RU2781143C2 - Вакцина против инфекционного бронхита - Google Patents
Вакцина против инфекционного бронхита Download PDFInfo
- Publication number
- RU2781143C2 RU2781143C2 RU2018142329A RU2018142329A RU2781143C2 RU 2781143 C2 RU2781143 C2 RU 2781143C2 RU 2018142329 A RU2018142329 A RU 2018142329A RU 2018142329 A RU2018142329 A RU 2018142329A RU 2781143 C2 RU2781143 C2 RU 2781143C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antigen
- vaccine
- oil
- inactivated
- ibd
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccines Drugs 0.000 title claims abstract description 88
- 230000002458 infectious Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 206010006451 Bronchitis Diseases 0.000 title claims description 17
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 87
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 87
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 87
- 229920000272 Oligonucleotide Polymers 0.000 claims abstract description 62
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 45
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 claims abstract description 45
- 241000271566 Aves Species 0.000 claims abstract description 19
- 206010021972 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 208000002551 Irritable Bowel Syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims abstract description 14
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 206010006811 Bursitis Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 41
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 36
- 230000003308 immunostimulating Effects 0.000 claims description 34
- 230000000890 antigenic Effects 0.000 claims description 17
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 claims description 8
- 208000010359 Newcastle Disease Diseases 0.000 claims description 7
- 241000702263 Reovirus sp. Species 0.000 claims description 7
- 241000711450 Infectious bronchitis virus Species 0.000 claims description 6
- 229940059904 Light Mineral Oil Drugs 0.000 claims description 6
- 206010051497 Rhinotracheitis Diseases 0.000 claims description 5
- 241000711955 Turkey rhinotracheitis virus Species 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 238000007792 addition Methods 0.000 abstract description 8
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 50
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 37
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 description 31
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 description 31
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 20
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 17
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 15
- 230000004044 response Effects 0.000 description 15
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 14
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 13
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 12
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 11
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 11
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N (3β)-Cholest-5-en-3-ol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 10
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 10
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 10
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- -1 2-bromovinyl Chemical group 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 9
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 description 8
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 8
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 8
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 7
- 201000009230 common cold Diseases 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 7
- 206010039083 Rhinitis Diseases 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 6
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 6
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 230000000405 serological Effects 0.000 description 6
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 6
- JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 1-hexadecanoyl-2-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 0.000 description 5
- 229940107161 Cholesterol Drugs 0.000 description 5
- 229940067606 Lecithin Drugs 0.000 description 5
- 229940067631 Phospholipids Drugs 0.000 description 5
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 5
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 5
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 5
- 230000000670 limiting Effects 0.000 description 5
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 5
- 201000010874 syndrome Diseases 0.000 description 5
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 4
- 241000702626 Infectious bursal disease virus Species 0.000 description 4
- 229960000380 Propiolactone Drugs 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 4
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 4
- 230000001681 protective Effects 0.000 description 4
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 4
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N β-Propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940072417 Peroxidase Drugs 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- 108090000437 Peroxidases Proteins 0.000 description 3
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 3
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 3
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 3
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 3
- 230000002519 immonomodulatory Effects 0.000 description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 3
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N (2R,3R,4R,5S)-hexane-1,2,3,4,5,6-hexol;(Z)-octadec-9-enoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N 0.000 description 2
- 241000606767 Avibacterium paragallinarum Species 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 206010060945 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 229920001972 Concatemer Polymers 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Polymers OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 210000003128 Head Anatomy 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N L-glucitol Polymers OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 2
- JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N Sorbitan Chemical compound OCC(O)C1OCC(O)[C@@H]1O JNYAEWCLZODPBN-CTQIIAAMSA-N 0.000 description 2
- 229960005078 Sorbitan sesquioleate Drugs 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N Stearic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- FPKOPBFLPLFWAD-UHFFFAOYSA-N Trinitrotoluene Chemical compound CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C([N+]([O-])=O)=C1[N+]([O-])=O FPKOPBFLPLFWAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036462 Unbound Effects 0.000 description 2
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated Effects 0.000 description 2
- 230000001488 breeding Effects 0.000 description 2
- 230000005591 charge neutralization Effects 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000002522 swelling Effects 0.000 description 2
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 2
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000001131 transforming Effects 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N β-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- ZAKBPRIDLSBYQQ-VHSXEESVSA-N 1,2-diacyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-sn-glycerol) Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](OC(C)=O)COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO ZAKBPRIDLSBYQQ-VHSXEESVSA-N 0.000 description 1
- QZZPTFPEQQIIID-ZGFSTQBOSA-N 1-[(2R,4S,5R)-4-hydroxy-5-(1-hydroxypropyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](C(O)CC)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 QZZPTFPEQQIIID-ZGFSTQBOSA-N 0.000 description 1
- NFAOATPOYUWEHM-UHFFFAOYSA-N 2-(6-methylheptyl)phenol Polymers CC(C)CCCCCC1=CC=CC=C1O NFAOATPOYUWEHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ISXSJGHXHUZXNF-UHFFFAOYSA-N 2-[[10,13-dimethyl-17-(6-methylheptan-2-yl)-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxycarbonylamino]ethyl-dimethylazanium;chloride Chemical compound Cl.C1C=C2CC(OC(=O)NCCN(C)C)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 ISXSJGHXHUZXNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZVZFHCZCIBYFMZ-UHFFFAOYSA-N 6-methylheptoxybenzene Chemical class CC(C)CCCCCOC1=CC=CC=C1 ZVZFHCZCIBYFMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XPAZGLFMMUODDK-UHFFFAOYSA-N 6-nitro-1H-benzimidazole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C2N=CNC2=C1 XPAZGLFMMUODDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710027066 ALB Proteins 0.000 description 1
- 102100001249 ALB Human genes 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000006673 Asthma Diseases 0.000 description 1
- 206010064097 Avian influenza Diseases 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 102100019404 CDSN Human genes 0.000 description 1
- 101700062689 CDSN Proteins 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N D-Mannitol Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N Diphenyl ether Chemical class C=1C=CC=CC=1OC1=CC=CC=C1 USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 229960002061 Ergocalciferol Drugs 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-APGDWVJJSA-N Ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-APGDWVJJSA-N 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-LNHMRCHQSA-N Ergosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3C([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@@H](/C=C/[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)=CC=2)CC1 DNVPQKQSNYMLRS-LNHMRCHQSA-N 0.000 description 1
- 206010015915 Eye discharge Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 Gastrointestinal Tract Anatomy 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 101710005864 HI_0216 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000002979 Influenza in Birds Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KMPDEGCQSA-N Inosine Natural products O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KMPDEGCQSA-N 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 1
- 210000004698 Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- UOXRPRZMAROFPH-IESLQMLBSA-N Lysophosphatidylinositol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(=O)OC1[C@H](O)[C@@H](O)C(O)[C@@H](O)[C@H]1O UOXRPRZMAROFPH-IESLQMLBSA-N 0.000 description 1
- 101710005865 MPN_201 Proteins 0.000 description 1
- 101710005862 MPN_285 Proteins 0.000 description 1
- 101710005861 MPN_289 Proteins 0.000 description 1
- 101710005860 MPN_290 Proteins 0.000 description 1
- 101710029070 MPN_343 Proteins 0.000 description 1
- 101710005841 MPN_365 Proteins 0.000 description 1
- 101710005863 MPN_615 Proteins 0.000 description 1
- 101710005859 MPN_638 Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000204022 Mycoplasma gallisepticum Species 0.000 description 1
- 108010061543 Neutralizing Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 210000004940 Nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000702244 Orthoreovirus Species 0.000 description 1
- 210000003101 Oviducts Anatomy 0.000 description 1
- 241000606856 Pasteurella multocida Species 0.000 description 1
- 229940051027 Pasteurella multocida Drugs 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- UNJJBGNPUUVVFQ-ZJUUUORDSA-N Phosphatidylserine Chemical compound CCCC(=O)O[C@H](COC(=O)CC)COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O UNJJBGNPUUVVFQ-ZJUUUORDSA-N 0.000 description 1
- 241000711902 Pneumovirus Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000789 Polyinosinic:polycytidylic acid Polymers 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 229920001914 Ribonucleotide Polymers 0.000 description 1
