
tcatttggag aggacacgct ga 622
<210> 170
<211> 1446
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1446)
<223> Группа химерных транскрипционных регуляторных элементов
экспрессии
<400> 170
ggtccgattg agacttttca acaaagggta atatccggaa acctcctcgg attccattgc 60
ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg aaggtggctc ctacaaatgc 120
catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct ctgccgacag tggtcccaaa 180
gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac cacgtcttca 240
aagcaagtgg attgatgtga tggtccgatt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga 300
aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag 360
gaaggtggct cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc 420
tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa 480
gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg atatctccac tgacgtaagg 540
gatgacgcac aatcccacta tccttcgcaa gacccttcct ctatataagg aagttcattt 600
catttggaga ggacacgctg acaagctgac tctagcagat ctaccgtctt cggtacgcgc 660
tcactccgcc ctctgccttt gttactgcca cgtttctctg aatgctctct tgtgtggtga 720
ttgctgagag tggtttagct ggatctagaa ttacactctg aaatcgtgtt ctgcctgtgc 780
tgattacttg ccgtcctttg tagcagcaaa atatagggac atggtagtac gaaacgaaga 840
tagaacctac acagcaatac gagaaatgtg taatttggtg cttagcggta tttatttaag 900
cacatgttgg tgttataggg cacttggatt cagaagtttg ctgttaattt aggcacaggc 960
ttcatactac atgggtcaat agtataggga ttcatattat aggcgatact ataataattt 1020
gttcgtctgc agagcttatt atttgccaaa attagatatt cctattctgt ttttgtttgt 1080
gtgctgttaa attgttaacg cctgaaggaa taaatataaa tgacgaaatt ttgatgttta 1140
tctctgctcc tttattgtga ccataagtca agatcagatg cacttgtttt aaatattgtt 1200
gtctgaagaa ataagtactg acagtatttt gatgcattga tctgcttgtt tgttgtaaca 1260
aaatttaaaa ataaagagtt tcctttttgt tgctctcctt acctcctgat ggtatctagt 1320
atctaccaac tgacactata ttgcttctct ttacatacgt atcttgctcg atgccttctc 1380
cctagtgttg accagtgtta ctcacatagt ctttgctcat ttcattgtaa tgcagatacc 1440
aagcgg 1446
<210> 171
<211> 1165
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1165)
<223> Группа химерных транскрипционных регуляторных элементов
экспрессии
<400> 171
ggtccgatgt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga aacctcctcg gattccattg 60
cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag gaaggtggct cctacaaatg 120
ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa 180
agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc 240
aaagcaagtg gattgatgtg atggtccgat gtgagacttt tcaacaaagg gtaatatccg 300
gaaacctcct cggattccat tgcccagcta tctgtcactt tattgtgaag atagtggaaa 360
aggaaggtgg ctcctacaaa tgccatcatt gcgataaagg aaaggccatc gttgaagatg 420
cctctgccga cagtggtccc aaagatggac ccccacccac gaggagcatc gtggaaaaag 480
aagacgttcc aaccacgtct tcaaagcaag tggattgatg tgatatctcc actgacgtaa 540
gggatgacgc acaatcccac tatccttcgc aagacccttc ctctatataa ggaagttcat 600
ttcatttgga gaggacacgc tgacaagctg actctagcag atcctctaga accatcttcc 660
acacactcaa gccacactat tggagaacac acagggacaa cacaccataa gatccaaggg 720
