RU2777504C2 - Способы и композиции для лечения повреждения хряща и артрита - Google Patents
Способы и композиции для лечения повреждения хряща и артрита Download PDFInfo
- Publication number
- RU2777504C2 RU2777504C2 RU2019117884A RU2019117884A RU2777504C2 RU 2777504 C2 RU2777504 C2 RU 2777504C2 RU 2019117884 A RU2019117884 A RU 2019117884A RU 2019117884 A RU2019117884 A RU 2019117884A RU 2777504 C2 RU2777504 C2 RU 2777504C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- approximately
- asn
- gly
- glu
- ser
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 105
- 206010007710 Cartilage injury Diseases 0.000 title claims abstract description 69
- 206010003246 Arthritis Diseases 0.000 title claims abstract description 47
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 360
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 70
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 60
- 210000000845 Cartilage Anatomy 0.000 claims abstract description 24
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 210000001503 Joints Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 210000001612 Chondrocytes Anatomy 0.000 claims description 21
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 19
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 16
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 14
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims description 13
- 210000001185 Bone Marrow Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 6
- 206010071155 Autoimmune arthritis Diseases 0.000 claims description 5
- 206010048873 Traumatic arthritis Diseases 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 abstract 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 abstract 1
- 101710043744 ANGPTL3 Proteins 0.000 description 170
- 102100011247 ANGPTL3 Human genes 0.000 description 170
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 165
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 156
- ZSXJENBJGRHKIG-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Serine Chemical compound OCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 ZSXJENBJGRHKIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 104
- 108091005771 Peptidases Proteins 0.000 description 98
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 98
- 102000033147 ERVK-25 Human genes 0.000 description 97
- 229940024606 Amino Acids Drugs 0.000 description 95
- 229940021015 I.V. solution additive Amino Acids Drugs 0.000 description 95
- TUTIHHSZKFBMHM-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(3-amino-1-carboxy-3-oxopropyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O TUTIHHSZKFBMHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 86
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 84
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 84
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 84
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 83
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 82
- 108010044655 lysylproline Proteins 0.000 description 77
- FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N Asn-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FYRVDDJMNISIKJ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 76
- JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 74
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 74
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 70
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 64
- KTGFOCFYOZQVRJ-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-3-methylpentanoyl)amino]pentanedioic acid Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(O)=O KTGFOCFYOZQVRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 62
- CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 62
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 62
- BBIXOODYWPFNDT-CIUDSAMLSA-N Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O BBIXOODYWPFNDT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 57
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 52
- QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N pro glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 QLROSWPKSBORFJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 50
- UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N Ser-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O UJTZHGHXJKIAOS-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 49
- MDCTVRUPVLZSPG-BQBZGAKWSA-N His-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 MDCTVRUPVLZSPG-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 47
- CNPNWGHRMBQHBZ-ZKWXMUAHSA-N Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O CNPNWGHRMBQHBZ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 46
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 46
- MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 46
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 46
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 46
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 46
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 44
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 43
- ULXYQAJWJGLCNR-YUMQZZPRSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-(carboxymethylamino)-4-oxobutanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O ULXYQAJWJGLCNR-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 42
- OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OMLWNBVRVJYMBQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 42
- QJMCHPGWFZZRID-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O QJMCHPGWFZZRID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N Gly-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FUESBOMYALLFNI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 42
- HYXQKVOADYPQEA-CIUDSAMLSA-N Ile-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HYXQKVOADYPQEA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 42
- TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 42
- MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 42
- UWBDLNOCIDGPQE-UHFFFAOYSA-N Isoleucyl-Lysine Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCCN UWBDLNOCIDGPQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- DRCKHKZYDLJYFQ-UHFFFAOYSA-N Isoleucyl-Threonine Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(C)O)C(O)=O DRCKHKZYDLJYFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- SENJXOPIZNYLHU-IUCAKERBSA-N Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N SENJXOPIZNYLHU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 42
- MYTOTTSMVMWVJN-STQMWFEESA-N Lys-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MYTOTTSMVMWVJN-STQMWFEESA-N 0.000 description 42
- 108010047562 NGR peptide Proteins 0.000 description 42
- BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N Phe-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 BXNGIHFNNNSEOS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 42
- OHUXOEXBXPZKPT-STQMWFEESA-N Phe-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 OHUXOEXBXPZKPT-STQMWFEESA-N 0.000 description 42
- ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N Phe-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 42
- UEKYKRQIAQHOOZ-KBPBESRZSA-N Pro-Trp Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)[O-])C(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 UEKYKRQIAQHOOZ-KBPBESRZSA-N 0.000 description 42
- LDEBVRIURYMKQS-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CO LDEBVRIURYMKQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- NQIHMZLGCZNZBN-PXNSSMCTSA-N Trp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)N)C(O)=O)=CNC2=C1 NQIHMZLGCZNZBN-PXNSSMCTSA-N 0.000 description 42
- ONWMQORSVZYVNH-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Asparagine Chemical compound NC(=O)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 ONWMQORSVZYVNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 42
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 42
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 42
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 42
- 108010060199 cysteinylproline Proteins 0.000 description 42
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 42
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 42
- 108010000761 leucylarginine Proteins 0.000 description 42
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 42
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 42
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 42
- UKKNTTCNGZLJEX-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Serine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CO)C(O)=O UKKNTTCNGZLJEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 108010085325 histidylproline Proteins 0.000 description 41
- DXJZITDUDUPINW-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Asparagine Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O DXJZITDUDUPINW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 41
- PABVKUJVLNMOJP-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(1-carboxy-2-sulfanylethyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O PABVKUJVLNMOJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N Glu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 40
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 40
- NIKBMHGRNAPJFW-UHFFFAOYSA-N Histidinyl-Arginine Chemical compound NC(=N)NCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 NIKBMHGRNAPJFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 39
- SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N Asn-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SONUFGRSSMFHFN-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 38
- AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N Lys-Pro Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 38
- GVUVRRPYYDHHGK-UHFFFAOYSA-N Prolyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C1CCCN1 GVUVRRPYYDHHGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- MRVYVEQPNDSWLH-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Valine Chemical compound CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O MRVYVEQPNDSWLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N 0.000 description 37
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 37
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 37
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(1-carboxy-2-phenylethyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 36
- 210000003127 Knee Anatomy 0.000 description 36
- AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 AFWBWPCXSWUCLB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 36
- KAFKKRJQHOECGW-JCOFBHIZSA-N Thr-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 KAFKKRJQHOECGW-JCOFBHIZSA-N 0.000 description 36
- LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)=CNC2=C1 LYMVXFSTACVOLP-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 36
- DZHDVYLBNKMLMB-ZFWWWQNUSA-N Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 DZHDVYLBNKMLMB-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 36
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 36
- CPMKYMGGYUFOHS-FSPLSTOPSA-N Asp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CPMKYMGGYUFOHS-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 35
- 108010045269 tryptophyltryptophan Proteins 0.000 description 35
- 230000002648 chondrogenic Effects 0.000 description 33
- QXRNAOYBCYVZCD-BQBZGAKWSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-aminopropanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QXRNAOYBCYVZCD-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 31
- SNFUTDLOCQQRQD-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-amino-4-carboxybutanoyl)amino]-3-methylpentanoic acid Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SNFUTDLOCQQRQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- XBZOQGHZGQLEQO-IUCAKERBSA-N Lys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN XBZOQGHZGQLEQO-IUCAKERBSA-N 0.000 description 31
- JSLGXODUIAFWCF-UHFFFAOYSA-N Arginyl-Asparagine Chemical compound NC(N)=NCCCC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O JSLGXODUIAFWCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 108010077435 glycyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 description 30
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 30
- 210000001188 Cartilage, Articular Anatomy 0.000 description 29
- YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N Gly-His Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CN=CN1 YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N 0.000 description 28
- CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 CZVQSYNVUHAILZ-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 28
- WKXVAXOSIPTXEC-UHFFFAOYSA-N Isoleucyl-Aspartate Chemical compound CCC(C)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(O)=O WKXVAXOSIPTXEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- JYOAXOMPIXKMKK-UHFFFAOYSA-N Leucyl-Glutamine Chemical compound CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCC(N)=O JYOAXOMPIXKMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 28
- DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 28
- XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 2-[[(2S)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 27
- FFMIYIMKQIMDPK-BQBZGAKWSA-N Asn-His Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 FFMIYIMKQIMDPK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 27
- ZARXTZFGQZBYFO-JQWIXIFHSA-N Asp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 ZARXTZFGQZBYFO-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 27
- KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 27
- GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 27
- IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N Ala-Ser Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 26
- KHTIUAKJRUIEMA-HOUAVDHOSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 KHTIUAKJRUIEMA-HOUAVDHOSA-N 0.000 description 25
- BXLYSRPHVMCOPS-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CO BXLYSRPHVMCOPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- SBMNPABNWKXNBJ-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CO SBMNPABNWKXNBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 24
- HKTRDWYCAUTRRL-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[[1-carboxy-2-(1H-imidazol-5-yl)ethyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 HKTRDWYCAUTRRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- HXWUJJADFMXNKA-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O HXWUJJADFMXNKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- VGRHZPNRCLAHQA-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Asparagine Chemical compound OC(=O)CC(N)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O VGRHZPNRCLAHQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N Pro-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 23
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 23
- IIFDPDVJAHQFSR-WHFBIAKZSA-N Asn-Glu Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O IIFDPDVJAHQFSR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 22
- KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N Asn-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O KLKHFFMNGWULBN-VKHMYHEASA-N 0.000 description 22
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 22
- DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 22
- OMSMPWHEGLNQOD-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Phenylalanine Chemical compound NC(=O)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OMSMPWHEGLNQOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- ZSRSLWKGWFFVCM-WDSKDSINSA-N Cys-Pro Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZSRSLWKGWFFVCM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 22
- WYVKPHCYMTWUCW-UHFFFAOYSA-N Cysteinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CS WYVKPHCYMTWUCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 22
- YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N Glu-Tyr Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 22
- PFMUCCYYAAFKTH-YFKPBYRVSA-N Gly-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN PFMUCCYYAAFKTH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 22
- VYZAGTDAHUIRQA-WHFBIAKZSA-N L-alanyl-L-glutamic acid Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O VYZAGTDAHUIRQA-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 22
- ZUKPVRWZDMRIEO-VKHMYHEASA-N L-cysteinylglycine zwitterion Chemical compound SC[C@H]([NH3+])C(=O)NCC([O-])=O ZUKPVRWZDMRIEO-VKHMYHEASA-N 0.000 description 22
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 22
- IGRMTQMIDNDFAA-UHFFFAOYSA-N Lysyl-Histidine Chemical compound NCCCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 IGRMTQMIDNDFAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- UQTNIFUCMBFWEJ-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Asparagine Chemical compound CC(O)C(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O UQTNIFUCMBFWEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- LUMXICQAOKVQOB-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)C(C)O LUMXICQAOKVQOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- KBUBZAMBIVEFEI-UHFFFAOYSA-N Tryptophyl-Histidine Chemical compound C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 KBUBZAMBIVEFEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- NLKUJNGEGZDXGO-XVKPBYJWSA-N Tyr-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NLKUJNGEGZDXGO-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 22
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 description 22
- QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 22
- AOLHUMAVONBBEZ-STQMWFEESA-N Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AOLHUMAVONBBEZ-STQMWFEESA-N 0.000 description 22
- MFEVVAXTBZELLL-UHFFFAOYSA-N Tyrosyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 MFEVVAXTBZELLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine zwitterion Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N Glu-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 21
- YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 21
- LZLREEUGSYITMX-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(CO)N)C(O)=O)=CNC2=C1 LZLREEUGSYITMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 21
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 21
- RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N Asn-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RJUHZPRQRQLCFL-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 20
- SJUXYGVRSGTPMC-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Alanine Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)C(N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- NPDLYUOYAGBHFB-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Arginine Chemical compound NC(=O)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N NPDLYUOYAGBHFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- TWXZVVXRRRRSLT-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Cysteine Chemical compound NC(=O)CC(N)C(=O)NC(CS)C(O)=O TWXZVVXRRRRSLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 20
- IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 20
- IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 20
- AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N 0.000 description 20
- XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N Gly-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N 0.000 description 20
- MMFKFJORZBJVNF-UWVGGRQHSA-N His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 MMFKFJORZBJVNF-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 20
- HTOOKGDPMXSJSY-STQMWFEESA-N His-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 HTOOKGDPMXSJSY-STQMWFEESA-N 0.000 description 20
- WRPDZHJNLYNFFT-UHFFFAOYSA-N Histidinyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 WRPDZHJNLYNFFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 20
- PESQCPHRXOFIPX-RYUDHWBXSA-N Met-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 20
- JXWLMUIXUXLIJR-QWRGUYRKSA-N Phe-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 JXWLMUIXUXLIJR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 20
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 20
- FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FELJDCNGZFDUNR-WDSKDSINSA-N 0.000 description 20
- PWIQCLSQVQBOQV-AAEUAGOBSA-N Trp-Glu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 PWIQCLSQVQBOQV-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 20
- 108010029384 tryptophyl-histidine Proteins 0.000 description 19
- JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N Asp-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O JHFNSBBHKSZXKB-VKHMYHEASA-N 0.000 description 18
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 17
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 17
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 16
- MPZWMIIOPAPAKE-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[[1-carboxy-4-(diaminomethylideneamino)butyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N MPZWMIIOPAPAKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N His-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 VHOLZZKNEBBHTH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 15
- HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N 0.000 description 15
- JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N Pro-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]1CCC[NH2+]1 JQOHKCDMINQZRV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 15
- -1 amino acids amino acids Chemical class 0.000 description 15
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 15
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 15
- XMAUFHMAAVTODF-STQMWFEESA-N (2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 XMAUFHMAAVTODF-STQMWFEESA-N 0.000 description 14
- HSPSXROIMXIJQW-BQBZGAKWSA-N Asp-His Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 HSPSXROIMXIJQW-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 14
- QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N L-lysyl-L-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QOOWRKBDDXQRHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 14
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 13
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 13
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 13
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 13
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 12
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical group CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 12
- GLUBLISJVJFHQS-VIFPVBQESA-N Phe-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 GLUBLISJVJFHQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 12
- PBOUVYGPDSARIS-IUCAKERBSA-N Met-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C PBOUVYGPDSARIS-IUCAKERBSA-N 0.000 description 11
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 11
- 229940019746 Antifibrinolytic amino acids Drugs 0.000 description 10
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 10
- QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N Thr-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 10
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 10
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 9
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 8
- IWIANZLCJVYEFX-RYUDHWBXSA-N Pro-Phe Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]1NCCC1)C1=CC=CC=C1 IWIANZLCJVYEFX-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 8
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 8
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 8
- 206010060820 Joint injury Diseases 0.000 description 7
- FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN FMIIKPHLJKUXGE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 7
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 7
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 7
- 229960002885 Histidine Drugs 0.000 description 6
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 6
- 108091006822 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 206010022114 Injury Diseases 0.000 description 6
- 229960004452 Methionine Drugs 0.000 description 6
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 6
- JMCOUWKXLXDERB-WMZOPIPTSA-N Phe-Trp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 JMCOUWKXLXDERB-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 6
- LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N Ser-Asn Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 6
- OYOQKMOWUDVWCR-RYUDHWBXSA-N Tyr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OYOQKMOWUDVWCR-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 6
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 6
- 229960003767 Alanine Drugs 0.000 description 5
- XNSKSTRGQIPTSE-UHFFFAOYSA-N Arginyl-Threonine Chemical compound CC(O)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCCNC(N)=N XNSKSTRGQIPTSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000005720 Glutathione Transferase family Human genes 0.000 description 5
- 108010070675 Glutathione Transferase family Proteins 0.000 description 5
- 229960002449 Glycine Drugs 0.000 description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- LNCFUHAPNTYMJB-IUCAKERBSA-N His-Pro Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CN=CN1 LNCFUHAPNTYMJB-IUCAKERBSA-N 0.000 description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 5
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 description 5
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 5
- IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N Thr-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 5
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 5
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 5
- 230000003899 glycosylation Effects 0.000 description 5
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 5
- WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- 210000000988 Bone and Bones Anatomy 0.000 description 4
- FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N L-serine Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- 210000002901 Mesenchymal Stem Cells Anatomy 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 210000001179 Synovial Fluid Anatomy 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 4
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000004059 degradation Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 102000037240 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 108091022076 maltose binding proteins Proteins 0.000 description 4
- 231100000062 no-observed-adverse-effect level Toxicity 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- QYLJIYOGHRGUIH-CIUDSAMLSA-N Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N QYLJIYOGHRGUIH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- KWBQPGIYEZKDEG-FSPLSTOPSA-N Asn-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O KWBQPGIYEZKDEG-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 3
- 229960001230 Asparagine Drugs 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 3
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N Glu-Pro Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O YBTCBQBIJKGSJP-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 241000208202 Linaceae Species 0.000 description 3
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 3
- UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 3
- ZFOMKMMPBOQKMC-KXUCPTDWSA-N Pyrrolysine Chemical compound C[C@@H]1CC=N[C@H]1C(=O)NCCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O ZFOMKMMPBOQKMC-KXUCPTDWSA-N 0.000 description 3
- 229940055619 Selenocysteine Drugs 0.000 description 3
- ZKZBPNGNEQAJSX-REOHCLBHSA-N Selenocysteine Chemical compound [SeH]C[C@H](N)C(O)=O ZKZBPNGNEQAJSX-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N Selenocysteine Natural products [Se]C[C@@H](N)C(O)=O FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N 0.000 description 3
- LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- BECPPKYKPSRKCP-ZDLURKLDSA-N Thr-Glu Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O BECPPKYKPSRKCP-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 3
- PEEAINPHPNDNGE-JQWIXIFHSA-N Trp-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 PEEAINPHPNDNGE-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 3
- 229960004799 Tryptophan Drugs 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 3
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 description 3
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 3
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 3
- 230000000670 limiting Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 3
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 3
- 235000016491 selenocysteine Nutrition 0.000 description 3
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 3
- 230000000472 traumatic Effects 0.000 description 3
- BYBBFWIUCNTGJM-JEDNCBNOSA-N (2S)-6-amino-2-(carboxyamino)hexanoic acid;2,3-dihydro-1H-pyrrole Chemical compound C1CC=CN1.NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(O)=O BYBBFWIUCNTGJM-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- 101000225334 ANGPTL3 Proteins 0.000 description 2
- QCWJKJLNCFEVPQ-WHFBIAKZSA-N Asn-Gln Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O QCWJKJLNCFEVPQ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- 229960005261 Aspartic Acid Drugs 0.000 description 2
