RU2776378C1

RU2776378C1 - Filler containing a hyaluronic acid hydrogel and exhibiting excellent filling properties

Info

Publication number: RU2776378C1
Application number: RU2021121278A
Authority: RU
Inventors: Чеол ДЗАНГ; Йонсу КИМ; Хиунсуп ЛИ; Миунгхан ЛИ; Дзи Сун КИМ; Хиун Тае ДЗУНГ; Дзинеон СО; Чанг Хиун ЛИ; Хвайоун РЕЕ
Original assignee: ЭлДжи КЕМ, ЛТД.
Priority date: 2018-12-21
Filing date: 2019-12-19
Publication date: 2022-07-19

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: group of inventions relates to a filler with a hyaluronic acid hydrogel. Filler contains a hyaluronic acid hydrogel wherein the value of the parameter of filling properties is 0.6 or more, where the hyaluronic acid % wt./wt. cross-linked hyaluronic acid produced by cross-linking a hyaluronic acid with an average molecular weight from 2,000,000 Da to 4,000,000 Da, or a salt thereof, by a cross-linking agent at a concentration of 1 to 10% mol. relative to a mole of N-acetyl-D-glucosamine and D-glucuronic acid in the hyaluronic acid or a salt thereof. Also disclosed are a filled syringe, a biomaterial for regenerating tissue, a method for regenerating tissue, and a method for reducing wrinkles.

EFFECT: group of inventions provides improved properties of high viscoelasticity, low mobility on injection into the skin, while maintaining the shape.

12 cl, 2 tbl, 2 ex, 4 dwg

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИFIELD OF TECHNOLOGY

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИCROSS-REFERENCE TO RELATED APPLICATIONS

Данная заявка заявляет преимущества приоритета, основанного на корейской патентной заявке №10-2018-0167782, зарегистрированной 21 декабря 2018 корейским управлением по интеллектуальной собственности, полное содержание которой включено сюда посредством ссылки.This application claims the benefit of priority based on Korean Patent Application No. 10-2018-0167782 filed December 21, 2018 by the Korean Intellectual Property Office, the entire content of which is hereby incorporated by reference.

Настоящее изобретение касается наполнителя, содержащего гидрогель гиалуроновой кислоты, используемого для медицинских и косметических целей, таких как забота о красоте или восстановление ткани. Более конкретно, настоящее изобретение касается наполнителя, который подходит для применения в качестве наполнителя, демонстрирует прекрасные фазовые свойства и, таким образом, имеет прекрасные заполняющие свойства.The present invention relates to a filler containing hyaluronic acid hydrogel used for medical and cosmetic purposes such as beauty care or tissue repair. More specifically, the present invention relates to a filler that is suitable for use as a filler, exhibits excellent phase properties, and thus has excellent filling properties.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИBACKGROUND OF THE INVENTION

Ткань человеческой кожи поддерживает свою структуру посредством внеклеточного матрикса, содержащего белки, такие как коллаген или эластин и др., и глюкозаминогликаны. Когда происходит нарушение мягкой ткани из-за внешнего удара, болезней или старения, или подобного, усиление ткани, такое как усиление мягкой ткани, применяют в медицинских или косметических целях. Такое усиление делают хирургически с помощью пластической хирургии, или форму восстанавливают и корректируют нехирургическим образом путем инъекции биологических тканей или синтетических полимеров в пораженное место, увеличивая и расширяя объем мягкой ткани. В этом случае материал, который впрыскивают в качестве компонента, подобного ткани кожи, в конкретное место, чтобы пополнить мягкую ткань и тем самым увеличить объем щек, губ, груди, бедер или подобного в косметических целях, и который применяют для удаления морщин или коррекции контура путем уменьшения тонких морщин и глубоких морщин на коже, называют материалом для приращения мягкой ткани, а также обычно называют кожным наполнителем. Кожный наполнитель первого поколения, разработанный впервые в связи с этими наполнителями, включает в себя такие продукты, как зидерм и зипласт, приготовленные путем экстракции животных белков, то есть белков, происходящих из животных, таких как коровы и свиньи, и космодерм или космопласт, полученные с использованием человеческого коллагена. Однако они редко применяются в хирургических операциях в последние годы из-за короткой продолжительности фармацевтического действия и неудобства в том, что аллергический тест кожи необходимо выполнять за один месяц до операции.Human skin tissue maintains its structure through an extracellular matrix containing proteins such as collagen or elastin, etc., and glycosaminoglycans. When soft tissue is damaged due to external shock, disease or aging, or the like, tissue enhancement such as soft tissue enhancement is used for medical or cosmetic purposes. Such augmentation is done surgically through plastic surgery, or the shape is restored and corrected non-surgically by injecting biological tissues or synthetic polymers into the affected area, increasing and expanding the soft tissue volume. In this case, a material that is injected as a skin tissue-like component at a specific location to replenish soft tissue and thereby increase the volume of the cheeks, lips, chest, thighs or the like for cosmetic purposes, and which is used for wrinkle removal or contouring by reducing fine wrinkles and deep wrinkles in the skin, is called a soft tissue augmentation material, and is also commonly referred to as a dermal filler. The first generation dermal filler, developed for the first time in connection with these fillers, includes products such as zyderm and ziplast prepared by extracting animal proteins, i.e. proteins originating from animals such as cows and pigs, and cosmoderm or cosmoplast obtained using human collagen. However, they are rarely used in surgical operations in recent years due to the short duration of pharmaceutical action and the inconvenience that an allergic skin test must be performed one month before surgery.

Наполнителем второго поколения является наполнитель с гиалуроновой кислотой (далее также обозначается как ´ГК´), который имеет большую продолжительность действия, чем коллагеновый наполнитель, и состоит из N-ацетил-D-глюкозамина и D-глюкуроновой кислоты, которые являются полисахаридами, подобными элементам, которые составляют человеческое тело. Соответственно, он имеет преимущество в том, что имеет меньше побочных эффектов, таких как аллергическая реакция кожи или подобные, и более легок в применении и удалении, и может притягивать воду, поддерживая влажность кожи, а также поддерживая объем и эластичность, и, таким образом, подходит в качестве кожного наполнителя.The second generation filler is hyaluronic acid filler (hereinafter also referred to as 'HA'), which has a longer duration of action than collagen filler, and is composed of N-acetyl-D-glucosamine and D-glucuronic acid, which are polysaccharides similar to elements that make up the human body. Accordingly, it has the advantage of having fewer side effects such as an allergic skin reaction or the like, and is easier to apply and remove, and can attract water to maintain skin moisture, as well as maintain volume and elasticity, and thus suitable as a dermal filler.

Однако сама гиалуроновая кислота имеет короткий период полураспада всего несколько часов в человеческом теле, и ее применение ограничено, и поэтому были выполнены исследования, чтобы увеличить период полураспада (стойкость в теле) гиалуроновой кислоты путем сшивания. Например, патент США № 4582865 раскрывает производное гиалуроновой кислоты, сшитое с использованием дивинилсульфона (ДВС) в качестве сшивающего агента, и ее гидрогелевая форма продается под маркой Hyalfrom®. Кроме того, патент США №5827937 раскрывает способ приготовления сшитых производных гиалуроновой кислоты с использованием многофункционального эпоксидного соединения в качестве сшивающего агента, и среди них Restylane®, сшитая гиалуроновая кислота в форме гидрогеля, приготовленная с использованием диглицидилового эфира 1,4-бутандиола (БДДЭ) в качестве многофункционального эпоксидного соединения, была одобрена управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (FDА) и коммерчески доступна повсюду в качестве наполнителя.However, hyaluronic acid itself has a short half-life of only a few hours in the human body, and its use is limited, and therefore studies have been performed to increase the half-life (persistence in the body) of hyaluronic acid by cross-linking. For example, US Patent No. 4,582,865 discloses a hyaluronic acid derivative cross-linked using divinyl sulfone (DVS) as a cross-linking agent, and its hydrogel form is sold under the brand name Hyalfrom®. In addition, U.S. Patent No. 5,827,937 discloses a process for the preparation of cross-linked hyaluronic acid derivatives using a multifunctional epoxy compound as a cross-linking agent, and among them Restylane®, a cross-linked hyaluronic acid in the form of a hydrogel prepared using 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) as a multifunctional epoxy compound, has been approved by the US Food and Drug Administration (FDA) and is commercially available worldwide as a filler.

Такие наполнители с гидрогелями сшитой гиалуроновой кислоты демонстрируют уникальные фазовые свойства путем прохождения сшитой гиалуроновой кислоты через сетку размером от нескольких десятков до нескольких сотен микрометров или путем воздействия на нее процесса послеобработки, и их классифицируют на два типа согласно формы фазы. Более конкретно, они включают в себя наполнители, сделанные из одной фазы (однофазный ГК наполнитель), и наполнители, сделанные из двух фаз (двухфазный ГК наполнитель).Such cross-linked hyaluronic acid hydrogel fillers exhibit unique phase properties by passing the cross-linked hyaluronic acid through a mesh of several tens to several hundreds of micrometers or by subjecting it to a post-treatment process, and they are classified into two types according to the shape of the phase. More specifically, they include fillers made from a single phase (single-phase HA filler) and fillers made from two phases (two-phase HA filler).

Такой наполнитель со сшитой гиалуроновой кислотой включает в себя наполнитель, состоящий из одной фазы (однофазный ГК наполнитель), и наполнитель, состоящий из двух фаз (двухфазный ГК наполнитель). Так как однофазный наполнитель с гиалуроновой кислотой готовят, используя гомогенный раствор, содержащий сшитую гиалуроновую кислоту, он имеет низкую эластичность и высокую когезию. Таким образом, когда однофазный наполнитель с гиалуроновой кислотой впрыскивают в кожу, он менее вероятно отходит от места введения, но есть проблема в том, что впрыснутая форма не сохраняется в течение длительного времени.Such a cross-linked hyaluronic acid filler includes a single-phase filler (single-phase HA filler) and a two-phase filler (two-phase HA filler). Since the single-phase hyaluronic acid filler is prepared using a homogeneous solution containing cross-linked hyaluronic acid, it has low elasticity and high cohesion. Thus, when a single-phase hyaluronic acid filler is injected into the skin, it is less likely to move away from the injection site, but there is a problem that the injected form is not maintained for a long time.

