RU2786722C1 - Nitrile-containing antiviral compounds - Google Patents
Nitrile-containing antiviral compounds Download PDFInfo
- Publication number
- RU2786722C1 RU2786722C1 RU2021132570A RU2021132570A RU2786722C1 RU 2786722 C1 RU2786722 C1 RU 2786722C1 RU 2021132570 A RU2021132570 A RU 2021132570A RU 2021132570 A RU2021132570 A RU 2021132570A RU 2786722 C1 RU2786722 C1 RU 2786722C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ethyl
- cyano
- methyl
- carboxamide
- oxopyrrolidin
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 284
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 title description 6
- 230000000840 anti-viral Effects 0.000 title description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 218
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims abstract description 83
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 50
- 200000000015 coronavirus disease 2019 Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 40
- 206010053983 Corona virus infection Diseases 0.000 claims abstract description 28
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 164
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N MeOtBu Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 100
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 claims description 85
- 238000000634 powder X-ray diffraction Methods 0.000 claims description 37
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- -1 hydroxy, cyano, phenyl Chemical group 0.000 description 380
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N acetic acid ethyl ester Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 294
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 176
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 164
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 136
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 136
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 129
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N methylene dichloride Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 126
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 124
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 123
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 122
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 description 114
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 102
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 100
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 97
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 96
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 91
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 77
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 76
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 73
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 68
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 67
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 65
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M NaHCO3 Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 59
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 58
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 57
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 57
- 239000000047 product Substances 0.000 description 54
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 52
- 125000005842 heteroatoms Chemical group 0.000 description 52
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N n-methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 49
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L na2so4 Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 39
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 39
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 39
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 38
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 37
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 36
- YSHOWEKUVWPFNR-UHFFFAOYSA-N Burgess reagent Chemical compound CC[N+](CC)(CC)S(=O)(=O)N=C([O-])OC YSHOWEKUVWPFNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 125000004432 carbon atoms Chemical group C* 0.000 description 35
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 35
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 34
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N n-heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N cd3od Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 33
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 description 33
- 125000004429 atoms Chemical group 0.000 description 32
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 30
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 30
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 28
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 28
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 27
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 26
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 25
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 25
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 24
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 24
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 24
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 23
- 108091005771 Peptidases Proteins 0.000 description 22
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 21
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 21
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 21
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 20
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 20
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 20
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 20
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 20
- 229940002612 prodrugs Drugs 0.000 description 20
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 19
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 19
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 19
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 19
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic anhydride Chemical compound FC(F)(F)C(=O)OC(=O)C(F)(F)F QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 18
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 18
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 102000033147 ERVK-25 Human genes 0.000 description 17
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N Phosphoryl chloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 description 16
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 16
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 16
- 125000005913 (C3-C6) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 15
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 15
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 15
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 15
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 15
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 15
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 14
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 14
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 14
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 14
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 14
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 14
- JNWBBCNCSMBKNE-UHFFFAOYSA-N HATU Chemical compound F[P-](F)(F)(F)(F)F.C1=CN=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 JNWBBCNCSMBKNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000002585 base Substances 0.000 description 13
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 13
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 13
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 13
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 13
- 125000006570 (C5-C6) heteroaryl group Chemical group 0.000 description 12
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 12
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 12
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 12
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 12
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 12
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 12
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 12
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 11
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 11
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 11
- 125000000000 cycloalkoxy group Chemical group 0.000 description 11
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 11
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 11
- 125000001313 C5-C10 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 10
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N Di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 10
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 10
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 10
- XIMBESZRBTVIOD-UHFFFAOYSA-N piperidine-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1CCCCN1 XIMBESZRBTVIOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 10
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N cdcl3 Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 9
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 9
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 9
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydrobenzotriazol-4-one Chemical compound O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 101800000504 3C-like protease Proteins 0.000 description 8
- 108010015742 Cytochrome P-450 Enzyme System Proteins 0.000 description 8
- NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N Ritonavir Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C[C@H](O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1SC=NC=1)CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N 0.000 description 8
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 8
- 230000002354 daily Effects 0.000 description 8
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 8
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 8
- 125000004435 hydrogen atoms Chemical group [H]* 0.000 description 8
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N iso-propanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L mgso4 Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 8
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960000311 ritonavir Drugs 0.000 description 8
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 7
- 241000127282 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus Species 0.000 description 7
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 101800001016 Picornain 3C-like protease Proteins 0.000 description 7
- 101800000596 Probable picornain 3C-like protease Proteins 0.000 description 7
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 7
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 7
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 7
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 7
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 7
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 7
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 7
- 230000000699 topical Effects 0.000 description 7
- 125000006568 (C4-C7) heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 description 6
- BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol Chemical compound FC(F)(F)C(O)C(F)(F)F BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100017866 ACE2 Human genes 0.000 description 6
- 125000003601 C2-C6 alkynyl group Chemical group 0.000 description 6
- 102100004057 CYP3A4 Human genes 0.000 description 6
- 101710007540 CYP3A4 Proteins 0.000 description 6
- 229960003957 Dexamethasone Drugs 0.000 description 6
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N Dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 6
- 108010047230 Member 1 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 6
- 102000018075 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Human genes 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 6
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M isovalerate Chemical compound CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 200000000016 middle east respiratory syndrome Diseases 0.000 description 6
- 125000003386 piperidinyl group Chemical group 0.000 description 6
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 6
- RWWYLEGWBNMMLJ-MEUHYHILSA-N remdesivir Drugs C([C@@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@@](C#N)(O1)C=1N2N=CN=C(N)C2=CC=1)O)OP(=O)(N[C@@H](C)C(=O)OCC(CC)CC)OC1=CC=CC=C1 RWWYLEGWBNMMLJ-MEUHYHILSA-N 0.000 description 6
- CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N tBuOOH Chemical compound CC(C)(C)OO CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101700066609 ACE2 Proteins 0.000 description 5
- 101710011233 BHLH74 Proteins 0.000 description 5
- 102000003849 Cytochrome P450 Human genes 0.000 description 5
- 229940021015 I.V. solution additive Amino Acids Drugs 0.000 description 5
- 102000035443 Peptidases Human genes 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 5
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 229920000591 gum Polymers 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 5
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 5
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 5
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 5
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 5
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 5
- 230000003612 virological Effects 0.000 description 5
- DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N (R)-rosmarinic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 DOUMFZQKYFQNTF-WUTVXBCWSA-N 0.000 description 4
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-Lutidine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZZAVIQXQBBOHBB-UHFFFAOYSA-N 4-methoxy-1H-indole-2-carboxylic acid Chemical compound COC1=CC=CC2=C1C=C(C(O)=O)N2 ZZAVIQXQBBOHBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N Azithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)N(C)C[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N 0.000 description 4
- IKIIZLYTISPENI-ZFORQUDYSA-N Baicalin Chemical compound O1[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(C(=C1O)O)=CC2=C1C(=O)C=C(C=1C=CC=CC=1)O2 IKIIZLYTISPENI-ZFORQUDYSA-N 0.000 description 4
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 4
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 4
- LJQLCJWAZJINEB-UHFFFAOYSA-N Hexafluorophosphate Chemical compound F[P-](F)(F)(F)(F)F LJQLCJWAZJINEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N Imidazole Chemical compound C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 4
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 4
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M Lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108091005554 SARS-CoV-2 main protease Proteins 0.000 description 4
- ZEASWHWETFMWCV-ISBUVJFSSA-N Theaflavin 3,3'-di-O-gallate Natural products O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C2=CC(=CC(=O)C(O)=C2C(O)=C(O)C=1)[C@@H]1[C@@H](CC2=C(O)C=C(O)C=C2O1)OC(=O)C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ZEASWHWETFMWCV-ISBUVJFSSA-N 0.000 description 4
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K Tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 229960004099 azithromycin Drugs 0.000 description 4
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005384 cross polarization magic-angle spinning Methods 0.000 description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 4
- 230000005712 crystallization Effects 0.000 description 4
- 125000006448 cycloalkyl cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 4
- 239000010408 film Substances 0.000 description 4
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 4
- 239000002748 glycoprotein P inhibitor Substances 0.000 description 4
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 4
- 125000005553 heteroaryloxy group Chemical group 0.000 description 4
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 4
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 4
- 125000001786 isothiazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000000842 isoxazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 4
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N magnesium oxide Chemical compound [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 125000004433 nitrogen atoms Chemical group N* 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 4
- 125000001715 oxadiazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000002098 pyridazinyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 4
- 239000007916 tablet composition Substances 0.000 description 4
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000001425 triazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- 239000001100 (2S)-5,7-dihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)chroman-4-one Substances 0.000 description 3
- 125000006766 (C2-C6) alkynyloxy group Chemical group 0.000 description 3
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SNUSZUYTMHKCPM-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxypyridin-2-one Chemical compound ON1C=CC=CC1=O SNUSZUYTMHKCPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101800000535 3C-like proteinase Proteins 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N Benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Carbodicyclohexylimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000035695 Efflux Effects 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- ZCGNOVWYSGBHAU-UHFFFAOYSA-N Favipiravir Chemical compound NC(=O)C1=NC(F)=CNC1=O ZCGNOVWYSGBHAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N Isopropyl acetate Chemical compound CC(C)OC(C)=O JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- 238000005004 MAS NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N P-Toluenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 3
- 108060006943 RdRp Proteins 0.000 description 3
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 3
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 3
- LHHCSNFAOIFYRV-DOVBMPENSA-N boceprevir Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]2[C@@H](C2(C)C)CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)NC(C)(C)C)C(C)(C)C)NC(C(=O)C(N)=O)CC1CCC1 LHHCSNFAOIFYRV-DOVBMPENSA-N 0.000 description 3
- 229960000517 boceprevir Drugs 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L cacl2 Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 3
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 3
- 125000002933 cyclohexyloxy group Chemical group C1(CCCCC1)O* 0.000 description 3
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 3
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940042399 direct acting antivirals Protease inhibitors Drugs 0.000 description 3
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 3
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 229950008454 favipiravir Drugs 0.000 description 3
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 3
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 3
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 3
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 3
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular Effects 0.000 description 3
- 229950003188 isovaleryl diethylamide Drugs 0.000 description 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 3
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 3
- QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N monochloramine Chemical compound ClN QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 3
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical Effects 0.000 description 3
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 3
- 125000002971 oxazolyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 125000001325 propanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 3
- 230000000241 respiratory Effects 0.000 description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 3
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 3
- 230000001131 transforming Effects 0.000 description 3
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-M valerate Chemical compound CCCCC([O-])=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WSVLPVUVIUVCRA-RJMJUYIDSA-N (2R,3R,4S,5R,6S)-2-(hydroxymethyl)-6-[(2R,3S,4R,5R)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane-3,4,5-triol;hydrate Chemical compound O.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O WSVLPVUVIUVCRA-RJMJUYIDSA-N 0.000 description 2
- LRFZIPCTFBPFLX-SSDOTTSWSA-N (2S)-3,3-dimethyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]butanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)C(C)(C)C LRFZIPCTFBPFLX-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 2
- AMFDITJFBUXZQN-KUBHLMPHSA-N (2S,3S,4R,5R)-2-(4-amino-5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)-5-(hydroxymethyl)pyrrolidine-3,4-diol Chemical compound C=1NC=2C(N)=NC=NC=2C=1[C@@H]1N[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O AMFDITJFBUXZQN-KUBHLMPHSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N (E)-but-2-enedioate;hydron Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 2
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 1,1'-Carbonyldiimidazole Substances C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001781 1,3,4-oxadiazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-Methylimidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZKCVKAIVRRHDC-UHFFFAOYSA-N 2,2-bis(1H-indol-3-yl)-1H-indol-3-one Chemical compound C1=CC=C2C(C3(C=4C5=CC=CC=C5NC=4)NC4=CC=CC=C4C3=O)=CNC2=C1 IZKCVKAIVRRHDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XCNBGWKQXRQKSA-UHFFFAOYSA-N 2-(2-chloro-4-iodoanilino)-3,4-difluorobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1NC1=CC=C(I)C=C1Cl XCNBGWKQXRQKSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HGVVOUNEGQIPMS-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-[[2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3,4-dihydro-2H-chromen-3-yl]oxy]-3,4-dihydrochromene-3,4,5,7-tetrol Chemical compound O1C2=CC(O)=CC(O)=C2C(O)C(O)C1(C=1C=C(O)C(O)=CC=1)OC1CC2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 HGVVOUNEGQIPMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 2-(cyclohexen-1-yl)cyclohexan-1-one Chemical compound O=C1CCCCC1C1=CCCCC1 GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000094 2-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010091324 3C proteases Proteins 0.000 description 2
- VVOAZFWZEDHOOU-UHFFFAOYSA-N 5,5'-diallyl-2,2'-dihydroxybiphenyl Chemical compound OC1=CC=C(CC=C)C=C1C1=CC(CC=C)=CC=C1O VVOAZFWZEDHOOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940119059 Actemra Drugs 0.000 description 2
- 108010007562 Adalimumab Proteins 0.000 description 2
- KMOUJOKENFFTPU-QNDFHXLGSA-N Apigetrin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C=C(C=3C=CC(O)=CC=3)OC2=C1 KMOUJOKENFFTPU-QNDFHXLGSA-N 0.000 description 2
- 229950002889 Apilimod Drugs 0.000 description 2
- QNZCBYKSOIHPEH-UHFFFAOYSA-N Apixaban Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1N1C(C(=O)N(CC2)C=3C=CC(=CC=3)N3C(CCCC3)=O)=C2C(C(N)=O)=N1 QNZCBYKSOIHPEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 102100000129 CHURC1 Human genes 0.000 description 2
- 101710014631 CHURC1 Proteins 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L Calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- XASIMHXSUQUHLV-UHFFFAOYSA-N Camostat Chemical compound C1=CC(CC(=O)OCC(=O)N(C)C)=CC=C1OC(=O)C1=CC=C(N=C(N)N)C=C1 XASIMHXSUQUHLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate dianion Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960003260 Chlorhexidine Drugs 0.000 description 2
- RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N Chrysin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037250 Clearance Effects 0.000 description 2
- GBBJCSTXCAQSSJ-XQXXSGGOSA-N Clevudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1[C@H](F)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 GBBJCSTXCAQSSJ-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N Cortisol Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 229960000913 Crospovidone Drugs 0.000 description 2
- 229940097362 Cyclodextrins Drugs 0.000 description 2
- 229950004181 Dalcetrapib Drugs 0.000 description 2
- YZQLWPMZQVHJED-UHFFFAOYSA-N Dalcetrapib Chemical compound C=1C=CC=C(SC(=O)C(C)C)C=1NC(=O)C1(CC(CC)CC)CCCCC1 YZQLWPMZQVHJED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N Diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003722 Doxycycline Drugs 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- MTZQAGJQAFMTAQ-UHFFFAOYSA-N Ethyl benzoate Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=CC=C1 MTZQAGJQAFMTAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N Exidine Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1NC(N)=NC(N)=NCCCCCCN=C(N)N=C(N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUFQPHANEAPEMJ-UHFFFAOYSA-N Famotidine Chemical compound NC(N)=NC1=NC(CSCCC(N)=NS(N)(=O)=O)=CS1 XUFQPHANEAPEMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001596 Famotidine Drugs 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)Cl)C3=CC=CC=C3C2=C1 IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950002031 Galidesivir Drugs 0.000 description 2
- 229960002897 Heparin Drugs 0.000 description 2
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N Heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 2
- AIONOLUJZLIMTK-AWEZNQCLSA-N Hesperetin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 AIONOLUJZLIMTK-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 2
- 229940025878 Hesperidin Drugs 0.000 description 2
- QUQPHWDTPGMPEX-YEDPJISVSA-N Hesperidin Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](Oc2cc(O)c3C(=O)C[C@@H](c4cc(O)c(OC)cc4)Oc3c2)O1)[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 QUQPHWDTPGMPEX-YEDPJISVSA-N 0.000 description 2
- 229940071829 Ilaris Drugs 0.000 description 2
- 108010053490 Infliximab Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical group CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 229960001375 Lactose Drugs 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 2
- 229960001021 Lactose Monohydrate Drugs 0.000 description 2
- 229950005287 Lanadelumab Drugs 0.000 description 2
- 229950007439 Lenzilumab Drugs 0.000 description 2
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-XIXRPRMCSA-N Mesotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-XIXRPRMCSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L MgCl2 Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 2
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinylpyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSKAZIJJKRAJAV-KOEQRZSOSA-N N-[(E)-(3-methylphenyl)methylideneamino]-6-morpholin-4-yl-2-(2-pyridin-2-ylethoxy)pyrimidin-4-amine Chemical compound CC1=CC=CC(\C=N\NC=2N=C(OCCC=3N=CC=CC=3)N=C(C=2)N2CCOCC2)=C1 HSKAZIJJKRAJAV-KOEQRZSOSA-N 0.000 description 2
- QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N Nelfinavir Chemical compound CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)N[C@H]([C@H](O)CN1[C@@H](C[C@@H]2CCCC[C@@H]2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N 0.000 description 2
- ARGKVCXINMKCAZ-UZRWAPQLSA-N Neohesperidin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@H]3[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O3)O)=CC(O)=C2C(=O)C1 ARGKVCXINMKCAZ-UZRWAPQLSA-N 0.000 description 2
- ARGKVCXINMKCAZ-NRRCNVALSA-N Neohesperidin Natural products O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1Oc1cc(O)c2C(=O)C[C@@H](c3cc(O)c(OC)cc3)Oc2c1)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](C)O1 ARGKVCXINMKCAZ-NRRCNVALSA-N 0.000 description 2
- ZBBHBTPTTSWHBA-UHFFFAOYSA-N Nicardipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OCCN(C)CC=2C=CC=CC=2)C1C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 ZBBHBTPTTSWHBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001783 Nicardipine Drugs 0.000 description 2
- 229940100691 Oral Capsule Drugs 0.000 description 2
- 229940100692 Oral Suspension Drugs 0.000 description 2
- 229940096978 Oral Tablet Drugs 0.000 description 2
- 108091000258 Otilimab Proteins 0.000 description 2
- 241000283898 Ovis Species 0.000 description 2
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 102000011587 Polyproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 2
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M Potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 2
- 229960000329 Ribavirin Drugs 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N Salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950006348 Sarilumab Drugs 0.000 description 2
- 210000003491 Skin Anatomy 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N Stearic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M Tetra-n-butylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FPZLLRFZJZRHSY-HJYUBDRYSA-N Tigecycline Chemical compound C([C@H]1C2)C3=C(N(C)C)C=C(NC(=O)CNC(C)(C)C)C(O)=C3C(=O)C1=C(O)[C@@]1(O)[C@@H]2[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C1=O FPZLLRFZJZRHSY-HJYUBDRYSA-N 0.000 description 2
- WPVFJKSGQUFQAP-GKAPJAKFSA-N Valcyte Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COC(CO)COC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C=N2 WPVFJKSGQUFQAP-GKAPJAKFSA-N 0.000 description 2
- WXIONIWNXBAHRU-UHFFFAOYSA-N [dimethylamino(triazolo[4,5-b]pyridin-3-yloxy)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CN=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 WXIONIWNXBAHRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UOFYSRZSLXWIQB-UHFFFAOYSA-N abivertinib Chemical compound C1CN(C)CCN1C(C(=C1)F)=CC=C1NC1=NC(OC=2C=C(NC(=O)C=C)C=CC=2)=C(C=CN2)C2=N1 UOFYSRZSLXWIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940121401 abivertinib Drugs 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 2
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 description 2
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 description 2
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 2
- 229960003886 apixaban Drugs 0.000 description 2
- 238000000065 atmospheric pressure chemical ionisation Methods 0.000 description 2
- 229960003321 baicalin Drugs 0.000 description 2
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical group N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 2
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012455 biphasic mixture Substances 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960000772 camostat Drugs 0.000 description 2
- 108010036787 canakinumab Proteins 0.000 description 2
- 229960001838 canakinumab Drugs 0.000 description 2
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 2
- 150000001244 carboxylic acid anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic Effects 0.000 description 2
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035512 clearance Effects 0.000 description 2
- 229960005338 clevudine Drugs 0.000 description 2
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 2
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 2
- 238000002447 crystallographic data Methods 0.000 description 2
- 125000004851 cyclopentylmethyl group Chemical group C1(CCCC1)C* 0.000 description 2
- 125000004186 cyclopropylmethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C1([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- JBIWCJUYHHGXTC-AKNGSSGZSA-N doxycycline Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC=C2[C@H](C)[C@@H]2C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@@H]1[C@H]2O JBIWCJUYHHGXTC-AKNGSSGZSA-N 0.000 description 2
- 229940009662 edetate Drugs 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N edta Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 description 2
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N epi-Gallocatechin 3-O-gallate Natural products O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 description 2
- STSCVKRWJPWALQ-UHFFFAOYSA-N ethyl 2,2,2-trifluoroacetate Chemical compound CCOC(=O)C(F)(F)F STSCVKRWJPWALQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000003203 everyday Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N fumaric acid Chemical compound OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 229950009614 gimsilumab Drugs 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- QUQPHWDTPGMPEX-QJBIFVCTSA-N hesperidin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]4[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)O3)O)=CC(O)=C2C(=O)C1 QUQPHWDTPGMPEX-QJBIFVCTSA-N 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 230000001965 increased Effects 0.000 description 2
- 125000002249 indol-2-yl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([*])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 2
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003253 isopropoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(O*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 108010078155 lanadelumab Proteins 0.000 description 2
- 108091006802 leronlimab Proteins 0.000 description 2
- 229940121292 leronlimab Drugs 0.000 description 2
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 2
- GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M lithium;hydroxide;hydrate Chemical compound [Li+].O.[OH-] GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 2
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- MSWIFFGHKBTPMY-VFUQPONKSA-L magnesium;(E)-4-octadecoxy-4-oxobut-2-enoate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)\C=C\C([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)\C=C\C([O-])=O MSWIFFGHKBTPMY-VFUQPONKSA-L 0.000 description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 2
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 2
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 2
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002757 morpholinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960000884 nelfinavir Drugs 0.000 description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 2
- 229940121480 otilimab Drugs 0.000 description 2
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036961 partial Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 238000005897 peptide coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDRPUGZCRXZLFL-OWOJBTEDSA-N piceatannol Chemical compound OC1=CC(O)=CC(\C=C\C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 CDRPUGZCRXZLFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 235000013809 polyvinylpolypyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 229920000523 polyvinylpolypyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 2
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001144 powder X-ray diffraction data Methods 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propanol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 2
- 125000004309 pyranyl group Chemical group O1C(C=CC=C1)* 0.000 description 2
- 125000003373 pyrazinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000719 pyrrolidinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 108010090937 ravulizumab Proteins 0.000 description 2
- 229950007085 ravulizumab Drugs 0.000 description 2
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 2
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 2
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 2
- 102220005682 rs121913116 Human genes 0.000 description 2
- 108010025791 sarilumab Proteins 0.000 description 2
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 2
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000000371 solid-state nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 2
- 239000012258 stirred mixture Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 2
- 125000003718 tetrahydrofuranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960004089 tigecycline Drugs 0.000 description 2
- 229960003989 tocilizumab Drugs 0.000 description 2
- 108010078548 tocilizumab Proteins 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-M toluene-4-sulfonate Chemical compound CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- WJKHJLXJJJATHN-UHFFFAOYSA-N triflic anhydride Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)OS(=O)(=O)C(F)(F)F WJKHJLXJJJATHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019798 tripotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229960002149 valganciclovir Drugs 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N β-Alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930014124 (-)-epigallocatechin gallate Natural products 0.000 description 1
- 235000004911 (-)-epigallocatechin gallate Nutrition 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N (1R)-4-[(1E,3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-18-[(1R,4R)-4-hydroxy-2,6,6-trimethylcyclohex-2-en-1-yl]-3,7,12,16-tetramethyloctadeca-1,3,5,7,9,11,13,15,17-nonaenyl]-3,5,5-trimethylcyclohex-3-en-1-ol Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N 0.000 description 1
- MHAVMNJPXLZEIG-CNRMHUMKSA-N (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-9-oxo-1-prop-1-en-2-yl-2,3,4,5,6,7,7a,10,11,11b,12,13,13a,13b-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]chrysene-3a-carbaldehyde Chemical compound C1CC(=O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C MHAVMNJPXLZEIG-CNRMHUMKSA-N 0.000 description 1
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2R,3R,4S,5R,6S)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- LPBSHGLDBQBSPI-YFKPBYRVSA-N (2S)-2-amino-4,4-dimethylpentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)C[C@H](N)C(O)=O LPBSHGLDBQBSPI-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- SEBFKMXJBCUCAI-PQVVKJAFSA-N (2S,3S)-3,5,7-trihydroxy-2-[(2S,3S)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-(hydroxymethyl)-2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-6-yl]-2,3-dihydrochromen-4-one Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC([C@H]2[C@@H](OC3=CC=C(C=C3O2)[C@H]2[C@@H](C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 SEBFKMXJBCUCAI-PQVVKJAFSA-N 0.000 description 1
- OYQRWBFWLSYDIZ-NATPOTRJSA-N (2S,4S,5S,7S)-5-amino-N-(3-amino-2,2-dimethyl-3-oxopropyl)-4-hydroxy-7-[[4-methoxy-3-(3-methoxypropoxy)phenyl]methyl]-8-methyl-2-propan-2-ylnonanamide;2,4-dioxo-1H-pyrimidine-6-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(=O)NC(=O)N1.COCCCOC1=CC(C[C@@H](C[C@H](N)[C@@H](O)C[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(C)(C)C(N)=O)C(C)C)=CC=C1OC OYQRWBFWLSYDIZ-NATPOTRJSA-N 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-XFYACQKRSA-N (2Z,4E,6E,8E)-3,7-dimethyl-9-(2,6,6-trimethylcyclohex-1-en-1-yl)nona-2,4,6,8-tetraenoic acid Chemical compound OC(=O)/C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-XFYACQKRSA-N 0.000 description 1
- OQANPHBRHBJGNZ-FYJGNVAPSA-N (3E)-6-oxo-3-[[4-(pyridin-2-ylsulfamoyl)phenyl]hydrazinylidene]cyclohexa-1,4-diene-1-carboxylic acid Chemical compound C1=CC(=O)C(C(=O)O)=C\C1=N\NC1=CC=C(S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)C=C1 OQANPHBRHBJGNZ-FYJGNVAPSA-N 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N (3S,6S,9S,12R,15S,18S,21S,24S,30S,33S)-30-ethyl-33-[(E,1R,2R)-1-hydroxy-2-methylhex-4-enyl]-1,4,7,10,12,15,19,25,28-nonamethyl-6,9,18,24-tetrakis(2-methylpropyl)-3,21-di(propan-2-yl)-1,4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-undecazacyclotritriacontane-2,5,8,11,14,17 Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N (5S,5aR,8aR,9R)-5-[[(2R,4aR,6R,7R,8R,8aS)-7,8-dihydroxy-2-thiophen-2-yl-4,4a,6,7,8,8a-hexahydropyrano[3,2-d][1,3]dioxin-6-yl]oxy]-9-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-5a,6,8a,9-tetrahydro-5H-[2]benzofuro[6,5-f][1,3]benzodioxol-8-one Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- JFPVXVDWJQMJEE-IZRZKJBUSA-N (6R,7R)-3-[(carbamoyloxy)methyl]-7-[(2Z)-2-(furan-2-yl)-2-(methoxyimino)acetamido]-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(COC(N)=O)CS[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OC)C1=CC=CO1 JFPVXVDWJQMJEE-IZRZKJBUSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UWTATZPHSA-M (R)-lactate Chemical compound C[C@@H](O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UWTATZPHSA-M 0.000 description 1
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 description 1
- YFMFNYKEUDLDTL-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,3,3,3-Heptafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)C(F)(F)F YFMFNYKEUDLDTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGUZGTVOIAKKC-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2-Tetrafluoroethane Chemical compound FCC(F)(F)F LVGUZGTVOIAKKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GTIIVHODSNYECK-UHFFFAOYSA-N 1,1,1-trifluoropropane Chemical group [CH2]CC(F)(F)F GTIIVHODSNYECK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004504 1,2,4-oxadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004506 1,2,5-oxadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- KXMZDGSRSGHMMK-VWLOTQADSA-N 1-(6,7-dihydro-5H-benzo[2,3]cyclohepta[2,4-d]pyridazin-3-yl)-3-N-[(7S)-7-pyrrolidin-1-yl-6,7,8,9-tetrahydro-5H-benzo[7]annulen-3-yl]-1,2,4-triazole-3,5-diamine Chemical compound N1([C@H]2CCC3=CC=C(C=C3CC2)NC=2N=C(N(N=2)C=2N=NC=3C4=CC=CC=C4CCCC=3C=2)N)CCCC1 KXMZDGSRSGHMMK-VWLOTQADSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-GJMOJQLCSA-N 1-[(2R,4R,5S)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-GJMOJQLCSA-N 0.000 description 1
- OZOMQRBLCMDCEG-VIZOYTHASA-N 1-[(E)-[5-(4-nitrophenyl)furan-2-yl]methylideneamino]imidazolidine-2,4-dione Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1C(O1)=CC=C1\C=N\N1C(=O)NC(=O)C1 OZOMQRBLCMDCEG-VIZOYTHASA-N 0.000 description 1
- DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 1-butoxybutane Chemical compound CCCCOCCCC DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMJAJFVLHDIEHF-CRBRZBHVSA-N 14-Deoxy-11,12-didehydroandrographolide Chemical compound C(/[C@@H]1C(=C)CC[C@H]2[C@@]1(C)CC[C@@H](O)[C@]2(CO)C)=C\C1=CCOC1=O XMJAJFVLHDIEHF-CRBRZBHVSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- 125000004206 2,2,2-trifluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C(F)(F)F 0.000 description 1
- WEVYAHXRMPXWCK-DICFDUPASA-N 2,2-dideuterioacetonitrile Chemical compound [2H]C([2H])C#N WEVYAHXRMPXWCK-DICFDUPASA-N 0.000 description 1
- 125000004778 2,2-difluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])(F)F 0.000 description 1
- PAQZWJGSJMLPMG-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tripropyl-1,3,5,2$l^{5},4$l^{5},6$l^{5}-trioxatriphosphinane 2,4,6-trioxide Chemical compound CCCP1(=O)OP(=O)(CCC)OP(=O)(CCC)O1 PAQZWJGSJMLPMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBLIDPPHFGWTKU-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichlorobenzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=C(Cl)C=CC=C1Cl JBLIDPPHFGWTKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WLOWIPYSYJEWHB-UHFFFAOYSA-N 2-(3,3-difluorocyclobutyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1CC(F)(F)C1 WLOWIPYSYJEWHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFDGPVCHZBVARC-UHFFFAOYSA-M 2-(dimethylamino)acetate Chemical class CN(C)CC([O-])=O FFDGPVCHZBVARC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VHVPQPYKVGDNFY-TUJWMRSMSA-N 2-[(2S)-butan-2-yl]-4-[4-[4-[4-[[(2R,4S)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1,2,4-triazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]piperazin-1-yl]phenyl]-1,2,4-triazol-3-one Chemical compound O=C1N([C@@H](C)CC)N=CN1C1=CC=C(N2CCN(CC2)C=2C=CC(OC[C@@H]3O[C@](CN4N=CN=C4)(OC3)C=3C(=CC(Cl)=CC=3)Cl)=CC=2)C=C1 VHVPQPYKVGDNFY-TUJWMRSMSA-N 0.000 description 1
- VUKAUDKDFVSVFT-UHFFFAOYSA-N 2-[6-[4,5-bis(2-hydroxypropoxy)-2-(2-hydroxypropoxymethyl)-6-methoxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)-5-methoxyoxane-3,4-diol Chemical compound COC1C(OC)C(OC2C(C(O)C(OC)C(CO)O2)O)C(COC)OC1OC1C(COCC(C)O)OC(OC)C(OCC(C)O)C1OCC(C)O VUKAUDKDFVSVFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCUNFLYVYCGDHP-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-4-methylsulfonylbutanoate Chemical compound CS(=O)(=O)CCC(N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001731 2-cyanoethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])([H])C#N 0.000 description 1
- GXQRZUWJYFTHSP-UHFFFAOYSA-N 2-cyclohexyl-2-methoxyacetic acid Chemical compound COC(C(O)=O)C1CCCCC1 GXQRZUWJYFTHSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVEMWYGBLHQEAK-UHFFFAOYSA-N 2-ethylbutanamide Chemical compound CCC(CC)C(N)=O QVEMWYGBLHQEAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUCQYCKVKVOKAY-CTYIDZIISA-N 2-hydroxy-3-[(1r,4r)-4-(4-chlorophenyl)cyclohexyl]-1,4-dihydronaphthalene-1,4-dione Chemical compound C1([C@H]2CC[C@@H](CC2)C2=C(C(C3=CC=CC=C3C2=O)=O)O)=CC=C(Cl)C=C1 KUCQYCKVKVOKAY-CTYIDZIISA-N 0.000 description 1
- 125000001494 2-propynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004105 2-pyridyl group Chemical group N1=C([*])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- IPXNXMNCBXHYLQ-UHFFFAOYSA-N 2-pyrrolidin-1-ylacetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCCC1 IPXNXMNCBXHYLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000175 2-thienyl group Chemical group S1C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 238000005084 2D-nuclear magnetic resonance Methods 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 2qpq Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- JXGJAHAKCWUIGR-UHFFFAOYSA-N 3,4,5,6-tetradehydropyran Chemical group [CH]1OC#CC#C1 JXGJAHAKCWUIGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AORMDLNPRGXHHL-UHFFFAOYSA-N 3-Ethylpentane Chemical compound CCC(CC)CC AORMDLNPRGXHHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-M 3-[[(2R)-2,4-dihydroxy-3,3-dimethylbutanoyl]amino]propanoate Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-M 0.000 description 1
- 125000000474 3-butynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-M 3-carboxy-2,3-dihydroxypropanoate Chemical compound OC(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- AQIPOVXEAHMJOU-UHFFFAOYSA-N 3-methylimidazo[2,1-b][1,3]thiazole-2-carboxylic acid Chemical compound C1=CN2C(C)=C(C(O)=O)SC2=N1 AQIPOVXEAHMJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003349 3-pyridyl group Chemical group N1=C([H])C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000001541 3-thienyl group Chemical group S1C([H])=C([*])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 3β-hydroxy-Olean-12-en-28-oic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 0.000 description 1
- LQBVNQSMGBZMKD-UHFFFAOYSA-N 4-[4-[[2-(4-chlorophenyl)-4,4-dimethylcyclohexen-1-yl]methyl]piperazin-1-yl]-N-[3-nitro-4-(oxan-4-ylmethylamino)phenyl]sulfonyl-2-(1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-5-yloxy)benzamide Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1C=1CC(C)(C)CCC=1CN(CC1)CCN1C(C=C1OC=2C=C3C=CNC3=NC=2)=CC=C1C(=O)NS(=O)(=O)C(C=C1[N+]([O-])=O)=CC=C1NCC1CCOCC1 LQBVNQSMGBZMKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CABAIQRHBLZKEG-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-2-ethyl-5-methylpyrazole-3-carboxylic acid Chemical compound CCN1N=C(C)C(Br)=C1C(O)=O CABAIQRHBLZKEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSCNPVBDEITWDU-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-2,5-dimethylpyrazole-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=NN(C)C(C(O)=O)=C1Cl BSCNPVBDEITWDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000339 4-pyridyl group Chemical group N1=C([H])C([H])=C([*])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000004606 5,6,7,8-tetrahydroisoquinolinyl group Chemical group C1(=NC=CC=2CCCCC12)* 0.000 description 1
- 125000004608 5,6,7,8-tetrahydroquinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC=2CCCCC12)* 0.000 description 1
- GZSOSUNBTXMUFQ-NJGQXECBSA-N 5,7,3'-Trihydroxy-4'-methoxyflavone 7-O-rutinoside Natural products O(C[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](Oc2cc(O)c3C(=O)C=C(c4cc(O)c(OC)cc4)Oc3c2)O1)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 GZSOSUNBTXMUFQ-NJGQXECBSA-N 0.000 description 1
- CWSZBVAUYPTXTG-UHFFFAOYSA-N 5-[6-[[3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-methoxyoxan-2-yl]oxymethyl]-3,4-dihydroxy-5-[4-hydroxy-3-(2-hydroxyethoxy)-6-(hydroxymethyl)-5-methoxyoxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)-2-methyloxane-3,4-diol Chemical compound O1C(CO)C(OC)C(O)C(O)C1OCC1C(OC2C(C(O)C(OC)C(CO)O2)OCCO)C(O)C(O)C(OC2C(OC(C)C(O)C2O)CO)O1 CWSZBVAUYPTXTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxylysine Chemical compound NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006163 5-membered heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- WDENQIQQYWYTPO-IBGZPJMESA-N Acalabrutinib Chemical compound CC#CC(=O)N1CCC[C@H]1C1=NC(C=2C=CC(=CC=2)C(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C2N1C=CN=C2N WDENQIQQYWYTPO-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- 229950009821 Acalabrutinib Drugs 0.000 description 1
- WNTYBHLDCKXEOT-UHFFFAOYSA-N Acetophenazine Chemical compound C12=CC(C(=O)C)=CC=C2SC2=CC=CC=C2N1CCCN1CCN(CCO)CC1 WNTYBHLDCKXEOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N Adamantane Chemical compound C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNMJYKCGWZFFKR-UHFFFAOYSA-N Alfuzosin Chemical compound N=1C(N)=C2C=C(OC)C(OC)=CC2=NC=1N(C)CCCNC(=O)C1CCCO1 WNMJYKCGWZFFKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004229 Alkannin Substances 0.000 description 1
- QGAVSDVURUSLQK-UHFFFAOYSA-N Ammonium heptamolybdate Chemical compound N.N.N.N.N.N.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Mo].[Mo].[Mo].[Mo].[Mo].[Mo].[Mo] QGAVSDVURUSLQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMARZQAQMVYCKC-OEMFJLHTSA-N Amprenavir Chemical compound C([C@@H]([C@H](O)CN(CC(C)C)S(=O)(=O)C=1C=CC(N)=CC=1)NC(=O)O[C@@H]1COCC1)C1=CC=CC=C1 YMARZQAQMVYCKC-OEMFJLHTSA-N 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 108090000975 Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 description 1
- KCFYEAOKVJSACF-UHFFFAOYSA-N Arbidol Chemical compound CN1C2=CC(Br)=C(O)C(CN(C)C)=C2C(C(=O)OCC)=C1CSC1=CC=CC=C1 KCFYEAOKVJSACF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N Aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 Aspartame Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 Aspartic Acid Drugs 0.000 description 1
- XUZMWHLSFXCVMG-UHFFFAOYSA-N Baricitinib Chemical compound C1N(S(=O)(=O)CC)CC1(CC#N)N1N=CC(C=2C=3C=CNC=3N=CN=2)=C1 XUZMWHLSFXCVMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950000971 Baricitinib Drugs 0.000 description 1
- 229960000686 Benzalkonium Chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N Benzyl bromide Chemical compound BrCC1=CC=CC=C1 AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000008904 Betacoronavirus Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RTATXGUCZHCSNG-UHFFFAOYSA-N Biorobin Chemical compound OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=CC(O)=CC=2)=O)O1 RTATXGUCZHCSNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 1
- BQDZMZRUXNFTQT-OHMLUKIUSA-N Bolazine Chemical compound C([C@]1(C)[C@@H](O)CC[C@H]1[C@@H]1CC2)C[C@@H]1[C@](C[C@H]1C)(C)[C@@H]2C\C1=N/N=C1/C[C@H](CC[C@@H]2[C@@H]3CC[C@]4(C)[C@@H](O)CC[C@H]42)[C@]3(C)C[C@H]1C BQDZMZRUXNFTQT-OHMLUKIUSA-N 0.000 description 1
- 229950009014 Bolazine Drugs 0.000 description 1
- XSEUMFJMFFMCIU-UHFFFAOYSA-N Buformin Chemical compound CCCC\N=C(/N)N=C(N)N XSEUMFJMFFMCIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005537 C09CA07 - Telmisartan Substances 0.000 description 1
- 101710035729 C32D5.10 Proteins 0.000 description 1
- 229940010415 CALCIUM HYDRIDE Drugs 0.000 description 1
- HYGKPGOEWCYHEN-IJEUNHHQSA-N COc1cc(O[C@@H]2O[C@H](CO[C@@H]3OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)c2c(c1)oc1ccc(OC)c(OC)c1c2=O Chemical compound COc1cc(O[C@@H]2O[C@H](CO[C@@H]3OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)c2c(c1)oc1ccc(OC)c(OC)c1c2=O HYGKPGOEWCYHEN-IJEUNHHQSA-N 0.000 description 1
- 102100018575 CYP1A2 Human genes 0.000 description 1
- 102100017371 CYP2C19 Human genes 0.000 description 1
- 102100017367 CYP2C9 Human genes 0.000 description 1
- 102100005543 CYP2D6 Human genes 0.000 description 1
- 102100004059 CYP3A5 Human genes 0.000 description 1
- 101710007537 CYP3A5 Proteins 0.000 description 1
- UUGAXJGDKREHIO-UHFFFAOYSA-N Calcium hydride Chemical compound [H-].[H-].[Ca+2] UUGAXJGDKREHIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIOPJNTWMNEORI-UHFFFAOYSA-N Camphorsulfonic acid Chemical compound C1CC2(CS(O)(=O)=O)C(=O)CC1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950004548 Candoxatril Drugs 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- DGQLVPJVXFOQEV-NGOCYOHBSA-N Carminic acid Chemical compound OC1=C2C(=O)C=3C(C)=C(C(O)=O)C(O)=CC=3C(=O)C2=C(O)C(O)=C1[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DGQLVPJVXFOQEV-NGOCYOHBSA-N 0.000 description 1
- NPAKNKYSJIDKMW-UHFFFAOYSA-N Carvedilol Chemical compound COC1=CC=CC=C1OCCNCC(O)COC1=CC=CC2=NC3=CC=C[CH]C3=C12 NPAKNKYSJIDKMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YJQPYGGHQPGBLI-KGSXXDOSSA-N Cathomycin Chemical compound O1C(C)(C)[C@H](OC)[C@@H](OC(N)=O)[C@@H](O)[C@@H]1OC1=CC=C(C(O)=C(NC(=O)C=2C=C(CC=C(C)C)C(O)=CC=2)C(=O)O2)C2=C1C YJQPYGGHQPGBLI-KGSXXDOSSA-N 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- OLVCFLKTBJRLHI-AXAPSJFSSA-N Cefamandole Chemical compound CN1N=NN=C1SCC1=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](O)C=3C=CC=CC=3)[C@H]2SC1 OLVCFLKTBJRLHI-AXAPSJFSSA-N 0.000 description 1
- 229960003012 Cefamandole Drugs 0.000 description 1
- 229960001668 Cefuroxime Drugs 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- ARXHRTZAVQOQEU-BRVLHLJYSA-N Cerevisterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=C[C@@H](O)[C@]21O ARXHRTZAVQOQEU-BRVLHLJYSA-N 0.000 description 1
- ARXHRTZAVQOQEU-LYHJVHLQSA-N Cerevisterol Natural products C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=C[C@@H](O)[C@]21O ARXHRTZAVQOQEU-LYHJVHLQSA-N 0.000 description 1
- 229910052684 Cerium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001091 Chenodeoxycholic Acid Drugs 0.000 description 1
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N Chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N Chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 229960005091 Chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- DHSUYTOATWAVLW-WFVMDLQDSA-N Cilastatin Chemical compound CC1(C)C[C@@H]1C(=O)N\C(=C/CCCCSC[C@H](N)C(O)=O)C(O)=O DHSUYTOATWAVLW-WFVMDLQDSA-N 0.000 description 1
- 229960004912 Cilastatin Drugs 0.000 description 1
- 229940090805 Clavulanate Drugs 0.000 description 1
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N Clavulanic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 description 1
- 229910019101 CoV Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- JGBBVDFNZSRLIF-UHFFFAOYSA-N Conivaptan Chemical compound C12=CC=CC=C2C=2[N]C(C)=NC=2CCN1C(=O)C(C=C1)=CC=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 JGBBVDFNZSRLIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 229940009997 Cromolyn Drugs 0.000 description 1
- 229940119017 Cyclosporine Drugs 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 108010074922 Cytochrome P-450 CYP1A2 Proteins 0.000 description 1
- 108010026925 Cytochrome P-450 CYP2C19 Proteins 0.000 description 1
- 108010000543 Cytochrome P-450 CYP2C9 Proteins 0.000 description 1
- 108010001237 Cytochrome P-450 CYP2D6 Proteins 0.000 description 1
- 102000002004 Cytochrome P-450 Enzyme System Human genes 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N D-Galacturonic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229950007095 DIMINAZENE Drugs 0.000 description 1
- 101700000624 DUT Proteins 0.000 description 1
- 229960001987 Dantrolene Drugs 0.000 description 1
- VEVRNHHLCPGNDU-MUGJNUQGSA-O Desmosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCC[N+]1=CC(CC[C@H](N)C(O)=O)=C(CCC[C@H](N)C(O)=O)C(CC[C@H](N)C(O)=O)=C1 VEVRNHHLCPGNDU-MUGJNUQGSA-O 0.000 description 1
- 206010012601 Diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N Diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNYZHCFCZNMTFY-UHFFFAOYSA-N Diminazen Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1N\N=N\C1=CC=C(C(N)=N)C=C1 XNYZHCFCZNMTFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940112141 Dry Powder Inhaler Drugs 0.000 description 1
- OBDOVFRMEYHSQB-UHFFFAOYSA-N Duxil Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1C(C=1C=CC(F)=CC=1)N1CCN(C=2N=C(NCC=C)N=C(NCC=C)N=2)CC1 OBDOVFRMEYHSQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 229950005627 Embonate Drugs 0.000 description 1
- 229950000206 Estolate Drugs 0.000 description 1
- 229960005309 Estradiol Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N Etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 Etoposide Drugs 0.000 description 1
- 229940012356 Eye Drops Drugs 0.000 description 1
- 101700086823 FAB1A Proteins 0.000 description 1
- 101700061750 FAB1B Proteins 0.000 description 1
- 108090001126 FURIN Proteins 0.000 description 1
- 206010016256 Fatigue Diseases 0.000 description 1
- LSLYOANBFKQKPT-UHFFFAOYSA-N Fenoterol Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=CC=1C(O)CNC(C)CC1=CC=C(O)C=C1 LSLYOANBFKQKPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N GABA Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001035 Gastrointestinal Tract Anatomy 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000004878 Gelsolin Human genes 0.000 description 1
- 108090001064 Gelsolin Proteins 0.000 description 1
- 241000699694 Gerbillinae Species 0.000 description 1
- 229940065521 Glucocorticoid inhalants for obstructive airway disease Drugs 0.000 description 1
- 229940097043 Glucuronic Acid Drugs 0.000 description 1
- 229940049906 Glutamate Drugs 0.000 description 1
- 229960002989 Glutamic Acid Drugs 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N Glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 229960003180 Glutathione Drugs 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 229940074045 Glyceryl Distearate Drugs 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 229940093912 Gynecological Sulfonamides Drugs 0.000 description 1
- 230000036499 Half live Effects 0.000 description 1
- 208000002672 Hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 229940088597 Hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229960002591 Hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 229960003444 IMMUNOSUPPRESSANTS Drugs 0.000 description 1
- 229960000310 ISOLEUCINE Drugs 0.000 description 1
- 229960000908 Idarubicin Drugs 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin hydrochloride Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 229950000038 Interferon alfa Drugs 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 1
- DGAIEPBNLOQYER-UHFFFAOYSA-N Iopromide Chemical compound COCC(=O)NC1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)N(C)CC(O)CO)=C1I DGAIEPBNLOQYER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002603 Iopromide Drugs 0.000 description 1
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N Irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N Isopropylamine Chemical group CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005280 Isotretinoin Drugs 0.000 description 1
- 102200096463 JMJD6 T285A Human genes 0.000 description 1
- FHCUMDQMBHQXKK-CDIODLITSA-N KCU0C7RS7Z Chemical compound C1([C@@H](NC(=O)OC)C(=O)N2[C@@H](C[C@@H](C2)COC)C=2NC(=CN=2)C=2C=C3C(C4=CC5=CC=C6NC(=NC6=C5C=C4OC3)[C@H]3N([C@@H](C)CC3)C(=O)[C@@H](NC(=O)OC)C(C)C)=CC=2)=CC=CC=C1 FHCUMDQMBHQXKK-CDIODLITSA-N 0.000 description 1
- XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N Ketoconazole Chemical compound C1CN(C(=O)C)CCN1C(C=C1)=CC=C1OC[C@@H]1O[C@@](CN2C=NC=C2)(C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)OC1 XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid zwitterion Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- TYQCGQRIZGCHNB-JLAZNSOCSA-N L-ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(O)=C(O)C1=O TYQCGQRIZGCHNB-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline zwitterion Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- WZNJWVWKTVETCG-YFKPBYRVSA-N L-mimosine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CN1C=CC(=O)C(O)=C1 WZNJWVWKTVETCG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229940001447 Lactate Drugs 0.000 description 1
- JYTUSYBCFIZPBE-AMTLMPIISA-N Lactobionic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JYTUSYBCFIZPBE-AMTLMPIISA-N 0.000 description 1
- 241000283953 Lagomorpha Species 0.000 description 1
- CEMAWMOMDPGJMB-UHFFFAOYSA-N Laracor Chemical compound CC(C)NCC(O)COC1=CC=CC=C1OCC=C CEMAWMOMDPGJMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VRTWBAAJJOHBQU-KMWAZVGDSA-N Ledipasvir Chemical compound COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N([C@@H](C1)C=2NC(=CN=2)C=2C=C3C(F)(F)C4=CC(=CC=C4C3=CC=2)C=2C=C3NC(=NC3=CC=2)[C@H]2N([C@@H]3CC[C@H]2C3)C(=O)[C@@H](NC(=O)OC)C(C)C)CC21CC2 VRTWBAAJJOHBQU-KMWAZVGDSA-N 0.000 description 1
- PTVWPYVOOKLBCG-ZDUSSCGKSA-N Levodropropizine Chemical compound C1CN(C[C@H](O)CO)CCN1C1=CC=CC=C1 PTVWPYVOOKLBCG-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 229940040692 Lithium Hydroxide Monohydrate Drugs 0.000 description 1
- UFSKUSARDNFIRC-UHFFFAOYSA-N Lumacaftor Chemical compound N1=C(C=2C=C(C=CC=2)C(O)=O)C(C)=CC=C1NC(=O)C1(C=2C=C3OC(F)(F)OC3=CC=2)CC1 UFSKUSARDNFIRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000998 Lumacaftor Drugs 0.000 description 1
- 229960005375 Lutein Drugs 0.000 description 1
- KBPHJBAIARWVSC-NRHWGSPPSA-N Lutein Natural products O[C@H]1C=C(C)[C@H](/C=C/C(=C\C=C\C(=C/C=C/C=C(\C=C\C=C(/C=C/C=2C(C)(C)C[C@H](O)CC=2C)\C)/C)\C)/C)C(C)(C)C1 KBPHJBAIARWVSC-NRHWGSPPSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 101710028968 MK0008 Proteins 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N Mandelic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036650 Metabolic stability Effects 0.000 description 1
- 230000036740 Metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000035633 Metabolized Effects 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- UCHDWCPVSPXUMX-TZIWLTJVSA-N Montelukast Chemical compound CC(C)(O)C1=CC=CC=C1CC[C@H](C=1C=C(\C=C\C=2N=C3C=C(Cl)C=CC3=CC=2)C=CC=1)SCC1(CC(O)=O)CC1 UCHDWCPVSPXUMX-TZIWLTJVSA-N 0.000 description 1
- 210000000214 Mouth Anatomy 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 210000003205 Muscles Anatomy 0.000 description 1
- BXGTVNLGPMZLAZ-UHFFFAOYSA-N N'-ethylmethanediimine;hydrochloride Chemical compound Cl.CCN=C=N BXGTVNLGPMZLAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- JHTJPSCVBLCXEO-UHFFFAOYSA-N N-(triethylazaniumyl)sulfonylcarbamate Chemical compound CC[N+](CC)(CC)S(=O)(=O)NC([O-])=O JHTJPSCVBLCXEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006327 Napsilate Drugs 0.000 description 1
- 206010028735 Nasal congestion Diseases 0.000 description 1
- QEFAQIPZVLVERP-UHFFFAOYSA-N Nepafenac Chemical compound NC(=O)CC1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1N QEFAQIPZVLVERP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RJMUSRYZPJIFPJ-UHFFFAOYSA-N Niclosamide Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1Cl RJMUSRYZPJIFPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001920 Niclosamide Drugs 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 229960002950 Novobiocin Drugs 0.000 description 1
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N Chemical compound OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJLHOZGJHZUQEA-VOMQXJPGSA-N OC1=C(C=CC=2OC3=CC(=CC(=C3C(C1=2)=O)O)OC)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO1 Chemical compound OC1=C(C=CC=2OC3=CC(=CC(=C3C(C1=2)=O)O)OC)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO1 NJLHOZGJHZUQEA-VOMQXJPGSA-N 0.000 description 1
- 229940100243 Oleanolic Acid Drugs 0.000 description 1
- MIJYXULNPSFWEK-LXLHWSNGSA-N Oleanolic acid Natural products C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@@H]5C4=CC[C@H]3[C@]21C MIJYXULNPSFWEK-LXLHWSNGSA-N 0.000 description 1
- 229940049964 Oleate Drugs 0.000 description 1
- 229960003104 Ornithine Drugs 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229940116315 Oxalic Acid Drugs 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N Oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 1
- 229960000625 Oxytetracycline Drugs 0.000 description 1
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 1
- 101710025242 PIKFYVE Proteins 0.000 description 1
- 102100012699 PIKFYVE Human genes 0.000 description 1
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N Pamoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 229960003379 Pancuronium bromide Drugs 0.000 description 1
- 241001596784 Pegasus Species 0.000 description 1
- 229940106366 Pegintron Drugs 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- 229940066842 Petrolatum Drugs 0.000 description 1
- NONJJLVGHLVQQM-JHXYUMNGSA-N Pheneticillin Chemical compound N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 NONJJLVGHLVQQM-JHXYUMNGSA-N 0.000 description 1
- 229940067631 Phospholipids Drugs 0.000 description 1
- RLZZBHBWPWGOSA-WKLGMTJKSA-N Phyllaemblicin B Natural products O([C@H]1C[C@@]2(OC[C@H]1C)C([C@@]1(O)[C@@H](O)C[C@@H](C[C@H]1O2)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)=O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RLZZBHBWPWGOSA-WKLGMTJKSA-N 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M Potassium bicarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N Prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- ILVXOBCQQYKLDS-UHFFFAOYSA-N Pyridine-N-oxide Chemical group [O-][N+]1=CC=CC=C1 ILVXOBCQQYKLDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940107700 Pyruvic Acid Drugs 0.000 description 1
- 101700033784 Q0032 Proteins 0.000 description 1
- 102100014279 RIPK1 Human genes 0.000 description 1
- 101700069676 RIPK1 Proteins 0.000 description 1
- 101700022107 ROBO3 Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- WVLAAKXASPCBGT-UHFFFAOYSA-N Reproterol Chemical compound C1=2C(=O)N(C)C(=O)N(C)C=2N=CN1CCCNCC(O)C1=CC(O)=CC(O)=C1 WVLAAKXASPCBGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHBIGIKBNXZKFE-UHFFFAOYSA-N Rescriptor Chemical compound CC(C)NC1=CC=CN=C1N1CCN(C(=O)C=2NC3=CC=C(NS(C)(=O)=O)C=C3C=2)CC1 WHBIGIKBNXZKFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010038687 Respiratory distress Diseases 0.000 description 1
- 206010039083 Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 229960002477 Riboflavin Drugs 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-OUCADQQQSA-N Riboflavin Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-OUCADQQQSA-N 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 108091005599 SARS-CoV-2 Spike protein Proteins 0.000 description 1
- 108091005743 SARS-CoV-2 proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100016749 SLC5A2 Human genes 0.000 description 1
- 101710040674 SLC5A2 Proteins 0.000 description 1
- 241001678561 Sarbecovirus Species 0.000 description 1
- 101710023234 Segment 5 Proteins 0.000 description 1
- BNRNXUUZRGQAQC-UHFFFAOYSA-N Sildenafil Chemical compound CCCC1=NN(C)C(C(N2)=O)=C1N=C2C(C(=CC=1)OCC)=CC=1S(=O)(=O)N1CCN(C)CC1 BNRNXUUZRGQAQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SEBFKMXJBCUCAI-VDVKDMFPSA-N Silybin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC([C@H]2[C@@H](OC3=CC=C(C=C3O2)[C@H]2[C@H](C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 SEBFKMXJBCUCAI-VDVKDMFPSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 229960001940 Sulfasalazine Drugs 0.000 description 1
- 229940037128 Systemic Glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 229920002253 Tannate Polymers 0.000 description 1
- RMMXLENWKUUMAY-UHFFFAOYSA-N Telmisartan Chemical compound CCCC1=NC2=C(C)C=C(C=3N(C4=CC=CC=C4N=3)C)C=C2N1CC(C=C1)=CC=C1C1=CC=CC=C1C(O)=O RMMXLENWKUUMAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 Teniposide Drugs 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- WZDGZWOAQTVYBX-XOINTXKNSA-N Tibolone Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@](C#C)(O)CC[C@H]3[C@@H]1[C@H](C)CC1=C2CCC(=O)C1 WZDGZWOAQTVYBX-XOINTXKNSA-N 0.000 description 1
- 230000036335 Tissue distribution Effects 0.000 description 1
- 239000004012 Tofacitinib Substances 0.000 description 1
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N Trappsol Cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 1
- ZOTHAEBAWXWVID-HXEFRTELSA-N UK-432,097 Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C(=O)NCC)O[C@H]1N1C2=NC(C(=O)NCCNC(=O)NC3CCN(CC3)C=3N=CC=CC=3)=NC(NCC(C=3C=CC=CC=3)C=3C=CC=CC=3)=C2N=C1 ZOTHAEBAWXWVID-HXEFRTELSA-N 0.000 description 1
- 229960004626 Umifenovir Drugs 0.000 description 1
- 102000012088 Vasoactive Intestinal Peptide Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010075974 Vasoactive Intestinal Peptide Receptors Proteins 0.000 description 1
- SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N Verapamil Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1CCN(C)CCCC(C#N)(C(C)C)C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003048 Vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 206010047461 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000001756 Virus Disease Diseases 0.000 description 1
- 101700073208 YC08 Proteins 0.000 description 1
- 101700052466 YCB8 Proteins 0.000 description 1
- 101700001034 YEDIN Proteins 0.000 description 1
- 101700036171 YO08 Proteins 0.000 description 1
- CITILBVTAYEWKR-UHFFFAOYSA-L Zinc trifluoromethanesulfonate Chemical compound [Zn+2].[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F.[O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F CITILBVTAYEWKR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- RLZZBHBWPWGOSA-MYVHNFIBSA-N [(2S,3R,4S,5S,6R)-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl] (2S,3aR,4R,4'S,5'R,6S,7aR)-4'-benzoyloxy-3a,4-dihydroxy-5'-methyl-3-oxospiro[5,6,7,7a-tetrahydro-4H-1-benzofuran-2,2'-oxane]-6- Chemical compound O([C@H]1C[C@@]2(OC[C@H]1C)C([C@@]1(O)[C@H](O)C[C@@H](C[C@H]1O2)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)=O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RLZZBHBWPWGOSA-MYVHNFIBSA-N 0.000 description 1
- IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N [C].[C] Chemical class [C].[C] IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YAUVUSSCQUHHFC-UHFFFAOYSA-M [Na+].CC(F)(F)S([O-])=O Chemical compound [Na+].CC(F)(F)S([O-])=O YAUVUSSCQUHHFC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K [O-]P([O-])([O-])=O Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000276 acetophenazine Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229960004607 alfuzosin Drugs 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical group 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005133 alkynyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 150000001280 alpha hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminum Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001668 ameliorated Effects 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003692 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 description 1
- 239000011609 ammonium molybdate Substances 0.000 description 1
- 235000018660 ammonium molybdate Nutrition 0.000 description 1
- 229940010552 ammonium molybdate Drugs 0.000 description 1
- 229960001830 amprenavir Drugs 0.000 description 1
- BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N ancitabine Chemical compound N=C1C=CN2[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3OC2=N1 BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 101710039709 ant4 Proteins 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229960000070 antineoplastic Monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 1
- 229940121357 antivirals Drugs 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003159 atovaquone Drugs 0.000 description 1
- 235000020127 ayran Nutrition 0.000 description 1
- 150000007514 bases Chemical class 0.000 description 1
- 229950009568 bemcentinib Drugs 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- 125000004603 benzisoxazolyl group Chemical group O1N=C(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-M benzoate Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000499 benzofuranyl group Chemical group O1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001164 benzothiazolyl group Chemical group S1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000004196 benzothienyl group Chemical group S1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000003354 benzotriazolyl group Chemical group N1N=NC2=C1C=CC=C2* 0.000 description 1
- 125000004541 benzoxazolyl group Chemical group O1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 229940000635 beta-Alanine Drugs 0.000 description 1
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 1
- 239000000227 bioadhesive Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 101710015604 blr2150 Proteins 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 125000004106 butoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- PASHVRUKOFIRIK-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate dihydrate Chemical compound O.O.[Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O PASHVRUKOFIRIK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZTWZVMIYIIVABD-OEMFJLHTSA-N candoxatril Chemical compound C([C@@H](COCCOC)C(=O)OC=1C=C2CCCC2=CC=1)C1(C(=O)N[C@@H]2CC[C@@H](CC2)C(O)=O)CCCC1 ZTWZVMIYIIVABD-OEMFJLHTSA-N 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N carbon-14 Chemical compound [14C] OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000004106 carminic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012730 carminic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940114118 carminic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 229960004195 carvedilol Drugs 0.000 description 1
- 230000024881 catalytic activity Effects 0.000 description 1
- 229960004086 ceftibuten Drugs 0.000 description 1
- SSWTVBYDDFPFAF-DKOGRLLHSA-N ceftibuten dihydrate Chemical compound O.O.S1C(N)=NC(C(=C\CC(O)=O)\C(=O)N[C@@H]2C(N3C(=CCS[C@@H]32)C(O)=O)=O)=C1 SSWTVBYDDFPFAF-DKOGRLLHSA-N 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- GWXLDORMOJMVQZ-UHFFFAOYSA-N cerium Chemical compound [Ce] GWXLDORMOJMVQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001904 chenodiol Drugs 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- SKPLBLUECSEIFO-UHFFFAOYSA-N chlorphenesin carbamate Chemical compound NC(=O)OCC(O)COC1=CC=C(Cl)C=C1 SKPLBLUECSEIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004878 chlorphenesin carbamate Drugs 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 1
- 229940043370 chrysin Drugs 0.000 description 1
- 235000015838 chrysin Nutrition 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 229960005188 collagen Drugs 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 229960000562 conivaptan Drugs 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 230000001808 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000265 cromoglicic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005388 cross polarization Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 125000004850 cyclobutylmethyl group Chemical group C1(CCC1)C* 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- ARUKYTASOALXFG-UHFFFAOYSA-N cycloheptylcycloheptane Chemical group C1CCCCCC1C1CCCCCC1 ARUKYTASOALXFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WVIIMZNLDWSIRH-UHFFFAOYSA-N cyclohexylcyclohexane Chemical group C1CCCCC1C1CCCCC1 WVIIMZNLDWSIRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004210 cyclohexylmethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- UVCMYJYTEVWUCV-UHFFFAOYSA-N cyclononylcyclononane Chemical group C1CCCCCCCC1C1CCCCCCCC1 UVCMYJYTEVWUCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N cyclooctylcyclooctane Chemical group C1CCCCCCC1C1CCCCCCC1 NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N cyclopentane Chemical compound C1CCCC1 RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MAWOHFOSAIXURX-UHFFFAOYSA-N cyclopentylcyclopentane Chemical group C1CCCC1C1CCCC1 MAWOHFOSAIXURX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVZWSLJZHVFIQJ-UHFFFAOYSA-N cyclopropane Chemical compound C1CC1 LVZWSLJZHVFIQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 1
- 229960005319 delavirdine Drugs 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 1
- 239000011903 deuterated solvents Substances 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 125000005331 diazinyl group Chemical group N1=NC(=CC=C1)* 0.000 description 1
- DKMROQRQHGEIOW-UHFFFAOYSA-N diethyl butanedioate Chemical compound CCOC(=O)CCC(=O)OCC DKMROQRQHGEIOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001664 diethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- DEQITUUQPICUMR-HJPBWRTMSA-N dihydroergocristine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@](C(N21)=O)(NC(=O)[C@H]1CN(C)[C@H]2[C@@H](C=3C=CC=C4NC=C(C=34)C2)C1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DEQITUUQPICUMR-HJPBWRTMSA-N 0.000 description 1
- 229960004318 dihydroergocristine Drugs 0.000 description 1
- 125000004852 dihydrofuranyl group Chemical group O1C(CC=C1)* 0.000 description 1
- 125000005043 dihydropyranyl group Chemical group O1C(CCC=C1)* 0.000 description 1
- 125000005057 dihydrothienyl group Chemical group S1C(CC=C1)* 0.000 description 1
- DRXGWTUAIWQOKN-UHFFFAOYSA-L dihydroxy(dioxo)molybdenum;phosphonic acid Chemical compound OP(O)=O.O[Mo](O)(=O)=O DRXGWTUAIWQOKN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940043279 diisopropylamine Drugs 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- GZSOSUNBTXMUFQ-YFAPSIMESA-N diosmin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1C(OC1=C2)=CC(=O)C1=C(O)C=C2O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O2)O)O1 GZSOSUNBTXMUFQ-YFAPSIMESA-N 0.000 description 1
- 229960004352 diosmin Drugs 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229940042397 direct acting antivirals Cyclic amines Drugs 0.000 description 1
- 238000007907 direct compression Methods 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- VLARUOGDXDTHEH-UHFFFAOYSA-L disodium cromoglycate Chemical compound [Na+].[Na+].O1C(C([O-])=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C([O-])=O)O2 VLARUOGDXDTHEH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidates Drugs 0.000 description 1
- 238000007908 dry granulation Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000001803 electron scattering Methods 0.000 description 1
- QFNHIDANIVGXPE-FNZWTVRRSA-N eluxadoline Chemical compound C1=C(C(O)=O)C(OC)=CC=C1CN(C(=O)[C@@H](N)CC=1C(=CC(=CC=1C)C(N)=O)C)[C@@H](C)C1=NC(C=2C=CC=CC=2)=CN1 QFNHIDANIVGXPE-FNZWTVRRSA-N 0.000 description 1
- 229960002658 eluxadoline Drugs 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 150000002085 enols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000006345 epimerization reaction Methods 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid Chemical compound CCS(O)(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HZNQVAOLVRFZBE-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclohexane Chemical group C=C[C]1CCCCC1 HZNQVAOLVRFZBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVXNKFYSHAUJIA-UHFFFAOYSA-M ethoxyethane;acetate Chemical compound CC([O-])=O.CCOCC KVXNKFYSHAUJIA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BUBWTSJXUHKBBX-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;sodium Chemical compound [Na].CCOC(C)=O BUBWTSJXUHKBBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- FFLYUXVZEPLMCL-UHFFFAOYSA-N ethylchloranuidyl formate Chemical compound CC[Cl-]OC=O FFLYUXVZEPLMCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable Effects 0.000 description 1
- 229960001022 fenoterol Drugs 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- 238000000806 fluorine-19 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 235000019525 fullness Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 101700050210 gB Proteins 0.000 description 1
- DSLZVSRJTYRBFB-DUHBMQHGSA-L galactarate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C([O-])=O DSLZVSRJTYRBFB-DUHBMQHGSA-L 0.000 description 1
- 229940013945 gamma-Aminobutyric Acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003969 glutathione Nutrition 0.000 description 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 229960004275 glycolic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium(0) Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960001587 hesperetin Drugs 0.000 description 1
- 235000010209 hesperetin Nutrition 0.000 description 1
- 125000005349 heteroarylcycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008079 hexane Substances 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- XGIHQYAWBCFNPY-AZOCGYLKSA-N hydrabamine Chemical compound C([C@@H]12)CC3=CC(C(C)C)=CC=C3[C@@]2(C)CCC[C@@]1(C)CNCCNC[C@@]1(C)[C@@H]2CCC3=CC(C(C)C)=CC=C3[C@@]2(C)CCC1 XGIHQYAWBCFNPY-AZOCGYLKSA-N 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic Effects 0.000 description 1
- 150000002440 hydroxy compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 125000002632 imidazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002636 imidazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004857 imidazopyridinyl group Chemical group N1C(=NC2=C1C=CC=N2)* 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppresant Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive Effects 0.000 description 1
- 229940079867 intestinal antiinfectives Sulfonamides Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007915 intraurethral administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-M iodide Chemical compound [I-] XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-M isethionate Chemical compound OCCS([O-])(=O)=O SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- RGXCTRIQQODGIZ-UHFFFAOYSA-O isodesmosine Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC[N+]1=CC(CCC(N)C(O)=O)=CC(CCC(N)C(O)=O)=C1CCCC(N)C(O)=O RGXCTRIQQODGIZ-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004628 isothiazolidinyl group Chemical group S1N(CCC1)* 0.000 description 1
- 125000005969 isothiazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003965 isoxazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004130 itraconazole Drugs 0.000 description 1
- 229960004125 ketoconazole Drugs 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940099584 lactobionate Drugs 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M laurate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 229960002461 ledipasvir Drugs 0.000 description 1
- 229960002265 levodropropizine Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting Effects 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000009673 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011068 load Methods 0.000 description 1
- 229940113983 lopinavir / Ritonavir Drugs 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000001656 lutein Substances 0.000 description 1
- 235000012680 lutein Nutrition 0.000 description 1
- AHEVKYYGXVEWNO-UEPZRUIBSA-N lymecycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3C[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(=O)NCNCCCC[C@H](N)C(O)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O AHEVKYYGXVEWNO-UEPZRUIBSA-N 0.000 description 1
- 229960004196 lymecycline Drugs 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- CRGZYKWWYNQGEC-UHFFFAOYSA-N magnesium;methanolate Chemical compound [Mg+2].[O-]C.[O-]C CRGZYKWWYNQGEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L malate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-L maleate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)\C=C/C([O-])=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-L 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005399 mechanical ventilation Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000035786 metabolism Effects 0.000 description 1
- UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N methane;palladium Chemical compound C.[Pd] UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- VSDUZFOSJDMAFZ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-amino-3-phenylpropanoate Chemical compound COC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 VSDUZFOSJDMAFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- JZMJDSHXVKJFKW-UHFFFAOYSA-M methyl sulfate(1-) Chemical compound COS([O-])(=O)=O JZMJDSHXVKJFKW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 229950002289 mimosine Drugs 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 1
- 108010045030 monoclonal antibodies Proteins 0.000 description 1
- 229960000060 monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 1
- 102000005614 monoclonal antibodies Human genes 0.000 description 1
- 125000001620 monocyclic carbocycle group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005127 montelukast Drugs 0.000 description 1
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940113083 morpholine Drugs 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004593 naphthyridinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CN=C12)* 0.000 description 1
- 229960001002 nepafenac Drugs 0.000 description 1
- 239000002353 niosome Substances 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical group 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- MYWLBRTZOYHDOU-FJMCMGCSSA-N norswertianolin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C2=C1C(=O)C1=C(O)C=C(O)C=C1O2 MYWLBRTZOYHDOU-FJMCMGCSSA-N 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-M oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC([O-])=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-M 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940005943 ophthalmologic Antivirals Drugs 0.000 description 1
- 229940005938 ophthalmologic antiinfectives Sulfonamides Drugs 0.000 description 1
- 239000007935 oral tablet Substances 0.000 description 1
- 101700009395 orf8 Proteins 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000160 oxazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003566 oxetanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004570 oxprenolol Drugs 0.000 description 1
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NPIJXCQZLFKBMV-YTGGZNJNSA-L pancuronium bromide Chemical compound [Br-].[Br-].C[N+]1([C@@H]2[C@@H](OC(C)=O)C[C@@H]3CC[C@H]4[C@@H]5C[C@@H]([C@@H]([C@]5(CC[C@@H]4[C@@]3(C)C2)C)OC(=O)C)[N+]2(C)CCCCC2)CCCCC1 NPIJXCQZLFKBMV-YTGGZNJNSA-L 0.000 description 1
- 229940014662 pantothenate Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- 239000006201 parenteral dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 235000021400 peanut butter Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- WBXPDJSOTKVWSJ-ZDUSSCGKSA-N pemetrexed Chemical compound C=1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2C=1CCC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 WBXPDJSOTKVWSJ-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 229960005079 pemetrexed Drugs 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229960004894 pheneticillin Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 125000005541 phosphonamide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001888 polyacrylic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 description 1
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940094025 potassium bicarbonate Drugs 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 150000003140 primary amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000000750 progressive Effects 0.000 description 1
- VQGISNOMGHCEPX-UHFFFAOYSA-N propanenitrile Chemical compound C[CH]C#N VQGISNOMGHCEPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002568 propynyl group Chemical group [*]C#CC([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004853 protein function Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 125000003072 pyrazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002755 pyrazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005412 pyrazyl group Chemical group 0.000 description 1
- UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N pyridin-2-ol Chemical group OC1=CC=CC=N1 UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001422 pyrrolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 125000001567 quinoxalinyl group Chemical group N1=C(C=NC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N rac-1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 229960002720 reproterol Drugs 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 201000003176 severe acute respiratory syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 229960003310 sildenafil Drugs 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000014899 silybin Nutrition 0.000 description 1
- 229940043175 silybin Drugs 0.000 description 1
- 238000004467 single crystal X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001187 sodium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940045902 sodium stearyl fumarate Drugs 0.000 description 1
- MAKUBRYLFHZREJ-JWBQXVCJSA-M sodium;(2S,3S,4R,5R,6R)-3-[(2S,3R,5S,6R)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C([O-])=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O MAKUBRYLFHZREJ-JWBQXVCJSA-M 0.000 description 1
- STFSJTPVIIDAQX-LTRPLHCISA-M sodium;(E)-4-octadecoxy-4-oxobut-2-enoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)\C=C\C([O-])=O STFSJTPVIIDAQX-LTRPLHCISA-M 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-M stearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 229940086735 succinate Drugs 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229940097346 sulfobutylether-beta-cyclodextrin Drugs 0.000 description 1
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003871 sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N sulfonic acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained Effects 0.000 description 1
- 230000000152 swallowing Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 229960001367 tartaric acid Drugs 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 239000004149 tartrazine Substances 0.000 description 1
- 238000003419 tautomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229960005187 telmisartan Drugs 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- RJBVJBGFJIHJSZ-ZETCQYMHSA-N tert-butyl (2S)-2-amino-3-methylbutanoate Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)OC(C)(C)C RJBVJBGFJIHJSZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 125000003507 tetrahydrothiofenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 1
- 125000001113 thiadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001984 thiazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002769 thiazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001023 tibolone Drugs 0.000 description 1
- UJLAWZDWDVHWOW-YPMHNXCESA-N tofacitinib Chemical compound C[C@@H]1CCN(C(=O)CC#N)C[C@@H]1N(C)C1=NC=NC2=C1C=CN2 UJLAWZDWDVHWOW-YPMHNXCESA-N 0.000 description 1
- 229960001350 tofacitinib Drugs 0.000 description 1
- 229940026754 topical Antivirals Drugs 0.000 description 1
- 229940026752 topical Sulfonamides Drugs 0.000 description 1
- 239000006208 topical dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N trans-L-hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 125000004306 triazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 241000007181 unidentified human coronavirus Species 0.000 description 1
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229960000863 velpatasvir Drugs 0.000 description 1
- 229960001183 venetoclax Drugs 0.000 description 1
- 229960001722 verapamil Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000017613 viral reproduction Effects 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 238000005550 wet granulation Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000003871 white petrolatum Substances 0.000 description 1
- 101700052270 ycxD Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- UANOWFITUWBPCF-UHFFFAOYSA-L zinc;trifluoromethanesulfinate Chemical compound [Zn+2].[O-]S(=O)C(F)(F)F.[O-]S(=O)C(F)(F)F UANOWFITUWBPCF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-QIUUJYRFSA-N β-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-QIUUJYRFSA-N 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Уровень техникиState of the art
Изобретение относится к соединениям и способам ингибирования активности репликации вируса, включающим контакт 3C-подобной («3CL») протеиназы, родственной SARS-CoV-2, с терапевтически эффективным количеством ингибитора 3C-подобной протеазы, родственной SARS-CoV-2. Изобретение также относится к способам лечения коронавирусного заболевания 2019 («COVID-19») у пациента путем введения терапевтически эффективного количества ингибитора 3C-подобной протеазы, родственной SARS-CoV-2, пациенту, нуждающемуся в этом. Изобретение также относится к способам лечения COVID-19 у пациента, где способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество ингибитора 3C-подобной протеазы, родственной SARS-CoV-2.The invention relates to compounds and methods for inhibiting viral replication activity, comprising contacting a 3C-like ("3CL") proteinase related to SARS-CoV-2 with a therapeutically effective amount of an inhibitor of a 3C-like protease related to SARS-CoV-2. The invention also relates to methods for treating coronavirus disease 2019 ("COVID-19") in a patient by administering a therapeutically effective amount of a SARS-CoV-2 related 3C-like protease inhibitor to a patient in need thereof. The invention also relates to methods for treating COVID-19 in a patient, wherein the method comprises administering to a patient in need thereof a pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of an inhibitor of a 3C-like protease related to SARS-CoV-2.
Мировая вспышка коронавирусной болезни 2019 («COVID-19») была связана с заражениями, возникшими в конце 2019 г. в Ухане, провинция Хубэй, Китай. К середине 2020 года вспышка COVID-19 переросла в глобальную пандемию, когда было подтверждено, что миллионы людей инфицированы, что привело к сотням тысяч смертей. Возбудитель COVID-19 был идентифицирован как новый коронавирус, получивший название атипичная пневмония, вызванная коронавирусом 2 («SARS-CoV-2»). Последовательность генома SARS-CoV-2 была секвенирована из изолятов, полученных от девяти пациентов в Ухане, Китай, и было обнаружено, что она принадлежит к подроду Sarbecovirus рода Betacoronavirus. Lu, R. et al. The Lancet, 395, 10224, 565-574; online January 29, 2020. Было обнаружено, что последовательность SARS-CoV-2 имеет 88% гомологию с двумя коронавирусами типа SARS, полученными от летучих мышей, bat-SL-CoVZC45 и bat-SL-CoVZXC21, которые были собраны в 2018 году в Чжоушане, восточный Китай. Также было обнаружено, что SARS-CoV-2 имеет примерно 79% гомологии с вирусом короны атипичной пневмонии («SARS-CoV»), возбудителем вспышки SARS в 2002-2003 г, и примерно 50% гомологию с коронавирусом ближневосточного респираторного синдрома («MERS-CoV»), возбудителем вспышки респираторного вируса, возникшей на Ближнем Востоке в 2012 году. На основе недавнего анализа 103 секвенированных геномов SARS-CoV-2 было высказано предположение, что SARS-CoV- 2 можно разделить на два основных типа (L и S типы), при этом S тип является наследственным, и L тип произошел от S типа. Lu, J.; Cui, J. et al. On the origin and continuing evolution of SARS-CoV-2; National Science Review, 7(6), June 2020, 1012-1023, http://doi.org/10.1093/nsr/nwaa036. Типы S и L могут быть четко определены только двумя тесно связанными SNP в положениях 8782 (orf1ab:T8517C, синонимичные) и 28144 (ORF8: C251T, S84L). Из 103 проанализированных геномов примерно 70% принадлежали к L типу и примерно 30% к S типу. Неясно, произошла ли эволюция L типа от S типа у людей или через зоонозное промежуточное звено, но похоже, что L тип более агрессивен, чем S тип, и вмешательство человека в попытки сдержать вспышку возможно сдвинуло относительную численность типов L и S вскоре после начала вспышки SARS-CoV-2. Обнаружение предложенных S и L подтипов SARS-CoV-2 повышает вероятность того, что человек потенциально может инфицироваться последовательно отдельными подтипами или заразиться обоими подтипами одновременно. Ввиду этой растущей угрозы, в данной области техники существует острая потребность в эффективном лечении COVID-19 и в методах подавления репликации коронавируса SARS-CoV-2.The global outbreak of coronavirus disease 2019 (“COVID-19”) has been linked to infections that emerged in late 2019 in Wuhan, Hubei Province, China. By mid-2020, the COVID-19 outbreak had grown into a global pandemic when millions of people were confirmed to be infected, resulting in hundreds of thousands of deaths. The causative agent of COVID-19 has been identified as a novel coronavirus, named SARS coronavirus 2 (“SARS-CoV-2”). The SARS-CoV-2 genome sequence was sequenced from isolates obtained from nine patients in Wuhan, China and found to belong to the Sarbecovirus subgenus of the Betacoronavirus genus. Lu, R. et al. The Lancet, 395, 10224, 565-574; online January 29, 2020. The SARS-CoV-2 sequence was found to have 88% homology with two bat-derived SARS-type coronaviruses, bat-SL-CoVZC45 and bat-SL-CoVZXC21, which were collected in 2018 in Zhoushan, eastern China. SARS-CoV-2 was also found to share approximately 79% homology with the SARS corona virus (“SARS-CoV”), the causative agent of the SARS outbreak in 2002-2003, and approximately 50% homology with the Middle East respiratory syndrome coronavirus (“MERS”). -CoV"), the causative agent of the respiratory virus outbreak that originated in the Middle East in 2012. Based on a recent analysis of 103 sequenced SARS-CoV-2 genomes, it has been suggested that SARS-CoV-2 can be divided into two main types (L and S types), with the S type being inherited and the L type being descended from the S type. Lu, J.; Cui, J. et al. On the origin and continuing evolution of SARS-CoV-2; National Science Review , 7(6), June 2020, 1012-1023, http://doi.org/10.1093/nsr/nwaa036. Types S and L can only be clearly defined by two closely related SNPs at positions 8782 ( orf1ab : T8517C, synonymous) and 28144 ( ORF8 : C251T, S84L). Of the 103 genomes analyzed, approximately 70% belonged to the L type and approximately 30% to the S type. It is not clear whether L type evolved from S type in humans or through a zoonotic intermediate, but it appears that L type is more aggressive than S type, and human intervention in attempts to contain the outbreak may have shifted the relative abundance of L and S types shortly after the outbreak began. SARS-CoV-2. The discovery of the proposed S and L subtypes of SARS-CoV-2 raises the possibility that a person could potentially become infected with separate subtypes sequentially or become infected with both subtypes at the same time. In view of this growing threat, there is an urgent need in the art for effective treatment of COVID-19 and methods for suppressing the replication of the SARS-CoV-2 coronavirus.
Недавние доказательства ясно показывают, что недавно возникший коронавирус SARS-CoV-2, возбудитель COVID-19 (Centers for Disease Control, CDC), приобрел способность передачи от человека к человеку, что приводит к распространению вируса среди населения. Последовательность рецептор-связывающего домена спайкового белка SARS-CoV-2 («RBD»), включая его рецептор-связывающий мотив (RBM), который непосредственно контактирует с рецептором ангиотензин-превращающего фермента 2, ACE2, аналогична RBD и RBM SARS-CoV, что убедительно свидетельствует о том, что SARS-CoV-2 использует ACE2 в качестве своего рецептора. Wan, Y.; Shang, J.; Graham, R.; Baric, R.S.; Li, F.; Receptor recognition by the novel coronavirus from Wuhan: An analysis based on decade-long structural studies of SARS coronavirus; J. Virol. 2020; doi:10.1128/JVI.00127-20. Несколько критических остатков в RBM SARS-CoV-2 (особенно Gln493) обеспечивают благоприятные взаимодействия с ACE2 человека, что согласуется со способностью SARS-CoV-2 инфицировать клетки человека. Несколько других критических остатков в RBM SARS-CoV-2 (в частности, Asn501) совместимы, но не идеальны для связывания человеческого ACE2, что позволяет предположить, что SARS-CoV-2 использует связывание ACE2 в некоторой степени для передачи от человека к человеку.Recent evidence clearly shows that the recently emerged coronavirus SARS-CoV-2, the causative agent of COVID-19 (Centers for Disease Control, CDC), has acquired the ability to transmit from person to person, leading to the spread of the virus in the population. The sequence of the receptor-binding domain of the SARS-CoV-2 spike protein (“RBD”), including its receptor-binding motif (RBM), which directly contacts the angiotensin-converting
Функция репликации и транскрипции коронавируса кодируется так называемым геном «репликазы» (Ziebuhr, J., Snijder, E.J., and Gorbalenya, A.E.; Virus-encoded proteinases and proteolytic processing in the Nidovirales. J. Gen. Virol. 2000, 81, 853-879; и Fehr, A.R.; Perlman, S.; Coronaviruses: An Overview of Their Replication and Pathogenesis, Methods Mol. Biol. 2015; 1282: 1-23. doi:10.1007/978-1-4939-2438-7_1), который состоит из двух перекрывающихся полипротеинов, которые интенсивно процессируются вирусными протеазами. C-проксимальная область процессируется в одиннадцати консервативных междоменных участках соединений основной или «3C-подобной» протеазой коронавируса (Ziebuhr, Snijder, Gorbalenya, 2000 and Fehr, Perlman et al., 2015). Название «3C-подобная» протеаза происходит от определенного сходств между ферментом коронавируса и хорошо известными протеазами пикорнавируса 3C. К ним относятся предпочтения субстратов, использование цистеина в качестве нуклеофила в активном центре в катализе, и сходство их предполагаемых общих полипептидных складок. Было обнаружено, что последовательность протеазы 3CL SARS-CoV-2 (номер доступа YP_009725301.1) имеет 96,08% гомологии по сравнению с протеазой 3CL SARS-CoV (номер доступа YP_009725301.1) Xu, J.; Zhao, S.; Teng, T.; Abdalla, A.E.; Zhu, W.; Xie, L.; Wang, Y.; Guo, X.; Systematic Comparison of Two Animal-to-Human Transmitted Human Coronaviruses: SARS-CoV-2 and SARS-CoV; Viruses 2020, 12, 244; doi:10.3390/v12020244. Совсем недавно Hilgenfeld и коллеги опубликовали рентгеновскую структуру с высоким разрешением основной протеазы коронавируса SARS-CoV-2 (3CL) Zhang, L.; Lin, D.; Sun, X.; Rox, K.; Hilgenfeld, R.; X-ray Structure of Main Protease of the Novel Coronavirus SARS-CoV-2 Enables Design of α-Ketoamide Inhibitors; bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952879. Структура указывает на различия при сравнении протеаз 3CL SARS-CoV-2 и SARS-CoV. В SARS-CoV, но не в димере протеазы SARS-CoV-2 3CL, существует полярное взаимодействие между двумя доменами III, включающее водородную связь 2,60-Å между гидроксильными группами боковой цепи остатка Thr285 каждого протомера, и поддерживается гидрофобным контактом между боковой цепью Ile286 и Thr285 Cγ2. В 3CL SARS-CoV-2 треонин заменен на аланин, а изолейцин на лейцин по сравнению с такими же остатками в 3CL SARS-CoV. Замена Thr285Ala, наблюдаемая в протеазе 3CL SARS-CoV-2, позволяет двум доменам III несколько сблизиться друг с другом (расстояние между атомами Cα остатков 285 в молекулах A и B составляет 6,77 Å в протеазе 3CL SARS-CoV и 5,21 Å в протеазе 3CL SARS-CoV-2, а расстояние между центрами масс двух доменов III сокращается с 33,4 Å до 32,1 Å). В активном сайте 3CL SARS-CoV-2, Cys145 и His 41 образуют каталитическую диаду, которая, будучи взятой вместе со скрытой молекулой воды, связанной водородной связью с His41, может считаться каталитической триадой протеазы 3CL SARS-CoV-2. Ввиду продолжающегося распространения SARS-CoV-2, вызвавшего текущую всемирную вспышку COVID-19, желательно иметь новые способы подавления репликации вируса SARS-CoV-2 и лечения COVID-19 у пациентов.The replication and transcription function of the coronavirus is encoded by the so-called “replicase” gene (Ziebuhr, J., Snijder, E.J., and Gorbalenya, A.E.; Virus-encoded proteinases and proteolytic processing in theNidovirales. J. Gen. Virol. 2000, 81, 853-879; and Fehr, A.R.; Perlman, S.; Coronaviruses: An Overview of Their Replication and Pathogenesis, Methods Mol. Biol. 2015; 1282:1-23. doi:10.1007/978-1-4939-2438-7_1), which consists of two overlapping polyproteins that are extensively processed by viral proteases. The C-proximal region is processed at eleven conserved interdomain junction sites by the major or "3C-like" coronavirus protease (Ziebuhr, Snijder, Gorbalenya, 2000 and Fehr, Perlman et al., 2015). The name "3C-like" protease comes from certain similarities between the coronavirus enzyme and well-known picornavirus 3C proteases. These include substrate preferences, the use of cysteine as the active site nucleophile in catalysis, and the similarity of their putative shared polypeptide folds. The sequence of the SARS-CoV-2 3CL protease (accession number YP_009725301.1) was found to have 96.08% homology compared to the SARS-CoV 3CL protease (accession number YP_009725301.1) Xu, J.; Zhao, S.; Teng, T.; Abdalla, A.E.; Zhu, W.; Xie, L.; Wang, Y.; Guo, X.; Systematic Comparison of Two Animal-to-Human Transmitted Human Coronaviruses: SARS-CoV-2 and SARS-CoV; Viruses 2020, 12, 244; doi:10.3390/v12020244. More recently, Hilgenfeld and colleagues published a high-resolution X-ray structure of the SARS-CoV-2 (3CL) coronavirus core protease Zhang, L.; Lin, D.; Sun, X.; Rox, K.; Hilgenfeld, R.; X-ray Structure of Main Protease of the Novel Coronavirus SARS-CoV-2 Enables Design ofα-Ketoamide Inhibitors; bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952879. The structure indicates differences when comparing the 3CL proteases of SARS-CoV-2 and SARS-CoV. In SARS-CoV, but not in the SARS-CoV-2 3CL protease dimer, there is a polar interaction between the two domains III, involving a 2.60-Å hydrogen bond between the side chain hydroxyl groups of the Thr residue285 of each protomer, and is maintained by hydrophobic contact between the Ile side chain286 and Thr285 Cγ2. In SARS-CoV-2 3CL, threonine is replaced by alanine and isoleucine by leucine compared to the same residues in SARS-CoV 3CL. The Thr285Ala substitution observed in the 3CL protease of SARS-CoV-2 allows two domains III to approach each other somewhat (the distance between the C atomsα 285 residues in molecules A and B is 6.77 Å in SARS-CoV 3CL protease and 5.21 Å in SARS-CoV-2 3CL protease, and the distance between the centers of mass of two domains III is reduced from 33.4 Å to 32.1 E). In the active site 3CL of SARS-CoV-2, Cys145 and His41 form a catalytic dyad which, when taken together with a hidden water molecule hydrogen-bonded to His41, can be considered a catalytic triad of SARS-CoV-2 3CL protease. In view of the ongoing spread of SARS-CoV-2, which has caused the current worldwide COVID-19 outbreak, it is desirable to have new ways to suppress SARS-CoV-2 virus replication and treat COVID-19 in patients.
Сущность изобретенияThe essence of the invention
В настоящем изобретении представлены новые соединения, которые действуют при ингибировании или профилактике репликации вируса SARS-CoV-2 и, таким образом, полезны для лечения COVID-19. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединения, и способам лечения COVID-19 и ингибирования репликации вируса SARS-CoV-2 путем введения соединений по настоящему изобретению или фармацевтических композиций, содержащих соединения по настоящему изобретению. Следует понимать, что каждый из приведенных ниже вариантов осуществления способа лечения также может быть сформулирован как соответствующие варианты осуществления применения. Например, любое из соединений, или их фармацевтически приемлемых солей, или сольватов, или гидратов, или фармацевтически приемлемых солей соединений, сольватов или гидратов, как указано в любом из вариантов осуществления E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 и E80-E83 могут быть использованы для использования в качестве лекарственного средства или, альтернативно, для использования в способе лечения, как описано в любом из вариантов осуществления E36-E41, E47-E49, E52-E58a, E69-E74, E77-R79, E85-E93 и E95-E98.The present invention provides novel compounds that act to inhibit or prevent SARS-CoV-2 virus replication and thus are useful in the treatment of COVID-19. The present invention also relates to pharmaceutical compositions containing the compounds and methods for treating COVID-19 and inhibiting the replication of the SARS-CoV-2 virus by administering the compounds of the present invention or pharmaceutical compositions containing the compounds of the present invention. It should be understood that each of the following embodiments of the treatment method can also be formulated as corresponding embodiments of the application. For example, any of the compounds, or their pharmaceutically acceptable salts, or solvates, or hydrates, or pharmaceutically acceptable salts of compounds, solvates, or hydrates, as defined in any of Embodiments E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 and E80-E83 can be used for use as a drug, or alternatively for use in a method of treatment, as described in any of the embodiments of E36-E41, E47-E49, E52-E58a, E69-E74, E77-R79, E85-E93 and E95-E98.
E1 является соединением по E45 или E59, ниже, формулы I E1 is a compound according to E45 or E59, below, of formula I
I; I;
или его фармацевтически приемлемой солью; где R1 выбирают из группы, состоящей из C1-C6 алкила, который необязательно замещен циано или от одного до пяти атомами фтора; C2-C6 алкинила; и (C3-C6 циклоалкил)-C1-C3 алкила, который необязательно замещен от одного до двух заместителями, выбранными из трифторметила и C1-C3 алкила, или от одного до пяти атомами фтора; R2 является водородом, или R2 и R1, взятые вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, являются пирролидиновым или пиперидиновым кольцом, которое необязательно замещено от одного до четырех R2a; R2a в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из фтора, C1-C6 алкила, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора, и C1-C6 алкокси, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора; или две R2a группы, присоединенные к соседним атомам углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются конденсированным C3-C6 циклоалкилом, который необязательно замещен от одного до четырех R2b; или две R2a группы, присоединенные к одному и тому же атому углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются спиро C3-C6 циклоалкилом, который необязательно замещен от одного до четырех R2b; R2b в каждом случае независимо выбирают из фтора, C1-C3 алкила, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора, и C1-C3 алкокси, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора; R3 выбирают из группы, состоящей из C1-C8 алкила, C1-C8 алкокси, (C1-C6 алкокси)-C1-C6 алкила, C2-C6 алкинила, C2-C6 алкинилокси, C3-C12 циклоалкила, необязательно конденсированного с 5-6-членным гетероарилом или фенилом, (C3-C12 циклоалкил)-C1-C6 алкила, C3-C12 циклоалкокси, (C3-C12 циклоалкокси)-C1-C6 алкила, 4-12-членного гетероциклоалкила, который необязательно конденсирован с 5-6-членным гетероарилом или фенилом, и где указанный гетероциклоалкил содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, (4-12-членный гетероциклоалкил)-C1-C6 алкила, где указанная гетероциклоалкильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, C6-C10 арила, необязательно конденсированного с C4-C6 циклоалкилом или 4-7-членнным гетероциклоалкилом, (C6-C10 арил)-C1-C6 алкила, 5-10-членного гетероарила, содержащего от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S, который необязательно конденсирован с C5-C6 циклоалкилом; (5-10-членный гетероарил)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (C6-C10 арил)-(5-10-членного гетероарила)- где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S, (5-10-членный гетероарилокси)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (5-6-членный гетероарил)-(5-6-членный гетероарила)-, где каждая гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (4-7-членнный гетероциклоалкил)-(5-6-членный гетероарила)-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n и гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (5-6-членный гетероарил)-(4-7-членнного гетероциклоалкила)-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n и гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; где каждая R3 группа необязательно замещена от одного до пяти R4; R4 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из оксо, галогена, гидрокси, циано, фенила, бензила, амино, (C1-C6 алкил)амино, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, ди(C1-C6 алкил)амино, необязательно замещенного от одного до десяти атомами фтора, C1-C6 алкила, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкокси, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C3 алкокси-C1-C3 алкила, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C3-C6 циклоалкила, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора или C1-C3 алкила, C1-C6 алкил-C(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкил-S(O)2NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкил-C(O)-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкил-S(O)n-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора; иor a pharmaceutically acceptable salt thereof; where R 1 is selected from the group consisting of C 1 -C 6 alkyl, which is optionally substituted with cyano or from one to five fluorine atoms; C 2 -C 6 alkynyl; and (C 3 -C 6 cycloalkyl)-C 1 -C 3 alkyl which is optionally substituted with one to two substituents selected from trifluoromethyl and C 1 -C 3 alkyl, or one to five fluorine atoms; R 2 is hydrogen, or R 2 and R 1 , taken together with the nitrogen and carbon atoms to which they are attached, are a pyrrolidine or piperidine ring which is optionally substituted with one to four R 2a ; R 2a is at each occurrence independently selected from the group consisting of fluorine, C 1 -C 6 alkyl optionally substituted with one to three fluorine atoms, and C 1 -C 6 alkoxy optionally substituted with one to three fluorine atoms; or two R 2a groups attached to adjacent carbon atoms and taken together with the atoms to which they are attached are fused C 3 -C 6 cycloalkyl which is optionally substituted with one to four R 2b ; or two R 2a groups attached to the same carbon atom and taken together with the atoms to which they are attached are spiro C 3 -C 6 cycloalkyl which is optionally substituted with one to four R 2b ; R 2b is at each occurrence independently selected from fluorine, C 1 -C 3 alkyl optionally substituted with one to three fluorine atoms, and C 1 -C 3 alkoxy optionally substituted with one to three fluorine atoms; R 3 is selected from the group consisting of C 1 -C 8 alkyl, C 1 -C 8 alkoxy, (C 1 -C 6 alkoxy)-C 1 -C 6 alkyl, C 2 -C 6 alkynyl, C 2 -C 6 alkynyloxy, C 3 -C 12 cycloalkyl optionally fused with 5-6 membered heteroaryl or phenyl, (C 3 -C 12 cycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, C 3 -C 12 cycloalkoxy, (C 3 -C 12 cycloalkoxy)-C 1 -C 6 alkyl, 4-12 membered heterocycloalkyl which is optionally fused with 5-6 membered heteroaryl or phenyl, and wherein said heterocycloalkyl contains one to four heteroatoms independently selected from N, O and S( O) n , (4-12 membered heterocycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, wherein said heterocycloalkyl group contains one to four heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n , C 6 -C 10 aryl , optionally fused with C 4 -C 6 cycloalkyl or 4-7 membered heterocycloalkyl, (C 6 -C 10 aryl)-C 1 -C 6 alkyl, 5-10 membered heteroaryl containing from one to five heteroatoms, independently selected from N, O and S, which is optionally fused with C 5 -C 6 cycloalkyl; (5-10-membered heteroaryl)-C 1 -C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; (C 6 -C 10 aryl)-(5-10 membered heteroaryl)- wherein the heteroaryl group contains one to five heteroatoms independently selected from N, O and S, (5-10 membered heteroaryloxy)-C 1 -C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; (5-6 membered heteroaryl)-(5-6 membered heteroaryl)-, where each heteroaryl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S; (4-7-membered heterocycloalkyl)-(5-6-membered heteroaryl)-, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n and the heteroaryl group contains one to four heteroatoms , independently selected from N, O and S; (5-6-membered heteroaryl)-(4-7-membered heterocycloalkyl)-, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n and the heteroaryl group contains one to four heteroatoms , independently selected from N, O and S; where each R 3 group is optionally substituted with one to five R 4 ; R 4 at each occurrence is independently selected from the group consisting of oxo, halogen, hydroxy, cyano, phenyl, benzyl, amino, (C 1 -C 6 alkyl)amino optionally substituted with one to five fluorine atoms, di(C 1 - C 6 alkyl)amino optionally substituted with one to ten fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkoxy optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 - C 3 alkoxy-C 1 -C 3 alkyl optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 3 -C 6 cycloalkyl optionally substituted with one to three fluorine atoms or C 1 -C 3 alkyl, C 1 -C 6 alkyl- C(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl-S(O) 2 NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl-C(O )- optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl-S(O) n - optionally substituted with one to five fluorine atoms; and
n в каждом случае независимо выбирают из 0, 1 и 2.n is independently selected from 0, 1 and 2 in each case.