- 206010003816 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 206010007709 Cartilage disease Diseases 0.000 description 2
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 2
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 2
- 229960002433 Cysteine Drugs 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N D-Mannitol Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 229940012952 Fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- 229940019698 Fibrinogen containing hemostatics Drugs 0.000 description 2
- 229960002989 Glutamic Acid Drugs 0.000 description 2
- 229960002743 Glutamine Drugs 0.000 description 2
- CLSDNFWKGFJIBZ-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Lysine Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O CLSDNFWKGFJIBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036499 Half live Effects 0.000 description 2
- 229960000310 ISOLEUCINE Drugs 0.000 description 2
- WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N Ile-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 WMDZARSFSMZOQO-DRZSPHRISA-N 0.000 description 2
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 2
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N Isoniazid Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100004459 KLK11 Human genes 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-2-aminohexanoic acid zwitterion Chemical group CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 125000000631 L-cysteino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])*)C([H])([H])S[H] 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- OAPNERBWQWUPTI-YUMQZZPRSA-N Lys-Gln Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O OAPNERBWQWUPTI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-YOLKTULGSA-N Maltose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@H]1CO)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-YOLKTULGSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 108091005503 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 2
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 2
- 229960005190 Phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229940068968 Polysorbate 80 Drugs 0.000 description 2
- 229960002429 Proline Drugs 0.000 description 2
- 206010039073 Rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 101710006487 SSE2 Proteins 0.000 description 2
- 101710043164 Segment-4 Proteins 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 2
- 229940094937 Thioredoxin Drugs 0.000 description 2
- 229920001949 Transfer RNA Polymers 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N Trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 229960004441 Tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 101700038759 VP1 Proteins 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 101700018328 ccdB Proteins 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 230000001809 detectable Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002349 favourable Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 2
- 101700005460 hemA Proteins 0.000 description 2
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 2
- 125000003372 histidine group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 2
- 102000025529 human ANGPTL3 protein Human genes 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 2
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 2
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 2
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 2
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic Effects 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 108060007849 sprT Proteins 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 102000002933 thioredoxin family Human genes 0.000 description 2
- 108060008226 thioredoxin family Proteins 0.000 description 2
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 2
- 108010071097 threonyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 231100000730 tolerability Toxicity 0.000 description 2
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- XITLYYAIPBBHPX-UHFFFAOYSA-N γ-glutamyl-Isoleucine Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(N)=O XITLYYAIPBBHPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2R,3R,4S,5R,6S)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- NKCXQMYPWXSLIZ-PSRDDEIFSA-N (2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-5-amino-2-[[2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-m Chemical compound O=C([C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NKCXQMYPWXSLIZ-PSRDDEIFSA-N 0.000 description 1
- NEMHIKRLROONTL-QMMMGPOBSA-N (2S)-2-azaniumyl-3-(4-azidophenyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 NEMHIKRLROONTL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- HFVPBQOSFYXKQZ-DTWKUNHWSA-N (2S)-2-azaniumyl-6-[[(2R)-3,4-dihydro-2H-pyrrole-2-carbonyl]amino]hexanoate Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCCCNC(=O)[C@H]1CCC=N1 HFVPBQOSFYXKQZ-DTWKUNHWSA-N 0.000 description 1
- PMMURAAUARKVCB-YLZRJQLMSA-N (4R,5R)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,4,5-triol Chemical compound OCC1OC(O)C[C@@H](O)[C@H]1O PMMURAAUARKVCB-YLZRJQLMSA-N 0.000 description 1
- ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N (4S)-4-amino-5-[[(2S,3S)-1-[[(1S)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O ZHNHJYYFCGUZNQ-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- 229920000160 (ribonucleotides)n+m Polymers 0.000 description 1
- PMMURAAUARKVCB-CERMHHMHSA-N 2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)C[C@@H](O)[C@@H]1O PMMURAAUARKVCB-CERMHHMHSA-N 0.000 description 1
- ZVAYUUUQOCPZCZ-UHFFFAOYSA-N 4-(diethoxyphosphorylmethyl)aniline Chemical compound CCOP(=O)(OCC)CC1=CC=C(N)C=C1 ZVAYUUUQOCPZCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MGHKSHCBDXNTHX-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-[(4-amino-1-carboxy-4-oxobutyl)amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O MGHKSHCBDXNTHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000643 Adenine Drugs 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Natural products NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 102000009840 Angiopoietins Human genes 0.000 description 1
- 108010009906 Angiopoietins Proteins 0.000 description 1
- 210000001737 Ankle Joint Anatomy 0.000 description 1
- HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N Asn-Asp Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HZYFHQOWCFUSOV-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- GSMPSRPMQQDRIB-WHFBIAKZSA-N Asp-Gln Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O GSMPSRPMQQDRIB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- IQTUDDBANZYMAR-UHFFFAOYSA-N Asparaginyl-Methionine Chemical compound CSCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(N)=O IQTUDDBANZYMAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZVDPYSVOZFINEE-UHFFFAOYSA-N Aspartyl-Leucine Chemical compound CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O ZVDPYSVOZFINEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004900 C-terminal fragment Anatomy 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- UHBYWPGGCSDKFX-UHFFFAOYSA-N Carboxyglutamic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC(C(O)=O)C(O)=O UHBYWPGGCSDKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 206010061762 Chondropathy Diseases 0.000 description 1
- 241001112695 Clostridiales Species 0.000 description 1
- 229920002676 Complementary DNA Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 description 1
- 102000008745 EC 6.1.1.- Human genes 0.000 description 1
- 108030004302 EC 6.1.1.- Proteins 0.000 description 1
- 208000002197 Ehlers-Danlos Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000001513 Elbow Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 Endothelial Cells Anatomy 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 210000003108 Foot Joints Anatomy 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N Gln-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LOJYQMFIIJVETK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- OWOFCNWTMWOOJJ-WDSKDSINSA-N Gln-Glu Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OWOFCNWTMWOOJJ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SSHIXEILTLPAQT-UHFFFAOYSA-N Glutaminyl-Aspartate Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CC(O)=O)C(O)=O SSHIXEILTLPAQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N Glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 229960003180 Glutathione Drugs 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- KRBMQYPTDYSENE-BQBZGAKWSA-N His-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 KRBMQYPTDYSENE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 238000006736 Huisgen cycloaddition reaction Methods 0.000 description 1
- 208000006572 Human Influenza Diseases 0.000 description 1
- 229960002591 Hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 102000018358 Immunoglobulins Human genes 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 206010022000 Influenza Diseases 0.000 description 1
- 229940102223 Injectable Solution Drugs 0.000 description 1
- 206010061246 Intervertebral disc degeneration Diseases 0.000 description 1
- 208000002658 Intra-Articular Fractures Diseases 0.000 description 1
- 208000009883 Joint Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine zwitterion Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-YGVKFDHGSA-N L-methionine S-oxide Chemical group CS(=O)CC[C@H](N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-YGVKFDHGSA-N 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 1
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N Leu-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- 206010065433 Ligament rupture Diseases 0.000 description 1
- 210000003041 Ligaments Anatomy 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 description 1
- ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- JPNRPAJITHRXRH-UHFFFAOYSA-N Lysyl-Asparagine Chemical compound NCCCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC(N)=O JPNRPAJITHRXRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100015262 MYC Human genes 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010072970 Meniscus injury Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-XIXRPRMCSA-N Mesotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-XIXRPRMCSA-N 0.000 description 1
- 208000008466 Metabolic Disease Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-O Methylsulfide anion Chemical compound [SH2+]C LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 125000000534 N(2)-L-lysino group Chemical class [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])N([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- SSURCGGGQUWIHH-UHFFFAOYSA-N NNON Chemical compound NNON SSURCGGGQUWIHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCWXELXMIBXGTH-QMMMGPOBSA-N O(4)-phospho-L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 DCWXELXMIBXGTH-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000007656 Osteochondritis Dissecans Diseases 0.000 description 1
- 241000283898 Ovis Species 0.000 description 1
- 102000035443 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O Phosphocholine Chemical compound C[N+](C)(C)CCOP(O)(O)=O YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N Phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229920001451 Polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N Raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 102000007312 Recombinant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010033725 Recombinant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000036045 Renal clearance Effects 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 101700030874 SOX9 Proteins 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- DUIOPKIIICUYRZ-UHFFFAOYSA-N Semicarbazide Chemical compound NNC(N)=O DUIOPKIIICUYRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- RZEQTVHJZCIUBT-UHFFFAOYSA-N Serinyl-Arginine Chemical compound OCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N RZEQTVHJZCIUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000002832 Shoulder Anatomy 0.000 description 1
- 208000006045 Spondylarthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010052775 Spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010043234 Tendon disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002435 Tendons Anatomy 0.000 description 1
- WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N Thr-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N 0.000 description 1
- CKHWEVXPLJBEOZ-UHFFFAOYSA-N Threoninyl-Valine Chemical compound CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)C(C)O CKHWEVXPLJBEOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 210000002700 Urine Anatomy 0.000 description 1
- UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- BNQVUHQWZGTIBX-IUCAKERBSA-N Val-His Chemical compound CC(C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CN=CN1 BNQVUHQWZGTIBX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- GVRKWABULJAONN-UHFFFAOYSA-N Valyl-Threonine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NC(C(C)O)C(O)=O GVRKWABULJAONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000707 Wrist Anatomy 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N Xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 Xylitol Drugs 0.000 description 1
- AMTCKRZHSPPHSE-UHFFFAOYSA-N [N-]=[N+]=NON=[N+]=[N-] Chemical compound [N-]=[N+]=NON=[N+]=[N-] AMTCKRZHSPPHSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005299 abrasion Methods 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 1
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 230000001058 adult Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic Effects 0.000 description 1
- 229920002892 amber Polymers 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 description 1
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 description 1
- 229960000070 antineoplastic Monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000000089 arabinosyl group Chemical class C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO1)* 0.000 description 1
- 125000000511 arginine group Chemical class N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 125000004429 atoms Chemical group 0.000 description 1
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide Chemical compound [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 150000001615 biotins Chemical class 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atoms Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000022159 cartilage development Effects 0.000 description 1
- 230000003848 cartilage regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052803 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 238000005056 compaction Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative Effects 0.000 description 1
- 201000002193 degenerative disc disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- PWEGVZDXTQLFLQ-UHFFFAOYSA-N dioxidoboron Chemical compound [O-][B][O-] PWEGVZDXTQLFLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 102000034387 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006031 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N formamide Substances NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 201000002406 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- KGNSGRRALVIRGR-UHFFFAOYSA-N gln-tyr Chemical compound NC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KGNSGRRALVIRGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 125000000267 glycino group Chemical group [H]N([*])C([H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- 108010033719 glycyl-histidyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004394 hip joint Anatomy 0.000 description 1
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atoms Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000002361 ketogenic Effects 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 1
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating Effects 0.000 description 1
- 108091005593 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 229960000060 monoclonal antibodies Drugs 0.000 description 1
- 102000005614 monoclonal antibodies Human genes 0.000 description 1
- 108010045030 monoclonal antibodies Proteins 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive Effects 0.000 description 1
- 238000006053 organic reaction Methods 0.000 description 1
- 201000009859 osteochondrosis Diseases 0.000 description 1
- 230000036961 partial Effects 0.000 description 1
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N phosphine Chemical compound P XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000073 phosphorus hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229950004354 phosphorylcholine Drugs 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N precursor Substances N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003449 preventive Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000002278 reconstructive surgery Methods 0.000 description 1
- 239000003638 reducing agent Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 150000003354 serine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 108010048397 seryl-lysyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating Effects 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 201000009594 systemic scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N trans-L-hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N β-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к лечению артрита или повреждения хряща у субъекта-человека. Предложен способ лечения артрита или повреждения хряща у субъекта-человека, предусматривающий введение в сустав субъекта-человека внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 20-40 мг полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17. Также предложена композиция для применения в лечении артрита у субъекта-человека, содержащая приблизительно 20-40 мг полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, где полипептид вводится внутрисуставно. Изобретение может быть использовано при регенерации хряща, лечения повреждения суставов, например повреждения суставного хряща, или остеоартрита. 3 н. п. и 23 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл., 1 пр.
Description
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
Настоящая заявка содержит перечень последовательностей, который был подан в электронном виде в формате ASCII и включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Указанная ASCII-копия, созданная 26 октября 2017 года, имеет название PAT057513-WO-PCT_SL.txt и размер 95244 байта.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к способам и композициям для лечения повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) или артрита.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0001] Остеоартрит (ОА) представляет собой наиболее распространенное заболевание опорно-двигательной системы. В настоящее время им поражены примерно 40 миллионов американцев; согласно прогнозам в течение следующих двадцати лет это число возрастет до 60 миллионов в результате старения населения и увеличения продолжительности жизни, что сделает его четвертой по значимости причиной инвалидизации. ОА характеризуется медленным дегенеративным разрушением сустава, затрагивающим как суставной хрящ (содержащий клетки и матрикс, которые вырабатывают смазку и служат амортизатором для сустава), так и субхондральную кость, залегающую под суставным хрящом. ОА может считаться последствием различных этиологических факторов. Например, он может быть обусловлен аномальным биомеханическим стрессом или генетическими или приобретенными аномалиями суставного хряща или кости.
[0002] Повреждение сустава, например, острое поражение сустава, такое как разрыв мениска или связки, или внутрисуставной перелом, также может привести к артриту, например, к посттравматическому артриту. Поскольку суставной хрящ имеет ограниченную способность к восстановлению, даже небольшое невыявляемое повреждение зачастую может со временем ухудшиться и привести к возникновению ОА.
[0003] Хотя хирургические методики и регенеративная технология достигли некоторого прогресса в восстановлении хряща, замедлении дегенерации и улучшили восстановление повреждения сустава, например повреждения суставного хряща, существует постоянная потребность в улучшении композиций и способов регенерации хряща, лечения повреждения суставов, например повреждения суставного хряща, или ОА.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем изобретении предусмотрены способы и композиции для лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
В данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща у субъекта-человека путем введения в сустав субъекта-человека внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-200 мг полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO: 1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления у субъекта-человека имеется повреждение хряща. В некоторых вариантах осуществления у субъекта-человека имеется остеоартрит, травматический артрит или аутоиммунный артрит.
В некоторых вариантах осуществления аминокислота в полипептиде, которая соответствует положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнута делеции. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит аминокислотную последовательность, перечисленную в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления полипептид состоит из аминокислотной последовательности, перечисленной в таблице 1.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща у субъекта-человека путем введения в сустав субъекта-человека внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-200 мг полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща у субъекта-человека путем введения в сустав субъекта-человека внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-200 мг полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17.
В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2-100 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2-60 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 2-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 10-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 20-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 40-60 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 2 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 10 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 20 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 60 мг.
В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят в сустав субъекта в виде однократной инъекции. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят в сустав субъекта в виде многократных инъекций. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят раз в две недели в течение периода времени, достаточного для лечения артрита или повреждения хряща. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят раз в месяц в течение периода времени, достаточного для лечения артрита или повреждения хряща. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят раз в неделю в течение периода времени, достаточного для лечения артрита или повреждения хряща.
В некоторых вариантах осуществления способы дополнительно предусматривают осуществление хирургической процедуры на пораженном суставе у субъекта. Полипептид можно вводить до, во время или после хирургической процедуры.
В некоторых вариантах осуществления способы дополнительно предусматривают дополнительную процедуру. Например, полипептид или композицию можно вводить в сочетании с любым из стимуляции костного мозга, замены хряща, имплантации аутологичных хондроцитов (ACI) или имплантации индуцированных матриксом аутологичных хондроцитов (MACI). В некоторых вариантах осуществления полипептид или композицию можно вводить в сочетании с ACI.
Также в данном документе предусмотрены композиции, содержащие приблизительно 0,2-200 мг полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO: 1, для применения в лечении артрита или повреждения хряща у субъекта-человека, где полипептид вводят внутрисуставно. Артрит может представлять собой остеоартрит, травматический артрит или аутоиммунный артрит.
В некоторых вариантах осуществления аминокислота в полипептиде, которая соответствует положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнута делеции. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит аминокислотную последовательность, перечисленную в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления полипептид состоит из аминокислотной последовательности, перечисленной в таблице 1.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, содержащие приблизительно 0,2-200 мг полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17, для применения в лечении артрита или повреждения хряща у субъекта-человека, где полипептид вводят внутрисуставно. В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, содержащие приблизительно 0,2-200 мг полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17, для применения в лечении артрита или повреждения хряща у субъекта-человека, где полипептид вводят внутрисуставно.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, содержащие приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17, для применения в лечении артрита или повреждения хряща у субъекта-человека, где полипептид вводят внутрисуставно.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, содержащие приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17, для применения в лечении артрита или повреждения хряща у субъекта-человека, где полипептид вводят внутрисуставно.
Если не определено иное, все применяемые в данном документе технические и научные термины имеют то же значение, которое обычно понимают рядовые специалисты в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Хотя при осуществлении на практике настоящего изобретения можно применять способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в данном документе, ниже описаны подходящие способы и материалы. Все публикации, заявки на патенты, патенты и другие литературные источники, упомянутые в данном документе, включены посредством ссылки во всей своей полноте. В случае расхождений настоящее описание, включая определения, будет иметь преимущественную силу. Кроме того, материалы, способы и примеры являются исключительно иллюстративными и не предполагаются как ограничивающие.
Подробности одного или нескольких вариантов осуществления настоящего изобретения изложены в прилагаемых графических материалах и описании ниже. Другие признаки, цели и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из описания и графических материалов, а также из формулы изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
На ФИГ. 1 показан дизайн исследования для рандомизированного плацебо-контролируемого двойного слепого исследования первого применения препарата на человеке с однократной возрастающей дозой полипептида ANGPTL3 с SEQ ID NO: 17 у пациентов с первичным остеоартритом, у которых запланирована полная замена коленного сустава.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
В настоящем изобретении предусмотрены способы и композиции для лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
Определения
Специалист в данной области будет осознавать множество способов и материалов, аналогичных или эквивалентных описанным в данном документе, которые можно применять при осуществлении на практике настоящего изобретения. Следует отметить, что настоящее изобретение никоим образом не ограничено описанными способами и материалами.
[0004] Используемые в данном документе формы единственного числа включают отсылки к формам множественного числа, если контекст явно не предписывает иное.
Следует понимать, хотя это и не всегда прямо указано, что всем числовым обозначениям предшествует термин «приблизительно». Следовательно, если не указано противоположное, числовые параметры, изложенные в описании и формуле изобретения, представляют собой приблизительные величины, которые могут варьироваться в зависимости от требуемых свойств, которые должны быть получены согласно настоящему раскрытию. Термин «приблизительно», когда он касается измеряемого значения, подразумевают как охватывающий отклонения на +/-10%, более предпочтительно +/-5%, еще более предпочтительно +/-1% и еще более предпочтительно +/-0,1% от указанного значения. Например, термин «приблизительно», когда он касается рН, подразумевают как охватывающий отклонения на +/-0,3 от указанного значения рН.
[0005] "ANGPTL3" относится к ангиопоэтин-подобному белку 3, который является представителем семейства ангиопоэтин-подобных секретируемых факторов. Он экспрессируется преимущественно в печени и имеет характерную для ангиопоэтинов структуру, состоящую из сигнального пептида, N-терминального суперспирального домена (CCD) и С-терминального фибриноген (FBN)-подобного домена. Было показано, что ANGPTL3 связывает интегрины αV/β3, и для индукции адгезии эндотелиальных клеток и ангиогенеза in vivo было достаточно одного FBN-подобного домена (Camenisch et al., J. Biol. Chem. 277: 17281-17290, 2002). Эндогенный ANGPTL3 обычно расщепляется in vivo на амино-терминальный и карбокси-терминальный фрагменты.
[0006] Аминокислотная последовательность ANGPTL3 (номер доступа в GenBank NP_055310.1) приведена под SEQ ID NO: 1; а соответствующая ей полинуклеотидная последовательность приведена под SEQ ID NO: 2 (номер эталонной последовательности в NCBI NM_014495.3).