Двухфазные наполнители с гидрогелем гиалуроновой кислоты готовят из частиц сшитой гиалуроновой кислоты или готовят перемешиванием с несшитой гиалуроновой кислотой (необработанная, несшитая гиалуроновая кислота, линейная ГК), подобной жидкой фазе, и пропусканием через сетку. Таким образом они разделяются на мелкие зерна в форме частиц и обычно имеют высокую эластичность и низкую когезию. Соответственно, когда двухфазные наполнители с гидрогелем гиалуроновой кислоты впрыскивают в кожу, форма может сохраняться в течение длительного времени, но есть проблема в том, что существует большая возможность отклонения от места введения. Типичным примером такого двухфазного ГК наполнителя является упомянутый Restylane® (Galderma).Biphasic hyaluronic acid hydrogel fillers are prepared from crosslinked hyaluronic acid particles or prepared by mixing with uncrosslinked hyaluronic acid (raw, uncrosslinked hyaluronic acid, linear HA) like a liquid phase and passing through a mesh. Thus, they are separated into fine grains in the form of particles and usually have high elasticity and low cohesion. Accordingly, when the biphasic hyaluronic acid hydrogel fillers are injected into the skin, the shape can be maintained for a long time, but there is a problem that there is a large possibility of deviation from the injection site. A typical example of such a two-phase HA filler is the mentioned Restylane® (Galderma).

Таким образом, и однофазные наполнители с гидрогелем гиалуроновой кислоты, и двухфазные наполнители с гидрогелем гиалуроновой кислоты имеют преимущества и недостатки в зависимости от типа. Следовательно, необходимо надлежащим образом выбирать тип наполнителя в зависимости от области применения и предпочтений. Однако нет надлежащего оценивающего инструмента, способного точно оценить фазу наполнителя, и, таким образом, есть трудность в выборе и разработке высококачественных продуктов.Thus, both single-phase hyaluronic acid hydrogel fillers and two-phase hyaluronic acid hydrogel fillers have advantages and disadvantages depending on the type. Therefore, it is necessary to properly select the type of filler depending on the application and preferences. However, there is no proper scoring tool capable of accurately estimating the filler phase, and thus there is difficulty in selecting and developing high quality products.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Техническая проблемаTechnical problem

Настоящее изобретение было сделано для решения проблем в предшествующем уровне техники, и целью настоящего изобретения является обеспечить гидрогель гиалуроновой кислоты, имеющий прекрасные заполняющие свойства, которые выбирают, используя микрореологические параметры, кожный наполнитель, содержащий упомянутый гидрогель гиалуроновой кислоты, и биоматериал для восстановления ткани, содержащий упомянутый наполнитель с гидрогелем гиалуроновой кислоты.The present invention has been made to solve the problems in the prior art, and the purpose of the present invention is to provide a hyaluronic acid hydrogel having excellent filling properties, which are selected using microrheological parameters, a dermal filler containing said hyaluronic acid hydrogel, and a tissue repair biomaterial containing mentioned filler with hyaluronic acid hydrogel.

Другой целью настоящего изобретения является обеспечить способ восстановления ткани или улучшения морщин с использованием указанного наполнителя.Another object of the present invention is to provide a method for tissue repair or wrinkle improvement using said filler.

Техническое решениеTechnical solution

Настоящее изобретение разработано для решения проблем предшествующего уровня техники, и гидрогель гиалуроновой кислоты демонстрирует прекрасные реологические свойства, такие как вязкоупругость, когезия и регулярность структуры наполнителя, когда он имеет определенный интервал величин заполняющих свойств (ЭУМ), определенных путем использования средней величины изменения переменной или распределения среднеквадратичного смещения (СКС) меченых частиц. Таким образом, было обнаружено, что упомянутый гидрогель гиалуроновой кислоты может легко формоваться в желаемую форму при впрыскивании в мягкие ткани, например, кожу или подобное, и может устойчиво сохраняться в течение желаемого периода времени, и, таким образом, имеет превосходные заполняющие свойства, то есть свойства для применения наполнителя, например, улучшение морщин вследствие наполнения биологических тканей и заполнения морщин, моделирование лица или контура, или восстановление или увеличение объема мягких тканей, тем самым выполняя настоящее изобретение.The present invention has been developed to solve the problems of the prior art, and hyaluronic acid hydrogel exhibits excellent rheological properties such as viscoelasticity, cohesion and regularity of the filler structure when it has a certain range of filling property values (EPR) determined by using the average value of the change variable or distribution root-mean-square displacement (RMS) of labeled particles. Thus, it has been found that said hyaluronic acid hydrogel can be easily molded into a desired shape when injected into soft tissues such as skin or the like, and can be stably maintained for a desired period of time, and thus has excellent filling properties, then there are properties for the application of the filler, for example, improvement of wrinkles due to the filling of biological tissues and filling of wrinkles, modeling of the face or contour, or restoration or increase in volume of soft tissues, thereby fulfilling the present invention.

Один вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой гидрогель гиалуроновой кислоты или содержащий его наполнитель мягкой ткани, и касается гидрогеля гиалуроновой кислоты с прекрасными заполняющими свойствами, где величина параметра ЭУМ, полученная из уравнения 1, составляет 0,6 или больше, наполнителя, содержащего упомянутый гидрогель гиалуроновой кислоты, заполненного шприца, заполненного упомянутым наполнителем, и способа улучшения морщин или восстановления тканей, включающего в себя инъекцию упомянутого наполнителя.One embodiment of the present invention is a hyaluronic acid hydrogel or a soft tissue filler containing the same, and relates to a hyaluronic acid hydrogel with excellent filling properties, where the EMU parameter value obtained from Equation 1 is 0.6 or more, a filler containing said hyaluronic acid hydrogel. an acid filled syringe filled with said excipient; and a wrinkle improvement or tissue repair method comprising injecting said excipient.

Предпочтительно, данный наполнитель предназначен для инъекции в мягкую ткань, например, для кожной инъекции, и наполнитель может быть использован в качестве наполнителя, имеющего заполняющие свойства, например, заполнения биологических тканей, улучшения морщин путем заполнения морщин и моделирования лица или исправления контура, или восстановления или увеличения объема мягкой ткани.Preferably, the filler is for soft tissue injection, such as dermal injection, and the filler can be used as a filler having filling properties, such as filling biological tissues, improving wrinkles by filling in wrinkles and shaping the face, or reshaping or restoring or an increase in soft tissue volume.

Далее настоящее изобретение будет описано более подробно.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

Настоящее изобретение касается гидрогеля гиалуроновой кислоты, содержащего гиалуроновую кислоту, у которого параметр заполняющего свойства (ЭУМ) находится в особом интервале величин, и содержащей его композиции наполнителя.The present invention relates to a hyaluronic acid hydrogel containing hyaluronic acid, in which the filling property parameter (EMA) is in a specific range of values, and a filler composition containing it.

В гидрогеле гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению или содержащем его наполнителе "параметр ЭУМ (эффективность улучшения морщин)" представляет собой параметр, способный отражать эластичность, когезию и регулярность структуры наполнителя, которые являются основными физическими свойствами наполнителя, и может быть получен с помощью уравнения 1 ниже. Наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, имеет заполняющее свойство, при котором величина параметра ЭУМ составляет 0,6 или больше, что удовлетворяет условиям эластичности, когезии регулярности структуры наполнителя.In the hyaluronic acid hydrogel of the present invention or the filler containing the same, the "EAM (Wrinkle Improvement Efficiency) parameter" is a parameter capable of reflecting the elasticity, cohesion and regularity of the structure of the filler, which are the main physical properties of the filler, and can be obtained by Equation 1 below . The filler containing the hyaluronic acid hydrogel according to the present invention has a filling property in which the value of the EMU parameter is 0.6 or more, which satisfies the conditions of elasticity, cohesion, regularity of the structure of the filler.

[Уравнение 1][Equation 1]

Параметр ЭУМ = ([средний наклон СКС]*[абсолютная величина СКС при времени перемещения 0,1 с]*[стандартное отклонение величины наклона СКС]*100)^-1 ELM parameter = ([average slope of the RMS]*[absolute value of the RMS at a travel time of 0.1 s]*[standard deviation of the slope of the RMS]*100) ^-1

В уравнении 1 СКС означает среднеквадратичное смещение меченых частиц, введенных в наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты.In equation 1, RMS means the root mean square displacement of the labeled particles introduced into the filler containing the hyaluronic acid hydrogel.

Настоящее изобретение анализирует фазовые свойства наполнителя, содержащего гидрогель гиалуроновой кислоты, с помощью микрореологических технологий, чтобы обеспечить наполнитель, имеющий прекрасные фазовые свойства и заполняющие свойства, происходящие из них. Применяемый здесь термин "микрореологические технологии" означает технологии для сопоставления физических свойств образца с поведением меченых частиц (например, частиц полистирола), диспергированных в небольшом количестве образца.The present invention analyzes the phase properties of a filler containing hyaluronic acid hydrogel using microrheological techniques to provide a filler having excellent phase properties and filling properties derived therefrom. As used herein, the term "microrheological technologies" means technologies for comparing the physical properties of a sample with the behavior of labeled particles (eg, polystyrene particles) dispersed in a small amount of the sample.

Более конкретно, настоящее изобретение использует СКС меченых частиц, чтобы демонстрировать фазовые свойства и заполняющие свойства наполнителя, измеряемые согласно таким микрореологическим технологиям. СКС описывает микрореологические параметры гидрогеля гиалуроновой кислоты и использует распределение среднеквадратичного смещения (далее обозначается СКС) переменной. Термин "СКС" представляет собой статистический параметр, представляющий аномальную диффузию частиц, и означает среднюю вариацию траектории частиц в среде. Единицей СКС может быть мкм² или мм². Когда частицы свободно мигрируют из-за броуновского движения (термические флуктуации) в обычной текучей среде, СКС линейно увеличивается со временем, и наклон задается такими свойствами, как вязкость и упругость текучей среды. Когда текучая среда является чистой вязкой средой, такой как вода, наклон СКС равен 1, а когда текучая среда является совершенно упругой средой, такой как твердое вещество, он равен 0. Кроме того, когда текучая среда имеет свойства, которые являются промежуточными между жидкостью и твердым веществом, он имеет промежуточную величину от 0 до 1, и чем тверже текучая среда, тем ближе к 0.More specifically, the present invention uses the SCM of labeled particles to demonstrate the phase properties and fill properties of the filler as measured by such microrheological techniques. The RMS describes the microrheological parameters of the hyaluronic acid hydrogel and uses the distribution of the root-mean-square bias (hereinafter referred to as the RMS) variable. The term "SCS" is a statistical parameter representing the anomalous diffusion of particles, and means the average variation in the trajectory of particles in a medium. The SCS unit can be µm ² or mm ² . When particles freely migrate due to Brownian motion (thermal fluctuations) in a normal fluid, the SMR increases linearly with time and the slope is given by properties such as fluid viscosity and elasticity. When the fluid is a pure viscous medium, such as water, the slope of the RMS is 1, and when the fluid is a perfectly elastic medium, such as a solid, it is 0. In addition, when the fluid has properties that are intermediate between liquid and solid, it has an intermediate value of 0 to 1, and the harder the fluid, the closer to 0.