E2 является соединением по любому из E1, E45 и E59, где R1 выбирают из группы, состоящей из (CH3)2CHCH2-, (CH3)3CCH2-, цианометила, 2-цианоэтила, 2,2-дифторэтила, 2,2,2-трифторэтила, 3,3-дифторпропила, 3,3,3-трифторпропила, 3,3,3-трифтор-2-метилпропила, циклопропилметила, (2,2-дифторциклопропил)метила, [1-(трифторметил)циклопропил]метила, (2-метилциклопропил)метила, (3,3-дифторциклобутил)метила, циклопентилметила и пропинила; и R2 является водородом; или его фармацевтически приемлемой солью.E2 is a compound according to any of E1, E45 and E59, where R 1 is selected from the group consisting of (CH 3 ) 2 CHCH 2 -, (CH 3 ) 3 CCH 2 -, cyanomethyl, 2-cyanoethyl, 2,2-difluoroethyl , 2,2,2-trifluoroethyl, 3,3-difluoropropyl, 3,3,3-trifluoropropyl, 3,3,3-trifluoro-2-methylpropyl, cyclopropylmethyl, (2,2-difluorocyclopropyl)methyl, [1-( trifluoromethyl)cyclopropyl]methyl, (2-methylcyclopropyl)methyl, (3,3-difluorocyclobutyl)methyl, cyclopentylmethyl and propynyl; and R 2 is hydrogen; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E3 является соединением по любому из E1, E45 и E59, где R2 и R1, взятые вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, являются пирролидиновым или пиперидиновым кольцом который необязательно замещен от одного до четырех R2a; или его фармацевтически приемлемой солью.E3 is a compound according to any of E1, E45 and E59, where R 2 and R 1 taken together with the nitrogen and carbon atoms to which they are attached, are a pyrrolidine or piperidine ring which is optionally substituted with one to four R 2a ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E4 является соединением по любому из E1, E45, E59 и E3 где R2a в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из фтора, метила, изопропила, трифторметила и трет-бутокси; или две R2a группы, присоединенные к соседним атомам углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются конденсированным циклопентаном или циклопропаном, который необязательно замещен от одного до четырех R2b; или две R2a группы, присоединенные к одному и тому же атому углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются спироциклопропановым кольцом, которое необязательно замещено от одного до четырех R2b; или его фармацевтически приемлемой солью.E4 is a compound according to any one of E1, E45, E59 and E3 wherein R 2a is at each occurrence independently selected from the group consisting of fluoro, methyl, isopropyl, trifluoromethyl and t -butoxy; or two R 2a groups attached to adjacent carbon atoms and taken together with the atoms to which they are attached are fused cyclopentane or cyclopropane which is optionally substituted with one to four R 2b ; or two R 2a groups attached to the same carbon atom and taken together with the atoms to which they are attached is a spirocyclopropane ring which is optionally substituted with one to four R 2b ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E5 является соединением по E1, E3, E4, E45 и E59, где R2b в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из фтора, метила и метокси; или его фармацевтически приемлемой солью.E5 is a compound according to E1, E3, E4, E45 and E59, where R 2b in each case is independently selected from the group consisting of fluorine, methyl and methoxy; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E6 является соединением по любому из E1, E2, E45 и E59, выбранным из группы, состоящей из формул Ia - IgE6 is a compound according to any one of E1, E2, E45 and E59 selected from the group consisting of formulas Ia - Ig
и ;and ;
или его фармацевтически приемлемой солью.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E7 является соединением по любому из E1, E3, E4, E45 и E59 выбранным из группы, состоящей из формул Ih - IkE7 is a compound according to any of E1, E3, E4, E45 and E59 selected from the group consisting of formulas Ih - Ik
или его фармацевтически приемлемой солью.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E8 является соединением по любому из E1, E3, E4, E7, E45 и E59 выбранным из группы, состоящей изE8 is a compound according to any one of E1, E3, E4, E7, E45 and E59 selected from the group consisting of
или его фармацевтически приемлемой солью.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E9 является соединением по любому из E1, E3, E4, E7, E8, E45 и E59 где R3 выбирают из группы, состоящей из C1-C6 алкила и (C3-C6 циклоалкил)-C1-C3 алкила; каждый из которых замещен от одного до четырех R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E9 is a compound according to any of E1, E3, E4, E7, E8, E45 and E59 where R 3 is selected from the group consisting of C 1 -C 6 alkyl and (C 3 -C 6 cycloalkyl)-C 1 -C 3 alkyl ; each of which is substituted with one to four R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E10 является соединением по любому из E1, E3, E4, E7 to E9, E45 и E59 где R3 выбирают из группы, состоящей из (CH3)2CHCH(R4)-, (CH3)3CCH(R4)- и (циклогексил)CH(R4)-; или его фармацевтически приемлемой солью.E10 is a compound according to any of E1, E3, E4, E7 to E9, E45 and E59 where R 3 is selected from the group consisting of (CH 3 ) 2 CHCH(R 4 )-, (CH 3 ) 3 CCH(R 4 ) - and (cyclohexyl)CH(R 4 )-; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E11 является соединением по любому из E1, E3, E4, E7-E10, E45 и E59 выбранным из группы, состоящей изE11 is a compound according to any one of E1, E3, E4, E7-E10, E45 and E59 selected from the group consisting of
, ,
или его фармацевтически приемлемой солью.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E12 является соединением по любому из E1, E3, E4, E7-E11, E45 и E59, где R4 выбирают из группы, состоящей из (C1-C6 алкил)амино, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкил-C(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, и C1-C6 алкил-S(O)2NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора; или его фармацевтически приемлемой солью.E12 is a compound according to any one of E1, E3, E4, E7-E11, E45 and E59, where R 4 is selected from the group consisting of (C 1 -C 6 alkyl)amino optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl-C(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms, and C 1 -C 6 alkyl-S(O) 2 NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E13 является соединением по любому из E1, E3, E4, E7-E12, E45 и E59, где R4 выбирают из группы, состоящей из CF3C(O)NH-, CF3S(O)2NH-, CH3C(O)NH-, CH3CH2C(O)NH- и CF3CH2NH-; или его фармацевтически приемлемой солью.E13 is a compound according to any of E1, E3, E4, E7-E12, E45 and E59, where R 4 is selected from the group consisting of CF 3 C(O)NH-, CF 3 S(O) 2 NH-, CH 3 C(O)NH-, CH 3 CH 2 C(O)NH- and CF 3 CH 2 NH-; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E14 является соединением по любому из E1, E3, E4, E7-E13, E45 и E59, где R4 является CF3C(O)NH- или CF3S(O)2NH-; или его фармацевтически приемлемой солью.E14 is a compound according to any of E1, E3, E4, E7-E13, E45 and E59, where R 4 is CF 3 C(O)NH- or CF 3 S(O) 2 NH-; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E15 является соединением по любому из E1-E8, E45 и E59, где R3 является 4-12-членнымо гетероциклоалкилом, который необязательно конденсирован с 5-6-членным гетероарилом или фенилом, и где указанный гетероциклоалкил содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, или является (4-12-членный гетероциклоалкил)-C1-C6 алкилом, где указанная гетероциклоалкильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n; каждый из которых необязательно замещен от одного до пяти R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E15 is a compound according to any one of E1-E8, E45 and E59, where R 3 is a 4-12 membered heterocycloalkyl which is optionally fused to a 5-6 membered heteroaryl or phenyl, and wherein said heterocycloalkyl contains from one to four heteroatoms, independently selected from N, O and S(O) n , or is (4-12-membered heterocycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, where the specified heterocycloalkyl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S( O) n ; each of which is optionally substituted with one to five R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E16 является соединением по любому из E1-E8, E15, E45 и E59, где 4-12-членную гетероциклоалкильную группу в R3 выбирают из группы, состоящей из ацетидинила, пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, оксетанила, тетрагидрофуранила, пиранила, 2-оксо-1,3-оксазолидинила, оксабицикло[2.2.1]гептила, 1-окса-8-азаспиро[4.5]децила, 1,1-диоксидо-1,2-тиазолидинила и 1,1-диоксидо-1,2-тиазинанила; каждый из который необязательно замещен от одного до трех R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E16 is a compound according to any one of E1-E8, E15, E45 and E59, wherein the 4-12 membered heterocycloalkyl group in R3 is selected from the group consisting of acetidinyl, pyrrolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, morpholinyl, oxetanyl, tetrahydrofuranyl, pyranyl, 2 -oxo-1,3-oxazolidinyl, oxabicyclo[2.2.1]heptyl, 1-oxa-8-azaspiro[4.5]decyl, 1,1-dioxido-1,2-thiazolidinyl and 1,1-dioxido-1,2 -thiazinanil; each of which is optionally substituted with one to three R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E17 является соединением по любому из E1-E8, E45 и E59, где R3 выбирают из группы, состоящей из фенила, бензила, фенэтила, 5-10-членного гетероарила, содержащего от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (5-10-членного гетероарил)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; и (5-10-членного гетероарилокси)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; каждый из которых необязательно замещен от одного до пяти R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E17 is a compound according to any one of E1-E8, E45 and E59, where R 3 is selected from the group consisting of phenyl, benzyl, phenethyl, 5-10 membered heteroaryl containing from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; (5-10-membered heteroaryl)-C 1 -C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; and (5-10-membered heteroaryloxy)-C 1 -C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; each of which is optionally substituted with one to five R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E18 является соединением по любому из E1-E8, E17, E45 и E59, где 5-10-членную гетероарильную группу в R3 выбирают из группы, состоящей из имидазолила, пиразолила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, оксадиазолила, триазолила, пиридинила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, индолила, бензимидазолила, пиридинопирролила, хинолинила, хиноксалинила, бензотриазолила, имидазо[1,2-a]пиридинила, имидазо[2,1-b][1,3]тиазолила, 4H-фуро[3,2-b]пирролила, 4H-тиено[3,2-b]пирролила, [1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидинила, [1,2,3]триазоло[1,5-a]пиридинила и нафтиридинила; каждый из которых необязательно замещен от одного до четырех R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E18 is a compound according to any one of E1-E8, E17, E45 and E59, where the 5-10 membered heteroaryl group in R3 selected from the group consisting of imidazolyl, pyrazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxadiazolyl, triazolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, indolyl, benzimidazolyl, pyridinopyrrolyl, quinolinyl, quinoxalinyl, benzotriazolyl, imidazo[1,2-a] pyridinyl, imidazo[2,1-b][1,3]thiazolyl, 4H-furo[3,2-b]pyrrolyl, 4H-thieno[3,2-b]pyrrolyl, [1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidinyl, [1,2,3]triazolo[1,5-a]pyridinyl and naphthyridinyl; each of which is optionally substituted with one to four R4; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E19 является соединением по любому из E1-E8, E17-E18, E45 и E59, где R3 является индолилом; который необязательно замещен от одного до четырех R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E19 is a compound according to any of E1-E8, E17-E18, E45 and E59, where R 3 is indolyl; which is optionally substituted with one to four R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E20 является соединением по любому из E1-E8, E17-E19, E45 и E59, где R3 является индол-2-ил; который необязательно замещен от одного до четырех R4; и R4 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из фтора, хлора, брома, гидрокси, метила, этила, пропила, изопропила, 1-метилпропила, бутила, трет-бутила, ацетила, метокси, этокси, пропокси, бутокси, трифторметила, трифторметокси, циклогексила и диэтиламино; или его фармацевтически приемлемой солью.E20 is a compound according to any of E1-E8, E17-E19, E45 and E59, where R 3 is indol-2-yl; which is optionally substituted with one to four R 4 ; and R 4 at each occurrence is independently selected from the group consisting of fluorine, chlorine, bromine, hydroxy, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, 1-methylpropyl, butyl, t -butyl, acetyl, methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, trifluoromethyl , trifluoromethoxy, cyclohexyl and diethylamino; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E21 является соединением по любому из E1, E2, E6, E9-E10, E12-E20, E45 и E59 формулыE21 is a compound according to any one of E1, E2, E6, E9-E10, E12-E20, E45 and E59 of the formula
; ;
или его фармацевтически приемлемой солью.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E22 является соединением по любому из E1, E2, E6, E9-E10, E12-E21, E45 и E59, где R3 выбирают из группы, состоящей из 1H-индол-2-ила, 7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-ила, 4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-ила, 4-метокси-1H-индол-2-ила, 4-(трифторметокси)-1H-индол-2-ила, 6-(трифторметил)-1H-индол-2-ила, 4-метокси-3,6,7-трис(трифторметил)-1H-индол-2-ила, 3-фтор-4-метокси-1H-индол-2-ила и 3,5-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-ила; или его фармацевтически приемлемой солью.E22 is a compound according to any of E1, E2, E6, E9-E10, E12-E21, E45 and E59, where R 3 is selected from the group consisting of 1H-indol-2-yl, 7-fluoro-4-methoxy-1H -indol-2-yl, 4-methoxy-7-(trifluoromethyl)-1H-indol-2-yl, 4-methoxy-1H-indol-2-yl, 4-(trifluoromethoxy)-1H-indol-2-yl , 6-(trifluoromethyl)-1H-indol-2-yl, 4-methoxy-3,6,7-tris(trifluoromethyl)-1H-indol-2-yl, 3-fluoro-4-methoxy-1H-indol- 2-yl and 3,5-difluoro-4-methoxy-1H-indol-2-yl; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E23 является соединением по любому из E1-E8, E21, E45 и E59, где R3 является C1-C6 алкокси; или его фармацевтически приемлемой солью.E23 is a compound according to any of E1-E8, E21, E45 and E59, where R 3 is C 1 -C 6 alkoxy; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E24 является соединением по любому из E1-E8, E21, E23, E45 и E59, где R3 выбирают из группы, состоящей из метокси, этокси и проп-2-окси; или его фармацевтически приемлемой солью.E24 is a compound according to any one of E1-E8, E21, E23, E45 and E59, where R 3 is selected from the group consisting of methoxy, ethoxy and prop-2-oxy; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E25 является соединением по любому из E1-E8, E21, E45 и E59, где R3 выбирают из группы, состоящей из C3-C12 циклоалкила, необязательно конденсированного с 5-6-членным гетероарилом или фенилом, (C3-C12 циклоалкил)-C1-C6 алкила, C3-C12 циклоалкокси и (C3-C12 циклоалкокси)-C1-C6 алкила; каждый из которых необязательно замещен от одного до трех R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E25 is a compound according to any one of E1-E8, E21, E45 and E59, where R 3 is selected from the group consisting of C 3 -C 12 cycloalkyl optionally fused with 5-6 membered heteroaryl or phenyl, (C 3 -C 12 cycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, C 3 -C 12 cycloalkoxy and (C 3 -C 12 cycloalkoxy)-C 1 -C 6 alkyl; each of which is optionally substituted with one to three R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E26 является соединением по любому из E1-E8, E21, E25, E45 и E59, где R3 выбирают из группы, состоящей из циклопропила, циклобутила, циклопентила, циклогексила, 1-(циклогексилокси)этила, циклогексоксиметила, циклопропилметила, циклопропилэтила, циклобутилметила, циклобутилэтила, циклопентилметила, циклопентилэтила, циклогексилметила и циклогексилэтила; каждый из которых необязательно замещен от одного до трех R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E26 is a compound according to any one of E1-E8, E21, E25, E45 and E59, where R 3 is selected from the group consisting of cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, 1-(cyclohexyloxy)ethyl, cyclohexoxymethyl, cyclopropylmethyl, cyclopropylethyl, cyclobutylmethyl, cyclobutylethyl, cyclopentylmethyl, cyclopentylethyl, cyclohexylmethyl and cyclohexylethyl; each of which is optionally substituted with one to three R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E27 является соединением по любому из E1-E8, E17, E45 и E59, где R3 выбирают из группы, состоящей из фенила, бензила и фенэтила, каждый из которых необязательно замещен от одного до трех R4; или его фармацевтически приемлемой солью.E27 is a compound according to any one of E1-E8, E17, E45 and E59, where R 3 is selected from the group consisting of phenyl, benzyl and phenethyl, each of which is optionally substituted with one to three R 4 ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E28 является соединением по любому из E1-E8, E17, E27, E45 и E59, где R4 выбирают из группы, состоящей из фтора, хлора, диметиламино, трифторметила, CF3C(O)NH- и CF3S(O)2NH-; или его фармацевтически приемлемой солью.E28 is a compound according to any of E1-E8, E17, E27, E45 and E59, where R 4 is selected from the group consisting of fluorine, chlorine, dimethylamino, trifluoromethyl, CF 3 C(O)NH- and CF 3 S(O) 2NH- ; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E29 является соединение по любому из E1, E45 и E59, выбранным из группы, состоящей из E29 is a compound according to any one of E1, E45 and E59 selected from the group consisting of
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-{(2R)-2-(диметиламино)-2-[4-(трифторметил)фенил]ацетил}-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -{(2R)-2-(dimethylamino)-2-[4-(trifluoromethyl )phenyl]acetyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-{(2R)-2-(диметиламино)-2-[3-(трифторметил)фенил]ацетил}-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -{(2R)-2-(dimethylamino)-2-[3-(trifluoromethyl )phenyl]acetyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-(трифторметил)-1H-индолe-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-6-(трифторметил)-1H-индолe-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-6-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3,6,7-трис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-3,6,7-tris(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-(трифторметокси)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-(trifluoromethoxy)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-(трифторметокси)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-(trifluoromethoxy)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-3-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3,5-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-3,5-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5,7-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5,7-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3,5,7-трис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-3,5,7-tris(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3,7-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-3,7-bis(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
7-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;7-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-7-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
6-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;6-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
4-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-7-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
4,6-дихлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4,6-dichloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl -1-oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
7-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;7-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-7-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
6-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;6-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
4-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
5,7-дихлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5,7-dichloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-7-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
4,6-дихлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4,6-dichloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-метил-5-(трифторметил)имидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-3-methyl-5-(trifluoromethyl)imidazo[2,1-b][1,3]thiazole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[4-метил-2-(трифторметил)-1,3-тиазол-5-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[4-methyl-2-(trifluoromethyl)-1, 3-thiazol-5-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[5-метил-2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[5-methyl-2-(trifluoromethyl)-1, 3-thiazol-4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N2-[(4-бром-1-этил-3-метил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-L-лейцинамида;N 2 -[(4-bromo-1-ethyl-3-methyl-1H-pyrazol-5-yl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidine- 3-yl]ethyl}-L-leucinamide;
N2-[(4-хлор-1,3-диметил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-L-лейцинамида;N 2 -[(4-chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazol-5-yl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-L-leucinamide;
3-ацетил-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;3-acetyl-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3R)-2,5-диоксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3R)-2,5-dioxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-гидрокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-hydroxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-гидрокси-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-hydroxy-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(3,3-дифторциклобутил)ацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(3,3-difluorocyclobutyl)acetyl]-4-methyl-L-leucinamide ;
N2-[(транс-4-цианоциклогексил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -[(trans-4-cyanocyclohexyl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide ;
N2-[(транс-4-цианоциклогексил)карбонил]-N-{(1R)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -[(trans-4-cyanocyclohexyl)carbonyl]-N-{(1R)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide ;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[2-(циклогексилокси)пропаноил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[2-(cyclohexyloxy)propanoyl]-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[cyclohexyl(methoxy)acetyl]-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[cyclohexyl(methoxy)acetyl]-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(2S)-2-(диметиламино)-2-фенилацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(2S)-2-(dimethylamino)-2-phenylacetyl]-4- methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-(пирролидин-1-илацетил)-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -(pyrrolidin-1-ylacetyl)-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(2R)-2-(диметиламино)-2-фенилацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(2R)-2-(dimethylamino)-2-phenylacetyl]-4- methyl-L-leucinamide;
N2-[(4-хлор-1,3-диметил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -[(4-chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazol-5-yl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-3-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-7-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3,7-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-3,7-bis(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3,5-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-3,5-bis(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3,6-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-3,6-bis(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-3-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-(циклогексилкарбонил)-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -(cyclohexylcarbonyl)-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-(циклогексилкарбонил)-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -(cyclohexylcarbonyl)-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[2-(trifluoromethyl)-1,3-thiazol- 4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-[(пропан-2-илокси)ацетил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -[(propan-2-yloxy)acetyl]-L-leucinamide ;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(циклогексилокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(cyclohexyloxy)acetyl]-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N 2-(4,4,4-трифтор-3-метилбутаноил)-L-лейцинамида; N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl- N 2 -(4,4,4-trifluoro-3-methylbutanoyl )-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-метилимидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-3-methylimidazo[2,1-b][1,3]thiazole-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-valyl]-3-азабицикло[3.1.0]hexane-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-5,5,5-trifluoro-1-oxopentane -2-yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-7-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]hexane-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(trifluoroacetyl )-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
N2-[(4-бром-1-этил-3-метил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -[(4-bromo-1-ethyl-3-methyl-1H-pyrazol-5-yl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidine- 3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-7-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-(2,6-дихлорбензоил)-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -(2,6-dichlorobenzoyl)-4-methyl-L-leucinamide;
(2S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4,4-диметил-1-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4,4-dimethyl-1-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl )-L-valyl]piperidine-2-carboxamide;
3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-4-(трифторметил)-L-пролинамида;3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl-(4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl -4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide;
(2S,4S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-{3-метил-N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-{3-methyl-N-[( trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-5-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -{[2-(trifluoromethyl)-1,3-thiazol-5-yl] carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(2S)-2-(диметиламино)-2-фенилацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(2S)-2-(dimethylamino)-2-phenylacetyl]-4- methyl-L-leucinamide;
N2-[(транс-4-цианоциклогексил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -[(trans-4-cyanocyclohexyl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide ;
N2-[(транс-4-цианоциклогексил)карбонил]-N-{(1R)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -[(trans-4-cyanocyclohexyl)carbonyl]-N-{(1R)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide ;
N-{(1R)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[2-(циклогексилокси)пропаноил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1R)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[2-(cyclohexyloxy)propanoyl]-4-methyl-L-leucinamide;
(2S,4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[N-(trifluoroacetyl)-L- valyl]piperidine-2-carboxamide;
5-(бутан-2-ил)-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-(butan-2-yl)-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4 ,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(4,5-дихлор-1H-имидазол-2-ил)карбонил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(4,5-dichloro-1H-imidazol-2-yl)carbonyl] -4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(4,5-дихлор-1H-пиразол-3-ил)карбонил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(4,5-dichloro-1H-pyrazol-3-yl)carbonyl] -4-methyl-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-2,3-диметил-4H-фуро[3,2-b]пиррол-5-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-2,3-dimethyl-4H-furo[3,2-b]pyrrole-5-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-(трифторметил)-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-(trifluoromethyl)-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-метокси-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-methoxy-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridine-2-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridine-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-фтор-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-fluoro-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[3-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-5-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[3-(propan-2-yl)-1H- pyrazol-5-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-fluoro-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5,6-дифтор-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5,6-difluoro-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4H-тиено[3,2-b]пиррол-5-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4H-thieno[3,2-b]pyrrole-5-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[3-(2-метилпропил)-1H-пиразол-5-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[3-(2-methylpropyl)-1H-pyrazole- 5-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N2-{[4-(3-хлорфенил)-1H-имидазол-2-ил]карбонил}-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -{[4-(3-chlorophenyl)-1H-imidazol-2-yl]carbonyl}-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl] ethyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N2-[(3-трет-бутил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -[(3-tert-butyl-1H-pyrazol-5-yl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -4-methyl-L-leucinamide;
6-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;6-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-метил-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-methyl-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индазол-3-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4,5,6,7-tetrahydro-1H-indazole-3-carboxamide;
4,6-дихлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-бензимидазол-2-карбоксамида;4,6-dichloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl -1-oxopentan-2-yl]-1H-benzimidazole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-(1-метилциклопропил)-4-(трифторметил)-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-(1-methylcyclopropyl)-4-(trifluoromethyl)-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine-2-carboxamide;
N2-{[5-(2-хлорфенил)-4-фтор-1H-пиразол-3-ил]карбонил}-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида;N 2 -{[5-(2-chlorophenyl)-4-fluoro-1H-pyrazol-3-yl]carbonyl}-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidine- 3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-2-метил-4H-тиено[3,2-b]пиррол-5-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-2-methyl-4H-thieno[3,2-b]pyrrole-5-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-{[3-(4-метоксифенил)-1H-пиразол-5-ил]карбонил}-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -{[3-(4-methoxyphenyl)-1H-pyrazol-5-yl] carbonyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-{[3-(2-метоксифенил)-1H-пиразол-5-ил]карбонил}-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -{[3-(2-methoxyphenyl)-1H-pyrazol-5-yl] carbonyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-{[4-(4-метоксифенил)-1H-имидазол-2-ил]карбонил}-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -{[4-(4-methoxyphenyl)-1H-imidazol-2-yl] carbonyl}-4-methyl-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[3-(4-метилфенил)-1H-пиразол-5-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[3-(4-methylphenyl)-1H-pyrazole- 5-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
7-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-метил-1H-индол-2-карбоксамида;7-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-5-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
7-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;7-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
(2S,4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[3-метил-N-(метилсульфонил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[3-methyl-N-(methylsulfonyl )-L-valyl]piperidine-2-carboxamide;
(2S,4S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[N-(trifluoroacetyl)-L- valyl]piperidine-2-carboxamide;
(2S,4S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl )-L-valyl]piperidine-2-carboxamide;
(2S,4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl )-L-valyl]piperidine-2-carboxamide;
5-[(2S)-бутан-2-ил]-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-[(2S)-butan-2-yl]-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3',3',3'-трифтор-N-(трифторацетил)-L-изолейцил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3',3 ',3'-trifluoro-N-(trifluoroacetyl)-L-isoleucyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{(2S)-2-циклогексил-2-[(трифторацетил)амино]ацетил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-{(2S)-2-cyclohexyl-2- [(trifluoroacetyl)amino]acetyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{(2S)-2-циклопентил-2-[(трифторацетил)амино]ацетил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-{(2S)-2-cyclopentyl-2- [(trifluoroacetyl)amino]acetyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[4-метил-N-(трифторацетил)-L-лейцил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[4-methyl- N-(trifluoroacetyl)-L-leucyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{(2S)-2-(4,4-дифторциклогексил)-2-[(трифторацетил)амино]ацетил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-{(2S)-2-(4.4 -difluorocyclohexyl)-2-[(trifluoroacetyl)amino]acetyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклопентил-N-(трифторацетил)-L-alanyl]-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-cyclopentyl-N-(trifluoroacetyl)- L-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклогексил-N-(трифторацетил)-L-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-cyclohexyl-N-(trifluoroacetyl)- L-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-лейцил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(trifluoroacetyl )-L-leucyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[6,6-дифтор-N-(трифторацетил)-L-норлейцил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[6,6-difluoro-N-(trifluoroacetyl )-L-norleucyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-{(2S)-4,4,4-трифтор-2-[(трифторацетил)амино]бутаноил}-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-{(2S)- 4,4,4-trifluoro-2-[(trifluoroacetyl)amino]butanoyl}-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-фтор-N-(трифторацетил)-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-fluoro-N-(trifluoroacetyl)- L-valyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{(2S)-2-циклопропил-2-[(трифторацетил)амино]ацетил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-{(2S)-2-cyclopropyl-2- [(trifluoroacetyl)amino]acetyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-(3,3-дифторциклобутил)-N-(трифторацетил)-L-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-(3,3-difluorocyclobutyl)- N-(trifluoroacetyl)-L-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-O-(трифторметил)-L-серил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(trifluoroacetyl )-O-(trifluoromethyl)-L-seryl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-{(2S)-2-фенил-2-[(трифторацетил)амино]ацетил}-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-{(2S)- 2-phenyl-2-[(trifluoroacetyl)amino]acetyl}-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-фенилаланил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(trifluoroacetyl )-L-phenylalanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3,5-дифтор-N-(трифторацетил)-L-фенилаланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3,5-difluoro-N-(trifluoroacetyl )-L-phenylalanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-3-(трифторметил)-L-фенилаланил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(trifluoroacetyl )-3-(trifluoromethyl)-L-phenylalanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(2,2,2-трифторэтил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(2 ,2,2-trifluoroethyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(2S,4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-{(2S)-3-метил-2-[(трифторацетил)амино]бутил}пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-{(2S)-3-methyl- 2-[(trifluoroacetyl)amino]butyl}piperidine-2-carboxamide;
(2S,4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-{(2S)-3-метил-2-[(2,2,2-трифторэтил)амино]бутил}пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-{(2S)-3-methyl- 2-[(2,2,2-trifluoroethyl)amino]butyl}piperidine-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(3,3,3-трифторпропаноил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(3 ,3,3-trifluoropropanoyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-(N-пропаноил-L-валил)-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-(N-propanoyl- L-valyl)-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(2S,4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[N-(2,2,2-трифторэтил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[N-(2,2,2 -trifluoroethyl)-L-valyl]piperidine-2-carboxamide;
N2-[(4-хлор-1-этил-3-метил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-L-лейцинамида;N 2 -[(4-chloro-1-ethyl-3-methyl-1H-pyrazol-5-yl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidine- 3-yl]ethyl}-L-leucinamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-этил-1H-индол-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-3-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-циклогексил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-cyclohexyl-1H-indole-2-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-метил-1H-индол-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-3-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3,5-диметил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-3,5-dimethyl-1H-indole-2-carboxamide;
5-трет-бутил-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-tert-Butyl-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-(пропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-(propan-2-yl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-этил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-3-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-6-этил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-6-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-этил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
4-бутокси-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4-butoxy-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-(трифторметокси)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-(trifluoromethoxy)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-6-(диэтиламино)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-6-(diethylamino)-1H-indole-2-carboxamide;
4-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
5-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
6-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;6-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentane -2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-3-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-6-пропокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-6-propoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-7-fluoro-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-7-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-6-фтор-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-6-fluoro-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-fluoro-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4,5-диметокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4,5-dimethoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-[(4-метил-1,3-тиазол-5-ил)карбонил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -[(4-methyl-1,3-thiazol-5- yl)carbonyl]-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-(этоксикарбонил)-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -(ethoxycarbonyl)-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-(этоксикарбонил)-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -(ethoxycarbonyl)-4-methyl-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-5,5,5-trifluoro-1-oxopentane -2-yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-оксазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[2-(trifluoromethyl)-1,3-oxazol- 4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[3-(трифторметил)-1,2-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[3-(trifluoromethyl)-1,2-thiazol- 4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[3-(трифторметил)-1,2-оксазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[3-(trifluoromethyl)-1,2-oxazol- 4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -{[2-(trifluoromethyl)-1,3-thiazol-4-yl] carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-5,5,5-трифтор-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-L-норвалинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-5,5,5-trifluoro-N 2 -{[2-(trifluoromethyl)-1, 3-thiazol-4-yl]carbonyl}-L-norvalinamide;
(4S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-5,5,5-трифтор-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;(4S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-5,5,5-trifluoro-N 2 -{[2-(trifluoromethyl )-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-5,5,5-трифтор-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;(4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-5,5,5-trifluoro-N 2 -{[2-(trifluoromethyl )-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-3-циклопентил-1-оксопропан-2-ил]-2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-3-cyclopentyl-1-oxopropan-2-yl ]-2-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-4-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[5-(трифторметил)-1,2-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[5-(trifluoromethyl)-1,2-thiazol- 4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[5-(трифторметил)-1,2-оксазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[5-(trifluoromethyl)-1,2-oxazol- 4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-оксазол-5-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[2-(trifluoromethyl)-1,3-oxazol- 5-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-5-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[2-(trifluoromethyl)-1,3-thiazol- 5-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-5,5,5-трифтор-4-метил-N2-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-5,5,5-trifluoro-4-methyl-N 2 -{[2-(trifluoromethyl )-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N2-{[(2S)-2-метилтетрагидрофуран-2-ил]карбонил}-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-N 2 -{[(2S)-2-methyltetrahydrofuran-2-yl] carbonyl}-L-leucinamide;
N-[(2S,4R)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S,4R)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-5,5,5-trifluoro-4 -methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S,4S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S,4S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-5,5,5-trifluoro-4 -methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-5,5,5-trifluoro-4,4 -dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-3-циклопентил-1-оксопропан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-3-cyclopentyl-1-oxopropan-2-yl ]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
5,7-дихлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5,7-dichloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl -1-oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-этил-1H-индол-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-3-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-циклогексил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-cyclohexyl-1H-indole-2-carboxamide;
5-хлор-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-метил-1H-индол-2-карбоксамида;5-chloro-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-3-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3,5-диметил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-3,5-dimethyl-1H-indole-2-carboxamide;
5-трет-бутил-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-tert-butyl-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl -1-oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-(пропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-(propan-2-yl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-7-(пропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-7-(propan-2-yl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-этил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-3-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-этил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-этил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-ethyl-1H-indole-2-carboxamide;
4-бутокси-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4-butoxy-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-(трифторметокси)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-(trifluoromethoxy)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-(диэтиламино)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-(diethylamino)-1H-indole-2-carboxamide;
4-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;4-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
5-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
6-бром-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;6-bromo-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1 -oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-3-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-пропокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-propoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-7-fluoro-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-7-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-7-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-фтор-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-fluoro-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-fluoro-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-6-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-6-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-5-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4,5-диметокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-4,5-dimethoxy-1H-indole-2-carboxamide;
5-(бутан-2-ил)-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-(butan-2-yl)-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4 -methyl-1-oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-(пропан-2-ил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-7-(propan-2-yl)-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-5-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-6-метил-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-6-methyl-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-6-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-6-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
5-(бутан-2-ил)-N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;5-(butan-2-yl)-N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4 ,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(2R)-2-циклогексил-2-метоксиацетил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(2R)-2-cyclohexyl-2-methoxyacetyl]-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(2R)-2-(циклогексилокси)пропаноил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(2R)-2-(cyclohexyloxy)propanoyl]-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N 2-(4,4,4-трифтор-3-метилбутаноил)-L-лейцинамида; N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl- N 2 -(4,4,4-trifluoro-3-methylbutanoyl )-L-leucinamide;
N2-[(транс-4-цианоциклогексил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-L-лейцинамида;N 2 -[(trans-4-cyanocyclohexyl)carbonyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(1-этил-4-метил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(1-ethyl-4-methyl-1H-pyrazol-5-yl) carbonyl]-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-(циклогексилкарбонил)-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -(cyclohexylcarbonyl)-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(циклогексилокси)ацетил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(cyclohexyloxy)acetyl]-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(3,3-дифторциклобутил)ацетил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(3,3-difluorocyclobutyl)acetyl]-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(пропан-2-илокси)ацетил]-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(propan-2-yloxy)acetyl]-L-leucinamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-метилимидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-3-methylimidazo[2,1-b][1,3]thiazole-2-carboxamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(2R)-2-циклогексил-2-метоксиацетил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(2R)-2-cyclohexyl-2-methoxyacetyl]-4-methyl- L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-[(1-этил-4-метил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-4-метил-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -[(1-ethyl-4-methyl-1H-pyrazol-5-yl) carbonyl]-4-methyl-L-leucinamide;
N2-[2-хлор-4-(метилсульфонил)бензоил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-L-лейцинамида;N 2 -[2-chloro-4-(methylsulfonyl)benzoyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-L-leucinamide;
N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N2-(2,6-дихлорбензоил)-L-лейцинамида;N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2 -(2,6-dichlorobenzoyl)-L-leucinamide;
(1R,2S,5S)-3-[N-(трет-бутилсульфонил)-3-метил-L-валил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-3-[N-(tert-butylsulfonyl)-3-methyl-L-valyl]-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidine- 3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-3-{[(3R)-1-бензил-5-оксопирролидин-3-ил]карбонил}-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-3-{[(3R)-1-benzyl-5-oxopyrrolidin-3-yl]carbonyl}-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2 -oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-{[(3R)-5-оксо-1-фенилпирролидин-3-ил]карбонил}-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-{[(3R) -5-oxo-1-phenylpyrrolidin-3-yl]carbonyl}-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-3-{[(3R)-1-трет-бутил-5-оксопирролидин-3-ил]карбонил}-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-3-{[(3R)-1-tert-butyl-5-oxopyrrolidin-3-yl]carbonyl}-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S) -2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[(3-метилимидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-ил)карбонил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[(3-methylimidazo [2,1-b][1,3]thiazol-2-yl)carbonyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-{[2-(трифторметил)-1,3-тиазол-4-ил]карбонил}-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-{[2-( trifluoromethyl)-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-3-циклопропил-1-оксопропан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида; иN-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-3-cyclopropyl-1-oxopropan-2-yl ]-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide; and
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-3-циклопропил-1-оксопропан-2-ил]-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-3-cyclopropyl-1-oxopropan-2-yl ]-1H-indole-2-carboxamide;
или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E30 является соединением по любому из E1, E45 и E59 выбранным из группы, состоящей изE30 is a compound according to any one of E1, E45 and E59 selected from the group consisting of
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2 -yl]-7-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-4-methoxy-7-(trifluoromethyl)-1H-indole-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[N-(trifluoroacetyl )-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида;N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl ]-7-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide;
(2S,4S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[N-(trifluoroacetyl)-L- valyl]piperidine-2-carboxamide;
(2S,4S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl )-L-valyl]piperidine-2-carboxamide;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{(2S)-2-циклогексил-2-[(трифторацетил)амино]ацетил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида;(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-{(2S)-2-cyclohexyl-2- [(trifluoroacetyl)amino]acetyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide;
(2S,4S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-1-{3-метил-N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида;(2S,4S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-1-{3-methyl-N-[( trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide;
3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-4-(трифторметил)-L-пролинамида; и3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl-(4R)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl -4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide; and
(2S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4,4-диметил-1-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]пиперидин-2-карбоксамида;(2S)-N-{(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4,4-dimethyl-1-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl )-L-valyl]piperidine-2-carboxamide;
или его фармацевтически приемлемой соли.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E31 является фармацевтической композицией, содержащей фармацевтически эффективное количество соединения по любому из E1-E30 или его фармацевтически приемлемой соль, вместе с фармацевтически приемлемым носителем.E31 is a pharmaceutical composition containing a pharmaceutically effective amount of a compound according to any of E1-E30, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, together with a pharmaceutically acceptable carrier.
E32 является фармацевтической композицией по E31, где композиция имеет внутривенную, подкожную, ингалируемую или пероральную дозированную формуюE32 is a pharmaceutical composition according to E31, where the composition is in intravenous, subcutaneous, inhalable or oral dosage form
E33 является фармацевтической композицией по E31 или E32, где композиция имеет пероральную дозированную форму.E33 is a pharmaceutical composition according to E31 or E32, where the composition is in an oral dosage form.
E34 является фармацевтической композицией по любому из E31-E33, дополнительно содержащей дополнительный терапевтический агент.E34 is a pharmaceutical composition according to any of E31-E33, additionally containing an additional therapeutic agent.
E35 является фармацевтической композицией по любому из E31-E34, где фармацевтическая композиция дополнительно содержит один или несколько из дексаметазона, азитромицина и ремдесивира.E35 is a pharmaceutical composition according to any one of E31-E34, wherein the pharmaceutical composition further comprises one or more of dexamethasone, azithromycin, and remdesivir.
E36 является способом лечения коронавирусной инфекции у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из E1-E30 или его фармацевтически приемлемой соли, пациенту, нуждающемуся в этом.E36 is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of a compound of any of E1-E30, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, to a patient in need thereof.
E37 является способом по E36, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E37 is the way of E36 where the coronavirus infection is COVID-19.
E38 является способом лечения коронавирусной инфекцией у пациента, где способ включает введение фармацевтической композиции по любому из E31-E35 пациенту, нуждающемуся в этом.E38 is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a pharmaceutical composition according to any of E31-E35 to a patient in need thereof.
E39 является способом по E38, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E39 is the way of E38 where the coronavirus infection is COVID-19.
E40 является способом ингибирования или профилактики репликации вируса SARS-CoV-2, включающим контакт протеазы 3CL коронавируса SARS-CoV-2 с терапевтически эффективным количеством соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из E1-E30.E40 is a method for inhibiting or preventing SARS-CoV-2 virus replication, comprising contacting SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease with a therapeutically effective amount of a compound or pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of E1-E30.
E41 является способом ингибирования или профилактики репликации вируса SARS-CoV-2 у пациента, включающим введение пациенту, нуждающемуся в ингибировании или профилактике репликации вируса SARS-CoV-2, терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из E1-E30.E41 is a method for inhibiting or preventing SARS-CoV-2 virus replication in a patient, comprising administering to a patient in need of inhibiting or preventing SARS-CoV-2 virus replication a therapeutically effective amount of a compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of E1-E30.
E42 является применением соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из E1-E30 для лечения коронавирусной инфекции.E42 is the use of a compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any one of E1-E30 for the treatment of a coronavirus infection.
E43 является применением E42, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E43 is an application of E42 where the coronavirus infection is COVID-19.
E44 является применением соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из E1-E30 для получения лекарственного средства, которое применяют для лечения коронавирусной инфекции.E44 is the use of a compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof according to any of E1-E30 for the preparation of a medicament that is used to treat a coronavirus infection.
E44a является применением по E44, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E44a is the application of E44 where the coronavirus infection is COVID-19.
E45 является соединением формулы I ' E45 is a compound of formula I '
или его фармацевтически приемлемой солью; где R в каждом случае независимо является гидрокси или оксо; p равен 0, 1 или 2; R1 выбирают из группы, состоящей из C1-C6 алкила, который необязательно замещен циано или от одного до пяти атомами фтора; C2-C6 алкинила; и (C3-C6 циклоалкил)-C1-C3 алкила, который необязательно замещен от одного до двух заместителями, выбранными из трифторметила и C1-C3 алкила или от одного до пяти атомами фтора; R2 является водородом или R2 и R1 взятые вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, являются пирролидиновым или пиперидиновым кольцом, которое необязательно замещен от одного до четырех R2a; R2a в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из фтора, гидрокси, C1-C6 алкила, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора, и C1-C6 алкокси, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора; или две R2a группы, присоединенные к соседним атомам углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются конденсированным C3-C6 циклоалкилом, который необязательно замещен от одного до четырех R2b; или две R2a группы, присоединенные к одному и тому же атому углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются спиро C3-C6 циклоалкилом, который необязательно замещен от одного до четырех R2b; R2b в каждом случае независимо выбирают из фтора, гидрокси, C1-C3 алкила, необязательно независимо замещенного от одного до трех фтор или гидрокси, и C1-C3 алкокси, необязательно независимо замещенного от одного до трех фтор или гидрокси; R3 выбирают из группы, состоящей из C1-C8 алкила, C1-C8 алкокси, (C1-C6 алкокси)-C1-C6 алкила, C2-C6 алкинила, C2-C6 алкинилокси, C3-C12 циклоалкила, необязательно конденсированного с 5-6-членным гетероарилом или фенилом, (C3-C12 циклоалкил)-C1-C6 алкила, C3-C12 циклоалкокси, (C3-C12 циклоалкокси)-C1-C6 алкила, 4-12-членного гетероциклоалкила, который необязательно конденсирован с 5-6-членным гетероарилом или фенилом и где указанный гетероциклоалкил содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, (4-12-членного гетероциклоалкил)-C1-C6 алкила, где указанная гетероциклоалкильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, C6-C10 арила, необязательно конденсированного с C4-C6 циклоалкилом или 4-7-членнным гетероциклоалкилом, (C6-C10 арил)-C1-C6 алкила, 5-10-членного гетероарила, содержащего от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S, который необязательно конденсирован с C5-C6 циклоалкилом; (5-10-членного гетероарил)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (C6-C10 арил)-(5-10-членного гетероарила)-, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S, (5-10-членного гетероарилокси)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (5-6-членный гетероарил)-(5-6-членный гетероарил)-, где каждая гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (4-7-членнный гетероциклоалкил)-(5-6-членный гетероарил)-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n и гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (5-6-членный гетероарил)-(4-7-членнным гетероциклоалкил)-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n и гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; где каждая R3 группа необязательно замещена от одного до пяти R4; R4 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из оксо, гало, гидрокси, циано, фенила, бензила, амино, (C1-C6 алкил)амино, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, ди(C1-C6 алкил)амино, необязательно замещенного от одного до десяти атомами фтора, C1-C6 алкила, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкокси, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C3 алкокси-C1-C3 алкила, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C3-C6 циклоалкила, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора или C1-C3 алкила, C1-C6 алкил-C(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкил-OC(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-NHC(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-S(O)2NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-C(O)-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-S(O)n-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5; R5 выбирают из фенил, фенокси, C3-C6 циклоалкила, C3-C6 циклоалкокси, 4-7-членнного гетероциклоалкила-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, и 5-6-членный гетероарил-, где гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; где каждый R5 необязательно независимо замещен от одного до трех гало, C1-C3 алкилом и C1-C3 алкокси; и n в каждом случае независимо выбирают из 0, 1 и 2.or a pharmaceutically acceptable salt thereof; where R is independently at each occurrence hydroxy or oxo; p is 0, 1, or 2; R 1 is selected from the group consisting of C 1 -C 6 alkyl which is optionally substituted with cyano or from one to five fluorine atoms; C 2 -C 6 alkynyl; and (C 3 -C 6 cycloalkyl)-C 1 -C 3 alkyl which is optionally substituted with one to two substituents selected from trifluoromethyl and C 1 -C 3 alkyl or one to five fluorine atoms; R 2 is hydrogen, or R 2 and R 1 taken together with the nitrogen and carbon atoms to which they are attached, are a pyrrolidine or piperidine ring which is optionally substituted with one to four R 2a ; R 2a is at each occurrence independently selected from the group consisting of fluorine, hydroxy, C 1 -C 6 alkyl optionally substituted with one to three fluorine atoms, and C 1 -C 6 alkoxy optionally substituted with one to three fluorine atoms; or two R 2a groups attached to adjacent carbon atoms and taken together with the atoms to which they are attached are fused C 3 -C 6 cycloalkyl which is optionally substituted with one to four R 2b ; or two R 2a groups attached to the same carbon atom and taken together with the atoms to which they are attached are spiro C 3 -C 6 cycloalkyl which is optionally substituted with one to four R 2b ; R 2b is at each occurrence independently selected from fluorine, hydroxy, C 1 -C 3 alkyl optionally independently substituted with one to three fluorine or hydroxy, and C 1 -C 3 alkoxy optionally independently substituted with one to three fluorine or hydroxy; R 3 is selected from the group consisting of C 1 -C 8 alkyl, C 1 -C 8 alkoxy, (C 1 -C 6 alkoxy)-C 1 -C 6 alkyl, C 2 -C 6 alkynyl, C 2 -C 6 alkynyloxy, C 3 -C 12 cycloalkyl optionally fused with 5-6 membered heteroaryl or phenyl, (C 3 -C 12 cycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, C 3 -C 12 cycloalkoxy, (C 3 -C 12 cycloalkoxy)-C 1 -C 6 alkyl, 4-12 membered heterocycloalkyl which is optionally fused with 5-6 membered heteroaryl or phenyl and wherein said heterocycloalkyl contains one to four heteroatoms independently selected from N, O and S(O ) n , (4-12-membered heterocycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, where the specified heterocycloalkyl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n , C 6 -C 10 aryl, optionally fused with C 4 -C 6 cycloalkyl or 4-7 membered heterocycloalkyl, (C 6 -C 10 aryl)-C 1 -C 6 alkyl, 5-10 membered heteroaryl containing from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S, which is optionally fused with C 5 -C 6 cycloalkyl; (5-10-membered heteroaryl)-C 1 -C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; (C 6 -C 10 aryl)-(5-10 membered heteroaryl)-, where the heteroaryl group contains one to five heteroatoms independently selected from N, O and S, (5-10 membered heteroaryloxy)-C 1 - C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; (5-6 membered heteroaryl)-(5-6 membered heteroaryl)-, where each heteroaryl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S; (4-7-membered heterocycloalkyl)-(5-6-membered heteroaryl)-, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n and the heteroaryl group contains one to four heteroatoms , independently selected from N, O and S; (5-6-membered heteroaryl)-(4-7-membered heterocycloalkyl)-, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n and the heteroaryl group contains one to four heteroatoms , independently selected from N, O and S; where each R 3 group is optionally substituted with one to five R 4 ; R 4 at each occurrence is independently selected from the group consisting of oxo, halo, hydroxy, cyano, phenyl, benzyl, amino, (C 1 -C 6 alkyl)amino optionally substituted with one to five fluorine atoms, di(C 1 - C 6 alkyl)amino optionally substituted with one to ten fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkoxy optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 - C 3 alkoxy-C 1 -C 3 alkyl optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 3 -C 6 cycloalkyl optionally substituted with one to three fluorine atoms or C 1 -C 3 alkyl, C 1 -C 6 alkyl- C(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl-OC(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl- NHC(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl-S(O) 2 NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl-C(O)- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl-S(O) n - optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 ; R 5 is selected from phenyl, phenoxy, C 3 -C 6 cycloalkyl, C 3 -C 6 cycloalkoxy, 4-7 membered heterocycloalkyl-, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O ) n , and 5-6-membered heteroaryl-, where the heteroaryl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S; where each R 5 is optionally independently substituted with one to three halo, C 1 -C 3 alkyl and C 1 -C 3 alkoxy; and n in each case is independently selected from 0, 1 and 2.
E46 является соединением, выбранным из группы, состоящей из (2S,4R)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида; (2R,4S)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида; 3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамида; (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(метилкарбамоил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; метил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил]-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил}карбамата; и N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамида; или его фармацевтически приемлемой солью.E46 is a compound selected from the group consisting of ( 2S , 4R )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide; ( 2R , 4S )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N- [(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide; 3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- 4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide; (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (methylcarbamoyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; methyl {(2 S )-1-[(1 R ,2 S ,5 S )-2-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl] ethyl}carbamoyl)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexan-3-yl]-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl}carbamate; and N- (trifluoroacetyl)-L- valyl- (4R) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-( trifluoromethyl)-L-prolinamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E47 является способом лечения коронавирусной инфекции у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из E45 и E46 или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в этом.E47 is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of a compound of any of E45 and E46, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, to a patient in need thereof.
E48 является способом по E47, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E48 is the way according to E47, where the coronavirus infection is COVID-19.
E49 является способом лечения коронавирусной инфекции у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из E1-E30 и E45-E46 или его фармацевтически приемлемой соли, где вводят дополнительный терапевтический агент, и дополнительный терапевтический агент выбирают из группы, состоящей из ремдесивира, галидесивир, фавилавира/авифавира, молнупиравира, AT-527, AT-301, BLD-2660, фавипиравира, камостата, SLV213, эмтриктабина/тенофивира, клевудина, дальцетрапиба, боцепревира, ABX464, дексаметазона, гидрокортизона, конвалесцентной плазмы, гелсолина (Rhu-p65N), регданвимаба (Regkirova), равулизумаба (Ultomiris), VIR-7831/VIR-7832, BRII-196/BRII-198, COVI-AMG/COVI DROPS (STI-2020), бамланивимаба (LY-CoV555), маврилимаба, леронлимаба (PRO140), AZD7442, лензилумаба, инфликсимаба, адалимумаба, JS 016, STI-1499 (COVIGUARD), ланаделумаба (Takhzyro), канакинумаба (Ilaris), гимсилумаба, отилимаба, касиривимаба/имдевимаба (REGN-Cov2), MK-7110 (CD24Fc/SACCOVID), гепарина, апиксабана, тоцилизумаба (Actemra), сарилумаба (Kevzara), димезилата апилимода, DNL758, DC402234, PB1046, дапаглифозина, абивертиниба, ATR-002, бемцентиниба, акалабрутиниба, барицитиниба, тофацитиниба, лосмапимода, фамотидина, ритонавира, никлозамида и диминазена.E49 is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of a compound according to any of E1-E30 and E45-E46, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein an additional therapeutic agent is administered and the additional therapeutic agent is selected from the group consisting of remdesivir , galidesivir, favilavir/avifavir, molnupiravir, AT-527, AT-301, BLD-2660, favipiravir, camostat, SLV213, emtrictabine/tenofivir, clevudine, dalcetrapib, boceprevir, ABX464, dexamethasone, hydrocortisone, convalescent plasma (Rhu, g-solin p65N), regdanvimab (Regkirova), ravulizumab (Ultomiris), VIR-7831/VIR-7832, BRII-196/BRII-198, COVI-AMG/COVI DROPS (STI-2020), bamlanivimab (LY-CoV555), mavrilimab, leronlimab (PRO140), AZD7442, lenzilumab, infliximab, adalimumab, JS 016, STI-1499 (COVIGUARD), lanadelumab (Takhzyro), canakinumab (Ilaris), gimsilumab, otilimab, kasirivimab/imdevimab (REGN-Cov2), MK-7110 ( CD24Fc/SACC OVID), heparin, apixaban, tocilizumab (Actemra), sarilumab (Kevzara), apilimod dimesylate, DNL758, DC402234, PB1046, dapaglifosin, abivertinib, ATR-002, bemcentinib, acalabrutinib, baricitinib, tofacitinib, losmapidine, nicloviridine, nicloviramide, famotidine diminazene.
E50 является соединением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид; или его фармацевтически приемлемой солью.E50 is the compound (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl -3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
E50a является соединением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид. E50a is the compound (1R, 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl -3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide.
E51 является фармацевтической композицией, содержащей терапевтически эффективное количество (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; или его фармацевтически приемлемой соли вместе с фармацевтически приемлемым носителем.E51 is a pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof, together with a pharmaceutically acceptable carrier.
E51a является фармацевтической композицией, содержащей терапевтически эффективное количество (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида вместе с фармацевтически приемлемым носителем.E51a is a pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide together with a pharmaceutically acceptable carrier.
E52 является способом лечения коронавирусной инфекции у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в ее лечении.E52 is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine -3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof to a patient in need of its treatment.
E52a является способом лечения коронавирусной инфекции у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида пациенту, нуждающемуся в ее лечении. E52a is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of (1R, 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidine -3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide to a patient in need of her treatment.
E53 является способом по E52, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E53 is the way according to E52, where the coronavirus infection is COVID-19.
E53a является способом по E52a, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E53a is the method of E52a, where the coronavirus infection is COVID-19.
E54 является способом по E52 или E53, где (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид; или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально.E54 is the method according to E52 or E53, where (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered orally.
E54a является способом по E52a или E53a, где (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид вводят перорально.E54a is the method according to E52a or E53a where (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide is administered orally.
E55 является способом по E54, где от 50 мг до 1500 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; или его фармацевтически приемлемой соли вводят каждый день.E55 is the method according to E54, where from 50 mg to 1500 mg (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered every day.
E55a является способом по E54a, где от 50 мг до 1500 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида вводят каждый день.E55a is the method according to E54a, where from 50 mg to 1500 mg (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide was administered every day.
E56 является способом по E55, где 380 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; или его фармацевтически приемлемую соль вводят три раза в день.E56 is the method according to E55, where 380 mg (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered three times a day.
E56a является способом по E55a, где 380 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид; или его фармацевтически приемлемую соль вводят три раза в день.E56a is the method according to E55a, where 380 mg (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered three times a day.
E57 является способом по E55, где от 50 мг до 1500 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; или его фармацевтически приемлемой соли вводят каждый день в виде пероральной суспензии, капсулы или таблетки.E57 is the method according to E55, where from 50 mg to 1500 mg (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered daily as an oral suspension, capsule or tablet.
E57a является способом по E55a, где от 50 до 1500 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; или его фармацевтически приемлемой соли вводят каждый день в виде пероральной суспензии, капсулы или таблетки.E57a is the method according to E55a, where from 50 to 1500 mg (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl ]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered daily as an oral suspension, capsule or tablet.
E58 является способом по E57, где вводят таблетку.E58 is the method of E57 where a tablet is administered.
E58a является способом по E57a, где вводят таблетку.E58a is the method of E57a where a tablet is administered.
E59 является соединением формулы I'' E59 is a compound of formula I''
или его сольватом или гидратом, или фармацевтически приемлемой солью указанного соединения, его сольвата или гидрата;or a solvate or hydrate thereof, or a pharmaceutically acceptable salt of said compound, solvate or hydrate thereof;
гдеwhere
R в каждом случае независимо является гидрокси или оксо;R is independently at each occurrence hydroxy or oxo;
q и q' каждый независимо выбирают из 0, 1 и 2;q and q ' are each independently selected from 0, 1 and 2;
p равен 0, 1 или 2;p is 0, 1 or 2;
R1 выбирают из группы, состоящей из C1-C6 алкила, который необязательно замещен циано или от одного до пяти атомами фтора; C2-C6 алкинила; и (C3-C6 циклоалкил)-C1-C3 алкила, который необязательно замещен от одного до двух заместителями, выбранными из трифторметила и C1-C3 алкила, или от одного до пяти атомами фтора;R 1 is selected from the group consisting of C 1 -C 6 alkyl which is optionally substituted with cyano or from one to five fluorine atoms; C 2 -C 6 alkynyl; and (C 3 -C 6 cycloalkyl)-C 1 -C 3 alkyl which is optionally substituted with one to two substituents selected from trifluoromethyl and C 1 -C 3 alkyl, or one to five fluorine atoms;
R2 является водородом или R2 и R1 взятые вместе с атомами азота и углерода, к которым они присоединены, являются пирролидиновым или пиперидиновым кольцом которое необязательно замещено от одного до четырех R2a;R 2 is hydrogen, or R 2 and R 1 taken together with the nitrogen and carbon atoms to which they are attached, are a pyrrolidine or piperidine ring which is optionally substituted with one to four R 2a ;
R2a в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из фтора, гидрокси, C1-C6 алкила, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора, и C1-C6 алкокси, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора; или две R2a группы, присоединенные к соседним атомам углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются конденсированным C3-C6 циклоалкилом, который необязательно замещен от одного до четырех R2b; или две R2a группы, присоединенные к одному и тому же атому углерода и взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, являются спиро C3-C6 циклоалкилом, который необязательно замещен от одного до четырех R2b;R 2a is at each occurrence independently selected from the group consisting of fluorine, hydroxy, C 1 -C 6 alkyl optionally substituted with one to three fluorine atoms, and C 1 -C 6 alkoxy optionally substituted with one to three fluorine atoms; or two R 2a groups attached to adjacent carbon atoms and taken together with the atoms to which they are attached are fused C 3 -C 6 cycloalkyl which is optionally substituted with one to four R 2b ; or two R 2a groups attached to the same carbon atom and taken together with the atoms to which they are attached are spiro C 3 -C 6 cycloalkyl which is optionally substituted with one to four R 2b ;
R2b в каждом случае независимо выбирают из фтора, гидрокси, C1-C3 алкила, необязательно независимо замещенного от одного до трех атомами фтора или гидрокси, и C1-C3 алкокси необязательно независимо замещенного от одного до трех атомами фтора или гидрокси;R 2b is at each occurrence independently selected from fluorine, hydroxy, C 1 -C 3 alkyl optionally independently substituted with one to three fluorine or hydroxy atoms, and C 1 -C 3 alkoxy optionally independently substituted with one to three fluorine or hydroxy atoms;
R3 выбирают из группы, состоящей из C1-C8 алкила, C1-C8 алкокси, (C1-C6 алкокси)-C1-C6 алкила, C2-C6 алкинила, C2-C6 алкинилокси, C3-C12 циклоалкила, необязательно конденсированного с 5-6-членным гетероарилом или фенилом, (C3-C12 циклоалкил)-C1-C6 алкила, C3-C12 циклоалкокси, (C3-C12 циклоалкокси)-C1-C6 алкила, 4-12-членного гетероциклоалкила, который необязательно конденсирован с 5-6-членным гетероарилом или фенилом, и где указанный гетероциклоалкил содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, (4-12-членного гетероциклоалкил)-C1-C6 алкила, где указанная гетероциклоалкильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, C6-C10 арила, необязательно конденсированного с C4-C6 циклоалкилом или 4-7-членнным гетероциклоалкилом, (C6-C10 арил)-C1-C6 алкила, 5-10-членного гетероарила, содержащего от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S, который необязательно конденсирован с C5-C6 циклоалкилом; (5-10-членного гетероарил)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (C6-C10 арил)-(5-10-членного гетероарил)-, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S, (5-10-членного гетероарилокси)-C1-C6 алкила, где гетероарильная группа содержит от одного до пяти гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (5-6-членный гетероарил)-(5-6-членный гетероарил)-, где каждая гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (4-7-членнным гетероциклоалкил)-(5-6-членный гетероарил)-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n и гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (5-6-членный гетероарил)-(4-7-членнным гетероциклоалкил)-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n и гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; где каждая R3 группа необязательно замещена от одного до пяти R4;R 3 is selected from the group consisting of C 1 -C 8 alkyl, C 1 -C 8 alkoxy, (C 1 -C 6 alkoxy)-C 1 -C 6 alkyl, C 2 -C 6 alkynyl, C 2 -C 6 alkynyloxy, C 3 -C 12 cycloalkyl optionally fused with 5-6 membered heteroaryl or phenyl, (C 3 -C 12 cycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, C 3 -C 12 cycloalkoxy, (C 3 -C 12 cycloalkoxy)-C 1 -C 6 alkyl, 4-12 membered heterocycloalkyl which is optionally fused with 5-6 membered heteroaryl or phenyl, and wherein said heterocycloalkyl contains one to four heteroatoms independently selected from N, O and S( O) n , (4-12-membered heterocycloalkyl)-C 1 -C 6 alkyl, where the specified heterocycloalkyl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n , C 6 -C 10 aryl , optionally fused with C 4 -C 6 cycloalkyl or 4-7 membered heterocycloalkyl, (C 6 -C 10 aryl)-C 1 -C 6 alkyl, 5-10 membered heteroaryl containing from one to five heteroatoms, independently selected from N, O and S, which is optionally fused with C 5 -C 6 cycloalkyl; (5-10-membered heteroaryl)-C 1 -C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; (C 6 -C 10 aryl)-(5-10 membered heteroaryl)-, where the heteroaryl group contains one to five heteroatoms independently selected from N, O and S, (5-10 membered heteroaryloxy)-C 1 - C 6 alkyl, where the heteroaryl group contains from one to five heteroatoms independently selected from N, O and S; (5-6 membered heteroaryl)-(5-6 membered heteroaryl)-, where each heteroaryl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S; (4-7-membered heterocycloalkyl)-(5-6-membered heteroaryl)-, where the heterocycloalkyl group contains from one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n and the heteroaryl group contains from one to four heteroatoms , independently selected from N, O and S; (5-6-membered heteroaryl)-(4-7-membered heterocycloalkyl)-, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n and the heteroaryl group contains one to four heteroatoms , independently selected from N, O and S; where each R 3 group is optionally substituted with one to five R 4 ;
R4 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из оксо, гало, гидрокси, циано, фенила, бензила, амино, (C1-C6 алкил)амино, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, ди(C1-C6 алкил)амино, необязательно замещенного от одного до десяти атомами фтора, C1-C6 алкила, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, (5-6-членный гетероарил)амино-, где гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; (4-7-членнный гетероциклоалкил)амино-, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, C1-C6 алкокси, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C3 алкокси-C1-C3 алкила, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C3-C6 циклоалкила, необязательно замещенного от одного до трех атомами фтора или C1-C3 алкилом, C1-C6 алкил-C(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора, C1-C6 алкил-OC(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-NHC(O)NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-S(O)2NH-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-C(O)-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5, C1-C6 алкил-S(O)n-, необязательно замещенного от одного до пяти атомами фтора или одним R5;R 4 at each occurrence is independently selected from the group consisting of oxo, halo, hydroxy, cyano, phenyl, benzyl, amino, (C 1 -C 6 alkyl)amino optionally substituted with one to five fluorine atoms, di(C 1 - C 6 alkyl)amino optionally substituted with one to ten fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl optionally substituted with one to five fluorine atoms, (5-6 membered heteroaryl)amino-, where the heteroaryl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S; (4-7-membered heterocycloalkyl)amino-, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n , C 1 -C 6 alkoxy optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 3 alkoxy-C 1 -C 3 alkyl optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 3 -C 6 cycloalkyl optionally substituted with one to three fluorine atoms, or C 1 -C 3 alkyl, C 1 -C 6 alkyl-C(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms, C 1 -C 6 alkyl-OC(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl-NHC(O)NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl-S(O) 2 NH- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl-C(O)- optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 , C 1 -C 6 alkyl-S(O) n - optionally substituted with one to five fluorine atoms or one R 5 ;
R5 выбирают из фенила, фенокси, C3-C6 циклоалкила, C3-C6 циклоалкокси, 4-7-членнного гетероциклоалкила, где гетероциклоалкильная группа содержит от одного до трех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S(O)n, и 5-6-членного гетероарила, где гетероарильная группа содержит от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из N, O и S; где каждый R5 is необязательно независимо замещен от одного до трех галогеном, C1-C3 алкилом и C1-C3 алкокси; иR 5 is selected from phenyl, phenoxy, C 3 -C 6 cycloalkyl, C 3 -C 6 cycloalkoxy, 4-7 membered heterocycloalkyl, where the heterocycloalkyl group contains one to three heteroatoms independently selected from N, O and S(O) n , and 5-6-membered heteroaryl, where the heteroaryl group contains from one to four heteroatoms independently selected from N, O and S; where each R 5 is optionally independently substituted with one to three halogen, C 1 -C 3 alkyl and C 1 -C 3 alkoxy; and
n в каждом случае независимо выбирают из 0, 1 и 2.n is independently selected from 0, 1 and 2 in each case.
E60 является соединением по E59, которым является (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид; или его сольват или гидрат, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения, сольвата или гидрата.E60 is the compound according to E59 which is (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- 6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a solvate or hydrate thereof, or a pharmaceutically acceptable salt of said compound, solvate or hydrate.
E61 является соединением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид, имеющий структуруE61 is the compound (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl -3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide having the structure
; ;
или его сольват или гидрат.or its solvate or hydrate.
E62 является соединением по E61, которое является кристаллическим (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамидом.E62 is a compound according to E61 which is crystalline ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide.
E63 является соединением по E62, которое является кристаллическим (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамидом, твердая форма 1.E63 is a compound according to E62 which is crystalline ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide,
E64 является соединением по E62, которое является кристаллическим (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамидом, твердая форма 4.E64 is the compound at E62 which is crystalline (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, solid form 4.
E65 является соединением по E61, которое является аморфным (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамидом.E65 is a compound according to E61 which is amorphous ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide.
E66 является соединением по E61, которое является (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамидом, метил трет-бутиловым сольватом.E66 is the compound according to E61 which is ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- 6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl solvate.
E67 является соединением по E66, которое является кристаллическим (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамидом, метил трет-бутиловым сольватом.E67 is a compound according to E66 which is crystalline ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl solvate.
E68 является соединением по E67, которое является кристаллическим (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид, метил трет-бутиловым сольватом, твердая форма 2.E68 is a compound according to E67 which is crystalline ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl solvate,
E69 является способом лечения коронавирусной инфекции у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по любому E61-E68 пациенту, нуждающемуся в ее лечении.E69 is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of a compound of any E61-E68 to a patient in need of its treatment.
E70 является способом по E69, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E70 is the way according to E69, where the coronavirus infection is COVID-19.
E71 является способом по E70, где пациенту также вводят ритонавир.E71 is the method according to E70, where ritonavir is also administered to the patient.
E72 является способом по E71, где соединение по любому из E61-E68 и ритонавир вводят пациенту перорально.E72 is the method of E71 wherein the compound of any of E61-E68 and ritonavir are administered orally to the patient.
E73 является способом по E72, где вводят от примерно 10 мг до примерно 1500 мг в сутки соединения по любому из E61-E68 и примерно 10 мг до примерно 1000 мг в сутки ритонавира.E73 is the method of E72 wherein about 10 mg to about 1500 mg per day of a compound of any of E61-E68 and about 10 mg to about 1000 mg per day of ritonavir are administered.
E74 является способом по E73, где примерно 50 мг соединения по любому из E61-E68 и примерно 100 мг ритонавира каждый вводят пациенту дважды в сутки.E74 is the method of E73 wherein about 50 mg of a compound of any of E61-E68 and about 100 mg of ritonavir are each administered to the patient twice daily.
E75 является фармацевтической композицией, содержащей терапевтически эффективное количество (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамида; или его сольвата или гидрата, или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения, сольвата или гидрата вместе с фармацевтически приемлемым носителем.E75 is a pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a solvate or hydrate thereof, or a pharmaceutically acceptable salt of said compound, solvate or hydrate, together with a pharmaceutically acceptable carrier.
E75a является фармацевтической композицией, содержащей терапевтически эффективное количество (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3.1.0]гексан-2-карбоксамид; или его сольват или гидрат вместе с фармацевтически приемлемым носителем. E75a is a pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of (1R, 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide; or a solvate or hydrate thereof, together with a pharmaceutically acceptable carrier.
E76 является фармацевтической композицией по E75a, содержащей соединение по любому из E62-E68.E76 is a pharmaceutical composition according to E75a containing a compound according to any of E62-E68.
E77 является способом по E69 или E70, где примерно 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 450 мг, 500 мг, 550 мг, 600 мг, 650 мг, 700 мг или 750 мг соединения по любому из E61-E68 вводят пациенту перорально дважды в сутки.E77 is the method according to E69 or E70, where about 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 450 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 650 mg, 700 mg or 750 mg of a compound according to any of E61-E68 is administered to the patient orally twice a day.
E78 является способом по E77, где ритонавир вводят совместно перорально пациенту два раза в сутки.E78 is the method according to E77, where ritonavir is co-administered orally to the patient twice a day.
E79 является способом по E78, где примерно 300 мг соединения по любому из E61-E68 и примерно 100 мг ритонавира совместно вводят пациенту два раза в сутки.E79 is the method of E78 wherein about 300 mg of a compound of any of E61-E68 and about 100 mg of ritonavir are co-administered to the patient twice daily.
E80 является соединением по E63, которое характеризуется 19F пиком с химическим сдвигом -73,3±0,1 ч./млн. и 13C пики с химическими сдвигами 31,0±0,1 ч./млн., 27,9±0,1 ч./млн. и 178,9±0,2 ч./млн.E80 is an E63 compound that has a 19 F peak with a chemical shift of -73.3±0.1 ppm. and 13 C peaks with chemical shifts of 31.0±0.1 ppm, 27.9±0.1 ppm. and 178.9±0.2 ppm
E81 является соединением по E64, которое характеризуется одним или несколькими пиками, выбранным из группы, состоящей из 19F пика с химическим сдвигом -73,6±0,1 ч./млн. и 13C пиками при 26,9±0,1 ч./млн., 21,6±0,1 ч./млн. и 41,5±0,1 ч./млн.E81 is a compound according to E64, which is characterized by one or more peaks selected from the group consisting of a 19 F peak with a chemical shift of -73.6±0.1 ppm. and 13 C peaks at 26.9±0.1 ppm, 21.6±0.1 ppm. and 41.5±0.1 ppm
E82 является соединением N-(Метоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамидом, имеющим структуруE82 is N- (Methoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl] ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide having the structure
; ;
или его сольватом или гидратом.or its solvate or hydrate.
E83 является соединением по E82, которым является N-(Метоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид.E83 is the compound according to E82, which is N- (Methoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine -3-yl]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide.
E84 является фармацевтической композицией, содержащей терапевтически эффективное количество N-(Метоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид; или его сольват или гидрат, вместе с фармацевтически приемлемым носителем.E84 is a pharmaceutical composition containing a therapeutically effective amount of N- (Methoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2- oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide; or a solvate or hydrate thereof, together with a pharmaceutically acceptable carrier.
E85 является способом лечения коронавирусной инфекции у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения E82 или E83 пациенту, нуждающемся в ее лечении.E85 is a method of treating a coronavirus infection in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of an E82 or E83 compound to a patient in need of its treatment.
E86 является способом по E85, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E86 is the way according to E85, where the coronavirus infection is COVID-19.
E87 является способом по E85 или E86, где вводят от 10 мг до 1500 мг в сутки соединения E82 или E83.E87 is the method according to E85 or E86, where 10 mg to 1500 mg per day of compound E82 or E83 is administered.
E88 является способом по любому из E85-E87 где соединение вводят перорально.E88 is the method of any one of E85-E87 wherein the compound is administered orally.
E89 является способом по E88, где 200 мг соединения вводят дважды в сутки.E89 is the method according to E88, where 200 mg of the compound is administered twice a day.
E90 является способом таргетирования ингибирования SARS-CoV-2 соединением по любому из E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 и E80-E83 в качестве средства лечения показаний, вызванных вирусными инфекциями, родственными SARS-CoV-2.E90 is a method of targeting the inhibition of SARS-CoV-2 with a compound of any of E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 and E80-E83 as a treatment for indications caused by SARS-CoV-2 related viral infections.
E91 является способом идентификации клеточных или вирусных путей, вмешивающихся в функционирование членов, которые могут применяться для лечения показаний, вызванных инфекциями SARS-CoV-2 через введение соединения ингибитора протеазы SARS-CoV-2 по любому из E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 и E80-E83.E91 is a method for identifying cellular or viral pathways interfering with the function of members that can be used to treat indications caused by SARS-CoV-2 infections through the administration of a SARS-CoV-2 protease inhibitor compound according to any of E1-E30, E45-E46, E50 , E50a, E59-E68 and E80-E83.
E92 является способом применения соединения ингибитора протеазы SARS-CoV-2 по любому из E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 и E80-E83 в качестве инструмента для понимания механизма действия других ингибиторов SARS-CoV-2.E92 is a method of using a SARS-CoV-2 protease inhibitor compound of any of E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68, and E80-E83 as a tool to understand the mechanism of action of other SARS-CoV-2 inhibitors.
E93 является способом применения соединения ингибитора 3C-подобной протеазы SARS-CoV-2 по любому из E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 и E80-E83 для проведения экспериментов по определению профиля генов для отслеживания активации или подавления генов для целей идентификации ингибиторов для лечения показаний, вызванных инфекциями SARS-CoV-2, такими как COVID-19.E93 is a method of using a SARS-CoV-2 3C-like protease inhibitor compound of any of E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68, and E80-E83 to perform gene profiling experiments to monitor gene activation or suppression for the purposes of identifying inhibitors for the treatment of indications caused by SARS-CoV-2 infections such as COVID-19.
E94 является фармацевтической композицией для лечения COVID-19 у млекопитающих, содержащей количество соединения ингибитора 3C-подобной протеазы SARS-CoV-2 по любому из E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 и E80-E83, которое эффективно для лечения COVID-19, вместе с фармацевтически приемлемым носителем.E94 is a pharmaceutical composition for the treatment of COVID-19 in a mammal, comprising an amount of a SARS-CoV-2 3C-like protease inhibitor compound of any one of E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68, and E80-E83 that is effective for the treatment of COVID-19, together with a pharmaceutically acceptable carrier.
E95 является способом лечения MERS у пациента, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68 и E80-E83 пациенту, нуждающемуся в этом.E95 is a method of treating MERS in a patient, wherein the method comprises administering a therapeutically effective amount of a compound of any of E1-E30, E45-E46, E50, E50a, E59-E68, and E80-E83 to a patient in need thereof.
E96 является способом лечения MERS у пациента, где способ включает введение фармацевтической композиции по любому из E31-E35, E51, E51a, E75, E75a, E84 и E94 пациенту, нуждающемуся в этом.E96 is a method of treating MERS in a patient, wherein the method comprises administering a pharmaceutical composition of any of E31-E35, E51, E51a, E75, E75a, E84 and E94 to a patient in need thereof.
E97 является способом ингибирования или профилактики вирусной репликации MERS, включающим контакт 3CL протеазы SARS-CoV-2 коронавируса с терапевтически эффективным количеством соединения по любому из E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 и 80-83.E97 is a method for inhibiting or preventing viral replication of MERS, comprising contacting a SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease with a therapeutically effective amount of a compound according to any one of E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 and 80-83.
E98 является способом ингибирования или профилактики вирусной репликации MERS у пациента, включающим введение пациенту, нуждающемуся в ингибировании или профилактике вирусной репликации MERS, терапевтически эффективного количества соединения по любому из E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 и 80-83.E98 is a method for inhibiting or preventing MERS viral replication in a patient, comprising administering to a patient in need of inhibiting or preventing MERS viral replication a therapeutically effective amount of a compound according to any one of E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 and 80- 83.
E99 применение соединения по любому из E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 и 80-83 для лечения коронавирусной инфекции.E99 the use of a compound according to any of E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 and 80-83 for the treatment of a coronavirus infection.
E100 применение по E99, где коронавирусной инфекцией является COVID-19.E100 application of E99, where the coronavirus infection is COVID-19.
E101 применение соединения по любому из E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 и 80-83 при получении лекарственного средства.E101 the use of a compound according to any of E1-E30, 45-46, 50, 50a, 59-68 and 80-83 in the preparation of a medicament.
E102 является соединением по любому из вариантов осуществления E1-E30, или его фармацевтически приемлемой солью, для применения в качестве лекарственного средства.E102 is a compound according to any one of embodiments E1-E30, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for use as a drug.
E103 является соединением по любому из вариантов осуществления по E1-E30, или его фармацевтически приемлемой солью, для применения в способе лечения, где способ такой, как описан в любом из вариантов осуществления E36-E41.E103 is a compound of any of the embodiments of E1-E30, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for use in a method of treatment, wherein the method is as described in any of the embodiments of E36-E41.
Краткое описание чертежейBrief description of the drawings
Фигура 1: Порошковая рентгеновская дифрактограмма 13, сольвата метил трет- бутилового эфира, Твердая форма 2, из альтернативного синтеза из примера 13, сольват метил трет-бутилового эфира; получение твердой формы 2.Figure 1: Powder X-ray diffraction pattern of 13, methyl t-butyl ether solvate ,
Фигура 2: Порошковая рентгеновская дифрактограмма 13, сольвата метил трет- бутилового эфира, Твердая форма 2, из второго альтернативного синтеза из примера 13, сольват метил трет-бутилового эфира; получение твердой формы 2Figure 2: Powder X-ray diffraction pattern of 13, methyl t-butyl ether solvate ,
Фигура 3: Порошковая рентгеновская дифрактограмма примера 13, Твердая форма 1, из перекристаллизации из примера 13; получение твердой формы 1Figure 3: Powder X-ray diffraction pattern of Example 13,
Фигура 4: Монокристальное рентгеновское определение структуры примера 13, Твердая форма 1. ORTEP диаграмма изображена с параметрами замещения при 50% вероятности.Figure 4: Single crystal x-ray structure determination of Example 13,
Фигура 5: Наложение порошковой рентгенограммы, полученной для примера 13, Твердая форма 1, из перекристаллизации из примера 13; получение твердой формы 1 (Фигура 3) и расчетная порошковая рентгенограмма, полученная с применением программы Mercury, из данных разрешающей однокристальной рентгенограммы формы 1 (см. Монокристальное рентгеновское определение структуры примера 13, Твердая форма 1).Figure 5: Overlay of the X-ray powder pattern obtained for Example 13,
Фигура 6: Порошковая рентгеновская дифрактограмма примера 13, Твердая форма 4, из альтернативной перекристаллизации примера 13; получение твердой формы 4.Figure 6: Powder X-ray diffraction pattern of Example 13, Solid Form 4, from an alternative recrystallization of Example 13; obtaining a solid form 4.
Фигура 7: Монокристальное рентгеновское определение структуры примера 13, Твердая форма 4. ORTEP диаграмма, изображенная с параметрами замещения при 50% вероятности.Figure 7: Single crystal x-ray determination of the structure of example 13, Solid form 4. ORTEP diagram depicted with substitution parameters at 50% probability.
Фигура 8: Наложение порошковой рентгенограммы, полученной для примера 13, Твердая форма 4, из альтернативной перекристаллизации примера 13; получение твердой формы 4 (Фигура 6) и расчетная порошковая рентгенограмма, полученная с применением программы Mercury, из данных разрешающей однокристальной рентгенограммы формы 4 (см. Монокристальное рентгеновское определение структуры примера 13, Твердая форма 4).Figure 8: Overlay of the X-ray powder diffraction obtained for Example 13, Solid Form 4, from an alternative recrystallization of Example 13; obtaining a solid form 4 (Figure 6) and a calculated X-ray powder diffraction pattern obtained using the Mercury program from the resolving single-crystal X-ray pattern data of Form 4 (see Single-Crystal X-ray Determination of the Structure of Example 13, Solid Form 4).
Фигура 9: Порошковая рентгеновская дифрактограмма примера 13, Твердая форма 5, из примера 96.Figure 9: Powder X-ray diffraction pattern of Example 13, Solid Form 5, from Example 96.
Фигура 10: Порошковая рентгеновская дифрактограмма промежуточного соединения C16, соль HCl.Figure 10: Powder X-ray diffraction pattern of intermediate C16, HCl salt .
Фигура 11: Порошковая рентгеновская дифрактограмма промежуточного соединения C91.Figure 11: Powder X-ray diffraction pattern of intermediate C91 .
Фигура 12: Монокристальное рентгеновское определение структуры промежуточного соединения C91. ORTEP диаграмма, изображенная с параметрами замещения при 50% вероятности.Figure 12: Single crystal x-ray structure determination of intermediate C91 . ORTEP diagram depicted with substitution parameters at 50% probability.
Фигура 13: Порошковая рентгеновская дифрактограмма промежуточного соединения C92.Figure 13: Powder X-ray diffraction pattern of intermediate C92 .
Фигура 14: Порошковая рентгеновская дифрактограмма промежуточного соединения C42.Figure 14: Powder X-ray diffraction pattern of intermediate C42 .
Фигура 15: Монокристальное рентгеновское определение структуры промежуточного соединения C42. ORTEP диаграмма, изображенная с параметрами замещения при 50% вероятности.Figure 15: Single crystal x-ray structure determination of intermediate C42 . ORTEP diagram depicted with substitution parameters at 50% probability.
Подробное описание изобретенияDetailed description of the invention
Для целей настоящего изобретения, как описано и заявлено в настоящем документе, следующие термины определены следующим образом:For the purposes of the present invention, as described and claimed herein, the following terms are defined as follows:
Используемые в настоящем документе термины «содержащий» и «включающий» используют в их открытом, неограничивающем смысле. Используемый в настоящем документе термин «лечение», если не указано иное, означает обращение, облегчение, ингибирование прогрессирования или профилактику нарушения или состояния, к которому применяется такой термин, или одного или нескольких симптомов такого нарушения или состояния. В способах лечения COVID-19 следует понимать, что COVID-19 является заболеванием, вызываемым у пациентов инфицированием вирусом SARS-CoV-2. Под вирусом SARS-CoV-2 следует понимать первоначально обнаруженный штамм вируса, а также возникающие мутантные штаммы, такие как, но не ограниченные ими, штаммы, такие как B.1.1.7 (вариант из Великобритании), B.1.351 (вариант из Южной Африки), P.1 (вариант из Бразилии) и B.1.427/B.1.429 (варианты из Калифорнии). Используемый в настоящем документе термин «лечение», если не указано иное, относится к акту лечения, в том смысле, как «лечение» определено непосредственно выше.As used herein, the terms "comprising" and "including" are used in their open, non-limiting sense. As used herein, the term "treatment", unless otherwise indicated, means the treatment, alleviation, inhibition of progression, or prevention of the disorder or condition to which such term applies, or one or more of the symptoms of such disorder or condition. In methods of treating COVID-19, it should be understood that COVID-19 is a disease caused in patients by infection with the SARS-CoV-2 virus. The SARS-CoV-2 virus is to be understood as the originally discovered strain of the virus, as well as emerging mutant strains, such as, but not limited to, strains such as B.1.1.7 (variant from the UK), B.1.351 (variant from the South Africa), P.1 (variant from Brazil) and B.1.427/B.1.429 (variant from California). Used in this document, the term "treatment", unless otherwise indicated, refers to the act of treatment, in the sense that "treatment" is defined immediately above.
Термин «пациент» относится к теплокровным животным, таким как, например, морские свинки, мыши, крысы, песчанки, кошки, кролики, собаки, крупный рогатый скот, козы, овцы, лошади, обезьяны, шимпанзе и люди. Что касается лечения COVID-19, способы по изобретению особенно полезны для лечения человека.The term "patient" refers to warm-blooded animals such as, for example, guinea pigs, mice, rats, gerbils, cats, rabbits, dogs, cattle, goats, sheep, horses, monkeys, chimpanzees, and humans. With respect to the treatment of COVID-19, the methods of the invention are particularly useful in the treatment of humans.
Термин «фармацевтически приемлемое» означает, что вещество или композиция должны быть совместимы, химически и/или токсикологически, с другими ингредиентами, входящими в состав, и/или с млекопитающим, которое лечат ими.The term "pharmaceutically acceptable" means that the substance or composition must be compatible, chemically and/or toxicologically, with the other ingredients in the formulation and/or with the mammal being treated with them.
Термин «терапевтически эффективное количество» означает количество соединения по настоящему изобретению, которое (i) лечит или предотвращает конкретное заболевание, состояние или нарушение, (ii) ослабляет, облегчает или устраняет один или несколько симптомов конкретного заболевания, состояния или нарушения, или (iii) предотвращает или задерживает начало одного или нескольких симптомов конкретного заболевания, состояния или нарушения, описанных в настоящем документе.The term "therapeutically effective amount" means an amount of a compound of the present invention that (i) treats or prevents a particular disease, condition, or disorder, (ii) relieves, alleviates, or eliminates one or more symptoms of a particular disease, condition, or disorder, or (iii) prevents or delays the onset of one or more symptoms of a particular disease, condition, or disorder described herein.
Используемый в настоящем документе термин «алкил» относится к насыщенному углеводородному заместителю с линейной или разветвленной цепью (т.е. заместителю, полученному из углеводорода путем удаления водорода); в одном варианте осуществления, содержащем от одного до восьми атомов углерода, в другом, до шести атомов углерода, и еще в одном, до трех атомов углерода. Неограничивающие примеры таких заместителей включают метил, этил, пропил (включая н-пропил и изопропил), бутил (включая н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил), пентил, изоамил, гексил, гептил, октил и подобные. В другом варианте осуществления, содержащий от одного до трех атомов углерода и состоящий из метила, этила, н-пропила и изопропила.As used herein, the term "alkyl" refers to a straight or branched saturated hydrocarbon substituent (ie, a substituent derived from a hydrocarbon by removal of hydrogen); in one embodiment, containing from one to eight carbon atoms, in another, up to six carbon atoms, and in another, up to three carbon atoms. Non-limiting examples of such substituents include methyl, ethyl, propyl (including n- propyl and isopropyl), butyl (including n -butyl, isobutyl, sec -butyl and t -butyl), pentyl, isoamyl, hexyl, heptyl, octyl, and the like. In another embodiment, containing from one to three carbon atoms and consisting of methyl, ethyl, n -propyl and isopropyl.
Используемый в настоящем документе термин «алкинил» относится к насыщенному углеводородному заместителю с линейной или разветвленной цепью, который содержит тройную связь углерод-углерод (т.е. заместителю, полученному из углеводорода, содержащего тройную связь, путем удаления водорода); в одном варианте осуществления, содержащему от двух до шести атомов углерода. Неограничивающие примеры таких заместителей включают проп-2-ин-1-ил, бут-3-ин-1-ил, пент-4-ин-1-ил и гекс-5- ин-1-ил.As used herein, the term "alkynyl" refers to a straight or branched saturated hydrocarbon substituent that contains a carbon-carbon triple bond (ie, a substituent derived from a hydrocarbon containing a triple bond by removal of hydrogen); in one embodiment, containing from two to six carbon atoms. Non-limiting examples of such substituents include prop-2-yn-1-yl, but-3-yn-1-yl, pent-4-yn-1-yl, and hex-5-yn-1-yl.
Термин «алкокси» относится к линейному или разветвленному насыщенному гидрокарбильному заместителю, присоединенному к кислородному радикалу (т.е. заместителю, полученному из углеводородного спирта путем удаления водорода из ОН); в одном варианте осуществления, содержащему от одного до шести атомов углерода. Не ограничивающие примеры таких заместителей включают метокси, этокси, пропокси (в том числе н-пропокси и изопропокси), бутокси (в том числе н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси), пентокси, гексокси и подобные. В другом варианте осуществления, содержащему от одного до трех атомов углерода и состоящему из метокси, этокси, н-пропокси и изопропокси. Алкоксигруппа, которая присоединена к алкильной группе, называется алкоксиалкил. Примером алкоксиалкильной группы является метоксиметил.The term "alkoxy" refers to a linear or branched saturated hydrocarbyl substituent attached to an oxygen radical (ie, a substituent derived from a hydrocarbon alcohol by removing hydrogen from OH); in one embodiment, containing from one to six carbon atoms. Non-limiting examples of such substituents include methoxy, ethoxy, propoxy (including n- propoxy and isopropoxy), butoxy (including n -butoxy, isobutoxy, sec -butoxy and tert -butoxy), pentoxy, hexoxy, and the like. In another embodiment, containing from one to three carbon atoms and consisting of methoxy, ethoxy, n- propoxy and isopropoxy. An alkoxy group that is attached to an alkyl group is called alkoxyalkyl. An example of an alkoxyalkyl group is methoxymethyl.
Термин «алкинилокси» относится к линейному или разветвленному насыщенному гидрокарбильному заместителю, содержащему тройную связь углерод-углерод, присоединенную к кислородному радикалу (то есть заместителю, полученному из углеводородного спирта, содержащего тройную связь, путем удаления водорода из группы ОН); в одном варианте осуществления, содержащему от трех до шести атомов углерода. Неограничивающие примеры таких заместителей включают пропинилокси, бутинилокси и пентинилокси и подобные.The term "alkynyloxy" refers to a linear or branched saturated hydrocarbyl substituent containing a carbon-carbon triple bond attached to an oxygen radical (i.e., a substituent derived from a hydrocarbon alcohol containing a triple bond by removing hydrogen from the OH group); in one embodiment, containing from three to six carbon atoms. Non-limiting examples of such substituents include propynyloxy, butynyloxy and pentynyloxy and the like.
В некоторых случаях, количество атомов углерода в гидрокарбильном заместителе (например, алкиле, циклоалкиле и т. д.) обозначается префиксом «Cx-Cy- » или «Cx-y», где x является минимальным и y является максимальным количеством атомов углерода в заместителе. Так, например, «C1-C8алкил» или «C1-8алкил» относится к алкильному заместителю, содержащему от 1 до 8 атомов углерода, «C1-C6алкил» или «C1-6алкил» относится к алкильному заместителю, содержащему от 1 до 6 атомов углерода, «C1-C3алкил» или «C1-3алкил» относится к алкильному заместителю, содержащему от 1 до 3 атомов углерода. Иллюстрируя далее, C3-C6циклоалкил или C3-6-циклоалкил относится к насыщенной циклоалкильной группе, содержащей от 3 до 6 атомов углерода в кольце.In some cases, the number of carbon atoms in a hydrocarbyl substituent (for example, alkyl, cycloalkyl, etc.) is indicated by the prefix "C x -C y - " or "C xy ", where x is the minimum and y is the maximum number of carbon atoms in deputy. Thus, for example, "C 1 -C 8 alkyl" or "C 1-8 alkyl" refers to an alkyl substituent containing from 1 to 8 carbon atoms, "C 1 -C 6 alkyl" or "C 1-6 alkyl" refers to an alkyl substituent containing 1 to 6 carbon atoms, "C 1 -C 3 alkyl" or "C 1-3 alkyl" refers to an alkyl substituent containing 1 to 3 carbon atoms. Illustrating further, C 3 -C 6 cycloalkyl or C 3-6 -cycloalkyl refers to a saturated cycloalkyl group containing from 3 to 6 carbon atoms in the ring.
Термин «циклоалкил» относится к карбоциклическому заместителю, полученному удалением водорода из насыщенной карбоциклической молекулы, например, имеющей от трех до семи атомов углерода. Термин «циклоалкил» включает моноциклические насыщенные карбоциклы. Термин «C3-C7циклоалкил» означает радикал трех-семичленной кольцевой системы, которая включает группы циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Термин «C3-C6циклоалкил» означает радикал трех-шестичленной кольцевой системы, которая включает группы циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклоалкил. Циклоалкильные группы также могут быть бициклическими или спироциклическими карбоциклами. Например, термин «C3-C12циклоалкил» включает моноциклические карбоциклы и бициклические и спироциклические группы, такие как бициклопентил, бициклогексил, бициклогептил, бициклооктил, бициклононил, спиропентил, спирогексил, спирогептил, спирооктил и спирононил.The term "cycloalkyl" refers to a carbocyclic substituent obtained by removal of hydrogen from a saturated carbocyclic molecule, for example having three to seven carbon atoms. The term "cycloalkyl" includes monocyclic saturated carbocycles. The term "C 3 -C 7 cycloalkyl" means a radical of a three to seven membered ring system which includes cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and cycloheptyl groups. The term "C 3 -C 6 cycloalkyl" means a radical of a three to six membered ring system which includes cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cycloalkyl groups. Cycloalkyl groups can also be bicyclic or spirocyclic carbocycles. For example, the term "C 3 -C 12 cycloalkyl" includes monocyclic carbocycles and bicyclic and spirocyclic groups such as bicyclopentyl, bicyclohexyl, bicycloheptyl, bicyclooctyl, bicyclononyl, spiropentyl, spirohexyl, spiroheptyl, spirooctyl, and spirononyl.
Термин «C3-C6циклоалкокси» относится к трех-шестичленной циклоалкильной группе, присоединенной к кислородному радикалу. Примеры включают циклопропокси, циклобутокси, циклопентокси и циклогексокси.The term "C 3 -C 6 cycloalkoxy" refers to a three to six membered cycloalkyl group attached to an oxygen radical. Examples include cyclopropoxy, cyclobutoxy, cyclopentoxy and cyclohexoxy.
Термин «арил» относится к карбоциклической ароматической системе. Термин «C6-C10арил» относится к карбоциклическим ароматическим системам с 3-10 атомами и включает фенил и нафтил.The term "aryl" refers to a carbocyclic aromatic system. The term "C 6 -C 10 aryl" refers to carbocyclic aromatic systems with 3-10 atoms and includes phenyl and naphthyl.
В некоторых случаях количество атомов в циклическом заместителе, содержащем один или несколько гетероатомов (например, гетероариле или гетероциклоалкиле), обозначается префиксом «x-y-членный», где x является минимальным, и y является максимальным количеством атомов, образующих циклическую группу заместителя. Так, например, «4-6-членный гетероциклоалкил» относится к гетероциклоалкилу, содержащему от 4 до 6 атомов, включая от одного до трех гетероатомов, в циклической части гетероциклоалкила. Аналогичным образом фраза «5-6-членный гетероарил» относится к гетероарилу, содержащему от 5 до 6 атомов, а «5-10-членный гетероарил» относится к гетероарилу, содержащему от 5 до 10 атомов, каждый из которых включает один или несколько гетероатомов, в циклической группе гетероарила. Кроме того, фразы «5-членный гетероарил» и «6-членный гетероарил» относятся к пятичленной гетероароматической кольцевой системе и шестичленной гетероароматической кольцевой системе соответственно. Гетероатомы, присутствующие в этих кольцевых системах, выбраны из N, O и S.In some cases, the number of atoms in a cyclic substituent containing one or more heteroatoms (for example, heteroaryl or heterocycloalkyl) is indicated by the prefix "x-y-membered", where x is the minimum and y is the maximum number of atoms forming the cyclic group of the substituent. Thus, for example, "4-6 membered heterocycloalkyl" refers to a heterocycloalkyl containing 4 to 6 atoms, including one to three heteroatoms, in the cyclic portion of the heterocycloalkyl. Similarly, the phrase "5-6 membered heteroaryl" refers to a heteroaryl containing 5 to 6 atoms, and "5-10 membered heteroaryl" refers to a heteroaryl containing 5 to 10 atoms, each of which includes one or more heteroatoms. , in the cyclic heteroaryl group. In addition, the phrases "5-membered heteroaryl" and "6-membered heteroaryl" refer to a five-membered heteroaromatic ring system and a six-membered heteroaromatic ring system, respectively. The heteroatoms present in these ring systems are selected from N, O and S.
Термин «гидрокси» или «гидроксил» относится к -ОН. При использовании в сочетании с другим термином, префикс «гидрокси» указывает, что заместитель, к которому присоединен префикс, замещен одним или несколькими гидрокси заместителями. Соединения, несущие углерод, у которого один или несколько гидрокси заместителей, включают, например, спирты, енолы и фенол. Термины циано и нитрил относятся к группе -CN. Термин «оксо» означает кислород, который присоединен к атому углерода двойной связью (то есть, когда R4 является оксо, тогда R4 вместе с углеродом, к которому он присоединен, являются группой C=O).The term "hydroxy" or "hydroxyl" refers to -OH. When used in conjunction with another term, the prefix "hydroxy" indicates that the substituent to which the prefix is attached has been substituted with one or more hydroxy substituents. Compounds bearing a carbon having one or more hydroxy substituents include, for example, alcohols, enols, and phenol. The terms cyano and nitrile refer to the -CN group. The term "oxo" means an oxygen that is attached to a carbon atom by a double bond (ie, when R 4 is oxo, then R 4 together with the carbon to which it is attached is a C=O group).
Термин «гало» или «галоген» относится к фтору (который может быть изображен как -F), хлору (который может быть изображен как -Cl), брому (который может быть изображен как -Br), или йоду (который может быть изображен как -I).The term "halo" or "halogen" refers to fluorine (which can be shown as -F), chlorine (which can be shown as -Cl), bromine (which can be shown as -Br), or iodine (which can be shown as like -I).
Термин «гетероциклоалкил» относится к заместителю, полученному удалением водорода из насыщенной или частично насыщенной кольцевой структуры, содержащей в общей сложности указанное число атомов, например от 4 до 6 атомов в кольце или от 4 до 12 атомов, где, по меньшей мере, один из атомов кольца является гетероатомом (т.е. кислородом, азотом или серей), при этом остальные атомы кольца выбирают независимо друг от друга, из группы, состоящей из углерода, кислорода, азота и серы. Сера может быть окисленной [т.е. S(O) или S(O)2] или нет. В группе, которая имеет гетероциклоалкильный заместитель, кольцевой атом гетероциклоалкильного заместителя, который связан с группой, может быть гетероатомом азота или может быть атомом углерода кольца. Аналогично, если гетероциклоалкильный заместитель, в свою очередь, замещен группой или заместителем, группа или заместитель могут быть связаны с гетероатомом азота или могут быть связаны с атомом углерода кольца. Следует понимать, что гетероциклическая группа может быть моноциклической, бициклической, полициклической или спироциклической.The term "heterocycloalkyl" refers to a substituent obtained by removal of hydrogen from a saturated or partially saturated ring structure containing a total of the specified number of atoms, for example 4 to 6 ring atoms or 4 to 12 atoms, where at least one of ring atoms is a heteroatom (ie, oxygen, nitrogen, or sulfur), with the remaining ring atoms being independently selected from the group consisting of carbon, oxygen, nitrogen, and sulfur. Sulfur may be oxidized [i.e. S(O) or S(O) 2 ] or not. In a group that has a heterocycloalkyl substituent, the ring atom of the heterocycloalkyl substituent that is bonded to the group may be a nitrogen heteroatom or may be a ring carbon atom. Similarly, if the heterocycloalkyl substituent is in turn substituted with a group or substituent, the group or substituent may be bonded to a nitrogen heteroatom or may be bonded to a carbon atom of the ring. It should be understood that a heterocyclic group may be monocyclic, bicyclic, polycyclic or spirocyclic.
Термин «гетероарил» относится к ароматической кольцевой структуре, содержащей указанное количество кольцевых атомов, в которой, по меньшей мере, один из кольцевых атомов является гетероатомом (т.е. кислородом, азотом или серой), а остальные кольцевые атомы независимо выбраны из группы, состоящей из углерода, кислорода, азота и серы. Примеры гетероарильных заместителей включают 6-членные гетероарильные заместители, такие как пиридил, пиразил, пиримидинил и пиридазинил; и 5-членные гетероарильные заместители, такие как триазолил, имидазолил, фуранил, тиофенил, пиразолил, пирролил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5-, или 1,3,4-оксадиазолил и изотиазолил. Гетероарильная группа также может быть бициклической гетероароматической группой, такой как индолил, бензофуранил, бензотиенил, бензимидазолил, бензотиазолил, бензоксазолил, бензоизоксазолил, оксазолопиридинил, имидазопиридинил, имидазопиримидинил и подобными. В группе, которая имеет гетероарильный заместитель, кольцевой атом гетероарильного заместителя, который связан с группой, может быть одним из гетероатомов или может быть атомом углерода кольца. Точно так же, если гетероарильный заместитель, в свою очередь, замещен группой или заместителем, группа или заместитель могут быть связаны с одним из гетероатомов, или они могут быть связаны с атомом углерода кольца. Термин «гетероарил» также включает N-оксиды пиридила и группы, содержащие N-оксидное кольцо пиридина. Кроме того, гетероарильная группа может содержать оксогруппу, такую как группа, присутствующая в пиридоновой группе. Дополнительные примеры включают фурил, тиенил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, пиридин-2(1H)-онтл, пиридазин-2(1H)-онил, пиримидин-2(1H)-онил, пиразин-2(1H)-онил, имидазо[1,2-a]пиридинил и пиразоло[1,5-a]пиридинил. Гетероарил может быть дополнительно замещен, как определено в настоящем описании.The term "heteroaryl" refers to an aromatic ring structure containing the specified number of ring atoms, in which at least one of the ring atoms is a heteroatom (i.e. oxygen, nitrogen or sulfur) and the remaining ring atoms are independently selected from the group, composed of carbon, oxygen, nitrogen and sulfur. Examples of heteroaryl substituents include 6-membered heteroaryl substituents such as pyridyl, pyrazyl, pyrimidinyl and pyridazinyl; and 5-membered heteroaryl substituents such as triazolyl, imidazolyl, furanyl, thiophenyl, pyrazolyl, pyrrolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5-, or 1 ,3,4-oxadiazolyl and isothiazolyl. The heteroaryl group may also be a bicyclic heteroaromatic group such as indolyl, benzofuranyl, benzothienyl, benzimidazolyl, benzothiazolyl, benzoxazolyl, benzisoxazolyl, oxazolopyridinyl, imidazopyridinyl, imidazopyrimidinyl and the like. In a group that has a heteroaryl substituent, the ring atom of the heteroaryl substituent that is bonded to the group may be one of the heteroatoms or may be a carbon atom of the ring. Similarly, if the heteroaryl substituent is in turn substituted with a group or substituent, the group or substituent may be bonded to one of the heteroatoms, or they may be bonded to a carbon atom of the ring. The term "heteroaryl" also includes pyridyl N -oxides and groups containing a pyridine N -oxide ring. In addition, the heteroaryl group may contain an oxo group, such as the group present in the pyridone group. Additional examples include furyl, thienyl, oxazolyl, thiazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl, isoxazolyl, isothiazolyl, oxadiazolyl, thiadiazolyl, pyridinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, pyridine-2( 1H )-ont, pyridazin-2(1 H )-onyl, pyrimidin-2(1 H )-onyl, pyrazin-2(1 H )-onyl, imidazo[1,2- a ]pyridinyl and pyrazolo[1,5- a ]pyridinyl. Heteroaryl may be further substituted as defined herein.
Примеры гетероарилов с одним кольцом и гетероциклоалкилов включают фуранил, дигидрофуранил, тетрагидрофуранил, тиофенил, дигидротиофенил, тетрагидротиофенил, пирролил, изопирролил, пирролинил, пирролидинил, имидазолил, изоимидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиразолил, пиразолинил, пиразолидинил, триазолил, тетразолил, дитиолил, оксатиолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, тиазолинил, изотиазолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, тиаоксадиазолил, оксатиазолил, оксадиазолил (включая оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил), пиранил (включая 1,2-пиранил или 1,4-пиранил), дигидропиранил, пиридинил, пиперидинил, диазинил (включая пиридазинил, пиримидинил, пиперазинил, триазинил (включая втор-триазинил, as-триазинил и v-триазинил), оксазинил (в том числе 2H-1,2-оксазинил, 6H-1,3-оксазинил или 2H-1,4-оксазинил), изоксазинил (в том числе о-изоксазинил или п-изоксазинил), оксазолидинил, изоксазолидинил, оксатиазинил (в том числе 1,2,5-оксатиазинил или 1,2,6-оксатиазинил), оксадиазинил (в том числе, 2H-1,2,4-оксадиазинил или 2H-1,2,5-оксадиазинил), и морфолинил.Examples of single ring heteroaryls and heterocycloalkyls include furanyl, dihydrofuranyl, tetrahydrofuranyl, thiophenyl, dihydrothiophenyl, tetrahydrothiophenyl, pyrrolyl, isopyrrolyl, pyrrolinyl, pyrrolidinyl, imidazolyl, isoimidazolyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, pyrazolyl, pyrazolinyl, pyrazolidinyl, triazolyl, tetrazolyl, oxathiolyl oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, thiazolinyl, isothiazolinyl, thiazolidinyl, isothiazolidinyl, thiaoxadiazolyl, oxathiazolyl, oxadiazolyl (including oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl), pyranyl (including 1,2-pyranyl or 1,4-pyranyl), dihydropyranyl, pyridinyl, piperidinyl, diazinyl (including pyridazinyl, pyrimidinyl, piperazinyl, triazinyl (including sec-triazinyl, as-triazinyl and v-triazinyl), oxazinyl (in including 2H-1,2- oxazinyl , 6H-1,3- oxazinyl or 2H-1,4- oxazinyl ), isoxazinyl (including o- isoxazinyl or p -isoxazinyl), oxazolidinyl, isoxazolidinyl, oxathiazinyl ( including 1,2,5 -oxathiazinyl or 1,2,6- oxathiazinyl ), oxadiazinyl (including 2H-1,2,4-oxadiazinyl or 2H-1,2,5-oxadiazinyl), and morpholinyl.
Термин «гетероарил» может также включать, если он определен как таковой, кольцевые системы, имеющие два кольца, где такие кольца могут быть конденсированы, и где одно кольцо является ароматическим, а другое кольцо не полностью является частью конъюгированной ароматической системы (т. е. гетероароматическое кольцо может быть конденсировано с циклоалкильным или гетероциклоалкильным кольцом). Не ограничивающие примеры таких кольцевых систем включают 5,6,7,8-тетрагидроизохинолинил, 5,6,7,8-тетрагидрохинолинил, 6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридинил, 6,7-дигидро-5H-циклопента[c]пиридинил, 1,4,5,6-тетрагидроциклопента[c]пиразолил, 2,4,5,6-тетрагидроциклопента[c]пиразолил, 5,6-дигидро-4H-пирроло[1,2-b]пиразолил, 6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазолил, 5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридинил, 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиридинил, 4,5,6,7-тетрагидро-1H-индазолил и 4,5,6,7-тетрагидро-2H-индазолил. Следует понимать, что если карбоциклическая или гетероциклическая группа может быть связана или иным образом присоединена к обозначенному субстрату через различные кольцевые атомы без указания конкретной точки присоединения, тогда подразумеваются все возможные точки, будь то через атом углерода или, например, трехвалентный атом азота. Например, термин «пиридил» означает 2-, 3- или 4-пиридил, термин «тиенил» означает 2- или 3-тиенил и так далее.The term "heteroaryl" may also include, if defined as such, ring systems having two rings, where such rings may be fused, and where one ring is aromatic and the other ring is not wholly part of a conjugated aromatic system (i.e. a heteroaromatic ring may be fused to a cycloalkyl or heterocycloalkyl ring). Non-limiting examples of such ring systems include 5,6,7,8-tetrahydroisoquinolinyl, 5,6,7,8-tetrahydroquinolinyl, 6,7-dihydro- 5H -cyclopenta[ b ]pyridinyl, 6,7-dihydro- 5H -cyclopenta[ c ]pyridinyl, 1,4,5,6-tetrahydrocyclopenta[ c ]pyrazolyl, 2,4,5,6-tetrahydrocyclopenta[ c ]pyrazolyl, 5,6-dihydro- 4H -pyrrolo[1,2- b ]pyrazolyl, 6,7-dihydro- 5H -pyrrolo[1,2- b ][1,2,4]triazolyl, 5,6,7,8-tetrahydro-[1,2,4]triazolo[1 ,5- a ]pyridinyl, 4,5,6,7-tetrahydropyrazolo[1,5- a ]pyridinyl, 4,5,6,7-tetrahydro-1 H -indazolyl and 4,5,6,7-tetrahydro- 2 H -indazolyl. It should be understood that if a carbocyclic or heterocyclic group can be bonded or otherwise attached to the designated substrate through various ring atoms without specifying a specific point of attachment, then all possible points are meant, whether through a carbon atom or, for example, a trivalent nitrogen atom. For example, the term "pyridyl" means 2-, 3-, or 4-pyridyl, the term "thienyl" means 2- or 3-thienyl, and so on.
Если заместители описаны как «независимые», имеющие более одной переменной, каждый заместитель выбирают независимо от других из списка доступных переменных. Следовательно, каждый заместитель может быть идентичным или отличаться от другого заместителя.If substituents are described as "independent" having more than one variable, each substituent is selected independently from the others from the list of available variables. Therefore, each substituent may be identical to or different from another substituent.
Если заместители описаны как «независимо выбранные» из группы, каждый заместитель выбирают независимо от других. Следовательно, каждый заместитель может быть идентичным или отличаться от другого заместителя.Where substituents are described as "independently selected" from a group, each substituent is selected independently of the others. Therefore, each substituent may be identical to or different from another substituent.
Используемые в настоящем документе термины «Формула I», «Формула I ' » или «Формула I''» могут в дальнейшем обозначаться как «соединение по изобретению», «настоящее изобретение» и «соединение формулы I, I' или I''». Такие термины также определены как включающие все формы формулы I, I' и I'', включая их гидраты, сольваты, изомеры, кристаллические и не кристаллические формы, изоморфы, полиморфы и их метаболиты. Например, соединения по изобретению или их фармацевтически приемлемые соли могут существовать в не сольватированных и сольватированных формах. Когда растворитель или вода плотно связаны, комплекс будет иметь четко определенную стехиометрию, не зависящую от влажности. Однако, когда растворитель или вода связаны слабо, как в канальных сольватах и гигроскопичных соединениях, содержание воды/растворителя будет зависеть от влажности и условий сушки. В таких случаях, не стехиометрия будет нормой.As used herein, the terms "Formula I ", " Formula I ' " or " Formula I''" may hereinafter be referred to as "the compound of the invention", "the present invention" and "the compound of formula I, I' or I'' " . Such terms are also defined to include all forms of formula I , I' and I'', including their hydrates, solvates, isomers, crystalline and non-crystalline forms, isomorphs, polymorphs and their metabolites. For example, the compounds of the invention, or pharmaceutically acceptable salts thereof, may exist in unsolvated and solvated forms. When the solvent or water is tightly bound, the complex will have a well-defined stoichiometry independent of humidity. However, when the solvent or water is weakly bound, as in channel solvates and hygroscopic compounds, the water/solvent content will depend on humidity and drying conditions. In such cases, non-stoichiometry will be the norm.
Соединения по изобретению могут существовать в виде клатратов или других комплексов. В объем изобретения входят комплексы, такие как клатраты, комплексы включения лекарственное средство-хозяин, где лекарственное средство и хозяин присутствуют в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Также включены комплексы по изобретению, содержащие два или несколько органических и/или неорганических компонента, которые могут быть в стехиометрических или не стехиометрических количествах. Полученные комплексы могут быть ионизированными, частично ионизированными или не ионизированными. Обзор таких комплексов представлен в J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975).The compounds of the invention may exist as clathrates or other complexes. Included within the scope of the invention are complexes such as clathrates, drug-host inclusion complexes, wherein the drug and host are present in stoichiometric or non-stoichiometric amounts. Also included are complexes of the invention containing two or more organic and/or inorganic components, which may be in stoichiometric or non-stoichiometric amounts. The resulting complexes may be ionized, partially ionized, or non-ionized. An overview of such complexes is presented in J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975).
Соединения по изобретению имеют асимметричные атомы углерода. Соединения углерод-углерод по изобретению могут быть изображены в настоящем документе с использованием сплошной линии ( ), сплошного клина ( ) или пунктирного клина ( ). Использование сплошной линии для изображения связей с асимметричными атомами углерода предназначено для обозначения того, что включены все возможные стереоизомеры (например, определенные энантиомеры, рацемические смеси и т.д.) на этом атоме углерода. Использование сплошного или пунктирного клина для изображения связей с асимметричными атомами углерода означает, что предполагается включение только показанного стереоизомера. Возможно, что соединения формулы I, I' и I'' могут содержать более одного асимметричного атома углерода. В этих соединениях, использование сплошной линии для изображения связей с асимметричными атомами углерода предназначено для обозначения того, что все возможные стереоизомеры должны быть включены. Например, если не указано иное, предполагается, что соединения формулы I, I' и I'' могут существовать в виде энантиомеров и диастереомеров или в виде рацематов и их смесей. Использование сплошной линии для изображения связей с одним или несколькими асимметричными атомами углерода в соединении формулы I, I' и I'' и использование сплошного или пунктирного клина для изображения связей с другими асимметричными атомами углерода в том же соединении означает, что присутствует смесь диастереомеров.The compounds of the invention have asymmetric carbon atoms. The carbon-carbon compounds of the invention may be depicted herein using a solid line ( ), solid wedge ( ) or dotted wedge ( ). The use of a solid line to depict bonds to asymmetric carbons is intended to indicate that all possible stereoisomers (eg, certain enantiomers, racemic mixtures, etc.) on that carbon are included. The use of a solid or dotted wedge to depict bonds to asymmetric carbons means that only the stereoisomer shown is intended to be included. It is possible that the compounds of formula I , I' and I'' may contain more than one asymmetric carbon atom. In these compounds, the use of a solid line to depict bonds to asymmetric carbons is intended to indicate that all possible stereoisomers are to be included. For example, unless otherwise indicated, it is contemplated that the compounds of formula I , I' and I'' may exist as enantiomers and diastereomers or as racemates and mixtures thereof. The use of a solid line to depict bonds to one or more asymmetric carbons in a compound of formula I , I' and I'' and the use of a solid or dotted wedge to represent bonds to other asymmetric carbons in the same compound means that a mixture of diastereomers is present.
Стереоизомеры формулы I, I' и I'' включают цис- и транс-изомеры, оптические изомеры, такие как энантиомеры R и S, диастереомеры, геометрические изомеры, вращательные изомеры, конформационные изомеры и таутомеры соединений по настоящему изобретению, включая соединения, проявляющие более одного типа изомерии; и их смеси (такие как рацематы и диастереомерные пары). Также включены кислотно-аддитивные или основно-аддитивные соли, где противоион является оптически активным, например, D-лактат или L-лизин, или рацемическим, например, DL-тартрат или DL-аргинин.Stereoisomers of formula I , I' and I'' include cis and trans isomers, optical isomers such as R and S enantiomers, diastereomers, geometric isomers, rotational isomers, conformational isomers and tautomers of the compounds of the present invention, including compounds exhibiting more one type of isomerism; and mixtures thereof (such as racemates and diastereomeric pairs). Also included are acid addition or base addition salts where the counterion is optically active, eg D-lactate or L-lysine, or racemic, eg DL-tartrate or DL-arginine.
При кристаллизации любого рацемата возможны кристаллы двух разных типов. Первым типом является рацемическое соединение (истинный рацемат), упомянутое выше, где образуется одна гомогенная форма кристалла, содержащая оба энантиомера в эквимолярных количествах. Вторым типом является рацемическая смесь или конгломерат, где две формы кристаллов образуются в эквимолярных количествах, каждая из которых содержит единственный энантиомер.During the crystallization of any racemate, two different types of crystals are possible. The first type is the racemic compound (true racemate) mentioned above, where a single homogeneous crystal form is formed containing both enantiomers in equimolar amounts. The second type is a racemic mixture or conglomerate, where the two crystal forms form in equimolar amounts, each containing a single enantiomer.
Соединения по настоящему изобретению, такие как соединения формулы I, I' и I'', могут проявлять явление таутомерии; такие таутомеры также рассматриваются как соединения по изобретению. Все такие таутомерные формы и их смеси включены в объем соединений формулы I, I' и I''. Таутомеры существуют в виде смесей таутомеров в растворе. В твердой форме, обычно преобладает один таутомер. Даже несмотря на то, что может быть описан один таутомер, настоящее изобретение включает все таутомеры соединений формулы I, I' и I'' и их соли.Compounds of the present invention, such as compounds of formula I , I' and I'' , may exhibit the phenomenon of tautomerism; such tautomers are also considered to be compounds of the invention. All such tautomeric forms and mixtures thereof are included within the scope of the compounds of formula I , I' and I'' . Tautomers exist as mixtures of tautomers in solution. In solid form, one tautomer usually predominates. Even though a single tautomer may be described, the present invention includes all tautomers of the compounds of formula I , I' and I'' and their salts.
Используемая в настоящем документе фраза «фармацевтически приемлемые соли», если не указано иное, включает соли кислотных или основных групп, которые могут присутствовать в соединениях, описанных в настоящем документе. Соединения, используемые в способах по настоящему изобретению, которые являются основными по природе, способны образовывать широкий спектр солей с различными неорганическими и органическими кислотами. Кислотами, которые можно использовать для получения фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей таких основных соединений, являются те, которые образуют нетоксичные кислотно-аддитивные соли, то есть соли, содержащие фармакологически приемлемые анионы, такие как ацетат, бензолсульфонат, бензоат, бикарбонат, бисульфат, битартрат, борат, бромид, эдетат кальция, камзилат, карбонат, хлорид, клавуланат, цитрат, дигидрохлорид, эдетат, эдислат, эстолат, эзилат, этилсукцинат, фумарат, глюцепат, глюконат, глутамат, гексилрезорцинат, гидрабамин, гидробромид, гидрохлорид, йодид, изетионат, лактат, лактобионат, лаурат, малат, малеат, миндалят, мезилат, метилсульфат, мукат, напсилат, нитрат, олеат, оксалат, памоат (эмбонат), пальмитат, пантотенат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, салицилат, стеарат, субацетат, сукцинат, таннат, тартрат, теоклат, тозилат, триэтиодод и валерат.As used herein, the phrase "pharmaceutically acceptable salts", unless otherwise indicated, includes salts of acidic or basic groups that may be present in the compounds described herein. The compounds used in the methods of the present invention, which are basic in nature, are capable of forming a wide range of salts with various inorganic and organic acids. Acids that can be used to prepare pharmaceutically acceptable acid addition salts of such basic compounds are those that form non-toxic acid addition salts, i.e. salts containing pharmacologically acceptable anions such as acetate, benzenesulfonate, benzoate, bicarbonate, bisulfate, bitartrate , borate, bromide, calcium edetate, camsylate, carbonate, chloride, clavulanate, citrate, dihydrochloride, edetate, edislate, estolate, esylate, ethyl succinate, fumarate, glucemate, gluconate, glutamate, hexylresorcinate, hydrabamine, hydrobromide, hydrochloride, iodide, isethionate, lactate, lactobionate, laurate, malate, maleate, almond, mesylate, methyl sulfate, mucate, napsilate, nitrate, oleate, oxalate, pamoate (embonate), palmitate, pantothenate, phosphate/diphosphate, polygalacturonate, salicylate, stearate, subacetate, succinate, tannate , tartrate, theoclate, tosylate, triethiododine and valerate.
Что касается соединений изобретения, используемых в способах изобретения, если соединения также существуют в таутомерных формах, то настоящее изобретение относится к этим таутомерам и применению всех таких таутомеров и их смесей.With regard to the compounds of the invention used in the methods of the invention, if the compounds also exist in tautomeric forms, then the present invention relates to these tautomers and the use of all such tautomers and mixtures thereof.
Настоящее изобретение также включает соединения и способы лечения коронавирусных инфекций, таких как COVID-19, и способы ингибирования SARS-CoV-2 с помощью изотопно меченых соединений, которые идентичны перечисленным в настоящем документе, но где один или несколько атомов являются заменены атомами, имеющими атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по настоящему изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F и 36Cl соответственно. Соединения по настоящему изобретению, их пролекарства и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений или указанных пролекарств, которые содержат указанные выше изотопы и/или изотопы других атомов, входят в объем настоящего изобретения. Некоторые меченые изотопами соединения по настоящему изобретению, например те, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как 3H и 14C, могут быть использованы в анализах распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Изотопы тритий, т.е. 3H, и углерод-14, т.е. 14C, особенно предпочтительны из-за простоты их получения и обнаружения. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т.е. 2H, может дать определенные терапевтические преимущества, обусловленные большей метаболической стабильностью, например, увеличенный период полувыведения in vivo или уменьшенные требования к дозировке, и, следовательно, может быть предпочтительным в некоторых обстоятельствах. Меченые изотопами соединения, используемые в способах по настоящему изобретению, и их пролекарства, как правило, могут быть получены путем проведения процедур получения соединений, описанных в данной области техники, путем замены легко доступным изотопно-меченным реагентом не изотопно-меченного реагента.The present invention also includes compounds and methods for treating coronavirus infections such as COVID-19 and methods for inhibiting SARS-CoV-2 using isotopically labeled compounds that are identical to those listed herein, but where one or more atoms are replaced by atoms having an atomic a mass or mass number other than the atomic mass or mass number normally found in nature. Examples of isotopes that can be included in the compounds of the present invention include isotopes of hydrogen, carbon, nitrogen, oxygen, phosphorus, fluorine and chlorine, such as 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 18 O, 17 O, 31 P, 32 P, 35 S, 18 F, and 36 Cl, respectively. The compounds of the present invention, their prodrugs and pharmaceutically acceptable salts of said compounds or said prodrugs which contain the above isotopes and/or isotopes of other atoms are within the scope of the present invention. Certain isotopically labeled compounds of the present invention, for example those incorporating radioactive isotopes such as 3 H and 14 C, can be used in drug and/or substrate tissue distribution assays. Isotopes of tritium, i.e. 3 H, and carbon-14, i.e. 14 C are particularly preferred due to their ease of preparation and detection. In addition, substitution by heavier isotopes such as deuterium, i.e. 2 H may confer certain therapeutic benefits due to greater metabolic stability, such as increased in vivo half-life or reduced dosage requirements, and therefore may be preferred in some circumstances. The isotopically labeled compounds used in the methods of the present invention and their prodrugs can generally be prepared by following the compounding procedures described in the art by replacing a readily available isotopically labeled reagent with a non-isotopically labeled reagent.
Это изобретение также включает способы с использованием фармацевтических композиций и способы лечения коронавирусных инфекций, таких как инфекции COVID-19, путем введения пролекарств соединений по изобретению. Соединения, содержащие свободные амино, амидо или гидроксигруппы, могут быть превращены в пролекарства. Пролекарства включают соединения, в которых аминокислотный остаток или полипептидная цепь из двух или нескольких (например, двух, трех или четырех) аминокислотных остатков ковалентно связана через сложноэфирную связь с гидрокси соединений, используемых в способах по настоящему изобретению. Аминокислотные остатки включают, но не ограничиваются ими, 20 встречающихся в природе аминокислот, обычно обозначаемых трехбуквенными символами, и также включают 4-гидроксипролин, гидроксилизин, десмозин, изодесмозин, 3-метилгистидин, норвалин, бета-аланин, гамма-аминомасляную кислоту, цитруллин, гомоцистеин, гомосерин, орнитин и метионинсульфон. Также включены дополнительные типы пролекарств. Например, свободные гидроксигруппы могут быть дериватизированы с использованием групп, включающих, но не ограниченных ими, гемисукцинаты, сложные фосфатные эфиры, диметиламиноацетаты и фосфорилоксиметилоксикарбонилы, как указано в Advanced Drug Delivery Reviews, 1996, 19, 115. Карбаматные пролекарства гидрокси и аминогрупп также включены, также как и карбонатные пролекарства, сульфонатные эфиры и сульфатные эфиры гидроксигрупп. Дериватизация гидроксигрупп в виде (ацилокси)метиловых и (ацилокси)этиловых эфиров, где ацильная группа может быть алкиловым эфиром, необязательно замещенным группами, включая, но не ограничиваясь ими, функциональные группы простого эфира, амина и карбоновой кислоты, или где ацильной группой является сложный эфир аминокислоты, как описано выше, также охватывается. Пролекарства этого типа описаны в J. Med. Chem., 1996, 29, 10. Свободные амины также могут быть образованы в виде амидов, сульфонамидов или фосфонамидов. Все эти пролекарства могут включать группы, включая, но не ограничиваясь ими, функциональные группы простого эфира, амина и карбоновой кислоты.This invention also includes methods using pharmaceutical compositions and methods for treating coronavirus infections, such as COVID-19 infections, by administering prodrugs of the compounds of the invention. Compounds containing free amino, amido or hydroxy groups can be converted into prodrugs. Prodrugs include compounds in which an amino acid residue or polypeptide chain of two or more (eg, two, three or four) amino acid residues is covalently linked through an ester bond to the hydroxy compounds used in the methods of the present invention. Amino acid residues include, but are not limited to, the 20 naturally occurring amino acids, usually denoted by three letter symbols, and also include 4-hydroxyproline, hydroxylysine, desmosine, isodesmosine, 3-methylhistidine, norvaline, beta-alanine, gamma-aminobutyric acid, citrulline, homocysteine, homoserine, ornithine and methionine sulfone. Additional types of prodrugs are also included. For example, free hydroxy groups can be derivatized using groups including, but not limited to, hemisuccinates, phosphate esters, dimethylaminoacetates, and phosphoryloxymethyloxycarbonyls, as outlined in Advanced Drug Delivery Reviews , 1996, 19, 115. Carbamate prodrugs of hydroxy and amino groups are also included, as well as carbonate prodrugs, sulfonate esters and sulfate esters of hydroxy groups. Derivatization of hydroxy groups as (acyloxy)methyl and (acyloxy)ethyl esters, where the acyl group may be an alkyl ether optionally substituted with groups including, but not limited to, ether, amine, and carboxylic acid functional groups, or where the acyl group is a complex an amino acid ester as described above is also covered. Prodrugs of this type are described in J. Med. Chem ., 1996, 29, 10. Free amines can also be formed as amides, sulfonamides or phosphonamides. All of these prodrugs may include groups including, but not limited to, ether, amine, and carboxylic acid functional groups.
Соединения по настоящему изобретению можно использовать в способах по настоящему изобретению в сочетании с другими лекарственными средствами. Например, введение пациенту, инфицированному коронавирусом SARS-CoV-2 (т.е. пациенту с COVID-19), ингибитора протеазы 3CL коронавируса SARS-CoV-2 по изобретению и интерферона, такого как интерферон альфа или пегилированного интерферона, такого как PEG-Intron или Pegasus, может обеспечить большую клиническую пользу, чем дозирование либо только интерферона, либо пегилированного интерферона, либо только ингибитора коронавируса SARS-CoV-2. Другие дополнительные агенты, которые можно использовать в способах по настоящему изобретению, включают дексаметазон, азитромицин и ремдесивир. Примеры более значительных клинических преимуществ могут включать большее уменьшение симптомов COVID-19, более быстрое время для облегчения симптомов, уменьшение патологии легких, большее снижение количества коронавируса SARS-CoV-2 у пациента (вирусной нагрузки) и снижение смертности.The compounds of the present invention can be used in the methods of the present invention in combination with other drugs. For example, administering to a SARS-CoV-2 coronavirus infected patient (i.e., a COVID-19 patient) a SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease inhibitor of the invention and an interferon such as interferon alfa or a pegylated interferon such as PEG- Intron or Pegasus may provide greater clinical benefit than dosing either interferon alone, pegylated interferon, or the SARS-CoV-2 coronavirus inhibitor alone. Other additional agents that can be used in the methods of the present invention include dexamethasone, azithromycin, and remdesivir. Examples of greater clinical benefits may include greater reduction in COVID-19 symptoms, faster time to symptom relief, reduced lung pathology, greater reduction in patient SARS-CoV-2 (viral load), and reduced mortality.