Препробелок ангиопоэтин-родственного белка 3 [Homo sapiens, NP_055310.1]
[0007] MFTIKLLLFIVPLVISSRIDQDNSSFDSLSPEPKSRFAMLDDVKILANGLLQLGHGLKDFVHKTKGQINDIFQKLNIFDQSFYDLSLQTSEIKEEEKELRRTTYKLQVKNEEVKNMSLELNSKLESLLEEKILLQQKVKYLEEQLTNLIQNQPETPEHPEVTSLKTFVEKQDNSIKDLLQTVEDQYKQLNQQHSQIKEIENQLRRTSIQEPTEISLSSKPRAPRTTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAKSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE (SEQ ID NO: 1)
[0008] Ангиопоэтин-подобный белок 3 Homo sapiens (ANGPTL3), кДНК [NM_014495.3]
--->
1 atatatagag ttaagaagtc taggtctgct tccagaagaa aacagttcca cgttgcttga
61 aattgaaaat caagataaaa atgttcacaa ttaagctcct tctttttatt gttcctctag
121 ttatttcctc cagaattgat caagacaatt catcatttga ttctctatct ccagagccaa
181 aatcaagatt tgctatgtta gacgatgtaa aaattttagc caatggcctc cttcagttgg
241 gacatggtct taaagacttt gtccataaga cgaagggcca aattaatgac atatttcaaa
301 aactcaacat atttgatcag tctttttatg atctatcgct gcaaaccagt gaaatcaaag
361 aagaagaaaa ggaactgaga agaactacat ataaactaca agtcaaaaat gaagaggtaa
421 agaatatgtc acttgaactc aactcaaaac ttgaaagcct cctagaagaa aaaattctac
481 ttcaacaaaa agtgaaatat ttagaagagc aactaactaa cttaattcaa aatcaacctg
541 aaactccaga acacccagaa gtaacttcac ttaaaacttt tgtagaaaaa caagataata
601 gcatcaaaga ccttctccag accgtggaag accaatataa acaattaaac caacagcata
661 gtcaaataaa agaaatagaa aatcagctca gaaggactag tattcaagaa cccacagaaa
721 tttctctatc ttccaagcca agagcaccaa gaactactcc ctttcttcag ttgaatgaaa
781 taagaaatgt aaaacatgat ggcattcctg ctgaatgtac caccatttat aacagaggtg
841 aacatacaag tggcatgtat gccatcagac ccagcaactc tcaagttttt catgtctact
901 gtgatgttat atcaggtagt ccatggacat taattcaaca tcgaatagat ggatcacaaa
961 acttcaatga aacgtgggag aactacaaat atggttttgg gaggcttgat ggagaatttt
1021 ggttgggcct agagaagata tactccatag tgaagcaatc taattatgtt ttacgaattg
1081 agttggaaga ctggaaagac aacaaacatt atattgaata ttctttttac ttgggaaatc
1141 acgaaaccaa ctatacgcta catctagttg cgattactgg caatgtcccc aatgcaatcc
1201 cggaaaacaa agatttggtg ttttctactt gggatcacaa agcaaaagga cacttcaact
1261 gtccagaggg ttattcagga ggctggtggt ggcatgatga gtgtggagaa aacaacctaa
1321 atggtaaata taacaaacca agagcaaaat ctaagccaga gaggagaaga ggattatctt
1381 ggaagtctca aaatggaagg ttatactcta taaaatcaac caaaatgttg atccatccaa
1441 cagattcaga aagctttgaa tgaactgagg caaatttaaa aggcaataat ttaaacatta
1501 acctcattcc aagttaatgt ggtctaataa tctggtatta aatccttaag agaaagcttg
1561 agaaatagat tttttttatc ttaaagtcac tgtctattta agattaaaca tacaatcaca
1621 taaccttaaa gaataccgtt tacatttctc aatcaaaatt cttataatac tatttgtttt
1681 aaattttgtg atgtgggaat caattttaga tggtcacaat ctagattata atcaataggt
1741 gaacttatta aataactttt ctaaataaaa aatttagaga cttttatttt aaaaggcatc
1801 atatgagcta atatcacaac tttcccagtt taaaaaacta gtactcttgt taaaactcta
1861 aacttgacta aatacagagg actggtaatt gtacagttct taaatgttgt agtattaatt
1921 tcaaaactaa aaatcgtcag cacagagtat gtgtaaaaat ctgtaataca aatttttaaa
1981 ctgatgcttc attttgctac aaaataattt ggagtaaatg tttgatatga tttatttatg
2041 aaacctaatg aagcagaatt aaatactgta ttaaaataag ttcgctgtct ttaaacaaat
2101 ggagatgact actaagtcac attgacttta acatgaggta tcactatacc ttatttgtta
2161 aaatatatac tgtatacatt ttatatattt taacacttaa tactatgaaa acaaataatt
2221 gtaaaggaat cttgtcagat tacagtaaga atgaacatat ttgtggcatc gagttaaagt
2281 ttatatttcc cctaaatatg ctgtgattct aatacattcg tgtaggtttt caagtagaaa
2341 taaacctcgt aacaagttac tgaacgttta aacagcctga caagcatgta tatatgttta
2401 aaattcaata aacaaagacc cagtccctaa attatagaaa tttaaattat tcttgcatgt
2461 ttatcgacat cacaacagat ccctaaatcc ctaaatccct aaagattaga tacaaatttt
2521 ttaccacagt atcacttgtc agaatttatt tttaaatatg attttttaaa actgccagta
2581 agaaatttta aattaaaccc atttgttaaa ggatatagtg cccaagttat atggtgacct
2641 acctttgtca atacttagca ttatgtattt caaattatcc aatatacatg tcatatatat
2701 ttttatatgt cacatatata aaagatatgt atgatctatg tgaatcctaa gtaaatattt
2761 tgttccagaa aagtacaaaa taataaaggt aaaaataatc tataattttc aggaccacag
2821 actaagctgt cgaaattaac gctgattttt ttagggccag aataccaaaa tggctcctct
2881 cttcccccaa aattggacaa tttcaaatgc aaaataattc attatttaat atatgagttg
2941 cttcctctat t (SEQ ID NO: 2)
<---
[0009]
[0010] "Полипептид ANGPTL3" относится к встречающемуся в природе белку ANGPTL3 или его фрагменту или варианту. Для целей настоящего изобретения нумерация аминокислоты, как правило, определяется со ссылкой на последовательность полноразмерного полипептида ANGPTL3 человека дикого типа (SEQ ID NO:1). Так, в вариантах осуществления, в которых полипептид по настоящему изобретению содержит только С-терминальную часть полноразмерного ANGPTL3 и не содержит N-терминальной части, хотя длина пептида составляет менее 460 аминокислот, нумерация положений основана на SEQ ID NO:1. Например, ссылка на положение 423 полипептида ANGPTL3 по настоящему изобретению относится к положению 423 из SEQ ID NO:1, даже несмотря на то, что длина самого полипептида ANGPTL3 по настоящему изобретению может составлять всего лишь 200 аминокислот. При определении аминокислоты в представляющей интерес последовательности, которая "соответствует" положению в эталонной последовательности, такой как SEQ ID NO:1, это осуществляют путем оптимального выравнивания последовательностей, например, с применением выравнивания CLUSTAL с параметрами по умолчанию или выравнивания BLAST 2 с параметрами по умолчанию, и сравнения последовательностей. Например, положение 423 в представляющей интерес последовательности, которое "определено со ссылкой на SEQ ID NO:1", или аминокислота, которая "соответствует" положению 423 из SEQ ID NO:1, означает аминокислоту, которая выравнивается с положением 423 из SEQ ID NO:1 при оптимальном выравнивании представляющей интерес последовательности с SEQ ID NO:1.
[0011] Используемый в данном документе термин "протеазоустойчивый" относится к полипептиду, содержащему модификацию, которая делает полипептид менее восприимчивым к расщеплению под действием трипсиноподобной протеазы, чем соответствующий немодифицированный полипептид дикого типа.
[0012] Термины "пептид", "полипептид" и "белок" используются взаимозаменяемо и относятся к соединению, состоящему из аминокислотных остатков, ковалентно связанных пептидными связями. Белок или пептид должны содержать по меньшей мере две аминокислоты, а ограничение на максимальное количество аминокислот, которые может содержать последовательность белка или пептида, не установлено. Полипептиды предусматривают любой пептид или белок, содержащие две или более аминокислоты, соединенные друг с другом пептидными связями. Используемый в данном документе термин относится как к коротким цепям, которые также обычно понимаются в уровне техники, например, как пептиды, олигопептиды и олигомеры, так и к более длинным цепям, которые обычно упоминаются в уровне техники как белки, которых существует множество типов. Например, "полипептиды" предусматривают, среди прочего, биологически активные фрагменты, практически гомологичные полипептиды, олигопептиды, гомодимеры, гетеродимеры, варианты полипептидов, модифицированные полипептиды, производные, аналоги, слитые белки. Полипептид предусматривает природный пептид, рекомбинантный пептид или их комбинацию.
Термин "вариант" относится к полипептиду, который имеет практически идентичную аминокислотную последовательность с эталонным полипептидом, или кодируется практически идентичной нуклеотидной последовательностью и может характеризоваться одной или несколькими активностями эталонного полипептида. Например, вариант может характеризоваться приблизительно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более высокой идентичностью последовательности с эталонным полипептидом, при этом сохраняя одну или несколько активностей эталонного полипептида.
[0013] Термин "аминокислота" относится к встречающимся в природе и синтетическим аминокислотам, а также к аналогам аминокислот и миметикам аминокислот, которые функционируют аналогично встречающимся в природе аминокислотам. Встречающиеся в природе аминокислоты представляют собой аминокислоты, кодируемые генетическим кодом, а также такие аминокислоты, которые были впоследствии модифицированы, например, гидроксипролин, γ-карбоксиглутамат и O-фосфосерин. Аналоги аминокислот относятся к соединениям, которые характеризуются такой же основной химической структурой, что и встречающаяся в природе аминокислота, то есть имеют α-углерод, который связан с водородом, карбоксильную группу, аминогруппу и R-группу, например, гомосерин, норлейцин, метионинсульфоксид, метионинметилсульфоний. Такие аналоги имеют модифицированные R-группы (например, норлейцин) или модифицированные пептидные остовы, но сохраняют такую же основную химическую структуру, что и встречающаяся в природе аминокислота. Кодируемые природным кодоном аминокислоты представляют собой 20 стандартных аминокислот (аланин, аргинин, аспарагин, аспарагиновая кислота, цистеин, глутамин, глутаминовая кислота, глицин, гистидин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, пролин, серин, треонин, триптофан, тирозин и валин), а также пирролизин, пирролин-карбоксил-лизин и селеноцистеин.
[0014] "Консервативно модифицированные варианты" распространяются как на аминокислотные последовательности, так и на последовательности нуклеиновой кислоты. Применительно к конкретным последовательностям нуклеиновой кислоты, консервативно модифицированные варианты относятся к тем нуклеиновым кислотам, которые кодируют идентичные или фактически идентичные аминокислотные последовательности, или же, если нуклеиновая кислота не кодирует аминокислотную последовательность, они относятся к фактически идентичным последовательностям. Вследствие вырожденности генетического кода любой данный белок кодируется большим количеством функционально идентичных нуклеиновых кислот. Например, все из кодонов GCA, GCC, GCG и GCU кодируют аминокислоту аланин. Таким образом, в каждом положении, где кодон определяет аланин, кодон может быть изменен на любой из описанных соответствующих кодонов без изменения кодируемого полипептида. Такие вариации нуклеиновой кислоты являются "молчащими вариациями", которые представляют собой один вид консервативно модифицированных вариаций. Каждая полипептидная последовательность в данном документе, которая кодируется полинуклеотидом, охватывает каждую возможную молчащую вариацию нуклеиновой кислоты. Специалист в данной области будет осознавать, что каждый кодон в нуклеиновой кислоте (за исключением AUG, который обычно является единственным кодоном для метионина, и TGG, который обычно является единственным кодоном для триптофана) может быть модифицирован с получением функционально идентичной молекулы. Соответственно, каждая молчащая вариация нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид, неявно определена в каждой описанной последовательности. Специалист в данной области будет осознавать, что отдельные замены, делеции или добавления, производимые в последовательности нуклеиновой кислоты, пептида, полипептида или белка, которые изменяют, добавляют или удаляют одну аминокислоту или небольшой процент аминокислот относительно исходной кодируемой аминокислотной последовательности, приводят к "консервативно модифицированному варианту", при этом такое изменение производит замену аминокислоты на химически аналогичную аминокислотную и/или полипептидную последовательность, за счет чего образуется структурно аналогичный белок, характеризующийся функциональной активностью, аналогичной исходному белку. Из уровня техники хорошо известны таблицы консервативных замен, обеспечивающих функционально аналогичные аминокислоты. Такие консервативно модифицированные варианты дополняют, а не исключают полиморфные варианты, межвидовые гомологи и аллели по настоящему изобретению.
[0015] Термин "консервативные аминокислотные замены" относится к (концептуальной или иной) замене аминокислоты из одной такой группы на другую аминокислоту из той же группы. Один пример замен основан на проведении анализа нормализованных частот аминокислотных изменений в соответствующих белках гомологичных организмов (см., например, Schulz, G. E. and R. H. Schirmer, Principles of Protein Structure, Springer-Verlag). По результатам таких анализов можно определить группы аминокислот, где аминокислоты преимущественно заменяются друг на друга внутри группы и, следовательно, больше всего похожи друг на друга по своему воздействию на общую структуру белка (см., например, Schulz, G. E. and R. H. Schirmer, Principles of Protein Structure, Springer-Verlag). Один пример набора групп аминокислот, определенных таким образом, включает: (i) группу заряженных аминокислот, состоящую из Glu и Asp, Lys, Arg и His; (ii) группу положительно заряженных аминокислот, состоящую из Lys, Arg и His; (iii) группу отрицательно заряженных аминокислот, состоящую из Glu и Asp; (iv) группу ароматических аминокислот, состоящую из Phe, Tyr и Trp; (v) группу аминокислот с азотсодержащим кольцом, состоящую из His и Trp; (vi) группу крупных алифатических неполярных аминокислот, состоящую из Val, Leu и Ile; (vii) группу слабополярных аминокислот, состоящую из Met и Cys; (viii) группу аминокислот с небольшим аминокислотным остатком, состоящую из Ser, Thr, Asp, Asn, Gly, Ala, Glu, Gln и Pro; (ix) группу алифатических аминокислот, состоящую из Val, Leu, Ile, Met и Cys; и (х) группу небольших гидроксиаминокислот, состоящую из Ser и Thr. Другими примерами консервативных замен, основанных на общих физических свойствах, являются замены в пределах следующих групп: 1) аланин (A), глицин (G); 2) аспарагиновая кислота (D), глутаминовая кислота (E); 3) аспарагин (N), глутамин (Q); 4) аргинин (R), лизин (K); 5) изолейцин (I), лейцин (L), метионин (M), валин (V); 6) фенилаланин (F), тирозин (Y), триптофан (W); 7) серин (S), треонин (T) и 8) цистеин (C), метионин (M) (см., например, Creighton, Proteins (1984)).
Термины "гомологичный" или "идентичность" относятся к идентичности последовательности субъединиц у двух полимерных молекул, например, у двух молекул нуклеиновой кислоты, таких как две молекулы ДНК или две молекулы РНК, или у двух молекул полипептидов. Если положение субъединицы в обеих из двух молекул занимает одна и та же мономерная субъединица, например, если положение в каждой из двух молекул ДНК занято аденином, то они являются гомологичными или идентичными по данному положению. Гомология между двумя последовательностями находится в прямой зависимости от количества совпадающих или гомологичных положений; например, если половина (например, пять положений в полимере длиной десять субъединиц) положений в двух последовательностях являются гомологичными, то эти две последовательности являются гомологичными на 50%; если 90% положений (например, 9 из 10) являются совпадающими или гомологичными, то две последовательности являются гомологичными на 90%. Процент "идентичности последовательности" можно определить путем сравнения двух оптимально выровненных последовательностей в пределах окна сравнения, при этом для оптимального выравнивания этих двух последовательностей фрагмент аминокислотной последовательности в окне сравнения может содержать добавления или делеции (например, гэпы или выступы) по сравнению с эталонной последовательностью (которая не содержит добавлений или делеций). Процент можно рассчитать путем определения количества положений, в которых в обеих последовательностях встречается идентичный аминокислотный остаток, с получением количества совпадающих положений, деления количества совпадающих положений на общее количество положений в окне сравнения и умножения результата на 100 с получением процента идентичности последовательностей. Результатом является процент идентичности рассматриваемой последовательности относительно запрашиваемой последовательности.
[0016] Два примера алгоритмов, которые подходят для определения процента идентичности последовательностей и сходства последовательностей, представляют собой алгоритмы BLAST и BLAST 2.0, которые описаны в Altschul et al. (1977) Nuc. Acids Res. 25:3389-3402, и Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410, соответственно. Программное обеспечение для осуществления анализов BLAST является общедоступным от Национального центра биотехнологической информации. На первом этапе данный алгоритм предусматривает идентификацию пар последовательностей с высоким показателем сходства (HSP) за счет идентификации коротких слов длиной W в запрашиваемой последовательности, которые либо совпадают, либо удовлетворяют некоторому пороговому баллу T с положительным значением при выравнивании со словом такой же длины в последовательности из базы данных. T известен под названием пороговый показатель соседних слов (Altschul et al., выше). Эти первоначальные совпадения соседних слов выступают в качестве "затравок" для начала поисков, чтобы найти более длинные HSP, содержащие их. Совпадения слов продлеваются в обоих направлениях вдоль каждой последовательности до тех пор, пока может увеличиваться суммарный показатель выравнивания. Суммарные показатели рассчитывают с применением, в случае нуклеотидных последовательностей, параметров M (вознаграждающий балл за пару совпадающих остатков; всегда >0) и N (штрафной балл за несовпадающие остатки; всегда <0). В случае аминокислотных последовательностей для подсчета суммарного показателя применяют матрицу замен. Продление совпадений слов в каждом направлении останавливается, когда суммарный показатель выравнивания уменьшается на величину X относительно своего максимального достигнутого значения; суммарный показатель стремится к нулю или ниже вследствие накопления одного или нескольких выравниваний остатков с отрицательными показателями; или достигается конец любой из последовательностей. Параметры W, T и X алгоритма BLAST определяют чувствительность и скорость выравнивания. В программе BLASTN (для нуклеотидных последовательностей) в качестве параметров по умолчанию применяется длина слова (W), составляющая 11, ожидание (E), составляющее 10, M=5, N=-4 и сравнение обеих нитей. В случае аминокислотных последовательностей в программе BLASTP в качестве параметров по умолчанию применяется длина слова, составляющая 3, и ожидание (E), составляющее 10, и матрица замен BLOSUM62 (см. Henikoff and Henikoff (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915), выравнивания (B), составляющие 50, ожидание (E), составляющее 10, M=5, N=-4 и сравнение обеих нитей. Алгоритм BLAST также осуществляет статистический анализ сходства между двумя последовательностями (см., например, Karlin and Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5787). Одной мерой сходства, обеспечиваемой алгоритмом BLAST, является наименьшая суммарная вероятность (P (N)), которая предусматривает указание вероятности, при которой совпадение между двумя нуклеотидными или аминокислотными последовательностями происходит случайно. Например, нуклеиновая кислота считается схожей с эталонной последовательностью, если наименьшая суммарная вероятность при сравнении тестируемой нуклеиновой кислоты с эталонной нуклеиновой кислотой составляет менее приблизительно 0,2, более предпочтительно менее приблизительно 0,01 и наиболее предпочтительно менее приблизительно 0,001.
[0017] Термин "выделенная/выделенный" применительно к нуклеиновой кислоте или белку означает, что нуклеиновая кислота или белок являются очищенными до такой степени, что они фактически не содержат других клеточных компонентов, с которыми они ассоциированы в естественном состоянии. Зачастую они находятся в гомогенном или почти гомогенном состоянии. Они могут находиться как в сухом состоянии, так и в водном растворе. Степень чистоты и гомогенности можно определить с применением методик аналитической химии, которые известны и обычно применяются в данной области техники, например, с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, высокопроизводительной жидкостной хроматографии и т. д. Белок, который является преобладающим видом молекул, присутствующих в препарате, является практически полностью очищенным. В некоторых вариантах осуществления термин "очищенный" означает, что белок приводит к образованию фактически лишь одной полоски в электрофоретическом геле. Как правило, это означает, что белок характеризуется чистотой по меньшей мере 85%, более предпочтительно чистотой по меньшей мере 95% и наиболее предпочтительно чистотой по меньшей мере 99%.
Термин "субъект" относится к животному, человеку или отличному от человека животному, в отношении которого обеспечивают лечение согласно способам по настоящему изобретению. Предусматриваются ветеринарные и неветеринарные применения. Данный термин включает без ограничения млекопитающих, например, человека, других приматов, свиней, грызунов, таких как мыши и крысы, кроликов, морских свинок, хомяков, коров, лошадей, кошек, собак, овец и коз. К типичным субъектам относятся человек, сельскохозяйственные животные и домашние животные, такие как кошки и собаки.
Термин "лечить" или "лечение" относится как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам, при этом целью является предупреждение или замедление нежелательного физиологического изменения или нарушения. Для целей настоящего изобретения благоприятные или требуемые клинические результаты включают без ограничения выявляемое или невыявляемое ослабление симптомов, уменьшение степени выраженности заболевания, стабилизацию (т. е. отсутствие ухудшения) состояния заболевания, задержку или замедление прогрессирования заболевания, облегчение или смягчение болезненного состояния и ремиссию (либо частичную, либо полную).
Протеазоустойчивые полипептиды ANGPTL3 с хондрогенной активностью
[0018] Настоящее изобретение направлено на внутрисуставное введение субъекту (например, субъекту-человеку) протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью для лечения повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) или артрита. Протеазоустойчивые полипептиды ANGPTL3 с хондрогенной активностью были описаны в WO2014/138687, которая включена посредством ссылки во всей своей полноте.