В результате анализа СКС меченых частиц в наполнителе, содержащем гидрогель гиалуроновой кислоты, когезия гидрогеля может быть представлена с помощью среднего наклона СКС, эластичность с помощью абсолютной величины СКС при времени перемещения 0,1 секунды, а регулярность гидрогеля с помощью стандартного отклонения наклона СКС, и параметр, рассматривающий все эти свойства, является параметром ЭУМ. Когда параметр ЭУМ равен 0,6 или больше, он может означать наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты, демонстрирующий желаемые фазовые свойства.As a result of analyzing the SMR of labeled particles in a vehicle containing hyaluronic acid hydrogel, hydrogel cohesion can be represented by the mean SMR slope, elasticity by the absolute value of the SMR at a travel time of 0.1 second, and hydrogel regularity by the standard deviation of the SMR slope, and the parameter considering all these properties is the ELM parameter. When the EAM is 0.6 or more, it can mean a filler containing hyaluronic acid hydrogel showing the desired phase properties.

Наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, демонстрирует прекрасные заполняющие свойства, и, более конкретно, параметр ЭУМ может быть 0,6 или больше, предпочтительно 0,6 или больше до 20, или от 1,0 до 20, более предпочтительно 0,6 или больше до 5 или меньше, или 1,0 или больше до 5,0 или меньше.The filler containing the hyaluronic acid hydrogel of the present invention exhibits excellent filling properties, and more specifically, the EMU parameter may be 0.6 or more, preferably 0.6 or more up to 20, or 1.0 to 20, more preferably 0 ,6 or more to 5 or less, or 1.0 or more to 5.0 or less.

Более конкретно, для измерения СКС меченых частиц в наполнителе, содержащем гидрогель гиалуроновой кислоты настоящего изобретения, готовят тестовый образец путем диспергирования меченых частиц и траекторию меченых частиц, движущихся в наполнителе, наблюдают с помощью оптического микроскопа, и затем полученное изображение анализируют с помощью программы анализа изображений и измеряют среднеквадратичное смещение согласно времени перемещения меченых частиц. Мечеными частицами являются частицы, диспергированные в гидрогеле гиалуроновой кислоты для СКС анализа, и они могут быть, например, полимерными частицами, предпочтительно частицами полистирола, и могут быть частицами, имеющими средний размер частиц от 0,5 до 2,0 мкм. Измерение выполняют путем добавления 0,05-5% (об/об) меченых частиц относительно анализируемого образца, и тип, размер и степень дисперсии меченых частиц можно выбирать надлежащим образом и применять, имея в виду способ анализа СКС и аналитическое устройство.More specifically, in order to measure the SMR of the labeled particles in the vehicle containing the hyaluronic acid hydrogel of the present invention, a test sample is prepared by dispersing the labeled particles, and the trajectory of the labeled particles moving in the vehicle is observed with an optical microscope, and then the resulting image is analyzed with an image analysis program. and measuring the rms displacement according to the travel time of the labeled particles. Labeled particles are particles dispersed in a hyaluronic acid hydrogel for SCS analysis, and they may be, for example, polymer particles, preferably polystyrene particles, and may be particles having an average particle size of 0.5 to 2.0 μm. The measurement is performed by adding 0.05-5% (v/v) of labeled particles relative to the analyzed sample, and the type, size and degree of dispersion of labeled particles can be appropriately selected and applied, bearing in mind the SCM analysis method and the analytical device.

Например, измерение можно выполнять с помощью способа, в котором броуновское движение меченых частиц, диспергированных в тестовом образце, фотографируют, используя видео-микроскопию, и затем движение частиц анализируют, используя программу обработки изображений (Матлаб) или подобную, что показано на фиг.2, но не ограничивается этим.For example, the measurement can be performed by a method in which the Brownian motion of the labeled particles dispersed in the test sample is photographed using video microscopy, and then the particle motion is analyzed using an image processing program (Matlab) or the like as shown in Fig. 2 , but is not limited to this.

Гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению имеет тот признак, что абсолютная величина СКС составляет от 0,05 до 0,30, среднее наклона СКC составляет от 0,05 до 0,20, и стандартное отклонение наклона СКС составляет от 0,10 до 0,21.The hyaluronic acid hydrogel of the present invention has the feature that the absolute value of the SMR is from 0.05 to 0.30, the average slope of the SMR is from 0.05 to 0.20, and the standard deviation of the slope of the SMR is from 0.10 to 0. 21.

Более конкретно, когда измеряют СКС, в случае наполнителя, имеющего низкую когезию вместо высокой вязкоупругости, движения меченых частиц, локализованных в области поверхности, и меченых частиц, локализованных в сшитой области, различаются, и меченые частицы, локализованные в области поверхности, движутся относительно свободно и, таким образом, демонстрируют большую величину наклона СКС, предпочтительно наклон СКС от более чем 0,8 до менее чем 1. Напротив, меченые частицы, которые проникли в данные частицы и находятся в сшитой области, имеют ограниченное движение и, таким образом, имеют малые величины наклона СКС, предпочтительно от более чем 0 до менее чем 0,5.More specifically, when SMR is measured, in the case of a filler having low cohesion instead of high viscoelasticity, the movements of the labeled particles localized in the surface region and the labeled particles localized in the crosslinked region are different, and the labeled particles localized in the surface region move relatively freely. and thus show a large amount of slope of the RSL, preferably a slope of more than 0.8 to less than 1. In contrast, labeled particles that have penetrated these particles and are in the crosslinked region have limited movement and thus have small values of the slope of the RMS, preferably from more than 0 to less than 0.5.

Согласно настоящему изобретению, параметр ЭУМ согласно уравнению 1, полученный на основании СКС, имеет интервал численных величин 0,6 или больше, и, в результате, он демонстрирует прекрасные свойства в качестве наполнителя, в частности, свойства улучшения морщин.According to the present invention, the ELM parameter according to Equation 1 obtained from the SCM has a numerical value range of 0.6 or more, and as a result, it exhibits excellent filler properties, in particular wrinkle improvement properties.

Свойство улучшения морщин наполнителя с гидрогелем гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению может быть представлено с помощью способности лифтинга (единица: Па*Н), вычисленной путем умножения эластичности и когезии. Способность лифтинга наполнителя составляет 600 или больше, предпочтительно от 600 или больше до 900 или меньше (Па*Н). Когда параметр ЭУМ согласно настоящему изобретению имеет величину 0,6 или больше, способность лифтинга составляет 600 или больше, предпочтительно от 600 или больше до 900 или меньше (Па*Н), и наполнитель с гидрогелем гиалуроновой кислоты, имеющий такой параметр ЭУМ, имеет высокую когезию, вязкоупругость и регулярность, и, таким образом, может демонстрировать прекрасные заполняющие свойства, то есть заполнение биологических тканей, улучшение морщин путем заполнения морщин и моделирование лица, или эффект восстановления или увеличения объема мягких тканей, таких как губы, нос, бедра, щеки или груди.The wrinkle improvement property of the hyaluronic acid hydrogel filler of the present invention can be represented by the lifting ability (unit: Pa*N) calculated by multiplying elasticity and cohesion. The lifting capacity of the filler is 600 or more, preferably 600 or more to 900 or less (Pa*N). When the EMR value of the present invention is 0.6 or more, the lifting ability is 600 or more, preferably 600 or more to 900 or less (Pa*H), and the hyaluronic acid hydrogel filler having such an EMR value has a high cohesion, viscoelasticity and regularity, and thus can exhibit excellent filling properties, i.e. filling of biological tissues, improvement of wrinkles by filling wrinkles and modeling of the face, or the effect of restoring or increasing the volume of soft tissues such as lips, nose, thighs, cheeks or chest.

Применяемое здесь выражение "заполняющие свойства" наполнителя с гидрогелем гиалуроновой кислоты относится к тому свойству, что гидрогель гиалуроновой кислоты подходит для выполнения своего применения в качестве наполнителя, и может быть представлено с помощью параметра ЭУМ. Более конкретно, заполняющие свойства могут быть, например, такими свойствами, как улучшение морщин благодаря наполнению биологических тканей и наполнению морщин, моделирование лица или исправление контура, или восстановление или увеличение объема мягких тканей.As used herein, the "filling properties" of a hyaluronic acid hydrogel filler refers to the property that the hyaluronic acid hydrogel is suitable to perform its filler application and can be represented by the ELM parameter. More specifically, the filling properties may be, for example, properties such as improvement of wrinkles due to biological tissue filling and wrinkle filling, facial modeling or contouring, or soft tissue restoration or volume enhancement.

Применяемые здесь "фазовые свойства" наполнителя с гидрогелем гиалуроновой кислоты могут быть свойствами, связанными с формой наполнителя с гидрогелем гиалуроновой кислоты или происходящими из нее физическими свойствами, и могут быть представлены микрореологическими параметрами. (Вязко)упругость, когезия, регулярность или подобные, которые являются ключевыми качествами наполнителей, в общем могут быть разделены на однофазные и двухфазные в зависимости от фазы наполнителя.As used herein, the "phase properties" of the hyaluronic acid hydrogel filler may be properties associated with the shape of the hyaluronic acid hydrogel filler or physical properties derived therefrom, and may be represented by microrheological parameters. (Viscous) elasticity, cohesion, regularity or the like, which are the key qualities of fillers, can generally be divided into single-phase and two-phase depending on the phase of the filler.

Эластичность наполнителя относится к степени, в которой желаемая форма сохраняется в кожной ткани, и когда эластичность выше, исходная произведенная форма сохраняется в течение большего времени. Применяемый здесь термин "эластичность" относится к свойству твердого тела, когда к объекту прилагается сила, то есть свойству, в котором форма изменяется, когда сила прилагается, но возвращается в свою исходную форму, когда силу удаляют. Эластичность выражают с помощью модуля сохранения упругости (G´), и единицей является паскаль (Па). Кроме того, применяемый здесь термин "вязкость" относится к свойству жидкости, то есть вязкое течение, которое является сопротивлением течению. Вязкость может быть выражена с помощью модуля вязкости или модуля потерь (G"), и единицей является паскаль (Па). Например, эластичность измеряют путем определения того, насколько большое усилие требуется, когда наполнитель помещают между вершиной и дном с круглой геометрией и прикладывают к нему постоянный сдвиг (деформация сдвига=0,1%), единица может быть выражена в Па, и скорость, с которой прикладывают сдвиг, может быть выражена в 10 рад/с.The elasticity of a filler refers to the extent to which the desired shape is retained in the skin tissue, and when the elasticity is higher, the original produced shape is retained for a longer time. As used herein, the term "elasticity" refers to the property of a rigid body when a force is applied to an object, that is, the property in which the shape changes when the force is applied but returns to its original shape when the force is removed. Elasticity is expressed in terms of the modulus of elasticity (G´) and the unit is pascal (Pa). In addition, the term "viscosity" as used herein refers to the property of a fluid, ie viscous flow, which is the resistance to flow. Viscosity can be expressed in terms of viscosity modulus or loss modulus (G"), and the unit is pascal (Pa). For example, elasticity is measured by determining how much force is required when a filler is placed between a top and bottom with a circular geometry and applied to to it a constant shear (shear strain=0.1%), the unit can be expressed in Pa, and the rate at which the shear is applied can be expressed in 10 rad/s.

