RU2790962C1

RU2790962C1 - Method for prediction of severe haemorrhagic fever with renal syndrome at early stages of disease

Info

Publication number: RU2790962C1
Application number: RU2022116619A
Authority: RU
Inventors: Михаил Федорович Иванов; Ирина Петровна Балмасова; Александр Викторович Жестков; Дмитрий Юрьевич Константинов; Сергей Николаевич Чемидронов
Filing date: 2022-06-20
Publication date: 2023-02-28

Abstract

FIELD: immunology and infectology.

SUBSTANCE: invention can be used to predict a severe course of haemorrhagic fever with renal syndrome in the early stages of the disease. In the blood serum of a patient with haemorrhagic fever with renal syndrome is determined in the first week of the disease, as well as the level of urea and alanine aminotransferase (ALT) activity, as well as the percentage of T-cells with CD3+CD8+CD314+ and CD3+CD8+FoxP3+ phenotypes among blood lymphocytes (CD45+). Based on these indicators, the prognosis criterion of severe disease (PCSD HFRS) is calculated according to the formula: PCSD HFRS = 2.015 + 0.072 * [ALT] + 0.516 * [urea] + 0.364 * [CD3+CD8+CD314+] - 0.381 * [CD3+CD8+FoxP3+]. With PCSD HFRS values above 19, the development of a severe course of haemorrhagic fever with renal syndrome is predicted.

EFFECT: method enables early prediction of the risk of developing a severe course of haemorrhagic fever with renal syndrome by determining a wide range of laboratory findings, including immunological parameters.

1 cl, 3 dwg, 1 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, в частности, к иммунологии и инфектологии и может использоваться для прогнозирования тяжелого течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом в ранние периоды заболевания.The invention relates to medicine, in particular to immunology and infectology, and can be used to predict the severe course of hemorrhagic fever with renal syndrome in the early stages of the disease.

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) - острое вирусное природно-очаговое заболевание, характеризующееся системным поражением мелких сосудов, геморрагическим диатезом, гемодинамическими расстройствами и своеобразным поражением почек по типу острого интерстициального нефрита с развитием острой почечной недостаточности [1, 2]. Hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) is an acute viral natural focal disease characterized by systemic damage to small vessels, hemorrhagic diathesis, hemodynamic disorders, and a peculiar kidney lesion similar to acute interstitial nephritis with the development of acute renal failure [1, 2].

ГЛПС распространена по всему миру и относится к группе инфекционных заболеваний с наивысшим приоритетом для эпиднадзора и эпидемиологических исследований [3]. В Российской Федерации ГЛПС по уровню заболеваемости занимает первое место среди природно-очаговых болезней [4], при этом природные очаги на территории России характеризуются высокой эпидемической активностью и являются одними из самых напряженных в мире [5]. HFRS is distributed worldwide and belongs to the group of infectious diseases with the highest priority for surveillance and epidemiological studies [3]. In the Russian Federation, HFRS ranks first among natural focal diseases in terms of incidence [4], while natural foci in Russia are characterized by high epidemic activity and are among the most intense in the world [5].

Возбудителями ГЛПС являются хантавирусы, относящиеся к категории одноцепочечных РНК-содержащих вирусов и принадлежащие к отряду Bunyavirales [6]. На территории России встречается ГЛПС, этиологически связанная с 6 типами хантавирусов: Puumala, Hantaan, Seоul, Amur, Dobrava, Sochi [1, 7]. На территории Среднего Поволжья, где проводилось данное исследование, встречается только тип Puumala [8], а основным природным резервуаром является европейская рыжая полевка [9]. В последние годы описано несколько новых видов хозяев-резервуаров, несущих хантавирусы, кроме того, участились сообщения о случаях с тяжелым или атипичным клиническим течением [3].The causative agents of HFRS are hantaviruses, which belong to the category of single-stranded RNA viruses and belong to the order Bunyavirales [6]. On the territory of Russia, HFRS occurs, etiologically associated with 6 types of hantaviruses: Puumala , Hantaan , Seoul, Amur, Dobrava, Sochi [1, 7]. In the territory of the Middle Volga region, where this study was conducted, only the Puumala type is found [8], and the European bank vole is the main natural reservoir [9]. In recent years, several new types of reservoir hosts carrying hantaviruses have been described, in addition, case reports with severe or atypical clinical course have become more frequent [3].

Особенности тропизма хантавирусов к клеткам человека определяет их проникновение, в первую очередь, в клетки эндотелия системы кровотока и моноцитов/макрофагов [10], в связи с чем можно предполагать, что именно эти клеточные мишени определяют распространение возбудителя геморрагической лихорадки с почечным синдромом по организму без необходимости миграции в барьерные ткани, а также его способность оказывать воздействие на иммунные процессы. В результате при ГЛПС развивается системное воспаление, сопровождающееся "цитокиновым штормом" и другими иммунными нарушениями [11], что определяет летальность при данном инфекционном заболевании, колеблющуюся от 1% до 40% [1, 12]. Features of tropism of hantaviruses to human cells determines their penetration, first of all, into the endothelial cells of the bloodstream system and monocytes/macrophages [10], and therefore it can be assumed that it is these cell targets that determine the spread of the causative agent of hemorrhagic fever with renal syndrome throughout the body without the need to migrate to barrier tissues, as well as its ability to influence immune processes. As a result, HFRS develops systemic inflammation, accompanied by a "cytokine storm" and other immune disorders [11], which determines the lethality in this infectious disease, ranging from 1% to 40% [1, 12].

Поражение вирусом эндотелия сосудов усугубляется присоединением уже в начале болезни нарушений со стороны системы гемостаза и приводит к развитию диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС-синдрома) [13]. При этом для тяжелого течения заболевания характерна выраженная тромбоцитопения [14]. Немалое значение в развитии тяжелого течения ГЛПС придается поражению почек, которое проявляется острой почечной недостаточностью и сопровождается олигоурией вплоть до полной анурии, протеинурии, креатининемии [14]. Так, анализ результатов биопсии почек больных при данном заболевании показал, что у таких пациентов в значительной степени страдает тубуло-интерстициальная ткань [15] в связи нарушением под влиянием вирусного возбудителя экспрессии белка ZO-1, определяющего плотные межклеточные контакты, максимальную приближенность клеток почечных клубочков друг к другу и их "сшивание" между собой. Падение экспрессии этого белка приводит к значительным нарушениям структуры и функции почечных тканей [16].Damage to the vascular endothelium by the virus is exacerbated by the addition of disorders in the hemostasis system already at the onset of the disease and leads to the development of disseminated intravascular coagulation (DIC) [13]. At the same time, severe thrombocytopenia is typical for the severe course of the disease [14]. Considerable importance in the development of severe HFRS is given to kidney damage, which is manifested by acute renal failure and is accompanied by oliguria up to complete anuria, proteinuria, creatininemia [14]. Thus, an analysis of the results of a kidney biopsy of patients with this disease showed that in such patients tubulo-interstitial tissue suffers to a large extent [15] due to a violation under the influence of a viral pathogen of the expression of the ZO-1 protein, which determines tight intercellular contacts, the maximum proximity of the cells of the renal glomeruli to each other and their "stitching" among themselves. A decrease in the expression of this protein leads to significant disorders in the structure and function of renal tissues [16].

Все эти патогенетические особенности вызывают особый интерес исследователей с точки зрения попыток прогнозировать тяжелое течение заболевания в процессе его ранней диагностики [13, 17], что очень важно для предотвращения в дальнейшем тяжелых осложнений и летальных исходов [18, 19]. Указанная проблема приобретает особое значение и в связи с тем, что, по оценке современных исследователей, эффективной специфической терапии ГЛПС пока не существует, а состояние вакцинопрофилактики оставляет желать лучшего [19, 20]. All these pathogenetic features are of particular interest to researchers in terms of attempts to predict the severe course of the disease in the process of its early diagnosis [13, 17], which is very important for preventing further severe complications and deaths [18, 19]. This problem is of particular importance due to the fact that, according to modern researchers, there is no effective specific therapy for HFRS yet, and the state of vaccination leaves much to be desired [19, 20].

В настоящее время показано, что тяжесть заболевания может быть связана с уровнями различных биомаркеров, которые могут служить прогностическими показателями. Было обнаружено, что биологические маркеры, такие как интерлейкин-6, пентраксин-3, идоламин-2,3-диоксигеназа, растворимый рецептор активатора плазминогена урокиназного типа и GATA-3, коррелируют с тяжестью течения ГЛПС [21, 22, 23]. С-реактивный белок и прокальцитонин используются, в частности, для различения бактериальных и вирусных инфекций и обычно обнаруживаются в высоких уровнях у пациентов с системными бактериальными инфекциями, но имеют также прогностическое значение и у пациентов с ГЛПС [24, 25]. Параллельно в острой фазе ГЛПС у пациентов обнаруживаются типовые лабораторные сдвиги, такие как анемия, лейкоцитоз, тромбоцитопения, протеинурия, гематурия, повышение активности печеночных ферментов и креатинина в сыворотке крови [26]. Высокий уровень лейкоцитов в сыворотке крови, азота мочевины крови (АМК), креатининфосфокиназы (КФК), С-реактивного белка (СРБ), протромбинового времени (ПВ), активированного частичного тромбопластинового времени (аЧТВ), D-димера и МНО (Международное нормализованное отношение) являются прогностическими факторами, повышающими риск смертности при ГЛПС [27]. Глюкозурия встречается относительно редко, но при ее наличии можно предсказать более тяжелое течение заболевания у пациентов с острой Puumala-инфекцией [28].It has now been shown that the severity of the disease can be associated with the levels of various biomarkers that can serve as prognostic indicators. Biological markers such as interleukin-6, pentraxin-3, idolamine-2,3-dioxygenase, soluble urokinase-type plasminogen activator receptor, and GATA-3 have been found to correlate with the severity of HFRS [21, 22, 23]. C-reactive protein and procalcitonin are used, in particular, to distinguish between bacterial and viral infections and are usually found at high levels in patients with systemic bacterial infections, but are also of prognostic value in patients with HFRS [24, 25]. In parallel, in the acute phase of HFRS, patients show typical laboratory changes, such as anemia, leukocytosis, thrombocytopenia, proteinuria, hematuria, increased activity of liver enzymes and serum creatinine [26]. High levels of leukocytes in blood serum, blood urea nitrogen (BUN), creatinine phosphokinase (CPK), C-reactive protein (CRP), prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT), D-dimer and INR (International Normalized Ratio ) are prognostic factors that increase the risk of mortality in HFRS [27]. Glucosuria is relatively rare, but its presence can predict a more severe course of the disease in patients with acute Puumala infection [28].