[0019] Описываемые в данном документе полипептиды ANGPTL3 характеризуются хондрогенной активностью. Как определено в данном документе, хондрогенез или хондрогенная активность относятся к развитию хондроцитов из мезенхимальных стволовых клеток (MSC). Мезенхимальные стволовые клетки (MSC) присутствуют в суставном хряще взрослого человека и после выделения могут быть запрограммированы in vitro на дифференцировку в хондроциты и другие линии дифференцировки мезенхимальных клеток, а также могут применяться для регенерации хряща. Признаки хондрогенной активности включают без ограничения выработку хрящевого матрикса. Выработку хрящевого матрикса можно измерить по различным маркерам, например, таким как Sox9, коллаген II типа, или по продукции гликозаминогликана (GAG). В некоторых вариантах осуществления в качестве маркера выработки хрящевого матрикса измеряют экспрессию коллагена II типа. В некоторых вариантах осуществления в качестве маркера выработки хрящевого матрикса измеряют выработку GAG. В некоторых вариантах осуществления 3-кратное увеличение выработки GAG с экспрессией белков, специфических для хряща, указывает на положительную продукцию хрящевого матрикса.
[0020] Описываемые в данном документе полипептиды ANGPTL3 являются протеазоустойчивыми. Полипептид можно оценить в отношении протеазоустойчивости с применением любого известного анализа, в котором измеряют расщепление под действием сериновой протеазы, такой как трипсин. В некоторых вариантах осуществления протеаза, используемая для оценки подверженности протеолизу, представляет собой сериновую протеазу трипсин. Считается, что полипептид является протеазоустойчивым, если он характеризуется пониженной чувствительностью к трипсину в сравнении со своим аналогом дикого типа. Примером анализа является измерение количества расщепленного продукта, образуемого при воздействии на полипептид трипсином в течение некоторого периода времени в сравнении с соответствующим нативным пептидом человека. Расщепление можно измерить с применением любого известного анализа, например SDS PAGE или LCMS.
[0021] В иллюстративном анализе ограниченный протеолиз посредством трипсинолиза проводят путем инкубации 10 нг белка, подлежащего оценке, с трипсином при массовом соотношении 8000:1 (белок:трипсин) в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем реакцию трипсинолиза можно блокировать путем добавления уксусной кислоты с доведением рН реакционной смеси до 3,0. Затем подвергнутые блокированию образцы анализируют с помощью SDS-PAGE, например, на геле с 4-12% Tris-Bis, с выявлением белков, которые устойчивы к расщеплению, отделяя их от подвергаемых расщеплению белков по появлению фрагмента, который образуется при расщеплении трипсином. У протеазоустойчивых полипептидов продукт расщепления отсутствует или его количество снижено в сравнении с их аналогами дикого типа.
[0022] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO:1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнут делеции.
[0023] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, выбранной из любой из SEQ ID NO: 3-30, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO: 1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, выбранной из любой из SEQ ID NO: 3-30, где аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнут делеции.
[0024] В дополнительном варианте осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, выбранной из любой из SEQ ID NO: 3-18, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO: 1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, выбранной из любой из SEQ ID NO: 3-18, где аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнут делеции.
[0025] В дополнительном варианте осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с SEQ ID NO: 17, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO: 1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В дополнительном варианте осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с SEQ ID NO: 17, где аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнут делеции.
[0026] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из любой из SEQ ID NO: 3-30. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из любой из SEQ ID NO: 3-18. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит SEQ ID NO: 18. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит SEQ ID NO: 37.
[0027] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из SEQ ID NO: 3-30. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из SEQ ID NO: 3-18. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из SEQ ID NO: 18. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из SEQ ID NO: 37.
Таблица 1. Конструкции вариантов ANGPTL3
SEQ ID NO |
Конструкция | Последовательность |
3 | 207KQ | IQEPTEISLSSKPRAPRTTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
4 | 207KS | IQEPTEISLSSKPRAPRTTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
5 | 225KQ | TTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
6 | 225KS | TTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
7 | 225ST | TTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAKTKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
8 | 226KQ | TPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
9 | 226KS | TPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
10 | 228KQ | FLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
11 | 228KS | FLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
12 | 228ST | FLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAKTKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
13 | 233KQ | EIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
14 | 233KS | EIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
15 | 241KQ | GIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
16 | 241KS | GIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
17 | 242KQ | IPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
18 | 242KS | IPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
19 | 225-455KQ | TTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
20 | 225-455KS | TTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
21 | 226-455KQ | TPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
22 | 226-455KS | TPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
23 | 228-455KQ | FLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
24 | 228-455KS | FLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
25 | 233-455KQ | EIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
26 | 233-455KS | EIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
27 | 241-455KQ | GIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
28 | 241-455KS | GIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
29 | 242-455KQ | IPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRAQSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
30 | 242-455KS | IPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASSKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
31 | 207Kdel | IQEPTEISLSSKPRAPRTTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
32 | 225Kdel | TTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
33 | 226Kdel | TPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
34 | 228Kdel | FLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
35 | 233Kdel | EIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
36 | 241Kdel | GIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
37 | 242Kdel | IPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTDSESFE |
38 | 225-455Kdel | TTPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
39 | 226-455Kdel | TPFLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
40 | 228-455Kdel | FLQLNEIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
41 | 233-455Kdel | EIRNVKHDGIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
42 | 241-455Kdel | GIPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
43 | 242-455Kdel | IPAECTTIYNRGEHTSGMYAIRPSNSQVFHVYCDVISGSPWTLIQHRIDGSQNFNETWENYKYGFGRLDGEFWLGLEKIYSIVKQSNYVLRIELEDWKDNKHYIEYSFYLGNHETNYTLHLVAITGNVPNAIPENKDLVFSTWDHKAKGHFNCPEGYSGGWWWHDECGENNLNGKYNKPRASKPERRRGLSWKSQNGRLYSIKSTKMLIHPTD |
[0028]
[0029] Описываемые в данном документе полипептиды ANGPTL3 могут иметь по меньшей мере одну замену или делецию в С-терминальной части полипептида для придания полипептиду протеазоустойчивости. Замена или делеция происходят по остатку R или K, вследствие чего полипептиды характеризуются повышенной устойчивостью к протеазам, например, к трипсиноподобным протеазам. В протеазоустойчивом полипептиде ANGPTL3 любая аминокислота может замещать R или K, или остаток R или K может быть подвергнут делеции. В некоторых вариантах осуществления заменой является полярная аминокислота, например, H, N, Q, S, T, A или Y. В некоторых вариантах осуществления заменой является H, N, Q, S, T или Y. В некоторых вариантах осуществления заменой является S или Q. В некоторых вариантах осуществления заменой является Q. В некоторых вариантах осуществления заменой является S. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый пептид ANGPTL3 имеет аминокислоту в положении 423 со ссылкой на SEQ ID NO: 1, которая отличается от K или R. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислоту в положении 423 (со ссылкой на SEQ ID NO:1), которая представляет собой полярную аминокислоту, например, аминокислота в положении 423 (со ссылкой на SEQ ID NO:1) может представлять собой Q или S или другую полярную аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 имеет Q в положении 423 (со ссылкой на SEQ ID NO:1). В других вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 имеет S в положении 423 (со ссылкой на SEQ ID NO:1). В некоторых вариантах осуществления в дополнение к замене в 423 (со ссылкой на SEQ ID NO:1) протеазоустойчивый пептид ANGPTL3 имеет замену другого R или K на С-конце SEQ ID NO:1 или ее варианта, где замена представляет собой полярную аминокислоту, отличную от R или K. В некоторых вариантах осуществления замена в положении 423 (со ссылкой на SEQ ID NO:1) представляет собой Q или S в протеазоустойчивом пептиде ANGPTL3. В некоторых вариантах осуществления аминокислота, соответствующая положению 423 из SEQ ID NO: 1, подвергнута делеции в протеазоустойчивом пептиде ANGPTL3.
[0030] В некоторых вариантах осуществления длина протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет 250 аминокислот или менее, и он содержит аминокислотную последовательность, выбранную из любой из SEQ ID NO: 5-18.
[0031] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 представляет собой карбокси-терминальный (С-терминальный) фрагмент (например, по меньшей мере 100, 150, 200, 220 или 215 смежных аминокислот) белка ANGPTL3 человека, или он имеет последовательность, практически идентичную С-терминальному фрагменту последовательности белка ANGPTL3 человека, где полипептид сохраняет хондрогенную активность. В некоторых вариантах осуществления у протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 отсутствует по меньшей мере часть С-терминальной последовательности, например, отсутствуют 5, 10, 15 или 20 аминокислот из С-терминальной части SEQ ID NO:1 (т. е. отсутствуют 456-460, 451-460, 446-460 или 441-460 из SEQ ID NO:1).
[0032] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит смежные аминокислоты, соответствующие аминокислотным областям: аминокислоты 241-455 или 241-460 из SEQ ID NO:1; аминокислоты 242-455 или 242-460 из SEQ ID NO:1; аминокислоты 233-455 или 233-460 из SEQ ID NO:1; аминокислоты 228-455 или 228-460 из SEQ ID NO:1, аминокислоты 226-455 или 226-260 или аминокислоты 225-455 или 225-260 из SEQ ID NO:1, в которых аминокислота замещает остаток R или K, или остаток R или K подвергнут делеции. В некоторых вариантах осуществления замена или делеция находятся в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO:1. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит смежные аминокислоты, соответствующие аминокислотным областям 207-455 или 207-460 SEQ ID NO:1, в которых аминокислота замещает остаток R или K, или остаток R или K подвергнут делеции. В некоторых вариантах осуществления замена или делеция находится в положении 423. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой полярную аминокислоту, например, H, N, Q, S, T, A или Y. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой H, N, Q, S, T или Y. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой S или Q. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO:1, подвергнут делеции.
[0033] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере на 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотами 240-454 из SEQ ID NO:1, аминокислотами 241-455 из SEQ ID NO:1 или аминокислотами 242-455 из SEQ ID NO:1 с заменой по аминокислоте, соответствующей положению 423 из SEQ ID NO:1, при этом заменяющая аминокислота представляет собой не R, и где полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В других вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислоты 240-454 из SEQ ID NO:1, аминокислоты 241-455 из SEQ ID NO:1 или аминокислоты 242-455 из SEQ ID NO:1, при этом каждый полипептид содержит замену по аминокислоте, соответствующей положению 423 из SEQ ID NO:1, где заменяющая аминокислота представляет собой Q или S. В других вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислоты 240-454 из SEQ ID NO:1, аминокислоты 241-455 из SEQ ID NO:1 или аминокислоты 242-455 из SEQ ID NO:1, при этом каждый полипептид содержит делецию аминокислотного остатка, соответствующего положению 423 из SEQ ID NO:1.
[0034] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% или по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичностью с аминокислотами аминокислотами 242- 455 или 242-460 из SEQ ID NO:1; 241-455 или 241-460 из SEQ ID NO:1; аминокислотами 233-455 или 233-460 из SEQ ID NO:1; аминокислотами 228-455 или 228-460 из SEQ ID NO:1, аминокислотами 226-455 или 226-260 из SEQ ID NO:1 или аминокислотами 225-455 или 225-260 из SEQ ID NO:1, в которой аминокислота замещает R или K. В некоторых вариантах осуществления замена находится в положении 423. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой полярную аминокислоту, например, H, N, Q, S, T, A или Y. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой H, N, Q, S, T или Y. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой S или Q. В некоторых вариантах осуществления замена представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO:1, подвергнут делеции.
[0035] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 является пегилированным. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 слит с гетерологичным пептидом. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 слит с любым из человеческого сывороточного альбумина (HSA), константной области тяжелой цепи иммуноглобулина (Fc), полигистидина, глутатион-S-трансферазы (GST), тиоредоксина, белка А, белка G, мальтозосвязывающего белка (MBP) или фрагмента любого из вышеуказанных гетерологичных полипептидов. В конкретных вариантах осуществления гетерологичный полипептид слит с амино-терминальным концом протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3. В дополнительных или альтернативных вариантах осуществления гетерологичный полипептид слит с карбокси-терминальным концом протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3.
[0036] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит по меньшей мере одну неприродную аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит 1, 2, 3, 4 или более неприродных аминокислот. Известны способы получения и введения в белок не встречающейся в природе аминокислоты. См., например, патенты США №№ 7083970 и 7524647. Из уровня техники известны общие принципы получения систем для ортогональной трансляции, которые подходят для получения белков, которые содержат одну или несколько требуемых неприродных аминокислот, а также общие способы получения систем для ортогональной трансляции. Например, см. международные публикации №№ WO 2002/086075, под названием "METHODS AND COMPOSITION FOR THE PRODUCTION OF ORTHOGONAL tRNA-AMINOACYL-tRNA SYNTHETASE PAIRS"; WO 2002/085923 под названием "IN VIVO INCORPORATION OF UNNATURAL AMINO ACIDS"; WO 2004/094593 под названием "EXPANDING THE EUKARYOTIC GENETIC CODE"; WO 2005/019415, поданную 7 июля 2004 года; WO 2005/007870, поданную 7 июля 2004 года; WO 2005/007624, поданную 7 июля 2004 года; WO 2006/110182, поданную 27 октября 2005 года, под названием "ORTHOGONAL TRANSLATION COMPONENTS FOR THE VIVO INCORPORATION OF UNNATURAL AMINO ACIDS" и WO 2007/103490, поданную 7 марта 2007 года, под названием "SYSTEMS FOR THE EXPRESSION OF ORTHOGONAL TRANSLATION COMPONENTS IN EUBACTERIAL HOST CELLS". Обсуждение систем для ортогональной трансляции, которые приводят к включению неприродных аминокислот, и способов их получения и применения см. также в Wang and Schultz, (2005) "Expanding the Genetic Code". Angewandte Chemie Int Ed 44: 34-66; Xie and Schultz, (2005) "An Expanding Genetic Code". Methods 36: 227-238; Xie and Schultz, (2005) "Adding Amino Acids to the Genetic Repertoire". Curr Opinion in Chemical Biology 9: 548-554; и Wang, et al., (2006) "Expanding the Genetic Code". Annu Rev Biophys Biomol Struct 35: 225-249; Deiters, et al, (2005) "In vivo incorporation of an alkyne into proteins in Escherichia coli". Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 15:1521-1524; Chin, et al., (2002) "Addition of p-Azido-L-phenylalanine to the Genetic Code of Escherichia coli". J Am Chem Soc 124: 9026-9027; и международную публикацию № WO2006/034332, поданную 20 сентября 2005 года. Дополнительные подробности находятся в патенте США № 7045337, № 7083970, № 7238510, № 7129333, № 7262040, № 7183082, № 7199222 и № 7217809.
[0037] "Не кодируемая природным кодоном аминокислота" относится к аминокислоте, которая не является одной из стандартных аминокислот или пиролизина, пирролин-карбоксилизина или селеноцистеина. Другими терминами, которые можно применять в качестве синонимов термина "не кодируемая природным кодоном аминокислота", являются "отличная от природной аминокислота", "неприродная аминокислота", "не встречающаяся в природе аминокислота" и различные варианты написания этих терминов. Термин "не кодируемая природным кодоном аминокислота" также включает без ограничения аминокислоты, которые возникают за счет модификации (например, посттрансляционных модификаций) кодируемой природным кодоном аминокислоты (включая без ограничения 20 стандартных аминокислот или пирролизин, пирролин-карбоксилизин и селеноцистеин), но сами по себе в природных условиях они не включаются в растущую полипептидную цепь трансляционным комплексом. Примеры таких не встречающихся в природе аминокислот включают без ограничения N-ацетилглюкозаминил-L-серин, N-ацетилглюкозаминил-L-треонин и O-фосфотирозин.
[0038] Не кодируемая природным кодоном аминокислота, как правило, характеризуется какой-либо структурой с какой-либо боковой цепью-заместителем, отличной от используемой в двадцати природных аминокислотах. Поскольку не кодируемые природным кодоном аминокислоты, как правило, отличаются от природных аминокислот только структурой боковой цепи, не кодируемые природным кодоном аминокислоты образуют амидные связи с другими аминокислотами, включая без ограничения природные или не кодируемые природным кодоном аминокислоты, таким же образом, каким они образуются во встречающихся в природе полипептидах. Однако, не кодируемые природным кодоном аминокислоты имеют группы боковых цепей, которые отличают их от природных аминокислот. Например, R необязательно предусматривает алкильную, арильную, ацильную, кето-группу, азидную, гидроксильную, гидразиновую, циано-группу, галогеновую, гидразидную, алкенильную, алкинильную, эфирную, тиоловую, селен-содержащую, сульфонильную, боратную, боронатную, фосфо-группу, фосфоновую, фосфиновую, гетероциклическую, еноновую, иминовую, альдегидную, сложноэфирную, тиокислотную, гидроксиламиновую, аминогруппу или т. п. или любую их комбинацию. Другие представляющие интерес не встречающиеся в природе аминокислоты, которые могут подходить для применения в настоящем изобретении, включают без ограничения аминокислоты, содержащие фотоактивируемый сшивающий линкер, спин-меченые аминокислоты, флуоресцентные аминокислоты, металло-связывающие аминокислоты металлсодержащие аминокислоты, радиоактивные аминокислоты, аминокислоты с новыми функциональными группами, аминокислоты, которые ковалентно или нековалентно взаимодействуют с другими молекулами, активируемые светом и/или изомеризуемые под действием света аминокислоты, аминокислоты, содержащие биотин или аналог биотина, гликозилированные аминокислоты, такие как замещенный сахаром серин, другие аминокислоты, модифицированные углеводами, кетосодержащие аминокислоты, аминокислоты, содержащие полиэтиленгликоль или полиэфир, аминокислоты, замещенные атомом тяжелого металла, химически расщепляемые и/или фоторасщепляемые аминокислоты, аминокислоты с удлиненными боковыми цепями по сравнению с природными аминокислотами, включая без ограничения полиэфиры или углеводороды с длинной цепью, включающие без ограничения более приблизительно 5 или более приблизительно 10 атомов углерода, углерод-связанные сахаросодержащие аминокислоты, редокс-активные аминокислоты, аминокислоты, содержащие аминотиокислоту, и аминокислоты, содержащие один или несколько токсичных фрагментов.
[0039] Иллюстративные не кодируемые природным кодоном аминокислоты, которые могут подходить для применения в настоящем изобретении и которые применимы для реакций с водорастворимыми полимерами, включают без ограничения аминокислоты, содержащие карбонильную, аминоокси-, гидразиновую, гидразидную, семикарбазидную, азидную и алкиновую реакционноспособные группы. В некоторых вариантах осуществления не кодируемые природным кодоном аминокислоты содержат сахаридный фрагмент. Примеры таких аминокислот включают N-ацетил-L-глюкозаминил-L-серин, N-ацетил-L-галактозаминил-L-серин, N-ацетил-L-глюкозаминил-L-треонин, N-ацетил-L-глюкозаминил-L-аспарагин и O-маннозаминил-L-серин. Примеры таких аминокислот также включают примеры, где встречающаяся в природе N- или O-связь между аминокислотой и сахаридом заменена на ковалентную связь, обычно не обнаруживаемую в природе, включая без ограничения алкеновую, оксимовую тиоэфирную, амидную и т. п. Примеры таких аминокислот также включают сахариды, обычно не обнаруживаемые во встречающихся в природе белках, такие как 2-дезоксиглюкоза, 2-дезоксигалактоза и т. п.
[0040] Другим типом модификации, которая может быть необязательно введена в полипептиды ANGPTL3 (например, в пределах полипептидной цепи или на любом из N- или С-концов), например, для увеличения периода полувыведения in vivo, является пегилирование или включение длинноцепочечных полимеров полиэтиленгликоля (PEG). Введение PEG или длинноцепочечных полимеров PEG увеличивает эффективную молекулярную массу полипептидов по настоящему изобретению, например, для предотвращения быстрой фильтрации в мочу. В некоторых вариантах осуществления остаток лизина в последовательности ANGPTL3 конъюгируют с PEG непосредственно или посредством линкера. Такой линкер может представлять собой, например, остаток Glu или ацильный остаток, содержащий тиольную функциональную группу для связывания с соответствующим образом модифицированной PEG-цепью. Альтернативный способ введения PEG-цепи заключается в том, чтобы сначала ввести остаток Cys на С-конце или по остаткам, подверженным воздействию растворителя, как, например, провести замещение остатков Arg или Lys. Затем данный остаток Cys сайт-специфическим образом прикрепляют к PEG-цепи, содержащей, например, малеимидную функциональную группу. Способы включения PEG или длинноцепочечных полимеров PEG хорошо известны из уровня техники (описаны, например, в Veronese, F. M., et al., Drug Disc. Today 10: 1451-8 (2005); Greenwald, R. B., et al., Adv. Drug Deliv. Rev. 55: 217-50 (2003); Roberts, M. J., et al., Adv. Drug Deliv. Rev., 54: 459-76 (2002)), содержание которых включено в данный документ посредством ссылки. В настоящем изобретении также можно применять другие способы конъюгирования полимеров, известные из уровня техники. В некоторых вариантах осуществления в качестве полимерного конъюгата для полипептида ANGPTL3 вводится поли(2-метаккрилоилоксиэтилфосфорилхолин) (PMPC) (см., например, WO2008/098930; Lewis, et al., Bioconjug Chem., 19: 2144-55 (2008)). В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении с полипептидом ANGPTL3 можно применять фосфорилхолин-содержащий полимерный конъюгат. Специалист в данной области легко сознает, что можно использовать другие биосовместимые полимерные конъюгаты.
