RU2781235C1 - METHOD FOR DETERMINING THE PRESENCE OF A RESPONSE OF T CELLS IN HUMAN BLOOD TO THE PRESENCE OF SARS-CoV2 ANTIGENS - Google Patents
METHOD FOR DETERMINING THE PRESENCE OF A RESPONSE OF T CELLS IN HUMAN BLOOD TO THE PRESENCE OF SARS-CoV2 ANTIGENS Download PDFInfo
- Publication number
- RU2781235C1 RU2781235C1 RU2022114529A RU2022114529A RU2781235C1 RU 2781235 C1 RU2781235 C1 RU 2781235C1 RU 2022114529 A RU2022114529 A RU 2022114529A RU 2022114529 A RU2022114529 A RU 2022114529A RU 2781235 C1 RU2781235 C1 RU 2781235C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sars
- concentration
- cov2
- well
- tube
- Prior art date
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 42
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 41
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 title claims abstract description 19
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 200000000003 influenza A Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000002429 anti-coagulation Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000036647 reaction Effects 0.000 claims abstract 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 7
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 7
- 210000000601 Blood Cells Anatomy 0.000 abstract description 4
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 11
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 9
- 201000003176 severe acute respiratory syndrome Diseases 0.000 description 7
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating Effects 0.000 description 4
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N Heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 3
- 229960002897 Heparin Drugs 0.000 description 3
- 210000003300 Oropharynx Anatomy 0.000 description 3
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 3
- 206010002653 Anosmia Diseases 0.000 description 2
- 101710040745 B19R Proteins 0.000 description 2
- 206010019233 Headache Diseases 0.000 description 2
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 200000000015 coronavirus disease 2019 Diseases 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 2
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral Effects 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 210000000612 Antigen-Presenting Cells Anatomy 0.000 description 1
- 102100016020 IFNG Human genes 0.000 description 1
- 101700086956 IFNG Proteins 0.000 description 1
- 210000000987 Immune System Anatomy 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 210000004698 Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000001058 adult Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral Effects 0.000 description 1
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 description 1
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к иммунологическим исследованиям и исследованиям функциональной активности иммунных клеток.The invention relates to medicine and biology, namely to immunological studies and studies of the functional activity of immune cells.
Заявленный способ позволяет определять специфическую реакцию Т-клеток - выброс различных цитокинов, в частности, ИФН гамма - на присутствие в среде антигенов SARS-CoV-2The claimed method allows to determine the specific reaction of T cells - the release of various cytokines, in particular, IFN gamma - to the presence of SARS-CoV-2 antigens in the environment.
Из уровня техники известен метод исследования реакции иммунной системы на вирус SARS-CoV2 «Стимуляция Т-клеток с желаемой антигенной специфичностью» [JP 1999155588, Stimulation Of Т Cell Having Desired Antigenic Specificity, 14.09.1998]. Изобретение представляет собой метод получения и стимуляции специфических Т-клеток посредством получения антиген презентирующих клеток, которым введен иммортализированный ген, с последующей трансдукцией таргетным геном целевых клеток, добавлением Т-клеток и дальнейшего совместного культивирования полученных клеточных популяций. Преимуществом данного метода является возможность получения любых специфических Т-клеток in vitro, недостатком является невозможность обнаружения данным методом сенсибилизированных к антигену SARS-CoV2 Т-клеток в культуре, полученной от человека.The prior art method for studying the response of the immune system to the SARS-CoV2 virus "Stimulation of T cells with the desired antigenic specificity" [JP 1999155588, Stimulation Of T Cell Having Desired Antigenic Specificity, 14.09.1998]. The invention is a method for obtaining and stimulating specific T cells by obtaining antigen presenting cells to which an immortalized gene has been introduced, followed by target cell transduction with a target gene, addition of T cells, and further co-cultivation of the resulting cell populations. The advantage of this method is the possibility of obtaining any specific T cells in vitro, the disadvantage is the impossibility of detecting T cells sensitized to the SARS-CoV2 antigen in a culture obtained from a person by this method.
