RU2777871C1 - Method for treating neurodegenerative diseases - Google Patents
Method for treating neurodegenerative diseases Download PDFInfo
- Publication number
- RU2777871C1 RU2777871C1 RU2021123180A RU2021123180A RU2777871C1 RU 2777871 C1 RU2777871 C1 RU 2777871C1 RU 2021123180 A RU2021123180 A RU 2021123180A RU 2021123180 A RU2021123180 A RU 2021123180A RU 2777871 C1 RU2777871 C1 RU 2777871C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- haee
- hsa
- peptide
- substance
- composition
- Prior art date
Links
- 206010053643 Neurodegenerative disease Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108091006822 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 6
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 229940097496 Nasal Spray Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 26
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 16
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 230000036912 Bioavailability Effects 0.000 abstract description 6
- 230000035514 bioavailability Effects 0.000 abstract description 6
- 206010001897 Alzheimer's disease Diseases 0.000 description 18
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 14
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 11
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 11
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 9
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 9
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102100001249 ALB Human genes 0.000 description 6
- 101710027066 ALB Proteins 0.000 description 6
- 210000001218 Blood-Brain Barrier Anatomy 0.000 description 6
- 229940050528 albumin Drugs 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 5
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 5
- 210000004556 Brain Anatomy 0.000 description 5
- SNKZJIOFVMKAOJ-UHFFFAOYSA-N Homotaurine Chemical compound NCCCS(O)(=O)=O SNKZJIOFVMKAOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000002490 cerebral Effects 0.000 description 5
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 5
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 230000037242 Cmax Effects 0.000 description 3
- 230000036897 Cmax/AUC Effects 0.000 description 3
- 230000036499 Half live Effects 0.000 description 3
- 230000035852 Tmax Effects 0.000 description 3
- 230000035510 distribution Effects 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000007787 long-term memory Effects 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 230000000699 topical Effects 0.000 description 3
- 229960003570 tramiprosate Drugs 0.000 description 3
- 230000036923 AUC (0-20) Effects 0.000 description 2
- 206010002023 Amyloidosis Diseases 0.000 description 2
- 206010002022 Amyloidosis Diseases 0.000 description 2
- 230000036698 Distribution coefficient Effects 0.000 description 2
- 210000001320 Hippocampus Anatomy 0.000 description 2
- 230000036948 MRT Effects 0.000 description 2
- 208000010513 Stupor Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 230000036012 kel Effects 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000000626 neurodegenerative Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 2
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic Effects 0.000 description 2
- 230000035533 AUC Effects 0.000 description 1
- 210000000577 Adipose Tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000036551 Apparent volume of distribution Effects 0.000 description 1
- 210000001175 Cerebrospinal Fluid Anatomy 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- 210000000349 Chromosomes Anatomy 0.000 description 1
- 206010057668 Cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 102100011199 EDAR Human genes 0.000 description 1
- 101700058454 EDAR Proteins 0.000 description 1
- 230000036826 Excretion Effects 0.000 description 1
- 241000981924 Juniperus oxycedrus Species 0.000 description 1
- 210000003734 Kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000035683 MEAN RESIDENCE TIME Effects 0.000 description 1
- 210000002747 Omentum Anatomy 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 230000037253 Total clearance Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002744 anti-aggregatory Effects 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 238000009227 behaviour therapy Methods 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidates Drugs 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic Effects 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000035761 normovolemia Effects 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral Effects 0.000 description 1
- 230000036231 pharmacokinetics Effects 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000001340 slower Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming Effects 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003936 working memory Effects 0.000 description 1
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004572 zinc-binding Effects 0.000 description 1
- 108010088577 zinc-binding protein Proteins 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ лечения нейродегенеративных заболеваний путем использования содержащей эффективное количество пептида HAEE в эквимолярном комплексе с цинком и человеческим сывороточным альбумином фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA в форме спрея для местного назального применения. The invention relates to the field of medicine and is a method for the treatment of neurodegenerative diseases by using the pharmaceutical composition HAEE-Zn-HSA containing an effective amount of the HAEE peptide in an equimolar complex with zinc and human serum albumin in the form of a spray for topical nasal application.
Болезнь Альцгеймера (далее БА) является самой распространенной нейродегенеративной патологией в мире и клинически сопровождается неуклонным снижением когнитивных функций (Гаврилова С.И. (2007). Фармакотерапия болезни Альцгеймера. Москва: Пульс.). Наследственные варианты болезни Альцгеймера составляют менее 1% всех случаев этой патологии и ассоциированы с мутациями в генах (Rogaev E.I., Sherrington R., Rogaeva E.A., Levesque G., Ikeda M., Liang Y., Chi H., Lin C., Holman K., Tsuda T., and Et Al. (1995) Familial Alzheimer's disease in kindreds with missense mutations in a gene on chromosome 1 related to the Alzheimer's disease type 3 gene. Nature. 376, 775-778), приводящими к конституциональному превышению физиологически нормального уровня бета-амилоида (Aв), – короткого гетерогенного по С-концу полипептида длиной 39-43 аминокислотных остатков (Querfurth H.W., and Laferla F.M. (2010) Alzheimer's Disease. New England Journal of Medicine. 362, 329-344). Alzheimer's disease (hereinafter AD) is the most common neurodegenerative pathology in the world and is clinically accompanied by a steady decline in cognitive functions (Gavrilova S.I. (2007). Pharmacotherapy of Alzheimer's disease. Moscow: Puls.). Hereditary variants of Alzheimer's disease account for less than 1% of all cases of this pathology and are associated with mutations in genes (Rogaev E.I., Sherrington R., Rogaeva E.A., Levesque G., Ikeda M., Liang Y., Chi H., Lin C., Holman K., Tsuda T., and Et Al (1995) Familial Alzheimer's disease in kindreds with missense mutations in a gene on
В патенте РФ № 2414925, публ.27.03.2011 представлено применение терапевтического человеческого альбумина для изготовления лекарственного средства для лечения пациентов, страдающих когнитивными расстройствами путем терапевтической плазмафильтрации. При этом, альбумин присутствует в среде замены при концентрации от 4% вплоть до 25 мас.%/об. При некоторых применениях альбумин присутствует при концентрации примерно от 4,5% до 5,5 мас.%/об. Причем независимо от концентрации бета-амилоида в крови, при применении терапевтической плазмафильтрации и замены объема нормоволемии альбумина с определенной частотой терапии происходит увеличение объема гиппокампа, которому сопутствует улучшение клинических симптомов болезни Альцгеймера. Это может быть следствием факторов, которые являются растворимыми и проницаемыми через гематоэнцефалический барьер. Однако способ плазмафильтрации часто вызывает осложнения и применим не для всех категорий пациентов.In the patent of the Russian Federation No. 2414925, publ. 27.03.2011, the use of therapeutic human albumin for the manufacture of a drug for the treatment of patients suffering from cognitive disorders by therapeutic plasma filtration is presented. At the same time, albumin is present in the replacement medium at a concentration of from 4% up to 25% w/v. In some applications, albumin is present at a concentration of from about 4.5% to about 5.5% w/v. Moreover, regardless of the concentration of beta-amyloid in the blood, when using therapeutic plasma filtration and replacing the volume of albumin normovolemia with a certain frequency of therapy, an increase in the volume of the hippocampus occurs, which is accompanied by an improvement in the clinical symptoms of Alzheimer's disease. This may be due to factors that are soluble and permeable through the blood-brain barrier. However, the plasma filtration method often causes complications and is not applicable to all categories of patients.