Еще одним неспецифическим маркером, связанным с прогнозом геморрагических лихорадок, в том числе ГЛПС, является High Mobility Group Box 1 (HMGB1) [26]. HMGB1 представляет собой негистоновый нуклеосомный белок, который связывает и изгибает ДНК. Он действует как фактор ядерного ремоделирования [29, 30]. Высокие уровни HMGB1 при вирусных инфекциях коррелировали с повышенной проницаемостью сосудов, интенсивностью симптомов и частотой вторичной инфекции [31, 32].Another nonspecific marker associated with the prognosis of hemorrhagic fevers, including HFRS, is High Mobility Group Box 1 (HMGB1) [26]. HMGB1 is a non-histone nucleosomal protein that binds and bends DNA. It acts as a nuclear remodeling factor [29, 30]. High HMGB1 levels in viral infections correlated with increased vascular permeability, symptom intensity, and secondary infection rates [31, 32].

При описании иммунологических признаков тяжелого течения ГЛПС обращается внимание на низкий уровень ТФР-β в сыворотке крови на ранней стадии хантавирусной инфекции [33], что косвенно свидетельствует о снижении секреторной функции регуляторных Т-клеток, хотя вопрос об их как протективной роли, так и нежелательных проявлений функции при тяжелом течении ГЛПС еще не решен [34, 35]. Описана также генетически детерминированная низкая продукция ФНО-альфа, которая была связана с некоторыми параметрами, свидетельствующими о более тяжелом клиническом течении хантавирусной инфекции Puumala у людей, возможно, за счет нарушения активации ФНО-альфа-зависимых противовирусных механизмов, что, в свою очередь, способно привести к снижению элиминация хантавируса [36].When describing the immunological signs of severe HFRS, attention is drawn to the low level of TGF-β in blood serum at an early stage of hantavirus infection [33], which indirectly indicates a decrease in the secretory function of regulatory T cells, although the question of their protective role and undesirable manifestations of function in severe HFRS has not yet been resolved [34, 35]. A genetically determined low production of TNF-alpha has also been described, which has been associated with some parameters indicating a more severe clinical course of Puumala hantavirus infection in humans, possibly due to impaired activation of TNF-alpha-dependent antiviral mechanisms, which, in turn, is capable of lead to a decrease in the elimination of hantavirus [36].

При идентификации биологических маркеров тяжелого течения ГЛПС определенный интерес представляют специфические иммунные механизмы, вызывающие тромбоцитопению. Недавно было показано, что специфичный для остановки клеточной пролиферации белок 6 (Gas6) и рецепторы ТАМ (Tyro3, Axl и Mer) играют важную роль в иммунной регуляции, а высокие уровни Gas6 в плазме могут предсказывать тяжесть заболевания [37]. К иммунным биомаркерам относится и CD163 как рецептор поглотителя гемоглобина для гаптоглобин-гемоглобиновых комплексов, который экспрессируется моноцитами/макрофагами и часто выделяется в виде растворимого CD163 в ответ на воспалительные стимулы. Сообщается, что этот рецептор-мусорщик ослабляет воспалительную реакцию, а высокие уровни растворимого CD163 в плазме, которые, как считается, отражают общий уровень экспрессии CD163 и могут служить предикторами тяжести заболевания [38]. В то же время необходимо подчеркнуть, что эффективность указанных маркеров установлена при ГЛПС, вызванной вирусом Hantaan. When identifying biological markers of severe HFRS, specific immune mechanisms that cause thrombocytopenia are of particular interest. Recently, cell proliferation arrest-specific protein 6 (Gas6) and TAM receptors (Tyro3, Axl, and Mer) have been shown to play an important role in immune regulation, and high levels of Gas6 in plasma can predict disease severity [37]. CD163 is also an immune biomarker as a hemoglobin scavenger receptor for haptoglobin-hemoglobin complexes, which is expressed by monocytes/macrophages and is often released as soluble CD163 in response to inflammatory stimuli. This scavenger receptor has been reported to attenuate the inflammatory response, and high plasma levels of soluble CD163, thought to reflect overall CD163 expression levels, may be predictive of disease severity [38]. At the same time, it must be emphasized that the effectiveness of these markers has been established in HFRS caused by the Hantaan virus.

В отечественной патентной базе содержится изобретение, рекомендующее в острую стадию болезни одновременное проведение транскраниальной допплерографии и ультразвукового дуплексного сканирования с регистрацией кровотоков в бассейнах средней мозговой артерии и почечной артерии и последующим расчетом церебрально-ренального показателя. При значении этого показателя больше 0,9 прогнозируют возможность развития сосудистой патологии мозга в реконвалесцентном периоде, а при значении меньше 0,9 данная патология не развивается [39]. The domestic patent base contains an invention that recommends simultaneous transcranial dopplerography and ultrasound duplex scanning in the acute stage of the disease with registration of blood flows in the basins of the middle cerebral artery and renal artery and subsequent calculation of the cerebro-renal index. If the value of this indicator is more than 0.9, the possibility of developing brain vascular pathology in the convalescent period is predicted, and if the value is less than 0.9, this pathology does not develop [39].

Запатентован способ, включающий определение уровня простагландина Е₂в плазме крови больного геморрагической лихорадкой с почечным синдромом. Его снижение до 18,19 - 26,18 пг/мл оценивают как тяжелую степень течения, снижение уровня до 29,84 - 57,25 пг/мл - как среднетяжелую, а снижение уровня до 100,0 - 113,0 пг/мл - как легкую степень тяжести течения заболевания [40].A method has been patented, including the determination of the level of prostaglandin E ₂ in the blood plasma of a patient with hemorrhagic fever with renal syndrome. Its decrease to 18.19 - 26.18 pg / ml is assessed as a severe course, a decrease in the level to 29.84 - 57.25 pg / ml - as moderate, and a decrease in the level to 100.0 - 113.0 pg / ml - as a mild severity of the course of the disease [40].

Для оценки тяжести течения ГЛПС проводят определение уровня конечных стабильных метаболитов оксида азота (NOx) в цельной крови. При его значении от 39,6 до 86,0 мкмоль/л регистрируют среднетяжелую форму ГЛПС, при значении NOx от 86,7 до 141,5 мкмоль/л - тяжелую форму заболевания, а от 88,2 до 128,6 мкмоль/л на фоне выраженной клинической картины - как осложненное течение заболевания [41].To assess the severity of the course of HFRS, the level of final stable metabolites of nitric oxide (NOx) in whole blood is determined. With its value from 39.6 to 86.0 µmol/l, a moderate form of HFRS is recorded, with a NOx value of 86.7 to 141.5 µmol/l, a severe form of the disease, and from 88.2 to 128.6 µmol/l against the background of a pronounced clinical picture - as a complicated course of the disease [41].

Сущность еще одного изобретения заключается в том, что исследуют кровь больного тяжелой формой ГЛПС в олигоурическом периоде, определяют липидный индекс в нейтрофильных лейкоцитах и при показателе 237±2,01 в указанном периоде прогнозируют летальный исход, а показатель выше 310±1,53 предполагает выздоровление [42]. The essence of another invention lies in the fact that the blood of a patient with a severe form of HFRS in the oliguric period is examined, the lipid index in neutrophilic leukocytes is determined, and at an indicator of 237 ± 2.01 in the specified period, a lethal outcome is predicted, and an indicator above 310 ± 1.53 suggests recovery [42].

Для прогноза риска развития тяжелой формы ГЛПС из лимфоцитов периферической венозной крови выделяют ДНК, проводят ПЦР анализ полиморфных локусов CYP1A1 и GSTP1. При обнаружении гетерозиготного генотипа AG гена GSTP1 или комбинации генотипов 1A2C/AG генов CYP1A1 и GSTP1 прогнозируют высокий риск развития тяжелой формы ГЛПС [43]. To predict the risk of developing a severe form of HFRS, DNA is isolated from peripheral venous blood lymphocytes, PCR analysis of polymorphic loci CYP1A1 and GSTP1 is performed. When a heterozygous AG genotype of the GSTP1 gene or a combination of 1A2C/AG genotypes of the CYP1A1 and GSTP1 genes is detected, a high risk of developing a severe form of HFRS is predicted [43].

Существует также способ оценки тяжести течения ГЛПС, включающий определение маркера дисфункции эндотелия сосудов в крови, где в плазме крови в качестве маркера дисфункции эндотелия сосудов определяют концентрацию антигена ингибитора активаторов плазминогена 1 типа (ИАП-1) в лихорадочный период болезни. Значение концентрации антигена ИАП-1 от 341,2 до 570,0 нг/мл оценивают как показатель среднетяжелой формы заболевания, от 240,4 до 320,1 нг/мл - тяжелой формы заболевания без осложнений, от 138,3 до 75,5 нг/мл - как предиктор тяжелой формы заболевания с осложненным течением [44].There is also a method for assessing the severity of HFRS, including the determination of a marker of vascular endothelial dysfunction in the blood, where in the blood plasma, as a marker of vascular endothelial dysfunction, the concentration of plasminogen activator inhibitor antigen type 1 antigen (PAI-1) is determined during the febrile period of the disease. The value of the concentration of the PAI-1 antigen from 341.2 to 570.0 ng / ml is estimated as an indicator of the moderate form of the disease, from 240.4 to 320.1 ng / ml - a severe form of the disease without complications, from 138.3 to 75.5 ng/ml - as a predictor of a severe form of the disease with a complicated course [44].

Предложена оценка тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом по содержанию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в крови. Среднетяжелая форма геморрагической лихорадки с почечным синдромом определяется повышением уровня ЦИК до 6,4-10,0×10⁴/л. Признаком тяжелой формы заболевания без осложнений служит повышение уровня ЦИК до 10,7-14,6×10⁴/л. Тяжелая форма геморрагической лихорадки с почечным синдромом и осложнениями связана с повышением уровня ЦИК до 14,9-21,0×10⁴/л на фоне выраженной клинической картины [45].An assessment of the severity of hemorrhagic fever with renal syndrome was proposed based on the content of circulating immune complexes (CIC) in the blood. The moderate form of hemorrhagic fever with renal syndrome is determined by an increase in the CEC level to 6.4-10.0×10 ⁴ /l. A sign of a severe form of the disease without complications is an increase in the level of the CEC to 10.7-14.6×10 ⁴ /l. A severe form of hemorrhagic fever with renal syndrome and complications is associated with an increase in the CEC level to 14.9-21.0×10 ⁴ /l against the background of a pronounced clinical picture [45].

Прототипом данного изобретения может служить способ прогнозирования тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом путем проведения общего и биохимического исследования крови с определением гематокрита, относительного содержания сегментоядерных и палочкоядерных лейкоцитов и моноцитов, концентрации креатинина и С-реактивного белка. Вычисляют значения дискриминантных функций классификации степеней тяжести ГЛПС по формулам:The prototype of this invention can serve as a method for predicting the severity of hemorrhagic fever with renal syndrome by conducting a general and biochemical blood test with the determination of hematocrit, the relative content of segmented and stab leukocytes and monocytes, the concentration of creatinine and C-reactive protein. Calculate the values of discriminant functions for classifying the severity of HFRS according to the formulas:

где KF₁ - значение функции классификации легкой формы ГЛПС; KF₂ - значение функции классификации среднетяжелой формы ГЛПС; KF₃ - значение функции классификации тяжелой формы ГЛПС; x₁ - гематокрит, %; х₂ - относительное содержание сегментоядерных лейкоцитов, %; х₃ - относительное содержание палочкоядерных лейкоцитов, %; x₄ - относительное содержание моноцитов, %; x₅ - концентрация креатинина, мкмоль/л; x₆ - концентрация C-реактивного белка, мг/л. where KF ₁ - the value of the classification function of mild HFRS; KF ₂ - the value of the classification function of the moderate form of HFRS; KF ₃ - the value of the classification function of severe HFRS; x ₁ - hematocrit,%; x ₂ - the relative content of segmented leukocytes,%; x ₃ - the relative content of stab leukocytes,%; x ₄ - the relative content of monocytes,%; x ₅ - creatinine concentration, µmol/l; x ₆ - concentration of C-reactive protein, mg/l.

