RU2783864C2 - Pharmaceutical compositions with il-2 - Google Patents
Pharmaceutical compositions with il-2 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2783864C2 RU2783864C2 RU2018118215A RU2018118215A RU2783864C2 RU 2783864 C2 RU2783864 C2 RU 2783864C2 RU 2018118215 A RU2018118215 A RU 2018118215A RU 2018118215 A RU2018118215 A RU 2018118215A RU 2783864 C2 RU2783864 C2 RU 2783864C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- interleukin
- pharmaceutical composition
- liquid pharmaceutical
- surfactant
- concentration
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 121
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims abstract description 222
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims abstract description 222
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 128
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 88
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 46
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 43
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 38
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 38
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical group [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 29
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims abstract description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 22
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 18
- 200000000018 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 14
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims abstract description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 229940090047 Auto-Injector Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims abstract description 10
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 2qpq Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 6
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N Glutaric acid Chemical compound OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims abstract description 5
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 4
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 3
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 claims abstract description 3
- CWGFSQJQIHRAAE-UHFFFAOYSA-N Cl.Cl.Cl.Cl.OCC(N)(CO)CO Chemical compound Cl.Cl.Cl.Cl.OCC(N)(CO)CO CWGFSQJQIHRAAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K [O-]P([O-])([O-])=O Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 230000001721 combination Effects 0.000 claims description 12
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 12
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 11
- FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N D-Mannitol Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N 0.000 claims description 10
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 10
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 10
- 229960005310 aldesleukin Drugs 0.000 claims description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 6
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 4
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical group [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 229940061607 Dibasic Sodium Phosphate Drugs 0.000 claims description 3
- 229940045641 Monobasic Sodium Phosphate Drugs 0.000 claims description 3
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 102100001249 ALB Human genes 0.000 claims description 2
- 101710027066 ALB Proteins 0.000 claims description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 2
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 claims description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N Trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 2
- 229940050528 albumin Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 claims description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N β-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 238000007792 addition Methods 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 238000005020 pharmaceutical industry Methods 0.000 abstract 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 abstract 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 abstract 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 14
- 229940087463 Proleukin Drugs 0.000 description 11
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 9
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 9
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 9
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 8
- 230000000111 anti-oxidant Effects 0.000 description 8
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 8
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 8
- -1 alkyl sulfate salts Chemical class 0.000 description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 206010003816 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N N'-amino-N-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 4
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-M dodecyl sulfate Chemical class CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- 206010039073 Rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 3
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000002354 daily Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N 2-[dodecanoyl(methyl)amino]acetic acid Chemical class CCCCCCCCCCCC(=O)N(C)CC(O)=O BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 4-[5-[3-(carboxymethoxy)phenyl]-3-(4,5-dimethyl-1,3-thiazol-2-yl)tetrazol-3-ium-2-yl]benzenesulfonate Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=C(OCC(O)=O)C=CC=2)=NN1C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N Benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N Bis-tris methane Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N Cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 2
- 206010012601 Diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N HEPES Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N MOPS Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010050513 Metastatic renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229940071643 Prefilled Syringe Drugs 0.000 description 2
- 229940038850 Rebif Drugs 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108020001027 Ribosomal DNA Proteins 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N Trappsol Cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000004059 degradation Effects 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-M deoxycholate Chemical class C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-M 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- YFVGRULMIQXYNE-UHFFFAOYSA-M lithium;dodecyl sulfate Chemical compound [Li+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O YFVGRULMIQXYNE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- HEGSGKPQLMEBJL-RQICVUQASA-N (2R,3S,4S,5R)-2-(hydroxymethyl)-6-octoxyoxane-3,4,5-triol Chemical compound CCCCCCCCOC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RQICVUQASA-N 0.000 description 1
- GJNXBNATEDXMAK-PFLSVRRQSA-N (2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2R)-2-[[(2R)-2-acetamido-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]-3-(4-chlorophenyl)propanoyl]amino]-3-pyridin-3-ylpropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-6-[bi Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN=C(NCC)NCC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN=C(NCC)NCC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 GJNXBNATEDXMAK-PFLSVRRQSA-N 0.000 description 1
- CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 1-dodecoxydodecane Chemical class CCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCC CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDCJDKXCCYFOCV-UHFFFAOYSA-N 1-hexadecoxyhexadecane Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCCCCCC FDCJDKXCCYFOCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 description 1
- RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 3-[[1,3-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)propan-2-yl]azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound OCC(CO)(CO)NCC(O)CS(O)(=O)=O RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUQQBLRVXOUDTN-XOHPMCGNSA-N 3-[dimethyl-[3-[[(4R)-4-[(3R,5S,7R,8R,9S,10S,12S,13R,14S,17R)-3,7,12-trihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]propyl]azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC(O)CS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 GUQQBLRVXOUDTN-XOHPMCGNSA-N 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 229940022663 Acetate Drugs 0.000 description 1
- 108009000283 Allograft Rejection Proteins 0.000 description 1
- 206010001897 Alzheimer's disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229940009098 Aspartate Drugs 0.000 description 1
- 208000006673 Asthma Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 229960000686 Benzalkonium Chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N Bicine Chemical compound OCCN(CCO)CC(O)=O FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011401 Crohn's disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N DL-aspartic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 206010018651 Graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 210000003000 Inclusion Bodies Anatomy 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 239000011786 L-ascorbyl-6-palmitate Substances 0.000 description 1
- QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N L-ascorbyl-6-palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N 0.000 description 1
- SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methylglycine Chemical compound OCC(CO)(CO)[NH2+]CC([O-])=O SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010053643 Neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 description 1
- 239000007990 PIPES buffer Substances 0.000 description 1
- 229940067631 Phospholipids Drugs 0.000 description 1
- QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K Potassium citrate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010040914 Skin reaction Diseases 0.000 description 1
- KSAVQLQVUXSOCR-UHFFFAOYSA-M Sodium lauroyl sarcosinate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCC(=O)N(C)CC([O-])=O KSAVQLQVUXSOCR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940075582 Sorbic Acid Drugs 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N Sorbitan Chemical compound OCC(O)C1OCC(O)[C@@H]1O JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N Sorbitan monostearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XWVZOOPGSA-N 0.000 description 1
- 208000000995 Spontaneous Abortion Diseases 0.000 description 1
- 208000004732 Systemic Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- 206010043709 Thyroid disease Diseases 0.000 description 1
- 229960001295 Tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 description 1
- FPKOPBFLPLFWAD-UHFFFAOYSA-N Trinitrotoluene Chemical compound CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C([N+]([O-])=O)=C1[N+]([O-])=O FPKOPBFLPLFWAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K Trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920004929 Triton X-114 Polymers 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Vitamin C Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- LWZFANDGMFTDAV-BURFUSLBSA-N [(2R)-2-[(2R,3R,4S)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O LWZFANDGMFTDAV-BURFUSLBSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000003213 activating Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant Effects 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010385 ascorbyl palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 201000001320 atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960004365 benzoic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000007998 bicine buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229920005557 bromobutyl Polymers 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 1
- 108010052897 dermorphin (1-4), Arg(2)-Sar(4)- Proteins 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 1
- 229960003794 ganirelix Drugs 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal Effects 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cells Anatomy 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 201000002481 myositis Diseases 0.000 description 1
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002085 persistent Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000001508 potassium citrate Substances 0.000 description 1
- 229960002635 potassium citrate Drugs 0.000 description 1
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000030788 protein refolding Effects 0.000 description 1
- 201000004681 psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000430 skin reaction Toxicity 0.000 description 1
- 230000035483 skin reaction Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 229960001790 sodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- WSWCOQWTEOXDQX-UHFFFAOYSA-N sorbic acid Chemical compound CC=CC=CC(O)=O WSWCOQWTEOXDQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940035044 sorbitan monolaurate Drugs 0.000 description 1
- 239000001587 sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000011076 sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035048 sorbitan monostearate Drugs 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival Effects 0.000 description 1
- 230000002522 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 1
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherols Natural products 0.000 description 1
- 230000001131 transforming Effects 0.000 description 1
- 239000011791 tripotassium citrate Substances 0.000 description 1
- 235000015870 tripotassium citrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011778 trisodium citrate Substances 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical group [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеThe technical field to which the invention belongs
Изобретение относится к новым фармацевтическим композициям, включающим интерлейкин-2 (IL-2), и их применению при лечении связанных с аутоиммунитетом или воспалительных расстройств.The invention relates to novel pharmaceutical compositions comprising interleukin-2 (IL-2) and their use in the treatment of autoimmunity-related or inflammatory disorders.
Уровень техникиState of the art
Интерлейкин-2 представляет собой цитокин, который изначально описан как благоприятствующий активации и пролиферации Т-лимфоцитов. Его используют клинически для стимуляции эффекторной иммунной реакции при некоторых раковых заболеваниях и инфекционном заболевании. Интерлейкин-2 одобрен в 1998 под товарным знаком пролейкин® для лечения метастазирующего почечно-клеточного рака. Позология пролейкина® включает прерывистое введение высокой дозировки IL-2 – типично 42,106 МЕ за 8 часов для пациента массой 70 кг путем непрерывной инфузии или ежедневной подкожной инъекции в течение 5 дней, которое может повторяться несколько раз после периода без лечения.Interleukin-2 is a cytokine that was originally described as favoring the activation and proliferation of T-lymphocytes. It is used clinically to stimulate an effector immune response in certain cancers and infectious diseases. Interleukin-2 was approved in 1998 under the trademark Proleukin® for the treatment of metastatic renal cell carcinoma. Proleukin® posology involves intermittent administration of a high dose of IL-2, typically 42.10 6 IU over 8 hours for a 70 kg patient, by continuous infusion or daily subcutaneous injection for 5 days, which may be repeated several times after a period without treatment.
Недавно показано, что интерлейкин-2 является существенным для выживания и активации Treg. В дозах, в 10-100 раз меньших, чем пролейкина®, IL-2 не стимулирует иммунитет, но сохраняет аутотолерантность путем специфической активации клеток, которые регулируют иммунитет – регуляторных Т-клеток (Treg). Следовательно, IL-2 проявляет селективное биологическое действие на баланс Treg/Teff – ключевой иммунологический двигатель иммунного гомеостаза. Такое свойство прокладывает путь для применения IL-2 при лечении аутоиммунных заболеваний и воспалительных расстройств (AID) в своей основе из-за недостаточности Treg (Klatzmann & Abbas, Nature Reviews Immunology, 2015, 15, 283–294). В настоящее время проводятся исследования IL-2 в низкой дозе при лечении некоторых аутоиммунных и воспалительных заболеваний, таких как диабет 1 типа.Recently, interleukin-2 has been shown to be essential for Treg survival and activation. At doses 10-100 times lower than proleukin®, IL-2 does not stimulate immunity, but maintains autotolerance by specifically activating cells that regulate immunity - regulatory T cells (Treg). Therefore, IL-2 exhibits a selective biological effect on the Treg/Teff balance, a key immunological engine of immune homeostasis. This property paves the way for the use of IL-2 in the treatment of autoimmune diseases and inflammatory disorders (AID) based on Treg deficiency (Klatzmann & Abbas, Nature Reviews Immunology, 2015, 15, 283–294). Research is currently underway on low dose IL-2 in the treatment of certain autoimmune and inflammatory diseases such as type 1 diabetes.
Интерлейкин-2 поддается разложению в присутствии воды и кислорода. Согласно уровню техники, интерлейкин-2 может подвергаться химическому разложению и физической неустойчивости в растворе. Соответственно, инициируется разработка лиофилизованных препаратов для того, чтобы избежать реакций разложения. В этом отношении выполняются некоторые исследования для того, чтобы идентифицировать стабилизаторы для улучшения устойчивости IL-2 в лиофилизованных препаратах. Например, Hora et al. (Develop. Biol. Standard., 1991, vol 74, 295-306) описывают применение аморфных эксципиентов, таких как аминокислоты, неионогенные поверхностно-активные вещества, гидроксипропил-β-циклодекстрин или сывороточный альбумин, в качестве стабилизаторов для лиофилизации для препаратов IL-2. Для того, чтобы получить устойчивые стандарты цитокинов, таких как IL-2, Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) рекомендует сушку белка вымораживанием в присутствии соответствующего эксципиента и буфера и хранение полученного препарата в сухих условиях при низкой температуре и в инертной атмосфере (Mire-Sluis at al., Journal of immunological methods, 1998, 216, 103-116). Заслуживает внимания, что пролейкин® для лечения метастазирующего почечно-клеточного рака продается в виде лиофилизованной композиции, включающей интерлейкин-2, маннит, додецилсульфат натрия и дигидрофосфат натрия, которая упакована во флакон в инертной среде и должна храниться при 2°С – 8°С. Маннит присутствует как стабилизатор для лиофилизации. Пролейкин® для инъекции следует восстанавливать водой. Как только он восстановлен, пролейкин® следует сразу же использовать и, в любом случае, в пределах 24 часов после восстановления (см., например, общее описание свойств продукта для пролейкина® в United Kingdom, January 20, 2015, Novartis Pharmaceuticals UK Ltd).Interleukin-2 is degradable in the presence of water and oxygen. According to the prior art, interleukin-2 can undergo chemical degradation and physical instability in solution. Accordingly, the development of lyophilized preparations is initiated in order to avoid degradation reactions. In this regard, some research is being done to identify stabilizers to improve the stability of IL-2 in lyophilized formulations. For example, Hora et al. (Develop. Biol. Standard., 1991, vol 74, 295-306) describe the use of amorphous excipients such as amino acids, nonionic surfactants, hydroxypropyl-β-cyclodextrin or serum albumin as lyophilization stabilizers for IL- 2. In order to obtain stable standards for cytokines such as IL-2, the World Health Organization (WHO) recommends freeze-drying the protein in the presence of an appropriate excipient and buffer and storing the resulting preparation under dry conditions at low temperature and in an inert atmosphere (Mire-Sluis at al., Journal of immunological methods, 1998, 216, 103-116). It is noteworthy that Proleukin® for the treatment of metastatic renal cell carcinoma is sold as a lyophilized formulation containing interleukin-2, mannitol, sodium dodecyl sulfate and sodium dihydrogen phosphate, which is packaged in an inert vial and must be stored at 2°C - 8°C . Mannitol is present as a freeze-drying stabilizer. Proleukin® for injection should be reconstituted with water. Once reconstituted, Proleukin® should be used immediately and in any case within 24 hours of reconstitution (See e.g. general product description for Proleukin® in United Kingdom, January 20, 2015, Novartis Pharmaceuticals UK Ltd) .