Согласно широко принятой «амилоидной гипотезе», превращение физиологически нормального Aв из мономерного состояния в растворимые нейротоксичные олигомеры, а затем в нерастворимые полимерные агрегаты, которые в конце концов накапливаются в виде амилоидных бляшек, является пусковым процессом патогенеза БА (Karran E., Mercken M., and De Strooper B. (2011) The amyloid cascade hypothesis for Alzheimer's disease: an appraisal for the development of therapeutics. Nat Rev Drug Discov. 10, 698-712.). Поэтому предотвращение церебрального амилоидогенеза путем ингибирования патологической олигомеризации Aв, т.н. анти-амилоидная терапия, считается наиболее перспективной стратегией лечения БА (Schenk D., Basi G.S., and Pangalos M.N. (2012) Treatment Strategies Targeting Amyloid в-Protein. Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine.). Было найдено, что синтетический пептид HAEE специфически связывается с металл-связывающим доменом 1-16 Aв по участку 11-14, блокирует цинк-индуцированную димеризацию домена и замедляет агрегацию полноразмерного Aв in vitro (Tsvetkov P.O., Cheglakov I.B., Ovsepyan A.A., Mediannikov O.Y., Morozov A.O., Telegin G.B., and Kozin S.A. (2015) Peripherally Applied Synthetic Tetrapeptides HAEE and RADD Slow Down the Development of Cerebral beta-Amyloidosis in AbetaPP/PS1 Transgenic Mice. J Alzheimers Dis. 46, 849-853). Внутривенные инъекции пептида HAEE замедляли развитие церебрального амилоидогенеза у мышей линии B6C3-Tg(APPswe, PSEN1-dE9)85Dbo/j, которые используются в качестве животной модели БА: среднее число амилоидных бляшек на срезе мозга уменьшалось с 14.2 ± 3.1 (для контрольных животных) до 5.8 ± 2.1 (для животных, подвергнутых терапевтическому воздействию) (Tsvetkov P.O., Cheglakov I.B., Ovsepyan A.A., Mediannikov O.Y., Morozov A.O., Telegin G.B., and Kozin S.A. (2015) Peripherally Applied Synthetic Tetrapeptides HAEE and RADD Slow Down the Development of Cerebral beta-Amyloidosis in AbetaPP/PS1 Transgenic Mice. J Alzheimers Dis. 46, 849-853.). По этому показателю эффективность препарата HAEE значительно превосходит анти-амилоидное действие Alzhemed (Tramiprosate) - одного из самых известных анти-агрегационных лекарственных кандидатов для лечения болезни Альцгеймера (Aisen P.S., Gauthier S., Ferris S.H., Saumier D., Haine D., Garceau D., Duong A., Suhy J., Oh J., Lau W.C., and Sampalis J. (2011) Tramiprosate in mild-to-moderate Alzheimer's disease - a randomized, double-blind, placebo-controlled, multi-centre study (the Alphase Study). Arch Med Sci. 7, 102-111.). При использовании Alzhemed в трансгенных мышах линии TgCRND8 происходило уменьшение числа амилоидных бляшек на 30% по сравнению с контрольными животными (Gervais F., Paquette J., Morissette C., Krzywkowski P., Yu M., Azzi M., Lacombe D., Kong X., Aman A., Laurin J., Szarek W.A., and Tremblay P. (2007) Targeting soluble Aв peptide with Tramiprosate for the treatment of brain amyloidosis. Neurobiology of Aging. 28, 537-547.). Таким образом, в настоящее время пептид HAEE является одним из самых эффективных антиамилодных препаратов в мире (Goyal D., Shuaib S., Mann S., and Goyal B. (2017) Rationally Designed Peptides and Peptidomimetics as Inhibitors of Amyloid-в (Aв) Aggregation: Potential Therapeutics of Alzheimer’s Disease. ACS Combinatorial Science. 19, 55-80.). Молекулярный механизм антиамилоидного действия тетрапептида HAEE хорошо установлен (Козин С.А., Барыкин Е.П., Митькевич В.А., Макаров А.А. (2018) Антиамилоидная терапия болезни Альцгеймера: современное состояние и перспективы. Биохимия. 83, 1331-1342.), и для оказания своего терапевтического воздействия эта субстанция должна проникать сквозь гематоэнцефалический барьер (ГЭБ).According to the widely accepted "amyloid hypothesis", the transformation of physiologically normal Av from a monomeric state into soluble neurotoxic oligomers, and then into insoluble polymeric aggregates, which eventually accumulate in the form of amyloid plaques, is the starting process of AD pathogenesis (Karran E., Mercken M. , and De Strooper B. (2011) The amyloid cascade hypothesis for Alzheimer's disease: an appraisal for the development of therapeutics Nat Rev Drug Discov 10, 698-712.). Therefore, the prevention of cerebral amyloidogenesis by inhibiting the pathological oligomerization of Av, the so-called. anti-amyloid therapy is considered the most promising strategy for the treatment of AD (Schenk D., Basi G.S., and Pangalos M.N. (2012) Treatment Strategies Targeting Amyloid in-Protein. Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine.). It was found that the synthetic HAEE peptide specifically binds to the metal-binding domain 1-16 Ab at site 11-14, blocks zinc-induced dimerization of the domain and slows down the aggregation of full-length Ab in vitro (Tsvetkov P.O., Cheglakov I.B., Ovsepyan A.A., Mediannikov O.Y., Morozov A.O., Telegin G.B., and Kozin S.A. (2015) Peripherally Applied Synthetic Tetrapeptides HAEE and RADD Slow Down the Development of Cerebral beta-Amyloidosis in AbetaPP/PS1 Transgenic Mice J Alzheimers Dis. 46, 849-853). Intravenous injections of the HAEE peptide slowed down the development of cerebral amyloidogenesis in B6C3-Tg(APPswe, PSEN1-dE9)85Dbo/j mice, which are used as an animal model of AD: the average number of amyloid plaques on a brain section decreased from 14.2 ± 3.1 (for control animals) up to 5.8 ± 2.1 (for treated animals) (Tsvetkov P.O., Cheglakov I.B., Ovsepyan A.A., Mediannikov O.Y., Morozov A.O., Telegin G.B., and Kozin S.A. (2015) Peripherally Applied Synthetic Tetrapeptides HAEE and RADD Slow Down the Development of Cerebral beta-Amyloidosis in AbetaPP/PS1 Transgenic Mice J Alzheimers Dis 46, 849-853.). According to this indicator, the effectiveness of the HAEE drug significantly exceeds the anti-amyloid effect of Alzhemed (Tramiprosate) - one of the most famous anti-aggregation drug candidates for the treatment of Alzheimer's disease (Aisen P.S., Gauthier S., Ferris S.H., Saumier D., Haine D., Garceau D., Duong A., Suhy J., Oh J., Lau W.C., and Sampalis J. (2011) Tramiprosate in mild-to-moderate Alzheimer's disease - a randomized, double-blind, placebo-controlled, multi-centre study (the Alphase Study. Arch Med Sci. 7, 102-111.). When Alzhemed was used in TgCRND8 transgenic mice, the number of amyloid plaques decreased by 30% compared with control animals (Gervais F., Paquette J., Morissette C., Krzywkowski P., Yu M., Azzi M., Lacombe D., Kong X., Aman A., Laurin J., Szarek W.A., and Tremblay P. (2007) Targeting soluble Aβ peptide with Tramiprosate for the treatment of brain amyloidosis Neurobiology of Aging 28, 537-547. Thus, at present, the HAEE peptide is one of the most effective anti-amyloid drugs in the world (Goyal D., Shuaib S., Mann S., and Goyal B. (2017) Rationally Designed Peptides and Peptidomimetics as Inhibitors of Amyloid-b (Av ) Aggregation: Potential Therapeutics of Alzheimer's Disease ACS Combinatorial Science 19, 55-80. The molecular mechanism of the anti-amyloid action of the HAEE tetrapeptide is well established (Kozin S.A., Barykin E.P., Mitkevich V.A., Makarov A.A. (2018) Antiamyloid therapy for Alzheimer's disease: current state and prospects. Biochemistry. 83, 1331 -1342.), and to exert its therapeutic effect, this substance must penetrate the blood-brain barrier (BBB).
Из уровня техники известно изобретение с целью лечения нейродегенеративных заболеваний, в частности болезни Альцгеймера, имеющее отношение к новому пептидному соединению Ra-R1-R2-R3-R4-Rb (I) или Ra-R4-R3-R2-R1-Rb (II), где Ra представляет собой N-концевую первичную аминную группу аминокислоты R1 или R4, либо свободную, либо замещенную аминозащитной группой, Rb представляет собой гидроксильную группу С-концевой карбоксильной группы аминокислоты R1 или R4, либо свободную, либо замещенную гидроксизащитной группой, и R1-R2-R3-R4 или R4-R3-R2-R1 представляют собой HADD, KADD, DDAK, RADD, DDAR, KAED, DEAK, RAED, DEAR, HADE, EDAH, KADE, EDAK, RADE, EDAR, HAEE, EEAH, KAEE, EEAK, RAEE и EEAR, главным образом используемому для связывания с в-амилоидными пептидами и/или предотвращения или уменьшения образования амилоидных бляшек, главным образом за счет ингибирования полимеризации вышеупомянутого амилоидного пептида в виде амилоидных бляшек. Причем, предпочтительно пептидное соединение, соответственно данному изобретению, выбрано из соединений с формулой (I) или (II), где R1-R2-R3-R4 или R4-R3-R2-R1, представлено одним из двух тетрапептидов HAEE и RADD. Наиболее предпочтительные пептидные соединения соответствуют формулам Ac-HAEE-NH2 и Ac-RADD-NH2. Также описана композиция для снижения или предотвращения связывания ионов Zn (II) с в-амилоидным пептидом, содержащая в качестве активного вещества указанное пептидное соединение, степень чистоты которого составляет по меньшей мере 98%, и фармацевтически приемлемый носитель для парентерального, чрескожного или чресслизистого введения. (патент РФ № 2588143 от 24.10.2011года, правообладатель КИМОНЕЛЛА ВЕНЧЕРС ЛТД (CY)).In the prior art, an invention is known for the treatment of neurodegenerative diseases, in particular Alzheimer's disease, relating to a new peptide compound Ra-R1-R2-R3-R4-Rb (I) or Ra-R4-R3-R2-R1-Rb (II ), where Ra is the N-terminal primary amine group of the amino acid R1 or R4, either free or substituted with an amino protecting group, Rb is the hydroxyl group of the C-terminal carboxyl group of the amino acid R1 or R4, either free or substituted with a hydroxy protecting group, and R1 -R2-R3-R4 or R4-R3-R2-R1 are HADD, KADD, DDAK, RADD, DDAR, KAED, DEAK, RAED, DEAR, HADE, EDAH, KADE, EDAK, RADE, EDAR, HAEE, EEAH, KAEE, EEAK, RAEE and EEAR, mainly used to bind to β-amyloid peptides and/or prevent or reduce the formation of amyloid plaques, mainly by inhibiting the polymerization of the aforementioned amyloid peptide as amyloid plaques. Moreover, preferably the peptide compound according to this invention is selected from compounds with formula (I) or (II), where R1-R2-R3-R4 or R4-R3-R2-R1 is represented by one of the two tetrapeptides HAEE and RADD. The most preferred peptide compounds correspond to the formulas Ac-HAEE-NH2 and Ac-RADD-NH2. Also described is a composition for reducing or preventing the binding of Zn (II) ions to a β-amyloid peptide, containing the specified peptide compound as an active substance, the purity of which is at least 98%, and a pharmaceutically acceptable carrier for parenteral, transdermal or transmucosal administration. (RF patent No. 2588143 dated October 24, 2011, copyright holder KIMONELLA VENTURES LTD (CY)).