Общность прототипа с заявляемым изобретением заключается в оценке тяжести течения ГЛПС на основе не единичных параметров, а с точки зрения интегрального подхода с учетом целой совокупности лабораторных данных, обработанных методом статистического анализа. В то же время особенностью заявляемого изобретения является ориентация не только на общепринятые лабораторные показатели, но и учет иммунной реакции на патологический процесс, а также иной способ статистической обработки полученных данных.The commonality of the prototype with the claimed invention is to assess the severity of HFRS on the basis of not single parameters, but from the point of view of an integral approach, taking into account the whole set of laboratory data processed by statistical analysis. At the same time, a feature of the claimed invention is the focus not only on generally accepted laboratory parameters, but also taking into account the immune response to the pathological process, as well as another way of statistical processing of the data obtained.

Целью настоящего изобретения служила разработка способа раннего прогнозирования риска развития тяжелого течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом на основе широкого спектра лабораторных данных, включая иммунологические показатели. The aim of the present invention was to develop a method for early prediction of the risk of developing severe hemorrhagic fever with renal syndrome based on a wide range of laboratory data, including immunological parameters.

Для получения технического результата были проведены сравнительные исследования крови 65 больных ГЛПС, проходивших стационарное лечение в клинике инфекционных болезней ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, среди которых у 53 человек (81,5%) заболевание, начиная с олигоурического периода, приобретало среднетяжелое течение, а у 12 человек (18,5%) - тяжелое. Всем проводилось определение величин рутинных лабораторных показателей (клинический и биохимический анализ крови и мочи), осуществлялось фенотипирование лимфоцитов крови путем оригинального подбора моноклональных антител для использования метода проточной цитофлуориметрии на приборе BD FACSCanto II (Becton Dickinson, США) после автоматизированной пробоподготовки цельной крови с помощью станции автоматической пробоподготовки BD FACS Sample Prep Assistant II (Becton Dickinson, США), а также устанавливался цитокиновый профиль плазмы крови методом иммуноферментного анализа с использованием микропланшетного ридера «Dynex MRX II» (Dynex technologies, USA) в соответствии с инструкциями по применению приборов, реактивов и моноклональных антител. Лабораторные исследования выполнялись в лихорадочный период ГЛПС (первый-пятый дни болезни), то есть до появления патогномоничных симптомов заболевания. Результаты анализировались путем статистического сравнения данных больных, у которых впоследствии заболевание принимало либо среднетяжелый, либо тяжелый характер. Статистическая обработка данных проводилась на основе пакета статистических программ SPSS, версия 21. To obtain a technical result, comparative blood tests were carried out in 65 patients with HFRS who underwent inpatient treatment at the clinic of infectious diseases of the Samara State Medical University of the Ministry of Health of Russia, among which in 53 people (81.5%) the disease, starting from the oligouric period, acquired a moderate course, and in 12 people (18.5%) - severe. All of them underwent determination of the values of routine laboratory parameters (clinical and biochemical analysis of blood and urine), phenotyping of blood lymphocytes was carried out by the original selection of monoclonal antibodies for using the flow cytometry method on the BD FACSCanto II device (Becton Dickinson, USA) after automated sample preparation of whole blood using the station automatic sample preparation BD FACS Sample Prep Assistant II (Becton Dickinson, USA), and the cytokine profile of blood plasma was determined by enzyme immunoassay using a Dynex MRX II microplate reader (Dynex technologies, USA) in accordance with the instructions for the use of instruments, reagents and monoclonal antibodies. Laboratory studies were performed during the feverish period of HFRS (the first to fifth days of illness), that is, before the appearance of pathognomonic symptoms of the disease. The results were analyzed by statistical comparison of data from patients in whom the disease subsequently became either moderate or severe. Statistical data processing was carried out on the basis of the SPSS statistical software package, version 21.

Результаты определения и статистического анализа полученных данных с учетом тяжести течения ГЛПС в лихорадочный период заболевания представлены в таблице 1 и на рисунке 1, при этом на рисунке показаны проценты отклонения показателей при тяжелом течении ГЛПС от показателей при среднетяжелом течении. В результате анализа были отобраны показатели, показывающие достоверность различий между группами с разной перспективой развития тяжелого течения. К их числу принадлежат:The results of the determination and statistical analysis of the data obtained, taking into account the severity of HFRS during the febrile period of the disease, are presented in Table 1 and Figure 1, while the figure shows the percentage deviation of indicators in severe HFRS from those in moderate course. As a result of the analysis, indicators were selected that show the reliability of differences between groups with different prospects for the development of a severe course. Among them are:

- % моноцитов среди лейкоцитов крови;-% of monocytes among blood leukocytes;

- активность аланинаминотрансферазы (АЛТ) в крови;- activity of alanine aminotransferase (ALT) in the blood;

- активность аспартатаминотрансферазы (АСТ) в крови;- activity of aspartate aminotransferase (AST) in the blood;

- уровень мочевины крови;- blood urea level;

- уровень креатинина крови;- blood creatinine level;

- содержание белка в моче;- protein content in urine;

- количество лейкоцитов в моче;- the number of leukocytes in the urine;

- количество выщелоченных эритроцитов в моче; - the number of leached erythrocytes in the urine;

- относительное число Т-хелперов (CD3+CD4+) в крови;- relative number of T-helpers (CD3+CD4+) in the blood;

- относительное и абсолютное число цитотоксических Т-лимфоцитов (CD3+CD8+) в крови;- relative and absolute number of cytotoxic T-lymphocytes (CD3+CD8+) in the blood;

- относительное и абсолютное число цитотоксических Т-лимфоцитов, экспрессирующих активирующие NKG2D рецепторы (CD3+CD8+CD314+) в крови;- relative and absolute number of cytotoxic T-lymphocytes expressing activating NKG2D receptors (CD3+CD8+CD314+) in blood;

- относительное и абсолютное число регуляторных Т-клеток, экспрессирующих молекулы CD8 (СD3+CD8+FoxP3+), в крови;- relative and absolute number of regulatory T cells expressing CD8 molecules (CD3+CD8+FoxP3+) in blood;

- уровень ИЛ-6 в крови;- the level of IL-6 in the blood;

- уровень ИЛ-1β в крови.- the level of IL-1β in the blood.

Все эти 17 показателей были использованы в качестве независимых переменных для проведения регрессионного анализа, в ходе которого зависимой переменной выступала тяжесть заболевания, а принципом отбора показателей – их исследование в лихорадочный период ГЛПС. В результате было получено уравнение линейной регрессии следующего вида:All these 17 indicators were used as independent variables for regression analysis, in which the dependent variable was the severity of the disease, and the principle of selecting indicators was their study during the febrile period of HFRS. As a result, a linear regression equation of the following form was obtained:

ПКТТ ГЛПС = 2,015 + 0,072 * [АЛТ] + 0,516 * [мочевина] + 0,364 * [СD3+CD8+CD314+] - 0,381 * [CD3+CD8+FoxP3+],PCTT HFRS = 2.015 + 0.072 * [ALT] + 0.516 * [urea] + 0.364 * [CD3+CD8+CD314+] - 0.381 * [CD3+CD8+FoxP3+],

где ПКТТ ГЛПС - прогностический критерий тяжелого течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом, * - знак умножения, АЛТ - активность аланинаминотрансферазы в крови в ЕД/л, мочевина - уровень мочевины в крови в ммоль/л, СD3+CD8+CD314+ – процент СD3+CD8+CD314+ Т-клеток среди лимфоцитов крови, CD3+CD8+FoxP3+ – процент CD3+CD8+FoxP3+ клеток среди лимфоцитов крови.where PCTT HFRS is a prognostic criterion for a severe course of hemorrhagic fever with renal syndrome, * is a multiplication sign, ALT is the activity of alanine aminotransferase in the blood in units/l, urea is the level of urea in the blood in mmol/l, CD3+CD8+CD314+ is the percentage of CD3+ CD8+CD314+ T-cells among blood lymphocytes, CD3+CD8+FoxP3+ – percentage of CD3+CD8+FoxP3+ cells among blood lymphocytes.

Как следует из полученной формулы, из 17 использованных параметров статистической программой было отобрано только 4 показателя, которые и вошли в состав уравнения регрессии для расчета прогностического критерия тяжести течения ГЛПС (ПКТТ). Подставляя в уравнение числовые значения каждого показателя у конкретного больного в лихорадочный период заболевания (первые 3-5 суток от начала появления симптомов), получается числовое значение ПКТТ для данного больного. As follows from the obtained formula, out of 17 parameters used, only 4 indicators were selected by the statistical program, which were included in the regression equation for calculating the prognostic criterion for the severity of HFRS (PCTT). Substituting into the equation the numerical values of each indicator in a particular patient during the febrile period of the disease (the first 3-5 days from the onset of symptoms), the numerical value of PCTT for this patient is obtained.

Чтобы определить критериальные значения ПКТТ ГЛПС, при которых тяжелое течение заболевания становится наиболее вероятным, проводилось сравнение 95%-ных доверительных интервалов этого коэффициента при среднетяжелом и тяжелом течении. Прогностическая значимость такого сравнения устанавливалась путем построения ROC-кривой, отражающей соотношение чувствительности и специфичности теста в форме линейной регрессии. Количественным выражением прогностической значимости в этих случаях служит площадь под ROC-кривой (AUC). При значениях AUC ≤ 0,5 тест как прогностически значимый не рассматривается, при значениях AUC 0,6-0,7 прогностическую значимость принято считать умеренной, при величинах 0,71-0,8 - тест высоко значим, а выше 0,8 - его значимость очень высокая при максимальных значениях AUC = 1,0 [46, 47]. 95%-ные доверительные интервалы критерия ПКТТ ГЛПС при среднетяжелом и тяжелом течении заболевания с обозначением прогностического критерия и ROC-кривая прогностической значимости теста представлены на рисунке 2.To determine the criterion values of HFRS PCTT, at which the severe course of the disease becomes the most likely, a comparison of 95% confidence intervals of this coefficient was carried out for moderate and severe course. The prognostic significance of such a comparison was established by constructing an ROC curve that reflects the ratio of sensitivity and specificity of the test in the form of a linear regression. The quantitative expression of the prognostic significance in these cases is the area under the ROC-curve (AUC). At AUC values ≤ 0.5, the test is not considered as prognostically significant, at AUC values of 0.6-0.7, the prognostic significance is considered to be moderate, at values of 0.71-0.8 - the test is highly significant, and above 0.8 - its significance is very high at the maximum values of AUC = 1.0 [46, 47]. 95% confidence intervals of the PCTT criterion for HFRS in moderate and severe course of the disease with the designation of the prognostic criterion and the ROC-curve of the prognostic significance of the test are shown in Figure 2.