aggcctccgc cgccgccggt aaccaccccg cccctctcct ctttctttct ccgttttttt 780
ttccgtctcg gtctcgatct ttggccttgg tagtttgggt gggcgagagg cggcttcgtg 840
cgcgcccaga tcggtgcgcg ggaggggcgg gatctcgcgg ggaatggggc tctcggatgt 900
agatctgcga tccgccgttg ttgggggaga tgatgggggg tttaaaattt gcgccgtgct 960
aaacaagatc aggaagaggg gaaaagggca ctatggttta tatttttata tatttctgct 1020
gcttcgtcag gcttagatgt gctagatctt tctttcttct ttttgtgggt agaatttgaa 1080
tccctcagca ttgttcatcg gtagtttttc ttttcatgat ttgtgacaaa tgcagcctcg 1140
tgcggagctt ttttgtaggt agaag 1165
<210> 172
<211> 1751
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1751)
<223> Группа химерных транскрипционных регуляторных элементов
экспрессии
<400> 172
tcgaggtcat tcatatgctt gagaagagag tcgggatagt ccaaaataaa acaaaggtaa 60
gattacctgg tcaaaagtga aaacatcagt taaaaggtgg tataaagtaa aatatcggta 120
ataaaaggtg gcccaaagtg aaatttactc ttttctacta ttataaaaat tgaggatgtt 180
tttgtcggta ctttgatacg tcatttttgt atgaattggt ttttaagttt attcgctttt 240
ggaaatgcat atctgtattt gagtcgggtt ttaagttcgt ttgcttttgt aaatacagag 300
ggatttgtat aagaaatatc tttagaaaaa cccatatgct aatttgacat aatttttgag 360
aaaaatatat attcaggcga attagcttag gcctcatcgt tgaagatgcc tctgccgaca 420
gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa gacgttccaa 480
ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg atatctccac tgacgtaagg gatgacgcac 540
aatcccacta tccttcgagg cctcatcgtt gaagatgcct ctgccgacag tggtcccaaa 600
gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac cacgtcttca 660
aagcaagtgg attgatgtga tatctccact gacgtaaggg atgacgcaca atcccactat 720
ccttcgaagc taattctcac aatgaacaat aataagatta aaatagcttt cccccgttgc 780
agcgcatggg tattttttct agtaaaaata aaagataaac ttagactcaa aacatttaca 840
aaaacaaccc ctaaagttcc taaagcccaa agtgctatcc acgatccata gcaagcccag 900
cccaacccaa cccaacccaa cccaccccag tccagccaac tggacaatag tctccacacc 960
cccccactat caccgtgagt tgtccgcacg caccgcacgt ctcgcagcca aaaaaaaaaa 1020
gaaagaaaaa aaagaaaaag aaaaaacagc aggtgggtcc gggtcgtggg ggccggaaac 1080
gcgaggagga tcgcgagcca gcgacgaggc cggccctccc tccgcttcca aagaaacgcc 1140
ccccatcgcc actatataca tacccccccc tctcctccca tccccccaac cctaccacca 1200
ccaccaccac cacctccacc tcctcccccc tcgctgccgg acgacgagct cctcccccct 1260
ccccctccgc cgccgccgcg ccggtaacca ccccgcccct ctcctctttc tttctccgtt 1320
tttttttccg tctcggtctc gatctttggc cttggtagtt tgggtgggcg agaggcggct 1380
tcgtgcgcgc ccagatcggt gcgcgggagg ggcgggatct cgcggctggg gctctcgccg 1440
gcgtggatcc ggcccggatc tcgcggggaa tggggctctc ggatgtagat ctgcgatccg 1500
ccgttgttgg gggagatgat ggggggttta aaatttccgc cgtgctaaac aagatcagga 1560
agaggggaaa agggcactat ggtttatatt tttatatatt tctgctgctt cgtcaggctt 1620
agatgtgcta gatctttctt tcttcttttt gtgggtagaa tttgaatccc tcagcattgt 1680
tcatcggtag tttttctttt catgatttgt gacaaatgca gcctcgtgcg gagctttttt 1740
gtaggtagaa g 1751
<210> 173
<211> 1101
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(1101)
<223> Группа химерных транскрипционных регуляторных элементов
экспрессии