Наиболее близким аналогом является изобретение «Методы стимуляции антиген-специфического Т-клеточного иммунитета» [US 20160068808, Methods for stimulating antigen-specific T cell responses, 22.04.2014]. В изобретении описан способ стимуляции специфических Т-клеток в культуре клеток крови или периферических мононуклеарных лимфоцитов, полученных от человека, посредством добавления ИЛ-10, ИЛ-10 и одного или нескольких антигенов, к которым требуется получение специфических иммунокомпетентных клеток. Отличие данного метода от заявляемого заключается в том, что приведенный метод позволяет получать in vitro специфические Т-клетки в культуре клеток крови и/или периферических мононуклеарных клеток к любому специфическому антигену, а не стимулировать исходные специфические Т-клетки, имеющиеся в исходном материале, полученном от пациента и/или донора.The closest analogue is the invention "Methods for stimulating antigen-specific T-cell immunity" [US 20160068808, Methods for stimulating antigen-specific T cell responses, 04/22/2014]. The invention describes a method for stimulating specific T cells in a culture of human-derived blood cells or peripheral mononuclear lymphocytes by adding IL-10, IL-10 and one or more antigens for which specific immunocompetent cells are required. The difference between this method and the claimed one lies in the fact that the given method allows to obtain in vitro specific T cells in a culture of blood cells and / or peripheral mononuclear cells to any specific antigen, and not to stimulate the original specific T cells present in the source material obtained from the patient and/or donor.
Техническим результатом заявленного изобретения является возможность исследования реакции иммунокомпетентных клеток цельной крови на присутствие антигенов SARS-CoV2, дающая возможность определять специфическую реакцию Т-клеток - выброс различных цитокинов - на присутствие в среде антигенов SARS-CoV-2.The technical result of the claimed invention is the possibility of studying the reaction of immunocompetent whole blood cells to the presence of SARS-CoV2 antigens, which makes it possible to determine the specific response of T cells - the release of various cytokines - to the presence of SARS-CoV-2 antigens in the environment.
Вышеприведенный технический результат достигается благодаря тому, что производят забор цельной крови в объеме не менее 2 мл в пробирку с антикоагулянтом (гепарином), далее полученную кровь раскапывают в несколько лунок планшета или пробирки в объеме не менее 500 мкл, далее одну лунку или пробирку оставляют в качестве контрольной и не добавляют никаких дополнительных реагентов, где при последующем исследовании уровня интерферона гамма (ИФН гамма) значение последнего не должно превышать 100 пг/мл. Превышение значения 100 пг/мл будет возможно свидетельствовать о наличии у пациента иммунокомпрометирующего состояния, т.к. при обследовании 100 здоровых доноров не было получено значений, превышающих 100 пг/мл. В другую лунку или пробирку добавляют фитогемагглютинин (ФГА) в концентрации 10 мкг/мл, т.к. при превышении данных значений будет наблюдаться переактивирование клеток, при более низкой концентрации может наблюдаться недостаточная активаций клеток. В лунке, куда добавлен ФГА, при последующем исследовании уровня интерферона гамма (ИФН гамма) значение последнего не должно быть ниже 100 пг/мл. Получение более низких значений будет свидетельствовать о наличии у исследуемого иммунодефицитного состояния, в таком случае значения интерферона в лунках с антигеном нельзя интерпретировать как валидные. В другую - любой из антигенов SARS (S, N, Е) в концентрации 20-30 мкг/мл, в последнюю - поверхностный антиген гриппа А в концентрации 20-30 мкг/мл, при меньшей концентрации не наблюдается достаточной активации клеток, повышение концентрации экономически и биологически необоснованно, после чего весь планшет / все пробирки инкубируют в течение 24 часов, далее забирают супернатант в объеме не менее 150 мкл (100 мкл стандартный объем сыворотки, требуемый для исследования уровня цитокинов в биологической жидкости большинством ИФА тест систем, которые является наиболее распространенными) и проводят исследование уровня интерферона гамма (ИФН гамма) или другого цитокина любым доступным методом, при соблюдении условий по полученным концентрациям в контрольной лунке / пробирке и лунке / пробирке с ФГА, отмечают специфическую реакцию иммунокомпетентных клеток на присутствие в среде антигенов SARS при превышении концентрации ИФН гамма в лунке / пробирке с последним более чем на 20% (в связи с тем, что значение уровней цитокинов в сыворотке крови людей могут варьироваться в достаточно широком диапазоне, за значимую разницу принимается значение, которое превышает разницу, полученную при исследовании уровня цитокинов в сыворотке крови, полученной в аналогичных условиях, одного и того же пациента в течение 10 дней) аналогичного показателя в лунке / пробирке с поверхностным антигеном гриппа А.The above technical result is achieved due to the fact that whole blood is taken in a volume of at least 2 ml into a test tube with an anticoagulant (heparin), then the resulting blood is dropped into several