Коронавирус SARS-CoV-2 инфицирует клетки, экспрессирующие Р-гликопротеин. Некоторые из ингибиторов протеазы 3CL коронавируса SARS-CoV-2 по изобретению являются субстратами P-гликопротеина. Соединения, которые ингибируют коронавирус SARS-CoV-2, которые также являются субстратами P-гликопротеина, могут быть дозированы с ингибитором P-гликопротеина. Примерами ингибиторов Р-гликопротеина являются верапамил, винбластин, кетоконазол, нелфинавир, ритонавир или циклоспорин. Ингибиторы Р-гликопротеина действуют путем ингибирования истечения ингибиторов коронавируса SARS-CoV-2 по изобретению из клетки. Ингибирование истечения на основе P-гликопротеина предотвратит снижение внутриклеточных концентраций ингибитора коронавируса SARS-CoV-2 из-за оттока P-гликопротеина. Ингибирование оттока Р-гликопротеина приведет к более высоким внутриклеточным концентрациям ингибиторов коронавируса SARS-CoV-2. Дозирование пациента, инфицированного коронавирусом SARS-CoV-2, ингибиторов протеазы 3CL коронавируса SARS-CoV-2 по изобретению и ингибитора P-гликопротеина может снизить количество ингибитора протеазы коронавируса 3CL SARS-CoV-2, необходимое для достижения эффективной дозы за счет увеличения внутриклеточной концентрации ингибитора протеазы 3CL коронавируса SARS-CoV-2.SARS-CoV-2 coronavirus infects cells expressing P-glycoprotein. Some of the SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease inhibitors of the invention are P-glycoprotein substrates. Compounds that inhibit the SARS-CoV-2 coronavirus, which are also P-glycoprotein substrates, can be dosed with a P-glycoprotein inhibitor. Examples of P-glycoprotein inhibitors are verapamil, vinblastine, ketoconazole, nelfinavir, ritonavir or cyclosporine. The P-glycoprotein inhibitors act by inhibiting the outflow of the inhibitors of the SARS-CoV-2 coronavirus of the invention from the cell. Inhibition of P-glycoprotein-based efflux will prevent a decrease in intracellular concentrations of SARS-CoV-2 coronavirus inhibitor due to P-glycoprotein efflux. Inhibition of P-glycoprotein efflux will result in higher intracellular concentrations of SARS-CoV-2 coronavirus inhibitors. Dosing of a SARS-CoV-2 coronavirus infected patient with the SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease inhibitors of the invention and a P-glycoprotein inhibitor can reduce the amount of SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease inhibitor needed to achieve an effective dose by increasing intracellular concentration 3CL protease inhibitor of SARS-CoV-2 coronavirus.
Среди агентов, которые могут быть использованы для увеличения воздействия соединения по настоящему изобретению на млекопитающее, есть те, которые могут действовать как ингибиторы по меньшей мере одной изоформы ферментов цитохрома P450 (CYP450). Изоформы CYP450, которые можно эффективно ингибировать, включают, но не ограничиваются ими, CYP1A2, CYP2D6, CYP2C9, CYP2C19 и CYP3A4. Соединения, используемые в способах по настоящему изобретению, включают соединения, которые могут быть субстратами CYP3A4 и метаболизируются CYP3A4. Дозирование пациенту, инфицированному коронавирусом SARS-CoV-2, ингибитора коронавируса SARS-CoV-2, который является субстратом CYP3A4, такого как ингибитор протеазы 3CL коронавируса SARS-CoV-2, и ингибитора CYP3A4, такого как ритонавир, нелфинавир или делавирдин, снизит метаболизм ингибитора коронавируса SARS-CoV-2 с помощью CYP3A4. Это приведет к снижению клиренса ингибитора коронавируса SARS-CoV-2 и увеличению концентрации ингибитора коронавируса SARS-CoV-2 в плазме крови. Сниженный клиренс и более высокие концентрации в плазме могут привести к более низкой эффективной дозе ингибитора коронавируса SARS-CoV-2.Among the agents that can be used to increase the exposure of a compound of the present invention to a mammal are those that can act as inhibitors of at least one isoform of cytochrome P450 (CYP450) enzymes. Isoforms of CYP450 that can be effectively inhibited include, but are not limited to, CYP1A2, CYP2D6, CYP2C9, CYP2C19, and CYP3A4. Compounds useful in the methods of the present invention include compounds that may be CYP3A4 substrates and are metabolized by CYP3A4. Dosing to a patient infected with SARS-CoV-2 coronavirus an inhibitor of SARS-CoV-2 coronavirus that is a CYP3A4 substrate, such as an inhibitor of SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease, and a CYP3A4 inhibitor, such as ritonavir, nelfinavir, or delavirdine, will decrease metabolism inhibitor of SARS-CoV-2 coronavirus using CYP3A4. This will lead to a decrease in the clearance of the SARS-CoV-2 coronavirus inhibitor and an increase in the plasma concentration of the SARS-CoV-2 coronavirus inhibitor. Reduced clearance and higher plasma concentrations may result in a lower effective dose of the SARS-CoV-2 coronavirus inhibitor.
Дополнительные терапевтические агенты, которые можно использовать в сочетании с ингибиторами SARS-CoV-2 в способах по настоящему изобретению, включают следующие:Additional therapeutic agents that can be used in combination with SARS-CoV-2 inhibitors in the methods of the present invention include the following:
Ингибиторы PLpro, апиломод, EIDD-2801, рибавирин, валганцикловир, β-тимидин, аспартам, окспренолол, доксициклин, ацетофеназин, иопромид, рибофлавин, репротерол, 2,2′-циклоцитидин, хлорамфеникол, хлорфенезин карбамат, леводропропизин, цефамандол, флоксуридин, тигециклин, пеметрексед, L(+)-аскорбиновую кислоту, глутатион, гесперетин, адеметионин, мазопрокол, изотретиноин, дантролен, сульфасалазин антибактериальный, силибин, никардипин, силденафил, платикодин, хризин, неогесперидин, баикалин, 9 сугетриол-3,9-диацетат, (-)-эпигаллокатехин галлат, файтантрин D, 2-(3,4-дигидроксифенил)-2-[[2-(3,4-дигидроксифенил)-3,4-дигидро-5,7-дигидрокси-2H-1-бензопиран-3-ил]окси]-3,4-дигидро-2H-1-бензопиран-3,4,5,7-тетрол, 2,2-ди(3-индолил)-3-индолон, (S)-(1S,2R,4aS,5R,8aS)-1-формамидо-1,4a-диметил-6-метилен-5-((E)-2-(2-оксо-2,5-дигидрофуран-3-ил)этенил)декагидронафталин-2-ил-2-амино-3-фенилпропаноат, пицеатаннол, розмариновую кислоту и магнолол.PLpro inhibitors, apilomod, EIDD-2801, ribavirin, valganciclovir, β -thymidine, aspartame, oxprenolol, doxycycline, acetophenazine, iopromide, riboflavin, reproterol, 2,2'-cyclocytidine, chloramphenicol, chlorphenesin carbamate, levodropropizine, cefamandol, tigecycline , pemetrexed, L(+)-ascorbic acid, glutathione, hesperetin, ademethionine, mazoprocol, isotretinoin, dantrolene, antibacterial sulfasalazine, silybin, nicardipine, sildenafil, platicodin, chrysin, neohesperidin, baicalin, 9 sugetriol-3,9-diacetate, ( -)-epigallocatechin gallate, phytanthrine D, 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-[[2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,4-dihydro-5,7-dihydroxy-2 H -1- benzopyran-3-yl]oxy]-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran- 3,4,5,7 -tetrol, 2,2-di(3-indolyl)-3-indolone, ( S ) -(1 S ,2 R ,4a S ,5 R ,8a S )-1-formamido-1,4a-dimethyl-6-methylene-5-(( E )-2-(2-oxo-2,5- dihydrofuran-3-yl)ethenyl)decahydronaphthalene-2-yl-2-amino-3-phenylpropanoate, piceatannol, rosmarinic acid and magnolol.
Ингибиторы 3CLpro, лаймециклин, хлоргексидин, альфузозин, циластатин, фамотидин, альмитрин, прогабид, непафенак, карведилол, ампренавир, тигециклин, монтелукаст, карминовую кислоту, мимозин, флавин, лютеин, цефпирамид, фенетициллин, кандоксатрил, никардипин, эстрадиол, валерат, пиоглитазон, кониваптан, телмисартан, доксициклин, окситетрациклин, (1S,2R,4aS,5R,8aS)-1-формамидо-1,4a-диметил-6-метилен-5-((E)-2-(2-оксо-2,5-дигидрофуран-3-ил)этенил)декагидронафталин-2-ил 5-((R)-1,2-дитиолан-3-ил)пентаноат, бетулонал, хризин-7-О-β-глюкуронид, андрографизид, (1S,2R,4aS,5R,8aS)-1-формамидо-1,4a-диметил-6-метилен-5-((E)-2-(2-оксо-2,5-дигидрофуран-3-ил)этенил)декагидронафталин-2-ил2-нитробензоат, 2β-гидрокси-3,4-секофриделолактон-27-ую кислоту (S)-(1S,2R,4aS,5R,8aS)-1-формамидо-1,4a-диметил-6-метилен-5-((E)-2-(2-оксо-2,5-дигидрофуран-3-ил)этенил)декагидронафталин-2-ил-2-амино-3-фенилпропаноат, изодекортинол, церевистерол, гесперидин, неогесперидин, андрограпанин, 2-((1R,5R,6R,8aS)-6-гидрокси-5-(гидроксиметил)-5,8a-диметил-2-метилендекагидронафталин-1-ил)этилбензоат, космосиин, клейстокальтон А, 2,2-ди(3-индолил)-3-индолон, биоробин, гнидицин, филлаэмблинол, теафлавин 3,3'-ди-O-галлат, розмариновую кислоту, куиченсид I, олеаноловую кислоту, стигмаст-5-ен-3-ол, деацетилцентапикрин и берхемол.3CLpro inhibitors, lymecycline, chlorhexidine, alfuzosin, cilastatin, famotidine, almitrin, progabid, nepafenac, carvedilol, amprenavir, tigecycline, montelukast, carminic acid, mimosin, flavin, lutein, cefpyramide, feneticillin, candoxatril, nicardipine, estradiol, piglyvalerate, conivaptan, telmisartan, doxycycline, oxytetracycline, (1 S ,2 R ,4a S ,5 R ,8a S )-1-formamido-1,4a-dimethyl-6-methylene-5-(( E )-2-(2 -oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl)ethenyl)decahydronaphthalene-2-yl 5-(( R )-1,2-dithiolan-3-yl)pentanoate, betulonal, chrysin-7- O - β -glucuronide , andrographizide, (1 S ,2 R ,4a S ,5 R ,8a S )-1-formamido-1,4a-dimethyl-6-methylene-5-(( E )-2-(2-oxo-2, 5-dihydrofuran-3-yl)ethenyl)decahydronaphthalene-2- yl2 -nitrobenzoate, 2β-hydroxy-3,4-secofridelolactone-27th acid ( S )-(1 S ,2 R ,4a S ,5 R , 8a S )-1-formamido-1,4a-dimethyl-6-methylene-5-(( E )-2-(2-oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl)ethenyl)decahydronaphthalene-2-yl- 2-amino-3-phenylpropanoate, isodecortinol, cerevisterol, hesperidin, neohesperidin, an droprapanine, 2-((1 R ,5 R ,6 R ,8a S )-6-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-5,8a-dimethyl-2-methylenedecahydronaphthalen-1-yl)ethylbenzoate, cosmosiin, cleistocalton A, 2,2-di(3-indolyl)-3-indolone, biorobin, gnidicine, phyllaemblinol, theaflavin 3,3'-di- O -gallate, rosmarinic acid, kuichenside I, oleanolic acid, stigmast-5- ene -3- ol, deacetylcentapicrin and berghemol.
Ингибиторы RdRp, валганцикловир, хлоргексидин, цефтибутен, фенотерол, флударабин, итраконазол, цефуроксим, атоваквон, хенодезексихолевую кислоту, кромолин, панкурония бромид, кортизон, тиболон, новобиоцин, силубин, идарубицин бромокриптин, дифеноксилат, бензилпеннициорил G, габигартан этексилат, гнидицин, 2β,30β-дигидрокси-3,4-секофриделолактон-27-лактон, 14-деокси-11,12-дидегидроандрографолид, гнидитрин, теафлавин 3,3'-ди-O-галлат, (R)-((1R,5aS,6R,9aS)-1,5a-диметил-7-метилен-3-оксо-6-((E)-2-(2-оксо-2,5-дигидрофуран-3-ил)этенил)декагидро-1H-бензо[c]азепин-1-ил)метил2-амино-3-фенилпропаноат, 2β-Гидрокси-3,4-секофриделолактон-27-овую кислоту, 2-(3,4-дигидроксифенил)-2-[[2-(3,4-дигидроксифенил)-3,4-дигидро-5,7-дигидрокси-2H-1-бензопиран-3-ил]окси]-3,4-дигидро-2H-1-бензопиран-3,4,5,7-тетрол, филлаэмблицин B, 14-гидроксициперотундон, андрографизид, 2-((1R,5R,6R,8aS)-6-гидрокси-5-(гидроксиметил)-5,8a-диметил-2-метилендекагидронафталин-1-ил)этилбензоат, андрографолид, сугетриол-3,9-диацетат, Байкалин, (1S,2R,4aS,5R,8aS)-1-формамидо-1,4a-диметил-6-метилен-5-((E)-2-(2-оксо-2,5-дигидрофуран-3-ил)этенил)декагидронафталин-2-ил 5-((R)-1,2-дитиолан-3-ил)пентаноат, 1,7-дигидрокси-3-метоксексантон, 1,2,6-триметокси-8-[(6-O-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-9H-ксантен-9-он и 1,8-дигидрокси-6-метокси-2-[(6-O-β-D-ксилопиранозил-β-D-глюкопиранозил)окси]-9H-ксантен-9-он, 8-(β-D-глюкопиранозилокси)-1,3,5-тригидрокси-9H-ксантен-9-он.RdRp inhibitors, valganciclovir, chlorhexidine, ceftibuten, fenoterol, fludarabine, itraconazole, cefuroxime, atovaquone, chenodeoxycholic acid, cromolyn, pancuronium bromide, cortisone, tibolone, novobiocin, silubin , idarubicin ,30 β -dihydroxy-3,4-secofridelolactone-27-lactone, 14-deoxy-11,12-didehydroandrographolide, gnidithrin, theaflavin 3,3'-di- O -gallate, ( R )-((1 R ,5a S ,6 R ,9a S )-1,5a-dimethyl-7-methylene-3-oxo-6-(( E )-2-(2-oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl)ethenyl)decahydro - 1H -benzo[ c ]azepin-1-yl)methyl2-amino-3-phenylpropanoate, 2β-Hydroxy-3,4- secofridelolactone -27-oic acid, 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-[ [2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,4-dihydro-5,7-dihydroxy-2H-1- benzopyran -3-yl]oxy]-3,4-dihydro-2H-1- benzopyran- 3,4,5,7-tetrol, phyllaemblicin B, 14-hydroxycyperotundone, andrographizide, 2-((1 R ,5 R ,6 R ,8a S )-6-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-5,8a- dimethyl-2-methylenedecahydronaphthalene-1-yl)ethylbenzoate, and rografolide, sugetriol-3,9-diacetate, Baicalin, (1 S ,2 R ,4a S ,5 R ,8a S )-1-formamido-1,4a-dimethyl-6-methylene-5-(( E )- 2-(2-oxo-2,5-dihydrofuran-3-yl)ethenyl)decahydronaphthalene-2-yl 5-(( R )-1,2-dithiolan-3-yl)pentanoate, 1,7-dihydroxy-3 -methoxexanthone, 1,2,6-trimethoxy-8-[(6- O - β -D-xylopyranosyl- β -D-glucopyranosyl)oxy]-9 H -xanthen-9-one and 1,8-dihydroxy-6 -methoxy-2-[(6- O - β -D-xylopyranosyl- β -D-glucopyranosyl)oxy]-9 H -xanthen-9-one, 8-( β -D-glucopyranosyloxy)-1,3,5 -trihydroxy -9H-xanthen-9-one.
Дополнительные терапевтические агенты, которые можно использовать в способах по настоящему изобретению, включают диосмин, гесперидин, MK-3207, венетоклакс, дигидроэргокристин, болазин, R428, дитеркалиний, этопозид, тенипозид, UK-432097, иринотекан, люмакафтор, велпатасвир, элуксадолин, ледипасвир, лопинавир/ритонавир+рибавирин, альферон и преднизон. Другие дополнительные агенты, используемые в способах по настоящему изобретению, включают дексаметазон, азитромицин и ремдесивир, а также боцепревир, умифеновир и фавипиравир.Additional therapeutic agents that can be used in the methods of the present invention include diosmin, hesperidin, MK-3207, venetoclax, dihydroergocristine, bolazine, R428, ditherkalinium, etoposide, teniposide, UK-432097, irinotecan, lumacaftor, velpatasvir, eluxadoline, ledipasvir, lopinavir/ritonavir+ribavirin, alferon and prednisone. Other additional agents used in the methods of the present invention include dexamethasone, azithromycin, and remdesivir, as well as boceprevir, umifenovir, and favipiravir.
Другие дополнительные агенты, которые можно использовать в способах по настоящему изобретению, включают соединения α—кетоамидов, обозначенные как 11r, 13a и 13b, показанные ниже, как описано у Zhang, L.; Lin, D.; Sun, X.; Rox, K.; Hilgenfeld, R.; X-ray Structure of Main Protease of the Novel Coronavirus SARS-CoV-2 Enables Design of α-Ketoamide Inhibitors; bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952879Other additional agents that can be used in the methods of the present invention include compoundsα—ketoamides, designated as 11r, 13a and 13b, shown below, as described in Zhang, L.; Lin, D.; Sun, X.; Rox, K.; Hilgenfeld, R.; X-ray Structure of Main Protease of the Novel Coronavirus SARS-CoV-2 Enables Design ofα-Ketoamide Inhibitors; bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952879
Дополнительные агенты, которые могут применяться в способах по настоящему изобретению, включают активаторы пути RIG 1, такие, как описаны в патенте США № 9,884,876.Additional agents that may be used in the methods of the present invention include
Другие дополнительные терапевтические агенты включают ингибиторы протеазы, такие, как описаны в Dai W, Zhang B, Jiang X-M, et al. Structure-based design of antiviral drug candidates targeting the SARS-CoV-2 main protease. Science. 2020;368(6497):1331-1335, включая соединения, такие как показаны ниже, и соединения, обозначенные как DC402234Other additional therapeutic agents include protease inhibitors such as those described in Dai W, Zhang B, Jiang XM, et al. Structure-based design of antiviral drug candidates targeting the SARS-CoV-2 main protease. science . 2020;368(6497):1331-1335, including compounds such as those shown below and compounds designated as DC402234
. .
Другим вариантом осуществления настоящего изобретения является способ лечения COVID-19 у пациента, где в дополнение к введению соединения по настоящему изобретению (т.е. соединения формулы I, I' или I'' или его сольвата или гидрата или его фармацевтически приемлемой соли соединения или сольвата или гидрата) вводят дополнительный агент, и этот дополнительный агент выбирают из противовирусных средств, таких как ремдесивир, галидесивир, фавилавир/авифавир, молнупиравир (MK-4482/EIDD 2801), AT-527, AT-301, BLD-2660, фавипиравир, камостат, SLV213 эмтриктабин/тенофивир, клевудин, дальцетрапиб, боцепревир и ABX464, глюкокортикоиды, такие как дексаметазон и гидрокортизон, реконвалесцентной плазмы, рекомбинантной плазмы человека, такой как гелсолин (Rhu-p65N), моноклональные антитела, такие как регданвимаб (Regkirova), равулизумаб (Ultomiris), VIR-7831/VIR-7832, BRII-196/BRII-198, COVI-AMG/COVI DROPS (STI-2020), бамланивимаб (LY-CoV555), маврилимаб, леронлимаб (PRO140), AZD7442, лензилумаб, инфликсимаб, адалимумаб, JS 016, STI-1499 (COVIGUARD), ланаделумаб (Takhzyro), канакинумаб (Ilaris), гимсилумаб и отилимаб, коктейли антител, такие как касиривимаб/имдевимаб (REGN-Cov2), рекомбинантный слитый белок, такой как MK-7110 (CD24Fc/SACCOVID), антикоагулянты, такие как гепарин и апиксабан, агонисты рецептора IL-6, такие как тоцилизумаб (Actemra) и сарилумаб (Kevzara), ингибиторы PIKfyve, такие как апилимод димезилат, ингибиторы RIPK1, такие как DNL758, DC10462234, агонисты рецептора VIP, такие как РВ1046, ингибиторы SGLT2, такие как дапаглифозин, ингибиторы TYK, такие как абивертиниб, ингибиторы киназы, такие как ATR-002, бемцентиниб, акалабрутиниб, лосмапимод, барицитиниб и тофацитиниб, блокаторы H2, такие как фамотидин, антигельминтные средства, такие как никлозамид, ингибиторы фурина, такие как диминащен.Another embodiment of the present invention is a method of treating COVID-19 in a patient, wherein in addition to administering a compound of the present invention (i.e., a compound of formula I, I' or I'' or a solvate or hydrate thereof or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a compound or solvate or hydrate) an additional agent is administered and this additional agent is selected from antivirals such as remdesivir, galidesivir, favilavir/avifavir, molnupiravir (MK-4482/EIDD 2801), AT-527, AT-301, BLD-2660, favipiravir , camostat, SLV213 emtrictabine/tenofivir, clevudine, dalcetrapib, boceprevir and ABX464, glucocorticoids such as dexamethasone and hydrocortisone, convalescent plasma, recombinant human plasma such as gelsolin (Rhu-p65N), monoclonal antibodies such as regdanvimab (Regkirova), ravulizumab (Ultomiris), VIR-7831/VIR-7832, BRII-196/BRII-198, COVI-AMG/COVI DROPS (STI-2020), bamlanivimab (LY-CoV555), mavrilimab, leronlimab (PRO140), AZD7442, lenzilumab , inf liximab, adalimumab, JS 016, STI-1499 (COVIGUARD), lanadelumab (Takhzyro), canakinumab (Ilaris), gimsilumab and otilimab, antibody cocktails such as casirivimab/imdevimab (REGN-Cov2), recombinant fusion protein such as MK- 7110 (CD24Fc/SACCOVID), anticoagulants such as heparin and apixaban, IL-6 receptor agonists such as tocilizumab (Actemra) and sarilumab (Kevzara), PIKfyve inhibitors such as apilimod dimesylate, RIPK1 inhibitors such as DNL758, DC10462234, VIP receptor agonists such as PB1046 SGLT2 inhibitors such as dapaglifosine TYK inhibitors such as abivertinib Kinase inhibitors such as ATR-002 , such as niclosamide, furin inhibitors, such as diminaschen.
Термин «агент, ингибирующий SARS-CoV-2» означает любое соединение ингибитор 3C-подобной протеазы родственной коронавирусу SARS-CoV-2, описанное в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат, пролекарство, активный метаболит или сольват или соединение, которое ингибирует репликацию SARS-CoV-2 любым способом.The term "SARS-CoV-2 inhibitory agent" means any SARS-CoV-2 coronavirus-related 3C-like protease inhibitor compound described herein, or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, prodrug, active metabolite, or solvate thereof, or a compound that inhibits SARS-CoV-2 replication by any means.
Термин «вмешательство или профилактика» вирусной репликации коронавируса, родственного SARS-CoV-2 («SARS-CoV-2») в клетке означает снижение репликации SARS-CoV-2 или продуцирования компонентов SARS-CoV-2, необходимых для потомства вируса в клетке, обработанной соединением по настоящему изобретению, по сравнению с клеткой, не обработанной соединением по настоящему изобретению. Простые и удобные анализы для определения снижения репликации вируса SARS-CoV-2 включают анализ ELISA на наличие, отсутствие или пониженное присутствие анти-SARS-CoV-2 антител в крови субъекта (Nasoff, et al., PNAS 88:5462-5466, 1991), RT-PCR (Yu, et al., in Viral Hepatitis and Liver Disease 574-577, Nishioka, Suzuki and Mishiro (Eds.); Springer-Verlag, Tokyo, 1994). Такие способы хорошо известны специалистам в данной области техники. Альтернативно, общая РНК из трансдуцированных и инфицированных «контрольных» клеток может быть выделена и подвергнута анализу с помощью дот-блоттинга или нозерн-блоттинга и зондирована ДНК, специфичной для SARS-CoV-2, чтобы определить, снижается ли репликация SARS-CoV-2. Альтернативно, снижение экспрессии белка SARS-CoV-2 также можно использовать в качестве индикатора ингибирования репликации SARS-CoV-2. Снижение репликации SARS-CoV-2 более чем на пятьдесят процентов по сравнению с контрольными клетками обычно количественно определяет профилактику репликации SARS-CoV-2.The term "intervention or prevention" of viral replication of the SARS-CoV-2-related coronavirus ("SARS-CoV-2") in a cell means the reduction of SARS-CoV-2 replication or the production of SARS-CoV-2 components necessary for the progeny of the virus in the cell treated with the compound of the present invention compared to a cell not treated with the compound of the present invention. Simple and convenient assays for determining a reduction in SARS-CoV-2 virus replication include an ELISA assay for the presence, absence, or reduced presence of anti-SARS-CoV-2 antibodies in a subject's blood (Nasoff, et al., PNAS 88:5462-5466, 1991 ), RT-PCR (Yu, et al., in Viral Hepatitis and Liver Disease 574-577, Nishioka, Suzuki and Mishiro (Eds.); Springer-Verlag, Tokyo, 1994). Such methods are well known to those skilled in the art. Alternatively, total RNA from transduced and infected "control" cells can be isolated and analyzed by dot blot or Northern blot and probed for SARS-CoV-2 specific DNA to determine if SARS-CoV-2 replication is reduced. . Alternatively, decreased SARS-CoV-2 protein expression can also be used as an indicator of SARS-CoV-2 replication inhibition. A reduction in SARS-CoV-2 replication of more than fifty percent compared to control cells usually quantifies the prevention of SARS-CoV-2 replication.
Если соединение-ингибитор SARS-CoV-2, используемое в способе изобретения, является основанием, желаемая соль может быть получена любым подходящим способом, известным в данной области, включая обработку свободного основания неорганической кислотой (такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и подобные) или с органической кислотой (такой как уксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидиловая кислота (такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота), альфа-гидроксикислота (такая как лимонная кислота или винная кислота), аминокислота (такая как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота), ароматическая кислота (такая как бензойная кислота или коричная кислота), сульфоновая кислота (такая как п-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота) и подобные.If the SARS-CoV-2 inhibitor compound used in the method of the invention is a base, the desired salt can be obtained by any suitable method known in the art, including treatment of the free base with an inorganic acid (such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid and the like) or with an organic acid (such as acetic acid, maleic acid, succinic acid, mandelic acid, fumaric acid, malonic acid, pyruvic acid, oxalic acid, glycolic acid, salicylic acid, pyranosidyl acid (such as glucuronic acid or galacturonic acid), alpha hydroxy acid (such as citric acid or tartaric acid), amino acid (such as aspartic acid or glutamic acid), aromatic acid (such as benzoic acid or cinnamic acid), sulfonic acid (such as p- toluenesulfonic acid or ethanesulfonic acid lot) and the like.
Если соединение ингибитор SARS-CoV-2, используемое в способе изобретения, представляет собой кислоту, желаемая соль может быть получена любым подходящим способом, известным в данной области, включая обработку свободной кислоты неорганическим или органическим основанием [таким как амин (первичный, вторичный или третичный)], гидроксид щелочного металла или гидроксид щелочноземельного металла. Иллюстративные примеры подходящих солей включают органические соли, полученные из аминокислот (таких как глицин и аргинин), аммиак, первичные амины, вторичные амины, третичные амины и циклические амины (такие как пиперидин, морфолин и пиперазин), а также неорганические соли, полученные из натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.If the SARS-CoV-2 inhibitor compound used in the method of the invention is an acid, the desired salt may be prepared by any suitable method known in the art, including treatment of the free acid with an inorganic or organic base [such as an amine (primary, secondary, or tertiary )], alkali metal hydroxide or alkaline earth metal hydroxide. Illustrative examples of suitable salts include organic salts derived from amino acids (such as glycine and arginine), ammonia, primary amines, secondary amines, tertiary amines, and cyclic amines (such as piperidine, morpholine, and piperazine), as well as inorganic salts derived from sodium. , calcium, potassium, magnesium, manganese, iron, copper, zinc, aluminum and lithium.
В случае соединений ингибиторов SARS-CoV-2, пролекарств, солей или сольватов, которые являются твердыми веществами, специалистам в данной области техники понятно, что соединение, пролекарства, соли и сольваты, используемые в способе по настоящему изобретению, могут существовать в различных полиморфных или кристаллических формах, все из которых входят в объем настоящего изобретения и указанные формулы. Кроме того, соединение, соли, пролекарства и сольваты, используемые в способе по настоящему изобретению, могут существовать в виде таутомеров, все которые предназначены для включения в широкий объем настоящего изобретения.In the case of SARS-CoV-2 inhibitor compounds, prodrugs, salts, or solvates that are solids, it will be understood by those skilled in the art that the compound, prodrugs, salts, and solvates used in the method of the present invention may exist in various polymorphs or crystalline forms, all of which are within the scope of the present invention and the stated formulas. In addition, the compound, salts, prodrugs and solvates used in the method of the present invention may exist as tautomers, all of which are intended to be included within the broad scope of the present invention.
Солюбилизирующие агенты также могут использоваться с соединениями по изобретению для увеличения растворимости соединений в воде физиологически приемлемых растворов. Эти солюбилизирующие агенты включают циклодекстрины, пропиленгликоль, диэтилацетамид, полиэтиленгликоль, Tween, этанол и мицеллообразующие агенты. Предлагаемыми солюбилизирующими агентами являются циклодекстрины, особенно бета-циклодекстрины и, в частности, гидроксипропил бета-циклодекстрин и сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрин.Solubilizing agents can also be used with the compounds of the invention to increase the aqueous solubility of the compounds in physiologically acceptable solutions. These solubilizing agents include cyclodextrins, propylene glycol, diethylacetamide, polyethylene glycol, Tween, ethanol, and micelle forming agents. Suggested solubilizing agents are cyclodextrins, especially beta-cyclodextrins and in particular hydroxypropyl beta-cyclodextrin and sulfobutyl ether beta-cyclodextrin.
В некоторых случаях, соединения ингибиторов SARS-CoV-2, соли, пролекарства и сольватов, используемые в способе по настоящему изобретению, могут иметь хиральные центры. Когда присутствуют хиральные центры, соединение, соли, пролекарства и сольваты могут существовать в виде отдельных стереоизомеров, рацематов и/или смесей энантиомеров и/или диастереомеров. Все такие отдельные стереоизомеры, рацематы, и их смеси предназначены для включения в широкий объем настоящего изобретения.In some cases, SARS-CoV-2 inhibitor compounds, salts, prodrugs and solvates used in the method of the present invention may have chiral centers. When chiral centers are present, the compound, salts, prodrugs, and solvates may exist as single stereoisomers, racemates, and/or mixtures of enantiomers and/or diastereomers. All such individual stereoisomers, racemates, and mixtures thereof are intended to be included within the broad scope of the present invention.
Как обычно понимают специалисты в данной области техники, оптически чистым соединением является соединение, которое является энантиомерно чистым. Используемый в настоящем документе термин «оптически чистый» предназначен для обозначения соединения, обладающего, по меньшей мере, достаточной активностью. Предпочтительно, оптически чистое количество одного энантиомера для получения соединения, имеющего желаемое фармакологически чистое соединение по настоящему изобретению, включает, по меньшей мере, 90% одного изомера (80% энантиомерный избыток), более предпочтительно, по меньшей мере 95% (90% эи), даже более предпочтительно, по меньшей мере, 97,5% (95% эи), и наиболее предпочтительно, по меньшей мере, 99% (98% эи).As generally understood by those skilled in the art, an optically pure compound is one that is enantiomerically pure. As used herein, the term "optically pure" is intended to refer to a compound having at least sufficient activity. Preferably, an optically pure amount of one enantiomer to obtain a compound having the desired pharmacologically pure compound of the present invention comprises at least 90% of one isomer (80% enantiomeric excess), more preferably at least 95% (90% ee) , even more preferably at least 97.5% (95% ee), and most preferably at least 99% (98% ee).
Термин «лечение», используемый в настоящем документе, если не указано иное, означает обращение, облегчение, ингибирование развития, или профилактику нарушения или состояния, к которому этот термин применяется, или одного или нескольких симптомов такого состояния или нарушения. Термин «лечение», как он использован в настоящем документе, если не указано иное, относится к акту лечения, в том смысле в котором «лечение» определено непосредственно выше. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, «лечить» или «лечение» означает, по меньшей мере, смягчение болезненного состояния у человека, которое облегчается путем ингибирования активности 3C-подобной протеазы SARS-COV-2, которая является основной протеазой SARS-COV-2, возбудителя COVID-19. Для пациентов, страдающих от COVID-19, лихорадка, усталость, и сухой кашель являются основными проявлениями болезни, в то время как заложенность носа, насморк, и другие симптомы верхних дыхательных путей встречаются редко. Beijing Centers for Diseases Control and Prevention указывает, что типовой случай COVID-19 вызывает прогрессирующее обострение. COVID-19 может быть классифицирован на легкие, нормальные, тяжелые, и критические типы на основе тяжести заболевания. National Health Commission of the People's Republic of China. Diagnosis and Treatment of Pneumonia Caused by 2019-nCoV (Trial Version 4). Доступно онлайн: http://www.nhc.gov.cn/jkj/s3577/202002/573340613ab243b3a7f61df260551dd4/files/c791e5a7ea5149f680fdcb34dac0f54e.pdf: (1) Легкие случаи - клинические симптомы были легкими, и воспаление легких не было обнаружено при компьютерной томографии (КТ) грудной клетки; (2) нормальные случаи - лихорадка, респираторные симптомы, и установлено что пациенты имели визуализирующиеся проявления пневмонии; (3) тяжелые случаи - одно из следующих трех условий: респираторный дистресс, частота дыхания ≥30 раз/мин (в состоянии покоя, относятся к насыщению кислородом ≤93%), частичное артериальное давление кислорода (РаО2)/концентрации абсорбции кислорода (FiO2 ) ≤300 мм рт.ст. (1 мм рт.ст.=0133 кПа); (4) критические случаи - одно из следующих трех условий: дыхательная недостаточность и необходимость искусственной вентиляции легких, шок, или ассоциированная недостаточность других органов, требующая интенсивной терапии. Текущие клинические данные показывают, что большинство случаев смерти произошло среди пациентов пожилого возраста. Тем не менее, тяжелые случаи были зарегистрированы у молодых людей, которые имеют уникальные факторы, в частности, хронические заболевания, такие как диабет или гепатит B. Те, которые длительное время принимали гормоны или иммунодепрессанты, и имеют пониженные функции иммунитета, вероятно будут сильно инфицированы.The term "treatment" as used herein, unless otherwise indicated, means the treatment, alleviation, inhibition of development, or prevention of the disorder or condition to which the term is applied, or one or more symptoms of such condition or disorder. The term "treatment" as used herein, unless otherwise indicated, refers to the act of treating in the sense that "treating" is defined immediately above. In a preferred embodiment of the present invention, "treat" or "treatment" means at least alleviating a disease state in a human that is alleviated by inhibiting the activity of SARS-COV-2 3C-like protease, which is the main protease of SARS-COV-2 , the causative agent of COVID-19. For patients suffering from COVID-19, fever, fatigue, and dry cough are the main manifestations of the disease, while nasal congestion, runny nose, and other upper respiratory symptoms are rare. The Beijing Centers for Diseases Control and Prevention indicates that a typical case of COVID-19 causes a progressive exacerbation. COVID-19 can be classified into mild, normal, severe, and critical types based on the severity of the disease. National Health Commission of the People 's Republic of China. Diagnosis and Treatment of Pneumonia Caused by 2019-nCoV (Trial Version 4). Available online: http://www.nhc.gov.cn/jkj/s3577/202002/573340613ab243b3a7f61df260551dd4/files/c791e5a7ea5149f680fdcb34dac0f54e.pdf: (1) Mild cases - clinical symptoms were mild and no inflammation of the lungs was detected on CT scan ( CT) chest; (2) normal cases - fever, respiratory symptoms, and found that patients had visualized manifestations of pneumonia; (3) severe cases - one of the following three conditions: respiratory distress, respiratory rate ≥30 times / min (at rest, refer to oxygen saturation ≤93%), partial oxygen pressure (PaO2) / oxygen absorption concentration (FiO2 ) ≤300mmHg (1 mm Hg = 0133 kPa); (4) critical cases - one of the following three conditions: respiratory failure and the need for mechanical ventilation, shock, or associated failure of other organs requiring intensive care. Current clinical data show that the majority of deaths occurred among elderly patients. However, severe cases have been reported in young people who have unique factors, in particular chronic diseases such as diabetes or hepatitis B. Those who have taken hormones or immunosuppressants for a long time and have reduced immune functions are likely to be highly infected. .
Способы лечения для смягчения болезненного состояния, связанного с коронавирусом, такого как COVID-19, включают использование одного или нескольких соединений по изобретению любым общепринятым способом. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления изобретения, соединение или соединения, используемые в способах по настоящему изобретению, вводят млекопитающему, такому как человек, при необходимости. Предпочтительно, чтобы млекопитающее, нуждающееся в этом, было инфицировано коронавирусом, таким как возбудитель COVID-19, а именно SARS-CoV-2.Methods of treatment for alleviating a disease state associated with a coronavirus, such as COVID-19, include the use of one or more compounds of the invention in any conventional manner. According to some preferred embodiments of the invention, the compound or compounds used in the methods of the present invention is administered to a mammal, such as a human, if necessary. Preferably, the mammal in need thereof is infected with a coronavirus such as the causative agent of COVID-19, namely SARS-CoV-2.
Настоящее изобретение также включает профилактические способы, включающие введение эффективного количества ингибитора SARS-CoV-2 по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, фармацевтически активного метаболита или сольвата млекопитающему, например человеку, подверженному риску заражения SARS-CoV-2. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления, эффективное количество одного или нескольких соединений по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, фармацевтически активного метаболита или сольвата вводят человеку, подверженному риску заражения SARS-CoV-2, возбудителя COVID-19. Профилактические способы по изобретению включают использование одного или нескольких соединений по изобретению любым общепринятым способом.The present invention also includes prophylactic methods comprising administering an effective amount of the SARS-CoV-2 inhibitor of the invention, or a pharmaceutically acceptable salt, prodrug, pharmaceutically active metabolite, or solvate thereof, to a mammal, such as a human, at risk for SARS-CoV-2 infection. In some preferred embodiments, an effective amount of one or more compounds of the present invention, or a pharmaceutically acceptable salt, prodrug, pharmaceutically active metabolite, or solvate thereof, is administered to a human subject at risk for SARS-CoV-2 infection, the causative agent of COVID-19. Prophylactic methods of the invention include the use of one or more compounds of the invention in any conventional manner.
Определенные соединения, используемые в способах по изобретению, например дексаметазон, азитромицин и ремдесивир, известны и могут быть получены способами, известными в данной области техники.Certain compounds used in the methods of the invention, such as dexamethasone, azithromycin and remdesivir, are known and can be prepared by methods known in the art.
Последние данные указывают на то, что новый коронавирус SARS-CoV-2 является возбудителем COVID-19. Нуклеотидная последовательность коронавируса SARS-CoV-2, а также недавно определенные подтипы L и S, были недавно определены и стали общедоступными.Recent data indicate that the novel coronavirus SARS-CoV-2 is the causative agent of COVID-19. The nucleotide sequence of the SARS-CoV-2 coronavirus, as well as the recently identified L and S subtypes, have recently been identified and made available to the public.
Активность соединений ингибиторов в качестве ингибиторов вирусной активности SARS-CoV-2 может быть измерена любым из подходящих способов, доступных в данной области техники, включая анализы in vivo и in vitro. Активность соединений по настоящему изобретению в качестве ингибиторов активности коронавируса 3C-подобной протеазы (такой как 3C-подобная протеаза коронавируса SARS-CoV-2) может быть измерена любым из подходящих способов, известных специалистам в данной области техники, в том числе анализы in vivo и in vitro. Примеры подходящих анализов для измерения активности включают анализы противовирусных клеточных культур, описанные в настоящем документе, а также анализы антипротеаз, описанные в настоящем документе, такие как анализы, описанные в экспериментальном разделе.The activity of inhibitor compounds as inhibitors of SARS-CoV-2 viral activity can be measured by any of the suitable methods available in the art, including in vivo and in vitro assays . The activity of the compounds of the present invention as inhibitors of coronavirus 3C-like protease activity (such as SARS-CoV-2 coronavirus 3C-like protease) can be measured by any of the suitable methods known to those skilled in the art, including in vivo assays and in vitro . Examples of suitable assays for measuring activity include the antiviral cell culture assays described herein as well as the antiprotease assays described herein, such as those described in the experimental section.
Введение соединений-ингибиторов SARS-CoV-2 и их фармацевтически приемлемых пролекарств, солей, активных метаболитов и сольватов может осуществляться любым из общепринятых способов введения, доступных специалистам в данной области техники. Иллюстративные примеры подходящих способов введения включают пероральный, назальный, легочный, парентеральный, местный, внутривенный, инъекционный, трансдермальный и ректальный. Предпочтительны пероральные, внутривенные, подкожные и назальные доставки.Administration of the SARS-CoV-2 inhibitor compounds and their pharmaceutically acceptable prodrugs, salts, active metabolites and solvates may be by any of the conventional routes of administration available to those skilled in the art. Illustrative examples of suitable routes of administration include oral, nasal, pulmonary, parenteral, topical, intravenous, injection, transdermal, and rectal. Oral, intravenous, subcutaneous and nasal delivery is preferred.
Агент, ингибирующий SARS-CoV-2, можно вводить в виде фармацевтической композиции в любой подходящей фармацевтической форме. Подходящие фармацевтические формы включают твердые, полужидкие, жидкие или лиофилизированные составы, такие как таблетки, порошки, капсулы, суппозитории, суспензии, липосомы и аэрозоли. Агент, ингибирующий SARS-CoV-2, может быть приготовлен в виде раствора с использованием любой из множества методик. Например, агент, ингибирующий SARS-CoV-2, можно растворить в кислоте (например, 1 M HCl) и разбавить достаточным объемом раствора 5% декстрозы в воде (D5W), чтобы получить желаемую конечную концентрацию агента, ингибирующего SARS-CoV-2 (например, примерно 15 мМ). Альтернативно, можно использовать раствор D5W, содержащий примерно 15 мМ HCl, чтобы получить раствор агента, ингибирующего SARS-CoV-2, в соответствующей концентрации. Кроме того, агент, ингибирующий SARS-CoV-2, может быть приготовлен в виде суспензии с использованием, например, 1% раствора карбоксиметилцеллюлозы (CMC).The SARS-CoV-2 inhibitory agent may be administered as a pharmaceutical composition in any suitable pharmaceutical form. Suitable pharmaceutical forms include solid, semi-solid, liquid or lyophilized formulations such as tablets, powders, capsules, suppositories, suspensions, liposomes and aerosols. The SARS-CoV-2 inhibitory agent may be formulated into a solution using any of a variety of techniques. For example, a SARS-CoV-2 inhibitory agent can be dissolved in an acid (e.g., 1 M HCl) and diluted with a sufficient volume of a 5% dextrose in water (D5W) solution to produce the desired final concentration of the SARS-CoV-2 inhibitory agent ( for example, about 15 mM). Alternatively, a D5W solution containing about 15 mM HCl can be used to prepare a solution of the SARS-CoV-2 inhibitory agent at the appropriate concentration. In addition, the SARS-CoV-2 inhibitory agent can be prepared as a suspension using, for example, a 1% solution of carboxymethyl cellulose (CMC).
Приемлемые способы приготовления подходящих фармацевтических форм фармацевтических композиций известны или могут быть определены обычным образом специалистами в данной области техники. Например, фармацевтические препараты могут быть приготовлены в соответствии с общепринятыми методами фармацевтической химии, включающими такие стадии, как смешивание, гранулирование и прессование, когда необходимо, для таблетированных форм, или смешивание, наполнение и растворение ингредиентов, если необходимо, с получением желаемых продуктов для внутривенного, перорального, парентерального, местного, интравагинального, интраназального, внутрибронхиального, внутриглазного, интрааурального и/или ректального введения.Acceptable methods for the preparation of suitable pharmaceutical forms of pharmaceutical compositions are known or can be determined in the usual way by experts in this field of technology. For example, pharmaceutical preparations may be prepared according to conventional pharmaceutical chemistry techniques, including steps such as mixing, granulating and compressing, when necessary, for tablet forms, or mixing, filling, and dissolving ingredients, if necessary, to obtain the desired intravenous products. , oral, parenteral, topical, intravaginal, intranasal, intrabronchial, intraocular, intraaural and/or rectal administration.
Обычно соединение по настоящему изобретению вводят в количестве, эффективном для лечения состояния, описанного в настоящем документе. Соединения по изобретению вводят любым подходящим путем в форме фармацевтической композиции, адаптированной к такому пути, и в дозе, эффективной для предполагаемого лечения. Терапевтически эффективные дозы соединений, необходимые для лечения прогрессирования медицинского состояния, легко определяются обычным специалистом в данной области техники с использованием доклинических и клинических подходов, знакомых специалистам в области медицины.Typically, the compound of the present invention is administered in an amount effective to treat the condition described herein. The compounds of the invention are administered by any suitable route in the form of a pharmaceutical composition adapted to such route and at a dose effective for the intended treatment. Therapeutically effective doses of the compounds required to treat the progression of a medical condition are readily determined by one of ordinary skill in the art using preclinical and clinical approaches familiar to those of skill in the medical arts.
Соединения по изобретению можно вводить перорально. Пероральное введение может включать глотание, так что соединение попадает в желудочно-кишечный тракт, или может применяться буккальное или сублингвальное введение, при котором соединение попадает в кровоток непосредственно изо рта.The compounds of the invention may be administered orally. Oral administration may include swallowing, so that the compound enters the gastrointestinal tract, or buccal or sublingual administration may be used, in which the compound enters the bloodstream directly from the mouth.
В другом варианте осуществления, соединения по изобретению также можно вводить непосредственно в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Подходящие способы парентерального введения включают внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, интратекальное, внутрижелудочковое, внутриуретральное, внутригрудинное, внутричерепное, внутримышечное и подкожное. Подходящие устройства для парентерального введения включают игольные (включая микроигольные) инъекторы, безыгольные инъекторы и методы инфузии.In another embodiment, the compounds of the invention can also be administered directly to the bloodstream, to a muscle, or to an internal organ. Suitable methods of parenteral administration include intravenous, intraarterial, intraperitoneal, intrathecal, intraventricular, intraurethral, intrasternal, intracranial, intramuscular and subcutaneous. Suitable devices for parenteral administration include needle (including microneedle) injectors, needleless injectors and infusion techniques.
В другом варианте осуществления, соединения по изобретению также можно вводить местно на кожу или слизистую оболочку, то есть дермально или трансдермально. В другом варианте осуществления, соединения по изобретению также можно вводить интраназально или путем ингаляции. В другом варианте осуществления, соединения по изобретению можно вводить ректально или вагинально. В другом варианте осуществления, соединения по изобретению также можно вводить непосредственно в глаз или ухо.In another embodiment, the compounds of the invention can also be administered topically to the skin or mucosa, ie dermally or transdermally. In another embodiment, the compounds of the invention can also be administered intranasally or by inhalation. In another embodiment, the compounds of the invention may be administered rectally or vaginally. In another embodiment, the compounds of the invention can also be administered directly to the eye or ear.
Схема дозирования соединений и/или композиций, содержащих соединения, основан на множестве факторов, включая тип, возраст, вес, пол и медицинское состояние пациента; тяжесть состояния; способ введения; и активность конкретного используемого соединения. Таким образом, схема дозирования может широко варьироваться. Уровни дозировки от примерно 0,01 мг до примерно 100 мг на килограмм массы тела в сутки полезны при лечении вышеуказанных состояний. В одном варианте осуществления, общая суточная доза соединения по настоящему изобретению (вводимая в виде однократной или разделенной дозы) обычно составляет от примерно 0,01 до примерно 100 мг/кг. В другом варианте осуществления, общая суточная доза соединения по настоящему изобретению составляет от примерно 0,1 до примерно 50 мг/кг, а в другом варианте от примерно 0,5 до примерно 30 мг/кг (т.е. мг соединения по настоящему изобретению на кг массы тела). В одном варианте осуществления, дозировка составляет от 0,01 до 10 мг/кг/сутки. В другом варианте осуществления, дозировка составляет от 0,1 до 1,0 мг/кг/сутки. Стандартные дозированные композиции могут содержать такие количества или их кратные количества, чтобы составить суточную дозу. Во многих случаях, введение соединений будет повторяться множество раз в сутки (обычно не более 4 раз). При желании можно использовать многократные дозы в сутки для увеличения общей суточной дозы.The dosing schedule for compounds and/or compositions containing compounds is based on a variety of factors, including the type, age, weight, sex, and medical condition of the patient; the severity of the condition; method of administration; and the activity of the particular compound used. Thus, the dosing regimen can vary widely. Dosage levels from about 0.01 mg to about 100 mg per kilogram of body weight per day are useful in the treatment of the above conditions. In one embodiment, the total daily dose of a compound of the present invention (administered as a single or divided dose) is typically from about 0.01 mg/kg to about 100 mg/kg. In another embodiment, the total daily dose of the compound of the present invention is from about 0.1 to about 50 mg/kg, and in another embodiment, from about 0.5 to about 30 mg/kg (i.e. mg of the compound of the present invention per kg of body weight). In one embodiment, the dosage is from 0.01 to 10 mg/kg/day. In another embodiment, the dosage is 0.1 to 1.0 mg/kg/day. Unit dosage compositions may contain such amounts, or multiples thereof, to constitute a daily dose. In many cases, the administration of the compounds will be repeated multiple times per day (typically no more than 4 times). If desired, multiple doses per day can be used to increase the total daily dose.
Для перорального введения, композиции могут быть представлены в форме таблеток, содержащих от примерно 0,01 мг до примерно 500 мг активного ингредиента, или, в другом варианте осуществления, от примерно 1 мг до примерно 100 мг активного ингредиента. При внутривенном введении дозы могут варьироваться от примерно 0,1 до примерно 10 мг/кг/мин при постоянной скорости инфузии.For oral administration, the compositions may be presented in the form of tablets containing from about 0.01 mg to about 500 mg of the active ingredient, or, in another embodiment, from about 1 mg to about 100 mg of the active ingredient. When administered intravenously, doses may vary from about 0.1 to about 10 mg/kg/min at a constant infusion rate.
Подходящие пациенты согласно настоящему изобретению включают млекопитающих пациентов. Млекопитающие по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются ими, собак, кошек, крупный рогатый скот, коз, лошадей, овец, свиней, грызунов, зайцеобразных, приматов и подобных, и включают млекопитающих в утробе матери. В одном варианте осуществления, подходящими пациентами являются люди. Пациенты-люди могут быть любого пола и на любой стадии развития.Suitable patients according to the present invention include mammalian patients. Mammals of the present invention include, but are not limited to, dogs, cats, cattle, goats, horses, sheep, pigs, rodents, lagomorphs, primates, and the like, and include mammals in the womb. In one embodiment, suitable patients are humans. Human patients can be of any gender and at any stage of development.
В другом варианте осуществления, изобретение включает использование одного или нескольких соединений по изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения состояний, перечисленных в настоящем документе.In another embodiment, the invention includes the use of one or more compounds of the invention for the preparation of a medicament for the treatment of the conditions listed herein.
Для лечения состояний, указанных выше, соединение по настоящему изобретению можно вводить как соединение само по себе. Альтернативно, фармацевтически приемлемые соли подходят для медицинского применения из-за их большей растворимости в воде по сравнению с исходным соединением.For the treatment of the conditions mentioned above, the compound of the present invention may be administered as a compound per se. Alternatively, pharmaceutically acceptable salts are suitable for medical use due to their greater aqueous solubility compared to the parent compound.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение включает фармацевтические композиции. Такие фармацевтические композиции содержат соединение по изобретению, представленное с фармацевтически приемлемым носителем. Фармацевтически приемлемый носитель включает любую подходящую дозированную форму, приемлемую для введения пациенту. Носитель может быть твердым, жидким или и тем, и другим, и может быть составлен с соединением в виде композиции разовой дозы, например, таблетки, которая может содержать от 0,05% до 95% массовых активных соединений. Соединение по настоящему изобретению может быть связано с подходящими полимерами в качестве таргетных носителей лекарственного средства. Также могут присутствовать другие фармакологически активные вещества.In another embodiment, the present invention includes pharmaceutical compositions. Such pharmaceutical compositions contain a compound of the invention, presented with a pharmaceutically acceptable carrier. A pharmaceutically acceptable carrier includes any suitable dosage form suitable for administration to a patient. The carrier may be a solid, liquid, or both, and may be formulated with the compound in a single dose formulation, eg, a tablet, which may contain from 0.05% to 95% by weight of the active compounds. The compound of the present invention may be associated with suitable polymers as targeted drug carriers. Other pharmacologically active substances may also be present.
Соединения по настоящему изобретению могут быть введены любым подходящим путем, предпочтительно в форме фармацевтической композиции, адаптированной к такому пути, и в дозе, эффективной для предполагаемого лечения. Активные соединения и композиции, например, можно вводить перорально, ректально, парентерально или местно.The compounds of the present invention may be administered by any suitable route, preferably in the form of a pharmaceutical composition adapted to such route and at a dose effective for the intended treatment. Active compounds and compositions, for example, can be administered orally, rectally, parenterally or topically.
Пероральное введение твердой дозированной формы может быть, например, представлено в дискретных единицах, таких как твердые или мягкие капсулы, пилюли, крахмальные облатки, лепешки или таблетки, каждая из которых содержит заранее определенное количество, по меньшей мере, одного соединения по настоящему изобретению. В другом варианте осуществления, пероральное введение может быть в форме порошка или гранул. В другом варианте осуществления, пероральная лекарственная форма является сублингвальной, такой как, например, лепешка. В такой твердой дозированной форме соединения по настоящему изобретению обычно объединяют с одним или несколькими адъювантами. Такие капсулы или таблетки могут содержать состав с контролируемым высвобождением. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированная форма также может содержать буферные агенты или может быть приготовлена с энтеросолюбильными покрытиями.Oral administration of a solid dosage form may, for example, be presented in discrete units such as hard or soft capsules, pills, cachets, lozenges or tablets, each containing a predetermined amount of at least one compound of the present invention. In another embodiment, oral administration may be in the form of a powder or granules. In another embodiment, the oral dosage form is sublingual, such as, for example, a lozenge. In such solid dosage form, the compounds of the present invention are usually combined with one or more adjuvants. Such capsules or tablets may contain a controlled release formulation. In the case of capsules, tablets and pills, the dosage form may also contain buffering agents or may be formulated with enteric coatings.
В другом варианте осуществления, пероральное введение может осуществляться в жидкой дозированной форме. Жидкие дозированные формы для перорального введения включают, например, фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники (например, воду). Такие композиции также могут содержать адъюванты, такие как смачивающие, эмульгирующие, суспендирующие, ароматизирующие (например, подслащивающие) и/или отдушки.In another embodiment, oral administration may be in liquid dosage form. Liquid dosage forms for oral administration include, for example, pharmaceutically acceptable emulsions, solutions, suspensions, syrups, and elixirs containing inert diluents commonly used in the art (eg, water). Such compositions may also contain adjuvants such as wetting, emulsifying, suspending, flavoring (eg sweetening) and/or flavoring agents.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение включает парентеральную дозированную форму. «Парентеральное введение» включает, например, подкожные инъекции, внутривенные инъекции, внутрибрюшинные инъекции, внутримышечные инъекции, внутригрудинные инъекции и инфузии. Препараты для инъекций (например, стерильные водные или масляные суспензии для инъекций) могут быть составлены в соответствии с известным уровнем техники с использованием подходящих диспергирующих, смачивающих агентов и/или суспендирующих агентов.In another embodiment, the present invention includes a parenteral dosage form. "Parenteral administration" includes, for example, subcutaneous injections, intravenous injections, intraperitoneal injections, intramuscular injections, intrasternal injections, and infusions. Injectable preparations (eg, sterile injectable aqueous or oily suspensions) can be formulated according to the known art using suitable dispersing, wetting and/or suspending agents.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение включает дозированную форму для местного применения. «Местное введение» включает, например, чрескожное введение, такое как чрескожные пластыри или устройства для ионтофореза, внутриглазное введение или интраназальное или ингаляционное введение. Композиции для местного применения также включают, например, гели для местного применения, спреи, мази и кремы. Состав для местного применения может включать соединение, которое усиливает абсорбцию или проникновение активного ингредиента через кожу или другие пораженные участки. Когда соединения по настоящему изобретению вводят с помощью чрескожного устройства, введение будет осуществляться с использованием пластыря либо резервуарного типа, либо пористой мембраны, либо твердой матрицы. Типовые составы для этой цели включают гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, присыпки, повязки, пены, пленки, кожные пластыри, вафли, имплантаты, губки, волокна, повязки и микроэмульсии. Также можно использовать липосомы. Типовые носители включают спирт, воду, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, глицерин, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. Могут быть включены усилители проникновения; см., например, J. Pharm. Sci., 88 (10), 955-958, by Finnin and Morgan (October 1999).In another embodiment, the present invention includes a topical dosage form. "Topical administration" includes, for example, transdermal administration, such as transdermal patches or iontophoresis devices, intraocular administration, or intranasal or inhalation administration. Topical compositions also include, for example, topical gels, sprays, ointments and creams. The topical formulation may include a compound that enhances the absorption or penetration of the active ingredient through the skin or other affected areas. When the compounds of the present invention are administered via a transdermal device, administration will be by either a reservoir-type patch, a porous membrane, or a solid matrix. Typical formulations for this purpose include gels, hydrogels, lotions, solutions, creams, ointments, powders, dressings, foams, films, skin patches, wafers, implants, sponges, fibers, dressings, and microemulsions. You can also use liposomes. Typical carriers include alcohol, water, mineral oil, liquid petrolatum, white petrolatum, glycerin, polyethylene glycol, and propylene glycol. Penetration enhancers may be included; see, for example, J. Pharm. Sci., 88 (10), 955-958, by Finnin and Morgan (October 1999).
Композиции, пригодные для местного введения в глаз, включают, например, глазные капли, где соединение по настоящему изобретению растворяют или суспендируют в подходящем носителе. Типовые составы, подходящие для глазного или ушного введения, могут быть в форме капель микронизированной суспензии или раствора в изотоническом рН-доведенном стерильном солевом растворе. Другие препараты, подходящие для глазного и ушного введения, включают мази, биоразлагаемые (например, рассасывающиеся гелевые губки, коллаген) и не биоразлагаемые (например, силиконовые) имплантаты, облатки, линзы и системы на основе частиц или пузырьков, такие как ниосомы или липосомы. Полимер, такой как поперечно сшитая полиакриловая кислота, поливиниловый спирт, гиалуроновая кислота, целлюлозный полимер, например, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза или метилцеллюлоза, или гетерополисахаридный полимер, например, гелановая камедь, могут быть включены вместе с консервантом, таки как хлорид бензалкония. Такие препараты также могут быть доставлены с помощью ионтофореза.Compositions suitable for topical administration to the eye include, for example, eye drops wherein the compound of the present invention is dissolved or suspended in a suitable vehicle. Typical formulations suitable for ophthalmic or otic administration may be in the form of drops of a micronized suspension or solution in isotonic pH-adjusted sterile saline. Other formulations suitable for ophthalmic and otic administration include ointments, biodegradable (eg, absorbable gel sponges, collagen) and non-biodegradable (eg, silicone) implants, cachets, lenses, and particle or vesicle systems such as niosomes or liposomes. A polymer such as cross-linked polyacrylic acid, polyvinyl alcohol, hyaluronic acid, a cellulose polymer such as hydroxypropyl methylcellulose, hydroxyethylcellulose or methylcellulose, or a heteropolysaccharide polymer such as gelan gum may be included along with a preservative such as benzalkonium chloride. Such drugs can also be delivered by iontophoresis.
Для интраназального введения или введения путем ингаляции активные соединения по настоящему изобретению удобно доставлять в форме раствора или суспензии из помпового распылителя, который сжимается или накачивается пациентом, или в виде аэрозольного спрея из находящегося под давлением контейнера или небулайзера, с использованием подходящего пропеллента. Составы, пригодные для интраназального введения, обычно вводят в форме сухого порошка (либо отдельно, в виде смеси, например, в сухой смеси с лактозой, либо в виде смешанной сложной частицы, например, смешанной с фосфолипидами, такими как фосфатидилхолин) из ингалятора сухого порошка или в виде аэрозольного спрея из контейнера под давлением, насоса, спрея, распылителя (предпочтительно, распылителя с использованием электрогидродинамики для получения мелкодисперсного тумана), или небулайзера, с или без использования подходящего пропеллента, такого как 1,1,1,2-тетрафторэтан или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан. Для интраназального применения порошок может содержать биоадгезивный агент, например хитозан или циклодекстрин.For intranasal or inhalation administration, the active compounds of the present invention are conveniently delivered in the form of a solution or suspension from a pump nebulizer that is compressed or pumped by the patient, or as an aerosol spray from a pressurized container or nebulizer using a suitable propellant. Formulations suitable for intranasal administration are usually administered in dry powder form (either alone, as a mixture, eg dry-mixed with lactose, or as a mixed complex particle, eg mixed with phospholipids such as phosphatidylcholine) from a dry powder inhaler or as an aerosol spray from a pressurized container, pump, spray, nebulizer (preferably an EHD nebulizer to produce a fine mist), or nebulizer, with or without the use of a suitable propellant such as 1,1,1,2-tetrafluoroethane or 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropane. For intranasal use, the powder may contain a bioadhesive agent such as chitosan or cyclodextrin.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение включает ректальную дозированную форму. Такая ректальная дозированная форма может быть в форме, например, суппозитория. Какао-масло является традиционной основой для суппозиториев, но при необходимости могут использоваться различные альтернативы.In another embodiment, the present invention includes a rectal dosage form. Such a rectal dosage form may be in the form of, for example, a suppository. Cocoa butter is the traditional base for suppositories, but various alternatives can be used if necessary.
Также можно использовать другие материалы-носители и способы введения, известные в фармацевтике. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно приготовить с помощью любых хорошо известных фармацевтических методик, таких как эффективные методики составления и процедуры введения. Вышеупомянутые соображения в отношении эффективных методик составления и введения хорошо известны в данной области техники и описаны в стандартных учебниках. Составление лекарственных средств обсуждается, например, в Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, 1975; Liberman et al., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; and Kibbe et al., Eds., Handbook of Pharmaceutical Excipients (3rd Ed.), American Pharmaceutical Association, Washington, 1999.Other carrier materials and routes of administration known in the pharmaceutical art may also be used. Pharmaceutical compositions of the present invention can be prepared using any of the well-known pharmaceutical techniques, such as efficient formulation techniques and administration procedures. The above considerations for efficient drafting and insertion techniques are well known in the art and are described in standard textbooks. Drug formulation is discussed, for example, in Hoover, John E., Remington 's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, 1975; Liberman et al., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, NY, 1980; and Kibbe et al., Eds., Handbook of Pharmaceutical Excipients (3rd Ed.), American Pharmaceutical Association, Washington, 1999.
Соединения по настоящему изобретению можно использовать отдельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами при лечении различных состояний или болезненных состояний. Соединение по настоящему изобретению и другое терапевтическое средство можно вводить одновременно (либо в одной и той же дозированной форме, либо в отдельных дозированных формах) или последовательно. Два или несколько соединений можно вводить одновременно, параллельно или последовательно. Кроме того, одновременное введение может осуществляться путем смешивания соединений перед введением или путем введения соединений в один и тот же момент времени, но в разные анатомические участки, или с использованием разных путей введения. Фразы «параллельное введение», «совместное введение», «одновременное введение» и «вводить одновременно» означают, что соединения вводят в комбинации.The compounds of the present invention can be used alone or in combination with other therapeutic agents in the treatment of various conditions or disease states. The compound of the present invention and the other therapeutic agent may be administered simultaneously (either in the same dosage form or in separate dosage forms) or sequentially. Two or more compounds can be administered simultaneously, in parallel or sequentially. In addition, simultaneous administration can be carried out by mixing the compounds before administration, or by administering the compounds at the same time but at different anatomical sites, or using different routes of administration. The phrases "parallel administration", "co-administration", "simultaneous administration" and "administer simultaneously" mean that the compounds are administered in combination.
Настоящее изобретение включает использование комбинации соединения по изобретению и одного или нескольких дополнительных терапевтических агентов. Если вводится комбинация активных агентов, то их можно вводить последовательно или одновременно, в отдельной дозированной форме или в сочетании в одной дозированной форме. Соответственно, настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие некоторое количество: (а) первого агента, содержащего соединение по изобретению или фармацевтически приемлемую соль соединения; (b) второй терапевтический агент; и (c) фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтические композиции по изобретению могут также включать подходящие эксципиенты, разбавители, носители и носители, а также другие фармацевтически активные агенты, в зависимости от предполагаемого использования. В фармацевтических композициях могут применяться твердые или жидкие фармацевтически приемлемые носители, разбавители, носители или эксципиенты. Иллюстративные твердые носители включают крахмал, лактозу, дигидрат сульфата кальция, сульфат кальция, сахарозу, тальк, желатин, пектин, аравийскую камедь, стеарат магния и стеариновую кислоту. Иллюстративные жидкие носители включают сироп, арахисовое масло, оливковое масло, солевой раствор и воду. Носитель или разбавитель может включать подходящий материал с пролонгированным высвобождением, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, отдельно или с воском. Когда используется жидкий носитель, препарат может быть в форме сиропа, эликсира, эмульсии, мягкой желатиновой капсулы, стерильной жидкости для инъекций (например, раствора) или не водной или водной жидкой суспензии.The present invention includes the use of a combination of a compound of the invention and one or more additional therapeutic agents. If a combination of active agents is administered, they may be administered sequentially or simultaneously, in a separate dosage form, or in combination in a single dosage form. Accordingly, the present invention also includes pharmaceutical compositions containing an amount of: (a) a first agent containing a compound of the invention or a pharmaceutically acceptable salt of the compound; (b) a second therapeutic agent; and (c) a pharmaceutically acceptable carrier. Pharmaceutical compositions of the invention may also include suitable excipients, diluents, carriers and carriers, as well as other pharmaceutically active agents, depending on the intended use. Pharmaceutical compositions may use solid or liquid pharmaceutically acceptable carriers, diluents, carriers or excipients. Illustrative solid carriers include starch, lactose, calcium sulfate dihydrate, calcium sulfate, sucrose, talc, gelatin, pectin, gum arabic, magnesium stearate, and stearic acid. Exemplary liquid carriers include syrup, peanut butter, olive oil, saline, and water. The carrier or diluent may include a suitable sustained release material such as glyceryl monostearate or glyceryl distearate alone or with a wax. When a liquid carrier is used, the formulation may be in the form of a syrup, elixir, emulsion, soft gelatin capsule, sterile injectable liquid (eg, solution), or non-aqueous or aqueous liquid suspension.
Доза фармацевтической композиции может содержать, по меньшей мере, терапевтически эффективное количество агента, ингибирующего SARS-CoV-2, и предпочтительно состоит из одной или нескольких фармацевтических дозированных единиц. Выбранная доза может быть введена млекопитающему, например пациенту-человеку, нуждающемуся в лечении, опосредованном ингибированием активности коронавируса, родственного SARS-CoV-2, любым известным или подходящим способом введения дозы, включая местное, например, в виде мази или крема; пероральное, ректальное, например, в виде суппозитория; парентеральное, путем инъекции; внутривенное; или непрерывное путем интравагинальной, интраназальной, внутрибронхиальной, интраауральной или внутриглазной инфузии.The dose of the pharmaceutical composition may contain at least a therapeutically effective amount of an agent that inhibits SARS-CoV-2, and preferably consists of one or more pharmaceutical dosage units. The selected dose may be administered to a mammal, e.g., a human patient, in need of treatment mediated by inhibition of SARS-CoV-2 related coronavirus activity by any known or suitable dosing route, including topical, e.g., as an ointment or cream; oral, rectal, for example, in the form of a suppository; parenteral, by injection; intravenous; or continuous by intravaginal, intranasal, intrabronchial, intraaural or intraocular infusion.
Фразы «терапевтически эффективное количество» и «эффективное количество» предназначены для обозначения количества агента по изобретению, которое при введении млекопитающему, нуждающемуся в лечении, является достаточным для лечения повреждений или болезненных состояний, облегченных ингибированием репликации вируса SARS-CoV-2. Количество данного агента, ингибирующего SARS-CoV-2, используемого в способе по настоящему изобретению, которое будет терапевтически эффективным, будет варьироваться в зависимости от таких факторов, как конкретный агент, ингибирующий SARS-CoV-2, болезненное состояние и его тяжесть, личность и характеристики нуждающегося в этом млекопитающего, количество которых может быть определено обычным образом специалистами в данной области техники.The phrases "therapeutically effective amount" and "effective amount" are intended to mean an amount of an agent of the invention which, when administered to a mammal in need of treatment, is sufficient to treat injuries or disease states ameliorated by inhibition of SARS-CoV-2 virus replication. The amount of a given SARS-CoV-2 inhibitory agent used in the method of the present invention that will be therapeutically effective will vary depending on factors such as the particular SARS-CoV-2 inhibitory agent, disease state and severity, personality and the characteristics of the mammal in need thereof, the amount of which can be determined in the usual manner by those skilled in the art.
Следует понимать, что фактические дозировки агентов, ингибирующих SARS-CoV-2, используемых в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, будут выбираться в соответствии со свойствами конкретного применяемого агента, конкретной составленной композиции, способом и конкретным сайтом введения, и лечимым хозяином и состоянием. Оптимальные дозировки для данного набора условий могут быть установлены специалистами в данной области техники с использованием обычных тестов для определения дозировки. Для перорального введения, например, доза, которую можно использовать, составляет от примерно 0,01 до примерно 1000 мг/кг массы тела, предпочтительно, от примерно 0,1 до примерно 500 мг/кг массы тела, и даже более предпочтительно, от примерно 1 до примерно 500 мг/кг массы тела при повторении курсов лечения через соответствующие промежутки времени. Для внутривенного введения можно использовать дозу до 5 граммов в сутки. Внутривенное введение может происходить с перерывами в течение дня или непрерывно в течение 24-часового периода.It should be understood that the actual dosages of the SARS-CoV-2 inhibitory agents used in the pharmaceutical compositions of the present invention will be selected according to the properties of the particular agent employed, the particular composition formulated, the manner and site of administration, and the host being treated and the condition being treated. Optimal dosages for a given set of conditions can be determined by those skilled in the art using conventional dosage determination tests. For oral administration, for example, the dose that can be used is from about 0.01 to about 1000 mg/kg of body weight, preferably from about 0.1 to about 500 mg/kg of body weight, and even more preferably from about 1 to about 500 mg/kg of body weight with repeated courses of treatment at appropriate intervals. For intravenous administration, a dose of up to 5 grams per day can be used. Intravenous administration may occur intermittently throughout the day or continuously over a 24 hour period.
Термины «количество, ингибирующее цитохром P450» и «количество, ингибирующее активность фермента цитохрома P450», используемые в настоящем документе, относятся к количеству соединения, необходимому для снижения активности ферментов цитохрома P450 или определенных изоформ фермента цитохрома P450 в присутствии такого соединения. Снижает ли конкретное соединение активность фермента цитохрома P450 и количество такого соединения, необходимое для этого, можно определить способами, известными специалистам в данной области техники, и способами, описанными в данном документе.The terms "cytochrome P450 inhibitory amount" and "cytochrome P450 enzyme activity inhibitory amount" as used herein refer to the amount of a compound required to reduce the activity of cytochrome P450 enzymes or certain cytochrome P450 enzyme isoforms in the presence of such a compound. Whether a particular compound reduces the activity of the cytochrome P450 enzyme, and the amount of such compound required to do so, can be determined by methods known to those skilled in the art and by the methods described herein.
Функции белков, необходимые для репликации и транскрипции коронавируса, кодируются так называемым геном «репликазы». Два перекрывающихся полипротеина транслируются из этого гена и интенсивно процессируются вирусными протеазами. C-проксимальная область процессируется в одиннадцати консервативных междоменных соединениях основной или «3C-подобной» протеазой коронавируса. Название «3C-подобная» протеаза происходит от определенного сходства между ферментом коронавируса и хорошо известными 3C протеазами пикорнавируса. К нему относятся предпочтения субстратов, использование цистеина в качестве нуклеофила в активном сайте в катализе, и сходство в их предполагаемых общих полипептидных складках. Сравнение аминокислотной последовательности 3C-подобной протеазы коронавируса, ассоциированной с SARS-CoV-2, с аминокислотной последовательностью других известных коронавирусов, таких как SARS-CoV, показывает, что аминокислотные последовательности имеют примерно 96% общей гомологии.The protein functions required for the replication and transcription of the coronavirus are encoded by the so-called "replicase" gene. Two overlapping polyproteins are translated from this gene and are extensively processed by viral proteases. The C-proximal region is processed at eleven conserved cross-domain junctions by a major or "3C-like" coronavirus protease. The name "3C-like" protease comes from a certain similarity between the coronavirus enzyme and the well-known picornavirus 3C proteases. These include substrate preferences, the use of cysteine as the nucleophile at the active site in catalysis, and similarities in their putative common polypeptide folds. Comparison of the amino acid sequence of the SARS-CoV-2-associated coronavirus 3C-like protease with the amino acid sequence of other known coronaviruses such as SARS-CoV shows that the amino acid sequences share approximately 96% overall homology.
Аминокислоты субстрата в сайте расщепления протеазой пронумерованы от N до C-конца следующим образом: -P3-P2-P1-P1'-P2'-P3', причем расщепление происходит между остатками P1 и P1' (Schechter & Berger, 1967). Специфичность субстрата во многом определяется положениями P2, P1 и P1'. Специфичность сайта расщепления основной протеазой коронавируса является высококонсервативной с потребностью в глутамине на P1 и малой аминокислоте на P1' [Journal of General Virology, 83, pp. 595-599 (2002)].The substrate amino acids at the protease cleavage site are numbered from N to the C-terminus as follows: -P3-P2-P1-P1 ' -P2 ' -P3 ' , with the cleavage occurring between residues P1 and P1' (Schechter & Berger, 1967). Substrate specificity is largely determined by the P2, P1 and P1' positions. Cleavage site specificity for the major coronavirus protease is highly conserved with a requirement for glutamine at P1 and a small amino acid at P1' [ Journal of General Virology , 83, pp. 595-599 (2002)].
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены в соответствии со способами, изложенными на схемах реакций 1-3 ниже.The compounds of the present invention can be prepared according to the methods set forth in Reaction Schemes 1-3 below.
Приведенные ниже схемы дополнительно иллюстрируют и являются примерами соединения по настоящему изобретению и способов получения таких соединений. Следует понимать, что объем настоящего изобретения никоим образом не ограничивается объемом следующих примеров и приготовлений. В следующих примерах, молекулы с одним хиральным центром могут существовать в виде одного энантиомера или рацемической смеси. Эти молекулы с двумя или несколькими хиральными центрами могут существовать в виде одного энантиомера, рацемической или иной смеси двух энантиомеров или в виде различных смесей диастереомеров. Такие энантиомеры, рацематы и диастереомеры могут быть получены и/или разделены способами, известными специалистам в данной области техники. Специалисту в данной области техники будет понятно, что определенные синтетические манипуляции могут эпимеризовать или рацемизировать стереоцентр, и условия синтеза могут быть выбраны так, чтобы стимулировать или препятствовать такой эпимеризации или рацемизации.The following schemes further illustrate and exemplify a compound of the present invention and methods for preparing such compounds. It should be understood that the scope of the present invention is in no way limited by the scope of the following examples and preparations. In the following examples, molecules with a single chiral center may exist as a single enantiomer or racemic mixture. These molecules with two or more chiral centers may exist as a single enantiomer, a racemic or other mixture of two enantiomers, or as various mixtures of diastereomers. Such enantiomers, racemates and diastereomers may be prepared and/or resolved by methods known to those skilled in the art. One of skill in the art will appreciate that certain synthetic manipulations may epimerize or racemize the stereocenter, and synthesis conditions may be chosen to promote or inhibit such epimerization or racemization.
Схема 1 иллюстрирует последовательность синтеза для получения соединений формулы I как показано, где N-BOC метиловый эфир формулы 1 (WO 2005/113580) превращают в первичный амид формулы 3 (N-BOC является N-трет-бутоксикарбонил). Это может осуществляться непосредственно, например, обработкой аммиаком (NH3) в герметично закрытом сосуде, в растворителе, таком как метанол или этанол, например, необязательно в присутствии добавок, таких как хлорид кальция (CaCl2) или диметоксид магния, Mg(OMe)2.
Схема 1
Превращение соединения формулы 1 в соединение формулы 3 также можно проводить предварительным превращением в карбоновую кислоту формулы 2 (WO 2005/113580). В этом случае, compound формулы 2 может быть превращено в соединение формулы 3 с применением способов, хорошо известных специалистам в данной области техники. Например, соединение формулы 2 может быть обработано реагентом, таким как гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ), изобутилхлорформиат, гидрохлорид 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида (EDCI) и гидроксибензотриазол (HOBt) или 1,1'-карбонилдиимидазол (КДИ), необязательно в присутствии основания, такого как N, N-диизопропилэтиламин (ДИЭА), 4-метилморфолин (NMM) или триэтиламин (ТЭА), с последующей обработкой NH3, вводимым в виде газа или раствора в совместимом с реакцией растворителе, или солью NH3, такой как ацетат аммония или хлорид аммония в присутствии основания, такого как N, N-диизопропилэтиламин, 4-метилморфолин или триэтиламин. подходящие растворители включают, но не ограничиваются ими, дихлорметан (CH2Cl2), N, N-диметилформамид (ДМФ), тетрагидрофуран (ТГФ) или ацетонитрил (CH3CN).The conversion of a compound of
Соединение формулы 3 может быть лишено N-защиты с получением амина формулы 4 с применением способов, хорошо известных специалисту в данной области техники для проведения таких снятий защиты. Часто используют кислые реагенты, такие как гидрохлорид, метансульфоновая кислота или трифторуксусная кислота, обычно в совместимом с реакцией растворителе, таком как CH2Cl2, 1,4-диоксан, 1,2-дихлорэтан или CH3CN. Специалист в данной области техники поймет, что соединение формулы 4 часто получают в виде кислотно-аддитивной соли. Соединение формулы 4 затем может быть превращено в соединение формулы 6 обработкой соединения N-защищенной аминокислоты формулы 5 в подходящих условиях. такие способы хорошо известны специалисту в данной области техники, и в общем могут быть выбраны стандартные условия пептидного сочетания.The compound of formula 3 may be deprotected from the N -protection to give the amine of formula 4 using methods well known to one of skill in the art for such deprotections. Acidic reagents are often used, such as hydrochloride, methanesulfonic acid, or trifluoroacetic acid, usually in a solvent compatible with the reaction, such as CH 2 Cl 2 , 1,4-dioxane, 1,2-dichloroethane, or CH 3 CN. One skilled in the art will appreciate that a compound of formula 4 is often prepared as an acid addition salt. The compound of formula 4 can then be converted to a compound of
Соединение формулы 6 может быть лишено N-защиты с получением амина формулы 7 с применением способов, хорошо известных специалисту в данной области техники для проведения таких снятий защиты. Часто используют кислые реагенты, такие как гидрохлорид, метансульфоновая кислота или трифторуксусная кислота, обычно в совместимом с реакцией растворителе, таком как CH2Cl2, 1,4-диоксан, 1,2-дихлорэтан или CH3CN. Специалист в данной области техники поймет, что соединение формулы 7 часто получают в виде кислотно-аддитивной соли. Соединение формулы 7 затем могут быть превращены в соединение формулы 9 обработкой карбоновой кислотой формулы 8 в подходящих условиях. Такие способы хорошо известны специалисту в данной области техники. Например, если X=атом хлора, карбоновая кислота известна как хлорангидрид, и реакцию проводят в присутствии основания для потребления гидрогалогенида HX, полученного в качестве побочного продукта реакции. Примеры подходящих оснований включает, но не ограничиваются ими, третичные амины, такие как 4-метилморфолин, 2,6-диметилпиридин или N, N-диизопропилэтиламин, или неорганические основания, такие как оксид магния (MgO), карбонат натрия (Na2CO3) или бикарбонат калия (KHCO3). подходящие растворители включают, но не ограничиваются ими, CH2Cl2, ДМФ, ТГФ или CH3CN. Если X=OH, обычно применяют реагент или комбинации реагентов для того, чтобы способствовать реакции карбоновой кислоты 8. Специалист в данной области техники может выбрать для применения, например, карбодиимидного реагента, такого как гидрохлорид 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида (EDCI) или N, N'-дициклогексилкарбодиимид (ДЦК), необязательно в присутствии вспомогательного нуклеофила, такого как гидроксибензотриазол (HOBt) или 2-гидроксипиридин-N-оксид (HOPO). Затем, если X=OH, специалист в данной области техники может выбрать для применения реагенты, которые подходят для образования смешанных карбоксильных/карбоновых ангидридов, таких как КДИ, изобутил или этил хлорформиат, часто в присутствии основания, такого как описано выше. Подходящие растворители включают, но не ограничиваются ими, CH2Cl2, ТГФ, или CH3CN. Другим подходом, обычно применяемым специалистом в данной области техники, когда X=OH, является обработка карбоновой кислоты формулы 8 хлоридом карбоновой кислоты, например, таким как Me3CCOCl, в присутствии основания, такого как описано выше, с получением смешанного карбонового ангидрида формулы R3C(O)O(O)CCMe3. Подходящие растворители включают, но не ограничиваются ими, CH2Cl2, ТГФ, или CH3CN. Во многих случаях, возможно применять симметрический ангидрид желаемой карбоновой кислоты формулы 8 для проведения реакции, необязательно в присутствии основания, такого как описано выше, в этом случае X=O(O)CR3 и поэтому карбоновой кислотой формулы 8 является R3C(O)O(O)CR3. Подходящие растворители включают, но не ограничиваются ими, CH2Cl2, ТГФ, или CH3CN.The compound of
Соединение формулы 9 может быть превращено в соединение формулы I обработкой в условиях дегидратации, хорошо известных специалистам в данной области техники. Часто эту стадию дегидратации можно выполнять с использованием избытка трифторуксусного ангидрида или оксихлорида фосфора, обычно в присутствии основания, такого как пиридин, N, N-диизопропилэтиламин, 4-метилморфолин или триэтиламин.The compound of formula 9 can be converted to the compound of formula I by treatment under dehydration conditions well known to those skilled in the art. Often this dehydration step can be performed using an excess of trifluoroacetic anhydride or phosphorus oxychloride, usually in the presence of a base such as pyridine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine or triethylamine.
Специалист в данной области техники будет знать, что N-BOC-защищенные аминокислоты формулы 5 известны в химической литературе, коммерчески доступны и могут быть получены из соответствующих известных и коммерчески доступных аминокислот специалистом в данной области техники с использованием хорошо известных процедур синтеза N-защищенных аминокислот. Точно так же, специалист в данной области техники поймет, что соединения карбоновой кислоты формулы 8 могут быть известны в химической литературе, и/или коммерчески доступны, и/или могут быть получены опубликованными способами или по аналогии с опубликованными способами.The person skilled in the art will be aware that the N-BOC protected amino acids of Formula 5 are known in the chemical literature, are commercially available, and can be prepared from the corresponding known and commercially available amino acids by one of skill in the art using well known N-protected amino acid synthesis procedures. . Similarly, one of skill in the art will appreciate that carboxylic acid compounds of formula 8 may be known in the chemical literature and/or commercially available and/or may be prepared by published methods or by analogy with published methods.
Специалист в данной области техники поймет, что стадии формирования связи в схеме 1 могут проводиться в другом порядке с соответствующими соображениями, например, как показано на схеме 2.One skilled in the art will appreciate that the bond formation steps in
Схема 2
На схеме 2, соединение формулы 3 превращают в соединение формулы 10 обработкой в условиях дегидратации, хорошо известных специалисту в данной области техники. Часто эту стадию дегидратации проводят с применением избытка трифторуксусного ангидрида или оксихлорида фосфора, обычно в присутствии основания, такого как пиридин, N, N-диизопропилэтиламин, 4-метилморфолин или триэтиламин. Соединение формулы 10 лишают N-защиты с получением амина формулы 11 с применением способов, хорошо известных специалисту в данной области техники, для проведения таких снятий защиты. Часто используют кислые реагенты, такие как гидрохлорид, метансульфоновая кислота, или трифторуксусная кислота, обычно в совместимом с реакцией растворителе, таком как CH2Cl2, 1,4-диоксан, 1,2-дихлорэтан или CH3CN. Специалист в данной области техники поймет, что соединение формулы 11 часто получают в виде кислотно-аддитивной соли. Соединение формулы 11 затем может быть превращено в соединение формулы I обработкой соединением формулы 12 в подходящих условиях. Такие способы хорошо известны специалисту в данной области техники, и в общем могут быть выбраны стандартные условия пептидного сочетания. Соединения формулы 12 исключительно хорошо известны в химической литературе, и специалист в данной области техники может выбрать получение любого данного соединения формулы 12 с применением способов, аналогичных тем, которые описаны в химической литературе.In
Специалист в данной области техники поймет, что стадии образования связей на схемах 1 и 2 могут проводиться в другом, отличном, порядке с учетом соответствующих факторов, например, как показано на Схеме 3.One skilled in the art will appreciate that the bonding steps in
Схема 3Scheme 3
На схеме 3 соединение формулы 4 затем может быть превращено в соединение формулы 9 обработкой соединением формулы 12 в подходящих условиях. Такие способы хорошо известны специалистам в данной области техники, и, как правило, можно выбрать стандартные условия связывания пептидов. Соединения формулы 12 исключительно хорошо известны в химической литературе, и специалист в данной области техники может выбрать получение любого данного соединения формулы 12 с использованием способов, аналогичных описанным в химической литературе. Соединение формулы 9 затем превращают в соединение формулы I обработкой в условиях дегидратации, хорошо известных специалистам данной области техники. Часто эту стадию дегидратации можно выполнять с использованием избытка трифторуксусного ангидрида или оксихлорида фосфора, обычно в присутствии основания, такого как пиридин, N, N-диизопропилэтиламин, 4-метилморфолин или триэтиламин.In Scheme 3, a compound of formula 4 can then be converted to a compound of formula 9 by treatment with a compound of formula 12 under suitable conditions. Such methods are well known to those skilled in the art and generally standard peptide binding conditions can be selected. Compounds of formula 12 are exceptionally well known in the chemical literature, and one skilled in the art may choose to prepare any given compound of formula 12 using methods analogous to those described in the chemical literature. The compound of formula 9 is then converted to a compound of formula I by treatment under dehydration conditions well known to those skilled in the art. Often this dehydration step can be performed using an excess of trifluoroacetic anhydride or phosphorus oxychloride, usually in the presence of a base such as pyridine, N,N-diisopropylethylamine, 4-methylmorpholine or triethylamine.
Специалист в данной области техники поймет, что дальнейшие перестановки стадий образования связи и манипуляции с функциональными группами на схемах 1, 2 и 3 могут быть применены с учетом соответствующих факторов. Такие перестановки в выборе порядка стадий хорошо известны в химической литературе, и при желании специалист в данной области техники может обратиться к химической литературе для получения дополнительных указаний. Специалист в данной области техники поймет, что можно сделать другой выбор защитных групп и реагентов для осуществления различных превращений.One skilled in the art will appreciate that further permutations of the bonding steps and manipulation of functional groups in
ПРИМЕРЫEXAMPLES
Методики экспериментаExperimental methods
Следующее иллюстрирует синтез различных соединений по настоящему изобретению. Дополнительные соединения в объеме данного изобретения могут быть получены с использованием способов, проиллюстрированных в этих примерах, либо по отдельности, либо в сочетании со способами, обычно известными в данной области техники. Все исходные материалы в этих примерах получения и примерах либо коммерчески доступны, либо могут быть получены способами, известными в данной области техники, или описанными в настоящем документе.The following illustrates the synthesis of various compounds of the present invention. Additional compounds within the scope of this invention may be prepared using the methods illustrated in these examples, either alone or in combination with methods generally known in the art. All starting materials in these Preparations and Examples are either commercially available or can be prepared by methods known in the art or described herein.
Все реакции проводят при непрерывном перемешивании в атмосфере азота или аргона, если не указано иное. При необходимости, реакционные устройства сушат в динамическом вакууме с использованием тепловой пушки и безводных растворителей (продукты Sure-Seal™ от Aldrich Chemical Company, Milwaukee, Wisconsin или продукты DriSolv™ от EMD Chemicals, Gibbstown, NJ). В некоторых случаях коммерческие растворители пропускают через колонки, заполненные молекулярными ситами 4Å, пока не будут достигнуты следующие стандарты контроля качества для воды: а) <100 ч/млн. для дихлорметана, толуола, N, N-диметилформамида и тетрагидрофурана; b) <180 ч./млн. для метанола, этанола, 1,4-диоксана и диизопропиламина. Для очень чувствительных реакций растворители дополнительно обрабатывают металлическим натрием, гидридом кальция или молекулярными ситами и дистиллируют непосредственно перед использованием. Другие коммерческие растворители и реагенты используют без дополнительной очистки. Для эталонных методик синтеза в других примерах или способах, условия реакции (время реакции и температура) могут варьироваться. Как правило, продукты сушат в вакууме перед тем, как использовать их в дальнейших реакциях или отправить на биологические испытания.All reactions are carried out with continuous stirring under nitrogen or argon, unless otherwise indicated. If necessary, the reaction devices are dried under dynamic vacuum using a heat gun and anhydrous solvents (Sure-Seal™ products from Aldrich Chemical Company, Milwaukee, Wisconsin or DriSolv™ products from EMD Chemicals, Gibbstown, NJ). In some cases, commercial solvents are passed through columns packed with 4Å molecular sieves until the following quality control standards for water are achieved: a) <100 ppm. for dichloromethane, toluene, N,N -dimethylformamide and tetrahydrofuran; b) <180 ppm for methanol, ethanol, 1,4-dioxane and diisopropylamine. For very sensitive reactions, the solvents are further treated with sodium metal, calcium hydride or molecular sieves and distilled immediately before use. Other commercial solvents and reagents were used without further purification. For reference synthesis procedures in other examples or methods, the reaction conditions (reaction time and temperature) may vary. Typically, products are vacuum dried before being used in further reactions or submitted for biological testing.
Если указано, реакции нагревают микроволновым излучением с использованием микроволн Biotage Initiator или Personal Chemistry Emrys Optimizer. За ходом реакции следят с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ), жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХМС), высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и/или газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХМС). ТСХ выполняют на предварительно покрытых пластинах силикагеля с индикатором флуоресценции (длина волны возбуждения 254 нм) и визуализируют в УФ-свете и/или с I2, KMnO4, CoCl2, фосфоромолибденовой кислотой и/или пятнами молибдата церия и аммония. Данные ЖХМС получают на приборе Agilent 1100 Series с автопробоотборником Leap Technologies, колонками Gemini C18, градиентами ацетонитрил/вода и модификаторами трифторуксусная кислота, муравьиная кислота или гидроксид аммония. Элюат колонки анализируют с использованием масс-спектрометра Waters ZQ, сканирующего в режимах как положительных, так и отрицательных ионов, от 100 до 1200 Да. Используют и другие подобные инструменты. Данные ВЭЖХ обычно получают на приборе Agilent 1100 Series с использованием указанных колонок, градиентов ацетонитрил/вода и модификаторов трифторуксусная кислота или гидроксид аммония. Данные ГХМС получают с использованием печи Hewlett Packard 6890 с инжектором HP 6890, колонкой HP-1 (12 м x 0,2 мм x 0,33 мкм) и газом-носителем гелием. Образец анализируют на масс-селективном детекторе HP 5973 со сканированием от 50 до 550 Да с использованием электронной ионизации. Очистку проводят способом средне эффективной жидкостной хроматографии (СЭЖХ) с использованием инструментов Isco CombiFlash Companion, AnaLogix IntelliFlash 280, Biotage SP1 или Biotage Isolera One и предварительно упакованных картриджей с диоксидом кремния Isco RediSep или Biotage Snap. Хиральную очистку выполняют с помощью хиральной сверхкритической жидкостной хроматографии (СЖХ), обычно с использованием инструментов Berger или Thar; колонок, таких как колонки ChiralPAK-AD, -AS, -IC, Chiralcel-OD, или -OJ; и смеси CO 2 с метанолом, этанолом, 2-пропанолом или ацетонитрилом, отдельно или модифицированные с использованием трифторуксусной кислоты или пропан-2-амина. УФ определение используют для запуска сбора фракций. Для эталонных процедур синтеза в других примерах или методах, очистки могут варьироваться: в общем, растворители и соотношения растворителей, используемые для элюентов/градиентов, выбирают так, чтобы обеспечить подходящие Rf или время удержания.If indicated, reactions are microwave heated using Biotage Initiator or Personal Chemistry Emrys Optimizer microwaves. The progress of the reaction is followed by thin layer chromatography (TLC), liquid chromatography-mass spectrometry (LCMS), high performance liquid chromatography (HPLC) and/or gas chromatography-mass spectrometry (GCMS). TLC is performed on pre-coated silica gel plates with a fluorescence indicator (excitation wavelength 254 nm) and visualized under UV light and/or with I 2 , KMnO 4 , CoCl 2 , phosphomolybdic acid and/or cerium and ammonium molybdate stains. LCMS data were obtained on an Agilent 1100 Series instrument with a Leap Technologies autosampler, Gemini C18 columns, acetonitrile/water gradients, and modifiers trifluoroacetic acid, formic acid, or ammonium hydroxide. The column eluate is analyzed using a Waters ZQ mass spectrometer scanning in both positive and negative ion modes, from 100 to 1200 Da. Other similar tools are also used. HPLC data are typically obtained on an Agilent 1100 Series instrument using the indicated columns, acetonitrile/water gradients, and trifluoroacetic acid or ammonium hydroxide modifiers. GCMS data were obtained using a Hewlett Packard 6890 oven with HP 6890 injector, HP-1 column (12 m x 0.2 mm x 0.33 µm) and helium carrier gas. The sample is analyzed on a mass selective detector HP 5973 scanning from 50 to 550 Da using electron ionization. Purification is performed by medium efficiency liquid chromatography (MELC) using Isco CombiFlash Companion, AnaLogix IntelliFlash 280, Biotage SP1, or Biotage Isolera One instruments and prepackaged Isco RediSep or Biotage Snap silica cartridges. Chiral purification is performed by chiral supercritical liquid chromatography (SLC), usually using Berger or Thar instruments; columns such as ChiralPAK-AD, -AS, -IC, Chiralcel-OD, or -OJ columns; and mixtures of CO 2 with methanol, ethanol, 2-propanol or acetonitrile alone or modified with trifluoroacetic acid or propane-2-amine. UV detection is used to trigger the collection of fractions. For reference synthesis procedures in other examples or methods, purifications may vary: in general, solvents and solvent ratios used for eluents/gradients are chosen to provide suitable R f or retention times.
Данные масс-спектрометрии получают из анализа ЖХМС. Масс-спектрометрию (МС) проводят с использованием источников химической ионизации при атмосферном давлении (ХИАД), ионизации электрораспылением (ИЭР), ионизации электронным ударом (ЭУ) или ионизации электронным рассеянием (ЭР). Химические сдвиги протонной ядерной магнитной спектроскопии (1H ЯМР) даны в частях на миллион в слабом поле от тетраметилсилана и зарегистрированы на 300, 400, 500 или 600 МГц спектрометрах Varian, Bruker или Jeol. Химические сдвиги выражают в частях на миллион (ч./млн., δ) со ссылкой на остаточные пики дейтерированного растворителя (хлороформ, 7,26 ч./млн.; CD2HOD, 3,31 ч./млн.; ацетонитрил-d 2, 1,94 ч./млн.; диметилсульфоксид-d 5, 2,50 ч./млн.; DHO, 4,79 ч./млн.). Формы пиков описаны следующим образом: с, синглет; д, дублет; т, триплет; кв, квартет; квинт, квинтет; м, мультиплет; шс, широкий синглет; вид., видимый. Аналитические данные СЖХ обычно получают на аналитическом приборе Berger, как описано выше. Данные по оптическому вращению получают на поляриметре PerkinElmer модель 343 с использованием ячейки 1 дм. Микроанализы выполняют Quantitative Technologies Inc. и полученные данные составляют в пределах 0,4% от расчетных значений.Mass spectrometry data is obtained from LCMS analysis. Mass spectrometry (MS) is carried out using atmospheric pressure chemical ionization (APCI), electrospray ionization (ESI), electron impact ionization (EI), or electron scattering ionization (ES) sources. Proton nuclear magnetic spectroscopy ( 1 H NMR) chemical shifts are given in ppm downfield from tetramethylsilane and recorded on 300, 400, 500, or 600 MHz Varian, Bruker, or Jeol spectrometers. Chemical shifts are expressed in parts per million (ppm, δ) with reference to the residual peaks of the deuterated solvent (chloroform, 7.26 ppm; CD 2 HOD, 3.31 ppm; acetonitrile- d 2 , 1.94 ppm; dimethylsulfoxide- d 5 , 2.50 ppm; DHO, 4.79 ppm). Peak shapes are described as follows: s, singlet; e, doublet; t, triplet; square, quartet; quint, quintet; m, multiplet; shs, wide singlet; view, visible. SLC analytical data are usually obtained on a Berger analytical instrument as described above. Optical rotation data were obtained on a PerkinElmer model 343 polarimeter using a 1 dm cell. Microanalyses are performed by Quantitative Technologies Inc. and the data obtained is within 0.4% of the calculated values.
Если не указано иное, химические реакции проводят при комнатной температуре (примерно 23 градуса Цельсия).Unless otherwise noted, chemical reactions are carried out at room temperature (about 23 degrees Celsius).
Если не указано иное, все реагенты получают коммерчески и использовались без дополнительной очистки, или получают способами, известными в литературе.Unless otherwise indicated, all reagents are commercially available and used without further purification, or prepared by methods known in the literature.
Термины «концентрированный», «выпаренный» и «концентрированный в вакууме» относятся к удалению растворителя при пониженном давлении на роторном испарителе с температурой бани менее 60°C. Аббревиатуры «мин» и «ч» обозначают «минуты» и «часы» соответственно. Термин «ТСХ» относится к тонкослойной хроматографии, «комнатная температура или температура окружающей среды» означает температуру от 18 до 25°C, «ГХМС» относится к газовой хроматографии-масс-спектрометрии, «ЖХМС» относится к жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии, «УЭЖХ» относится к ультраэффективной жидкостной хроматографии, «ВЭЖХ» относится к высокоэффективной жидкостной хроматографии, и «СЖХ» относится к сверхкритической жидкостной хроматографии.The terms "concentrated", "evaporated" and "concentrated in vacuo " refer to the removal of the solvent under reduced pressure on a rotary evaporator with a bath temperature of less than 60°C. The abbreviations "min" and "h" stand for "minutes" and "hours" respectively. The term "TLC" refers to thin layer chromatography, "room temperature or ambient temperature" means a temperature of 18 to 25°C, "GCMS" refers to gas chromatography-mass spectrometry, "LCMS" refers to liquid chromatography-mass spectrometry, "UPLC" refers to ultra high performance liquid chromatography, "HPLC" refers to high performance liquid chromatography, and "SLC" refers to supercritical liquid chromatography.
Гидрогенизация может выполняться в шейкере Парра под давлением газообразного водорода или в проточном аппарате для гидрогенизации Thales-nano H-Cube при полном водороде и скорости потока 1-2 мл/мин при заданной температуре.Hydrogenation can be performed in a Parr shaker under hydrogen gas pressure or in a Thales-nano H-Cube hydrogenation flow apparatus at full hydrogen and a flow rate of 1-2 ml/min at a given temperature.
Время удержания ВЭЖХ, УЭЖХ, ЖХМС, ГХМС и СЖХ измеряют с использованием способов, указанных в процедурах.The retention times of HPLC, UPLC, LCMS, GCMS and SLC are measured using the methods indicated in the procedures.
В некоторых примерах было выполнено хиральное разделение для разделения энантиомеров или диастереомеров определенных соединений по изобретению (в некоторых примерах разделенные энантиомеры обозначены как ENT-1 и ENT-2 в соответствии с их порядком элюирования; аналогично, разделенные диастереомеры обозначены как DIAST-1 и DIAST-2, в соответствии с порядком их элюирования). В некоторых примерах, оптическое вращение энантиомера измеряют с помощью поляриметра. Согласно наблюдаемым данным о вращении (или данным удельного вращения) энантиомер с вращением по часовой стрелке обозначен как (+)-энантиомер, и энантиомер с вращением против часовой стрелки обозначен как (-)-энантиомер. На рацемические соединения указывает либо отсутствие нарисованной или описанной стереохимии, либо присутствие (+/-) соседней к структуре; в этом последнем случае указанная стереохимия представляет собой только один из двух энантиомеров, которые составляют рацемическую смесь.In some examples, a chiral separation has been performed to separate the enantiomers or diastereomers of certain compounds of the invention (in some examples, the separated enantiomers are designated ENT-1 and ENT-2 according to their elution order; similarly, the separated diastereomers are designated DIAST-1 and DIAST- 2 according to their elution order). In some examples, the optical rotation of an enantiomer is measured using a polarimeter. According to the observed rotation data (or specific rotation data), the clockwise rotation enantiomer is designated as the (+)-enantiomer, and the counter-clockwise rotation enantiomer is designated as the (-)-enantiomer. Racemic compounds are indicated either by the absence of a stereochemistry drawn or described, or by the presence of a (+/-) adjacent structure; in this latter case, said stereochemistry is only one of the two enantiomers that make up the racemic mixture.
Соединения и промежуточные соединения, описанные ниже, были названы с использованием соглашения о наименованиях, предоставленного ACD/ChemSketch 2019.1.1, File Version C05H41, Build 110712 (Advanced Chemistry Development, Inc., Toronto, Ontario, Canada). Соглашение о наименованиях, предоставляемое ACD/ChemSketch 2019.1.1, хорошо известно специалистам в данной области техники, и считается, что соглашение об именах, предоставляемое ACD/ChemSketch 2019.1.1 в целом согласуется с IUPAC (International Union for Pure and Applied Chemistry) рекомендациями в правилах Nomenclature of Organic Chemistry and the CAS Index.The compounds and intermediates described below have been named using the naming convention provided by ACD/ChemSketch 2019.1.1, File Version C05H41, Build 110712 (Advanced Chemistry Development, Inc., Toronto, Ontario, Canada). The naming convention provided by ACD/ChemSketch 2019.1.1 is well known to those skilled in the art and the naming convention provided by ACD/ChemSketch 2019.1.1 is generally considered to be consistent with the IUPAC (International Union for Pure and Applied Chemistry) recommendations in the rules of the Nomenclature of Organic Chemistry and the CAS Index.
Пример 1Example 1
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (1)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 1 )
Стадия 1. Синтез метил (1R,2S,5S)-3-[N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C1).
0°C раствор N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валина (69,7 г, 321 ммоль) в смеси ацетонитрила и N, N-диметилформамида (10:1, 1,10 л) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 122 г, 321 ммоль), затем N, N-диизопропилэтиламином (127 мл, 729 ммоль). затем реакционную смесь перемешивают в течение 5 минут, добавляют метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилат, гидрохлорид (60,0 г, 292 ммоль), и перемешивание продолжают при 0°C в течение 1 часа. Реакционную смесь затем разбавляют водным раствором лимонной кислоты (1 N; 50 мл) и водой (100 мл), перемешивают в течение 2 минут, и концентрируют в вакууме до приблизительно половины исходного объема. Полученную смесь разделяют между этилацетатом и водой, и водный слой экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои затем промывают три раза водой и один раз насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток перемешивают в минимальном количестве этилацетата, и затем фильтруют; нерастворимый продукт промывают этилацетатом, пока он не станет белым. Объединенные фильтраты концентрируют при пониженном давлении и затем подвергают хроматографии на силикагеле (Элюент: 1:1 этилацетат/гептан), с получением C1 в виде желтого масла. Выход: 109 г, количественный. ЖХМС m/z 369,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 5,08 (д, J=9,6 Гц, 1H), 4,45 (с, 1H), 4,11 (дд, J=9,7, 7,8 Гц, 1H), 3,95 (д, половина АВ квартета, J=10,1 Гц, 1H), 3,86 (дд, компонент системы АВХ, J=10,2, 4,8 Гц, 1H), 3,74 (с, 3H), 2,04-1,93 (м, 1H), 1,50-1,41 (м, 2H), 1,40 (с, 9H), 1,04 (с, 3H), 1,00 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,95 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,93 (с, 3H).0°C solutionN-(tert-butoxycarbonyl)-L-valine (69.7 g, 321 mmol) in a mixture of acetonitrile andN, N-dimethylformamide (10:1, 1.10 L) is treated with hexafluorophosphateO-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N, N, N', N'-tetramethyluronium (GATU; 122 g, 321 mmol), thenN, N-diisopropylethylamine (127 ml, 729 mmol). then the reaction mixture was stirred for 5 minutes, methyl (1R.2S,fiveS)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate, hydrochloride (60.0 g, 292 mmol) and stirring continued at 0° C. for 1 hour. The reaction mixture was then diluted with aqueous citric acid (1 N; 50 ml) and water (100 ml), stirred for 2 minutes, and concentratedin a vacuum up to about half of the original volume. The resulting mixture was partitioned between ethyl acetate and water, and the aqueous layer was extracted three times with ethyl acetate. The combined organic layers are then washed three times with water and once with saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated.in a vacuum. The residue is stirred in a minimum amount of ethyl acetate and then filtered; the insoluble product is washed with ethyl acetate until it turns white. The combined filtrates are concentrated under reduced pressure and then subjected to silica gel chromatography (eluent: 1:1 ethyl acetate/heptane) to giveC1 as a yellow oil. Yield: 109 g, quantitative. HCMSm/z 369.3 [M+H]+.oneH NMR (400 MHz, chloroform-d) δ 5.08 (d,J=9.6 Hz, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.11 (dd,J=9.7, 7.8 Hz, 1H), 3.95 (d, half AB quartet,J=10.1 Hz, 1H), 3.86 (dd, ABX system component,J=10.2, 4.8 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.04-1.93 (m, 1H), 1.50-1.41 (m, 2H), 1, 40 (s, 9H), 1.04 (s, 3H), 1.00 (d,J=6.8 Hz, 3H), 0.95 (d,J=6.8 Hz, 3H), 0.93 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-L-валил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата, гидрохлорида (C2).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 15 мл, 60 ммоль) добавляют к 0°C раствору C1 (1,00 г, 2,71 ммоль) в этилацетате (50 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 часов, затем добавляют дополнительный гидрохлорид в растворе 1,4-диоксана (4 M; 10 мл, 40 ммоль), и перемешивание продолжают при 0°C в течение 3 часов, затем при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь затем обрабатывают раствором гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 10 мл, 40 ммоль) и метаноле (15 мл) и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Концентрация в вакууме дает C2 в виде камеди; этот продукт применяют для следующей химической обработки без дальнейшей очистки, и реакцию оценивают как количественную. ЖХМС m/z 269,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,24 (шс, 3H), 4,27 (с, 1H), 3,81-3,61 (м, 3H), 3,67 (с, 3H), 2,21-2,06 (м, 1H), 1,63-1,55 (м, 1H), 1,49 (д, компонент АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,09-0,88 (м, 12H).A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 15 ml, 60 mmol) is added to a 0° C. solution of C1 (1.00 g, 2.71 mmol) in ethyl acetate (50 ml). The reaction mixture was stirred at 0°C for 2 hours, then additional hydrochloride in 1,4-dioxane solution (4 M; 10 ml, 40 mmol) was added and stirring was continued at 0°C for 3 hours, then at room temperature within 1 hour. The reaction mixture was then treated with a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 10 ml, 40 mmol) and methanol (15 ml) and stirred overnight at room temperature. Concentration in vacuo gives C2 as a gum; this product is used for the next chemical treatment without further purification, and the reaction is evaluated as quantitative. LCMS m/z 269.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.24 (br s, 3H), 4.27 (s, 1H), 3.81-3.61 (m, 3H), 3.67 (s, 3H), 2.21-2.06 (m, 1H), 1.63-1.55 (m, 1H), 1.49 (d, component of the AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1 .09-0.88 (m, 12H).
Стадия 3. Синтез метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C3).Stage 3. Synthesis of methyl (1R.2S,fiveS)-6,6-dimethyl-3-[N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate (C3).
Триэтиламин (1,55 мл, 11,1 ммоль) добавляют к 0°C раствору C2 (1,0 г, 3,3 ммоль) в дихлорметане (37 мл), затем по каплям добавляют трифторуксусный ангидрид (0,57 мл, 4,0 ммоль) в течение 30 минут. Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 30 минут, затем ее разбавляют дихлорметаном (100 мл), промывают последовательно 10% водным раствором бисульфата калия (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (30 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C3 в виде светло-желтого масла. Выход: 1,2 г, 3,3 ммоль, количественный. ЖХМС m/z 365,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 7,04 (шд, J=8,8 Гц, 1H), 4,54 (дд, J=8,9, 6,3 Гц, 1H), 4,46 (с, 1H), 3,91 (дд, J=10,1, 5,0 Гц, 1H), 3,80-3,73 (м, 1H), 3,76 (с, 3H), 2,25-2,13 (м, 1H), 1,55-1,47 (м, 2H), 1,09-1,03 (м, 6H), 0,94 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,92 (с, 3H).Triethylamine (1.55 ml, 11.1 mmol) is added to a 0°C solution of C2 (1.0 g, 3.3 mmol) in dichloromethane (37 ml), then trifluoroacetic anhydride (0.57 ml, 4 .0 mmol) for 30 minutes. The reaction mixture was stirred at 0°C for 30 minutes, then it was diluted with dichloromethane (100 ml), washed successively with 10% aqueous potassium bisulfate (50 ml) and saturated aqueous sodium chloride (30 ml), dried over sodium sulfate, filtered , and concentrated in vacuo to give C3 as a light yellow oil. Yield: 1.2 g, 3.3 mmol, quantitative. LCMS m/z 365.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 7.04 (bd, J =8.8 Hz, 1H), 4.54 (dd, J =8.9, 6.3 Hz, 1H), 4, 46 (s, 1H), 3.91 (dd, J =10.1, 5.0 Hz, 1H), 3.80-3.73 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 2 .25-2.13 (m, 1H), 1.55-1.47 (m, 2H), 1.09-1.03 (m, 6H), 0.94 (d, J = 6.8 Hz , 3H), 0.92 (s, 3H).
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C4).Step 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-[ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxylic acids ( C4 ).
Концентрированную хлористоводородную кислоту (0,57 мл, 6,6 ммоль) добавляют в раствор C3 (1,25 г, 3,43 ммоль) в смеси уксусной кислоты (40,8 мл) и воды (8,2 мл). Реакционную смесь нагревают при 55°C в течение 3 дней, затем ее разделяют между водой (50 мл) и этилацетатом (100 мл). Водный слой экстрагируют этилацетатом (2×50 мл), и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C4 в виде белой пены. Выход: 1,00 г, 2,85 ммоль, 83%. ЖХМС m/z 351,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d), характеристические пики: δ 4,56-4,44 (м, 2H), 2,24-2,12 (м, 1H), [1,66 (д, компонент АВ квартета, J=7,5 Гц) и 1,59-1,47 (м), всего 2H], 1,10-1,01 (м, 6H), 0,96-0,91 (м, 6H).Concentrated hydrochloric acid (0.57 ml, 6.6 mmol) is added to a solution of C3 (1.25 g, 3.43 mmol) in a mixture of acetic acid (40.8 ml) and water (8.2 ml). The reaction mixture is heated at 55°C for 3 days, then it is divided between water (50 ml) and ethyl acetate (100 ml). The aqueous layer was extracted with ethyl acetate (2 x 50 ml) and the combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium chloride (50 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C4 as a white foam. Yield: 1.00 g, 2.85 mmol, 83%. LCMS m/z 351.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ), characteristic peaks: δ 4.56-4.44 (m, 2H), 2.24-2.12 (m, 1H), [1.66 (d, component AB quartet, J = 7.5 Hz) and 1.59-1.47 (m), total 2H], 1.10-1.01 (m, 6H), 0.96-0.91 (m, 6H ).
Стадия 5. Синтез трет-бутил {(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамата (C5).Step 5. Synthesis of tert -butyl {( 2S )-1-amino-1-oxo-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2-yl}carbamate ( C5 ).
Раствор аммиака в метаноле (7,0 M; 150 мл, 1,0 моль) добавляют к 0°C раствору метил N-(трет-бутоксикарбонил)-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланината (5,00 г, 17,5 ммоль) в метаноле (25 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 дней, ее концентрируют в вакууме; остаток разбавляют и повторно концентрируют последовательно смесь этилацетата и гептана (1:1, 4×50 мл) затем гептана (50 мл) с получением C5 в виде твердого вещества (5,27 г, количественная оценка) которое содержит остаточный растворитель. Часть этого продукта применяют на следующей стадии. ЖХМС m/z 216,2 [(M − 2-метилпроп-1-ен)+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,16-3,96 (м, 1H), 3,40-3,27 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,55-2,42 (м, 1H), 2,35 (дддд, J=12,2, 8,6, 6,8, 3,3 Гц, 1H), 2,03 (ддд, J=14,0, 11,0, 4,4 Гц, 1H), 1,93-1,81 (м, 1H), 1,74 (ддд, J=14,2, 10,1, 4,3 Гц, 1H), 1,45 (с, 9H).A solution of ammonia in methanol (7.0 M; 150 ml, 1.0 mol) was added to a 0° C. solution of methyl N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]- L-alaninate (5.00 g, 17.5 mmol) in methanol (25 ml). The reaction mixture is then stirred at room temperature for 3 days, it is concentrated in vacuo ; the residue was diluted and re-concentrated sequentially with a mixture of ethyl acetate and heptane (1:1, 4×50 ml) then heptane (50 ml) to give C5 as a solid (5.27 g, quantified) which contained residual solvent. Part of this product is used in the next step. LCMS m/z 216.2 [(M − 2-methylprop-1-ene)+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.16-3.96 (m, 1H), 3.40-3.27 (m, 2H, suggested; partially covered by solvent peak), 2.55- 2.42 (m, 1H), 2.35 (dddd, J =12.2, 8.6, 6.8, 3.3 Hz, 1H), 2.03 (ddd, J =14.0, 11 .0, 4.4 Hz, 1H), 1.93-1.81 (m, 1H), 1.74 (ddd, J = 14.2, 10.1, 4.3 Hz, 1H), 1, 45 (s, 9H).