Такие лиофилизованные препараты не подходят для самостоятельного введения и длительного лечения, поскольку препараты необходимо восстанавливать, и они могут храниться только в течение короткого периода времени после восстановления.Such freeze-dried preparations are not suitable for self-administration and long-term treatment because the preparations must be reconstituted and can only be stored for a short period of time after reconstitution.
Таким образом, существует потребность в альтернативных фармацевтических композициях с IL-2.Thus, there is a need for alternative pharmaceutical compositions with IL-2.
Раскрытие изобретения Disclosure of invention
Изобретение относится к жидкой фармацевтической композиции, подходящей для инъекции пациенту, включающей по существу интерлейкин-2 в концентрации 0,1-20 миллионов МЕ/мл, буферирующий агент, поверхностно-активное вещество и необязательный эксципиент, предпочтительно выбранный из антиоксидантов, регуляторов осмолярности и консервантов, в воде. Интерлейкин-2 может присутствовать в концентрации 2-12 мМЕ/мл, предпочтительно от 4 до 10 мМЕ/мл. В некоторых воплощениях поверхностно-активное вещество представляет собой анионное поверхностно-активное вещество, такое как додецилсульфат натрия (SDS) и додецилсульфат лития. Поверхностно-активное вещество может присутствовать в концентрации примерно 0,05-0,5 мг/мл. Массовое отношение поверхностно-активного вещества к интерлейкину-2 типично составляет от 0,04 до 5, например, от 0,1 до 3,0.The invention relates to a liquid pharmaceutical composition suitable for injection into a patient, comprising essentially interleukin-2 at a concentration of 0.1-20 million IU/ml, a buffering agent, a surfactant and an optional excipient, preferably selected from antioxidants, osmolarity regulators and preservatives , in water. Interleukin-2 may be present at a concentration of 2-12 mIU/ml, preferably 4 to 10 mIU/ml. In some embodiments, the surfactant is an anionic surfactant such as sodium dodecyl sulfate (SDS) and lithium dodecyl sulfate. The surfactant may be present at a concentration of about 0.05-0.5 mg/mL. The weight ratio of surfactant to interleukin-2 is typically 0.04 to 5, eg 0.1 to 3.0.
Жидкую фармацевтическую композицию по изобретению предпочтительно получают из нелиофилизованного интерлейкина-2.The liquid pharmaceutical composition of the invention is preferably prepared from non-lyophilized interleukin-2.
В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция не включает маннит и/или альбумин.In some embodiments, the liquid pharmaceutical composition does not include mannitol and/or albumin.
Интерлейкин-2 может представлять собой рекомбинантный человеческий интерлейкин-2 или его варианты, такие как альдеслейкин.Interleukin-2 may be recombinant human interleukin-2 or variants thereof such as aldesleukin.
В другом или дополнительном воплощении жидкая фармацевтическая композиция по существу состоит из In another or additional embodiment, the liquid pharmaceutical composition essentially consists of
- интерлейкина-2 в дозе 2-12 мМЕ/мл, такой как от 4 до 10 мМЕ/мл,- interleukin-2 at a dose of 2-12 mIU/ml, such as from 4 to 10 mIU/ml,
- додецилсульфата натрия (SDS) в концентрации примерно 0,05-0,5 мг/мл,- sodium dodecyl sulfate (SDS) at a concentration of approximately 0.05-0.5 mg / ml,
- буфера, выбранного из одноосновного фосфата натрия, двухосновного фосфата натрия и их комбинации, присутствующих в концентрации, колеблющейся от 5 мМ до 25 мМ,- a buffer selected from monobasic sodium phosphate, dibasic sodium phosphate and combinations thereof, present in a concentration ranging from 5 mM to 25 mM,
- необязательно, регулятора осмолярности, такого как NaCl, и- optionally, an osmolarity regulator such as NaCl, and
- воды.- water.
Жидкая фармацевтическая композиция по изобретению предпочтительно устойчива при 5°С в течение периода по меньшей мере 6 месяцев.The liquid pharmaceutical composition of the invention is preferably stable at 5° C. for a period of at least 6 months.
В некоторых альтернативных или дополнительных воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению может иметь по меньшей мере одну из следующих особенностей:In some alternative or additional embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention may have at least one of the following features:
- рН композиции составляет от 7,1 до 7,8, предпочтительно рН составляет 7,5 ± 0,2,- the pH of the composition is from 7.1 to 7.8, preferably the pH is 7.5 ± 0.2,
- буферирующий агент предпочтительно представляет собой фосфатный буфер,the buffering agent is preferably a phosphate buffer,
- интерлейкин-2 представляет собой альдеслейкин,- interleukin-2 is an aldesleukin,
- жидкая фармацевтическая композиция подходит для упаковки в устройство для доставки для инъекции, такое как шприц или ручка,the liquid pharmaceutical composition is suitable for being packaged in a delivery device for injection such as a syringe or pen,
- фармацевтическая композиция не включает какой-либо стабилизатор для лиофилизации.- the pharmaceutical composition does not include any stabilizer for lyophilization.
Настоящее изобретение также относится к применению жидкой фармацевтической композиции по изобретению для введения подкожным путем. Типично жидкую фармацевтическую композицию по изобретению можно использовать для лечения или предупреждения аутоиммунного, связанного с иммунитетом или воспалительного расстройства. В таких применениях указанную композицию типично вводят подкожным путем в количестве, эквивалентном дозе интерлейкина-2 0,1 мМЕ – 3 мМЕ.The present invention also relates to the use of the liquid pharmaceutical composition of the invention for subcutaneous administration. Typically, the liquid pharmaceutical composition of the invention can be used to treat or prevent an autoimmune, immune-related or inflammatory disorder. In such applications, said composition is typically administered by the subcutaneous route in an amount equivalent to a dose of interleukin-2 of 0.1 mIU-3 mIU.
Другим предметом изобретения является способ получения жидкой фармацевтической композиции, описанной выше, который включает стадииAnother subject of the invention is a process for the preparation of a liquid pharmaceutical composition as described above, which comprises the steps
а) предоставления концентрированного раствора очищенного интерлейкина-2, предпочтительно содержащего более 20 мМЕ/мг интерлейкина-2,a) providing a concentrated solution of purified interleukin-2, preferably containing more than 20 mIU/mg of interleukin-2,
b) получения композиции указанного концентрированного раствора очищенного интерлейкина-2 путем добавления одного или нескольких эксципиентов с тем, чтобы получить указанную жидкую фармацевтическую композицию с интерлейкином-2,b) obtaining a composition of said concentrated solution of purified interleukin-2 by adding one or more excipients in order to obtain said liquid pharmaceutical composition with interleukin-2,
с) необязательно, упаковки жидкой фармацевтической композиции во флакон, картридж или устройство для доставки для инъекции, такое как шприц или ручка.c) optionally, packaging the liquid pharmaceutical composition in a vial, cartridge or delivery device for injection, such as a syringe or pen.
Изобретение также относится к набору, включающему флакон или картридж, наполненный указанной жидкой композицией, и средства для подкожной инъекции, такие как шприц(ы), игла(ы) и/или автоинжектор. Другим предметом изобретения является система доставки для инъекции, предпочтительно для подкожной инъекции, наполненная жидкой композицией, определенной выше.The invention also relates to a kit comprising a vial or cartridge filled with said liquid composition and means for subcutaneous injection such as syringe(s), needle(s) and/or auto-injector. Another object of the invention is a delivery system for injection, preferably subcutaneous injection, filled with a liquid composition as defined above.
Осуществление изобретения Implementation of the invention
Авторы изобретения показали, что возможно получить жидкий водный препарат интерлейкина-2, который готов для инъекции, и который можно хранить несколько месяцев при температуре между 2°С и 8°С без какого-либо существенного разложения или потери биологической активности. Авторы изобретения таким образом преодолели предвзятое мнение путем разработки высоко устойчивой водной фармацевтической композиции интерлейкина-2, в то время как известный уровень техники показывает плохую устойчивость интерлейкина-2 в воде и ясно ведет к разработке лиофилизованных препаратов.The inventors have shown that it is possible to obtain an aqueous liquid preparation of interleukin-2 which is ready for injection and which can be stored for several months at a temperature between 2°C and 8°C without any significant degradation or loss of biological activity. The inventors thus overcame prejudice by developing a highly stable aqueous pharmaceutical composition of interleukin-2, while the prior art shows poor stability of interleukin-2 in water and clearly leads to the development of lyophilized preparations.
Фармацевтическая композиция, разработанная авторами изобретения, очень проста и не опирается на применение добавляемых и дорогостоящих эксципиентов. Препарат содержит очень мало эксципиентов, типично поверхностно-активное вещество, буферирующий агент и необязательный эксципиент. Необязательный эксципиент может представлять собой, например, антиоксидант, консервант или регулятор осмолярности. Способ получения не требует какой-либо стадии лиофилизации интерлейкина-2. Действительно лиофилизация белка не требуется и должна быть аннулирована, поскольку она может пагубно влиять на биологическую активность и устойчивость интерлейкина-2 в восстановленном растворе.The pharmaceutical composition developed by the inventors is very simple and does not rely on the use of added and costly excipients. The formulation contains very few excipients, typically a surfactant, a buffering agent and an optional excipient. An optional excipient may be, for example, an antioxidant, a preservative or an osmolarity regulator. The production method does not require any interleukin-2 lyophilization step. Indeed, lyophilization of the protein is not required and should be avoided as it can adversely affect the biological activity and stability of interleukin-2 in reconstituted solution.
Жидкая фармацевтическая композиция по изобретению включает низкую концентрацию интерлейкина-2, например, от 1.106 до 5.106 МЕ/мл. Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что даже в таких низких концентрациях IL-2 может быть устойчивым в жидкой композиции по изобретению. Таким образом, жидкая фармацевтическая композиция по изобретению особенно подходит для применения при затяжном лечении. Указанная композиция подходит для частого введения и может быть использована при лечении AID такого типа, как диабет типа 1, рассеянный склероз и ревматоидный артрит. Так как фармацевтическая композиция по изобретению готова для инъекции, указанная фармацевтическая композиция может быть заключена в устройства-ручки или шприцы и таким образом особенно адаптирована для самостоятельного введения.The liquid pharmaceutical composition of the invention comprises a low concentration of interleukin-2, for example from 1.10 6 to 5.10 6 IU/ml. The inventors surprisingly found that even at such low concentrations, IL-2 can be stable in the liquid composition of the invention. Thus, the liquid pharmaceutical composition according to the invention is particularly suitable for use in chronic treatment. Said composition is suitable for frequent administration and may be used in the treatment of AIDs such as type 1 diabetes, multiple sclerosis and rheumatoid arthritis. Since the pharmaceutical composition according to the invention is ready for injection, said pharmaceutical composition can be enclosed in pen or syringe devices and is thus particularly adapted for self-administration.
Кроме того, ожидается, что жидкая фармацевтическая композиция по изобретению произведет меньше локальных побочных действий, таких как локальные кожные реакции (покраснение и/или опухание) в месте инъекции по сравнению с пролейкином®.In addition, the liquid pharmaceutical composition of the invention is expected to produce fewer local side effects such as local skin reactions (redness and/or swelling) at the injection site compared to Proleukin®.
Наконец, способ получения жидкой фармацевтической композиции по изобретению проще и быстрее, чем способы, описанные на известном уровне техники, поскольку интерлейкин-2 включают в композицию только после стадий очистки без какой-либо лиофилизации.Finally, the method for preparing a liquid pharmaceutical composition according to the invention is simpler and faster than the methods described in the prior art, since interleukin-2 is included in the composition only after purification steps without any lyophilization.
▪ Фармацевтическая композиция согласно изобретению▪ Pharmaceutical composition according to the invention
Первым объектом изобретения является водная фармацевтическая композиция, подходящая для инъекции пациенту, включающая от 1.106 до 20.106 МЕ/мл интерлейкина-2.The first object of the invention is an aqueous pharmaceutical composition suitable for injection into a patient, comprising from 1.10 6 to 20.10 6 IU/ml interleukin-2.