<400> 173
ggtccgattg agacttttca acaaagggta atatccggaa acctcctcgg attccattgc 60
ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg aaggtggctc ctacaaatgc 120
catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct ctgccgacag tggtcccaaa 180
gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac cacgtcttca 240
aagcaagtgg attgatgtga tggtccgatt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga 300
aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag 360
gaaggtggct cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc 420
tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa 480
gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg atatctccac tgacgtaagg 540
gatgacgcac aatcccacta tccttcgcaa gacccttcct ctatataagg aagttcattt 600
catttggaga ggacacgctg accgccgccg ccggtaacca ccccgcccct ctcctctttc 660
tttctccgtt tttttttccg tctcggtctc gatctttggc cttggtagtt tgggtgggcg 720
agaggcggct tcgtgcgcgc ccagatcggt gcgcgggagg ggcgggatct cgcggctggg 780
gctctcgccg gcgtggatcc ggcccggatc tcgcggggaa tggggctctc ggatgtagat 840
ctgcgatccg ccgttgttgg gggagatgat ggggggttta aaatttccgc cgtgctaaac 900
aagatcagga agaggggaaa agggcactat ggtttatatt tttatatatt tctgctgctt 960
cgtcaggctt agatgtgcta gatctttctt tcttcttttt gtgggtagaa tttgaatccc 1020
tcagcattgt tcatcggtag tttttctttt catgatttgt gacaaatgca gcctcgtgcg 1080
gagctttttt gtaggtagaa g 1101
<210> 174
<211> 200
<212> ДНК
<213> Вирус мозаики цветной капусты
<400> 174
aaatcaccag tctctctcta caaatctatc tctctctatt tttctccaga ataatgtgtg 60
agtagttccc agataaggga attagggttc ttatagggtt tcgctcatgt gttgagcata 120
taagaaaccc ttagtatgta tttgtatttg taaaatactt ctatcaataa aatttctaat 180
tcctaaaacc aaaatccagt 200
<210> 175
<211> 300
<212> ДНК
<213> Oryza sativa
<400> 175
attaatcgat cctccgatcc cttaattacc ataccattac accatgcatc aatatccata 60
tatatataaa ccctttcgca cgtacttata ctatgttttg tcatacatat atatgtgtcg 120
aacgatcgat ctatcactga tatgatatga ttgatccatc agcctgatct ctgtatcttg 180
ttatttgtat accgtcaaat aaaagtttct tccacttgtg ttaataatta gctactctca 240
tctcatgaac cctatatata actagtttaa tttgctgtca attgaacatg atgatcgatg 300
<210> 176
<211> 623
<212> ДНК
<213> Вирус мозаики цветной капусты
<400> 176
ggtccgatgt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga aacctcctcg gattccattg 60
cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag gaaggtggct cctacaaatg 120
ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa 180
agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc 240
aaagcaagtg gattgatgtg atggtccgat gtgagacttt tcaacaaagg gtaatatccg 300
gaaacctcct cggattccat tgcccagcta tctgtcactt tattgtgaag atagtggaaa 360
aggaaggtgg ctcctacaaa tgccatcatt gcgataaagg aaaggccatc gttgaagatg 420
cctctgccga cagtggtccc aaagatggac ccccacccac gaggagcatc gtggaaaaag 480
aagacgttcc aaccacgtct tcaaagcaag tggattgatg tgatatctcc actgacgtaa 540
gggatgacgc acaatcccac tatccttcgc aagacccttc ctctatataa ggaagttcat 600
ttcatttgga gaggacacgc tga 623
<210> 177
<211> 8
<212> ДНК
<213> Вирус мозаики цветной капусты