Когезия наполнителя означает, что частицы наполнителя хорошо соединяются. Применяемый здесь термин "когезия" является силой притяжения (силой адгезии), действующей между частицами наполнителя, которая позволяет частицам наполнителя соединяться. Когда когезия выше, сила впрыскивания наполнителя в ткань больше. Обычно когезия может быть измерена с помощью теста сцепления или подобного, и измеряют силу когезии во время растяжения с постоянной скоростью после помещения в реометр, и единицей является Н (ньютон). Например, когезию измеряют как приложенную силу, когда наполнитель помещают между верхом и низом данной геометрии и растягивают в вертикальном направлении. Чем больше когезия между частицами наполнителя, тем больше сила, требуемая для растяжения. Скорость растяжения была 1 мм/с, и единицей является Н.The cohesion of the filler means that the filler particles adhere well. The term "cohesion" as used herein is an attractive force (adhesive force) between filler particles that allows the filler particles to bond. When the cohesion is higher, the force of injection of the filler into the fabric is greater. Generally, cohesion can be measured by an adhesion test or the like, and the cohesive force is measured at the time of stretching at a constant speed after being placed in the rheometer, and the unit is N (newton). For example, cohesion is measured as an applied force when a filler is placed between the top and bottom of a given geometry and stretched in the vertical direction. The greater the cohesion between the filler particles, the greater the force required to stretch. The stretching speed was 1 mm/s, and the unit is N.

Кроме того, применяемый здесь термин "регулярность" означает, насколько регулярно образована сшитая структура гиалуроновой кислоты, составляющей наполнитель с гиалуроновой кислотой, или когда наполнитель с гиалуроновой кислотой выглядит как комок, она означает степень регулярности между частицами, составляющими наполнитель, или между частицами и текучей средой.In addition, the term "regularity" as used herein means how regularly the cross-linked structure of the hyaluronic acid constituting the filler with hyaluronic acid is formed, or when the filler with hyaluronic acid looks like a lump, it means the degree of regularity between the particles constituting the filler, or between the particles and the fluid environment.

Обычно в наполнителях эластичность и когезия противоположны друг другу, но наполнитель, имеющий прекрасное свойство улучшения морщин, представляет собой наполнитель, превосходный и по эластичности, и по когезии. Предпочтительно, наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, имеет прекрасные заполняющие свойства, удовлетворяющие всем указанным свойствам.Generally, in fillers, elasticity and cohesion are opposite to each other, but a filler having an excellent wrinkle-improving property is a filler excellent in both elasticity and cohesion. Preferably, the filler containing the hyaluronic acid hydrogel according to the present invention has excellent filling properties, satisfying all of these properties.

Обычно наполнители с однофазным гидрогелем гиалуроновой кислоты демонстрируют форму связанного геля, имеют низкую эластичность, но высокую когезию и, таким образом, показывают высокую силу инъекции. Примеры этого включают в себя Belotero® от Merz и Stylage® от Vivacy. Кроме того, частицы двухфазной гиалуроновой кислоты имеют тот признак, что эластичность высока, а когезия низкая, и чтобы демонстрировать такую высокую эластичность, частицы получают с большим размером частиц. Примеры этого включают в себя Restylane® от Galderma. Следовательно, однофазные и двухфазные наполнители с гидрогелем гиалуроновой кислоты, ранее известные в технике, имеют трудности в удовлетворении всех свойств, таких как эластичность, когезия и регулярность структуры наполнителя.Generally, single-phase hyaluronic acid hydrogel fillers exhibit a bonded gel shape, have low elasticity but high cohesion, and thus exhibit high injection strength. Examples of this include Belotero® by Merz and Stylage® by Vivacy. In addition, the biphasic hyaluronic acid particles have the characteristic that the elasticity is high and the cohesion is low, and in order to exhibit such high elasticity, the particles are made with a large particle size. Examples of this include Restylane® by Galderma. Therefore, single-phase and dual-phase hyaluronic acid hydrogel fillers previously known in the art have difficulty in satisfying all properties such as elasticity, cohesion, and regularity of the filler structure.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения когезию, эластичность и регулярность структуры гидрогеля наполнителя анализируют, используя микрореологические параметры наполнителя с гидрогелем гиалуроновой кислоты, и параметром, рассматривающим все эти свойства, может быть параметр ЭУМ. В уравнении 1, которой выражает параметр ЭУМ, средняя величина наклона СКС может описывать когезию гидрогеля, абсолютная величина СКС при времени перемещения 0,1 секунды может описывать эластичность гидрогеля, а стандартное отклонение наклона СКС может описывать регулярность.In one embodiment of the present invention, the cohesion, elasticity, and regularity of the filler hydrogel structure is analyzed using the microrheological parameters of the hyaluronic acid hydrogel filler, and the parameter considering all of these properties may be the EAM parameter. In equation 1, which expresses the ELM parameter, the average value of the SMR slope can describe the cohesion of the hydrogel, the absolute value of the SMR at a travel time of 0.1 seconds can describe the elasticity of the hydrogel, and the standard deviation of the SMR slope can describe the regularity.

Применяемый здесь термин "гиалуроновая кислота" предназначен включать в себя гиалуроновую кислоту, соль гиалуроновой кислоты или ее сшитое тело.As used herein, the term "hyaluronic acid" is intended to include hyaluronic acid, a salt of hyaluronic acid, or a crosslinked body thereof.

Гиалуроновая кислота (далее также обозначается как ´ГК´) настоящего изобретения представляет собой биополимерный материал, в котором повторяющиеся звенья, состоящие из N-ацетил-D-глюкозамина и D-глюкуроновой кислоты, линейно соединяются, и гиалуроновая кислота часто присутствует в стекловидном теле глаза, синовиальной жидкости суставов, петушиных гребнях и подобном, и имеет прекрасную биосовместимость, и, таким образом, широко применяется в области медицинской помощи и медицинских средств, таких как средства глазной хирургии, средства улучшения функции суставов, материалы для доставки лекарств, глазные капли, средства от морщин и подобное, или в области косметики. Более конкретно, гиалуроновая кислота, содержащаяся в наполнителе настоящего изобретения, может относиться к ее соли в добавление к гиалуроновой кислоте.The hyaluronic acid (hereinafter also referred to as 'HA') of the present invention is a biopolymer material in which repeating units composed of N-acetyl-D-glucosamine and D-glucuronic acid are linearly connected, and hyaluronic acid is often present in the vitreous body of the eye , synovial fluid of the joints, cockscombs and the like, and has excellent biocompatibility, and thus is widely used in the field of medical care and medical products, such as eye surgery products, joint function improvers, drug delivery materials, eye drops, from wrinkles and the like, or in the field of cosmetics. More specifically, hyaluronic acid contained in the filler of the present invention may refer to its salt in addition to hyaluronic acid.

Соль гиалуроновой кислоты включает в себя, например, неорганические соли, такие как гиалурат натрия, гиалурат калия, гиалурат кальция, гиалурат магния, гиалурат цинка, гиалурат кобальта и подобные, и органические соли, такие как тетрабутиламмоний гиалуроновая кислота, и так далее, но не ограничиваясь этим.The hyaluronic acid salt includes, for example, inorganic salts such as sodium hyalurate, potassium hyalurate, calcium hyalurate, magnesium hyalurate, zinc hyalurate, cobalt hyalurate and the like, and organic salts such as tetrabutylammonium hyaluronic acid, etc., but not limiting it.

Кроме того, предпочтительно, гиалуроновая кислота или ее соль могут быть сшиты с помощью подходящего сшивающего агента. Сшитое производное гиалуроновой кислоты может быть приготовлено путем сшивания самой гиалуроновой кислоты или ее соли с использованием сшивающего агента.In addition, preferably, hyaluronic acid or a salt thereof can be cross-linked with a suitable cross-linking agent. A crosslinked hyaluronic acid derivative can be prepared by crosslinking hyaluronic acid itself or a salt thereof using a crosslinker.

Для сшивания гиалуроновой кислоты может быть использован способ использования сшивающего агента в присутствии водного щелочного раствора. Данный щелочной водный раствор может быть NаОН и КОН, предпочтительно водный раствор NаОН, но не ограничивается этим. В этом случае, водный раствор NаОН может применяться в концентрации от 0,1 до 0,5 Н. Сшитая гиалуроновая кислота, содержащаяся в наполнителе настоящего изобретения, демонстрирует высокую вязкоупругость и когезию, даже когда используется низкая концентрация и небольшое количество сшивающего агента. Концентрация сшивающего агента может быть от 1 до 10 мол.%, предпочтительно от 1 до 5 мол.% относительно моля N-ацетил-D-глюкозамина и D-глюкуроновой кислоты в гиалуроновой кислоте или ее соли.For cross-linking hyaluronic acid, the method of using a cross-linking agent in the presence of an aqueous alkaline solution can be used. This alkaline aqueous solution may be NaOH and KOH, preferably NaOH aqueous solution, but is not limited thereto. In this case, an aqueous solution of NaOH can be used at a concentration of 0.1 to 0.5 N. The crosslinked hyaluronic acid contained in the filler of the present invention exhibits high viscoelasticity and cohesion even when a low concentration and a small amount of a crosslinker is used. The concentration of the crosslinking agent may be from 1 to 10 mol%, preferably from 1 to 5 mol%, relative to the mole of N-acetyl-D-glucosamine and D-glucuronic acid in hyaluronic acid or its salt.

Сшивающий агент может представлять собой соединение, включающее в себя две или больше эпоксидные функциональные группы, и его предпочтительные примеры включают в себя диглицидиловый эфир 1,4-бутандиола (БДДЭ), диглицидиловый эфир этиленгликоля (ЭГДГЭ), диглицидиловый эфир 1,6-гександиола, диглицидиловый эфир пропиленгликоля, диглицидиловый эфир полипропиленгликоля, диглицидиловый эфир политетраметиленгликоля, диглицидиловый эфир неопентилгликоля, полиглицидиловый эфир полиглицерина, полиглицидиловый эфир диглицерина, полиглицидиловый эфир глицерина, полиглицидиловый эфир триметилпропана, 1,2-(бис(2,3-эпоксипропокси)этилен, полиглицидиловый эфир пентаэритритола и полиглицидиловый эфир сорбитола. Среди них особенно предпочтителен биэпоксидный глицидиловый эфир 1,4-бутандиола с точки зрения низкой токсичности.The crosslinking agent may be a compound having two or more epoxy functional groups, and preferred examples thereof include 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE), ethylene glycol diglycidyl ether (EGDGE), 1,6-hexanediol diglycidyl ether, propylene glycol diglycidyl ether, polypropylene glycol diglycidyl ether, polytetramethylene glycol diglycidyl ether, neopentyl glycol diglycidyl ether, polyglycerol polyglycidyl ether, diglycerol polyglycidyl ether, glycerol polyglycidyl ether, trimethylpropane polyglycidyl ether, pentaerythol 1,2-(bis(2,3-epoxypropoxy)ethylene, polyglycidyl ether and sorbitol polyglycidyl ether Among them, 1,4-butanediol biepoxide glycidyl ester is particularly preferable from the viewpoint of low toxicity.