[0041] С полипептидами по настоящему изобретению можно осуществлять описанный в последнее время альтернативный подход для включения PEG или PEG-полимеров за счет включения неприродных аминокислот (как описано выше). В данном подходе используется разработанная пара тРНК/тРНК-синтетазы, и в плазмиде экспрессии она кодируется амбер-супрессорным кодоном (Deiters, A, et al. (2004). Bio-org. Med. Chem. Lett. 14, 5743-5). Например, в полипептиды по настоящему изобретению можно включить пара-азидофенилаланин, а затем провести их реакцию с PEG-полимером, содержащим ацетиленовый фрагмент, в присутствии восстанавливающего средства и ионов меди для облегчения протекания органической реакции, известной как "[3+2]циклоприсоединение Хьюсгена".
[0042] В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения также предусмотрены специфические мутации полипептида ANGPTL3, направленные на изменение гликозилирования полипептида. Такие мутации можно выбрать таким образом, чтобы они приводили к введению или устранению одного или нескольких сайтов гликозилирования, включая без ограничения сайты О- или N-гликозилирования. В определенных вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 характеризуется сайтами и паттернами гликозилирования, не измененными относительно встречающихся в природе белков ANGPTL3. В определенных вариантах осуществления вариант полипептида ANGPTL3 включает вариант гликозилирования, в котором количество и/или тип сайтов гликозилирования были изменены относительно встречающихся в природе белков ANGPTL3. В определенных вариантах осуществления вариант полипептида содержит большее или меньшее количество сайтов N-гликозилирования относительно нативного полипептида. Сайт N-гликозилирования характеризуется последовательностью: Asn-X-Ser или Asn-X-Thr, где аминокислотный остаток, обозначенный как X, может представлять собой любой аминокислотный остаток, за исключением пролина. Замена аминокислотных остатков с созданием данной последовательности обеспечивает возможность потенциального нового сайта для добавления N-связанной углеводной цепи. В качестве альтернативы замены, которые приводят к устранению данной последовательности, будут удалять существующую N-связанную углеводную цепь. В определенных вариантах осуществления предусмотрена перестройка N-связанных углеводных цепей, где устранены один или несколько сайтов N-гликозилирования (как правило, встречающиеся в природе) и созданы один или несколько новых сайтов N-гликозилирования.
[0043] В некоторых вариантах осуществления функциональные варианты или модифицированные формы полипептидов ANGPTL3 включают слитые белки из полипептида ANGPTL3 и одного или нескольких доменов для образования слияния. Хорошо известные примеры доменов для образования слияния включают без ограничения полигистидин, Glu-Glu, глутатион-S-трансферазу (GST), тиоредоксин, белок A, белок G, константную область тяжелой цепи иммуноглобулина (Fc), мальтозосвязывающий белок (MBP) и/или человеческий сывороточный альбумин (HSA). Домен для образования слияния или его фрагмент можно выбрать таким образом, чтобы он придавал требуемое свойство. Например, некоторые домены для образования слияния особенно применимы для выделения слитых белков с помощью аффинной хроматографии. Для целей аффинной очистки применяют соответствующие матрицы для аффинной хроматографии, такие как смолы, конъюгированные с глутатионом, амилазой и никелем или кобальтом. Многие из таких матриц доступны в форме "набора", такой как система очистки Pharmacia GST и система QLAexpress™ (Qiagen), которые применимы для использования с (HIS6 (SEQ ID NO: 44)) партнерами по слиянию. В качестве другого примера, домен для образования слияния можно выбрать таким образом, чтобы он облегчал выявление полипептидов ANGPTL3. Примеры таких доменов для выявления включают различные флуоресцентные белки (например, GFP), а также "эпитопные метки", которые обычно представляют собой короткие пептидные последовательности, специфическое антитело в отношении которых является доступным. Хорошо известные эпитопные метки, специфические моноклональные антитела в отношении которых являются общедоступными, включают FLAG, гемагглютинин вируса гриппа (HA) и метки c-myc. В некоторых случаях домены для образования слияния несут сайт расщепления протеазами, такими как фактор Ха или тромбин, что позволяет соответствующей протеазе частично расщеплять слитые белки и, тем самым, высвобождать из них рекомбинантные белки. Затем высвобожденные белки можно отделить от домена для образования слияния путем последующего хроматографического разделения. В определенных вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 слит с доменом, который стабилизирует полипептид ANGPTL3 in vivo (домен-"стабилизатор"). Под "стабилизацией" подразумевают все, что увеличивает период полувыведения из сыворотки, независимо от того, происходит ли это вследствие уменьшения разрушения, уменьшения клиренса почкой или другого фармакокинетического эффекта. Известно, что образование слияний с Fc-частью иммуноглобулина придает требуемые фармакокинетические свойства самым различным белкам. Аналогично, образование слияний с человеческим сывороточным альбумином может придавать требуемые свойства. Другие типы доменов для образования слияния, которые можно выбрать, включают мультимеризирующиеся (например, димеризирующиеся, тетрамеризирующиеся) домены и функциональные домены (которые при необходимости придают дополнительную биологическую функцию). Можно сконструировать слияния таким образом, что гетерологичный пептид слит с амино-концом полипептида ANGPTL3 и/или с карбокси-концом полипептида ANGPTL3.
Способ лечения и терапевтическое применение
В данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща у субъекта (например, субъекта-человека), предусматривающие введение в сустав субъекта (например, субъекта-человека) внутрисуставной дозы описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью или композиции, содержащей протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 с хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется повреждение хряща. В некоторых вариантах осуществления у субъекта имеется артрит, например остеоартрит, травматический артрит или аутоиммунный артрит. В некоторых вариантах осуществления у пациента имеется артрит или поражение хряща. В некоторых вариантах осуществления у индивидуума отсутствует артроз или поражение хряща, но имеется риск их развития.
В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят в соответствии со схемой дозирования, описываемой в данном документе. Схемы дозирования корректируют для обеспечения оптимального требуемого ответа (например, терапевтического ответа). Эффективные дозы и схемы дозирования полипептида ANGPTL3, применяемого в настоящем изобретении, зависят от заболевания или состояния, подлежащих лечению.
В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят в сустав субъекта (например, субъекта-человека) в виде однократной инъекции. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят в сустав субъекта (например, субъекта-человека) в виде многократных инъекций. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят раз в две недели в течение периода времени, достаточного для лечения артрита или повреждения хряща. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят раз в месяц в течение периода времени, достаточного для лечения артрита или повреждения хряща. В некоторых вариантах осуществления полипептид ANGPTL3 вводят раз в неделю в течение периода времени, достаточного для лечения артрита или повреждения хряща.
Соответственно, в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-200 мг описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью. Например, полипептид ANGPTL3 можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-200 мг, приблизительно 0,2-150 мг, приблизительно 0,2-120 мг, приблизительно 0,2-100 мг, приблизительно 0,2-90 мг, приблизительно 0,2-80 мг, приблизительно 0,2-70 мг, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-200 мг, приблизительно 2-150 мг, приблизительно 2-120 мг, приблизительно 2-100 мг, приблизительно 2-90 мг, приблизительно 2-80 мг, приблизительно 2-70 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 10-200 мг, приблизительно 10-150 мг, приблизительно 10-120 мг, приблизительно 10-100 мг, приблизительно 10-90 мг, приблизительно 10-80 мг, приблизительно 10-70 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-150 мг, приблизительно 20-120 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 20-90 мг, приблизительно 20-80 мг, приблизительно 20-70 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 40-200 мг, приблизительно 40-150 мг, приблизительно 40-120 мг, приблизительно 40-100 мг, приблизительно 40-90 мг, приблизительно 40-80 мг, приблизительно 40-70 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 50-200 мг, приблизительно 50-150 мг, приблизительно 50-120 мг, приблизительно 50-100 мг, приблизительно 50-90 мг, приблизительно 50-80 мг, приблизительно 50-70 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 60-200 мг, приблизительно 60-150 мг, приблизительно 60-120 мг, приблизительно 60-100 мг, приблизительно 60-90 мг, приблизительно 60-80 мг, приблизительно 60-70 мг, приблизительно 70-200 мг, приблизительно 70-150 мг, приблизительно 70-120 мг, приблизительно 70-100 мг, приблизительно 70-90 мг, приблизительно 70-80 мг, приблизительно 80-200 мг, приблизительно 80-150 мг, приблизительно 80-120 мг, приблизительно 80-100 мг, приблизительно 80-90 мг, приблизительно 90-200 мг, приблизительно 90-150 мг, приблизительно 90-120 мг, приблизительно 90-100 мг, приблизительно 100-200 мг, приблизительно 100-150 мг, приблизительно 100-120 мг, приблизительно 120-200 мг, приблизительно 120-150 мг или приблизительно 150-200 мг.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-60 мг описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью. Например, полипептид ANGPTL3 можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг или приблизительно 60 мг.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-40 мг описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью. Например, полипептид ANGPTL3 можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг или приблизительно 40 мг.
В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2-100 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2-60 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 2-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 10-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 20-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 40-60 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 0,2 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 2 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 10 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 20 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 составляет приблизительно 60 мг.
[0044] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO:1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнут делеции.
[0045] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из SEQ ID NO: 17.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-200 мг полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17. Например, полипептид, содержащий SEQ ID NO: 17, можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-200 мг, приблизительно 0,2-150 мг, приблизительно 0,2-120 мг, приблизительно 0,2-100 мг, приблизительно 0,2-90 мг, приблизительно 0,2-80 мг, приблизительно 0,2-70 мг, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-200 мг, приблизительно 2-150 мг, приблизительно 2-120 мг, приблизительно 2-100 мг, приблизительно 2-90 мг, приблизительно 2-80 мг, приблизительно 2-70 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 10-200 мг, приблизительно 10-150 мг, приблизительно 10-120 мг, приблизительно 10-100 мг, приблизительно 10-90 мг, приблизительно 10-80 мг, приблизительно 10-70 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-150 мг, приблизительно 20-120 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 20-90 мг, приблизительно 20-80 мг, приблизительно 20-70 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 40-200 мг, приблизительно 40-150 мг, приблизительно 40-120 мг, приблизительно 40-100 мг, приблизительно 40-90 мг, приблизительно 40-80 мг, приблизительно 40-70 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 50-200 мг, приблизительно 50-150 мг, приблизительно 50-120 мг, приблизительно 50-100 мг, приблизительно 50-90 мг, приблизительно 50-80 мг, приблизительно 50-70 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 60-200 мг, приблизительно 60-150 мг, приблизительно 60-120 мг, приблизительно 60-100 мг, приблизительно 60-90 мг, приблизительно 60-80 мг, приблизительно 60-70 мг, приблизительно 70-200 мг, приблизительно 70-150 мг, приблизительно 70-120 мг, приблизительно 70-100 мг, приблизительно 70-90 мг, приблизительно 70-80 мг, приблизительно 80-200 мг, приблизительно 80-150 мг, приблизительно 80-120 мг, приблизительно 80-100 мг, приблизительно 80-90 мг, приблизительно 90-200 мг, приблизительно 90-150 мг, приблизительно 90-120 мг, приблизительно 90-100 мг, приблизительно 100-200 мг, приблизительно 100-150 мг, приблизительно 100-120 мг, приблизительно 120-200 мг, приблизительно 120-150 мг или приблизительно 150-200 мг.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-60 мг полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17. Например, полипептид, содержащий SEQ ID NO: 17, можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг или приблизительно 60 мг.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-40 мг полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17. Например, полипептид, содержащий SEQ ID NO: 17, можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг или приблизительно 40 мг.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-200 мг полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17. Например, полипептид, состоящий из SEQ ID NO: 17, можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-200 мг, приблизительно 0,2-150 мг, приблизительно 0,2-120 мг, приблизительно 0,2-100 мг, приблизительно 0,2-90 мг, приблизительно 0,2-80 мг, приблизительно 0,2-70 мг, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-200 мг, приблизительно 2-150 мг, приблизительно 2-120 мг, приблизительно 2-100 мг, приблизительно 2-90 мг, приблизительно 2-80 мг, приблизительно 2-70 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 10-200 мг, приблизительно 10-150 мг, приблизительно 10-120 мг, приблизительно 10-100 мг, приблизительно 10-90 мг, приблизительно 10-80 мг, приблизительно 10-70 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-150 мг, приблизительно 20-120 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 20-90 мг, приблизительно 20-80 мг, приблизительно 20-70 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 40-200 мг, приблизительно 40-150 мг, приблизительно 40-120 мг, приблизительно 40-100 мг, приблизительно 40-90 мг, приблизительно 40-80 мг, приблизительно 40-70 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 50-200 мг, приблизительно 50-150 мг, приблизительно 50-120 мг, приблизительно 50-100 мг, приблизительно 50-90 мг, приблизительно 50-80 мг, приблизительно 50-70 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 60-200 мг, приблизительно 60-150 мг, приблизительно 60-120 мг, приблизительно 60-100 мг, приблизительно 60-90 мг, приблизительно 60-80 мг, приблизительно 60-70 мг, приблизительно 70-200 мг, приблизительно 70-150 мг, приблизительно 70-120 мг, приблизительно 70-100 мг, приблизительно 70-90 мг, приблизительно 70-80 мг, приблизительно 80-200 мг, приблизительно 80-150 мг, приблизительно 80-120 мг, приблизительно 80-100 мг, приблизительно 80-90 мг, приблизительно 90-200 мг, приблизительно 90-150 мг, приблизительно 90-120 мг, приблизительно 90-100 мг, приблизительно 100-200 мг, приблизительно 100-150 мг, приблизительно 100-120 мг, приблизительно 120-200 мг, приблизительно 120-150 мг или приблизительно 150-200 мг.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-60 мг полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17. Например, полипептид, состоящий из SEQ ID NO: 17, можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг или приблизительно 60 мг.
В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) у субъекта (например, субъекта-человека) путем введения в сустав субъекта внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 0,2-40 мг полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17. Например, полипептид, состоящий из SEQ ID NO: 17, можно вводить внутрисуставно в дозе, составляющей приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг или приблизительно 40 мг.
В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 0,2-100 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 0,2-60 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 0,2-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 2-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 10-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 20-40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 40-60 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 0,2 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 2 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 10 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 20 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 40 мг. В некоторых вариантах осуществления внутрисуставная доза полипептида, содержащего или состоящего из SEQ ID NO: 17, составляет приблизительно 60 мг.
В некоторых вариантах осуществления способы дополнительно предусматривают осуществление хирургической процедуры на пораженном суставе у субъекта. Полипептид или композицию можно вводить до, во время или после хирургической процедуры.
В некоторых вариантах осуществления способы дополнительно предусматривают дополнительную процедуру. Например, полипептид или композицию можно вводить в сочетании с любым из стимуляции костного мозга, замены хряща, имплантации аутологичных хондроцитов (ACI) или имплантации индуцированных матриксом аутологичных хондроцитов (MACI). В некоторых вариантах осуществления полипептид или композицию можно вводить в сочетании с ACI.
[0046] Также предусмотрены композиции, содержащие описываемый в данном документе протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 с хондрогенной активностью, для применения в лечении артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща). Например, такие композиции могут содержать полипептид ANGPTL3, содержащий аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO:1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат полипептид ANGPTL3, содержащий аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнут делеции. В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат полипептид ANGPTL3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат полипептид ANGPTL3, состоящий из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1.
[0047] Такие композиции могут содержать приблизительно 0,2-200 мг (например, 0,2-200 мг, приблизительно 0,2-150 мг, приблизительно 0,2-120 мг, приблизительно 0,2-100 мг, приблизительно 0,2-90 мг, приблизительно 0,2-80 мг, приблизительно 0,2-70 мг, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-200 мг, приблизительно 2-150 мг, приблизительно 2-120 мг, приблизительно 2-100 мг, приблизительно 2-90 мг, приблизительно 2-80 мг, приблизительно 2-70 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 10-200 мг, приблизительно 10-150 мг, приблизительно 10-120 мг, приблизительно 10-100 мг, приблизительно 10-90 мг, приблизительно 10-80 мг, приблизительно 10-70 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-150 мг, приблизительно 20-120 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 20-90 мг, приблизительно 20-80 мг, приблизительно 20-70 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 40-200 мг, приблизительно 40-150 мг, приблизительно 40-120 мг, приблизительно 40-100 мг, приблизительно 40-90 мг, приблизительно 40-80 мг, приблизительно 40-70 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 50-200 мг, приблизительно 50-150 мг, приблизительно 50-120 мг, приблизительно 50-100 мг, приблизительно 50-90 мг, приблизительно 50-80 мг, приблизительно 50-70 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 60-200 мг, приблизительно 60-150 мг, приблизительно 60-120 мг, приблизительно 60-100 мг, приблизительно 60-90 мг, приблизительно 60-80 мг, приблизительно 60-70 мг, приблизительно 70-200 мг, приблизительно 70-150 мг, приблизительно 70-120 мг, приблизительно 70-100 мг, приблизительно 70-90 мг, приблизительно 70-80 мг, приблизительно 80-200 мг, приблизительно 80-150 мг, приблизительно 80-120 мг, приблизительно 80-100 мг, приблизительно 80-90 мг, приблизительно 90-200 мг, приблизительно 90-150 мг, приблизительно 90-120 мг, приблизительно 90-100 мг, приблизительно 100-200 мг, приблизительно 100-150 мг, приблизительно 100-120 мг, приблизительно 120-200 мг, приблизительно 120-150 мг, приблизительно 150-200 мг) описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
[0048] В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
[0049] В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат приблизительно 0,2-40 мг (например, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг) описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
[0050] В некоторых вариантах осуществления предусмотрены композиции, содержащие полипептид, содержащий SEQ ID NO: 17, для применения в лечении артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща). В некоторых вариантах осуществления предусмотрены композиции, содержащие полипептид, состоящий из SEQ ID NO: 17, для применения в лечении артрита или повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща).
[0051] Такие композиции могут содержать приблизительно 0,2-200 мг (например, 0,2-200 мг, приблизительно 0,2-150 мг, приблизительно 0,2-120 мг, приблизительно 0,2-100 мг, приблизительно 0,2-90 мг, приблизительно 0,2-80 мг, приблизительно 0,2-70 мг, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-200 мг, приблизительно 2-150 мг, приблизительно 2-120 мг, приблизительно 2-100 мг, приблизительно 2-90 мг, приблизительно 2-80 мг, приблизительно 2-70 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 10-200 мг, приблизительно 10-150 мг, приблизительно 10-120 мг, приблизительно 10-100 мг, приблизительно 10-90 мг, приблизительно 10-80 мг, приблизительно 10-70 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-150 мг, приблизительно 20-120 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 20-90 мг, приблизительно 20-80 мг, приблизительно 20-70 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 40-200 мг, приблизительно 40-150 мг, приблизительно 40-120 мг, приблизительно 40-100 мг, приблизительно 40-90 мг, приблизительно 40-80 мг, приблизительно 40-70 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 50-200 мг, приблизительно 50-150 мг, приблизительно 50-120 мг, приблизительно 50-100 мг, приблизительно 50-90 мг, приблизительно 50-80 мг, приблизительно 50-70 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 60-200 мг, приблизительно 60-150 мг, приблизительно 60-120 мг, приблизительно 60-100 мг, приблизительно 60-90 мг, приблизительно 60-80 мг, приблизительно 60-70 мг, приблизительно 70-200 мг, приблизительно 70-150 мг, приблизительно 70-120 мг, приблизительно 70-100 мг, приблизительно 70-90 мг, приблизительно 70-80 мг, приблизительно 80-200 мг, приблизительно 80-150 мг, приблизительно 80-120 мг, приблизительно 80-100 мг, приблизительно 80-90 мг, приблизительно 90-200 мг, приблизительно 90-150 мг, приблизительно 90-120 мг, приблизительно 90-100 мг, приблизительно 100-200 мг, приблизительно 100-150 мг, приблизительно 100-120 мг, приблизительно 120-200 мг, приблизительно 120-150 мг, приблизительно 150-200 мг) полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17.