Стадия 6. Синтез трет-бутил {(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}карбамата (C6).
2,6-диметилпиридин (2 мл, 17 ммоль) и трифторуксусный ангидрид (0,94 мл, 6,6 ммоль) добавляют к 0°C раствору C5 (с предыдущей стадии; 1,0 г, ≤3,3 ммоль) в дихлорметане (12 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 часов, где ее обрабатывают хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл) и дихлорметаном (60 мл). Органический слой промывают последовательно насыщенным водным раствором хлорида натрия (30 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (30 мл), сушат над сульфатом натрия, и концентрируют в вакууме; хроматография на силикагеле (Градиент: 40%-100% этилацетат в гептане) дает C6 в виде твердого вещества. Выход: 737 мг, 2,91 ммоль, 88% за 2 стадии. ЖХМС m/z 254,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,72 (дд, J=9,3, 6,8 Гц, 1H), 3,39-3,27 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,57-2,46 (м, 1H), 2,36 (дддд, J=12,2, 8,6, 6,3, 3,4 Гц, 1H), 2,21 (ддд, J=13,8, 9,3, 5,6 Гц, 1H), 1,92-1,79 (м, 2H), 1,47 (с, 9H).2,6-dimethylpyridine (2 ml, 17 mmol) and trifluoroacetic anhydride (0.94 ml, 6.6 mmol) are added to a 0°C solution of C5 (from the previous step; 1.0 g, ≤3.3 mmol) in dichloromethane (12 ml). The reaction mixture is stirred at room temperature for 1.5 hours, where it is treated with hydrochloric acid (1 M; 30 ml) and dichloromethane (60 ml). The organic layer was washed successively with saturated aqueous sodium chloride (30 ml) and saturated aqueous sodium bicarbonate (30 ml), dried over sodium sulfate, and concentrated in vacuo ; chromatography on silica gel (Gradient: 40%-100% ethyl acetate in heptane) gives C6 as a solid. Yield: 737 mg, 2.91 mmol, 88% over 2 steps. LCMS m/z 254.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.72 (dd, J =9.3, 6.8 Hz, 1H), 3.39-3.27 (m, 2H, suggested; partially covered by peak solvent), 2.57-2.46 (m, 1H), 2.36 (dddd, J = 12.2, 8.6, 6.3, 3.4 Hz, 1H), 2.21 (ddd, J = 13.8, 9.3, 5.6 Hz, 1H), 1.92-1.79 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
Стадия 7. Синтез (2S)-2-амино-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропаннитрил, метансульфонат (C7).Step 7. Synthesis of ( 2S )-2-amino-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propanenitrile, methanesulfonate ( C7 ).
В раствор C6 (317 мг, 1,25 ммоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (3 мл) добавляют метансульфоновую кислоту (81,2 мкл, 1,25 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 45 минут, концентрируют в вакууме, затем несколько раз помещают в смесь растворителей и повторно концентрируют: ацетонитрил и этилацетат (1:1, 2×10 мл) затем этилацетат и гептан (1:1, 2×10 мл). Полученный C7 получают в виде стекла (423 мг), который не содержит нитриловый эпимер через 1H и 13C ЯМР анализ. Часть этого продукта используют в следующих реакциях без дополнительной очистки. ЖХМС m/z 154,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,78 (t, J=7,3 Гц, 1H), 3,42-3,36 (м, 2H), 2,82-2,68 (м, 1H), 2,70 (с, 3H), 2,50-2,39 (м, 1H), 2,20 (t, J=7,3 Гц, 1H), 2,07-1,80 (м, 2H).To a solution of C6 (317 mg, 1.25 mmol) in 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (3 mL) was added methanesulfonic acid (81.2 μL, 1.25 mmol). The reaction mixture was then stirred at room temperature for 45 minutes, concentrated in vacuo , then placed several times in a mixture of solvents and re-concentrated: acetonitrile and ethyl acetate (1:1, 2x10 ml) then ethyl acetate and heptane (1:1, 2 ×10 ml). The resulting C7 was obtained as a glass (423 mg) which was free of the nitrile epimer through 1 H and 13 C NMR analysis. A portion of this product was used in the following reactions without further purification. LCMS m/z 154.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.78 (t, J =7.3 Hz, 1H), 3.42-3.36 (m, 2H), 2.82-2.68 ( m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.50-2.39 (m, 1H), 2.20 (t, J =7.3 Hz, 1H), 2.07-1.80 (m, 2H).
Стадия 8. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (1).Stage 8. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl 3-[ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 1 ).
Смесь C7 (с предыдущей стадии; 98,8 мг, ≤0,292 ммоль) и C4 (100 мг, 0,285 ммоль) в ацетонитриле (1,5 мл) охлаждают до 0°C. Добавляют O-(7-Азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфат (ГАТУ, 97%; 112 мг, 0,286 ммоль), затем раствор 4-метилморфолин (94,0 мкл, 0,855 ммоль) в ацетонитриле (0,5 мл), и реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение приблизительно 2 часов. Затем добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл) к 0°C реакционной смеси, затем дихлорметан (50 мл), и органический слой промывают хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл). Объединенные водные слои экстрагируют дихлорметаном (60 мл), затем объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, концентрируют в вакууме, и подвергают хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 20% метанол в этилацетате). Полученный продукт оценивают ЯМР и ЖХМС как загрязненный эпимером продукта, его затем очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусную кислоту (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил, содержащий 0,05% трифторуксусную кислоту (об./об.); Градиент: 5% - 95% B за 8,54 минут, затем 95% B в течение 1,46 минут; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (1). Выход: 14,6 мг, 30,1 мкмоль, 11%. ЖХМС m/z 486,5 [M+H]+. Время удержания: 2,33 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis C18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусную кислоту (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил, содержащий 0,05% трифторуксусную кислоту (об./об.). Градиент: 5% - 95% B за 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты. Скорость потока: 2 мл/минуту).A mixture of C7 (from the previous step; 98.8 mg, ≤0.292 mmol) and C4 (100 mg, 0.285 mmol) in acetonitrile (1.5 ml) was cooled to 0°C. Add O- (7-Azabenzotriazol-1-yl) -N,N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU, 97%; 112 mg, 0.286 mmol) followed by a solution of 4-methylmorpholine (94.0 µl, 0.855 mmol) in acetonitrile (0.5 ml), and the reaction mixture was stirred at 0°C for approximately 2 hours. Saturated aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml) was then added to the 0° C. reaction mixture, followed by dichloromethane (50 ml) and the organic layer was washed with hydrochloric acid (1 M; 30 ml). The combined aqueous layers were extracted with dichloromethane (60 ml), then the combined organic layers were dried over sodium sulfate, concentrated in vacuo , and subjected to silica gel chromatography (Gradient: 0% - 20% methanol in ethyl acetate). The resulting product was assessed by NMR and LCMS as being contaminated with the product epimer and then purified by reverse phase HPLC (Column: Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v). v/v Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5% to 95% B over 8.54 minutes then 95% B over 1.46 minutes; Flow rate: 25 ml/minute) to give (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl }-6,6-dimethyl-3-[ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 1 ). Yield: 14.6 mg, 30.1 µmol, 11%. LCMS m/z 486.5 [M+H] + . Retention time: 2.33 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis C18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5% - 95% B over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes Flow rate: 2 ml/ minute).
Альтернативный синтез C4 Alternative C4 synthesis
(1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C4)( 1R , 2S , 5S )-6,6-dimethyl-3-[ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxylic acid ( C4 )
Стадия 1. Синтез (1R,2S,5S)-3-[N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C8).
Водный раствор гидроксида лития (2,0 M; 436 мл, 872 ммоль) добавляют в раствор C1 (107 г, 290 ммоль) в тетрагидрофуране (730 мл). Затем полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение приблизительно 2 часов, ее разбавляют водой и этилацетатом, затем обрабатывают 1 M водным раствором гидроксида натрия. Водный слой промывают этилацетатом, и объединенные органические слои экстрагируют три раза 1 M водным раствором гидроксида натрия, до тех пор, пока ЖХМС анализ не показал, что C8 был полностью удален из органического слоя. Подкисление объединенных водных слоев до pH 2 проводят добавлением концентрированной хлористоводородной кислоты, затем смесь экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют; растирание остатка с гептаном дает C8 в виде белого твердого вещества. Выход: 92,8 г, 262 ммоль, 90%. ЖХМС m/z 355,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,32 (с, 1H), 4,05 (д, половина АВ квартета, J=10,5 Гц, 1H), 4,01 (д, J=9,0 Гц, 1H), 3,88 (дд, компонент системы АВХ, J=10,4, 5,3 Гц, 1H), 2,03-1,91 (м, 1H), 1,57 (дд, компонент системы АВХ, J=7,5, 5,2 Гц, 1H), 1,50 (д, половина АВ квартета, J=7,5 Гц, 1H), 1,41 (с, 9H), 1,08 (с, 3H), 0,99 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,97-0,94 (м, 6H).An aqueous solution of lithium hydroxide (2.0 M; 436 ml, 872 mmol) is added to a solution of C1 (107 g, 290 mmol) in tetrahydrofuran (730 ml). The resulting mixture was then stirred at room temperature for approximately 2 hours, diluted with water and ethyl acetate, then treated with 1 M aqueous sodium hydroxide. The aqueous layer was washed with ethyl acetate and the combined organic layers were extracted three times with 1M aqueous sodium hydroxide until LCMS analysis indicated that C8 had been completely removed from the organic layer. Acidification of the combined aqueous layers to
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-L-валил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты, гидрохлорид (C9).
В раствор C8 (82,8 г, 234 ммоль) в дихлорметане (230 мл) добавляют раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4,0 M; 409 мл, 1,64 моль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, затем ее концентрируют в вакууме, с получением C9 в виде белой пены. Этот продукт применяют непосредственно на следующей стадии. ЖХМС m/z 255,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,42 (с, 1H), 4,05 (д, J=4,8 Гц, 1H), 3,89 (дд, компонент системы АВХ, J=10,5, 5,2 Гц, 1H), 3,74 (д, половина АВ квартета, J=10,5 Гц, 1H), 2,36-2,25 (м, 1H), 1,62 (дд, компонент системы АВХ, J=7,5, 5,1 Гц, 1H), 1,57 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,16 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,10 (с, 3H), 1,04 (д, J=6,9 Гц, 3H), 1,01 (с, 3H).To a solution of C8 (82.8 g, 234 mmol) in dichloromethane (230 ml) was added a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4.0 M; 409 ml, 1.64 mol). The reaction mixture was stirred overnight at room temperature, then concentrated in vacuo to give C9 as a white foam. This product is used directly in the next step. LCMS m/z 255.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.42 (s, 1H), 4.05 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 3.89 (dd, component of the ABX system, J = 10.5, 5.2 Hz, 1H), 3.74 (d, half AB quartet, J = 10.5 Hz, 1H), 2.36-2.25 (m, 1H), 1.62 (dd , component of the ABX system, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 1.57 (d, half of the AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.16 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.04 (d, J =6.9 Hz, 3H), 1.01 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C4).Step 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-[ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxylic acids ( C4 ).
Раствор C9 (с предыдущей стадии; ≤234 ммоль) в метаноле (230 мл) охлаждают до 0°C, обрабатывают триэтиламином (66,7 мл, 479 ммоль), и перемешивают в течение 5 минут, затем медленно добавляют этилтрифторацетат (36,1 мл, 303 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 90 минут, ее концентрируют в вакууме. Остаток разбавляют водой, 1 M водным раствором гидроксида натрия и этилацетатом, и полученный органический слой экстрагируют дважды 1 M водным раствором гидроксида натрия. Объединенные водные слои подкисляют до pH 2 добавлением 1 M хлористоводородной кислоты, затем экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме, с получением C4 в виде белой пены. Выход: 73,4 г, 210 ммоль, 90% за 2 стадии. ЖХМС m/z 351,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 12,65 (v шс, 1H), 9,82 (д, J=7,7 Гц, 1H), 4,16 (дд, J=9,9, 7,9 Гц, 1H), 4,12 (с, 1H), 3,86 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,81 (дд, компонент системы АВХ, J=10,5, 5,0 Гц, 1H), 2,18-2,05 (м, 1H), 1,54 (дд, компонент системы АВХ, J=7,7, 4,6 Гц, 1H), 1,42 (д, половина АВ квартета, J=7,5 Гц, 1H), 1,02 (с, 3H), 0,95 (д, J=6,7 Гц, 3H), 0,89 (д, J=6,6 Гц, 3H), 0,84 (с, 3H).A solution of C9 (from the previous step; ≤234 mmol) in methanol (230 ml) was cooled to 0°C, treated with triethylamine (66.7 ml, 479 mmol) and stirred for 5 minutes, then ethyl trifluoroacetate (36.1 ml, 303 mmol). The reaction mixture is then stirred at room temperature for 90 minutes, it is concentrated in vacuo . The residue was diluted with water, 1 M aqueous sodium hydroxide and ethyl acetate, and the resulting organic layer was extracted twice with 1 M aqueous sodium hydroxide. The combined aqueous layers were acidified to
Альтернативный синтез примера 1Alternative Synthesis of Example 1
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (1)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 1 )
Стадия 1. Синтез метил 3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинат, метансульфоната (C10).
В раствор метил N-(трет-бутоксикарбонил)-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланината (10,1 г, 35,3 ммоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (70 мл) добавляют метансульфоновую кислоту (2,30 мл, 35,4 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 70 минут, ЖХМС анализ показывает, что исходный материал был превращен в C10: ЖХМС m/z 187,2 [M+H]+. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, и остаток дважды перерастворяют, затем концентрируют при пониженном давлении в смеси ацетонитрила и этилацетата (1:1, 2×20 мл). Полученный продукт помещают в смесь ацетонитрила и этилацетата (1:1, 30 мл), концентрируют, затем дважды перерастворяют в этилацетате (2×40 мл) и концентрируют. Остаток растирают этилацетатом (60 мл) с получением C10. Выход: 9,87 г, 35,0 ммоль, 99%. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,22 (дд, J=9,7, 3,6 Гц, 1H), 3,86 (с, 3H), 3,41-3,36 (м, 2H), 2,84-2,74 (м, 1H), 2,70 (с, 3H), 2,41 (дддд, J=12,3, 8,6, 5,1, 3,6 Гц, 1H), 2,25 (ддд, J=15,1, 4,5, 3,6 Гц, 1H), 1,98 (ддд, J=15,1, 9,6, 9,6 Гц, 1H), 1,87 (дддд, J=12,6, 10,9, 9,2, 9,2 Гц, 1H).To a solution of methyl N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L- alaninate (10.1 g, 35.3 mmol) in 1,1,1,3 ,3,3-hexafluoropropan-2-ole (70 ml) methanesulfonic acid (2.30 ml, 35.4 mmol) is added. The reaction mixture was then stirred at room temperature for 70 minutes, LCMS analysis showed that the starting material had been converted to C10 : LCMS m/z 187.2 [M+H] + . The reaction mixture was concentrated in vacuo and the residue redissolved twice, then concentrated under reduced pressure in a mixture of acetonitrile and ethyl acetate (1:1, 2×20 ml). The product obtained is taken up in a mixture of acetonitrile and ethyl acetate (1:1, 30 ml), concentrated, then redissolved twice in ethyl acetate (2×40 ml) and concentrated. The residue was triturated with ethyl acetate (60 ml) to give C10 . Yield: 9.87 g, 35.0 mmol, 99%. 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.22 (dd, J =9.7, 3.6 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.41-3.36 ( m, 2H), 2.84-2.74 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.41 (dddd, J =12.3, 8.6, 5.1, 3.6 Hz, 1H), 2.25 (ddd, J =15.1, 4.5, 3.6 Hz, 1H), 1.98 (ddd, J =15.1, 9.6, 9.6 Hz, 1H), 1.87 (dddd, J =12.6, 10.9, 9.2, 9.2 Hz, 1H).
Стадия 2. Синтез метил N-({(1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-ил}карбонил)-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинат (C11).
К 0°C раствору C10 (2,76 г, 9,78 ммоль) и C4 (3,43 г, 9,79 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) добавляют гидрохлорид 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида (1,88 г, 9,81 ммоль), затем по каплям добавляют пиридин (2,37 мл, 29,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2,25 часов, затем обрабатывают хлористоводородной кислотой (1 M; 50 мл) и экстрагируют этилацетатом (150 мл). Органический слой промывают последовательно насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток помещают в метил трет-бутиловый эфир (30 мл) и концентрируют при пониженном давлении, и полученное стекло перемешивают с метил трет-бутиловым эфиром (50 мл) при комнатной температуре в течение ночи. После фильтрации, фильтровальную лепешку промывают с метил трет-бутиловым эфиром (3×6 мл) с получением C11 в виде твердого вещества, которое согласно 1H ЯМР анализу содержит значительный остаточный метил трет-бутиловый эфир. Часть этого продукта применяют на следующей стадии. Выход: 3,74 г; скорректирован на остаточный метил трет-бутиловый эфир: 2,94 г, 5,67 ммоль, 58%. ЖХМС m/z 519,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,55 (дд, J=12,0, 3,8 Гц, 1H), 4,34 (с, 1H), 4,29 (д, J=9,6 Гц, 1H), 3,97 (д, J=3,1 Гц, 2H), 3,74 (с, 3H), 3,37-3,23 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,73-2,62 (м, 1H), 2,32 (дддд, J=12,4, 8,8, 6,7, 2,4 Гц, 1H), 2,21-2,10 (м, 2H), 1,86-1,74 (м, 2H), 1,60 (дт, компонент ABX2 системы, J=7,7, 3,1 Гц, 1H), 1,49 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,09 (с, 3H), 1,02 (д, J=6,9 Гц, 3H), 0,99-0,95 (м, 6H).To a 0°C solution of C10 (2.76 g, 9.78 mmol) and C4 (3.43 g, 9.79 mmol) in acetonitrile (40 ml) was added 1-[3-(dimethylamino)propyl]-3 hydrochloride -ethylcarbodiimide (1.88 g, 9.81 mmol), then pyridine (2.37 ml, 29.3 mmol) is added dropwise. The reaction mixture was stirred at 0°C for 2.25 hours, then treated with hydrochloric acid (1 M; 50 ml) and extracted with ethyl acetate (150 ml). The organic layer was washed successively with saturated aqueous sodium chloride (50 ml), saturated aqueous sodium bicarbonate (50 ml) and saturated aqueous sodium chloride (50 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue was taken up in methyl t- butyl ether (30 ml) and concentrated under reduced pressure, and the resulting glass was stirred with methyl t- butyl ether (50 ml) at room temperature overnight. After filtration, the filter cake was washed with methyl tert -butyl ether (3 x 6 ml) to give C11 as a solid which, according to 1 H NMR analysis, contained significant residual methyl tert -butyl ether. Part of this product is used in the next step. Yield: 3.74 g; corrected for residual methyl t- butyl ether: 2.94 g, 5.67 mmol, 58%. LCMS m/z 519.5 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.55 (dd, J =12.0, 3.8 Hz, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.29 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 3.97 (d, J =3.1 Hz, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.37-3.23 (m, 2H, assumed; partially covered by peak solvent), 2.73-2.62 (m, 1H), 2.32 (dddd, J =12.4, 8.8, 6.7, 2.4 Hz, 1H), 2.21-2, 10 (m, 2H), 1.86-1.74 (m, 2H), 1.60 (dt, component ABX 2 system, J =7.7, 3.1 Hz, 1H), 1.49 (d , half of the AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.99-0.95 (m, 6H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (C12).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-6,6-dimethyl-3-[ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( C12 ).
Раствор аммиака в метаноле (7,0 M; 5 мл, 40 ммоль) добавляют в раствор C11 (с предыдущей стадии: 205 мг, 0,311 ммоль) в метаноле (1 мл). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 часов, затем снова добавляют раствор аммиака в метаноле (7,0 M; 5 мл, 40 ммоль), и перемешивание продолжают в течение ночи. Реакционную смесь затем обрабатывают третий раз тем же количеством аммиака в метаноле; через еще 8 часов реакции, ее концентрируют в вакууме. Остаток разбавляют и повторно концентрируют последовательно этилацетатом (2×20 мл) и смесью этилацетата и гептана (1:1, 2×20 мл). Полученный продукт растворяют в дихлорметане (50 мл), промывают хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (30 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C12 в виде твердого вещества. Выход: 87 мг, 0,17 ммоль, 55%. ЖХМС m/z 504,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 8,68 (д, J=7,9 Гц, <1H, неполностью заменен растворителем), 4,44 (ддд, J=11,9, 7,9, 4,0 Гц, 1H), 4,37-4,26 (м, 2H), 4,01 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,1 Гц, 1H), 3,94 (д, половина АВ квартета, J=10,2 Гц, 1H), 3,39-3,24 (м, 2H, предполагаемый; в большей части закрыт пиком растворителя), 2,72-2,62 (м, 1H), 2,38-2,28 (м, 1H), 2,21-2,08 (м, 2H), 1,90-1,72 (м, 2H), 1,58 (дд, компонент системы АВХ, J=7,5, 5 Гц, 1H), 1,54 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,08 (с, 3H), 1,02 (д, J=6,7 Гц, 3H), 0,97 (д, J=6,7 Гц, 3H), 0,96 (с, 3H).A solution of ammonia in methanol (7.0 M; 5 ml, 40 mmol) is added to a solution of C11 (from the previous step: 205 mg, 0.311 mmol) in methanol (1 ml). The resulting solution was stirred at room temperature for 1.5 hours, then a solution of ammonia in methanol (7.0 M; 5 ml, 40 mmol) was added again and stirring was continued overnight. The reaction mixture is then treated a third time with the same amount of ammonia in methanol; after another 8 hours of reaction, it is concentrated in vacuo . The residue was diluted and re-concentrated successively with ethyl acetate (2×20 ml) and a mixture of ethyl acetate and heptane (1:1, 2×20 ml). The resulting product was dissolved in dichloromethane (50 ml), washed with hydrochloric acid (1 M; 30 ml) and saturated aqueous sodium chloride solution (30 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C12 as a solid. Yield: 87 mg, 0.17 mmol, 55%. LCMS m/z 504.5 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 8.68 (d, J = 7.9 Hz, <1H, not completely replaced by solvent), 4.44 (ddd, J = 11.9, 7.9, 4.0 Hz, 1H), 4.37-4.26 (m, 2H), 4.01 (dd, ABX system component, J = 10.3, 5.1 Hz, 1H), 3.94 (d , half AB quartet, J = 10.2 Hz, 1H), 3.39-3.24 (m, 2H, assumed; mostly obscured by solvent peak), 2.72-2.62 (m, 1H), 2.38-2.28 (m, 1H), 2.21-2.08 (m, 2H), 1.90-1.72 (m, 2H), 1.58 (dd, ABX system component, J = 7.5, 5 Hz, 1H), 1.54 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.08 (s, 3H), 1.02 (d, J = 6, 7 Hz, 3H), 0.97 (d, J =6.7 Hz, 3H), 0.96 (s, 3H).
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (1).Stage 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl 3-[ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 1 ).
Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 88,4 мг, 0,371 ммоль) добавляют в раствор C12 (85,0 мг, 0,17 ммоль) в дихлорметане (4,0 мл), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. Через 3 часа, метил снова добавляют N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 20 мг, 84 мкмоль); через 30 минут реакционную смесь разбавляют этилацетатом (60 мл), промывают последовательно хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (30 мл), и насыщенным водным раствором хлорида натрия (30 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток берут в гептане и повторно концентрируют с последующей очисткой хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 5% метанол в этилацетате). (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (1) выделяют в виде твердого вещества. Выход: 35 мг, 72 мкмоль, 42%. ЖХМС m/z 486,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 5,04 (дд, J=10,7, 5,4 Гц, 1H), 4,28 (д, J=9,6 Гц, 1H), 4,25 (с, 1H), 4,03-3,94 (м, 2H), 3,35-3,23 (м, 2H, предполагаемый; в большей части закрыт пиком растворителя), 2,72-2,62 (м, 1H), 2,37-2,26 (м, 2H), 2,19-2,08 (м, 1H), 1,93-1,75 (м, 2H), 1,64 (ддд, J=7,6, 4,2, 2,1 Гц, 1H), 1,41 (д, J=7,6 Гц, 1H), 1,09 (с, 3H), 1,02 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,00-0,95 (м, 6H).Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 88.4 mg, 0.371 mmol) was added to a solution of C12 (85.0 mg, 0.17 mmol) in dichloromethane (4.0 mL) and the reaction mixture was stirred at room temperature. After 3 hours, methyl again add N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 20 mg, 84 µmol); after 30 minutes, the reaction mixture was diluted with ethyl acetate (60 ml), washed successively with hydrochloric acid (1 M; 30 ml), saturated aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml), and saturated aqueous sodium chloride solution (30 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue is taken up in heptane and re-concentrated, followed by purification by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 5% methanol in ethyl acetate). (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [ N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 1 ) is isolated as a solid. Yield: 35 mg, 72 µmol, 42%. LCMS m/z 486.5 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 5.04 (dd, J =10.7, 5.4 Hz, 1H), 4.28 (d, J =9.6 Hz, 1H), 4 .25 (s, 1H), 4.03-3.94 (m, 2H), 3.35-3.23 (m, 2H, inferred; mostly obscured by solvent peak), 2.72-2.62 (m, 1H), 2.37-2.26 (m, 2H), 2.19-2.08 (m, 1H), 1.93-1.75 (m, 2H), 1.64 (ddd , J = 7.6, 4.2, 2.1 Hz, 1H), 1.41 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.00-0.95 (m, 6H).
Пример 2Example 2
N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N 2-(пирролидин-1-илацетил)-L-лейцинамид, трифторацетат (2) N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl- N 2 -(pyrrolidin-1-ylacetyl)-L-leucinamide, trifluoroacetate ( 2 )
Стадия 1. Синтез бензил 4-метил-L-лейцината, соли п-толуолсульфоновой кислоты (C13).
Суспензию 4-метил-L-лейцина (9,5 г, 65 ммоль), бензилового спирта (28,3 г, 262 ммоль), и моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (14,9 г, 78,3 ммоль) в толуоле (200 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение ночи; ловушку Дина-Старка применяют для азеотропного удаления полученной воды. Реакционную смесь затем концентрируют в вакууме, затем остаток разбавляют диэтиловым эфиром (200 мл) и этилацетатом (100 мл). Полученную суспензию перемешивают в течение 1,5 часов и фильтруют; фильтровальную лепешку промывают диэтиловым эфиром с получением C13 в виде белого твердого вещества. Выход: 24,9 г, 61,1 ммоль, 94%. ЖХМС m/z 236,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,30 (шс, 3H), 7,47 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,44-7,36 (м, 5H), 7,11 (д, J=7,8 Гц, 2H), 5,23 (AB квартет, J AB=12,3 Гц, δνAB=13,7 Гц, 2H), 4,02 (дд, J=7,3, 4,5 Гц, 1H), 2,29 (с, 3H), 1,81 (дд, J=14,5, 7,3 Гц, 1H), 1,57 (дд, J=14,5, 4,6 Гц, 1H), 0,90 (с, 9H).Suspension of 4-methyl-L-leucine (9.5 g, 65 mmol), benzyl alcohol (28.3 g, 262 mmol), and p -toluenesulfonic acid monohydrate (14.9 g, 78.3 mmol) in toluene ( 200 ml) heated at the boil under reflux overnight; a Dean-Stark trap is used to azeotropically remove the produced water. The reaction mixture was then concentrated in vacuo , then the residue was diluted with diethyl ether (200 ml) and ethyl acetate (100 ml). The resulting suspension is stirred for 1.5 hours and filtered; the filter cake is washed with diethyl ether to give C13 as a white solid. Yield: 24.9 g, 61.1 mmol, 94%. LCMS m/z 236.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.30 (br s, 3H), 7.47 (d, J =8.1 Hz, 2H), 7.44-7.36 (m, 5H) , 7.11 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 5.23 (AB quartet, J AB = 12.3 Hz, δν AB = 13.7 Hz, 2H), 4.02 (dd, J =7.3, 4.5 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.81 (dd, J =14.5, 7.3 Hz, 1H), 1.57 (dd, J = 14.5, 4.6 Hz, 1H), 0.90 (s, 9H).
Стадия 2. Синтез бензил 4-метил-N-(пирролидин-1-илацетил)-L-лейцината (C14).
0°C смесь C13 (800 мг, 1,96 ммоль) и пирролидин-1-илуксусной кислоты (254 мг, 1,97 ммоль) в N, N-диметилформамиде (4 мл) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 746 мг, 1,96 ммоль), затем раствором 4-метилморфолина (0,496 мл, 4,51 ммоль) в дихлорметане (1 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 часов, добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл) при 0°C; полученную смесь экстрагируют этилацетатом (2×60 мл), и объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Очистку хроматографией на силикагеле проводят дважды (Градиент: 0% - 20% этилацетат в гептане, затем вторая хроматографическая очистка с применением 0% - 10% этилацетат в гептане), с получением C14 в виде камеди (761 мг). Этот продукт применяют непосредственно на следующей стадии. ЖХМС m/z 347,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,40-7,29 (м, 5H), 5,16 (AB квартет, J AB=12,2 Гц, δνAB=11,1 Гц, 2H), 4,56 (дд, J=9,0, 3,1 Гц, 1H), 3,76 (AB квартет, J AB=15,6 Гц, δνAB=13,6 Гц, 2H), 3,17-3,06 (м, 4H), 2,03-1,93 (м, 4H), 1,81 (дд, J=14,5, 3,1 Гц, 1H), 1,60 (дд, J=14,5, 9,0 Гц, 1H), 0,95 (с, 9H).A 0°C mixture of C13 (800 mg, 1.96 mmol) and pyrrolidin-1-ylacetic acid (254 mg, 1.97 mmol) in N,N -dimethylformamide (4 ml) was treated with O- (7-azabenzotriazole-1) hexafluorophosphate -yl) -N, N, N', N'- tetramethyluronium (GATU; 746 mg, 1.96 mmol), then with a solution of 4-methylmorpholine (0.496 ml, 4.51 mmol) in dichloromethane (1 ml). Then the reaction mixture was stirred at 0°C for 2 hours, saturated aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml) was added at 0°C; the resulting mixture was extracted with ethyl acetate (2×60 ml) and the combined organic layers dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Purification by silica gel chromatography was carried out twice (Gradient: 0%-20% ethyl acetate in heptane followed by a second chromatographic purification using 0%-10% ethyl acetate in heptane) to give C14 as a gum (761 mg). This product is used directly in the next step. LCMS m/z 347.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.40-7.29 (m, 5H), 5.16 (AB quartet, J AB= 12.2 Hz, δν AB= 11.1 Hz, 2H ), 4.56 (dd, J =9.0, 3.1 Hz, 1H), 3.76 (AB quartet, J AB= 15.6 Hz, δν AB= 13.6 Hz, 2H), 3, 17-3.06 (m, 4H), 2.03-1.93 (m, 4H), 1.81 (dd, J =14.5, 3.1 Hz, 1H), 1.60 (dd, J = 14.5, 9.0 Hz, 1H), 0.95 (s, 9H).
Стадия 3. Синтез 4-метил-N-(пирролидин-1-илацетил)-L-лейцина (C15).Step 3. Synthesis of 4-methyl- N- (pyrrolidin-1-ylacetyl)-L-leucine ( C15 ).
В раствор C14 (с предыдущей стадии; 760 мг, ≤1,96 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляют палладий на угле (76,0 мг). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре под водородом (50 ф./кв.д.) в течение ночи, затем ЖХМС анализ показывает превращение в C15: ЖХМС m/z 257,4 [M+H]+. Реакционную смесь фильтруют дважды через 0,15 мкм фильтр, и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток дважды растворяют в смеси этилацетата и гептана (1:1, 2×20 мл), затем концентрируют при пониженном давлении; это дает C15 в виде твердого вещества (646 мг). Порции этого материала применяют в последующих химических реакциях без дальнейшей очистки. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,46 (д, J=8,3 Гц, 1H), 4,31 (ддд, J=8,9, 8,6, 3,0 Гц, 1H), 3,74-3,60 (м, 2H), 3,00 ш (с, 4H), 1,90-1,79 (м, 4H), 1,70 (дд, компонент системы АВХ, J=14,3, 3,0 Гц, 1H), 1,56 (дд, компонент системы АВХ, J=14,3, 9,2 Гц, 1H), 0,90 (с, 9H).To a solution of C14 (from the previous step; 760 mg, ≤1.96 mmol) in methanol (5 ml) was added palladium on charcoal (76.0 mg). The reaction mixture was stirred at room temperature under hydrogen (50 psi) overnight, then LCMS analysis showed conversion to C15 : LCMS m/z 257.4 [M+H] + . The reaction mixture is filtered twice through a 0.15 µm filter and the filtrate is concentrated in vacuo . The residue is dissolved twice in a mixture of ethyl acetate and heptane (1:1, 2×20 ml), then concentrated under reduced pressure; this gives C15 as a solid (646 mg). Portions of this material are used in subsequent chemical reactions without further purification. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.46 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.31 (ddd, J = 8.9, 8.6, 3.0 Hz, 1H), 3.74-3.60 (m, 2H), 3.00 br (s, 4H), 1.90-1.79 (m, 4H), 1.70 (dd, ABX system component, J =14.3, 3.0 Hz, 1H), 1.56 (dd, system component ABX, J =14.3, 9.2 Hz, 1H), 0.90 (s, 9H).
Стадия 4. Синтез N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N 2-(пирролидин-1-илацетил)-L-лейцинамид, трифторацетата (2).Stage 4. Synthesis of N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl- N 2 -(pyrrolidin-1-ylacetyl)- L-leucinamide, trifluoroacetate ( 2 ).
Смесь C15 (с предыдущей стадии; 30 мг, ≤91 мкмоль) и C7 (со стадии 7 примера 1; 35,3 мг, ≤0,104 ммоль) в N, N-диметилформамиде (1 мл) охлаждают до 0°C и обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ, 97%; 39,9 мг, 0,102 ммоль), затем раствором 4-метилморфолина (28,0 мкл, 0,255 ммоль) в дихлорметане (0,25 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение примерно 1,5 часов, ее разбавляют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 мл) при 0°C и экстрагируют дихлорметаном (4×4 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме и очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил, содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5% - 25% B в течение 8,5 минут, затем 25% - 95% ацетонитрил в течение 0,5 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-N 2-(пирролидин-1-илацетил)-L-лейцинамида, трифторацетата (2) в виде камеди. Выход: 8,1 мг, 16 мкмоль, 18% за 3 стадии. ЖХМС m/z 392,6 [M+H]+. Время удержания: 1,47 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis C18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.). Градиент: 5% - 95% B over 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты. Скорость потока: 2 мл/минуту).A mixture of C15 (from the previous step; 30 mg, ≤91 μmol) and C7 (from step 7 of example 1; 35.3 mg, ≤0.104 mmol) in N,N -dimethylformamide (1 ml) was cooled to 0°C and treated with hexafluorophosphate O - (7-azabenzotriazol-1-yl) - N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU, 97%; 39.9 mg, 0.102 mmol), then with a solution of 4-methylmorpholine (28.0 μl, 0.255 mmol) in dichloromethane (0.25 ml). Then the reaction mixture was stirred at 0°C for about 1.5 hours, it was diluted with saturated aqueous sodium bicarbonate (3 ml) at 0°C and extracted with dichloromethane (4×4 ml). The combined organic layers were concentrated in vacuo and purified by reverse phase HPLC (Column: Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5% - 25% B over 8.5 minutes, then 25% - 95% acetonitrile over 0.5 minutes, then 95 % B for 1.0 min; Flow rate: 25 ml/min) to give N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- 4-methyl- N 2 -(pyrrolidin-1-ylacetyl)-L-leucinamide, trifluoroacetate ( 2 ) as gum. Yield: 8.1 mg, 16 µmol, 18% over 3 steps. LCMS m/z 392.6 [M+H] + . Retention time: 1.47 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis C18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5% - 95% B over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes Flow rate: 2 ml/minute ).
Пример 3Example 3
N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-(2,6-дихлорбензоил)-4-метил-L-лейцинамид (3) N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- N 2 -(2,6-dichlorobenzoyl)-4-methyl-L-leucinamide ( 3 )
Стадия 1. Синтез 3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида, метансульфоната (C16).
В раствор C5 (6,13 г, ≤19 ммоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (40 мл) добавляют метансульфоновую кислоту (1,83 г, 19 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем ее концентрируют в вакууме, ресуспендируют в смеси толуола и гептана, и концентрируют еще один раз с получением гигроскопичного стекла (7,47 г). Часть этого продукта (6,47 г) разбавляют и повторно концентрируют последовательно со следующим: смесь дихлорметана и этанола (2:3, 2×50 мл); этилацетата и этанола (2:3, 50 мл); этилацетата, гептана и дихлорметана (4:4:1, 2×50 мл). Полученный продукт растворяют в смеси ацетонитрила и воды (1:1, 22 мл) и лиофилизируют в течение 2 дней с получением C16 в виде стекла. Выход: 3,23 г, 12,1 ммоль, 73% за 2 стадии. ЖХМС m/z 172,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,03 (дд, J=9,1, 4,6 Гц, 1H), 3,43-3,35 (м, 2H), 2,82-2,72 (м, 1H), 2,71 (с, 3H), 2,49-2,38 (м, 1H), 2,12-1,96 (м, 2H), 1,94-1,81 (м, 1H).To a solution of C5 (6.13 g, ≤19 mmol) in 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (40 mL) was added methanesulfonic acid (1.83 g, 19 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour, then it was concentrated in vacuo , taken up in a mixture of toluene and heptane, and concentrated once more to give a hydroscopic glass (7.47 g). A portion of this product (6.47 g) was diluted and re-concentrated sequentially with the following: a mixture of dichloromethane and ethanol (2:3, 2×50 ml); ethyl acetate and ethanol (2:3, 50 ml); ethyl acetate, heptane and dichloromethane (4:4:1, 2×50 ml). The resulting product was dissolved in a mixture of acetonitrile and water (1:1, 22 ml) and lyophilized for 2 days to obtain C16 as a glass. Yield: 3.23 g, 12.1 mmol, 73% over 2 steps. LCMS m/z 172.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.03 (dd, J =9.1, 4.6 Hz, 1H), 3.43-3.35 (m, 2H), 2.82- 2.72 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.49-2.38 (m, 1H), 2.12-1.96 (m, 2H), 1.94-1, 81 (m, 1H).
Стадия 2. Синтез N-(трет-бутоксикарбонил)-4-метил-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C17).
0°C раствор C16 (1,34 г, 5,02 ммоль) и N-(трет-бутоксикарбонил)-4-метил-L-лейцина (1,28 г, 5,22 ммоль) в N, N-диметилформамиде (7,0 мл) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ, 97%; 2,04 г, 5,20 ммоль), затем раствором 4-метилморфолина (1,43 мл, 13,0 ммоль) в дихлорметане (3 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2,25 часов, ее гасят при 0°C добавлением хлористоводородной кислоты (1 M; 30 мл) и затем разбавляют дихлорметаном (50 мл). Органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (30 мл), и объединенные водные слои экстрагируют дихлорметаном (60 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и суспендируют/концентрируют с гептаном (3×10 мл). Очистка остатка хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 20% метанол в этилацетате) дает C17 в виде твердого вещества. Выход: 1,42 г, 3,56 ммоль, 71%. ЖХМС m/z 399,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 6,83 (д, J=7,4 Гц, <1H, неполностью заменен растворителем), 4,43 (дд, J=11,2, 4,2 Гц, 1H), 4,11-4,05 (м, 1H), 3,38-3,24 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,52-2,41 (м, 1H), 2,40-2,30 (м, 1H), 2,13 (ддд, J=14,0, 11,2, 4,5 Гц, 1H), 1,91-1,75 (м, 2H), 1,71 (дд, компонент системы АВХ, J=14,4, 3,2 Гц, 1H), 1,51 (дд, компонент системы АВХ, J=14,4, 9,3 Гц, 1H), 1,45 (с, 9H), 0,97 (с, 9H).0°C solution of C16 (1.34 g, 5.02 mmol) and N- ( tert -butoxycarbonyl)-4-methyl-L-leucine (1.28 g, 5.22 mmol) in N,N -dimethylformamide ( 7.0 ml) is treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU, 97%; 2.04 g, 5.20 mmol), then with solution 4 -methylmorpholine (1.43 ml, 13.0 mmol) in dichloromethane (3 ml). The reaction mixture is then stirred at 0°C for 2.25 hours, it is quenched at 0°C by the addition of hydrochloric acid (1 M; 30 ml) and then diluted with dichloromethane (50 ml). The organic layer was washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (30 ml) and the combined aqueous layers were extracted with dichloromethane (60 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and suspended/concentrated with heptane (3×10 ml). Purification of the residue by chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 20% methanol in ethyl acetate) gave C17 as a solid. Yield: 1.42 g, 3.56 mmol, 71%. LCMS m/z 399.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 6.83 (d, J =7.4 Hz, <1H, not completely replaced by solvent), 4.43 (dd, J =11.2, 4.2 Hz , 1H), 4.11-4.05 (m, 1H), 3.38-3.24 (m, 2H, inferred; partially covered by solvent peak), 2.52-2.41 (m, 1H), 2.40-2.30 (m, 1H), 2.13 (ddd, J =14.0, 11.2, 4.5 Hz, 1H), 1.91-1.75 (m, 2H), 1.71 (dd, ABX system component, J =14.4, 3.2 Hz, 1H), 1.51 (dd, ABX system component, J =14.4, 9.3 Hz, 1H), 1, 45 (s, 9H), 0.97 (s, 9H).
Стадия 3. Синтез 4-метил-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида, метансульфоната (C18).Step 3. Synthesis of 4-methyl-L-leucyl-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanineamide, methanesulfonate ( C18 ).
Метансульфоновую кислоту (32,6 мкл, 0,502 ммоль) добавляют в раствор C17 (200 мг, 0,502 ммоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 40 минут, затем ее концентрируют в вакууме, растворяют в этилацетате и концентрируют еще один раз с получением C18 в виде твердого вещества (238 мг). Большую часть этого продукта применяют на следующей стадии. ЖХМС m/z 299,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,53 (дд, J=10,3, 5,0 Гц, 1H), 3,91 (дд, J=7,6, 5,5 Гц, 1H), 3,41-3,27 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,70 (с, 3H), 2,57-2,47 (м, 1H), 2,41 (дддд, J=12,0, 8,6, 7,0, 3,2 Гц, 1H), 2,15 (ддд, J=14,0, 10,3, 5,0 Гц, 1H), 2,01 (дд, J=14,4, 7,5 Гц, 1H), 1,96-1,85 (м, 1H), 1,78 (ддд, J=14,1, 9,1, 5,0 Гц, 1H), 1,59 (дд, J=14,3, 5,5 Гц, 1H), 1,01 (с, 9H).Methansulfonic acid (32.6 μl, 0.502 mmol) is added to a solution of C17 (200 mg, 0.502 mmol) in 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (1.5 ml). The reaction mixture was stirred at room temperature for 40 minutes, then concentrated in vacuo , dissolved in ethyl acetate and concentrated once more to give C18 as a solid (238 mg). Most of this product is used in the next step. LCMS m/z 299.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.53 (dd, J =10.3, 5.0 Hz, 1H), 3.91 (dd, J =7.6, 5.5 Hz, 1H), 3.41-3.27 (m, 2H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.70 (s, 3H), 2.57-2.47 (m, 1H), 2.41 (dddd , J =12.0, 8.6, 7.0, 3.2 Hz, 1H), 2.15 (ddd, J =14.0, 10.3, 5.0 Hz, 1H), 2.01 (dd, J =14.4, 7.5 Hz, 1H), 1.96-1.85 (m, 1H), 1.78 (ddd, J =14.1, 9.1, 5.0 Hz , 1H), 1.59 (dd, J =14.3, 5.5 Hz, 1H), 1.01 (s, 9H).
Стадия 4. Синтез N-(2,6-дихлорбензоил)-4-метил-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C19).Step 4. Synthesis of N- (2,6-dichlorobenzoyl)-4-methyl-L-leucyl-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanineamide ( C19 ).
0°C суспензию C18 (с предыдущей стадии: 234 мг, ≤0,49 ммоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывают триэтиламином (170 мкл, 1,2 ммоль), затем по каплям добавляют раствор 2,6-дихлорбензоилхлорида (130 мг, 0,621 ммоль) в дихлорметане (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем ее разбавляют дихлорметаном (60 мл), затем промывают хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл), затем насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (30 мл). Органический слой сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и подвергают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 30% метанол в этилацетате) с получением C19. Выход: 120 мг, 0,255 ммоль, 52% за 2 стадии. ЖХМС m/z 471,4 (наблюдается паттерн дихлорного изотопа) [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 8,45 (д, J=7,9 Гц, <1H, неполностью заменен растворителем), 7,45-7,35 (м, 3H), 4,59 (дд, J=7,8, 4,5 Гц, 1H), 4,52-4,44 (м, 1H), 3,37-3,24 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,65-2,55 (м, 1H), 2,37 (дддд, J=12,5, 8,8, 6,6, 2,8 Гц, 1H), 2,19 (ддд, J=13,9, 11,3, 4,5 Гц, 1H), 1,91-1,72 (м, 3H), 1,66 (дд, компонент системы АВХ, J=14,4, 7,8 Гц, 1H), 1,03 (с, 9H).A 0°C suspension of C18 (from the previous step: 234 mg, ≤0.49 mmol) in dichloromethane (2 ml) is treated with triethylamine (170 μl, 1.2 mmol), then a solution of 2,6-dichlorobenzoyl chloride (130 mg , 0.621 mmol) in dichloromethane (0.2 ml). The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour, then it was diluted with dichloromethane (60 ml), then washed with hydrochloric acid (1 M; 30 ml), then with saturated aqueous sodium bicarbonate (30 ml). The organic layer is dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and subjected to silica gel chromatography (Gradient: 0% - 30% methanol in ethyl acetate) to give C19 . Yield: 120 mg, 0.255 mmol, 52% over 2 steps. LCMS m/z 471.4 (dichlorine isotope pattern observed) [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 8.45 (d, J =7.9 Hz, <1H, not completely replaced by solvent), 7.45-7.35 (m, 3H), 4.59 (dd, J =7.8, 4.5 Hz, 1H), 4.52-4.44 (m, 1H), 3.37-3.24 (m, 2H, inferred; partly covered by solvent peak), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.37 (dddd, J =12.5, 8.8, 6.6, 2.8 Hz, 1H), 2.19 (ddd, J =13 .9, 11.3, 4.5 Hz, 1H), 1.91-1.72 (m, 3H), 1.66 (dd, ABX system component, J = 14.4, 7.8 Hz, 1H ), 1.03 (s, 9H).
Стадия 5. Синтез N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-(2,6-дихлорбензоил)-4-метил-L-лейцинамида (3).Step 5. Synthesis of N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- N 2 -(2,6-dichlorobenzoyl)-4-methyl- L-leucinamide ( 3 ).
Раствор C19 (90 мг, 0,19 ммоль) и 1H-имидазола (33,8 мг, 0,496 ммоль) в пиридине (1 мл) охлаждают на бане ацетонитрил/сухой лед (-35°C). Туда добавляют оксихлорид фосфора (0,100 мл, 1,07 ммоль), и реакционную смесь перемешивают at -30°C - -20°C. Через 30 минут, добавляют пиридин (2 мл) для облегчения перемешивания; через 1 час, дихлорметан (2 мл) добавляют по той же причине. После 2 часов реакции, снова добавляют оксихлорид фосфора (0,100 мл, 1,07 ммоль), и перемешивание продолжают в течение 30 минут при -30°C, затем реакционную смесь нагревают до 0°C и перемешивают в течение еще 40 минут. Ее затем обрабатывают хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл) и экстрагируют дихлорметаном (2×60 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и подвергают хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 15% метанол в этилацетате) с получением твердого вещества (67 мг). Этот продукт объединяют с продуктом (12 мг) из аналогичной реакции, проводимой с применением C19 (30 мг, 64 мкмоль) и дважды берут в этилацетате (2×3 мл), затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток перемешивают со смесью этилацетата и гептана (1:3, 4 мл) при комнатной температуре в течение 40 минут и фильтруют; фильтровальную лепешку промывают смесью этилацетата и гептана (1:3, 5×2 мл) с получением N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-(2,6-дихлорбензоил)-4-метил-L-лейцинамида (3) в виде твердого вещества. Объединенный выход: 70 мг, 0,15 ммоль, 59%. ЖХМС m/z 453,3 (наблюдается паттерн дихлорного изотопа) [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,45-7,34 (м, 3H), 5,05 (дд, J=10,7, 5,4 Гц, 1H), 4,56 (дд, J=7,0, 5,7 Гц, 1H), 3,37-3,23 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,70-2,59 (м, 1H), 2,42-2,29 (м, 2H), 1,95-1,77 (м, 3H), 1,67 (дд, компонент системы АВХ, J=14,4, 7,0 Гц, 1H), 1,04 (с, 9H).A solution of C19 (90 mg, 0.19 mmol) and 1 H -imidazole (33.8 mg, 0.496 mmol) in pyridine (1 ml) was cooled in an acetonitrile/dry ice bath (−35° C.). Phosphorus oxychloride (0.100 ml, 1.07 mmol) was added thereto and the reaction mixture was stirred at -30°C to -20°C. After 30 minutes, pyridine (2 ml) is added to facilitate mixing; after 1 hour, dichloromethane (2 ml) is added for the same reason. After 2 hours of reaction, phosphorus oxychloride (0.100 ml, 1.07 mmol) is added again and stirring is continued for 30 minutes at -30°C, then the reaction mixture is warmed to 0°C and stirred for another 40 minutes. It is then treated with hydrochloric acid (1 M; 30 ml) and extracted with dichloromethane (2×60 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and subjected to silica gel chromatography (Gradient: 0% - 15% methanol in ethyl acetate) to give a solid (67 mg). This product is combined with the product (12 mg) from a similar reaction carried out using C19 (30 mg, 64 μmol) and taken up twice in ethyl acetate (2×3 ml), then concentrated under reduced pressure. The residue is stirred with a mixture of ethyl acetate and heptane (1:3, 4 ml) at room temperature for 40 minutes and filtered; the filter cake was washed with a mixture of ethyl acetate and heptane (1:3, 5×2 ml) to obtain N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- N 2 -(2,6-dichlorobenzoyl)-4-methyl-L-leucinamide ( 3 ) as a solid. Combined yield: 70 mg, 0.15 mmol, 59%. LCMS m/z 453.3 (dichlorine isotope pattern observed) [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.45-7.34 (m, 3H), 5.05 (dd, J =10.7, 5.4 Hz, 1H), 4.56 ( dd, J = 7.0, 5.7 Hz, 1H), 3.37-3.23 (m, 2H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.70-2.59 (m, 1H), 2 .42-2.29 (m, 2H), 1.95-1.77 (m, 3H), 1.67 (dd, ABX system component, J =14.4, 7.0 Hz, 1H), 1 .04 (s, 9H).
Пример 4Example 4
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (4) N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan- 2-yl]-4-methoxy-1 H -indole-2-carboxamide ( 4 )
Стадия 1. Синтез метил L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланината, гидрохлорида (C20).
Раствор метил N-(трет-бутоксикарбонил)-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланината (см. Prior, A.M., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 6317-6320; 2,0 г, 5,0 ммоль) в смеси метанола (2 мл) и раствора гидрохлорида в этилацетате (4 M; 20 мл) перемешивают при 25°C в течение 1 часа. Концентрация в вакууме дает C20 в виде белого твердого вещества (1,92 г, количественная оценка). 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 9,09-8,98 (м, 1H), 8,39 (шс, 3H), 7,69 (с, 1H), 4,44-4,31 (м, 1H), 3,22-3,07 (м, 2H), 2,5-2,38 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,24-2,11 (м, 1H), 2,11-1,99 (м, 1H), 1,78-1,48 (м, 5H), 0,92 (д, J=6,5 Гц, 3H), 0,89 (д, J=6,5 Гц, 3H).Methyl N- ( tert -butoxycarbonyl)-L-leucyl-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L- alaninate solution (see Prior, AM, et al., Bioorg. Med. Chem Lett. 2013 , 23 , 6317-6320; 2.0 g, 5.0 mmol) in a mixture of methanol (2 ml) and a solution of hydrochloride in ethyl acetate (4 M; 20 ml) was stirred at 25°C for 1 hour. Concentration in vacuo gives C20 as a white solid (1.92 g, quant.). 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 9.09-8.98 (m, 1H), 8.39 (br s, 3H), 7.69 (s, 1H), 4, 44-4.31 (m, 1H), 3.22-3.07 (m, 2H), 2.5-2.38 (m, 1H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.24-2, 11 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 1H), 1.78-1.48 (m, 5H), 0.92 (d, J =6.5 Hz, 3H), 0 .89 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
Стадия 2. Синтез метил N-(4-метокси-1H-индол-2-карбонил)-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланината (C21).
Гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 494 мг, 1,30 ммоль) и N, N-диизопропилэтиламина (388 мг, 3,00 ммоль) добавляют к 0°C раствору C20 (из эксперимента меньшего масштаба аналогичного стадии 1; 336 мг, ≤0,840 ммоль) и 4-метокси-1H-индол-2-карбоновой кислоты (159 мг, 0,832 ммоль) в N, N-диметилформамид (6 мл). Раствор перемешивают при 0°C в течение 1,5 часов, затем выливают в воду/лед (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (элюент: 10:1 дихлорметан/метанол) дает C21 в виде желтого масла. Выход: 380 мг, 0,804 ммоль, 97%. ЖХМС m/z 473,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,59-11,53 (м, 1H), 8,53 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,37 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,37-7,33 (м, 1H), 7,09 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 7,00 (д, компонент АВ квартета, J=8,2 Гц, 1H), 6,50 (д, J=7,6 Гц, 1H), 4,56-4,47 (м, 1H), 4,40-4,31 (м, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,62 (с, 3H), 3,18-3,05 (м, 2H), 2,41-2,29 (м, 1H), 2,15-2,03 (м, 2H), 1,78-1,49 (м, 5H), 0,93 (д, J=6,3 Гц, 3H), 0,89 (д, J=6,4 Гц, 3H).Hexafluorophosphate O - (7-azabenzotriazol-1-yl) - N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU; 494 mg, 1.30 mmol) and N, N -diisopropylethylamine (388 mg, 3.00 mmol) added to a 0°C solution of C20 (from a smaller scale experiment similar to step 1; 336 mg, ≤0.840 mmol) and 4-methoxy- 1H -indole-2-carboxylic acid (159 mg, 0.832 mmol) in N,N -dimethylformamide (6 ml). The solution was stirred at 0°C for 1.5 hours, then poured into water/ice (10 ml) and extracted with ethyl acetate (3×10 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (eluent: 10:1 dichloromethane/methanol) gave C21 as a yellow oil. Yield: 380 mg, 0.804 mmol, 97%. LCMS m/z 473.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.59-11.53 (m, 1H), 8.53 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.37-7.33 (m, 1H), 7.09 (dd, J =8.8 Hz, 1H), 7.00 ( e, component of the AB quartet, J = 8.2 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.56-4.47 (m, 1H), 4.40-4 .31 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.18-3.05 (m, 2H), 2.41-2.29 (m, 1H ), 2.15-2.03 (m, 2H), 1.78-1.49 (m, 5H), 0.93 (d, J =6.3 Hz, 3H), 0.89 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
Стадия 3. Синтез N-(4-метокси-1H-индол-2-карбонил)-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланин (C22).Step 3. Synthesis of N- (4-methoxy- 1H -indole-2-carbonyl)-L-leucyl-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanine ( C22 ).
К перемешиваемой смеси хлорида кальция (0,887 г, 7,99 ммоль) и гидроксида натрия (0,168 г, 4,20 ммоль) в 2-пропаноле (7 мл) и воде (3 мл) добавляют C21 (1,8 г, 3,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 6 часов, затем ее концентрируют в вакууме, разбавляют водой (4 мл), доводят до pH 4 добавлением 1 M хлористоводородной кислоты и экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (элюент: 10:1:0,1 дихлорметан/метанол/уксусной кислоты) дает C22 в виде желтого твердого вещества. Выход: 1,76 г, 3,84 ммоль, 100%. ЖХМС m/z 459,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d), характеристические пики: δ 6,51-6,43 (м, 1H), 4,80-4,66 (м, 1H), 4,60-4,45 (м, 1H), 3,92 (с, 3H), 3,36-3,18 (м, 2H), 2,59-2,44 (м, 1H).To a stirred mixture of calcium chloride (0.887 g, 7.99 mmol) and sodium hydroxide (0.168 g, 4.20 mmol) in 2-propanol (7 mL) and water (3 mL) was added C21 (1.8 g, 3. 8 mmol). The reaction mixture was stirred at 20°C for 6 hours, then it was concentrated in vacuo , diluted with water (4 ml), adjusted to pH 4 with 1 M hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate (3×10 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (eluent: 10:1:0.1 dichloromethane/methanol/acetic acid) gave C22 as a yellow solid. Yield: 1.76 g, 3.84 mmol, 100%. LCMS m/z 459.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ), characteristic peaks: δ 6.51-6.43 (m, 1H), 4.80-4.66 (m, 1H), 4.60-4.45 ( m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.36-3.18 (m, 2H), 2.59-2.44 (m, 1H).
Альтернативная стадия 3. Синтез N-(4-метокси-1H-индол-2-карбонил)-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланина (C22).Alternative Step 3 Synthesis of N- (4-methoxy- 1H -indole-2-carbonyl)-L-leucyl-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanine ( C22 ).
Раствор C21 (20 мг, 42 мкмоль) в тетрагидрофуране (0,4 мл) обрабатывают водным раствором, содержащим гидроксид лития (14,2 мг, 0,593 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 часов, ее разбавляют этилацетатом и промывают 10% водным раствором бисульфата калия. Органический слой затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C22 в виде белого твердого вещества. Выход: 20 мг, количественный. ЖХМС m/z 459,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,27 (с, 1H), 7,14 (дд, компонент системы АВХ, J=8, 8 Гц, 1H), 7,02 (д, компонент АВ квартета, J=8,3 Гц, 1H), 6,50 (д, J=7,7 Гц, 1H), 4,66 (дд, J=9,0, 5,9 Гц, 1H), 4,52 (дд, J=11,7, 3,9 Гц, 1H), 3,92 (с, 3H), 3,30-3,18 (м, 2H), 2,65-2,52 (м, 1H), 2,38-2,26 (м, 1H), 2,21 (ддд, J=14,0, 11,7, 4,1 Гц, 1H), 1,90-1,70 (м, 5H), 1,02 (д, J=6,3 Гц, 3H), 0,99 (д, J=6,3 Гц, 3H).A solution of C21 (20 mg, 42 μmol) in tetrahydrofuran (0.4 ml) is treated with an aqueous solution containing lithium hydroxide (14.2 mg, 0.593 mmol). The reaction mixture was then stirred at room temperature for 2.5 hours, diluted with ethyl acetate, and washed with 10% aqueous potassium bisulfate. The organic layer is then dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C22 as a white solid. Yield: 20 mg, quantitative. LCMS m/z 459.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.27 (s, 1H), 7.14 (dd, ABX component, J =8.8 Hz, 1H), 7.02 (d, AB component quartet, J = 8.3 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.66 (dd, J = 9.0, 5.9 Hz, 1H), 4, 52 (dd, J = 11.7, 3.9 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.30-3.18 (m, 2H), 2.65-2.52 (m, 1H), 2.38-2.26 (m, 1H), 2.21 (ddd, J = 14.0, 11.7, 4.1 Hz, 1H), 1.90-1.70 (m, 5H), 1.02 (d, J =6.3 Hz, 3H), 0.99 (d, J =6.3 Hz, 3H).
Стадия 4. Синтез N-(4-метокси-1H-индол-2-карбонил)-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C23).Step 4. Synthesis of N- (4-methoxy- 1H -indole-2-carbonyl)-L-leucyl-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanineamide ( C23 ).
К 0°C раствору C22 (1,76 г, 3,84 ммоль) и хлорида аммония (0,246 г, 4,60 ммоль) в N, N-диметилформамиде (15 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 1,90 г, 5,00 ммоль) и N, N-диизопропилэтиламин (1,49 г, 11,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1,5 часов, N, N-диизопропилэтиламин (2,3 г, 18 ммоль) используют для доведения pH до 8. Реакционную смесь перемешивают в течение еще 30 минут, затем ее выливают в смесь хлористоводородной кислоты (1 M; 20 мл, 20 ммоль) и льда. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом (3×10 мл); объединенные органические слои промывают последовательно хлористоводородной кислотой (1 M; 10 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: 10:1 дихлорметан/метанол), с получением C23 в виде желтого твердого вещества. Выход: 1,09 г, 2,38 ммоль, 62%. ЖХМС m/z 458,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,62-11,55 (м, 1H), 8,42 (д, J=7,9 Гц, 1H), 8,04 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,60 (шс, 1H), 7,38-7,26 (м, 2H), 7,10 (дд, компонент системы АВХ, J=8, 8 Гц, 1H), 7,06 (шс, 1H), 7,00 (д, компонент АВ квартета, J=8,2 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 4,54-4,41 (м, 1H), 4,34-4,22 (м, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,17-3,01 (м, 2H), 2,31-1,95 (м, 3H), 1,76-1,45 (м, 5H), 0,92 (д, J=6,1 Гц, 3H), 0,88 (д, J=6,3 Гц, 3H).To a 0°C solution of C22 (1.76 g, 3.84 mmol) and ammonium chloride (0.246 g, 4.60 mmol) in N,N -dimethylformamide (15 mL) was added hexafluorophosphate O- (7-azabenzotriazole-1- yl) -N,N,N',N'- tetramethyluronium (GATU; 1.90 g, 5.00 mmol) and N, N -diisopropylethylamine (1.49 g, 11.5 mmol). The reaction mixture is then stirred at 0°C for 1.5 hours, N,N -diisopropylethylamine (2.3 g, 18 mmol) is used to adjust the pH to 8. The reaction mixture is stirred for another 30 minutes, then it is poured into the mixture hydrochloric acid (1 M; 20 ml, 20 mmol) and ice. The resulting mixture is extracted with ethyl acetate (3×10 ml); the combined organic layers are washed successively with hydrochloric acid (1 M; 10 ml) and saturated aqueous sodium chloride solution (10 ml), dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and purified by chromatography on silica gel (eluent: 10:1 dichloromethane/methanol ) to give C23 as a yellow solid. Yield: 1.09 g, 2.38 mmol, 62%. LCMS m/z 458.0 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.62-11.55 (m, 1H), 8.42 (d, J =7.9 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (ws, 1H), 7.38-7.26 (m, 2H), 7.10 (dd, ABX system component, J =8.8 Hz, 1H), 7.06 (ws, 1H), 7.00 (d, AB component of the quartet, J = 8.2 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.54-4 .41 (m, 1H), 4.34-4.22 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.17-3.01 (m, 2H), 2.31-1.95 (m, 3H), 1.76-1.45 (m, 5H), 0.92 (d, J =6.1 Hz, 3H), 0.88 (d, J =6.3 Hz, 3H) .
Стадия 5. Синтез N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (4).Stage 5. Synthesis of N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl- 1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy- 1H -indole-2-carboxamide ( 4 ).
К 0°C смеси C23 (500 мг, 1,09 ммоль) и N, N-диизопропилэтиламина (565 мг, 4,37 ммоль) в тетрагидрофуране (8 мл) добавляют 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинан 2,4,6-триоксид (50% раствор по массе в этилацетате; 2,78 г, 4,37 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 50°C в течение 3 часов, ее концентрируют в вакууме, разбавляют водой (5 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×5 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме; очистка хроматографией на силикагеле (элюент: 10:1 дихлорметан/метанол) затем ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: YMC-Actus Triart C18, 50×250 мм, 7 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,225% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 18% - 58% B; Скорость потока: 25 мл/минуту) дает N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (4) в виде желтого твердого вещества. Выход: 130 мг, 0,296 ммоль, 27%. ЖХМС m/z 440,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,58 (шс, 1H), 8,90 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,71 (шс, 1H), 7,38-7,35 (м, 1H), 7,09 (дд, компонент системы АВХ, J=8, 8 Гц, 1H), 7,00 (д, компонент АВ квартета, J=8,2 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 5,02-4,93 (м, 1H), 4,49-4,40 (м, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,19-3,05 (м, 2H), 2,41-2,29 (м, 1H), 2,20-2,06 (м, 2H), 1,85-1,62 (м, 4H), 1,58-1,47 (м, 1H), 0,94 (д, J=6,3 Гц, 3H), 0,89 (д, J=6,3 Гц, 3H).To a 0°C mixture of C23 (500 mg, 1.09 mmol) and N,N -diisopropylethylamine (565 mg, 4.37 mmol) in tetrahydrofuran (8 ml) was added ,2,4,6-
Альтернативный синтез примера 4Alternative Synthesis of Example 4
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (4) N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan- 2-yl]-4-methoxy-1 H -indole-2-carboxamide ( 4 )
Стадия 1. Синтез N-[(4-метокси-1H-индол-2-ил)карбонил]-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C23).
Раствор аммиака в метаноле (7,0 M; 21 мл, 150 ммоль) добавляют в раствор C21 (500 мг, 1,06 ммоль) в метаноле (2,0 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов, и снова добавляют раствор аммиака в метаноле (7,0 M; 7,0 мл, 49 ммоль) и перемешивание продолжают в течение ночи. Раствор аммиака в метаноле (7,0 M; 7,0 мл, 49 ммоль) снова добавляют, и перемешивание продолжают в течение 24 часов, затем проводят конечную обработку раствором аммиака в метаноле (7,0 M; 7,0 мл, 49 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение еще одного дня, затем ее концентрируют в вакууме. Остаток объединяют с продуктом аналогичной реакции (350 мг из выделенных 512 мг) с применением C21 (500 мг, 1,06 ммоль), и смесь повторно растворяют в этилацетате (5×10 мл) и концентрируют при пониженном давлении с получением C23 (835 мг). Этот продукт применяют непосредственно на следующей стадии. ЖХМС m/z 458,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,29 (д, J=0,9 Гц, 1H), 7,15 (дд, компонент системы АВХ, J=8, 8 Гц, 1H), 7,03 (шд, компонент АВ квартета, J=8,3 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 4,59 (дд, J=9,7, 5,0 Гц, 1H), 4,45 (дд, J=11,3, 4,2 Гц, 1H), 3,93 (с, 3H), 3,34-3,19 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,57-2,47 (м, 1H), 2,31 (дддд, J=12,6, 8,5, 6,8, 2,8 Гц, 1H), 2,15 (ддд, J=14,0, 11,4, 4,6 Гц, 1H), 1,88-1,67 (м, 5H), 1,02 (д, J=6,1 Гц, 3H), 0,98 (д, J=6,1 Гц, 3H).A solution of ammonia in methanol (7.0 M; 21 ml, 150 mmol) was added to a solution of C21 (500 mg, 1.06 mmol) in methanol (2.0 ml). Then the reaction mixture was stirred at room temperature for 6 hours, and a solution of ammonia in methanol (7.0 M; 7.0 ml, 49 mmol) was added again and stirring was continued overnight. Ammonia in methanol (7.0 M; 7.0 ml, 49 mmol) was added again and stirring was continued for 24 hours, followed by a final treatment with ammonia in methanol (7.0 M; 7.0 ml, 49 mmol). ). The reaction mixture is stirred for another day, then it is concentrated in vacuo . The residue is combined with the product of a similar reaction (350 mg from 512 mg isolated) using C21 (500 mg, 1.06 mmol) and the mixture is redissolved in ethyl acetate (5×10 ml) and concentrated under reduced pressure to give C23 (835 mg ). This product is used directly in the next step. LCMS m/z 458.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.29 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.15 (dd, component of the ABX system, J = 8.8 Hz, 1H), 7 .03 (bd, AB component of the quartet, J = 8.3 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.59 (dd, J = 9.7, 5.0 Hz, 1H), 4.45 (dd, J =11.3, 4.2 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.34-3.19 (m, 2H, assumed; partially closed solvent peak), 2.57-2.47 (m, 1H), 2.31 (dddd, J =12.6, 8.5, 6.8, 2.8 Hz, 1H), 2.15 (ddd , J =14.0, 11.4, 4.6 Hz, 1H), 1.88-1.67 (m, 5H), 1.02 (d, J =6.1 Hz, 3H), 0, 98 (d, J =6.1 Hz, 3H).
Стадия 2. Синтез N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (4).
Раствор C23 (с предыдущей стадии; 835 мг, ≤1,78 ммоль) и 1H-имидазола (323 мг, 4,74 ммоль) в смеси пиридина (4 мл) и дихлорметана (4 мл) охлаждают до -35°C с применением бани ацетонитрил/сухой лед, затем оксихлорид фосфора (0,956 мл, 10,2 ммоль) добавляют по каплям в течение 5 минут. Реакционную смесь перемешивают при температуре от -30°C до -20°C в течение примерно 1,5 часов, затем обрабатывают хлористоводородной кислотой (1 M; 50 мл) и перемешивают в течение 1 часа. После экстрагирования дихлорметаном (3×60 мл), полученные органические слои объединяют, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток объединяют с очищенным 4 из другой партии (75 мг, 0,17 ммоль) и подвергают хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 5% метанол в этилацетате) с получением 4 в виде твердого вещества (800 мг). Этот продукт объединяют с продуктом (80 мг) из аналогичной реакции, проводимой с применением C23 (161 мг, 0,352 ммоль); полученный продукт перемешивают в диэтиловом эфире (25 мл) в течение 3 дней, затем его фильтруют. Фильтровальную лепешку промывают со смесью диэтилового эфира и гептана (1:1, 4×2 мл) с получением N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (4) в виде твердого вещества. Объединенный выход: 519 мг, 1,18 ммоль, приблизительно 50% за 2 стадии. ЖХМС m/z 440,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,57 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,90 (д, J=8,1 Гц, 1H), 8,46 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,37 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,10 (дд, компонент системы АВХ, J=8, 8 Гц, 1H), 7,00 (д, компонент АВ квартета, J=8,2 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 5,03-4,92 (м, 1H), 4,51-4,39 (м, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,19-3,05 (м, 2H), 2,42-2,30 (м, 1H), 2,20-2,06 (м, 2H), 1,80 (ддд, J=13,2, 9,3, 6,7 Гц, 1H), 1,75-1,63 (м, 3H), 1,58-1,47 (м, 1H), 0,94 (д, J=6,2 Гц, 3H), 0,89 (д, J=6,2 Гц, 3H).A solution of C23 (from the previous step; 835 mg, ≤1.78 mmol) and 1 H -imidazole (323 mg, 4.74 mmol) in a mixture of pyridine (4 ml) and dichloromethane (4 ml) was cooled to -35°C with using an acetonitrile/dry ice bath, then phosphorus oxychloride (0.956 mL, 10.2 mmol) was added dropwise over 5 minutes. The reaction mixture is stirred at -30°C to -20°C for about 1.5 hours, then treated with hydrochloric acid (1 M; 50 ml) and stirred for 1 hour. After extraction with dichloromethane (3×60 ml), the resulting organic layers are combined, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue was combined with purified 4 from another batch (75 mg, 0.17 mmol) and subjected to silica gel chromatography (Gradient: 0% - 5% methanol in ethyl acetate) to give 4 as a solid (800 mg). This product is combined with the product (80 mg) from a similar reaction carried out using C23 (161 mg, 0.352 mmol); the resulting product is stirred in diethyl ether (25 ml) for 3 days, then it is filtered. The filter cake is washed with a mixture of diethyl ether and heptane (1:1, 4×2 ml) to obtain N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )- 2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy- 1H -indole-2-carboxamide ( 4 ) as a solid. Combined yield: 519 mg, 1.18 mmol, approximately 50% over 2 steps. LCMS m/z 440.5 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.57 (d, J =2.3 Hz, 1H), 8.90 (d, J =8.1 Hz, 1H), 8.46 (d , J = 7.7 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.37 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.10 (dd, ABX system component, J = 8, 8 Hz, 1H), 7.00 (d, AB quartet component, J = 8.2 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.03-4.92 ( m, 1H), 4.51-4.39 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.19-3.05 (m, 2H), 2.42-2.30 (m, 1H), 2.20-2.06 (m, 2H), 1.80 (ddd, J = 13.2, 9.3, 6.7 Hz, 1H), 1.75-1.63 (m, 3H), 1.58-1.47 (m, 1H), 0.94 (d, J =6.2 Hz, 3H), 0.89 (d, J =6.2 Hz, 3H).
Примеры 5 и 6Examples 5 and 6
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид (5) и N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид (6) N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan- 2-yl]-4-methoxy-3-(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide ( 5 ) and N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2- [(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-7-(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide ( 6 )
В пробирку со сбросом давления, содержащую трифторметансульфонат цинка(II) (98%, 2,44 мг, 7,21 мкмоль) последовательно добавляют раствор 4 (0,79 мг, 1,8 мкмоль) в диметилсульфоксиде (60 мкл), трифторуксусной кислоте (0,56 мкл, 7,3 мкмоль) и трет-бутилгилропероксиде (70% в воде; 1,25 мкл, 9,03 мкмоль). Пробирку закрывают крышкой и нагревают до 50°C в течение ночи, затем реакционную смесь охлаждают и разбавляют ацетонитрилом и 1% раствором муравьиной кислоты в воде до объема приблизительно 2-3 мл. Конечная смесь композиции растворителя такова, чтобы полученная смесь была прозрачной, обычно примерно 20% - 30% ацетонитрил. Всю смесь подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Luna C18,10×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза A: 0,5% уксусной кислоты в воде; Подвижная фаза B: 9:1 ацетонитрил/метанол; Градиент: 15% B в течение 5 минут, затем 15% - 70% B линейный градиент в течение 84 минут, затем 70% - 95% B в течение 1 минуты, затем 95% B в течение 9 минут; Скорость потока: 2 мл/мин). Элюат пропускают через УФ/ВИД датчик и затем разделяют при приблизительно 15:1 между сборщиком фракций и масс спектрометром с ионной ловушкой. Фракции собирают каждые 20 секунд и те, которые потенциально содержат представляющие интерес продукты оценивают СВЭЖХ-УФ-МСВР перед объединением. Два продукта элюируют при приблизительно 71 и 75 минут. Продуктом, элюированным первым, является 5 {N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-3-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид}, и продуктом, элюированным вторым, является 6 {N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид}.To a depressurized tube containing zinc(II) trifluoromethanesulfonate (98%, 2.44 mg, 7.21 µmol) is added successively a solution of 4 (0.79 mg, 1.8 µmol) in dimethyl sulfoxide (60 µl), trifluoroacetic acid (0.56 µl, 7.3 µmol) and tert -butyl hydroperoxide (70% in water; 1.25 µl, 9.03 µmol). The tube is capped and heated to 50°C overnight, then the reaction mixture is cooled and diluted with acetonitrile and 1% formic acid in water to a volume of approximately 2-3 ml. The final mixture of the solvent composition is such that the resulting mixture is clear, typically about 20%-30% acetonitrile. The whole mixture was subjected to reverse phase HPLC (Column: Phenomenex Luna C18.10×250 mm, 10 µm; Mobile phase A: 0.5% acetic acid in water; Mobile phase B: 9:1 acetonitrile/methanol; Gradient: 15% B over 5 minutes, then 15% - 70% B linear gradient over 84 minutes, then 70% - 95% B over 1 minute, then 95% B over 9 minutes; flow rate: 2 ml/min). The eluate is passed through a UV/VIS sensor and then split at approximately 15:1 between a fraction collector and an ion trap mass spectrometer. Fractions are collected every 20 seconds and those potentially containing products of interest are evaluated by UPLC-UV-HRMS before pooling. The two products elute at approximately 71 and 75 minutes. The product eluted first is 5 { N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)- 4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-3-(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide}, and the product eluted second is 6 { N -[(2 S )- 1-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy -7-(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide}.
5 - Выход: 0,101 мг, 0,199 мкмоль, 11%. МС с высоким разрешением m/z 508,2171 [M+H]+; рассчитано для C24H29F3N5O4, 508,2172. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 12,22 (шс, 1H), 9,01 (д, J=7,6 Гц, 1H), 8,96 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,21 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 7,08 (д, J=8,2 Гц, 1H), 6,69 (д, J=7,8 Гц, 1H), 5,03-4,95 (м, 1H), 4,49-4,40 (м, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,22-3,08 (м, 2H), 2,43-2,34 (м, 1H), 2,23-2,10 (м, 2H), 1,82 (ддд, J=13,7, 9,3, 6,8 Гц, 1H), 1,78-1,66 (м, 2H), 1,62 (ддд, J=14,6, 9,7, 5,2 Гц, 1H), 1,49 (ддд, J=13,8, 8,8, 5,5 Гц, 1H), 0,97-0,88 (м, 6H). Время удержания: 8,43 минут (Аналитические условия. Колонка: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2,1×100 мм, 2,6 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 5% B в течение 0,5 минут, затем 5% - 70% B в течение 10,5 минут, затем 70% - 95% B в течение 2 минут; Скорость потока: 0,4 мл/мин). 5 - Yield: 0.101 mg, 0.199 µmol, 11%. High resolution MS m/z 508.2171 [M+H] + ; calculated for C 24 H 29 F 3 N 5 O 4 , 508.2172. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.22 (br s, 1H), 9.01 (d, J =7.6 Hz, 1H), 8.96 (d, J =7.9 Hz , 1H), 7.73 (s, 1H), 7.21 (dd, J = 8.8 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.69 (d , J = 7.8 Hz, 1H), 5.03-4.95 (m, 1H), 4.49-4.40 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.22- 3.08 (m, 2H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.23-2.10 (m, 2H), 1.82 (ddd, J =13.7, 9.3 , 6.8 Hz, 1H), 1.78-1.66 (m, 2H), 1.62 (ddd, J = 14.6, 9.7, 5.2 Hz, 1H), 1.49 ( ddd, J =13.8, 8.8, 5.5 Hz, 1H), 0.97-0.88 (m, 6H). Retention time: 8.43 minutes (Analytical conditions. Column: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2.1×100 mm, 2.6 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile ; Gradient: 5% B over 0.5 minutes, then 5% - 70% B over 10.5 minutes, then 70% - 95% B over 2 minutes; Flow rate: 0.4 ml/min).
6 - Выход: 14,7 мкг, 0,029 мкмоль, 1,6%. МС с высоким разрешением m/z 508,2178 [M+H]+; рассчитано для C24H29F3N5O4, 508,2172. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,47 (шс, 1H), 9,00 (д, J=7,9 Гц, 1H), 8,79 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,55 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,35 (с, 1H), 6,72 (д, J=8,3 Гц, 1H), 5,02-4,94 (м, 1H), 4,56-4,48 (м, 1H), 3,97 (с, 3H), 3,18-3,05 (м, 2H), 2,39-2,30 (м, 1H), 2,18-2,08 (м, 2H), 1,86-1,77 (м, 1H), 1,75-1,64 (м, 3H), 1,61-1,52 (м, 1H), 0,95 (д, J=6,1 Гц, 3H), 0,90 (д, J=6,1 Гц, 3H). Время удержания: 8,92 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 5). 6 - Yield: 14.7 µg, 0.029 µmol, 1.6%. High resolution MS m/z 508.2178 [M+H] + ; calculated for C 24 H 29 F 3 N 5 O 4 , 508.2172. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.47 (br s, 1H), 9.00 (d, J =7.9 Hz, 1H), 8.79 (d, J =7.8 Hz , 1H), 7.70 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.72 (d, J = 8.3 Hz , 1H), 5.02-4.94 (m, 1H), 4.56-4.48 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.18-3.05 (m, 2H ), 2.39-2.30 (m, 1H), 2.18-2.08 (m, 2H), 1.86-1.77 (m, 1H), 1.75-1.64 (m , 3H), 1.61-1.52 (m, 1H), 0.95 (d, J =6.1 Hz, 3H), 0.90 (d, J =6.1 Hz, 3H). Retention time: 8.92 minutes (Analytical conditions identical to those used for 5 ).
Альтернативный синтез примера 6Alternative Synthesis of Example 6
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид (6) N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan- 2-yl]-4-methoxy-7-(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide ( 6 )
Стадия 1. Синтез трифторметилированной 4-метокси-1H-индол-2-карбоновой кислоты (C24).
Смесь 4-метокси-1H-индол-2-карбоновой кислоты (100 мг, 0,523 ммоль) и трифторметансульфината цинка(II) (120 мг, 0,362 ммоль) обрабатывают диметилсульфоксидом (1,5 мл), затем трифторуксусной кислотой (56 мкл, 0,727 ммоль). После охлаждения реакционной смеси до 0°C, добавляют трет-бутилгилропероксид (70% в воде; 143 мкл, 1,03 ммоль) и перемешивание продолжают при 0°C в течение 20 минут, затем при комнатной температуре в течение 25 минут. Реакционную смесь затем нагревают при 52°C в течение 2 часов, затем ее охлаждают до комнатной температуры и обрабатывают по каплям водным раствором бикарбоната натрия до прекращения барботирования. Затем полученную смесь разделяют между водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом, водный слой экстрагируют один раз этилацетатом и органические слои отбрасывают. Водный слой затем подкисляют до pH 7 с 1 M хлористоводородной кислотой; добавляют этилацетат, и смесь перемешивают до доведения pH до 1 добавлением 1 M хлористоводородной кислоты. После перемешивания двухфазной смеси в течение 10 минут, органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме. По ЖХМС анализу, остаток (115 мг) содержит смесь исходного продукта и моно-трифторметилированные продукты, а также небольшое количество ди-трифторметилированного продукта. Объем этой смеси применяют на стадии 4. Выход: 115 мг, <0,4 ммоль. ЖХМС m/z 189,8, 257,8, 325,8 (незначительный) [M−H]−. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4), характеристические пики их трех основных компонентов: δ 7,07 (шд, J=8,4 Гц), 7,02 (шд, J=8,4 Гц), 6,81 (д, J=7,8 Гц), 6,66 (д, J=7,8 Гц), 6,51 (д, J=7,7 Гц), 4,06 (с, -OMe), 3,93 (с, -OMe), 3,92 (с, -OMe).A mixture of 4-methoxy- 1H -indole-2-carboxylic acid (100 mg, 0.523 mmol) and zinc(II) trifluoromethanesulfinate (120 mg, 0.362 mmol) was treated with dimethyl sulfoxide (1.5 ml) followed by trifluoroacetic acid (56 μl, 0.727 mmol). After the reaction mixture was cooled to 0° C., tert- butyl hydroperoxide (70% in water; 143 μl, 1.03 mmol) was added and stirring was continued at 0° C. for 20 minutes, then at room temperature for 25 minutes. The reaction mixture is then heated at 52°C for 2 hours, then it is cooled to room temperature and treated dropwise with aqueous sodium bicarbonate until sparging stops. The resulting mixture was then partitioned between an aqueous sodium bicarbonate solution and ethyl acetate, the aqueous layer was extracted once with ethyl acetate, and the organic layers were discarded. The aqueous layer is then acidified to pH 7 with 1 M hydrochloric acid; ethyl acetate is added and the mixture is stirred until the pH is adjusted to 1 with 1 M hydrochloric acid. After stirring the biphasic mixture for 10 minutes, the organic layer was washed with saturated aqueous sodium chloride, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . According to LCMS analysis, the residue (115 mg) contains a mixture of starting material and mono-trifluoromethylated products, as well as a small amount of di-trifluoromethylated product. The volume of this mixture is used in step 4. Yield: 115 mg, <0.4 mmol. LCMS m/z 189.8, 257.8, 325.8 (not significant) [M−H] − . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ), characteristic peaks of their three main components: δ 7.07 (bd, J =8.4 Hz), 7.02 (bd, J =8.4 Hz), 6 .81 (d, J =7.8 Hz), 6.66 (d, J =7.8 Hz), 6.51 (d, J =7.7 Hz), 4.06 (s, -OMe) , 3.93 (s, -OMe), 3.92 (s, -OMe).
Стадия 2. Синтез N-(трет-бутоксикарбонил)-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C25).
К 0°C раствору метил N-(трет-бутоксикарбонил)-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланината (см. Prior, A.M., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 6317-6320; 1,5 г, 3,8 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляют раствор аммиака в метаноле (7 M; 43 мл, 300 ммоль). После того, как реакционный сосуд будет закрыт крышкой, реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Раствор аммиака в метаноле (7 M; 10,7 мл, 74,9 ммоль) снова добавляют, и реакцию продолжают при комнатной температуре в течение 3 дней, затем ее концентрируют в вакууме. Остаток берут дважды в диэтиловом эфире (40 мл) и концентрируют при пониженном давлении с получением C25 в виде белого твердого вещества. Выход: 1,46 г, 3,80 ммоль, количественный. ЖХМС m/z 385,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 8,29-8,17 (м, 1H), 7,23 (шс, 1H), 5,64 (шс, 1H), 5,32 (шс, 1H), 5,02 (д, J=6,1 Гц, 1H), 4,50-4,38 (м, 1H), 4,05 (ддд, J=10,3, 6,3, 4,5 Гц, 1H), 3,44-3,32 (м, 2H), 2,51-2,35 (м, 2H), 2,16-1,98 (м, 2H), 1,97-1,83 (м, 1H), 1,76-1,6 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком воды), 1,49-1,39 (м, 1H), 1,45 (с, 9H), 0,94 (д, J=6,4 Гц, 3H), 0,94 (д, J=6,3 Гц, 3H).To a 0°C solution of methyl N- ( tert -butoxycarbonyl)-L-leucyl-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L- alaninate (see Prior, AM, et al., Bioorg Med. Chem. Lett. 2013 , 23 , 6317-6320; 1.5 g, 3.8 mmol) in methanol (5 ml) was added a solution of ammonia in methanol (7 M; 43 ml, 300 mmol). After the reaction vessel is capped, the reaction mixture is stirred overnight at room temperature. A solution of ammonia in methanol (7 M; 10.7 ml, 74.9 mmol) is added again and the reaction is continued at room temperature for 3 days, then it is concentrated in vacuo . The residue is taken up twice in diethyl ether (40 ml) and concentrated under reduced pressure to give C25 as a white solid. Yield: 1.46 g, 3.80 mmol, quantitative. LCMS m/z 385.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 8.29-8.17 (m, 1H), 7.23 (br.s., 1H), 5.64 (br.s., 1H), 5.32 (br.s., 1H ), 5.02 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 4.50-4.38 (m, 1H), 4.05 (ddd, J = 10.3, 6.3, 4.5 Hz, 1H), 3.44-3.32 (m, 2H), 2.51-2.35 (m, 2H), 2.16-1.98 (m, 2H), 1.97-1, 83 (m, 1H), 1.76-1.6 (m, 2H, estimated; partially covered by water peak), 1.49-1.39 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0 .94 (d, J =6.4 Hz, 3H), 0.94 (d, J =6.3 Hz, 3H).
Стадия 3. Синтез L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамид, метансульфоната (C26).Step 3. Synthesis of L-leucyl-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanineamide, methanesulfonate ( C26 ).
Раствор метансульфоновой кислоты (0,861 мл, 13,3 ммоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (5 мл) медленно добавляют в раствор C25 (5,1 г, 13 ммоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (43 мл). Через 30 минут, ЖХМС анализ показывает превращение в C26: ЖХМС m/z 285,3 [M+H]+. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, затем берут в следующей смеси растворителей и повторно концентрируют: смесь ацетонитрила и этилацетата (1:1, 2×20 мл), затем смесь этилацетата и гептана (1:1, 2×20 мл). Полученное твердое вещество подвергают азеотропной перегонке дважды со смесью ацетонитрила и этилацетата, затем дважды со смесью этилацетата и гептана, с получением C26 в виде белого твердого вещества (6,05 г) которое удерживает растворители по 1H ЯМР анализу. Выход: количественная оценка. 1H ЯМР (600 MГц, метанол-d 4) δ 4,50 (дд, J=10,7, 4,9 Гц, 1H), 3,91 (дд, J=8,6, 5,5 Гц, 1H), 3,39-3,28 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,70 (с, 3H), 2,53-2,46 (м, 1H), 2,43-2,36 (м, 1H), 2,14 (ддд, J=14,0, 10,7, 5,0 Гц, 1H), 1,95-1,86 (м, 1H), 1,82-1,71 (м, 3H), 1,70-1,64 (м, 1H), 1,02 (д, J=6,3 Гц, 3H), 1,01 (д, J=6,1 Гц, 3H).A solution of methanesulfonic acid (0.861 ml, 13.3 mmol) in 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (5 ml) was slowly added to a solution of C25 (5.1 g, 13 mmol) in 1 ,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ole (43 ml). After 30 minutes, LCMS analysis shows conversion to C26 : LCMS m/z 285.3 [M+H] + . The reaction mixture was concentrated in vacuo , then taken up in the following solvent mixture and re-concentrated: acetonitrile/ethyl acetate (1:1, 2×20 ml), then ethyl acetate/heptane (1:1, 2×20 ml). The resulting solid was azeotropically distilled twice with a mixture of acetonitrile and ethyl acetate, then twice with a mixture of ethyl acetate and heptane to give C26 as a white solid (6.05 g) which retained solvents by 1 H NMR analysis. Yield: quantification. 1 H NMR (600 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.50 (dd, J =10.7, 4.9 Hz, 1H), 3.91 (dd, J =8.6, 5.5 Hz, 1H), 3.39-3.28 (m, 2H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.70 (s, 3H), 2.53-2.46 (m, 1H), 2.43-2 .36 (m, 1H), 2.14 (ddd, J =14.0, 10.7, 5.0 Hz, 1H), 1.95-1.86 (m, 1H), 1.82-1 .71 (m, 3H), 1.70-1.64 (m, 1H), 1.02 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.1 Hz, 3H).
Стадия 4. Синтез N-{[4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-ил]карбонил}-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C27).Step 4. Synthesis of N -{[4-methoxy-7-(trifluoromethyl)-1 H -indol-2-yl]carbonyl}-L-leucyl-3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl] -L-alanineamide ( C27 ).
Раствор C24 (со стадии 1; 101 мг, <0,35 ммоль) и C26 (с предыдущей стадии; 204 мг, ≤0,438 ммоль) в ацетонитриле (1,7 мл) и N, N-диметилформамиде (1 мл) охлаждают до 0°C и обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 163 мг, 0,429 ммоль) затем 4-метилморфолином (0,129 мл, 1,17 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 40 минут, затем 1:1 смесь водного раствора бикарбоната натрия и льда медленно добавляют до образования мутного осадка. Этилацетат затем добавляют, и двухфазную смесь перемешивают в течение 5 минут. Водный слой экстрагируют один раз этилацетатом, и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Очистку хроматографией на силикагеле проводят дважды (Градиент #1: 0% - 10% метанол в дихлорметане; Градиент #2: 5% - 10% метанол в дихлорметане) с получением C27. Региохимию этого продукта подтверждают 2D ЯМР экспериментами. Выход: 19 мг, 36 мкмоль, приблизительно 10%. ЖХМС m/z 526,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,53 (шд, J=8,2 Гц, 1H), 7,41 (с, 1H), 6,68 (д, J=8,3 Гц, 1H), 4,60 (дд, J=9,5, 5,1 Гц, 1H), 4,45 (дд, J=11,4, 4,2 Гц, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,3-3,21 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,60-2,49 (м, 1H), 2,36-2,26 (м, 1H), 2,15 (ддд, J=14,1, 11,5, 4,6 Гц, 1H), 1,89-1,68 (м, 5H), 1,03 (д, J=6,1 Гц, 3H), 0,99 (д, J=6,2 Гц, 3H).A solution of C24 (from
Стадия 5. Синтез N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида (6).Stage 5. Synthesis of N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl- 1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-7-(trifluoromethyl) -1H -indole-2-carboxamide ( 6 ).
Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 17,2 мг, 72,2 мкмоль) добавляют в раствор C27 (19 мг, 36 мкмоль) в смеси дихлорметана (0,5 мл) и ацетонитрила (0,2 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, ее разбавляют этилацетатом и промывают 1:1 смесью водного раствора бикарбоната натрия и льда. Водный слой экстрагируют этилацетатом, и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и пропускают через картридж для твердофазной экстракции, заполненный сульфатом магния. Концентрация фильтрата в вакууме дает остаток, который очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 25% - 65% B за 8,5 минут, затем 65% - 95% B за 0,5 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-7-(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамида (6). Выход: 4,3 мг, 8,5 мкмоль, 24%. ЖХМС m/z 508,6 [M+H]+. Время удержания: 2,83 минут (Колонка: Waters Atlantis C18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5% - 95% B за 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 2 мл/минуту).Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 17.2 mg, 72.2 µmol) is added to a solution of C27 (19 mg, 36 µmol) in a mixture of dichloromethane (0.5 ml) and acetonitrile (0.2 ml). The reaction mixture was then stirred at room temperature for 1 hour, diluted with ethyl acetate, and washed with 1:1 aqueous sodium bicarbonate and ice. The aqueous layer was extracted with ethyl acetate, and the combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium chloride, and passed through a solid phase extraction cartridge filled with magnesium sulfate. Concentration of the filtrate in vacuo gave a residue which was purified by reverse phase HPLC (Column: Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 25% - 65% B in 8.5 minutes, then 65% - 95% B in 0.5 minutes, then 95% B for 1.0 minutes; Flow rate: 25 ml/minute) to give N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine- 3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-7-(trifluoromethyl) -1H -indole-2-carboxamide ( 6 ). Yield: 4.3 mg, 8.5 µmol, 24%. LCMS m/z 508.6 [M+H] + . Retention time: 2.83 minutes (Column: Waters Atlantis C18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Gradient: 5% - 95% B over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes; Flow rate: 2 ml/minute).
Пример 7Example 7
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-метилимидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-карбоксамид (7) N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1- oxopentan-2-yl]-3-methylimidazo[2,1- b ][1,3]thiazole-2-carboxamide ( 7 )
Стадия 1. Синтез N 2-(трет-бутоксикарбонил)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида (C28).
Раствор C17 (560 мг, 1,41 ммоль) и 1H-имидазола (249 мг, 3,65 ммоль) в смеси пиридина (3 мл) и дихлорметана (3 мл) охлаждают до -35°C с применением бани ацетонитрил/сухой лед. Оксихлорид фосфора (0,74 мл, 7,94 ммоль) добавляют по каплям, в течение 4 минут, затем дополнительный дихлорметан (2 мл), и перемешивание продолжают при от -30°C до -20°C. Через 1 час, реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (2 мл). После приблизительно 1,5 часов добавляют хлористоводородную кислоту (1 M; 30 мл); полученную смесь перемешивают в течение 30 минут, и затем экстрагируют дихлорметаном (2×60 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме, с получением C28 в виде твердого вещества. Выход: 492 мг, 1,29 ммоль, 91%. ЖХМС m/z 381,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 5,03 (дд, J=10,4, 5,7 Гц, 1H), 4,09 (дд, J=8,7, 4,2 Гц, 1H), 3,39-3,25 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,64-2,52 (м, 1H), 2,40-2,27 (м, 2H), 1,97-1,78 (м, 2H), 1,70 (дд, компонент системы АВХ, J=14,3, 4,1 Гц, 1H), 1,54 (дд, компонент системы АВХ, J=14,3, 8,7 Гц, 1H), 1,45 (с, 9H), 1,00 (с, 9H).A solution of C17 (560 mg, 1.41 mmol) and 1 H -imidazole (249 mg, 3.65 mmol) in a mixture of pyridine (3 ml) and dichloromethane (3 ml) was cooled to -35° C. using an acetonitrile/dry bath ice. Phosphorus oxychloride (0.74 ml, 7.94 mmol) is added dropwise over 4 minutes, then additional dichloromethane (2 ml) and stirring is continued at -30°C to -20°C. After 1 hour, the reaction mixture was diluted with dichloromethane (2 ml). After approximately 1.5 hours, hydrochloric acid (1 M; 30 ml) is added; the resulting mixture was stirred for 30 minutes and then extracted with dichloromethane (2×60 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C28 as a solid. Yield: 492 mg, 1.29 mmol, 91%. LCMS m/z 381.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 5.03 (dd, J =10.4, 5.7 Hz, 1H), 4.09 (dd, J =8.7, 4.2 Hz, 1H), 3.39-3.25 (m, 2H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.64-2.52 (m, 1H), 2.40-2.27 (m, 2H), 1 .97-1.78 (m, 2H), 1.70 (dd, ABX system component, J = 14.3, 4.1 Hz, 1H), 1.54 (dd, ABX system component, J = 14, 3, 8.7 Hz, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.00 (s, 9H).
Стадия 2. Синтез N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-метилимидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-карбоксамида (7).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4,0 M; 0,3 мл, 1,2 ммоль) добавляют в раствор C28 (100 мг, 0,263 ммоль) в смеси ацетонитрила (1,5 мл) и метанола (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут, затем ее обрабатывают 4-метилморфолином (0,144 мл, 1,31 ммоль). После удаления растворителей в вакууме, остаток дважды ресуспендируют в смеси дихлорметана и гептана (1:1, 2×10 мл) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток объединяют с 3-метилимидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-карбоновой кислотой (47,9 мг, 0,263 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3,3 мл), охлаждают до 0°C, и обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 99,9 мг, 0,263 ммоль) затем раствором 4-метилморфолина (72 мкл, 0,655 ммоль) в дихлорметане (0,2 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение приблизительно 2 часов, ее обрабатывают при 0°C хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл), и полученную смесь экстрагируют дихлорметаном (2×60 мл). Водный слой затем подщелачивают до pH 9 добавлением насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем его экстрагируют дихлорметаном (3×60 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида аммония (50 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. 1H ЯМР анализ этого продукта указывает на присутствие незначительного эпимера, предположительно возникающего при частичной рацемизации на центре, несущем нитрил. Основной продукт выделяют с применением хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 20% метанол в этилацетате), с получением N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-метилимидазо[2,1-b][1,3]тиазол-2-карбоксамида (7) в виде твердого вещества. Выход: 56 мг, 0,13 ммоль, 49%. ЖХМС m/z 445,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,73 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,37 (д, J=1,6 Гц, 1H), 5,04 (дд, J=10,3, 5,9 Гц, 1H), 4,53 (дд, J=7,8, 5,0 Гц, 1H), 3,36-3,24 (м, 2H; предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,70 (с, 3H), 2,67-2,57 (м, 1H), 2,38-2,27 (м, 2H), 1,93 (ддд, J=14,0, 9,4, 6,0 Гц, 1H), 1,88-1,78 (м, 3H), 1,03 (с, 9H).A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4.0 M; 0.3 mL, 1.2 mmol) was added to a solution of C28 (100 mg, 0.263 mmol) in a mixture of acetonitrile (1.5 mL) and methanol (1.0 ml). The reaction mixture was stirred at room temperature for 30 minutes, then treated with 4-methylmorpholine (0.144 mL, 1.31 mmol). After removing the solvents in vacuo , the residue is taken up twice in a mixture of dichloromethane and heptane (1:1, 2×10 ml) and concentrated under reduced pressure. The residue is combined with 3-methylimidazo[2,1- b ][1,3]thiazole-2-carboxylic acid (47.9 mg, 0.263 mmol) in N,N -dimethylformamide (3.3 ml), cooled to 0° C, and treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 99.9 mg, 0.263 mmol) followed by a solution of 4-methylmorpholine (72 µl, 0.655 mmol ) in dichloromethane (0.2 ml). The reaction mixture is then stirred at 0°C for approximately 2 hours, it is treated at 0°C with hydrochloric acid (1 M; 30 ml), and the resulting mixture is extracted with dichloromethane (2×60 ml). The aqueous layer was then basified to pH 9 with saturated aqueous sodium bicarbonate, then extracted with dichloromethane (3 x 60 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous ammonium chloride (50 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . 1 H NMR analysis of this product indicates the presence of a slight epimer, presumably arising from partial racemization at the center bearing the nitrile. The main product is isolated using silica gel chromatography (Gradient: 0% - 20% methanol in ethyl acetate) to give N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-3-methylimidazo[2,1- b ][1,3]thiazole-2-carboxamide ( 7 ) as a solid. Yield: 56 mg, 0.13 mmol, 49%. LCMS m/z 445.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.73 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J =1.6 Hz, 1H), 5.04 (dd , J = 10.3, 5.9 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 7.8, 5.0 Hz, 1H), 3.36-3.24 (m, 2H; assumed; partially closed by solvent peak), 2.70 (s, 3H), 2.67-2.57 (m, 1H), 2.38-2.27 (m, 2H), 1.93 (ddd, J =14, 0, 9.4, 6.0 Hz, 1H), 1.88-1.78 (m, 3H), 1.03 (s, 9H).
Примеры 8 и 9Examples 8 and 9
N-{1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамид, DIAST-1 (8) и N-{1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамид, DIAST-2 (9) N-{1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2-[cyclohexyl(methoxy)acetyl]-4-methyl-L-leucinamide, DIAST-1 (eight) andN-{1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-N 2-[cyclohexyl(methoxy)acetyl]-4-methyl-L-leucinamide, DIAST-2 (nine)
Стадия 1. Синтез N-{1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида (C29).
В раствор C28 (114 мг, 0,300 ммоль) в смеси ацетонитрила (1 мл) и метанола (1 мл) добавляют раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 0,4 мл, 1,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут, затем добавляют 4-метилморфолин (0,165 мл, 1,50 ммоль), доводя pH до 7-8. Затем растворители удаляют в вакууме, остаток дважды берут в смеси этилацетата и гептана (1:1, 2×10 мл) и концентрируют при пониженном давлении с получением C29 в виде твердого вещества (269 мг); по 1H ЯМР анализу, он состоит из смеси эпимеров, предположительно находящихся на центре, несущем нитрил, в соотношении 2-3 к 1. Часть этого продукта применяют на следующей стадии. ЖХМС m/z 281,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4), характеристические пики: δ [5,11 (дд, J=8,8, 7,3 Гц, основной) и 5,01 (дд, J=6,5, 6,5 Гц, незначительный), всего 1H], [2,75-2,65 (м, незначительный) и 2,64-2,54 (м, основной), всего 1H], 2,48-2,38 (м, 1H), 2,30-2,20 (м, 1H), 2,06-1,83 (м, 3H), 1,64 (дд, J=14,1, 4,8 Гц, 1H), [1,04 (с, основной), 1,01 (с, незначительный), всего 9H].To a solution of C28 (114 mg, 0.300 mmol) in a mixture of acetonitrile (1 ml) and methanol (1 ml) was added a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 0.4 ml, 1.6 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature for 30 minutes, then 4-methylmorpholine (0.165 ml, 1.50 mmol) was added to adjust the pH to 7-8. The solvents are then removed in vacuo , the residue is taken up twice in ethyl acetate/heptane (1:1, 2 x 10 mL) and concentrated under reduced pressure to give C29 as a solid (269 mg); according to 1 H NMR analysis, it consists of a mixture of epimers, presumably located on the center bearing the nitrile, in a ratio of 2-3 to 1. Part of this product is used in the next step. LCMS m/z 281.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ), characteristic peaks: δ [5.11 (dd, J =8.8, 7.3 Hz, fundamental) and 5.01 (dd, J =6.5, 6.5 Hz, minor), 1H total], [2.75-2.65 (m, minor) and 2.64-2.54 (m, major), 1H total], 2.48-2.38 (m, 1H), 2.30-2.20 (m, 1H), 2.06-1.83 (m, 3H), 1.64 (dd, J =14.1, 4.8 Hz, 1H ), [1.04 (s, major), 1.01 (s, minor), total 9H].
Стадия 2. Синтез N-{1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамид, DIAST-1 (8) и N-{1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамида, DIAST-2 (9).
К 0°C раствору C29 (с предыдущей стадии; 83,4 мг, ≤93 мкмоль) и циклогексил(метокси)уксусной кислоты (17,2 мг, 99,9 мкмоль) в N, N-диметилформамиде (1 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 38,0 мг, 0,100 ммоль), затем раствор 4-метилморфолина (30,8 мкл, 0,280 ммоль) в дихлорметане (0,2 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение примерно 2 часов, ее разбавляют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 мл) при 0°C, и экстрагируют дихлорметаном (4×4 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме; по ЖХМС анализу, остаток состоит из двух компонентов, предположительно соответствующих двум эпимерам на центре, несущем нитрил. Эти диастереомеры разделяют ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters XBridge C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: water; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 5% - 95% B over 8,54 минут, затем 95% B в течение 1,46 минут; Скорость потока: 25 мл/минуту). Первый элюированный диастереомер обозначают как 8 (N-{1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамид, DIAST-1), и второй элюированный диастереомер как 9 (N-{1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[циклогексил(метокси)ацетил]-4-метил-L-лейцинамид, DIAST-2).To a 0°C solution of C29 (from the previous step; 83.4 mg, ≤93 µmol) and cyclohexyl(methoxy)acetic acid (17.2 mg, 99.9 µmol) in N,N -dimethylformamide (1 ml) was added hexafluorophosphate O - (7-azabenzotriazol-1-yl) - N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU; 38.0 mg, 0.100 mmol), then a solution of 4-methylmorpholine (30.8 μl, 0.280 mmol) in dichloromethane (0.2 ml). Then the reaction mixture was stirred at 0°C for about 2 hours, it was diluted with saturated aqueous sodium bicarbonate (3 ml) at 0°C, and extracted with dichloromethane (4×4 ml). The combined organic layers are concentrated in vacuo ; according to LCMS analysis, the residue consists of two components, presumably corresponding to two epimers on the center bearing the nitrile. These diastereomers are separated by reverse phase HPLC (Column: Waters XBridge C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: water; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 5% - 95% B over 8.54 minutes, then 95 % B for 1.46 minutes Flow rate: 25 ml/minute). The first diastereomer eluted is designated as 8 ( N- {1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- N 2 -[cyclohexyl(methoxy)acetyl]-4-methyl-L- leucinamide, DIAST-1), and the second diastereomer eluted as 9 ( N- {1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -N 2 -[cyclohexyl(methoxy)acetyl] -4-methyl-L-leucinamide, DIAST-2).
8 - Выход: 12,8 мг, 29,4 мкмоль, 32% за 2 стадии. ЖХМС m/z 435,6 [M+H]+. Время удержания: 2,63 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis C18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.). Градиент: 5% to 95% B в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты. Скорость потока: 2 мл/минуту). 8 - Yield: 12.8 mg, 29.4 µmol, 32% over 2 steps. LCMS m/z 435.6 [M+H] + . Retention time: 2.63 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis C18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5% to 95% B over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes Flow rate: 2 ml/ minute).
9 - Выход: 10 мг, 23,0 мкмоль, 25% за 2 стадии. ЖХМС m/z 435,6 [M+H]+. Время удержания: 2,72 минут (Аналитические условия идентичным тем, которые применяют для 8). 9 - Yield: 10 mg, 23.0 µmol, 25% over 2 steps. LCMS m/z 435.6 [M+H] + . Retention time: 2.72 minutes (Analytical conditions identical to those used for 8 ).
Пример 10Example 10
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (10) N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1- oxopentan-2-yl]-4-methoxy-1 H -indole-2-carboxamide ( 10 )
Стадия 1. Синтез N-[(4-метокси-1H-индол-2-ил)карбонил]-4-метил-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C30).
К 0°C раствору C18 (200 мг, ≤0,46 ммоль) и 4-метокси-1H-индол-2-карбоновой кислоты (88,2 мг, 0,460 ммоль) в ацетонитриле (2 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 175 мг, 0,460 ммоль), затем раствор 4-метилморфолина (0,127 мл, 1,16 ммоль) в ацетонитриле (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2,5 часов, затем ее разбавляют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (30 мл) при 0°C, затем экстрагируют дихлорметаном (50 мл). Органический слой промывают хлористоводородной кислотой (1 M; 30 мл), и водные слои экстрагируют дихлорметаном (60 мл). Затем объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме, остаток очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 30% метанол в этилацетате) с получением C30 в виде твердого вещества. Выход: 148 мг, 0,314 ммоль, 68% за 2 стадии. ЖХМС m/z 472,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,25 (д, J=0,9 Гц, 1H), 7,15 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 7,03 (шд, компонент АВ квартета, J=8,3 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 4,65 (дд, J=9,2, 3,4 Гц, 1H), 4,44 (дд, J=11,2, 4,2 Гц, 1H), 3,93 (с, 3H), 3,29-3,15 (м, 2H), 2,54-2,44 (м, 1H), 2,29 (дддд, J=12,6, 8,6, 7,0, 2,7 Гц, 1H), 2,14 (ддд, J=14,0, 11,2, 4,6 Гц, 1H), 1,89 (дд, компонент системы АВХ, J=14,5, 3,4 Гц, 1H), 1,85-1,74 (м, 3H), 1,02 (с, 9H). O- ( _ 7-azabenzotriazol-1-yl)- N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU; 175 mg, 0.460 mmol), then a solution of 4-methylmorpholine (0.127 ml, 1.16 mmol) in acetonitrile (0.2 ml). The reaction mixture was stirred at 0°C for 2.5 hours, then it was diluted with saturated aqueous sodium bicarbonate (30 ml) at 0°C, then extracted with dichloromethane (50 ml). The organic layer was washed with hydrochloric acid (1 M; 30 ml) and the aqueous layers were extracted with dichloromethane (60 ml). Then the combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo , the residue is purified by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 30% methanol in ethyl acetate) to give C30 as a solid. Yield: 148 mg, 0.314 mmol, 68% over 2 steps. LCMS m/z 472.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.25 (d, J =0.9 Hz, 1H), 7.15 (dd, J =8.8 Hz, 1H), 7.03 (br , component of the AB quartet, J = 8.3 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.65 (dd, J = 9.2, 3.4 Hz, 1H) , 4.44 (dd, J =11.2, 4.2 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.29-3.15 (m, 2H), 2.54-2.44 (m, 1H), 2.29 (dddd, J =12.6, 8.6, 7.0, 2.7 Hz, 1H), 2.14 (ddd, J =14.0, 11.2, 4.6 Hz, 1H), 1.89 (dd, ABX system component, J = 14.5, 3.4 Hz, 1H), 1.85-1.74 (m, 3H), 1.02 (s , 9H).
Стадия 2. Синтез N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (10).
Раствор C30 (143 мг, 0,303 ммоль) и 1H-имидазолe (53,7 мг, 0,789 ммоль) в смеси пиридина (1 мл) и дихлорметана (1 мл) охлаждают на бане ацетонитрил/сухой лед (-35°C). Оксихлорид фосфора (0,159 мл, 1,71 ммоль) добавляют по каплям в течение 5 минут, и реакционную смесь перемешивают при от -30°C до -20°C в течение 2 часов, затем ее обрабатывают хлористоводородную кислоту (1 M; 30 мл), перемешивают в течение 20 минут и экстрагируют дихлорметаном (2×60 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в этилацетате) дает N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (10) в виде твердого вещества. Выход: 68 мг, 0,15 ммоль, 50%. ЖХМС m/z 454,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,24 (д, J=0,9 Гц, 1H), 7,14 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 7,02 (шд, компонент АВ квартета, J=8,3 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 5,03 (дд, J=10,1, 6,0 Гц, 1H), 4,64 (дд, J=8,6, 4,3 Гц, 1H), 3,93 (с, 3H), 3,30-3,17 (м, 2H), 2,63-2,52 (м, 1H), 2,37-2,21 (м, 2H), 1,95-1,74 (м, 4H), 1,03 (с, 9H).A solution of C30 (143 mg, 0.303 mmol) and 1H -imidazole (53.7 mg, 0.789 mmol) in a mixture of pyridine (1 ml) and dichloromethane (1 ml) was cooled in an acetonitrile/dry ice bath (−35° C.). Phosphorus oxychloride (0.159 ml, 1.71 mmol) is added dropwise over 5 minutes and the reaction mixture is stirred at -30°C to -20°C for 2 hours, then it is treated with hydrochloric acid (1 M; 30 ml ), stirred for 20 minutes and extracted with dichloromethane (2×60 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in ethyl acetate) gives N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidine-3 -yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy- 1H -indole-2-carboxamide ( 10 ) as a solid. Yield: 68 mg, 0.15 mmol, 50%. LCMS m/z 454.5 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.24 (d, J =0.9 Hz, 1H), 7.14 (dd, J =8.8 Hz, 1H), 7.02 (br , component of the AB quartet, J = 8.3 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.03 (dd, J = 10.1, 6.0 Hz, 1H) , 4.64 (dd, J = 8.6, 4.3 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.30-3.17 (m, 2H), 2.63-2.52 (m, 1H), 2.37-2.21 (m, 2H), 1.95-1.74 (m, 4H), 1.03 (s, 9H).