В настоящем изобретении средняя молекулярная масса гиалуроновой кислоты, используемой в реакции сшивания, может быть 2000000 Да или больше, 2300000 Да или больше, или 2500000 Да или больше, например, от 2000000 до 4000000 Да, от 2300000 до 4000000 Да, от 2000000 до 3700000 Да, или от 2500000 до 3500000 Да.In the present invention, the average molecular weight of the hyaluronic acid used in the crosslinking reaction may be 2000000 Da or more, 2300000 Da or more, or 2500000 Da or more, for example, 2000000 to 4000000 Da, 2300000 to 4000000 Da, 2000000 to 3700000 Yes, or between 2,500,000 and 3,500,000 Yes.

Кроме того, частицы гиалуроновой кислоты, предпочтительно частицы сшитой гиалуроновой кислоты, в наполнителе, содержащем гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, могут демонстрировать различные формы, но предпочтительно они могут быть сферической формы. Кроме того, средний диаметр таких частиц может быть от 10 до 1000 мкм, от 100 до 600 мкм, от 700- до 900 мкм, от 300 до 500 мкм или от 300 до 400 мкм.Furthermore, the hyaluronic acid particles, preferably the cross-linked hyaluronic acid particles, in the hyaluronic acid hydrogel-containing vehicle of the present invention may exhibit various shapes, but preferably they may be spherical in shape. Furthermore, the average diameter of such particles may be 10 to 1000 µm, 100 to 600 µm, 700 to 900 µm, 300 to 500 µm, or 300 to 400 µm.

В предпочтительном варианте осуществления, в наполнителе, содержащем гидрогель согласно настоящему изобретению, гиалуроновая кислота, ее соль или ее сшитый продукт может содержаться в количестве от 1 до 3 мас.% в расчете на полную массу наполнителя.In a preferred embodiment, in the filler containing the hydrogel according to the present invention, hyaluronic acid, its salt or its cross-linked product may be contained in an amount of from 1 to 3 wt.% based on the total weight of the filler.

Наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, может дополнительно включать в себя не только гиалуроновую кислоту, но также воду, анестетик или их комбинацию.The filler containing the hyaluronic acid hydrogel of the present invention may further include not only hyaluronic acid, but also water, an anesthetic, or a combination thereof.

Анестетик включает в себя один или несколько типов анестетиков, известных в данной области, предпочтительно местных анестетиков, и концентрация одного или нескольких анестетиков является эффективным количеством для облегчения симптомов, возникающих при впрыскивании композиции. Примеры анестетиков могут быть выбраны из группы, состоящей из амбукаина, амоланона, беноксината, бензокаина, бетоксикаина, бифенамина, бупивакаина, бутакаина, бутамбена, бутаниликаина, бутетамина, бутоксикаина, картикаина, хлоропрокаина, кокаэтилена, кокаина, циклометикаина, дибукаина, диметисокуина, диметокаина, диперодона, дициклонина, экгонидина, экгонина, этилхлорида, этидокаина, бета-эукаина, эупроцина, феналсомина, формокаина, гексилкаина, гидрокситетракаина, изобутил п-аминобензоата, мезилата лейцинокаина, левоксадрола, лидокаина, мепивакаина, меприлкаина, метабутоксикаина, метилхлорида, миртекаина, наепаина, октакаина, ортокаина, оксетазаина, паретоксикаина, фенакаина, фенола, пиперокаина, пиридокаина, полидоканола, прамоксина, прилокаина, прокаина, пропанокаина, пропаракаина, пропоксикаина, пседокаина, пиррокаина, ропивакаина, салицилового спирта, тетракаина, толикаина, тримекаина, золамина и их солей. В одном варианте осуществления анестетик может быть лидокаином, например, в форме гидрохлорида лидокаина.The anesthetic includes one or more types of anesthetics known in the art, preferably local anesthetics, and the concentration of one or more anesthetics is an effective amount to alleviate the symptoms experienced when the composition is injected. Exemplary anesthetics may be selected from the group consisting of ambucaine, amolanon, benoxinate, benzocaine, betoxicaine, biphenamine, bupivacaine, butacaine, butamben, butanylycaine, butetamine, butoxycaine, karticaine, chloroprocaine, cocaethylene, cocaine, cyclomethicaine, dibucaine, dimethisoquine, diperodone, dicyclonine, ecgonidine, ecgonine, ethyl chloride, ethidocaine, beta-eucaine, euprocin, phenalsomin, formocaine, hexylcaine, hydroxytetracaine, isobutyl p-aminobenzoate, leucinocaine mesylate, levoxadrol, lidocaine, mepivacaine, meprilcaine, metabutoxycaine, methyl chloride, napaine, octacaine, orthocaine, oxetazaine, paretoxycaine, phenacaine, phenol, piperocaine, pyridocaine, polidocanol, pramoxine, prilocaine, procaine, propanocaine, proparacaine, propoxycaine, pseudocaine, pyrrocaine, ropivacaine, salicylic alcohol, tetracaine, tolicaine, trimecaine, zolamine and their salts. In one embodiment, the anesthetic may be lidocaine, for example in the form of lidocaine hydrochloride.

Концентрация анестетика, содержащегося в наполнителе, может быть от приблизительно 0,1 мас.% до приблизительно 1,0 мас.%, например, от приблизительно 0,2 мас.% до приблизительно 0,5 мас.% в расчете на полную массу наполнителя. Концентрация анестетика в описанном здесь наполнителе может быть терапевтически эффективной, что означает, что эта концентрация адекватно обеспечивает терапевтические преимущества с точки зрения удобства хирургической операции и расслабления пациентов без нанесения вреда пациенту.The concentration of anesthetic contained in the filler may be from about 0.1 wt.% to about 1.0 wt.%, for example, from about 0.2 wt.% to about 0.5 wt.%, based on the total weight of the filler . The concentration of anesthetic in the excipient described herein can be therapeutically effective, which means that this concentration adequately provides therapeutic benefits in terms of surgical comfort and patient relaxation without harming the patient.

Наполнитель согласно настоящему изобретению может дополнительно включать в себя буферный раствор, и буферный раствор может использоваться без ограничения, пока он используется в приготовлении гидрогеля гиалуроновой кислоты. Предпочтительные примеры такого буферного раствора включают в себя, по меньшей мере, один буферный раствор, выбранный из группы, состоящей из лимонной кислоты, моногидрофосфата натрия, дигидрофосфата натрия, уксусной кислоты, диэтилбарбитуровой кислоты, ацетата натрия, трис(гидроксиметил)метиламино)пропансульфоновой кислоты (ТАРS), 2-бис(2-гидроксиэтил)амино)уксусной кислоты (бицин), трис(гидроксиметил)амино метана (трис), N-(2-гидрокси-1,1-бис(гидроксиметил)этил)глицина (трицин), 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновой кислоты (НЕРЕS), 2-[[1,3-дигидрокси-2-(гидроксиметил)пропан-2-ил]амино]метансульфоновой кислоты (ТЕS) и пиперазин-N, N´-бис(2-этансульфоновой кислоты) (РIРЕS), но не ограничивается этим. Содержание компонентов, включенных в буферный раствор, может подстраиваться надлежащим образом, но предпочтительно они могут содержаться в концентрации от 0,3 до 2,0 г/л относительно буферного раствора.The filler of the present invention may further include a buffer solution, and the buffer solution can be used without limitation as long as it is used in the preparation of hyaluronic acid hydrogel. Preferred examples of such a buffer solution include at least one buffer solution selected from the group consisting of citric acid, sodium monohydrogen phosphate, sodium dihydrogen phosphate, acetic acid, diethylbarbituric acid, sodium acetate, tris(hydroxymethyl)methylamino)propanesulfonic acid ( TAPS), 2-bis(2-hydroxyethyl)amino)acetic acid (bicine), tris(hydroxymethyl)aminomethane (tris), N-(2-hydroxy-1,1-bis(hydroxymethyl)ethyl)glycine (tricine) , 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (HEPS), 2-[[1,3-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)propan-2-yl]amino]methanesulfonic acid (TES) and piperazine-N, N'-bis(2-ethanesulfonic acid) (PIPES), but not limited to this. The content of the components included in the buffer solution can be adjusted as appropriate, but preferably they can be contained in a concentration of 0.3 to 2.0 g/l relative to the buffer solution.

Наполнитель согласно настоящему изобретению может дополнительно включать в себя изотонический агент, и этот изотонический агент может использоваться без ограничений, пока он применяется для приготовления гидрогеля гиалуроновой кислоты и может быть включен в буфер. В качестве предпочтительного изотонического агента может применяться хлорид натрия, но изотонический агент не ограничивается этим. Содержание изотонического агента можно регулировать надлежащим образом, если необходимо, и, например, он может содержаться в количестве от 7,0 до 9,0 г/л относительно буфера, но не ограничиваясь этим.The excipient of the present invention may further include an isotonic agent, and this isotonic agent may be used without limitation as long as it is used to prepare a hyaluronic acid hydrogel and may be buffered. Sodium chloride may be used as the preferred isotonic agent, but the isotonic agent is not limited thereto. The content of the isotonic agent can be adjusted appropriately, if necessary, and, for example, it can be contained in an amount of from 7.0 to 9.0 g/l relative to the buffer, but not limited to this.

В одном варианте осуществления согласно настоящему изобретению можно использовать буфер, содержащий хлорид натрия, моногидрофосфат натрия и дигидрофосфат натрия в воде для инъекции.In one embodiment according to the present invention, a buffer containing sodium chloride, sodium monohydrogen phosphate and sodium dihydrogen phosphate in water for injection can be used.

В дополнительном аспекте, наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, может дополнительно включать в себя допустимые компоненты, которые могут быть включены при приготовлении наполнителя в дополнение к указанным компонентам.In an additional aspect, the filler containing the hyaluronic acid hydrogel according to the present invention may further include acceptable components that can be included in the preparation of the filler in addition to these components.