Используемый в настоящем описании термин «подходящая для инъекции» означает, что жидкую фармацевтическую композицию можно вводить пациенту инъекцией, предпочтительно, внутривенным, внутримышечным, интрадермальным или подкожным путем.Used in the present description, the term "suitable for injection" means that the liquid pharmaceutical composition can be administered to the patient by injection, preferably by intravenous, intramuscular, intradermal or subcutaneous route.
В предпочтительном воплощении жидкая фармацевтическая композиция по изобретению подходит для интрадермальной или подкожной инъекции.In a preferred embodiment, the liquid pharmaceutical composition of the invention is suitable for intradermal or subcutaneous injection.
Предпочтительно водная жидкая фармацевтическая композиция по изобретению готова к применению, в частности, готова для инъекции. Использование в настоящем описании «готова для инъекции» означает, что жидкую фармацевтическую композицию можно вводить пациенту непосредственно, не подвергая какой-либо дополнительной стадии получения.Preferably, the aqueous liquid pharmaceutical composition according to the invention is ready for use, in particular ready for injection. The use herein of "ready for injection" means that the liquid pharmaceutical composition can be administered directly to a patient without undergoing any additional preparation step.
Используемый в настоящем описании термин «стадия получения» относится к добавлению к композиции одного или нескольких эксципиентов.Used in the present description, the term "stage of obtaining" refers to the addition to the composition of one or more excipients.
Предпочтительно интерлейкин-2, присутствующий в жидкой фармацевтической композиции по изобретению, не подвергается сушке вымораживанием (или процессу лиофилизации). Используемые в настоящем описании термины «сушка вымораживанием» или «лиофилизация» относятся к способу дегидратации, включающему замораживание материала, включающего воду, и снижение давления таким образом, чтобы создать возможность удаления сублимацией замороженной воды в материале.Preferably, the interleukin-2 present in the liquid pharmaceutical composition of the invention is not freeze-dried (or lyophilized). As used herein, the terms "freeze-drying" or "lyophilization" refer to a dehydration process involving freezing a material comprising water and reducing pressure so as to allow the frozen water in the material to be removed by sublimation.
Например, пролейкин® представляет собой твердую фармацевтическую композицию с интерлейкином-2, полученную лиофилизацией.For example, Proleukin® is a solid pharmaceutical composition with interleukin-2 obtained by lyophilization.
Таким образом, жидкую фармацевтическую композицию по изобретению предпочтительно получают из нелиофилизованного интерлейкина-2, т.е., из интерлейкина-2, который не подвергался какому-либо процессу лиофилизации. В более общем аспекте жидкую фармацевтическую композицию по изобретению можно получить способом изготовления, который не включает стадию, на которой интерлейкин-2 сушат вымораживанием даже в присутствии стабилизатора для лиофилизации. Подходящие способы получения жидкой фармацевтической композиции по изобретению также описаны ниже.Thus, the liquid pharmaceutical composition of the invention is preferably prepared from non-lyophilized interleukin-2, ie from interleukin-2 that has not undergone any lyophilization process. In a more general aspect, the liquid pharmaceutical composition of the invention can be prepared by a manufacturing process that does not include the step in which interleukin-2 is freeze-dried even in the presence of a lyophilization stabilizer. Suitable methods for preparing a liquid pharmaceutical composition of the invention are also described below.
Используемый в настоящем изобретении интерлейкин-2 (IL-2) охватывает интерлейкин-2 дикого типа млекопитающих и его варианты. Предпочтительно IL-2 представляет собой человеческий IL-2 или его варианты.As used herein, interleukin-2 (IL-2) encompasses wild-type mammalian interleukin-2 and variants thereof. Preferably IL-2 is human IL-2 or variants thereof.
Активные варианты IL-2 описаны в литературе. Варианты нативного IL-2 могут представлять собой его фрагменты, аналоги и производные. Под «фрагментом» подразумевается полипептид, включающий только часть интактной последовательности полипептида. «Аналог» обозначает полипептид, включающий нативную последовательность полипептида с одной или несколькими заменами, вставками или делециями аминокислот. Мутеины и псевдопептиды являются конкретными примерами аналогов. «Производные» включают любой модифицированный нативный полипептид IL-2 или его фрагмент или аналог, такой как гликозилированный, фосфорилированный, слитый с другим полипептидом или молекулой, полимеризованный и т.д., или модифицированный через химическую или ферментативную модификацию или присоединение для улучшения свойств IL-2 (например. устойчивости, специфичности и т.д.). Активные варианты эталонного полипептида IL-2 обычно имеют по меньшей мере 75%, предпочтительно 85%, предпочтительнее по меньшей мере 90% идентичность аминокислотной последовательности с аминокислотной последовательностью эталонного полипептида IL-2, например, зрелого человеческого IL-2 дикого типа.Active variants of IL-2 are described in the literature. Variants of native IL-2 may be its fragments, analogs and derivatives. By "fragment" is meant a polypeptide comprising only a portion of the intact sequence of the polypeptide. "Analog" means a polypeptide comprising a native polypeptide sequence with one or more amino acid substitutions, insertions or deletions. Muteins and pseudopeptides are specific examples of analogues. "Derivatives" includes any modified native IL-2 polypeptide or fragment or analog thereof, such as glycosylated, phosphorylated, fused to another polypeptide or molecule, polymerized, etc., or modified through chemical or enzymatic modification or addition to improve the properties of IL -2 (eg stability, specificity, etc.). Active variants of a reference IL-2 polypeptide typically have at least 75%, preferably 85%, more preferably at least 90% amino acid sequence identity with the amino acid sequence of a reference IL-2 polypeptide, e.g., wild-type mature human IL-2.
Способы определения того, является ли вариант полипептида IL-2 активным, доступны в технике и конкретно описаны в настоящем изобретении. Активным вариантом является, наиболее предпочтительно, вариант, который стимулирует Treg.Methods for determining whether an IL-2 polypeptide variant is active are available in the art and are specifically described herein. The active variant is most preferably one that stimulates Treg.
Примеры вариантов IL-2 раскрываются, например, в EP109748, EP136489, US4752585, EP200280 или EP118617.Examples of IL-2 variants are disclosed in, for example, EP109748, EP136489, US4752585, EP200280 or EP118617.
IL-2 можно получить методом рекомбинантных ДНК. Организм-хозяин, используемый для экспрессии рекомбинантной ДНК, кодирующей IL-2, может быть прокариотным (бактерией, такой как E. coli) или эукариотным (например, клеткой дрожжей, гриба, растения или млекопитающего). Способы получения IL-2 описаны, например, в US4656132, US4748234, US4530787 или US4748234, включенных в настоящее описание в качестве ссылок.IL-2 can be obtained by recombinant DNA. The host organism used to express the recombinant DNA encoding IL-2 may be prokaryotic (a bacterium such as E. coli) or eukaryotic (eg a yeast, fungus, plant or mammalian cell). Methods for producing IL-2 are described, for example, in US4656132, US4748234, US4530787 or US4748234, incorporated herein by reference.
С другой стороны, IL-2 можно получить химическим пептидным синтезом. Например, IL-2 можно получить параллельным синтезом более коротких пептидов, которые затем собирают с образованием полной последовательности IL-2 с правильной дисульфидной связью. Полный синтез интерлейкина-2 поясняется, например, в Asahina et al., Angewandte Chemie International Edition, 2015, Vol.54, Issue 28, 8226-8230, полностью включенной в настоящее описание в качестве ссылки.On the other hand, IL-2 can be obtained by chemical peptide synthesis. For example, IL-2 can be made by parallel synthesis of shorter peptides, which are then assembled to form a complete IL-2 sequence with the correct disulfide bond. The complete synthesis of interleukin-2 is explained, for example, in Asahina et al., Angewandte Chemie International Edition, 2015, Vol. 54, Issue 28, 8226-8230, incorporated herein by reference in its entirety.
В каком-то воплощении IL-2 является вариантом, имеющим по меньшей мере 80%, предпочтительно по меньшей мере 90%, 95%, 98%, 99% идентичность последовательностей со зрелым человеческим IL-2 дикого типа. Вариант может являться гликозилированным или негликозилированным. Нуклеотидная последовательность и аминокислотная последовательность человеческого IL-2 раскрыты, например, в Genbank, ref 3558 или P60568, соответственно.In one embodiment, IL-2 is a variant having at least 80%, preferably at least 90%, 95%, 98%, 99% sequence identity with wild-type mature human IL-2. The variant may be glycosylated or non-glycosylated. The nucleotide sequence and amino acid sequence of human IL-2 are disclosed in, for example, Genbank ref 3558 or P60568, respectively.
IL-2 коммерчески доступен, включая фармацевтические применения, и разрешен к применению для пациентов людей. Подходящие коммерческие формы включают, например,IL-2 is commercially available, including pharmaceutical applications, and approved for use in human patients. Suitable commercial forms include, for example,
- пролейкин® (альдеслейкин), который представляет собой рекомбинантный негликозилированный дезаланил-1, серин-125, человеческий интерлейкин-2, продуцированный в E. coli;- proleukin® (aldesleukin), which is a recombinant non-glycosylated desalanil-1, serine-125, human interleukin-2, produced in E. coli;
- ронколейкин®, который представляет собой рекомбинантный человеческий интерлейкин-2, продуцированный в дрожжах.- Roncoleukin®, which is a recombinant human interleukin-2 produced in yeast.
В предпочтительном воплощении IL-2 представляет собой альдеслейкин. Альдеслейкин является активным ингредиентом пролейкина®. Альдеслейкин представляет собой негликозилированный вариант зрелого человеческого интерлейкина-2, включающий две аминокислотные модификации по сравнению с последовательностью зрелого человеческого интерлейкина-2: делецию первой аминокислоты (аланина) и замену цистеина в позиции 125 на серин. IL-2 для применения в настоящем изобретении предпочтительно находится в по существу чистой форме, например, с чистотой 95% или больше, предпочтительнее с чистотой 96, 97, 98 или 99%.In a preferred embodiment, IL-2 is an aldesleukin. Aldesleukin is the active ingredient in Proleukin®. Aldesleukin is a non-glycosylated variant of mature human interleukin-2 that includes two amino acid modifications compared to the mature human interleukin-2 sequence: deletion of the first amino acid (alanine) and replacement of cysteine at position 125 with serine. The IL-2 for use in the present invention is preferably in a substantially pure form, for example 95% pure or greater, more preferably 96%, 97%, 98% or 99% pure.
IL-2 для применения в настоящем изобретении типично имеет специфическую активность 1,2-2,4 миллиона Международных единиц (мМЕ) на мг белка, предпочтительно от 8 до 18 мМЕ/мг белка. Например, IL-2, присутствующий в композиции по изобретению, может иметь специфическую активность 12±3 мМЕ на мг белка.IL-2 for use in the present invention typically has a specific activity of 1.2-2.4 million international units (mIU) per mg protein, preferably 8 to 18 mIU/mg protein. For example, IL-2 present in a composition of the invention may have a specific activity of 12 ± 3 mIU per mg of protein.
Например, если IL-2 имеет специфическую активность 12 мМЕ на мг белка, жидкая композиция по изобретению может включать от примерно 0,008 до примерно 1,67 мг указанного IL-2 на мл.For example, if IL-2 has a specific activity of 12 mIU per mg of protein, the liquid composition of the invention may include from about 0.008 to about 1.67 mg of said IL-2 per ml.
Биологическую активность IL-2 предпочтительно определяют клеточным анализом, выполняемым на клеточной линии НТ-2 (клон A5E, ATCC® CRL-1841™), рост которой зависит от IL-2. Рост клеток в присутствии разных количеств испытываемого продукта интерлейкина-2 сравнивают с ростом, регистрируемым с Международным стандартом IL-2 (2-ой Международный стандарт ВОЗ для интерлейкина-2 (человеческий, установленная рДНК) NIBSC, код 86/500). Рост клеток измеряют после добавления и трансформации [3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2H-тетразолия (внутренняя соль, MTS) в формазан активными жизнеспособными клетками. Затем концентрацию формазана определяют спектрофотометрией при 490 нм.The biological activity of IL-2 is preferably determined by a cell assay performed on the HT-2 cell line (clone A5E, ATCC® CRL-1841™) that depends on IL-2 for growth. Cell growth in the presence of different amounts of interleukin-2 test product is compared to growth recorded with the International Standard IL-2 (2nd WHO International Standard for Interleukin-2 (human, established rDNA) NIBSC, code 86/500). Cell growth is measured after addition and transformation of [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (internal salt, MTS) into formazan active viable cells. The concentration of formazan is then determined by spectrophotometry at 490 nm.
В некоторых воплощениях интерлейкин-2 присутствует в жидкой композиции по изобретению в форме мономеров, агрегатов и их комбинаций.In some embodiments, interleukin-2 is present in the liquid composition of the invention in the form of monomers, aggregates, and combinations thereof.