<400> 177
acacgctg 8
<210> 178
<211> 804
<212> ДНК
<213> Zea mays
<400> 178
accgtcttcg gtacgcgctc actccgccct ctgcctttgt tactgccacg tttctctgaa 60
tgctctcttg tgtggtgatt gctgagagtg gtttagctgg atctagaatt acactctgaa 120
atcgtgttct gcctgtgctg attacttgcc gtcctttgta gcagcaaaat atagggacat 180
ggtagtacga aacgaagata gaacctacac agcaatacga gaaatgtgta atttggtgct 240
tagcggtatt tatttaagca catgttggtg ttatagggca cttggattca gaagtttgct 300
gttaatttag gcacaggctt catactacat gggtcaatag tatagggatt catattatag 360
gcgatactat aataatttgt tcgtctgcag agcttattat ttgccaaaat tagatattcc 420
tattctgttt ttgtttgtgt gctgttaaat tgttaacgcc tgaaggaata aatataaatg 480
acgaaatttt gatgtttatc tctgctcctt tattgtgacc ataagtcaag atcagatgca 540
cttgttttaa atattgttgt ctgaagaaat aagtactgac agtattttga tgcattgatc 600
tgcttgtttg ttgtaacaaa atttaaaaat aaagagtttc ctttttgttg ctctccttac 660
ctcctgatgg tatctagtat ctaccaactg acactatatt gcttctcttt acatacgtat 720
cttgctcgat gccttctccc tagtgttgac cagtgttact cacatagtct ttgctcattt 780
cattgtaatg cagataccaa gcgg 804
<210> 179
<211> 1396
<212> ДНК
<213> Oryza sativa
<400> 179
tcgaggtcat tcatatgctt gagaagagag tcgggatagt ccaaaataaa acaaaggtaa 60
gattacctgg tcaaaagtga aaacatcagt taaaaggtgg tataaagtaa aatatcggta 120
ataaaaggtg gcccaaagtg aaatttactc ttttctacta ttataaaaat tgaggatgtt 180
tttgtcggta ctttgatacg tcatttttgt atgaattggt ttttaagttt attcgctttt 240
ggaaatgcat atctgtattt gagtcgggtt ttaagttcgt ttgcttttgt aaatacagag 300
ggatttgtat aagaaatatc tttagaaaaa cccatatgct aatttgacat aatttttgag 360
aaaaatatat attcaggcga attctcacaa tgaacaataa taagattaaa atagctttcc 420
cccgttgcag cgcatgggta ttttttctag taaaaataaa agataaactt agactcaaaa 480
catttacaaa aacaacccct aaagttccta aagcccaaag tgctatccac gatccatagc 540
aagcccagcc caacccaacc caacccagcc caccccagtc cagccaactg gacaatagtc 600
tccacacccc cccactatca ccgtgagttg tccgcacgca ccgcacgtct cgcagccaaa 660
aaaaaaaaga aagaaaaaaa agaaaaagaa aaaacagcag gtgggtccgg gtcgtggggg 720
ccggaaacgc gaggaggatc gcgagccagc gacgaggccg gccctccctc cgcttccaaa 780
gaaacgcccc ccatcgccac tatatacata cccccccctc tcctcccatc cccccaaccc 840
taccaccacc accaccacca cctccacctc ctcccccctc gctgccggac gacgagctcc 900
tcccccctcc ccctccgccg ccgccgcgcc ggtaaccacc ccgcccctct cctctttctt 960
tctccgtttt tttttccgtc tcggtctcga tctttggcct tggtagtttg ggtgggcgag 1020
aggcggcttc gtgccgccca gatcggtgcg cgggaggggc gggatctcgc ggctggctct 1080
cgcccccgtg gatccggccc ggatctcgcg gggaatgggg ctctcggatg tagatctgcg 1140
atccgccgtt gttggggccg atgatggggc ccttaaaatt tccgccgtgc taaacaagat 1200
caggaagagg ggaaaagggc actatggttt atatttttat atatttctgc tgcttcgtca 1260
ggcttagatg tgctagatct ttctttcttc tttttgtggg tagaatttaa tccctcagca 1320
ttgttcatcg gtagtttttc ttttcatgat tcgtgacaaa tgcagcctcg tgcggacgtt 1380
tttttgtagg tagaag 1396
<210> 180
<211> 2625
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 180
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ccgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cccgttgccg 1500