Как следует из графика разграничительная величина для 95% доверительных интервалов ПКТТ у больных со среднетяжелым и тяжелым течением геморрагической лихорадки с почечным синдромом составляет 19.As follows from the graph, the delimiting value for 95% confidence intervals of PCTT in patients with moderate and severe hemorrhagic fever with renal syndrome is 19.

Иными словами, при ПКТТ ГЛПС выше/равно 19 у больного можно констатировать риск тяжелого течения заболевания. Прогностическая значимость ПКТТ ГЛПС очень велика, поскольку при построении ROC-кривой AUC составляет 1,0, то есть соответствует максимальному значению площади под ROC-кривой.In other words, with PCTT HFRS higher/equal to 19 in a patient, one can ascertain the risk of a severe course of the disease. The prognostic significance of HFRS PCTT is very high, since when constructing the ROC curve, AUC is 1.0, that is, it corresponds to the maximum value of the area under the ROC curve.

Способ иллюстрируется следующими рисунками:The method is illustrated in the following figures:

Фиг. 1. Проценты отклонения лабораторных показателей при тяжелом течении ГЛПС от показателей при среднетяжелом течении в лихорадочный период заболевания.Fig. 1. Percentage deviation of laboratory parameters in severe HFRS from those in moderate course during the febrile period of the disease.

Фиг. 2. 95% доверительные интервалы прогностического критерия тяжелого течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ПКТТ ГЛПС) в лихорадочный период при среднетяжелом и тяжелом течении.Fig. 2. 95% confidence intervals of the prognostic criterion for the severe course of hemorrhagic fever with renal syndrome (PKTT HFRS) in the febrile period with moderate and severe course.

Фиг. 3. ROC-кривая прогностического значения ПКТТ ГЛПС для определения риска тяжелого течения ГЛПС в лихорадочный период.Fig. Fig. 3. ROC-curve of the prognostic value of HFRS PCTT to determine the risk of severe HFRS during the febrile period.

Таблица 1 содержит результаты определения и статистического анализа лабораторных данных в лихорадочный период ГЛПС в соответствии с развитием впоследствии среднетяжелого или тяжелого течения заболевания.Table 1 contains the results of the determination and statistical analysis of laboratory data during the febrile period of HFRS in accordance with the subsequent development of a moderate or severe course of the disease.

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами.The proposed method is illustrated by the following examples.

Пример 1. Больной А., 60 лет, поступил в клинику инфекционных болезней на 4-й день заболевания с диагнозом «Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом». Проживает в частном доме и не отрицает возможность контакта с биологическими выделениями мышей. Example 1. Patient A., aged 60, was admitted to the clinic of infectious diseases on the 4th day of the disease with a diagnosis of "Hemorrhagic fever with renal syndrome". He lives in a private house and does not deny the possibility of contact with the biological secretions of mice.

При поступлении предъявлял жалобы на общую слабость, головную боль, тошноту, сухость во рту, боль в пояснице, снижение количества мочи. При поступлении отмечена гиперемия лица, инъекция сосудов склер, положительный симптом Пастернацкого. Upon admission, he complained of general weakness, headache, nausea, dry mouth, back pain, decreased urine output. On admission, facial flushing, injection of scleral vessels, positive Pasternatsky's sign were noted.

При исследовании мочи было отмечено падение суточного диуреза до 250 мл при удельном весе 1002, наличии белка до 5,0 г/л, выщелоченных эритроцитов до 10 в поле зрения; лейкоциты по Нечипоренко 8750×10⁶/л, эритроциты по Нечипоренко 1250×10⁶/л.In the study of urine, a drop in daily diuresis to 250 ml was noted with a specific gravity of 1002, the presence of protein up to 5.0 g/l, leached erythrocytes up to 10 in the field of view; leukocytes according to Nechiporenko 8750×10 ⁶ /l, erythrocytes according to Nechiporenko 1250×10 ⁶ /l.

Клинический анализ крови: эритроциты 5,36×10¹²/л; гемоглобин 156 г/л; тромбоциты 67,0×10³/л; лейкоциты 7,4×10⁹/л; нейтрофильные гранулоциты 69%; лимфоциты 24,4%; моноциты 6,6%; СОЭ 15 мм/ч. Clinical blood test: erythrocytes 5.36×10 ¹² /l; hemoglobin 156 g/l; platelets 67.0×10 ³ /l; leukocytes 7.4×10 ⁹ /l; neutrophilic granulocytes 69%; lymphocytes 24.4%; monocytes 6.6%; ESR 15 mm/h.

Биохимический анализ крови: мочевина 19,7 ммоль/л; креатинин 402 ммоль/л; общий белок 61,1 г/л; альбумин 36,7 г/л; общий билирубин 9,8 ммоль/л; холестерин 3,2 ммоль/л; аланинаминотрансфераза 25 ЕД/л; аспартатаминотрансфераза 28,8 ЕД/л; щелочная фосфатаза 46,7 ЕД/л; креатининфосфокиназа 66,6 ЕД/л; глюкоза 7,7 г/л; С-реактивный белок 89,2 мг/л; натрий 141,7 ммоль/л; калий 4,7 ммоль/л; хлориды 100,9 ммоль/л. Biochemical blood test: urea 19.7 mmol/l; creatinine 402 mmol/l; total protein 61.1 g/l; albumin 36.7 g/l; total bilirubin 9.8 mmol/l; cholesterol 3.2 mmol/l; alanine aminotransferase 25 U/l; aspartate aminotransferase 28.8 U/l; alkaline phosphatase 46.7 U/l; creatinine phosphokinase 66.6 U/l; glucose 7.7 g/l; C-reactive protein 89.2 mg/l; sodium 141.7 mmol/l; potassium 4.7 mmol/l; chlorides 100.9 mmol/l.

Реакция непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ) с парными сыворотками: 1:256 и 1:1024 (нарастание титра в 4 раза). The reaction of indirect immunofluorescence (RNIF) with paired sera: 1:256 and 1:1024 (4-fold increase in titer).

Фенотипирование лимфоцитов крови: CD19+ 9% и 0,1×10⁹/л; СD3+ 82% и 1,4×10⁹/л; CD3+CD4+ 37,7% и 0,64×10⁹/л; CD3+CD8+ 45,2% и 0,77×10⁹/л; CD3+CD8+CD314+ 35,8% и 0,59×10⁹/л; СD3+CD4+FoxP3+ 8,8% и 0,9×10⁹/л; СD3+CD8+FoxP3+ 10,8% и 0,15×10⁹/л; СD16+CD56+ 17,1% и 0,17×10⁹/л; CD16+CD56+CD314+ 11,8% и 0,12×10⁹/л.Phenotyping of blood lymphocytes: CD19+ 9% and 0.1×10 ⁹ /l; CD3+ 82% and 1.4×10 ⁹ /l; CD3+CD4+ 37.7% and 0.64×10 ⁹ /l; CD3+CD8+ 45.2% and 0.77×10 ⁹ /l; CD3+CD8+CD314+ 35.8% and 0.59×10 ⁹ /l; CD3+CD4+FoxP3+ 8.8% and 0.9×10 ⁹ /l; CD3+CD8+FoxP3+ 10.8% and 0.15×10 ⁹ /l; CD16+CD56+ 17.1% and 0.17×10 ⁹ /l; CD16+CD56+CD314+ 11.8% and 0.12×10 ⁹ /l.

Цитокиновый профиль плазмы крови: ИЛ-1β 3,3 пг/мл; ИЛ-4 1,6 пг/мл; ИЛ-6 24,5 пг/мл; ИЛ-10 182,7 пг/мл; ИЛ-12 149 пг/мл; ФНОα 3,8 пг/мл; ФНОβ 452,2 пг/мл; ИФНγ 834,6 пг/мл.Cytokine profile of blood plasma: IL-1β 3.3 pg/ml; IL-4 1.6 pg/ml; IL-6 24.5 pg/ml; IL-10 182.7 pg/ml; IL-12 149 pg/ml; TNFα 3.8 pg/ml; TNFβ 452.2 pg/ml; IFNγ 834.6 pg/ml.

По совокупности клинико-лабораторных данных у больного А. в лихорадочный период заболевания была диагностирована ГЛПС средней тяжести. Однако, определение прогностического критерия тяжелого течения (ПКТТ ГЛПС) показало, что его величина составляла 22,9 (>19), что свидетельствовало о риске развития тяжелого течения ГЛПС. Based on the combination of clinical and laboratory data, patient A. was diagnosed with moderate HFRS during the febrile period of the disease. However, the definition of a prognostic criterion for severe course (PCTT HFRS) showed that its value was 22.9 (>19), which indicated the risk of developing a severe course of HFRS.

Дальнейшее наблюдение больного А. показало, что в олигоурический период заболевания у него развилась тяжелая острая почечная недостаточность, сопровождавшаяся выраженной азотемией (мочевина 42,6 ммоль/л, креатинин 898,4 ммоль/л), что было расценено как показание к применению гемодиализа, то есть прогноз тяжелого течения заболевания в данном случае подтвердился. После одного сеанса гемодиализа состояние больного улучшилось и на 31-й день от начала заболевания пациент был выписан на амбулаторное лечение в удовлетворительном состоянии. Further observation of patient A. showed that during the oligouric period of the disease he developed severe acute renal failure, accompanied by severe azotemia (urea 42.6 mmol / l, creatinine 898.4 mmol / l), which was regarded as an indication for the use of hemodialysis, that is, the prognosis of a severe course of the disease in this case was confirmed. After one session of hemodialysis, the patient's condition improved and on the 31st day from the onset of the disease, the patient was discharged for outpatient treatment in a satisfactory condition.

Пример 2. Больной Д., 39 лет, поступил в клинику инфекционных болезней на 3-й день заболевания с диагнозом «Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом». Сбор эпидемического анамнеза показал, что больной часто выезжает в сельскую местность на рыбалку, что создает условия для возможного контакта с грызунами. Example 2. Patient D., aged 39, was admitted to the clinic of infectious diseases on the 3rd day of the disease with a diagnosis of "Hemorrhagic fever with renal syndrome". The collection of an epidemic history showed that the patient often travels to the countryside for fishing, which creates conditions for possible contact with rodents.

Жалобы на головную боль, нарушения зрения, сухость во рту, тошноту, однократную рвоту, боль в пояснице. Объективное исследование выявило гиперемию и отечность лица, инъекцию сосудов склер, жесткость дыхания, слабоположительный симптом Пастернацкого. Complaints of headache, visual impairment, dry mouth, nausea, single vomiting, back pain. An objective examination revealed flushing and swelling of the face, injection of scleral vessels, respiratory rigidity, and a weakly positive Pasternatsky symptom.