Пример 11Example 11
N 2-[(4-Бром-1-этил-3-метил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамид (11) N 2 -[(4-Bromo-1-ethyl-3-methyl-1 H -pyrazol-5-yl)carbonyl]- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2 -oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide ( 11 )
К 0°C суспензии C18 (43,4 мг, ≤0,10 ммоль) и 4-бром-1-этил-3-метил-1H-пиразол-5-карбоновой кислоты (23,3 мг, 0,100 ммоль) в ацетонитриле (1,0 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 38,0 мг, 0,100 ммоль), затем раствор 4-метилморфолина (30 мкл, 0,27 ммоль) в ацетонитриле (0,2 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение приблизительно 80 минут, добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 71,5 мг, 0,300 ммоль) и перемешивание продолжают. Через приблизительно 2,75 часов, снова добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 71,5 мг, 0,300 ммоль), и реакцию проводят в течение 1,5 часов, затем ее обрабатывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 мл) при 0°C и экстрагируют дихлорметаном (2×8 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме, затем растворяют в ацетонитриле (4 мл) и снова концентрируют с применением испарителя Genevac с получением неочищенного продукта (138 мг). Часть этого продукта (80 мг) очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5% - 95% B в течение 8,54 минут, затем 95% B в течение 1,46 минут; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением N 2-[(4-бром-1-этил-3-метил-1H-пиразол-5-ил)карбонил]-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамида (11). Выход: 24,7 мг, 49,8 мкмоль, 86% за 2 стадии. ЖХМС m/z 495,5 (наблюдается паттерн изотопа брома) [M+H]+. Время удержания: 2,48 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis C18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.). Градиент: 5% - 95% B в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты. Скорость потока: 2 мл/минуту).To 0°C suspension of C18 (43.4 mg, ≤0.10 mmol) and 4-bromo-1-ethyl-3-methyl- 1H -pyrazole-5-carboxylic acid (23.3 mg, 0.100 mmol) in acetonitrile (1.0 ml) add O - (7-azabenzotriazol-1-yl) - N, N, N', N' -tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 38.0 mg, 0.100 mmol), then a solution of 4-methylmorpholine ( 30 µl, 0.27 mmol) in acetonitrile (0.2 ml). The reaction mixture is then stirred at 0° C. for about 80 minutes, methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 71.5 mg, 0.300 mmol) are added and stirring is continued. After approximately 2.75 hours, methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 71.5 mg, 0.300 mmol) is added again and the reaction is carried out for 1.5 hours, then it is treated with saturated aqueous sodium bicarbonate (3 ml) at 0°C and extracted with dichloromethane (2×8 ml). The combined organic layers were concentrated in vacuo , then dissolved in acetonitrile (4 ml) and concentrated again using a Genevac evaporator to give the crude product (138 mg). A portion of this product (80 mg) was purified by reverse phase HPLC (Column: Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5% - 95% B over 8.54 minutes then 95% B over 1.46 minutes Flow rate: 25 ml/ minute) to give N 2 -[(4-bromo-1-ethyl-3-methyl-1 H -pyrazol-5-yl)carbonyl]- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L-leucinamide ( 11 ). Yield: 24.7 mg, 49.8 µmol, 86% over 2 steps. LCMS m/z 495.5 (bromine isotope pattern observed) [M+H] + . Retention time: 2.48 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis C18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5% - 95% B over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes Flow rate: 2 ml/ minute).
Пример 12Example 12
N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[(3,3-дифторциклобутил)ацетил]-4-метил-L-лейцинамид (12) N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- N 2 -[(3,3-difluorocyclobutyl)acetyl]-4-methyl-L -leucinamide ( 12 )
Стадия 1. Синтез 4-метил-L-лейцил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамид, гидрохлорид (C18, соль HCl).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 1,7 мл, 6,8 ммоль) добавляют в раствор C17 (260 мг, 0,652 ммоль) в ацетонитриле (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 часов, затем ее концентрируют в вакууме, затем повторно растворяют в смеси дихлорметана и гептана (1:1, 3×10 мл) и повторно концентрируют, с получением C18, соли HCl (242 мг) в виде стекла. Часть этого продукта применяют на следующей стадии. ЖХМС m/z 299,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,53 (дд, J=10,3, 5,0 Гц, 1H), 3,91 (дд, J=7,5, 5,4 Гц, 1H), 3,41-3,26 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,57-2,47 (м, 1H), 2,41 (дддд, J=12,0, 8,7, 7,0, 3,1 Гц, 1H), 2,15 (ддд, J=13,9, 10,3, 4,9 Гц, 1H), 2,05-1,97 (м, 1H), 1,97-1,85 (м, 1H), 1,78 (ддд, J=14,1, 9,1, 5,0 Гц, 1H), 1,60 (дд, J=14,3, 5,4 Гц, 1H), 1,01 (с, 9H).A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 1.7 mL, 6.8 mmol) was added to a solution of C17 (260 mg, 0.652 mmol) in acetonitrile (3 mL). The reaction mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours, then it was concentrated in vacuo , then redissolved in a mixture of dichloromethane and heptane (1:1, 3×10 ml) and re-concentrated to give C18, HCl salt (242 mg ) in the form of glass. Part of this product is used in the next step. LCMS m/z 299.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.53 (dd, J =10.3, 5.0 Hz, 1H), 3.91 (dd, J =7.5, 5.4 Hz, 1H), 3.41-3.26 (m, 2H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.57-2.47 (m, 1H), 2.41 (dddd, J =12.0, 8, 7, 7.0, 3.1 Hz, 1H), 2.15 (ddd, J =13.9, 10.3, 4.9 Hz, 1H), 2.05-1.97 (m, 1H) , 1.97-1.85 (m, 1H), 1.78 (ddd, J =14.1, 9.1, 5.0 Hz, 1H), 1.60 (dd, J =14.3, 5.4 Hz, 1H), 1.01 (s, 9H).
Стадия 2. Синтез N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[(3,3-дифторциклобутил)ацетил]-4-метил-L-лейцинамида (12).
Суспензию C18, соли HCl (с предыдущей стадии; 37,2 мг, ≤0,100 ммоль) и (3,3-дифторциклобутил)уксусной кислоты (15,8 мг, 0,105 ммоль) в тетрагидрофуране (1,0 мл) обрабатывают триоксидом 2,4,6-триоксида 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинана (50% раствор по массе в этилацетате; 65,5 мкл, 0,110 ммоль) и 4-метилморфолином (27,5 мкл, 0,250 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, ее нагревают при 50°C в течение 4,5 часов, затем снова добавляют триоксид 2,4,6-триоксида 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинана (50% раствор по массе в этилацетате; 2,2 эквивалента) и 4-метилморфолина (5 эквивалентов). Затем реакционную смесь перемешивают при 50°C в течение 3 дополнительный дней, ее обрабатывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 мл) и экстрагируют дихлорметаном (4×4 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме и очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters XBridge C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: water; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 20% - 40% B в течение 8,5 минут, затем 40% - 95% B в течение 0,5 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[(3,3-дифторциклобутил)ацетил]-4-метил-L-лейцинамида (12). Выход: 10,1 мг, 24,5 мкмоль, 24% за 2 стадии. ЖХМС m/z 413,5 [M+H]+. Время удержания: 1,96 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis C18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.). Градиент: 5% - 95% B в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты. Скорость потока: 2 мл/минуту).A suspension of C18, HCl salt (from the previous step; 37.2 mg, ≤0.100 mmol) and (3,3-difluorocyclobutyl)acetic acid (15.8 mg, 0.105 mmol) in tetrahydrofuran (1.0 ml) was treated with
Пример 13Example 13
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (13)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 )
Стадия 1. Синтез метил (1R,2S,5S)-3-[N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C31).
Гексафторфосфат O-(7-Азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 7,92 г, 20,8 ммоль) добавляют к 0°C смеси N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валина (4,38 г, 18,9 ммоль) и метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата, гидрохлорида (3,9 г, 19 ммоль) в N, N-диметилформамиде (95 мл). Затем реакционную смесь перемешивают в течение 5 минут, добавляют N, N-диизопропилэтиламин (8,25 мл, 47,4 ммоль); перемешивание продолжают при 0°C в течение 2 часов, затем добавляют водный раствор лимонной кислоты (1 N, 20 мл) и воды (40 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 2 минут, и затем разбавляют этилацетатом (250 мл). Органический слой промывают водой (3×150 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 100% этилацетат в гептане) дает C31 в виде масла. Выход: 3,60 г, 9,41 ммоль, 50%. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 6,42 (д, J=9,7 Гц, <1H; неполностью заменен растворителем), 4,35 (с, 1H), 4,21 (д, J=9,7 Гц, 1H), 4,02 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,91 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,3 Гц, 1H), 3,73 (с, 3H), 1,57 (дд, компонент системы АВХ, J=7,5, 5,1 Гц, 1H), 1,47 (д, половина АВ квартета, J=7,5 Гц, 1H), 1,41 (с, 9H), 1,07 (с, 3H), 1,02 (с, 9H), 0,93 (с, 3H). O- (7-Azabenzotriazol-1-yl) -N,N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 7.92 g, 20.8 mmol) is added to a 0°C mixture of N- ( tert -butoxycarbonyl) -3-methyl-L-valine (4.38 g, 18.9 mmol) and methyl (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane- 2-caroxylate, hydrochloride (3.9 g, 19 mmol) in N,N -dimethylformamide (95 ml). The reaction mixture is then stirred for 5 minutes, N,N -diisopropylethylamine (8.25 ml, 47.4 mmol) is added; stirring is continued at 0° C. for 2 hours, then an aqueous solution of citric acid (1 N, 20 ml) and water (40 ml) is added. The resulting mixture was stirred for 2 minutes and then diluted with ethyl acetate (250 ml). The organic layer was washed with water (3×150 ml) and saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Purification by chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 100% ethyl acetate in heptane) gave C31 as an oil. Yield: 3.60 g, 9.41 mmol, 50%. 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 6.42 (d, J = 9.7 Hz, <1H; not completely replaced by solvent), 4.35 (s, 1H), 4.21 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 4.02 (d, half AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 3.91 (dd, component of the ABX system, J = 10.3, 5.3 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 1.57 (dd, component of the ABX system, J = 7.5, 5.1 Hz, 1H), 1.47 (d, half of the AB quartet, J = 7, 5 Hz, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.07 (s, 3H), 1.02 (s, 9H), 0.93 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-3-[N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C32).
Водный раствор гидроксида лития (1,0 M; 14,7 ммоль, 14,7 мл) добавляют по каплям к 0°C раствору C31 (3,60 г, 9,41 ммоль) в смеси тетрагидрофурана и метанола (1:1, 30 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа, ее нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 часа, затем ЖХМС анализ показывает превращение в C32: ЖХМС m/z 367,3 [M−H]−. Корректировку до pH 3 проводят добавлением 1 M хлористоводородной кислоты, после чего смесь разбавляют водой (30 мл). Водный слой экстрагируют этилацетатом (2×75 мл), и объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют при пониженном давлении с получением C32 в виде беловатого твердого вещества. Выход: 3,10 г, 8,41 ммоль, 89%. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 6,39 (д, J=9,7 Гц, приблизительно 0,5H; неполностью заменен растворителем), 4,33 (с, 1H), [4,21 (д, J=9,6 Гц) и 4,21 (с), всего 1H], 4,01 (д, половина АВ квартета, J=10,5 Гц, 1H), 3,91 (дд, компонент системы АВХ, J=10,4, 5,2 Гц, 1H), 1,56 (дд, компонент системы АВХ, J=7,5, 5,0 Гц, 1H), 1,50 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,42 (с, 9H), 1,07 (с, 3H), 1,02 (с, 9H), 0,93 (с, 3H).An aqueous solution of lithium hydroxide (1.0 M; 14.7 mmol, 14.7 ml) was added dropwise to a 0°C solution of C31 (3.60 g, 9.41 mmol) in a mixture of tetrahydrofuran and methanol (1:1, 30 ml). The reaction mixture is then stirred at 0° C. for 1 hour, warmed to room temperature and stirred for 1 hour, then LCMS analysis shows conversion to C32 : LCMS m/z 367.3 [M−H] − . Adjustment to pH 3 is carried out by adding 1 M hydrochloric acid, after which the mixture is diluted with water (30 ml). The aqueous layer was extracted with ethyl acetate (2 x 75 ml) and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to give C32 as an off-white solid. Yield: 3.10 g, 8.41 mmol, 89%. 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 6.39 (d, J = 9.7 Hz, approx. 0.5H; not completely replaced by solvent), 4.33 (s, 1H), [4.21 ( d, J=9.6 Hz) and 4.21 (s), total 1H], 4.01 (d, half AB quartet, J =10.5 Hz, 1H), 3.91 (dd, component of the ABX system , J = 10.4, 5.2 Hz, 1H), 1.56 (dd, component of the ABX system, J = 7.5, 5.0 Hz, 1H), 1.50 (d, half of the AB quartet, J =7.6 Hz, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.07 (s, 3H), 1.02 (s, 9H), 0.93 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез трет-бутил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил}карбамата (C33).Stage 3. Synthesis of tert -butyl {(2 S )-1-[(1 R ,2 S ,5 S )-2-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2- oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}carbamoyl)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexan-3-yl]-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl}carbamate ( C33 ).
0°C смесь C7 (31,9 мг, ≤94 мкмоль) и C32 (34 мг, 92 мкмоль) в ацетонитриле (1 мл) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ, 97%; 36,2 мг, 92,3 мкмоль) затем раствором 4-метилморфолина (25 мкл, 0,23 ммоль) в ацетонитриле (0,25 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение приблизительно 1 часа, ее разбавляют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 мл) при 0°C и экстрагируют дихлорметаном (4×4 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме с получением C33 в виде камеди (48 мг). Большую часть этого продукта применяют на следующей стадии. ЖХМС m/z 504,6 [M+H]+.0°C mixture of C7 (31.9 mg, ≤94 µmol) and C32 (34 mg, 92 µmol) in acetonitrile (1 ml) is treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N' hexafluorophosphate ,N'- tetramethyluronium (GATU, 97%; 36.2 mg, 92.3 µmol) followed by a solution of 4-methylmorpholine (25 µl, 0.23 mmol) in acetonitrile (0.25 ml). Then the reaction mixture was stirred at 0°C for approximately 1 hour, it was diluted with saturated aqueous sodium bicarbonate (3 ml) at 0°C and extracted with dichloromethane (4×4 ml). The combined organic layers were concentrated in vacuo to give C33 as a gum (48 mg). Most of this product is used in the next step. LCMS m/z 504.6 [M+H] + .
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13).Stage 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 ).
Получают исходный раствор метансульфоновой кислоты (60 мкл) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (940 мкл). В раствор C33 (с предыдущей стадии; 47 мг, ≤90 мкмоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (1 мл) добавляют часть исходного раствора метансульфоновой кислоты (0,1 мл; 100 мкмоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, ее концентрируют в вакууме, затем берут в следующей смеси растворителей и повторно концентрируют: смесь ацетонитрила и этилацетата (1:1, 2×10 мл), и затем смесь этилацетата и гептана (1:1, 2×10 мл). Остаток растворяют в дихлорметане (1 мл) и обрабатывают 4-метилморфолином (30,8 мкл, 0,280 ммоль), затем трифторуксусным ангидридом (0,143 мл, 1,01 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 40 минут, затем ее обрабатывают 4-метилморфолином (30,8 мкл, 0,280 ммоль), затем трифторуксусным ангидридом (0,143 мл, 1,01 ммоль); через 30 минут снова добавляют 4-метилморфолин (30,8 мкл, 0,280 ммоль), затем трифторуксусный ангидрид (0,143 мл, 1,01 ммоль). Через еще 15 минут перемешивания, реакционную смесь обрабатывают хлористоводородной кислотой (1 M; 3 мл), и полученную смесь экстрагируют дихлорметаном (3×4 мл); объединенные органические слои концентрируют в вакууме и очищают с применением ВЭЖХ с обращенной фазой (Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.). Градиент: 20% - 60% B в течение 8,5 минут, затем 60% - 95% B в течение 0,5 минут, затем 95% B в течение 1 минуты; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13). Выход: 7,5 мг, 15 мкмоль, 17% за 2 стадии. ЖХМС m/z 500,5 [M+H]+. Время удержания: 2,66 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis dC18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: 0,05% трифторуксусной кислоты в воде (об./об.); Подвижная фаза B: 0,05% трифторуксусной кислоты в ацетонитриле (об./об.); Градиент: 5,0% - 95% B в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 2 мл/минуту).Prepare a stock solution of methanesulfonic acid (60 µl) in 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (940 µl). To a solution of C33 (from the previous step; 47 mg, ≤90 µmol) in 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (1 mL) was added a portion of the stock methanesulfonic acid solution (0.1 mL; 100 µmol). The reaction mixture was then stirred at room temperature for 1 hour, concentrated in vacuo , then taken up in the following solvent mixture and re-concentrated: a mixture of acetonitrile and ethyl acetate (1:1, 2×10 ml), and then a mixture of ethyl acetate and heptane (1 :1, 2×10 ml). The residue was dissolved in dichloromethane (1 ml) and treated with 4-methylmorpholine (30.8 μl, 0.280 mmol) followed by trifluoroacetic anhydride (0.143 ml, 1.01 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature for 40 minutes, then treated with 4-methylmorpholine (30.8 μl, 0.280 mmol) followed by trifluoroacetic anhydride (0.143 ml, 1.01 mmol); 30 minutes later, 4-methylmorpholine (30.8 μl, 0.280 mmol) was added again, followed by trifluoroacetic anhydride (0.143 ml, 1.01 mmol). After another 15 minutes of stirring, the reaction mixture is treated with hydrochloric acid (1 M; 3 ml), and the resulting mixture is extracted with dichloromethane (3×4 ml); the combined organic layers were concentrated in vacuo and purified using reverse phase HPLC (Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 20% - 60% B over 8.5 minutes, then 60% - 95% B over 0.5 minutes, then 95% B for 1 minute; Flow rate: 25 ml/minute) to give (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine -3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 ) . Yield: 7.5 mg, 15 µmol, 17% over 2 steps. LCMS m/z 500.5 [M+H] + . Retention time: 2.66 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis dC18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: 0.05% trifluoroacetic acid in water (v/v); Mobile phase B : 0.05% trifluoroacetic acid in acetonitrile (v/v) Gradient: 5.0% - 95% B over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes Flow rate: 2 ml /minute).
Альтернативный синтез примера 13, сольват метил трет-бутилового эфира; создание 13, сольвата метил трет-бутилового эфира, Твердая форма 2Alternative Synthesis of Example 13, Methyl tert -butyl ether solvate;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, сольват метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира), Твердая форма 2(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl ether solvate (13, methyl tert -butyl ether solvate),
Стадия 1. Синтез трет-бутил {(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамата (C5).
Этот эксперимент проводят в 2 параллельных партиях. Раствор аммиака в метаноле (7 M; 2,4 л, 17 моль) добавляют к метил N-(трет-бутоксикарбонил)-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинату (600 г, 2,10 моль) и реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 40 часов. Концентрация в вакууме и объединение 2 партий дает C5 в виде желтого твердого вещества. Объединенный выход: 1,10 кг, 4,05 моль, 96%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6 ) δ 7,63 (шс, 1H), 7,29 (шс, 1H), 7,01 (шс, 1H), 6,89 (д, J=8,5 Гц, 1H), 3,96-3,85 (м, 1H), 3,22-3,06 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком воды), 2,28-2,08 (м, 2H), 1,89 (ддд, J=14,6, 10,8, 4,0 Гц, 1H), 1,74-1,60 (м, 1H), 1,56-1,43 (м, 1H), 1,36 (с, 9H).This experiment is carried out in 2 parallel batches. A solution of ammonia in methanol (7 M; 2.4 L, 17 mol) was added to methyl N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L- alaninate (600 g , 2.10 mol) and the reaction mixture was stirred at 25°C for 40 hours. Concentration in vacuo and pooling of 2 batches gives C5 as a yellow solid. Combined yield: 1.10 kg, 4.05 mol, 96%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.63 (br s, 1H), 7.29 (br br, 1H), 7.01 (br br, 1H), 6.89 (d, J =8, 5 Hz, 1H), 3.96-3.85 (m, 1H), 3.22-3.06 (m, 2H, estimated; partially covered by water peak), 2.28-2.08 (m, 2H ), 1.89 (ddd, J =14.6, 10.8, 4.0 Hz, 1H), 1.74-1.60 (m, 1H), 1.56-1.43 (m, 1H ), 1.36 (s, 9H).
Стадия 2. Синтез 3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида, гидрохлорида (C16, соль HCl).
Этот эксперимент проводят в 3 параллельные партии. К 0°C раствору C5 (840 г, 3,10 моль) в дихлорметане (2,0 L) добавляют раствор гидрохлорид в 1,4-диоксане (4 M; 2 л, 8 моль). Реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 2 часов, затем ее концентрируют в вакууме; объединение 3 партий дает C16, соль HCl в виде белого твердого вещества. Объединенный выход: 1,20 кг, 5,78 моль, 62%. МС m/z 172,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6 ) δ 8,52-8,35 (шс, 3H), 8,12 (с, 1H), 7,95 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 3,88-3,76 (м, 1H), 3,24-3,10 (м, 2H), 2,59-2,5 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,35-2,24 (м, 1H), 2,01 (ддд, J=14,9, 9,2, 6,1 Гц, 1H), 1,80-1,68 (м, 2H).This experiment is carried out in 3 parallel batches. To a 0°C solution of C5 (840 g, 3.10 mol) in dichloromethane (2.0 L) was added a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 2 L, 8 mol). The reaction mixture is stirred at 25°C for 2 hours, then it is concentrated in vacuo ; combining 3 batches gives C16, the HCl salt as a white solid. Combined yield: 1.20 kg, 5.78 mol, 62%. MS m/z 172.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.52-8.35 (br s, 3H), 8.12 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 3.88-3.76 (m, 1H), 3.24-3.10 (m, 2H), 2.59-2.5 (m, 1H, inferred; partially covered by solvent peak), 2 .35-2.24 (m, 1H), 2.01 (ddd, J =14.9, 9.2, 6.1 Hz, 1H), 1.80-1.68 (m, 2H).
Образец C16, соли HCl растирают в 2-пропанoле в течение 1,5 часов, затем его собирают фильтрацией и промывают 2-пропанолом. Объединенное твердое вещество сушат в течение ночи в высоком вакууме с получением образца для исследования порошковой рентгеновской дифракцией. Порошковая рентгеновская дифрактограмма для этого продукта дана на фигуре 10; характеристические пики перечислены в таблице Q.Sample C16, HCl salts triturated in 2-propanol for 1.5 hours, then collected by filtration and washed with 2-propanol. The combined solid is dried overnight under high vacuum to provide a sample for X-ray powder diffraction analysis. Powder x-ray diffraction pattern for this product is given in figure 10; characteristic peaks are listed in Table Q.
Сбор данных порошковой рентгеновской дифракцииAcquisition of X-ray powder diffraction data
Анализ порошковой рентгеновской дифракцией проводят с использованием дифрактометра Bruker AXS D4 Endeavour, оборудованного источником излучения Cu. Щель расходимости установлена на 0,6 мм, в то время как вторичная оптика использует вариабельные щели. Дифрагированное излучение регистрируют датчиком PSD-Lynx Eye. Напряжение и сила тока рентгеновской трубки установлены на 40 кВ и 40 мА, соответственно. Данные собирают в гониометре Тэта-2Тэта при длине волны Cu от 3,0 до 40,0 градусов 2-Тэта с использованием размера шага 0,020 градусов и времени шага 0,3 секунды. Образцы готовят, помещая их в кремниевый низкофоновый держатель образцов и вращая во время сбора.Powder x-ray diffraction analysis was performed using a Bruker AXS D4 Endeavor diffractometer equipped with a Cu radiation source. The divergence slit is set to 0.6 mm while the secondary optics uses variable slits. Diffracted radiation is recorded by the PSD-Lynx Eye sensor. The voltage and current of the X-ray tube are set to 40 kV and 40 mA, respectively. Data is collected in a Theta-2Theta goniometer at a Cu wavelength of 3.0 to 40.0 degrees 2-Theta using a step size of 0.020 degrees and a step time of 0.3 seconds. Samples are prepared by placing them in a silicon low background sample holder and rotating during collection.
Анализ порошковой рентгеновской дифракцией проводят с использованием дифрактометра Bruker AXS D8 Advance, оборудованного источником излучения Cu. Дифрагированное излучение регистрируют датчиком LYNXEYE_EX с моторизованными щелями. И первичная, и вторичная оборудованы 2,5-дюймовыми щелями. Напряжение и сила тока рентгеновской трубки установлены на 40 кВ и 40 мА, соответственно. Данные собирают в гониометре Тэта-Тэта при сканировании с замкнутой парой при длине волны Cu K-альфа (средняя) от 3,0 до 40,0 градусов 2-Тэта с шагом 0,02 градуса, с использованием скорости сканирования 0,5 секунд на шаг. Образцы получают путем помещения в кремниевый низкофоновый держатель для образцов.Powder x-ray diffraction analysis is carried out using a Bruker AXS D8 Advance diffractometer equipped with a Cu radiation source. Diffracted radiation is recorded by a LYNXEYE_EX sensor with motorized slits. Both primary and secondary are equipped with 2.5-inch slots. The voltage and current of the X-ray tube are set to 40 kV and 40 mA, respectively. Data is collected on a Theta-Theta goniometer with a closed-pair scan at Cu wavelength K-alpha (average) from 3.0 to 40.0 degrees 2-Theta in 0.02 degree increments, using a scan speed of 0.5 seconds per step. Samples are obtained by placing them in a silicon low background sample holder.
Данные собирают обоими приборами с использованием программного обеспечения Bruker DIFFRAC Plus, и анализ выполняют с помощью программного обеспечения EVA DIFFRAC plus. Файл данных PXRD не обрабатывают до поиска пика. Используя алгоритм поиска пиков в программном обеспечении EVA, пики, выбранные с пороговым значением 1, используют для предварительного назначения пиков. Для обеспечения достоверности корректировки вносят вручную; вывод автоматических назначений проверяют визуально, и положения пиков доводят до максимума пика. Обычно выбирают пики с относительной интенсивностью ≥3%. Обычно пики, которые не разрешены или соответствуют шуму, не выбирают. Типовая ошибка, связанная с положением пика PXRD, указана в USP до +/- 0,2° 2-Тэта (USP-941).Data is collected with both instruments using Bruker DIFFRAC Plus software and analysis is performed with EVA DIFFRAC plus software. The PXRD data file is not processed until the peak search. Using the peak search algorithm in the EVA software, peaks selected with a threshold of 1 are used for peak preassignment. To ensure reliability, adjustments are made manually; the output of the automatic assignments is checked visually and the peak positions are adjusted to the maximum peak. Usually choose peaks with a relative intensity ≥3%. Typically, peaks that are not resolved or correspond to noise are not selected. The typical error associated with PXRD peak position is specified in the USP up to +/- 0.2° 2-Theta (USP-941).
Альтернативный синтез 3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида, гидрохлорида, C16 соль HCl Alternative synthesis of 3-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanineamide, hydrochloride, C16 HCl salt
Альтернативное получение соединения C16, соли HCl изображено на схеме реакции ниже.An alternative preparation of Compound C16, the HCl salt is depicted in the reaction scheme below.
В раствор аммиака в метаноле (7,0 M; 100 мл, 725,4 ммоль) добавляют 4-метилбензолсульфонат метил (S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропаноата (20 г, 55,8 ммоль) и сульфат магния (6,7 г, 55,8 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания реакционной смеси в течение 7 часов при комнатной температуре, азот барботируют в реакционную смесь в течение 1 часа для продувания избытка аммиака. Затем реакционную смесь фильтруют через слой Celite® и затем концентрируют в вакууме, и полученный 4-метилбензолсульфонат (S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропанамид применяют непосредственно на следующей стадии без дальнейшей очистки. В раствор диметилформамида (50 мл, 647 ммоль) добавляют часть 4-метилбензолсульфоната (S)-2-амино-3-((S)-2-оксопирролидин-3-ил)пропанамида (10 г, 25,9 ммоль) и раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4,0 M; 19,4 мл, 77,7 ммоль). После перемешивания в течение 12 часов при комнатной температуре суспензию фильтруют и промывают диметилформамидом (15 мл, 190 ммоль). Полученное твердое вещество сушат в вакуумной печи при 40°C в течение 12 часов с получением 3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида, гидрохлорида, C16 соли HCl (2,7 г, 12,4 ммоль) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества (общий выход 48%).Methyl (S)-2-amino-3-((S)-2-oxopyrrolidin-3-yl)propanoate 4-methylbenzenesulfonate (20 g, 55.8 mmol) and magnesium sulfate (6.7 g, 55.8 mmol) at room temperature. After the reaction mixture was stirred for 7 hours at room temperature, nitrogen was bubbled into the reaction mixture for 1 hour to purge excess ammonia. The reaction mixture is then filtered through a pad of Celite® and then concentratedin a vacuum and the resulting 4-methylbenzenesulfonate (S)-2-amino-3-((S)-2-oxopyrrolidin-3-yl)propanamide was used directly in the next step without further purification. A portion of 4-methylbenzenesulfonate is added to a solution of dimethylformamide (50 ml, 647 mmol). (S)-2-amino-3-((S)-2-oxopyrrolidin-3-yl)propanamide (10 g, 25.9 mmol) and hydrochloride solution in 1,4-dioxane (4.0 M; 19, 4 ml, 77.7 mmol). After stirring for 12 hours at room temperature, the suspension is filtered and washed with dimethylformamide (15 ml, 190 mmol). The resulting solid was dried in a vacuum oven at 40° C. for 12 hours to give 3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanineamide, hydrochloride,C16 HCl salts(2.7 g, 12.4 mmol) as a tan solid (48% overall yield).
Стадия 3. Синтез метил (1R,2S,5S)-3-[N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C31).Stage 3. Synthesis of methyl (1 R ,2 S ,5 S )-3-[ N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3,1, 0]hexane-2-carboxylate ( C31 ).
Этот эксперимент проводят в 3 параллельных партиях. К 0°C раствору метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата, гидрохлорида (237 г, 1,15 моль) и N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валина (293 г, 1,27 моль) в смеси N, N-диметилформамида (400 мл) и ацетонитрила (3,6 L) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 481 г, 1,26 моль), затем по каплям добавляют N, N-диизопропилэтиламин (601 мл, 3,45 моль). Реакционную смесь затем нагревают до 25°C и перемешивают в течение 16 часов, затем ее выливают в смесь ледяной воды (1 л) и хлористоводородной кислоты (0,5 M; 1 л), с pH приблизительно 5, и перемешивают в течение 6 минут. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом (2 л), и органический слой промывают водой (2 л), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток очищают с применением хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 50% этилацетат в петролейном эфире), с получением, после объединения 3 партий, C31 в виде бесцветного масла. Объединенный выход: 1,17 кг, 3,06 моль, 89%. ЖХМС m/z 383,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 5,10 (д, J=10,2 Гц, 1H), 4,46 (с, 1H), 4,20 (д, J=10,3 Гц, 1H), 3,98 (д, половина АВ квартета, J=10,2 Гц, 1H), 3,89-3,82 (м, 1H), 3,74 (с, 3H), 1,48-1,41 (м, 2H), 1,38 (с, 9H), 1,03 (с, 3H), 1,01 (с, 9H), 0,89 (с, 3H).This experiment is carried out in 3 parallel batches. To a 0°C solution of methyl (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate, hydrochloride (237 g, 1.15 mol) and N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valine (293 g, 1.27 mol) in a mixture of N, N -dimethylformamide (400 ml) and acetonitrile (3.6 L) is added hexafluorophosphate O - (7- azabenzotriazol-1-yl) -N,N,N',N'- tetramethyluronium (GATU; 481 g, 1.26 mol), then N,N -diisopropylethylamine (601 ml, 3.45 mol) was added dropwise. The reaction mixture is then heated to 25°C and stirred for 16 hours, then it is poured into a mixture of ice water (1 L) and hydrochloric acid (0.5 M; 1 L), pH approximately 5, and stirred for 6 minutes . The resulting mixture was extracted with ethyl acetate (2 L) and the organic layer was washed with water (2 L), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue was purified using silica gel chromatography (Gradient: 0% - 50% ethyl acetate in petroleum ether) to give, after combining 3 batches, C31 as a colorless oil. Combined yield: 1.17 kg, 3.06 mol, 89%. LCMS m/z 383.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 5.10 (d, J =10.2 Hz, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.20 (d, J =10.3 Hz, 1H), 3.98 (d, half AB quartet, J = 10.2 Hz, 1H), 3.89-3.82 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 1.48-1 .41 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.03 (s, 3H), 1.01 (s, 9H), 0.89 (s, 3H).
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-3-[N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C32).Step 4. Synthesis of ( 1R , 2S , 5S )-3-[ N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0 ]hexane-2-carboxylic acid ( C32 ).
Этот эксперимент проводят в 3 параллельных партиях. В раствор C31 (668 г, 1,75 моль) в тетрагидрофуране (2,5 л) добавляют моногидрат гидроксида лития (220 г, 5,24 моль) и воду (500 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 2 часов, ее концентрируют в вакууме для удаления большей части тетрагидрофурана; остаток затем доводят до pH 2 добавлением 1 M хлористоводородной кислоты. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом (2×500 мл), и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (500 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C32 в виде белого твердого вещества (2,0 кг) после объединения 3 партий. Этот продукт применяют непосредственно на следующей стадии. ЖХМС m/z 313,2 [(M − 2-метилпроп-1-ен)+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 5,14 (д, J=10,2 Гц, 1H), 4,46 (с, 1H), 4,24 (д, J=10,2 Гц, 1H), 4,06 (д, половина АВ квартета, J=10,5 Гц, 1H), 3,82 (дд, компонент системы АВХ, J=10,5, 5,5 Гц, 1H), 1,75 (д, J=7,7 Гц, 1H), 1,49 (дд, J=7,7, 5,4 Гц, 1H), 1,40 (с, 9H), 1,06 (с, 3H), 1,00 (с, 9H), 0,89 (с, 3H).This experiment is carried out in 3 parallel batches. To a solution of C31 (668 g, 1.75 mol) in tetrahydrofuran (2.5 L) was added lithium hydroxide monohydrate (220 g, 5.24 mol) and water (500 ml). Then the reaction mixture is stirred at 25°C for 2 hours, it is concentrated in vacuo to remove most of the tetrahydrofuran; the residue is then brought to
Стадия 5. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-(3-метил-L-валил)-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты, гидрохлорида (C41).Stage 5. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-(3-methyl-L-valyl)-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxylic acid, hydrochloride ( C41 ).
Этот эксперимент проводят в 2 параллельных партиях. Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 4,0 L, 16 моль) добавляют в раствор C32 (с предыдущей стадии; 1,00 кг, ≤2,62 моль) в дихлорметане (1,0 л), и реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 16 часов. Удаление растворителей в вакууме при 50°C дает C41 в виде белого твердого вещества (1,8 кг) после объединения 2 партий. Этот продукт применяют непосредственно на следующей стадии. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4 ) δ 4,42 (с, 1H), 4,00 (с, 1H), 3,94 (дд, компонент системы АВХ, J=10,7, 5,4 Гц, 1H), 3,80 (д, половина АВ квартета, J=10,7 Гц, 1H), 1,62 (дд, компонент системы АВХ, J=7,7, 5,2 Гц, 1H), 1,56 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,15 (с, 9H), 1,09 (с, 3H), 1,03 (с, 3H).This experiment is carried out in 2 parallel batches. A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 4.0 L, 16 mol) is added to the solutionC32 (from the previous step; 1.00 kg, ≤2.62 mol) in dichloromethane (1.0 L) and the reaction mixture was stirred at 25° C. for 16 hours. Solvent removalin a vacuum at 50°C givesC41 as a white solid (1.8 kg) after combining 2 batches. This product is used directly in the next step.oneH NMR (400 MHz, methanol-d 4 ) δ 4.42 (s, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.94 (dd, component of the ABX system,J=10.7, 5.4 Hz, 1H), 3.80 (d, half AB quartet,J=10.7 Hz, 1H), 1.62 (dd, ABX system component,J\u003d 7.7, 5.2 Hz, 1H), 1.56 (d, half AB quartet,J=7.6 Hz, 1H), 1.15 (s, 9H), 1.09 (s, 3H), 1.03 (s, 3H).
Стадия 6. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C42).
Этот эксперимент проводят в 3 параллельных партиях. К 0°C раствору C41 (с предыдущей стадии; 600 г, ≤1,75 моль) в метаноле (2 л) добавляют триэтиламин (1,64 л, 11,8 моль), затем этилтрифторацетат (699 г, 4,92 моль), затем реакционную смесь нагревают до 25°C, и перемешивают в течение 16 часов. Ее затем концентрируют в вакууме при 50°C, и остаток разбавляют этилацетатом (3 л) и доводят до pH 3-4 добавлением 2 M хлористоводородной кислоты. После экстрагирования водного слоя этилацетатом (1 л), объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (3 л), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют при пониженном давлении. В этот момент 3 партии объединяют, обрабатывают смесь петролейным эфиром и этилацетатом (5:1, 3 л), и перемешивают при 25°C в течение 2 часов. Фильтрация дает C42 в виде белого твердого вещества. Объединенный выход: 1,90 кг, 5,21 моль, 99% за 3 стадии. ЖХМС m/z 365,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 8,88 (д, J=8,8 Гц, <1H; не полностью заменен), [4,60 (д, J=8,9 Гц) и 4,59 (с), всего 1H], 4,35 (с, 1H), 3,96 (дд, компонент системы АВХ, J=10,5, 5,1 Гц, 1H), 3,90 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 1,58 (дд, компонент системы АВХ, J=7,6, 4,9 Гц, 1H), 1,52 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,08 (с, 12H), 0,92 (с, 3H).This experiment is carried out in 3 parallel batches. To a 0°C solution of C41 (from the previous step; 600 g, ≤1.75 mol) in methanol (2 L) was added triethylamine (1.64 L, 11.8 mol) followed by ethyl trifluoroacetate (699 g, 4.92 mol ), then the reaction mixture is heated to 25°C, and stirred for 16 hours. It is then concentrated in vacuo at 50° C. and the residue is diluted with ethyl acetate (3 L) and adjusted to pH 3-4 with 2 M hydrochloric acid. After extracting the aqueous layer with ethyl acetate (1 L), the combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (3 L), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. At this point, 3 parties are combined, treated with a mixture of petroleum ether and ethyl acetate (5:1, 3 l), and stirred at 25°C for 2 hours. Filtration gives C42 as a white solid. Combined yield: 1.90 kg, 5.21 mol, 99% over 3 steps. LCMS m/z 365.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 8.88 (d, J =8.8 Hz, <1H; not completely replaced), [4.60 (d, J =8.9 Hz) and 4 .59 (s), total 1H], 4.35 (s, 1H), 3.96 (dd, component of the ABX system, J = 10.5, 5.1 Hz, 1H), 3.90 (d, half AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 1.58 (dd, component of the ABX system, J = 7.6, 4.9 Hz, 1H), 1.52 (d, half of the AB quartet, J = 7 .6 Hz, 1H), 1.08 (s, 12H), 0.92 (s, 3H).
Стадия 7. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (C43).Step 7. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( C43 ).
Этот эксперимент проводят в 4 параллельные партии. 2-Гидроксипиридин 1-оксид (33,9 г, 305 ммоль) добавляют в раствор C42 (445 г, 1,22 моль) и C16, соли HCl (256 г, 1,23 моль) в бутан-2-оне (2,5 л), и смесь охлаждают до 0°C. N, N-диизопропилэтиламин (638 мл, 3,66 моль) затем добавляют, затем по каплям добавляют 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (351 г, 1,83 моль). Реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 16 часов, затем ее разбавляют этилацетатом (1 л) и обрабатывают смесью хлористоводородной кислоты (1 M; 1,5 л, 1,5 моль) и насыщенного водного раствора хлорида натрия (1 л). Органический слой промывают смесью водного раствора гидроксида натрия (1 M; 1,5 л, 1,5 моль) и насыщенного водного раствора хлорида натрия (1 л), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Комбинация 4 партий дает C43 в виде белого твердого вещества (2,3 кг). Объединенный выход: 2,1 кг (скорректирован на остаточный этилацетат), 4,1 моль, 84%. ЖХМС m/z 518,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,41 (шд, J=7,7 Гц, 1H), 8,30 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,32 (шс, 1H), 7,04 (шс, 1H), 4,43 (шд, J=7,3 Гц, 1H), 4,35-4,25 (м, 1H), 4,28 (с, 1H), 3,89 (дд, J=10,3, 5,5 Гц, 1H), 3,67 (д, J=10,4 Гц, 1H), 3,17-3,09 (м, 1H), 3,07-2,98 (м, 1H), 2,46-2,35 (м, 1H), 2,19-2,10 (м, 1H), 1,99-1,89 (м, 1H), 1,70-1,58 (м, 1H), 1,55-1,44 (м, 2H), 1,38 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,01 (с, 3H), 0,98 (с, 9H), 0,84 (с, 3H).This experiment is carried out in 4 parallel batches. 2-Hydroxypyridine 1-oxide (33.9 g, 305 mmol) is added to a solution of C42 (445 g, 1.22 mol) and C16, HCl salt (256 g, 1.23 mol) in butan-2-one (2 .5 l), and the mixture is cooled to 0°C. N,N -diisopropylethylamine (638 ml, 3.66 mol) was then added followed by 1-[3-(dimethylamino)propyl]-3-ethylcarbodiimide hydrochloride (351 g, 1.83 mol) added dropwise. The reaction mixture was stirred at 25°C for 16 hours, then it was diluted with ethyl acetate (1 L) and treated with a mixture of hydrochloric acid (1 M; 1.5 L, 1.5 mol) and saturated aqueous sodium chloride solution (1 L). The organic layer was washed with a mixture of aqueous sodium hydroxide (1 M; 1.5 L, 1.5 mol) and saturated aqueous sodium chloride (1 L), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The combination of 4 batches gives C43 as a white solid (2.3 kg). Combined yield: 2.1 kg (corrected for residual ethyl acetate), 4.1 mol, 84%. LCMS m/z 518.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.41 (bd, J = 7.7 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.56 (s , 1H), 7.32(brs, 1H), 7.04(brs, 1H), 4.43(bd, J =7.3Hz, 1H), 4.35-4.25(m, 1H) , 4.28 (s, 1H), 3.89 (dd, J =10.3, 5.5 Hz, 1H), 3.67 (d, J =10.4 Hz, 1H), 3.17- 3.09 (m, 1H), 3.07-2.98 (m, 1H), 2.46-2.35 (m, 1H), 2.19-2.10 (m, 1H), 1, 99-1.89 (m, 1H), 1.70-1.58 (m, 1H), 1.55-1.44 (m, 2H), 1.38 (d, half AB quartet, J =7 .6 Hz, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.98 (s, 9H), 0.84 (s, 3H).
Стадия 8. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, сольвата метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира), Твердая форма 2.Stage 8. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl ether solvate ( 13, methyl tert - butyl ether solvate ether ),
Этот эксперимент проводят в 3 параллельных партиях. Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 552 г, 2,32 моль) добавляют в раствор C43 (600 г, 1,16 моль) в этилацетате (3 л). Затем реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 3 часов, ее обрабатывают дополнительным метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбаматом, внутренней солью (реагент Бурджеса; 27,6 г, 116 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа. Ее затем фильтруют; фильтровальную лепешку промывают этилацетатом (2×500 мл) и объединенные фильтраты промывают последовательно водным раствором бикарбоната натрия (1 M; 2 л), насыщенным водным раствором хлорида натрия (2 л), хлористоводородную кислоту (1 M; 2 л), и насыщенным водным раствором хлорида натрия (2 л). Органический слой затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток обрабатывают смесь этилацетатом и метил трет-бутиловым эфиром (1:10, 2,5 л) и нагревают до 50°C; после перемешивания в течение 1 часа при 50°C ее охлаждают до 25°C и перемешивают в течение 2 часов. Твердое вещество собирают фильтрацией, и 3 партии объединяют в этилацетате (8 л) и фильтруют через силикагель (3,0 кг); силикагель затем промывают этилацетатом (2×2 л). Затем объединенные элюаты концентрируют в вакууме, остаток берут в этилацетате (900 мл) и метил трет-бутиловом эфире (9 л). Эту смесь нагревают до 50°C в течение 1 часа, охлаждают до 25°C и перемешивают в течение 2 часов. Фильтрация дает (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, сольват метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира) в виде белого твердого вещества. Порошковая рентгеновская дифрактограмма для этого продукта, обозначенного как Твердая форма 2, дана на Фигуре 1; характеристические пики перечислены в таблице A. Объединенный выход: 1,41 кг, 2,82 моль, 81%. ЖХМС m/z 500,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,42 (д, J=8,4 Гц, 1H), 9,03 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,68 (с, 1H), 4,97 (ддд, J=10,9, 8,5, 5,1 Гц, 1H), 4,41 (д, J=8,5 Гц, 1H), 4,16 (с, 1H), 3,91 (дд, J=10,4, 5,5 Гц, 1H), 3,69 (д, J=10,4 Гц, 1H), 3,18-3,10 (м, 1H), 3,08-2,99 (м, 1H), 2,46-2,34 (м, 1H), 2,20-2,03 (м, 2H), 1,78-1,65 (м, 2H), 1,57 (дд, J=7,6, 5,4 Гц, 1H), 1,32 (д, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,98 (с, 9H), 0,85 (с, 3H).This experiment is carried out in 3 parallel batches. Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 552 g, 2.32 mol) was added to a solution of C43 (600 g, 1.16 mol) in ethyl acetate (3 L). The reaction mixture was then stirred at 25° C. for 3 hours, treated with additional methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 27.6 g, 116 mmol) and the reaction mixture stirred for 1 hour. It is then filtered; the filter cake was washed with ethyl acetate (2×500 mL) and the combined filtrates were washed successively with aqueous sodium bicarbonate (1 M; 2 L), saturated aqueous sodium chloride (2 L), hydrochloric acid (1 M; 2 L), and saturated aqueous sodium chloride solution (2 l). The organic layer is then dried over sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo . The residue is taken up in a mixture of ethyl acetate and methyl tert -butyl ether (1:10, 2.5 L) and heated to 50°C; after stirring for 1 hour at 50°C, it is cooled to 25°C and stirred for 2 hours. The solid is collected by filtration and 3 batches are combined in ethyl acetate (8 L) and filtered through silica gel (3.0 kg); silica gel is then washed with ethyl acetate (2×2 l). The combined eluates are then concentrated in vacuo and the residue taken up in ethyl acetate (900 ml) and methyl t- butyl ether (9 l). This mixture is heated to 50°C for 1 hour, cooled to 25°C and stirred for 2 hours. Filtration gives ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl- 3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl ether solvate (13, methyl tert -butyl ether solvate) as a white solid. The powder x-ray diffraction pattern for this product, designated
Сбор данных порошковой рентгеновской дифракцииAcquisition of X-ray powder diffraction data
Анализ порошковой рентгеновской дифракцией проводят с использованием дифрактометра Bruker AXS D8 Endeavour, оборудованного источником излучения Cu (среднее K-α). Щель расхождения устанавливают на постоянное освещение 15 мм. Дифрагированное излучение регистрируют датчиком PSD-Lynx Eye с раскрытием PSD датчика на 2,99 градуса. Напряжение и сила тока рентгеновской трубки установлены на 40 кВ и 40 мА, соответственно. Данные собирают в гониометре Тэта-Тэта при длине волны Cu от 3,0 до 40,0 градусов 2-Тэта с использованием размера шага 0,00998 градуса и времени шага 1,0 секунды. Экран антирассеивания устанавливают на фиксированное расстояние 1,5 мм. Во время сбора образцы вращают со скоростью 15/мин. Образцы получают, помещая их в кремниевый низкофоновый держатель образцов и вращая во время сбора. Данные собирают с помощью программного обеспечения Bruker DIFFRAC Plus, и анализ выполняют с помощью программного обеспечения EVA DIFFRAC Plus. Используя алгоритм поиска пиков в программном обеспечении EVA, пики, выбранные с пороговым значением 1, используют для предварительного присвоения пиков. Для обеспечения достоверности корректировки вносят вручную; вывод автоматических отчислений проверяют визуально и положения пиков доводят до максимума пика. Обычно выбирают пики с относительной интенсивностью ≥3%. Пики, которые не разрешены или соответствуют шуму, не выбирают. Типовая ошибка, связанная с положением пика PXRD, указанным в USP, составляет до +/- 0,2° 2-Тэта (USP-941).X-ray powder diffraction analysis was performed using a Bruker AXS D8 Endeavor diffractometer equipped with a Cu (average K- α ) radiation source. The discrepancy gap is set to constant illumination of 15 mm. The diffracted radiation is recorded by a PSD-Lynx Eye sensor with a PSD sensor opening of 2.99 degrees. The voltage and current of the X-ray tube are set to 40 kV and 40 mA, respectively. Data is collected on a Theta-Theta goniometer at a Cu wavelength of 3.0 to 40.0 degrees 2-Theta using a step size of 0.00998 degrees and a step time of 1.0 seconds. The anti-scatter shield is set at a fixed distance of 1.5 mm. During collection, the samples are rotated at a speed of 15/min. Samples are obtained by placing them in a silicon low background sample holder and rotating during collection. Data is collected with Bruker DIFFRAC Plus software and analysis is performed with EVA DIFFRAC Plus software. Using the peak search algorithm in the EVA software, peaks selected with a threshold value of 1 are used for peak pre-assignment. To ensure reliability, adjustments are made manually; the output of automatic deductions is checked visually and the positions of the peaks are adjusted to the maximum peak. Usually choose peaks with a relative intensity ≥3%. Peaks that are not resolved or correspond to noise are not selected. Typical error associated with USP PXRD peak position is up to +/- 0.2° 2-Theta (USP-941).
+/- 0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/- 0.2° 2-Theta
+/- 0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/- 0.2° 2-Theta
Альтернативный синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C42).Alternative synthesis of ( 1R , 2S , 5S )-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2 -carboxylic acid ( C42 ).
Второй альтернативный синтез примера 13, сольват метил трет-бутилового эфира; создание 13, сольват метил трет-бутилового эфира, Твердая форма 2Second alternative synthesis of Example 13, Methyl t- butyl ether solvate;
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, сольват метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира), Твердая форма 2(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl ether solvate (13, methyl tert -butyl ether solvate),
Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 392 г, 1,64 моль) добавляют в раствор C43 (415 г, 802 ммоль) в этилацетате (2,0 л). Реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 3 часов, затем снова добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 86,0 г, 361 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа, ее фильтруют, и фильтрат промывают последовательно водным раствором бикарбоната натрия (1 M; 1,5 л), насыщенным водным раствором хлорида натрия (1,5 л), хлористоводородной кислотой (1 M; 1,5 л) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (1,5 л), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток обрабатывают смесью этилацетата и метил трет-бутилового эфира (1:10, 2,5 л) и нагревают до 50°C; после перемешивания в течение 1 часа при 50°C, ее охлаждают до 25°C и перемешивают в течение 2 часов. Сбор твердого вещества фильтрацией дает (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, сольват метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира) в виде кристаллического белого твердого вещества. Порошковая рентгеновская дифрактограмма для этого продукта, обозначенного как Твердая форма 2, дана на Фигуре 2; характеристические пики перечислены в таблице B. Выход: 338 г, 575 ммоль, 72%. ЖХМС m/z 500,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,43 (д, J=8,4 Гц, 1H), 9,04 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,68 (с, 1H), 4,97 (ддд, J=10,9, 8,5, 5,0 Гц, 1H), 4,41 (д, J=8,5 Гц, 1H), 4,15 (с, 1H), 3,91 (дд, компонент системы АВХ, J=10,4, 5,5 Гц, 1H), 3,69 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,18-3,10 (м, 1H), 3,08-2,98 (м, 1H), 2,46-2,34 (м, 1H), 2,20-2,02 (м, 2H), 1,77-1,65 (м, 2H), 1,57 (дд, J=7,6, 5,4 Гц, 1H), 1,32 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,02 (с, 3H), 0,98 (с, 9H), 0,85 (с, 3H); пики метил трет-бутилового эфира: 3,07 (с, 3H), 1,10 (с, 9H).Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 392 g, 1.64 mol) was added to a solution of C43 (415 g, 802 mmol) in ethyl acetate (2.0 L). The reaction mixture was stirred at 25° C. for 3 hours, then methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 86.0 g, 361 mmol) was added again. The reaction mixture was then stirred for 1 hour, filtered, and the filtrate was washed successively with aqueous sodium bicarbonate (1 M; 1.5 L), saturated aqueous sodium chloride (1.5 L), hydrochloric acid (1 M; 1.5 L). 5 L) and saturated aqueous sodium chloride solution (1.5 L), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo. The residue is taken up in a mixture of ethyl acetate and methyl t- butyl ether (1:10, 2.5 L) and heated to 50°C; after stirring for 1 hour at 50°C , it is cooled to 25°C and stirred for 2 hours. Collection of the solid by filtration gives ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6.6 -dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl ether solvate ( 13, methyl tert -butyl ether solvate butyl ether ) as a crystalline white solid. The powder x-ray diffraction pattern for this product, designated
Способ сбора данных порошковой рентгеновской дифракции описан в Альтернативном синтезе примера 13, сольвата метил трет-бутилового эфира, Стадия 8.A method for collecting X-ray powder diffraction data is described in Alternative Synthesis of Example 13, Methyl tert -butyl ether solvate, Step 8.
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
Третий альтернативный синтез примера 13Third Alternative Synthesis of Example 13
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (13)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 )
Стадия 1. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, сольват метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира)
0°C смесь C42 (90,5% масс., 5,05 г, 12,5 ммоль) и C16, соль HCl (98,9% масс., 3,12 г, 14,9 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) обрабатывают 2,4,6-триоксидом 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинана (50% раствор по массе в ацетонитриле; 17 мл, 24,3 ммоль) в течение приблизительно 10 минут. Затем медленно добавляют 1-метил-1H-имидазол (4,0 мл, 50,2 ммоль) в течение приблизительно 15 минут, и реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 3,5 часов, затем ее нагревают до 25°C. 2,4,6-триоксид 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинана (50% раствор по массе в ацетонитриле; 17 мл, 24,3 ммоль) добавляют одной порцией, и реакционную смесь перемешивают при 45°C в течение 16 часов. Ее охлаждают до 25°C в этот момент, и затем обрабатывают 10 минут водным раствором бикарбоната натрия (1,14 M; 35 мл, 40 ммоль). После добавления этилацетата (25 мл) и достаточного количества воды для растворения полученных твердых веществ, органический слой промывают дважды водным раствором бикарбоната натрия (1,14 M; 25 мл, 28 ммоль). Затем органический слой промывают водным раствором хлорида натрия (14%, 2×20 мл), его сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток смешивают с этилацетатом (2,1 мл) и обрабатывают метил трет-бутиловым эфиром (19 мл); полученную суспензию нагревают при перемешивании при 50°C в течение 1 часа, охлаждают до 25°C в течение 1 часа, и выдерживают при 25°C в течение 1,5 часов. Твердые вещества выделяют фильтрацией, промывают метил трет-бутиловым эфиром (2 мл/г) и сушат в вакуумной печи в течение ночи при 50°C с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, сольвата метил трет-бутилового эфира (13, сольвата метил трет- бутилового эфира) в виде кристаллического белого твердого вещества. Объем этого продукта прогрессирует на следующей стадии. Выход: 3,71 г, 6,31 ммоль, 50%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,40 (д, J=8,4 Гц, 1H), 9,02 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,66 (с, 1H), 4,97 (ддд, J=10,7, 8,6, 5,1 Гц, 1H), 4,41 (д, J=8,4 Гц, 1H), 4,16 (с, 1H), 3,91 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,5 Гц, 1H), 3,69 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,18-3,10 (м, 1H), 3,09-2,99 (м, 1H), 2,46-2,35 (м, 1H), 2,20-2,04 (м, 2H), 1,78-1,64 (м, 2H), 1,56 (дд, J=7,4, 5,6 Гц, 1H), 1,32 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,98 (с, 9H), 0,85 (с, 3H); пики метил трет-бутилового эфира: 3,07 (с, 3H), 1,10 (с, 9H).0°C mixtureC42(90.5 wt%, 5.05 g, 12.5 mmol) andC16, HCl salt(98.9% wt., 3.12 g, 14.9 mmol) in acetonitrile (50 ml) is treated with 2,4,6-
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13).
Смесь пропан-2-илацетата (17 мл) и гептана (17 мл) добавляют к 13, сольвату метил трет- бутилового эфира (с предыдущей стадии; 3,41 г, 5,80 ммоль), и перемешивание проводят в течение ночи при 20°C. Гептан (17 мл) затем добавляют в течение 2 часов, и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Полученную суспензию фильтруют, и собранные твердые вещества промывают смесью пропан-2-илацетата (1,36 мл) и гептана (3,73 мл) и сушат при 50°C под вакуумом, с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13) в виде кристаллического твердого вещества. Часть этой партии применяют как затравочный материал для перекристаллизации примера 13; получение твердой формы 1 ниже. Выход: 2,73 г, 5,46 ммоль, 94%.A mixture of propan-2-ylacetate (17 ml) and heptane (17 ml) was added to13, methyl solvate tert- butyl ether(from the previous step; 3.41 g, 5.80 mmol) and stirring is carried out overnight at 20°C. Heptane (17 ml) is then added over 2 hours and the mixture is stirred overnight at room temperature. The resulting suspension is filtered and the collected solids are washed with a mixture of propan-2-ylacetate (1.36 ml) and heptane (3.73 ml) and dried at 50°C under vacuum to obtain (1R.2S,fiveS)-N-{(oneS)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (13) as a crystalline solid. A portion of this batch was used as seed material for the recrystallization of Example 13; obtaining
Перекристаллизация примера 13; получение твердой формы 1Recrystallization of Example 13; obtaining a
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (13), Твердая форма 1(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 ),
Смесь 13, сольвата метил трет- бутилового эфира (из альтернативного синтеза из примера 13, сольват метил трет-бутилового эфира; получение 13, сольват метил трет-бутилового эфира, Твердая форма 2; 60,1 г, 102 ммоль) и пропан-2-илацетата (480 мл) нагревают до 60°C. Образец 13 (затравочный продукт из третьего альтернативного синтеза примера 13, Стадия 2; 1,2 г, 2,4 ммоль) добавляют; через 10 минут затравочный продукт все еще присутствует в твердой форме. Гептан (360 мл) медленно добавляют к перемешиваемой смеси в течение 12 часов. Дополнительный гептан (360 мл) вводят в течение 4 часов, и полученную смесь перемешивают в течение 30 минут. Ее затем охлаждают до 20°C со скоростью 0,1 градусов/минуту, затем ее перемешивают в течение ночи. Твердое вещество собирают фильтрацией, и промывают смесью пропан-2-илацетата (72 мл) и гептана (168 мл). Затем ее затем сушат под вакуумом при 50°C с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13) в виде белого кристаллического твердого вещества. Порошковая рентгеновская дифрактограмма этого продукта, обозначенного как Твердая форма 1, дана на Фигуре 3; характеристические пики перечислены в таблице C. Выход: 47,8 г, 95,7 ммоль, 94%.Mixture13, methyl solvate tert- butyl ether(from alternative synthesis from example 13, methyl solvatetert-butyl ether;
Способ сбора данных порошковой рентгеновской дифракции описан в Альтернативном синтезе примера 13, сольвата метил трет-бутилового эфира, Стадия 8.A method for collecting X-ray powder diffraction data is described in Alternative Synthesis of Example 13, Methyl tert -butyl ether solvate, Step 8.
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
Монокристальное рентгеновское определение структуры примера 13, Твердая форма 1Single Crystal X-Ray Structure Determination of Example 13,
Образец примера 13 подвергают кристаллизации путем диффузии с использованием этилацетата и гексана. Сосуд для кристаллизации выстаивают при комнатной температуре, пока растворитель испаряется; через 2,5 месяца появились кристаллы рентгеновского качества. Один из них используют для определения структуры. Диаграмма ORTEP для данных монокристалла показана на фигуре 4. Программное обеспечение Mercury используют для расчета структуры порошка на основе разрешенной кристаллической структуры; сравнение с дифрактограммой из примера Перекристаллизации 13; получение твердой формы 1, идентифицирует данный продукт как Твердую форму 1 (см. Фигуру 5). Характеристики пики для этих расчетных данных представлены в таблице D.A sample of example 13 is subjected to crystallization by diffusion using ethyl acetate and hexane. The crystallization vessel is left at room temperature while the solvent evaporates; X-ray quality crystals appeared after 2.5 months. One of them is used to define the structure. The ORTEP chart for single crystal data is shown in Figure 4. Mercury software is used to calculate the powder structure based on the resolved crystal structure; comparison with the diffraction pattern from Recrystallization Example 13; obtaining
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
Рентгеновский анализ монокристалловX-ray analysis of single crystals
Сбор данных проводят на дифрактометре Bruker D8 Quest при комнатной температуре. Сбор данных состоит из сканирования омега и фи.Data collection is carried out on a Bruker D8 Quest diffractometer at room temperature. Data collection consists of omega and phi scans.
Структура была разрешена путем внутреннего фазирования с использованием программного пакета SHELX в пространственной группе орторомбического класса P212121. В дальнейшем структуру уточняют полноматричным методом наименьших квадратов. Все атомы, отличные от водорода, найдены и уточнены с использованием параметров анизотропного смещения.The structure was resolved by internal phasing using the SHELX software package in the space group of the
Атомы водорода, расположенные на азоте, найдены из разностной карты Фурье и уточнены с ограничением расстояний. Остальные атомы водорода размещены в расчетных положениях и им позволили перемещаться на своих атомах-носителях. Окончательное уточнение включает параметры изотропного смещения для всех атомов водорода.Hydrogen atoms located on nitrogen were found from the difference Fourier map and refined with limited distances. The remaining hydrogen atoms are placed in calculated positions and allowed to move on their carrier atoms. The final refinement includes isotropic displacement parameters for all hydrogen atoms.
Анализ абсолютной структуры с использованием способов вероятности (Hooft, 2008) проводят с использованием PLATON (Spek). Результаты показывают, что абсолютная структура назначена правильно. Способ рассчитывает, что вероятность того, что структура назначена правильно, составляет 100%. Параметр Хофта представлен как -0,01 с осо (оценочное стандартное отклонение) (3), и параметр Парсона представлен как -0,01 с осо (2).Absolute structure analysis using probability methods (Hooft, 2008) is performed using PLATON (Spek). The results show that the absolute structure is assigned correctly. The method calculates that the probability that the structure is assigned correctly is 100%. Hooft's parameter is presented as -0.01 s os (estimated standard deviation) (3) and Parson's parameter is presented as -0.01 s s o (2).
Итоговый R-индекс составляет 3,3%. Конечная разностная карта Фурье не обнаружила отсутствующей или смещенной электронной плотности.The resulting R-index is 3.3%. The final difference Fourier map showed no missing or shifted electron density.
Соответствующий кристалл, сбор данных и уточняющая информация сведены в таблицу E. Координаты атомов, длины связей, углы связей и параметры смещения перечислены в таблицах F-H.The corresponding crystal, data acquisition, and refinement information are summarized in Table E. Atomic coordinates, bond lengths, bond angles, and bias parameters are listed in Tables F-H.
Программное обеспечение и ссылкиSoftware and Links
SHELXTL, Version 5,1, Bruker AXS, 1997. SHELXTL , Version 5.1, Bruker AXS, 1997.
PLATON, A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003, 36, 7-13. PLATON , A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003 , 36 , 7-13.
MERCURY, C. F. Macrae, P. R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G. P. Shields, R. Taylor, M. Towler, и J. van de Streek, J. Appl. Cryst. 2006, 39, 453-457. MERCURY , C. F. Macrae, P. R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G. P. Shields, R. Taylor, M. Towler, and J. van de Streek, J. Appl. Cryst. 2006, 39 , 453-457.
OLEX2, O. V. Dolomanov, L. J. Bourhis, R. J. Gildea, J. A. K. Howard, и H. Puschmann, J. Appl. Cryst. 2009, 42, 339-341. OLEX2 , OV Dolomanov, LJ Bourhis, RJ Gildea, JAK Howard, and H. Puschmann, J. Appl. Cryst. 2009, 42 , 339-341.
R. W. W. Hooft, L. H. Straver, и A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2008, 41, 96-103.R. W. W. Hooft, L. H. Straver, and A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2008 , 41 , 96-103.
H. D. Flack, Acta Cryst. 1983, A39, 867-881.HD Flack, Acta Cryst. 1983 , A39 , 867-881.
Масса формулы
Температура
Длина волны
Кристаллическая система
Пространственная группа
Постоянная решетки
Объем
Z
Плотность (расчетная)
Коэффициент абсорбции
F(000)
Размер кристалла
Интервал тэта для сбора данных
Диапазоны индексов
Собранные отражения
Независимые отражения
Полнота до тэта=67,679°
Коррекция абсорбции
Способ уточнения
Данные/ограничения/параметры
Соответствие по F 2
Конечные индексы R [I>2σ(I)]
Индексы R (все данные)
Параметр абсолютной структуры
Коэффициент возбуждения
Наибольшие дифф. пики и впадиныEmpirical formula
formula mass
Temperature
Wavelength
Crystal system
space group
Lattice constant
Volume
Z
Density (calculated)
Absorption coefficient
F (000)
Crystal size
Theta interval for data collection
Index ranges
Collected Reflections
Independent Reflections
Completeness to theta=67.679°
Absorption correction
Refinement method
Data/Restrictions/Parameters
Compliance with F 2
Finite indices R [ I>2σ(I) ]
R indices (all data)
Absolute Structure Parameter
Excitation factor
The largest diff. peaks and valleys
499,53
296(2) K
1,54178 Å
Ортотромбическая
P212121
a=9,6836(2) Å
b=15,0522(4) Å
c=18,0272(5) Å
2627,64(11) Å3
4
1,263 Мг/м3
0,862 мм-1
1056
0,300×0,280×0,260 мм3
3,826 до 80,042°
−12<=h<=12, −18<=k<=19, −22<=l<=23
79731
5628 [R int =0,0294]
99,3%
Эмпирическая
Наименьшие квадраты в полноматричном приближении по F 2
5628/9/358
1,040
R1=0,0326, wR2=0,0906
R1=0,0346, wR2=0,0928
−0,01(3)
н/д
0,112 и -0,121 e.Å-3 C 23 H 32 F 3 N 5 O 4
499.53
296(2) K
1.54178 Å
orthothrombic
a =9.6836(2) Å
b =15.0522(4) Å
c = 18.0272(5) Å
2627.64(11) Å 3
4
1.263 Mg/ m3
0.862 mm -1
1056
0.300×0.280×0.260 mm 3
3.826 to 80.042°
−12<= h <=12, −18<= k <=19, −22<= l <=23
79731
5628 [ Rint = 0.0294 ]
99.3%
empirical
Least squares in the full-matrix approximation in F 2
5628/9/358
1.040
−0.01(3)
n/a
0.112 and -0.121 e.Å -3
β=90°
γ=90° α= 90°
β= 90°
γ =90°
Таблица F. Атомные координаты (x 104) и параметры эквивалентного изотропного замещения (Å2×103) для примера 13, Твердая форма 1. U(экв) определен как одна третья от следа ортогонализированного тензора Uij.Table F. Atomic coordinates (x 10 4 ) and equivalent isotropic substitution parameters (Å 2 ×10 3 ) for example 13,
Таблица G. Длины связей [Å] и углы [°] для примера 13, Твердой формы 1.Table G. Bond lengths [Å] and angles [°] for Example 13,
Симметричные превращения используют для создания эквивалентных атомов.Symmetric transformations are used to create equivalent atoms.
Таблица H. Параметры анизотропного замещения (Å2×103) для примера 13, Твердая форма 1. Экспонента коэффициента анизотропного замещения принимает форму: −2π2[h2 a*2U11 + ... + 2 h k a* b* U12].Table H. Anisotropic substitution parameters (Å 2 ×10 3 ) for Example 13,
ЯМР анализ твердого тела соединения из Примера 13, Форм 1 и 4, проводят на зонде CPMAS, установленном в ЯМР спектрометр Bruker-BioSpin Avance III 500 МГц (частота 1H). Используют скорость вращения под магическим углом 15,0 кГц. Спектры формы 1 собирают при температуре окружающей среды (не контролируемая температура) и спектры формы 4 собирают при 15°C.NMR analysis of a solid body of the compound from Example 13,
Спектры 13C ЯМР получают с применением эксперимента с кросс-поляризацией и вращением под магическим углом (CPMAS) с развязанным протоном. Во время сбора спектров применяют фазомодулированное поле развязки протонов 80-100 кГц. Время кросс-поляризационного контакта установлено равным 2 мс, и задержку рециркуляции на 3,5 секунды для Формы 1 и Формы 4. Количество сканирований доводят до получения адекватного отношения сигнала к шуму. Шкала химического сдвига 13C была сопоставлена с использованием эксперимента 13C CPMAS на внешнем стандарте кристаллического адамантана, установив его резонанс в верхнем поле на 29,5 ч/млн. .sup.13 C NMR spectra were obtained using a cross-polarization magic angle spinning experiment (CPMAS) with a decoupled proton. During the collection of spectra, a phase-modulated proton decoupling field of 80-100 kHz is used. The cross polarization contact time is set to 2 ms and the recirculation delay is set to 3.5 seconds for
Спектры 19F ЯМР получают с помощью эксперимента с вращением под магическим углом (MAS) с развязкой протонов. Во время сбора спектров применяют фазомодулированное поле развязки протонов 80-100 кГц. Спектры собирают с задержкой рециркуляции до 6 секунд для Формы 1 и 5,25 секунд для Формы 4. Количество сканирований доводят до получения адекватного отношения сигнала к шуму. Для шкалы химического сдвига 19F используют эксперимент 19F MAS с внешним стандартом трифторуксусной кислоты (50%/50% об./об. в H2O), установив его резонанс на -76,54 ч./млн.The 19 F NMR spectra were obtained using a magic angle spinning (MAS) experiment with proton decoupling. During the collection of spectra, a phase-modulated proton decoupling field of 80-100 kHz is used. The spectra are collected with a recirculation delay of up to 6 seconds for
Автоматический сбор пиков выполняют с использованием программного обеспечения Bruker-BioSpin TopSpin версии 3,6. Как правило, для предварительного выбора пика используют пороговое значение 4% относительной интенсивности. Выходные данные автоматического сбора пиков визуально проверяют, чтобы убедиться в их достоверности, и при необходимости вносят корректировки вручную. Несмотря на то, что здесь приведены конкретные значения пиков ЯМР твердого тела, существует диапазон для этих значений пиков из-за различий в инструментах, образцах и подготовке образцов. Это обычная практика в области ЯМР твердого тела из-за различий в положениях пиков. Типовая вариабельность значения химического сдвига 13C по оси абсцисс составляет порядка плюс-минус 0,2 ч/млн, если не указано иное, для кристаллического твердого вещества. Вариабельность значения химического сдвига по оси абсцисс 19F составляет порядка плюс-минус 0,1 ч/млн. Приведенные здесь высоты пиков ЯМР твердого тела являются относительными интенсивностями. Интенсивность ЯМР твердого тела может варьироваться в зависимости от реальной настройки экспериментальных параметров и термической истории образца.Automatic peak collection is performed using Bruker-BioSpin TopSpin software version 3.6. Typically, a threshold of 4% relative intensity is used for peak preselection. The output of the automatic peak collection is visually checked to ensure that it is valid, and manual adjustments are made, if necessary. Although specific solid state NMR peak values are given here, there is a range for these peak values due to differences in instruments, samples, and sample preparation. This is common practice in the field of solid state NMR due to differences in peak positions. Typical variability in 13 C chemical shift along the abscissa is on the order of plus or minus 0.2 ppm, unless otherwise noted, for a crystalline solid. The variability in the 19 F chemical shift value is on the order of plus or minus 0.1 ppm. The heights of the solid NMR peaks given here are relative intensities. The NMR intensity of a solid can vary depending on the actual setting of the experimental parameters and the thermal history of the sample.
13C ЯМР твердого тела Примера 13, Формы 1 получают, как описано выше, и определяют следующий список пиков Примера 13, Формы 1. Вариабельность для значений 13C химического сдвига составляет±0,2 ч./млн., если не указано иное. 13 C NMR of the solid of Example 13
19F ЯМР твердого тела соединения примера 13, формы 1 получают, и определяют пик 19F ЯМР твердого тела при химическом сдвиге -73,3±0,1 ч./млн. 19 F NMR solid of the compound of Example 13
Характеристическими пиками для соединения примера 13, формы 1 являются 19F пик с химическим сдвигом -73,3±0,1 ч./млн. в комбинации с 13C пиками с химическими сдвигами 31,0±0,1 ч./млн., 27,9±0,1 ч./млн. и 178,9±0,2 ч./млн.Characteristic peaks for the compound of example 13,
Альтернативная перекристаллизация примера 13; получение твердой формы 4Alternative recrystallization of example 13; obtaining a solid form 4
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (13), Твердая форма 4(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 ), Solid Form 4
Стадия 1. Перекристаллизация (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13) из пропан-2-ил ацетата и гептана.
Смесь пропан-2-илацетата (50 мл) и гептана (50 мл) добавляют к 13, сольвату метил трет- бутилового эфира, Твердая форма 2 (из второго альтернативного синтеза из примера 13, сольват метил трет-бутилового эфира; 10,02 г, 17,0 ммоль) и смесь перемешивают при 20°C и 3500 об./мин. в течение ночи. Гептан (50 мл) затем медленно добавляют, и перемешивание продолжают в течение 30 минут, затем смесь охлаждают до 10°C в течение 30 минут. После перемешивания в течение еще 2 часов, суспензию фильтруют; фильтровальную лепешку промывают смесью пропан-2-илацетата (4 мл) и гептана (16 мл) и затем сушат при 55°C под вакуумом с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13) в виде кристаллического твердого вещества. Часть этого продукта применяют в следующей перекристаллизации. Выход: 7,74 г, 15,5 ммоль, 91%.A mixture of propan-2-ylacetate (50 ml) and heptane (50 ml) was added to13, methyl solvate tert- butyl ether, Solid form 2 (from the second alternative synthesis from example 13, solvate methyltert-butyl ether; 10.02 g, 17.0 mmol) and the mixture is stirred at 20° C. and 3500 rpm. during the night. Heptane (50 ml) is then added slowly and stirring is continued for 30 minutes, then the mixture is cooled to 10° C. over 30 minutes. After stirring for another 2 hours, the suspension is filtered; the filter cake was washed with a mixture of propan-2-yl acetate (4 ml) and heptane (16 ml) and then dried at 55°C under vacuum to obtain (1R.2S,fiveS)-N-{(oneS)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (13) as a crystalline solid. Part of this product is used in the next recrystallization. Yield: 7.74 g, 15.5 mmol, 91%.
Стадия 2. Перекристаллизация (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (13) из воды.
Суспензию 13 (с предыдущей стадии; 1,0 г, 2,0 ммоль) в воде (12 мл) перемешивают при 5°C в течение 21 дней, затем твердое вещество собирают фильтрацией. Ее затем сушат под вакуумом в течение 10 минут и сушат на воздухе в тонком слое на бумаге в течение 20 минут с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (13) в виде белого кристаллического твердого вещества. Порошковая рентгеновская дифрактограмма этого продукта, обозначенного как Твердая форма 4, дана на фигуре 6; характеристические пики перечислены в таблице J. Выход: 755 мг, 1,51 ммоль, 76%. Способ сбора данных порошковой рентгеновской дифракции описаны в Альтернативном синтезе примера 13, сольвата метил трет-бутилового эфира, Стадия 8.Suspension 13 (from the previous step; 1.0 g, 2.0 mmol) in water (12 ml) was stirred at 5°C for 21 days, then the solid was collected by filtration. It is then dried under vacuum for 10 minutes and air dried in a thin layer on paper for 20 minutes to give (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[ (3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0] hexane-2-carboxamide ( 13 ) as a white crystalline solid. Powder X-ray diffraction pattern of this product, designated as Solid form 4, is given in figure 6; characteristic peaks are listed in Table J. Yield: 755 mg, 1.51 mmol, 76%. A method for collecting powder X-ray diffraction data is described in Alternative Synthesis of Example 13, Methyl tert -butyl ether solvate, Step 8.
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
Монокристальный рентгеновский структурный анализ примера 13, твердая форма 4Single crystal X-ray structural analysis of example 13, solid form 4
Образец образца 13 подвергают кристаллизации путем диффузии при комнатной температуре, используя этилацетат и пентан; один из полученных кристаллов используют для монокристального рентгеновского структурного анализа. Диаграмма ORTEP для данных монокристалла показана на фигуре 7. Программное обеспечение Mercury используют для расчета порошковой дифрактограммы на основе разрешенной кристаллической структуры; сравнение с дифракционной картиной из альтернативной перекристаллизации примера 13; получение твердой формы 4 идентифицирует этот продукт как твердую форму 4 (см. фигуру 8). Характеристические пики для этих расчетных данных приведены в таблице К.A sample of
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
+/-0,2° 2-ТэтаAngle (°2-theta)
+/-0.2° 2-Theta
Рентгеновский анализ монокристалловX-ray analysis of single crystals
Сбор данных проводят на дифрактометре Bruker D8 Venture при -100°C. Сбор данных состоит из сканирования омега и фи.Data collection is carried out on a Bruker D8 Venture diffractometer at -100°C. Data collection consists of omega and phi scans.
Структура была разрешена путем внутреннего фазирования с использованием программного пакета SHELX в пространственной группе орторомбического класса P212121. В дальнейшем структуру уточняют полноматричным методом наименьших квадратов. Все атомы, отличные от водорода, найдены и уточнены с использованием параметров анизотропного смещения.The structure was resolved by internal phasing using the SHELX software package in the space group of the
Атомы водорода, расположенные на азоте, найдены из разностной карты Фурье и уточнены с ограничением расстояний. Остальные атомы водорода размещены в расчетных положениях и им позволили перемещаться на своих атомах-носителях. Окончательное уточнение включает параметры изотропного смещения для всех атомов водорода.Hydrogen atoms located on nitrogen were found from the difference Fourier map and refined with limited distances. The remaining hydrogen atoms are placed in calculated positions and allowed to move on their carrier atoms. The final refinement includes isotropic displacement parameters for all hydrogen atoms.
Анализ абсолютной структуры с использованием способов вероятности (Hooft, 2008) проводят с использованием PLATON (Spek). Абсолютная стереохимия не определена из-за значений параметров Хофта/Парсонса/Флака за пределами спецификации и стандартных отклонений.Absolute structure analysis using probability methods (Hooft, 2008) is performed using PLATON (Spek). Absolute stereochemistry not determined due to out-of-spec Hooft/Parsons/Flac parameters and standard deviations.
Итоговый R-индекс составляет 6,3%. Конечная разностная карта Фурье не обнаружила отсутствующей или смещенной электронной плотности.The final R-index is 6.3%. The final difference Fourier map showed no missing or shifted electron density.
Соответствующий кристалл, сбор данных и уточняющая информация сведены в таблицу L. Координаты атомов, длины связей, углы связей и параметры смещения перечислены в таблицах M-P.The corresponding crystal, data acquisition, and refinement information are summarized in Table L. Atomic coordinates, bond lengths, bond angles, and bias parameters are listed in Tables M-P.
Программное обеспечение и ссылкиSoftware and Links
SHELXTL, Version 5,1, Bruker AXS, 1997. SHELXTL , Version 5.1, Bruker AXS, 1997.
PLATON, A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003, 36, 7-13. PLATON , A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003 , 36 , 7-13.
MERCURY, C. F. Macrae, P. R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G. P. Shields, R. Taylor, M. Towler, и J. van de Streek, J. Appl. Cryst. 2006, 39, 453-457. MERCURY , C. F. Macrae, P. R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G. P. Shields, R. Taylor, M. Towler, and J. van de Streek, J. Appl. Cryst. 2006, 39 , 453-457.
OLEX2, O. V. Dolomanov, L. J. Bourhis, R. J. Gildea, J. A. K. Howard, и H. Puschmann, J. Appl. Cryst. 2009, 42, 339-341. OLEX2 , OV Dolomanov, LJ Bourhis, RJ Gildea, JAK Howard, and H. Puschmann, J. Appl. Cryst. 2009, 42 , 339-341.
R. W. W. Hooft, L. H. Straver, и A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2008, 41, 96-103.R. W. W. Hooft, L. H. Straver, and A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2008 , 41 , 96-103.
H. D. Flack, Acta Cryst. 1983, A39, 867-881.HD Flack, Acta Cryst. 1983 , A39 , 867-881.
Масса формулы
Температура
Длина волны
Кристаллическая система
Пространственная группа
Постоянная решетки
Объем
Z
Плотность (расчетная)
Коэффициент абсорбции
F(000)
Размер кристалла
Интервал тэта для сбора данных
Диапазоны индексов
Собранные отражения
Независимые отражения
Полнота до тэта=54,284°
Коррекция абсорбции
Способ уточнения
Данные/ограничения/параметры
Соответствие по F 2
Конечные индексы R [I>2σ(I)]
R индексы (все данные)
Параметр абсолютной структуры
Коэффициент возбуждения
Наибольшие дифф. пики и впадиныEmpirical formula
formula mass
Temperature
Wavelength
Crystal system
space group
Lattice constant
Volume
Z
Density (calculated)
Absorption coefficient
F (000)
Crystal size
Theta interval for data collection
Index ranges
Collected Reflections
Independent Reflections
Fullness to theta=54.284°
Absorption correction
Refinement method
Data/Restrictions/Parameters
Compliance with F 2
Finite indices R [ I>2σ(I) ]
R indices (all data)
Absolute Structure Parameter
Excitation factor
The largest diff. peaks and valleys
499,53
173(2) K
1,54178 Å
Ортотромбическая
P212121
a=9,2114(9) Å
b=15,1607(16) Å
c=18,191(2) Å
2540,5(5) Å3
4
1,306 Мг/м3
0,892 мм-1
1056
0,100×0,060×0,040 мм3
3,795-54,284°
-9<=h<=9, -15<=k<=15, -18<=l<=18
15896
3070 [R int =0,1260]
99,1%
Эмпирическая
Наименьшие квадраты в полноматричном приближении по F 2
3070/9/349
1,067
R1=0,0625, wR2=0,1515
R1=0,0696, wR2=0,1578
0,14(14)
н/д
0,280 и −0,220 e.Å−3 C 23 H 32 F 3 N 5 O 4
499.53
173(2) K
1.54178 Å
orthothrombic
a =9.2114(9) Å
b = 15.1607(16) Å
c = 18.191(2) Å
2540.5(5) Å 3
4
1.306 Mg/ m3
0.892 mm -1
1056
0.100×0.060×0.040 mm 3
3.795-54.284°
-9<= h <=9, -15<= k <=15, -18<= l <=18
15896
3070 [ Rint = 0.1260 ]
99.1%
empirical
Least squares in the full-matrix approximation in F 2
3070/9/349
1.067
0.14(14)
n/a
0.280 and -0.220 e.Å -3
β=90°
γ=90° α= 90°
β= 90°
γ =90°
Таблица M. Атомные координаты (x 104) и параметры эквивалентного изотропного замещения (Å2×103) для примера 13, Твердая форма 4. U(экв) определен как одна треть от следа ортогонализированного тензора Uij.Table M. Atomic coordinates (x 10 4 ) and equivalent isotropic substitution parameters (Å 2 ×10 3 ) for example 13, Solid form 4 . U(eq) is defined as one third of the trace of the orthogonalized tensor U ij .
Таблица N. Длины связи [Å] и углы [°] для примера 13, твердая форма 4.Table N. Bond lengths [Å] and angles [°] for example 13, solid form 4 .
Симметричные превращения используют для создания эквивалентных атомов.Symmetric transformations are used to create equivalent atoms.
Таблица P. Параметры анизотропного замещения (Å2×103) для примера 13, твердая форма 4. Экспонента фактора анизотропного замещения принимает форму: −2π2[h2 a*2U11 + ... + 2 h k a* b* U12].Table P. Anisotropic substitution parameters (Å 2 ×10 3 ) for example 13, solid form 4 . The exponent of the anisotropic substitution factor takes the form: −2π 2 [h 2 a* 2 U 11 + ... + 2 hka* b* U 12 ].
Список пиков 13C ЯМР твердого тела PF-07321332-00 формы 4. Вариабельность для 13C значений химического сдвига составляет ±0,2 ч./млн., если не указано иное. 13 C NMR Peak List Solid State PF-07321332-00 Form 4 Variability for 13 C chemical shift values is ±0.2 ppm unless otherwise noted.
19F ЯМР твердого тела соединения примера 13, формы 4 получают и пик при -73,6±0,1 с относительной интенсивностью 100% определяют. 19 F NMR solid of Example 13 Form 4 was obtained and a peak at -73.6 ± 0.1 with a relative intensity of 100% was determined.
Для соединения примера 13, формы 4, идентифицированы шесть характеристических пиков: 19F химический сдвиг при -73,6±0,1 ч./млн. и 13C химические сдвиги при 26,9±0,1 ч./млн., 21,6±0,1 ч./млн., 41,5±0,2 ч./млн., 27,9±0,1 ч./млн., и 12,9±0,1. 19F пик с химическим сдвигом -73,6±0,1 ч./млн. является характеристическим для соединения примера 13, формы4. 13C пики при 26,9±0,1 ч./млн., 21,6±0,1 ч./млн. и 41,5±0,1 ч./млн. каждый является характеристическим пиком соединения примера 13, формы 4. 13C пики при 27,9 ч./млн. и 12,9 ч./млн. каждый является характеристическим для соединения примера 13, формы 4, когда взяты в комбинации с одним или несколькими из пиков, выбранных из 13C пиков при 21,6 ч./млн., 26,9 ч./млн. и 41,5 ч./млн. и 19F пика при -73,6 ч./млн.For the compound of example 13, form 4, six characteristic peaks were identified: 19 F chemical shift at -73.6±0.1 ppm. and 13 C chemical shifts at 26.9±0.1 ppm, 21.6±0.1 ppm, 41.5±0.2 ppm, 27.9±0 .1 ppm, and 12.9±0.1. 19 F peak with a chemical shift of -73.6±0.1 ppm is characteristic of the compound of example 13, form 4. 13 C peaks at 26.9±0.1 ppm, 21.6±0.1 ppm and 41.5±0.1 ppm each is a characteristic peak of Example 13, Form 4. 13 C peaks at 27.9 ppm. and 12.9 ppm each is characteristic of Example 13 Form 4 when taken in combination with one or more of the peaks selected from the 13 C peaks at 21.6 ppm, 26.9 ppm and 41.5 ppm and 19 F peak at -73.6 ppm.
Четвертый альтернативный синтез примера 13, сольвата метил трет-бутилового эфираFourth Alternative Synthesis of Example 13, Methyl t -Butyl Ether Solvate
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, сольват метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl ether solvate (13, methyl tert -butyl ether solvate)
К 0°C суспензии C43 (5,0 г, 9,7 ммоль) в пропан-2-илацетате (7,6 мл/г, 38 мл) загружают 4-метилморфолин (4,5 эквивалента; 4,8 мл, 44 ммоль). В полученную суспензию загружают трифторуксусный ангидрид (2,25 эквивалента; 3,1 мл, 22 ммоль) в течение 1 часа через дозирующий насос. После перемешивания при 0°C в течение, по меньшей мере, 1 часа, реакционную смесь нагревают до примерно 20°C, гасят водой (8 мл/г, 40 мл) и перемешивают в течение, по меньшей мере, 10 минут. После декантирования, нижний (водный) слой отбрасывают и воду (8 мл/г, 40 мл) добавляют в органический слой. После перемешивания в течение, по меньшей мере, 10 минут, слои разделяют, и нижний (водный) слой отбрасывают. Органический слой концентрируют при пониженном давлении до приблизительно 4 мл/г (около 20 мл), затем вакуум разрушают с применением азота и раствор нагревают до приблизительно 50°C. Метил трет-бутиловый эфир (12 мл/г, 60 мл) медленно добавляют в течение, по меньшей мере, 4 часов через капельную воронку, и реакционную смесь выдерживают при 50°C в течение, по меньшей мере, 1 часа, затем охлаждают до 25°C в течение 1 часа. Полученную суспензию выдерживают при 25°C в течение ночи, затем фильтруют, промывают последовательно смесью пропан-2-илацетата и метил трет-бутилового эфира [1:3 (об./об.); 2 мл/г] и метил трет-бутиловым эфиром (2 мл/г, 10 мл), и сушат на фильтре в течение, по меньшей мере, 30 минут. Твердые вещества затем переносят в вакуумную печь при 50°C и сушат в течение, по меньшей мере, 8 часов, с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, сольвата метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира) в виде беловатого твердого вещества. Выход: 3,4 г, 5,8 ммоль, 60%.To 0°C suspensionC43 (5.0 g, 9.7 mmol) in propan-2-yl acetate (7.6 ml/g, 38 ml) loaded with 4-methylmorpholine (4.5 equivalents; 4.8 ml, 44 mmol). The resulting suspension was charged with trifluoroacetic anhydride (2.25 equivalents; 3.1 ml, 22 mmol) over 1 hour via a metering pump. After stirring at 0°C for at least 1 hour, the reaction mixture is heated to about 20°C, quenched with water (8 ml/g, 40 ml) and stirred for at least 10 minutes. After decanting, the lower (aqueous) layer was discarded and water (8 ml/g, 40 ml) was added to the organic layer. After stirring for at least 10 minutes, the layers are separated and the bottom (water) layer is discarded. The organic layer is concentrated under reduced pressure to about 4 ml/g (about 20 ml), then the vacuum is broken using nitrogen and the solution is heated to about 50°C. Methyltert-butyl ether (12 ml/g, 60 ml) is added slowly over at least 4 hours via an addition funnel and the reaction mixture is kept at 50°C for at least 1 hour, then cooled to 25°C within 1 hour. The resulting suspension is kept at 25°C overnight, then filtered, washed successively with a mixture of propan-2-ylacetate and methyltert-butyl ether [1:3 (v/v); 2 ml/g] and methyltert-butyl ether (2 ml/g, 10 ml) and filter dried for at least 30 minutes. The solids are then transferred to a vacuum oven at 50°C and dried for at least 8 hours to obtain (1R.2S,fiveS)-N-{(oneS)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl solvatetert-butyl ether (13, methyl solvate tert- butyl ether) as an off-white solid. Yield: 3.4 g, 5.8 mmol, 60%.
Пятый альтернативный синтез примера 13, сольват метил трет-бутилового эфираFifth Alternative Synthesis of Example 13, Methyl t -Butyl Ether Solvate
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, сольват метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, methyl tert -butyl ether solvate (13, methyl tert -butyl ether solvate)
К суспензии C43 (4,0 г, 7,7 ммоль) в ацетонитриле (10 мл/г, 40 мл) при комнатной температуре загружают 1-метил-1H-имидазол (4,6 эквивалента; 2,84 мл, 35,6 ммоль) и полученную смесь нагревают до приблизительно 30°C. Раствор 2,4,6-триоксида 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинана (50% раствор по массе в ацетонитриле; 2 эквивалента; 10,8 мл) добавляют в течение, по меньшей мере, 6 часов с применением насоса. Затем реакционную смесь перемешивают в течение, по меньшей мере, 10 часов, ее охлаждают до 25°C и осторожно гасят добавлением насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (7 мл/г, 28 мл) (экзотермическая и без газа). Ацетонитрил затем отгоняют при пониженном давлении; к полученной смеси добавляют этилацетат (10 мл/г, 40 мл) и дополнительный насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (5 мл/г, 20 мл). После разделения фаз, нижний (водный) слой отбрасывают и органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3,5 мл/г; 14 мл). Водный слой снова отбрасывают, и органический слой концентрируют при пониженном давлении до приблизительно 1 мл/г (4 мл). Метил трет-бутиловый эфир (9 мл/г; 36 мл) загружают, и полученный раствор нагревают до 50°C, быстро получая суспензию. Эту суспензию хранят при 50°C в течение, по меньшей мере, 30 минут, затем ее охлаждают до 25°C в течение 1 часа и хранят при 25°C в течение, по меньшей мере, 8 часов. Суспензию затем фильтруют, промывают смесью этилацетата и метил трет-бутилового эфира [1:3 (об./об.); 2 мл/г], и затем промывают метил трет-бутиловым эфиром (2 мл/г; 8 мл). Объединенное твердое вещество сушат на фильтре в течение, по меньшей мере, 30 минут, переносят в вакуумную печь при примерно 50°C, и сушат в течение, по меньшей мере, 8 часов, с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, сольвата метил трет-бутилового эфира (13, сольват метил трет- бутилового эфира) в виде беловатого твердого вещества. Выход: 2,9 г, 4,9 ммоль, 64%.To a suspension of C43 (4.0 g, 7.7 mmol) in acetonitrile (10 mL/g, 40 mL) at room temperature was charged 1-methyl- 1H -imidazole (4.6 equivalents; 2.84 mL, 35. 6 mmol) and the resulting mixture is heated to approximately 30°C. A solution of 2,4,6-tripropyl-1,3,5,2,4,6-
Примеры составов для соединения примера 13Formulation Examples for Compound of Example 13
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид или его гидрат или сольват или фармацевтически приемлемую соль соединения, гидрата или сольвата составляют с получением обычной таблетки и немедленным выделением с пленочным покрытием для перорального введения, где дозы варьируются от 100 до 250 мг. В качестве примера, состав для немедленного выделения описан в таблице составов и содержит обычные неактивные эксципиенты микрокристаллическую целлюлозу и моногидрат лактозы (разбавители), кросповидон (разрыхлитель), коллоидный диоксид кремния (глидант) и стеарилфумарат натрия (смазывающий агент). Таблетки с немедленным выделение покрывают пленочным покрытием с применением коммерчески доступных составов для пленочного покрытия, включая Opadry white и Opadry pink. Все эксципиенты в таблетке с пленочным покрытием являются широко применяемыми и присутствуют на известных уровнях. Представленный состав является примером таблетированного состава с немедленным выделением и, как таковой, специалист в данной области техники сможет использовать легко доступные обычные методики с применением альтернативных эксципиентов для составов с получением подходящих таблеток и достижения желаемых характеристик качества таблетки.(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide or a hydrate or solvate thereof or a pharmaceutically acceptable salt of the compound, hydrate or solvate is formulated to form a conventional tablet and immediate release film-coated for oral administration, where doses range from 100 to 250 mg. As an example, the immediate release formulation is described in the formulation table and contains the usual inactive excipients microcrystalline cellulose and lactose monohydrate (diluents), crospovidone (disintegrant), colloidal silicon dioxide (glidant) and sodium stearyl fumarate (lubricant). The immediate release tablets are film coated using commercially available film coating formulations including Opadry white and Opadry pink. All excipients in the film-coated tablet are commonly used and are present at known levels. The present formulation is an example of an immediate release tablet formulation and as such, one skilled in the art will be able to use readily available conventional formulation techniques using alternative formulation excipients to obtain suitable tablets and achieve the desired tablet quality characteristics.
Примеры составов: типовые таблетированные составы с покрытием для (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида.Formulation Examples: Typical coated tablet formulations for ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl} -6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide.
Таблетки с немедленным выделением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (называемого ниже API) производят с применением обычных, стандартных периодических процессов для твердых пероральных таблеток с немедленным выделением. Примеры стандартных периодических процессов, которые можно применяться для производства таблеток (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида с немедленным выделением включают прямое прессование, сухую грануляцию и влажную грануляцию. Альтернативно, может применяться непрерывный процесс производства. После прессования таблеток, сердцевины таблеток покрывают пленкой. Покрытие таблеток пленкой может проводиться с применением непрерывного нанесения покрытия или с применением обычного периодического процесса нанесения пленочного покрытия. Immediate Release Tablets _ _ _ dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (referred to below as API) is produced using conventional, standard batch processes for solids oral tablets with immediate release. Examples of standard batch processes that can be used to produce tablets ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide with immediate release include direct compression, dry granulation and wet granulation. Alternatively, a continuous manufacturing process may be used. After pressing the tablets, the tablet cores are coated with a film. Film coating of tablets can be carried out using continuous coating or using a conventional batch film coating process.
Состав таблетки: составы таблеток 100 мг, 150 мг и 250 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамидаTablet composition: tablet formulations 100 mg, 150 mg and 250 mg (1 R ,2 S , 5 S )- N yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
(YS-1-7027-SP)Opadry White
(YS-1-7027-SP)
(058140011)Opadry Pink
(058140011)
Пример 14Example 14
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (14) N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-5,5,5-trifluoro- 1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-1 H -indole-2-carboxamide ( 14 )
Стадия 1. Синтез 9H-флуорен-9-илметил [(2S)-1-амино-5,5,5-трифтор-1-оксопентан-2-ил]карбамат (C34).
Бикарбонат натрия (4,8 г, 57 ммоль) добавляют в раствор 5,5,5-трифтор-L-норвалинамида, гидрохлорида (его синтезируют с применением способа, описанного для его энантиомера, в J. E. Starrett, PCT Int. Appl., 2010107997, September 23, 2010; 4,0 г, 19 ммоль) и 9H-флуорен-9-илметила карбонохлоридата (хлорид Fmoc; 10,2 г, 39,4 ммоль) в воде (80 мл). Полученную суспензию перемешивают при 15°C - 25°C в течение 24 часов, затем ее разделяют между водой и дихлорметаном. Органический слой промывают последовательно водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме, с получением C34 в виде твердого вещества. Выход: 6,2 г, 16 ммоль, 83%. ЖХМС m/z 393,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 7,9 (д, 2H), 7,7 (м, 2H), 7,5 (д, 1H), 7,4 (м, 5H), 7,1 (шс, 1H), 4,3 (м, 3H), 4,0 (м, 1H), 2,2 (м, 2H), 1,9 (м, 1H), 1,7 (м, 1H).Sodium bicarbonate (4.8 g, 57 mmol) is added to a solution of 5,5,5-trifluoro-L-norvalinamide, hydrochloride (it is synthesized using the method described for its enantiomer in JE Starrett, PCT Int. Appl., 2010107997 , September 23, 2010; 4.0 g, 19 mmol) and 9 H -fluoren-9-ylmethyl carbonochloridate (Fmoc chloride; 10.2 g, 39.4 mmol) in water (80 ml). The resulting suspension is stirred at 15°C - 25°C for 24 hours, then it is divided between water and dichloromethane. The organic layer is washed successively with water and saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C34 as a solid. Yield: 6.2 g, 16 mmol, 83%. LCMS m/z 393.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.9 (d, 2H), 7.7 (m, 2H), 7.5 (d, 1H), 7.4 (m, 5H), 7 .1 (ws, 1H), 4.3 (m, 3H), 4.0 (m, 1H), 2.2 (m, 2H), 1.9 (m, 1H), 1.7 (m, 1H).
Стадия 2. Синтез N-[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]-5,5,5-трифтор-L-норвалина (C35).
В раствор C34 (6,2 г, 16 ммоль) в 1,4-диоксане (60 мл) добавляют хлористоводородную кислоту (3 M; 10 мл, 30 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при 80°C в течение 16 часов. Ее затем разделяют между водой и дихлорметаном, и органический слой промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток растирают с петролейным эфиром с получением C35 в виде твердого вещества. Выход: 5,5 г, 14 ммоль, 88%. ЖХМС m/z 392,1 [M−H]−. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 12,83 (шс, 1H), 7,89 (д, J=7,4 Гц, 2H), 7,77-7,67 (м, 3H), 7,46-7,38 (м, 2H), 7,36-7,28 (м, 2H), 4,38-4,28 (м, 2H), 4,26-4,19 (м, 1H), 4,06 (ддд, J=9, 9, 4,9 Гц, 1H), 2,43-2,15 (м, 2H), 2,01-1,89 (м, 1H), 1,89-1,75 (м, 1H).To a solution of C34 (6.2 g, 16 mmol) in 1,4-dioxane (60 ml) was added hydrochloric acid (3 M; 10 ml, 30 mmol) and the reaction mixture was stirred at 80° C. for 16 hours. It is then partitioned between water and dichloromethane, and the organic layer is washed with water and saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue is triturated with petroleum ether to give C35 as a solid. Yield: 5.5 g, 14 mmol, 88%. LCMS m/z 392.1 [M−H] − . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.83 (br s, 1H), 7.89 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.77-7.67 (m, 3H) , 7.46-7.38(m, 2H), 7.36-7.28(m, 2H), 4.38-4.28(m, 2H), 4.26-4.19(m, 1H), 4.06 (ddd, J= 9, 9, 4.9 Hz, 1H), 2.43-2.15 (m, 2H), 2.01-1.89 (m, 1H), 1 .89-1.75 (m, 1H).
Стадия 3. Синтез бензил N-[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]-5,5,5-трифтор-L-норвалината (C36).Step 3. Synthesis of benzyl N -[(9H- fluoren -9-ylmethoxy)carbonyl]-5,5,5-trifluoro-L-norvalinate ( C36 ).
Смесь C35 (435 мг, 1,11 ммоль), бензилбромида (0,263 мл, 2,21 ммоль) и бикарбоната натрия (464 мг, 5,52 ммоль) в N, N-диметилформамиде (20 мл) перемешивают в течение 15 часов при 25°C. Затем реакционную смесь разбавляют водой (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл), объединенные органические слои промывают последовательно насыщенным водным раствором хлорида натрия и 5% водным раствором хлорида лития, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (градиент: 0% - 100% этилацетат в петролейном эфире) дает C36 в виде белого твердого вещества. Выход: 510 мг, 1,05 ммоль, 95%. ЖХМС m/z 506,1 [M+Na+].A mixture of C35 (435 mg, 1.11 mmol), benzyl bromide (0.263 ml, 2.21 mmol) and sodium bicarbonate (464 mg, 5.52 mmol) in N,N -dimethylformamide (20 ml) was stirred for 15 hours at 25°C. The reaction mixture was then diluted with water (30 ml) and extracted with ethyl acetate (3 x 30 ml), the combined organic layers were washed successively with saturated aqueous sodium chloride and 5% aqueous lithium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (gradient: 0% - 100% ethyl acetate in petroleum ether) gives C36 as a white solid. Yield: 510 mg, 1.05 mmol, 95%. LCMS m/z 506.1 [M+Na + ].
Стадия 4. Синтез бензил 5,5,5-трифтор-L-норвалината (C37).Step 4. Synthesis of benzyl 5,5,5-trifluoro-L-norvalinate ( C37 ).
Диэтиламин (10 мл) добавляют к 0°C смеси C36 (510 мг, 1,05 ммоль) в ацетонитриле (25 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 2 часов, ее концентрируют при пониженном давлении; затем хроматография на силикагеле (градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) дает C37 в виде бесцветного масла. Выход: 250 мг, 0,957 ммоль, 91%. ЖХМС m/z 302,9 [M+CH3CN+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 7,42-7,32 (м, 5H), 5,17 (с, 2H), 3,50 (дд, J=8,4, 5,0 Гц, 1H), 2,32-2,13 (м, 2H), 2,01 (дддд, J=13,7, 10,8, 5,2, 5,2 Гц, 1H), 1,76 (дддд, J=13,6, 10,8, 8,4, 5,3 Гц, 1H).Diethylamine (10 ml) was added to a 0°C mixture of C36 (510 mg, 1.05 mmol) in acetonitrile (25 ml). Then the reaction mixture is stirred at 20°C for 2 hours, it is concentrated under reduced pressure; then chromatography on silica gel (gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) gives C37 as a colorless oil. Yield: 250 mg, 0.957 mmol, 91%. LCMS m/z 302.9 [M+CH 3 CN+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 7.42-7.32 (m, 5H), 5.17 (s, 2H), 3.50 (dd, J =8.4, 5.0 Hz , 1H), 2.32-2.13 (m, 2H), 2.01 (dddd, J = 13.7, 10.8, 5.2, 5.2 Hz, 1H), 1.76 (dddd , J =13.6, 10.8, 8.4, 5.3 Hz, 1H).
Стадия 5. Синтез бензил 5,5,5-трифтор-N-[(4-метокси-1H-индол-2-ил)карбонил]-L-норвалината (C38).Step 5. Synthesis of benzyl 5,5,5-trifluoro- N -[(4-methoxy- 1H -indol-2-yl)carbonyl]-L-norvalinate ( C38 ).
К 0°C раствору C37 (250 мг, 0,957 ммоль) и 4-метокси-1H-индол-2-карбоновой кислоты (220 мг, 1,15 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 437 мг, 1,15 ммоль), затем по каплям добавляют 4-метилморфолин (194 мг, 1,92 ммоль). Перемешивание продолжают при 0°C - 10°C в течение 1 часа, затем реакционную смесь разбавляют водой (20 мл) и водным раствором лимонной кислоты (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывают последовательно насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (30 мл), насыщенным водным раствором хлорида натрия, и водным раствором хлорида лития (5%, 20 мл), затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток очищают с применением хроматографии на силикагеле (градиент: 0% - 100% этилацетат в петролейном эфире) с получением C38 в виде белого твердого вещества. Выход: 350 мг, 0,806 ммоль, 84%. ЖХМС m/z 435,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 9,09 (шс, 1H), 7,42-7,33 (м, 5H), 7,23 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 7,09 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,03 (д, J=8,3 Гц, 1H), 6,76 (шд, J=7,6 Гц, 1H), 6,53 (д, J=7,8 Гц, 1H), 5,25 (AB квартет, J AB=12,1 Гц, δνAB=11,4 Гц, 2H), 4,94-4,87 (м, 1H), 3,96 (с, 3H), 2,35-2,14 (м, 2H), 2,14-1,96 (м, 2H).To a 0°C solution of C37 (250 mg, 0.957 mmol) and 4-methoxy- 1H -indole-2-carboxylic acid (220 mg, 1.15 mmol) in N,N -dimethylformamide (10 ml) was added hexafluorophosphate O - (7-Azabenzotriazol-1-yl) -N,N,N',N'- tetramethyluronium (GATU; 437 mg, 1.15 mmol), then 4-methylmorpholine (194 mg, 1.92 mmol) was added dropwise. Stirring is continued at 0°C - 10°C for 1 hour, then the reaction mixture is diluted with water (20 ml) and aqueous citric acid solution (20 ml) and extracted with ethyl acetate (3×20 ml). The combined organic layers were washed successively with saturated aqueous sodium bicarbonate (30 ml), saturated aqueous sodium chloride, and aqueous lithium chloride (5%, 20 ml), then dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue was purified using silica gel chromatography (gradient: 0% - 100% ethyl acetate in petroleum ether) to give C38 as a white solid. Yield: 350 mg, 0.806 mmol, 84%. LCMS m/z 435.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 9.09 (br s, 1H), 7.42-7.33 (m, 5H), 7.23 (dd, J =8.8 Hz, 1H), 7.09 (d, J =2.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J =8.3 Hz, 1H), 6.76 (br, J =7.6 Hz, 1H), 6, 53 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.25 (AB quartet, J AB = 12.1 Hz, δν AB = 11.4 Hz, 2H), 4.94-4.87 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.35-2.14 (m, 2H), 2.14-1.96 (m, 2H).
Стадия 6. Синтез 5,5,5-трифтор-N-[(4-метокси-1H-индол-2-ил)карбонил]-L-норвалина (C39).
Смесь C38 (350 мг, 0,806 ммоль) и палладия на угле (10%, 85,7 мг, 80,5 мкмоль) в метаноле (10 мл) гидрируют в течение 16 часов при 20°C и 15 ф./кв.д. Реакционную смесь затем фильтруют, и фильтровальную лепешку промывают с метанолом (10 мл); объединенные фильтраты концентрируют в вакууме и подвергают хроматографии на силикагеле (элюент: этилацетат) с получением C39 в виде белого твердого вещества. Выход: 270 мг, 0,784 ммоль, 97%. ЖХМС m/z 345,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,62 (шс, 1H), 8,61 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,32 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,11 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 7,01 (д, половина АВ квартета, J=8,2 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,6 Гц, 1H), 4,47 (ддд, J=8,5, 8,5, 4,8 Гц, 1H), 3,89 (с, 3H), 2,5-2,27 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,12-1,92 (м, 2H).A mixture of C38 (350 mg, 0.806 mmol) and palladium-carbon (10%, 85.7 mg, 80.5 µmol) in methanol (10 ml) was hydrogenated for 16 hours at 20° C. and 15 psi . The reaction mixture is then filtered and the filter cake washed with methanol (10 ml); the combined filtrates were concentrated in vacuo and chromatographed on silica gel (eluent: ethyl acetate) to give C39 as a white solid. Yield: 270 mg, 0.784 mmol, 97%. LCMS m/z 345.0 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.62 (br s, 1H), 8.61 (d, J =7.9 Hz, 1H), 7.32 (d, J =2.2 Hz , 1H), 7.11 (dd, J = 8.8 Hz, 1H), 7.01 (d, half AB quartet, J = 8.2 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7, 6 Hz, 1H), 4.47 (ddd, J = 8.5, 8.5, 4.8 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.5-2.27 (m, 2H , putative; partially obscured by solvent peak), 2.12-1.92 (m, 2H).
Стадия 7. Синтез 5,5,5-трифтор-N-[(4-метокси-1H-индол-2-ил)карбонил]-L-норвалил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C40).Step 7. Synthesis of 5,5,5-trifluoro- N -[(4-methoxy- 1H -indol-2-yl)carbonyl]-L- norvalyl -3-[(3S)-2-oxopyrrolidine-3- yl]-L-alanineamide ( C40 ).
0°C смесь C16 (58,2 мг, 0,218 ммоль) и C39 (75,0 мг, 0,218 ммоль) в N, N-диметилформамиде (4 мл) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 99,4 мг, 0,261 ммоль) и 4-метилморфолином (44,1 мг, 0,436 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа, ее разбавляют водой (20 мл) и водным раствором лимонной кислоты (1 M; 20 мл), и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (3×20 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (элюент: 10:1 этилацетат/метанол) дает C40 в виде белого твердого вещества. Выход: 72 мг, 0,145 ммоль, 66%. ЖХМС m/z 498,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,60 (шс, 1H), 8,52 (д, J=7,7 Гц, 1H), 8,20 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,42-7,33 (м, 2H), 7,14-7,05 (м, 2H), 7,00 (д, половина АВ квартета, J=8,2 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 4,58-4,46 (м, 1H), 4,32-4,22 (м, 1H), 3,89 (с, 3H), 3,18-3,02 (м, 2H), 2,45-2,21 (м, 3H), 2,18-2,07 (м, 1H), 2,06-1,88 (м, 3H), 1,73-1,59 (м, 1H), 1,59-1,48 (м, 1H).A 0°C mixture of C16 (58.2 mg, 0.218 mmol) and C39 (75.0 mg, 0.218 mmol) in N,N -dimethylformamide (4 mL) was treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N hexafluorophosphate , N,N',N'- tetramethyluronium (GATU; 99.4 mg, 0.261 mmol) and 4-methylmorpholine (44.1 mg, 0.436 mmol). Then the reaction mixture was stirred at 0°C for 1 hour, it was diluted with water (20 ml) and aqueous citric acid solution (1 M; 20 ml), and extracted with ethyl acetate (3×30 ml). The combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (20 ml) and saturated aqueous sodium chloride (3×20 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (eluent: 10:1 ethyl acetate/methanol) gives C40 as a white solid. Yield: 72 mg, 0.145 mmol, 66%. LCMS m/z 498.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.60 (br s, 1H), 8.52 (d, J =7.7 Hz, 1H), 8.20 (d, J =8.3 Hz , 1H), 7.61 (s, 1H), 7.42-7.33 (m, 2H), 7.14-7.05 (m, 2H), 7.00 (d, half AB quartet, J = 8.2 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.58-4.46 (m, 1H), 4.32-4.22 (m, 1H) , 3.89 (s, 3H), 3.18-3.02 (m, 2H), 2.45-2.21 (m, 3H), 2.18-2.07 (m, 1H), 2 .06-1.88 (m, 3H), 1.73-1.59 (m, 1H), 1.59-1.48 (m, 1H).
Стадия 8. Синтез N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (14).Step 8. Synthesis of N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-5.5, 5-trifluoro-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy- 1H -indole-2-carboxamide ( 14 ).
К смеси C40 (52 мг, 0,10 ммоль) в дихлорметане (13 мл) добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 37 мг, 0,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 часов, затем снова добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 37 мг, 0,16 ммоль), и перемешивание продолжают в течение 16 часов. Конечное добавление метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамата, внутренней соли (реагент Бурджеса; 24,9 мг, 0,105 ммоль) затем перемешивают в течение 2 часов, затем реакционную смесь разбавляют водой (20 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (2×20 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме; препаративная тонкослойная хроматография (элюент: 20:1 этилацетат/метанол) дает N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (14) в виде белого твердого вещества. Выход: 17,4 мг, 36,3 мкмоль, 36%. Этот продукт объединяют с очищенными продуктами двух других синтезов 14 (3 мг и 4 мг) и подвергают сверхкритической жидкостной хроматографии [Колонка: Chiral Technologies ChiralCel OD-H, 30×250 мм, 5 мкм; Подвижная фаза: 7:3 диоксид углерода/(этанол содержащий 0,1% гидроксид аммония); Скорость потока: 60 мл/минуту] с получением N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-5,5,5-трифтор-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (14) в виде твердого вещества. Выход: 11,3 мг, 23,6 мкмоль, 46% для сверхкритической жидкостной хроматографии. ЖХМС m/z 480,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,61 (шс, 1H), 8,96 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,61 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,37 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,11 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 7,01 (д, половина АВ квартета, J=8,2 Гц, 1H), 6,51 (д, J=7,7 Гц, 1H), 5,03-4,94 (м, 1H), 4,51-4,43 (м, 1H), 3,89 (с, 3H), 3,19-3,07 (м, 2H), 2,43-2,28 (м, 3H), 2,20-2,08 (м, 2H), 2,06-1,92 (м, 2H), 1,86-1,76 (м, 1H), 1,76-1,64 (м, 1H).To a mixture of C40 (52 mg, 0.10 mmol) in dichloromethane (13 mL) was added methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 37 mg, 0.16 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours, then methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 37 mg, 0.16 mmol) was added again and stirring was continued for 16 hours. The final addition of methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 24.9 mg, 0.105 mmol) was then stirred for 2 hours, then the reaction mixture was diluted with water (20 ml) and extracted with dichloromethane (3×10 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (2×20 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo ; preparative thin layer chromatography (eluent: 20:1 ethyl acetate/methanol) gives N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl ]ethyl}amino)-5,5,5-trifluoro-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy- 1H -indole-2-carboxamide ( 14 ) as a white solid. Yield: 17.4 mg, 36.3 µmol, 36%. This product is combined with the purified products of two other syntheses 14 (3 mg and 4 mg) and subjected to supercritical liquid chromatography [Column: Chiral Technologies ChiralCel OD-H, 30×250 mm, 5 μm; Mobile phase: 7:3 carbon dioxide/(ethanol containing 0.1% ammonium hydroxide); Flow rate: 60 ml/minute] to give N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino )-5,5,5-trifluoro-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy- 1H -indole-2-carboxamide ( 14 ) as a solid. Yield: 11.3 mg, 23.6 µmol, 46% for supercritical liquid chromatography. LCMS m/z 480.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.61 (br s, 1H), 8.96 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.61 (d, J =7.7 Hz , 1H), 7.71 (s, 1H), 7.37 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 8.8 Hz, 1H), 7.01 (d , half AB quartet, J = 8.2 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.03-4.94 (m, 1H), 4.51-4, 43 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.19-3.07 (m, 2H), 2.43-2.28 (m, 3H), 2.20-2.08 ( m, 2H), 2.06-1.92 (m, 2H), 1.86-1.76 (m, 1H), 1.76-1.64 (m, 1H).