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 1
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 1
- 241000607132 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Gallinarum Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 206010041232 Sneezing Diseases 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N Squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940032091 Stigmasterol Drugs 0.000 description 1
- HCXVJBMSMIARIN-MFBJGPNFSA-N Stigmasterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@@H](/C=C/[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 HCXVJBMSMIARIN-MFBJGPNFSA-N 0.000 description 1
- 229940033663 Thimerosal Drugs 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L Thiomersal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- MDYZKJNTKZIUSK-UHFFFAOYSA-N Tyloxapol Chemical compound O=C.C1CO1.CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(O)C=C1 MDYZKJNTKZIUSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UCVXFZOQSA-N Uridine Natural products O[C@H]1[C@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UCVXFZOQSA-N 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 229940045145 Uridine Drugs 0.000 description 1
- 101700021629 VEMP Proteins 0.000 description 1
- 101700054919 VGE Proteins 0.000 description 1
- 101700055524 VME1 Proteins 0.000 description 1
- 229940099259 Vaseline Drugs 0.000 description 1
- NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N [(2R)-2-[(2R,3R,4S)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] (Z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N 0.000 description 1
- NWGKJDSIEKMTRX-BFWOXRRGSA-N [(2R)-2-[(3R,4S)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] (Z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)C1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-BFWOXRRGSA-N 0.000 description 1
- RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N [(2R)-3-acetyloxy-2-hydroxypropyl] 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229940050528 albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 201000005794 allergic hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940076810 beta Sitosterol Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atoms Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 108091006028 chimera Proteins 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000010961 commercial manufacture process Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000000994 depressed Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000008286 diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion media Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000008344 egg yolk phospholipid Substances 0.000 description 1
- 230000000534 elicitor Effects 0.000 description 1
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 1
- 244000144992 flock Species 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 238000005658 halogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010211 hemagglutination inhibition (HI) assay Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 201000006334 interstitial nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 101710026800 lyc Proteins 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002941 microtiter virus yield reduction assay Methods 0.000 description 1
- 101700045377 mvp1 Proteins 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogens Species 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 101700003508 pgtE Proteins 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 description 1
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008105 phosphatidylcholines Chemical class 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 229940115272 poly I:C Drugs 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 101700083974 prrB Proteins 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory Effects 0.000 description 1
- 239000003340 retarding agent Substances 0.000 description 1
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 description 1
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- XVTUQDWPJJBEHJ-KZCWQMDCSA-N tetrastearoyl cardiolipin Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)CO[P@@](O)(=O)OCC(O)CO[P@](O)(=O)OC[C@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC XVTUQDWPJJBEHJ-KZCWQMDCSA-N 0.000 description 1
- 102000002689 toll-like receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 229920001664 tyloxapol Polymers 0.000 description 1
- 229960004224 tyloxapol Drugs 0.000 description 1
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 description 1
- MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N vitamin D2 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N 0.000 description 1
- 235000001892 vitamin D2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011653 vitamin D2 Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N β-Sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к области фармацевтики и ветеринарии, а именно к вакцине для предупреждения инфекционных заболеваний у птиц, содержащей антигенный компонент и адъювантный компонент, где адъювантный компонент содержит иммуностимулирующий олигонуклеотид CpG и эмульсию вода-в-масле и где антигенный компонент содержит антиген инфекционного бурсита (IBD), присутствующий в количестве 107,5 - 108 TCID50 на дозу, где к тому же адъювантный компонент по сути состоит из иммуностимулирующего олигонуклеотида, масла и одного или нескольких эмульгаторов, где к тому же иммуностимулирующий олигонуклеотид представляет собой Р-класс иммуностимулирующего олигонуклеотида и масло представляет собой неметаболизируемое масло. Технический результат заключается в более раннем возникновении иммунитета, более низкой дозе антигена IBD в вакцине и высвобождении объема вакцины для добавления других антигенов. 6 з.п. ф-лы, 12 табл., 6 пр.
Description
[0001] Ринотрахеит индюков (TRT) представляет собой инфекционное заболевание верхних дыхательных путей индюков и курей, вызванное пневмовирусом. Это высококантегиозное, острое заболевание, которым страдают индюки любого возраста. Клинические симптомы инфекции TRT включают выраженные, часто пенообразные назальные выделения, хрипы, резкие хрипы, чихание, и трясение головой. У инфицированных индюков, также могут наблюдаться глазные выделения или отек подглазничных пазух. Антитела к вирусу TRT (TRTV) были обнаружены в некоторых куриных стадах (как бройлеров и бройлеров/племенной птицы), страдающих синдромом отека головы (SHS). Предполагается, что TRTV играет роль в этиологии SHS и связанного с ним респираторного дистресс-синдрома. [0002] Инфекционный бронхит (IB) представляет собой коронавирус, вызывающий заболевание только у курей, хотя некоторые другие птицы могут быть субклинически инфицированы. Некоторые серотипы являются географически ограниченными, но несколько серотипов обычно социркулируют в одном географическом регионе. В последние года новый генотип IBV, штамм QX, стал более распространенным в Азии и Европе. Заболеваемость обычно приближается к 100%. Цыплята могут кашлять, чихать, и иметь хрипы в трахеи на протяжении 10-14 дней. Могут наблюдаться конъюнктивит и одышка, иногда отек лица, особенно при одновременной бактериальной инфекции пазух. Цыплята могут выглядеть подавленными и скапливаться под лампами накаливания. Потребление корма и увеличение массы уменьшаются. Инфекция с нефропатогенными штаммами может вызывать начальные респираторные признаки, и затем приводить к депрессии, раздражительности, диарее, большому потреблению воды и смерти. У несушек, производство яиц может уменьшиться на целых 70%, и яйца часто являются деформированными, с тонкой, мягкой, шероховатой, и/или бледной скорлупой, и могут быть меньше и иметь жидкий белок. В большинстве случаев производство яиц и качество яиц возвращаются к нормальному, но это может занять до 8 недель. В большинстве вспышек, смертность составляет 5%, однако, уровень смертности выше, когда заболевание осложняется одновременной бактериальной инфекцией. Нефропатогенные штаммы могут вызывать интерстициальный нефрит с высокой смертностью (до 60%) у молодых цыплят. Инфекция у молодых цыплят может вызвать необратимое повреждение яйцевода, что в результате приводит к тому, что несушки или племенная птица никогда не достигают нормальных уровней производства.
[0003] Известные вакцинные штаммы IB вирусов оказались недостаточными для защиты от инфекционного бронхита, вызванного IB-QX и IB-QX-подобными вирусами. Смотрите WO 2010017440.
[0004] Инфекционный бурсит (IBD, Гамборо) представляет собой высококантегиозное иммуносупрессивное заболевание курей, которое встречается во всем мире и вызывает значительное экономическое воздействие на производство яиц и мяса. Вакцины IBD являются важной частью стратегии контроля Гамборо. Выбор вакцины, предназначенной для введения, зависит от типа курицы, которую будут вакцинировать, и преобладающей ситуации заражения.
[0005] Как правило, инактивированные антигены используются в вакцинах для птицы. Однако, производство инактивированных вирусов является относительно дорогостоящим и поэтому, желательными были бы эффективные вакцины, содержащие более низкий уровень антигена.
[0006] Другая потребность в вакцинации домашней птицы тесно связана со стоимостью самой вакцинации. Экономически выгодным является создание поливалентной вакцины, назначенной для предупреждения нескольких заболеваний. Такие поливалентные вакцины уменьшают стоимость введения вакцины. Однако, из-за хорошо известного феномена антигенной интерференции, простое смешивание антигенов в таких же дозированных формах часто представляет собой не эффективный подход к созданию поливалентных вакцин.
[0007] Соответственно, существует потребность в вакцинах для птицы с пониженным количеством антигена и/или поливалентных вакцинах.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0008] Представленное изобретение предусматривает в одном аспекте иммуногенную композицию, содержащую антигенный компонент и иммунологически эффективное количество адъювантного компонента, причем антигенный компонент содержит, по меньшей мере, один антиген TRT и, по меньшей мере, один IB антиген, и адъювантный компонент содержит иммуностимулирующий олигонуклеотид, масляную эмульсию, и необязательно, стерин.
[0009] В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один антиген TRT представляет собой TRT штамм K.
[0010] В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, один IB антиген представляет собой, по меньшей мере, один из IB D1466 и IB QX антигена.
[0011] В некоторых вариантах осуществления, иммуногенная композиция по изобретению является нелипосомальной и/или фактически не содержит сапонина.
[0012] В некоторых вариантах осуществления, необязательно присутствующий стерин смешивают с иммуностимулирующим олигонуклеотидом.
[0013] Изобретение также предусматривает вакцину, содержащую антигенный компонент и эффективное количество адъювантного компонента, причем адъювантный компонент содержит иммуностимулирующий олигонуклеотид и масляную эмульсию, и причем антигенный компонент содержит IBD антиген.
[0014] В некоторых вариантах осуществления, указанный IBD антиген представляет собой инактивированный антиген штамма Лукерта, который может присутствовать в количестве 107,5-108 TCID50.
[0015] В некоторых вариантах осуществления, вакцина представляет собой поливалентную вакцину, содержащую, по меньшей мере, один из: антигена, полученного из штамма не Лукерта IBD; антигена инфекционного бронхита; реовирусного антигена; антигена заболевания Ньюкасла; антигена ринотрахеита индеек.
[0016] В другом аспекте, изобретение предусматривает вакцину, содержащую антигенный компонент и эффективное количество адъювантного компонента, причем адъювантный компонент содержит иммуностимулирующий олигонуклеотид и масляную эмульсию, и причем антигенный компонент содержит: антиген TRT; антиген Ньюкасла; антиген синдрома снижения яйценоскости (EDS); IBK антиген; и антиген насморка.