При клиническом анализе мочи в момент поступления в стационар установлено снижение суточного диуреза до 300 мл, удельный вес составлял 1002, белок 1,5 г/л, свежие и выщелоченные эритроциты до 25 в поле зрения. Clinical analysis of urine at the time of admission to the hospital revealed a decrease in daily diuresis to 300 ml, specific gravity was 1002, protein 1.5 g/l, fresh and leached erythrocytes up to 25 per field of view.

Клинический анализ крови: эритроциты 5,46×10¹²/л; гемоглобин 208 г/л; тромбоциты 33,0×10³/л; лейкоциты 7,3×10⁹/л; нейтрофильные гранулоциты 81,8%; лимфоциты 14,8%; моноциты 3,4%; СОЭ 21 мм/ч. Clinical blood test: erythrocytes 5.46×10 ¹² /l; hemoglobin 208 g/l; platelets 33.0×10 ³ /l; leukocytes 7.3×10 ⁹ /l; neutrophilic granulocytes 81.8%; lymphocytes 14.8%; monocytes 3.4%; ESR 21 mm/h.

Биохимический анализ крови: мочевина 16,7 ммоль/л; креатинин 172,2 ммоль/л; общий белок 66,3 г/л; альбумин 36,5 г/л; общий билирубин 7,3 ммоль/л; холестерин 3,8 ммоль/л; аланинаминотрансфераза 29 ЕД/л; аспартатаминотрансфераза 35,8 ЕД/л; лактатдегидрогеназа 731 ЕД/л; креатинфосфокиназа 140 ЕД/л; глюкоза 6,7 г/л; С-реактивный белок 250 мг/л; натрий 135,7 ммоль/л; калий 3,6 ммоль/л; хлориды 99,3 ммоль/л. Biochemical blood test: urea 16.7 mmol/l; creatinine 172.2 mmol/l; total protein 66.3 g/l; albumin 36.5 g/l; total bilirubin 7.3 mmol/l; cholesterol 3.8 mmol/l; alanine aminotransferase 29 U/l; aspartate aminotransferase 35.8 U/l; lactate dehydrogenase 731 U/l; creatine phosphokinase 140 U/l; glucose 6.7 g/l; C-reactive protein 250 mg/l; sodium 135.7 mmol/l; potassium 3.6 mmol/l; chlorides 99.3 mmol/l.

Реакция непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ) с парными сыворотками: 1:64 и 1:512 (нарастание титра в 8 раз). Indirect immunofluorescence reaction (RNIF) with paired sera: 1:64 and 1:512 (8-fold increase in titer).

Фенотипирование лимфоцитов крови: CD19+ 9% и 0,1×10⁹/л; СD3+ 64,5% и 1,35×10⁹/л; CD3+CD4+ 30,8% и 0,65×10⁹/л; CD3+CD8+ 31,7% и 0,65×10⁹/л; CD3+CD8+CD314+ 22,1% и 0,51×10⁹/л; СD3+CD4+FoxP3+ 8% и 0,17×10⁹/л; СD3+CD8+FoxP3+ 9% и 0,19×10⁹/л; СD16+CD56+ 28,5% и 0,6×10⁹/л; CD16+CD56+CD314+ 16% и 0,34×10⁹/л.Phenotyping of blood lymphocytes: CD19+ 9% and 0.1×10 ⁹ /l; CD3+ 64.5% and 1.35×10 ⁹ /l; CD3+CD4+ 30.8% and 0.65×10 ⁹ /l; CD3+CD8+ 31.7% and 0.65×10 ⁹ /l; CD3+CD8+CD314+ 22.1% and 0.51×10 ⁹ /l; CD3+CD4+FoxP3+ 8% and 0.17×10 ⁹ /l; CD3+CD8+FoxP3+ 9% and 0.19×10 ⁹ /l; CD16+CD56+ 28.5% and 0.6×10 ⁹ /l; CD16+CD56+CD314+ 16% and 0.34×10 ⁹ /l.

Цитокиновый профиль плазмы крови: ИЛ-1β 2,6 пг/мл; ИЛ-4 1,8 пг/мл; ИЛ-6 20,4 пг/мл; ИЛ-10 645,2 пг/мл; ИЛ-12 125 пг/мл; ФНОα 3,2 пг/мл; ФНОβ 468,2 пг/мл; ИФНγ 885,6 пг/мл.Cytokine profile of blood plasma: IL-1β 2.6 pg/ml; IL-4 1.8 pg/ml; IL-6 20.4 pg/ml; IL-10 645.2 pg/ml; IL-12 125 pg/ml; TNFα 3.2 pg/ml; TNFβ 468.2 pg/ml; IFNγ 885.6 pg/ml.

По совокупности клинико-лабораторных данных у больного Д. в лихорадочный период заболевания была диагностирована ГЛПС средней тяжести. Определение прогностического критерия тяжелого течения (ПКТТ ГЛПС) показало, что его величина составляла 17,3 (<19), что исключало риск развития тяжелого течения ГЛПС. Стационарное наблюдение больного Д. в последующие периоды развития заболевания полностью подтвердило, что заболевание имело среднетяжелое течение и не сопровождалось развитием каких-либо осложнений. На 19-й день заболевания больной был выписан в удовлетворительном состоянии для диспансерного наблюдения.According to the combination of clinical and laboratory data, patient D. was diagnosed with moderately severe HFRS during the febrile period of the disease. Determination of the prognostic criterion for severe course (PCTT HFRS) showed that its value was 17.3 (<19), which excluded the risk of developing a severe course of HFRS. Stationary observation of patient D. in subsequent periods of the development of the disease fully confirmed that the disease had a moderate course and was not accompanied by the development of any complications. On the 19th day of illness, the patient was discharged in a satisfactory condition for dispensary observation.

Литература:Literature:

1. Валишин, Д.А. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом у взрослых. Клинические рекомендации [Текст] / Д.А. Валишин, Р.Т. Мурзабаева, В.А. Иванис и др. // Некоммерческое партнерство «Национальное научное общество инфекционистов». - 2016. - 74 с.1. Valishin, D.A. Hemorrhagic fever with renal syndrome in adults. Clinical guidelines [Text] / D.A. Valishin, R.T. Murzabaeva, V.A. Ivanis et al. // Non-commercial partnership "National Scientific Society of Infectionists". - 2016. - 74 p.

2. Хунафина Д.Х. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом. Обзор литературы [Текст] / Д.Х. Хунафина, Д.А. Валишин, Л.Р. Шайхуллина, А.Т. Галиева // Международный журнал экспериментального образования. - 2014. – № 8-1. – С. 14-17.2. Hunafina D.Kh. Hemorrhagic fever with renal syndrome. Literature review [Text] / D.Kh. Khunafina, D.A. Valishin, L.R. Shaihullina, A.T. Galiyeva // International Journal of Experimental Education. - 2014. - No. 8-1. - S. 14-17.

3. Krautkramer, E. Old World hantaviruses: aspects of pathogenesis and clinical course of acute renal failure [Text] / E. Krautkramer, M.Zeier // Virus Res. – 2014. – Vol. 187. – P. 59-64. 3. Krautkramer, E. Old World hantaviruses: aspects of pathogenesis and clinical course of acute renal failure [Text] / E. Krautkramer, M.Zeier // Virus Res. - 2014. - Vol. 187. - P. 59-64.

4. Tkachenko, E.A. Hemorrhagic fever with renal syndrome, Russia [Text] / E.A.Tkachenko, A.A.Ishmukhametov, T.K.Dzagurova et al. // Emerg Infect Dis. – 2019. – Vol. 25 (12). – P. 2325-2328.4. Tkachenko, E.A. Hemorrhagic with fever renal syndrome, Russia [Text] / E.A. Tkachenko, A.A. Ishmukhametov, T.K. Dzagurova et al. // Emerg Infect Dis. - 2019. - Vol. 25 (12). - P. 2325-2328.

5. Валишин Д.А. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом: клиника, диагностика и лечение: учебное пособие для врачей [Текст] / Д.А. Валишин, Р.Т. Мурзабаева, А.П. Мамон и др. // Уфа, Изд-во ГБОУ ВПО БГМУ Минздравсоцразвития России. - 2012. - 51 с.5. Valishin D.A. Hemorrhagic fever with renal syndrome: clinic, diagnosis and treatment: a textbook for doctors [Text] / D.A. Valishin, R.T. Murzabaeva, A.P. Mamon et al. // Ufa, Publishing House of GBOU VPO BSMU of the Ministry of Health and Social Development of Russia. - 2012. - 51 p.

6. Klingstrom, J. Innate and adaptive immune responses against human Puumala virus infection: immunopathogenesis and suggestions for novel treatment strategies for severe hantavirus-associated syndromes [Text] / J.Klingstrom, А.Smed-Sörensen, K.T.Maleki et al. // J Intern Med. - 2019. - Vol. 285, N 5. - P. 510-523.6. Klingstrom, J. Innate and adaptive immune responses against human Puumala virus infection: immunopathogenesis and suggestions for novel treatment strategies for severe hantavirus-associated syndromes [Text] / J. Klingstrom, A. Smed-Sörensen, K. T. Maleki et al. // J Intern Med. - 2019. - Vol. 285, No. 5. - P. 510-523.

7. Морозов В.Г. Клинические особенности геморрагической лихорадки с почечным синдромом в России [Текст] / В.Г. Морозов, А.А. Ишмухаметов, Т.К. Дзагурова, Е.А. Ткаченко // Инфекционные болезни, 2017. - № 5. - С. 156-161.7. Morozov V.G. Clinical features of hemorrhagic fever with renal syndrome in Russia [Text] / V.G. Morozov, A.A. Ishmukhametov, T.K. Dzagurova, E.A. Tkachenko // Infectious diseases, 2017. - No. 5. - P. 156-161.

8. Митрофанова Н.Н. Анализ клинико-эпидемиологических и эпизоотических особенностей заболеваемости геморрагической лихорадкой с почечным синдромом на территории Пензенской области [Текст] / Н.Н. Митрофанова, В.Л. Мельников, Н.Ф. Золина, Е.Д. Скороходова // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. – 2009. – №3 (11). – С. 109-116.8. Mitrofanova N.N. Analysis of clinical, epidemiological and epizootic features of the incidence of hemorrhagic fever with renal syndrome in the Penza region [Text] / N.N. Mitrofanova, V.L. Melnikov, N.F. Zolina, E.D. Skorokhodova // News of higher educational institutions. Volga region. Medical Sciences. - 2009. - No. 3 (11). - S. 109-116.

9. Алехин Е.К. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом [Текст] / Е.К. Алехин, Ф.Х. Камилов, Д.Х. Хунафина и др. // Медицинский вестник Башкортостана. - 2013. - № 5. - С. 24-31.9. Alekhin E.K. Hemorrhagic fever with renal syndrome [Text] / E.K. Alekhin, F.Kh. Kamilov, D.Kh. Hunafin and others // Medical Bulletin of Bashkortostan. - 2013. - No. 5. - S. 24-31.