caagactcag atcagattcc gatccccagt tcttccccaa tcaccttgtg gtctctcgtg 1560
tcgcggttcc cagggacgcc tccggctcgt cgctcgacag cgatctccgc cccagcaagg 1620
tatagattca gttccttgct ccgatcccaa tctggttgag atgttgctcc gatgcgactt 1680
gattatgtca tatatctgcg gtttgcaccg atctgaagcc tagggtttct cgagcgaccc 1740
agttatttgc aatttgcgat ttgctcgttt gttgcgcagc gtagtttatg tttggagtaa 1800
tcgaggattt gtatgcggcg tcggcgctac ctgcttaatc acgccatgtg acgcggttac 1860
ttgcagaggc tgggttctgt tatgtcgtga tctaagaatc tagattaggc tcagtcgttc 1920
ttgctgtcga ctagtttgtt ttgatatcca tgtagtacaa gttacttaaa atttaggtcc 1980
aatatatttt gcatgctttt ggcctgttat tcttgccaac aagttgtcct ggtaaaaagt 2040
agatgtgaaa gtcacgtatt gggacaaatt gatggtttag tgctatagtt ctatagttct 2100
gtgatacatc tatctgattt tttttggtct attggtgcct aacttatctg aaaatcatgg 2160
aacatgaggc tagtttgatc atggtttagt tcattgtgat taataatgta tgatttagta 2220
gctattttgg tgatcgtgtc attttatttg tgaatggaat cattgtatgt aaatgaagct 2280
agttcagggg ttacgatgta gctggctttg tattctaaag gctgctatta ttcatccatc 2340
gatttcacct atatgtaatc cagagctttt gatgtgaaat ttgtctgatc cttcactagg 2400
aaggacagaa cattgttaat attttggcac atctgtctta ttctcatcct ttgtttgaac 2460
atgttagcct gttcaaacag atactgttgt aatgtcctag ttatataggt acatatgtgt 2520
tctctattga gtttatggac ttttgtgtgt gaagttatat ttcattttgc tcaaaactca 2580
tgtttgcaag ctttctgaca ttattctatt gttctgaaac aggtg 2625
<210> 181
<211> 2008
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 181
gtcgtgcccc tctctagaga taaagagcat tgcatgtcta aagtataaaa aattaccaca 60
tatttttttg tcacacttat ttgaagtgta gtttatctat ctctatacat atatttaaac 120
ttcactctac aaataatata gtctataata ctaaaataat attagtgttt tagaggatca 180
tataaataaa ctgctagaca tggtctaaag gataattgaa tattttgaca atctacagtt 240
ttatcttttt agtgtgcatg tgatctctct gttttttttg caaatagctt gacctatata 300
atacttcatc cattttatta gtacatccat ttaggattta gggttgatgg tttctataga 360
ctaattttta gtacatccat tttattcttt ttagtctcta aattttttaa aactaaaact 420
ctattttagt tttttattta ataatttaga tataaaatga aataaaataa attgactaca 480
aataaaacaa atacccttta agaaataaaa aaactaagca aacatttttc ttgtttcgag 540
tagataatga caggctgttc aacgccgtcg acgagtctaa cggacaccaa ccagcgaacc 600
agcagcgtcg cgtcgggcca agcgaagcag acggcacggc atctctgtag ctgcctctgg 660
acccctctcg agagttccgc tccaccgttg gacttgctcc gctgtcggca tccagaaatt 720
gcgtggcgga gcggcagacg tgaggcggca cggcaggcgg cctcttcctc ctctcacggc 780
accggcagct acgggggatt cctttcccac cgctccttcg ctttcccttc ctcgcccgcc 840
gtaataaata gacaccccct ccacaccctc tttccccaac ctcgtgttcg ttcggagcgc 900
acacacacgc aaccagatct cccccaaatc cagccgtcgg cacctccgct tcaaggtacg 960
ccgctcatcc tccccccccc cctctctcta ccttctctag atcggcgatc cggtccatgg 1020
ttagggcccg gtagttctac ttctgttcat gtttgtgtta gagcaaacat gttcatgttc 1080
atgtttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag atcggagtag gatactgttt 1140
caagctacct ggtggattta ttaattttgt atctgtatgt gtgtgccata catcttcata 1200
gttacgagtt taagatgatg gatggaaata tcgatctagg ataggtatac atgttgatgc 1260
gggttttact gatgcatata cagagatgct ttttttctcg cttggttgtg atgatatggt 1320