[0017] В некоторых вариантах осуществления, антиген TRT содержит инактивированный вирус ринотрахеита индеек, антиген Ньюкасла содержит инактивированный вирус Ньюкасла, EDS антиген содержит инактивированный EDS вирус, IBK антиген содержит инактивированный IBK вирус, и антиген насморка содержит смесь из бактеринов насморка М, насморка 221 и насморка S.
[0018] В некоторых вариантах осуществления, антиген TRT присутствует в количестве от 106,00TCID50 до 106,50TCID50 на дозу.
[0019] В некоторых вариантах осуществления, указанная масляная эмульсия представляет собой В/М (вода/масло) эмульсию.
ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ
[0020] Определения:
[0021] Термины «около» или «приблизительно» когда используются в связи с измеряемой числовой переменной, относятся к указанному значению переменной и ко всем значениям переменной, которые находятся в пределах экспериментальной погрешности указанного значения (например, в пределах 95% доверительного интервала для среднего значения) или в пределах 10 процентов от указанного значения, в зависимости от того, что является большим, за исключением тех случаев, когда «приблизительно» используется по отношению к временным интервалам в неделях, когда «приблизительно 3 недели» составляет от 17 до 25 дней, и приблизительно от 2 до приблизительно 4 недель составляет от 10 до 40 дней.
[0022] Термин «который фактически состоит из» и подобный, когда применяется к адъювантным препаратам по представленному изобретению, касается композиций, которые не содержат дополнительных адъювантных или иммуномодулирующих агентов в количествах, в которых указанный агент вызывает измеряемые адъювантные или иммуномодулирующие эффекты.
[0023] Термины «фактически не содержит сапонина», «по существу не содержит сапонина» и подобные касаются композиции, которая не содержит сапонин в количествах, в которых сапонин вызывает измеряемые адъювантные или иммуномодулирующие эффекты. В некоторых вариантах осуществления, композиции, которые фактически не содержат сапонин, содержат сапонин в количестве, недостаточном для того, чтобы вызывать системный иммунный ответ, такой как лихорадка. В некоторых вариантах осуществления, композиции, которые фактически не содержат сапонин, не содержат никакого сапонина или содержат сапонин в пределах или ниже предела детектирования.
[0024] Термин «иммуностимулирующая молекула» касается молекулы, которая генерирует иммунный ответ.
[0025] Термин «парентеральное введение» означает введение вещества, такого как вакцина, в организм субъекта через или путем, который не включает пищеварительный тракт. Парентеральное введение включает подкожное, внутримышечное, транскутанное, внутрикожное, внутрибрюшное, внутриглазной и внутривенное введение.
[0026] Процент чистоты или «X процентная чистота», как используется относительно иммуностимулирующего олигонуклеотидного препарата, касается популяции олигонуклеотидных молекул, которые содержат Х% названного олигонуклеотида (например, SEQ ID NO: 1, SEQ ID: NO: 5, SEQ ID NO: 8, и тому подобное), и остаток (то есть, 100% минус Х%) содержит более короткие фрагменты названного олигонуклеотида, присутствуют в качестве примеси в процессе производства названной последовательности. Таким образом, если последовательность производится путем 3'-5' секвенирования, 5'-отсечения будут включать остаток. В качестве неограничивающего примера, препарат из 100 мкг 80% чистой SEQ ID NO: 8 содержит 80 мкг SEQ ID NO: 8 и оставшаяся часть 20 мкг представляет собой более короткие фрагменты SEQ ID NO: 8, присутствующие в препарате.
[0027] Термины «терапевтически эффективное количество», «иммунологически эффективное количество» и «эффективное количество» касаются количества антигена, или адъюванта, или вакцины, которые будут индуцировать иммунный ответ у субъекта, который получает антиген, или адъювант, или вакцину, которая является достаточной для предотвращения или уменьшения признаков или симптомов заболевания, включая неблагоприятные последствия для здоровья или их осложнения, вызванные инфицированием возбудителя, таким как вирус или бактерия. Индуцированными могут быть гуморальный иммунитет или клеточно-опосредованный иммунитет, или как гуморальный, так и клеточно-опосредованный иммунитет.Иммуногенность и эффективность вакцины у животного может быть оценена, например, опосредованно путем измерения титров антител, используя анализы пролиферации лимфоцитов, или непосредственно через наблюдения за признаками и симптомами после заражения штаммом немутантного типа. Защитный иммунитет, который предоставляется вакциной, может быть оценен за счет измерения, например, уменьшение таких клинических признаков, как смертность, заболеваемость, температурный показатель, общее физическое состояние и общее состояние здоровья и работоспособность субъекта. Количество вакцины, которое является терапевтически эффективным, может варьировать в зависимости от конкретного адъюванта, который используется, конкретного антигена, который используется, или состояния субъекта, и может быть определено квалифицированным специалистом в данной области техники.
[0028] В течение своей жизни коммерческих курей-несушек и племенную птицу вакцинируют широким разнообразием различных вакцин. Данные вакцины в основном представляют собой ослабленные живые вакцины. До того времени, когда куры готовы начать откладывать яйца, их вакцинируют инактивированными комбинированными вакцинами, чтобы стимулировать иммунитет против инфекционных агентов, против которых они уже получили вакцину, и чтобы индуцировать иммунитет против других агентов, которые могут вызвать снижение при продуцировании яиц или другие повреждения в период откладывания яиц. Важным является то, что данные вакцины являются способными индуцировать высокие титры антител, и что продолжительность иммунитета является долгой, поскольку вакцины должны защищать в течение всего периода откладывания яиц, который продолжается с возраста от приблизительно 20 недель до 70 недель. Для того, чтобы достичь длительную продолжительность иммунитета необходимо сформулировать антигены в адъювант, например, эмульсия вода-в-масле (В/М).
[0029] Таким образом, как правило, изобретение предусматривает иммуногенную композицию, которая содержит антигенный компонент и адъювантный компонент, причем антигенный компонент содержит, по меньшей мере, один антиген TRT и, по меньшей мере, один IB антиген, и адъювантный компонент содержит (или, в некоторых вариантах осуществления, состоит фактически из, или в других вариантах осуществления, состоит из) иммуностимулирующего олигонуклеотида, масляной эмульсии, и необязательно, стерина.
Антигенный компонент
[0030] Различные IB QX антигены являются приемлемыми для представленного изобретения. В определенных вариантах осуществления IB QX антиген представляет собой цельный инактивированный вирус. В других вариантах осуществления, вирус представляет собой модифицированный живой вирус. В еще других вариантах осуществления, могут использоваться субъединичные вакцины. Например, приемлемыми могут быть протеины, присутствующие на поверхности вируса, включая, без ограничений, S протеин, М протеин Е-протеин, или какие-либо их комбинации. В вариантах осуществления, которые предусматривают использование инактивированного цельного вируса, антиген может использоваться в количествах от 103 до 1010 инфекционных единиц на дозу, например, 104, 105, 106, 107 инфекционных единиц на дозу. В определенных вариантах осуществления, количество инактивированного вируса IB QX на дозу составляет от приблизительно 105 до приблизительно 108 инфекционных единиц на дозу.
[0031] В дальнейших вариантах осуществления антигенный компонент содержит IBD антиген, который, в определенных вариантах осуществления, представляет собой инактивированный вирус IBD Лукерта.
[0032] В определенных вариантах осуществления, количество инактивированного вируса IBD Лукерта составляет от 107 и 108 TCID50 на дозу, например, 107,1, 107,2, 107,3, 107,4, 107,5, 107,6, 107,7, 107,8, 107,9TCID50 на дозу.
[0033] В определенных вариантах осуществления, в дополнение к инактивированному вирусу IBD Лукерта, антигенный компонент вакцины содержит другие антигены. Например, использоваться могут различные штаммы вируса инфекционного бронхита, например, IB М41, и/или IB D1466, и/или IB D274. Альтернативно или дополнительно, вакцина по представленному изобретению также может содержать антигены TRT, заболевание Ньюкасла (например, штамм LaSota), EDS (синдром снижения яйценоскости), реовирусов, и вируса инфекционного бурсита птицы, птичьего гриппа.
[0034] В других аспектах, изобретение предусматривает поливалентную вакцину, которая содержит антиген TRT; антиген Ньюкасла; антиген синдрома снижения яйценоскости (EDS); антиген IBK (вирусов инфекционного бронхита); и антиген насморка.
[0035] В определенных вариантах осуществления изобретения, антиген TRT присутствует в количестве от 106,0 TCID50 до 106,50 TCID50 на дозу, например, 106,00 TCID50, или 106,10TCID50, или 106,20TCID50, или 106,30 TCID50, или 106,40 TCID50, или 106,50 TCID50.