Однако известно, что короткие заряженные пептиды типа HAEE имеют очень короткое время жизни в плазме крови (от нескольких секунд до нескольких минут) и с трудом проходят через ГЭБ, что существенно ослабляет эффективность их терапевтического воздействия (Fosgerau K., and Hoffmann T. (2015) Peptide therapeutics: current status and future directions. Drug Discovery Today. 20, 122-128; Wade J., and Otvos L. (2014) Current Challenges in Peptide-based Drug Discovery. Frontiers in Chemistry. 2.).However, it is known that short charged peptides of the HAEE type have a very short lifetime in blood plasma (from several seconds to several minutes) and hardly pass through the BBB, which significantly reduces the effectiveness of their therapeutic effect (Fosgerau K., and Hoffmann T. (2015 ) Peptide therapeutics: current status and future directions Drug Discovery Today 20, 122-128; Wade J., and Otvos L. (2014) Current Challenges in Peptide-based Drug Discovery Frontiers in Chemistry 2.).
Известно, что альбумин обеспечивает транспорт ряда пептидов, включая бета-амилоид, через ГЭБ (Boada M., Anaya F., Ortiz P., Olazaran J. (2017) Efficacy and Safety of Plasma Exchange with 5% Albumin to Modify Cerebrospinal Fluid and Plasma Amyloid-в Concentrations and Cognition Outcomes in Alzheimer's Disease Patients: A Multicenter, Randomized, Controlled Clinical Trial. Journal of Alzheimer's disease : JAD. 56, 129-143.) и образует стабильный комплекс с одним ионом цинка (Blindauer C.A., Harvey I., Bunyan K.E., Stewart A.J., Sleep D., Harrison D.J., Berezenko S., and Sadler P.J. (2009) Structure, Properties, and Engineering of the Major Zinc Binding Site on Human Albumin. Journal of Biological Chemistry. 284, 23116-23124.).It is known that albumin provides transport of a number of peptides, including beta-amyloid, through the BBB (Boada M., Anaya F., Ortiz P., Olazaran J. (2017) Efficacy and Safety of Plasma Exchange with 5% Albumin to Modify Cerebrospinal Fluid and Plasma Amyloid-in Concentrations and Cognition Outcomes in Alzheimer's Disease Patients: A Multicenter, Randomized, Controlled Clinical Trial Journal of Alzheimer's disease : JAD. 56, 129-143.) and forms a stable complex with a single zinc ion (Blindauer C.A., Harvey I ., Bunyan K.E., Stewart A.J., Sleep D., Harrison D.J., Berezenko S., and Sadler P.J. (2009) Structure, Properties, and Engineering of the Major Zinc Binding Site on Human Albumin Journal of Biological Chemistry 284, 23116- 23124.).
Известно, что HAEE образует специфический эквимолярный комплекс с цинк-связанным альбумином - HAEE-Zn-HSA.(патент №2709539), который в форме раствора для внутривенного введения, где фармацевтически приемлемым носителем является, например, физиологический раствор, позволяет при внутривенном введении экспериментальным животным:It is known that HAEE forms a specific equimolar complex with zinc-bound albumin - HAEE-Zn-HSA. (patent No. 2709539), which in the form of a solution for intravenous administration, where a pharmaceutically acceptable carrier is, for example, physiological animals:
˗ в два раза увеличить время полувыведения HAEE из организма;˗ double the half-life of HAEE from the body;
˗ в пять раз увеличить биодоступность этой субстанции в мозге;˗ five times increase the bioavailability of this substance in the brain;
˗ на 20% улучшить когнитивные функции экспериментальных животных, по сравнению с чистым тетрапептидом HAEE.˗ 20% improvement in cognitive function in experimental animals compared to pure HAEE tetrapeptide.
Недостатком является то, что внутривенное введение композиции HAEE-Zn-HSA требует специально обученного медицинского персонала. Кроме того, недостаточное повышение когнитивных функций экспериментальных животных при внутривенном введении указанной композиции.The disadvantage is that intravenous administration of the HAEE-Zn-HSA composition requires specially trained medical personnel. In addition, insufficient increase in the cognitive functions of experimental animals with intravenous administration of the specified composition.
Задачей изобретения является расширение арсенала способов лечения нейродегенеративных заболеваний с использованием композиции HAEE-Zn-HSA. The objective of the invention is to expand the arsenal of methods for the treatment of neurodegenerative diseases using the HAEE-Zn-HSA composition.
Технический результат – повышение удобства введения композиции HAEE-Zn-HSA наряду с сохранением биодоступности и длительности действия активной субстанции - пептида HAEE, а также когнитивных функций у экспериментальных животных. Дополнительным преимуществом является отсутствие существенных различий между назальной и внутривенной формами выпуска препарата.The technical result is an increase in the convenience of introducing the HAEE-Zn-HSA composition along with maintaining the bioavailability and duration of action of the active substance - the HAEE peptide, as well as cognitive functions in experimental animals. An additional advantage is the absence of significant differences between the nasal and intravenous formulations of the drug.