Кроме того, настоящее изобретение отличается тем, что остаточный сшивающий агент по существу не включен в наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты, имеющий высокие заполняющие свойства, и остаточный сшивающий агент предпочтительно содержится в количестве 0,5 ч/млн или меньше, что является пределом обнаружения.In addition, the present invention is characterized in that the residual crosslinker is substantially not included in the vehicle containing hyaluronic acid hydrogel having high filling properties, and the residual crosslinker is preferably contained in an amount of 0.5 ppm or less, which is the limit of detection. .

Наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, может очень эффективно применяться для косметических или терапевтических целей благодаря заполняющим свойствам, имеющим параметр ЭУМ 0,6 или больше.The filler containing the hyaluronic acid hydrogel of the present invention can be used very effectively for cosmetic or therapeutic purposes due to the filling properties having an EMU of 0.6 or more.

В качестве конкретного примера, наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты, может применяться для улучшения морщин благодаря заполнению биологических тканей и заполнению морщин, исправления лица, или восстановления или увеличения объема мягких тканей, таких как губы, нос, бедра, щеки или груди. Наполнитель с гидрогелем гиалуроновой кислоты может назначаться в дозирующей форме, подходящей для таких целей, и предпочтительно может быть инъекцией.As a specific example, a filler containing hyaluronic acid hydrogel can be used to improve wrinkles by filling in biological tissues and filling wrinkles, correcting the face, or restoring or augmenting soft tissues such as lips, nose, thighs, cheeks, or breasts. The hyaluronic acid hydrogel vehicle may be administered in a dosage form suitable for such purposes, and may preferably be an injection.

[ПРЕИМУЩЕСТВЕННЫЕ ЭФФЕКТЫ][BENEFITS]

Наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, имеет конкретный параметр заполняющего свойства, используя способ его выбора, и, таким образом, может иметь оптимальный эффект наполнителя.The filler containing the hyaluronic acid hydrogel of the present invention has a specific filling property parameter using the selection method thereof, and thus can have an optimal filler effect.

[КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ][BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS]

Фиг.1 представляет собой изображение, кратко показывающее свойства наполнителя, имеющего фазовые свойства настоящего изобретения, т.е. однофазного наполнителя и двухфазного наполнителя.Fig. 1 is an image briefly showing the properties of a filler having the phase properties of the present invention, i. e. single-phase filler and two-phase filler.

Фиг.2 представляет собой изображение, показывающее результат анализа движения меченых частиц с использованием обрабатывающей программы (Матлаб).Fig. 2 is an image showing the result of analyzing the movement of tagged particles using a processing program (Matlab).

Фиг.3 представляет собой график, показывающий результаты измерения СКС однофазного наполнителя (сравнительный пример 4) и двухфазного наполнителя (сравнительный пример 1).3 is a graph showing the measurement results of the RMS of a single-phase filler (comparative example 4) and a two-phase filler (comparative example 1).

Фиг.4 представляет собой график, подтверждающий такие параметры, как высокая когезия/высокая эластичность/регулярность на основании уравнения 1 согласно настоящему изобретению.4 is a graph confirming high cohesion/high elasticity/regularity based on Equation 1 according to the present invention.

[ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ][DETAIL DESCRIPTION OF EMBODIMENTS]

Далее настоящее изобретение будет описано более подробно посредством примеров. Однако эти примеры даются только в целях иллюстрации, и объем настоящего изобретения не ограничивается этими примерами.Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of examples. However, these examples are given for purposes of illustration only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.

Пример 1: Приготовление наполнителя, содержащего гидрогель гиалуроновой кислотыExample 1 Preparation of Filler Containing Hyaluronic Acid Hydrogel

Чтобы приготовить наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, выполняли следующий способ.To prepare the filler containing the hyaluronic acid hydrogel according to the present invention, the following method was performed.

Детально, взвешивали гиалурат натрия, имеющий среднюю молекулярную массу от 2,5 МДа до 3,5 МДа, гидроксид натрия и диглицидиловый эфир 1,4-бутандиола (БДДЭ) в качестве сшивающего агента. Концентрация гиалурата натрия во время реакции была 16 мас.%, а мол.% БДДЭ был 4 мол.% на единицу добавленного гиалурата натрия. Отдельно готовили водный раствор гидроксида натрия (NаОН) с концентрацией 0,25 Н и фильтровали. Взвешенные гиалурат натрия, 0,25 Н водный раствор гидроксида натрия и диглицидиловый эфир 1,4-бутандиола (БДДЭ) помещали в бак смесителя и равномерно перемешивали, и этот бак смесителя помещали в водяную баню с постоянной температурой, и реакцию сшивания выполняли при температуре 30°С в течение ночи. Затем сшитый гидрогель гиалуроновой кислоты после реакции грубо разрезали.In detail, sodium hyalurate having an average molecular weight of 2.5 MDa to 3.5 MDa, sodium hydroxide, and 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) as a crosslinking agent were weighed. The concentration of sodium hyalurate during the reaction was 16 wt.%, and mol.% BDDE was 4 mol.% per unit added sodium hyalurate. Separately, an aqueous solution of sodium hydroxide (NaOH) was prepared at a concentration of 0.25 N and filtered. Weighed sodium hyalurate, 0.25 N aqueous sodium hydroxide solution and 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) were placed in a mixing tank and stirred uniformly, and this mixing tank was placed in a constant temperature water bath, and the crosslinking reaction was performed at a temperature of 30 °C during the night. Then, the cross-linked hyaluronic acid hydrogel was roughly cut after the reaction.

Параллельно растворяли соли и анестетики в концентрации 1,26 г/л гидрата гидрофосфата натрия (додекагидрат), 0,46 г/л моногидрата дигидрофосфата натрия (моногидрат), 7 г/л хлорида натрия и 3 г/л гидрохлорида лидокаина в буферном баке, содержащем воду для инъекций, получая буферный раствор.In parallel, salts and anesthetics were dissolved at a concentration of 1.26 g/l sodium hydrogen phosphate hydrate (dodecahydrate), 0.46 g/l sodium dihydrogen phosphate monohydrate (monohydrate), 7 g/l sodium chloride and 3 g/l lidocaine hydrochloride in a buffer tank, containing water for injection, obtaining a buffer solution.

Часть буферного раствора использовали в качестве первичного буферного раствора и переносили в промывочный бак через 0,22 мкм фильтр. Разрезанный гидрогель гиалуроновой кислоты, предварительно приготовленный, переносили в промывочный бак, содержащий первичный буферный раствор и затем перемешивали. Гидрогель гиалуроновой кислоты подвергали первичной промывке и набуханию, и затем, когда набухание завершалось, промывочный раствор удаляли. Потом вторичный буферный раствор переносили в промывочный бак через 0,22 мкм фильтр и перемешивали, и гидрогель подвергали вторичной промывке и набуханию, и затем, когда промывка и набухание завершались, промывочный раствор удаляли. Затем третичный буферный раствор переносили в промывочный бак через подходящий 0,22 мкм фильтр и перемешивали, и гидрогель подвергали третьей промывке и набуханию. Потом, когда завершались промывка и набухание, промывочный раствор удаляли.Part of the buffer solution was used as the primary buffer solution and transferred to the wash tank through a 0.22 μm filter. The cut hyaluronic acid hydrogel, previously prepared, was transferred to the wash tank containing the primary buffer solution and then mixed. The hyaluronic acid hydrogel was subjected to primary washing and swelling, and then, when the swelling was completed, the washing solution was removed. Then, the secondary buffer solution was transferred to the wash tank through a 0.22 μm filter and stirred, and the hydrogel was subjected to a second wash and swelling, and then, when the washing and swelling were completed, the wash solution was removed. The tertiary buffer solution was then transferred to the wash tank through a suitable 0.22 µm filter and mixed, and the hydrogel was subjected to a third wash and swell. Then, when washing and swelling were completed, the washing solution was removed.

После завершения третьей промывки и набухания проверяли, находится ли рН промывочного раствора в нейтральном диапазоне, и гидрогель гиалуроновой кислоты, подвергнутый промывке и набуханию, измельчали и затем переносили в бак экструдера, измеряя массу, буферный раствор добавляли так, чтобы масса геля достигала целевой массы, и выполняли первичную коррекцию содержания. Когда завершали первичную коррекцию содержания, гидрогель гиалуроновой кислоты экструдировали и измельчали в баке экструдера. Затем измельченный гидрогель гиалуроновой кислоты переносили в стерилизованный бак и гомогенизировали, после чего содержание измеряли и добавляли буферный раствор, чтобы выполнить вторичную коррекцию содержания. Гидрогель гиалуроновой кислоты после вторичной коррекции содержания нагревали до температуры 121°С или больше в течение, по меньшей мере, 1 минуты и выполняли дегазирование путем перемешивания гидрогеля гиалуроновой кислоты при пониженном давлении перед загрузкой в шприц.After the completion of the third washing and swelling, it was checked whether the pH of the washing solution was in the neutral range, and the hyaluronic acid hydrogel subjected to washing and swelling was crushed and then transferred to the extruder tank, measuring the mass, the buffer solution was added so that the mass of the gel reached the target mass, and performed initial content correction. When the primary content adjustment was completed, the hyaluronic acid hydrogel was extruded and pulverized in the extruder tank. Then, the crushed hyaluronic acid hydrogel was transferred to a sterilized tank and homogenized, after which the content was measured and a buffer solution was added to perform a secondary correction of the content. The hyaluronic acid hydrogel after the secondary content correction was heated to a temperature of 121° C. or more for at least 1 minute, and degassing was performed by agitating the hyaluronic acid hydrogel under reduced pressure before loading into a syringe.

Затем гидрогель гиалуроновой кислоты заполняли под вакуумом в каждый шприц в заданном количестве и сразу запечатывали резиновой пробкой. Заполненный шприц стерилизовали паром в течение, по меньшей мере, 8 минут при температуре 121°С или больше в конечном стерилизаторе.Then the hyaluronic acid hydrogel was filled under vacuum into each syringe in a predetermined amount and immediately sealed with a rubber stopper. The filled syringe was steam sterilized for at least 8 minutes at 121° C. or more in the final sterilizer.

Экспериментальный пример 1: СКС измерение меченых частиц в наполнителе, содержащем гидрогель гиалуроновой кислоты, используя микрореологическую технологиюExperimental Example 1: SCM Measurement of Labeled Particles in a Filler Containing Hyaluronic Acid Hydrogel Using Microrheological Technology

Для анализа свойств приготовленного образца 1, наполнители, содержащие гидрогель коммерческой гиалуроновой кислоты, из сравнительных примеров 1-5 вместе с примером 1 использовали в эксперименте, показанном в таблице 1.To analyze the properties of the prepared sample 1, the fillers containing commercial hyaluronic acid hydrogel from Comparative Examples 1-5 together with Example 1 were used in the experiment shown in Table 1.