[0036] Вирусы, которые используются в вакцинах по данному изобретению, могут быть ослабленными или инактивированными. Способы инактивации и ослабления вируса являются хорошо известными в данной области. Например, вирус может быть инактивирован путем пассирования культуры. Способы, когда инактивация включает, без ограничений, влияние вируса на эффективное количество инактивации химическим веществом, выбранным из формалина, бета-пропиолактона (BPL), бинарного этиленимина (BEI) или фенола.
[0037] Насморк вызывается различными штаммами Haemophilus paragallinarum. Таким образом, в определенных вариантах осуществления, антиген насморка содержит один или несколько штаммов Haemophilus paragallinarum, например, штамм М, штамм Z, штамм 221, и подобные. В других вариантах осуществления, используется смесь штаммов, которые представляют собой серовары А, В, и С. Таким образом, штамм 221 (Насморк 221) может использоваться в качестве штамма серовара А, штамм Spross (насморк S) может использоваться в качестве штамма серовара В, и штамм Modesto (насморк М) может использоваться в качестве штамма серовара С.
[0038] Квалифицированный специалист в данной области может понять, что титр вируса может варьировать в зависимости от методологии титрования вируса, иногда вплоть до приблизительно 30%. В данном раскрытии, где дозы измеряются в качестве показателя степени 10, показатель степени может изменяться на 0,2. Таким образом, например, титр 106,40 TCID50 может охватывать значения от 106,20 TCID50 до 106,60 TCID50. Такая же концепция применяется к диапазонам титров. Например, титр 106,00 TCID50-106,50TCTD50 охватывает диапазон от 105,80 TCID50 до 106,70TCTD50.
[0039] В других вариантах осуществления, иные антигены могут использоваться в дополнении к антигенам указанным выше, например, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Mycoplasma gallisepticum, Salmonella gallinarum, Pasteurella multocida. Подобно инактивации вируса, бактерии также могут быть инактивированы, например, путем влияния эффективного количества инактивирующего химического вещества, выбранного из формалина, бета-пропиолактона (BPL), бинарного этиленимина (BEI) или фенола.
Адъювантный компонент
[0040] Как правило, адъювантный компонент, который используется в иммуногенной композиции по изобретению, содержит иммуностимулирующий олигонуклеотид, масло, и необязательно, поверхностно-активное(ые) вещество(а). В определенных вариантах осуществления, адъювантный компонент не содержит или фактически не содержит сапонины и/или ISCOM.
[0041] В определенных вариантах осуществления, адъювантный компонент фактически состоящий из иммуностимулирующего олигонуклеотида, масла, и необязательно, поверхностно-активного(ых) вещества(в). В определенных вариантах осуществления, адъювантный компонент состоит из иммуностимулирующего олигонуклеотида, масла, и необязательно, поверхностно-активного(ых) вещества(в).
[0042] Приемлемые иммуностимулирующие олигонуклеотиды включают ODN (на основе ДНК), ORN (на основе РНК) олигонуклеотиды, или химерные ODN-ORN структуры, которые могут иметь модифицированный скелет включая, без ограничений, модификации фосфоротиоата, галогенирование, алкилирование (например, этил- или метил- модификации), и фосфодисложноэфирные модификации. В некоторых вариантах осуществления, могут использоваться поли инозиновая - цитидиловая кислота или их производная (поли I:C).
[0043] CpG олигонуклеотиды характеризуются присутствием неметилированного CG динуклеотида в конкретных контекстах основание-последовательность (CpG мотив). (Hansel ТТ, Barnes PJ (eds): New Drugs for Asthma, Allergy и COPD. Prog Respir Res. Basel, Karger, 2001, vol 31, pp 229-232, которая включена в данный документ в виде ссылки). Данные CpG мотивы не наблюдаются в эукариотической ДНК, в которой подавляются CG динуклеотиды и, если присутствуют, как правило, метилированы, но присутствуют в бактериальной ДНК, в которой они предоставляют иммуностимулирующие свойства.
[0044] В выбранных вариантах осуществления, адъюванты по представленному изобретению используют так называемый иммуностимулирующий олигонуклеотид Р-класса, более предпочтительно модифицированные иммуностимулирующие олигонуклеотиды Р- класса, еще более предпочтительно, Е-модифицированные олигонуклеотиды Р-класса. Иммуностимулирующие олигонуклеотиды Р-класса представляют собой CpG олигонуклеотиды, которые характеризуются присутствием палиндромов, как правило, 6-20 нуклеотидов длиной. Олигонуклеотиды Р-класса имеют способность спонтанно самособираться в конкатемеры или in vitro и/или in vivo. Данные олигонуклеотиды являются, в буквальном смысле, одноцепочечными, но присутствие палиндромов позволяет создавать конкатемеры или, возможно, стволовые-и-петлевые структуры. Общая длина Р-класс иммуностимулирующих олигонуклеотидов составляет от 19 и 100 нуклеотидов, например, 19-30 нуклеотидов, 30-40 нуклеотидов, 40-50 нуклеотидов, 50-60 нуклеотидов, 60-70 нуклеотидов, 70-80 нуклеотидов, 80-90 нуклеотидов, 90-100 нуклеотидов.
[0045] В одном аспекте изобретения иммуностимулирующий олигонуклеотид содержит 5' TLR активационный домен и, по меньшей мере, два пиландромных участка, причем один пиландромный участок представляет собой 5' пиландромный участок из, по меньшей мере, 6 нуклеотидов длиной и соединенный с 3' пиландромным участком из, по меньшей мере, 8 нуклеотидов длиной или непосредственно, или через спейсер.
[0046] Иммуностимулирующие олигонуклеотиды Р-класса могут быть модифицированы согласно методикам, известным в данной области. Например, J-модификация касается йод-модифицированных нуклеотидов. Е-модификация касается этил-модифицированного(ых) нуклеотида(ов). Таким образом, Е-модифицированные иммуностимулирующие олигонуклеотиды Р-класса представляют собой иммуностимулирующие олигонуклеотиды Р-класса, в которых, по меньшей мере, один нуклеотид (преимущественно 5' нуклеотид) является этилированным. Дополнительные модификации включают присоединение 6-нитробензимидазола, О-метилирование, модификацию с проинил-dU, инозиновую модификацию, присоединение 2-бромвинила (преимущественно к уридину). [0047] Иммуностимулирующие олигонуклеотиды Р-класса также могут содержать модифицированную интернуклеотидную связь включая, без ограничений, фосфодисложноэфирные связи фосфоротиоатные связи. Олигонуклеотиды по представленному изобретению могут быть синтезированы или получены из коммерческих источников.
[0048] Олигонуклеотиды Р-класса и модифицированные олигонуклеотиды Р-класса являются, кроме того, раскрытыми в опубликованной РСТ заявке № WO 2008/068638, опубликованной 12 июня 2008 года. Приемлемые не ограничивающие примеры модифицированных иммуностимулирующих олигонуклеотидов Р-класса представлены ниже (в SEQ ID NO 1-10, "*" касается фосфоротиоатной связи и "-" касается фосфодисложноэфирной связи). В SEQ ID NO 11-14, все связи представляют собой фосфодисложноэфирные связи.
[0049] Иммуностимулирующие олигонуклеотиды по представленному изобретению могут быть химически синтезированными. Кроме того, иммуностимулирующие олигонуклеотиды могут использоваться с чистотой приблизительно 60% (однородности) или более (например, приблизительно 65%, приблизительно 70%, приблизительно 75%, приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95%, приблизительно 98%, или 100% чистоты).
[0050] Количество иммуностимулирующего олигонуклеотида Р-класса для применения в адъювантных композициях зависит от природы иммуностимулирующего олигонуклеотида Р-класса, который используется, и назначенного вида.
[0051] Стерины имеют общее химическое ядро, которое представляет собой стероидную(ые) кольцевую(ые) структуру(ы), которые имеют гидроксильную (ОН) группу, как правило, присоединенную к углероду-3. Углеводородная цепь жирнокислотного заместителя изменяется длиной, как правило, от 16 до 20 атомов углерода, и может быть насыщенным или ненасыщенным. Стерины обычно содержат одну или несколько двойных связей в кольцевой структуре и также различные заместители, присоединенные к кольцам. Стерины и их жирнокислотные сложные эфиры являются фактически не растворимыми в воде. С учетом данных химических сходств, таким образом, вероятность того, что стерины, имеющие данное химическое ядро будут иметь аналогичные свойства, когда используются в вакцинных композициях по представленному изобретению. Стерины являются хорошо известными в данной области и могут быть приобретены коммерчески. Например, холестерин является раскрытым в Merck Index, 12th Ed., p.369. Приемлемые стерины включают, без ограничений, β-ситостерин, стигмастерин, эргостерин, эргокальциферол, холестерин, и их производные, такие как, например DC-Холестерин (3β-[N-(диметиламиноэтан)карбамоил]холестерин).