[0052] В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17.
В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат приблизительно 0,2-40 мг (например, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг) полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17.
[0053] Такие композиции могут содержать приблизительно 0,2-200 мг (например, 0,2-200 мг, приблизительно 0,2-150 мг, приблизительно 0,2-120 мг, приблизительно 0,2-100 мг, приблизительно 0,2-90 мг, приблизительно 0,2-80 мг, приблизительно 0,2-70 мг, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-200 мг, приблизительно 2-150 мг, приблизительно 2-120 мг, приблизительно 2-100 мг, приблизительно 2-90 мг, приблизительно 2-80 мг, приблизительно 2-70 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 10-200 мг, приблизительно 10-150 мг, приблизительно 10-120 мг, приблизительно 10-100 мг, приблизительно 10-90 мг, приблизительно 10-80 мг, приблизительно 10-70 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-150 мг, приблизительно 20-120 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 20-90 мг, приблизительно 20-80 мг, приблизительно 20-70 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 40-200 мг, приблизительно 40-150 мг, приблизительно 40-120 мг, приблизительно 40-100 мг, приблизительно 40-90 мг, приблизительно 40-80 мг, приблизительно 40-70 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 50-200 мг, приблизительно 50-150 мг, приблизительно 50-120 мг, приблизительно 50-100 мг, приблизительно 50-90 мг, приблизительно 50-80 мг, приблизительно 50-70 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 60-200 мг, приблизительно 60-150 мг, приблизительно 60-120 мг, приблизительно 60-100 мг, приблизительно 60-90 мг, приблизительно 60-80 мг, приблизительно 60-70 мг, приблизительно 70-200 мг, приблизительно 70-150 мг, приблизительно 70-120 мг, приблизительно 70-100 мг, приблизительно 70-90 мг, приблизительно 70-80 мг, приблизительно 80-200 мг, приблизительно 80-150 мг, приблизительно 80-120 мг, приблизительно 80-100 мг, приблизительно 80-90 мг, приблизительно 90-200 мг, приблизительно 90-150 мг, приблизительно 90-120 мг, приблизительно 90-100 мг, приблизительно 100-200 мг, приблизительно 100-150 мг, приблизительно 100-120 мг, приблизительно 120-200 мг, приблизительно 120-150 мг, приблизительно 150-200 мг) полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17.
[0054] В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17.
В некоторых вариантах осуществления такие композиции содержат приблизительно 0,2-40 мг (например, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг) полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17.
Предусмотрено, что полипептиды, композиции и способы по настоящему изобретению можно применять для лечения любого типа повреждения суставного хряща (например, повреждения или поражения сустава), включая, например, повреждение, являющееся следствием травматического события или разрыва сухожилия или связки. В некоторых вариантах осуществления полипептиды, композиции и способы применяют для лечения повреждения сустава (например, повреждения суставного хряща). В конкретных вариантах осуществления повреждение сустава представляет собой травматическое поражение сустава (например, травматическое повреждение хряща). В других вариантах осуществления повреждение сустава или повреждение суставного хряща представляет собой повреждение, являющееся следствием возраста, или неактивности, или генетических факторов. В других вариантах осуществления повреждение сустава или повреждение суставного хряща представляет собой повреждение, являющееся следствием аутоиммунного нарушения. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения полипептиды, композиции и способы по настоящему изобретению можно применять для лечения остеоартрита.
В некоторых вариантах осуществления полипептиды, композиции и способы по настоящему изобретению предусматривают способ стимуляции пролиферации хондроцитов и/или выработки хряща в хрящевых тканях, которые были повреждены, например, вследствие травматического поражения или хондропатии. В конкретных вариантах осуществления полипептиды, композиции и способы по настоящему изобретению применимы для лечения повреждения хряща в суставах (например, повреждения суставного хряща), например, на суставных поверхностях, например, позвоночнике, плече, локте, запястье, суставах пальцев, бедре, колене, лодыжке и суставах ступни. Примеры заболеваний или нарушений, полезный эффект в отношении которых может обеспечить лечение, включают остеоартрит, ревматоидный артрит, другие аутоиммунные заболевания или рассекающий остеохондрит. Кроме того, повреждение или разрушение хряща встречается как результат определенных генетических или метаболических нарушений, патология хряща зачастую наблюдается у человека при различных формах карликовости, и/или повреждение или разрушение хряща зачастую является результатом реконструктивной хирургии, поэтому полипептиды, композиции и способы будут применимой терапией для таких пациентов, независимо от того, используются ли они отдельно или в сочетании с другими подходами.
Дополнительно предусмотрено, что полипептиды, композиции и способы по настоящему изобретению можно применять для лечения различных нарушений хрящевой ткани и/или ассоциированных с ними симптомов или эффектов таких состояний. Иллюстративные состояния или нарушения, для лечения которых применяют описываемые в данном документе полипептиды, композиции и способы, включают без ограничения ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, остеоартрит, дегенеративное заболевание межпозвонковых дисков, виды спондилоартропатии, синдром Элерса-Данлоса, системный склероз (склеродермию) или заболевание сухожилий.
В некоторых вариантах осуществления полипептиды и композиции по настоящему изобретению применяются путем прямой инъекции в синовиальную жидкость сустава или непосредственно в дефект хряща. Полипептиды, композиции и способы по настоящему изобретению также можно применять в сочетании с хирургической процедурой на пораженном суставе. Введение полипептида по настоящему изобретению можно осуществлять до, во время или в сочетании с и/или после хирургической процедуры. Например, полипептиды, композиции и способы по настоящему изобретению можно применять для размножения популяций хондроцитов в культуре для аутологичной или аллогенной имплантации хондроцитов. Хондроциты необязательно можно имплантировать с одновременным проведением лечения, заключающегося во введении полипептидов и композиций по настоящему изобретению. При проведении таких процедур, например, хондроциты можно собрать артроскопическим методом из непораженной, подвергающейся незначительной нагрузке зоны поврежденного сустава и можно культивировать in vitro необязательно в присутствии полипептидов и композиций по настоящему изобретению и/или других факторов роста для увеличения количества клеток перед трансплантацией. Затем размноженные культуры необязательно смешивают с полипептидами и композициями по настоящему изобретению и/или помещают в суставную щель или непосредственно в область дефекта. В определенных вариантах осуществления размноженные культуры (необязательно с полипептидами по настоящему изобретению) помещают в суставную щель суспендированными в матриксе или мембране. В других вариантах осуществления полипептиды и композиции по настоящему изобретению можно применять в комбинации с одним или несколькими периостальными или перихондриальными трансплантатами, которые содержат образующие хрящ клетки и/или помогают удерживать трансплантированные хондроциты или клетки-предшественники хондроцитов на своем месте. В некоторых вариантах осуществления полипептиды и композиции по настоящему изобретению применяют для восстановления повреждения хряща (например, повреждения суставного хряща) в сочетании с другими процедурами, включая без ограничения промывание полости сустава, стимуляцию костного мозга, абразивную артропластику, рассверливание субхондральной кости или создание микротрещин в проксимальной части субхондральной кости. Необязательно, после введения полипептидов и композиций по настоящему изобретению и роста хряща благоприятный эффект может обеспечить дополнительное хирургическое лечение для надлежащего оконтуривания новообразованной(-ых) поверхности(-ей) хряща.
Фармацевтическая композиция
[0055] В данном документе также предусмотрены, например, фармацевтические композиции, содержащие один или несколько описываемых в данном документе протеазоустойчивых полипептидов ANGPTL3 с хондрогенной активностью. Такие композиции могут содержать один или несколько наполнителей или носителей, например, фармацевтически приемлемый наполнитель или носитель.
[0056] В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, которые содержат терапевтически эффективное количество белка или пептида в смеси, составлены с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями или носителем, выбранными за соответствие требованиям способа введения, формы доставки и требуемой дозировки.
[0057] В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции, содержащие протеазоустойчивые полипептиды ANGPTL3 с хондрогенной активностью, подходят для внутрисуставного введения.
Фармацевтические композиции могут находиться в различных формах. Они предусматривают, например, жидкие, полутвердые или твердые формы. Форма зависит от предполагаемого способа введения и терапевтического применения. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкий раствор, например, инъекционный раствор. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция представляет собой порошок, например, лиофилизат. Для хранения лиофилизированных фармацевтических композиций, как правило, не требуются особые условия, такие как хранение при низких температурах. Лиофилизация применима для разработки фармацевтических лекарственных продуктов, которые восстанавливают и вводят пациенту путем инъекции. Например, лиофилизированный лекарственный продукт можно восстановить непосредственно перед инъекцией путем добавления подходящего разбавителя для введения (например, стерильной воды).
[0058] В данном документе предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, содержащие приблизительно 0,2-200 мг описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью. Например, такие композиции могут содержать приблизительно 0,2-200 мг, приблизительно 0,2-150 мг, приблизительно 0,2-120 мг, приблизительно 0,2-100 мг, приблизительно 0,2-90 мг, приблизительно 0,2-80 мг, приблизительно 0,2-70 мг, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-200 мг, приблизительно 2-150 мг, приблизительно 2-120 мг, приблизительно 2-100 мг, приблизительно 2-90 мг, приблизительно 2-80 мг, приблизительно 2-70 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 10-200 мг, приблизительно 10-150 мг, приблизительно 10-120 мг, приблизительно 10-100 мг, приблизительно 10-90 мг, приблизительно 10-80 мг, приблизительно 10-70 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 20-200 мг, приблизительно 20-150 мг, приблизительно 20-120 мг, приблизительно 20-100 мг, приблизительно 20-90 мг, приблизительно 20-80 мг, приблизительно 20-70 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 40-200 мг, приблизительно 40-150 мг, приблизительно 40-120 мг, приблизительно 40-100 мг, приблизительно 40-90 мг, приблизительно 40-80 мг, приблизительно 40-70 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 50-200 мг, приблизительно 50-150 мг, приблизительно 50-120 мг, приблизительно 50-100 мг, приблизительно 50-90 мг, приблизительно 50-80 мг, приблизительно 50-70 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 60-200 мг, приблизительно 60-150 мг, приблизительно 60-120 мг, приблизительно 60-100 мг, приблизительно 60-90 мг, приблизительно 60-80 мг, приблизительно 60-70 мг, приблизительно 70-200 мг, приблизительно 70-150 мг, приблизительно 70-120 мг, приблизительно 70-100 мг, приблизительно 70-90 мг, приблизительно 70-80 мг, приблизительно 80-200 мг, приблизительно 80-150 мг, приблизительно 80-120 мг, приблизительно 80-100 мг, приблизительно 80-90 мг, приблизительно 90-200 мг, приблизительно 90-150 мг, приблизительно 90-120 мг, приблизительно 90-100 мг, приблизительно 100-200 мг, приблизительно 100-150 мг, приблизительно 100-120 мг, приблизительно 120-200 мг, приблизительно 120-150 мг, приблизительно 150-200 мг протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
[0059] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, содержащие приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
[0060] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, содержащие приблизительно 0,2-40 мг (например, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг) описываемого в данном документе протеазоустойчивого полипептида ANGPTL3 с хондрогенной активностью.
[0061] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где полипептид содержит аминокислоту, которая представляет собой полярную аминокислоту, отличную от K или R, в положении 423, как определено со ссылкой на SEQ ID NO:1, и полипептид характеризуется хондрогенной активностью. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью или по меньшей мере 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, перечисленной в таблице 1, где аминокислотный остаток, соответствующий положению 423 из SEQ ID NO: 1, представляет собой Q или S или подвергнут делеции.
[0062] В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из любой из последовательностей, перечисленных в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 содержит SEQ ID NO: 17. В некоторых вариантах осуществления протеазоустойчивый полипептид ANGPTL3 состоит из SEQ ID NO: 17.
[0063] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, содержащие приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17.
[0064] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, содержащие приблизительно 0,2-60 мг (например, приблизительно 0,2-60 мг, приблизительно 0,2-55 мг, приблизительно 0,2-50 мг, приблизительно 0,2-45 мг, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-60 мг, приблизительно 2-55 мг, приблизительно 2-50 мг, приблизительно 2-45 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-60 мг, приблизительно 5-55 мг, приблизительно 5-50 мг, приблизительно 5-45 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-60 мг, приблизительно 10-55 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 10-45 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-60 мг, приблизительно 15-55 мг, приблизительно 15-50 мг, приблизительно 15-45 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-60 мг, приблизительно 20-55 мг, приблизительно 20-50 мг, приблизительно 20-45 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-60 мг, приблизительно 30-55 мг, приблизительно 30-50 мг, приблизительно 30-45 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-60 мг, приблизительно 35-55 мг, приблизительно 35-50 мг, приблизительно 35-45 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 40-60 мг, приблизительно 40-55 мг, приблизительно 40-50 мг, приблизительно 40-45 мг, приблизительно 45-60 мг, приблизительно 45-55 мг, приблизительно 45-50 мг, приблизительно 50-60 мг, приблизительно 50-55 мг, приблизительно 55-60 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 41 мг, приблизительно 42 мг, приблизительно 43 мг, приблизительно 44 мг, приблизительно 45 мг, приблизительно 46 мг, приблизительно 47 мг, приблизительно 48 мг, приблизительно 49 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 51 мг, приблизительно 52 мг, приблизительно 53 мг, приблизительно 54 мг, приблизительно 55 мг, приблизительно 56 мг, приблизительно 57 мг, приблизительно 58 мг, приблизительно 59 мг, приблизительно 60 мг) полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17.
[0065] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, содержащие приблизительно 0,2-40 мг (например, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг) полипептида, содержащего SEQ ID NO: 17.
[0066] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, содержащие приблизительно 0,2-40 мг (например, приблизительно 0,2-40 мг, приблизительно 0,2-35 мг, приблизительно 0,2-30 мг, приблизительно 0,2-25 мг, приблизительно 0,2-20 мг, приблизительно 0,2-15 мг, приблизительно 0,2-10 мг, приблизительно 0,2-5 мг, приблизительно 0,2-2 мг, приблизительно 2-40 мг, приблизительно 2-35 мг, приблизительно 2-30 мг, приблизительно 2-25 мг, приблизительно 2-20 мг, приблизительно 2-15 мг, приблизительно 2-10 мг, приблизительно 2-5 мг, приблизительно 5-40 мг, приблизительно 5-35 мг, приблизительно 5-30 мг, приблизительно 5-25 мг, приблизительно 5-20 мг, приблизительно 5-15 мг, приблизительно 5-10 мг, приблизительно 10-40 мг, приблизительно 10-35 мг, приблизительно 10-30 мг, приблизительно 10-25 мг, приблизительно 10-20 мг, приблизительно 10-15 мг, приблизительно 15-40 мг, приблизительно 15-35 мг, приблизительно 15-30 мг, приблизительно 15-25 мг, приблизительно 15-20 мг, приблизительно 20-40 мг, приблизительно 20-35 мг, приблизительно 20-30 мг, приблизительно 20-25 мг, приблизительно 25-60 мг, приблизительно 25-55 мг, приблизительно 25-50 мг, приблизительно 25-45 мг, приблизительно 25-40 мг, приблизительно 25-35 мг, приблизительно 25-30 мг, приблизительно 30-40 мг, приблизительно 30-35 мг, приблизительно 35-40 мг, приблизительно 0,2 мг, приблизительно 0,5 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 2 мг, приблизительно 3 мг, приблизительно 4 мг, приблизительно 5 мг, приблизительно 6 мг, приблизительно 7 мг, приблизительно 8 мг, приблизительно 9 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 11 мг, приблизительно 12 мг, приблизительно 13 мг, приблизительно 14 мг, приблизительно 15 мг, приблизительно 16 мг, приблизительно 17 мг, приблизительно 18 мг, приблизительно 19 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 21 мг, приблизительно 22 мг, приблизительно 23 мг, приблизительно 24 мг, приблизительно 25 мг, приблизительно 26 мг, приблизительно 27 мг, приблизительно 28 мг, приблизительно 29 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 31 мг, приблизительно 32 мг, приблизительно 33 мг, приблизительно 34 мг, приблизительно 35 мг, приблизительно 36 мг, приблизительно 37 мг, приблизительно 38 мг, приблизительно 39 мг, приблизительно 40 мг) полипептида, состоящего из SEQ ID NO: 17.
[0067] В некоторых вариантах осуществления композиции дополнительно содержат углевод. В некоторых вариантах осуществления композиции дополнительно содержат буфер или буферный компонент. В некоторых вариантах осуществления композиции дополнительно содержат поверхностно-активное вещество, например полисорбат 80.
В некоторых вариантах осуществления описываемые в данном документе композиции содержат буфер или буферный компонент. Буферы хорошо известны как средства для контроля pH, применяемые не только в качестве средства для доставки лекарственного средства (например, полипептида) при физиологически совместимом pH (т. е. для улучшения переносимости), но и для обеспечения условий раствора, благоприятных для химической стабильности лекарственного средства (например, полипептида).
Неограничивающие примеры буферов, которые можно применять в описываемых в данном документе композициях, включают гистидиновый буфер, фосфатный буфер, глициновый буфер, ацетатный буфер, цитратный буфер, лактатный буфер, тартратный буфер или буфер на основе соляной кислоты. В некоторых вариантах осуществления описываемые в данном документе композиции включают буфер, выбранный из гистидинового буфера, фосфатного буфера, глицинового буфера или ацетатного буфера или их компонента. Предпочтительным буфером является гистидиновый буфер, а предпочтительным буферным компонентом является гистидин.
рН может иметь определяющее значение для получения оптимизированной композиции на основе белка, например, жидкой композиции на основе белка с повышенной стабильностью. Действие рН может проявляться в том, что оно воздействует на конформацию, и/или агрегацию, и/или разрушение, и/или реакционную способность белка. Предпочтительно рН составляет менее 7,0, более предпочтительно в диапазоне от приблизительно 5,0 до приблизительно 7,0, более предпочтительно от приблизительно 5,5 до приблизительно 6,1, более предпочтительно приблизительно 5,8. В некоторых вариантах осуществления pH описываемой в данном документе композиции составляет от 5,5 до 6,1, например, приблизительно 5,5, приблизительно 5,6, приблизительно 5,7, приблизительно 5,8, приблизительно 5,9, приблизительно 6,0, приблизительно 6,1. Предпочтительно pH композиции составляет приблизительно 5,8.
В некоторых вариантах осуществления в композицию включен углевод. Углевод может вызывать большую компактизацию белка и, например, приводить к погружению или иному затруднению доступа к активному фрагменту. Это может увеличивать стабильность белка, например, за счет уменьшения агрегации белка.
В некоторых вариантах осуществления описываемые в данном документе композиции содержат углевод. Предпочтительным углеводом является сахароза. Другие предпочтительные углеводы, подходящие для применения, включают трегалозу, мальтозу, рафинозу, глюкозу, сорбит, декстран, циклодекстрин или маннит. Другие подходящие вещества, которые можно применять для стабилизации белка, включают углеводы, такие как лактоза и арабиноза; полиолы, такие как маннит, глицерин и ксилит; аминокислоты, такие как глицин, аргинин, лизин, гистидин, аланин, метионин и лейцин; и полимеры, такие как PEG, полоксомеры, декстран, полипропиленгликоль, полисахариды, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия, поливинилпирролидон (PVP), гидролизованный желатин и человеческий альбумин. В некоторых вариантах осуществления в описываемых в данном документе композициях применяют комбинацию из двух или более таких углеводов (например, сахарозы и трегалозы). Пригодность потенциального углевода для комбинации можно тестировать.
Поверхностно-активное вещество можно добавить в композицию для повышения стабильности белка, например, для уменьшения разрушения белка, например, вследствие образования поверхности контакта воздух/жидкость при встряхивании/транспортировке. Выбирают поверхностно-активное вещество, которое повышает стабильность белка, например, не вызывает разрушения белка в композиции. Подходящим для применения поверхностно-активным веществом, является, например, полисорбат 80.
ПРИМЕРЫ
Настоящее изобретение дополнительно описано в следующих примерах, которые не ограничивают объем настоящего изобретения, описанного в формуле изобретения.