wells of a plate or test tube in a volume of at least 500 μL, then one well or test tube is left in as a control and do not add any additional reagents, where in the subsequent study of the level of interferon gamma (IFN gamma), the value of the latter should not exceed 100 pg / ml. Exceeding the value of 100 pg / ml will possibly indicate the presence of an immunocompromising condition in the patient, because. when examining 100 healthy donors, no values exceeding 100 pg/ml were obtained. Phytohemagglutinin (PHA) is added to another well or tube at a concentration of 10 μg / ml, because. when these values are exceeded, cell reactivation will be observed, at a lower concentration, insufficient cell activation may be observed. In the well where PHA was added, during the subsequent study of the level of interferon gamma (IFN gamma), the value of the latter should not be lower than 100 pg / ml. Obtaining lower values will indicate the presence of an immunodeficiency state in the test, in which case the values of interferon in the wells with antigen cannot be interpreted as valid. In the other - any of the SARS antigens (S, N, E) at a concentration of 20-30 μg / ml, in the last - influenza A surface antigen at a concentration of 20-30 μg / ml, at a lower concentration there is no sufficient cell activation, an increase in concentration economically and biologically unreasonable, after which the entire plate / all tubes are incubated for 24 hours, then the supernatant is taken in a volume of at least 150 μl (100 μl is the standard volume of serum required to study the level of cytokines in the biological fluid by most ELISA test systems, which are the most common) and conduct a study of the level of interferon gamma (IFN gamma) or another cytokine by any available method, subject to the conditions for the obtained concentrations in the control well / test tube and well / test tube with PHA, note the specific reaction of immunocompetent cells to the presence of SARS antigens in the medium when exceeding concentration of IFN gamma in the well / tube with the latter by more than 20% (due to the fact that the value of the levels of cytokines in the blood serum of people can vary in a fairly wide range, a significant difference is taken to be a value that exceeds the difference obtained in the study of the level of cytokines in the blood serum obtained under similar conditions, the same patient for 10 days) similar indicator in the well / tube with influenza A surface antigen.
Изобретение может быть иллюстрировано следующими примерами.The invention can be illustrated by the following examples.
Пример 1Example 1
Донор К., 35 лет, анамнез без особенностей, данные физикального осмотра без особенностей. Исследуемый тесно контактировал с пациентом (супружеская пара, проживали в одной квартире и в пределах одной спальни), у которого определялись характерные симптомы SARS-CoV2 (температура 38°С, головная боль, потеря обоняния) и у которого определялся в мазке из ротоглотки SARS-CoV2 методом ПЦР в 2 заборах с интервалом в 3 дня, при этом исследуемый донор К. не имел клинических симптомов заболевания, мазок на ПЦР сдал по прошествии карантинного периода, в мазке РНК SARS -СоV2 не была обнаружена. У данного донора также по окончании карантинного периода произвели забор крови в объеме 4 мл в пробирку с гепарином, в тот же день кровь поставили на инкубирование на 24 часа в планшете в следующем варианте: 500 мкл контроль кровь (без добавления реагентов), 500 мкл кровь + ФГА 10 мкг / мл, 500 мкл кровь + антиген SARS S 30 мкг/мл, 500 мкл кровь + антиген SARS N 30 мкг/мл, 500 мкл кровь + поверхностный антиген вируса гриппа А 30 мкг/мл. Далее планшет инкубировали в течение 24 часов в стандартных условиях 5% CO2 и 37°С. По прошествии инкубации отобрали 100 мкл супернатанта из каждой лунки и поставили реакцию иммуноферментного анализа (ИФА) на интерферон гамма.Donor K., 35 years old, anamnesis without features, physical examination data without features. The subject was in close contact with the patient (married couple, lived in the same apartment and within the same bedroom), who had characteristic symptoms of SARS-CoV2 (temperature 38 ° C, headache, loss of smell) and who was determined in a swab from the oropharynx SARS- CoV2 by PCR in 2 samplings with an interval of 3 days, while the studied donor K. had no clinical symptoms of the disease, he gave a PCR smear after the quarantine period, SARS-CoV2 RNA was not detected in the smear. Also, at the end of the quarantine period, blood was taken from this donor in a volume of 4 ml into a test tube with heparin, on the same day the blood was placed for incubation for 24 hours in the tablet in the following version: 500 µl control blood (without adding reagents), 500 µl blood + PHA 10 µg/ml, 500 µl blood + SARS S antigen 30 µg/ml, 500 µl blood + SARS N antigen 30 µg/ml, 500 µl blood + influenza A surface antigen 30 µg/ml. Next, the tablet was incubated for 24 hours under standard conditions of 5% CO2 and 37°C. After incubation, 100 μl of the supernatant was taken from each well and an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test was performed for interferon gamma.