[0052] Многие масла и их комбинации являются приемлемыми для применения по представленному изобретению. Данные масла включают, без ограничений, животные масла, растительные масла, а также неметаболизируемые масла. Не ограничивающие примеры растительных масел, приемлемых в представленном изобретении, включают кукурузное масло, арахисовое масло, соевое масло, кокосовое масло, оливковое масло, и фитосквалан. Не ограничивающим примером животных масел является сквалан. Приемлемые не ограничивающие примеры неметаболизируемых масел включают легкое минеральное масло, насыщенные масла с линейной или разветвленной цепью, разветвленные масла, и подобные.
[0053] В наборе вариантов осуществления, масло, используемое в адъювантных препаратах по представленному изобретению, представляет собой легкое минеральное масло. Как используется в данном документе, термин «минеральное масло» касается смеси жидких углеводородов, полученных из жидкого парафина методом дистилляции. Данный термин является синонимом «разжиженного парафина», «разжиженного жидкого вазелина» и «белого минерального масла». Термины также предназначены включать «легкое минеральное масло», то есть, масло аналогично получают путем дистилляции жидкого парафина, но которое имеет несколько меньшую удельную массу, чем белое минеральное масло. Смотрите, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1990, at pages 788 и 1323). Минеральное масло может быть получено из различных коммерческих источников, например, J. Т. Baker (Phillipsburg, Pa.), USB Corporation (Cleveland, Ohio). Предпочтительное минеральное масло представляет собой легкое минеральное масло коммерчески доступное под названием DRAKEOL®. В другом варианте осуществления, приемлемое масло содержит минеральное масло MARCOL™ 52. MARCOL™ 52 представляет собой очищенную смесь жидких насыщенных углеводородов. Это является кристально чистым, водно-белым продуктом, который не содержит никаких токсичных примесей. Его получают из нефти путем вакуумной дистилляции с последующими стадиями очистки, включая окончательную очистку путем каталитической гидрогенизации.
[0054] Эмульгаторы, приемлемые для применения в представленных эмульсиях включают естественные биологически совместимые эмульгаторы и неестественные синтетические поверхностно-активные вещества. Биологически совместимые эмульгаторы включают фосфолипидные соединения или смесь фосфолипидов. Предпочтительные фосфолипиды представляют собой фосфатидилхолины (лецитин), такие как соевый или яичный лецитин. Лецитин может быть получен в виде смеси из фосфатидов и триглицеридов путем промывания водой сырых растительных масел, и разделения и высушивания полученных в результате гидратированных смол. Очищенный продукт может быть получен путем фракционирования смеси из нерастворимых в ацетоне фосфолипидов и гликолипидов, которые остаются после удаления триглицеридов и растительного масла путем промывания ацетоном. Альтернативно, лецитин может быть получен из различных коммерческих источников. Другие приемлемые фосфолипиды включают фосфатидилглицерин, фосфатидилинозитол, фосфатидилсерин, фосфатидную кислоту, кардиолипин, фосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилсерин, лизофосфатидилинозитол, и лизофосфатидилэтаноламин. Фосфолипиды могут быть выделены из естественных источников или традиционно синтезированы.
[0055] В дополнительных вариантах осуществления, эмульгаторы, которые используются в данном документе, не включают лецитин, или применяют лецитин в количестве, которое не является иммунологически эффективным.
[0056] Неестественные, синтетические эмульгаторы, приемлемые для применения в адъювантных препаратах по представленному изобретению включают неионные поверхностно-активные вещества на основе сорбитана, например, поверхностно-активные вещества на основе сорбитана, замещенного жирными кислотами (коммерчески доступные под названием SPAN® или ARLACEL®), сложные эфиры жирной кислоты полиэтоксилированного сорбита (TWEEN®), сложные эфиры полиэтиленгликоля жирных кислот из источников, таких как рициновое масло (EMULFOR®); полиэтоксилированная жирная кислота (например, стеариновая кислота, доступная под названием SIMULSOL® М-53), полиэтоксилированный изооктилфенол/формальдегидный полимер (TYLOXAPOL®), простые эфиры полиоксиэтиленового жирного спирта (BRIJ®); полиоксиэтиленовые нефениловые простые эфиры (TRITON® N), полиоксиэтиленовые изооктилфениловые простые эфиры (TRITON® X). Предпочтительные синтетические поверхностно-активные вещества представляют собой поверхностно-активные вещества, доступные под названием SPAN® и 'TWEEN®, такие как TWEEN®-80 (полиоксиэтиленовый (20) сорбитана моноолеат) и ARLACEL™ 83V (сорбитана сесквиолеат)).
[0057] В общем говоря, эмульгатор(ы) может/могут присутствовать в вакцинной композиции в количестве от 0,01% до 40% по объему, предпочтительно, от 0,1% до 15%, более предпочтительно от 2% до 10%.
[0058] В подгруппе вариантов осуществления, объемный процент масла и растворимого в масле эмульгатора вместе составляет, по меньшей мере, 50%, например, от 50% до 95% по объему; предпочтительно, количества большего, чем от 50% до 85%; более предпочтительно, количества от 50% до 60%, и более предпочтительно в количестве от 55 до 65% об./об. вакцинной композиции. Таким образом, например, и без ограничений, масло может присутствовать в количестве 45% и растворимый в липиде эмульгатор будет присутствовать в количестве большем, чем 5% об./об. Таким образом, объемный процент масла и растворимого в масле эмульгатора вместе будет составлять, по меньшей мере, 50%.
[0059] В еще другой подгруппе, приемлемой для всех вакцин по изобретению, объемный процент масла составляет более 40%, например, от 40% до 90% по объему; от 40% до 85%; от 43% до 60%, от 44 до 50% об./об. вакцинной композиции. В определенных вариантах осуществления, эмульсии содержат, по меньшей мере 60% об./об. масляной фазы и 40% об./об. водной фазы.
[0060] Иногда, невозможным или неосуществленным является концентрировать антиген, особенно в масштабируемом коммерческом применении, и приходится использовать растворы с низкими концентрациями антигена. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления, вакцинные композиции по представленному изобретению содержат адъювантные препараты, как описано выше, где содержание масляной фазы в данных адъювантных препаратах является разбавленным, и где вакцинная композиция представляет собой эмульсию вода-в-масле.
[0061] На практике, возможным является создать эмульсию вода-в-масле, причем масляная фаза составляет менее, чем 50% об./об.
[0062] Коротко, во-первых, адъювантный препарат по представленному изобретению получают, как описано выше. В указанном адъювантном препарате, масляная фаза содержит более 50% об./об. адъювантного препарата. Количество других ингредиентов, чем масло и эмульгатор(ы) масштабируется соответственно, на основе конечной целевой концентрации и желаемого разбавления. Например, если одной целью является получение вакцинной композиции, в которой адъювантный препарат составляет 80% об./об., количество других ингредиентов, чем масло, масштабируется по коэффициенту 1,25 (1/0,8). Количество эмульгаторов, если какие-либо (например, TWEEN®80 и/или SPAN®80) необязательно нужно масштабировать, но преимущественно, объемное соотношение между маслом и эмульгатором(ами) сохраняется таким же образом в адъювантном препарате и в конечной вакцинной композиции.
[0063] Затем раствор антигена добавляют в адъювантный препарат.
[0064] Целостность эмульсии вода-в-масле может сохраняться при условии, что диспергированные сферические капли воды не присутствуют в более концентрированном виде, чем максимальная фракция для случайной упаковки монодисперсных капель, то есть: 0,64. Смотрите Tadros, Emulsion Formation, Stability and Rheology, 1st ed. 2013, Wiley-VCH GmbH & Co KGaA. Главным является то, что общая фракция объема, занята водными каплями, не превышает 0,64, то есть: 64% об./об. И наоборот, это означает, что масляная фаза не должна падать ниже 36% об./об.
[0065] В некоторых вариантах осуществления приемлемым является то, что одна доза адъюванта будет содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мкг (например, 1-20 мкг, или 5-15 мкг, или 8-12 мкг или 10 мкг) иммуностимулирующего олигонуклеотида, вплоть до приблизительно 50 мкг (например, 0,5-20 мкг, или 1-10 мкг) стерина, такого как холестерин.
[0066] В определенных вариантах осуществления, адъювантный компонент получают следующим образом:
а) Сорбитана сесквиолеат и холестерин, если такие есть, растворяют в легком минеральном масле. Полученный в результате масляный раствор стерильно фильтруется;
b) Иммуностимулирующий олигонуклеотид и полиоксиэтиленовый (20) сорбитана моноолеат растворяют в водной фазе, таким образом, получая водный раствор;
c) Водный раствор добавляют в масляный раствор во время непрерывной гомогенизации.
[0067] Иммуногенная композиция по представленному изобретению может быть получена путем добавления антигенного компонента в водную фазу с последующим сочетанием водной фазы с масляной фазой. В других вариантах осуществления, антигенный компонент может добавляться в адъювантный компонент после того, как получают адъювантный компонент.