Детально, броуновское движение меченых частиц, диспергированных в образце, фотографировали, используя видео-микроскоп, и затем движение меченых частиц анализировали, используя программу обработки изображений (Матлаб) (фиг.2).In detail, the Brownian motion of the labeled particles dispersed in the sample was photographed using a video microscope, and then the motion of the labeled particles was analyzed using an image processing program (Matlab) (FIG. 2).

Более конкретно, тестовый образец готовили диспергированием 1 об.% меченых частиц (частицы полистирола, имеющие диаметр 1 мкм) в 1 мл наполнителя из примера 1. Микрореологические эксперименты выполняли путем размещения образца наполнителя, в котором были диспергированы меченые частицы, между прозрачными предметными стеклами и регистрации траектории меченых частиц, движущихся в наполнителе, с помощью камеры, соединенной с оптическим микроскопом. Запись выполняли 10 раз в минуту и усредняли. Скорость съемки была 38 кадров в секунду. Записанные изображения анализировали, используя средство анализа изображений (Матлаб), и откладывали, насколько расстояние движения меченых частиц изменялось со временем, то есть среднеквадратичное смещение относительно времени перемещения меченых частиц. Таким же образом меченые частицы диспергировали в наполнителях, содержащих гидрогели гиалуроновой кислоты, из сравнительных примеров 1-5, получая тестовый образец, и анализировали поведение меченых частиц.More specifically, a test sample was prepared by dispersing 1 vol.% of the labeled particles (polystyrene particles having a diameter of 1 μm) in 1 ml of the filler from Example 1. Microrheological experiments were performed by placing a sample of the filler in which the labeled particles were dispersed between transparent glass slides and recording the trajectory of labeled particles moving in the filler using a camera connected to an optical microscope. Recording was performed 10 times per minute and averaged. The shooting speed was 38 frames per second. The recorded images were analyzed using an image analysis tool (Matlab), and how much the distance of movement of the tagged particles changed with time, that is, the root-mean-square shift relative to the movement time of the tagged particles, was plotted. In the same manner, the labeled particles were dispersed in the hyaluronic acid hydrogel-containing vehicles of Comparative Examples 1 to 5 to prepare a test sample, and the behavior of the labeled particles was analyzed.

Подтверждали характеристики распределения среднеквадратичного смещения (СКС) меченых частиц согласно фазовым свойствам наполнителей с гидрогелями гиалуроновой кислоты. Более конкретно, в случае двухфазного наполнителя из сравнительного примера 1 движения меченых частиц, локализованных в области поверхности, и меченых частиц, локализованных в сшитой области, были разными, и меченые частицы, локализованные в области поверхности, имели относительно свободное движение, приводящее к большой величине наклона СКС. Напротив, частицы, которые проникли внутрь данных частиц и локализованы в сшитой области, имели ограниченное движение, которое демонстрировало небольшую величину наклона СКС. При этом, распределение СКС меченых частиц для однофазного наполнителя из сравнительного примера 4 не разделялось на две области, а показывало одинаковые наклоны, тем самым подтверждая, что частицы формировали непрерывную фазу без границ относительно области наполнителя (фиг.3). Согласно этим результатам, было доказано, что фазовые свойства наполнителей могут быть определены при измерении величину СКС путем введения меченых частиц в наполнители, содержащие гидрогель гиалуроновой кислоты.The RMS distribution characteristics of the labeled particles were confirmed according to the phase properties of the fillers with hyaluronic acid hydrogels. More specifically, in the case of the two-phase filler of Comparative Example 1, the movements of the labeled particles localized in the surface region and the labeled particles localized in the crosslinked region were different, and the labeled particles localized in the surface region had a relatively free movement, resulting in a large value slope of the SCS. On the contrary, the particles that penetrated into these particles and localized in the crosslinked region had a limited movement, which showed a small amount of slope of the SCS. At the same time, the SMR distribution of labeled particles for the single-phase filler from comparative example 4 was not divided into two regions, but showed the same slopes, thereby confirming that the particles formed a continuous phase without boundaries relative to the filler region (Fig. 3). According to these results, it was proved that the phase properties of the fillers can be determined by measuring the SDR value by introducing labeled particles into fillers containing hyaluronic acid hydrogel.

Кроме того, на основании соотношения между распределением величины наклона среднеквадратичного смещения (СКС) меченых частиц и фазой гидрогеля выполняли попытку получить параметры, ответственные за эластичность, когезию и регулярность структуры наполнителя, которые являются самыми важными физическими свойствами наполнителя для выбора прекрасных наполнителей.In addition, based on the relationship between the RMS slope distribution of the labeled particles and the hydrogel phase, an attempt was made to obtain the parameters responsible for the elasticity, cohesion and regularity of the filler structure, which are the most important physical properties of the filler for the selection of excellent fillers.

В случае наполнителей, имеющих низкую когезию вместо высокой эластичности, таких как двухфазные наполнители, структура наполнителей была нерегулярной, и, таким образом, движение меченых частиц, локализованных в области поверхности, и меченых частиц, локализованных в сшитой области, становилось разным. Более конкретно, меченые частицы, локализованные в области поверхности, имели относительно свободное движение и, таким образом, демонстрировали большую величину наклона СКС, а меченые частицы, которые проникали в наполнитель и были локализованы в сшитой области, имели ограниченное движение и, таким образом, показывали небольшую величину наклона СКС. Соответственно, было подтверждено, что эти наполнители имели большое стандартное отклонение наклона СКС, а также показано, что средняя величина наклона СКС была велика. Кроме того, было доказано, что абсолютная величина СКС при 0,1 секунды снижалась при увеличении эластичности. Напротив, в случае наполнителей, имеющих низкую эластичность вместо высокой когезии, таких как однофазные наполнители, структура наполнителей была регулярной, и стандартное отклонение величины наклона СКС было небольшим, а также меченые частицы имели ограниченное движение из-за когезии и, таким образом, показывали небольшую величину наклона СКС.In the case of fillers having low cohesion instead of high elasticity, such as two-phase fillers, the structure of the fillers was irregular, and thus the movement of labeled particles localized in the surface region and labeled particles localized in the crosslinked region became different. More specifically, the labeled particles localized in the surface region had a relatively free movement and thus showed a large amount of slope of the SMR, and the labeled particles that penetrated the filler and were localized in the crosslinked region had limited movement and thus showed a small slope of the SCS. Accordingly, it was confirmed that these fillers had a large standard deviation of the SMR slope, and it was also shown that the average value of the SMR slope was large. In addition, it was proved that the absolute value of the SDR at 0.1 seconds decreased with increasing elasticity. In contrast, in the case of fillers having low elasticity instead of high cohesion, such as single-phase fillers, the structure of the fillers was regular and the standard deviation of the SMR slope was small, and the labeled particles had limited movement due to cohesion and thus showed little the slope of the SCS.

На основании результатов данных тестов в качестве параметра, ответственного за эластичность, когезию и регулярность структуры наполнителя, был предложен "параметр эффективности улучшения морщин (ЭУМ)", выраженный уравнением 1.Based on the results of these tests, as a parameter responsible for the elasticity, cohesion, and regularity of the structure of the filler, the "Wrinkle Improvement Effectiveness Parameter (EIM)" expressed by Equation 1 was proposed.

[Уравнение 1][Equation 1]

В уравнении 1 СКС означает среднеквадратичное смещение меченых частиц. Когезию наполнителя представляет средняя величина наклона СКС, эластичность представляет абсолютная величина СКС при времени перемещения 0,1 секунды для частиц, и регулярность структуры наполнителя представляет стандартное отклонение величины наклона СКС, и эти свойства рассматриваются совместно.In Equation 1, RMS means the rms displacement of the tagged particles. The cohesion of the filler represents the mean value of the SMR slope, the elasticity represents the absolute value of the SMR at a travel time of 0.1 seconds for particles, and the regularity of the filler structure represents the standard deviation of the value of the SMR slope, and these properties are considered together.

Соответственно, было доказано, что физические свойства наполнителей с гиалуроновой кислотой могут быть измерены с помощью параметра ЭУМ, используя СКС, и было доказано, что величины параметра ЭУМ наполнителей из примера 1 и сравнительных примеров 1-5 согласно уравнению 1 отражают одновременно когезию, эластичность и регулярность структуры наполнителя, и результаты показаны в таблице 1 и фиг.4 ниже.Accordingly, it has been proven that the physical properties of hyaluronic acid fillers can be measured by the EMU parameter using the SCM, and it has been proven that the EMU parameter values of the fillers of Example 1 and Comparative Examples 1 to 5 according to Equation 1 reflect cohesion, elasticity, and the regularity of the filler structure, and the results are shown in Table 1 and Figure 4 below.

[Таблица 1][Table 1]

СимволSymbol ОбразецSample Средний наклон величины СКСAverage slope of the SDR value Абсолютная величина СКС при 0,1 сAbsolute value of SDR at 0.1 s Стандартное отклонение величины наклона СКСStandard deviation of the slope of the SCS Величина ЭУМEUM value AA Пример 1Example 1 0,1200.120 0,1090.109 0,1800.180 4,254.25 BB Сравнительный пример 1 (Restylane Lyft с лидокаином)Comparative Example 1 (Restylane Lyft with Lidocaine) 0,4400.440 0,6960.696 0,4070.407 0,080.08 CC Сравнительный пример 2 (Juvederm Voluma с лидокаином)Comparative Example 2 (Juvederm Voluma with Lidocaine) 0,2790.279 0,3580.358 0,2600.260 0,380.38 DD Сравнительный пример 3 (Teosyal Puresense Ultimate с лидокаином)Comparative Example 3 (Teosyal Puresense Ultimate with Lidocaine) 0,2550.255 0,4160.416 0,2140.214 0,440.44 EE Сравнительный пример 4 (Teosyal Puresense Ultra Deep с лидокаином)Comparative Example 4 (Teosyal Puresense Ultra Deep with Lidocaine) 0,2200.220 0,3490.349 0,2550.255 0,510.51 FF Сравнительный пример 5 (Teosyal Puresense Deep Line с лидокаином)Comparative Example 5 (Teosyal Puresense Deep Line with Lidocaine) 0,4200.420 0,5070.507 0,2360.236 0,20.2

Как показано в таблице 1 и фиг.4, величина параметра ЭУМ наполнителя согласно примеру 1 была 4,25, а величины параметров ЭУМ наполнителей из сравнительных примеров 1-5 были 0,51 или меньше. Наполнители из сравнительных примеров 1-5 имели значительно меньшие величины ЭУМ по сравнению с наполнителем из примера согласно настоящему изобретению, которые не удовлетворяли когезии, эластичности и регулярности структуры наполнителя согласно настоящему изобретению. Напротив, было доказано, что наполнитель, имеющий величину параметра ЭУМ 0,6 или больше, может быть выбран в качестве наполнителя, имеющего прекрасные заполняющие свойства (фиг.4).As shown in Table 1 and FIG. 4, the EAM parameter value of the filler according to Example 1 was 4.25, and the EMR parameter values of the fillers from Comparative Examples 1 to 5 were 0.51 or less. The fillers of Comparative Examples 1-5 had significantly lower ESM values compared to the filler of the example according to the present invention, which did not satisfy the cohesion, elasticity and regularity of the structure of the filler according to the present invention. On the contrary, it has been proven that a filler having an ELM value of 0.6 or more can be selected as a filler having excellent filling properties (FIG. 4).