Исходя из полученных данных можно сделать вывод о наличии специфического выброса Т-клетками ИФН гамма в ответ на присутствие в среде антигенов вируса SARS, т.к. по полученным результатам концентрации ИФН гамма соблюдены следующие условия: концентрация в контрольной лунке не превышает 100 пг/мл (0 пг/мл), концентрация в пробирке с ФГА превышает 100 пг/мл и составляет 900 пг/мл, концентрация в лунках с антигенами S и N SARS-CoV2 составляет 320 и 50 пг/мл соответственно на фоне 1,9 пг/мл, полученной в лунке с поверхностным антигеном вируса гриппа А. Анамнестические данные донора К. свидетельствуют о возможном контакте иммуннокомпентеных клеток с вирусом SARS-CoV2 и, как следствие, формирования ими специфической реакции, заключающейся в частности в выбросе ИФН гамма, в ответ на антиген SARS-CoV2, о чем свидетельствует проведенное исследование и что может быть одним из объяснений отсутствия у данного донора симптомов заболевания COVID 19 при его тесном и продолжительном контакте (проживание в одной квартире и одной спальне в течение 14 недель) с инфицированным.Based on the data obtained, it can be concluded that there is a specific release of IFN gamma by T cells in response to the presence of antigens of the SARS virus in the environment, since according to the obtained results of the concentration of IFN gamma, the following conditions are met: the concentration in the control well does not exceed 100 pg/ml (0 pg/ml), the concentration in the test tube with PHA exceeds 100 pg/ml and is 900 pg/ml, the concentration in the wells with S antigens and N of SARS-CoV2 are 320 and 50 pg/ml, respectively, against the background of 1.9 pg/ml obtained in the well with the surface antigen of the influenza A virus. The anamnestic data of donor K. indicate a possible contact of immune cells with the SARS-CoV2 virus and, as a result, they form a specific reaction, which consists in particular in the release of IFN gamma, in response to the SARS-CoV2 antigen, as evidenced by the study and which may be one of the explanations for the absence of symptoms of COVID 19 in this donor during close and prolonged contact (living in the same apartment and one bedroom for 14 weeks) with an infected person.