Примеры 15, 16, 17, 18, и 19Examples 15, 16, 17, 18, and 19
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (15), N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (16), N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (17), N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5,7-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (18) и N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3,5-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (19) N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-7-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (fifteen), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-5-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (16), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-3-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (17), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-5,7-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (eighteen) and N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-3,5-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (nineteen)
Смесь 4 (10,0 мг, 22,8 мкмоль), декавольфрамата тетра-н-бутиламмония (TBADT; 3,78 мг, 1,14 мкмоль) и N-фтор-N-(фенилсульфонил)бензолсульфонамида (8,61 мг, 27,3 мкмоль) обрабатывают ацетонитрилом (0,75 мл), водой (0,5 мл) и трифторуксусной кислотой (1,74 мкл, 22,6 мкмоль) под аргоном. Реакционную пробирку затем герметично закрывают, помещают в EvoluChem™ PhotoRedOx Box, оборудованный вентилятором и облучают черным светом (PAR20-18W LG 365 нм, 100-240 VAC) при 25°C в течение 16 часов. В реакционную смесь добавляют водный раствор фосфата калия (1 M, pH 7,45; 1 мл), затем попеременно аликвоты воды и ацетонитрила для поддержания очищенного раствора в конечном объеме 18 мл. Аликвоты (3 мл) этой смеси наносят на Biotage Isolute C18 твердофазные картриджи для экстрагирования, которые заранее обрабатывают метанолом (3 мл), затем водой (3 мл). Картриджи промывают водой (3 мл) и 20% ацетонитрилом в 20 мМ водным раствором ацетата аммония (3 мл), затем элюируют ацетонитрилом (3 мл). После выпаривания элюатов в вакуумной центрифуге, остатки восстанавливают в смеси 1% водной муравьиной кислоты и ацетонитрила, и объединяют до всего 6 мл. Этот раствор делят наполовину, и каждую половину подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Luna C18,10×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; градиент: 15% B в течение 5 минут, затем 15% - 70% B в течение 70 минут, затем 70% - 95% B в течение 15 минут; скорость потока: 2 мл/мин). Фракции собирают каждые 20 секунд, и подобные представляющие интерес фракции из двух разделений объединяют и концентрируют. Эти фракции затем очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Agilent Polaris C18, 4,6×250 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 10 мМ ацетат аммония; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 10% B в течение 5 минут, затем 10% - 35% B в течение 35 минут, затем 35% - 60% B в течение 15 минут, затем 60% - 95% B в течение 9 минут; Скорость потока: 0,8 мл/мин). Фракции собирают каждые 20 секунд с получением N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (15), N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (16), N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (17), N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-5,7-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (18), и N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4-метил-1-оксопентан-2-ил]-3,5-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (19).Mixture4(10.0 mg, 22.8 µmol), decatungstate tetra-n-butylammonium (TBADT; 3.78 mg, 1.14 µmol) andN-fluorine-N-(phenylsulfonyl)benzenesulfonamide (8.61 mg, 27.3 µmol) is treated with acetonitrile (0.75 ml), water (0.5 ml) and trifluoroacetic acid (1.74 µl, 22.6 µmol) under argon. The reaction tube is then sealed, placed in an EvoluChem™ PhotoRedOx Box equipped with a fan and irradiated with black light (PAR20-18W LG 365 nm, 100-240 VAC) at 25°C for 16 hours. An aqueous solution of potassium phosphate (1 M, pH 7.45; 1 ml) was added to the reaction mixture, followed by alternating aliquots of water and acetonitrile to maintain the purified solution in a final volume of 18 ml. Aliquots (3 ml) of this mixture are applied to Biotage Isolute C18 solid phase extraction cartridges which are pretreated with methanol (3 ml) then water (3 ml). The cartridges were washed with water (3 ml) and 20% acetonitrile in 20 mM aqueous ammonium acetate (3 ml), then eluted with acetonitrile (3 ml). After evaporating the eluates in a vacuum centrifuge, the residues are reconstituted in a mixture of 1% aqueous formic acid and acetonitrile and combined to a total of 6 ml. This solution is divided in half and each half is subjected to reverse phase HPLC (Column: Phenomenex Luna C18.10×250 mm, 10 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile; gradient: 15% B for 5 minutes, then 15% - 70% B for 70 minutes, then 70% - 95% B for 15 minutes; flow rate: 2 ml/min). Fractions are collected every 20 seconds and similar fractions of interest from the two separations are pooled and concentrated. These fractions are then purified by reverse phase HPLC (Column: Agilent Polaris C18, 4.6×250 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 10 mM ammonium acetate; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 10% B over 5 minutes, then 10% - 35% B over 35 minutes, then 35% - 60% B over 15 minutes, then 60% - 95% B over 9 minutes; Flow rate: 0.8 ml/min). Fractions are collected every 20 seconds to obtainN-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-7-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (fifteen), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-5-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (16), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-3-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (17), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-5,7-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (eighteen), and N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-3,5-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (nineteen).
15 - Первое разделение, номера фракций 172-174; Второе разделение, номера фракций 136-137. Выход: 58 мкг, 0,13 мкмоль, 0,6%. МС с высоким разрешением m/z 458,2201 [M+H]+; рассчитано для C23H29FN5O4, 458,2204. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 12,05 (шс, 1H), 8,93 (д, J=7,9 Гц, 1H), 8,51 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,37 (д, J=2,3 Гц, 1H), 6,92 (дд, J=10,8, 8,6 Гц, 1H), 6,42 (дд, J=8,4, 2,5 Гц, 1H), 5,01-4,94 (м, 1H), 4,50-4,43 (м, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,18-3,07 (м, 2H), 2,40-2,31 (м, 1H), 2,19-2,08 (м, 2H), 1,85-1,76 (м, 1H), 1,76-1,64 (м, 3H), 1,58-1,49 (м, 1H), 0,94 (д, J=6,3 Гц, 3H), 0,89 (д, J=6,3 Гц, 3H). Время удержания: 7,90 минут (Аналитические условия. Колонка: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2,1×100 мм, 2,6 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 5% B в течение 0,5 минут, затем 5% - 70% B в течение 10,5 минут, затем 70% - 95% B в течение 2 минут; Скорость потока: 0,4 мл/мин). 15 - First separation, fraction numbers 172-174; Second separation, fraction numbers 136-137. Yield: 58 µg, 0.13 µmol, 0.6%. High resolution MS m/z 458.2201 [M+H] + ; calculated for C 23 H 29 FN 5 O 4 , 458.2204. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.05 (br s, 1H), 8.93 (d, J =7.9 Hz, 1H), 8.51 (d, J =7.6 Hz , 1H), 7.70 (s, 1H), 7.37 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.92 (dd, J = 10.8, 8.6 Hz, 1H), 6 .42 (dd, J = 8.4, 2.5 Hz, 1H), 5.01-4.94 (m, 1H), 4.50-4.43 (m, 1H), 3.87 (s , 3H), 3.18-3.07 (m, 2H), 2.40-2.31 (m, 1H), 2.19-2.08 (m, 2H), 1.85-1.76 (m, 1H), 1.76-1.64 (m, 3H), 1.58-1.49 (m, 1H), 0.94 (d, J =6.3 Hz, 3H), 0, 89 (d, J =6.3 Hz, 3H). Retention time: 7.90 minutes (Analytical conditions. Column: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2.1×100 mm, 2.6 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile ; Gradient: 5% B over 0.5 minutes, then 5% - 70% B over 10.5 minutes, then 70% - 95% B over 2 minutes; Flow rate: 0.4 ml/min).
16 - Первое разделение, номера фракций 172-174; Второе разделение, номера фракций 138-139. Выход: 153 мкг, 0,33 мкмоль, 1,4%. МС с высоким разрешением m/z 458,2201 [M+H]+; рассчитано для C23H29FN5O4, 458,2204. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,73 (шс, 1H), 8,95 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,61 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,09-7,03 (м, 2H), 5,01-4,94 (м, 1H), 4,51-4,43 (м, 1H), 4,06 (с, 3H), 3,18-3,07 (м, 2H), 2,40-2,31 (м, 1H), 2,19-2,08 (м, 2H), 1,80 (ддд, J=13,6, 9,2, 7,2 Гц, 1H), 1,76-1,65 (м, 3H), 1,58-1,50 (м, 1H), 0,94 (д, J=6,3 Гц, 3H), 0,89 (д, J=6,3 Гц, 3H). Время удержания: 7,94 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 15). 16 - First separation, fraction numbers 172-174; Second separation, fraction numbers 138-139. Yield: 153 µg, 0.33 µmol, 1.4%. High resolution MS m/z 458.2201 [M+H] + ; calculated for C 23 H 29 FN 5 O 4 , 458.2204. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.73 (br s, 1H), 8.95 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.61 (d, J =7.7 Hz , 1H), 7.70 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.09-7.03 (m, 2H), 5.01-4.94 (m, 1H), 4, 51-4.43 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.18-3.07 (m, 2H), 2.40-2.31 (m, 1H), 2.19- 2.08 (m, 2H), 1.80 (ddd, J =13.6, 9.2, 7.2 Hz, 1H), 1.76-1.65 (m, 3H), 1.58- 1.50 (m, 1H), 0.94 (d, J =6.3 Hz, 3H), 0.89 (d, J =6.3 Hz, 3H). Retention time: 7.94 minutes (Analytical conditions identical to those used for 1 5 ).
17 - Первое разделение, номера фракций 176-177; Второе разделение, номера фракций 141-142. Выход: 22 мкг, 0,048 мкмоль, 0,21%. МС с высоким разрешением m/z 458,2199 [M+H]+; рассчитано для C23H29FN5O4, 458,2204. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,45 (с, 1H), 8,94 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,62 (шд, J=7,5 Гц, 1H), 7,16 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 6,95 (шд, J=8,3 Гц, 1H), 6,54 (д, J=7,8 Гц, 1H), 5,02-4,94 (м, 1H), 4,54-4,46 (м, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,19-3,07 (м, 2H), 2,41-2,31 (м, 1H), 2,20-2,08 (м, 2H), 1,85-1,77 (м, 1H), 1,76-1,63 (м, 3H), 1,61-1,53 (м, 1H), 0,94 (д, J=6,3 Гц, 3H), 0,91 (д, J=6,3 Гц, 3H). Время удержания: 8,06 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 15). 17 - First separation, fraction numbers 176-177; Second separation, fraction numbers 141-142. Yield: 22 µg, 0.048 µmol, 0.21%. High resolution MS m/z 458.2199 [M+H] + ; calculated for C 23 H 29 FN 5 O 4 , 458.2204. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.45 (s, 1H), 8.94 (d, J =7.8 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.62 (bd, J =7.5 Hz, 1H), 7.16 (dd, J =8.8 Hz, 1H), 6.95 (bd, J =8.3 Hz, 1H), 6.54 (d , J = 7.8 Hz, 1H), 5.02-4.94 (m, 1H), 4.54-4.46 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.19- 3.07 (m, 2H), 2.41-2.31 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 2H), 1.85-1.77 (m, 1H), 1, 76-1.63 (m, 3H), 1.61-1.53 (m, 1H), 0.94 (d, J =6.3 Hz, 3H), 0.91 (d, J =6, 3 Hz, 3H). Retention time: 8.06 minutes (Analytical conditions identical to those used for 1 5 ).
18 - Первое разделение, номера фракций 180-181; Второе разделение, номер фракции 145. Выход: 17 мкг, 0,036 мкмоль, 0,16%. МС с высоким разрешением m/z 476,2100 [M+H]+; рассчитано для C23H28F2N5O4, 476,2109. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 12,23 (с, 1H), 8,96 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,62 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,52-7,48 (м, 1H), 7,13 (дд, J=11, 11 Гц, 1H), 5,02-4,94 (м, 1H), 4,53-4,44 (м, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,18-3,07 (м, 2H), 2,38-2,30 (м, 1H), 2,19-2,08 (м, 2H), 1,81 (ддд, J=13,6, 9,1, 7,0 Гц, 1H), 1,76-1,65 (м, 3H), 1,59-1,51 (м, 1H), 0,95 (д, J=6,2 Гц, 3H), 0,90 (д, J=6,3 Гц, 3H). Время удержания: 8,20 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 15). 18 - First separation, fraction numbers 180-181; Second separation, fraction number 145. Yield: 17 μg, 0.036 μmol, 0.16%. High resolution MS m/z 476.2100 [M+H] + ; calculated for C 23 H 28 F 2 N 5 O 4 , 476.2109. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.23 (s, 1H), 8.96 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.62 (d, J =7.6 Hz , 1H), 7.70 (s, 1H), 7.52-7.48 (m, 1H), 7.13 (dd, J =11.11 Hz, 1H), 5.02-4.94 ( m, 1H), 4.53-4.44 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.18-3.07 (m, 2H), 2.38-2.30 (m, 1H), 2.19-2.08 (m, 2H), 1.81 (ddd, J =13.6, 9.1, 7.0 Hz, 1H), 1.76-1.65 (m, 3H), 1.59-1.51 (m, 1H), 0.95 (d, J =6.2 Hz, 3H), 0.90 (d, J =6.3 Hz, 3H). Retention time: 8.20 minutes (Analytical conditions identical to those used for 1 5 ).
19 - Первое разделение, номера фракций 185-187; Второе разделение, номера фракций 150-151. Выход: 35 мкг, 0,074 мкмоль, 0,32%. МС с высоким разрешением m/z 476,2107 [M+H]+; рассчитано для C23H28F2N5O4, 476,2109. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,64 (с, 1H), 8,94 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,80 (шд, J=7 Гц, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,16 (дд, компонент системы АВХ, J=11,9, 9,1 Гц, 1H), 7,08 (шд, половина АВ квартета, J=8,5 Гц, 1H), 5,02-4,94 (м, 1H), 4,55-4,47 (м, 1H), 3,99 (с, 3H), 3,19-3,08 (м, 2H), 2,41-2,32 (м, 1H), 2,19-2,10 (м, 2H), 1,81 (ддд, J=13,7, 9,0, 7,2 Гц, 1H), 1,77-1,63 (м, 3H), 1,57 (ддд, J=12,9, 8,4, 4,8 Гц, 1H), 0,94 (д, J=6,4 Гц, 3H), 0,91 (д, J=6,4 Гц, 3H). Время удержания: 8,44 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 15). 19 - First separation, fraction numbers 185-187; Second separation, fraction numbers 150-151. Yield: 35 µg, 0.074 µmol, 0.32%. High resolution MS m/z 476.2107 [M+H] + ; calculated for C 23 H 28 F 2 N 5 O 4 , 476.2109. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.64 (s, 1H), 8.94 (d, J =7.9 Hz, 1H), 7.80 (brd, J =7 Hz, 1H ), 7.71 (s, 1H), 7.16 (dd, component of the ABX system, J = 11.9, 9.1 Hz, 1H), 7.08 (sd, half of the AB quartet, J = 8.5 Hz, 1H), 5.02-4.94 (m, 1H), 4.55-4.47 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.19-3.08 (m, 2H), 2.41-2.32 (m, 1H), 2.19-2.10 (m, 2H), 1.81 (ddd, J =13.7, 9.0, 7.2 Hz, 1H), 1.77-1.63 (m, 3H), 1.57 (ddd, J =12.9, 8.4, 4.8 Hz, 1H), 0.94 (d, J =6, 4 Hz, 3H), 0.91 (d, J =6.4 Hz, 3H). Retention time: 8.44 minutes (Analytical conditions identical to those used for 1 5 ).
Примеры 20, 21, 22, и 23Examples 20, 21, 22, and 23
N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (20), N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (21), N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (22) и N-[(2S)-1-({(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5,7-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамид (23) N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-7-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (twenty), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-5-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (21), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-3-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (22) and N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-5,7-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (23)
Смесь 10 (10,0 мг, 22,0 мкмоль), декавольфрамата тетра-н-бутиламмония (TBADT; 3,66 мг, 1,10 мкмоль) и N-фтор-N-(фенилсульфонил)бензолсульфонамида (8,34 мг, 26,4 мкмоль) обрабатывают ацетонитрилом (0,75 мл), водой (0,5 мл) и трифторуксусной кислотой (1,69 мкл, 21,9 мкмоль) под аргоном. Реакционную пробирку затем герметично закрывают, помещают в EvoluChem™ PhotoRedOx Box, оборудованную вентилятором, и облучают черным светом (PAR20-18W LG 365 нм, 100-240 VAC) при 25°C в течение 16 часов. В реакционную смесь добавляют водный раствор фосфата калия (1 M, pH 7,45; 1 мл), затем попеременно аликвоты воды и ацетонитрила для сохранения очищенного раствора в конечном объеме 18 мл. Аликвоты (3 мл) этой смеси наносят на Biotage Isolute C18 картриджи для твердофазной экстракции, которые предварительно обрабатывают метанолом (3 мл), затем водным раствором ацетата аммония (10 мМ; 3 мл). Картриджи промывают водным раствором ацетата аммония (10 мМ; 3 мл) и 20% ацетонитрилом в 20 мМ ацетата аммония (3 мл), затем элюируют ацетонитрилом (3 мл). После выпаривания элюатов в вакуумной центрифуге, остатки восстанавливают в смеси 1% водной муравьиной кислоты и ацетонитрила, и объединяют до всего 6 мл. Этот раствор делят наполовину, и каждую половину подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Luna C18,10×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 15% B в течение 5 минут, затем 15% - 70% B в течение 70 минут, затем 70% - 95% B в течение 15 минут; Скорость потока: 2 мл/мин). Фракции собирают каждые 20 секунд, и похожие фракции, представляющие интерес, из двух разделений объединяют и концентрируют. Эти фракции затем очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Agilent Polaris C18, 4,6×250 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 10 мМ ацетат аммония; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 10% B в течение 5 минут, затем немедленное повышение до 20% B, затем 20% - 40% B в течение 35 минут, затем 40% - 60% B в течение 15 минут, затем 60% - 95% B в течение 9 минут; Скорость потока: 0,8 мл/мин). Фракции собирают каждые 20 секунд, с получением N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-7-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (20), N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (21), N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-3-фтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (22) и N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-5,7-дифтор-4-метокси-1H-индол-2-карбоксамида (23).Mixture10(10.0 mg, 22.0 µmol), decatungstate tetra-n-butylammonium (TBADT; 3.66 mg, 1.10 µmol) andN-fluorine-N-(phenylsulfonyl)benzenesulfonamide (8.34 mg, 26.4 μmol) is treated with acetonitrile (0.75 ml), water (0.5 ml) and trifluoroacetic acid (1.69 μl, 21.9 μmol) under argon. The reaction tube is then sealed, placed in an EvoluChem™ PhotoRedOx Box equipped with a fan, and irradiated with black light (PAR20-18W LG 365 nm, 100-240 VAC) at 25°C for 16 hours. An aqueous solution of potassium phosphate (1 M, pH 7.45; 1 ml) was added to the reaction mixture, followed by alternating aliquots of water and acetonitrile to keep the purified solution in a final volume of 18 ml. Aliquots (3 ml) of this mixture were applied to Biotage Isolute C18 solid phase extraction cartridges, which were pretreated with methanol (3 ml) followed by aqueous ammonium acetate (10 mM; 3 ml). The cartridges were washed with aqueous ammonium acetate (10 mM; 3 ml) and 20% acetonitrile in 20 mM ammonium acetate (3 ml), then eluted with acetonitrile (3 ml). After evaporating the eluates in a vacuum centrifuge, the residues are reconstituted in a mixture of 1% aqueous formic acid and acetonitrile and combined to a total of 6 ml. This solution was divided in half and each half was subjected to reverse phase HPLC (Column: Phenomenex Luna C18.10×250 mm, 10 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 15% B for 5 minutes, then 15% - 70% B for 70 minutes, then 70% - 95% B for 15 minutes; flow rate: 2 ml/min). Fractions are collected every 20 seconds and similar fractions of interest from the two partitions are pooled and concentrated. These fractions are then purified by reverse phase HPLC (Column: Agilent Polaris C18, 4.6×250 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 10 mM ammonium acetate; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 10% B over 5 minutes, then immediate rise to 20% B, then 20% - 40% B for 35 minutes, then 40% - 60% B for 15 minutes, then 60% - 95% B for 9 minutes; Flow rate: 0.8 ml/min). Fractions are collected every 20 seconds, yieldingN-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-7-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (twenty), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-5-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (21), N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-3-fluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (22) and N-[(2S)-1-({(1S)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-5,7-difluoro-4-methoxy-1H-indole-2-carboxamide (23).
20 - Первое разделение, номера фракций 183-185; Второе разделение, номера фракций 150-151. Выход: 24 мкг, 0,051 мкмоль, 0,23%. МС с высоким разрешением m/z 472,2342 [M+H]+; рассчитано для C24H31FN5O4, 472,2360. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 12,05 (шс, 1H), 8,91 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,52 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,37-7,32 (м, 1H), 6,92 (дд, J=10,9, 8,4 Гц, 1H), 6,41 (дд, J=8,5, 2,7 Гц, 1H), 5,00-4,93 (м, 1H), 4,52 (ддд, J=8,5, 8,2, 3,7 Гц, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,17-3,05 (м, 2H), 2,38-2,30 (м, 1H), 2,18-2,06 (м, 2H), 1,85-1,64 (м, 4H), 0,94 (с, 9H). Время удержания: 8,32 минут (Аналитические условия. Колонка: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2,1×100 мм, 2,6 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 5% B в течение 0,5 минут, затем 5% - 70% B в течение 10,5 минут, затем 70% - 95% B в течение 2 минут; Скорость потока: 0,4 мл/минуту). 20 - First separation, fraction numbers 183-185; Second separation, fraction numbers 150-151. Yield: 24 µg, 0.051 µmol, 0.23%. High resolution MS m/z 472.2342 [M+H] + ; calculated for C 24 H 31 FN 5 O 4 , 472.2360. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.05 (br s, 1H), 8.91 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J =8.0 Hz , 1H), 7.69 (s, 1H), 7.37-7.32 (m, 1H), 6.92 (dd, J =10.9, 8.4 Hz, 1H), 6.41 ( dd, J =8.5, 2.7 Hz, 1H), 5.00-4.93 (m, 1H), 4.52 (dd, J =8.5, 8.2, 3.7 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.17-3.05 (m, 2H), 2.38-2.30 (m, 1H), 2.18-2.06 (m, 2H) , 1.85-1.64 (m, 4H), 0.94 (s, 9H). Retention time: 8.32 minutes (Analytical conditions. Column: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2.1×100 mm, 2.6 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile ; Gradient: 5% B over 0.5 minutes, then 5% - 70% B over 10.5 minutes, then 70% - 95% B over 2 minutes; Flow rate: 0.4 ml/minute).
21 - Первое разделение, номера фракций 183-185; Второе разделение, номера фракций 152-153. Выход: 68 мкг, 0,14 мкмоль, 0,64%. МС с высоким разрешением m/z 472,2344 [M+H]+; рассчитано для C24H31FN5O4, 472,2360. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,72 (шс, 1H), 8,91 (д, J=8,1 Гц, 1H), 8,59 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,47 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,09-7,04 (м, 2H), 5,00-4,93 (м, 1H), 4,52 (ддд, J=8,5, 8,5, 3,8 Гц, 1H), 4,06 (шс, 3H), 3,17-3,05 (м, 2H), 2,39-2,31 (м, 1H), 2,18-2,06 (м, 2H), 1,84-1,77 (м, 1H), 1,78 (дд, J=13,9, 9,0 Гц, 1H), 1,74-1,64 (м, 2H), 0,94 (с, 9H). Время удержания: 8,34 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 20). 21 - First separation, fraction numbers 183-185; Second separation, fraction numbers 152-153. Yield: 68 µg, 0.14 µmol, 0.64%. High resolution MS m/z 472.2344 [M+H] + ; calculated for C 24 H 31 FN 5 O 4 , 472.2360. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.72 (br s, 1H), 8.91 (d, J =8.1 Hz, 1H), 8.59 (d, J =8.0 Hz , 1H), 7.69 (s, 1H), 7.47 (d, J =2.2 Hz, 1H), 7.09-7.04 (m, 2H), 5.00-4.93 ( m, 1H), 4.52 (ddd, J =8.5, 8.5, 3.8 Hz, 1H), 4.06 (br, 3H), 3.17-3.05 (m, 2H) , 2.39-2.31(m, 1H), 2.18-2.06(m, 2H), 1.84-1.77(m, 1H), 1.78(dd, J =13, 9, 9.0 Hz, 1H), 1.74-1.64 (m, 2H), 0.94 (s, 9H). Retention time: 8.34 minutes (Analytical conditions identical to those used for 20 ).
22 - Первое разделение, номера фракций 187-188; Второе разделение, номер фракции 154. Выход: 5 мкг, 0,011 мкмоль, 0,05%. МС с высоким разрешением m/z 472,2354 [M+H]+; рассчитано для C24H31FN5O4, 472,2360. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,45 (с, 1H), 8,91 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,57 (дд, J=8,2, 3,6 Гц, 1H), 7,15 (дд, J=8, 8 Гц, 1H), 6,95 (шд, J=8,3 Гц, 1H), 6,54 (д, J=7,8 Гц, 1H), 5,00-4,94 (м, 1H), 4,56-4,49 (м, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,18-3,07 (м, 2H), 2,40-2,32 (м, 1H), 2,17-2,09 (м, 2H), 1,84-1,77 (м, 1H), 1,76-1,65 (м, 3H), 0,95 (с, 9H). Время удержания: 8,51 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 20). 22 - First separation, fraction numbers 187-188; Second separation, fraction number 154. Yield: 5 μg, 0.011 μmol, 0.05%. High resolution MS m/z 472.2354 [M+H] + ; calculated for C 24 H 31 FN 5 O 4 , 472.2360. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.45 (s, 1H), 8.91 (d, J =7.9 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.57 (dd, J =8.2, 3.6Hz, 1H), 7.15 (dd, J =8.8Hz, 1H), 6.95 (bd, J =8.3Hz, 1H), 6 .54 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.00-4.94 (m, 1H), 4.56-4.49 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.18-3.07 (m, 2H), 2.40-2.32 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 2H), 1.84-1.77 (m, 1H ), 1.76-1.65 (m, 3H), 0.95 (s, 9H). Retention time: 8.51 minutes (Analytical conditions identical to those used for 20 ).
23 - Первое разделение, номера фракций 190-192; Второе разделение, номера фракций 156-157. Выход: 21 мкг, 0,043 мкмоль, 0,19%. МС с высоким разрешением m/z 490,2258 [M+H]+; рассчитано для C24H30F2N5O4, 490,2266. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 12,24 (с, 1H), 8,95 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,64 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,49-7,47 (м, 1H), 7,13 (дд, J=11,1, 11,1 Гц, 1H), 5,00-4,93 (м, 1H), 4,54 (ддд, J=8, 8, 4,1 Гц, 1H), 4,00 (с, 3H), 3,17-3,06 (м, 2H), 2,38-2,30 (м, 1H), 2,18-2,07 (м, 2H), 1,85-1,65 (м, 4H), 0,95 (с, 9H). Время удержания: 8,65 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 20). 23 - First separation, fraction numbers 190-192; Second separation, fraction numbers 156-157. Yield: 21 µg, 0.043 µmol, 0.19%. High resolution MS m/z 490.2258 [M+H] + ; calculated for C 24 H 30 F 2 N 5 O 4 , 490.2266. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 12.24 (s, 1H), 8.95 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.64 (d, J =8.0 Hz , 1H), 7.69 (s, 1H), 7.49-7.47 (m, 1H), 7.13 (dd, J =11.1, 11.1 Hz, 1H), 5.00- 4.93 (m, 1H), 4.54 (ddd, J =8.8, 4.1 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.17-3.06 (m, 2H) , 2.38-2.30 (m, 1H), 2.18-2.07 (m, 2H), 1.85-1.65 (m, 4H), 0.95 (s, 9H). Retention time: 8.65 minutes (Analytical conditions identical to those used for 20 ).
или
DIAST-1
or
DIAST-1
или
DIAST-2
or
DIAST-2
или
or
или
or
1. В этом случае, C28 лишают защиты с применением метансульфоновой кислоты, а не гидрохлорида.1. In this case, C28 is deprotected using methanesulfonic acid rather than hydrochloride.
2. Эпимеры примера 25 и примера 26 разделяют сверхкритической жидкостной хроматографией (Колонка: Chiral Technologies Chiralpak IB, 21×250 мм, 5 мкм; Подвижная фаза: 9:1 диоксид углерода/метанол; Обратное давление: 120 бар, Скорость потока: 75 мл/минуту). Первый элюированный диастереомер обозначают пример 25, и второй элюированный диастереомер обозначают пример 26.2. The epimers of example 25 and example 26 are separated by supercritical liquid chromatography (Column: Chiral Technologies Chiralpak IB, 21×250 mm, 5 µm; Mobile phase: 9:1 carbon dioxide/methanol; Back pressure: 120 bar, Flow rate: 75 ml /minute). The first eluted diastereomer is designated Example 25 and the second eluted diastereomer is designated Example 26.
3. Условия для аналитической ВЭЖХ. Колонка: Chiral Technologies Chiralpak IB, 4,6×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза: 85:15 диоксид углерода/метанол; Обратное давление: 120 бар; Скорость потока: 1,5 мл/минуту.3. Conditions for analytical HPLC. Column: Chiral Technologies Chiralpak IB, 4.6×100 mm, 5 µm; Mobile phase: 85:15 carbon dioxide/methanol; Back pressure: 120 bar; Flow rate: 1.5 ml/minute.
4. Условия для аналитической ВЭЖХ. Колонка: Waters Atlantis dC18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5,0% - 95% B, линейный, в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 2 мл/минуту.4. Conditions for analytical HPLC. Column: Waters Atlantis dC18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Gradient: 5.0% - 95% B, linear over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes; Flow rate: 2 ml/minute.
5. 1H ЯМР примера 30 до конечной очистки: 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 7,48-7,42 (м, 2H), 7,36-7,26 (м, 3H), 4,90 (дд, J=10,5, 5,7 Гц, 1H), 4,37 (дд, J=7,7, 4,9 Гц, 1H), 3,69 (с, 1H), 3,25 (ддд, J=9,9, 8,9, 2,5 Гц, 1H), 3,18 (ддд, J=9,6, 9,0, 7,1 Гц, 1H), 2,40-2,29 (м, 1H), 2,20 (с, 6H), 2,2-2,10 (м, 1H), 2,09-1,99 (м, 1H), 1,80-1,61 (м, 2H), 1,73 (дд, J=14,5, 5,0 Гц, 1H), 1,61 (дд, J=14,4, 7,8 Гц, 1H), 0,95 (с, 9H).5. 1 H NMR Example 30 to final purification: 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 7.48-7.42 (m, 2H), 7.36-7.26 (m, 3H), 4.90 (dd, J =10.5, 5.7 Hz, 1H), 4.37 (dd, J =7.7, 4.9 Hz, 1H), 3.69 (s, 1H), 3 .25 (ddd, J =9.9, 8.9, 2.5 Hz, 1H), 3.18 (ddd, J =9.6, 9.0, 7.1 Hz, 1H), 2.40 -2.29(m, 1H), 2.20(s, 6H), 2.2-2.10(m, 1H), 2.09-1.99(m, 1H), 1.80-1 .61 (m, 2H), 1.73 (dd, J =14.5, 5.0 Hz, 1H), 1.61 (dd, J =14.4, 7.8 Hz, 1H), 0, 95 (s, 9H).
6. Амидное сочетание с подходящей карбоновой кислотой проводят с применением триоксида 2,4,6-триоксида 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинана.6. Amide coupling with a suitable carboxylic acid is carried out using 2,4,6-
7. Пример 4 (25 мкм) инкубируют с цитохромом человека P450 3A5 (4 нмоль) в буфере на основе фосфата калия (100 мМ, pH 7,4; 40 мл), содержащем хлорид магния (3,3 мМ) и NADPH (1,3 мМ). Инкубацию проводят в течение 0,75 часов во встряхиваемой водяной бане, выдерживаемой при 37°C. Инкубацию заканчивают добавлением равного объема ацетонитрила, затем смесь вращают в центрифуге при 1700 x g в течение 5 минут, и супернатант подвергают вакуумному центрифугированию в течение приблизительно 1,5 часов. К этой смеси добавляют муравьиную кислоту (0,5 мл), ацетонитрил (0,5 мл) и воду до конечного объема 50 мл, и полученную смесь вращают в центрифуге при 40000 x g в течение 30 минут. Супернатант подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Polaris C18, 4,6×250 мм; 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: метанол; Градиент: 15% B в течение 5 минут, затем 15% - 35% B в течение 75 минут, затем 35% - 95% B в течение 10 минут; Скорость потока: 0,8 мл/минуту). Фракции собирают каждые 20 секунд. первый элюированный продукт, не чистый пример 33, элюируют при 54,7 минут, и пример 34 элюируют при 55,3 минут. Не чистый пример 33 повторно очищают с применением ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2,1×100 мм, 2,6 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,5% уксусной кислоты; Подвижная фаза B: 9:1 ацетонитрил/метанол; Градиент: 10% B в течение 0,5 минут, затем 10% - 35% в течение 26,5 минут, затем 35% - 60% B в течение 3 минут; Скорость потока 0,5 мл/минуту); фракции собирают каждые 15 секунд. В этой системе, пример 33 имеет время удержания 12,7 минут; дополнительный пример 34 элюируют при 13,5 минут.7. Example 4 (25 µm) incubated with human cytochrome P450 3A5 (4 nmol) in potassium phosphate buffer (100 mM, pH 7.4; 40 ml) containing magnesium chloride (3.3 mM) and NADPH (1.3 mM). Incubation is carried out for 0.75 hours in a shaking water bath maintained at 37°C. The incubation is terminated by adding an equal volume of acetonitrile, then the mixture is spun in a centrifuge at 1700 x g for 5 minutes and the supernatant is subjected to vacuum centrifugation for approximately 1.5 hours. To this mixture are added formic acid (0.5 ml), acetonitrile (0.5 ml) and water to a final volume of 50 ml, and the resulting mixture is centrifuged at 40,000 x g for 30 minutes. The supernatant was subjected to reverse phase HPLC (Column: Polaris C18, 4.6×250 mm; 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: methanol; Gradient: 15% B over 5 minutes, then 15% - 35% B for 75 minutes, then 35% - 95% B for 10 minutes; Flow rate: 0.8 ml/minute). Fractions are collected every 20 seconds. the first eluted product, not pure Example 33, was eluted at 54.7 minutes and Example 34 was eluted at 55.3 minutes. Illegal Example 33 was repurified using reverse phase HPLC (Column: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2.1×100 mm, 2.6 µm; Mobile phase A: water containing 0.5% acetic acid; Mobile phase B : 9:1 acetonitrile/methanol; Gradient: 10% B over 0.5 minutes, then 10% - 35% over 26.5 minutes, then 35% - 60% B over 3 minutes; Flow rate 0.5 ml/minute); fractions are collected every 15 seconds. In this system, example 33 has a hold time of 12.7 minutes; Additional Example 34 was eluted at 13.5 minutes.
8. Необходимую 4-хлор-1,3-диметил-1H-пиразол-5-карбоновая кислота может быть получена гидролизом коммерчески доступного этилового эфира.8. The desired 4-chloro-1,3-dimethyl-1 H -pyrazole-5-carboxylic acid can be obtained by hydrolysis of commercially available ethyl ester.
9. Реакционную смесь разбавляют ацетонитрилом и 1% водной муравьиной кислотой до объема приблизительно 2 мл; композиция конечного растворителя такова, что смесь является прозрачной, с содержанием ацетонитрила приблизительно 20% - 30%. Компоненты этой смеси разделяют ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Luna C18, 10×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 15% B в течение 5 минут, затем 15% - 70% B в течение 70 минут, затем 70% - 95% B в течение 15 минут; Скорость потока: 2 мл/минуту); фракции собирают каждые 20 секунд. Примеры 37, 38, 39, 40, и 41 элюируют с временем удержания, данным ниже.9. The reaction mixture is diluted with acetonitrile and 1% aqueous formic acid to a volume of approximately 2 ml; the composition of the final solvent is such that the mixture is clear, with an acetonitrile content of approximately 20% - 30%. The components of this mixture are separated by reverse phase HPLC (Column: Phenomenex Luna C18, 10×250 mm, 10 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 15% B over 5 minutes, then 15% - 70% B for 70 minutes, then 70% - 95% B for 15 minutes; Flow rate: 2 ml/minute); fractions are collected every 20 seconds. Examples 37, 38, 39, 40, and 41 are eluted with the retention times given below.
10. Условия для аналитической ВЭЖХ. Колонка: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2,1×100 мм, 2,6 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 5% B в течение 0,5 минут, затем 5% - 70% B в течение 10,5 минут, затем 70% - 95% B в течение 2 минут; Скорость потока: 0,4 мл/мин.10. Conditions for analytical HPLC. Column: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2.1×100 mm, 2.6 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 5% B over 0.5 minutes, then 5% - 70% B over 10.5 minutes, then 70% - 95% B over 2 minutes; Flow rate: 0.4 ml/min.
11. Региохимия примера 41 не была строго определена; другими возможными структурами для этого примера являются N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-5,6-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид и N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-6,7-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид.11. The regiochemistry of example 41 was not strictly defined; other possible structures for this example are N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4 ,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-5,6-bis(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide and N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-6,7 -bis(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide.
12. Реакционную смесь очищают с применением условий, описанных в примечании 9. Пример 42 элюируют при 58,1 минут и пример 43 элюируют при 59,2 минут.12. The reaction mixture was purified using the conditions described in Note 9. Example 42 was eluted at 58.1 minutes and Example 43 was eluted at 59.2 minutes.
13. Реакционную смесь разбавляют смесью ацетонитрила (0,3 мл) и 1% водной муравьиной кислоты (0,7 мл). Полученную смесь центрифугируют, и супернатант подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Luna C18, 10×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 2% - 10% B в течение 5,0 минут, затем 10% - 95% B в течение 95 минут; Скорость потока: 2 мл/минуту); фракции собирают каждые 20 секунд. Примеры 46, 47, и 48 элюируют с временем удержания, данным ниже. Пример 5 также выделяют из этой реакции, во фракциях 189-190.13. The reaction mixture was diluted with a mixture of acetonitrile (0.3 ml) and 1% aqueous formic acid (0.7 ml). The resulting mixture was centrifuged and the supernatant was subjected to reverse phase HPLC (Column: Phenomenex Luna C18, 10×250 mm, 10 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 2% - 10% B for 5.0 minutes, then 10% - 95% B for 95 minutes; Flow rate: 2 ml/minute); fractions are collected every 20 seconds. Examples 46, 47, and 48 are eluted with the retention times given below. Example 5 is also isolated from this reaction, in fractions 189-190.
14. Условия для аналитической ВЭЖХ. Колонка: Phenomenex Kinetex C18, 2,1×50 мм, 1,7 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,1% муравьиной кислоты; Градиент: 5% B в течение 0,5 минут, затем 5% - 50% B в течение 6,0 минут, затем 50% - 80% B в течение 1,5 минут, затем 80% - 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 0,4 мл/мин.14. Conditions for analytical HPLC. Column: Phenomenex Kinetex C18, 2.1×50 mm, 1.7 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid; Mobile phase B: acetonitrile containing 0.1% formic acid; Gradient: 5% B over 0.5 minutes, then 5% - 50% B over 6.0 minutes, then 50% - 80% B over 1.5 minutes, then 80% - 95% B over 1 .0 minutes; Flow rate: 0.4 ml/min.
15. Только указанный продукт наблюдают в этой реакции.15. Only the indicated product is observed in this reaction.
16. Получают исходный раствор примера 4 (5,56 мг, 12,7 мкмоль) и трифторуксусной кислоты (4 мкл, 50 мкл) в диметилсульфоксиде (420 мкл). Одну шестую этого раствора обрабатывают 1,1-дифторэтансульфинатом натрия 1,3 мг, 8,5 мкмоль), затем трет-бутилгилропероксидом (70% в воде; 1,4 мкл, 10 мкмоль) и нагревают при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют ацетонитрилом и 1% водной муравьиной кислотой до объема приблизительно 2-3 мл; композиция конечного растворителя такова, что смесь является прозрачной, с содержанием ацетонитрила приблизительно 20% - 30%. Компоненты этой смеси разделяют ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Luna C18, 10×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 15% B в течение 5 минут, затем 15% - 40% B в течение 70 минут, затем 40% - 95% B в течение 15 минут; Скорость потока: 2 мл/минуту); фракции собирают каждые 20 секунд. Пример 74 элюируют при 68,6 минут.16. Prepare a stock solution of Example 4 (5.56 mg, 12.7 µmol) and trifluoroacetic acid (4 µl, 50 µl) in dimethyl sulfoxide (420 µl). One sixth of this solution is treated with
Примеры 75 и 76Examples 75 and 76
(2S,4R)-4-трет-Бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамид и (2R,4S)-4-трет-Бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамид [75 (DIAST-1) и 76 (DIAST-2) ( 2S , 4R )-4- tert -Butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N- [(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide and ( 2R , 4S )-4- tert -Butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S ) -2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide [ 75 (DIAST-1) and 76 (DIAST-2)
Стадия 1. Синтез трет-бутил N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валината (C44).
Раствор трифторметансульфонового ангидрида (8,88 мл, 52,8 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляют к -78°C раствору трет-бутил L-валината, гидрохлорида (10,0 г, 47,7 ммоль) и триэтиламина (18,7 мл, 134 ммоль) в дихлорметане (90 мл). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 часов, затем ее выливают в воду и подкисляют до pH приблизительно 4 добавлением 1 M хлористоводородной кислотой. Полученную смесь экстрагируют дихлорметаном, и органический слой промывают водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток объединяют с продуктами двух аналогичных реакций, проводимых с применением трет-бутил L-валината, гидрохлорида (1,00 г, 4,77 ммоль; 1,00 г, 4,77 ммоль) и очищают хроматографией на силикагеле (градиент: 0% - 20% этилацетат в петролейном эфире) с получением C44 в виде белого твердого вещества. Объединенный выход: 14,0 г, 45,9 ммоль, 80%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,92 (д, J=8,8 Гц, 1H), 3,68 (дд, J=8,8, 6,2 Гц, 1H), 2,16-2,02 (м, 1H), 1,43 (с, 9H), 0,92 (д, J=6,9 Гц, 3H), 0,90 (д, J=6,9 Гц, 3H).A solution of trifluoromethanesulfonic anhydride (8.88 ml, 52.8 mmol) in dichloromethane (10 ml) was added to a -78°C solution of tert -butyl L-valinate, hydrochloride (10.0 g, 47.7 mmol) and triethylamine (18 .7 ml, 134 mmol) in dichloromethane (90 ml). The reaction mixture is stirred at -78°C for 2 hours, then it is poured into water and acidified to pH approximately 4 by adding 1 M hydrochloric acid. The resulting mixture was extracted with dichloromethane and the organic layer was washed with aqueous sodium bicarbonate and saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue is combined with the products of two similar reactions carried out using tert -butyl L-valinate, hydrochloride (1.00 g, 4.77 mmol; 1.00 g, 4.77 mmol) and purified by silica gel chromatography (gradient: 0% - 20% ethyl acetate in petroleum ether) to give C44 as a white solid. Combined yield: 14.0 g, 45.9 mmol, 80%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.92 (d, J =8.8 Hz, 1H), 3.68 (dd, J =8.8, 6.2 Hz, 1H), 2 .16-2.02 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 0.92 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.90 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Стадия 2. Синтез N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валина (C45).
В раствор C44 (14,0 г, 45,9 ммоль) в дихлорметане (85 мл) добавляют трифторуксусную кислоту (85 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов, затем ее концентрируют в вакууме; остаток промывают петролейным эфиром с получением C45 в виде белого твердого вещества. Выход: 10,9 г, 43,7 ммоль, 95%. МС m/z 248,0 [M-H]−. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,86 (шд, J=8,3 Гц, 1H), 3,79-3,71 (м, 1H), 2,19-2,05 (м, 1H), 0,93 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,90 (д, J=6,8 Гц, 3H).To a solution of C44 (14.0 g, 45.9 mmol) in dichloromethane (85 ml) was added trifluoroacetic acid (85 ml). The reaction mixture is stirred at room temperature for 3 hours, then it is concentrated in vacuo ; the residue is washed with petroleum ether to give C45 as a white solid. Yield: 10.9 g, 43.7 mmol, 95%. MS m/z 248.0 [MH] - . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.86 (br, J = 8.3 Hz, 1H), 3.79-3.71 (m, 1H), 2.19-2.05 ( m, 1H), 0.93 (d, J =6.8 Hz, 3H), 0.90 (d, J =6.8 Hz, 3H).
Стадия 3. Синтез метил цис-4-трет-бутилпиперидин-2-карлоксилата, гидрохлорида (C46).Step 3. Synthesis of methyl cis -4- tert -butylpiperidine-2-carboxylate, hydrochloride ( C46 ).
К 0°C раствору цис-4-трет-бутилпиперидин-2-карбоновой кислоты, гидрохлорида (см. R. T. Shuman et al., J. Org. Chem. 1990, 55, 738-741; 4,00 г, 18,0 ммоль) в метаноле (40 мл) добавляют тионилхлорид (6,44 г, 54,1 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 16 часов, ее концентрируют в вакууме с получением C46 в виде беловатого твердого вещества (4,50 г). Часть этого продукта применяют на следующей стадии. ЖХМС m/z 200,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,46 (шс, 1H), 9,09 (шс, 1H), 4,11-3,96 (м, 1H), 3,76 (с, 3H), 3,4-3,21 (м, 1H, предполагаемый; значительно закрыт пиком воды), 2,93-2,77 (м, 1H), 2,07 (шд, J=10,8 Гц, 1H), 1,75 (шд, J=10,6 Гц, 1H), 1,51-1,32 (м, 3H), 0,84 (с, 9H).To a 0°C solution of cis -4- tert -butylpiperidine-2-carboxylic acid, hydrochloride (see RT Shuman et al., J. Org. Chem . 1990, 55 , 738-741; 4.00 g, 18.0 mmol) in methanol (40 ml) thionyl chloride (6.44 g, 54.1 mmol) is added. The reaction mixture was then stirred at 25° C. for 16 hours, concentrated in vacuo to give C46 as an off-white solid (4.50 g). Part of this product is used in the next step. LCMS m/z 200.0 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.46 (br s, 1H), 9.09 (br br, 1H), 4.11-3.96 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.4-3.21 (m, 1H, estimated; significantly covered by water peak), 2.93-2.77 (m, 1H), 2.07 (br, J =10.8 Hz, 1H ), 1.75 (bd, J =10.6 Hz, 1H), 1.51-1.32 (m, 3H), 0.84 (s, 9H).
Стадия 4. Синтез метил (2S,4R)-4-трет-бутил-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карлоксилата и метил (2R,4S)-4-трет-бутил-1-{N-[(трифторметил) сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карлоксилата (C47).Stage 4. Synthesis of methyl (2 S ,4 R )-4- tert -butyl-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-caroxylate and methyl (2 R ,4 S )- 4- tert -Butyl-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-caroxylate ( C47 ).
К 25°C смеси C45 (300 мг, 1,20 ммоль) и C46 (с предыдущей стадии; 341 мг, ≤1,36 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл) добавляют 4-метилморфолин (365 мг, 3,61 ммоль). Полученную смесь охлаждают до 0°C и обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 549 мг, 1,44 ммоль). Затем реакционную смесь продувают азотом в течение 1 минуты, ее перемешивают при 25°C в течение 12 часов. ЖХМС анализ в этой точке показывает присутствие C47: ЖХМС m/z 431,1 [M+H]+. Реакционную смесь разделяют между этилацетатом (20 мл) и водой (20 мл), и водный слой экстрагируют этилацетатом (20 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (4×20 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (градиент: 0% - 20% этилацетат в петролейном эфире) с получением C47 в виде желтой камеди. 1H ЯМР анализ подтвердил, что продукт содержит смесь диастереомеров. Выход: 320 мг, 0,743 ммоль, 62%. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 6,12-5,94 (м, 1H), [4,51 (дд, J=11,7, 6,3 Гц) и 4,32-4,18 (м), всего 2H], [3,73 (с) и 3,71 (с), всего 3H], [3,63-3,49 (м) и 3,48-3,39 (м), всего 2H], 2,18-1,93 (м, 2H), 1,91-1,77 (м, 1H), 1,63-1,37 (м, 2H), 1,37-1,22 (м, 1H), 1,13-1,04 (м, 3H), [0,94 (д, J=6,8 Гц) и 0,91 (д, J=6,8 Гц), всего 3H], 0,87 (с, 9H).4- methylmorpholine ( 365 mg , 3 .61 mmol). The resulting mixture was cooled to 0° C. and treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N', N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 549 mg, 1.44 mmol). Then the reaction mixture is purged with nitrogen for 1 minute, it is stirred at 25°C for 12 hours. LCMS analysis at this point shows the presence of C47 : LCMS m/z 431.1 [M+H] + . The reaction mixture was partitioned between ethyl acetate (20 ml) and water (20 ml) and the aqueous layer was extracted with ethyl acetate (20 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (4×20 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (gradient: 0% - 20% ethyl acetate in petroleum ether) to give C47 as a yellow gum. 1 H NMR analysis confirmed that the product contained a mixture of diastereomers. Yield: 320 mg, 0.743 mmol, 62%. 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 6.12-5.94 (m, 1H), [4.51 (dd, J =11.7, 6.3 Hz) and 4.32-4, 18 (m), 2H total], [3.73 (s) and 3.71 (s), 3H total], [3.63-3.49 (m) and 3.48-3.39 (m) , total 2H], 2.18-1.93 (m, 2H), 1.91-1.77 (m, 1H), 1.63-1.37 (m, 2H), 1.37-1, 22 (m, 1H), 1.13-1.04 (m, 3H), [0.94 (d, J =6.8 Hz) and 0.91 (d, J =6.8 Hz), total 3H], 0.87 (s, 9H).
Стадия 5. Синтез (2S,4R)-4-трет-бутил-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоновой кислоты и (2R,4S)-4-трет-бутил-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоновой кислоты (C48).Step 5. Synthesis of ( 2S , 4R )-4- tert -butyl-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxylic acid and ( 2R , 4S )-4 - tert -Butyl-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxylic acid ( C48 ).
Раствор C47 (314 мг, 0,729 ммоль) в смеси метанола (2 мл) и тетрагидрофурана (2 мл) обрабатывают раствором моногидрата гидроксида лития (91,8 мг, 2,19 ммоль) в воде (1,4 мл) и реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 3 часов. После удаления растворителя в вакууме остаток разбавляют водой (10 мл) и подкисляют до pH приблизительно 1 добавлением 1 M хлористоводородной кислоты. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом (2×20 мл), и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (15 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме, с получением C48 в виде желтого стекла. 1H ЯМР анализ подтвердил, что продукт содержит смесь диастереомеров. Выход: 304 мг, количественный. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ [9,82 (д, J=8,7 Гц) и 9,69 (шд, J=8,8 Гц), всего 1H], [4,28 (дд, J=11,5, 6,4 Гц), 4,24-4,14 (м), и 4,05-3,96 (м), всего 2H], [3,80-3,69 (м) и 3,6-3,2 (м, предполагаемый; по существу закрыт пиком воды), всего 2H], 2,06-1,90 (м, 2H), 1,80-1,65 (м, 1H), 1,41-1,17 (м, 3H), [0,96 (д, J=6,8 Гц) и 0,93 (д, J=6,5 Гц), всего 3H], [0,89 (д, J=6,9 Гц) и 0,86-0,80 (м), всего 12H].A solution of C47 (314 mg, 0.729 mmol) in a mixture of methanol (2 ml) and tetrahydrofuran (2 ml) is treated with a solution of lithium hydroxide monohydrate (91.8 mg, 2.19 mmol) in water (1.4 ml) and the reaction mixture is stirred at 25°C for 3 hours. After removal of the solvent in vacuo, the residue was diluted with water (10 ml) and acidified to pH approximately 1 with 1 M hydrochloric acid. The resulting mixture was extracted with ethyl acetate (2 x 20 ml) and the combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium chloride (15 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C48 as a yellow glass. 1 H NMR analysis confirmed that the product contained a mixture of diastereomers. Yield: 304 mg, quantitative. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ [9.82 (d, J = 8.7 Hz) and 9.69 (bd, J = 8.8 Hz), total 1H], [4.28 (dd, J =11.5, 6.4 Hz), 4.24-4.14 (m), and 4.05-3.96 (m), total 2H], [3.80-3.69 (m) and 3.6-3.2 (m, estimated; essentially covered by water peak), total 2H], 2.06-1.90 (m, 2H), 1.80-1.65 (m, 1H), 1.41-1.17 (m, 3H), [0.96 (d, J =6.8 Hz) and 0.93 (d, J =6.5 Hz), total 3H], [ 0.89 (d, J = 6.9 Hz) and 0.86-0.80 (m), total 12H].
Стадия 6. Синтез (2S,4R)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-4-трет-бутил-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида и (2R,4S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-4-трет-бутил-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида (C49).
К 25°C смеси C16 (120 мг, 0,449 ммоль) и C48 (144 мг, 0,346 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл) добавляют 4-метилморфолин (100 мг, 0,989 ммоль), затем смесь охлаждают до 0°C и обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 151 мг, 0,397 ммоль). Реакционную смесь продувают азотом в течение 1 минуты и затем перемешивают при 25°C в течение 12 часов. ЖХМС анализ показывает присутствие C49: ЖХМС m/z 570,3 [M+H]+. Реакционную смесь затем разделяют между этилацетатом (20 мл) и водой (20 мл), и водный слой насыщают твердым хлоридом натрия и экстрагируют этилацетатом (5×20 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и подвергают хроматографии на силикагеле (градиент: 0% - 15% метанол в дихлорметане), с получением C49 в виде белого твердого вещества. Этот продукт содержит смесь диастереомеров, по анализу 1H ЯМР. Выход: 190 мг, 0,334 ммоль, 96%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики, интеграции являются приблизительными: δ [9,88 (д, J=8,6 Гц) и 9,82-9,68 (м), всего 1H], [8,12 (д, J=8,8 Гц) и 8,09-7,98 (м), всего 1H], [7,63 (с) и 7,57 (с), всего 1H], [7,30 (шс) и 7,18 (шс), всего 1H], [7,06 (шс) и 7,03 (шс), всего 1H], [4,36 (дд, J=12,0, 6,1 Гц) и 4,32-4,08 (м), всего 2H], 2,26-2,05 (м, 2H), 1,81-1,54 (м, 2H), 1,53-1,30 (м, 2H), 0,98-0,87 (м, 6H), 0,86-0,76 (м, 9H).To a 25°C mixture of C16 (120 mg, 0.449 mmol) and C48 (144 mg, 0.346 mmol) in N,N -dimethylformamide (3 ml) was added 4-methylmorpholine (100 mg, 0.989 mmol), then the mixture was cooled to 0° C and treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N,N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 151 mg, 0.397 mmol). The reaction mixture was purged with nitrogen for 1 minute and then stirred at 25° C. for 12 hours. LCMS analysis shows the presence of C49 : LCMS m/z 570.3 [M+H] + . The reaction mixture was then partitioned between ethyl acetate (20 ml) and water (20 ml) and the aqueous layer was saturated with solid sodium chloride and extracted with ethyl acetate (5×20 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and chromatographed on silica gel (gradient: 0% - 15% methanol in dichloromethane) to give C49 as a white solid. This product contains a mixture of diastereomers as determined by 1 H NMR. Yield: 190 mg, 0.334 mmol, 96%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks, integrations are approximate: δ [9.88 (d, J =8.6 Hz) and 9.82-9.68 (m), total 1H] , [8.12 (d, J = 8.8 Hz) and 8.09-7.98 (m), total 1H], [7.63 (s) and 7.57 (s), total 1H], [7.30 (shs) and 7.18 (shs), total 1H], [7.06 (shs) and 7.03 (shs), total 1H], [4.36 (dd, J = 12.0 , 6.1 Hz) and 4.32-4.08 (m), total 2H], 2.26-2.05 (m, 2H), 1.81-1.54 (m, 2H), 1, 53-1.30 (m, 2H), 0.98-0.87 (m, 6H), 0.86-0.76 (m, 9H).
Стадия 7. Синтез (2S,4R)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида и (2R,4S)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамида [75 (DIAST-1) и 76 (DIAST-2)].Step 7. Synthesis of ( 2S , 4R )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1 -{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide and ( 2R , 4S )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[ (3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide [ 75 (DIAST-1) and 76 (DIAST-2 ) ].
Смесь C49 (190,0 мг, 0,334 ммоль) и метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамата, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 238 мг, 1,00 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивают при 25°C в течение 2 дней, затем реакционную смесь разбавляют водой (20 мл) и экстрагируют дихлорметаном (2×20 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (градиент: 0% - 8% метанол в дихлорметане) дает белое твердое вещество, которое согласно ЖХМС анализу содержит приблизительно 3:1 смесь продуктов: ЖХМС m/z 552,2 [M+H]+ и ЖХМС m/z 552,2 [M+H]+. Эти диастереомеры разделяют сверхкритической жидкостной хроматографией [Колонка: Chiral Technologies Chiralpak IG, 30×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза: 3:1 диоксид углерода/(этанол, содержащий 0,1% гидроксид аммония); скорость потока: 70 мл/минуту]. Первый элюированный диастереомер, выделенный в виде белого твердого вещества, обозначают как 75, и второй элюированный диастереомер, также белое твердое вещество, обозначают как 76 [(2S,4R)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамид и (2R,4S)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамид].A mixture of C49 (190.0 mg, 0.334 mmol) and methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 238 mg, 1.00 mmol) in dichloromethane (10 mL) was stirred at 25°C for 2 days, then the reaction mixture was diluted with water (20 ml) and extracted with dichloromethane (2×20 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (10 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (gradient: 0% - 8% methanol in dichloromethane) gives a white solid, which according to LCMS analysis contains approximately 3:1 mixture of products: LCMS m/z 552.2 [M+H] + and LCMS m/z 552.2 [M+H] + . These diastereomers are separated by supercritical liquid chromatography [Column: Chiral Technologies Chiralpak IG, 30×250 mm, 10 µm; Mobile phase: 3:1 carbon dioxide/(ethanol containing 0.1% ammonium hydroxide); flow rate: 70 ml/minute]. The first eluted diastereomer, isolated as a white solid, is designated 75 and the second eluted diastereomer, also a white solid, is designated 76 [( 2S , 4R )-4- tert -butyl- N -{( 1S ) -1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide and ( 2R , 4 S )-4- tert -butyl- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N -[(trifluoromethyl) sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide].
75 - Выход: 26,2 мг, 47,5 мкмоль, 14%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,87 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,87 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 4,99-4,91 (м, 1H), 4,24 (дд, J=12,3, 6,0 Гц, 1H), 4,18 (дд, J=8,3, 8,3 Гц, 1H), 3,88-3,78 (м, 1H), 3,19-3,00 (м, 2H), 2,46-2,35 (м, 1H), 2,17-2,02 (м, 2H), 1,99-1,85 (м, 2H), 1,79-1,62 (м, 3H), 1,50-1,36 (м, 2H), 1,26-1,12 (м, 2H), 0,97-0,87 (м, 6H), 0,84 (с, 9H). Время удержания: 1,30 минут (Аналитические условия. Колонка: Chiral Technologies Chiralpak IG-3, 4,6×50 мм, 3 мкм; Подвижная фаза A: диоксид углерода; Подвижная фаза B: этанол содержащий 0,05% диэтиламин; градиент: 5% - 40% B в течение 2 минут, затем 40% B в течение 1,2 минут; Скорость потока: 4 мл/минуту; Обратное давление: 1500 ф./кв.д.). 75- Yield: 26.2 mg, 47.5 µmol, 14%.oneH NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.87 (d,J= 8.8 Hz, 1H), 8.87 (d,J= 8.4 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 4.99-4.91 (m, 1H), 4.24 (dd,J=12.3, 6.0 Hz, 1H), 4.18 (dd,J= 8.3, 8.3 Hz, 1H), 3.88-3.78 (m, 1H), 3.19-3.00 (m, 2H), 2.46-2.35 (m, 1H ), 2.17-2.02 (m, 2H), 1.99-1.85 (m, 2H), 1.79-1.62 (m, 3H), 1.50-1.36 (m , 2H), 1.26-1.12 (m, 2H), 0.97-0.87 (m, 6H), 0.84 (s, 9H). Retention time: 1.30 minutes (Analytical conditions. Column: Chiral Technologies Chiralpak IG-3, 4.6×50 mm, 3 µm; Mobile phase A: carbon dioxide; Mobile phase B: ethanol containing 0.05% diethylamine; gradient : 5% - 40% B for 2 minutes, then 40% B for 1.2 minutes; Flow rate: 4 ml/minute; Back pressure: 1500 psi).
76 - Выход: 8,8 мг, 16 мкмоль, 5%. ЖХМС m/z 552,3 [M+H]+. By 1H ЯМР анализ, этот образец 76 содержит примеси. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики, интеграции являются приблизительными: δ 9,76 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,59 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,72 (с, 1H), 5,02-4,90 (м, 1H), 0,94-0,86 (м, 6H), 0,82 (с, 9H). Время удержания: 1,61 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые используют для 75). 76- Yield: 8.8 mg, 16 µmol, 5%. HCMSm/z 552.3 [M+H]+. ByoneH NMR analysis, this sample76 contains impurities.oneH NMR (400 MHz, DMSO-d 6), characteristic peaks, integrations are approximate: δ 9.76 (d,J= 8.8 Hz, 1H), 8.59 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 5.02-4.90 (m, 1H), 0.94-0.86 (m, 6H), 0.82 (s, 9H). Retention time: 1.61 minutes (Assay conditions are identical to those used for 7five).
Пример 77Example 77
3-Метил-N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил] этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид (77)3-Methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl] ethyl}- 4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 77 )
Стадия 1. Синтез (4R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-(трифторметил)-L-пролил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C50).
К -30°C смеси (4R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-(трифторметил)-L-пролина (429 мг, 1,51 ммоль) и C16, соли HCl (346 мг, 1,67 ммоль) в N, N-диметилформамиде (7,8 мл) добавляют N, N-диизопропилэтиламин (0,791 мл, 4,54 ммоль), затем гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 633 мг, 1,66 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 0°C в течение 1 часа, затем ее разбавляют водным раствором бикарбоната натрия (30 мл) и экстрагируют смесью 2-бутанола и дихлорметана (9:1, 3.K -30°C mixture of ( 4R )-1-( tert -butoxycarbonyl)-4-(trifluoromethyl)-L-proline (429 mg, 1.51 mmol) and C16, HCl salts (346 mg, 1.67 mmol ) in N, N -dimethylformamide (7.8 ml) add N, N -diisopropylethylamine (0.791 ml, 4.54 mmol), then hexafluorophosphate O - (7-azabenzotriazol-1-yl) - N, N, N ', N' -tetramethyluronium (GATU; 633 mg, 1.66 mmol). The reaction mixture is heated to 0°C for 1 hour, then it is diluted with aqueous sodium bicarbonate solution (30 ml) and extracted with a mixture of 2-butanol and dichloromethane (9:1, 3.
мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме и очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 100% метанол в дихлорметане), с получением C50 в виде беловатой пены. Согласно 1H ЯМР анализу, этот продукт существует в виде спеси ротамеров, и содержит примеси, полученные из применяемых реагентов; часть этого образца переносят на следующую стадию. Выход: 613 мг, 1,40 ммоль, 93%. ЖХМС m/z 459,3 [M+Na+]. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики продукта только: δ 8,33-8,18 (м, 1H), [7,65 (шс) и 7,59 (шс), всего 1H], [7,39 (шс) и 7,27 ш (с), всего 1H], 7,05 (шс, 1H), 4,38-4,28 (м, 1H), 4,28-4,17 (м, 1H), 3,46-3,36 (м, 1H), 2,02-1,89 (м, 1H), 1,80-1,45 (м, 2H), [1,39 (с) и 1,32 (с), всего 9H].ml). The combined organic layers were concentrated in vacuo and purified by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 100% methanol in dichloromethane) to give C50 as an off-white foam. According to 1 H NMR analysis, this product exists as a mixture of rotamers, and contains impurities derived from the reagents used; part of this sample is transferred to the next stage. Yield: 613 mg, 1.40 mmol, 93%. LCMS m/z 459.3 [M+Na + ]. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), product characteristic peaks only: δ 8.33-8.18 (m, 1H), [7.65 (br) and 7.59 (br) 1H total] , [7.39 (brs) and 7.27 br (s), total 1H], 7.05 (brs, 1H), 4.38-4.28 (m, 1H), 4.28-4.17 (m, 1H), 3.46-3.36 (m, 1H), 2.02-1.89 (m, 1H), 1.80-1.45 (m, 2H), [1.39 ( c) and 1.32 (c), total 9H].
Стадия 2. Синтез N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-4-(трифторметил)-L-пролил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C51).
Смесь C50 (242 мг, 0,554 ммоль) и раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 2 мл, 8 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут, затем реакционную смесь концентрируют в вакууме для удаления растворителя и остаточного гидрохлорида. Полученный продукт со снятой защитой объединяют с N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валином (128 мг, 0,553 ммоль) и гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ: 232 мг, 0,610 ммоль) в N, N-диметилформамиде (2 мл), и затем охлаждают до -30°C. N, N-диизопропилэтиламин (0,290 мл, 1,66 ммоль) добавляют, и реакционную смесь нагревают до 0°C в течение 1 часа. После добавления водного раствора бикарбоната натрия, полученную смесь экстрагируют три раза этилацетатом; объединенные органические слои концентрируют в вакууме и очищают хроматографией на силикагеле (градиент: 0% - 30% метанол в дихлорметане), с получением C51 в виде твердого вещества. Выход: 230 мг, 0,418 ммоль, 75%. ЖХМС m/z 550,3 [M+H]+.A mixture of C50 (242 mg, 0.554 mmol) and a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 2 ml, 8 mmol) was stirred at room temperature for 5 minutes, then the reaction mixture was concentrated in vacuo to remove the solvent and residual hydrochloride. The resulting deprotected product is combined with N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valine (128 mg, 0.553 mmol) and hexafluorophosphate O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU: 232 mg, 0.610 mmol) in N,N -dimethylformamide (2 ml) and then cooled to -30°C. N,N -diisopropylethylamine (0.290 ml, 1.66 mmol) is added and the reaction mixture is heated to 0° C. for 1 hour. After an aqueous sodium bicarbonate solution was added, the resulting mixture was extracted three times with ethyl acetate; the combined organic layers were concentrated in vacuo and purified by silica gel chromatography (gradient: 0% - 30% methanol in dichloromethane) to give C51 as a solid. Yield: 230 mg, 0.418 mmol, 75%. LCMS m/z 550.3 [M+H] + .
Стадия 3. Синтез 3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамида (77).Step 3. Synthesis of 3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl ]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 77 ).
Смесь C51 (230 мг, 0,418 ммоль) и раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 2 мл, 8 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут, затем реакционную смесь концентрируют в вакууме для удаления растворителя и остаточного гидрохлорида. Полученный продукт со снятой защитой объединяют с этилтрифторацетатом (595 мг, 4,19 ммоль) и N, N-диизопропилэтиламином (0,219 мл, 1,26 ммоль) в метаноле (1,0 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут, снова добавляют этилтрифторацетат (60 мг, 0,422 ммоль) и перемешивание продолжают в течение 30 минут. Водный раствор бикарбоната натрия затем добавляют, и полученную смесь экстрагируют три раза этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, концентрируют в вакууме и растворяют в дихлорметане (3 мл). Туда добавляют этил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 299 мг, 1,25 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов, затем ее обрабатывают дополнительным метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбаматом, внутренней солью (реагентом Бурджеса; 100 мг, 0,420 ммоль) и перемешивают в течение еще 30 минут. Хатем добавляют разбавленный водный раствор карбоната натрия, и смесь экстрагируют дважды этилацетатом; объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Очистка сверхкритической жидкостной хроматографией (Колонка: Princeton Dinitrophenyl, 10×250 мм, 5 мкм; Подвижная фаза: 9:1 диоксид углерода/метанол; Обратное давление: 120 бар; Скорость потока: 80 мл/минуту) дает продукт, который затем суспендируют в гептане (2,0 мл) при 50°C в течение 2 часов, охлаждают до комнатной температуры и собирают фильтрацией, с получением 3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамида (77) в виде твердого вещества. Выход: 64 мг, 0,121 ммоль, 29%. ЖХМС m/z 528,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6 ) δ 9,46 (д, J=8,4 Гц, 1H), 9,05 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,67 (с, 1H), 4,96 (ддд, J=11,0, 8,5, 5,0 Гц, 1H), 4,56 (д, J=8,5 Гц, 1H), 4,37 (дд, J=7,5, 7,5 Гц, 1H), 3,98 (дд, компонент системы АВХ, J=11,2, 7,5 Гц, 1H), 3,92 (дд, компонент системы АВХ, J=11,3, 4,8 Гц, 1H), 3,46-3,35 (м, 1H), 3,19-3,10 (м, 1H), 3,09-3,00 (м, 1H), 2,5-2,38 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,38-2,28 (м, 1H), 2,21-2,04 (м, 3H), 1,78-1,65 (м, 2H), 0,99 (с, 9H).A mixture of C51 (230 mg, 0.418 mmol) and a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 2 ml, 8 mmol) was stirred at room temperature for 5 minutes, then the reaction mixture was concentrated in vacuo to remove the solvent and residual hydrochloride. The resulting deprotected product is combined with ethyl trifluoroacetate (595 mg, 4.19 mmol) and N,N -diisopropylethylamine (0.219 ml, 1.26 mmol) in methanol (1.0 ml). The reaction mixture is then stirred at room temperature for 30 minutes, ethyl trifluoroacetate (60 mg, 0.422 mmol) is added again and stirring is continued for 30 minutes. An aqueous solution of sodium bicarbonate is then added and the resulting mixture is extracted three times with ethyl acetate. The combined organic layers are dried over magnesium sulfate, filtered, concentrated in vacuo and dissolved in dichloromethane (3 ml). Ethyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 299 mg, 1.25 mmol) is added thereto and the reaction mixture is stirred at room temperature for 2 hours, then it is treated with additional methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 100 mg, 0.420 mmol) and stirred for an additional 30 minutes. Hatem dilute aqueous sodium carbonate solution is added and the mixture is extracted twice with ethyl acetate; the combined organic layers are dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Purification by supercritical fluid chromatography (Column: Princeton Dinitrophenyl, 10 x 250 mm, 5 µm; Mobile phase: 9:1 carbon dioxide/methanol; Back pressure: 120 bar; Flow rate: 80 ml/minute) gives a product which is then suspended in heptane (2.0 ml) at 50° C. for 2 hours, cooled to room temperature and collected by filtration to give 3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L- valyl- (4R) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 77 ) as a solid. Yield: 64 mg, 0.121 mmol, 29%. LCMS m/z 528.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.46 (d, J =8.4 Hz, 1H), 9.05 (d, J =8.6 Hz, 1H), 7.67 (s , 1H), 4.96 (ddd, J = 11.0, 8.5, 5.0 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 7.5, 7.5 Hz, 1H), 3.98 (dd, ABX system component, J = 11.2, 7.5 Hz, 1H), 3.92 (dd, ABX system component, J = 11.3, 4.8 Hz, 1H), 3.46-3.35(m, 1H), 3.19-3.10(m, 1H), 3.09-3.00(m, 1H) , 2.5-2.38 (m, 1H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.38-2.28 (m, 1H), 2.21-2.04 (m, 3H), 1.78 -1.65 (m, 2H), 0.99 (s, 9H).
Пример 78Example 78
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(метилкарбамоил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (78)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (methylcarbamoyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 78 )
Стадия 1. Синтез метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-(3-метил-L-валил)-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата, гидрохлорида (C52).
К 0°C раствору C31 (1,00 г, 2,61 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляют, по каплям, раствор гидрохлорида в этилацетате (4 M; 20 мл, 80 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение ночи, ее концентрируют в вакууме с получением C52 в виде белой камеди. Выход: 700 мг, 2,20 ммоль, 84%. ЖХМС m/z 283,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,22 (шс, 3H), 4,25 (с, 1H), 3,87-3,77 (м, 2H), 3,72 (д, половина АВ квартета, J=10,8 Гц, 1H), 3,67 (с, 3H), 1,59 (дд, компонент системы АВХ, J=7,7, 5,3 Гц, 1H), 1,49 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,03 (с, 9H), 1,02 (с, 3H), 0,96 (с, 3H).To a 0°C solution of C31 (1.00 g, 2.61 mmol) in dichloromethane (20 ml) was added dropwise a solution of hydrochloride in ethyl acetate (4 M; 20 ml, 80 mmol). The reaction mixture is then stirred at 25° C. overnight, concentrated in vacuo to give C52 as a white gum. Yield: 700 mg, 2.20 mmol, 84%. LCMS m/z 283.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.22 (br s, 3H), 4.25 (s, 1H), 3.87-3.77 (m, 2H), 3.72 (d, half AB quartet, J = 10.8 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 1.59 (dd, component of the ABX system, J = 7.7, 5.3 Hz, 1H), 1.49 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.03 (s, 9H), 1.02 (s, 3H), 0.96 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(метилкарбамоил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C53).
К 0°C раствору C52 (320 мг, 1,00 ммоль) в дихлорметане (6 мл) медленно добавляют триэтиламин (0,769 мл, 5,52 ммоль) и метилкарбамилхлорид (188 мг, 2,01 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 20°C и перемешивают в течение 18 часов, затем ее обрабатывают по каплям насыщенным водным раствором карбоната натрия (5 мл) и экстрагируют дихлорметаном (2×5 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (2×20 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) с получением C53 в виде светло-желтой камеди. Выход: 190 мг, 0,560 ммоль, 56%. ЖХМС m/z 339,9 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 6,03 (д, J=9,4 Гц, 1H), 5,89 (шкв, J=5 Гц, 1H), 4,20-4,14 (м, 2H), 3,91 (д, половина АВ квартета, J=10,3 Гц, 1H), 3,79 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,3 Гц, 1H), 3,65 (с, 3H), 3,17 (д, J=5,3 Гц, 3H), 1,55-1,49 (м, 1H), 1,40 (д, половина АВ квартета, J=7,4 Гц, 1H), 1,00 (с, 3H), 0,92 (с, 9H), 0,83 (с, 3H).To a 0° C. solution of C52 (320 mg, 1.00 mmol) in dichloromethane (6 ml) was slowly added triethylamine (0.769 ml, 5.52 mmol) and methylcarbamyl chloride (188 mg, 2.01 mmol). The reaction mixture is heated to 20°C and stirred for 18 hours, then it is treated dropwise with saturated aqueous sodium carbonate solution (5 ml) and extracted with dichloromethane (2×5 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (2×20 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) to give C53 as a light yellow gum. Yield: 190 mg, 0.560 mmol, 56%. LCMS m/z 339.9 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 6.03 (d, J =9.4 Hz, 1H), 5.89 (shw, J =5 Hz, 1H), 4.20-4.14 (m, 2H), 3.91 (d, half AB quartet, J = 10.3 Hz, 1H), 3.79 (dd, component of the ABX system, J = 10.3, 5.3 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.17 (d, J = 5.3 Hz, 3H), 1.55-1.49 (m, 1H), 1.40 (d, half AB quartet, J = 7.4 Hz, 1H), 1.00 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.83 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(метилкарбамоил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C54).Step 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (methylcarbamoyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane -2-carboxylic acid ( C54 ).
К 0°C раствору C53 (190 мг, 0,560 ммоль) в смеси тетрагидрофурана (2 мл), воды (4 мл) и метанола (1 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (82,0 мг, 1,95 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 2 часов, ее разбавляют этилацетатом (10 мл); водный слой затем охлаждают до 0°C - 5°C и подкисляют до pH 2-3 добавлением 1 M хлористоводородной кислоты. Водную смесь экстрагируют этилацетатом (3×15 мл), и эти объединенные слои этилацетата сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C54 в виде белого твердого вещества. Выход: 120 мг, 0,369 ммоль, 66%. ЖХМС m/z 348,3 [M+Na+]. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 6,04 (д, J=9,6 Гц, 1H), 5,89 (д, J=4,7 Гц, 1H), 4,17 (д, J=9,6 Гц, 1H), 4,09 (с, 1H), 3,87 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,77 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,4 Гц, 1H), 1,49 (дд, компонент системы АВХ, J=7,6, 5,1 Гц, 1H), 1,38 (д, половина АВ квартета, J=7,5 Гц, 1H), 1,00 (с, 3H), 0,92 (с, 9H), 0,82 (с, 3H).To a 0°C solution of C53 (190 mg, 0.560 mmol) in a mixture of tetrahydrofuran (2 ml), water (4 ml) and methanol (1 ml) was added lithium hydroxide monohydrate (82.0 mg, 1.95 mmol). Then the reaction mixture is stirred at 20°C for 2 hours, it is diluted with ethyl acetate (10 ml); the aqueous layer is then cooled to 0°C - 5°C and acidified to pH 2-3 by adding 1 M hydrochloric acid. The aqueous mixture was extracted with ethyl acetate (3 x 15 mL) and the combined ethyl acetate layers were dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C54 as a white solid. Yield: 120 mg, 0.369 mmol, 66%. LCMS m/z 348.3 [M+Na + ]. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 6.04 (d, J =9.6 Hz, 1H), 5.89 (d, J =4.7 Hz, 1H), 4 .17 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.87 (d, half AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 3.77 (dd, ABX system component, J = 10.3, 5.4 Hz, 1H), 1.49 (dd, ABX system component, J = 7.6, 5.1 Hz, 1H), 1.38 (d, half AB quartet, J = 7.5 Hz, 1H), 1.00 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.82 (s, 3H).
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(метилкарбамоил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (C55).Step 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (methylcarbamoyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( C55 ).
К 0°C - 5°C раствору C54 (120 мг, 0,369 ммоль) и C16, соли HCl (75%, 107 мг, 0,387 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3,0 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 154 мг, 0,405 ммоль) и 4-метилморфолин (0,144 мл, 1,31 ммоль). Затем реакционную смесь нагревают от 0°C до 20°C в течение 1,5 часов, ее перемешивают при 20°C в течение 18 часов, затем ее разбавляют водой и обрабатывают твердым сульфатом натрия до насыщения. Полученную смесь экстрагируют смесью 2-пропанола и хлороформа (1:4, 3×20 мл), и объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (градиент: 0% - 20% метанол в дихлорметане) дает C55 (240 мг) в виде бесцветного стекла. Часть этого продукта применяют на следующей стадии. ЖХМС m/z 479,2 [M+H]+. Согласно 1H ЯМР анализу, этот продукт загрязнен побочным продуктом, полученным из реагента ГАТУ. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики продукта только: δ 8,21 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,53 (шс, 1H), 7,29 (шс, 1H), 7,03 (шс, 1H), 6,02 (д, J=9,6 Гц, 1H), 5,86 (кв, J=4,6 Гц, 1H), 4,31-4,23 (м, 1H), 4,21 (с, 1H), 4,15 (д, J=9,6 Гц, 1H), 2,18-2,08 (м, 1H), 1,98-1,88 (м, 1H), 1,68-1,55 (м, 1H), 1,54-1,42 (м, 2H), 1,34 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,01 (с, 3H), 0,90 (с, 9H), 0,84 (с, 3H). O- ( 7 _ -azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU; 154 mg, 0.405 mmol) and 4-methylmorpholine (0.144 ml, 1.31 mmol). Then the reaction mixture is heated from 0°C to 20°C for 1.5 hours, it is stirred at 20°C for 18 hours, then it is diluted with water and treated with solid sodium sulfate until saturation. The resulting mixture was extracted with a mixture of 2-propanol and chloroform (1:4, 3×20 ml) and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (gradient: 0% - 20% methanol in dichloromethane) gives C55 (240 mg) as a colorless glass. Part of this product is used in the next step. LCMS m/z 479.2 [M+H] + . According to 1 H NMR analysis, this product is contaminated with a by-product obtained from the GATU reagent. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks of the product only: δ 8.21 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.53 (shs, 1H), 7.29 (brs, 1H), 7.03 (br, 1H), 6.02 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 5.86 (q, J = 4.6 Hz, 1H), 4.31-4, 23 (m, 1H), 4.21 (s, 1H), 4.15 (d, J =9.6 Hz, 1H), 2.18-2.08 (m, 1H), 1.98-1 .88 (m, 1H), 1.68-1.55 (m, 1H), 1.54-1.42 (m, 2H), 1.34 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz , 1H), 1.01 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.84 (s, 3H).
Стадия 5. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(метилкарбамоил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (78).Stage 5. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl-3-[3-methyl- N- (methylcarbamoyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 78 ).
В раствор C55 (с предыдущей стадии; 190 мг, ≤0,292 ммоль) в ацетонитриле (12 мл) добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 303 мг, 1,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 22 часов, затем ее объединяют с аналогичной реакцией, проводимой с применением C55 (с предыдущей стадии; 50 мг, ≤77 мкмоль). Полученный раствор концентрируют в вакууме, разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме; очистка ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Boston Prime C18, 30×150 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: 0,225% муравьиной кислоты в воде; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 23% - 46% B; Скорость потока: 25 мл/минуту) дает (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(метилкарбамоил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (78) в виде белого твердого вещества. Объединенный выход: 25 мг, 54 мкмоль, 15% за 2 стадии. ЖХМС m/z 461,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 8,96 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,65 (с, 1H), 6,02 (д, J=9,5 Гц, 1H), 5,85 (кв, J=4,5 Гц, 1H), 4,95 (ддд, J=10,8, 8,4, 5,1 Гц, 1H), 4,13 (д, J=9,6 Гц, 1H), 4,11 (с, 1H), 3,88-3,79 (м, 2H), 3,18-3,09 (м, 1H), 3,07-2,98 (м, 1H), 2,48-2,37 (м, 1H), 2,20-2,02 (м, 2H), 1,77-1,62 (м, 2H), 1,56-1,50 (м, 1H), 1,27 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,02 (с, 3H), 0,89 (с, 9H), 0,85 (с, 3H). 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d), характеристические пики: δ 8,12 (д, J=7,6 Гц, 1H), 5,78 (шс, 1H), 5,04 (шд, J=9,4 Гц, 1H), 4,99-4,90 (м, 1H), 4,57-4,49 (м, 1H), 4,39 (д, J=9,7 Гц, 1H), 4,25 (с, 1H), 4,01 (д, половина АВ квартета, J=10,2 Гц, 1H), 3,93 (шдд, компонент системы АВХ, J=10,6, 4,9 Гц, 1H), 3,43-3,25 (м, 2H), 2,71 (д, J=4,8 Гц, 3H), 2,61-2,50 (м, 1H), 2,45-2,30 (м, 2H), 2,03-1,93 (м, 1H), 1,91-1,78 (м, 1H), 1,05 (с, 3H), 0,98 (с, 9H), 0,91 (с, 3H).To a solution of C55 (from the previous step; 190 mg, ≤0.292 mmol) in acetonitrile (12 mL) was added methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 303 mg, 1.26 mmol). The reaction mixture is stirred at 20°C for 22 hours, then it is combined with a similar reaction carried out using C55 (from the previous stage; 50 mg, ≤77 μmol). The resulting solution was concentrated in vacuo , diluted with water (10 ml) and extracted with ethyl acetate (3×10 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo ; reverse phase HPLC purification (Column: Boston Prime C18, 30×150 mm, 5 µm; Mobile phase A: 0.225% formic acid in water; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 23% - 46% B; Flow rate: 25 ml/minute) gives (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6.6 -dimethyl-3-[3-methyl- N- (methylcarbamoyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 78 ) as a white solid. Combined Yield: 25 mg, 54 µmol, 15% over 2 steps. LCMS m/z 461.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 8.96 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.02 (d, J = 9.5Hz, 1H), 5.85(kv, J =4.5Hz, 1H), 4.95(ddd, J =10.8, 8.4, 5.1Hz, 1H), 4, 13 (d, J =9.6 Hz, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.88-3.79 (m, 2H), 3.18-3.09 (m, 1H), 3 .07-2.98 (m, 1H), 2.48-2.37 (m, 1H), 2.20-2.02 (m, 2H), 1.77-1.62 (m, 2H) , 1.56-1.50 (m, 1H), 1.27 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.02 (s, 3H), 0.89 (s, 9H ), 0.85 (s, 3H). 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ), characteristic peaks: δ 8.12 (d, J =7.6 Hz, 1H), 5.78 (brisk, 1H), 5.04 (brd, J =9 .4 Hz, 1H), 4.99-4.90 (m, 1H), 4.57-4.49 (m, 1H), 4.39 (d, J =9.7 Hz, 1H), 4 .25 (s, 1H), 4.01 (d, half AB quartet, J = 10.2 Hz, 1H), 3.93 (bdd, ABX system component, J = 10.6, 4.9 Hz, 1H ), 3.43-3.25 (m, 2H), 2.71 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.61-2.50 (m, 1H), 2.45-2, 30 (m, 2H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.91-1.78 (m, 1H), 1.05 (s, 3H), 0.98 (s, 9H) , 0.91 (s, 3H).
Пример 79Example 79
Метил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил}карбамат (79)Methyl {(2 S )-1-[(1 R ,2 S ,5 S )-2-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl] ethyl}carbamoyl)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexan-3-yl]-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl}carbamate ( 79 )
Стадия 1. Синтез метил (1R,2S,5S)-3-[N-(метоксикарбонил)-3-метил-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C56).
К 0°C раствору C52 (370 мг, 1,16 ммоль) в дихлорметане (6 мл) медленно добавляют триэтиламин (0,647 мл, 4,64 ммоль) и метил хлорформиат (335 мг, 3,55 ммоль). затем реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 16 часов, ее разбавляют по каплям насыщенным водным раствором карбоната натрия (5 мл) и экстрагируют дихлорметаном (2×20 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (2×20 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме; хроматография на силикагеле (градиент: 0% - 100% этилацетат в петролейном эфире) дает C56 в виде белой камеди. Выход: 115 мг, 0,338 ммоль, 29%. ЖХМС m/z 341,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 5,29 (шд, J=9,6 Гц, 1H), 4,46 (с, 1H), 4,23 (д, J=9,9 Гц, 1H), 3,94-3,86 (м, 2H), 3,74 (с, 3H), 3,63 (шс, 3H), 1,49-1,41 (м, 2H), 1,04 (с, 3H), 1,03 (с, 9H), 0,91 (с, 3H).To a 0° C. solution of C52 (370 mg, 1.16 mmol) in dichloromethane (6 ml) was slowly added triethylamine (0.647 ml, 4.64 mmol) and methyl chloroformate (335 mg, 3.55 mmol). then the reaction mixture was stirred at 20°C for 16 hours, it was diluted dropwise with saturated aqueous sodium carbonate solution (5 ml) and extracted with dichloromethane (2×20 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (2×20 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo ; chromatography on silica gel (gradient: 0% - 100% ethyl acetate in petroleum ether) gives C56 as a white gum. Yield: 115 mg, 0.338 mmol, 29%. LCMS m/z 341.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 5.29 (brd, J =9.6 Hz, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.23 (d, J =9.9 Hz, 1H), 3.94-3.86(m, 2H), 3.74(s, 3H), 3.63(brs, 3H), 1.49-1.41(m, 2H), 1.04 (s, 3H), 1.03 (s, 9H), 0.91 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-3-[N-(метоксикарбонил)-3-метил-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C57).
В раствор C56 (115 мг, 0,338 ммоль) в смеси метанола (2,0 мл), тетрагидрофурана (2,0 мл), и воды (2 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (28,4 мг, 0,677 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (22°C - 25°C) в течение 16 часов, затем концентрируют в вакууме. Водный остаток разделяют между водой (5 мл) и этилацетатом (20 мл), затем органический слой отбрасывают, и водный слой доводят до pH 1-2 добавлением концентрированной хлористоводородной кислоты. Полученную смесь экстрагируют три раза этилацетатом; объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C57 в виде бесцветной камеди. Выход: 100 мг, 0,306 ммоль, 91%. ЖХМС m/z 327,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 5,42 (д, J=9,9 Гц, 1H), 4,46 (с, 1H), 4,26 (д, J=10,0 Гц, 1H), 3,96 (д, половина АВ квартета, J=10,5 Гц, 1H), 3,87 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,4 Гц, 1H), 3,64 (с, 3H), 1,68 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,50 (дд, компонент системы АВХ, J=7,6, 5,3 Гц, 1H), 1,06 (с, 3H), 1,01 (с, 9H), 0,91 (с, 3H).To a solution of C56 (115 mg, 0.338 mmol) in a mixture of methanol (2.0 ml), tetrahydrofuran (2.0 ml), and water (2 ml) was added lithium hydroxide monohydrate (28.4 mg, 0.677 mmol). The reaction mixture is stirred at room temperature (22°C - 25°C) for 16 hours, then concentrated in vacuo . The aqueous residue was partitioned between water (5 ml) and ethyl acetate (20 ml), then the organic layer was discarded and the aqueous layer was adjusted to pH 1-2 with concentrated hydrochloric acid. The resulting mixture is extracted three times with ethyl acetate; the combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C57 as a colorless gum. Yield: 100 mg, 0.306 mmol, 91%. LCMS m/z 327.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 5.42 (d, J =9.9 Hz, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.26 (d, J =10.0 Hz, 1H), 3.96 (d, half of the AB quartet, J = 10.5 Hz, 1H), 3.87 (dd, component of the ABX system, J = 10.3, 5.4 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 1.68 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.50 (dd, component of the ABX system, J = 7.6, 5.3 Hz, 1H), 1.06 (s, 3H), 1.01 (s, 9H), 0.91 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез метил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил}карбамата (C58).Stage 3. Synthesis of methyl {(2 S )-1-[(1 R ,2 S ,5 S )-2-({(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )- 2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2-yl}carbamoyl)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexan-3-yl]-3,3-dimethyl-1-oxobutan- 2-yl}carbamate ( C58 ).
К 0°C раствору C57 (100 мг, 0,306 ммоль) и C16, соли HCl (75%, 84,8 мг, 0,306 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 140 мг, 0,368 ммоль), затем по каплям добавляют раствор 4-метилморфолина (93 мг, 0,919 ммоль) в N, N-диметилформамиде (1 мл). Реакционную смесь затем нагревают до комнатной температуры (25°C) и перемешивают в течение 16 часов, затем добавляют воду (10 мл). После добавления сульфата натрия до насыщения, полученную смесь экстрагируют смесью хлороформа и 2-пропанола (4:1, 3×10 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и очищают с применением хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 30% метанол в дихлорметане), с получением C58 в виде белого твердого вещества. Выход: 93 мг, 0,19 ммоль, 62%. ЖХМС m/z 480,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 8,30 (шс, 1H), 7,18 (шс, 1H), 5,98 (шс, 1H), 5,64 (шс, 1H), 5,58-5,42 (м, 1H), 4,49-4,37 (м, 1H), 4,29 (д, J=10,0 Гц, 1H), 4,23 (с, 1H), 4,11 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,5 Гц, 1H), 3,93 (д, половина АВ квартета, J=10,3 Гц, 1H), 3,64 (с, 3H), 3,43-3,29 (м, 2H), 2,55-2,33 (м, 2H), 2,15-1,81 (м, 3H), 1,54-1,47 (м, 1H), 1,45 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 1,01 (с, 9H), 0,88 (с, 3H).To a 0°C solution of C57 (100 mg, 0.306 mmol) and C16, HCl salts (75%, 84.8 mg, 0.306 mmol) in N, N -dimethylformamide (3 ml) was added hexafluorophosphate O- (7-azabenzotriazole-1 -yl)- N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU; 140 mg, 0.368 mmol), then a solution of 4-methylmorpholine (93 mg, 0.919 mmol) in N, N -dimethylformamide (1 ml) is added dropwise . The reaction mixture was then warmed to room temperature (25°C) and stirred for 16 hours, then water (10 ml) was added. After adding sodium sulfate until saturation, the resulting mixture was extracted with a mixture of chloroform and 2-propanol (4:1, 3×10 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and purified using silica gel chromatography (Gradient: 0% - 30% methanol in dichloromethane) to give C58 as a white solid. Yield: 93 mg, 0.19 mmol, 62%. LCMS m/z 480.0 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 8.30 (brisk, 1H), 7.18 (brisk, 1H), 5.98 (brisk, 1H), 5.64 (brisk, 1H), 5, 58-5.42 (m, 1H), 4.49-4.37 (m, 1H), 4.29 (d, J =10.0 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 4 .11 (dd, component of the ABX system, J = 10.3, 5.5 Hz, 1H), 3.93 (d, half of the AB quartet, J = 10.3 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H ), 3.43-3.29 (m, 2H), 2.55-2.33 (m, 2H), 2.15-1.81 (m, 3H), 1.54-1.47 (m , 1H), 1.45 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H), 1.01 (s, 9H), 0.88 (s, 3H) .
Стадия 4. Синтез метил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил}карбамата (79).Step 4. Synthesis of methyl {(2 S )-1-[(1 R ,2 S ,5 S )-2-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine- 3-yl]ethyl}carbamoyl)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexan-3-yl]-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl}carbamate ( 79 ) .
К суспензии C58 (93 мг, 0,19 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 139 мг, 0,583 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при 25°C в течение 2 часов. Ее затем разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3×10 мл); объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (2×10 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (градиент: 0% - 100% этилацетат в петролейном эфире, затем градиент 0% - 20% метанол в дихлорметане) дает метил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил}карбамат (79) в виде белого твердого вещества. Выход: 7,0 мг, 15 мкмоль, 8%. ЖХМС m/z 462,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 8,13 (шд, J=7,0 Гц, 1H), 5,68 (шс, 1H), 5,34 (шд, J=9,9 Гц, 1H), 4,95-4,85 (м, 1H), 4,26 (с, 1H), 4,23 (д, J=10,0 Гц, 1H), 3,94 (дд, компонент системы АВХ, J=10,1, 4,5 Гц, 1H), 3,88 (д, половина АВ квартета, J=10,3 Гц, 1H), 3,63 (с, 3H), 3,45-3,29 (м, 2H), 2,62-2,50 (м, 1H), 2,46-2,28 (м, 2H), 2,02-1,93 (м, 1H), 1,92-1,79 (м, 1H), 1,6-1,49 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком воды), 1,06 (с, 3H), 0,98 (с, 9H), 0,90 (с, 3H).To a suspension of C58 (93 mg, 0.19 mmol) in dichloromethane (5 mL) was added methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 139 mg, 0.583 mmol) and the reaction mixture was stirred at 25°C for 2 hours. It is then diluted with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (3×10 ml); the combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (2×10 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (gradient: 0% - 100% ethyl acetate in petroleum ether, then
Пример 80Example 80
N-(Трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид (80) N -(Trifluoroacetyl)-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-(trifluoromethyl )-L-Prolinamide ( 80 )
Стадия 1. Синтез 2-бензил 1-трет-бутил (2S,4R)-4-(трифторметил)пирролидин-1,2-дикарлоксилат (C59).
Смесь (4R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-(трифторметил)-L-пролина (400 мг, 1,41 ммоль), бензилбромида (0,335 мл, 2,82 ммоль) и бикарбоната натрия (593 мг, 7,06 ммоль) в N, N-диметилформамиде (8 мл) перемешивают в течение 15 часов при 25°C. Затем реакционную смесь разбавляют водой (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл), объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и 5% водным раствором хлорида лития, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 30% этилацетат в петролейном эфире) дает C59 в виде бесцветного масла. Согласно 1H ЯМР анализу, этот продукт существует в виде смеси ротамеров. Выход: 355 мг, 0,951 ммоль, 67%. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 7,44-7,28 (м, 5H), 5,29-5,07 (м, 2H), [4,54 (шд, J=8,6 Гц) и 4,40 (шдд, J=8,5, 2 Гц), всего 1H], 3,87-3,70 (м, 1H), [3,58 (дд, J=11,2, 7,4 Гц) и 3,49 (дд, J=11,0, 7,9 Гц), всего 1H], 3,13-2,95 (м, 1H), 2,47-2,27 (м, 1H), 2,25-2,11 (м, 1H), [1,46 (с) и 1,33 (с), всего 9H].A mixture of ( 4R )-1-( tert -butoxycarbonyl)-4-(trifluoromethyl)-L-proline (400 mg, 1.41 mmol), benzyl bromide (0.335 ml, 2.82 mmol) and sodium bicarbonate (593 mg, 7.06 mmol) in N,N -dimethylformamide (8 ml) was stirred for 15 hours at 25°C. The reaction mixture was then diluted with water (30 ml) and extracted with ethyl acetate (3 x 30 ml), the combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium chloride and 5% aqueous lithium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 30% ethyl acetate in petroleum ether) gave C59 as a colorless oil. According to 1 H NMR analysis, this product exists as a mixture of rotamers. Yield: 355 mg, 0.951 mmol, 67%. 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 7.44-7.28 (m, 5H), 5.29-5.07 (m, 2H), [4.54 (brd, J =8.6 Hz) and 4.40 (bdd, J = 8.5, 2 Hz), total 1H], 3.87-3.70 (m, 1H), [3.58 (dd, J = 11.2, 7 .4 Hz) and 3.49 (dd, J = 11.0, 7.9 Hz), total 1H], 3.13-2.95 (m, 1H), 2.47-2.27 (m, 1H), 2.25-2.11 (m, 1H), [1.46 (s) and 1.33 (s), 9H total].
Стадия 2. Синтез бензил (4R)-4-(трифторметил)-L-пролината, гидрохлорида (C60).
К 0°C раствору C59 (200 мг, 0,536 ммоль) в этилацетате (3 мл) добавляют раствор гидрохлорида в этилацетате (4 M; 6 мл, 24 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (28°C) в течение 3 часов, ее концентрируют в вакууме с получением C60 в виде белого твердого вещества; этот продукт берут непосредственно на следующую стадию. ЖХМС m/z 274,0 [M+H]+.To a 0°C solution of C59 (200 mg, 0.536 mmol) in ethyl acetate (3 ml) was added a solution of hydrochloride in ethyl acetate (4 M; 6 ml, 24 mmol). The reaction mixture is then stirred at room temperature (28°C) for 3 hours, it is concentrated in vacuo to give C60 as a white solid; this product is taken directly to the next stage. LCMS m/z 274.0 [M+H] + .
Стадия 3. Синтез бензил N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валил-(4R)-4-(трифторметил)-L-пролината (C61).Step 3. Synthesis of benzyl N -( tert -butoxycarbonyl)-L- valyl- (4R)-4-(trifluoromethyl)-L-prolinate ( C61 ).
Гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 277 мг, 0,728 ммоль) и 4-метилморфолин (184 мг, 1,82 ммоль) добавляют к 0°C смеси C60 (с предыдущей стадии; ≤0,536 ммоль) и N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валина (158 мг, 0,727 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа, затем ее выливают в ледяную воду (15 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические слои промывают последовательно 1 M хлористоводородной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 40% этилацетат в петролейном эфире) дает C61 в виде бесцветной камеди. Выход: 230 мг, 0,487 ммоль, 91% за 2 стадии. ЖХМС m/z 495,0 [M+Na+]. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d), характеристические пики: δ 7,40-7,30 (м, 5H), 5,17 (AB квартет, J AB=12,3 Гц, δνAB=12,6 Гц, 2H), 4,21 (дд, J=9,3, 6,8 Гц, 1H), 4,00-3,86 (м, 2H), 3,18-3,04 (м, 1H), 2,36 (ддд, компонент ABXY системы, J=13,5, 9, 9 Гц, 1H), 2,20 (ддд, компонент ABXY системы, J=13,4, 7,4, 3,5 Гц, 1H), 2,05-1,94 (м, 1H), 1,42 (с, 9H), 0,98 (д, J=6,7 Гц, 3H), 0,91 (д, J=6,8 Гц, 3H). O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 277 mg, 0.728 mmol) and 4-methylmorpholine (184 mg, 1.82 mmol) are added to 0° C mixture of C60 (from previous step; ≤0.536 mmol) and N- ( tert -butoxycarbonyl)-L-valine (158 mg, 0.727 mmol) in N,N -dimethylformamide (3 mL). The reaction mixture was stirred at 0°C for 1 hour, then it was poured into ice water (15 ml) and extracted with ethyl acetate (2×15 ml). The combined organic layers are washed successively with 1 M hydrochloric acid, saturated aqueous sodium bicarbonate and saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Purification by chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 40% ethyl acetate in petroleum ether) gave C61 as a colorless gum. Yield: 230 mg, 0.487 mmol, 91% over 2 steps. LCMS m/z 495.0 [M+Na + ]. 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ), characteristic peaks: δ 7.40-7.30 (m, 5H), 5.17 (AB quartet, J AB= 12.3 Hz, δν AB= 12.6 Hz, 2H), 4.21 (dd, J =9.3, 6.8 Hz, 1H), 4.00-3.86 (m, 2H), 3.18-3.04 (m, 1H) , 2.36 (ddd, ABXY component of the system, J = 13.5, 9.9 Hz, 1H), 2.20 (ddd, ABXY component of the system, J = 13.4, 7.4, 3.5 Hz, 1H), 2.05-1.94 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 0.98 (d, J =6.7 Hz, 3H), 0.91 (d, J =6 .8 Hz, 3H).
Стадия 4. Синтез бензил L-валил-(4R)-4-(трифторметил)-L-пролината, гидрохлорида (C62).Step 4. Synthesis of benzyl L- valyl- (4R)-4-(trifluoromethyl)-L-prolinate, hydrochloride ( C62 ).
К 0°C раствору C61 (230 мг, 0,487 ммоль) в этилацетате (2 мл) добавляют раствор гидрохлорида в этилацетате (4 M; 4 мл, 16 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (28°C) в течение 1 часа, затем ЖХМС анализ показывает превращение в C62: ЖХМС m/z 373,1 [M+H]+. Концентрация реакционной смеси в вакууме дает C62 в виде белого твердого вещества, которое берут непосредственно на следующую стадию.To a 0°C solution of C61 (230 mg, 0.487 mmol) in ethyl acetate (2 ml) was added a solution of hydrochloride in ethyl acetate (4 M; 4 ml, 16 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature (28° C.) for 1 hour, then LCMS analysis showed conversion to C62 : LCMS m/z 373.1 [M+H] + . Concentration of the reaction mixture in vacuo gives C62 as a white solid which is taken directly to the next step.
Стадия 5. Синтез бензил N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-4-(трифторметил)-L-пролината (C63).Step 5. Synthesis of benzyl N- (trifluoroacetyl)-L- valyl- (4R)-4-(trifluoromethyl)-L-prolinate ( C63 ).
Раствор трифторуксусного ангидрида (154 мг, 0,733 ммоль) в дихлорметане (0,5 мл) добавляют к 0°C суспензии C62 (с предыдущей стадии; ≤0,487 ммоль) в дихлорметане (3 мл). Через 3 минуты, раствор триэтиламина (148 мг, 1,46 ммоль) в дихлорметане (0,5 мл) добавляют по каплям, и перемешивание продолжают при 25°C в течение 3 часов. После разбавления дихлорметаном (5 мл), реакционную смесь промывают насыщенным водным раствором карбоната натрия (10 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (15 мл), сушат, фильтруют, и концентрируют в вакууме; хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 30% этилацетат в петролейном эфире) дает C63 в виде бесцветного масла. Выход: 129 мг, 0,275 ммоль, 56% за 2 стадии. ЖХМС m/z 491,2 [M+Na+].A solution of trifluoroacetic anhydride (154 mg, 0.733 mmol) in dichloromethane (0.5 ml) was added to a 0°C suspension of C62 (from the previous step; ≤0.487 mmol) in dichloromethane (3 ml). After 3 minutes, a solution of triethylamine (148 mg, 1.46 mmol) in dichloromethane (0.5 ml) was added dropwise and stirring continued at 25° C. for 3 hours. After dilution with dichloromethane (5 ml), the reaction mixture was washed with saturated aqueous sodium carbonate (10 ml) and saturated aqueous sodium chloride (15 ml), dried, filtered, and concentrated in vacuo ; chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 30% ethyl acetate in petroleum ether) gave C63 as a colorless oil. Yield: 129 mg, 0.275 mmol, 56% over 2 steps. LCMS m/z 491.2 [M+Na + ].
Стадия 6. Синтез N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-4-(трифторметил)-L-пролина (C64).
К 28°C раствору C63 (129 мг, 0,275 ммоль) в метаноле (3 мл) добавляют палладий на угле (10%, 29,3 мг, 27,5 мкмоль), затем смесь гидрогенируют при 15 ф./кв.д. в течение 16 часов. Фильтрация дает фильтровальную лепешку, которую промывают метанолом (10 мл); объединенные фильтраты концентрируют в вакууме с получением C64 в виде светло-желтого твердого вещества. Выход: 80 мг, 0,21 ммоль, 76%. ЖХМС m/z 401,0 [M+Na+].To a 28° C. solution of C63 (129 mg, 0.275 mmol) in methanol (3 mL) was added palladium on carbon (10%, 29.3 mg, 27.5 µmol) then the mixture was hydrogenated at 15 psi. within 16 hours. Filtration gave a filter cake which was washed with methanol (10 ml); the combined filtrates are concentrated in vacuo to give C64 as a light yellow solid. Yield: 80 mg, 0.21 mmol, 76%. LCMS m/z 401.0 [M+Na + ].
Стадия 7. Синтез N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-4-(трифторметил)-L-пролил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C65).Step 7. Synthesis of N- (trifluoroacetyl)-L-valyl-(4 R )-4-(trifluoromethyl)-L-prolyl-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]-L-alanineamide ( C65 ).
Гексафторфосфат O-(7-Азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 88,5 мг, 0,233 ммоль) и 4-метилморфолин (64,2 мг, 0,635 ммоль) добавляют к 0°C раствору C64 (80 мг, 0,21 ммоль) и C16 (76,8 мг, 0,287 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл). затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 часов, ее обрабатывают водой (10 мл) и водным раствором лимонной кислоты (1 M; 10 мл, 10 ммоль), затем экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают последовательно насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (15 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) дает C65 в виде белого твердого вещества. Выход: 72 мг, 0,14 ммоль, 67%. ЖХМС m/z 532,2 [M+H]+. O- (7-Azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 88.5 mg, 0.233 mmol) and 4-methylmorpholine (64.2 mg, 0.635 mmol) are added to 0°C solution of C64 (80 mg, 0.21 mmol) and C16 (76.8 mg, 0.287 mmol) in N,N -dimethylformamide (3 ml). then the reaction mixture is stirred at 0°C for 2 hours, it is treated with water (10 ml) and an aqueous solution of citric acid (1 M; 10 ml, 10 mmol), then extracted with ethyl acetate (3×10 ml). The combined organic layers were washed successively with saturated aqueous sodium bicarbonate (15 ml) and saturated aqueous sodium chloride (15 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Purification by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) gave C65 as a white solid. Yield: 72 mg, 0.14 mmol, 67%. LCMS m/z 532.2 [M+H] + .
Стадия 8. Синтез N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамида (80).Stage 8. Synthesis of N -(trifluoroacetyl)-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- 4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 80 ).
Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 96,9 мг, 0,407 ммоль) добавляют к смеси C65 (72 мг, 0,14 ммоль) в дихлорметане (5 мл), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После разбавления водой (15 мл), смесь экстрагируют дихлорметаном (3×15 мл), и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (2×20 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) дает N-(трифторацетил)-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид (80) в виде белого твердого вещества. Выход: 30,9 мг, 60,2 мкмоль, 43%. ЖХМС m/z 536,1 [M+Na+]. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 9,89 (д, J=7,8 Гц, 1H), 9,06 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,69 (с, 1H), 4,96 (ддд, J=10,6, 8,4, 5,5 Гц, 1H), 4,38 (дд, J=7,9, 6,3 Гц, 1H), 4,28 (дд, J=9,8, 7,8 Гц, 1H), 4,07-3,94 (м, 2H), 3,20-3,00 (м, 2H), 2,5-2,41 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,38-2,28 (м, 1H), 2,19-2,02 (м, 4H), 1,78-1,61 (м, 2H), 0,92 (д, J=7 Гц, 3H), 0,90 (д, J=6,8 Гц, 3H).Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 96.9 mg, 0.407 mmol) was added to a mixture of C65 (72 mg, 0.14 mmol) in dichloromethane (5 ml) and the reaction mixture was stirred at room temperature in during the night. After dilution with water (15 ml), the mixture was extracted with dichloromethane (3 x 15 ml) and the combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium chloride (2 x 20 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) gives N- (trifluoroacetyl)-L- valyl- (4R) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S ) -2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 80 ) as a white solid. Yield: 30.9 mg, 60.2 µmol, 43%. LCMS m/z 536.1 [M+Na + ]. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 9.89 (d, J =7.8 Hz, 1H), 9.06 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7 .69 (s, 1H), 4.96 (ddd, J =10.6, 8.4, 5.5 Hz, 1H), 4.38 (dd, J =7.9, 6.3 Hz, 1H ), 4.28 (dd, J =9.8, 7.8 Hz, 1H), 4.07-3.94 (m, 2H), 3.20-3.00 (m, 2H), 2, 5-2.41 (m, 1H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.38-2.28 (m, 1H), 2.19-2.02 (m, 4H), 1.78-1, 61 (m, 2H), 0.92 (d, J =7 Hz, 3H), 0.90 (d, J =6.8 Hz, 3H).
Примеры 81-84Examples 81-84
Пример 81: (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3R)-5-гидрокси-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамидExample 81: ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3R )-5-hydroxy-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6 ,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
Пример 82: (1R,2S,5S,6R)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6-(гидроксиметил)-6-метил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамидExample 82: ( 1R , 2S , 5S , 6R ) -N -{( 1S )-1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6- (hydroxymethyl)-6-methyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
Пример 83: (1R,2S,5S,6S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6-(гидроксиметил)-6-метил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамидExample 83: (1 R ,2 S ,5 S ,6 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6- (hydroxymethyl)-6-methyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
Пример 84: (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-(гидроксиметил)-N-(трифторацетил)-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамидExample 84: (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3- (hydroxymethyl)- N -(trifluoroacetyl)-L-valyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
Соединения примеров 81-84 получают путями биотрансформации, и in vitro и in vivo, из (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (соединение примера 13) следующим образом. В исследованиях in vitro, (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид инкубируют с микросомами печени мыши, крысы, хомяка, кролика, обезьяны или человека (см. таблицу M1 ниже) или гепатоцитами крысы, обезьяны или человека (см. таблицу M2 ниже). Альтернативно, в исследованиях in vivo (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид вводят крысам и обезьянам. Получают образцы плазмы, мочи и желчи крысы и плазмы обезьяны. Полученные метаболиты затем анализируют с применением ВЭЖХ/МС и полученные окислительные метаболиты соединений примеров 81-84 определяют и получают. Кроме соединений примеров 81-84, дополнительный метаболит, (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновую кислоту, получаемую при гидролитическом расщеплении, наблюдают в исследованиях in vivo.Compounds of examples 81-84 are prepared by biotransformation, both in vitro and in vivo, from (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2- oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (compound example 13) as follows. In vitro studies , ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6.6 -dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide is incubated with mouse, rat, hamster, rabbit, monkey or human (see Table M1 below) or rat, monkey or human hepatocytes (see Table M2 below). Alternatively, in in vivo studies (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6, 6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide is administered to rats and monkeys. Get samples of plasma, urine and bile of rats and plasma of monkeys. The resulting metabolites are then analyzed using HPLC/MS and the resulting oxidative metabolites of the compounds of examples 81-84 are determined and obtained. In addition to the compounds of examples 81-84, an additional metabolite, (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3 ,1,0]hexane-2-carboxylic acid produced by hydrolytic cleavage has been observed in in vivo studies .