Жидкая композиция по изобретению предпочтительно состоит по существу из интерлейкина-2 в концентрации 0,1-20 миллионов МЕ/мл, буферирующего агента, поверхностно-активного вещества и необязательного эксципиента, выбранного из антиоксидантов, регуляторов осмолярности и консервантов, в воде. Используемый в настоящем описании термин «состоит по существу из» означает, что перечисленные компоненты представляют более 95 мас.% жидкой композиции. Иными словами, интерлейкин-2, буферирующий агент, поверхностно-активное вещество, необязательный эксципиент и вода предпочтительно отвечают за 95 мас.%, например, за более чем 96 мас.%, 97 мас.%, 98 мас.%, 99 мас.% или 99,9 мас.% от всей массы жидкой композиции.The liquid composition of the invention preferably consists essentially of interleukin-2 at a concentration of 0.1-20 million IU/ml, a buffering agent, a surfactant and an optional excipient selected from antioxidants, osmolarity regulators and preservatives, in water. Used in the present description, the term "consists essentially of" means that the listed components represent more than 95 wt.% liquid composition. In other words, interleukin-2, buffering agent, surfactant, optional excipient and water are preferably responsible for 95 wt.%, for example, more than 96 wt.%, 97 wt.%, 98 wt.%, 99 wt. % or 99.9 wt.% of the total weight of the liquid composition.
Вода является носителем раствора. Типично вода является водой фармацевтического сорта. Поверхностно-активное вещество присутствует с тем, чтобы промотировать растворение и устойчивость интерлейкина-2 в растворе. Подходящие поверхностно-активные вещества охватывают, без ограничения, соли С8-С20-алкилсульфаты, некоторые фосфолипиды, такие как фосфатидаты, соли холата, дезоксихолата, соли лауроилсаркозината (такие как натриевая соль, известная как саркозил), CHAPS, CHAPSO, тритон X100, тритон X114, NP40, октилглюкозид, додециловые эфиры полиэтиленгликоля, например, продаваемые под товарным знаком Brijtm35, гексадециловые эфиры полиэтиленгликоля, например, продаваемые под товарным знаком Brijtm58, производные полиоксиэтилена монолауратов сорбитана, такие как твин 20 и твин 80, эфиры сорбитана, такие как моностеарат сорбитана или монолаурат сорбитана, и их комбинации.Water is the carrier of the solution. Typically the water is pharmaceutical grade water. The surfactant is present to promote the dissolution and stability of interleukin-2 in solution. Suitable surfactants include, without limitation, C 8 -C 20 alkyl sulfate salts, certain phospholipids such as phosphatidates, cholate, deoxycholate salts, lauroyl sarcosinate salts (such as the sodium salt known as sarcosyl), CHAPS, CHAPSO, Triton X100 , triton X114, NP40 , octylglucoside, polyethylene glycol dodecyl ethers, e.g. sold under the trade name Brij tm 35, polyethylene glycol hexadecyl ethers, e.g. sorbitan, such as sorbitan monostearate or sorbitan monolaurate; and combinations thereof.
В некоторых воплощениях поверхностно-активное вещество является анионным поверхностно-активным веществом. Соответственно, поверхностно-активное вещество можно выбрать из солей С8-С20-алкилсульфатов, солей лауроилсаркозината, солей холата, дезоксихолата и их комбинаций.In some embodiments, the surfactant is an anionic surfactant. Accordingly, the surfactant may be selected from C 8 -C 20 alkyl sulfate salts, lauroyl sarcosinate salts, cholate salts, deoxycholate salts, and combinations thereof.
Предпочтительными анионными поверхностно-активными веществами согласно изобретению являются додецилсульфаты, такие как додецилсульфат натрия (SDS) или додецилсульфат лития. Например, поверхностно-активное вещество можно выбрать из додецилсульфатов щелочных металлов и щелочноземельных металлов. Предпочтительным поверхностно-активным веществом является SDS.Preferred anionic surfactants according to the invention are dodecyl sulfates such as sodium dodecyl sulfate (SDS) or lithium dodecyl sulfate. For example, the surfactant can be selected from dodecyl sulfates of alkali metals and alkaline earth metals. The preferred surfactant is SDS.
Без связи с какой-либо теорией, авторы изобретения полагают, что концентрация поверхностно-активного вещества в растворе и массовое отношение поверхностно-активного вещества к IL-2 могут оказывать некоторое влияние на устойчивость интердейкина-2 со временем. В некоторых воплощениях поверхностно-активное вещество, в частности додецилсульфат, такой как SDS, присутствует в концентрации 0,01-0,5 мг/мл. Без связи с какой-либо теорией, Заявитель считает, что концентрация поверхностно-активного вещества, в частности додецилсульфата, такого как SDS, превышающая 0,05 мг/мл, может промотировать устойчивость IL-2 в растворе за счет образования мицелл. В предпочтительном воплощении поверхностно-активное вещество, предпочтительно SDS, присутствует в концентрации от 0,05 до 5,0 мг/мл, например, от 0,06, 0,07 или 0,08 до 5,0 мг/мл. Поверхностно-активное вещество в жидкой композиции по изобретению может присутствовать в концентрации от 0,08 до 0,4 мг/мл.Without wishing to be bound by any theory, the inventors believe that the concentration of surfactant in solution and the weight ratio of surfactant to IL-2 may have some effect on the stability of interdeukin-2 over time. In some embodiments, the surfactant, in particular dodecyl sulfate such as SDS, is present at a concentration of 0.01-0.5 mg/ml. Without wishing to be bound by any theory, the Applicant believes that a concentration of a surfactant, in particular dodecyl sulfate such as SDS, greater than 0.05 mg/ml can promote the stability of IL-2 in solution by micelle formation. In a preferred embodiment, the surfactant, preferably SDS, is present at a concentration of 0.05 to 5.0 mg/ml, such as 0.06, 0.07 or 0.08 to 5.0 mg/ml. The surfactant in the liquid composition of the invention may be present at a concentration of 0.08 to 0.4 mg/ml.
В дополнительных или альтернативных воплощениях массовое отношение поверхностно-активного вещества, предпочтительно SDS, к интерлейкину-2 составляет от 0,01 до 5, предпочтительно, от 0,04 до 5, например, от 0,1 до 3. Как пример, массовое отношение поверхностно-активного вещества к интерлейкину-2 может составлять от 0,1 до 4, например, от 0,15 до 0,30 или от 1,0 до 3,0, например, от 1,5 до 2,5.In further or alternative embodiments, the weight ratio of surfactant, preferably SDS, to interleukin-2 is 0.01 to 5, preferably 0.04 to 5, such as 0.1 to 3. As an example, the weight ratio surfactant to interleukin-2 may be from 0.1 to 4, for example, from 0.15 to 0.30 or from 1.0 to 3.0, for example, from 1.5 to 2.5.
Буферирующий агент может быть любого типа при условии, что он подходит для композиции с интерлейкином-2 и адаптирован для инъекции, в частности, подкожной инъекции. Буферирующий агент относится к кислотам, солевым формам кислот и их комбинации. Буферирующие агенты включают фосфорную кислоту, трис(гидроксиметил)аминометангидрохлорид (трис.HCl), 4-морфолинпропансульфоновую кислоту (MOPS), 4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновую кислоту (HEPES), PIPES, 2,2-бис(гидроксиметил)-2,2',2"-нитрилотриэтанол (бис-трис), трис-глицин, бицин, трицин, TAPS, TAPSO, MES, цитрат, борат, цитрат/фосфат, бикарбонат, глутаровую кислоту, янтарную кислоту, их соли и их комбинации.The buffering agent may be of any type, provided that it is suitable for formulation with interleukin-2 and adapted for injection, in particular subcutaneous injection. Buffering agent refers to acids, salt forms of acids, and combinations thereof. Buffering agents include phosphoric acid, tris(hydroxymethyl)aminomethanehydrochloride (tris.HCl), 4-morpholinepropanesulfonic acid (MOPS), 4-(2-hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid (HEPES), PIPES, 2,2-bis( hydroxymethyl)-2,2',2"-nitrilotriethanol (bis-tris), tris-glycine, bicine, tricine, TAPS, TAPSO, MES, citrate, borate, citrate/phosphate, bicarbonate, glutaric acid, succinic acid, their salts and their combinations.
Концентрация буферирующего агента в жидкой композиции по изобретению типично составляет от 1 мМ до 10 мМ, предпочтительно от 5 мМ до 25 мМ, например, от 5 мМ до 15 М.The buffering agent concentration in the liquid composition of the invention is typically 1 mM to 10 mM, preferably 5 mM to 25 mM, such as 5 mM to 15 M.
В жидкой композиции по изобретению рН предпочтительно составляет от 7,0 до 8,0, например, рН 7,5±0,2. В некоторых воплощениях буферирующий(ие) агент(ы) имеет(имеют) рК от примерно 6,5 до примерно 8,5, предпочтительно от 7,0 до 8,0. Предпочтительно буферирующие агенты представляют собой соли фосфорной кислоты, такие как натриевые, кальциевые или калиевые соли фосфорной кислоты. Например, буферирующий агент выбирают из одноосновного фосфата натрия, двухосновного фосфата натрия и их комбинации. Иными словами, предпочтительными буферами являются фосфатные буферы.In the liquid composition according to the invention, the pH is preferably between 7.0 and 8.0, for example pH 7.5±0.2. In some embodiments, the buffer(s) agent(s) has(have) pK from about 6.5 to about 8.5, preferably from 7.0 to 8.0. Preferably buffering agents are salts of phosphoric acid, such as sodium, calcium or potassium salts of phosphoric acid. For example, the buffering agent is selected from sodium phosphate monobasic, sodium phosphate dibasic, and combinations thereof. In other words, the preferred buffers are phosphate buffers.
В предпочтительных воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению имеет осмолярность, подходящую для подкожной инъекции. Типично осмолярность композиции по изобретению составляет по меньшей мере 250 мОсм, предпочтительно, по меньшей мере 330 мОсм и в частности по меньшей мере 360 мОсм.In preferred embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention has an osmolarity suitable for subcutaneous injection. Typically the osmolarity of the composition according to the invention is at least 250 mOsm, preferably at least 330 mOsm and in particular at least 360 mOsm.
Необязательный эксципиент можно выбрать из консервантов, антиоксидантов и их комбинаций. Консерванты включают, без ограничения, хлорид бензалкония, бензойную кислоту, сорбиновую кислоту и их соли. Антиоксиданты включают аскорбиновую кислоту, аскорбилпальмитат, токоферол и их комбинации. Типично необязательный эксципиент отвечает за менее 5 мас.%, предпочтительно менее 3 мас.%, 2 мас.% и даже 0,1 мас.% от общей массы композиции.The optional excipient may be selected from preservatives, antioxidants, and combinations thereof. Preservatives include, without limitation, benzalkonium chloride, benzoic acid, sorbic acid, and salts thereof. Antioxidants include ascorbic acid, ascorbyl palmitate, tocopherol, and combinations thereof. Typically, the optional excipient is responsible for less than 5 wt.%, preferably less than 3 wt.%, 2 wt.% and even 0.1 wt.% of the total weight of the composition.
Необязательный эксципиент также можно выбрать из регуляторов осмолярности. Регуляторы осмолярности включают фармацевтически приемлемые неорганические соли, такие как хлорид натрия и хлорид калия, и органические соли, такие как органические соли натрия или калия, например, цитрат, аспартат или ацетат калия или натрия. Регуляторы осмолярности типично добавляют в композицию по изобретению в количестве, позволяющем регулировать осмолярность композиции до величины по меньшей мере 330 мОсм или по меньшей мере 360 мОсм. Осмолярность типично составляет от 330 мОсм до 600 мОсм. Предпочтительным регулятором осмолярности согласно изобретению является NaCl.An optional excipient can also be selected from osmolarity regulators. Osmolarity regulators include pharmaceutically acceptable inorganic salts such as sodium chloride and potassium chloride, and organic salts such as organic sodium or potassium salts such as potassium or sodium citrate, aspartate or acetate. Osmolarity regulators are typically added to the composition of the invention in an amount to adjust the osmolarity of the composition to at least 330 mOsm or at least 360 mOsm. Osmolarity is typically between 330 mOsm and 600 mOsm. The preferred osmolarity regulator according to the invention is NaCl.
В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция не включает какой-либо необязательный эксципиент. В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению содержит регулятор осмолярности, но не содержит какие-либо консерванты или антиоксиданты.In some embodiments, the liquid pharmaceutical composition does not include any optional excipient. In some embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention contains an osmolarity regulator, but does not contain any preservatives or antioxidants.
В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению состоит по существу из интерлейкина-2 в концентрации 0,1-20 миллионов МЕ/мл, буферирующего агента и поверхностно-активного вещества в воде. В других воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению состоит по существу из интерлейкина-2 в концентрации 0,1-20 миллионов МЕ/мл, буферирующего агента, регулятора осмолярности и поверхностно-активного вещества в воде.In some embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention consists essentially of interleukin-2 at a concentration of 0.1-20 million IU/ml, a buffering agent and a surfactant in water. In other embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention consists essentially of interleukin-2 at a concentration of 0.1-20 million IU/ml, a buffering agent, an osmolarity regulator and a surfactant in water.