Пример 1. Введение полипептидов ANGPTL3 пациентам-людям с первичным остеоартритом
Рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое исследование первого применения препарата на человеке с однократной возрастающей дозой полипептида ANGPTL3 с SEQ ID NO: 17 у пациентов с первичным остеоартритом, у которых запланирована полная замена коленного сустава (TKR), продолжается в настоящее время.
На ФИГ. 1 показан дизайн исследования, который был разработан для оценки безопасности и переносимости полипептида ANGPTL3 после одной внутрисуставной (i.a.) инъекции в коленный сустав пациентов с первичным остеоартритом (ОА) перед его удалением при полной замене коленного сустава (TKR). Приблизительно 28 пациентов следует включить в семь когорт. В каждой когорте три пациента получают лечение полипептидом ANGPTL3 и один пациент получает лечение плацебо. Пациентам из когорты 1 вводили внутрисуставную инъекцию полипептида ANGPTL3 в дозе 0,2 мг/колено или плацебо приблизительно за 7 дней до проведения TKR. Пациентам из когорты 2 вводили внутрисуставную инъекцию полипептида ANGPTL3 в дозе 2 мг/колено или плацебо приблизительно за 7 дней до проведения TKR. Пациентам из когорты 3 вводили внутрисуставную инъекцию полипептида ANGPTL3 в дозе 10 мг/колено или плацебо приблизительно за 7 дней до проведения TKR. Пациентам из когорты 4 вводили внутрисуставную инъекцию полипептида ANGPTL3 в дозе 20 мг/колено или плацебо приблизительно за 7 дней до проведения TKR. Дозу и время введения до хирургической операции для когорт 5-7 выбирали на основе результатов анализа когорт 1-4. Пациентам из когорты 5 будут вводить внутрисуставную инъекцию полипептида ANGPTL3 в дозе 20 мг/колено или плацебо приблизительно за 2 часа до проведения TKR. Пациентам из когорты 6 будут вводить внутрисуставную инъекцию полипептида ANGPTL3 в дозе 20 мг/колено или плацебо приблизительно за 21 дня до проведения TKR. Пациентам из когорты 7 будут вводить внутрисуставную инъекцию полипептида ANGPTL3 в дозе 40 мг/колено или плацебо приблизительно за 7 дней до проведения TKR. Информация о популяции и демографических данных пациентов из когорт 1-4 показана в таблице 2 и таблице 3.
Начальная доза, составляющая 0,2 мг/колено, для пациента-человека была выбрана на основе данных о безопасности и эффективности, полученных в исследованиях с введением доз на крысах и собаках, и, ожидается, что она должна приводить к умеренному фармакологическому эффекту.
Доза, составляющая 20 мг/колено, для пациента-человека была выбрана на основе объема синовиальной жидкости сустава и растворимости полипептида ANGPTL3 с SEQ ID NO: 17 в синовиальной жидкости сустава, а также результатов исследований с введением внутрисуставных доз на собаках. По оценкам, площадь хряща в колене собаки составляет 196 мм2; в то же время, по оценкам, площадь хряща в колене человека составляет 1215 мм2. Исходя из результатов исследований с введением внутрисуставных доз на собаках доза, составляющая 20 мг/колено, характеризуется приемлемым резервом безопасности.
В ходе промежуточного анализа, охватывающего всех пациентов из когорт 1-4 до визита с проведением хирургической операции TKR, все конечные точки безопасности (включая нежелательные явления CTC-AE, физикальное обследование, показатели жизненно важных функций, ЭКГ, лабораторное исследование безопасности и боль, измеряемую с применением KOOS) измеряли вплоть до 7 дней после введения дозы включительно. Не сообщалось о каких-либо неблагоприятных эффектах, которые предположительно были связаны с лечением.
Подводя итог, в когортах 1-4 не наблюдали никаких значимых данных, связанных с проблемами безопасности. Иммуногенность не наблюдали в случае 16 пациентов, которым вводили полипептид ANGPTL3 с SEQ ID NO: 17.
Поскольку протестированная доза, составляющая 20 мг/колено, в когорте 4 хорошо переносилась всеми подвергнутыми лечению пациентами (N=3) без каких-либо специфических проблем, связанных с безопасностью, в случае когорты 7 запланировали дополнительное повышение дозы до 40 мг/колено. На основе результатов исследований токсичности на собаках и крысах (см. таблицу 4) предполагаемое системное воздействие при дозе 40 мг/колено все еще будет ассоциировано с достаточным резервом безопасности. В дополнение к высокому резерву системной безопасности причина включения дозы, составляющей 40 мг/колено, также основана на (i) результатах доклинических фармакологических исследований, которые обосновывают необходимость изучения безопасности потенциально более эффективной дозы полипептида ANGPTL3 с SEQ ID NO: 17; (ii) благоприятном профиле безопасности полипептида ANGPTL3 с SEQ ID NO: 17 вплоть до дозы, составляющей 20 мг/колено, без каких-либо продемонстрированных на сегодняшний день неблагоприятных эффектов, связанных с лекарственным средством; (iii) локальном резерве безопасности для хряща по результатам исследований на собаках (см. таблицу 5).
Таблица 2. Популяция пациентов
Популяция | 0,2 мг/ колено N=3 |
2 мг/ колено N=3 |
10 мг/ колено N=3 |
20 мг/ колено N=4* |
Плацебо** N=5* |
Рандомизированные | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 4 (100,0) | 5 (100,0) |
Группа анализа безопасности | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 3 (75,0) | 4 (80,0) |
Группа PK-анализа | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 3 (75,0) | 4 (80,0) |
Группа анализа биомаркеров | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 3 (100,0) | 3 (75,0) | 4 (80,0) |
*По одному субъекту в каждой из группы дозы 20 мг/колено и группы плацебо были рандомизированы, но отозвали свое согласие до введения дозы. |
Таблица 3. Демографические данные пациентов
Параметр | 0,2 мг/ колено N=3 |
2 мг/ колено N=3 |
10 мг/ колено N=3 |
20 мг/ колено N=3 |
Плацебо ** N=4 |
Все субъекты N=16 |
|
Пол | Мужчина | 2 (67%) | 2 (67%) | 0 | 1 (33%) | 1 (25%) | 6 (38%) |
Женщина | 1 (33%) | 1 (33%) | 3 (100%) | 2 (67%) | 3 (75%) | 10 (63%) | |
Возраст (лет) | Среднее (SD) | 57,7 (7,23) | 63,3 (3,79) | 67,7 (2,08) | 68,0 (5,20) | 60,3 (9,22) | 63,2 (6,86) |
Размах | 53-66 | 59-66 | 66-70 | 65-74 | 51-73 | 51-74 | |
Вес (кг) | Среднее (SD) | 92,4 (25,14) | 82,2 (1,60) | 70,1 (18,52) | 110,0 (21,21) | 98,2 (11,73) | 91,1 (20,18) |
Размах | 64-113 | 81-84 | 54-91 | 91-133 | 85-113 | 54-133 | |
Рост (см) | Среднее (SD) | 170,6 (10,18) | 174,5 (3,21) | 159,4 (6,85) | 169,3 (12,02) | 168,2 (15,57) | 168,4 (10,67) |
Размах | 160-180 | 171-178 | 152-165 | 160-183 | 146-182 | 146-183 | |
BMI (кг/м2) | Среднее (SD) | 31,9 (8,97) | 27,0 (0,80) | 27,3 (5,16) | 38,1 (2,30) | 35,1 (5,22) | 32,1 (6,30) |
Размах | 22-39 | 27-28 | 24-33 | 35-40 | 29-40 | 22-40 |
Таблица 4. Резерв системной безопасности
Вид | NOAEL* (мг/кг/ день) |
HED# (мг/кг/ день) |
Резерв системной безопасности при дозе 0,2 мг/колено |
Резерв системной безопасности при дозе 20 мг/колено |
Резерв системной безопасности при дозе 40 мг/колено |
Крыса | 50 | 8,06 | 2820 | 28,2 | 14,1 |
Собака | 20 | 11,1 | 3880 | 38,8 | 19,4 |
*NOAEL=уровень, при котором не наблюдали никаких неблагоприятных эффектов #HED=эквивалентная человеческая доза |
Таблица 5. Резерв локальной безопасности
Вид | NOAEL* (мг/колено) |
Ткань | Резерв локальной безопасности при дозе 0,2 мг/колено |
Резерв локальной безопасности при дозе 20 мг/колено |
Резерв локальной безопасности при дозе 40 мг/колено |
Собака | 4 | Синовиальная жидкость | 140 | 1,40 | 0,70 |
Собака | 4 | Хрящ | 124 | 1,24 | 0,62 |
*NOAEL=уровень, при котором не наблюдали никаких неблагоприятных эффектов |
Если не определено иное, технические и научные термины, применяемые в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в области техники, к которой относится настоящее изобретение.
Если не указано иное, все способы, стадии, методики и манипуляции, которые конкретно не описаны подробно, можно было осуществлять и осуществляли широко известным способом, как будет ясно специалисту в данной области. Например, снова сделана ссылка на стандартные руководства и общий уровень техники, упоминаемый в данном документе, а также на дополнительные литературные источники, цитируемые в данном документе. Если не указано иное, каждый из литературных источников, цитируемых в данном документе, включен посредством ссылки во всей своей полноте.
Пункты формулы изобретения являются неограничивающими и представлены ниже.
Хотя конкретные аспекты и пункты формулы изобретения были подробно раскрыты в данном документе, это было выполнено в качестве примера лишь в целях иллюстрации, и не предназначено для ограничений с точки зрения объема прилагаемой формулы изобретения или объема объекта формулы изобретения с любым соответствующим дальнейшим применением. В частности, авторы настоящего изобретения подразумевают, что различные замены, изменения и модификации могут быть выполнены в настоящем изобретении без отклонения от сути и объема настоящего изобретения, определяемого формулой изобретения. Считается, что выбор исходного материала в виде нуклеиновой кислоты, представляющего интерес клона или типа библиотеки, является обычным делом для рядового специалиста в данной области, располагающего сведениями об аспектах, описанных в данном документе. Считается, что другие аспекты, преимущества и модификации находятся в пределах объема следующей формулы изобретения. Специалистам в данной области будут понятны многие эквиваленты конкретных аспектов настоящего изобретения, описанного в данном документе, или путем проведения всего лишь обычных экспериментов они будут способны установить такие эквиваленты. Предусмотрено, что такие эквиваленты охвачены следующей формулой изобретения. Изменение объема пункта формулы изобретения в позднее поданных соответствующих заявках может быть обусловлено ограничениями патентных законов различных стран и не должно пониматься как отказ от объекта формулы изобретения.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> NOVARTIS AG
<120> СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЯ ХРЯЩА И АРТРИТА
<130> PAT057513-WO-PCT
<140>
<141>
<150> 62/560,301
<151> 2017-09-19
<150> 62/421,534
<151> 2016-11-14
<160> 44
<170> PatentIn версия 3.5
<210> 1
<211> 460
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 1
Met Phe Thr Ile Lys Leu Leu Leu Phe Ile Val Pro Leu Val Ile Ser
5 10 15
Ser Arg Ile Asp Gln Asp Asn Ser Ser Phe Asp Ser Leu Ser Pro Glu
20 25 30
Pro Lys Ser Arg Phe Ala Met Leu Asp Asp Val Lys Ile Leu Ala Asn
35 40 45
Gly Leu Leu Gln Leu Gly His Gly Leu Lys Asp Phe Val His Lys Thr
50 55 60
Lys Gly Gln Ile Asn Asp Ile Phe Gln Lys Leu Asn Ile Phe Asp Gln
65 70 75 80
Ser Phe Tyr Asp Leu Ser Leu Gln Thr Ser Glu Ile Lys Glu Glu Glu
85 90 95
Lys Glu Leu Arg Arg Thr Thr Tyr Lys Leu Gln Val Lys Asn Glu Glu
100 105 110
Val Lys Asn Met Ser Leu Glu Leu Asn Ser Lys Leu Glu Ser Leu Leu
115 120 125
Glu Glu Lys Ile Leu Leu Gln Gln Lys Val Lys Tyr Leu Glu Glu Gln
130 135 140
Leu Thr Asn Leu Ile Gln Asn Gln Pro Glu Thr Pro Glu His Pro Glu
145 150 155 160
Val Thr Ser Leu Lys Thr Phe Val Glu Lys Gln Asp Asn Ser Ile Lys
165 170 175
Asp Leu Leu Gln Thr Val Glu Asp Gln Tyr Lys Gln Leu Asn Gln Gln
180 185 190
His Ser Gln Ile Lys Glu Ile Glu Asn Gln Leu Arg Arg Thr Ser Ile
195 200 205
Gln Glu Pro Thr Glu Ile Ser Leu Ser Ser Lys Pro Arg Ala Pro Arg
210 215 220
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
225 230 235 240
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
245 250 255
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
260 265 270
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
275 280 285
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
290 295 300
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
305 310 315 320
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
325 330 335
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
340 345 350
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
355 360 365
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
370 375 380
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
385 390 395 400
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
405 410 415
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Lys Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
420 425 430
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
435 440 445
Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
450 455 460
<210> 2
<211> 2951
<212> ДНК
<213> Homo sapiens
<400> 2
atatatagag ttaagaagtc taggtctgct tccagaagaa aacagttcca cgttgcttga 60
aattgaaaat caagataaaa atgttcacaa ttaagctcct tctttttatt gttcctctag 120
ttatttcctc cagaattgat caagacaatt catcatttga ttctctatct ccagagccaa 180
aatcaagatt tgctatgtta gacgatgtaa aaattttagc caatggcctc cttcagttgg 240
gacatggtct taaagacttt gtccataaga cgaagggcca aattaatgac atatttcaaa 300
aactcaacat atttgatcag tctttttatg atctatcgct gcaaaccagt gaaatcaaag 360
aagaagaaaa ggaactgaga agaactacat ataaactaca agtcaaaaat gaagaggtaa 420
agaatatgtc acttgaactc aactcaaaac ttgaaagcct cctagaagaa aaaattctac 480
ttcaacaaaa agtgaaatat ttagaagagc aactaactaa cttaattcaa aatcaacctg 540
aaactccaga acacccagaa gtaacttcac ttaaaacttt tgtagaaaaa caagataata 600
gcatcaaaga ccttctccag accgtggaag accaatataa acaattaaac caacagcata 660
gtcaaataaa agaaatagaa aatcagctca gaaggactag tattcaagaa cccacagaaa 720
tttctctatc ttccaagcca agagcaccaa gaactactcc ctttcttcag ttgaatgaaa 780
taagaaatgt aaaacatgat ggcattcctg ctgaatgtac caccatttat aacagaggtg 840
aacatacaag tggcatgtat gccatcagac ccagcaactc tcaagttttt catgtctact 900
gtgatgttat atcaggtagt ccatggacat taattcaaca tcgaatagat ggatcacaaa 960
acttcaatga aacgtgggag aactacaaat atggttttgg gaggcttgat ggagaatttt 1020
ggttgggcct agagaagata tactccatag tgaagcaatc taattatgtt ttacgaattg 1080
agttggaaga ctggaaagac aacaaacatt atattgaata ttctttttac ttgggaaatc 1140
acgaaaccaa ctatacgcta catctagttg cgattactgg caatgtcccc aatgcaatcc 1200
cggaaaacaa agatttggtg ttttctactt gggatcacaa agcaaaagga cacttcaact 1260
gtccagaggg ttattcagga ggctggtggt ggcatgatga gtgtggagaa aacaacctaa 1320
atggtaaata taacaaacca agagcaaaat ctaagccaga gaggagaaga ggattatctt 1380
ggaagtctca aaatggaagg ttatactcta taaaatcaac caaaatgttg atccatccaa 1440
cagattcaga aagctttgaa tgaactgagg caaatttaaa aggcaataat ttaaacatta 1500
acctcattcc aagttaatgt ggtctaataa tctggtatta aatccttaag agaaagcttg 1560
agaaatagat tttttttatc ttaaagtcac tgtctattta agattaaaca tacaatcaca 1620
taaccttaaa gaataccgtt tacatttctc aatcaaaatt cttataatac tatttgtttt 1680
aaattttgtg atgtgggaat caattttaga tggtcacaat ctagattata atcaataggt 1740
gaacttatta aataactttt ctaaataaaa aatttagaga cttttatttt aaaaggcatc 1800
atatgagcta atatcacaac tttcccagtt taaaaaacta gtactcttgt taaaactcta 1860
aacttgacta aatacagagg actggtaatt gtacagttct taaatgttgt agtattaatt 1920
tcaaaactaa aaatcgtcag cacagagtat gtgtaaaaat ctgtaataca aatttttaaa 1980
ctgatgcttc attttgctac aaaataattt ggagtaaatg tttgatatga tttatttatg 2040
aaacctaatg aagcagaatt aaatactgta ttaaaataag ttcgctgtct ttaaacaaat 2100
ggagatgact actaagtcac attgacttta acatgaggta tcactatacc ttatttgtta 2160
aaatatatac tgtatacatt ttatatattt taacacttaa tactatgaaa acaaataatt 2220
gtaaaggaat cttgtcagat tacagtaaga atgaacatat ttgtggcatc gagttaaagt 2280
ttatatttcc cctaaatatg ctgtgattct aatacattcg tgtaggtttt caagtagaaa 2340
taaacctcgt aacaagttac tgaacgttta aacagcctga caagcatgta tatatgttta 2400
aaattcaata aacaaagacc cagtccctaa attatagaaa tttaaattat tcttgcatgt 2460
ttatcgacat cacaacagat ccctaaatcc ctaaatccct aaagattaga tacaaatttt 2520
ttaccacagt atcacttgtc agaatttatt tttaaatatg attttttaaa actgccagta 2580
agaaatttta aattaaaccc atttgttaaa ggatatagtg cccaagttat atggtgacct 2640
acctttgtca atacttagca ttatgtattt caaattatcc aatatacatg tcatatatat 2700
ttttatatgt cacatatata aaagatatgt atgatctatg tgaatcctaa gtaaatattt 2760
tgttccagaa aagtacaaaa taataaaggt aaaaataatc tataattttc aggaccacag 2820
actaagctgt cgaaattaac gctgattttt ttagggccag aataccaaaa tggctcctct 2880
cttcccccaa aattggacaa tttcaaatgc aaaataattc attatttaat atatgagttg 2940
cttcctctat t 2951
<210> 3
<211> 253
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 3
Ile Gln Glu Pro Thr Glu Ile Ser Leu Ser Ser Lys Pro Arg Ala Pro
5 10 15
Arg Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His
20 25 30
Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His
35 40 45
Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His
50 55 60
Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His
65 70 75 80
Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys
85 90 95
Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys
100 105 110
Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu
115 120 125
Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu
130 135 140
Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly
145 150 155 160
Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr
165 170 175
Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser
180 185 190
Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly
195 200 205
Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly
210 215 220
Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr
225 230 235 240
Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
245 250
<210> 4
<211> 253
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 4
Ile Gln Glu Pro Thr Glu Ile Ser Leu Ser Ser Lys Pro Arg Ala Pro
5 10 15
Arg Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His
20 25 30
Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His
35 40 45
Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His
50 55 60
Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His
65 70 75 80
Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys
85 90 95
Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys
100 105 110
Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu
115 120 125
Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu
130 135 140
Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly
145 150 155 160
Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr
165 170 175
Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser
180 185 190
Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly
195 200 205
Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly
210 215 220
Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr
225 230 235 240
Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
245 250
<210> 5
<211> 236
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 5
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
5 10 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
20 25 30
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
35 40 45
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
50 55 60
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
65 70 75 80
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
85 90 95
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
100 105 110
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
115 120 125
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
130 135 140
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
145 150 155 160
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
165 170 175
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
180 185 190
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
195 200 205
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
210 215 220
Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230 235
<210> 6
<211> 236
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 6
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
5 10 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
20 25 30
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
35 40 45
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
50 55 60
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
65 70 75 80
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
85 90 95
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
100 105 110
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
115 120 125
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
130 135 140
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
145 150 155 160
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
165 170 175
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
180 185 190
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
195 200 205
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
210 215 220
Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230 235
<210> 7
<211> 236
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 7
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
5 10 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
20 25 30
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
35 40 45
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
50 55 60
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
65 70 75 80
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
85 90 95
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
100 105 110
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
115 120 125
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
130 135 140
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
145 150 155 160
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
165 170 175
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
180 185 190
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Lys Thr Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
195 200 205
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
210 215 220
Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230 235
<210> 8
<211> 235
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 8
Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly
5 10 15
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
20 25 30
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
35 40 45
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
50 55 60
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
85 90 95
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
100 105 110
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
115 120 125
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
130 135 140
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
145 150 155 160
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
165 170 175
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
180 185 190
Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
195 200 205
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
210 215 220
Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230 235
<210> 9
<211> 235
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 9
Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly
5 10 15
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
20 25 30
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
35 40 45
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
50 55 60
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
85 90 95
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
100 105 110
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
115 120 125
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
130 135 140
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
145 150 155 160
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
165 170 175
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
180 185 190
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
195 200 205
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
210 215 220
Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230 235
<210> 10
<211> 233
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 10
Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro
5 10 15
Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met
20 25 30
Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp
35 40 45
Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly
50 55 60
Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly
65 70 75 80
Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile
85 90 95
Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys
100 105 110
Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu
115 120 125
Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn
130 135 140
Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys
145 150 155 160
Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp
165 170 175
Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys
180 185 190
Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys
195 200 205
Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile
210 215 220
His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230
<210> 11
<211> 233
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 11
Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro
5 10 15
Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met
20 25 30
Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp
35 40 45
Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly
50 55 60
Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly
65 70 75 80
Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile
85 90 95
Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys
100 105 110
Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu
115 120 125
Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn
130 135 140
Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys
145 150 155 160
Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp
165 170 175
Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys
180 185 190
Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys
195 200 205
Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile
210 215 220
His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230
<210> 12
<211> 233
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 12
Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro
5 10 15
Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met
20 25 30
Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp
35 40 45
Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly
50 55 60
Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly
65 70 75 80
Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile
85 90 95
Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys
100 105 110
Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu
115 120 125
Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn
130 135 140
Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys
145 150 155 160
Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp
165 170 175
Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys
180 185 190
Pro Arg Ala Lys Thr Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys
195 200 205
Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile
210 215 220
His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230
<210> 13
<211> 228
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 13
Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr
5 10 15
Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro
20 25 30
Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser
35 40 45
Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn
50 55 60
Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu
65 70 75 80
Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn
85 90 95
Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr
100 105 110
Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu
115 120 125
His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn
130 135 140
Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe
145 150 155 160
Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys
165 170 175
Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser
180 185 190
Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg
195 200 205
Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser
210 215 220
Glu Ser Phe Glu
225
<210> 14
<211> 228
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 14
Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr
5 10 15
Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro
20 25 30
Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser
35 40 45
Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn
50 55 60
Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu
65 70 75 80
Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn
85 90 95
Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr
100 105 110
Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu
115 120 125
His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn
130 135 140
Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe
145 150 155 160
Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys
165 170 175
Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser
180 185 190
Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg
195 200 205
Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser
210 215 220
Glu Ser Phe Glu
225
<210> 15
<211> 220
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
5 10 15
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
20 25 30
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
35 40 45
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
50 55 60
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
65 70 75 80
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
85 90 95
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
100 105 110
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
115 120 125
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
130 135 140
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
145 150 155 160
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
165 170 175
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
180 185 190
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
195 200 205
Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
210 215 220
<210> 16
<211> 220
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 16
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
5 10 15
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
20 25 30
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
35 40 45
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
50 55 60
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
65 70 75 80
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
85 90 95
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
100 105 110
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
115 120 125
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
130 135 140
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
145 150 155 160
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
165 170 175
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
180 185 190
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
195 200 205
Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
210 215 220
<210> 17
<211> 219
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 17
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
5 10 15
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
20 25 30
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
35 40 45
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
50 55 60
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
65 70 75 80
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
85 90 95
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
100 105 110
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
115 120 125
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
130 135 140
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
145 150 155 160
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
165 170 175
Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
180 185 190
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
195 200 205
Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
210 215
<210> 18
<211> 219
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 18
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
5 10 15
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
20 25 30
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
35 40 45
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