[0068] Иммуногенная композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемый носитель. Как используется в данном документе, «фармацевтически приемлемый носитель» включает какие-либо и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, адъюванты, стабилизирующие агенты, разбавители, консерванты, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические агенты, агенты, которые замедляют адсорбцию, и подобные. Носитель(и) должны быть «приемлемые» в смысле совместимости с другими компонентами композиций и не являться вредными для субъекта. Как правило, носители будут стерильными и не будут содержать пирогенов, и выбираются в зависимости от способа введения, который будет использоваться. Квалифицированным специалистам в данной области хорошо известно, что предпочтительные композиции для фармацевтически приемлемого носителя, который содержится в композиции, представляют собой такие фармацевтические носители утвержденные в соответствии с нормативными актами, обнародованными Министерством сельского хозяйства Соединенных Штатов (США) (United States (US) Department of Agriculture) или Администрацией США по пищевым продуктам и медикаментам (US Food и Drug Administration), или аналогичным государственным агентством в государстве не США. Поэтому, фармацевтически приемлемый носитель для коммерческого производства композиций представляет собой носитель, который уже является утвержденным или будет утвержден соответствующим государственным агентством США или иностранного государства.
[0069] Другие компоненты композиций могут включать фармацевтически приемлемые эксципиенты, такие как носители, растворители, и разбавители, изотонические агенты, буферные агенты, стабилизаторы, консерванты, Типичные носители, растворители и разбавители включают воду, физиологический раствор, декстрозу, этанол, глицерин, масло и подобные. Иллюстративные изотонические агенты включают хлорид натрия, декстрозу, манит, сорбит, лактозу и подобные. Используемые стабилизаторы включают желатин, альбумин и подобные.
Введение вакцины
[0070] Как правило, вакцины по представленному изобретению могут быть введены несколькими путями. Такие пути являются известными квалифицированным специалистам в данной области и включают, без ограничений, внутримышечные и подкожные инъекции.
[0071] В определенных вариантах осуществления, вакцины вводят приблизительно за 3-7 недель (например, приблизительно за 4-6 недель) перед ожидаемой яйцекладкой. Данный режим гарантирует, что иммунитет к IB QX развивается до момента яйцекладки и сохраняется в течение всего периода яйцекладки вакцинированных кур.
[0072] В дополнительных вариантах осуществления, вакцина по представленному изобретению вводится как бустерная вакцина курам, которые получили первичную вакцинацию. Несколько IB первичных вакцин являются известными в данной области. Например, POULVAC® IB первичная вакцина содержит высушенный при замораживании, массачусетского типа, живой вирус инфекционного бронхита. Nobilis® IB Н120 представляет собой живую высушенную при замораживании вакцину, предназначенную для применения, в качестве первичной вакцинации птицы от инфекционного бронхита. Данная вакцина содержит штамм Н120 типа Массачусетс. Другие IB первичные вакцины также могут использоваться с вакциной по представленному изобретению.
[0073] Далее изобретение будет описано в следующих не ограничивающих примерах.
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Получение вакцины
[0074] Иллюстративная эмульсия вода-в-масле представлена в таблице 1. Антигены разбавляют в водной фазе, в которую также добавляют CpG. Водная фаза содержит антигены, CpG и тимеросал. Она смешивается с масляной фазой. После тщательного перемешивания, образуется стабильная эмульсия В/М.
Пример 2. Анализы эффективности для IB или TRT
[0075] Авторы изобретения изготовили эмульсии В/М, которые содержат инактивированный IB М41 антиген (107,2 EID50 перед инактивацией на дозу) или инактивированный антиген TRT (105,3 TCID50 перед инактивацией на дозу). Данные эмульсии содержали разные количества CpG или не CpG (SEQ ID NO: 8, 65% чистота). Эмульсии исследовали в анализе на эффективность у курей. Куры были вакцинированы в возрасте 4 недель. Через 5 недель после вакцинации образцы крови собирали и исследовали относительно титров антител против антигенов, используя ELISA.
[0076] Титры антител против вируса ринотрахеита индеек (TRT) определяли, используя фермент-связанный иммуносорбентный анализ (ELISA), в котором антиген наносили на лунки 96 луночных микро ELISA планшетов. После нанесения в лунки добавляли стандартную отрицательную и стандартную положительную сыворотки и сыворотки, которые необходимо исследовать. Все сыворотки исследовали в двух повторах. В качестве контроля все сыворотки исследовали также в двух повторах в лунках без антигена. Несвязанные антитела были удалены, и реактивность антител к антигену была визуализирована путем добавления антител против сывороточных антител, к которым конъюгировалась пероксидаза. После удаления несвязанных конъюгированных антител, добавляли субстрат пероксидазы ортофенилендиамино + Н2О2. Присутствие пероксидазы было продемонстрировано развитием цветной реакции.
[0077] Результаты исследования эффективности антигена TRT представлены в таблице 2. В целом титры антител были удовлетворительными, и в одной из групп не было таких, которые не проявили ответ. Существовал положительный эффект CpG на титры антител. Наилучшие результаты были получены из 10 мкг CpG на дозу, но также 1 мкг CpG на дозу имел положительный эффект.
[0078] Кроме того, положительный эффект CpG был определен относительно антительного ответа против IB М41, смотрите таблицу 3. Доза 1 мкг CpG на дозу уже была достаточной, чтобы существенно стимулировать антительный ответ. Без CpG, 7 из 15 курей имели антительный ответ ниже порогового значения 2,60, тогда как все куры продемонстрировали ответ, когда исследовали 1 мкг CpG на дозу. Дальнейшее увеличение было получено из 10 мкг CpG на дозу.
*Титры выше, чем 396 (Log10Титр=2,60) рассматриваются положительными по набору. Пример 3. Анализы эффективности для IB, ND, EDS
[0079] Группы из 10 курей SPF были вакцинированы 0,5 мл на дозу внутримышечно в возрасте 4 недель. Образцы крови для серологического исследования собирали через 5 недель после вакцинации. Для измерения титров антител против IB, ND и EDS, использовали ELISA (набор антител Idexx FlockCheck IBV; Idexx, Maine, USA), исследования ингибирования гемагглютинации и ELISA (набор антител Idexx FlockCheck NCD; Idexx, Maine, USA), соответственно.
[0080] Вакцины содержали:
в эмульсиях вода-в-масле, которая содержит разные количества CpG.
[0081] Группы из 10 курей SPF были вакцинированы 0,5 мл на дозу внутримышечно в возрасте 4 недель. Образцы крови для серологического исследования собирали через 5 недель после вакцинации. Для измерения титров антител против IB, ND и EDS, использовали ELISA (набор антител Idexx FlockCheck IBV; Idexx, Maine, USA), исследование ингибирования гемагглютинации и ELISA (набор антител Idexx FlockCheck NCD; Idexx, Maine, USA), соответственно.
[0082] Результаты относительно IB, ND, и EDS представлены в таблицах 4-6, соответственно.
• Различные буквы в верхнем индексе означают, что различия являются статистически значимыми.
[0083] Результаты и выводы
[0084] Для IB М41 и ND существуют значительные отличия между препаратами без CpG и препаратом с 5 мкг CpG на дозу. Для ND 2,5 мкг CpG на дозу титры антител также значительно улучшились. Для EDS не существовало никаких существенных отличий между препаратами без CpG и препаратами с CpG, но в количественном соотношении 5 мкг CpG на дозу было лучше, чем без CpG.
[0085] CpG имеет стимулирующий эффект на антительные ответы IB М41, ND и EDS, если добавляют в количестве 5 мкг на дозу. Эффект от 2,5 мкг CpG на дозу является ограниченным.
Пример 4. Исследование эффективности
[0086] Получали комбинированные вакцины, которые содержат разные количества инактивированного IB QX, инактивированного IB D1466 и инактивированных антигенов TRT в эмульсии В/М, которая содержит 10 мкг на дозу CpG. Данные эмульсии использовались для вакцинации SPF несушек в возрасте 14 недель. Половина различных вакцинных групп была вакцинирована в возрасте 10 недель живыми вакцинами IB. В возрасте 26 недель куры были контрольно заражены вирулентным QX-подобным IB вирусом или вирулентным IB D1466 вирусом. Между 2 неделями перед контрольным заражением и через 4 недели после контрольного заражения определяли продуцирование яиц. Кроме того, титры антител измеряли через 7 недель после вакцинации с исследованием нейтрализации сыворотки.
[0087] Как видно из данных, представленных в таблице 4 после живой первичной вакцинации, четкий антительный ответ мог быть детектирован с использованием ELISA. После вакцинации инактивированными вакцинами, также определяли титры антител против IB с использованием SN исследований. Исследование SN специально выявляет антитела против IB QX и IB D1466. Не наблюдалось никакой перекрестной реактивности, тогда как никакой разницы не может быть сделано между антителами против IB QX и IB D1466, используя ELISA.
[0088] Данные в таблице 7 также показывают, что после контрольного заражения существует очень четкое снижение производства яиц у курей, зараженных вирулентным вирусом IB QX, которые не были вакцинированы. Вакцинация только живыми вакцинами, только инактивированной вакциной или обеими в результате приводила к защитному иммунитету против уменьшения яиц, вызванного заражением вирусом IB QX.