Как указано выше, интерлейкин-2, используемый для получения композиции по изобретению, предпочтительно является нелиофилизованным интерлейкином-2. Следовательно, в жидкой фармацевтической композиция по изобретению присутствие стабилизатора для лиофилизации не требуется. При использовании термин «стабилизатор для лиофилизации» или «стабилизатор для сушки вымораживанием» относится к эксципиенту, способному защищать белки, в частности, интерлейкин-2, от денатурации во время лиофилизации. Стабилизаторы для лиофилизации типично включают сахара, такие как маннит, сахароза, декстроза и трегалоза, аминокислоты, гидроксипропил-β-циклодекстрин и сывороточный альбумин.As indicated above, the interleukin-2 used to prepare the composition of the invention is preferably non-lyophilized interleukin-2. Therefore, in the liquid pharmaceutical composition according to the invention, the presence of a stabilizer for lyophilization is not required. When used, the term "lyophilization stabilizer" or "freeze-drying stabilizer" refers to an excipient capable of protecting proteins, in particular interleukin-2, from denaturation during lyophilization. Lyophilization stabilizers typically include sugars such as mannitol, sucrose, dextrose and trehalose, amino acids, hydroxypropyl-β-cyclodextrin and serum albumin.
В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция не включает какой-либо стабилизатор для лиофилизации. В некоторых других воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению не включает маннит и/или сывороточный альбумин.In some embodiments, the liquid pharmaceutical composition does not include any lyophilization stabilizer. In some other embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention does not include mannitol and/or serum albumin.
Авторы изобретения показали, что жидкая фармацевтическая композиция по изобретению устойчива со временем. Жидкую фармацевтическую композицию можно хранить при температуре от 2°С до 8°С, предпочтительно при 5°С, в инертной атмосфере в течение по меньшей мере 6 месяцев без какой-либо существенной потери биологической активности, т.е. со снижением биологической активности самое большее на 25%, предпочтительно, самое большее на 20%, 15%, 10% или 5%. В частности, после периода хранения 6 месяцев при 5°С снижение биологической активности интерлейкина-2 в растворе составляет менее 30%, предпочтительно, менее 25% или 20%, в частности, менее 15%, 10% или 5% от биологической активности до хранения. Используемое в настоящем описании выражение «жидкая фармацевтическая композиция является устойчивой» означает, что жидкая фармацевтическая композиция по изобретению устойчива, когда хранится при температуре 5°С в инертной атмосфере в течение периода по меньшей мере 6 месяцев, даже по меньшей мере 12 месяцев. В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция может быть устойчивой, когда хранится при температуре от 2°С до 8°С в инертной атмосфере в течение периода одного-трех лет.The inventors have shown that the liquid pharmaceutical composition of the invention is stable over time. The liquid pharmaceutical composition can be stored at 2°C to 8°C, preferably at 5°C, under an inert atmosphere for at least 6 months without any significant loss of biological activity, i. with a decrease in biological activity of at most 25%, preferably at most 20%, 15%, 10% or 5%. In particular, after a storage period of 6 months at 5° C., the decrease in the biological activity of interleukin-2 in solution is less than 30%, preferably less than 25% or 20%, in particular less than 15%, 10% or 5% of the biological activity up to storage. As used herein, "a liquid pharmaceutical composition is stable" means that the liquid pharmaceutical composition of the invention is stable when stored at 5° C. under an inert atmosphere for a period of at least 6 months, even at least 12 months. In some embodiments, the liquid pharmaceutical composition may be stable when stored at 2°C to 8°C under an inert atmosphere for a period of one to three years.
Заслуживает внимания, что жидкая фармацевтическая композиция устойчива, даже если интерлейкин-2 присутствует в низкой концентрации, например, менее 12 мМЕ на мл, например, от 2 до 12 мМЕ на мл. Устойчивые жидкие фармацевтические композиции, включающие низкое количество интерлейкина-2, представляют интерес для применения при длительном лечении аутоиммунных и воспалительных расстройств, поскольку они удобны для упаковки в устройства для доставки, такие как шприцы и шприцы-ручки, адаптированные для самостоятельного введения.It is noteworthy that the liquid pharmaceutical composition is stable even if interleukin-2 is present at a low concentration, eg less than 12 mIU per ml, eg 2 to 12 mIU per ml. Persistent liquid pharmaceutical compositions containing low amounts of interleukin-2 are of interest for use in the long-term treatment of autoimmune and inflammatory disorders because they are conveniently packaged in delivery devices such as syringes and self-administered pens.
В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению включает интерлейкин-2 в количестве 0,1-12 мМЕ на мл композиции, например, от 0,1 до 10 мМЕ на мл или от 2 до 12 мМЕ на мл композиции. Количество 0,1-12 ММЕ на мл включает количество 0,1-1 мМЕ на мл, 1 мМЕ – 2 мМЕ на мл, 2 мМЕ – 3 мМЕ на мл, 3 мМЕ – 4 мМЕ на мл, 4 мМЕ – 5 мМЕ на мл, 5 мМЕ – 6 мМЕ на мл, of 6 мМЕ – 7 мМЕ на мл, 7 мМЕ – 8 мМЕ на мл, 8 мМЕ – 9 мМЕ на мл, 9 мМЕ – 10 мМЕ на мл, 10 мМЕ – 11 мМЕ на мл, 11 мМЕ – 12 мМЕ на мл. В предпочтительных воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению включает интерлейкин-2 в количестве 4 мМЕ – 10 мМЕ на мл, например, в количестве 4 мМЕ – 6 мМЕ на мл.In some embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention includes interleukin-2 in an amount of 0.1-12 mIU per ml of composition, for example, from 0.1 to 10 mIU per ml or from 2 to 12 mIU per ml of composition. The amount of 0.1-12 MIU per ml includes the amount of 0.1-1 mIU per ml, 1 mIU - 2 mIU per ml, 2 mIU - 3 mIU per ml, 3 mIU - 4 mIU per ml, 4 mIU - 5 mIU per ml ml, 5 mIU - 6 mIU per ml, of 6 mIU - 7 mIU per ml, 7 mIU - 8 mIU per ml, 8 mIU - 9 mIU per ml, 9 mIU - 10 mIU per ml, 10 mIU - 11 mIU per ml , 11 mIU - 12 mIU per ml. In preferred embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention comprises interleukin-2 in an amount of 4 mIU - 10 mIU per ml, for example in an amount of 4 mIU - 6 mIU per ml.
В некоторых отдельных воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению включает интерлейкин-2 в количестве 0,1-6 мМЕ на мл композиции, предпочтительно от 0,5 до 5 мМЕ на мл. Например, количество интерлейкин-2 в композиции по изобретению может составлять 0,5 мМЕ на мл, 1,0 мМЕ на мл, 1,5 мМЕ на мл, 2,0 мМЕ на мл, 2,5 мМЕ на мл, 3,0 мМЕ на мл, 3,5 мМЕ на мл, 4,0 мМЕ на мл, 4,5 мМЕ на мл или 5,0 мМЕ на мл.In some specific embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention comprises interleukin-2 in an amount of 0.1-6 mIU per ml of composition, preferably 0.5 to 5 mIU per ml. For example, the amount of interleukin-2 in the composition of the invention may be 0.5 mIU per ml, 1.0 mIU per ml, 1.5 mIU per ml, 2.0 mIU per ml, 2.5 mIU per ml, 3.0 mIU per ml, 3.5 mIU per ml, 4.0 mIU per ml, 4.5 mIU per ml or 5.0 mIU per ml.
В некоторых отдельных воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению включает от 1,0 до 3,0 мМЕ интерлейкина-2 на мл.In some specific embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention comprises 1.0 to 3.0 mIU of interleukin-2 per ml.
Например, в указанных воплощениях, если IL-2 имеет специфическую активность примерно 12 мМЕ на мг белка, 1,0-3,0 мМЕ интерлейкина-2 на мл соответствует примерно 0,08 мг IL-2 на мл – примерно 0,24 мг IL-2 на мл.For example, in these embodiments, if IL-2 has a specific activity of about 12 mIU per mg of protein, 1.0-3.0 mIU of interleukin-2 per ml corresponds to about 0.08 mg of IL-2 per ml - about 0.24 mg IL-2 per ml.
В некоторых других воплощениях изобретения жидкая фармацевтическая композиция состоит по существу изIn some other embodiments of the invention, the liquid pharmaceutical composition consists essentially of
- интерлейкина-2 в количестве 1,0-3,0 мМЕ на мл или от 2 мМЕ до 12 мМЕ на мл, таком как 4 мМЕ – 10 мМЕ на мл, или таком как 4 мМЕ – 6 мМЕ на мл,- interleukin-2 in an amount of 1.0-3.0 mIU per ml or from 2 mIU to 12 mIU per ml, such as 4 mIU - 10 mIU per ml, or such as 4 mIU - 6 mIU per ml,
- поверхностно-активного вещества, предпочтительно додецилсульфата натрия (SDS),- a surfactant, preferably sodium dodecyl sulfate (SDS),
- буферирующего агента, предпочтительно выбранного из солей фосфатов, таких как одноосновный фосфат натрия и двухосновный фосфат натрия,a buffering agent, preferably selected from phosphate salts such as monobasic sodium phosphate and dibasic sodium phosphate,
- необязательного эксципиента, предпочтительно выбранного из консервантов, антиоксидантов и регуляторов осмолярности, и- an optional excipient, preferably selected from preservatives, antioxidants and osmolarity regulators, and
- воды.- water.
Как указано выше, поверхностно-активное вещество, в частности, SDS, может присутствовать в количестве 0,01-0,50 мг/мл. Предпочтительно SDS присутствует в концентрации от 0,05 до 0,5 мг/мл. В других или дополнительных воплощениях массовое отношение поверхностно-активного вещества, предпочтительно SDS, к интерлейкину-2 составляет от 0,04 до 5, предпочтительнее от 0,1 до 3,0, например, от 2,0 до 2,5, такое как 2,2, или от 0,10 до 0,30, такое как 0,22.As mentioned above, the surfactant, in particular SDS, may be present in an amount of 0.01-0.50 mg/ml. Preferably the SDS is present at a concentration of 0.05 to 0.5 mg/ml. In other or additional embodiments, the weight ratio of surfactant, preferably SDS, to interleukin-2 is from 0.04 to 5, more preferably from 0.1 to 3.0, for example, from 2.0 to 2.5, such as 2.2, or 0.10 to 0.30, such as 0.22.
В некоторых воплощениях жидкая фармацевтическая композиция состоит по существу изIn some embodiments, the liquid pharmaceutical composition consists essentially of
- интерлейкина-2 в количестве 1,0-3,0 мМЕ на мл или от 2 мМЕ до 12 мМЕ на мл, таком как 4 мМЕ – 10 мМЕ на мл,- interleukin-2 in an amount of 1.0-3.0 mIU per ml or from 2 mIU to 12 mIU per ml, such as 4 mIU - 10 mIU per ml,
- додецилсульфата натрия (SDS), присутствующего в концентрации примерно 0,05-0,5 мг/мл,- sodium dodecyl sulfate (SDS), present at a concentration of about 0.05-0.5 mg/ml,
- фосфатного буфера, - phosphate buffer,
- воды и- water and
- необязательно, регулятора осмолярности, предпочтительно NaCl.- optionally, an osmolarity regulator, preferably NaCl.
В некоторых других воплощениях изобретения жидкая фармацевтическая композиция характеризуется одной или несколькими из следующих особенностей:In some other embodiments of the invention, the liquid pharmaceutical composition is characterized by one or more of the following features:
- жидкая композиция подходит для инъекции пациенту,the liquid composition is suitable for injection into a patient,
- жидкая композиция состоит по существу из интерлейкина-2 в количестве 2,0-12 мМЕ на мл, поверхностно-активного вещества, буферирующего агента, регулятора осмолярности и воды,- the liquid composition consists essentially of interleukin-2 in an amount of 2.0-12 mIU per ml, a surfactant, a buffering agent, an osmolarity regulator and water,
- поверхностно-активным веществом является SDS, который присутствует в концентрации 0,1-0,4 мг/мл,- the surfactant is SDS, which is present at a concentration of 0.1-0.4 mg/ml,
- буферирующий агент представляет собой соли фосфаты в общей концентрации от 1 мМ до 100 мМ, предпочтительно от 5 мМ до 25 мМ,the buffering agent is a phosphate salt in a total concentration of 1 mM to 100 mM, preferably 5 mM to 25 mM,
- рН композиции составляет от 7,0 до 8,0, предпочтительно рН составляет 7,5 ± 0,2,- the pH of the composition is from 7.0 to 8.0, preferably the pH is 7.5 ± 0.2,
- массовое отношение поверхностно-активного вещества к интерлейкину-2 составляет от 1,0 до 3,0,- the mass ratio of surfactant to interleukin-2 is from 1.0 to 3.0,
- интерлейкин-2 представляет собой нелиофилизованный интерлейкин-2,- interleukin-2 is non-lyophilized interleukin-2,
- интерлейкин-2 имеет специфическую активность 12±3 мМЕ на мг белка,- interleukin-2 has a specific activity of 12±3 mIU per mg of protein,
- интерлейкин-2 представляет собой альдеслейкин,- interleukin-2 is an aldesleukin,
- фармацевтическая композиция не включает какой-либо стабилизатор для лиофилизации, включая маннит,- the pharmaceutical composition does not include any lyophilization stabilizer, including mannitol,
- регулятором осмолярности является NaCl,- osmolarity regulator is NaCl,
- осмолярность жидкой композиции составляет по меньшей мере 330 мОсм, предпочтительно по меньшей мере 360 мОсм,- the osmolarity of the liquid composition is at least 330 mOsm, preferably at least 360 mOsm,
- фармацевтическая композиция устойчива, когда хранится при температуре 5°С и в инертной атмосфере в течение периода по меньшей мере 6 месяцев,- the pharmaceutical composition is stable when stored at a temperature of 5°C and in an inert atmosphere for a period of at least 6 months,
- жидкая фармацевтическая композиция упакована в устройство для доставки для инъекции, например, шприц или ручку,- the liquid pharmaceutical composition is packaged in a delivery device for injection, such as a syringe or pen,
- жидкая фармацевтическая композиция подходит для подкожного введения.the liquid pharmaceutical composition is suitable for subcutaneous administration.