В таблицах M1, M2 и M3 применяют следующие обозначения: -=не определено; +=определено масс спектрометрией и незначительный УФ пик; ++=определено масс спектрометрией и средний УФ пик; +++=определено масс спектрометрией и основной УФ пик; t=след, определенный только масс спектрометриейIn tables M1, M2 and M3, the following designations apply: -=not defined; +=determined by mass spectrometry and slight UV peak; ++=determined by mass spectrometry and average UV peak; +++=determined by mass spectrometry and main UV peak; t=trace determined by mass spectrometry only
Примеры 82, 83, 84, и 81Examples 82, 83, 84, and 81
(1R,2S,5S,6R)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6-(гидроксиметил)-6-метил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (82), (1R,2S,5S,6S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6-(гидроксиметил)-6-метил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (83), (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-(гидроксиметил)-N-(трифторацетил)-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (84) и (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3R)-5-гидрокси-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (81)(1 R ,2 S ,5 S ,6 R )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6-(hydroxymethyl) -6-methyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 82 ), (1 R ,2 S ,5 S ,6 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6-(hydroxymethyl)-6-methyl-3-[ 3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 83 ), (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-(hydroxymethyl)- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-6,6- dimethyl-3-azabicyclo[3,1,0]hexane-2-carboxamide ( 84 ) and (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 R )-5-hydroxy-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0 ]hexane-2-carboxamide ( 81 )
Пример 13 (25 мкм) объединяют с микросомами печени человека (2 мг/мл) в буфере на основе фосфата калия (100 мМ, pH 7,4; 40 мл), содержащем хлорид магния (3,3 мМ) и NADPH (1,3 мМ). Инкубацию проводят в течение 55 минут во встряхиваемой водяной бане, выдерживаемой при 37°C. Реакцию заканчивают добавлением равного объема ацетонитрила, затем смесь вращают в центрифуге при 1800 x g в течение 5 минут, и супернатант подвергают вакуумному центрифугированию в течение приблизительно 1,5 часов. К остатку добавляют муравьиную кислоту (0,5 мл), ацетонитрил (0,5 мл) и воду до конечного объема 50 мл, и полученную смесь вращают в центрифуге при 40000 x g в течение 30 минут. Супернатант наносят на ВЭЖХ колонку (Polaris C18, 4,6×250 мм; 5 мкм) при 1 мл/мин с применением Jasco ВЭЖХ насоса. После нанесения, колонку перемещают в ВЭЖХ-УФ систему Waters Acquity, соединенную с Thermo LTQ масс-спектрометром и сборщиком фракций CTC Analytics и подвергают разделению ВЭЖХ с обращенной фазой (Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 2% в течение 5 минут, затем повышают до 15% B, затем 15% - 60% B в течение 80 минут, затем 60% - 95% B в течение 5 минут; Скорость потока: 0,8 мл/мин). Фракции собирают каждые 20 секунд с получением (1R,2S,5S,6R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6-(гидроксиметил)-6-метил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (82), (1R,2S,5S,6S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6-(гидроксиметил)-6-метил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (83), (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-(гидроксиметил)-N-(трифторацетил)-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (84) и (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3R)-5-гидрокси-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (81).Example 13 (25 µM) was combined with human liver microsomes (2 mg/ml) in potassium phosphate buffer (100 mM, pH 7.4; 40 ml) containing magnesium chloride (3.3 mM) and NADPH (1. 3 mM). Incubation is carried out for 55 minutes in a shaking water bath maintained at 37°C. The reaction is terminated by adding an equal volume of acetonitrile, then the mixture is centrifuged at 1800 x g for 5 minutes and the supernatant is subjected to vacuum centrifugation for approximately 1.5 hours. Formic acid (0.5 ml), acetonitrile (0.5 ml) and water were added to the residue to a final volume of 50 ml, and the resulting mixture was centrifuged at 40,000 x g for 30 minutes. The supernatant is applied to an HPLC column (Polaris C18, 4.6×250 mm; 5 µm) at 1 ml/min using a Jasco HPLC pump. After loading, the column is transferred to a Waters Acquity HPLC-UV system connected to a Thermo LTQ mass spectrometer and CTC Analytics fraction collector and subjected to reverse phase HPLC separation (Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid (v/v). vol.); Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 2% over 5 minutes, then increased to 15% B, then 15% - 60% B over 80 minutes, then 60% - 95% B over 5 minutes; Flow rate: 0.8 ml/min). Fractions are collected every 20 seconds to obtain (1R.2S,fiveS.6R)-N-{(oneS)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6-(hydroxymethyl)-6-methyl-3-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (82), (oneR.2S,fiveS.6S)-N-{(oneS)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6-(hydroxymethyl)-6-methyl-3-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (83), (oneR.2S,fiveS)-N-{(oneS)-1-cyano-2-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-(hydroxymethyl)-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (84) and (1R.2S,fiveS)-N-{(oneS)-1-cyano-2-[(3R)-5-hydroxy-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl-N-(trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (81).
82 - Выход: 60 мкг, 0,12 мкмоль, 12%. МС с высоким разрешением m/z 516,2424 [M+H]+; рассчитано для C23H33F3N5O5, 516,2434. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 9,42 (шд, J=7,9 Гц, 1H), 9,03 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,66 (с, 1H), 5,01-4,93 (м, 1H), 4,69-4,63 (м, 1H), 4,43 (д, J=8,3 Гц, 1H), 4,15 (с, 1H), 3,94 (дд, компонент системы АВХ, J=10,2, 5,4 Гц, 1H), 3,68 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,21-3,17 (м, 2H), 3,17-3,11 (м, 1H), 3,07-3,00 (м, 1H), 1,69-1,65 (м, 1H), 1,44 (д, J=7,8 Гц, 1H), 0,98 (с, 9H), 0,84 (с, 3H). 82 - Yield: 60 µg, 0.12 µmol, 12%. High resolution MS m/z 516.2424 [M+H] + ; calculated for C 23 H 33 F 3 N 5 O 5 , 516.2434. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 9.42 (bd, J =7.9 Hz, 1H), 9.03 (d, J =8.5 Hz, 1H), 7 .66 (s, 1H), 5.01-4.93 (m, 1H), 4.69-4.63 (m, 1H), 4.43 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.94 (dd, ABX system component, J = 10.2, 5.4 Hz, 1H), 3.68 (d, half AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 3.21-3.17(m, 2H), 3.17-3.11(m, 1H), 3.07-3.00(m, 1H), 1.69-1.65( m, 1H), 1.44 (d, J =7.8 Hz, 1H), 0.98 (s, 9H), 0.84 (s, 3H).
83 - Выход: 30 мкг, 0,058 мкмоль, 6%. МС с высоким разрешением m/z 516,2425 [M+H]+; рассчитано для C23H33F3N5O5, 516,2434. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 9,37 (д, J=7,0 Гц, 1H), 9,04 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,65 (с, 1H), 5,00-4,94 (м, 1H), 4,54-4,49 (м, 1H), 4,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 4,28 (с, 1H), 3,93 (дд, компонент системы АВХ, J=10,2, 5,8 Гц, 1H), 3,74 (д, половина АВ квартета, J=10,6 Гц, 1H), 3,3-3,20 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком воды), 3,17-3,11 (м, 1H), 3,07-3,00 (м, 1H), 1,75-1,63 (м, 2H), 1,38 (д, половина АВ квартета, J=7,3 Гц, 1H), 1,06 (с, 3H), 0,98 (с, 9H). 83 - Yield: 30 µg, 0.058 µmol, 6%. High resolution MS m/z 516.2425 [M+H] + ; calculated for C 23 H 33 F 3 N 5 O 5 , 516.2434. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 9.37 (d, J =7.0 Hz, 1H), 9.04 (d, J =8.5 Hz, 1H), 7 .65 (s, 1H), 5.00-4.94 (m, 1H), 4.54-4.49 (m, 1H), 4.40 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 3.93 (dd, ABX system component, J = 10.2, 5.8 Hz, 1H), 3.74 (d, half AB quartet, J = 10.6 Hz, 1H), 3.3-3.20 (m, 1H, estimated; partially covered by water peak), 3.17-3.11 (m, 1H), 3.07-3.00 (m, 1H), 1 .75-1.63 (m, 2H), 1.38 (d, half AB quartet, J = 7.3 Hz, 1H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 9H).
84 - Выход: 40 мкг, 0,078 мкмоль, 8%. МС с высоким разрешением m/z 516,2423 [M+H]+; рассчитано для C23H33F3N5O5, 516,2434. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 9,61-9,51 (м, 1H), 9,00 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,68 (с, 1H), 5,02-4,92 (м, 1H), 4,51-4,43 (м, 1H), 4,16 (с, 1H), 3,92 (шдд, J=10,0, 5,6 Гц, 1H), 3,78 (д, J=10,6 Гц, 1H), 3,51 (д, J=10,1 Гц, 1H), 3,18-3,10 (м, 1H), 3,10-3,03 (м, 1H), 1,73-1,67 (м, 2H), 1,60-1,54 (м, 1H), 1,31 (д, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 1,01 (с, 3H), 0,88 (шс, 6H). 84 - Yield: 40 µg, 0.078 µmol, 8%. High resolution MS m/z 516.2423 [M+H] + ; calculated for C 23 H 33 F 3 N 5 O 5 , 516.2434. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 9.61-9.51 (m, 1H), 9.00 (d, J =8.3 Hz, 1H), 7.68 ( s, 1H), 5.02-4.92 (m, 1H), 4.51-4.43 (m, 1H), 4.16 (s, 1H), 3.92 (bdd, J =10, 0, 5.6 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.51 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.18-3.10 ( m, 1H), 3.10-3.03 (m, 1H), 1.73-1.67 (m, 2H), 1.60-1.54 (m, 1H), 1.31 (d, J =7.6Hz, 1H), 1.03(s, 3H), 1.01(s, 3H), 0.88(brs, 6H).
81 - Выход: 130 мкг, 0,252 мкмоль, 25%. Определено, что этот продукт существует в виде взаимопревращающейся смеси стереоизомеров вокруг карбинолаиновой группы пирролидона (см. примеры 81 и 82). МС с высоким разрешением m/z 516,2428 [M+H]+; рассчитано для C23H33F3N5O5, 516,2434. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ [9,40 (д, J=8,4 Гц) и 9,38 (д, J=8,2 Гц), всего 1H], [8,99 (д, J=8,5 Гц) и 8,92 (д, J=7,6 Гц), всего 1H], [8,37 (с) и 8,25 (с), всего 1H], [5,83 (шс) и 5,70 (шс), всего 1H], 5,04-4,92 (м, 2H), 4,44-4,38 (м, 1H), [4,19 (с) и 4,15 (с), всего 1H], 3,91 (дд, J=10,2, 5,5 Гц, 1H), [3,69 (д, J=10 Гц) и 3,68 (д, J=10,2 Гц), всего 1H], [2,65-2,57 (м), 2,43-2,30 (м), и 2,21-2,13 (м), всего 2H], [2,08 (ддд, J=13,7, 8,4, 6,2 Гц), 2,00-1,90 (м), и 1,87-1,79 (м), всего 2H], [1,78-1,70 (м) и 1,51-1,44 (м), всего 1H], 1,60-1,53 (м, 1H), [1,32 (д, J=7,6 Гц) и 1,29 (д, J=7,6 Гц), всего 1H], 1,03 (с, 3H), [0,99 (с) и 0,98 (с), всего 9H], [0,85 (с) и 0,84 (с), всего 3H]. 81 - Yield: 130 µg, 0.252 µmol, 25%. This product was determined to exist as an interconvertible mixture of stereoisomers around the carbinolaine group of the pyrrolidone (see Examples 81 and 82). High resolution MS m/z 516.2428 [M+H] + ; calculated for C 23 H 33 F 3 N 5 O 5 , 516.2434. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ [9.40 (d, J =8.4 Hz) and 9.38 (d, J =8.2 Hz), total 1H], [8.99 (d, J = 8.5 Hz) and 8.92 (d, J = 7.6 Hz), total 1H], [8.37 (s) and 8.25 (s), total 1H], [5 .83 (brs) and 5.70 (brs), total 1H], 5.04-4.92 (m, 2H), 4.44-4.38 (m, 1H), [4.19 (s) and 4.15 (s), total 1H], 3.91 (dd, J = 10.2, 5.5 Hz, 1H), [3.69 (d, J = 10 Hz) and 3.68 (d , J= 10.2 Hz), 1H total], [2.65-2.57 (m), 2.43-2.30 (m), and 2.21-2.13 (m), 2H total ], [2.08 (ddd, J =13.7, 8.4, 6.2 Hz), 2.00-1.90 (m), and 1.87-1.79 (m), total 2H ], [1.78-1.70 (m) and 1.51-1.44 (m), total 1H], 1.60-1.53 (m, 1H), [1.32 (d, J =7.6 Hz) and 1.29 (d, J =7.6 Hz), total 1H], 1.03 (s, 3H), [0.99 (s) and 0.98 (s), total 9H], [0.85 (s) and 0.84 (s), total 3H].
Примеры 81 и 85Examples 81 and 85
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3R)-5-гидрокси-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (81) и (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3R)-2,5-диоксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (85)(1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 R )-5-hydroxy-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 81 ) and (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 R )-2,5-dioxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl )-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 85 )
Смесь примера 13 (1,0 мг, 2,0 мкмоль) и декавольфрамата тетра-н-бутиламмония (TBADT; 0,33 мг, 0,10 мкмоль) обрабатывают ацетонитрилом (0,15 мл) и хлористоводородной кислотой (1,0 M; 0,05 мл, 50 мкмоль). Иглу шприца (калибр 18) вставляют через тефлоновую крышку пробирки и доступную для воздуха смесь помещают в EvoluChem™ PhotoRedOx Box, оборудованную вентилятором и облучают черным светом (PAR20-18W LG 365 нм, 100-240 VAC) при 25°C в течение 16 часов. В реакционную смесь добавляют водный раствор фосфата калия (1 M, pH 7,5; 0,5 мл), затем воду (до объема приблизительно 6 мл), затем добавляют водную муравьиную кислоту (1%, 2 мл) и ацетонитрил, достаточный для сохранения раствора. Полученный раствор делят наполовину и наносят на два 5 г Biotage Isolute C18 картриджи для твердофазной экстракции. Картриджи промывают водным раствором ацетата аммония (10 мМ; 3 мл) и 20% ацетонитрилом в 10 мМ водном растворе ацетата аммония (3 мл), затем элюируют ацетонитрилом (3 мл). Растворители удаляют с применением испарителя Genevac, и два остатка восстанавливают в смеси ацетонитрила и 1% водной муравьиной кислоты и объединяют до всего 2 мл раствора. Этот продукт подвергают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Phenomenex Luna C18,10×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 2% - 15% B в течение 5 минут, затем 15% - 60% B в течение 80 минут, затем 60% - 95% B в течение 5 минут; Скорость потока: 2 мл/мин). Фракции собирают каждые 20 секунд; элюированным первым соединением является (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3R)-5-гидрокси-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (81), и элюированным вторым соединением является (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3R)-2,5-диоксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (85).A mixture of Example 13 (1.0 mg, 2.0 µmol) and tetra -n- butylammonium decatungstate (TBADT; 0.33 mg, 0.10 µmol) was treated with acetonitrile (0.15 ml) and hydrochloric acid (1.0 M ; 0.05 ml, 50 µmol). The syringe needle (18 gauge) is inserted through the Teflon cap of the tube and the air-available mixture is placed in an EvoluChem™ PhotoRedOx Box equipped with a fan and irradiated with black light (PAR20-18W LG 365 nm, 100-240 VAC) at 25°C for 16 hours . An aqueous solution of potassium phosphate (1 M, pH 7.5; 0.5 mL) was added to the reaction mixture, followed by water (to a volume of approximately 6 mL), then aqueous formic acid (1%, 2 mL) and sufficient acetonitrile were added to save the solution. The resulting solution is divided by half and applied to two 5 g Biotage Isolute C18 cartridges for solid phase extraction. The cartridges were washed with aqueous ammonium acetate (10 mM; 3 ml) and 20% acetonitrile in 10 mM aqueous ammonium acetate (3 ml), then eluted with acetonitrile (3 ml). The solvents were removed using a Genevac evaporator and the two residues were reconstituted in a mixture of acetonitrile and 1% aqueous formic acid and combined to a total of 2 ml solution. This product was subjected to reverse phase HPLC (Column: Phenomenex Luna C18.10×250 mm, 10 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile; Gradient : 2% - 15% B over 5 minutes, then 15% - 60% B over 80 minutes, then 60% - 95% B over 5 minutes; Flow rate: 2 ml/min). Fractions are collected every 20 seconds; the first compound eluted is ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3R )-5-hydroxy-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- 6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 81 ), and the second compound eluted is (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 R )-2,5-dioxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 85 ).
Выход 81: 0,122 мг, 0,237 мкмоль, 12%. Определяют, что этот продукт существует в виде взаимопревращающейся смеси стереоизомеров вокруг карбиноламиновой группы пирролидона, и элюируется в виде двойного пика на ВЭЖХ. МС с высоким разрешением m/z 516,2413 [M+H]+; рассчитано для C23H33F3N5O5, 516,2434. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,44-9,34 (м, 1H), [8,99 (д, J=8,5 Гц) и 8,92 (д, J=7,6 Гц), всего 1H], [8,37 (с) и 8,25 (с), всего 1H], [5,83 (шс) и 5,70 (шс), всего 1H], 5,05-4,91 (м, 2H), 4,44-4,37 (м, 1H), [4,19 (с) и 4,15 (с), всего 1H], 3,91 (дд, J=10,3, 5,5 Гц, 1H), [3,69 (д, J=10,1 Гц) и 3,68 (д, J=10,3 Гц), всего 1H], [2,65-2,57 (м), 2,43-2,30 (м), и 2,17 (ддд, J=14,9, 10,7, 4,7 Гц), всего 2H], [2,08 (ддд, J=14,1, 8,5, 6,2 Гц), 2,01-1,90 (м), и 1,83 (ддд, J=13,7, 10,1, 5,7 Гц), всего 2H], [1,78-1,70 (м) и 1,51-1,44 (м), всего 1H], 1,60-1,53 (м, 1H), [1,32 (д, J=7,6 Гц) и 1,29 (д, J=7,6 Гц), всего 1H], 1,03 (с, 3H), [0,99 (с) и 0,98 (с), всего 9H], [0,85 (с) и 0,84 (с), всего 3H]. Время удержания: 7,7 минут (Аналитические условия. Колонка: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2,1×100 мм, 2,6 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,1% муравьиной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 5% B в течение 0,5 минут, затем 5% - 70% B в течение 10,5 минут, затем 70% - 95% B в течение 2 минут; Скорость потока: 0,4 мл/минуту).Yield 81 : 0.122 mg, 0.237 µmol, 12%. This product is determined to exist as an interconvertible mixture of stereoisomers around the carbinolamine group of the pyrrolidone and elutes as a double peak on HPLC. High resolution MS m/z 516.2413 [M+H] + ; calculated for C 23 H 33 F 3 N 5 O 5 , 516.2434. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.44-9.34 (m, 1H), [8.99 (d, J =8.5 Hz) and 8.92 (d, J =7 .6 Hz), 1H total], [8.37 (s) and 8.25 (s), 1H total], [5.83 (sh) and 5.70 (sh), 1H total], 5.05 -4.91 (m, 2H), 4.44-4.37 (m, 1H), [4.19 (s) and 4.15 (s), total 1H], 3.91 (dd, J = 10.3, 5.5 Hz, 1H), [3.69 (d, J =10.1 Hz) and 3.68 (d, J =10.3 Hz), total 1H], [2.65- 2.57 (m), 2.43-2.30 (m), and 2.17 (ddd, J = 14.9, 10.7, 4.7 Hz), total 2H], [2.08 ( ddd, J =14.1, 8.5, 6.2 Hz), 2.01-1.90 (m), and 1.83 (ddd, J =13.7, 10.1, 5.7 Hz ), total 2H], [1.78-1.70 (m) and 1.51-1.44 (m), total 1H], 1.60-1.53 (m, 1H), [1.32 (d, J = 7.6 Hz) and 1.29 (d, J = 7.6 Hz), total 1H], 1.03 (s, 3H), [0.99 (s) and 0.98 ( s), 9H total], [0.85 (s) and 0.84 (s), 3H total]. Retention time: 7.7 minutes (Analytical conditions. Column: Phenomenex Kinetex XB-C18, 2.1×100 mm, 2.6 µm; Mobile phase A: water containing 0.1% formic acid (v/v ); Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 5% B over 0.5 minutes, then 5% - 70% B over 10.5 minutes, then 70% - 95% B over 2 minutes; Flow rate: 0 .4 ml/minute).
Выход 85: 0,104 мг, 0,203 мкмоль, 10%. МС с высоким разрешением m/z 514,2259 [M+H]+; рассчитано для C23H31F3N5O5, 514,2277. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 11,17 (шс, 1H), 9,40 (шс, 1H), 9,08 (д, J=8,9 Гц, 1H), 5,06-4,98 (м, 1H), 4,42-4,36 (м, 1H), 4,13 (с, 1H), 3,91 (дд, J=10,3, 5,6 Гц, 1H), 3,70 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,00-2,93 (м, 1H), 2,60 (дд, компонент системы АВХ, J=18,0, 5,9 Гц, 1H), 2,46 (дд, компонент системы АВХ, J=18,1, 9,1 Гц, 1H), 2,25-2,18 (м, 1H), 2,04-1,97 (м, 1H), 1,60-1,55 (м, 1H), 1,35 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,95 (с, 9H), 0,86 (с, 3H). Время удержания: 8,3 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые применяют для 81).Yield 85 : 0.104 mg, 0.203 µmol, 10%. High resolution MS m/z 514.2259 [M+H] + ; calculated for C 23 H 31 F 3 N 5 O 5 , 514.2277. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.17 (brs, 1H), 9.40 (brs, 1H), 9.08 (d, J =8.9 Hz, 1H), 5.06 -4.98(m, 1H), 4.42-4.36(m, 1H), 4.13(s, 1H), 3.91(dd, J =10.3, 5.6Hz, 1H ), 3.70 (d, half of the AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 3.00-2.93 (m, 1H), 2.60 (dd, component of the ABX system, J = 18.0 , 5.9 Hz, 1H), 2.46 (dd, component of the ABX system, J = 18.1, 9.1 Hz, 1H), 2.25-2.18 (m, 1H), 2.04- 1.97 (m, 1H), 1.60-1.55 (m, 1H), 1.35 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H) , 0.95 (s, 9H), 0.86 (s, 3H). Retention time: 8.3 minutes (Analytical conditions identical to those used for 81 ).
Пример 86Example 86
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[5,5,5-трифтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (86)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [5,5,5-trifluoro-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 86 )
Стадия 1. Синтез трет-бутил (1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-карлоксилата (C66).
К 0°C суспензии (1R,2S,5S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (5,25 г, 20,6 ммоль), C16, соли HCl (4,70 г, 22,6 ммоль) и 2-гидроксипиридин 1-оксида (571 мг, 5,14 ммоль) в бутан-2-оне (108 мл) добавляют N, N-диизопропилэтиламин (7,97 г, 61,7 ммоль), затем гидрохлорид 1-[3-(диметиламино)пропил]-3-этилкарбодиимида (4,73 г, 24,7 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 20 минут, ее постепенно нагревают до комнатной температуры, и затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем ЖХМС анализ показывает присутствие C66: ЖХМС m/z 407,1 [M−H]−. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (100 мл), и промывают последовательно следующим: смесью воды (50 мл) и насыщенного водного раствора хлорида натрия (20 мл), насыщенным водным раствором хлорида натрия (70 мл), дважды смесью хлористоводородной кислоты (1 M; 50 мл) и насыщенного водного раствора хлорида натрия (20 мл), и наконец, насыщенным водным раствором хлорида натрия (70 мл). Каждый водный слой экстрагируют этилацетатом (100 мл), и объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и фильтруют. Собранный сульфат натрия промывают этилацетатом (2×50 мл), и объединенные фильтраты концентрируют в вакууме, разбавляют гептаном (50 мл) и концентрируют при пониженном давлении с получением C66 в виде бесцветного стекла (6,69 г). Согласно 1H ЯМР анализу, присутствует некоторое количество растворителя; чистоту оценивают как приблизительно 85% массовых. 1H ЯМР анализ также показал, что этот продукт существует в виде смеси ротамеров. Выход, скорректированный на присутствие растворителей: 5,7 г, 14 ммоль, 68%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 8,23-8,13 (м, 1H), [7,63 (шс) и 7,59 (шс), всего 1H], [7,36 (шс) и 7,23 (шс), всего 1H], 7,08-7,00 (м, 1H), 4,31-4,19 (м, 1H), [4,03 (с) и 3,99 (с), всего 1H], [3,58 (дд, J=10,8, 4,6 Гц) и 3,49 (дд, J=10,8, 3,9 Гц), всего 1H], [3,27 (д, J=10,9 Гц) и 3,26 (д, J=10,7 Гц), всего 1H], 3,22-3,00 (м, 2H), 2,38-2,09 (м, 2H), 1,79-1,43 (м, 2H), [1,36 (с) и 1,29 (с), всего 9H], 1,00 (с, 3H), 0,89 (с, 3H).To 0°C suspension of (1 R ,2 S ,5 S )-3-( tert -butoxycarbonyl)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxylic acid (5.25 g, 20.6 mmol), C16, HCl salts (4.70 g, 22.6 mmol) and 2-hydroxypyridine 1-oxide (571 mg, 5.14 mmol) in butan-2-one (108 ml) are added N,N -diisopropylethylamine (7.97 g, 61.7 mmol) followed by 1-[3-(dimethylamino)propyl]-3-ethylcarbodiimide hydrochloride (4.73 g, 24.7 mmol). Then the reaction mixture is stirred at 0°C for 20 minutes, it is gradually warmed to room temperature, and then stirred at room temperature overnight, then LCMS analysis shows the presence of C66 : LCMS m/z 407.1 [M−H] − . The reaction mixture was diluted with ethyl acetate (100 ml), and washed successively with the following: a mixture of water (50 ml) and a saturated aqueous sodium chloride solution (20 ml), a saturated aqueous sodium chloride solution (70 ml), twice with a mixture of hydrochloric acid (1 M; 50 ml) and a saturated aqueous sodium chloride solution (20 ml) and finally a saturated aqueous sodium chloride solution (70 ml). Each aqueous layer was extracted with ethyl acetate (100 ml) and the combined organic layers were dried over sodium sulfate and filtered. The collected sodium sulfate was washed with ethyl acetate (2×50 ml) and the combined filtrates were concentrated in vacuo , diluted with heptane (50 ml) and concentrated under reduced pressure to give C66 as a colorless glass (6.69 g). According to 1 H NMR analysis, some solvent is present; the purity is estimated as approximately 85% by weight. 1 H NMR analysis also showed that this product exists as a mixture of rotamers. Yield corrected for the presence of solvents: 5.7 g, 14 mmol, 68%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 8.23-8.13 (m, 1H), [7.63 (br) and 7.59 (br) 1H total], [ 7.36 (brs) and 7.23 (brs), total 1H], 7.08-7.00 (m, 1H), 4.31-4.19 (m, 1H), [4.03 (s ) and 3.99 (s), total 1H], [3.58 (dd, J =10.8, 4.6 Hz) and 3.49 (dd, J =10.8, 3.9 Hz), 1H total], [3.27 (d, J =10.9 Hz) and 3.26 (d, J =10.7 Hz), 1H total], 3.22-3.00 (m, 2H), 2.38-2.09 (m, 2H), 1.79-1.43 (m, 2H), [1.36 (s) and 1.29 (s), total 9H], 1.00 (s , 3H), 0.89 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, метансульфоната (C67).
Метансульфоновую кислоту (0,920 мл, 14,2 ммоль) добавляют в раствор C66 (приблизительно 85% массовых, с предыдущей стадии; 6,68 г, 14 ммоль) в 1,1,1,3,3,3-гексафторпропан-2-оле (30 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов, затем ее концентрируют в вакууме. Остаток последовательно берут в следующих системах растворителей, затем повторно концентрируют: ацетонитрил/этилацетат (1:1, 2×10 мл) и этилацетат/гептан (1:1, 2×10 мл), с получением C67 в виде стекла (7,18 г). Часть этого продукта берут на следующую стадию. ЖХМС m/z 309,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4) δ 4,51 (дд, J=10,8, 4,7 Гц, 1H), 4,21 (шс, 1H), 3,73 (дд, J=12,4, 6,3 Гц, 1H), 3,41-3,22 (м, 3H), 2,70 (с, 3H), 2,58-2,47 (м, 1H), 2,42-2,32 (м, 1H), 2,16 (ддд, J=14,0, 10,8, 4,8 Гц, 1H), 1,97 (шд, J=7,9 Гц, 1H), 1,95-1,84 (м, 1H), 1,84-1,75 (м, 2H), 1,15 (с, 6H).Methanesulfonic acid (0.920 ml, 14.2 mmol) is added to a solution of C66 (ca. ole (30 ml). The reaction mixture is stirred at room temperature for 3 hours, then it is concentrated in vacuo . The residue was sequentially taken up in the following solvent systems, then re-concentrated: acetonitrile/ethyl acetate (1:1, 2×10 ml) and ethyl acetate/heptane (1:1, 2×10 ml) to give C67 as a glass (7.18 G). Some of this product is taken to the next stage. LCMS m/z 309.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ) δ 4.51 (dd, J = 10.8, 4.7 Hz, 1H), 4.21 (brisk, 1H), 3.73 (dd, J = 12.4, 6.3 Hz, 1H), 3.41-3.22 (m, 3H), 2.70 (s, 3H), 2.58-2.47 (m, 1H), 2.42 -2.32(m, 1H), 2.16(ddd, J =14.0, 10.8, 4.8Hz, 1H), 1.97(brd, J =7.9Hz, 1H), 1.95-1.84 (m, 1H), 1.84-1.75 (m, 2H), 1.15 (s, 6H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[5,5,5-трифтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (86).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl 3-[5,5,5-trifluoro-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 86 ).
В раствор 2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-5,5,5-трифторпентановой кислоты (59,0 мг, 0,218 ммоль) в смеси ацетонитрила (0,60 мл) и N, N-диметилформамида (0,40 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 82,7 мг, 0,218 ммоль), затем 4-метилморфолин (54,4 мкл, 0,495 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают в течение 20 минут, C67 (с предыдущей стадии; 100 мг, ≤0,19 ммоль) добавляют в виде твердого вещества. Реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 часов, затем ее разделяют между этилацетатом и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Водный слой экстрагируют этилацетатом, и объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют с применением потока азота. Остаток растворяют в дихлорметане (0,70 мл), обрабатывают трифторуксусной кислоты (0,175 мл) и перемешивают при комнатной температуре. Через 2 часа, снова добавляют трифторуксусную кислоту (0,10 мл); перемешивание продолжают в течение еще 3 часов, затем реакционную смесь концентрируют под потоком азота, и затем в вакууме. Этот продукт растворяют в дихлорметане (0,75 мл), охлаждают на ледяной бане и обрабатывают триэтиламином (54,8 мкл, 0,393 ммоль); трифторуксусный ангидрид (41,2 мкл, 0,292 ммоль) добавляют по каплям, и реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 3 часов. Летучие вещества удаляют с применением испарителя Genevac evaporator, и остаток растворяют в дихлорметане (0,90 мл), обрабатывают метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбаматом, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 132 мг, 0,554 ммоль), и перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 часов. Реакционную смесь затем концентрируют под потоком азота, разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Водный слой экстрагируют этилацетатом, и объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют под потоком азота. Очистка ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: 0,05% трифторуксусной кислоты в воде; Подвижная фаза B: 0,05% трифторуксусной кислоты в ацетонитриле; Градиент: 5% - 95% B в течение 8,54 минут, затем 95% B в течение 1,46 минут; Скорость потока: 25 мл/минуту) дает (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[5,5,5-трифтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (86). Выход: 14 мг, 26 мкмоль, 14% за 2 стадии. ЖХМС m/z 540,6 [M+H]+. Время удержания: 2,60 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis dC18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5,0% - 95% B, линейный, в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 2 мл/минуту).To a solution of 2-[( tert -butoxycarbonyl)amino]-5,5,5-trifluoropentanoic acid (59.0 mg, 0.218 mmol) in a mixture of acetonitrile (0.60 ml) and N,N -dimethylformamide (0.40 ml ) add O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 82.7 mg, 0.218 mmol), then 4-methylmorpholine (54.4 µl, 0.495 mmol ). The reaction mixture is then stirred for 20 minutes, C67 (from the previous step; 100 mg, ≤0.19 mmol) is added as a solid. The reaction mixture is stirred for 1.5 hours, then it is partitioned between ethyl acetate and saturated aqueous sodium bicarbonate. The aqueous layer is extracted with ethyl acetate and the combined organic layers are dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated using a stream of nitrogen. The residue was dissolved in dichloromethane (0.70 ml), treated with trifluoroacetic acid (0.175 ml) and stirred at room temperature. After 2 hours, trifluoroacetic acid (0.10 ml) is added again; stirring is continued for another 3 hours, then the reaction mixture is concentrated under a stream of nitrogen, and then in vacuo . This product is dissolved in dichloromethane (0.75 ml), cooled in an ice bath and treated with triethylamine (54.8 μl, 0.393 mmol); trifluoroacetic anhydride (41.2 μl, 0.292 mmol) was added dropwise and the reaction mixture was stirred at 0° C. for 3 hours. The volatiles were removed using a Genevac evaporator and the residue was dissolved in dichloromethane (0.90 ml), treated with methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 132 mg, 0.554 mmol), and stirred at room temperature for 2.5 hours. The reaction mixture is then concentrated under a stream of nitrogen, diluted with ethyl acetate and washed with saturated aqueous sodium bicarbonate. The aqueous layer is extracted with ethyl acetate and the combined organic layers are dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated under a stream of nitrogen. Reverse phase HPLC purification (Column: Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: 0.05% trifluoroacetic acid in water; Mobile phase B: 0.05% trifluoroacetic acid in acetonitrile; Gradient: 5% - 95% B for 8.54 minutes, then 95% B for 1.46 minutes; Flow rate: 25 ml/minute) gives (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )- 1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[5,5,5-trifluoro-2-(2,2,2-trifluoroacetamido )pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 86 ). Yield: 14 mg, 26 µmol, 14% over 2 steps. LCMS m/z 540.6 [M+H] + . Retention time: 2.60 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis dC18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5.0% - 95% B, linear over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes; Speed flow: 2 ml/minute).
Пример 87Example 87
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[(2S)-2-циклогексил-2-{[(трифторметил)сульфонил]амино}ацетил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (87)(1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[(2 S )- 2-cyclohexyl-2-{[(trifluoromethyl)sulfonyl]amino}acetyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 87 )
Стадия 1. Синтез метил (1R,2S,5S)-3-{(2S)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-циклогексилацетил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C68).
К 0°C раствору метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата, гидрохлорида (300 мг, 1,46 ммоль) и (2S)-[(трет-бутоксикарбонил)амино](циклогексил)уксусной кислоты (394 мг, 1,53 ммоль) в N, N-диметилформамиде (5 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 610 мг, 1,60 ммоль), затем по каплям добавляют 4-метилморфолин (443 мг, 4,38 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 10 минут, затем при комнатной температуре (20°C) в течение 2 часов, затем ее выливают в ледяную воду (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×40 мл). Объединенные органические слои промывают последовательно водой (40 мл), хлористоводородной кислотой (1 M; 40 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (40 мл), и насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением C68 в виде белой пены. Выход: 580 мг, 1,42 ммоль, 97%. ЖХМС m/z 409,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 7,03 (д, J=8,5 Гц, 1H), 4,17 (с, 1H), 4,00 (д, J=10,4 Гц, 1H), 3,88 (дд, J=9, 9 Гц, 1H), 3,75 (дд, J=10,3, 5,3 Гц, 1H), 3,64 (с, 3H), 1,83-1,47 (м, 8H), 1,46-1,28 (м, 2H), 1,33 (с, 9H), 1,18-1,06 (м, 3H), 1,00 (с, 3H), 0,86 (с, 3H).To a 0°C solution of methyl (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate, hydrochloride (300 mg, 1.46 mmol) and ( 2S )-[( tert -butoxycarbonyl)amino](cyclohexyl)acetic acid (394 mg, 1.53 mmol) in N,N -dimethylformamide (5 mL) O- (7-azabenzotriazol-1-yl) hexafluorophosphate is added - N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU; 610 mg, 1.60 mmol), then 4-methylmorpholine (443 mg, 4.38 mmol) is added dropwise. The reaction mixture was stirred at 0°C for 10 minutes, then at room temperature (20°C) for 2 hours, then it was poured into ice water (30 ml) and extracted with ethyl acetate (3×40 ml). The combined organic layers were washed successively with water (40 ml), hydrochloric acid (1 M; 40 ml), saturated aqueous sodium bicarbonate (40 ml), and saturated aqueous sodium chloride, then dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C68 as a white foam. Yield: 580 mg, 1.42 mmol, 97%. LCMS m/z 409.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.03 (d, J =8.5 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.00 (d, J =10.4 Hz , 1H), 3.88 (dd, J =9.9 Hz, 1H), 3.75 (dd, J =10.3, 5.3 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 1 .83-1.47 (m, 8H), 1.46-1.28 (m, 2H), 1.33 (s, 9H), 1.18-1.06 (m, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.86 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез метил (1R,2S,5S)-3-[(2S)-2-амино-2-циклогексилацетил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата, гидрохлорида (C69).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 15 мл) добавляют по каплям к 5°C раствору C68 (580 мг, 1,42 ммоль) в 1,4-диоксане (3 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (20°C) в течение 1,5 часов, ее концентрируют в вакууме. Остаток совместно выпаривают с дихлорметаном с получением C69 в виде светло-желтой пены (490 мг), всю которую используют в следующем эксперименте. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,22 (шс, 3H), 4,26 (с, 1H), 3,99-3,90 (м, 1H), 3,76 (дд, компонент системы АВХ, J=10,7, 5,1 Гц, 1H), 3,71 (д, половина АВ квартета, J=10,6 Гц, 1H), 3,66 (с, 3H), 1,83-1,60 (м, 6H), 1,59 (дд, J=7,6, 5,1 Гц, 1H), 1,49 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,27-1,02 (м, 5H), 1,03 (с, 3H), 0,94 (с, 3H).A solution of the hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 15 ml) was added dropwise to a 5°C solution of C68 (580 mg, 1.42 mmol) in 1,4-dioxane (3 ml). The reaction mixture is then stirred at room temperature (20°C) for 1.5 hours, it is concentrated in vacuo . The residue was co-evaporated with dichloromethane to give C69 as a light yellow foam (490 mg), all of which was used in the next experiment. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.22 (br s, 3H), 4.26 (s, 1H), 3.99-3.90 (m, 1H), 3.76 (dd, component of the ABX system, J = 10.7, 5.1 Hz, 1H), 3.71 (d, half of the AB quartet, J = 10.6 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 1.83 -1.60 (m, 6H), 1.59 (dd, J =7.6, 5.1 Hz, 1H), 1.49 (d, half AB quartet, J =7.6 Hz, 1H), 1.27-1.02 (m, 5H), 1.03 (s, 3H), 0.94 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез метил (1R,2S,5S)-3-[(2S)-2-циклогексил-2-{[(трифторметил)сульфонил]амино}ацетил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата (C70).Stage 3. Synthesis of methyl (1 R ,2 S ,5 S )-3-[(2 S )-2-cyclohexyl-2-{[(trifluoromethyl)sulfonyl]amino}acetyl]-6,6-dimethyl-3- azabicyclo[3,1,0]hexane-2-carboxylate ( C70 ).
К -10°C раствору C69 (с предыдущей стадии; 480 мг, ≤1,39 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляют N, N-диизопропилэтиламин (630 мг, 4,87 ммоль), затем по каплям добавляют трифторметансульфоновый ангидрид (0,328 мл, 1,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -10°C в течение 1 часа, затем при комнатной температуре (20°C) в течение 1 часа, затем ее разбавляют насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3×30 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и очищают хроматографией на силикагеле (Элюент: 1:4 этилацетат/петролейным эфиром), с получением C70 в виде светло-желтого масла. Выход: 124 мг, 0,282 ммоль, 20% за 2 стадии. ЖХМС m/z 441,1 [M+H]+.To a -10°C solution of C69 (from the previous step; 480 mg, ≤1.39 mmol) in dichloromethane (10 ml) is added N,N -diisopropylethylamine (630 mg, 4.87 mmol), then trifluoromethanesulfonic anhydride ( 0.328 ml, 1.95 mmol). The reaction mixture was stirred at -10°C for 1 hour, then at room temperature (20°C) for 1 hour, then it was diluted with saturated aqueous sodium chloride solution (50 ml) and extracted with dichloromethane (3×30 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and purified by silica gel chromatography (eluent: 1:4 ethyl acetate/petroleum ether) to give C70 as a light yellow oil. Yield: 124 mg, 0.282 mmol, 20% over 2 steps. LCMS m/z 441.1 [M+H] + .
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-3-[(2S)-2-циклогексил-2-{[(трифторметил)сульфонил]амино}ацетил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C71).Stage 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )-3-[(2 S )-2-cyclohexyl-2-{[(trifluoromethyl)sulfonyl]amino}acetyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo [3,1,0]hexane-2-carboxylic acid ( C71 ).
В раствор C70 (120 мг, 0,272 ммоль) в смеси воды (2 мл), метанола (2 мл) и тетрагидрофурана (2 мл) добавляют моногидрат гидроксида лития (28,6 мг, 0,682 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (20°C) в течение 18 часов при комнатной температуре, ЖХМС показывает, что реакция завершена: ЖХМС m/z 427,2 [M+H]+. Реакционную смесь концентрируют в вакууме для удаления органических растворителей. Остаток разбавляют водой (5 мл) и затем подкисляют до pH 2-3 добавлением 1 M хлористоводородной кислоты; полученную смесь экстрагируют этилацетатом (2×30 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме, с получением C71 в виде светло-желтого твердого вещества. Выход: 92,0 мг, 0,216 ммоль, 79%.To a solution of C70 (120 mg, 0.272 mmol) in a mixture of water (2 ml), methanol (2 ml) and tetrahydrofuran (2 ml) was added lithium hydroxide monohydrate (28.6 mg, 0.682 mmol). Then the reaction mixture is stirred at room temperature (20°C) for 18 hours at room temperature, LCMS shows that the reaction is complete: LCMS m/z 427.2 [M+H] + . The reaction mixture is concentrated in vacuo to remove organic solvents. The residue was diluted with water (5 ml) and then acidified to pH 2-3 with 1 M hydrochloric acid; the resulting mixture was extracted with ethyl acetate (2×30 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give C71 as a light yellow solid. Yield: 92.0 mg, 0.216 mmol, 79%.
Стадия 5. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-3-[(2S)-2-циклогексил-2-{[(трифторметил)сульфонил]амино}ацетил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (C72).Step 5. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-3-[(2 S )-2-cyclohexyl-2-{[(trifluoromethyl)sulfonyl]amino}acetyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2- carboxamide ( C72 ).
К 0°C раствору C71 (92,0 мг, 0,216 ммоль) и C16, соли HCl (72%, 68,8 мг, 0,238 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 98,4 мг, 0,259 ммоль), затем 4-метилморфолин (76,4 мг, 0,755 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивают при 20°C в течение 2 часов, затем ее выливают в ледяную воду (10 мл) и экстрагируют смесью хлороформа и 2-пропанола (4:1, 4×20 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане), с получением C72 в виде бесцветного стекла. Выход: 100 мг, 0,173 ммоль, 80%. ЖХМС m/z 580,2 [M+H]+.To a 0°C solution of C71 (92.0 mg, 0.216 mmol) and C16, HCl salts (72%, 68.8 mg, 0.238 mmol) in N, N -dimethylformamide (3 ml) was added hexafluorophosphate O- (7-azabenzotriazole -1-yl)- N, N, N', N' -tetramethyluronium (GATU; 98.4 mg, 0.259 mmol), then 4-methylmorpholine (76.4 mg, 0.755 mmol). The reaction mixture was then stirred at 20°C for 2 hours, then it was poured into ice water (10 ml) and extracted with a mixture of chloroform and 2-propanol (4:1, 4×20 ml). The combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and purified by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) to give C72 as a colorless glass. Yield: 100 mg, 0.173 mmol, 80%. LCMS m/z 580.2 [M+H] + .
Стадия 6. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[(2S)-2-циклогексил-2-{[(трифторметил)сульфонил]амино}ацетил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (87).
Раствор трифторуксусного ангидрида (47,1 мг, 0,224 ммоль) в дихлорметане (1 мл) добавляют по каплям к 0°C раствору C72 (100 мг, 0,173 ммоль) и пиридина (41,7 мкл, 0,516 ммоль) в дихлорметане (3 мл). Затем смесь перемешивают в течение 20 часов при комнатной температуре (10°C - 20°C), ее концентрируют в вакууме и повторно растворяют в дихлорметане (3 мл). Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 103 мг, 0,432 ммоль) добавляют, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (20°C) в течение 20 часов. Ее затем разбавляют насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3×20 мл); объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и подвергают сверхкритической жидкостной хроматографии [Колонка: Chiral Technologies Chiralcel OD, 30×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза: 4:1 диоксид углерода/(этанол содержащий 0,1% гидроксид аммония); Скорость потока: 60 мл/минуту]. Фракции, содержащие 87, концентрируют в вакууме ниже 40°C для удаления спиртового сорастворителя. Остаток разбавляют этилацетатом (50 мл) и дихлорметаном (5 мл) и промывают последовательно хлористоводородной кислотой (1 M; 20 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл), и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме, затем смешивают с водой (20 мл) и ацетонитрилом (5 мл); эту смесь лиофилизируют с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[(2S)-2-циклогексил-2-{[(трифторметил)сульфонил]амино}ацетил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (87) в виде белого твердого вещества. Выход: 27,6 мг, 49,1 мкмоль, 28%. ЖХМС m/z 562,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 9,93 (д, J=8,3 Гц, 1H), 9,10 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 5,03-4,94 (м, 1H), 4,15 (с, 1H), 3,88-3,78 (м, 2H), 3,55 (д, J=10,2 Гц, 1H), 3,20-3,11 (м, 1H), 3,10-3,00 (м, 1H), 2,19-2,08 (м, 1H), 2,06-1,95 (м, 1H), 1,85-1,53 (м, 9H), 1,33 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,89 (с, 3H).A solution of trifluoroacetic anhydride (47.1 mg, 0.224 mmol) in dichloromethane (1 ml) was added dropwise to a 0°C solution of C72 (100 mg, 0.173 mmol) and pyridine (41.7 μl, 0.516 mmol) in dichloromethane (3 ml ). The mixture is then stirred for 20 hours at room temperature (10°C - 20°C), it is concentrated in vacuo and redissolved in dichloromethane (3 ml). Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 103 mg, 0.432 mmol) was added and the reaction mixture was stirred at room temperature (20° C.) for 20 hours. It is then diluted with saturated aqueous sodium chloride (10 ml) and extracted with dichloromethane (3×20 ml); the combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and subjected to supercritical liquid chromatography [Column: Chiral Technologies Chiralcel OD, 30×250 mm, 10 µm; Mobile phase: 4:1 carbon dioxide/(ethanol containing 0.1% ammonium hydroxide); Flow rate: 60 ml/minute]. Fractions containing 87 are concentrated under vacuum below 40° C. to remove the alcohol co-solvent. The residue was diluted with ethyl acetate (50 ml) and dichloromethane (5 ml) and washed successively with hydrochloric acid (1 M; 20 ml), saturated aqueous sodium bicarbonate (20 ml), and saturated aqueous sodium chloride. The resulting organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo, then mixed with water (20 ml) and acetonitrile (5 ml); this mixture is lyophilized to give ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[ (2 S )-2-cyclohexyl-2-{[(trifluoromethyl)sulfonyl]amino}acetyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 87 ) as white solid. Yield: 27.6 mg, 49.1 µmol, 28%. LCMS m/z 562.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 9.93 (d, J =8.3 Hz, 1H), 9.10 (d, J =8.7 Hz, 1H), 7 .70 (s, 1H), 5.03-4.94 (m, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.88-3.78 (m, 2H), 3.55 (d, J =10.2 Hz, 1H), 3.20-3.11 (m, 1H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.19-2.08 (m, 1H), 2, 06-1.95 (m, 1H), 1.85-1.53 (m, 9H), 1.33 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
Примеры 88 и 89Examples 88 and 89
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-L-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид и (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-D-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (88 и 89)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-cyclobutyl- N -(trifluoroacetyl)-L-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide and ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S ) -1-Cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-cyclobutyl- N- (trifluoroacetyl)-D-alanyl]-6,6-dimethyl-3- azabicyclo[3,1,0]hexane-2-carboxamide ( 88 and 89 )
Стадия 1. Синтез трет-бутил {1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-3-циклобутил-1-оксопропан-2-ил}карбамата (C73).
0°C раствор C67 (150 мг, 0,371 ммоль) и N-(трет-бутоксикарбонил)-3-циклобутилаланина (99,2 мг, 0,408 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 169 мг, 0,444 ммоль). Затем добавляют по каплям 4-метилморфолин (131 мг, 1,30 ммоль), затем реакционную смесь нагревают до 25°C и перемешивают в течение ночи. Добавляют ледяную воду (10 мл), и полученную смесь экстрагируют смесью хлороформа и 2-пропанола (4:1, 4×20 мл); объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматографию на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) проводят дважды с получением C73 в виде белого твердого вещества, которое содержит смесь двух диастереомеров. Выход: 106 мг, 0,199 ммоль, 54%. ЖХМС m/z 534,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ [8,59 (д, J=5,5 Гц) и 7,85 (д, J=7,7 Гц), всего 1H], 7,20-7,06 (м, 1H), [5,78 (шс) и 5,67 (шс), всего 1H], [5,51 (шс) и 5,40 ш (с), всего 1H], 5,22-5,12 (м, 1H), [4,49-4,39 (м) и 4,38-4,23 (м), всего 3H], 4,17-4,06 (м, 1H), [3,83 (д, J=10,4 Гц) и 3,50 (д, J=10,5 Гц), всего 1H], 3,42-3,28 (м, 2H), 2,50-2,30 (м, 3H), 2,23-2,00 (м, 4H), 2,00-1,77 (м, 4H), 1,73-1,44 (м, 5H), [1,40 (с) и 1,39 (с), всего 9H], [1,07 (с) и 1,03 (с), всего 3H], [0,98 (с) и 0,92 (с), всего 3H].A 0°C solution of C67 (150 mg, 0.371 mmol) and N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-cyclobutylalanine (99.2 mg, 0.408 mmol) in N,N -dimethylformamide (3 ml) was treated with O- (7- azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N', N'- tetramethyluronium (GATU; 169 mg, 0.444 mmol). Then add dropwise 4-methylmorpholine (131 mg, 1.30 mmol), then the reaction mixture is heated to 25°C and stirred overnight. Ice water (10 ml) was added and the resulting mixture was extracted with a mixture of chloroform and 2-propanol (4:1, 4×20 ml); the combined organic layers are dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) is carried out twice to give C73 as a white solid which contains a mixture of two diastereomers. Yield: 106 mg, 0.199 mmol, 54%. LCMS m/z 534.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ [8.59 (d, J =5.5 Hz) and 7.85 (d, J =7.7 Hz), total 1H], 7.20-7 .06 (m, 1H), [5.78 (brs) and 5.67 (brs), 1H total], [5.51 (br) and 5.40 br (s), 1H total], 5.22 -5.12 (m, 1H), [4.49-4.39 (m) and 4.38-4.23 (m), total 3H], 4.17-4.06 (m, 1H), [3.83 (d, J =10.4 Hz) and 3.50 (d, J =10.5 Hz), total 1H], 3.42-3.28 (m, 2H), 2.50- 2.30 (m, 3H), 2.23-2.00 (m, 4H), 2.00-1.77 (m, 4H), 1.73-1.44 (m, 5H), [1 .40 (s) and 1.39 (s), 9H total], [1.07 (s) and 1.03 (s), 3H total], [0.98 (s) and 0.92 (s) , total 3H].
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-L-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида и (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-D-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида [88 (DIAST-1) и 89 (DIAST-2)].
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 5 мл, 20 ммоль) добавляют по каплям к 0°C раствору C73 (106 мг, 0,199 ммоль) в дихлорметане (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 15 минут и затем при 25°C в течение 2 часов, затем ее концентрируют в вакууме с получением продукта со снятой защитой в виде белого твердого вещества: ЖХМС m/z 434,2 [M+H]+. Его растворяют в дихлорметане (3 мл), охлаждают на ледяной бане, и обрабатывают пиридином (79,9 мг, 1,01 ммоль) и раствором трифторуксусного ангидрида (170 мг, 0,809 ммоль) в дихлорметане (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 20 часов; затем добавляют пиридин (40,0 мг, 0,506 ммоль), и перемешивание продолжают в течение еще 12 часов при 25°C. После разбавления дихлорметаном (15 мл), реакционную смесь промывают последовательно хлористоводородной кислотой (1 M; 10 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3×10 мл), и насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл), сушат, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 20% метанол в дихлорметане) затем сверхкритическая жидкостная хроматография [Колонка: Chiral Technologies Chiralpak IC, 30×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза: 3:1 диоксид углерода/(метанол содержащий 0,1% гидроксида аммония); Скорость потока: 70 мл/минуту], с получением разделенных диастереомеров (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-L-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида и (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-D-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида. Какой из продуктов содержит D-аланил конфигурацию, а какой содержит L-аланил конфигурацию определено не было; первый элюированный диастереомер обозначают 88, и второй элюированный диастереомер обозначают как 89. Оба получают в виде белого твердого вещества.A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 5 ml, 20 mmol) was added dropwise to a 0° C. solution of C73 (106 mg, 0.199 mmol) in dichloromethane (5 ml). The reaction mixture was stirred at 0°C for 15 minutes and then at 25°C for 2 hours, then it was concentrated in vacuo to give the deprotected product as a white solid: LCMS m/z 434.2 [M+H ] + . This is dissolved in dichloromethane (3 ml), cooled in an ice bath, and treated with pyridine (79.9 mg, 1.01 mmol) and a solution of trifluoroacetic anhydride (170 mg, 0.809 mmol) in dichloromethane (1.5 ml). The reaction mixture is stirred at 20°C for 20 hours; then pyridine (40.0 mg, 0.506 mmol) is added and stirring is continued for another 12 hours at 25°C. After dilution with dichloromethane (15 ml), the reaction mixture was washed successively with hydrochloric acid (1 M; 10 ml), saturated aqueous sodium bicarbonate solution (3×10 ml), and saturated aqueous sodium chloride solution (10 ml), dried, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 20% methanol in dichloromethane) then supercritical liquid chromatography [Column: Chiral Technologies Chiralpak IC, 30×250 mm, 10 μm; Mobile phase: 3:1 carbon dioxide/(methanol containing 0.1% ammonium hydroxide); Flow rate: 70 ml/minute] to give separated diastereomers (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-3-[3-cyclobutyl- N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide and (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-cyclobutyl- N -(trifluoroacetyl)- D-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide. Which product contains the D-alanyl configuration and which contains the L-alanyl configuration was not determined; the first eluted diastereomer is designated 88 , and the second eluted diastereomer is designated 89 . Both are obtained as a white solid.
88 - Выход: 9,3 мг, 18,2 мкмоль, 9% за 2 стадии. ЖХМС m/z 512,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,75 (шд, J=7,0 Гц, 1H), 8,96 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,71 (с, 1H), 5,00-4,90 (м, 1H), 4,32-4,23 (м, 1H), 4,13 (с, 1H), 3,82 (дд, компонент системы АВХ, J=10,2, 5,4 Гц, 1H), 3,69 (д, половина АВ квартета, J=10,2 Гц, 1H), 3,20-3,02 (м, 2H), 2,44-2,28 (м, 2H), 2,16-2,04 (м, 2H), 2,04-1,91 (м, 2H), 1,87-1,54 (м, 9H), 1,32 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,88 (с, 3H). Время удержания: 2,78 минут (Аналитические условия. Колонка: Chiral Technologies Chiralpak IC-3, 4,6×150 мм, 3 мкм; Подвижная фаза A: диоксид углерода; Подвижная фаза B: метанол содержащий 0,05% диэтиламин (об./об.); Градиент: 5% - 40% B в течение 5 минут, затем 40% B в течение 2,5 минут; Обратное давление: 1500 ф./кв.д.; Скорость потока: 2,5 мл/минуту). 88 - Yield: 9.3 mg, 18.2 µmol, 9% over 2 steps. LCMS m/z 512.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.75 (bd, J =7.0 Hz, 1H), 8.96 (d, J =8.1 Hz, 1H), 7.71 (s , 1H), 5.00-4.90 (m, 1H), 4.32-4.23 (m, 1H), 4.13 (s, 1H), 3.82 (dd, ABX system component, J \u003d 10.2, 5.4 Hz, 1H), 3.69 (d, half AB quartet, J \u003d 10.2 Hz, 1H), 3.20-3.02 (m, 2H), 2.44- 2.28 (m, 2H), 2.16-2.04 (m, 2H), 2.04-1.91 (m, 2H), 1.87-1.54 (m, 9H), 1, 32 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.88 (s, 3H). Retention time: 2.78 minutes (Analytical conditions. Column: Chiral Technologies Chiralpak IC-3, 4.6×150 mm, 3 µm; Mobile phase A: carbon dioxide; Mobile phase B: methanol containing 0.05% diethylamine (vol ./v); Gradient: 5% - 40% B over 5 minutes, then 40% B over 2.5 minutes; Back pressure: 1500 psi; Flow rate: 2.5 ml/ minute).
89 - Выход: 23 мг, 45,0 ммоль, 23% за 2 стадии. 1H ЯМР анализ показывает, что этот продукт существует в виде смеси ротамеров. ЖХМС m/z 512,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ [9,92 ш (с) и 9,65 (шс), всего 1H], [9,22 (д, J=7,7 Гц) и 8,85 (д, J=8,4 Гц), всего 1H], [7,76 (с) и 7,67 (с), всего 1H], [5,11-5,00 (м) и 4,98-4,87 (м), всего 1H], [4,51 (с) и 4,07 (с), всего 1H], [4,47-4,36 (м) и 4,09-4,00 (м), всего 1H], [3,90 (дд, J=10,2, 5,3 Гц) и 3,60-3,45 (м), всего 2H], 3,21-3,00 (м, 2H), 2,44-2,33 (м, 1H), 2,28-1,98 (м, 3H), 1,98-1,52 (м, 10H), [1,49-1,38 (м) и 1,32 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц), всего 2H], [1,04 (с) и 1,02 (с), всего 3H], [0,93 (с) и 0,82 (с), всего 3H]. Время удержания: 4,14 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые применяют для 88). 89 - Yield: 23 mg, 45.0 mmol, 23% over 2 steps. 1 H NMR analysis shows that this product exists as a mixture of rotamers. LCMS m/z 512.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ [9.92 br (s) and 9.65 (br s), total 1H], [9.22 (d, J = 7.7 Hz) and 8, 85 (d, J = 8.4 Hz), 1H total], [7.76 (s) and 7.67 (s), 1H total], [5.11-5.00 (m) and 4.98 -4.87 (m), 1H total], [4.51 (s) and 4.07 (s), 1H total], [4.47-4.36 (m) and 4.09-4.00 (m), total 1H], [3.90 (dd, J = 10.2, 5.3 Hz) and 3.60-3.45 (m), total 2H], 3.21-3.00 ( m, 2H), 2.44-2.33 (m, 1H), 2.28-1.98 (m, 3H), 1.98-1.52 (m, 10H), [1.49-1 .38 (m) and 1.32 (d, half an AB quartet, J = 7.6 Hz), 2H total], [1.04 (s) and 1.02 (s), 3H total], [0, 93 (s) and 0.82 (s), total 3H]. Retention time: 4.14 minutes (Analytical conditions identical to those used for 88 ).
Пример 90Example 90
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-(пиридин-2-ил)-N-(трифторацетил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (90)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-(pyridin-2-yl) -N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 90 )
Стадия 1. Синтез трет-бутил [(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-1-оксо-3-(пиридин-2-ил)пропан-2-ил]карбамата (C74).
К 0°C раствору C67 (250 мг, 0,618 ммоль) и N-(трет-бутоксикарбонил)-3-пиридин-2-ил-L-аланина (198 мг, 0,744 ммоль) в N, N-диметилформамиде (2 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 282 мг, 0,742 ммоль), затем по каплям добавляют раствор 4-метилморфолин (188 мг, 1,86 ммоль) в N, N-диметилформамиде (1 мл). Реакционную смесь затем нагревают до 20°C и перемешивают в течение 2 часов, затем ее разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (10 мл). Твердый сульфат натрия добавляют к водному слою до достижения насыщения, затем водный слой экстрагируют смесью дихлорметана и метанола (10:1, 3×20 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме и очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане), с получением C74 в виде желтой камеди. Выход: 250 мг, 0,449 ммоль, 73%. ЖХМС m/z 557,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, метанол-d 4), характеристические пики: δ 8,49 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,78-7,71 (м, 1H), 7,35 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,30-7,25 (м, 1H), 4,73 (дд, J=8,5, 5,2 Гц, 1H), 4,40 (дд, J=11,8, 4,2 Гц, 1H), 4,30 (с, 1H), 4,01-3,90 (м, 1H), 3,26 (дд, J=14,2, 5,6 Гц, 1H), 2,94 (дд, J=14,1, 8,9 Гц, 1H), 2,65-2,53 (м, 1H), 2,37-2,25 (м, 1H), 2,14-2,04 (м, 1H), 1,91-1,78 (м, 2H), 1,61-1,55 (м, 1H), 1,53 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,34 (с, 9H), 1,08 (с, 3H), 1,00 (с, 3H).To a 0°C solution of C67 (250 mg, 0.618 mmol) and N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-pyridin-2-yl-L-alanine (198 mg, 0.744 mmol) in N,N -dimethylformamide (2 mL) O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 282 mg, 0.742 mmol) was added, then a solution of 4-methylmorpholine (188 mg, 1.86 mmol) in N,N -dimethylformamide (1 ml). The reaction mixture is then heated to 20°C and stirred for 2 hours, then it is diluted with water (10 ml) and extracted with ethyl acetate (10 ml). Solid sodium sulfate is added to the aqueous layer until saturation is reached, then the aqueous layer is extracted with a mixture of dichloromethane and methanol (10:1, 3×20 ml). The combined organic layers were concentrated in vacuo and purified by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) to give C74 as a yellow gum. Yield: 250 mg, 0.449 mmol, 73%. LCMS m/z 557.0 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, methanol- d 4 ), characteristic peaks: δ 8.49 (d, J =5.2 Hz, 1H), 7.78-7.71 (m, 1H), 7.35 ( d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.30-7.25 (m, 1H), 4.73 (dd, J = 8.5, 5.2 Hz, 1H), 4.40 (dd , J = 11.8, 4.2 Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 4.01-3.90 (m, 1H), 3.26 (dd, J = 14.2.5 .6 Hz, 1H), 2.94 (dd, J = 14.1, 8.9 Hz, 1H), 2.65-2.53 (m, 1H), 2.37-2.25 (m, 1H), 2.14-2.04 (m, 1H), 1.91-1.78 (m, 2H), 1.61-1.55 (m, 1H), 1.53 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.34 (s, 9H), 1.08 (s, 3H), 1.00 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-[3-(пиридин-2-ил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, гидрохлорида (C75).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 6 мл) добавляют к 0°C раствору C74 (250 мг, 0,449 ммоль) в дихлорметане (2 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 5 часов при 20°C. ЖХМС анализ показывает превращение в C75: ЖХМС m/z 457,1 [M+H]+. Удаление растворителей в вакууме дает C75 в виде желтого твердого вещества (250 мг); часть этого продукта применяют непосредственно на следующей стадии. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 8,81 (шд, J=5,4 Гц, 1H), 8,43 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,39-8,31 (м, 1H), 7,90 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,87-7,81 (м, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,43 (шс, 1H), 7,06 (шс, 1H), 4,77-4,67 (м, 1H), 4,35 (с, 1H), 4,32-4,23 (м, 1H), 3,94-3,86 (м, 1H), 3,80 (д, половина АВ квартета, J=10,6 Гц, 1H), 3,36-3,25 (м, 1H), 3,20-3,08 (м, 2H), 2,35-2,23 (м, 1H), 2,17-2,06 (м, 1H), 2,01-1,90 (м, 1H), 1,55-1,48 (м, 1H), 1,43 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,04 (с, 3H), 0,96 (с, 3H).A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 6 ml) was added to a 0°C solution of C74 (250 mg, 0.449 mmol) in dichloromethane (2 ml) and the reaction mixture was stirred for 5 hours at 20°C. LCMS analysis shows conversion to C75 : LCMS m/z 457.1 [M+H] + . Removal of solvents in vacuo gave C75 as a yellow solid (250 mg); part of this product is used directly in the next step. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 8.81 (bd, J =5.4 Hz, 1H), 8.43 (d, J =8.3 Hz, 1H), 8 .39-8.31 (m, 1H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.87-7.81 (m, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.43(brs, 1H), 7.06(brs, 1H), 4.77-4.67(m, 1H), 4.35(s, 1H), 4.32-4.23(m, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.80 (d, half AB quartet, J = 10.6 Hz, 1H), 3.36-3.25 (m, 1H), 3 .20-3.08 (m, 2H), 2.35-2.23 (m, 1H), 2.17-2.06 (m, 1H), 2.01-1.90 (m, 1H) , 1.55-1.48 (m, 1H), 1.43 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.04 (s, 3H), 0.96 (s, 3H ).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-(пиридин-2-ил)-N-(трифторацетил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (90).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl 3-[3-(pyridin-2-yl) -N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 90 ).
К 0°C раствору C75 (с предыдущей стадии; 175 мг, ≤0,314 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляют пиридин (197 мг, 2,49 ммоль), затем раствор трифторуксусного ангидрида (186 мг, 0,886 ммоль) в дихлорметане (2 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 2 часов, ее разбавляют водой и экстрагируют смесью дихлорметана и метанола (10:1, 3×15 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме и подвергают хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане), затем сверхкритической жидкостной хроматографии [Колонка: Chiral Technologies Chiralpak AS, 30×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза: 3:1 диоксид углерода/(этанол содержащий 0,1% гидроксид аммония); Скорость потока: 70 мл/минуту], с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-(пиридин-2-ил)-N-(трифторацетил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (90) в виде белого твердого вещества. Выход: 25 мг, 46,8 мкмоль, 15% за 2 стадии. ЖХМС m/z 535,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,92 (д, J=7,5 Гц, 1H), 8,91 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,51 (шд, J=5 Гц, 1H), 7,75-7,68 (м, 2H), 7,28 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,25 (дд, J=7,3, 5,1 Гц, 1H), 5,00-4,88 (м, 2H), 4,15 (с, 1H), 3,86 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,4 Гц, 1H), 3,70 (д, половина АВ квартета, J=10,3 Гц, 1H), 3,21-3,04 (м, 4H), 2,42-2,31 (м, 1H), 2,18-2,04 (м, 2H), 1,76 (ддд, J=13,5, 9,6, 6,6 Гц, 1H), 1,74-1,62 (м, 1H), 1,62-1,53 (м, 1H), 1,33 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,89 (с, 3H).To a 0°C solution of C75 (from the previous step; 175 mg, ≤0.314 mmol) in dichloromethane (6 mL) was added pyridine (197 mg, 2.49 mmol) followed by a solution of trifluoroacetic anhydride (186 mg, 0.886 mmol) in dichloromethane ( 2 ml). The reaction mixture is then stirred at 20°C for 2 hours, diluted with water and extracted with a mixture of dichloromethane and methanol (10:1, 3×15 ml). The combined organic layers are concentrated in vacuo and subjected to silica gel chromatography (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane), then supercritical liquid chromatography [Column: Chiral Technologies Chiralpak AS, 30×250 mm, 10 μm; Mobile phase: 3:1 carbon dioxide/(ethanol containing 0.1% ammonium hydroxide); Flow rate: 70 ml/minute] to give (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl] ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-(pyridin-2-yl) -N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 90 ) as a white solid. Yield: 25 mg, 46.8 µmol, 15% over 2 steps. LCMS m/z 535.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.92 (d, J =7.5 Hz, 1H), 8.91 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.51 (bd , J = 5 Hz, 1H), 7.75-7.68 (m, 2H), 7.28 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 7.3, 5.1 Hz, 1H), 5.00-4.88 (m, 2H), 4.15 (s, 1H), 3.86 (dd, ABX system component, J =10.3, 5.4 Hz , 1H), 3.70 (d, half AB quartet, J = 10.3 Hz, 1H), 3.21-3.04 (m, 4H), 2.42-2.31 (m, 1H), 2.18-2.04 (m, 2H), 1.76 (ddd, J =13.5, 9.6, 6.6 Hz, 1H), 1.74-1.62 (m, 1H), 1.62-1.53 (m, 1H), 1.33 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.89 (s, 3H) .
Пример 91Example 91
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{N-[(4-фторфенокси)ацетил]-3-метил-L-валил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (91)(1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-{ N -[(4 -fluorophenoxy)acetyl]-3-methyl-L-valyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 91 )
Стадия 1. Синтез трет-бутил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил}карбамата (C76).
Раствор C32 (15,4 г, 41,8 ммоль) и C16, соли HCl (75%, 11,6 г, 41,9 ммоль) в N, N-диметилформамиде (380 мл) охлаждают до -5°C - 0°C. Туда добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 18,3 г, 48,1 ммоль) и 4-метилморфолин (12,7 г, 126 ммоль) при -5°C - 0°C. Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1,5 часов, ее выливают в ледяную воду (400 мл) и полученную смесь экстрагируют этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои последовательно промывают водным раствором лимонной кислоты (1 M; 120 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (120 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (3×60 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и объединяют с неочищенным продуктом из аналогичной реакции, проводимой с применением C32 (1,08 г, 2,93 ммоль). Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) дает C76 в виде белого твердого вещества (9,80 г). Объединенные водные слои экстрагируют смесью хлороформа и 2-пропанола (4:1, 3×100 мл); концентрация этих объединенных экстрактов с последующей хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) дает дополнительный C76 в виде белого твердого вещества (2,3 г). Объединенный выход: 12,1 гм, 23,2 ммоль, 52%. ЖХМС m/z 522,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 8,28 (шд, J=5,9 Гц, 1H), 7,20 (шс, 1H), 5,71 (шс, 1H), 5,38 (шс, 1H), 5,10 (шд, J=10,3 Гц, 1H), 4,47-4,38 (м, 1H), 4,28-4,20 (м, 2H), 4,12 (дд, компонент системы АВХ, J=10,2, 4,0 Гц, 1H), 3,99 (д, половина АВ квартета, J=10,2 Гц, 1H), 3,40-3,33 (м, 2H), 2,53-2,35 (м, 2H), 2,17-2,07 (м, 1H), 2,00-1,81 (м, 2H), 1,52-1,4 (м, 2H, предполагаемый; значительно закрыт сигналом пика воды и трет-бутила), 1,39 (с, 9H), 1,02 (с, 3H), 1,01 (с, 9H), 0,88 (с, 3H).A solution of C32 (15.4 g, 41.8 mmol) and C16, HCl salts (75%, 11.6 g, 41.9 mmol) in N,N -dimethylformamide (380 ml) is cooled to -5°C - 0 °C O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 18.3 g, 48.1 mmol) and 4-methylmorpholine (12.7 g, 126 mmol) at -5°C - 0°C. Then the reaction mixture was stirred at 0°C for 1.5 hours, it was poured into ice water (400 ml) and the resulting mixture was extracted with ethyl acetate (3×200 ml). The combined organic layers are washed successively with aqueous citric acid (1 M; 120 ml), saturated aqueous sodium bicarbonate (120 ml) and saturated aqueous sodium chloride (3×60 ml), dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo . and combined with the crude product from a similar reaction using C32 (1.08 g, 2.93 mmol). Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) gave C76 as a white solid (9.80 g). The combined aqueous layers are extracted with a mixture of chloroform and 2-propanol (4:1, 3×100 ml); concentration of these combined extracts followed by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) gave additional C76 as a white solid (2.3 g). Combined yield: 12.1 gm, 23.2 mmol, 52%. LCMS m/z 522.5 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 8.28 (brb, J = 5.9 Hz, 1H), 7.20 (bbr, 1H), 5.71 (brb, 1H), 5.38 ( brs, 1H), 5.10 (brd, J =10.3 Hz, 1H), 4.47-4.38 (m, 1H), 4.28-4.20 (m, 2H), 4.12 (dd, component of the ABX system, J = 10.2, 4.0 Hz, 1H), 3.99 (d, half of the AB quartet, J = 10.2 Hz, 1H), 3.40-3.33 (m , 2H), 2.53-2.35 (m, 2H), 2.17-2.07 (m, 1H), 2.00-1.81 (m, 2H), 1.52-1.4 (m, 2H, estimated; significantly obscured by water and t- butyl peak signal), 1.39 (s, 9H), 1.02 (s, 3H), 1.01 (s, 9H), 0.88 (s , 3H).
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-(3-метил-L-валил)-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, гидрохлорида (C77).
К 0°C раствору C76 (12,1 г, 23,2 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляют раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 250 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 2 часов, ее фильтруют. Фильтровальную лепешку перемешивают метил трет-бутиловым эфиром (250 мл) в течение 18 часов; фильтрация дает C77 в виде светло-желтого/белого твердого вещества (10,89 г). ЖХМС m/z 422,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,38 (д, J=9,0 Гц, 1H), 8,19 (шс, 3H), 7,57 (шс, 1H), 7,41 (шс, 1H), 7,04 (шс, 1H), 4,35-4,27 (м, 1H), 4,34 (с, 1H), 3,85-3,72 (м, 2H), 3,65 (д, половина АВ квартета, J=10,8 Гц, 1H), 3,16-3,09 (м, 1H), 3,05-2,95 (м, 1H), 2,43-2,31 (м, 1H), 2,17-2,04 (м, 1H), 2,00-1,89 (м, 1H), 1,71-1,42 (м, 3H), 1,38 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,02 (с, 3H), 1,02 (с, 9H), 0,97 (с, 3H).To a 0°C solution of C76 (12.1 g, 23.2 mmol) in dichloromethane (50 ml) was added a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 250 ml). Then the reaction mixture is stirred at 20°C for 2 hours, it is filtered. The filter cake was stirred with methyl t- butyl ether (250 mL) for 18 hours; filtration gave C77 as a light yellow/white solid (10.89 g). LCMS m/z 422.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.38 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.19 (brine, 3H), 7.57 (brine, 1H), 7.41 (brs, 1H), 7.04 (brs, 1H), 4.35-4.27 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.85-3.72 (m, 2H), 3.65 (d, half AB quartet, J = 10.8 Hz, 1H), 3.16-3.09 (m, 1H), 3.05-2.95 (m, 1H), 2.43- 2.31 (m, 1H), 2.17-2.04 (m, 1H), 2.00-1.89 (m, 1H), 1.71-1.42 (m, 3H), 1, 38 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.02 (s, 3H), 1.02 (s, 9H), 0.97 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-3-[N-(хлорацетил)-3-метил-L-валил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (C78).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-3-[ N- (chloroacetyl)-3-methyl-L-valyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( C78 ).
Триэтиламин (2,21 г, 21,8 ммоль) добавляют к 0°C раствору C77 (с предыдущей стадии; 2,50 г, ≤5,33 ммоль) в дихлорметане (100 мл). Раствор хлорацетилхлорида (1,23 г, 10,9 ммоль) в дихлорметане (9 мл) добавляют в реакционную смесь по каплям, и перемешивание продолжают при 0°C в течение 1 часа. Затем добавляют воду (50 мл), и полученную смесь экстрагируют смесь. хлороформа и 2-пропанола (4:1, 3×50 мл); объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) дает C78 в виде белого твердого вещества. Выход: 1,21 г, 2,43 ммоль, 46% за 2 стадии. ЖХМС m/z 498,1 (наблюдается паттерн изотопа хлора) [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,30-8,22 (м, 2H), 7,54 (шс, 1H), 7,30 (шс, 1H), 7,03 (шс, 1H), 4,35 (д, J=8,9 Гц, 1H), 4,29 (ддд, J=12,1, 8,7, 3,4 Гц, 1H), 4,24 (с, 1H), 4,11 (AB квартет, J AB=12,4 Гц, δνAB=14,3 Гц, 2H), 3,86 (дд, компонент системы АВХ, J=10,2, 5,4 Гц, 1H), 3,72 (д, половина АВ квартета, J=10,3 Гц, 1H), 3,18-3,08 (м, 1H), 3,07-2,97 (м, 1H), 2,48-2,36 (м, 1H), 2,19-2,08 (м, 1H), 1,99-1,88 (м, 1H), 1,69-1,43 (м, 3H), 1,37 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,01 (с, 3H), 0,94 (с, 9H), 0,84 (с, 3H).Triethylamine (2.21 g, 21.8 mmol) is added to a 0°C solution of C77 (from the previous step; 2.50 g, ≤5.33 mmol) in dichloromethane (100 ml). A solution of chloroacetyl chloride (1.23 g, 10.9 mmol) in dichloromethane (9 ml) was added dropwise to the reaction mixture, and stirring was continued at 0° C. for 1 hour. Water (50 ml) was then added and the resulting mixture was extracted into a mixture. chloroform and 2-propanol (4:1, 3×50 ml); the combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (50 ml), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Purification by chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) gave C78 as a white solid. Yield: 1.21 g, 2.43 mmol, 46% over 2 steps. LCMS m/z 498.1 (chlorine isotope pattern observed) [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.30-8.22 (m, 2H), 7.54 (br br, 1H), 7.30 (br br, 1H), 7.03 (br br, 1H), 4.35 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.29 (ddd, J = 12.1, 8.7, 3.4 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H ), 4.11 (AB quartet, J AB= 12.4 Hz, δν AB= 14.3 Hz, 2H), 3.86 (dd, ABX system component, J = 10.2, 5.4 Hz, 1H ), 3.72 (d, half AB quartet, J = 10.3 Hz, 1H), 3.18-3.08 (m, 1H), 3.07-2.97 (m, 1H), 2, 48-2.36 (m, 1H), 2.19-2.08 (m, 1H), 1.99-1.88 (m, 1H), 1.69-1.43 (m, 3H), 1.37 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.94 (s, 9H), 0.84 (s, 3H).
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-3-{N-[(4-фторфенокси)ацетил]-3-метил-L-валил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (C79).Step 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-3-{ N -[(4-fluorophenoxy)acetyl]-3-methyl-L-valyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( C79 ).
4-Фторфенол (49,5 мг, 0,442 ммоль) добавляют к смеси фторида цезия (67,1 мг, 0,442 ммоль) в N, N-диметилформамиде (3 мл) и смесь перемешивают при 65°C в течение 1 часа, затем добавляют C78 (110,0 мг, 0,221 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 65°C в течение 8 часов. Ее затем объединяют с аналогичной реакцией, проводимой с применением C78 (30 мг, 60 мкмоль), выливают в воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают последовательно водой (20 мл), хлористоводородной кислотой (1 M; 10 мл), насыщенным водным раствором карбоната натрия (10 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) дает C79 в виде белого стекла. Объединенный выход: 100 мг, 0,174 ммоль, 62%. ЖХМС m/z 574,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 8,23 (шд, J=6 Гц, 1H), 7,19 (шс, 1H), 7,04 (шд, J=10,2 Гц, 1H), 6,99 (дд, J=9,2, 8,0 Гц, 2H), 6,85 (дд, компонент системы АВХ, J=9,1, 4,2 Гц, 2H), 5,78 (шс, 1H), 5,46 (шс, 1H), 4,65 (д, J=9,8 Гц, 1H), 4,52-4,38 (м, 3H), 4,22 (с, 1H), 4,14 (дд, компонент системы АВХ, J=10,3, 5,3 Гц, 1H), 3,93 (д, половина АВ квартета, J=10,3 Гц, 1H), 3,41-3,32 (м, 2H), 2,55-2,34 (м, 2H), 2,14-2,05 (м, 1H), 2,03-1,80 (м, 3H), 1,03 (с, 3H), 1,00 (с, 9H), 0,86 (с, 3H).4-Fluorophenol (49.5 mg, 0.442 mmol) was added to a mixture of cesium fluoride (67.1 mg, 0.442 mmol) in N,N -dimethylformamide (3 ml) and the mixture was stirred at 65°C for 1 hour, then added C78 (110.0 mg, 0.221 mmol) and the reaction mixture was stirred at 65°C for 8 hours. It is then combined with a similar reaction carried out using C78 (30 mg, 60 μmol), poured into water (10 ml) and extracted with ethyl acetate (3×10 ml). The combined organic layers were washed successively with water (20 ml), hydrochloric acid (1 M; 10 ml), saturated aqueous sodium carbonate (10 ml) and saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) gives C79 as a white glass. Combined yield: 100 mg, 0.174 mmol, 62%. LCMS m/z 574.2 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 8.23 (brd, J =6 Hz, 1H), 7.19 (brb, 1H), 7.04 (brd, J =10.2 Hz, 1H) , 6.99 (dd, J =9.2, 8.0 Hz, 2H), 6.85 (dd, ABX system component, J =9.1, 4.2 Hz, 2H), 5.78 (ws , 1H), 5.46 (brs, 1H), 4.65 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.52-4.38 (m, 3H), 4.22 (s, 1H) , 4.14 (dd, component of the ABX system, J = 10.3, 5.3 Hz, 1H), 3.93 (d, half of the AB quartet, J = 10.3 Hz, 1H), 3.41-3 .32 (m, 2H), 2.55-2.34 (m, 2H), 2.14-2.05 (m, 1H), 2.03-1.80 (m, 3H), 1.03 (s, 3H), 1.00 (s, 9H), 0.86 (s, 3H).
Стадия 5. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{N-[(4-фторфенокси)ацетил]-3-метил-L-валил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (91).Stage 5. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-{ N -[(4-fluorophenoxy)acetyl]-3-methyl-L-valyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 91 ).
Раствор метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 125 мг, 0,524 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляют по каплям к 10°C (комнатная температуре) раствору C79 (100 мг, 0,174 ммоль) в дихлорметане (4 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 10°C в течение 16 часов, ее разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (2×10 мл) и концентрируют в вакууме; хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане), затем сверхкритическая жидкостная хроматография [Колонка: Chiral Technologies Chiralcel OD, 30×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза: 4:1 диоксид углерода/(этанол содержащий 0,1% гидроксид аммония); Скорость потока: 60 мл/минуту], дает (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-{N-[(4-фторфенокси)ацетил]-3-метил-L-валил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (91) в виде белого твердого вещества. Выход: 55 мг, 99,0 мкмоль, 57%. ЖХМС m/z 556,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,01 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,96 (д, J=9,1 Гц, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,13-7,04 (м, 2H), 6,90-6,84 (м, 2H), 4,97 (ддд, J=10,9, 8,5, 5,1 Гц, 1H), 4,61-4,50 (м, 2H), 4,39 (д, J=8,9 Гц, 1H), 4,12 (с, 1H), 3,87 (дд, компонент системы АВХ, J=10,4, 5,5 Гц, 1H), 3,73 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,19-3,09 (м, 1H), 3,09-2,99 (м, 1H), 2,47-2,36 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,21-2,02 (м, 2H), 1,79-1,65 (м, 2H), 1,53 (дд, J=7,6, 5,4 Гц, 1H), 1,29 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,00 (с, 3H), 0,93 (с, 9H), 0,75 (с, 3H).A solution of methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 125 mg, 0.524 mmol) in dichloromethane (2 mL) was added dropwise to a 10°C (room temperature) solution of C79 (100 mg, 0.174 mmol) in dichloromethane ( 4 ml). Then the reaction mixture was stirred at 10°C for 16 hours, it was diluted with water (10 ml) and extracted with dichloromethane (3×10 ml). The combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride (2×10 ml) and concentrated in vacuo ; chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane), then supercritical liquid chromatography [Column: Chiral Technologies Chiralcel OD, 30×250 mm, 10 μm; Mobile phase: 4:1 carbon dioxide/(ethanol containing 0.1% ammonium hydroxide); Flow rate: 60 ml/minute] gives (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl }-3-{ N -[(4-fluorophenoxy)acetyl]-3-methyl-L-valyl}-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 91 ) in form of a white solid. Yield: 55 mg, 99.0 µmol, 57%. LCMS m/z 556.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.01 (d, J =8.5 Hz, 1H), 7.96 (d, J =9.1 Hz, 1H), 7.68 (s , 1H), 7.13-7.04 (m, 2H), 6.90-6.84 (m, 2H), 4.97 (ddd, J =10.9, 8.5, 5.1 Hz , 1H), 4.61-4.50 (m, 2H), 4.39 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.12 (s, 1H), 3.87 (dd, system component ABX, J = 10.4, 5.5 Hz, 1H), 3.73 (d, half AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 3 .09-2.99 (m, 1H), 2.47-2.36 (m, 1H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.21-2.02 (m, 2H), 1.79-1 .65 (m, 2H), 1.53 (dd, J = 7.6, 5.4 Hz, 1H), 1.29 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1, 00 (s, 3H), 0.93 (s, 9H), 0.75 (s, 3H).
Пример 92Example 92
3-Метил-N-[(4-метилфенил)ацетил]-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид (92)3-Methyl- N -[(4-methylphenyl)acetyl]-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidine-3- yl]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 92 )
Смесь C51 (68,0 мг, 0,12 ммоль) и раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 1 мл, 4 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут, затем реакционную смесь концентрируют в вакууме для удаления растворителя, затем далее отсасывают с применением высокого вакуума для удаления остаточного гидрохлорида. (4-Метилфенил)уксусную кислоту (18,6 мг, 0,124 ммоль) добавляют к остатку; полученную смесь растворяют в N, N-диметилформамиде (1,0 мл) и охлаждают до -30°C. После добавления N, N-диизопропилэтиламина (64,7 мкл, 0,371 ммоль), затем гексафторфосфата O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 61,2 мг, 0,161 ммоль), реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 1 часа и затем обрабатывают водным раствором бикарбоната натрия. Смесь экстрагируют 5 раз этилацетатом, и объединенные органические слои концентрируют при пониженном давлении. Остаток затем растворяют в дихлорметане (1 мл), обрабатывают метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбаматом, внутренней солью (реагентом Бурджеса; 88,5 мг, 0,371 ммоль), и перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем реакционную смесь обрабатывают разбавленным водным раствором карбоната натрия и экстрагируют дважды этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, концентрируют в вакууме, и очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters XBridge C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: water; Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 20% - 60% B в течение 8,5 минут, затем 60% - 95% B в течение 0,5 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением 3-метил-N-[(4-метилфенил)ацетил]-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамида (92). Выход: 20,7 мг, 36,7 мкмоль, 31%. ЖХМС m/z 564,8 [M+H]+. Время удержания: 2,71 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis dC18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5,0% - 95% B, линейный, в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 2 мл/минуту).A mixture of C51 (68.0 mg, 0.12 mmol) and a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 1 ml, 4 mmol) was stirred at room temperature for 5 minutes, then the reaction mixture was concentrated in vacuo to remove the solvent , then further aspirated using high vacuum to remove residual hydrochloride. (4-Methylphenyl)acetic acid (18.6 mg, 0.124 mmol) was added to the residue; the resulting mixture was dissolved in N,N -dimethylformamide (1.0 ml) and cooled to -30°C. After adding N, N -diisopropylethylamine (64.7 μl, 0.371 mmol), then O - (7-azabenzotriazol-1-yl) - N, N, N', N' -tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 61.2 mg, 0.161 mmol), the reaction mixture is warmed to room temperature for 1 hour and then treated with aqueous sodium bicarbonate. The mixture is extracted 5 times with ethyl acetate and the combined organic layers are concentrated under reduced pressure. The residue was then dissolved in dichloromethane (1 ml), treated with methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 88.5 mg, 0.371 mmol), and stirred at room temperature for 1 hour, then the reaction mixture was treated with dilute aqueous sodium carbonate solution and extracted twice with ethyl acetate. The combined organic layers are dried over magnesium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and purified by reverse phase HPLC (Column: Waters XBridge C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: water; Mobile phase B: acetonitrile; Gradient: 20 % - 60% B for 8.5 minutes, then 60% - 95% B for 0.5 minutes, then 95% B for 1.0 minutes; Flow rate: 25 ml / minute) to obtain 3-methyl - N -[(4-methylphenyl)acetyl]-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl }-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 92 ). Yield: 20.7 mg, 36.7 µmol, 31%. LCMS m/z 564.8 [M+H] + . Retention time: 2.71 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis dC18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5.0% - 95% B, linear over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minutes; Speed flow: 2 ml/minute).
Пример 93Example 93
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-(1H-пиразол-1-ил)-N-(трифторацетил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (93)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-( 1H -pyrazol-1-yl) -N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 93 )
Стадия 1. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, гидрохлорида (C67, соль HCl).
В раствор C66 (9,97 г, 24,4 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляют раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 90 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (25°C) в течение 2 часов, затем ЖХМС анализ показывает превращение в C67: ЖХМС m/z 309,0 [M+H]+. Концентрация в вакууме дает C67, соль HCl в виде белого твердого вещества. Выход: 8,10 г, 23,5 ммоль, 96%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 10,20-10,08 (м, 1H), 8,93 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,86-8,71 (м, 1H), 7,68 (шс, 1H), 7,63 (шс, 1H), 7,12 (шс, 1H), 4,30 (ддд, J=10,9, 8,1, 4,1 Гц, 1H), 4,09-4,02 (м, 1H), 3,63-3,53 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком воды), 3,22-2,99 (м, 3H), 2,34-2,22 (м, 1H), 2,21-2,11 (м, 1H), 2,01 (ддд, J=13,6, 11,1, 3,6 Гц, 1H), 1,80-1,66 (м, 3H), 1,55 (ддд, J=13,6, 11,4, 4,1 Гц, 1H), 1,08 (с, 3H), 1,05 (с, 3H).To a solution of C66 (9.97 g, 24.4 mmol) in dichloromethane (50 ml) was added a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 90 ml). The reaction mixture was stirred at room temperature (25° C.) for 2 hours, then LCMS analysis showed conversion to C67 : LCMS m/z 309.0 [M+H] + . Concentration in vacuo gives C67, the HCl salt as a white solid. Yield: 8.10 g, 23.5 mmol, 96%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 10.20-10.08 (m, 1H), 8.93 (d, J =8.0 Hz, 1H), 8.86-8.71 ( m, 1H), 7.68 (brs, 1H), 7.63 (brs, 1H), 7.12 (brs, 1H), 4.30 (ddd, J =10.9, 8.1, 4, 1 Hz, 1H), 4.09-4.02 (m, 1H), 3.63-3.53 (m, 1H, estimated; partially covered by water peak), 3.22-2.99 (m, 3H ), 2.34-2.22 (m, 1H), 2.21-2.11 (m, 1H), 2.01 (ddd, J = 13.6, 11.1, 3.6 Hz, 1H ), 1.80-1.66 (m, 3H), 1.55 (ddd, J = 13.6, 11.4, 4.1 Hz, 1H), 1.08 (s, 3H), 1, 05(s, 3H).
Стадия 2. Синтез трет-бутил [(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-1-оксо-3-(1H-пиразол-1-ил)пропан-2-ил]карбамата (C80).
0°C раствор C67, соли HCl (300 мг, 0,870 ммоль) и N-(трет-бутоксикарбонил)-3-(1H-пиразол-1-ил)-L-аланина (222 мг, 0,870 ммоль) в N, N-диметилформамиде (10 мл) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 430 мг, 1,13 ммоль) и 4-метилморфолином (264 мг, 2,61 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 часов, ее разбавляют водой (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (20 мл). Водный слой затем насыщают добавлением твердого сульфата натрия и экстрагируют смесью дихлорметана и метанола (10:1, 4×30 мл). Объединенные органические слои концентрируют в вакууме и подвергают хроматографии на силикагеле дважды (Градиент #1: 0% - 10% метанол в дихлорметане; Градиент #2: 0% - 25% метанол в дихлорметане), с получением C80 в виде ярко-желтого твердого вещества. Выход: 340 мг, 0,623 ммоль, 72%. ЖХМС m/z 546,1 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 8,29 (шд, J=8,6 Гц, 1H), 7,70-7,66 (м, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,51 (шс, 1H), 7,38 (шд, J=8,2 Гц, 1H), 7,15-7,06 (м, 2H), 6,23-6,19 (м, 1H), 4,53-4,43 (м, 1H), 4,34-4,18 (м, 3H), 4,17 (с, 1H), 3,76 (д, половина АВ квартета, J=10,5 Гц, 1H), 3,65 (дд, компонент системы АВХ, J=10,4, 5,4 Гц, 1H), 3,20-3,06 (м, 2H), 2,36-2,24 (м, 1H), 2,19-2,08 (м, 1H), 2,02-1,90 (м, 1H), 1,71-1,55 (м, 2H), 1,53-1,46 (м, 1H), 1,39 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,30 (с, 9H), 1,01 (с, 3H), 0,89 (с, 3H).0°C C67 solution, HCl salts (300 mg, 0.870 mmol) and N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-(1 H -pyrazol-1-yl)-L-alanine (222 mg, 0.870 mmol) in N, N -dimethylformamide (10 ml) was treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 430 mg, 1.13 mmol) and 4-methylmorpholine (264 mg , 2.61 mmol). Then the reaction mixture was stirred at 0°C for 2 hours, it was diluted with water (50 ml) and extracted with ethyl acetate (20 ml). The aqueous layer was then saturated with the addition of solid sodium sulfate and extracted with a mixture of dichloromethane and methanol (10:1, 4×30 ml). The combined organic layers were concentrated in vacuo and subjected to silica gel chromatography twice (Gradient #1: 0%-10% methanol in dichloromethane; Gradient #2: 0%-25% methanol in dichloromethane) to give C80 as a bright yellow solid . Yield: 340 mg, 0.623 mmol, 72%. LCMS m/z 546.1 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.29 (brd, J = 8.6 Hz, 1H), 7.70-7.66 (m, 1H), 7.64 (s, 1H) , 7.51(brs, 1H), 7.38(brd, J =8.2Hz, 1H), 7.15-7.06(m, 2H), 6.23-6.19(m, 1H ), 4.53-4.43 (m, 1H), 4.34-4.18 (m, 3H), 4.17 (s, 1H), 3.76 (d, half of the AB quartet, J = 10 .5 Hz, 1H), 3.65 (dd, ABX system component, J = 10.4, 5.4 Hz, 1H), 3.20-3.06 (m, 2H), 2.36-2, 24 (m, 1H), 2.19-2.08 (m, 1H), 2.02-1.90 (m, 1H), 1.71-1.55 (m, 2H), 1.53- 1.46 (m, 1H), 1.39 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.30 (s, 9H), 1.01 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-[3-(1H-пиразол-1-ил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, гидрохлорида (C81).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-6,6-dimethyl-3-[3-( 1H -pyrazol-1-yl)-L-alanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide hydrochloride ( C81 ).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 15 мл) добавляют к 0°C раствору C80 (340 мг, 0,623 ммоль) в дихлорметане (4 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при 20°C в течение 1 часа, ее фильтруют, и фильтровальную лепешку промывают дихлорметаном (3×10 мл). Объединенные фильтраты концентрируют в вакууме с получением C81 в виде белого твердого вещества. Выход: 244 мг, 0,506 ммоль, 81%. ЖХМС m/z 446,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 8,57-8,48 (м, 3H), 8,42 (шд, J=8,6 Гц, 1H), 7,81 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,65 (шс, 1H), 7,58 (д, J=1,9 Гц, 1H), 7,35 (шс, 1H), 7,09 (шс, 1H), 6,27 (дд, J=2, 2 Гц, 1H), 4,59 (дд, компонент системы АВХ, J=14,4, 4,7 Гц, 1H), 4,54-4,41 (м, 2H), 4,36-4,25 (м, 1H), 4,30 (с, 1H), 3,66-3,60 (м, 1H), 3,42-3,33 (м, 1H), 3,21-3,03 (м, 2H), 2,31-2,20 (м, 1H), 2,18-2,06 (м, 1H), 1,97 (ддд, J=13,5, 11,5, 3,7 Гц, 1H), 1,46 (дд, компонент системы АВХ, J=7,7, 5,3 Гц, 1H), 1,41 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,01 (с, 3H), 0,92 (с, 3H).A solution of the hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 15 ml) was added to a 0° C. solution of C80 (340 mg, 0.623 mmol) in dichloromethane (4 ml). The reaction mixture is then stirred at 20°C for 1 hour, it is filtered and the filter cake is washed with dichloromethane (3×10 ml). The combined filtrates are concentrated in vacuo to give C81 as a white solid. Yield: 244 mg, 0.506 mmol, 81%. LCMS m/z 446.0 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 8.57-8.48 (m, 3H), 8.42 (bd, J =8.6 Hz, 1H), 7.81 ( d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.65 (brs, 1H), 7.58 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.35 (brs, 1H), 7.09 ( brs, 1H), 6.27 (dd, J =2.2 Hz, 1H), 4.59 (dd, ABX system component, J =14.4, 4.7 Hz, 1H), 4.54-4 .41 (m, 2H), 4.36-4.25 (m, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.66-3.60 (m, 1H), 3.42-3.33 (m, 1H), 3.21-3.03 (m, 2H), 2.31-2.20 (m, 1H), 2.18-2.06 (m, 1H), 1.97 (ddd , J = 13.5, 11.5, 3.7 Hz, 1H), 1.46 (dd, ABX system component, J = 7.7, 5.3 Hz, 1H), 1.41 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.92 (s, 3H).
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-(1H-пиразол-1-ил)-N-(трифторацетил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (93).Stage 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl 3-[3-( 1H -pyrazol-1-yl) -N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 93 ).
0°C раствор C81 (120 мг, 0,249 ммоль) в дихлорметане (6,0 мл) обрабатывают пиридином (170 мг, 2,15 ммоль), затем добавляют раствор трифторуксусного ангидрида (158 мг, 0,752 ммоль) в дихлорметане (2,0 мл). Реакционную смесь затем нагревают до 20°C и перемешивают в течение 3 часов, затем ее разбавляют водой (20 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои промывают хлористоводородной кислотой (1 M; 20 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (2×20 мл), сушат, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Хроматография на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане), затем сверхкритическая жидкостная хроматография [Колонка: Chiral Technologies Chiralpak AD, 30×250 мм, 10 мкм; Подвижная фаза: 4:1 диоксид углерода/(этанол содержащий 0,1% гидроксид аммония); Скорость потока: 60 мл/минуту], дает (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-(1H-пиразол-1-ил)-N-(трифторацетил)-L-аланил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (93) в виде белого твердого вещества. Выход: 15,0 мг, 28,6 мкмоль, 11%. ЖХМС m/z 524,0 [M+H]+. 1H ЯМР (500 MГц, ДМСО-d 6) δ 10,03 (шс, 1H), 8,92 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,74 (шс, 1H), 7,69 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,51 (д, J=1,9 Гц, 1H), 6,23 (дд, J=2, 2 Гц, 1H), 5,01-4,93 (м, 1H), 4,91-4,83 (м, 1H), 4,49-4,39 (м, 2H), 4,13 (с, 1H), 3,73 (дд, компонент системы АВХ, J=10,4, 5,4 Гц, 1H), 3,60 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,21-3,09 (м, 2H), 2,40-2,31 (м, 1H), 2,20-2,10 (м, 2H), 1,79 (ддд, J=13,7, 9,5, 6,8 Гц, 1H), 1,76-1,66 (м, 1H), 1,56 (дд, J=7,5, 5,4 Гц, 1H), 1,36 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,02 (с, 3H), 0,85 (с, 3H).A 0°C solution of C81 (120 mg, 0.249 mmol) in dichloromethane (6.0 mL) was treated with pyridine (170 mg, 2.15 mmol) followed by a solution of trifluoroacetic anhydride (158 mg, 0.752 mmol) in dichloromethane (2.0 ml). The reaction mixture is then heated to 20°C and stirred for 3 hours, then it is diluted with water (20 ml) and extracted with dichloromethane (3×20 ml). The combined organic layers are washed with hydrochloric acid (1 M; 20 ml) and saturated aqueous sodium chloride solution (2×20 ml), dried, filtered, and concentrated in vacuo . Chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane), then supercritical liquid chromatography [Column: Chiral Technologies Chiralpak AD, 30×250 mm, 10 μm; Mobile phase: 4:1 carbon dioxide/(ethanol containing 0.1% ammonium hydroxide); Flow rate: 60 ml/minute] gives (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl }-6,6-dimethyl-3-[3-(1 H -pyrazol-1-yl)- N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 93 ) as a white solid. Yield: 15.0 mg, 28.6 µmol, 11%. LCMS m/z 524.0 [M+H] + . 1 H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 10.03 (br s, 1H), 8.92 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.74 (br s, 1H), 7.69 (d, J =2.3 Hz, 1H), 7.51 (d, J =1.9 Hz, 1H), 6.23 (dd, J =2.2 Hz, 1H), 5.01-4 .93 (m, 1H), 4.91-4.83 (m, 1H), 4.49-4.39 (m, 2H), 4.13 (s, 1H), 3.73 (dd, component ABX system, J = 10.4, 5.4 Hz, 1H), 3.60 (d, half AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 3.21-3.09 (m, 2H), 2.40-2.31 (m, 1H), 2.20-2.10 (m, 2H), 1.79 (ddd, J =13.7, 9.5, 6.8 Hz, 1H), 1.76-1.66 (m, 1H), 1.56 (dd, J = 7.5, 5.4 Hz, 1H), 1.36 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.02 (s, 3H), 0.85 (s, 3H).
Пример 94Example 94
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[(2S)-4,4-дифтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бутаноил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (94)(1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[(2 S )- 4,4-difluoro-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)butanoyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 94 )
Стадия 1. Синтез 9H-флуорен-9-илметил {(2S)-1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-4,4-дифтор-1-оксобутан-2-ил}карбамата (C82).
К 0°C раствору C67 (230 мг, 0,569 ммоль) и (2S)-2-{[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]амино}-4,4-дифторбутановой кислоты (247 мг, 0,684 ммоль) в N, N-диметилформамиде (5 мл) добавляют гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 281 мг, 0,739 ммоль) одной порцией; затем по каплям добавляют 4-метилморфолин (173 мг, 1,71 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 10 минут, ее нагревают до комнатной температуры (20°C) и перемешивание продолжают в течение 2 часов, затем реакционную смесь выливают в ледяную воду (15 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические слои последовательно промывают 1 M хлористоводородной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют в вакууме, и очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 10% метанол в дихлорметане) с получением C82 в виде белого твердого вещества. Выход: 245 мг, 0,376 ммоль, 66%. ЖХМС m/z 652,5 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 8,86 (шс, 1H), 7,74 (д, J=7,6 Гц, 2H), 7,58-7,51 (м, 2H), 7,38 (дд, J=7,4, 7,4 Гц, 2H), 7,33-7,25 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 7,08 (шс, 1H), 6,49-6,32 (м, 1H), 6,17-5,79 (м, 3H), 4,78-4,67 (м, 1H), 4,41-4,24 (м, 4H), 4,22-4,07 (м, 2H), 3,83 (д, J=10,5 Гц, 1H), 3,45-3,32 (м, 2H), 2,62-2,36 (м, 3H), 2,26-2,10 (м, 2H), 1,99-1,83 (м, 2H), 1,53 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,51-1,44 (м, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,89 (с, 3H).To a 0°C solution of C67 (230 mg, 0.569 mmol) and (2S)-2-{[(9H- fluoren -9- ylmethoxy )carbonyl]amino}-4,4-difluorobutanoic acid (247 mg, 0.684 mmol ) in N, N -dimethylformamide (5 ml) add O - (7-azabenzotriazol-1-yl) - N, N, N', N' -tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 281 mg, 0.739 mmol) in one portion; then 4-methylmorpholine (173 mg, 1.71 mmol) is added dropwise. Then the reaction mixture was stirred at 0°C for 10 minutes, it was warmed to room temperature (20°C) and stirring continued for 2 hours, then the reaction mixture was poured into ice water (15 ml) and extracted with ethyl acetate (2×15 ml ). The combined organic layers are washed successively with 1 M hydrochloric acid, saturated aqueous sodium bicarbonate and saturated aqueous sodium chloride, dried over sodium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and purified by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 10% methanol in dichloromethane) to give C82 as a white solid. Yield: 245 mg, 0.376 mmol, 66%. LCMS m/z 652.5 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 8.86 (br s, 1H), 7.74 (d, J =7.6 Hz, 2H), 7.58-7.51 (m, 2H), 7.38 (dd, J = 7.4, 7.4 Hz, 2H), 7.33-7.25 (m, 2H, estimated; partially covered by solvent peak), 7.08 (br, 1H), 6 .49-6.32(m, 1H), 6.17-5.79(m, 3H), 4.78-4.67(m, 1H), 4.41-4.24(m, 4H) , 4.22-4.07 (m, 2H), 3.83 (d, J =10.5 Hz, 1H), 3.45-3.32 (m, 2H), 2.62-2.36 (m, 3H), 2.26-2.10 (m, 2H), 1.99-1.83 (m, 2H), 1.53 (d, half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H ), 1.51-1.44 (m, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-3-[(2S)-2-амино-4,4-дифторбутаноил]-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (C83).
К 0°C суспензии C82 (195 мг, 0,299 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляют раствор диэтиламина (32,8 мг, 0,448 ммоль) в дихлорметане (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при 30°C в течение 16 часов, затем ее объединяют с аналогичной реакцией, проводимой с применением C82 (50 мг, 77 мкмоль) и концентрируют в вакууме. Очистка хроматографией на силикагеле [Градиент: 0% - 10% (10:1 смесь метанола и гидроксида аммония) в дихлорметане] дает C83 в виде бесцветной камеди. Объединенный выход: 149 мг, 0,347 ммоль, 92%. ЖХМС m/z 452,3 [M+Na+]. 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 8,73 (шд, J=5,3 Гц, 1H), 7,11 (шс, 1H), 6,03 (тдд, J=56,8, 6,2, 3,0 Гц, 1H), 5,64 (шс, 1H), 5,28 (шс, 1H), 4,35-4,27 (м, 1H), 4,27 (с, 1H), 4,11 (дд, J=10,3, 5,5 Гц, 1H), 3,72 (дд, J=9,3, 4,1 Гц, 1H), 3,61 (д, J=10,3 Гц, 1H), 3,41-3,35 (м, 2H), 2,53-2,36 (м, 3H), 2,20-2,11 (м, 1H), 2,00-1,84 (м, 3H), 1,6-1,45 (м, 2H, предполагаемый; частично закрыт пиком воды), 1,06 (с, 3H), 0,94 (с, 3H).To a 0°C suspension of C82 (195 mg, 0.299 mmol) in dichloromethane (3 ml) was added a solution of diethylamine (32.8 mg, 0.448 mmol) in dichloromethane (0.5 ml). The reaction mixture is stirred at 30°C for 16 hours, then it is combined with a similar reaction carried out using C82 (50 mg, 77 μmol) and concentrated in vacuo . Purification by chromatography on silica gel [Gradient: 0% - 10% (10:1 mixture of methanol and ammonium hydroxide) in dichloromethane] gives C83 as a colorless gum. Combined yield: 149 mg, 0.347 mmol, 92%. LCMS m/z 452.3 [M+Na + ]. 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 8.73 (bd, J = 5.3 Hz, 1H), 7.11 (brb, 1H), 6.03 (tdd, J = 56.8, 6 .2, 3.0Hz, 1H), 5.64(brs, 1H), 5.28(brs, 1H), 4.35-4.27(m, 1H), 4.27(s, 1H) , 4.11 (dd, J =10.3, 5.5 Hz, 1H), 3.72 (dd, J =9.3, 4.1 Hz, 1H), 3.61 (d, J =10 .3 Hz, 1H), 3.41-3.35 (m, 2H), 2.53-2.36 (m, 3H), 2.20-2.11 (m, 1H), 2.00- 1.84 (m, 3H), 1.6-1.45 (m, 2H, estimated; partially covered by water peak), 1.06 (s, 3H), 0.94 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[(2S)-4,4-дифтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бутаноил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (94).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[( 2 S )-4,4-difluoro-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)butanoyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 94 ).
К 0°C раствору C83 (99 мг, 0,23 ммоль) в дихлорметане (4 мл) добавляют пиридин (146 мг, 1,85 ммоль) и раствор трифторуксусного ангидрида (194 мг, 0,924 ммоль) в дихлорметане (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (15°C) в течение 20 часов, обрабатывают дополнительным пиридином (30 мг, 0,38 ммоль) и перемешивают при комнатной температуре (15°C) в течение еще 16 часов. Ее затем разделяют между дихлорметаном (15 мл) и хлористоводородной кислотой (1 M; 15 мл), и органический слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл), сушат, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток объединяют с продуктом из аналогичной реакции, проводимой с применением C83 (50 мг, 0,12 ммоль) и очищают с применением ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters XBridge BEH C18, 25×150 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% гидроксид аммония (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил; Градиент: 23% - 63% B). (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[(2S)-4,4-дифтор-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бутаноил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (94) выделяют в виде белого твердого вещества. Объединенный выход: 28,8 мг, 56,8 мкмоль, 16%. ЖХМС m/z 508,0 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 10,01 (шс, 1H), 8,96 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,72 (с, 1H), 6,16 (тт, J=55,9, 4,6 Гц, 1H), 4,99-4,90 (м, 1H), 4,65-4,57 (м, 1H), 4,14 (с, 1H), 3,85 (дд, компонент системы АВХ, J=10,2, 5,4 Гц, 1H), 3,67 (д, половина АВ квартета, J=10,3 Гц, 1H), 3,21-3,04 (м, 2H), 2,42-2,19 (м, 3H), 2,17-2,04 (м, 2H), 1,83-1,64 (м, 2H), 1,60 (дд, J=7,6, 5,3 Гц, 1H), 1,35 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,89 (с, 3H).To a 0°C solution of C83 (99 mg, 0.23 mmol) in dichloromethane (4 ml) was added pyridine (146 mg, 1.85 mmol) and a solution of trifluoroacetic anhydride (194 mg, 0.924 mmol) in dichloromethane (2 ml). The reaction mixture was stirred at room temperature (15°C) for 20 hours, treated with additional pyridine (30 mg, 0.38 mmol) and stirred at room temperature (15°C) for another 16 hours. It was then partitioned between dichloromethane (15 ml) and hydrochloric acid (1 M; 15 ml) and the organic layer was washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (15 ml) and saturated aqueous sodium chloride (10 ml), dried, filtered, and concentrated in a vacuum . The residue was combined with the product from a similar reaction using C83 (50 mg, 0.12 mmol) and purified using reverse phase HPLC (Column: Waters XBridge BEH C18, 25x150 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% ammonium hydroxide (v/v) Mobile phase B: acetonitrile Gradient: 23% - 63% B). (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[(2 S )- 4,4-difluoro-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)butanoyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 94 ) is isolated as a white solid . Combined yield: 28.8 mg, 56.8 µmol, 16%. LCMS m/z 508.0 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 10.01 (br s, 1H), 8.96 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.16 (tt, J =55.9, 4.6 Hz, 1H), 4.99-4.90 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 4.14 (s, 1H ), 3.85 (dd, component of the ABX system, J = 10.2, 5.4 Hz, 1H), 3.67 (d, half of the AB quartet, J = 10.3 Hz, 1H), 3.21- 3.04 (m, 2H), 2.42-2.19 (m, 3H), 2.17-2.04 (m, 2H), 1.83-1.64 (m, 2H), 1, 60 (dd, J =7.6, 5.3 Hz, 1H), 1.35 (d, half AB quartet, J =7.6 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
Пример 95Example 95
N-(Метоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид (95) N- (Methoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- 4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 95 )
Стадия 1. Синтез (4R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-(трифторметил)-L-пролил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C50).
N, N-диизопропилэтиламин (14,8 мл, 85,0 ммоль) добавляют к -30°C смеси (4R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-(трифторметил)-L-пролина (8,00 г, 28,2 ммоль), C16, соли HCl (6,45 г, 31,1 ммоль) и гексафторфосфата O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 11,8 г, 31,0 ммоль) в N, N-диметилформамиде (100 мл). Реакционную смесь нагревают до 0°C в течение 1 часа, затем ЖХМС анализ показывает присутствие C50: ЖХМС m/z 437,3 [M+H]+. Водным раствором бикарбоната натрия (300 мл) добавляют, и полученную смесь экстрагируют со смесью 2-пропанола и дихлорметана (1:4, 5×100 мл); объединенные органические слои концентрируют в вакууме и очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 100% метанол в дихлорметане), с получением C50 в виде масла. 1H ЯМР анализ показывает, что этот продукт существует в виде смеси ротамеров. Выход: 10,9 г, 25,0 ммоль, 89%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ [8,28 (д, J=8,5 Гц) и 8,22 (д, J=8,2 Гц), всего 1H], [7,64 (с) и 7,59 (с), всего 1H], [7,38 (шс) и 7,27 (шс), всего 1H], 7,05 (шс, 1H), 4,38-4,28 (м, 1H), 4,28-4,17 (м, 1H), 3,45-3,36 (м, 1H), 3,12-3,00 (м, 1H), 2,42-2,03 (м, 4H), 2,02-1,89 (м, 1H), 1,80-1,45 (м, 2H), [1,39 (с) и 1,32 (с), всего 9H]. N,N -diisopropylethylamine (14.8 mL, 85.0 mmol) was added to a -30°C mixture of ( 4R )-1-( tert -butoxycarbonyl)-4-(trifluoromethyl)-L-proline (8.00 g , 28.2 mmol), C16, HCl salts (6.45 g, 31.1 mmol) and O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N,N',N'- tetramethyluronium hexafluorophosphate (GATU; 11.8 g, 31.0 mmol) in N,N -dimethylformamide (100 ml). The reaction mixture is heated to 0°C for 1 hour, then LCMS analysis shows the presence of C50 : LCMS m/z 437.3 [M+H] + . An aqueous solution of sodium bicarbonate (300 ml) was added and the resulting mixture was extracted with a mixture of 2-propanol and dichloromethane (1:4, 5×100 ml); the combined organic layers were concentrated in vacuo and purified by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 100% methanol in dichloromethane) to give C50 as an oil. 1 H NMR analysis shows that this product exists as a mixture of rotamers. Yield: 10.9 g, 25.0 mmol, 89%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ [8.28 (d, J =8.5 Hz) and 8.22 (d, J =8.2 Hz), 1H total], [7.64 (s) and 7.59 (s), 1H total], [7.38 (br) and 7.27 (br) 1H total], 7.05 (br, 1H), 4.38 -4.28(m, 1H), 4.28-4.17(m, 1H), 3.45-3.36(m, 1H), 3.12-3.00(m, 1H), 2 .42-2.03 (m, 4H), 2.02-1.89 (m, 1H), 1.80-1.45 (m, 2H), [1.39 (s) and 1.32 ( c), total 9H].