10. Connor, S.D. Regulated portals of entry into the cells [Text] / S.D. Connor, S.L. Schimid // Nature. - 2003. - Vol. 422, N 6927. - P. 37-44.10. Connor, S.D. Regulated portals of entry into the cells [Text] / S.D. Connor, S.L. Schimid // Nature. - 2003. - Vol. 422, No. 6927. - P. 37-44.

11. Wang, P.Z. Elevated serum concentrations of inflammatory cytokines and chemokines in patients with haemorrhagic fever with renal syndrome [Text] / P.Z. Wang, Z.D. Li, H.T. Yu et al. // J Int Med Res. - 2012. - Vol. 40, N 2. - P. 648-656.11. Wang, P.Z. Elevated serum concentrations of inflammatory cytokines and chemokines in patients with haemorrhagic fever with renal syndrome [Text] / P.Z. Wang, Z.D. Li, H.T. Yu et al. // J Int Med Res. - 2012. - Vol. 40, No. 2. - P. 648-656.

12. Kruger, D.H. Hantaviruses-Globally emerging pathogens [Text] / D.H. Krüger, L.T. Figueiredo, J.W. Song, B. Klempa // J Clin Virol, 2015. - Vol. 64. - P. 128–136.12. Kruger, D.H. Hantaviruses-Globally emerging pathogens [Text] / D.H. Kruger, L.T. Figueiredo, J.W. Song, B. Klempa // J Clin Virol, 2015. - Vol. 64.-P. 128–136.

13. Jiang, H. Hemorrhagic fever with renal syndrome: pathogenesis and clinical picture [Text] / H.Jiang, H.Du, L.M.Wang et al. // Front Cell Infect Microbiol. - 2016. - Vol. 6. - P. 1-14. 13. Jiang, H. Hemorrhagic fever with renal syndrome: pathogenesis and clinical picture [Text] / H.Jiang, H.Du, L.M.Wang et al. // Front Cell Infect Microbiol. - 2016. - Vol. 6. - P. 1-14.

14. Latus, J. Severe thrombocytopenia in hantavirus-induced nephropathia epidemica [Text] / J.Latus, D.Kitterer, S.Segerer et al. // Infection. – 2015. – Vol. 43, N 1. – P. 83-87. 14. Latus, J. Severe thrombocytopenia in hantavirus-induced nephropathia epidemica [Text] / J. Latus, D. Kitterer, S. Segerer et al. // infection. - 2015. - Vol. 43, No. 1. - P. 83-87.

15. Taylor, S.L. Endothelial cell permeability during hantavirus infection involves factor XII-dependent increased activation of the kallikrein–kinin system [Text] / S.L.Taylor, V.Wahl-Jensen, A.M.Copeland et al. // PLoS Pathog, 2013. - Vol. 9, N 7. - P. e1003470.15. Taylor, S.L. Endothelial cell permeability during hantavirus infection involves factor XII-dependent increased activation of the kallikrein–kinin system [Text] / S.L.Taylor, V.Wahl-Jensen, A.M.Copeland et al. // PLoS Pathog, 2013. - Vol. 9, No. 7. - P. e1003470.

16. Krautkrаmer, E. Pathogenic old world hantaviruses infect renal glomerular and tubular cells and induce disassembling of cell-to-cell contacts [Text] / E.Krautkrämer, S.Grouls, N.Stein et al. // J Virol. - 2011. - Vol. 85, N 19. - P. 9811-9823.16. Krautkramer, E. Pathogenic old world hantaviruses infect renal glomerular and tubular cells and induce disassembling of cell-to-cell contacts [Text] / E.Krautkrämer, S.Grouls, N.Stein et al. // J Virol. - 2011. - Vol. 85, No. 19. - P. 9811-9823.

17. Koivula, T.T. Regulatory T cell response correlates with the severity of human hantavirus infection [Text] / T.T.Koivula, A.Tuulasvaara, L.Hetemäki et al. // J Infec, 2014. - Vol. 68, N 4. - P. 387-394.17. Koivula, T.T. Regulatory T cell response correlates with the severity of human hantavirus infection [Text] / T.T.Koivula, A.Tuulasvaara, L.Hetemäki et al. // J Infec, 2014. - Vol. 68, No. 4. - P. 387-394.

18. Lebecque, O. Puumala hantavirus: an imaging review [Text] / O. Lebecque, M.Dupont // Acta Radiol. – 2020. – Vol. 61, N 8. – P. 1072-1079.18. Lebecque, O. Puumala hantavirus: an imaging review [Text] / O. Lebecque, M. Dupont // Acta Radiol. - 2020. - Vol. 61, No. 8. - P. 1072-1079.

19. Du, H. Clinical characteristics and outcomes in critical patients with hemorrhagic fever with renal syndrome [Text] / H.Du, P.-Z.Wang, J.Li et al. // BMC Infect Dis. – 2014. – Vol. 14. – P. 191. 19. Du, H. Clinical characteristics and outcomes in critical patients with hemorrhagic fever with renal syndrome [Text] / H.Du, P.-Z.Wang, J.Li et al. // BMC Infect Dis. - 2014. - Vol. 14. - P. 191.

20. Jiang, D.B. Hantavirus Gc induces long-term immune protection via LAMP-targeting DNA vaccine strategy [Text] / D.B.Jiang, J.P.Zhang, L.F.Cheng et al. // Antiviral Res, 2018. - Vol. 150. - P. 174-182.20. Jiang, D.B. Hantavirus Gc induces long-term immune protection via LAMP-targeting DNA vaccine strategy [Text] / D.B.Jiang, J.P.Zhang, L.F.Cheng et al. // Antiviral Res, 2018. - Vol. 150. - P. 174-182.

21. Outinen, T.K. High activity of indoleamine 2,3-dioxygenase is associated with renal insufficiency in Puumala hantavirus induced nephropathia epidemica [Text] / T.K.Outinen, S.Makela, I.O.Ala-Houhala et al. // J Med Virol, 2011. – Vol. 83, N 4. – P. 731–737.21 Outinen, T.K. High activity of indoleamine 2,3-dioxygenase is associated with renal insufficiency in Puumala hantavirus induced nephropathia epidemica [Text] / T.K.Outinen, S.Makela, I.O.Ala-Houhala et al. // J Med Virol, 2011. - Vol. 83, No. 4. - P. 731-737.

22. Outinen, T.K. High pentraxin-3 plasma levels associate with thrombocytopenia in acute Puumala hantavirus-induced nephropathia epidemica [Text] / T.K.Outinen, S.Makel, H.Huhtala et al. // Eur J Clin Microbiol Infect Dis: official publication of the European Society of Clinical Microbiology, 2012. – Vol. 31, N 6. – P. 957–963.22 Outinen, T.K. High pentraxin-3 plasma levels associated with thrombocytopenia in acute Puumala hantavirus-induced nephropathia epidemica [Text] / T.K.Outinen, S.Makel, H.Huhtala et al. // Eur J Clin Microbiol Infect Dis: official publication of the European Society of Clinical Microbiology, 2012. – Vol. 31, No. 6. - P. 957–963.

23. Outinen, T.K. Plasma levels of soluble urokinase-type plasminogen activator receptor associate with the clinical severity of acute puumala hantavirus infection [Text] / T.K. Outinen, L. Tervo, S. Makela et al. // PloS one, 2013. – Vol. 8, N 8. - e71335. 23 Outinen, T.K. Plasma levels of soluble urokinase-type plasminogen activator receptor associate with the clinical severity of acute puumala hantavirus infection [Text] / T.K. Outinen, L. Tervo, S. Makela et al. // PloS one, 2013. - Vol. 8, N 8. - e71335.

24. Jereb, M. Procalcitonin in hantavirus infections [Text] / M. Jereb, N.K. Lunacek, T. Kotar et al. // Scand J Clin Lab Invest, 2011. – Vol. 71, N 4. – P. 287–291.24. Jereb, M. Procalcitonin in hantavirus infections [Text] / M. Jereb, N.K. Lunacek, T. Kotar et al. // Scand J Clin Lab Invest, 2011. - Vol. 71, No. 4. - P. 287-291.

25. Yilmaz G, Koksal I, Topbas M, Yilmaz H, Aksoy F (2010) The effectiveness of routine laboratory findings in determining disease severity in patients with Crimean-Congo hemorrhagic fever: severity prediction criteria [Text] / G. Yilmaz, I. Koksal, M. Topbas et al. // J Clin Virol, 2010. – Vol. 47, N 4. – P. 361–365.25. Yilmaz G, Koksal I, Topbas M, Yilmaz H, Aksoy F (2010) The effectiveness of routine laboratory findings in determining disease severity in patients with Crimean-Congo hemorrhagic fever: severity prediction criteria [Text] / G. Yilmaz, I Koksal, M. Topbas et al. // J Clin Virol, 2010. - Vol. 47, No. 4. - P. 361-365.

26. Resman Rus, K. HMGB1 is a potential biomarker for severe viral hemorrhagic fevers [Text] / K. Resman Rus, L. Fajs, M. Korva, T. Avšič-Županc // PLoS Negl Trop Dis, 2016. – Vol. 10, N 6. - e0004804.26. Resman Rus, K. HMGB1 is a potential biomarker for severe viral hemorrhagic fevers [Text] / K. Resman Rus, L. Fajs, M. Korva, T. Avšič-Županc // PLoS Negl Trop Dis, 2016. - Vol . 10, No. 6. - e0004804.

27. Kaya, S. Prognostic factors in hantavirus infections [Text] / S. Kaya // Mikrobiyol Bul, 2014. – Vol. 48, N 1. – P. 179-187.27. Kaya, S. Prognostic factors in hantavirus infections [Text] / S. Kaya // Mikrobiyol Bul, 2014. – Vol. 48, No. 1. - P. 179-187.

28. Tietavainen, J. Glucosuria predicts the severity of puumala hantavirus infection [Text] / J. Tietavainen, P. Mantula, T. Outinen et al. // Kidney Int Rep, 2019. – Vol. 4, N 9. – P. 1296-1303. 28. Tietavainen, J. Glucosuria predicts the severity of puumala hantavirus infection [Text] / J. Tietavainen, P. Mantula, T. Outinen et al. // Kidney Int Rep, 2019. - Vol. 4, No. 9. - P. 1296-1303.

29. Bianchi, M.E. HMG proteins: dynamic players in gene regulation and differentiation [Text] / M.E. Bianchi, A. Agresti // Curr Opin Genet Dev, 2005. – Vol. 15, N 5. – P. 496–506.29. Bianchi, M.E. HMG proteins: dynamic players in gene regulation and differentiation [Text] / M.E. Bianchi, A. Agresti // Curr Opin Genet Dev, 2005. - Vol. 15, No. 5. - P. 496-506.