Поставленная задача достигается тем, что способ лечения нейродегенеративных деменций, в том числе болезни Альцгеймера, включает введение фармацевтической композиции, содержащей эффективное количество субстанции HAEE в эквимолярном комплексе с цинком и человеческим сывороточным альбумином (HAEE-Zn-HSA) в форме спрея для местного назального применения. Спрей как лекарственная форма (ЛФ) сейчас очень активно начинает использоваться в медицинской практике, т.к. его применение не требует использования специально обученного медицинского персонала, отсутствует опасность загрязнения лекарственного препарата извне, за счет того баллон герметически закрыт, обеспечивается точная дозировка при использовании дозирующих клапанов, и др.The task is achieved in that the method for the treatment of neurodegenerative dementias, including Alzheimer's disease, includes the introduction of a pharmaceutical composition containing an effective amount of the substance HAEE in an equimolar complex with zinc and human serum albumin (HAEE-Zn-HSA) in the form of a spray for topical nasal application . Spray as a dosage form (DF) is now very actively beginning to be used in medical practice, because. its use does not require the use of specially trained medical personnel, there is no danger of contamination of the medicinal product from the outside, due to the fact that the container is hermetically sealed, accurate dosage is ensured when using dosing valves, etc.
Авторами настоящего изобретения экспериментально доказано, что способ введения композиция HAEE-Zn-HSA в форме спрея для местного назального применения, по сравнению с ее введением внутривенно, характеризуется не только более практичным и универсальным способом применения, но и имеет доказанный уровень эффективности воздействия тетрапептида HAEE.The authors of the present invention experimentally proved that the method of administration of the HAEE-Zn-HSA composition in the form of a topical nasal spray, in comparison with its administration intravenously, is characterized not only by a more practical and versatile method of application, but also has a proven level of effectiveness of the HAEE tetrapeptide.
Изобретение иллюстрируется следующими фигурами.The invention is illustrated by the following figures.
Фиг.1. График «Результаты анализа пространственной памяти у экспериментальных животных по итогам теста Водный лабиринт Морриса».Fig.1. Graph "The results of the analysis of spatial memory in experimental animals according to the results of the Morris Water Maze test."
Фиг.2. График «Результаты анализа пространственной долговременной памяти у экспериментальных животных по итогам теста Т-образный водный лабиринт».Fig.2. Graph "The results of the analysis of spatial long-term memory in experimental animals based on the results of the T-shaped water maze test."
Фиг.3. График «Результаты анализа формирования долговременной памяти у экспериментальных животных в тесте «формирование страха».Fig.3. Graph “The results of the analysis of the formation of long-term memory in experimental animals in the test “formation of fear”.
ПРИМЕР 1. EXAMPLE 1.
Исследования фармакокинетики субстанции HAEE в композиции HAEE-Zn-HSA, меченой тритием (радиохимическая чистота более 98%), выполнены на кроликах породы Шиншилла. Определяли значения основных фармакокинетических показателей при однократном внутривенном и назальном введении композиции HAEE-Zn-HSA. Усредненные значения основных фармакокинетических показателей субстанции HAEE после однократного назального и однократного внутривенного введения композиции HAEE-Zn-HSA кроликам в дозе 120 мкг/кг приведены в таблице 1.Studies of the pharmacokinetics of the HAEE substance in the HAEE-Zn-HSA composition labeled with tritium (radiochemical purity over 98%) were performed on Chinchilla rabbits. The values of the main pharmacokinetic parameters were determined after a single intravenous and nasal administration of the HAEE-Zn-HSA composition. The average values of the main pharmacokinetic parameters of the HAEE substance after a single nasal and single intravenous administration of the HAEE-Zn-HSA composition to rabbits at a dose of 120 μg/kg are shown in Table 1.
Таблица 1Table 1
гдеwhere
D – введенная доза вещества;D is the administered dose of the substance;
Cmax - максимальное измеренное значение концентрации вещества в плазме крови;Cmax - the maximum measured value of the concentration of a substance in blood plasma;
Tmax – время достижения максимальной концентрации вещества в плазме крови;Tmax is the time to reach the maximum concentration of the substance in the blood plasma;
AUC0-∞ - площадь под фармакокинетической кривой концентрация-время от нуля до бесконечности;AUC0-∞ - area under the concentration-time pharmacokinetic curve from zero to infinity;
Cmax/AUC(0-∞) - относительная скорость всасывания;Cmax/AUC(0-∞) - relative absorption rate;
Clт – общий клиренс (объем плазмы, который очищается от препарата в единицу времени);Clt - total clearance (plasma volume that is cleared from the drug per unit time);
MRT – среднее время удержания (среднее время пребывания соединения в крови);MRT, mean retention time (mean residence time of a compound in the blood);
Kel - константа скорости выведения вещества из крови;Kel is the rate constant for the excretion of a substance from the blood;
T1/2(el) - время полувыведения вещества из крови;T1/2(el) - half-life of the substance from the blood;
Vd - кажущийся объем распределения вещества в центральном компартменте.Vd is the apparent volume of distribution of the substance in the central compartment.
r2 – коэффициент детерминации;r 2 - coefficient of determination;
У кроликов максимальная концентрация субстанции HAEE в крови независимо от способа введения отмечается через 4 минуты после применения препарата. Время полувыведения субстанции HAEE из крови кролика при назальном введении составляет 19 минут, при внутривенном – 20 минут. HAEE характеризуется быстрым выведением из крови, которое обусловлено его быстрым распределением по тканям организма с последующим протеолитическим гидролизом также независимо от способа введения. Практически значения всех фармакокинетических показателей близки между собой как при назальном, так и при внутривенном способе введения композиции HAEE-Zn-HSA.In rabbits, the maximum concentration of the HAEE substance in the blood, regardless of the route of administration, is observed 4 minutes after the drug is applied. The half-life of the substance HAEE from the blood of a rabbit when administered nasally is 19 minutes, when administered intravenously - 20 minutes. HAEE is characterized by rapid elimination from the blood, which is due to its rapid distribution in the tissues of the body, followed by proteolytic hydrolysis, also regardless of the route of administration. In practice, the values of all pharmacokinetic parameters are close to each other both with nasal and intravenous administration of the HAEE-Zn-HSA composition.