Пример 2Example 2
Донор Л., 46 лет, анамнез без особенностей, данные физикального осмотра без особенностей. Исследуемый тесно контактировал с пациентом (инфицированный взрослый ребенок (22 года), проживали в одной квартире и в пределах одной спальни), у которого определялись характерные симптомы SARS-CoV2 (слабые катаральные явления, слабость, головная боль, потеря обоняния) и у которого определялся в мазке из ротоглотки SARS-CoV2 методом ПЦР в 2 заборах с интервалом в 2 дня, при этом исследуемый донор Л. сдал мазок из ротоглотки на определение РНК SARS-СоV2 методом ПЦР через неделю после получения первого положительного результата у инфицированного родственника, в мазке РНК SARS-CoV2 была обнаружена. В течение всего карантинного периода и далее (период наблюдения составлял 4 недели с момента получения положительного результата ПЦР) донор Л. не имел клинических симптомов заболевания. По прошествии карантинного периода, в мазке донора Л. РНК SARS-CoV2 не была обнаружена. У данного донора также по окончании карантинного периода произвели забор крови в объеме 4 мл в пробирку с гепарином, в тот же день раскапали кровь в планшет в следующем варианте: 500 мкл контроль кровь (без добавления реагентов), 500 мкл кровь + ФГА 10 мкг / мл, 500 мкл кровь + антиген SARS S 20 мкг/мл, 500 мкл кровь + антиген SARS N 20 мкг/мл, 500 мкл кровь + поверхностный антиген вируса гриппа А 20 мкг / мл. Далее планшет инкубировали в течение 24 часов в стандартных условиях 5% CO2 и 37°С. По прошествии инкубации отобрали 100 мкл супернатанта из каждой лунки и поставили реакцию ИФА на интерферон гамма.Donor L., 46 years old, anamnesis without features, physical examination data without features. The subject was in close contact with a patient (an infected adult child (22 years old), lived in the same apartment and within the same bedroom), who had characteristic symptoms of SARS-CoV2 (mild catarrh, weakness, headache, loss of smell) and who had in a swab from the oropharynx SARS-CoV2 by PCR in 2 samplings with an interval of 2 days, while the studied donor L. passed a swab from the oropharynx for the determination of SARS-CoV2 RNA by PCR a week after receiving the first positive result in an infected relative, in an RNA smear SARS-CoV2 has been discovered. During the entire quarantine period and beyond (the observation period was 4 weeks from the moment a positive PCR result was obtained), donor L. had no clinical symptoms of the disease. After the quarantine period, SARS-CoV2 RNA was not detected in the smear of the donor L.. Also, at the end of the quarantine period, blood was taken from this donor in a volume of 4 ml into a test tube with heparin, on the same day blood was dropped into a plate in the following version: 500 µl control blood (without adding reagents), 500 µl blood + FHA 10 µg / ml, 500 µl blood + SARS S antigen 20 µg/ml, 500 µl blood + SARS N antigen 20 µg/ml, 500 µl blood + influenza A surface antigen 20 µg/ml. Next, the tablet was incubated for 24 hours under standard conditions of 5% CO2 and 37°C. After incubation, 100 μl of supernatant was taken from each well and an ELISA test was performed for interferon gamma.
Исходя из полученных данных можно сделать вывод о наличии специфического выброса Т-клетками ИФН гамма в ответ на присутствие в среде антигенов вируса SARS, т.к. по полученным результатам концентрации ИФН гамма соблюдены следующие условия: концентрация в контрольной лунке не превышает 100 пг/мл (0 пг/мл), концентрация в пробирке с ФГА превышает 100 пг/л и составляет 680 пг/мл, концентрация в лунках с антигенами S и N SARS-CoV2 составляет 20 и 240 пг/мл соответственно на фоне 50 пг/мл, полученной в лунке с поверхностным антигеном вируса гриппа А, концентрация ИФН гамма в лунке с антигеном N SARS-CoV2 превышает более чем на 20% таковое значение в лунке с поверхностным антигеном вируса гриппа А (240 пг/мл и 50 пг/мл соответственно). Анамнестические данные донора Л. свидетельствуют о возможном контакте иммуннокомпентеных клеток с вирусом SARS-CoV2 и, как следствие, формирования ими специфической реакции, заключающейся в частности в выбросе ИФН гамма, в ответ на антиген SARS-CoV2, о чем свидетельствует проведенное исследование и что может быть одним из объяснений отсутствия у данного донора симптомов заболевания COVID 19 при его тесном и продолжительном контакте (проживание в одной квартире и одной спальне в течение 14 недель) с инфицированным и несмотря на положительный результат ПЦР на РНК вируса SARS-CoV2.Based on the data obtained, it can be concluded that there is a specific release of IFN gamma by T cells in response to the presence of antigens of the SARS virus in the environment, since according to the obtained results of the concentration of IFN gamma, the following conditions are met: the concentration in the control well does not exceed 100 pg/ml (0 pg/ml), the concentration in the test tube with PHA exceeds 100 pg/l and is 680 pg/ml, the concentration in the wells with S antigens and N SARS-CoV2 is 20 and 240 pg/ml, respectively, against the background of 50 pg/ml obtained in the well with the surface antigen of the influenza A virus, the concentration of IFN-gamma in the well with the SARS-CoV2 N antigen exceeds by more than 20% the value in well with influenza A surface antigen (240 pg/ml and 50 pg/ml, respectively). The anamnestic data of the donor L. indicate a possible contact of immunocompetent cells with the SARS-CoV2 virus and, as a result, the formation of a specific reaction by them, consisting in particular in the release of IFN gamma, in response to the SARS-CoV2 antigen, as evidenced by the study and which may be one of the explanations for the absence of symptoms of COVID 19 in this donor in case of close and prolonged contact (living in the same apartment and one bedroom for 14 weeks) with an infected person and despite a positive PCR result for SARS-CoV2 virus RNA.