ctggttgggc ggtcgttcta gatcggagta gaatactgtt tcaaactacc tggtggattt 1380
attaaaggat aaagggtcgt tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg 1440
atttattaaa ggatctgtat gtatgtgcct acatcttcat agttacgagt ttaagatgat 1500
ggatggaaat atcgatctag gataggtata catgttgatg cgggttttac tgatgcatat 1560
acagagatgc tttttttcgc ttggttgtga tgatgtggtc tggttgggcg gtcgttctag 1620
atcggagtag aatactgttt caaactacct ggtggattta ttaattttgt atctttatgt 1680
gtgtgccata catcttcata gttacgagtt taagatgatg gatggaaata ttgatctagg 1740
ataggtatac atgttgatgt gggttttact gatgcatata catgatggca tatgcggcat 1800
ctattcatat gctctaacct tgagtaccta tctattataa taaacaagta tgttttataa 1860
ttattttgat cttgatatac ttggatgatg gcatatgcag cagctatatg tggatttttt 1920
agccctgcct tcatacgcta tttatttgct tggtactgtt tcttttgtcc gatgctcacc 1980
ctgttgttgg gtgatacttc tgcagcgg 2008
<210> 182
<211> 1053
<212> ДНК
<213> Zea mays subsp. Mexicana
<400> 182
gtacgccgct catcctcccc ccccccctct ctctaccttc tctagatcgg cgatccggtc 60
catggttagg gcccggtagt tctacttctg ttcatgtttg tgttagagca aacatgttca 120
tgttcatgtt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt tctagatcgg agtaggatac 180
tgtttcaagc tacctggtgg atttattaat tttgtatctg tatgtgtgtg ccatacatct 240
tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatatcgat ctaggatagg tatacatgtt 300
gatgcgggtt ttactgatgc atatacagag atgctttttt tctcgcttgg ttgtgatgat 360
atggtctggt tgggcggtcg ttctagatcg gagtagaata ctgtttcaaa ctacctggtg 420
gatttattaa aggataaagg gtcgttctag atcggagtag aatactgttt caaactacct 480
ggtggattta ttaaaggatc tgtatgtatg tgcctacatc ttcatagtta cgagtttaag 540
atgatggatg gaaatatcga tctaggatag gtatacatgt tgatgcgggt tttactgatg 600
catatacaga gatgcttttt ttcgcttggt tgtgatgatg tggtctggtt gggcggtcgt 660
tctagatcgg agtagaatac tgtttcaaac tacctggtgg atttattaat tttgtatctt 720
tatgtgtgtg ccatacatct tcatagttac gagtttaaga tgatggatgg aaatattgat 780
ctaggatagg tatacatgtt gatgtgggtt ttactgatgc atatacatga tggcatatgc 840
ggcatctatt catatgctct aaccttgagt acctatctat tataataaac aagtatgttt 900
tataattatt ttgatcttga tatacttgga tgatggcata tgcagcagct atatgtggat 960
tttttagccc tgccttcata cgctatttat ttgcttggta ctgtttcttt tgtccgatgc 1020
tcaccctgtt gttgggtgat acttctgcag cgg 1053
<210> 183
<211> 2625
<212> ДНК
<213> Setaria italica
<400> 183
actgccgcga cacgcctcac tggcgggagg gctccgagcg ctctctcccc ggcggccggc 60
ggagcagcga tctggattgg agagaataga ggaaagagag ggaaaaggag agagatagcg 120
caaagagctg aaaagataag gttgtgcggg ctgtggtgat tagaggacca ctaatccctc 180
catctcctaa tgacgcggtg cccaagacca gtgccgcggc acaccagcgt ctaagtgaac 240
ttccgctaac cttccggtca ttgcgcctga aagatgtcat gtggcgaggc ccccctctca 300
gtagattgcc aactgcctac cgtgccactc ttccatgcat gattgctccc gtctatcccg 360
tttctcacaa cagatagaca acagtaagca tcactaaagc aagcatgtgt agaaccttaa 420
aaaaaggctt atactaccag tatactatca accagcatgc cgtttttgaa gtatccagga 480
ttagaagctt ctactgcgct tttatattat agctgtggac ccgtggtaac ctttctcttt 540
tggcgcttgc ttaatctcgg ccgtgctggt ccatgcttag gcactaggca gagatagagc 600