В некоторых воплощениях жидкая композиция характеризуется всеми вышеперечисленными особенностями.In some embodiments, the liquid composition is characterized by all of the above features.
▪ Способ получения жидкой фармацевтической композиции по изобретению▪ Method for obtaining a liquid pharmaceutical composition according to the invention
Настоящее изобретение также относится к способу получения жидкой фармацевтической композиции с интерлейкином-2, подходящей для инъекции пациенту, раскрытой в настоящем описании выше, который включаетThe present invention also relates to a method for preparing a liquid pharmaceutical composition with interleukin-2 suitable for injection into a patient, disclosed in the present description above, which includes
а) предоставление концентрированного раствора очищенного интерлейкина-2 и a) providing a concentrated solution of purified interleukin-2 and
b) получение композиции концентрированного раствора очищенного интерлейкина-2 путем добавления одного или нескольких эксципиентов с тем, чтобы получить указанную жидкую фармацевтическую композицию с интерлейкином-2.b) obtaining a composition of a concentrated solution of purified interleukin-2 by adding one or more excipients in order to obtain the specified liquid pharmaceutical composition with interleukin-2.
Типично концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2 со стадии а) включает воду в качестве носителя и буфер. Интерлейкин-2 присутствует в концентрированном растворе в концентрации более 20 мМЕ/мл, предпочтительно в концентрации по меньшей мере 25 мМЕ, например, от 25 мМЕ до 50 мМЕ на мл. Концентрированный раствор, как правило, находится при рН от 7,0 до 8,0. Концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2 получают стандартным способом получения IL-2. Указанный стандартный способ может включать рекомбинантное получение IL-2 в культуре-хозяине и извлечение и очистку интерлейкина-2 от культуры-хозяина с тем, чтобы получить концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2. Способ, используемый для получения концентрированного раствора интерлейкина-2, предпочтительно не включает стадию лиофилизации. В некоем воплощении указанный способ также не включает стадию восстановления, на которой жидкий носитель добавляют к твердой композиции с IL-2, например, лиофилизованной композиции с IL-2.Typically, a concentrated solution of purified interleukin-2 from step a) includes water as a carrier and a buffer. Interleukin-2 is present in concentrated solution at a concentration greater than 20 mIU/ml, preferably at a concentration of at least 25 mIU, eg 25 mIU to 50 mIU per ml. The concentrated solution is typically at a pH of 7.0 to 8.0. A concentrated solution of purified interleukin-2 is obtained by a standard method for obtaining IL-2. Said standard method may include recombinant production of IL-2 in the host culture and recovery and purification of interleukin-2 from the host culture so as to obtain a concentrated solution of purified interleukin-2. The method used to prepare the concentrated interleukin-2 solution preferably does not include a lyophilization step. In an embodiment, said method also does not include a reconstitution step in which a liquid carrier is added to a solid IL-2 composition, such as a lyophilized IL-2 composition.
В некоторых воплощениях концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2 можно получить способом, включающимIn some embodiments, a concentrated solution of purified interleukin-2 can be obtained by a method including
i) получение интерлейкина-2 в рекомбинантной культуре E. coli,i) obtaining interleukin-2 in a recombinant culture of E. coli,
ii) извлечение интерлейкина-2 из рекомбинантной культуры E. coli, и очистку интерлейкина-2 с тем, чтобы получить концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2.ii) recovering interleukin-2 from the recombinant culture of E. coli, and purifying interleukin-2 so as to obtain a concentrated solution of purified interleukin-2.
Получение интерлейкина-2 в E. coli можно выполнить стандартными методами. Извлечение интерлейкина-2 и очистку интерлейкина-2 от культуры E. coli также можно выполнить стандартными методами, которые могут включать такие стадии, как гомогенизация и центрифугирование культуры E. coli, извлечение и солюбилизация телец включения, рефолдинг белка, одну или несколько стадий хроматографии, такой как эксклюзионная хроматография, ионообменная хроматография, аффинная хроматография, мультимодальная хроматография, хроматография с обращенной фазой, ВЭЖХ или гидроксиапатитная хроматография, одну или несколько стадий фильтрации, такой как глубокая фильтрация, ультрафильтрация, тангенциальная ультрафильтрация, нанофильтрация и обратный осмос. Раствор очищенного интерлейкина-2 можно сконцентрировать ультрафильтрацией с тем, чтобы получить желательную концентрацию IL-2 (например, концентрацию по меньшей мере 15 мМЕ/мл). Перед очисткой IL-2, извлеченный из клеточной культуры, можно подвергнуть стадии рефолдинга.The production of interleukin-2 in E. coli can be performed by standard methods. Recovery of interleukin-2 and purification of interleukin-2 from E. coli culture can also be performed by standard methods, which may include steps such as homogenization and centrifugation of the E. coli culture, recovery and solubilization of inclusion bodies, protein refolding, one or more chromatography steps, such as size exclusion chromatography, ion exchange chromatography, affinity chromatography, multimodal chromatography, reverse phase chromatography, HPLC or hydroxyapatite chromatography, one or more filtration steps such as deep filtration, ultrafiltration, tangential ultrafiltration, nanofiltration and reverse osmosis. The purified interleukin-2 solution can be concentrated by ultrafiltration to obtain the desired concentration of IL-2 (eg, a concentration of at least 15 mIU/ml). Prior to purification, IL-2 recovered from cell culture can be subjected to a refolding step.
С другой стороны, концентрированный раствор очищенного IL-2 можно получить химическим синтезом. Например, способ получения указанного концентрированного раствора может включать получение IL-2 пептидным синтезом и очистку указанного полученного химически IL-2 с тем, чтобы получить указанный концентрированный раствор. Например, IL-2 можно получить параллельным синтезом более коротких пептидов в твердой или жидкой фазе, предпочтительно, твердофазным методом. Затем полученные пептиды лигируют вместе, что приводит к полной последовательности IL-2. Затем полученный IL-2 очищают стандартными методами, такими как стадии препаративной хроматографии, и подвергают рефолдингу при необходимости.On the other hand, a concentrated solution of purified IL-2 can be obtained by chemical synthesis. For example, a method of obtaining said concentrated solution may include obtaining IL-2 by peptide synthesis and purifying said chemically obtained IL-2 so as to obtain said concentrated solution. For example, IL-2 can be prepared by parallel solid or liquid phase synthesis of shorter peptides, preferably by the solid phase method. The resulting peptides are then ligated together resulting in the complete IL-2 sequence. The resulting IL-2 is then purified by standard methods such as preparative chromatography steps and refolded if necessary.
Перед получением композиции концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2 можно подвергнуть стадиям стерилизации и/или инактивации вирусов. Типично концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2 можно подвергнуть стерильной фильтрации. Концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2 также может включать поверхностно-активное вещество или другие эксципиенты, такие как антиоксиданты и консерванты.The concentrated solution of purified interleukin-2 may be subjected to sterilization and/or virus inactivation steps prior to formulation. A typically concentrated solution of purified interleukin-2 can be sterile filtered. The concentrated solution of purified interleukin-2 may also include a surfactant or other excipients such as antioxidants and preservatives.
Предпочтительно концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2 состоит по существу из интерлейкина-2 в концентрации по меньшей мере 15 мМЕ/мл, предпочтительно по меньшей мере 20 мМЕ/мл, буфера, воды и, необязательно, поверхностно-активного вещества. Предпочтительным буферирующим агентом является фосфатный буфер, и предпочтительным поверхностно-активным веществом является SDS.Preferably, the concentrated solution of purified interleukin-2 consists essentially of interleukin-2 at a concentration of at least 15 mIU/ml, preferably at least 20 mIU/ml, buffer, water, and optionally a surfactant. The preferred buffering agent is a phosphate buffer and the preferred surfactant is SDS.
Получение композиции с концентрированным раствором очищенного интерлейкина-2 выполняют так, чтобы получить желательную жидкую фармацевтическую композицию с интерлейкином-2. В зависимости от особенностей исходного концентрированного раствора очищенного интерлейкина-2 и желательного конечного фармацевтического продукта, стадия b) может включатьPreparation of a composition with a concentrated solution of purified interleukin-2 is performed so as to obtain the desired liquid pharmaceutical composition with interleukin-2. Depending on the characteristics of the original concentrated solution of purified interleukin-2 and the desired final pharmaceutical product, step b) may include
- разбавление раствора с тем, чтобы установить концентрацию интерлейкина-2 в интервале 0,1 мМЕ – 20 мМЕ на мл, например, от 2 мМЕ до 12 мМЕ на мл, от 4 мМЕ до 10 мМЕ на мл, от 0,1 мМЕ до 10 мМЕ на мл или от 0,1 мМЕ до 6 мМЕ на мл, и/или- dilution of the solution in order to set the concentration of interleukin-2 in the range of 0.1 mIU - 20 mIU per ml, for example, from 2 mIU to 12 mIU per ml, from 4 mIU to 10 mIU per ml, from 0.1 mIU to 10 mIU per ml or 0.1 mIU to 6 mIU per ml, and/or
- добавление поверхностно-активного вещества и/или регулирование концентрации поверхностно-активного вещества,- adding a surfactant and/or adjusting the concentration of the surfactant,
- добавление одного или нескольких буферов с тем, чтобы установить рН между 7,0 и 8,0 и/или с тем, чтобы отрегулировать молярность буфера в растворе до величины между 1 мМ и 100 мМ, например, от 5 мМ до 25 мМ, и/или- adding one or more buffers in order to adjust the pH between 7.0 and 8.0 and/or in order to adjust the molarity of the buffer in the solution to a value between 1 mM and 100 mM, for example from 5 mM to 25 mM, and/or
- добавление необязательного эксципиента, выбранного из антиоксидантов, консервантов, регуляторов осмолярности и их комбинации.- adding an optional excipient selected from antioxidants, preservatives, osmolarity regulators, and combinations thereof.
Способ по изобретению может дополнительно включать стадию упаковки с). Типично жидкую фармацевтическую композицию по изобретению можно упаковывать в устройство для инъекции, например, в шприц или ручку для инъекции, в инертной атмосфере или модифицированной атмосфере, такой как аргон или азот. С другой стороны, жидкий фармацевтический препарат можно заключить во флакон или картридж в инертной атмосфере. Указанный флакон или картридж, наполненный жидкой фармацевтической композицией по изобретению, можно упаковать вместе со средствами для инъекции, такими как шприц, игла и система автоинжектора. Упаковывание фармацевтической композиции для инъекции предпочтительно выполняют в асептических условиях. Способ по изобретению также может включать стадии стерилизации и/или инактивации вирусов, например, путем облучения е-лучами. Указанные стадии можно осуществлять до или после упаковки, в зависимости от используемой технологии. Например, жидкую фармацевтическую композицию можно подвергнуть стерильной фильтрации перед упаковкой и/или облучению е-лучами после упаковки.The method according to the invention may further include the step of packaging c). Typically, a liquid pharmaceutical composition of the invention may be packaged in an injection device, such as a syringe or injection pen, under an inert atmosphere or a modified atmosphere such as argon or nitrogen. On the other hand, the liquid pharmaceutical formulation may be enclosed in a vial or cartridge under an inert atmosphere. Said vial or cartridge filled with the liquid pharmaceutical composition of the invention may be packaged together with injectables such as a syringe, needle and auto-injector system. The packaging of the pharmaceutical composition for injection is preferably carried out under aseptic conditions. The method of the invention may also include the steps of sterilization and/or inactivation of viruses, for example by irradiation with e-beams. These steps can be carried out before or after packaging, depending on the technology used. For example, a liquid pharmaceutical composition may be sterile filtered prior to packaging and/or e-irradiated after packaging.
В некоторых воплощениях способ получения жидкой фармацевтической композиции с интерлейкином-2, подходящей для инъекции пациенту, описанной выше, включает стадииIn some embodiments, a method for preparing a liquid interleukin-2 pharmaceutical composition suitable for injection into a patient described above comprises the steps of
i) получения интерлейкина-2 в рекомбинантной культуре-хозяине, предпочтительно E. coli,i) producing interleukin-2 in a recombinant host culture, preferably E. coli,
ii) извлечения интерлейкина-2 из рекомбинантной культуры-хозяина и очистки интерлейкина-2 с тем, чтобы получить концентрированный раствор очищенного интерлейкина-2,ii) recovering the interleukin-2 from the recombinant host culture and purifying the interleukin-2 so as to obtain a concentrated solution of purified interleukin-2,
iii) получения композиции с концентрированным раствором очищенного интерлейкина-2 с тем, чтобы получить жидкую фармацевтическую композицию с интерлейкином-2, иiii) preparing a composition with a concentrated solution of purified interleukin-2 so as to obtain a liquid pharmaceutical composition with interleukin-2, and
iv) необязательно, упаковки жидкой фармацевтической композиции с интерлейкином-2 в устройство для инъекции, такое как шприц или ручка.iv) optionally, packaging the liquid pharmaceutical composition with interleukin-2 into an injection device such as a syringe or pen.