30. Stros, M. HMGB proteins: interactions with DNA and chromatin [Text] / M. Stros // Biochim Biophys Acta, 2010. – Vol. 1799, N 1-2. – P. 101–113.30. Stros, M. HMGB proteins: interactions with DNA and chromatin [Text] / M. Stros // Biochim Biophys Acta, 2010. – Vol. 1799, No. 1-2. – P. 101–113.

31. Allonso, D. Elevated serum levels of high mobility group box 1 (HMGB1) protein in dengue-infected patients are associated with disease symptoms and secondary infection [Text] / D. Allonso, F.S. Belgrano, N. Calzada et al. // J Clin Virol, 2012. – Vol. 55, N 3. – P. 214–219. 31. Allonso, D. Elevated serum levels of high mobility group box 1 (HMGB1) protein in dengue-infected patients are associated with disease symptoms and secondary infection [Text] / D. Allonso, F.S. Belgrano, N. Calzada et al. // J Clin Virol, 2012. - Vol. 55, No. 3. – P. 214–219.

32. Allonso, D. High mobility group box 1 protein as an auxiliary biomarker for dengue diagnosis [Text] / D. Allonso, S. Vazquez, M.G. Guzman, R. Mohana-Borges // Am J Trop Med Hyg, 2013. – Vol. 88, N 3. – P. 506–509.32. Allonso, D. High mobility group box 1 protein as an auxiliary biomarker for dengue diagnosis [Text] / D. Allonso, S. Vazquez, M.G. Guzman, R. Mohana-Borges // Am J Trop Med Hyg, 2013. - Vol. 88, No. 3. - P. 506-509.

33. Sadeghi, M. Association of low serum TGF-β level in hantavirus infected patients with severe disease [Text] / M. Sadeghi, I. Lahdou, J. Ettinger et al. // BMC Immunol, 2015. – Vol. 16. – P. 19. 33. Sadeghi, M. Association of low serum TGF-β level in hantavirus infected patients with severe disease [Text] / M. Sadeghi, I. Lahdou, J. Ettinger et al. // BMC Immunol, 2015. - Vol. 16. - P. 19.

34. Иванов, М.Ф. Иммунный ответ при геморрагической лихорадке с почечным синдромом различной степени тяжести [Teкст] / М.Ф. Иванов, Е.П. Ефратова, И.П. Балмасова // Аллергология и иммунология. - 2017. - Т. 18, № 3. - С. 147-151.34. Ivanov, M.F. Immune response in hemorrhagic fever with renal syndrome of varying severity [Text] / M.F. Ivanov, E.P. Efratova, I.P. Balmasova // Allergology and Immunology. - 2017. - V. 18, No. 3. - S. 147-151.

35. Koivula, T.-T. Regulatory T cell response correlates with the severity of human hantavirus infection [Text] / T.-T. Koivula, A. Tuulasvaara, I. Hetemaki et al. // J Infect, 2014. – Vol. 68, N 4. – P. 387-394. 35. Koivula, T.-T. Regulatory T cell response correlates with the severity of human hantavirus infection [Text] / T.-T. Koivula, A. Tuulasvaara, I. Hetemaki et al. // J Infect, 2014. - Vol. 68, No. 4. - P. 387-394.

36. Maes, P. Tumor necrosis factor-alpha genetic predisposing factors can influence clinical severity in nephropathia epidemica [Text] / P. Maes, J. Clement, P.H.P. Groeneveld et al. // Viral Immunol Summer, 2006. – Vol. 19, N 3. – P. 558-564. 36. Maes, P. Tumor necrosis factor-alpha genetic predisposing factors can influence clinical severity in nephropathia epidemica [Text] / P. Maes, J. Clement, P.H.P. Groeneveld et al. // Viral Immunol Summer, 2006. - Vol. 19, No. 3. - P. 558-564.

37. Zhang, C. Elevated plasma growth arrest-specific 6 protein levels are associated with the severity of disease during Hantaan virus infection in humans [Text] / C. Zhang, K. Tang, Y. Zhang et al. // Viral Immunol, 2017. – Vol. 30, N 5. – P. 330-335.37. Zhang, C. Elevated plasma growth arrest-specific 6 protein levels are associated with the severity of disease during Hantaan virus infection in humans [Text] / C. Zhang, K. Tang, Y. Zhang et al. // Viral Immunol, 2017. - Vol. 30, No. 5. - P. 330-335.

38. Zhang, Y. Soluble scavenger receptor CD163 is associated with severe acute kidney injury in patients with Hantaan virus infection [Text] / Y. Zhang, Y. Ma, C. Zhang et al. // Viral Immunol, 2015. – Vol. 28, N 4. – P. 241-246. 38. Zhang, Y. Soluble scavenger receptor CD163 is associated with severe acute kidney injury in patients with Hantaan virus infection [Text] / Y. Zhang, Y. Ma, C. Zhang et al. // Viral Immunol, 2015. - Vol. 28, No. 4. - P. 241-246.

Таблица 1.Table 1.