Настоящий тест будет способствовать отражению статуса в отношении инфекции вирусом SARS не только гуморального звена иммунитета (наличие антител в плазме крови), но и клеточного, т.е. будет отображать способность Т-клеток реагировать выбросом цитокинов, прежде всего, противовирусного интерферона гамма, в ответ на встречу с антигенами вируса SARS.This test will help to reflect the status in relation to infection with the SARS virus not only of the humoral link of immunity (the presence of antibodies in the blood plasma), but also of the cellular one, i.e. will reflect the ability of T cells to respond by releasing cytokines, primarily the antiviral interferon gamma, in response to encountering SARS virus antigens.
Результаты подобного теста помогут клиницистам в определении показаний к мерам специфической профилактики и, при накоплении определенного массива данных, формировании прогноза течения инфекции SARS.The results of such a test will help clinicians determine the indications for specific prevention measures and, with the accumulation of a certain amount of data, the formation of a prognosis for the course of SARS infection.
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2781235C1 true RU2781235C1 (en) | 2022-10-07 |
Family
ID=
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112028978A (en) * | 2020-09-07 | 2020-12-04 | 重庆医科大学 | Novel coronavirus specific CD8+T cell epitope peptide and application thereof |
| RU2744444C1 (en) * | 2021-02-21 | 2021-03-09 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Use of agent for induction of specific immunity against severe acute respiratory syndrome sars-cov-2 for population revaccination (versions) |
| WO2021207051A1 (en) * | 2020-04-06 | 2021-10-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating acute respiratory disorders |
| RU2759149C1 (en) * | 2021-04-13 | 2021-11-09 | Акционерное общество "Центр Генетики и Репродуктивной Медицины "ГЕНЕТИКО" | Method for carrying out an enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies in a human biological sample specific to the sars-cov2 human coronavirus, a test system |
| RU2760438C1 (en) * | 2021-06-09 | 2021-11-25 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное объединение "Иммунотэкс" | METHOD FOR ENZYME IMMUNOASSAY DETERMINATION OF THE LEVEL OF ANTIGEN-RECOGNIZING B-LYMPHOCYTE RECEPTORS REPRESENTED BY MEMBRANE-SPECIFIC RBD PROTEIN SARS-COV-2, IgG ANTIBODIES |
| WO2022026921A1 (en) * | 2020-07-30 | 2022-02-03 | Repertoire Immune Medicines, Inc. | Identification and use of t cell epitopes in designing diagnostic and therapeutic approaches for covid-19 |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2021207051A1 (en) * | 2020-04-06 | 2021-10-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treating acute respiratory disorders |
| WO2022026921A1 (en) * | 2020-07-30 | 2022-02-03 | Repertoire Immune Medicines, Inc. | Identification and use of t cell epitopes in designing diagnostic and therapeutic approaches for covid-19 |
| CN112028978A (en) * | 2020-09-07 | 2020-12-04 | 重庆医科大学 | Novel coronavirus specific CD8+T cell epitope peptide and application thereof |
| RU2744444C1 (en) * | 2021-02-21 | 2021-03-09 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Use of agent for induction of specific immunity against severe acute respiratory syndrome sars-cov-2 for population revaccination (versions) |
| RU2759149C1 (en) * | 2021-04-13 | 2021-11-09 | Акционерное общество "Центр Генетики и Репродуктивной Медицины "ГЕНЕТИКО" | Method for carrying out an enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies in a human biological sample specific to the sars-cov2 human coronavirus, a test system |