[0089] Кроме того, ранее считалось, что инактивированный антиген IB QX навряд ли способен индуцировать титры антител у курей после вакцинации, в отличие от штаммов IB, которые не являются QX. Например, в данное время продукты, которые представлены на рынке, содержащие антигены из других штаммов, которые не являются QX, инфекционного бронхита (например, IB М41, или IB D274, или IB D1466) являются дополненными адъювантом масляной эмульсии без CpG и, тем не менее, обеспечивают достаточную защиту. В отличие от этого, как продемонстрировано в таблице 8, масляная эмульсия без CpG является недостаточной для выявления нейтрализующих антител, тогда как добавление CpG в результате приводит к надежному антительному ответу.
[0090] В то же время, как указано выше, известные вакцинные штаммы вирусов IB были признаны недостаточными для защиты против инфекционного бронхита, вызванного IB-QX и IB-QX-подобными вирусами. Смотрите WO 2010017440. Неожиданно, вакцины по представленному изобретению вызвали четкий антительный ответ против инактивированных IB QX антигенов.
Пример 5. Вакцина против инфекционного бронхита, заболевания Ньюкасла, TRT, инфекционного бурсита птиц, и реовируса
[0091] В данном эксперименте использовались смешанные по полу новорожденные цыплята SPF Leghorn. Цыплят кормили стандартной диетой с водой в неограниченном количестве.
[0092] На 0 день, птицы были вакцинированы против инфекционного бронхита вакциной, содержащей штамм Массачусетс 1 путем глазного введения. На 28 день эксперимента, птице вводили вакцины POULVAC® REO и POULVAC® TRT в дозах, рекомендованных производителем при введении птице в крылья и глаза, соответственно. На 49 день эксперимента, птице вводили экспериментальные вакцины. Группы Т01, Т02, Т04, и Т05 включали по 32 птицы на группу. Группы Т03, Т06, и Т07 включали по 13 птиц на группу.
Коммерческое наименование вакцины MSD: Nobilis®RT+IBmulti+G+ND
[0093] Все антигены, которые использовались в Т01, Т02, Т04, и Т05 были инактивированы формальдегидом.
[0094] Группы Т01-Т05 получали 0,5 мл внутримышечной инъекции в грудную область. Группы Т06 и Т07 обрабатывались согласно протоколам производителей.
[0095] Кровь была взята у птиц на 70 и 77 день для проведения серологического анализа. Анализ проводили с использованием исследования нейтрализации сыворотки (IB, IBDV, Reo), HAI (Ньюкасла), и ELISA (TRT). Серологические данные для T01, T02, T04 и Т05 были проанализированы, используя общую линейную смешанную модель с повторными измерениями. Применяли соответствующее log преобразование. Модель включала фиксированные эффекты обработки, временные точки и обработку по временным точкам взаимодействия, и случайные эффекты блока, и животное в пределах блока, и обработку (животный термин).
[0096] (Обратное преобразование) среднее значение, полученное методом наименьших квадратов, и 90% доверительные интервалы докладывались вместе с диапазоном исходных данных. Если основной эффект обработки или обработки за счет временных взаимодействий были значимыми (Р≤0,10), то проводились и докладывались сравнения между всеми группами обработки в каждой временной точке. Группы обработки Т03, Т06 и Т07 были обобщены с использованием средних геометрических значений, стандартных погрешностей, и диапазонов.
[0097] Результаты представлены в таблице 10.
Статистический анализ проводили для сравнения титров, выявленных путем обработки Т01, Т02, Т04 и Т05. Различные буквы указывают на значительную разницу (р≤0,1).
TRT* указывает на то, что титр был получен, используя ELISA. Все другие результаты были получены, используя сыворотки нейтрализации (IB, IBDV, Reo) или исследования HAI (Ньюкасл)
[0098] Данные результаты демонстрируют, что добавление CpG в эмульсию В/М в результате приводило к почти 3-кратному увеличению иммунного ответа на IBDV. Смотря на результаты с разных точек зрения, данные результаты демонстрируют, что уменьшение дозы IBD Лукерта с 108TCID50 до 107,5TCID50 (приблизительно трехкратное уменьшение) и добавление CpG (сравнить Т01 и Т05) в препарат в результате привело к увеличению ответов на IBD. Ответы на Ньюкасл, реовирус, и TRT также увеличивались, и ответы на IB статистически не уменьшались.
[0099] Кроме того, ответы на все вирусы в результате привели к защитным титрам (защитный титр для IB 20, защитный титр на Ньюкасл составляет 16, защитный титр для IBD составляет 32, защитный титр для реовируса составляет 16). Эффективность вакцины TRT измеряется путем сероконверсии. Сероконверсия более 70% указывала на то, что вакцина была эффективной.
[00100] В экспериментах, приведенных выше, препараты, которые содержат CpG (группы Т01 и Т02) были оба эффективными против TRT (более 90% сероконверсия). В отличие от этого, препараты, которые не содержат CpG (группы Т04 и Т05) не были эффективными против TRT (сероконверсия 62,5% и ниже).
[00101] Группа Т06 использовалась в качестве положительного контроля для IBDV. Как показано в таблице 10, титры, вызванные вакциной Т02, были сопоставимы с титрами, вызванными положительным контролем. Группа Т07 использовалось в качестве положительного контроля для TRT. Как показано в таблице 10, экспериментальные вакцины Т01 и Т02 вызывали более высокие TRT титры, чем Т07.
[00102] В итоге, добавление CpG в эмульсию В/М позволило создать пятивалентную вакцину, эффективную против бронхита, заболевания Ньюкасла, TRT, инфекционного бурсита птиц (IBD или Гамборо) и реовируса. Препараты без CpG не были эффективными против TRT. Кроме того, титры против Ньюкасла, реовируса и IBD были меньше в препаратах без CpG, чем в препаратах с CpG.
Пример 6. Вакцина против инфекционного бронхита, насморка, синдрома снижения яйценоскости, заболевания Ньюкасла и TRT
[00103] В данном эксперименте использовались смешанные по полу новорожденные цыплята SPF Leghorn. Цыплят кормили стандартной диетой с водой в неограниченном количестве.
[00104] На 0 день, птицы были вакцинированы против инфекционного бронхита вакциной, содержащей штамм Массачусетс 1 путем глазного введения. На 14 день эксперимента, птицам вводили вакцины POULVAC® TRT в дозировках, рекомендованных производителем при внутриглазном введении. На 35 день эксперимента, экспериментальные вакцины вводили путем внутримышечных инъекций.
[00105] Таблица 11 иллюстрирует экспериментальные и контрольные вакцинные композиции, которые используются в данных экспериментах. Каждая из этих групп содержала по 56 птиц.
*EDS касается синдрома снижения яйценоскости, IBK касается инфекционного бронхита
[00106] Все антигены, которые используются в Т01, Т02, Т04, и Т05, были инактивированы в формальдегиде.
[00107] Кровь брали у птиц на 56 и 70 день для проведения серологического анализа. В анализе использовали десятипроцентный двусторонний уровень значимости.
[00108] Серологические данные для Т01, Т03, Т04, Т05 и Т06 были проанализированы, используя общую линейную смешанную модель с повторными измерениями. Применяли соответствующее log преобразование. Модель включала фиксированные эффекты обработки, временные точки и обработку по временным точкам взаимодействия, и случайные эффекты блока, и животное в пределах блока, и обработку (животный термин).
[00109] (Обратное преобразование) среднее значение, полученное методом наименьших квадратов, и 90% доверительные интервалы докладывались вместе с диапазоном исходных данных. Если основной эффект обработки или обработки за счет временных взаимодействий были значимыми (Р≤0,10), то проводились и докладывались сравнения между всеми группами обработки в каждой временной точке. Серология для Т02 была обобщена с использованием средних геометрических значений, стандартных погрешностей, и диапазонов.
[00110] Результаты для экспериментальных групп (Т03-Т06) представлены в таблице 12.
Различные буквы указывают на значительную разницу (р≤0,1).
[00111] Данные результаты демонстрируют, что добавление CpG в эмульсию В/М в результате привело к 2-3-кратного увеличения иммунного ответа на TRT, измеренного с использованием ELISA. Смотря на результаты перспективы сероконверсии, группы, обработанные препаратами без CpG (обработки Т03 и Т05) не демонстрировали эффективный TRT сероконверсионный ответ (57% или менее). В отличии от этого, группы, обработанные препаратами Т04 и Т06 оба из которых содержали CpG, демонстрировали эффективную сероконверсию (75% и выше). Даже если доза антигена TRT была уменьшена приблизительно втрое, добавление больше CpG компенсировалось более низкой дозой антигена (сравните Т04 и Т05).