Как указано выше, способ по изобретению не включает стадию, на которой интерлейкин-2 сушат вымораживанием.As stated above, the method of the invention does not include the step in which interleukin-2 is freeze-dried.
Стадию iv) предпочтительно выполняют в асептических условиях.Step iv) is preferably performed under aseptic conditions.
Само собой понятно, что настоящее изобретение также относится к жидкой фармацевтической композиции, которую можно получить таким способом, а также устройству для инъекции, наполненному указанной жидкой фармацевтической композицией.It goes without saying that the present invention also relates to a liquid pharmaceutical composition that can be obtained in this way, as well as an injection device filled with said liquid pharmaceutical composition.
▪ Применения, терапевтические методы, наборы и устройства согласно изобретению▪ Applications, therapeutic methods, kits and devices according to the invention
Настоящее изобретение также относится к применению жидкой фармацевтической композиции с интерлейкином-2 по изобретению при лечении или предупреждении аутоиммунного, связанного с иммунитетом или воспалительного расстройства у субъекта. Предпочтительное аутоиммунное, связанное с иммунитетом или воспалительное расстройство у субъекта родственно расстройствам, ассоциированным с недостаточностью Treg.The present invention also relates to the use of an interleukin-2 liquid pharmaceutical composition of the invention in the treatment or prevention of an autoimmune, immune-related or inflammatory disorder in a subject. The subject's preferred autoimmune, immune-related, or inflammatory disorder is related to disorders associated with Treg deficiency.
Аутоиммунные, связанные с иммунитетом или воспалительные расстройства включают, без ограничения, HCV-связанный васкулит, увеит, миозит, диабет типа I, системную красную волчанку, системный васкулит, псориаз, аллергию, астму, болезнь Крона, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, атеросклероз, аутоиммунное заболевание щитовидной железы, нейродегенеративные заболевания, болезнь Альцгеймера, болезнь «трансплантат против хозяина», самопроизвольный аборт и отторжение аллотрансплантата. Предпочтительными аутоиммунными заболеваниями и воспалительными расстройствами (AID) являются диабет типа I, рассеянный склероз, системная красная волчанка и ревматоидный артрит.Autoimmune, immune-related or inflammatory disorders include, without limitation, HCV-related vasculitis, uveitis, myositis, type I diabetes, systemic lupus erythematosus, systemic vasculitis, psoriasis, allergies, asthma, Crohn's disease, multiple sclerosis, rheumatoid arthritis, atherosclerosis, autoimmune thyroid disease, neurodegenerative diseases, Alzheimer's disease, graft versus host disease, spontaneous abortion and allograft rejection. Preferred autoimmune diseases and inflammatory disorders (AID) are type I diabetes, multiple sclerosis, systemic lupus erythematosus and rheumatoid arthritis.
Жидкую фармацевтическую композицию по изобретению предпочтительно вводят пациенту инъекцией, например, внутривенным, внутримышечным, интрадермальным или подкожным путем. Предпочтительными путями введения являются подкожный путь и интрадермальный путь. В предпочтительном воплощении жидкая фармацевтическая композиция по изобретению является композицией для подкожной инъекции. Жидкая фармацевтическая композиция по изобретению предпочтительно подходит для доставки дозы IL-2, колеблющейся от 0,1 мМЕ до 3 мМЕ интерлейкина-2, такой как доза в 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, или 3,0 мМЕ.The liquid pharmaceutical composition of the invention is preferably administered to a patient by injection, for example by intravenous, intramuscular, intradermal or subcutaneous route. Preferred routes of administration are the subcutaneous route and the intradermal route. In a preferred embodiment, the liquid pharmaceutical composition of the invention is a subcutaneous injection composition. The liquid pharmaceutical composition of the invention is preferably suitable for delivering a dose of IL-2 ranging from 0.1 mIU to 3 mIU of interleukin-2, such as a dose of 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6 , 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, or 3.0 mIU.
Соответственно, жидкая фармацевтическая композиция по изобретению может являться композицией для применения при лечении или предупреждении аутоиммунного, связанного с иммунитетом или воспалительного расстройства, причем указанную жидкую фармацевтическую композицию вводят подкожным путем с тем, чтобы предоставить пациенту дозу IL-2 от 0,1 мМЕ до 3 мМЕ.Accordingly, the liquid pharmaceutical composition of the invention may be a composition for use in the treatment or prevention of an autoimmune, immune-related or inflammatory disorder, wherein said liquid pharmaceutical composition is administered subcutaneously so as to provide a patient with a dose of IL-2 from 0.1 mIU to 3 mIU.
Жидкая фармацевтическая композиция по изобретению подходит для частых введений. Типично жидкую фармацевтическую композицию по изобретению можно вводить один раз в месяц, один раз в две недели, один раз в неделю, дважды в неделю или ежедневно, в зависимости от заболевания, от которого лечат, и терапевтического эффекта, который получают. Лечение может длиться несколько дней, несколько недель, несколько месяцев и даже несколько лет. Лечение может включать начальный курс, когда жидкую фармацевтическую композицию по изобретению вводят ежедневно в течение нескольких дней, и поддерживающий период, в который жидкую фармацевтическую композицию по изобретению вводят с меньшей частотой, например, один раз в месяц или один раз каждые два месяца.The liquid pharmaceutical composition of the invention is suitable for frequent administration. Typically, the liquid pharmaceutical composition of the invention may be administered once a month, once every two weeks, once a week, twice a week, or daily, depending on the disease being treated and the therapeutic effect being obtained. Treatment can last several days, several weeks, several months and even several years. Treatment may include an initial course in which the liquid pharmaceutical composition of the invention is administered daily for several days, and a maintenance period in which the liquid pharmaceutical composition of the invention is administered at a lesser frequency, such as once a month or once every two months.
В некоторых дополнительных или альтернативных воплощениях жидкая фармацевтическая композиция по изобретению является композицией для применения при длительном лечении аутоиммунного, связанного с иммунитетом или воспалительного расстройства.In some additional or alternative embodiments, the liquid pharmaceutical composition of the invention is a composition for use in the long-term treatment of an autoimmune, immune-related, or inflammatory disorder.
Используемый в настоящем описании термин «длительное лечение» относится к лечению, длящемуся по меньшей мере 3 месяца, причем жидкую фармацевтическую композицию по изобретению вводят по меньшей мере один раз в месяц.Used in the present description, the term "long-term treatment" refers to treatment lasting at least 3 months, and the liquid pharmaceutical composition according to the invention is administered at least once a month.
Доза для введения, частота введения, схема введения и длительность лечения будут изменяться в зависимости от расстройства, от которого лечат или которое предупреждают, тяжести расстройства, характеристик пациента, в частности, возраста пациента, массы тела, площади поверхности тела (BSA), общего состояния здоровья, истории болезни.The dose to be administered, the frequency of administration, the schedule of administration, and the duration of treatment will vary depending on the disorder being treated or prevented, the severity of the disorder, the characteristics of the patient, in particular the patient's age, body weight, body surface area (BSA), general condition health, medical history.
Изобретение также относится к способу лечения или предупреждения у пациента аутоиммунного, связанного с иммунитетом или воспалительного расстройства, причем указанный способ включает введение пациенту жидкой фармацевтической композиции по изобретению. Как указано выше, жидкую фармацевтическую композицию предпочтительно вводят инъекцией, в частности, подкожным путем, в количестве, соответствующем дозе IL-2, колеблющейся от 0,1 мМЕ до3.0 мМЕ.The invention also relates to a method for treating or preventing an autoimmune, immune-related or inflammatory disorder in a patient, said method comprising administering to the patient a liquid pharmaceutical composition of the invention. As indicated above, the liquid pharmaceutical composition is preferably administered by injection, in particular subcutaneously, in an amount corresponding to a dose of IL-2 ranging from 0.1 mIU to 3.0 mIU.
Другим объектом изобретения является устройство для инъекции, предпочтительно для подкожной инъекции, наполненное жидкой фармацевтической композицией по изобретению. Устройство может представлять собой, например, шприц или ручку. Предпочтительно устройство подходит для обеспечения подкожного введения жидкой фармацевтической композиции по изобретению. Устройство может быть адаптировано для предоставления одной дозы или нескольких доз жидкой фармацевтической композиции по изобретению. Каждая доза жидкой фармацевтической композиции по изобретению предпочтительно соответствует количеству IL-2, колеблющемуся от 0,1 мМЕ до 3,0 мМЕ. Типично устройство по изобретению подходит для доставки объема от 50 мкл до 2 мл, предпочтительно от 100 мкл до 1 мл.Another object of the invention is an injection device, preferably for subcutaneous injection, filled with a liquid pharmaceutical composition according to the invention. The device may be, for example, a syringe or a pen. Preferably, the device is suitable for providing subcutaneous administration of a liquid pharmaceutical composition of the invention. The device may be adapted to provide a single dose or multiple doses of a liquid pharmaceutical composition of the invention. Each dose of the liquid pharmaceutical composition of the invention preferably corresponds to an amount of IL-2 ranging from 0.1 mIU to 3.0 mIU. Typically, the device of the invention is suitable for delivering a volume of 50 µl to 2 ml, preferably 100 µl to 1 ml.
В каком-то воплощении устройство по изобретению является устройство для однократного применения. Устройство предпочтительно является одноразовым.In one embodiment, the device of the invention is a single use device. The device is preferably disposable.
В некоторых других воплощениях устройство по изобретению адаптировано для доставки нескольких доз, как, например, многодозовые ручки.In some other embodiments, the device of the invention is adapted to deliver multiple doses, such as multi-dose pens.
В каком-то воплощении устройство содержит средства, дающие возможность регулировать количество жидкой фармацевтической композиции для введения. В других воплощениях устройство подходит для введения фиксированного количества жидкой фармацевтической композиции.In one embodiment, the device includes means to control the amount of liquid pharmaceutical composition to be administered. In other embodiments, the device is suitable for administering a fixed amount of a liquid pharmaceutical composition.
Предпочтительно устройство подходит для самостоятельного введения.Preferably, the device is suitable for self-administration.
В некоторых воплощениях устройство по изобретению может представлять собой предварительно наполненный шприц или предварительно наполненный картридж, который можно использовать с автоинжектором. Автоинжектор может являться электронным или механическим.In some embodiments, the device of the invention may be a pre-filled syringe or a pre-filled cartridge that can be used with an auto-injector. The auto-injector may be electronic or mechanical.
Устройства, подходящие для подкожного введения и/или самостоятельного введения, хорошо известны на известном уровне техники. Некоторые гормональные продукты продаются в предварительно наполненных шприцах-ручках или предварительно наполненных шприцах. Например, можно обратиться к устройствам, используемым для введения инсулина, таким как инсулиновые ручки (такие, как продаваемые NovoNordisk под торговыми наименованиями NovoPen®) или инсулиновые шприцы для подкожных инъекций.Devices suitable for subcutaneous administration and/or self administration are well known in the art. Some hormonal products are sold in pre-filled pens or pre-filled syringes. For example, one can refer to devices used to administer insulin, such as insulin pens (such as those sold by NovoNordisk under the trade name NovoPen®) or insulin hypodermic syringes.
Само собой понятно, что к указанным шприцам или ручкам для выполнения инъекций можно адаптировать иглы для подкожных инъекций.It goes without saying that hypodermic needles can be adapted to said syringes or injection pens.
Как другие примеры, можно обратиться к системам для подкожной доставки, продаваемым для введения Rebif® (INF-1a), таким как Rebif® Rebidose, которая представляет собой предварительно наполненную одноразовую ручку, RebiSmart®, которая представляет собой электронное устройство для автоинжекции с многодозовым картриджем, созданное для самостоятельного введения, и Rebiject II®, которая представляет собой созданный для самостоятельного введения автоинжектор с предварительно наполненный шприцем.As other examples, refer to the subcutaneous delivery systems marketed for administering Rebif® (INF-1a), such as Rebif® Rebidose, which is a pre-filled disposable pen, RebiSmart®, which is an electronic auto-injection device with a multi-dose cartridge , designed for self-administration, and Rebiject II®, which is a self-administered auto-injector with a pre-filled syringe.
Если устройство по изобретению представляет собой шприц, такой шприц предпочтительно является предварительно собранным шприцем, что означает, что игла уже установлена на шприце. Например, можно обратиться к предварительно собранному шприцу Orgalutran®.If the device according to the invention is a syringe, such a syringe is preferably a pre-assembled syringe, which means that the needle is already mounted on the syringe. For example, you can refer to a pre-assembled Orgalutran® syringe.
В некоторых альтернативных или дополнительных воплощениях шприц адаптирован для применения с автоинжектором.In some alternative or additional embodiments, the syringe is adapted for use with an auto-injector.
Предпочтительно устройство представляет собой многодозовую ручку или стеклянный шприц, например, 0,5-1,5-мл шприц. Шприц может быть снабжен колпачком или иглой, извлекаемой колпачком.Preferably, the device is a multi-dose pen or a glass syringe, such as a 0.5-1.5 ml syringe. The syringe may be provided with a cap or a needle that can be removed by the cap.