Пример 2.Example 2
Однократное назальное введение мышам (N=36) композиции HAEE-Zn-HSA в дозе 300 мкг/кг.Single nasal administration to mice (N=36) of the HAEE-Zn-HSA composition at a dose of 300 μg/kg.
Значения концентрации субстанции HAEE в крови и тканях мышей после однократного назального введения препарата в дозе 300 мкг/кг в различных временных точках приведены в таблице 2.The concentration values of the HAEE substance in the blood and tissues of mice after a single nasal administration of the drug at a dose of 300 μg/kg at various time points are shown in Table 2.
Для сравнения значения концентрации субстанции HAEE в крови и тканях мышей после однократного внутрибрюшинного введения препарата HAEE в дозе 0,3 мг/кг в различных временных точках приведены в таблице 3.For comparison, the values of the concentration of the HAEE substance in the blood and tissues of mice after a single intraperitoneal injection of the HAEE preparation at a dose of 0.3 mg/kg at different time points are shown in Table 3.
Из таблиц 3 и 4 видно, что субстанция HAEE характеризуется быстрым выведением из крови, которое обусловлено его быстрым распределением по тканям организма с последующим протеолитическим гидролизом. При этом концентрация субстанции НАЕЕ в мозге через 20 минут при назальном и внутрибрюшинном введении показала одинаковое значение 29±6 пмоль/г.From tables 3 and 4 it can be seen that the HAEE substance is characterized by rapid elimination from the blood, which is due to its rapid distribution throughout the tissues of the body, followed by proteolytic hydrolysis. At the same time, the concentration of the HAEE substance in the brain after 20 minutes with nasal and intraperitoneal administration showed the same value of 29±6 pmol/g.
Сравнение значений фармакокинетических показателей субстанции HAEE в крови и внутренних органах мышей после однократного назального введения препарата HAEE (Н) в дозе 300 мкг/кг, и после однократного внутрибрюшинного введения препарата HAEE (В) в дозе 0,3 мг/кг приведены в таблице 4.Comparison of the values of the pharmacokinetic parameters of the HAEE substance in the blood and internal organs of mice after a single nasal administration of the HAEE (H) preparation at a dose of 300 μg/kg, and after a single intraperitoneal administration of the HAEE (B) preparation at a dose of 0.3 mg/kg are shown in Table 4 .
где:where:
Cmax - максимальное измеренное значение концентрации вещества в плазме крови;Cmax - the maximum measured value of the concentration of a substance in blood plasma;
Tmax – время достижения максимальной концентрации вещества в плазме крови;Tmax is the time to reach the maximum concentration of the substance in the blood plasma;
AUC0(0-20) - площадь под фармакокинетической кривой «концентрация-время» от нуля до 20 минут;AUC0(0-20) - area under the pharmacokinetic curve "concentration-time" from zero to 20 minutes;
Cmax/AUC(0-20) - относительная скорость всасывания от нуля до 20 минут;Cmax/AUC(0-20) - relative absorption rate from zero to 20 minutes;
fт – тканевая доступность фармакологического средства, fт = AUC(0-20)ткань/AUC(0-20)кровь;ft – tissue availability of a pharmacological agent, ft = AUC(0-20)tissue/AUC(0-20)blood;
Kd – кажущийся коэффициент распределения фармакологического средства; Kd = Сткань / Скровь.Kd is the apparent distribution coefficient of the pharmacological agent; Kd = Cloth / Blood.
В исследовании распределения субстанции HAEE между кровью и периферическими тканями, как при назальном, так и при внутрибрюшинном введении, показано, что его максимальная концентрация зафиксирована в тканях почек мышей. Наименьшая концентрация субстанции HAEE отмечена в жировой ткани сальника. Для всех исследуемых органов изменение концентрации HAEE во времени было пропорционально изменению его уровня в системном кровотоке. Также видно, что субстанция HAEE способна преодолевать гематоэнцефалический барьер – для ткани мозга кажущийся коэффициент распределения пептида HAEE при внутрибрюшинном введении имел значение Kd = 0,17, при назальном Kd = 0,13. In the study of the distribution of the HAEE substance between the blood and peripheral tissues, both during nasal and intraperitoneal administration, it was shown that its maximum concentration was recorded in the tissues of the kidneys of mice. The lowest concentration of the HAEE substance was found in the fatty tissue of the omentum. For all the studied organs, the change in the concentration of HAEE over time was proportional to the change in its level in the systemic circulation. It can also be seen that the HAEE substance is able to overcome the blood-brain barrier - for brain tissue, the apparent distribution coefficient of the HAEE peptide upon intraperitoneal administration was Kd = 0.17, with nasal Kd = 0.13.
Таким образом, приведенные примеры подтверждают, что введение композиции HAEE-Zn-HSA назально в форме спрея сохранениет биодоступность и длительность действия активной субстанции - пептида HAEE.Thus, the above examples confirm that nasal administration of the HAEE-Zn-HSA composition in the form of a spray will preserve the bioavailability and duration of action of the active substance - the HAEE peptide.
ПРИМЕР 3. Сравнительный анализ влияния композиции HAEE-Zn-HSA, представленной в инъекционной и назальной форме, на когнитивные функции экспериментальных животных.EXAMPLE 3. Comparative analysis of the effect of the HAEE-Zn-HSA composition, presented in injection and nasal form, on the cognitive functions of experimental animals.
Для сравнительной оценки влияния HAEE и фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA на характеристики памяти и обучения экспериментальных животных была использована стандартная методика оценки пространственной памяти в водном лабиринте Морриса, метод Т-образного водного лабиринта и тест моделирования страха.For a comparative assessment of the effect of HAEE and the pharmaceutical composition HAEE-Zn-HSA on the memory and learning characteristics of experimental animals, the standard method for assessing spatial memory in the Morris water maze, the T-shaped water maze method, and the fear modeling test were used.