50 55 60
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
65 70 75 80
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
85 90 95
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
100 105 110
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
115 120 125
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
130 135 140
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
145 150 155 160
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
165 170 175
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
180 185 190
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
195 200 205
Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
210 215
<210> 19
<211> 231
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 19
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
5 10 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
20 25 30
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
35 40 45
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
50 55 60
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
65 70 75 80
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
85 90 95
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
100 105 110
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
115 120 125
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
130 135 140
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
145 150 155 160
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
165 170 175
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
180 185 190
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
195 200 205
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
210 215 220
Met Leu Ile His Pro Thr Asp
225 230
<210> 20
<211> 231
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 20
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
5 10 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
20 25 30
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
35 40 45
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
50 55 60
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
65 70 75 80
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
85 90 95
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
100 105 110
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
115 120 125
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
130 135 140
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
145 150 155 160
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
165 170 175
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
180 185 190
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
195 200 205
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
210 215 220
Met Leu Ile His Pro Thr Asp
225 230
<210> 21
<211> 230
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 21
Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly
5 10 15
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
20 25 30
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
35 40 45
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
50 55 60
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
85 90 95
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
100 105 110
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
115 120 125
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
130 135 140
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
145 150 155 160
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
165 170 175
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
180 185 190
Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
195 200 205
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
210 215 220
Leu Ile His Pro Thr Asp
225 230
<210> 22
<211> 230
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 22
Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly
5 10 15
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
20 25 30
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
35 40 45
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
50 55 60
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
85 90 95
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
100 105 110
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
115 120 125
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
130 135 140
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
145 150 155 160
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
165 170 175
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
180 185 190
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
195 200 205
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
210 215 220
Leu Ile His Pro Thr Asp
225 230
<210> 23
<211> 228
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 23
Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro
5 10 15
Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met
20 25 30
Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp
35 40 45
Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly
50 55 60
Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly
65 70 75 80
Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile
85 90 95
Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys
100 105 110
Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu
115 120 125
Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn
130 135 140
Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys
145 150 155 160
Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp
165 170 175
Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys
180 185 190
Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys
195 200 205
Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile
210 215 220
His Pro Thr Asp
225
<210> 24
<211> 228
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 24
Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro
5 10 15
Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met
20 25 30
Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp
35 40 45
Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly
50 55 60
Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly
65 70 75 80
Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile
85 90 95
Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys
100 105 110
Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu
115 120 125
Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn
130 135 140
Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys
145 150 155 160
Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp
165 170 175
Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys
180 185 190
Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys
195 200 205
Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile
210 215 220
His Pro Thr Asp
225
<210> 25
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 25
Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr
5 10 15
Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro
20 25 30
Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser
35 40 45
Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn
50 55 60
Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu
65 70 75 80
Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn
85 90 95
Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr
100 105 110
Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu
115 120 125
His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn
130 135 140
Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe
145 150 155 160
Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys
165 170 175
Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser
180 185 190
Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg
195 200 205
Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp
210 215 220
<210> 26
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 26
Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr
5 10 15
Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro
20 25 30
Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser
35 40 45
Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn
50 55 60
Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu
65 70 75 80
Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn
85 90 95
Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr
100 105 110
Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu
115 120 125
His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn
130 135 140
Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe
145 150 155 160
Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys
165 170 175
Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser
180 185 190
Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg
195 200 205
Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp
210 215 220
<210> 27
<211> 215
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 27
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
5 10 15
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
20 25 30
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
35 40 45
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
50 55 60
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
65 70 75 80
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
85 90 95
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
100 105 110
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
115 120 125
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
130 135 140
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
145 150 155 160
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
165 170 175
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
180 185 190
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
195 200 205
Met Leu Ile His Pro Thr Asp
210 215
<210> 28
<211> 215
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 28
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
5 10 15
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
20 25 30
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
35 40 45
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
50 55 60
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
65 70 75 80
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
85 90 95
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
100 105 110
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
115 120 125
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
130 135 140
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
145 150 155 160
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
165 170 175
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
180 185 190
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
195 200 205
Met Leu Ile His Pro Thr Asp
210 215
<210> 29
<211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 29
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
5 10 15
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
20 25 30
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
35 40 45
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
50 55 60
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
65 70 75 80
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
85 90 95
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
100 105 110
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
115 120 125
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
130 135 140
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
145 150 155 160
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
165 170 175
Asn Lys Pro Arg Ala Gln Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
180 185 190
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
195 200 205
Leu Ile His Pro Thr Asp
210
<210> 30
<211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 30
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
5 10 15
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
20 25 30
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
35 40 45
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
50 55 60
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
65 70 75 80
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
85 90 95
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
100 105 110
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
115 120 125
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
130 135 140
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
145 150 155 160
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
165 170 175
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
180 185 190
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
195 200 205
Leu Ile His Pro Thr Asp
210
<210> 31
<211> 252
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 31
Ile Gln Glu Pro Thr Glu Ile Ser Leu Ser Ser Lys Pro Arg Ala Pro
5 10 15
Arg Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His
20 25 30
Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His
35 40 45
Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His
50 55 60
Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His
65 70 75 80
Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys
85 90 95
Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys
100 105 110
Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu
115 120 125
Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu
130 135 140
Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly
145 150 155 160
Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr
165 170 175
Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser
180 185 190
Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly
195 200 205
Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu
210 215 220
Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys
225 230 235 240
Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
245 250
<210> 32
<211> 235
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 32
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
5 10 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
20 25 30
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
35 40 45
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
50 55 60
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
65 70 75 80
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
85 90 95
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
100 105 110
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
115 120 125
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
130 135 140
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
145 150 155 160
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
165 170 175
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
180 185 190
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
195 200 205
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
210 215 220
Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230 235
<210> 33
<211> 234
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 33
Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly
5 10 15
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
20 25 30
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
35 40 45
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
50 55 60
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
85 90 95
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
100 105 110
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
115 120 125
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
130 135 140
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
145 150 155 160
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
165 170 175
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
180 185 190
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp
195 200 205
Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu
210 215 220
Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230
<210> 34
<211> 232
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 34
Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro
5 10 15
Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met
20 25 30
Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp
35 40 45
Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly
50 55 60
Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly
65 70 75 80
Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile
85 90 95
Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys
100 105 110
Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu
115 120 125
Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn
130 135 140
Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys
145 150 155 160
Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp
165 170 175
Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys
180 185 190
Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser
195 200 205
Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His
210 215 220
Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
225 230
<210> 35
<211> 227
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 35
Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr
5 10 15
Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro
20 25 30
Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser
35 40 45
Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn
50 55 60
Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu
65 70 75 80
Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn
85 90 95
Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr
100 105 110
Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu
115 120 125
His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn
130 135 140
Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe
145 150 155 160
Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys
165 170 175
Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys
180 185 190
Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu
195 200 205
Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu
210 215 220
Ser Phe Glu
225
<210> 36
<211> 219
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 36
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
5 10 15
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
20 25 30
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
35 40 45
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
50 55 60
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
65 70 75 80
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
85 90 95
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
100 105 110
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
115 120 125
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
130 135 140
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
145 150 155 160
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
165 170 175
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
180 185 190
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
195 200 205
Leu Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
210 215
<210> 37
<211> 218
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 37
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
5 10 15
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
20 25 30
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
35 40 45
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
50 55 60
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
65 70 75 80
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
85 90 95
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
100 105 110
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
115 120 125
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
130 135 140
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
145 150 155 160
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
165 170 175
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp
180 185 190
Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu
195 200 205
Ile His Pro Thr Asp Ser Glu Ser Phe Glu
210 215
<210> 38
<211> 230
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 38
Thr Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp
5 10 15
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
20 25 30
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
35 40 45
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
50 55 60
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
65 70 75 80
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
85 90 95
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
100 105 110
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
115 120 125
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
130 135 140
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
145 150 155 160
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
165 170 175
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
180 185 190
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
195 200 205
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
210 215 220
Leu Ile His Pro Thr Asp
225 230
<210> 39
<211> 229
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 39
Thr Pro Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly
5 10 15
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
20 25 30
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
35 40 45
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
50 55 60
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
85 90 95
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
100 105 110
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
115 120 125
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
130 135 140
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
145 150 155 160
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
165 170 175
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
180 185 190
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp
195 200 205
Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu
210 215 220
Ile His Pro Thr Asp
225
<210> 40
<211> 227
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 40
Phe Leu Gln Leu Asn Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro
5 10 15
Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met
20 25 30
Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp
35 40 45
Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly
50 55 60
Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly
65 70 75 80
Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile
85 90 95
Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys
100 105 110
Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu
115 120 125
Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn
130 135 140
Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys
145 150 155 160
Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp
165 170 175
Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys
180 185 190
Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser
195 200 205
Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His
210 215 220
Pro Thr Asp
225
<210> 41
<211> 222
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 41
Glu Ile Arg Asn Val Lys His Asp Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr
5 10 15
Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro
20 25 30
Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser
35 40 45
Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn
50 55 60
Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu
65 70 75 80
Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn
85 90 95
Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr
100 105 110
Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu
115 120 125
His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn
130 135 140
Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe
145 150 155 160
Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys
165 170 175
Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys
180 185 190
Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu
195 200 205
Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu Ile His Pro Thr Asp
210 215 220
<210> 42
<211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 42
Gly Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr
5 10 15
Ser Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val
20 25 30
Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg
35 40 45
Ile Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr
50 55 60
Gly Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile
65 70 75 80
Tyr Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu
85 90 95
Asp Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly
100 105 110
Asn His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn
115 120 125
Val Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp
130 135 140
Asp His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly
145 150 155 160
Gly Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys
165 170 175
Tyr Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser
180 185 190
Trp Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met
195 200 205
Leu Ile His Pro Thr Asp
210
<210> 43
<211> 213
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: синтетический
полипептид"
<400> 43
Ile Pro Ala Glu Cys Thr Thr Ile Tyr Asn Arg Gly Glu His Thr Ser
5 10 15
Gly Met Tyr Ala Ile Arg Pro Ser Asn Ser Gln Val Phe His Val Tyr
20 25 30
Cys Asp Val Ile Ser Gly Ser Pro Trp Thr Leu Ile Gln His Arg Ile
35 40 45
Asp Gly Ser Gln Asn Phe Asn Glu Thr Trp Glu Asn Tyr Lys Tyr Gly
50 55 60
Phe Gly Arg Leu Asp Gly Glu Phe Trp Leu Gly Leu Glu Lys Ile Tyr
65 70 75 80
Ser Ile Val Lys Gln Ser Asn Tyr Val Leu Arg Ile Glu Leu Glu Asp
85 90 95
Trp Lys Asp Asn Lys His Tyr Ile Glu Tyr Ser Phe Tyr Leu Gly Asn
100 105 110
His Glu Thr Asn Tyr Thr Leu His Leu Val Ala Ile Thr Gly Asn Val
115 120 125
Pro Asn Ala Ile Pro Glu Asn Lys Asp Leu Val Phe Ser Thr Trp Asp
130 135 140
His Lys Ala Lys Gly His Phe Asn Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gly
145 150 155 160
Trp Trp Trp His Asp Glu Cys Gly Glu Asn Asn Leu Asn Gly Lys Tyr
165 170 175
Asn Lys Pro Arg Ala Ser Lys Pro Glu Arg Arg Arg Gly Leu Ser Trp
180 185 190
Lys Ser Gln Asn Gly Arg Leu Tyr Ser Ile Lys Ser Thr Lys Met Leu
195 200 205
Ile His Pro Thr Asp
210
<210> 44
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности: Синтетическая
метка 6xHis"
<400> 44
His His His His His His
5
<---
Claims (26)
1. Способ лечения артрита у субъекта-человека, причем способ предусматривает введение в сустав субъекта-человека внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 20-40 мг полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17.
2. Способ по п. 1, где внутрисуставная доза составляет приблизительно 20 мг.
3. Способ по п. 1, где внутрисуставная доза составляет приблизительно 40 мг.
4. Способ по пп. 1-3, где полипептид вводят в сустав субъекта-человека в виде однократной инъекции.
5. Способ по любому из пп. 1-3, где полипептид вводят в сустав субъекта-человека один раз в месяц в течение периода времени, достаточного для лечения артрита или повреждения сустава.
6. Способ по любому из пп. 1-5, где введение полипептида осуществляют в сочетании с любым из стимуляции костного мозга, замены хряща, имплантации аутологичных хондроцитов (ACI) или имплантации индуцированных матриксом аутологичных хондроцитов (MACI).
7. Способ по любому из пп. 1-5, где введение полипептида осуществляют в сочетании с имплантацией аутологичных хондроцитов (ACI).
8. Способ по любому из пп. 1-7, где у субъекта-человека имеется остеоартрит, травматический артрит или аутоиммунный артрит.
9. Способ по любому из пп. 1-8, где у субъекта-человека имеется повреждение хряща.
10. Композиция, содержащая приблизительно 20-40 мг полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, для применения в лечении артрита у субъекта-человека, где полипептид вводится внутрисуставно.
11. Композиция по п. 10, где композиция содержит приблизительно 20 мг полипептида.
12. Композиция по п. 10, где композиция содержит приблизительно 40 мг полипептида.
13. Композиция по любому из пп. 10-12, где полипептид вводится внутрисуставно в виде однократной инъекции.
14. Композиция по любому из пп. 10-12, где полипептид вводится внутрисуставно в виде многократных инъекций.
15. Композиция по любому из пп. 10-12, где полипептид вводится внутрисуставно один раз в две недели в течение периода времени, достаточного для лечения артрита.
16. Композиция по любому из пп. 10-12, где полипептид вводится внутрисуставно один раз в месяц в течение периода времени, достаточного для лечения артрита.
17. Композиция по любому из пп. 10-16, где лечение осуществляется в сочетании со стимуляцией костного мозга, заменой хряща, имплантацией аутологичных хондроцитов (ACI) или имплантацией индуцированных матриксом аутологичных хондроцитов (MACI).
18. Композиция по любому из пп. 10-17, где артрит представляет собой остеоартрит, травматический артрит или аутоиммунный артрит.
19. Композиция по пп. 10-18, где у субъекта-человека имеется повреждение хряща.
20. Способ лечения повреждения хряща у субъекта-человека, причем способ предусматривает введение в сустав субъекта-человека внутрисуставной дозы, составляющей приблизительно 20-40 мг полипептида, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17.
21. Способ по п. 20, где внутрисуставная доза составляет примерно 20 мг.
22. Способ по п. 20, где внутрисуставная доза составляет примерно 40 мг.
23. Способ по любому из пп. 20-22, где полипептид вводят в сустав субъекта-человека в виде однократной инъекции.
24. Способ по любому из пп. 20-22, где полипептид вводят в сустав субъекта-человека один раз в месяц в течение периода времени, достаточного для лечения повреждения сустава.
25. Способ по любому из пп. 20-24, где введение полипептида осуществляют в сочетании с любым из стимуляции костного мозга, замены хряща, имплантации аутологичных хондроцитов (ACI) или имплантации индуцированных матриксом аутологичных хондроцитов (MACI).
26. Способ по любому из пп. 20-25, где введение полипептида осуществляют в сочетании с имплантацией аутологичных хондроцитов (ACI).
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662421534P | 2016-11-14 | 2016-11-14 | |
US62/421,534 | 2016-11-14 | ||
US201762560301P | 2017-09-19 | 2017-09-19 | |
US62/560,301 | 2017-09-19 | ||
PCT/IB2017/057081 WO2018087727A1 (en) | 2016-11-14 | 2017-11-13 | Methods and compositions for treatment of cartilage damage and arthritis |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2019117884A RU2019117884A (ru) | 2020-12-14 |
RU2019117884A3 RU2019117884A3 (ru) | 2021-02-05 |
RU2777504C2 true RU2777504C2 (ru) | 2022-08-05 |
Family
ID=
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014138687A1 (en) * | 2013-03-08 | 2014-09-12 | Irm Llc | Peptides and compositions for treatment of joint damage |
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014138687A1 (en) * | 2013-03-08 | 2014-09-12 | Irm Llc | Peptides and compositions for treatment of joint damage |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Navarro-Sarabia F, Ariza-Ariza R, Hernandez-Cruz B, Villanueva I. Adalimumab for treating rheumatoid arthritis. CochraneDatabaseofSystematicReviews 2005, Issue 3. Art. No.: CD005113. DOI: 10.1002/14651858.CD005113.pub2. Найдено онлайн: https://www.cochranelibrary.com/cdsr/doi/10.1002/14651858.CD005113.pub2/epdf/abstract Дата обращения 05.10.2021. Brooks P., Kubler P. Etoricoxib for arthritis and pain management. Therapeutics and clinical risk management, vol. 2,1 (2006): 45-57. Найдено онлайн: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1661646/ Дата обращения 05.10.2021. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11179442B2 (en) | Peptides and compositions for treatment of joint damage | |
US11370820B2 (en) | Peptides and compositions for treatment of joint damage | |
US20220331398A1 (en) | Methods and compositions for treatment of cartilage damage and arthritis | |
RU2777504C2 (ru) | Способы и композиции для лечения повреждения хряща и артрита |