cgggggtgaa tggggctaaa gctcagctgc tcgaggggcc gtgggctggt ttccactagc 660
ctacagctgt gccacgtgcg gccgcgcaag ccgaagcaag cacgctgagc cgttggacag 720
cttgtcataa tgccattacg tggattacac gtaactggcc ctgtaactac tcgttcggcc 780
atcatcaaac gacgacgtcc gctaggcgac gacacgggta atgcacgcag ccacccaggc 840
gcgcgcgcta gcggagcacg gtcaggtgac acgggcgtcg tgacgcttcc gagttgaagg 900
ggttaacgcc agaaacagtg tttggccagg gtatgaacat aacaaaaaat attcacacga 960
aagaatggaa gtatggagct gctactgtgt aaatgccaag caggaaactc acgcccgcta 1020
acatccaacg gccaacagct cgacgtgccg gtcagcagag catcggaaca ctggtgattg 1080
gtggagccgg cagtatgcgc cccagcacgg ccgaggtggt ggtggcccgt ggccctgctg 1140
tctgcgcggc tcgggacaac ttgaaactgg gccaccgcct cgtcgcaact cgcaacccgt 1200
tggcggaaga aaggaatggc tcgtaggggc ccgggtagaa tcgaagaatg ttgcgctggg 1260
cttcgattca cataacatgg gcctgaagct ctaaaacgac ggcccggtcg ccgcgcgatg 1320
gaaagagacc ggatcctcct cgtgaattct ggaaggccac acgagagcga cccaccaccg 1380
acgcggagga gtcgtgcgtg gtccaacacg gccggcgggc tgggctgcga ccttaaccag 1440
caaggcacgc cacgacccgc cccgccctcg aggcataaat accctcccat cccgttgccg 1500
caagactcag atcagattcc gatccccagt tcttccccaa tcaccttgtg gtctctcgtg 1560
tcgcggttcc cagggacgcc tccggctcgt cgctcgacag cgatctccgc cccagcaagg 1620
tatagattca gttccttgct ccgatcccaa tctggttgag atgttgctcc gatgcgactt 1680
gattatgtca tatatctgcg gtttgcaccg atctgaagcc tagggtttct cgagcgaccc 1740
agttatttgc aatttgcgat ttgctcgttt gttgcgcagc gtagtttatg tttggagtaa 1800
tcgaggattt gtatgcggcg tcggcgctac ctgcttaatc acgccatgtg acgcggttac 1860
ttgcagaggc tgggttctgt tatgtcgtga tctaagaatc tagattaggc tcagtcgttc 1920
ttgctgtcga ctagtttgtt ttgatatcca tgtagtacaa gttacttaaa atttaggtcc 1980
aatatatttt gcatgctttt ggcctgttat tcttgccaac aagttgtcct ggtaaaaagt 2040
agatgtgaaa gtcacgtatt gggacaaatt gatggtttag tgctatagtt ctatagttct 2100
gtgatacatc tatctgattt tttttggtct attggtgcct aacttatctg aaaatcatgg 2160
aacatgaggc tagtttgatc atggtttagt tcattgtgat taataatgta tgatttagta 2220
gctattttgg tgatcgtgtc attttatttg tgaatggaat cattgtatgt aaatgaagct 2280
agttcagggg ttacgatgta gctggctttg tattctaaag gctgctatta ttcatccatc 2340
gatttcacct atatgtaatc cagagctttt gatgtgaaat ttgtctgatc cttcactagg 2400
aaggacagaa cattgttaat attttggcac atctgtctta ttctcatcct ttgtttgaac 2460
atgttagcct gttcaaacag atactgttgt aatgtcctag ttatataggt acatatgtgt 2520
tctctattga gtttatggac ttttgtgtgt gaagttatat ttcattttgc tcaaaactca 2580
tgtttgcaag ctttctgaca ttattctatt gttctgaaac aggtg 2625
<---
Claims (20)
1. Молекула ДНК для инициации транскрипции гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, содержащая последовательность ДНК, выбранную из группы, состоящей из:
a) последовательности по меньшей мере с 95% идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 157, 66 и 158, где последовательность имеет промоторную активность; и
b) последовательности, содержащей любую из SEQ ID NO: 157, 66 и 158;
где указанная последовательность ДНК функционально связана с гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулой.