Были использованы пять групп семимесячных мышей:Five groups of seven-month-old mice were used:
- мыши линии «App/PSI», подверженные болезни Альцгеймера и не получающие лечение (N «intact» = 10 голов) (группа 1),- mice of the "App / PSI" line, prone to Alzheimer's disease and not receiving treatment (N "intact" = 10 heads) (group 1),
- мыши линии «App/PSI» (N «HAEE» = 10 голов), которым вводили препарат HAEE внутривенно в дозе 50 мкг/кг три раза - в возрасте 4, 5 и 6 месяцев перед началом эксперимента) (группа 2),- mice of the "App/PSI" line (N "HAEE" = 10 heads), which were injected with the HAEE preparation intravenously at a dose of 50 μg/kg three times - at the age of 4, 5 and 6 months before the start of the experiment) (group 2),
- мыши линии «App/PSI» (N «HAEE-Zn-HSA» = 10 голов); которым вводили композицию HAEE-Zn-HSA внутривенно в дозе 50 мкг/кг три раза - в возрасте 4, 5 и 6 месяцев перед началом эксперимента) (группа 3), - mice of the "App/PSI" line (N "HAEE-Zn-HSA" = 10 heads); who were injected with the composition HAEE-Zn-HSA intravenously at a dose of 50 μg/kg three times - at the age of 4, 5 and 6 months before the start of the experiment) (group 3),
- мыши линии «App/PSI» (N «HAEE-Zn-HSA» = 10 голов); которым вводили композицию HAEE-Zn-HSA назально в дозе 50 мкг/кг три раза - в возрасте 4, 5 и 6 месяцев перед началом эксперимента) (группа 4), - mice of the "App/PSI" line (N "HAEE-Zn-HSA" = 10 heads); who were administered the composition HAEE-Zn-HSA nasally at a dose of 50 μg/kg three times - at the age of 4, 5 and 6 months before the start of the experiment) (group 4),
- контрольные мыши дикого типа (N «wt» = 10 голов) (группа 5).- wild-type control mice (N "wt" = 10 heads) (group 5).
Пример 3.1. Водный лабиринт МоррисаExample 3.1. Morris water maze
Водный лабиринт Морриса является классическим инструментом для оценки пространственной памяти, зависящей от функции гиппокампа. Важно отметить, что именно в гиппокампе у пациентов при болезни Альцгеймера и у трансгенных мышей линии «App/PSI» агрессивно развивается церебральный амилоидоз.The Morris water maze is a classic tool for assessing hippocampal function dependent spatial memory. It is important to note that cerebral amyloidosis aggressively develops in the hippocampus of patients with Alzheimer's disease and in App/PSI transgenic mice.
Результаты анализа пространственной памяти животных, продемонстрировали значительную разницу между интактными и инъектированными мышами линии «App/PSI». Данные представлены в таблице 5 и на фигуре 1.The results of the analysis of the spatial memory of animals demonstrated a significant difference between intact and injected mice of the App/PSI line. The data are presented in table 5 and figure 1.
При назальном использовании композиции HAEE-Zn-HSA эффект улучшения когнитивных функций сопоставим с эффектом при внутривенных инъекциях указанной композиции и даже несколько лучше (группа 3 и группа 4), при этом заметно улучшен по сравнению с введением препарата HAEE (группа 2). Таким образом, фармацевтическая композиция HAEE-Zn-HSA сохраняет эффективность терапевтического действия пептида HAEE при назальном введении.With nasal use of the HAEE-Zn-HSA composition, the effect of improving cognitive functions is comparable to the effect of intravenous injections of this composition and even slightly better (
Пример 3.2.Example 3.2.
Установка "Т-лабиринт" позволяет исследовать рабочую память грызунов, лежащую в основе поведения чередования рукавов (спонтанного или подкрепленного) и чувствительную к дисфункции септо-гиппокампальной системы. Водный вариант теста позволяет избежать влияния обонятельных меток, оставляемых животными, и не требует пищевого подкрепления. Он сочетает в себе преимущества "сухого" Т-лабиринта и теста Морриса.The "T-maze" setup allows us to study the working memory of rodents, which underlies the behavior of alternating sleeves (spontaneous or reinforced) and is sensitive to dysfunction of the septo-hippocampal system. The aqueous version of the test avoids the influence of olfactory marks left by animals and does not require food reinforcement. It combines the advantages of the "dry" T-maze and the Morris test.
Результаты Т-образного водного лабиринта также подтверждают эффективность композиции HAEE-Zn-HSA, как в инъекционной форме, так и в форме спрея. Причем введение композиции в форме назального спрея (группа 4) также как и в предыдущем примере показывает несколько лучший эффект по сравнению с введением композиции HAEE-Zn-HSA в инъекционной форме (группа 3). Обе формы показывают свою эффективность по сравнению с введением препарата HAEE (группа 2) и значительно превосходят группу интактных животных. Данные представлены в таблице 6 и на фигуре 2.The results of the T-shaped water maze also confirm the efficacy of the HAEE-Zn-HSA formulation, both in injectable and spray form. Moreover, the introduction of the composition in the form of a nasal spray (group 4), as well as in the previous example, shows a slightly better effect compared to the introduction of the HAEE-Zn-HSA composition in the injection form (group 3). Both forms show their effectiveness in comparison with the introduction of the HAEE preparation (group 2) and significantly outperform the group of intact animals. The data are presented in table 6 and figure 2.