Можно использовать другие устройства для самостоятельной инъекции. Например, можно использовать безигольные устройства для доставки, адаптированные для подкожного введения, такие как Zeneo®, продаваемые Crossject. Эта система основана на принципе перекрытия струйки воды; струйку жидкости, заключенной в стеклянную капсулу, выдавливают через иглу для инъекции очень маленького диаметра со скоростью 150 метр/секунда, что достаточно для прохождения через ткани.Other self-injection devices may be used. For example, needleless delivery devices adapted for subcutaneous administration such as the Zeneo® sold by Crossject can be used. This system is based on the principle of blocking a trickle of water; a trickle of liquid, enclosed in a glass capsule, is extruded through a very small diameter injection needle at a speed of 150 meters/second, which is sufficient to pass through the tissues.
В другом аспекте изобретение относится к набору, включающемуIn another aspect, the invention relates to a kit comprising
- флакон или картридж, включающий жидкие фармацевтические композиции по изобретению, и- a vial or cartridge containing liquid pharmaceutical compositions according to the invention, and
- средства для введения, такие как шприц(ы), игла(ы) и/или устройство(а) автоинжектор(ы).means for administration, such as syringe(s), needle(s) and/or auto-injector device(s).
Следующие далее примеры приводятся только для пояснения, а не для ограничения.The following examples are provided by way of explanation only and not by way of limitation.
ПРИМЕРЫEXAMPLES
Исследование устойчивостиSustainability research
Это исследование имеет в виду оценку устойчивости некоторых фармацевтических композиций с активным веществом IL-2 (альдеслейкином) в течение 36 месяцев при 5°С и 12 месяцев при 30°С/75% RH.This study refers to the evaluation of the stability of some pharmaceutical compositions with the active substance IL-2 (aldesleukin) for 36 months at 5°C and 12 months at 30°C/75% RH.
1. Получение жидкой фармацевтической композиции по изобретению1. Obtaining a liquid pharmaceutical composition according to the invention
Получают растворы стерильного активного вещества IL-2 (концентрированный раствор, включающий 25 мМЕ/мл, эквивалентный 2 мг/мл IL-2) в асептических условиях в вытяжном шкафу с ламинарным потоком при комнатной температуре. Активное вещество IL-2 разбавляют и составляют композиции согласно таблице композиций, приведенной ниже. Каждую композицию (1 мл) упаковывают в атмосфере азота во флаконы из стекла с силиконовым покрытием, которые закрывают бромбутиловыми пробками Flurotec.Prepare solutions of sterile IL-2 active (strong solution comprising 25 mIU/ml equivalent to 2 mg/ml IL-2) under aseptic conditions in a laminar flow fume hood at room temperature. The IL-2 active is diluted and formulated according to the formulation table below. Each composition (1 ml) is packaged under nitrogen in silicone coated glass vials, which are closed with Flurotec bromobutyl stoppers.
2. Исследования устойчивости2. Sustainability studies
Полученные композиции хранят в контролируемых камерах при 5°С или 30°С/75% RH в течение 36 месяцев. Каждую композицию (1-10) оценивают на ее устойчивость в месяц 6. Дополнительный анализ на устойчивость будет выполняться до 36 месяцев хранения.The resulting compositions are stored in controlled chambers at 5°C or 30°C/75% RH for 36 months. Each composition (1-10) is evaluated for its stability at month 6. An additional stability analysis will be performed up to 36 months of storage.
Устойчивость оценивают признанными аналитическими методами, в частности, ВЭЖХ с обращенной фазой (ОФ-ВЭЖХ), для определения чистоты вещества IL-2 и возможного образования продуктов разложения, и анализом на биологическую активность. ОФ-ВЭЖХ выполняют в следующих условиях:Stability is assessed by recognized analytical methods, in particular reverse phase HPLC (RP-HPLC), to determine the purity of the IL-2 substance and the possible formation of degradation products, and analysis for biological activity. RP-HPLC is performed under the following conditions:
- неподвижная фаза: колонка С4, Jupiter C4, 5 мкм, 300Ǻ, 4,6x250 мм, от Phenomenex;- stationary phase: column C4, Jupiter C4, 5 µm, 300Ǻ, 4.6x250 mm, from Phenomenex;
- градиент: элюирование выполняют в 30-минутном градиенте буфера В (муравьиная кислота, 0,1%, в ацетонитриле) в буфере А (муравьиная кислота, 0,1%, в ультрачистой воде), описанном ниже:- gradient: elution is performed in a 30-minute gradient of buffer B (formic acid, 0.1%, in acetonitrile) in buffer A (formic acid, 0.1%, in ultrapure water) described below:
- время удерживания IL-2 составляет 14,0-14,6 минут.- the retention time of IL-2 is 14.0-14.6 minutes.
Исходное активное вещество IL-2 в концентрации 1 мМЕ/мл впрыскивают в качестве качественного контроля.The original active substance IL-2 at a concentration of 1 mIU/ml is injected as a quality control.
Биологическую активность IL-2 предпочтительно определяют клеточным анализом, выполняемым на клеточной линии НТ-2 (клон A5E, ATCC® CRL-1841™), чей рост зависит от IL-2. Рост клеток в присутствии интервала испытываемого продукта интерлейкина-2 сравнивают с ростом, регистрируемым с Международным стандартом IL-2 (2-ой Международный стандарт ВОЗ для интерлейкина-2 (человеческий, установленная рДНК) NIBSC, код 86/500). Рост клеток измеряют после добавления и конверсии [3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2H-тетразолия (внутренняя соль, MTS) в формазан активными жизнеспособными клетками. Затем концентрацию формазана измеряют спектрофотометрией при 490 нм. Такая концентрация прямо пропорциональна числу жизнеспособных клеток, присутствующих в культуре.The biological activity of IL-2 is preferably determined by a cell assay performed on the HT-2 cell line (clone A5E, ATCC® CRL-1841™) whose growth is dependent on IL-2. Cell growth in the presence of the interleukin-2 test product range is compared to growth recorded with the International Standard for IL-2 (2nd WHO International Standard for Interleukin-2 (human, established rDNA) NIBSC, code 86/500). Cell growth is measured after addition and conversion of [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (internal salt, MTS) to formazan with active viable cells. The formazan concentration is then measured by spectrophotometry at 490 nm. This concentration is directly proportional to the number of viable cells present in the culture.
Результатыresults
Чистоту и биологическую активность вещества IL-2 оценивают для каждой композиции и для каждого условия хранения в течение 6 месяцев.The purity and biological activity of the IL-2 substance is evaluated for each composition and for each storage condition for 6 months.
Результаты приводятся в таблицах ниже.The results are shown in the tables below.
Все испытываемые композиции показывают хорошую устойчивость после хранения 6 месяцев при 5°С, за исключением композиций 3 и 6. Композиции 3 и 6 отображают сильное разложение IL-2 уже после 3 месяцев хранения при 5°С и 30°С. После хранения 3 месяца при 30°С процент остаточной биологической активности составляет примерно 12% и 46% для композиций 3 и 6, соответственно. Такая низкая устойчивость может являться результатом низкой концентрации SDS в растворе. Оказывается, что может требоваться концентрация SDS по меньшей мере 0,05 мг/мл для промотирования устойчивости IL-2 в растворе. В связи с этим хорошую устойчивость при 5°С и 30°С показывает композиция 7, которая содержит 0,088 мг/мл SDS.All compositions tested show good stability after 6 months storage at 5°C, with the exception of compositions 3 and 6. Compositions 3 and 6 show a strong degradation of IL-2 already after 3 months storage at 5°C and 30°C. After storage for 3 months at 30°C, the percentage of residual biological activity is approximately 12% and 46% for compositions 3 and 6, respectively. This low stability may result from the low concentration of SDS in solution. It appears that an SDS concentration of at least 0.05 mg/mL may be required to promote IL-2 stability in solution. In this regard, composition 7, which contains 0.088 mg/ml SDS, shows good stability at 5°C and 30°C.
Примечательно, что композиции 7, 8 и 10, включающие от 5 до 10 мМЕ/мл IL-2, показывают хороший профиль устойчивости. Наилучшие результаты в смысле чистоты и биологической активности после 6 месяцев хранения при 5°С и 30°С получают с композицией 8. Композиция 8 содержит 10 мМЕ/мл IL-2 и 0,176 мг/мл SDS с отношением SDS/IL-2 0,22. Композиции 1 и 4 являются сопоставимыми композициями, содержащими маннит. Композиции 1 и 4 показывают схожую устойчивость в смысле чистоты и биологической активности с композициями 2 и 5, которые не включают маннит. Таким образом, присутствие маннита не является необходимым для промотирования устойчивости IL-2 во время хранения.Notably, compositions 7, 8 and 10, comprising 5 to 10 mIU/ml IL-2, show a good resistance profile. The best results in terms of purity and biological activity after 6 months of storage at 5°C and 30°C are obtained with formulation 8. Composition 8 contains 10 mIU/ml IL-2 and 0.176 mg/ml SDS with an SDS/IL-2 ratio of 0. 22. Compositions 1 and 4 are comparable compositions containing mannitol. Compositions 1 and 4 show similar stability in terms of purity and biological activity to compositions 2 and 5 which do not include mannitol. Thus, the presence of mannitol is not necessary to promote IL-2 stability during storage.
Claims (38)
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP15306696.4 | 2015-10-22 | ||
| EP15306696 | 2015-10-22 | ||
| PCT/EP2016/075204 WO2017068031A1 (en) | 2015-10-22 | 2016-10-20 | Pharmaceutical compositions of il-2 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018118215A RU2018118215A (en) | 2019-11-25 |
| RU2018118215A3 RU2018118215A3 (en) | 2020-02-21 |
| RU2783864C2 true RU2783864C2 (en) | 2022-11-21 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4530787A (en) * | 1984-03-28 | 1985-07-23 | Cetus Corporation | Controlled oxidation of microbially produced cysteine-containing proteins |
| US4752585A (en) * | 1985-12-17 | 1988-06-21 | Cetus Corporation | Oxidation-resistant muteins |
| NL1028208C1 (en) * | 2005-02-07 | 2005-05-26 | Chiron Corp | Preparation of interleukin-2, useful for combination therapy treatment of cancer, by adding sodium dodecyl sulfate to form microaggregates |
| AU2006200923A1 (en) * | 1999-12-30 | 2006-03-30 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Methods for pulmonary delivery of interleukin-2 |
| EP1688146A1 (en) * | 2005-02-07 | 2006-08-09 | Chiron Corporation | Preparing aldesleukin for pharmaceutical use |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4530787A (en) * | 1984-03-28 | 1985-07-23 | Cetus Corporation | Controlled oxidation of microbially produced cysteine-containing proteins |
| US4530787B1 (en) * | 1984-03-28 | 1993-07-20 | Cetus Corp | |
| US4752585A (en) * | 1985-12-17 | 1988-06-21 | Cetus Corporation | Oxidation-resistant muteins |
| AU2006200923A1 (en) * | 1999-12-30 | 2006-03-30 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Methods for pulmonary delivery of interleukin-2 |
| NL1028208C1 (en) * | 2005-02-07 | 2005-05-26 | Chiron Corp | Preparation of interleukin-2, useful for combination therapy treatment of cancer, by adding sodium dodecyl sulfate to form microaggregates |
| EP1688146A1 (en) * | 2005-02-07 | 2006-08-09 | Chiron Corporation | Preparing aldesleukin for pharmaceutical use |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7329571B2 (en) | IL-2 pharmaceutical composition | |
| CA2395814C (en) | Glp-2 formulations comprising phosphate buffer, l-histidine and mannitol or sucrose | |
| JP3927248B2 (en) | HGF lyophilized formulation | |
| JP2000504327A (en) | Highly concentrated, lyophilized and liquid, Factor IX formula | |
| EP2676677A9 (en) | Highly concentrated anti-cd40 antibody pharmaceutical preparation | |
| US8580246B2 (en) | Surfactant-free stable pharmaceutical composition comprising granulocyte-colony stimulating factor | |
| EP2052736A1 (en) | Parathyroid hormone formulations und uses thereof | |
| CA2026149A1 (en) | Stabilized aqueous formulations of small peptides | |
| UA80331C2 (en) | Human serum albumin-free stabilised interferon liquid formulations | |
| CA2792965A1 (en) | Stable aqueous mia/cd-rap formulations | |
| CN106714823A (en) | Hgf preparation suitable for treatment of nervous diseases | |
| KR20190071760A (en) | Pharmaceutical formulations and methods for their preparation | |
| US20210330747A1 (en) | Pharmaceutical Compositions and Pharmaceutical Products of Heterodimeric Human Interleukin-15 (hetIL-15) | |
| JP2015038111A (en) | Liquid formulation of g-csf | |
| RU2783864C2 (en) | Pharmaceutical compositions with il-2 | |
| JP3479082B2 (en) | Thrombopoietin composition | |
| AU629549B2 (en) | Homogeneous dimeric m-csf and storage stable formulations thereof | |
| EA026073B1 (en) | Formulation for bovine granulocyte colony stimulating factor and method of treatment using same | |
| EP3744319B1 (en) | A stable lyophilized formulation for hybrid fc fused g-csf | |
| AU2011268944A1 (en) | Long-term storage of non-glycosylated recombinant human G-CSF |