2. Молекула ДНК по п.1, где указанная последовательность имеет по меньшей мере 97-процентную идентичность последовательности с последовательностью ДНК любой из SEQ ID NO: 157, 66 и 158 и имеет промоторную активность.
3. Молекула ДНК по п.1, где указанная последовательность имеет по меньшей мере 99-процентную идентичность последовательности с последовательностью ДНК любой из SEQ ID NO: 157, 66 и 158 и имеет промоторную активность.
4. Молекула ДНК по п.1, где эта гетерологичная транскрибируемая полинуклеотидная молекула содержит представляющий агрономический интерес ген.
5. Молекула ДНК по п.4, где этот представляющий агрономический интерес ген придает устойчивость к гербицидам в растениях.
6. Молекула ДНК по п.4, где этот представляющий агрономический интерес ген придает устойчивость к вредителям в растениях.
7. Трансгенная клетка растения для экспрессии гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, содержащая молекулу ДНК по п.1.
8. Трансгенная клетка растения по п.7, где указанной трансгенной клеткой растения является клетка однодольного растения.
9. Трансгенная клетка растения по п.7, где указанной трансгенной клеткой растения является клетка двудольного растения.
10. Трансгенное растение для экспрессии гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, и содержащее молекулу ДНК по п.1.
11. Часть трансгенного растения по п.10 для экспрессии гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, и содержащая молекулу ДНК по п.1.
12. Трансгенное семя для получения растения для экспрессии гетерологичной транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, где это семя содержит молекулу ДНК по п.1.
13. Способ получения товарного продукта, включающий получение трансгенного растения, содержащего молекулу ДНК по п.1, и получение из него товарного продукта, где указанный товарный продукт содержит молекулу ДНК по п.1.
14. Способ по п.13, где этим товарным продуктом является концентрат белка, изолят белка, зерно, крахмал, семена, мучка, мука, биомасса или масло из семян растений.
15. Пищевой продукт, полученный из трансгенного растения по п. 10.
16. Пищевой продукт по п.15, где этим пищевым продуктом является концентрат белка, изолят белка, зерно, крахмал, семена, мучка, мука, биомасса или масло семян растений.
17. Способ экспрессии транскрибируемой полинуклеотидной молекулы, предусматривающий получение трансгенного растения, содержащего молекулу ДНК по п.1, и культивирование растения, где экспрессируется транскрибируемый полинуклеотид.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161467875P | 2011-03-25 | 2011-03-25 | |
US61/467,875 | 2011-03-25 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013147604A Division RU2644205C2 (ru) | 2011-03-25 | 2012-03-21 | Регуляторные элементы растений и их применение |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2017145549A RU2017145549A (ru) | 2019-02-19 |
RU2017145549A3 RU2017145549A3 (ru) | 2021-10-15 |
RU2800424C2 true RU2800424C2 (ru) | 2023-07-21 |
Family
ID=
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2326167C2 (ru) * | 2002-12-27 | 2008-06-10 | Сентро Де Инженьериа Генетика И Биотекнологиа | Искусственный промотор для экспрессии последовательностей днк в растительных клетках |
WO2009126470A2 (en) * | 2008-04-07 | 2009-10-15 | Monsanto Technology Llc | Plant regulatory elements and uses thereof |
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2326167C2 (ru) * | 2002-12-27 | 2008-06-10 | Сентро Де Инженьериа Генетика И Биотекнологиа | Искусственный промотор для экспрессии последовательностей днк в растительных клетках |
WO2009126470A2 (en) * | 2008-04-07 | 2009-10-15 | Monsanto Technology Llc | Plant regulatory elements and uses thereof |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2017204438B2 (en) | Plant regulatory elements and uses thereof | |
EP2752491A2 (en) | Plant regulatory elements and uses thereof | |
RU2800424C2 (ru) | Регуляторные элементы растений и их применение | |
RU2800423C2 (ru) | Регуляторные элементы растений и их применение | |
RU2800425C2 (ru) | Регуляторные элементы растений и их применение | |
RU2800430C2 (ru) | Регуляторные элементы растений и их применение |