[00112] Кроме того, ответы на все вирусы в результате приводили к защитным титрам (защитный титр для IB составляет 20, защитный титр для Ньюкасла составляет 16, защитный титр для насморка составляет 5, защитный титр для EDS составляет 18). SN титры или HAI титры, вызванные препаратами Т04 и Т06 (которые содержат CpG) как правило, были приблизительно вдвое большими, чем титры, вызванные препаратами Т03 и Т05 (без CpG).
[00113] Все публикации, приведенные в описании, как патентные публикации, так и непатентные публикации, полностью включены в данный документ путем ссылки на такой же объем, как если бы каждая отдельная публикация была конкретно и индивидуально указана, как включена путем ссылки.
[00114] Несмотря на то, что изобретение в данном документе описано с ссылкой на конкретные варианты осуществления, следует понимать, что данные варианты осуществления являются лишь иллюстрацией принципов и применений представленного изобретения. Поэтому следует понимать, что многочисленные модификации могут быть сделаны для иллюстративных вариантов осуществления, и что другие положения могут быть разработаны без отступления от сущности и объема представленного изобретения как определено в следующей формуле изобретения.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> ZOETIS LLC
DOMINOWSKI, Paul Joseph
DOS SANTOS, Maria Carolina Ferreira
FREITAS, Carla Maria
GEERLIGS, Harmen Jacob
<120> ВАКЦИНА ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА
<130> ZP000154A
<150> 62/344598
<151> 2016-06-02
<150> 62/365419
<151> 2016-07-22
<160> 14
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<400> 1
tcgtcgacga tcggcgcgcg ccg 23
<210> 2
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<400> 2
tcgacgtcga tcggcgcgcg ccg 23
<210> 3
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<400> 3
tcgacgtcga tcggcgcgcg ccgt 24
<210> 4
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<220>
<221> модифицированное основание
<222> (1)..(1)
<223> 5'-Йод-2'-дезоксиуридин
<400> 4
ncgacgtcga tcggcgcgcg ccg 23
<210> 5
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<220>
<221> модифицированное основание
<222> (1)..(1)
<223> 5'-Йод-2'-дезоксиуридин
<400> 5
ncgacgtcga tcggcgcgcg ccgt 24
<210> 6
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<220>
<221> модифицированное основание
<222> (1)..(1)
<223> 5'-Йод-2'-дезоксиуридин
<400> 6
ncgacgtcga tcggcgcgcg ccgt 24
<210> 7
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<220>
<221> модифицированное основание
<222> (1)..(1)
<223> 5'-Ethyl-2'-дезоксиуридин
<400> 7
ncgacgtcga tcggcgcgcg ccg 23
<210> 8
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<220>
<221> модифицированное основание
<222> (1)..(1)
<223> 5'-Йод-2'-дезоксиуридин
<400> 8
ncgtcgacga tcggcggccg ccgt 24
<210> 9
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<220>
<221> модифицированное основание
<222> (1)..(1)
<223> 5'-Йод-2'-дезоксиуридин
<400> 9
ncgtcgacga tcggcggccg ccgt 24
<210> 10
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CpG олигонуклеотид
<400> 10
tcgtcgacga tcggcgcgcg ccg 23
<210> 11
<211> 20
<212> РНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> РНК олигонуклеотид
<400> 11
uuguuguugu uguuguuguu 20
<210> 12
<211> 20
<212> РНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> РНК олигонуклеотид
<400> 12
uuauuauuau uauuauuauu 20
<210> 13
<211> 19
<212> РНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> РНК олигонуклеотид
<400> 13
aaacgcucag ccaaagcag 19
<210> 14
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК/РНК олигонуклеотид
<220>
<221> иной_признак
<222> (11)..(17)
<223> рибонуклеотиды
<400> 14
tcgtcgtttt guuguguttt t 21
<---
Claims (7)
1. Вакцина для предупреждения инфекционных заболеваний у птиц, содержащая антигенный компонент и адъювантный компонент, где адъювантный компонент содержит иммуностимулирующий олигонуклеотид CpG и эмульсию вода-в-масле, и где антигенный компонент содержит антиген инфекционного бурсита (IBD), присутствующий в количестве 107,5 - 108 TCID50 на дозу, где к тому же адъювантный компонент по сути состоит из иммуностимулирующего олигонуклеотида, масла и одного или нескольких эмульгаторов, где к тому же иммуностимулирующий олигонуклеотид представляет собой Р-класс иммуностимулирующего олигонуклеотида, и масло представляет собой неметаболизируемое масло.
2. Вакцина по п. 1, в которой указанный антиген IBD представляет собой инактивированный штамм антигена Лукерта.
3. Вакцина по п. 1, в которой эмульсия вода-в-масле содержит легкое минеральное масло.
4. Вакцина по п. 2, в которой антигенный компонент дополнительно содержит, по меньшей мере, один из: a) антигена, полученного из штамма, который не является Лукертом, IBD; b) антигена инфекционного бронхита; c) реовирусного антигена; d) антигена заболевания Ньюкасла; e) антигена ринотрахеита индейки.
5. Вакцина по п. 4, в которой антиген инфекционного бронхита содержит инактивированный вирус инфекционного бронхита, реовирусный антиген содержит инактивированный реовирус, антиген, полученный из штамма, который не является Лукертом, IBD, содержит инактивированный IBD вирус штамма, который не является Лукертом, антиген заболевания Ньюкасла содержит инактивированный вирус Ньюкасла, и антиген ринотрахеита индейки содержит инактивированный вирус ринотрахеита индейки.
6. Вакцина по п. 1, в которой указанный иммуностимулирующий олигонуклеотид содержит SEQ ID NO: 8.
7. Вакцина по п. 1, в которой иммуностимулирующий олигонуклеотид присутствует в количестве 2,5-20 мкг на дозу.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662344598P | 2016-06-02 | 2016-06-02 | |
| US62/344,598 | 2016-06-02 | ||
| US201662365419P | 2016-07-22 | 2016-07-22 | |
| US62/365,419 | 2016-07-22 | ||
| PCT/US2017/035105 WO2017210244A1 (en) | 2016-06-02 | 2017-05-31 | Vaccine against infectious bronchitis |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021117820A Division RU2021117820A (ru) | 2016-06-02 | 2017-05-31 | Вакцина против инфекционного бронхита |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018142329A RU2018142329A (ru) | 2020-06-01 |
| RU2018142329A3 RU2018142329A3 (ru) | 2020-09-01 |
| RU2781143C2 true RU2781143C2 (ru) | 2022-10-06 |
Family
ID=
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002045745A2 (en) * | 2000-11-21 | 2002-06-13 | Wyeth | Methods and vaccines for providing in ovo protection against turkey rhinotracheitis |
| WO2012092226A1 (en) * | 2010-12-27 | 2012-07-05 | Biomune Company | Veterinary vaccine composition against infections caused by salmonella |
| WO2015042369A2 (en) * | 2013-09-19 | 2015-03-26 | Zoetis Llc | Oil-based adjuvants |
| RU2545530C2 (ru) * | 2009-12-01 | 2015-04-10 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Инактивированная вакцина для птицы |
| RU2568053C2 (ru) * | 2008-08-08 | 2015-11-10 | Зоетис Сервисиз ЛЛК | Вакцина для защиты птицы от qх-подобного вируса инфекционного бронхита и способ ее использования |
| RU2584588C2 (ru) * | 2011-05-26 | 2016-05-20 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002045745A2 (en) * | 2000-11-21 | 2002-06-13 | Wyeth | Methods and vaccines for providing in ovo protection against turkey rhinotracheitis |
| RU2568053C2 (ru) * | 2008-08-08 | 2015-11-10 | Зоетис Сервисиз ЛЛК | Вакцина для защиты птицы от qх-подобного вируса инфекционного бронхита и способ ее использования |
| RU2545530C2 (ru) * | 2009-12-01 | 2015-04-10 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Инактивированная вакцина для птицы |
| WO2012092226A1 (en) * | 2010-12-27 | 2012-07-05 | Biomune Company | Veterinary vaccine composition against infections caused by salmonella |
| RU2584588C2 (ru) * | 2011-05-26 | 2016-05-20 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
| WO2015042369A2 (en) * | 2013-09-19 | 2015-03-26 | Zoetis Llc | Oil-based adjuvants |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6586083B2 (ja) | 油性アジュバント | |
| US10456459B2 (en) | Liposomal adjuvant compositions | |
| JP2023002541A (ja) | 伝染性気管支炎に対するワクチン | |
| AU2014265649B2 (en) | Novel vaccine compositions comprising immunostimulatory oligonucleotides | |
| RU2781143C2 (ru) | Вакцина против инфекционного бронхита | |
| JP6975132B2 (ja) | リポソームアジュバント組成物 | |
| JP7370983B2 (ja) | ヘンドラウイルス感染症及びニパウイルス感染症に対するワクチン | |
| NZ788650A (en) | Vaccine against infectious bronchitis | |
| NZ788649A (en) | Vaccine against infectious bronchitis | |
| WO2024077025A1 (en) | Poultry vaccines and methods of protecting poultry |