Пример 3.3Example 3.3
Тест «моделирование страха» проводят в течение 3-х дней. В первый, тренировочный день, каждое животное помещают в экспериментальную установку с металлической решёткой на полу, и дают возможность свободно исследовать обстановку в течение 120 секунд. В последние 2 секунды теста на решётку подают электрический импульс. Спустя 24 часа ( на 1 день тестирования) животное помещают в ту же установку и регистрируют процент времени, проведённого животным в состоянии замирания (оцепенения) в течение 180 секунд, затем животное оставляли в установке на дополнительные 7 минут, не подавая на решётку электрический импульс. Спустя ещё 24 часа (на 2 день тестирования) животное помещали в экспериментальную установку и в течение 180 секунд измеряли процент времени, проведённого в состоянии замирания (оцепенения).[Strekalova T. et al., 2018]. The "fear modeling" test is carried out for 3 days. On the first day of training, each animal is placed in an experimental setup with a metal grate on the floor and allowed to freely explore the environment for 120 seconds. In the last 2 seconds of the test, an electrical impulse is applied to the grid. After 24 hours (on
Замирания являются формой реакции животных на воздействие аверсивного стимула, которым в данном тесте являлся электрический разряд, а время, проведённое животным в состоянии замирания, отражало формирование памяти у животных на контекст, в котором происходило воздействие данного аверсивного стимула. На второй день исследования, после воздействия стимула, мыши 2,3,4 и 5 групп проводили достоверно меньшее время в состоянии замирания по сравнению с животными 1 группы, что указывает на формирование рефлекса долговременной памяти у групп 2,3,4 и 5. (фигура 3).Freezes are a form of animal response to the impact of an aversive stimulus, which in this test was an electric discharge, and the time spent by the animal in a state of freezing reflected the formation of memory in animals to the context in which the impact of this aversive stimulus occurred. On the second day of the study, after exposure to the stimulus, mice of
Во всех поведенческих тестах видна заметная разница между интактными животными и животными из групп экспериментов. Суммарное улучшение когнитивных функций трех экспериментов между первой и четвертой группами составляет 2,84 раза. Эффективность фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA( группы 3, 4) по сравнению с группой 2, которой вводили чистый пептид HAEE, выше в 1,39 раза. In all behavioral tests, a noticeable difference is seen between intact animals and animals from the experimental groups. The total improvement in cognitive functions of the three experiments between the first and fourth groups is 2.84 times. The effectiveness of the pharmaceutical composition HAEE-Zn-HSA (
Эксперименты показывают, что использование композиции HAEE-Zn-HSA в форме назального спрея позволяет повысить удобство введения наряду с сохранением биодоступности и длительности действия активной субстанции - пептида HAEE, а также когнитивных функций у экспериментальных животных по сравнению с внутривенным введением указанной композиции.Experiments show that the use of the HAEE-Zn-HSA composition in the form of a nasal spray makes it possible to increase the convenience of administration along with maintaining the bioavailability and duration of action of the active substance - the HAEE peptide, as well as cognitive functions in experimental animals compared with intravenous administration of this composition.
Таким образом, поставленная задача изобретения по расширению арсенала способов лечения нейродегенеративных заболеваний с использованием композиции HAEE-Zn-HSA решена.Thus, the task of the invention to expand the arsenal of methods for the treatment of neurodegenerative diseases using the HAEE-Zn-HSA composition is solved.
Технический результат – повышение удобства введения композиции HAEE-Zn-HSA наряду с сохранением биодоступности и длительности действия активной субстанции - пептида HAEE, а также улучшения когнитивных функций у экспериментальных животных достигнут.EFFECT: increasing the convenience of administering the HAEE-Zn-HSA composition along with maintaining the bioavailability and duration of action of the active substance - the HAEE peptide, as well as improving cognitive functions in experimental animals is achieved.
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2777871C1 true RU2777871C1 (en) | 2022-08-11 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2588143C2 (en) * | 2010-10-27 | 2016-06-27 | Кимонелла Венчерс Лтд | Peptide compound, useful for inhibiting formation of amyloid plaques |
| RU2709539C1 (en) * | 2019-08-15 | 2019-12-18 | Акционерное общество "Опытно-Экспериментальный завод "ВладМиВа" | Pharmaceutical composition based on haee peptide for treating neurodegenerative diseases |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2588143C2 (en) * | 2010-10-27 | 2016-06-27 | Кимонелла Венчерс Лтд | Peptide compound, useful for inhibiting formation of amyloid plaques |
| RU2709539C1 (en) * | 2019-08-15 | 2019-12-18 | Акционерное общество "Опытно-Экспериментальный завод "ВладМиВа" | Pharmaceutical composition based on haee peptide for treating neurodegenerative diseases |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ПРИВАЛОВА А. М. и др. Интраназальное введение - перспективный способ доставки лекарственных веществ в мозг // Нейрохимия. - 2012. - Т. 29. - N 2. - С. 93-105. GOYAL D. et al. Rationally Designed Peptides and Peptidomimetics as Inhibitors of Amyloid-β (Aβ) Aggregation: Potential Therapeutics of Alzheimer's Disease. ACS Comb Sci. 2017 Feb 13; 19(2): 55-80. doi: 10.1021/acscombsci.6b00116. Epub 2017, Jan 18. PMID: 28045249. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2709539C1 (en) | Pharmaceutical composition based on haee peptide for treating neurodegenerative diseases | |
| JP6286589B2 (en) | How to treat traumatic brain injury | |
| US20210069354A1 (en) | Method of transporting an agent across blood-brain, blood-cochlear or blood-cerebrospinal fluid barrier | |
| US20220062412A1 (en) | Treatment of alzheimer's disease (ad) with an aluminum salt | |
| US11857568B2 (en) | Treatment and prevention of Alzheimer's disease (AD) | |
| RU2777871C1 (en) | Method for treating neurodegenerative diseases | |
| JP6314135B2 (en) | Liposomes active in-vivo for neurodegenerative diseases (especially Alzheimer's disease) | |
| ES2247329T3 (en) | PREVENTION OF CELL DEATH USING SEGMENTS OF NEURAL FIBER PROTEINS. | |
| KR102388363B1 (en) | Treatment and prevention of alzheimer's disease (ad) | |
| US20170049844A1 (en) | Stable compositions of neuroactive peptides | |
| US20200289473A1 (en) | Methods of treating neurodegeneration | |
| EP1541166B1 (en) | Preventing cell death using segments of neural thread proteins | |
| AU2002302239B2 (en) | Method of preventing cell death using segments of neural thread proteins |