Стадия 2. Синтез N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-4-(трифторметил)-L-пролил-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]-L-аланинамида (C51).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 80 мл) добавляют в раствор C50 (7,00 г, 16,0 ммоль) в дихлорметане (15 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут, ее концентрируют в вакууме для удаления растворителя, и затем отсасывают через высокий вакуум для удаления остаточного гидрохлорида. Остаток смешивают с N-(трет-бутоксикарбонил)-3-метил-L-валином (4,08 г, 17,6 ммоль) и гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 6,71 г, 17,6 ммоль) в N, N-диметилформамиде (25 мл), охлаждают до -30°C и обрабатывают N, N-диизопропилэтиламином (8,38 мл, 48,1 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 0°C в течение 1 часа, затем ЖХМС анализ показывает присутствие C51: ЖХМС m/z 550,4 [M+H]+. Реакционную смесь затем разбавляют водным раствором бикарбоната натрия и экстрагируют три раза 4:1 смесью дихлорметана и 2-пропанола. Затем объединенные органические слои концентрируют в вакууме, остаток очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 30% метанол в дихлорметане), с получением C51 в виде твердого вещества. Выход: 3,95 г, 7,19 ммоль, 45%, 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 8,28 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,29 (шс, 1H), 7,03 (шс, 1H), 6,77 (шд, J=9,1 Гц, 1H), 4,52-4,43 (м, 1H), 4,24 (ддд, J=12,2, 8,7, 3,5 Гц, 1H), 4,12 (д, J=9,2 Гц, 1H), 4,02-3,84 (м, 2H), 3,16-3,08 (м, 1H), 3,08-2,98 (м, 1H), 2,50-2,37 (м, 1H), 2,31-2,20 (м, 1H), 2,19-2,05 (м, 2H), 2,00-1,87 (м, 1H), 1,69-1,55 (м, 1H), 1,55-1,44 (м, 1H), 1,36 (с, 9H), 0,93 (с, 9H).A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 80 ml) was added to a solution of C50 (7.00 g, 16.0 mmol) in dichloromethane (15 ml). The reaction mixture is then stirred at room temperature for 5 minutes, concentrated in vacuo to remove the solvent, and then suctioned off under high vacuum to remove residual hydrochloride. The residue is mixed with N- ( tert -butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valine (4.08 g, 17.6 mmol) and hexafluorophosphate O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N', N' -tetramethyluronium (HATU; 6.71 g, 17.6 mmol) in N,N -dimethylformamide (25 ml), cooled to -30°C and treated with N,N -diisopropylethylamine (8.38 ml, 48.1 mmol). The reaction mixture is heated to 0°C for 1 hour, then LCMS analysis shows the presence of C51 : LCMS m/z 550.4 [M+H] + . The reaction mixture was then diluted with aqueous sodium bicarbonate and extracted three times with a 4:1 mixture of dichloromethane and 2-propanol. The combined organic layers are then concentrated in vacuo , the residue is purified by silica gel chromatography (Gradient: 0% - 30% methanol in dichloromethane) to give C51 as a solid. Yield: 3.95 g, 7.19 mmol, 45%, 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks: δ 8.28 (d, J =8.8 Hz, 1H), 7, 55(s, 1H), 7.29(brs, 1H), 7.03(brs, 1H), 6.77(brd, J =9.1Hz, 1H), 4.52-4.43(m , 1H), 4.24 (ddd, J =12.2, 8.7, 3.5 Hz, 1H), 4.12 (d, J =9.2 Hz, 1H), 4.02-3, 84 (m, 2H), 3.16-3.08 (m, 1H), 3.08-2.98 (m, 1H), 2.50-2.37 (m, 1H), 2.31- 2.20 (m, 1H), 2.19-2.05 (m, 2H), 2.00-1.87 (m, 1H), 1.69-1.55 (m, 1H), 1, 55-1.44 (m, 1H), 1.36 (s, 9H), 0.93 (s, 9H).
Стадия 3. Синтез N-(метоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамида (95).Stage 3. Synthesis of N -(methoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4 R )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl ]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 95 ).
Смесь C51 (230 мг, 0,418 ммоль) и раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 2 мл, 8 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут, затем реакционную смесь концентрируют в вакууме для удаления растворителя, затем отсасывают через высокий вакуум для удаления остаточного гидрохлорида. Остаток растворяют в дихлорметане (2 мл), охлаждают до 0°C и обрабатывают N, N-диизопропилэтиламином (0,219 мл, 1,26 ммоль) затем метилхлорформиатом (59,3 мг, 0,628 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 10 минут, ее разбавляют водным раствором бикарбоната натрия и экстрагируют три раза 4:1 смесью дихлорметана и 2-пропанола; объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в дихлорметане (3 мл); после добавления метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамата, внутренней соли (реагент Бурджеса; 299 мг, 1,25 ммоль), реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Ее затем обрабатывают разбавленным водным раствором карбоната натрия и экстрагируют 3 раза этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, и очищают хроматографией на силикагеле (Градиент: 50% - 100% этилацетат в гептане). Полученный продукт суспендируют в гептане (4 мл) при 50°C в течение 2 часов, охлаждают до комнатной температуры и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи; сбор твердого вещества дает N-(метоксикарбонил)-3-метил-L-валил-(4R)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-(трифторметил)-L-пролинамид (95) в виде твердого вещества. Выход: 123 мг, 0,251 ммоль, 60%. ЖХМС m/z 490,4 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,02 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,27 (шд, J=8,7 Гц, 1H), 4,94 (ддд, J=11,1, 8,5, 5,0 Гц, 1H), 4,36 (дд, J=7,3, 7,2 Гц, 1H), 4,14 (д, J=8,7 Гц, 1H), 4,00-3,91 (м, 2H), 3,52 (с, 3H), 3,46-3,34 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком воды), 3,18-2,98 (м, 2H), 2,5-2,39 (м, 1H, предполагаемый; частично закрыт пиком растворителя), 2,35-2,23 (м, 1H), 2,22-2,01 (м, 3H), 1,77-1,63 (м, 2H), 0,94 (с, 9H).A mixture of C51 (230 mg, 0.418 mmol) and a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 2 ml, 8 mmol) was stirred at room temperature for 5 minutes, then the reaction mixture was concentrated in vacuo to remove the solvent, then it was filtered with suction through high vacuum to remove residual hydrochloride. The residue was dissolved in dichloromethane (2 ml), cooled to 0°C and treated with N,N -diisopropylethylamine (0.219 ml, 1.26 mmol) then methyl chloroformate (59.3 mg, 0.628 mmol). The reaction mixture was then stirred at 0° C. for 10 minutes, diluted with an aqueous sodium bicarbonate solution and extracted three times with a 4:1 mixture of dichloromethane and 2-propanol; the combined organic layers are dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The residue is dissolved in dichloromethane (3 ml); after adding methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 299 mg, 1.25 mmol), the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour. It is then treated with dilute sodium carbonate aqueous solution and extracted 3 times with ethyl acetate. The combined organic layers are dried over magnesium sulfate, filtered, and purified by silica gel chromatography (Gradient: 50% - 100% ethyl acetate in heptane). The resulting product is suspended in heptane (4 ml) at 50°C for 2 hours, cooled to room temperature and stirred at room temperature overnight; collection of the solid yields N- (methoxycarbonyl)-3-methyl-L- valyl- (4R) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl ]ethyl}-4-(trifluoromethyl)-L-prolinamide ( 95 ) as a solid. Yield: 123 mg, 0.251 mmol, 60%. LCMS m/z 490.4 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.02 (d, J =8.6 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.27 (br, J =8.7 Hz , 1H), 4.94 (ddd, J =11.1, 8.5, 5.0 Hz, 1H), 4.36 (dd, J =7.3, 7.2 Hz, 1H), 4, 14 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.00-3.91 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.46-3.34 (m, 1H, estimated; partially covered by water peak), 3.18-2.98 (m, 2H), 2.5-2.39 (m, 1H, estimated; partially covered by solvent peak), 2.35-2.23 (m, 1H ), 2.22-2.01 (m, 3H), 1.77-1.63 (m, 2H), 0.94 (s, 9H).
Пример 96Example 96
(1R,2S,5S)-N-{(1R)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (96) и (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (13), Твердая форма 5(1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 R )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 96 ) and ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl] -3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 ), Solid Form 5
В раствор 13, сольвата метил трет- бутилового эфира (из альтернативного синтеза из примера 13, сольват метил трет-бутилового эфира; 15,0 г, 25,5 ммоль) в ацетонитриле (80 мл) добавляют метансульфоновую кислоту (6,4 мл, 99 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов, затем ее подщелачивают добавлением смеси насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (80 мл) и насыщенного водного раствора хлорида натрия (10 мл). Полученную смесь экстрагируют дихлорметаном (2×100 мл), и объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Разделение двух эпимеров проводят сверхкритической жидкостной хроматографией (Колонка: Chiral Technologies Chiralcel OX-H, 30×250 мм, 5 мкм; Подвижная фаза: 9:1 диоксид углерода/2-пропанол; Обратное давление: 100 бар; Скорость потока: 80 мл/минуту). Первым элюированным продуктом является восстановленный (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид (13). Согласно порошковой рентгеновской дифракции, этот продукт является аморфным; его обозначают как Твердую форму 5. Второй элюированный продукт получают в виде стекла, которое растворяют в дихлорметане, обрабатывают гептаном и концентрируют в вакууме с получением (1R,2S,5S)-N-{(1R)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (96) в виде твердого вещества.To a solution of 13, methyl t-butyl ether solvate ( from the alternative synthesis from Example 13, methyl t -butyl ether solvate; 15.0 g, 25.5 mmol) in acetonitrile (80 mL) was added methanesulfonic acid (6.4 mL, 99 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature for 4 hours, then made basic by adding a mixture of saturated aqueous sodium bicarbonate (80 ml) and saturated aqueous sodium chloride (10 ml). The resulting mixture was extracted with dichloromethane (2×100 ml) and the combined organic layers were dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The separation of the two epimers is carried out by supercritical liquid chromatography (Column: Chiral Technologies Chiralcel OX-H, 30×250 mm, 5 µm; Mobile phase: 9:1 carbon dioxide/2-propanol; Back pressure: 100 bar; Flow rate: 80 ml/ minute). The first product eluted is reduced ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6 -dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide ( 13 ). According to powder x-ray diffraction, this product is amorphous; this is referred to as Solid Form 5. The second eluted product is obtained as a glass, which is dissolved in dichloromethane, treated with heptane and concentrated in vacuo to give (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 R )-1-cyano -2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3, 1.0]hexane-2-carboxamide ( 96 ) as a solid.
Восстановленное 13 - Выход: 6,00 г, 12,0 ммоль, 47%. ЖХМС m/z 500,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,46-9,33 (м, 1H), 9,01 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,66 (с, 1H), 5,03-4,91 (м, 1H), 4,46-4,37 (м, 1H), 4,16 (с, 1H), 3,97- 3,86 (м, 1H), 3,69 (д, половина АВ квартета, J=10,4 Гц, 1H), 3,19-3,09 (м, 1H), 3,09-2,98 (м, 1H), 2,46-2,33 (м, 1H), 2,21-2,03 (м, 2H), 1,79-1,65 (м, 2H), 1,61-1,53 (м, 1H), 1,32 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,98 (с, 9H), 0,85 (с, 3H). Время удержания: 3,93 минут (Аналитические условия. Колонка: Chiral Technologies Chiralcel OX-H, 4,6×250 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: диоксид углерода; Подвижная фаза B: 2-пропанол; Градиент: 5% B в течение 1,00 минуты, затем 5% - 60% B в течение 8,00 минут; Обратное давление: 120 бар; Скорость потока: 3,0 мл/минуту). Порошковая рентгеновская дифрактограмма для этого аморфоного продукта дана на Фигуре 9. Способ сбора данных порошковой рентгеновской дифракции описан в Альтернативном синтезе примера 13, сольвата метил трет-бутилового эфира, Стадия 8.Reduced 13 - Yield: 6.00 g, 12.0 mmol, 47%. LCMS m/z 500.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.46-9.33 (m, 1H), 9.01 (d, J =8.5 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H) , 5.03-4.91 (m, 1H), 4.46-4.37 (m, 1H), 4.16 (s, 1H), 3.97-3.86 (m, 1H), 3 .69 (d, half AB quartet, J = 10.4 Hz, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 3.09-2.98 (m, 1H), 2.46-2 .33 (m, 1H), 2.21-2.03 (m, 2H), 1.79-1.65 (m, 2H), 1.61-1.53 (m, 1H), 1.32 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.98 (s, 9H), 0.85 (s, 3H). Retention time: 3.93 minutes (Analytical conditions. Column: Chiral Technologies Chiralcel OX-H, 4.6×250 mm, 5 µm; Mobile phase A: carbon dioxide; Mobile phase B: 2-propanol; Gradient: 5% B for 1.00 minutes, then 5% - 60% B for 8.00 minutes; Back pressure: 120 bar; Flow rate: 3.0 ml/minute). The powder X-ray diffraction pattern for this amorphous product is given in Figure 9. The method for collecting powder X-ray diffraction data is described in Alternative Synthesis of Example 13, Methyl tert -butyl ether solvate, Step 8.
96 - Выход: 2,58 г, 5,16 ммоль, 20%. ЖХМС m/z 500,3 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 9,42 (д, J=8,4 Гц, 1H), 9,06 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,79 (с, 1H), 4,96-4,86 (м, 1H), 4,41 (д, J=8,7 Гц, 1H), 4,20 (с, 1H), 3,92 (шдд, J=10,7, 5,4 Гц, 1H), 3,66 (д, половина АВ квартета, J=10,5 Гц, 1H), 3,22-3,12 (м, 2H), 2,43-2,31 (м, 1H), 2,31-2,20 (м, 1H), 2,16-2,04 (м, 1H), 1,84-1,63 (м, 2H), 1,57-1,49 (м, 1H), 1,32 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,00 (шс, 12H), 0,84 (с, 3H). Время удержания: 4,20 минут (Аналитические условия идентичны тем, которые применяют для восстановленного 13 выше). 96 - Yield: 2.58 g, 5.16 mmol, 20%. LCMS m/z 500.3 [M+H] + . 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 9.42 (d, J =8.4 Hz, 1H), 9.06 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.79 (s , 1H), 4.96-4.86 (m, 1H), 4.41 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 3.92 (bdd, J = 10.7, 5.4 Hz, 1H), 3.66 (d, half AB quartet, J = 10.5 Hz, 1H), 3.22-3.12 (m, 2H), 2.43-2 .31 (m, 1H), 2.31-2.20 (m, 1H), 2.16-2.04 (m, 1H), 1.84-1.63 (m, 2H), 1.57 -1.49 (m, 1H), 1.32 (d, half AB quartet, J =7.7 Hz, 1H), 1.00 (brs, 12H), 0.84 (s, 3H). Retention time: 4.20 minutes (Analytical conditions identical to those used for reconstituted 13 above).
Пример 97Example 97
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, из C86 (DIAST-2) (97)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [2-(2,2,2-trifluoroacetamido)-3-(trifluoromethyl)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, from C86 (DIAST-2) ( 97 )
Стадия 1. Синтез 2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-(трифторметил)пентанoвой кислоты (C84).
Водный раствор гидроксида натрия (1 M; 1,48 мл, 1,48 ммоль) добавляют в суспензию 2-амино-3-(трифторметил)пентановой кислоты (Wang et al., J. Amer. Chem. Soc. 2003, 125, 6900-6906; 137 мг, 0,740 ммоль) в 1,4-диоксане (3 мл) и полученную смесь охлаждают до 0°C. Медленно добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (0,204 мл, 0,888 ммоль), затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После разбавления этилацетатом, реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и затем подкисляют до pH 2 добавлением 1 M водного раствора гидросульфата калия. Водный слой экстрагируют дважды этилацетатом, и объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме, с получением C84 в виде твердого вещества. Этот продукт предположительно состоит из смеси 4 диастереомеров, потенциально демонстрирующих также ротамеры. Выход: 197 мг, 0,690 ммоль, 93%. ЖХМС m/z 284,3 [M−H]−. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6) δ 13,16 (шс, 1H), [7,29 (д, основной, J=9,8 Гц) и 6,95-6,85 (м, незначительный), всего 1H], [4,55 (дд, основной, J=9,8, 3,3 Гц), 4,46 (шд, незначительный, J=9,1 Гц), и 4,40 (дд, незначительный, J=9,4, 4,5 Гц), всего 1H], 2,86-2,67 (м, 1H), 1,71-1,47 (м, 2H), 1,39 (шс, 9H), [0,98 (т, незначительный, J=7,4 Гц) и 0,91 (т, основной, J=7,5 Гц), всего 3H].An aqueous solution of sodium hydroxide (1 M; 1.48 ml, 1.48 mmol) is added to a suspension of 2-amino-3-(trifluoromethyl)pentanoic acid (Wang et al., J. Amer. Chem. Soc . 2003 , 125 , 6900-6906; 137 mg, 0.740 mmol) in 1,4-dioxane (3 ml) and the resulting mixture was cooled to 0°C. Di- tert -butyl dicarbonate (0.204 ml, 0.888 mmol) was added slowly, then the reaction mixture was stirred at room temperature overnight. After dilution with ethyl acetate, the reaction mixture was cooled in an ice bath and then acidified to
Стадия 2. Синтез трет-бутил {1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-1-оксо-3-(трифторметил)пентан-2-ил}карбамата, DIAST-1 (C85) и трет-бутил {1-[(1R,2S,5S)-2-({(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}карбамоил)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-3-ил]-1-оксо-3-(трифторметил)пентан-2-ил}карбамата, DIAST-2 (C86).
0°C раствор C84 (128 мг, 0,449 ммоль) в смеси ацетонитрила (2,7 мл) и N, N-диметилформамида (1,5 мл) обрабатывают гексафторфосфатом O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония (ГАТУ; 176 мг, 0,463 ммоль) и 4-метилморфолином (0,116 мл, 1,06 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 30 минут, C67 (170 мг, 0,420 ммоль) добавляют в виде твердого вещества, и перемешивание продолжают в течение 2 часов. Реакционную смесь затем разбавляют этилацетатом и водой, и промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Водный слой экстрагируют дважды этилацетатом, и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме. Полученное масло подвергают азеотропной перегонке дважды гептаном и дважды метил трет-бутиловым эфиром, затем подвергают хроматографии на силикагеле (Градиент: 0% - 20% метанол в дихлорметане). Первый элюированный диастереомер обозначают C85, и второй элюированный диастереомер обозначают как C86.A 0°C solution of C84 (128 mg, 0.449 mmol) in a mixture of acetonitrile (2.7 mL) and N,N -dimethylformamide (1.5 mL) is treated with O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N,N hexafluorophosphate ,N',N'- tetramethyluronium (GATU; 176 mg, 0.463 mmol) and 4-methylmorpholine (0.116 ml, 1.06 mmol). The reaction mixture is then stirred at 0° C. for 30 minutes, C67 (170 mg, 0.420 mmol) is added as a solid and stirring is continued for 2 hours. The reaction mixture was then diluted with ethyl acetate and water, and washed with saturated aqueous sodium bicarbonate. The aqueous layer was extracted twice with ethyl acetate, and the combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium chloride, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo . The resulting oil was azeotropically distilled twice with heptane and twice with methyl t- butyl ether, then subjected to silica gel chromatography (Gradient: 0% - 20% methanol in dichloromethane). The first eluted diastereomer is designated C85 and the second eluted diastereomer is designated C86 .
C85 (DIAST-1) - Выход: 77,3 мг, 0,134 ммоль, 32%. Этот продукт содержит смесь изомеров или ротамеров по 1H ЯМР анализу. ЖХМС m/z 576,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики, интеграции являются приблизительными: δ [8,35 (д, J=7,9 Гц) и 8,16 (д, J=8,5 Гц), всего 1H], 7,62-7,54 (м, 1H), 7,41-7,18 (м, 2H), [7,02 (шс) и 6,98 (шс), всего 1H], 4,59-4,50 (м, 1H), 4,29-4,13 (м, 2H), 3,89 (дд, J=10,4, 5,4 Гц, 1H), 3,44 (д, J=10,4 Гц, 1H), 3,20-3,04 (м, 2H), 2,70-2,59 (м, 1H), 2,43-2,31 (м, 1H), 2,21-2,08 (м, 1H), 1,99-1,88 (м, 1H), [1,38 (с) и 1,36 (с), всего 9H], 1,01 (шс, 3H), 0,94-0,82 (м, 6H). C85 (DIAST-1)- Yield: 77.3 mg, 0.134 mmol, 32%. This product contains a mixture of isomers or rotamers according tooneH NMR analysis. HCMSm/z 576.2 [M+H]+.oneH NMR (400 MHz, DMSO-d 6), characteristic peaks, integrations are approximate: δ [8.35 (d,J= 7.9 Hz) and 8.16 (d,J= 8.5 Hz), 1H total], 7.62-7.54 (m, 1H), 7.41-7.18 (m, 2H), [7.02 (br) and 6.98 (br ), total 1H], 4.59-4.50 (m, 1H), 4.29-4.13 (m, 2H), 3.89 (dd,J=10.4, 5.4 Hz, 1H), 3.44 (d,J=10.4 Hz, 1H), 3.20-3.04 (m, 2H), 2.70-2.59 (m, 1H), 2.43-2.31 (m, 1H), 2, 21-2.08(m, 1H), 1.99-1.88(m, 1H), [1.38(s) and 1.36(s), total 9H], 1.01(brs, 3H ), 0.94-0.82 (m, 6H).
C86 (DIAST-2) - Выход: 87,8 мг, 0,153 ммоль, 36%. Этот продукт в большей части является единственным изомером по 1H ЯМР анализу. ЖХМС m/z 576,2 [M+H]+. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики: δ 8,27 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,31 (д, J=9,5 Гц, 1H), 7,22 (шс, 1H), 7,04 (шс, 1H), 4,55 (дд, J=9,5, 5,9 Гц, 1H), 4,30-4,17 (м, 1H), 4,23 (с, 1H), 3,79 (дд, компонент системы АВХ, J=10,1, 5,2 Гц, 1H), 3,71 (д, половина АВ квартета, J=10,1 Гц, 1H), 3,09-2,99 (м, 1H), 2,68-2,55 (м, 1H), 2,42-2,30 (м, 1H), 2,17-2,04 (м, 1H), 1,97-1,86 (м, 1H), 1,36 (с, 9H), 1,02 (с, 3H), 0,94-0,83 (м, 6H). C86 (DIAST-2)- Yield: 87.8 mg, 0.153 mmol, 36%. This product is for the most part the only isomer in terms ofoneH NMR analysis. HCMSm/z 576.2 [M+H]+.oneH NMR (400 MHz, DMSO-d 6), characteristic peaks: δ 8.27 (d,J= 8.6 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.31 (d,J=9.5 Hz, 1H), 7.22 (ws, 1H), 7.04 (ws, 1H), 4.55 (dd,J=9.5, 5.9 Hz, 1H), 4.30-4.17 (m, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.79 (dd, ABX system component,J=10.1, 5.2 Hz, 1H), 3.71 (d, half AB quartet,J=10.1 Hz, 1H), 3.09-2.99 (m, 1H), 2.68-2.55 (m, 1H), 2.42-2.30 (m, 1H), 2, 17-2.04 (m, 1H), 1.97-1.86 (m, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.02 (s, 3H), 0.94-0.83 ( m, 6H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентанoил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, из C86 (DIAST-2) (C87).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(2 S )-1-amino-1-oxo-3-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2 -yl}-6,6-dimethyl-3-[2-(2,2,2-trifluoroacetamido)-3-(trifluoromethyl)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, from C86 (DIAST-2) ( C87 ).
Раствор C86 (DIAST-2) (87,8 мг, 0,153 ммоль) в дихлорметане (1 мл) обрабатывают раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 0,381 мл, 1,52 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 40 минут, добавляют метанол (0,5 мл) для улучшения растворимости. После еще 40 минут, добавляют раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 0,10 мл, 0,4 ммоль); через 30 минут, ЖХМС анализ показывает полное удаление защитной группы: ЖХМС m/z 476,2 [M+H]+. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и подвергают азеотропной перегонке дважды гептаном; остаток растирают дважды диэтиловым эфиром, суспендируют в дихлорметане (1,2 мл) и охлаждают до 0°C. После добавления триэтиламина (42,4 мкл, 0,304 ммоль), затем трифторуксусного ангидрида (47,9 мкл, 0,339 ммоль), реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 30 минут, затем ее удаляют из ледяной бани и разделяют между водой и этилацетатом. Водный слой экстрагируют этилацетатом, и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют, концентрируют в вакууме, и подвергают азеотропной перегонке дважды с метил трет-бутиловым эфиром. По 1H ЯМР и ЖХМС анализу, этот продукт содержит смесь C87 и соответствующий метиловый эфир (ЖХМС m/z 587,4 [M+H]+). 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), характеристические пики для C87: δ 8,31 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,05 (с, 1H), 3,59 (д, половина АВ квартета, J=10,0 Гц, 1H), 1,97-1,87 (м, 1H), 1,40 (д, половина АВ квартета, J=7,6 Гц, 1H), 1,03 (с, 3H), 0,84 (с, 3H). Очистка хроматографией на силикагеле (Градиент: 0% - 20% метанол в дихлорметане), затем азеотропная перегонка полученного масла с гептаном, затем азеотропная перегонка со смесью диэтилового эфира и гептана, дает C87 в виде белого твердого вещества. Выход: 17,9 мг, 31,3 мкмоль, 20%. ЖХМС m/z 572,0 [M+H]+.A solution of C86 (DIAST-2) (87.8 mg, 0.153 mmol) in dichloromethane (1 ml) was treated with a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 0.381 ml, 1.52 mmol). After the reaction mixture was stirred at room temperature for 40 minutes, methanol (0.5 ml) was added to improve solubility. After another 40 minutes, add a solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 0.10 ml, 0.4 mmol); after 30 minutes, LCMS analysis shows complete deprotection: LCMS m/z 476.2 [M+H] + . The reaction mixture is concentrated in vacuo and azeotropically distilled twice with heptane; the residue is triturated twice with diethyl ether, suspended in dichloromethane (1.2 ml) and cooled to 0°C. After adding triethylamine (42.4 µl, 0.304 mmol) followed by trifluoroacetic anhydride (47.9 µl, 0.339 mmol), the reaction mixture was stirred at 0°C for 30 minutes, then it was removed from the ice bath and partitioned between water and ethyl acetate . The aqueous layer was extracted with ethyl acetate and the combined organic layers were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate and saturated aqueous sodium chloride, dried over magnesium sulfate, filtered, concentrated in vacuo , and azeotropically distilled twice with methyl t- butyl ether. According to 1 H NMR and LCMS analysis, this product contains a mixture of C87 and the corresponding methyl ester (LCMS m/z 587.4 [M+H] + ). 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), characteristic peaks for C87 : δ 8.31 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 3.59 (d, half AB quartet, J = 10.0 Hz, 1H), 1.97-1.87 (m, 1H), 1.40 (d , half AB quartet, J = 7.6 Hz, 1H), 1.03 (s, 3H), 0.84 (s, 3H). Purification by chromatography on silica gel (Gradient: 0% - 20% methanol in dichloromethane), then azeotroping the resulting oil with heptane, then azeotroping with a mixture of diethyl ether and heptane, gives C87 as a white solid. Yield: 17.9 mg, 31.3 µmol, 20%. LCMS m/z 572.0 [M+H] + .
Стадия 4. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, из C86 (DIAST-2) (97).Stage 4. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl 3-[2-(2,2,2-trifluoroacetamido)-3-(trifluoromethyl)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, from C86 (DIAST-2) ( 97 ).
Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 18,8 мг, 78,9 мкмоль) добавляют в раствор C87 (18 мг, 31 мкмоль) в этилацетате (0,8 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, снова добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса) на конце шпателя. Перемешивание продолжают в течение 2 часов, затем реакционную смесь фильтруют, и фильтровальную лепешку промывают этилацетатом. Объединенные фильтраты промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, и водный слой экстрагируют один раз этилацетатом; объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением неочищенного продукта. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6 ), основной компонент: δ 9,90 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,85 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,56 (шс, 1H), 4,97-4,89 (м, 2H), 4,17 (с, 1H), 3,89 (дд, J=10,1, 5,4 Гц, 1H), 3,62 (д, J=10,1 Гц, 1H), 3,21-3,14 (м, 1H), 3,12-3,06 (м, 1H), 2,92-2,82 (м, 1H), 2,43-2,35 (м, 1H), 2,18-2,10 (м, 2H), 1,78 (ддд, J=13,6, 9,6, 6,0 Гц, 1H), 1,75-1,66 (м, 2H), 1,62-1,55 (м, 2H), 1,35 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,04 (с, 3H), 0,97-0,92 (t, J=7,6 Гц, 3H), 0,85 (с, 3H). Этот продукт очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: 0,05% трифторуксусной кислоты в воде (об./об.); Подвижная фаза B: 0,05% трифторуксусной кислоты в ацетонитриле (об./об.); Градиент: 5% - 95% B в течение 8,54 минут, затем 95% B в течение 1,46 минут; Скорость потока: 25 мл/минуту) с получением (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, из C86 (DIAST-2) (97). Выход: 8,3 мг, 15 мкмоль, 48%. ЖХМС m/z 554,6 [M+H]+. Время удержания: 2,72 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis dC18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5,0% - 95% B, линейный в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 2 мл/минуту).Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 18.8 mg, 78.9 µmol) was added to a solution of C87 (18 mg, 31 µmol) in ethyl acetate (0.8 ml). After the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour, methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent) was added again at the end of a spatula. Stirring is continued for 2 hours, then the reaction mixture is filtered and the filter cake is washed with ethyl acetate. The combined filtrates are washed with saturated aqueous sodium bicarbonate and the aqueous layer is extracted once with ethyl acetate; the combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give the crude product. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ), main component: δ 9.90 (d, J =8.8 Hz, 1H), 8.85 (d, J =8.1 Hz, 1H), 7 .56 (brs, 1H), 4.97-4.89 (m, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.89 (dd, J =10.1, 5.4 Hz, 1H), 3.62 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.21-3.14 (m, 1H), 3.12-3.06 (m, 1H), 2.92-2.82 ( m, 1H), 2.43-2.35 (m, 1H), 2.18-2.10 (m, 2H), 1.78 (ddd, J =13.6, 9.6, 6.0 Hz, 1H), 1.75-1.66 (m, 2H), 1.62-1.55 (m, 2H), 1.35 (d, half AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H) , 1.04 (s, 3H), 0.97-0.92 (t, J= 7.6 Hz, 3H), 0.85 (s, 3H). This product was purified by reverse phase HPLC (Column: Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: 0.05% trifluoroacetic acid in water (v/v); Mobile phase B: 0.05% trifluoroacetic acid in acetonitrile (v/v); Gradient: 5% - 95% B over 8.54 minutes, then 95% B over 1.46 minutes; Flow rate: 25 ml/minute) to give (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[2 -(2,2,2-trifluoroacetamido)-3-(trifluoromethyl)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, from C86 (DIAST-2) ( 97 ). Yield: 8.3 mg, 15 µmol, 48%. LCMS m/z 554.6 [M+H] + . Retention time: 2.72 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis dC18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5.0% - 95% B, linear over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minute; Flow rate : 2 ml/minute).
Пример 98Example 98
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, из C85 (DIAST-1) (98)(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3- [2-(2,2,2-trifluoroacetamido)-3-(trifluoromethyl)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, from C85 (DIAST-1) ( 98 )
Стадия 1. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-3-[2-амино-3-(трифторметил)пентаноил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, гидрохлорида, из C85 (DIAST-1) (C88).
Раствор гидрохлорида в 1,4-диоксане (4 M; 0,336 мл, 1,34 ммоль) добавляют в раствор C85 (DIAST-1) (77,3 мг, 0,134 ммоль) в дихлорметане (1 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 40 минут, метанол (0,5 мл) добавляют для улучшения растворимости. Перемешивание продолжают в течение 2 часов, затем ЖХМС анализ показывает завершение снятия защиты: ЖХМС m/z 476,2 [M+H]+. Реакционную смесь концентрируют в вакууме; остаток подвергают азеотропной перегонке дважды гептаном, затем растирают дважды диэтиловым эфиром с получением C88 в виде белого твердого вещества. Выход: 54,5 мг, 0,106 ммоль, 79%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), основных характеристические пики: δ 8,53 (шс, 3H), 8,36 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,28 (шс, 1H), 7,06 (шс, 1H), 4,25 (ддд, J=10,9, 8,4, 4,5 Гц, 1H), 4,17 (с, 1H), 4,08 (дд, J=10,5, 5,6 Гц, 1H), 2,80-2,68 (м, 1H), 2,37-2,26 (м, 1H), 2,23-2,13 (м, 1H), 2,05-1,96 (м, 1H), 1,73-1,51 (м, 5H), 1,44 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,04 (с, 3H), 0,90 (с, 3H).A solution of hydrochloride in 1,4-dioxane (4 M; 0.336 ml, 1.34 mmol) was added to a solution of C85 (DIAST-1) (77.3 mg, 0.134 mmol) in dichloromethane (1 ml). After the reaction mixture was stirred at room temperature for 40 minutes, methanol (0.5 ml) was added to improve solubility. Stirring is continued for 2 hours, then LCMS analysis shows completion of deprotection: LCMS m/z 476.2 [M+H] + . The reaction mixture is concentrated in vacuo ; the residue is azeotropically distilled twice with heptane, then triturated twice with diethyl ether to give C88 as a white solid. Yield: 54.5 mg, 0.106 mmol, 79%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), main characteristic peaks: δ 8.53 (br s, 3H), 8.36 (d, J =8.5 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H ), 7.28 (shs, 1H), 7.06 (shs, 1H), 4.25 (ddd, J =10.9, 8.4, 4.5 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.08 (dd, J =10.5, 5.6 Hz, 1H), 2.80-2.68 (m, 1H), 2.37-2.26 (m, 1H), 2 .23-2.13 (m, 1H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.73-1.51 (m, 5H), 1.44 (d, half of the AB quartet, J = 7.7 Hz, 1H), 1.04 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(2S)-1-амино-1-оксо-3-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]пропан-2-ил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, из C85 (DIAST-1) (C89).
0°C суспензию C88 (54,5 мг, 0,106 ммоль) в дихлорметане (1 мл) обрабатывают триэтиламином (26 мкл, 0,19 ммоль), затем трифторуксусным ангидридом (19,5 мкл, 29,1 мг, 0,138 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа и 10 минут, добавляют трифторуксусный ангидрид (1 эквивалент); через 30 минут снова добавляют трифторуксусный ангидрид (9,4 мкл, 67 мкмоль). Перемешивание продолжают в течение 45 минут, затем ЖХМС анализ показывает полное превращение в C89: ЖХМС m/z 572,4 [M+H]+. Реакционную смесь разделяют между водой и этилацетатом, и водный слой экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают последовательно насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением C89. Выход: 41,2 мг, 72,1 мкмоль, 68%. 1H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d 6), основной компонент, характеристические пики: δ 10,04 (д, J=9,3 Гц, 1H), 8,23 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,31 (шс, 1H), 7,01 (шс, 1H), 4,92-4,83 (м, 1H), 4,23 (с, 1H), 3,95 (дд, J=10,2, 5,5 Гц, 1H), 2,98-2,86 (м, 1H), 2,38-2,27 (м, 1H), 1,90 (ддд, J=13,5, 11,2, 4,0 Гц, 1H), 1,39 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,02 (с, 3H), 0,90 (с, 3H).A 0°C suspension of C88 (54.5 mg, 0.106 mmol) in dichloromethane (1 ml) was treated with triethylamine (26 μl, 0.19 mmol) followed by trifluoroacetic anhydride (19.5 μl, 29.1 mg, 0.138 mmol). Then the reaction mixture is stirred at 0°C for 1 hour and 10 minutes, trifluoroacetic anhydride (1 equivalent) is added; after 30 minutes, trifluoroacetic anhydride (9.4 μl, 67 μmol) is added again. Stirring is continued for 45 minutes, then LCMS analysis shows complete conversion to C89 : LCMS m/z 572.4 [M+H] + . The reaction mixture is partitioned between water and ethyl acetate, and the aqueous layer is extracted with ethyl acetate. The combined organic layers are washed successively with saturated aqueous sodium bicarbonate and saturated aqueous sodium chloride, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated in vacuo to give C89 . Yield: 41.2 mg, 72.1 µmol, 68%. 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ), main component, characteristic peaks: δ 10.04 (d, J =9.3 Hz, 1H), 8.23 (d, J =8.5 Hz, 1H ), 7.58(s, 1H), 7.31(brs, 1H), 7.01(brs, 1H), 4.92-4.83(m, 1H), 4.23(s, 1H) , 3.95 (dd, J =10.2, 5.5 Hz, 1H), 2.98-2.86 (m, 1H), 2.38-2.27 (m, 1H), 1.90 (ddd, J =13.5, 11.2, 4.0 Hz, 1H), 1.39 (d, half AB quartet, J =7.7 Hz, 1H), 1.02 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, из C85 (DIAST-1) (98).Stage 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6- dimethyl 3-[2-(2,2,2-trifluoroacetamido)-3-(trifluoromethyl)pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, from C85 (DIAST-1) ( 98 ).
Метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса; 42,7 мг, 0,179 ммоль) добавляют в раствор C89 (41,0 мг, 71,7 мкмоль) в этилацетате (0,8 мл). Затем реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, добавляют метил N-(триэтиламмониосульфонил)карбамат, внутреннюю соль (реагент Бурджеса) на кончике шпателя. Перемешивание продолжают в течение 2 часов, затем реакционную смесь фильтруют, и фильтровальную лепешку промывают этилацетатом. Объединенные фильтраты промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, и водный слой экстрагируют этилацетатом; объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют в вакууме с получением неочищенного продукта. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6), основной компонент, характеристические пики: δ 10,12 (д, J=9,1 Гц, 1H), 8,99 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,70 (с, 1H), 4,94 (ддд, J=9,4, 8,1, 6,5 Гц, 1H), 4,87 (дд, J=9,0, 9,0 Гц, 1H), 4,11 (с, 1H), 3,96 (дд, J=10,2, 5,6 Гц, 1H), 3,52 (д, J=10,0 Гц, 1H), 3,18-3,07 (м, 2H), 2,98-2,88 (м, 1H), 2,40-2,33 (м, 1H), 1,79-1,52 (м, 4H), 1,61 (дд, J=7,6, 5,5 Гц, 1H), 1,33 (д, половина АВ квартета, J=7,7 Гц, 1H), 1,04 (с, 3H), 0,91-0,86 (м, 6H).Methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent; 42.7 mg, 0.179 mmol) was added to a solution of C89 (41.0 mg, 71.7 µmol) in ethyl acetate (0.8 ml). After the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour, methyl N- (triethylammoniosulfonyl)carbamate, internal salt (Burgess reagent) was added at the tip of a spatula. Stirring is continued for 2 hours, then the reaction mixture is filtered and the filter cake is washed with ethyl acetate. The combined filtrates are washed with saturated aqueous sodium bicarbonate and the aqueous layer is extracted with ethyl acetate; the combined organic layers are washed with saturated aqueous sodium chloride, dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give the crude product. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ), main component, characteristic peaks: δ 10.12 (d, J =9.1 Hz, 1H), 8.99 (d, J =8.1 Hz, 1H ), 7.70 (s, 1H), 4.94 (ddd, J =9.4, 8.1, 6.5 Hz, 1H), 4.87 (dd, J =9.0, 9.0 Hz, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.96 (dd, J =10.2, 5.6 Hz, 1H), 3.52 (d, J =10.0 Hz, 1H), 3.18-3.07 (m, 2H), 2.98-2.88 (m, 1H), 2.40-2.33 (m, 1H), 1.79-1.52 (m, 4H ), 1.61 (dd, J =7.6, 5.5 Hz, 1H), 1.33 (d, half AB quartet, J =7.7 Hz, 1H), 1.04 (s, 3H) , 0.91-0.86 (m, 6H).
Очистка этого продукта ВЭЖХ с обращенной фазой (Колонка: Waters Sunfire C18, 19×100 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: 0,05% трифторуксусной кислоты в воде; Подвижная фаза B: 0,05% трифторуксусной кислоты в ацетонитриле; Градиент: 5% - 95% B в течение 8,54 минут, затем 95% B в течение 1,46 минут; Скорость потока: 25 мл/минуту) дает (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[2-(2,2,2-трифторацетамидо)-3-(трифторметил)пентаноил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамид, из C85 (DIAST-1) (98). Выход: 4,3 мг, 7,8 мкмоль, 11%. ЖХМС m/z 554,6 [M+H]+. Время удержания: 2,80 минут (Аналитические условия. Колонка: Waters Atlantis dC18, 4,6×50 мм, 5 мкм; Подвижная фаза A: вода, содержащая 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Подвижная фаза B: ацетонитрил содержащий 0,05% трифторуксусной кислоты (об./об.); Градиент: 5,0% - 95% B, линейный в течение 4,0 минут, затем 95% B в течение 1,0 минуты; Скорость потока: 2 мл/минуту).Purification of this reverse phase HPLC product (Column: Waters Sunfire C18, 19×100 mm, 5 µm; Mobile phase A: 0.05% trifluoroacetic acid in water; Mobile phase B: 0.05% trifluoroacetic acid in acetonitrile; Gradient: 5% - 95% B for 8.54 minutes, then 95% B for 1.46 minutes; Flow rate: 25 ml/minute) gives (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[2-(2,2,2-trifluoroacetamido)-3-(trifluoromethyl )pentanoyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide, from C85 (DIAST-1) ( 98 ). Yield: 4.3 mg, 7.8 µmol, 11%. LCMS m/z 554.6 [M+H] + . Retention time: 2.80 minutes (Analytical conditions. Column: Waters Atlantis dC18, 4.6×50 mm, 5 µm; Mobile phase A: water containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v); Mobile phase B: acetonitrile containing 0.05% trifluoroacetic acid (v/v) Gradient: 5.0% - 95% B, linear over 4.0 minutes, then 95% B over 1.0 minute; Flow rate : 2 ml/minute).
Получение 3-трет-бутил 2-метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2,3-дикарлоксилата (C90)Preparation of 3- tert -butyl 2-methyl(1R,2S, 5S )-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[ 3.1,0 ]hexane-2,3- dicaroxylate ( C90 )
Это получение проводят с применением общей методики, описанной у C. Uyeda and J. Werth, Angew. Chem. Int. Ed. 2018, 57, 13902-13906. В 3-горлую колбу, оборудованную магнитной мешалкой, обратным холодильником, термометром и входом для азота загружают бромид кобальта(II) (0,15 эквивалента; 0,146 г, 0,667 ммоль), (1E,1'E)-1,1'-пиридин-2,6-диилбис[N-(2-трет-бутилфенил)этанимин] (2- t -BuPDI; 0,15 эквивалента; 0,284 г, 0,667 ммоль) и тетрагидрофуран (11 мл). Густую зеленую суспензию перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, и добавляют цинк (2,4 эквивалента; 0,70 г, 11 ммоль) и бромид цинка (1,1 эквивалента; 1,1 г, 4,9 ммоль). После перемешивания в течение 15 минут, реакционная смесь становится фиолетовой, и добавляют раствор 1-трет-бутил 2-метил (2S)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1,2-дикарлоксилата (1,0 эквивалент; 1,0 г, 4,4 ммоль) в тетрагидрофуране (7,5 мл) и 2,2-дихлорпропане (2,0 эквивалента; 1,0 г, 8,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 дней, затем ее фильтруют через слой диатомовой земли и промывают тетрагидрофураном (10,8 мл). Фильтрат объединяют насыщенным водным раствором хлорида аммония (3,5 мл) и этилацетатом (9,5 мл); затем слои разделяют, и водную фазу экстрагируют этилацетатом (8,4 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10,5 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют, и концентрируют досуха с получением 3-трет-бутил 2-метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2,3-дикарлоксилата (C90) в виде желтого масла. Выход: 0,90 г, 3,3 ммоль, 75%. По 1H ЯМР анализу, этот продукт существует в виде двух карбаматных ротамеров (соотношение ~3:2). 1H ЯМР (400 MГц, хлороформ-d) δ 4,20 & 4,09 (2 с, 1H), 3,74 & 3,75 (2 с, 3H), 3,68-3,60 (м, 1H), 3,44 & 3,38 (2 д, J=10,9 Гц, 1H), 1,43 & 1,38 (2 с, 9H), 1,38-1,34 (м, 2H), 1,03 & 0,98 & 0,96 (3 с, 6H). ИЭР-МС (пол.) m/z (%)=255,1 (12,5) [M - Me+H]+, 214,1 (100) [M - t-Bu+H]+, 170,2 (50) [M - Boc+H]+.This preparation is carried out using the general procedure described by C. Uyeda and J. Werth, Angew. Chem. Int. Ed . 2018 , 57 , 13902-13906. A 3-necked flask equipped with a magnetic stirrer, reflux condenser, thermometer, and nitrogen inlet was charged with cobalt(II) bromide (0.15 equiv; 0.146 g, 0.667 mmol), ( 1E.1'E )-1.1' -pyridine-2,6-diylbis[ N- (2- tert -butylphenyl)ethanimine] ( 2 - t -Bu PDI; 0.15 equivalents; 0.284 g, 0.667 mmol) and tetrahydrofuran (11 mL). The thick green suspension is stirred overnight at room temperature and zinc (2.4 equivalents; 0.70 g, 11 mmol) and zinc bromide (1.1 equivalents; 1.1 g, 4.9 mmol) are added. After stirring for 15 minutes, the reaction mixture turns purple and a solution of 1- tert -butyl 2-methyl (2S)-2,5-dihydro- 1H -pyrrole-1,2- dicaroxylate (1.0 equivalent; 1.0 g, 4.4 mmol) in tetrahydrofuran (7.5 ml) and 2,2-dichloropropane (2.0 equivalents; 1.0 g, 8.8 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature for 5 days, then it was filtered through a pad of diatomaceous earth and washed with tetrahydrofuran (10.8 ml). The filtrate was combined with saturated aqueous ammonium chloride (3.5 ml) and ethyl acetate (9.5 ml); then the layers are separated and the aqueous phase is extracted with ethyl acetate (8.4 ml). The combined organic extracts were washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (10.5 ml), dried over magnesium sulfate, filtered, and concentrated to dryness to give 3- tert -butyl 2-methyl( 1R , 2S , 5S )-6.6 -dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2,3-dicaroxylate ( C90 ) as a yellow oil. Yield: 0.90 g, 3.3 mmol, 75%. According to 1 H NMR analysis, this product exists as two carbamate rotamers (~3:2 ratio). 1 H NMR (400 MHz, chloroform- d ) δ 4.20 & 4.09 (2 s, 1H), 3.74 & 3.75 (2 s, 3H), 3.68-3.60 (m, 1H), 3.44 & 3.38 (2d, J=10.9Hz, 1H), 1.43 & 1.38 (2s, 9H), 1.38-1.34 (m, 2H) , 1.03 & 0.98 & 0.96 (3 s, 6H). ESI-MS (pol.) m/z (%)=255.1 (12.5) [M - Me+H] + , 214.1 (100) [M - t -Bu+H] + , 170, 2 (50) [M - Boc+H] + .
Альтернативное получение C42 Alternative production of C42
(1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C42)(1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxylic acids ( C42 )
Стадия 1. Синтез 3-метил-N-(трифторацетил)-L-валина (C91).
Раствор метоксида натрия в метаноле (25% массовых; 28,5 мл, 124 ммоль) добавляют в раствор 3-метил-L-валин (99%, 15 г, 113 ммоль) в метаноле (30 мл). Затем добавляют этилтрифторацетат (130 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 40°C до завершения реакции (приблизительно 2,5 часа), затем ее охлаждают до 20°C. После добавления хлористоводородной кислоты (1 M; 136 мл, 136 ммоль), смесь разбавляют этилацетатом (150 мл) и слои разделяют. Органический слой промывают дважды насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, и фильтруют. Гептан добавляют к фильтрату, затем раствор концентрируют при 50°C до объема 5 мл/г. Эту методику повторяют дважды; после второй дистилляции добавляют затравочные кристаллы C91 (50 мг; см. ниже). Полученное твердое вещество собирают фильтрацией, промывают гептаном и сушат при 40°C с получением C91 в виде беловатого твердого вещества. Выход: 22,2 г, 97,7 ммоль, 86%.A solution of sodium methoxide in methanol (25% by weight; 28.5 ml, 124 mmol) is added to a solution of 3-methyl-L-valine (99%, 15 g, 113 mmol) in methanol (30 ml). Ethyl trifluoroacetate (130 mmol) is then added and the reaction mixture is stirred at 40°C until the reaction is complete (approximately 2.5 hours), then it is cooled to 20°C. After adding hydrochloric acid (1 M; 136 ml, 136 mmol), the mixture is diluted with ethyl acetate (150 ml) and the layers are separated. The organic layer was washed twice with saturated aqueous sodium chloride, dried over magnesium sulfate, and filtered. Heptane is added to the filtrate, then the solution is concentrated at 50° C. to a volume of 5 ml/g. This procedure is repeated twice; after a second distillation, seed crystals C91 (50 mg; see below) are added. The resulting solid is collected by filtration, washed with heptane and dried at 40° C. to give C91 as an off-white solid. Yield: 22.2 g, 97.7 mmol, 86%.
Затравочные кристаллы, применяемые выше, получают из аналогичной реакции, проводимой с применением 3-метил-L-валина; затем органический слой, содержащий C91, сушат над сульфатом магния и фильтруют, концентрация в вакууме дает твердое вещество. Часть этого твердого вещества применяют в качестве затравочного продукта.The seed crystals used above are obtained from a similar reaction carried out using 3-methyl-L-valine; then the organic layer containing C91 is dried over magnesium sulfate and filtered, concentration in vacuo gives a solid. A portion of this solid is used as a seed product.
Физико-химические данные получают на образцах C91, полученных из реакций, проводимых по той же методике. МСВР-ИЭР+ (m/z): [M+H]+ Рассчитано для C8H13F3NO3, 228,0842; найдено, 228,0842. Первичный ион наблюдают как C8H11F3NNa2O3 [M+Na+]: Рассчитано, 272,0481; Найдено, 272,0482. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ 13,05 (с, 1H), 9,48 (д, J=8,9 Гц, 1H), 4,21 (д, J=8,9 Гц, 1H), 1,00 (с, 9H). 13C ЯМР (150,8 MГц, ДМСО-d 6) δ 170,9, 156,6 (кв, 2 J CF=36,9 Гц), 115,8 (кв, 1 J CF=287,7 Гц), 61,0, 33,6, 26,5. Порошковая рентгеновская дифрактограмма для C91 дана на Фигуре 11; характеристические пики перечислены в таблице R.Physico-chemical data obtained on samples of C91 obtained from reactions carried out according to the same method. HRMS-ESI + ( m/z ): [M+H] + Calculated for C 8 H 13 F 3 NO 3 , 228.0842; found, 228.0842. The primary ion is observed as C 8 H 11 F 3 NNa 2 O 3 [M+Na + ]: Calc., 272.0481; Found, 272.0482. 1 H NMR (600 MHz, DMSO- d 6 ) δ 13.05 (s, 1H), 9.48 (d, J =8.9 Hz, 1H), 4.21 (d, J =8.9 Hz , 1H), 1.00 (s, 9H). 13 C NMR (150.8 MHz, DMSO- d 6 ) δ 170.9, 156.6 (q, 2 J CF = 36.9 Hz), 115.8 (q, 1 J CF = 287.7 Hz) , 61.0, 33.6, 26.5. Powder x-ray diffraction pattern for C91 is given in Figure 11; characteristic peaks are listed in Table R.
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
Кристалл для рентгеновской кристаллографии получают перекристаллизацией из этилацетата и гексана с использованием затравочных кристаллов из той же партии, что и выше. Диаграмма ORTEP для данных монокристалла C91 показана на фигуре 12.The X-ray crystallography crystal was obtained by recrystallization from ethyl acetate and hexane using seed crystals from the same batch as above. The ORTEP chart for C91 single crystal data is shown in Figure 12.
Однокристальный рентгеновский структурный анализ C91 Single crystal X-ray structural analysis of C91
Однокристальный рентгеновский анализSingle crystal x-ray analysis
Сбор данных проводят на дифрактометре Bruker D8 Quest при -100°C. Сбор данных состоит из сканирования омега и фи.Data collection is carried out on a Bruker D8 Quest diffractometer at -100°C. Data collection consists of omega and phi scans.
Структура была разрешена путем внутреннего фазирования с использованием программного пакета SHELX в пространственной группе орторомбического класса P212121. В дальнейшем структуру уточняют полноматричным методом наименьших квадратов. Все атомы, отличные от водорода, найдены и уточнены с использованием параметров анизотропного смещения.The structure was resolved by internal phasing using the SHELX software package in the space group of the
Атомы водорода, расположенные на азоте, найдены из разностной карты Фурье и уточнены с ограничением расстояний. Водород на O2 (H2Z) и O3 (H3Z) разделен как заряд и уточнен как занятость по 10,5 каждый. Остальные атомы водорода размещены в расчетных положениях и им позволили перемещаться на своих атомах-носителях. Окончательное уточнение включает параметры изотропного смещения для всех атомов водорода.Hydrogen atoms located on nitrogen were found from the difference Fourier map and refined with limited distances. Hydrogen into O 2 (H 2 Z) and O 3 (H 3 Z) is separated as a charge and refined as an employment of 10.5 each. The remaining hydrogen atoms are placed in calculated positions and allowed to move on their carrier atoms. The final refinement includes isotropic displacement parameters for all hydrogen atoms.
Определяют и моделируют нарушение занятости популяции как отношение ~ 67/33 в сегменте -CF3.Population disruption is defined and modeled as a ratio of ~67/33 in the -CF 3 segment.
Анализ абсолютной структуры с использованием способов вероятности (Hooft, 2008) проводят с использованием PLATON (Spek). Результаты показывают, что абсолютная структура назначена правильно. Способ рассчитывает, что вероятность того, что структура назначена правильно, составляет 100%. Параметр Хофта представлен как -0,02 с осо (оценочное стандартное отклонение) (4), и параметр Парсона представлен как -0,02 с осо (4).Absolute structure analysis using probability methods (Hooft, 2008) is performed using PLATON (Spek). The results show that the absolute structure is assigned correctly. The method calculates that the probability that the structure is assigned correctly is 100%. The Hooft parameter is presented as -0.02 s os (estimated standard deviation) (4), and the Parson parameter is presented as -0.02 s s o (4).
Итоговый R-индекс составляет 4,1%. Конечная разностная карта Фурье не обнаружила отсутствующей или смещенной электронной плотности.The resulting R-index is 4.1%. The final difference Fourier map showed no missing or shifted electron density.
Соответствующий кристалл, сбор данных и уточняющая информация сведены в таблицу S. Координаты атомов, длины связей, углы связей и параметры смещения перечислены в таблицах T-V.The corresponding crystal, data acquisition, and refinement information are summarized in Table S. Atomic coordinates, bond lengths, bond angles, and bias parameters are listed in Tables T-V.
Список используемого программного обеспечения и ссылок можно найти в Монокристальном рентгеновском определении структуры примера 13, Твердая форма 1.A list of software and references used can be found in Single Crystal X-ray Structure Determination Example 13,
Масса формулы
Температура
Длина волны
Кристаллическая система
Пространственная группа
Постоянная решетки
Объем
Z
Плотность (расчетная)
Коэффициент абсорбции
F(000)
Размер кристалла
Интервал тэта для сбора данных
Диапазоны индексов
Собранные отражения
Независимые отражения
Полнота до тэта=67,679°
Коррекция абсорбции
Способ уточнения
Данные/ограничения/параметры
Соответствие по F 2
Конечные R индексы [I>2σ(I)]
R индексы (все данные)
Параметр абсолютной структуры
Коэффициент возбуждения
Наибольшие дифф. пики и впадиныEmpirical Formula
formula mass
Temperature
Wavelength
Crystal system
space group
Lattice constant
Volume
Z
Density (calculated)
Absorption coefficient
F (000)
Crystal size
Theta interval for data collection
Index ranges
Collected Reflections
Independent Reflections
Completeness to theta=67.679°
Absorption correction
Refinement method
Data/Restrictions/Parameters
Compliance with F 2
Finite R indices [ I>2σ(I) ]
R indices (all data)
Absolute Structure Parameter
Excitation factor
The largest diff. peaks and valleys
227,19
173(2) K
1,54178 Å
Тетрагональная
P41212
a=9,9168(6) Å
b=9,9168(6) Å
c=22,721(2) Å
2234,5(4) Å3
8
1,351 Мг/м3
1,184 мм−1
944
0,200×0,170×0,080 мм3
4,866-70,114°
-11<=h<=10, -12<=k<=12, -27<=l<=27
48160
2122 [R int =0,0392]
99,8%
Эмпирическая
Наименьшие квадраты в полноматричном приближении по F 2
2122/9/158
1,010
R1=0,0408, wR2=0,1012
R1=0,0429, wR2=0,1039
0,03(4)
н/д
0,280 и −0,215 e.Å−3 C 8 H 12 F 3 NO 3
227.19
173(2) K
1.54178 Å
tetragonal
P 4 1 2 1 2
a =9.9168(6) Å
b =9.9168(6) Å
c = 22.721(2) Å
2234.5(4) Å 3
eight
1.351 Mg/ m3
1.184 mm -1
944
0.200×0.170×0.080 mm 3
4.866-70.114°
-11<= h <=10, -12<= k <=12, -27<= l <=27
48160
2122 [ Rint = 0.0392 ]
99.8%
empirical
Least squares in the full-matrix approximation in F 2
2122/9/158
1.010
0.03(4)
n/a
0.280 and -0.215 e.Å -3
β=90°
γ=90° α= 90°
β= 90°
γ =90°
Таблица T. Атомные координаты (x 104) и параметры эквивалентного изотропного замещения (Å2×103) для C91. U(экв) определены как одна треть от следа ортогонализированного тензора Uij.Table T. Atomic coordinates (x 10 4 ) and equivalent isotropic substitution parameters (Å 2 ×10 3 ) for C91 . U(eq) are defined as one third of the trace of the orthogonalized tensor U ij .
Таблица U. Длины связей [Å] и углы [°] для C91.Table U. Bond lengths [Å] and angles [°] for C91 .
Симметричные превращения используют для создания эквивалентных атомов.Symmetric transformations are used to create equivalent atoms.
Таблица V. Параметры анизотропного замещения (Å2×103) для C91. Экспонента фактора анизотропного замещения принимает форму: -2π2[h2 a*2U11 + ... + 2 h k a* b* U12].Table V. Anisotropic substitution parameters (Å 2 ×10 3 ) for C91 . The exponent of the anisotropic substitution factor takes the form: -2π 2 [h 2 a* 2 U 11 + ... + 2 hka* b* U 12 ].
Стадия 2. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата лития (C92).
Моногидрат гидроксида лития (29,0 г, 678 ммоль) добавляют к смеси метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата, гидрохлорида (68,5 г, 333 ммоль) в тетрагидрофуране (950 мл) и воде (48 мл). Реакционную смесь перемешивают при 25°C до завершения гидролиза, затем твердое вещество собирают фильтрацией, промывают 5% раствором воды тетрагидрофуране (400 мл) и сушат под вакуумом при 70°C с получением C92 в виде белого/беловатого твердого вещества. Выход: 47,6 г, 295 ммоль, 89%. Физико-химические данные, полученные для образцов C92, получают в реакциях, проводимых по той же методике.Lithium hydroxide monohydrate (29.0 g, 678 mmol) is added to a mixture of methyl (1R, 2S , 5S )-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2- caroxylate , hydrochloride (68.5 g, 333 mmol) in tetrahydrofuran (950 ml) and water (48 ml). The reaction mixture was stirred at 25° C. until hydrolysis was complete, then the solid was collected by filtration, washed with 5% tetrahydrofuran water (400 ml) and dried under vacuum at 70° C. to give C92 as a white/off-white solid. Yield: 47.6 g, 295 mmol, 89%. The physicochemical data obtained for the C92 samples are obtained from reactions carried out in the same manner.
МСВР-ИЭР+ (m/z): [M+H]+ Рассчитано для C8H14NO2, 156,1019; Найдено, 156,1019. 1H ЯМР (600 MГц, D2O) δ 3,23 (д, J=1,1 Гц, 1H), 3,09 (дд, J=11,1, 5,2 Гц, 1H), 2,63 (д, J=11,1 Гц, 1H), 1,33-1,24 (м, 2H), 0,86 (с, 2H), 0,83 (с, 3H). 13C ЯМР (150,8 MГц, D2O) δ 182,7, 62,3, 45,6, 35,5, 30,0, 25,8, 19,3, 12,7. Порошковая рентгеновская дифрактограмма для C92 дана на Фигуре 13; характеристические пики перечислены в таблице W.ISWR-IER+ (m/z): [M+H]+ Calculated for CeightHfourteenNO2.156.1019; Found, 156.1019.oneH NMR (600 MHz, D2O) δ 3.23 (d,J=1.1 Hz, 1H), 3.09 (dd,J=11.1, 5.2 Hz, 1H), 2.63 (d,J=11.1 Hz, 1H), 1.33-1.24 (m, 2H), 0.86 (s, 2H), 0.83 (s, 3H).13C NMR (150.8 MHz, D2O) δ 182.7, 62.3, 45.6, 35.5, 30.0, 25.8, 19.3, 12.7. Powder X-ray diffraction pattern forC92 given in Figure 13; characteristic peaks are listed in Table W.
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
Стадия 3. Синтез (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C42).Step 3. Synthesis of (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane -2-carboxylic acid ( C42 ).
Смесь C91 (1,29 г, 5,68 ммоль), 4-(диметиламино)пиридина (0,60 г, 4,8 ммоль) и N, N-диизопропилэтиламина (1,70 мл, 9,75 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл), обрабатывают п-толуолсульфонилхлоридом (0,99 г, 5,2 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при 20°C, загружают C92 (75,7% масс., 1,00 г, 4,70 ммоль) и перемешивание продолжают в течение ночи при 20°C. Полученную суспензию смешивают с пропан-2-илацетатом (10 мл) и промывают последовательно водным раствором лимонной кислоты (10%, 10 мл) и водой (10 мл). Органический слой затем концентрируют, затем добавляют пропан-2-илацетат (5 мл), затем по каплям добавляют гептан (15 мл) из капельной воронки. Твердые вещества выделяют фильтрацией и сушат под вакуумом с получением (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C42) в виде белого твердого вещества. Выход: 1,2 г. Это соединение демонстрирует два набора ЯМР сигналов. Основной и незначительный наборы соответствуют Z и E изомерам третичного амида, соответственно, в молярном отношении 20:1. Образец также содержит изопропилацетат в 37% молярном отношении относительно C42, показывая 1H резонансы при 4,86, 1,96, и 1,17 ч./млн., и 13C резонансы при 169,7, 66,9, 21,5, и 21,0 ч./млн. 1H и 13C сигналы обозначают с применением TMS сигнала, установленного на 0 ч./млн. в обоих.Mixture of C91 (1.29 g, 5.68 mmol), 4-(dimethylamino)pyridine (0.60 g, 4.8 mmol) and N,N -diisopropylethylamine (1.70 ml, 9.75 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml), treated with p -toluenesulfonyl chloride (0.99 g, 5.2 mmol). The reaction mixture is then stirred for 2 hours at 20°C, C92 (75.7% wt., 1.00 g, 4.70 mmol) is charged and stirring is continued overnight at 20°C. The resulting suspension is mixed with propan-2-ylacetate (10 ml) and washed successively with an aqueous citric acid solution (10%, 10 ml) and water (10 ml). The organic layer is then concentrated, then propan-2-ylacetate (5 ml) is added, then heptane (15 ml) is added dropwise from an addition funnel. The solids are isolated by filtration and dried in vacuo to give ( 1R , 2S , 5S )-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3 ,1,0]hexane-2-carboxylic acid ( C42 ) as a white solid. Yield: 1.2 g. This compound shows two sets of NMR signals. The major and minor sets correspond to the Z and E isomers of the tertiary amide, respectively, in a molar ratio of 20:1. The sample also contains isopropyl acetate at a 37% mole ratio relative to C42 showing 1 H resonances at 4.86, 1.96, and 1.17 ppm, and 13 C resonances at 169.7, 66.9, 21, 5, and 21.0 ppm 1 H and 13 C signals are denoted using the TMS signal set to 0 ppm. in both.
МСВР-ИЭР+ (m/z): [M+H]+ Рассчитано для C16H24F3N2O4, 365,1683; Найдено: 365,1684. 1H ЯМР (600 MГц, ДМСО-d 6) δ основной: 9,44 (д, J=8,5 Гц, 1H), 4,44 (д, J=8,5 Гц, 1H), 4,15 (с, 1H), 3,85 (дд, J=10,5, 5,4 Гц, 1H), 3,73 (д, J=10,5 Гц, 1H), 1,53 (дд, J=7,6, 5,3 Гц, 1H), 1,43 (д, J=7,6 Гц, 1H), 1,01 (с, 3H), 1,01 (с, 9H), 0,83 (с, 3H); незначительный: 9,11 (д, J=9,4 Гц, 1H), 4,53 (с, 1H), 4,33 (д, J=9,4 Гц, 1H), 3,53 (дд, J=12,5, 5,3 Гц, 1H), 3,41 (д, J=12,5 Гц, 1H), 1,55 (д, J=7,5 Гц, 1H), 1,41 (дд, J=7,5, 5,3 Гц, 1H), 1,02 (с, 3H), 0,97 (с, 3H), 0,91 (с, 9H). 13C ЯМР (150,8 MГц, ДМСО-d 6) δ основной: 172,3, 167,5, 156,8 (2 J CF=37,0 Гц), 115,7 (1 J CF=287,7 Гц), 59,1, 58,0, 47,1, 34,6, 29,6, 26,7, 26,1, 25,6, 18,7, 12,0; незначительный: 172,3, 168,1, 155,9 (2 J CF=36,8 Гц), 115,8 (1 J CF=288,1 Гц), 59,9, 57,3, 46,4, 36,2, 32,1, 26,2, 26,0, 24,4, 19,0, 12,7. Порошковая рентгеновская дифрактограмма для C42 дана на фигуре 14; характеристические пики перечислены в таблице X.ISWR-IER+ (m/z): [M+H]+ Calculated for C16H24F3N2O4.365.1683; Found: 365,1684.oneH NMR (600 MHz, DMSO-d 6) δbasic: 9.44 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 4.44 (d,J= 8.5 Hz, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.85 (dd,J=10.5, 5.4 Hz, 1H), 3.73 (d,J=10.5 Hz, 1H), 1.53 (dd,J=7.6, 5.3 Hz, 1H), 1.43 (d,J=7.6 Hz, 1H), 1.01 (s, 3H), 1.01 (s, 9H), 0.83 (s, 3H);minor: 9.11 (d,J=9.4 Hz, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.33 (d,J=9.4 Hz, 1H), 3.53 (dd,J=12.5, 5.3 Hz, 1H), 3.41 (d,J=12.5 Hz, 1H), 1.55 (d,J\u003d 7.5 Hz, 1H), 1.41 (dd,J=7.5, 5.3 Hz, 1H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.91 (s, 9H).13C NMR (150.8 MHz, DMSO-d 6) δbasic: 172.3, 167.5, 156.8 (2 J CF=37.0 Hz), 115.7 (one J CF=287.7 Hz), 59.1, 58.0, 47.1, 34.6, 29.6, 26.7, 26.1, 25.6, 18.7, 12.0;minor: 172.3, 168.1, 155.9 (2 J CF=36.8 Hz), 115.8 (one J CF=288.1 Hz), 59.9, 57.3, 46.4, 36.2, 32.1, 26.2, 26.0, 24.4, 19.0, 12.7. Powder X-ray diffraction pattern forC42 given in figure 14; characteristic peaks are listed in Table X.
Кристаллизация для порошковой рентгеновской дифракции и однокристального рентгеновского структурного анализа проводят следующим образом. Раствор C42 (2,96 г) в этаноле (9 мл) нагревают до 40°C при перемешивании (3500 об./мин.), затем добавляют воду (10,5 мл) в течение 10 минут. Затем добавляют дополнительную воду (16,5 мл) в течение 4 часов, и смесь охлаждают до 10°C и перемешивают в течение ночи. После фильтрации, фильтровальную лепешку промывают водой (6 мл) и сушат при 50°C с получением кристаллического C42 (2,6 г).Crystallization for powder x-ray diffraction and single-crystal x-ray structural analysis is carried out as follows. A solution of C42 (2.96 g) in ethanol (9 ml) was heated to 40° C. with stirring (3500 rpm), then water (10.5 ml) was added over 10 minutes. Then add additional water (16.5 ml) over 4 hours, and the mixture is cooled to 10°C and stirred overnight. After filtration, the filter cake was washed with water (6 ml) and dried at 50° C. to give crystalline C42 (2.6 g).
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
(°2-тэта)Corner
(°2-theta)
Диаграмма ORTEP для данных монокристалла C42 показана на фигуре 15.The ORTEP chart for C42 single crystal data is shown in Figure 15.
Однокристальный рентгеновский структурный анализ C42 Single-crystal X-ray structural analysis of C42
Однокристальный рентгеновский анализSingle crystal x-ray analysis
Сбор данных проводят на дифрактометре Bruker D8 Venture при комнатной температуре. Специальную стратегию данных 0,3 градуса ширины на рамки применяют для разделения доменов, тем самым исключая любые вопросы TWIN и псевдосимметрии.Data collection is carried out on a Bruker D8 Venture diffractometer at room temperature. A special data strategy of 0.3 degrees width per frame is used to separate the domains, thereby eliminating any TWIN and pseudo-symmetry issues.
Структуру разрешают путем внутреннего фазирования с использованием программного пакета SHELX в группе ромбоэдрического класса R3. В дальнейшем структуру уточняют полноматричным методом наименьших квадратов. Все атомы, отличные от водорода, найдены и уточнены с использованием параметров анизотропного смещения.The structure is resolved by internal phasing using the SHELX software package in the R 3 rhombohedral class group. The structure is further refined by the full matrix least squares method. All non-hydrogen atoms are found and refined using anisotropic displacement parameters.
Атомы водорода, расположенные на азоте и кислороде, найдены из разностной карты Фурье и уточнены с ограничением расстояний. Остальные атомы водорода размещены в расчетных положениях и им позволили перемещаться на своих атомах-носителях. Окончательное уточнение включает параметры изотропного смещения для всех атомов водорода.Hydrogen atoms located on nitrogen and oxygen were found from the difference Fourier map and refined with limited distances. The remaining hydrogen atoms are placed in calculated positions and allowed to move on their carrier atoms. The final refinement includes isotropic displacement parameters for all hydrogen atoms.
Анализ абсолютной структуры с использованием способов вероятности (Hooft, 2008) проводят с использованием PLATON (Spek). Результаты показывают, что абсолютная структура назначена правильно. Способ рассчитывает, что вероятность того, что структура назначена правильно, составляет 100%. Параметр Хофта представлен как -0,08 с осо (оценочное стандартное отклонение) (7), и параметр Парсона представлен как -0,09 с осо (6).Absolute structure analysis using probability methods (Hooft, 2008) is performed using PLATON (Spek). The results show that the absolute structure is assigned correctly. The method calculates that the probability that the structure is assigned correctly is 100%. Hooft's parameter is presented as -0.08 s os (estimated standard deviation) (7), and Parson's parameter is presented as -0.09 s os (6).
Определяют и моделируют нарушение занятости популяции как отношение 78:22 в сегменте C1_F1_F2.Population occupancy disruption is determined and modeled as a ratio of 78:22 in the C1_F1_F2 segment.
Итоговый R-индекс составляет 5,8%. Конечная разностная карта Фурье не обнаружила отсутствующей или смещенной электронной плотности.The final R-index is 5.8%. The final difference Fourier map showed no missing or shifted electron density.
Соответствующий кристалл, сбор данных и уточняющая информация сведены в таблицу Y. Координаты атомов, длины связей, углы связей и параметры смещения перечислены в таблицах Z-BB.The corresponding crystal, data acquisition, and refinement information are summarized in Table Y. Atomic coordinates, bond lengths, bond angles, and bias parameters are listed in Tables Z-BB.
Список используемого программного обеспечения и ссылок можно найти в Монокристальном рентгеновском определении структуры примера 13, Твердая форма 1.A list of software and references used can be found in Single Crystal X-ray Structure Determination Example 13,
Масса формулы
Температура
Длина волны
Кристаллическая система
Пространственная группа
Постоянная решетки
Объем
Z
Плотность (расчетная)
Коэффициент абсорбции
F(000)
Размер кристалла
Интервал тэта для сбора данных
Диапазоны индексов
Собранные отражения
Независимые отражения
Полнота до тэта=67,679°
Коррекция абсорбции
Способ уточнения
Данные/ограничения/параметры
Соответствие по F 2
Конечные R индексы [I>2σ(I)]
R индексы (все данные)
Параметр абсолютной структуры
Коэффициент возбуждения
Наибольшие дифф. пики и впадиныEmpirical Formula
formula mass
Temperature
Wavelength
Crystal system
space group
Lattice constant
Volume
Z
Density (calculated)
Absorption coefficient
F (000)
Crystal size
Theta interval for data collection
Index ranges
Collected Reflections
Independent Reflections
Completeness to theta=67.679°
Absorption correction
Refinement method
Data/Restrictions/Parameters
Compliance with F 2
Finite R indices [ I>2σ(I) ]
R indices (all data)
Absolute Structure Parameter
Excitation factor
The largest diff. peaks and valleys
364,36
296(2) K
1,54178 Å
Тригональная
R3
a=14,1740(6) Å
b=14,1740(6) Å
c=14,1740(2) Å
1715,9(4) Å3
3
1,058 Мг/м3
0,788 мм−1
576
0,200×0,100×0,100 мм3
6,445-80,034°
-17<=h<=16, -14<=k<=16,
-14<=l<=17
13310
4011 [R int =0,0369]
98,9%
Эмпирическая
Наименьшие квадраты в полноматричном приближении по F 2
4011/6/244
1,056
R1=0,0582, wR2=0,1675
R1=0,0611, wR2=0. 0,1710
-0,09(6)
н/д
0,292 и −0,174 e.Å−3 C 16 H 23 F 3 N 2 O 4
364.36
296(2) K
1.54178 Å
Trigonal
R3
a =14.1740(6) Å
b =14.1740(6) Å
c = 14.1740(2) Å
1715.9(4) Å 3
3
1.058 Mg/ m3
0.788 mm -1
576
0.200×0.100×0.100 mm 3
6.445-80.034°
-17<= h <=16, -14<= k <=16,
-14<= l <=17
13310
4011 [ Rint = 0.0369 ]
98.9%
empirical
Least squares in the full-matrix approximation in F 2
4011/6/244
1.056
-0.09(6)
n/a
0.292 and -0.174 e.Å -3
β=114,11°
γ=114,11° α= 114.11°
β= 114.11°
γ =114.11°
Таблица Z. Атомные координаты (x 104) и параметры эквивалентного изотропного замещения (Å2×103) для C42. U(экв) определены как одна треть от следа ортогонализированного тензора Uij.Table Z. Atomic coordinates (x 10 4 ) and equivalent isotropic substitution parameters (Å 2 × 10 3 ) for C42 . U(eq) are defined as one third of the trace of the orthogonalized tensor U ij .
Таблица AA. Длины связей [Å] и углы [°] для C42.Table A.A. Bond lengths [Å] and angles [°] for C42 .
Симметричные превращения используют для создания эквивалентных атомов.Symmetric transformations are used to create equivalent atoms.
Таблица BB. Параметры анизотропного замещения (Å2×103) для C42. Экспонента фактора анизотропного замещения принимает форму: -2π2[h2 a*2U11 + ... + 2 h k a* b* U12].BB table. Anisotropic substitution parameters (Å 2 ×10 3 ) for C42 . The exponent of the anisotropic substitution factor takes the form: -2π 2 [h 2 a* 2 U 11 + ... + 2 hka* b* U 12 ].
В дополнение к получению (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоновой кислоты (C42) согласно способам, описанным выше, соединение также может быть получено как изображено на схемах реакции, показанных непосредственно ниже. На стадии 1, метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилат гидрохлорид сначала обрабатывают триэтиламином в смеси тетрагидрофурана и воды для нейтрализации гидрохлорида, затем гидролизуют метиловый эфир с применением гидроксида натрия в смеси тетрагидрофурана и воды с получением (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата натрия.In addition to obtaining (1 R ,2 S ,5 S )-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane -2-carboxylic acid ( C42 ) according to the methods described above, the compound can also be obtained as depicted in the reaction schemes shown directly below. In
Получение (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилат натрияPreparation of sodium (1R,2S,5S)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate
В подходящий сосуд добавляют тетрагидрофуран (30 мл), воду (7,5 мл), триэтиламин (7,62 мл, 54,7 ммоль) и гидрохлорид метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0] гексан-2-карлоксилата (7,59 г, 36,9 ммоль). Смесь перемешивают при 25°C в течение, по меньшей мере, 30 минут. Перемешивание останавливают и слои разделяют. В отдельном сосуде 28% масс./масс. водного гидроксида натрия (4,19 мл, 38,3 ммоль) и тетрагидрофуран (71 мл) добавляют при перемешивании при 40°C. 25% органического слоя, содержащего раствор метил (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0] гексан-2-карлоксилата в тетрагидрофуране, после разделения добавляют, и раствор засевают (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилатом натрия (0,1182 г, 0,7336 ммоль - ранее полученным по аналогичной методике). Смесь выдерживают при 40°C в течение, по меньшей мере, 15 минут и медленно добавляют оставшиеся 75% органического слоя. Смесь выдерживают при перемешивании при 40°C в течение 16 часов, затем медленно охлаждают до 20°C и выдерживают в течение, по меньшей мере, 4 ч. Полученный твердый (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилат натрия выделяют фильтрацией, промывают раствором, состоящим из тетрагидрофурана (43 мл) и воды (2,25 мл). Твердый продукт сушат при 70°C под вакуумом с получением 6,13 г (93,8%) (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата натрия в виде кристаллического твердого вещества. ПРД определяют способами, описанными выше.To a suitable vessel add tetrahydrofuran (30 ml), water (7.5 ml), triethylamine (7.62 ml, 54.7 mmol) and methyl (1R,2S,5S)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo hydrochloride [3.1.0]hexane-2-caroxylate (7.59 g, 36.9 mmol). The mixture is stirred at 25°C for at least 30 minutes. Stirring is stopped and the layers are separated. In a separate vessel 28% wt./mass. aqueous sodium hydroxide (4.19 ml, 38.3 mmol) and tetrahydrofuran (71 ml) are added with stirring at 40°C. 25% organic layer containing a solution of methyl (1R,2S,5S)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate in tetrahydrofuran was added after separation and the solution was seeded (1R, 2S,5S)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-sodium carboxylate (0.1182 g, 0.7336 mmol - previously obtained by a similar method). The mixture is kept at 40° C. for at least 15 minutes and the remaining 75% of the organic layer is slowly added. The mixture is kept under stirring at 40°C for 16 hours, then slowly cooled to 20°C and held for at least 4 hours. sodium azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate is isolated by filtration, washed with a solution consisting of tetrahydrofuran (43 ml) and water (2.25 ml). The solid is dried at 70° C. under vacuum to give 6.13 g (93.8%) of (1R,2S,5S)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-caroxylate sodium as a crystalline solid. PDP is determined by the methods described above.
Выбранные ПРД пики кристаллического (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилата натрия.Selected XRD peaks of crystalline (1R,2S,5S)-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3,1,0]hexane-2-caroxylate sodium.
градусы
2-θ
± 0,2 °2-θCorner
degrees
2-θ
± 0.2 °2-θ
градусы
2-θ
± 0,2 °2-θCorner
degrees
2-θ
± 0.2 °2-θ
градусы
2-θ
± 0,2 °2-θCorner
degrees
2-θ
± 0.2 °2-θ
Выбранные ПРД пики (S)-3,3-диметил-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бутановой кислоты (C91)Selected XRD peaks of (S)-3,3-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)butanoic acid ( C91 )
2-θ ±0,2 °2-θAngle degrees
2-θ ±0.2 °2-θ
2-θ
±0,2 °2-θAngle degrees
2-θ
±0.2 °2-θ
2-θ
±0,2 °2-θAngle degrees
2-θ
±0.2 °2-θ
Уточнение кристаллических данных и уточнение структуры для (S)-3,3-диметил-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бутановой кислоты (C91).Refinement of crystal data and refinement of the structure for (S)-3,3-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)butanoic acid ( C91 ).
Масса формулы
Температура
Длина волны
Кристаллическая система
Пространственная группа
Постоянная решетки
Объем
Z
Плотность (расчетная)
Коэффициент абсорбции
F(000)
Размер кристалла
Интервал тэта для сбора данных
Диапазоны индексов
Собранные отражения
Независимые отражения
Полнота до тэта=67,679°
Коррекция абсорбции
Способ уточнения
Данные/ограничения/параметры
Соответствие по F 2
Конечные R индексы [I>2σ(I)]
R индексы (все данные)
Параметр абсолютной структуры
Коэффициент возбуждения
Наибольшие дифф. пики и впадиныEmpirical formula
formula mass
Temperature
Wavelength
Crystal system
space group
Lattice constant
Volume
Z
Density (calculated)
Absorption coefficient
F (000)
Crystal size
Theta interval for data collection
Index ranges
Collected Reflections
Independent Reflections
Completeness to theta=67.679°
Absorption correction
Refinement method
Data/Restrictions/Parameters
Compliance with F 2
Finite R indices [ I>2σ(I) ]
R indices (all data)
Absolute Structure Parameter
Excitation factor
The largest diff. peaks and valleys
227,19
173(2) K
1,54178 Å
Тетрагональная
P41212
a=9,9168(6) Å
b=9,9168(6) Å
c=22,721(2) Å
2234,5(4) Å3
8
1,351 Мг/м3
1,184 мм−1
944
0,200×0,170×0,080 мм3
4,866-70,114°
-11<=h<=10, -12<=k<=12, -27<=l<=27
48160
2122 [R int =0,0392]
99,8%
Эмпирическая
Наименьшие квадраты в полноматричном приближении по F 2
2122/9/158
1,010
R1=0,0408, wR2=0,1012
R1=0,0429, wR2=0,1039
0,03(4)
н/д
0,280 и −0,215 e.Å−3 C 8 H 12 F 3 NO 3
227.19
173(2) K
1.54178 Å
tetragonal
P 4 1 2 1 2
a =9.9168(6) Å
b =9.9168(6) Å
c = 22.721(2) Å
2234.5(4) Å 3
eight
1.351 Mg/ m3
1.184 mm -1
944
0.200×0.170×0.080 mm 3
4.866-70.114°
-11<= h <=10, -12<= k <=12, -27<= l <=27
48160
2122 [ Rint = 0.0392 ]
99.8%
empirical
Least squares in the full-matrix approximation in F 2
2122/9/158
1.010
0.03(4)
n/a
0.280 and -0.215 e.Å -3
β=90°
γ=90° α= 90°
β= 90°
γ =90°
На стадии 2, полученный (1R,2S,5S)-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карлоксилат натрия затем сочетают с (S)-3,3-диметил-2-(2,2,2-трифторацетамидо)бутановой кислоты с присутствии тозилхлорида и диметиламинопиридина в тетрагидрофуране. Тетрагидрофуран удаляют и заменяют изопропилацетатом, затем обрабатывают HCl в насыщенном растворе соли, затем обрабатывают водой и гептаном с получением C42.In
Кристаллический C42 характеризуют ПРД и идентифицируют дополнительную форму, полученную после продолжительной сушки или более высокой температуры.Crystalline C42 characterizes the PDP and identifies an additional form obtained after prolonged drying or higher temperature.
Выбранные ПРД пики для C42 - кристаллическая форма, полученная после продолжительной сушки или более высокой температурыSelected XRD peaks for C42 - crystalline form obtained after prolonged drying or higher temperature
градусы
2-θ
± 0,2 °2-θCorner
degrees
2-θ
± 0.2 °2-θ
градусы
2-θ
± 0,2 °2-θCorner
degrees
2-θ
± 0.2 °2-θ
градусы
2-θ
± 0,2 °2-θCorner
degrees
2-θ
± 0.2 °2-θ
Противовирусная активность от инфекции SARS-CoV-2Antiviral activity against SARS-CoV-2 infection
Способность соединений предотвращать гибель клеток, вызванную коронавирусом SARS-CoV-2, или цитопатический эффект можно оценить по жизнеспособности клеток с использованием формата анализа, в котором люцифераза используется для измерения внутриклеточного АТФ в качестве конечной точки. Коротко, клетки VeroE6, которые обогащены экспрессией hACE2, инокулируют SARS-CoV-2 (USA_WA1/2020) при множественности заражения 0,002 в BSL-3 lab. Клетки, инокулированные вирусом, затем добавляют в планшеты с готовым к анализу соединением при плотности 4000 клеток/лунку. После 3-дневной инкубации, когда вирус-индуцированный цитопатический эффект составляет 95% в необработанных инфицированных контрольных условиях, жизнеспособность клеток оценивают с помощью Cell Titer-Glo (Promega) в соответствии с протоколом производителя, который количественно определяет уровни АТФ. Цитотоксичность соединения оценивают параллельно не инфицированным клеткам. Тестируемые соединения испытывают либо по отдельности, либо в присутствии ингибитора P-гликопротеина (P-gp) CP-100356 в концентрации 2 мкм. Включение CP 100356 предназначено для оценки того, выводятся ли тестируемые соединения из клеток VeroE6, которые имеют высокие уровни экспрессии P-гликопротеина. Долю эффекта для каждого тестируемого соединения рассчитывают на основании значений для лунок без вируса и контрольных лунок, содержащих вирус на каждом планшете для анализа. Значение концентрации, необходимой для 50% ответа (EC50), определяют на основе этих данных с использованием 4-параметрической логистической модели. Кривые EC50 соответствуют наклону 3 по Хиллу при >3 и максимальной дозе, дающей ≥50% эффект. Если цитотоксичность обнаруживают при эффекте более 30%, соответствующие данные исключают из определения ЕС50.The ability of compounds to prevent SARS-CoV-2 coronavirus-induced cell death or cytopathic effect can be assessed by cell viability using an assay format that uses luciferase to measure intracellular ATP as an endpoint. Briefly, VeroE6 cells that are enriched in hACE2 expression are inoculated with SARS-CoV-2 (USA_WA1/2020) at an MOI of 0.002 in a BSL-3 lab. Cells inoculated with virus are then added to assay-ready compound plates at a density of 4000 cells/well. After 3 days of incubation, when the virus-induced cytopathic effect is 95% under untreated infected control conditions, cell viability is assessed using Cell Titer-Glo (Promega) according to the manufacturer's protocol, which quantifies ATP levels. The cytotoxicity of the compound is evaluated in parallel to non-infected cells. Test compounds are tested either alone or in the presence of P-glycoprotein (P-gp) inhibitor CP-100356 at a concentration of 2 µM. The inclusion of CP 100356 is intended to assess whether test compounds are cleared from VeroE6 cells that have high levels of P-glycoprotein expression. The proportion of effect for each test compound is calculated from the values for wells without virus and control wells containing virus on each assay plate. The concentration required for a 50% response (EC 50 ) is determined from these data using a 4-parameter logistic model. Curves EC 50 correspond to slope 3 Hill at >3 and the maximum dose, giving ≥50% effect. If cytotoxicity is detected at an effect greater than 30%, the corresponding data is excluded from the definition of the EU 50 .
Для планшетов с цитотоксичностью рассчитывают долю эффекта для каждого вида тестируемого соединения на основе значений для контрольных лунок, содержащих только клетки, и контрольных лунок, содержащих гиамин, на каждом аналитическом планшете. Значение CC50 рассчитывают с использованием 4-параметрической логистической модели. Затем рассчитывают TI путем деления значения CC50 на значение EC50.For plates with cytotoxicity, calculate the proportion of effect for each type of test compound based on the values for the cell-only control wells and the hyamine-containing control wells on each assay plate. The CC 50 value is calculated using a 4-parameter logistic model. The TI is then calculated by dividing the CC 50 value by the EC 50 value.
FRET исследование и анализ 3C протеазы SARS-CoV-2 коронавирусаFRET study and analysis of SARS-CoV-2 coronavirus 3C protease
Протеолитическую активность основной протеазы, 3CLpro, SARS-CoV-2 контролируют с помощью анализа непрерывного резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET). Анализ SARS-CoV-2 3CLpro измеряет активность полноразмерной 3CL протеазы SARS-CoV-2 по расщеплению синтетического флуоргенного субстратного пептида со следующей последовательностью: Dabcyl-KTSAVLQ-SGFRKME-Edans, смоделированной на основе консенсусного пептида (V. Grum-Tokars et al. Evaluating the 3C-like protease activity of SARS-coronavirus: recommendations for standardized assays for drug discovery. Virus Research 133 (2008) 63-73). Флуоресценцию расщепленного пептида Edans (возбуждение 340 нм/испускание 490 нм) измеряют с использованием протокола интенсивности флуоресценции на ридере Flexstation (Molecular Devices). Флуоресцентный сигнал снижается в присутствии PF-835231, мощного ингибитора SARS-CoV-2 3CLpro. Буфер для реакции анализа содержит 20 мМ Трис-HCl (pH 7,3), 100 нМ NaCl, 1 мМ ЭДТК и 25 мкм пептидного субстрата. Ферментные реакции инициируют добавлением 15 нМ 3CL протеазы SARS-CoV-2 и проводят в течение 60 минут при 23°C. Долю ингибирования или активности рассчитывают на основе контрольных лунок без соединения (0% ингибирования/100% активности) и контрольного соединения (100% ингибирования/0% активности). Значения IC50 получают с использованием четырехпараметрической модели подгонки с использованием программного обеспечения ABASE (IDBS). Значения Ki соответствуют уравнению Моррисона с параметром концентрации фермента, установленным на уровне 15 нМ, параметром Km, установленным на уровне 14 мкм, и параметром концентрации субстрата, установленным на уровне 25 мкм, с использованием программного обеспечения ABASE (IDBS).The proteolytic activity of the major protease, 3CL pro , of SARS-CoV-2 is monitored by a continuous fluorescence resonance energy transfer (FRET) assay. The SARS-CoV-2 3CL pro assay measures the activity of the full-length SARS-CoV-2 3CL protease by cleaving a synthetic fluorogenic substrate peptide with the following sequence: Dabcyl-KTSAVLQ-SGFRKME-Edans, modeled on a consensus peptide (V. Grum-Tokars et al. Evaluating the 3C-like protease activity of SARS-coronavirus: recommendations for standardized assays for drug discovery Virus Research 133 (2008) 63-73). The fluorescence of the digested Edans peptide (excitation 340 nm/emission 490 nm) is measured using the fluorescence intensity protocol on a Flexstation reader (Molecular Devices). The fluorescent signal is reduced in the presence of PF-835231, a potent SARS-CoV-2 3CL pro inhibitor. The assay reaction buffer contains 20 mM Tris-HCl (pH 7.3), 100 nM NaCl, 1 mM EDTA, and 25 μM peptide substrate. Enzymatic reactions initiated by adding 15 nm 3CL protease SARS-CoV-2 and carried out for 60 minutes at 23°C. The proportion of inhibition or activity is calculated based on control wells without compound (0% inhibition/100% activity) and control compound (100% inhibition/0% activity). IC 50 values are obtained using a four parameter fitting model using ABASE software (IDBS). The Ki values correspond to the Morrison equation with the enzyme concentration parameter set at 15 nM, the Km parameter set at 14 μm, and the substrate concentration parameter set at 25 μm using ABASE software (IDBS).
Протеолитическую активность 3CL протеазы SARS-CoV-2 коронавируса измеряют с помощью анализа непрерывного резонансного переноса энергии флуоресценции. FRET анализ SARS-CoV-2 3CLpro измеряет катализируемое протеазой расщепление TAMRA-SITSAVLQSGFRKMK-(DABCYL)-OH до TAMRA-SITSAVLQ и SGFRKMK(DABCYL)-OH. Флуоресценцию расщепленного пептида TAMRA (возб. 558 нм/исп. 581 нм) измеряют с использованием планшетного ридера для флуоресценции TECAN SAFIRE в течение 10 мин. Типовые реакционные растворы содержат 20 мМ HEPES (pH 7,0), 1 мМ EDTК, 4,0 мкм субстрата FRET, 4% ДМСО и 0,005% Tween-20. Анализы инициируют добавлением 25 нМ SARS 3CLpro (нуклеотидная последовательность 9985-10902 полной последовательности генома штамма Urbani коронавируса SARS (номер доступа NCBI AY278741)). Долю ингибирования определяют дважды при уровне ингибитора 0,001 мМ. Данные анализируют с помощью программы анализа нелинейной регрессии Kalidagraph с использованием уравнения:The proteolytic activity of the SARS-CoV-2 coronavirus 3CL protease was measured by continuous resonance fluorescence energy transfer assay. The SARS-CoV-2 3CL pro FRET assay measures protease-catalyzed cleavage of TAMRA-SITSAVLQSGFRKMK-(DABCYL)-OH to TAMRA-SITSAVLQ and SGFRKMK(DABCYL)-OH. The fluorescence of the digested TAMRA peptide (ex. 558 nm/exp. 581 nm) was measured using a TECAN SAFIRE Fluorescence Plate Reader for 10 minutes. Typical reaction solutions contain 20 mM HEPES (pH 7.0), 1 mM EDTK, 4.0 μm FRET substrate, 4% DMSO, and 0.005% Tween-20. The assays are initiated by adding 25 nM SARS 3CL pro (nucleotide sequence 9985-10902 of the full genome sequence of the SARS coronavirus strain Urbani (NCBI accession number AY278741)). The proportion of inhibition is determined twice at an inhibitor level of 0.001 mm. The data is analyzed with the Kalidagraph non-linear regression analysis program using the equation:
FU=расхождение + (предел) (1- e-(kobs)t)FU=divergence + (limit) (1- e -(kobs) t)
где расхождение равно сигналу флуоресценции нерасщепленного пептидного субстрата, и предел равен флуоресценции полностью расщепленного пептидного субстрата. Kobs представляет собой константу скорости первого порядка для этой реакции, и в отсутствие какого-либо ингибитора представляет использование субстрата. В ферменте запускается реакция, которая содержит необратимый ингибитор, и если рассчитанный предел составляет менее 20% от теоретического максимального предела, вычисленный kobs является скоростью инактивации 3C протеазы коронавируса. Наклон (kobs/I) графика kobs vs. [I] является мерой авидности ингибитора для фермента. Для очень быстрых необратимых ингибиторов kobs/I рассчитывают из наблюдений только для одного или двух [I], а не как наклон.where the divergence is equal to the fluorescence signal of the uncleaved peptide substrate, and the limit is equal to the fluorescence of the fully cleaved peptide substrate. Kobs is the first order rate constant for this reaction, and in the absence of any inhibitor represents substrate utilization. The enzyme starts a reaction that contains an irreversible inhibitor, and if the calculated limit is less than 20% of the theoretical maximum limit, the calculated kobs is the rate of inactivation of the 3C protease of the coronavirus. Slope (kobs/I) plot kobs vs. [I] is a measure of the avidity of an inhibitor for an enzyme. For very fast irreversible inhibitors, kobs/I is calculated from observations for only one or two [I], and not as a slope.
или
N 2-[(транс-4-цианоциклогексил)карбонил]-N-{(1R)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-4-метил-L-лейцинамид N 2 -[( trans -4-cyanocyclohexyl)carbonyl]- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L -leucinamide
or
N 2 -[( trans -4-cyanocyclohexyl)carbonyl] -N -{(1 R )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-4-methyl-L -leucinamide
или
N-{(1R)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-N 2-[2-(циклогексилокси)пропаноил]-4-метил-L-лейцинамид N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- N 2 -[2-(cyclohexyloxy)propanoyl]-4-methyl-L-leucinamide
or
N -{(1 R )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}- N 2 -[2-(cyclohexyloxy)propanoyl]-4-methyl-L-leucinamide
или
(2R,4S)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамидDiastereomer 1: ( 2S , 4R )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1- { N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide
or
( 2R , 4S )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N- [(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide
или
(2R,4S)-4-трет-бутил-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-1-{N-[(трифторметил)сульфонил]-L-валил}пиперидин-2-карбоксамидDiastereomer 2: ( 2S , 4R )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1- { N -[(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide
or
( 2R , 4S )-4- tert -butyl- N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-1-{ N- [(trifluoromethyl)sulfonyl]-L-valyl}piperidine-2-carboxamide
или
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-D-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамидFirst-eluting diastereomer: ( 1R , 2S , 5S ) -N -{( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[ 3-cyclobutyl- N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
or
(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-cyclobutyl- N -(trifluoroacetyl)-D-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
или
(1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-3-[3-циклобутил-N-(трифторацетил)-D-аланил]-6,6-диметил-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамидSecond-eluting diastereomer: (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[ 3-cyclobutyl- N- (trifluoroacetyl)-L-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
or
(1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-3-[3-cyclobutyl- N -(trifluoroacetyl)-D-alanyl]-6,6-dimethyl-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide
1. Не определено.1. Not defined.
2. Региохимия примера 41 определена не точно; другими возможными структурами для этого примера являются N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-5,6-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид и N-[(2S)-1-({(1S)-1-циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}амино)-4,4-диметил-1-оксопентан-2-ил]-4-метокси-6,7-бис(трифторметил)-1H-индол-2-карбоксамид.2. The regiochemistry of Example 41 is not well defined; other possible structures for this example are N -[( 2S )-1-({( 1S )-1-cyano-2-[( 3S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4 ,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-5,6-bis(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide and N -[(2 S )-1-({(1 S )-1-cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}amino)-4,4-dimethyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methoxy-6,7 -bis(trifluoromethyl)-1 H -indole-2-carboxamide.
Спрогнозированные фармакокинетические параметры (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида (соединение примера 13) у человекаPredicted pharmacokinetic parameters of (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl -3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide (compound of Example 13) in humans
Основываясь на моделировании физиологически основанной фармакокинетики (PBPK) in-vitro данных, включая CLint из микросом печени человека и CLbile из гепатоцитов человека в сандвич-культивированных условиях, спрогнозированные CL и Vss в плазме человека для (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида составляют 5,9 мл/мин/кг и 0,97 л/кг, соответственно, и дают эффективный период полужизни, t1/2, 1,9 часа. Целевой Ceff 0,16 мМ (несвязанная плазменная концентрация) определяют на основе данных антивирусного ингибирования, полученных из in vitro исследований (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида с либо VeroE6 клетками в присутствии ингибитора P-gp (значение EC90 0,156 мМ), либо в анализе дифференцированных нормальных клеток бронхиального эпителия человека (dNHBE) (значение EC90 0,149 мМ). Доза 380 мг (1R,2S,5S)-N-{(1S)-1-Циано-2-[(3S)-2-оксопирролидин-3-ил]этил}-6,6-диметил-3-[3-метил-N-(трифторацетил)-L-валил]-3-азабицикло[3,1,0]гексан-2-карбоксамида, вводимая перорально три раза в сутки (TID),предположительно покрывает эффективную несвязанную концентрацию 0,16 мМ при Cmin.Based on modeling of physiologically based pharmacokinetics (PBPK) in-vitro data including CL int from human liver microsomes and CL bile from human hepatocytes under sandwich culture conditions, predicted CL and V ss in human plasma for (1 R ,2 S ,5 S )- N -{(1 S )-1-Cyano-2-[(3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N -( trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide are 5.9 ml / min / kg and 0.97 l / kg, respectively, and give an effective half-life, t 1 /2 , 1.9 hours. Target C eff 0.16 mM (unbound plasma concentration) is determined based on antiviral inhibition data obtained from in vitro studies of (1 R ,2 S ,5 S ) -N -{(1 S )-1-Cyano-2-[ (3 S )-2-oxopyrrolidin-3-yl]ethyl}-6,6-dimethyl-3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0] hexane-2-carboxamide with either VeroE6 cells in the presence of a P-gp inhibitor (EC 90 value 0.156 mM) or in a differentiated normal human bronchial epithelial cell (dNHBE) assay (EC 90 value 0.149 mM). 380 mg dose _ _ _ -3-[3-methyl- N- (trifluoroacetyl)-L-valyl]-3-azabicyclo[3.1.0]hexane-2-carboxamide administered orally three times a day (TID) is expected to cover the effective unbound concentration 0.16 mm at C min .
Все патенты и публикации, описанные выше, полностью включены в настоящий документ посредством ссылки. Хотя изобретение было описано в терминах различных предпочтительных вариантов осуществления и конкретных примеров, изобретение следует понимать как не ограниченное вышеприведенным подробным описанием, а как определенное прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентами.All patents and publications described above are incorporated herein by reference in their entirety. Although the invention has been described in terms of various preferred embodiments and specific examples, the invention is to be understood as not being limited by the above detailed description, but as defined by the appended claims and their equivalents.
--->--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙSEQUENCE LIST
<110> Pfizer Inc.<110> Pfizer Inc.
Owen, Dafydd Owen, Dafydd
Pettersson, Martin Pettersson, Martin
Reese, Matthew Reese, Matthew
Sammons, Matthew Sammons, Matthew
Tuttle, Jamison Tuttle, Jamison
Yang, Qingyi Yang, Qingyi
Yang, Xiaojing Yang, Xiaojing
Verhoest, Patrick Verhoest, Patrick
<120> НИТРИЛСОДЕРЖАЩИЕ ПРОТИВОВИРУСНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ<120> NITRILE-CONTAINING ANTIVIRAL COMPOUNDS
<130> PC072660A<130> PC072660A
<150> US 63/073,982<150> US 63/073,982
<151> 2020-09-03<151> 2020-09-03
<150> US 63/143,435<150> US 63/143,435
<151> 2021-01-29<151> 2021-01-29
<150> US 63/170,158<150> US 63/170,158
<151> 2021-04-02<151> 2021-04-02
<150> US 63/194,241<150> US 63/194,241
<151> 2021-05-28<151> 2021-05-28
<160> 2 <160> 2
<170> PatentIn version 3.5<170>PatentIn version 3.5
<210> 1<210> 1
<211> 306<211> 306
<212> БЕЛОК<212> PROTEIN
<213> Homo sapiens<213> Homo sapiens
<400> 1<400> 1
Ser Gly Phe Arg Lys Met Ala Phe Pro Ser Gly Lys Val Glu Gly Cys Ser Gly Phe Arg Lys Met Ala Phe Pro Ser Gly Lys Val Glu Gly Cys
1 5 10 15 1 5 10 15
Met Val Gln Val Thr Cys Gly Thr Thr Thr Leu Asn Gly Leu Trp Leu Met Val Gln Val Thr Cys Gly Thr Thr Thr Leu Asn Gly Leu Trp Leu
20 25 30 20 25 30
Asp Asp Val Val Tyr Cys Pro Arg His Val Ile Cys Thr Ser Glu Asp Asp Asp Val Val Tyr Cys Pro Arg His Val Ile Cys Thr Ser Glu Asp
35 40 45 35 40 45
Met Leu Asn Pro Asn Tyr Glu Asp Leu Leu Ile Arg Lys Ser Asn His Met Leu Asn Pro Asn Tyr Glu Asp Leu Leu Ile Arg Lys Ser Asn His
50 55 60 50 55 60
Asn Phe Leu Val Gln Ala Gly Asn Val Gln Leu Arg Val Ile Gly His Asn Phe Leu Val Gln Ala Gly Asn Val Gln Leu Arg Val Ile Gly His
65 70 75 80 65 70 75 80
Ser Met Gln Asn Cys Val Leu Lys Leu Lys Val Asp Thr Ala Asn Pro Ser Met Gln Asn Cys Val Leu Lys Leu Lys Val Asp Thr Ala Asn Pro
85 90 95 85 90 95
Lys Thr Pro Lys Tyr Lys Phe Val Arg Ile Gln Pro Gly Gln Thr Phe Lys Thr Pro Lys Tyr Lys Phe Val Arg Ile Gln Pro Gly Gln Thr Phe
100 105 110 100 105 110
Ser Val Leu Ala Cys Tyr Asn Gly Ser Pro Ser Gly Val Tyr Gln Cys Ser Val Leu Ala Cys Tyr Asn Gly Ser Pro Ser Gly Val Tyr Gln Cys
115 120 125 115 120 125
Ala Met Arg Pro Asn Phe Thr Ile Lys Gly Ser Phe Leu Asn Gly Ser Ala Met Arg Pro Asn Phe Thr Ile Lys Gly Ser Phe Leu Asn Gly Ser
130 135 140 130 135 140
Cys Gly Ser Val Gly Phe Asn Ile Asp Tyr Asp Cys Val Ser Phe Cys Cys Gly Ser Val Gly Phe Asn Ile Asp Tyr Asp Cys Val Ser Phe Cys
145 150 155 160 145 150 155 160
Tyr Met His His Met Glu Leu Pro Thr Gly Val His Ala Gly Thr Asp Tyr Met His His Met Glu Leu Pro Thr Gly Val His Ala Gly Thr Asp
165 170 175 165 170 175
Leu Glu Gly Asn Phe Tyr Gly Pro Phe Val Asp Arg Gln Thr Ala Gln Leu Glu Gly Asn Phe Tyr Gly Pro Phe Val Asp Arg Gln Thr Ala Gln
180 185 190 180 185 190
Ala Ala Gly Thr Asp Thr Thr Ile Thr Val Asn Val Leu Ala Trp Leu Ala Ala Gly Thr Asp Thr Thr Ile Thr Val Asn Val Leu Ala Trp Leu
195 200 205 195 200 205
Tyr Ala Ala Val Ile Asn Gly Asp Arg Trp Phe Leu Asn Arg Phe Thr Tyr Ala Ala Val Ile Asn Gly Asp Arg Trp Phe Leu Asn Arg Phe Thr
210 215 220 210 215 220
Thr Thr Leu Asn Asp Phe Asn Leu Val Ala Met Lys Tyr Asn Tyr Glu Thr Thr Leu Asn Asp Phe Asn Leu Val Ala Met Lys Tyr Asn Tyr Glu
225 230 235 240 225 230 235 240
Pro Leu Thr Gln Asp His Val Asp Ile Leu Gly Pro Leu Ser Ala Gln Pro Leu Thr Gln Asp His Val Asp Ile Leu Gly Pro Leu Ser Ala Gln
245 250 255 245 250 255
Thr Gly Ile Ala Val Leu Asp Met Cys Ala Ser Leu Lys Glu Leu Leu Thr Gly Ile Ala Val Leu Asp Met Cys Ala Ser Leu Lys Glu Leu Leu
260 265 270 260 265 270
Gln Asn Gly Met Asn Gly Arg Thr Ile Leu Gly Ser Ala Leu Leu Glu Gln Asn Gly Met Asn Gly Arg Thr Ile Leu Gly Ser Ala Leu Leu Glu
275 280 285 275 280 285
Asp Glu Phe Thr Pro Phe Asp Val Val Arg Gln Cys Ser Gly Val Thr Asp Glu Phe Thr Pro Phe Asp Val Val Arg Gln Cys Ser Gly Val Thr
290 295 300 290 295 300
Phe Gln Phe Gln
305 305
<210> 2<210> 2
<211> 306<211> 306
<212> БЕЛОК<212> PROTEIN
<213> Homo sapiens<213> Homo sapiens
<400> 2<400> 2
Ser Gly Phe Arg Lys Met Ala Phe Pro Ser Gly Lys Val Glu Gly Cys Ser Gly Phe Arg Lys Met Ala Phe Pro Ser Gly Lys Val Glu Gly Cys
1 5 10 15 1 5 10 15
Met Val Gln Val Thr Cys Gly Thr Thr Thr Leu Asn Gly Leu Trp Leu Met Val Gln Val Thr Cys Gly Thr Thr Thr Leu Asn Gly Leu Trp Leu
20 25 30 20 25 30
Asp Asp Val Val Tyr Cys Pro Arg His Val Ile Cys Thr Ser Glu Asp Asp Asp Val Val Tyr Cys Pro Arg His Val Ile Cys Thr Ser Glu Asp
35 40 45 35 40 45
Met Leu Asn Pro Asn Tyr Glu Asp Leu Leu Ile Arg Lys Ser Asn His Met Leu Asn Pro Asn Tyr Glu Asp Leu Leu Ile Arg Lys Ser Asn His
50 55 60 50 55 60
Asn Phe Leu Val Gln Ala Gly Asn Val Gln Leu Arg Val Ile Gly His Asn Phe Leu Val Gln Ala Gly Asn Val Gln Leu Arg Val Ile Gly His
65 70 75 80 65 70 75 80
Ser Met Gln Asn Cys Val Leu Lys Leu Lys Val Asp Thr Ala Asn Pro Ser Met Gln Asn Cys Val Leu Lys Leu Lys Val Asp Thr Ala Asn Pro
85 90 95 85 90 95
Lys Thr Pro Lys Tyr Lys Phe Val Arg Ile Gln Pro Gly Gln Thr Phe Lys Thr Pro Lys Tyr Lys Phe Val Arg Ile Gln Pro Gly Gln Thr Phe
100 105 110 100 105 110
Ser Val Leu Ala Cys Tyr Asn Gly Ser Pro Ser Gly Val Tyr Gln Cys Ser Val Leu Ala Cys Tyr Asn Gly Ser Pro Ser Gly Val Tyr Gln Cys
115 120 125 115 120 125
Ala Met Arg Pro Asn Phe Thr Ile Lys Gly Ser Phe Leu Asn Gly Ser Ala Met Arg Pro Asn Phe Thr Ile Lys Gly Ser Phe Leu Asn Gly Ser
130 135 140 130 135 140
Cys Gly Ser Val Gly Phe Asn Ile Asp Tyr Asp Cys Val Ser Phe Cys Cys Gly Ser Val Gly Phe Asn Ile Asp Tyr Asp Cys Val Ser Phe Cys
145 150 155 160 145 150 155 160
Tyr Met His His Met Glu Leu Pro Thr Gly Val His Ala Gly Thr Asp Tyr Met His His Met Glu Leu Pro Thr Gly Val His Ala Gly Thr Asp
165 170 175 165 170 175
Leu Glu Gly Asn Phe Tyr Gly Pro Phe Val Asp Arg Gln Thr Ala Gln Leu Glu Gly Asn Phe Tyr Gly Pro Phe Val Asp Arg Gln Thr Ala Gln
180 185 190 180 185 190
Ala Ala Gly Thr Asp Thr Thr Ile Thr Val Asn Val Leu Ala Trp Leu Ala Ala Gly Thr Asp Thr Thr Ile Thr Val Asn Val Leu Ala Trp Leu
195 200 205 195 200 205
Tyr Ala Ala Val Ile Asn Gly Asp Arg Trp Phe Leu Asn Arg Phe Thr Tyr Ala Ala Val Ile Asn Gly Asp Arg Trp Phe Leu Asn Arg Phe Thr
210 215 220 210 215 220
Thr Thr Leu Asn Asp Phe Asn Leu Val Ala Met Lys Tyr Asn Tyr Glu Thr Thr Leu Asn Asp Phe Asn Leu Val Ala Met Lys Tyr Asn Tyr Glu
225 230 235 240 225 230 235 240
Pro Leu Thr Gln Asp His Val Asp Ile Leu Gly Pro Leu Ser Ala Gln Pro Leu Thr Gln Asp His Val Asp Ile Leu Gly Pro Leu Ser Ala Gln
245 250 255 245 250 255
Thr Gly Ile Ala Val Leu Asp Met Cys Ala Ser Leu Lys Glu Leu Leu Thr Gly Ile Ala Val Leu Asp Met Cys Ala Ser Leu Lys Glu Leu Leu
260 265 270 260 265 270
Gln Asn Gly Met Asn Gly Arg Thr Ile Leu Gly Ser Ala Leu Leu Glu Gln Asn Gly Met Asn Gly Arg Thr Ile Leu Gly Ser Ala Leu Leu Glu
275 280 285 275 280 285
Asp Glu Phe Thr Pro Phe Asp Val Val Arg Gln Cys Ser Gly Val Thr Asp Glu Phe Thr Pro Phe Asp Val Val Arg Gln Cys Ser Gly Val Thr
290 295 300 290 295 300
Phe Gln Phe Gln
305 305
<---<---
Claims (35)
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US63/073,982 | 2020-09-03 | ||
US63/143,435 | 2021-01-29 | ||
US63/170,158 | 2021-04-02 | ||
US63/194,241 | 2021-05-28 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2022113054A Division RU2820150C2 (en) | 2020-09-03 | 2021-08-06 | Nitrile-containing antiviral compounds |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2786722C1 true RU2786722C1 (en) | 2022-12-26 |
Family
ID=
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005113580A1 (en) * | 2004-05-21 | 2005-12-01 | Pfizer Inc. | Anticoronviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses and materials for their synthesis |
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005113580A1 (en) * | 2004-05-21 | 2005-12-01 | Pfizer Inc. | Anticoronviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses and materials for their synthesis |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ZHAI YANGYANG et al. "Cyanohydrin as an Anchoring Group for Potent and Selective Inhibitors of Enterovirus 71 3C Protease", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, 2015, vol. 58, no. 23, pages 9414-9420. WANG YAXIN et al. "Inhibition of enterovirus 71 replication by an [alpha]-hydroxy-nitrile derivative NK-1.9k", ANTIVIRAL RESEARCH, 2017, vol. 141, pages 91-100. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7126628B2 (en) | Nitrile-containing antiviral compounds | |
US20230339930A1 (en) | Antiviral Heteroaryl Ketone Derivatives | |
RU2786722C1 (en) | Nitrile-containing antiviral compounds | |
RU2820150C2 (en) | Nitrile-containing antiviral compounds | |
EA046321B1 (en) | NITRILE-CONTAINING ANTI-VIRAL COMPOUNDS | |
EA047572B1 (en) | NITRILE-CONTAINING ANTIVIRAL COMPOUNDS | |
NZ791608A (en) | Nitrile-containing antiviral compounds | |
OA20440A (en) | Nitrile-containing antiviral compounds | |
OA21481A (en) | Nitrile-containing antiviral compounds. |