| RU2760438C1 (en) * | 2021-06-09 | 2021-11-25 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное объединение "Иммунотэкс" | METHOD FOR ENZYME IMMUNOASSAY DETERMINATION OF THE LEVEL OF ANTIGEN-RECOGNIZING B-LYMPHOCYTE RECEPTORS REPRESENTED BY MEMBRANE-SPECIFIC RBD PROTEIN SARS-COV-2, IgG ANTIBODIES |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Turner et al. | Rudimentary signs of immunosenescence in Cytomegalovirus-seropositive healthy young adults | |
| Hernández-Santos et al. | Th17 cells confer long-term adaptive immunity to oral mucosal Candida albicans infections | |
| Mayne et al. | Gene expression profile of herpesvirus-infected T cells obtained using immunomicroarrays: induction of proinflammatory mechanisms | |
| Levin et al. | Decline in varicella-zoster virus (VZV)–specific cell-mediated immunity with increasing age and boosting with a high-dose VZV vaccine | |
| Fan et al. | Characterization of SARS-CoV-specific memory T cells from recovered individuals 4 years after infection | |
| EP1996936B1 (en) | A method for detecting antigen-specific or mitogen-activated t cells | |
| Tian et al. | Molecular signatures of dengue virus-specific IL-10/IFN-γ co-producing CD4 T cells and their association with dengue disease | |
| Merlini et al. | Stimulation of PBMC and monocyte-derived macrophages via toll-like receptor activates innate immune pathways in HIV-infected patients on virally suppressive combination antiretroviral therapy | |
| CN111593022B (en) | vMIP-II induced CD8+ T cell dephosphorylation to Tcm and its application in medicine | |
| Tonaco et al. | Evaluation of profile and functionality of memory T cells in pulmonary tuberculosis | |
| Arora et al. | Body fluid from the parasitic worm Ascaris suum inhibits broad‐acting pro‐inflammatory programs in dendritic cells | |
| Arevalo et al. | Ivermectin reduces coronavirus infection in vivo: a mouse experimental model | |
| Hernandez et al. | HIV-1-exposed seronegative individuals show alteration in TLR expression and pro-inflammatory cytokine production ex vivo: An innate immune quiescence status? | |
| JP6272820B2 (en) | Method for monitoring HIV-specific T cell response | |
| Kratzer et al. | Combined assessment of S‐and N‐specific IL‐2 and IL‐13 secretion and CD69 neo‐expression for discrimination of post–infection and post‐vaccination cellular SARS‐CoV‐2‐specific immune response | |
| RU2781235C1 (en) | METHOD FOR DETERMINING THE PRESENCE OF A RESPONSE OF T CELLS IN HUMAN BLOOD TO THE PRESENCE OF SARS-CoV2 ANTIGENS | |
| Garner-Spitzer et al. | Correlation between humoral and cellular immune responses and the expression of the hepatitis A receptor HAVcr-1 on T cells after hepatitis A re-vaccination in high and low-responder vaccinees | |
| WO1997039358A1 (en) | In vitro prognostic test for progressors and non-progressors after hiv infection | |
| EP2813849A1 (en) | EBV-specific immune signature as diagnostic markers in Chronic Fatigue Syndrome (CFS) | |
| Hitch et al. | Investigation of the influence of maternal infection with Wuchereria bancrofti on the humoral and cellular responses of neonates to filarial antigens | |
| Kirosingh et al. | Malaria-specific Type 1 regulatory T cells are more abundant in first pregnancies and associated with placental malaria | |
| Devalraju et al. | Defective MyD88 and IRAK4 but not TLR-2 expression in HIV+ individuals with latent tuberculosis infection | |
| Borena et al. | Follow-up study in the ski-resort Ischgl: antibody and T cell responses to SARS-CoV-2 persisted for up to 8 months after infection and transmission of virus was low even during the second infection wave in Austria | |
| Humlová et al. | Immunological profiles of patients with chronic myeloid leukaemia I. State before the start of treatment | |
| Pereira et al. | Gene expression in IFN-gamma-activated murine macrophages |