Более конкретно, было доказано, что в сравнительном примере 1 регулярность структуры наполнителя была плохой, потому что стандартное отклонение величины наклона СКС было большое, как для типичного двухфазного наполнителя, а также было доказано, что когезия была низкой, потому что средняя величина наклона СКС была большая. В сравнительном примере 1 было доказано, что эластичность наполнителя была низкой, потому что абсолютная величина СКС (величина при 0,1 с) была большой как у однофазного наполнителя.More specifically, in Comparative Example 1, the regularity of the filler structure was proven to be poor because the standard deviation of the SMR slope value was large, as for a typical two-phase filler, and it was also proved that the cohesion was low because the average value of the SMR slope was big. In Comparative Example 1, it was proved that the elasticity of the filler was low because the absolute value of the SDR (value at 0.1 s) was large as that of a single-phase filler.

В случае примера 1 было доказано, что абсолютная величина СКС (величина при 0,1 с) была низкая, средняя величина наклона СКС была низкая, и стандартное отклонение величины наклона СКС было низкое, и когезия, эластичность и регулярность наполнителя были превосходными. Следовательно, наполнитель из примера 1 показывает прекрасную способность сохранения формы в месте инъекции, низкую вероятность движения в другие места во время хирургической операции и регулярную структуру наполнителя, и, таким образом, ожидается, что он покажет прекрасные заполняющие свойства.In the case of Example 1, it was proved that the absolute value of the SMR (value at 0.1 s) was low, the average value of the slope of the SMR was low, and the standard deviation of the value of the SMR slope was low, and the cohesion, elasticity and regularity of the filler were excellent. Therefore, the filler of Example 1 shows excellent shape retention at the injection site, low chance of movement to other sites during surgery, and a regular filler structure, and thus is expected to show excellent filling properties.

Экспериментальный пример 2: доказательство свойства улучшения морщин наполнителя, содержащего гидрогель гиалуроновой кислотыExperimental Example 2: Proof of Wrinkle Improvement Property of Filler Containing Hyaluronic Acid Hydrogel

Чтобы доказать, связан ли по существу параметр ЭУМ из экспериментального примера 1 со свойством улучшения морщин, свойство улучшения морщин наполнителей с гиалуроновой кислотой согласно примеру 1 и сравнительным примерам 1-5, показанным в таблице 1, измеряли согласно следующему способу.In order to prove whether the ELM parameter of Experimental Example 1 is substantially related to the wrinkle improvement property, the wrinkle improvement property of the hyaluronic acid fillers according to Example 1 and Comparative Examples 1 to 5 shown in Table 1 was measured according to the following method.

Чтобы измерить способность лифтинга, которая является параметром, показывающим свойство улучшения морщин, эластичность и когезию наполнителей измеряли с помощью реометра (АRЕS0G2, ТА Instruments), и данные две величины перемножали, вычисляя способность лифтинга. Результаты доказательства такой эластичности, когезии и способности лифтинга показаны в таблице 2 и фиг.4 ниже.In order to measure the lifting ability, which is a parameter indicative of the wrinkle improvement property, the elasticity and cohesion of the fillers were measured with a rheometer (ARES0G2, TA Instruments), and these two values were multiplied to calculate the lifting ability. The results of proving such elasticity, cohesion and lifting ability are shown in Table 2 and Figure 4 below.

Более конкретно, эластичность измеряли путем определения того, насколько большая нагрузка требовалась, когда наполнитель помещали между верхом и низом круглой геометрии и прикладывали к ней постоянный сдвиг (деформация сдвига=0,1%), единицу выражали в Па, и скорость, при которой прикладывали сдвиг, была 10 рад/с. Когезию измеряли как силу, прилагаемую, когда наполнитель помещали между верхом и низом данной геометрии и тянули вертикально. Когда когезия между частицами наполнителя была больше, большая сила требовалась для растяжения. Скорость растяжения была 1 мм/с, и единицу выражали в Н.More specifically, elasticity was measured by determining how much load was required when the filler was placed between the top and bottom of the circular geometry and a constant shear was applied thereto (shear strain=0.1%), the unit was expressed in Pa, and the rate at which shift was 10 rad/s. Cohesion was measured as the force applied when the filler was placed between the top and bottom of a given geometry and pulled vertically. When the cohesion between the filler particles was greater, a greater force was required to stretch. The stretching speed was 1 mm/s and the unit was expressed in N.

[Таблица 2][Table 2]

ПримерExample ТипType of Когезия (Н)Cohesion (N) Модуль сохранения упругости (Па)@10 рад/cModulus of elasticity (Pa)@10 rad/s Способность лифтингаLifting ability Параметр ЭУМEUM parameter Пример 1(А)Example 1(A) Однофазный и двухфазныйSingle-phase and two-phase 1,4141.414 620,72620.72 878878 4,254.25 Сравнительный пример 1(В)Comparative Example 1(B) Двухфазныйtwo-phase 0,5900.590 598,264598.264 353353 0,080.08 Сравнительный пример 2(С)Comparative Example 2(C) Однофазный single phase 0,8150.815 296,604296.604 242242 0,380.38 Сравнительный пример 3(D)Comparative Example 3(D) Однофазный single phase 1,3461.346 391,664391.664 527527 0,440.44 Сравнительный пример 4(Е)Comparative Example 4(E) Однофазный single phase 1,6341.634 354,452354.452 579579 0,510.51 Сравнительный пример 5(F)Comparative Example 5(F) Однофазный single phase 1,1561.156 235,074235.074 279279 0,200.20

Из результатов экспериментальных примеров 1 и 2 выше можно обнаружить, что наполнитель, содержащий гидрогель гиалуроновой кислоты согласно настоящему изобретению, демонстрирует величину параметра ЭУМ 4,25, что больше чем 0,6, и высокий параметр способности лифтинга, который выражается, как произведение эластичности и когезии, и представляет свойство улучшения морщин, 600 Па*Н или больше, более предпочтительно 800 Па*Н или больше, и, таким образом, доказывая, что наполнитель настоящего изобретения одновременно удовлетворяет эластичности и когезии. Однако сравнительные примеры 1-5, которые являются коммерчески доступными наполнителями с гиалуроновой кислотой, имели величину параметра ЭУМ меньше чем 0,6, не показывали прекрасной эластичности и/или когезии, и имели способность лифтинга меньше чем 600 Па*Н. Таким образом, было доказано, что свойство улучшения морщин не было высоким по сравнению с наполнителем настоящего изобретения.From the results of Experimental Examples 1 and 2 above, it can be found that the filler containing the hyaluronic acid hydrogel of the present invention exhibits an EMU value of 4.25, which is greater than 0.6, and a high lifting ability parameter, which is expressed as the product of elasticity and cohesion, and presents a wrinkle improvement property of 600 Pa*N or more, more preferably 800 Pa*N or more, and thus proving that the filler of the present invention simultaneously satisfies elasticity and cohesion. However, Comparative Examples 1 to 5, which are commercially available hyaluronic acid fillers, had an EMU value of less than 0.6, did not show excellent elasticity and/or cohesion, and had a lifting capacity of less than 600 Pa*N. Thus, it was proved that the wrinkle improvement property was not high compared with the filler of the present invention.

В результате, наполнитель (пример 1), имеющий величину параметра ЭУМ 0,6 или больше, как в настоящем изобретении, был превосходным по когезии и эластичности и демонстрировал способность лифтинга 600 Па*Н или больше, вследствие чего имел превосходное свойство улучшения морщин.As a result, the filler (Example 1) having an EMU value of 0.6 or more as in the present invention was excellent in cohesion and elasticity and exhibited a lifting ability of 600 Pa*N or more, thereby having an excellent wrinkle improvement property.

Claims

1. A filler containing a hyaluronic acid hydrogel, in which the value of the filling property parameter (FRP) obtained using Equation 1 is 0.6 or more:

[Equation 1]

Wrinkle Improvement Efficiency Parameter (WME) = ([mean value of SMR slope]*[absolute value of SMR at 0.1 s movement time]*[standard deviation of SMR value]*100) ^-1

in equation 1 above,

SMR means the root-mean-square displacement of the labeled particles introduced into the vehicle containing the hyaluronic acid hydrogel, and the slope means a straight line from the plot of the SMR versus time,

where hyaluronic acid is a cross-linked hyaluronic acid, which is obtained by cross-linking hyaluronic acid having an average molecular weight from 2000000 Da to 4000000 Da, or its salt with a cross-linking agent at a concentration of 1 to 10 mol.% relative to the mole of N-acetyl-D- glucosamine and D-glucuronic acid in hyaluronic acid or its salt.

2. The filler of claim. 1, wherein the EAM parameter is from 0.6 or more to 20 or less.

3. The filler according to claim 1, wherein the product of elasticity and cohesion is 600 Pa*N or more.

4. The filler of claim. 1, in which the filling property provides for the reduction of wrinkles due to the filling of biological tissues, the modeling of the face, or the restoration or increase in volume of soft tissues.

5. The excipient of claim 1 wherein the crosslinker comprises at least one crosslinker selected from the group consisting of 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE), ethylene glycol diglycidyl ether (EGDGE), diglycidyl ether 1 ,6-hexanediol, propylene glycol diglycidyl ether, polypropylene glycol diglycidyl ether, polytetramethylene glycol diglycidyl ether, neopentyl glycol diglycidyl ether, polyglycerol polyglycidyl ether, diglycerol polyglycidyl ether, glycerol polyglycidyl ether, trimethylpropane polyglycidyl ether, 1,2-(2-(2,3-)-propoxy) ethylene, pentaerythritol polyglycidyl ether and sorbitol polyglycidyl ether.

6. Filler according to claim 1, additionally containing an anesthetic.

7. An excipient according to claim 6 wherein the anesthetic is lidocaine or a salt thereof.

8. An excipient according to claim 6, wherein the excipient is for dermal injection.

9. Filled syringe filled with a filler containing hyaluronic acid hydrogel according to any one of paragraphs. 1-8.

10. Biomaterial for tissue repair, containing a filler with hyaluronic acid hydrogel according to any one of paragraphs. 1-8.

11. Method for tissue repair, in which the filler with hyaluronic acid hydrogel according to any one of paragraphs is injected. 1-8.

12. A method for reducing wrinkles, in which the filler with hyaluronic acid hydrogel according to any one of paragraphs is injected. 1-8.