ВидView
лабораторногоlaboratory
исследованияresearch ЛабораторныеLaboratory
показатели indicators Медиана [минимум; максимум]Median [minimum; maximum] рR БольныеГЛПСPatients with HFRS
тяжелого теченияsevere course Больные ГЛПСPatients with HFRS
средней middle
тяжестиgravity 11 22 33 44 55 Клинический
анализ
кровиClinical
analysis
blood Эритроциты (10¹² клеток/л)Erythrocytes (10 ¹² cells/l) 4,9[4,0; 6,4]4.9[4.0; 6.4] 5,3[5,1; 6,2]5.3[5.1; 6.2] 0,4800.480 Гемоглобин (г/л)Hemoglobin (g/l) 147 [124; 203]147 [124; 203] 167,5 [157; 172]167.5 [157; 172] 0,4800.480 Гематокрит (%)Hematocrit (%) 40 [35,3; 56,8]40 [35.3; 56.8] 45,2 [44; 54,4]45.2 [44; 54.4] 0,4800.480 Тромбоциты (10⁹ клеток/л)Platelets (10 ⁹ cells/l) 69 [39; 149]69 [39; 149] 108 [45; 163]108 [45; 163] 0,4800.480 Лейкоциты (10⁶ клеток/л)Leukocytes ( ¹⁰⁶ cells/l) 13 [7,5; 19,4]13 [7.5; 19.4] 9,2 [6,7; 10,8]9.2 [6.7; 10.8] 0,2890.289 Эозинофилы (%)Eosinophils (%) 1,4 [0; 10]1.4[0; 10] 1,5 [0; 5]1.5[0; 5] 0,6660.666 Палочкоядерные нейтрофилы (%)Stab neutrophils (%) 3 [0; 22]thirty; 22] 2 [0; 4]20; 4] 0,1460.146 Сегментоядерные нейтрофилы (%)Segmented neutrophils (%) 59 [37; 73]59 [37; 73] 60,5 [47; 73]60.5 [47; 73] 0,9370.937 Лимфоциты (%)Lymphocytes (%) 12 [11,6; 17,7]12 [11.6; 17.7] 13,7 [6,4; 25]13.7 [6.4; 25] 0,8270.827 Моноциты (%)Monocytes (%) 7,2 [6,0; 8,3]7.2 [6.0; 8.3] 18,9 [12,4; 25,4]18.9 [12.4; 25.4] 0,0320.032 СОЭ мм/часESR mm/h 13 [8; 16]13 [8; 16] 10 [5; 15]10 [5; 15] 0,1740.174 Биохимический
анализ
кровиBiochemical
analysis
blood Мочевина, ммоль/лUrea, mmol/l 14,7 [9,6; 17,2]14.7 [9.6; 17.2] 8,4 [4,4; 9,1] 8.4 [4.4; 9.1] 0,0340.034 Креатинин, мкмоль/лCreatinine, µmol/l 113 [93,3; 391,3]113 [93.3; 391.3] 83,8 [70,2; 471,1]83.8 [70.2; 471.1] 0,0340.034 Мочевая кислота, мкмоль/лUric acid, µmol/l 313,8 [105; 668]313.8 [105; 668] 325,6 [268; 578]325.6 [268; 578] 0,2120.212 Общий белок, г/лTotal protein, g/l 55,7 [48,7; 91,5]55.7 [48.7; 91.5] 71,5 [45,6; 92,7]71.5 [45.6; 92.7] 0,1490.149 Альбумин, г/лAlbumin, g/l 36 [27,3; 45,4]36 [27.3; 45.4] 45,4 [25,5; 59,2]45.4 [25.5; 59.2] 0,0840.084 11 22 33 44 55 Биохимический анализ
кровиBiochemical analysis
blood Общий билирубин, ммоль/лTotal bilirubin, mmol/l 8,4 [3,1; 58]8.4 [3.1; 58] 10,3 [3,9; 18,2]10.3 [3.9; 18.2] 0,6640.664 Холестерин, ммоль/лCholesterol, mmol/l 3,4 [2,1; 11,6]3.4 [2.1; 11.6] 3 [1,9; 5,8]3 [1.9; 5.8] 0,7070.707 Амилаза, ЕД/лAmylase, U/l 40,2 [31,7; 61,8]40.2 [31.7; 61.8] 45,5 [40,2; 101,4]45.5 [40.2; 101.4] 0,2370.237 Аланинаминотрансфераза (АЛТ), ЕД/лAlanine aminotransferase (ALT), U/l 281,8 [108; 289]281.8 [108; 289] 65 [36,3; 93,8]65 [36.3; 93.8] 0,0490.049 Аспартатаминотрансфераза (АСТ),ЕД/лAspartate aminotransferase (AST), U/l 153,8 [113; 181]153.8 [113; 181] 47,3 [41,9;52,7]47.3 [41.9;52.7] 0,0490.049 Щелочная фосфатаза (ЩФ), ЕД/лAlkaline phosphatase (AP), U/l 70,2 [34,6; 141]70.2 [34.6; 141] 60,9 [46,7; 71,8]60.9 [46.7; 71.8] 0,3610.361 γ-глутамилтранспептидаза (ГТП), ЕД/лγ-glutamyl transpeptidase (GTP), U/l 37,5 [5,9; 272,9]37.5 [5.9; 272.9] 39 [19,3; 104,3]39 [19.3; 104.3] 0,7070.707 Лактатдегидрогеназа (ЛДГ), ЕД/лLactate dehydrogenase (LDH), U/l 416 [61,6; 1202]416 [61.6; 1202] 403 [329; 900]403 [329; 900] 0,5930.593 Креатининфосфокиназа (КФК), ЕД/лCreatinine phosphokinase (CPK), U/l 66,7 [30,6; 364]66.7 [30.6; 364] 54,4 [29,6; 769]54.4 [29.6; 769] 0,2340.234 Глюкоза, г/лGlucose, g/l 7,2 [4; 8,5]7.2 [4; 8.5] 6,5 [4,5; 8,2]6.5 [4.5; 8.2] 0,6890.689 Ферритин, мкг/лFerritin, mcg/l 841,8 [28; 1743]841.8 [28; 1743] 859,7 [831; 1072]859.7 [831; 1072] 0,7340.734 Трансферрин, г/лTransferrin, g/l 2 [1,5; 3,7]2 [1.5; 3.7] 2,1 [1,8; 2,6]2.1 [1.8; 2.6] 0,4230.423 С-реактивный белок (СРБ), мг/лC-reactive protein (CRP), mg/l 16,8 [0,5; 78,5]16.8 [0.5; 78.5] 22,8 [6; 89,2]22.8 [6; 89.2] 0,4490.449 Натрий, ммоль/лSodium, mmol/l 129,5 [115; 151]129.5 [115; 151] 138,4 [116; 147]138.4 [116; 147] 0,7330.733 Калий, ммоль/лPotassium, mmol/l 5,2 [3,1; 14,1]5.2 [3.1; 14.1] 4,4 [3,1; 5,7]4.4 [3.1; 5.7] 0,1080.108 Хлор, ммоль/лChlorine, mmol/l 84,9 [81; 114]84.9 [81; 114] 97,7 [71; 115]97.7 [71; 115] 0,2630.263 Клинический анализ
мочиClinical Analysis
urine Суточное количество мочи, млDaily amount of urine, ml 1000 [800; 1500]1000[800; 1500] 1050 [750;1050]1050 [750;1050] 0,2360.236 Удельный вес мочиSpecific gravity of urine 1,02 [1; 1,02]1.02 [1; 1.02] 1,02 [1,02; 1,02]1.02 [1.02; 1.02] 0,6170.617 рН мочиurine pH 5 [1; 8]5 [1; 8] 5,5 [5; 6,5]5.5 [5; 6.5] 0,2730.273 Белок, г/лProtein, g/l 1,75 [1,5; 5]1.75 [1.5; 5] 0,38 [0; 1,5]0.38[0; 1.5] 0,0480.048 Лейкоциты, клеток/поле зренияLeukocytes, cells/field of view 50 [25; 100]50 [25; 100] 0 [0; 0]0[0; 0] 0,0190.019 Эритроциты свежие,
клеток/поле зренияfresh erythrocytes,
cells/field of view 0 [0; 50]0[0; 50] 0 [0; 25]0[0; 25] 0,4680.468 Эритроциты выщелочен-ные, клеток/поле зрения Erythrocytes leached, cells/field of view 50 [50; 50]50 [50; 50] 12,5 [0; 50]12.5[0; 50] 0,0250.025 Лейкоциты по Нечипо-ренко, *10⁶ клеток/лLeukocytes according to Nechiporenko, *10 ⁶ cells/l 1750 [275; 9200]1750 [275; 9200] 1250 [250; 8750]1250 [250; 8750] 0,1080.108 Эритроциты по Нечипо-ренко, *10⁶ клеток/лErythrocytes according to Nechiporenko, *10 ⁶ cells/l 2000 [500; 2350]2000 [500; 2350] 1500 [820; 1700]1500 [820; 1700] 0,1160.116 Фенитипичес-кий профиль
лимфоцитов
кровиPhenytypical profile
lymphocytes
blood СD19+, %CD19+, % 12,5 [9; 12,5]12.5 [9; 12.5] 9 [8,5; 15,7]9 [8.5; 15.7] 0,6530.653 СD19+, 10⁹ клеток/лCD19+, 10 ⁹ cells/l 0,2 [0,11; 0,29]0.2 [0.11; 0.29] 0,14 [0,05; 0,19]0.14 [0.05; 0.19] 0,2750.275 CD3+, %CD3+, % 62 [62; 73,7]62 [62; 73.7] 73,7 [62; 87]73.7 [62; 87] 0,3460.346 CD3+, 10⁹ клеток/лCD3+, 10 ⁹ cells/l 1,40 [0,66; 1,43]1.40 [0.66; 1.43] 1,04 [0,66; 1,05]1.04 [0.66; 1.05] 0,3760.376 CD3+CD25+, %CD3+CD25+, % 5,9 [3,7; 18,7]5.9 [3.7; 18.7] 9,6 [9,4; 27]9.6 [9.4; 27] 0,2750.275 CD3+CD25+, 10⁹ клеток/лCD3+CD25+, 10 ⁹ cells/l 0,14 [0,08; 0,17]0.14 [0.08; 0.17] 0,16 [0,09; 0,32]0.16 [0.09; 0.32] 0,5130.513 CD3+CD4+, %CD3+CD4+, % 32 [23,6; 35]32 [23.6; 35] 58,7 [46; 67]58.7 [46; 67] 0,0460.046 11 22 33 44 55 Фенотипичес-кий профиль
лимфоцитов
кровиPhenotypic profile
lymphocytes
blood CD3+CD4+, 10⁹ клеток/лCD3+CD4+, 10 ⁹ cells/l 0,53 [0,32; 0,74]0.53 [0.32; 0.74] 0,78 [0,53; 0,8]0.78 [0.53; 0.8] 0,1840.184 CD3+CD8+, %CD3+CD8+, % 32 [25,9; 46]32 [25.9; 46] 12,6 [10,6; 17,8]12.6 [10.6; 17.8] 0,0410.041 CD3+CD8+, 10⁹ клеток/лCD3+CD8+, 10 ⁹ cells/l 0,58 [0,41; 0,74]0.58 [0.41; 0.74] 0,18 [0,11; 0,22]0.18 [0.11; 0.22] 0,0220.022 CD3+CD8+CD314+, %CD3+CD8+CD314+, % 27,7 [13,6; 42,3]27.7 [13.6; 42.3] 11,9 [8,3; 24,3]11.9 [8.3; 24.3] 0,0350.035 CD3+CD8+CD314+,
10⁹ клеток/лCD3+CD8+CD314+,
10 ⁹ cells/l 0,38 [0,22; 0,64]0.38 [0.22; 0.64] 0,14 [0,14; 0,22]0.14 [0.14; 0.22] 0,0420.042 CD3+CD4+FoxP3+, %CD3+CD4+FoxP3+, % 15 [6,8; 15,5]15 [6.8; 15.5] 9,2 [4,9; 9,5]9.2 [4.9; 9.5] 0,2780.278 CD3+CD4+FoxP3+,
10⁹ клеток/лCD3+CD4+FoxP3+,
10 ⁹ cells/l 0,15 [0,14; 0,34]0.15 [0.14; 0.34] 0,11 [0,07; 0,11]0.11 [0.07; 0.11] 0,0830.083 CD3+CD8+FoxP3+, %CD3+CD8+FoxP3+, % 3,8 [2,5; 4,1]3.8 [2.5; 4.1] 10,4 [8,3; 12,5]10.4 [8.3; 12.5] 0,0170.017 CD3+CD8+FoxP3+,
10⁹ клеток/лCD3+CD8+FoxP3+,
10 ⁹ cells/l 0,06 [0,04; 0,09]0.06 [0.04; 0.09] 0,12 [0,11; 0,14]0.12 [0.11; 0.14] 0,0240.024 СD3+СD56+, %СD3+СD56+, % 2,5 [1,1; 12,8]2.5 [1.1; 12.8] 3,1 [1,5; 11,7]3.1 [1.5; 11.7] 0,8270.827 СD3+СD56+, 10⁹ клеток/лCD3+CD56+, 10 ⁹ cells/l 0,03 [0,02; 0,12]0.03 [0.02; 0.12] 0,06 [0,03; 0,14]0.06 [0.03; 0.14] 0,8270.827 CD16+CD56+, %CD16+CD56+, % 11 [8,6; 19,4]11 [8.6; 19.4] 17,8 [7,7; 21,6]17.8 [7.7; 21.6] 0,8270.827 CD16+CD56+, 10⁹ клеток/лCD16+CD56+, 10 ⁹ cells/l 0,19 [0,17; 0,25]0.19 [0.17; 0.25] 0,16 [0,13; 0,26]0.16 [0.13; 0.26] 0,5130.513 CD16+CD56+СD314+, %CD16+CD56+CD314+, % 3,4[3,9; 12,7]3.4[3.9; 12.7] 2,6 [1,8; 7,2]2.6 [1.8; 7.2] 0,1810.181 CD16+CD56+СD314+,
10⁹ клеток/лCD16+CD56+CD314+,
10 ⁹ cells/l 0,05 [0,04; 0,19]0.05 [0.04; 0.19] 0,04 [0,02; 0,09]0.04 [0.02; 0.09] 0,1240.124 Цитокиновый профиль
плазмы
кровиCytokine profile
plasma
blood ИЛ-4, г/лIL-4, g/l 1,5 [1,5; 1,6]1.5 [1.5; 1.6] 1,5 [1,5;1,6]1.5 [1.5;1.6] 0,9990.999 ИЛ-12, г/лIL-12, g/l 12,1 [11,7; 13,1]12.1 [11.7; 13.1] 12 [10,9; 12,1]12 [10.9; 12.1] 0,5130.513 ИФНγ, г/лIFNγ, g/l 80,3 [72,2; 88,6]80.3 [72.2; 88.6] 88,6 [79,9; 94,8]88.6 [79.9; 94.8] 0,3760.376 ИЛ-1β, г/лIL-1β, g/l 3,35 [3,22; 3,72]3.35 [3.22; 3.72] 2,49 [2,07; 3,19]2.49 [2.07; 3.19] 0,0040.004 ИЛ-6, г/лIL-6, g/l 35,1 [30,4; 39,4]35.1 [30.4; 39.4] 23,8 [17; 32,3]23.8 [17; 32.3] 0,0060.006 ФНОα, г/лTNFα, g/l 2,7 [2,55; 3]2.7 [2.55; 3] 2,9 [2,7;3]2.9 [2.7;3] 0,5130.513 ФНОβ, г/лTNFβ, g/l 48,5 [38,1; 71,7]48.5 [38.1; 71.7] 48,5 [40,6; 51,1]48.5 [40.6; 51.1] 0,4870.487

Примечание: р - вероятность различий в группе больных ГЛПС разной степени тяжести, серым цветом обозначена достоверность различий по критерию Манна-Уитни при р <0,05.Note: p - the probability of differences in the group of patients with HFRS of varying severity, gray color indicates the significance of differences according to the Mann-Whitney test at p <0.05.

Claims

A method for predicting a severe course of hemorrhagic fever with renal syndrome in the early stages of the disease, including determining the level of urea and alanine aminotransferase (ALT) activity in the blood serum of a patient with hemorrhagic fever with renal syndrome in the first week of the disease, as well as the percentage of T cells with CD3+CD8+ phenotypes CD314+ and CD3+CD8+FoxP3+ among blood lymphocytes (CD45+), characterized by the fact that on the basis of these indicators, a prognostic criterion for a severe course of the disease (PCTT HFRS) is calculated according to the formula: PCTT HFRS = 2.015 + 0.072 * [ALT] + 0.516 * [urea ] + 0.364 * [CD3+CD8+CD314+] - 0.381 * [CD3+CD8+FoxP3+], and with HFRS PCTT values above 19, the development of a severe course of hemorrhagic fever with renal syndrome is predicted.