RU2776373C2 - Пероральные композиции с иммуномодулирующим эффектом в отношении естественных клеток-киллеров - Google Patents
Пероральные композиции с иммуномодулирующим эффектом в отношении естественных клеток-киллеров Download PDFInfo
- Publication number
- RU2776373C2 RU2776373C2 RU2019117597A RU2019117597A RU2776373C2 RU 2776373 C2 RU2776373 C2 RU 2776373C2 RU 2019117597 A RU2019117597 A RU 2019117597A RU 2019117597 A RU2019117597 A RU 2019117597A RU 2776373 C2 RU2776373 C2 RU 2776373C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fatty acids
- cells
- composition
- esters
- peripheral blood
- Prior art date
Links
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 97
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 75
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 title description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 57
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 57
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 57
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 50
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 claims abstract description 35
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims abstract description 25
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 24
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims abstract description 22
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 19
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims abstract description 12
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 41
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 41
- -1 fatty acid esters Chemical class 0.000 claims description 13
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N palmitic acid group Chemical group C(CCCCCCCCCCCCCCC)(=O)O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 10
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 10
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 10
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 10
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000004667 medium chain fatty acids Chemical class 0.000 claims description 8
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 6
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)(=O)O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims description 6
- 239000005632 Capric acid (CAS 334-48-5) Substances 0.000 claims description 4
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 claims description 4
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 claims description 4
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 claims description 4
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003313 saccharo lipids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 claims description 3
- VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N gamma-linolenic acid Chemical class CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N 0.000 claims description 2
- 235000020664 gamma-linolenic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 52
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 43
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 abstract description 15
- 229940028435 intralipid Drugs 0.000 abstract description 13
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 14
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 14
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 13
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 13
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 12
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 8
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 8
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 7
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 7
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 7
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 6
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 6
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 5
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 5
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 5
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 2-cyanobenzohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CC=C1C#N TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021360 Myristic acid Nutrition 0.000 description 4
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N Myristic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 4
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 4
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 4
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940100688 oral solution Drugs 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 4
- DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N (2e,4e,6e,8e,10e,12e)-docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N 0.000 description 3
- GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 6-Ketone, O18-Me-Ussuriedine Natural products CC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003744 In vitro fertilisation Methods 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 3
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 3
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000016117 decidualization Effects 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 3
- KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N docosahexaenoic acid (DHA) Natural products COC(=O)C(C)NOCC1=CC=CC=C1 KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 3
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 3
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 3
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 3
- YWWVWXASSLXJHU-AATRIKPKSA-N (9E)-tetradecenoic acid Chemical compound CCCC\C=C\CCCCCCCC(O)=O YWWVWXASSLXJHU-AATRIKPKSA-N 0.000 description 2
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N (Z,Z,Z)-Octadeca-9,12,15-trienoic acid Natural products CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010011409 Cross infection Diseases 0.000 description 2
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- 206010046607 Urine abnormality Diseases 0.000 description 2
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000002238 decidual nk cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- GFZPJHFJZGRWMQ-UHFFFAOYSA-M diOC18(3) dye Chemical compound [O-]Cl(=O)(=O)=O.O1C2=CC=CC=C2[N+](CCCCCCCCCCCCCCCCCC)=C1C=CC=C1N(CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C2=CC=CC=C2O1 GFZPJHFJZGRWMQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 206010013781 dry mouth Diseases 0.000 description 2
- 206010013990 dysuria Diseases 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000007365 immunoregulation Effects 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 2
- AOHAPDDBNAPPIN-UHFFFAOYSA-N myristicinic acid Natural products COC1=CC(C(O)=O)=CC2=C1OCO2 AOHAPDDBNAPPIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 2
- SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N palmitoleic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N 0.000 description 2
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 2
- GMRQFYUYWCNGIN-UHFFFAOYSA-N 1,25-Dihydroxy-vitamin D3' Natural products C1CCC2(C)C(C(CCCC(C)(C)O)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CC(O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 1,25-dihydroxy vitamin D3 Chemical compound C1([C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=CC=C1C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 0.000 description 1
- LYEDSFIRVCIINX-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropanoic acid Chemical compound [CH2]C(C)C(O)=O LYEDSFIRVCIINX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- YWWVWXASSLXJHU-UHFFFAOYSA-N 9E-tetradecenoic acid Natural products CCCCC=CCCCCCCCC(O)=O YWWVWXASSLXJHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006740 Aseptic Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 206010005063 Bladder pain Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 206010008635 Cholestasis Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 102100021260 Galactosylgalactosylxylosylprotein 3-beta-glucuronosyltransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 1
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 206010019842 Hepatomegaly Diseases 0.000 description 1
- 101000894906 Homo sapiens Galactosylgalactosylxylosylprotein 3-beta-glucuronosyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 208000035752 Live birth Diseases 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010027201 Meningitis aseptic Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 235000021319 Palmitoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000012951 Remeasurement Methods 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N Valeric acid Natural products CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N alpha-isobutyric acid Natural products CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000003212 astringent agent Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N calcitriol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N 0.000 description 1
- 229960005084 calcitriol Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000007870 cholestasis Effects 0.000 description 1
- 231100000359 cholestasis Toxicity 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N cis-palmitoleic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003785 decidua Anatomy 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 150000002066 eicosanoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000032692 embryo implantation Effects 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 230000007184 endocrine pathway Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N gamma-Linolensaeure Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002733 gamolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 150000002327 glycerophospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 230000008629 immune suppression Effects 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 229940008228 intravenous immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000021281 monounsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 1
- 235000016236 parenteral nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000008775 paternal effect Effects 0.000 description 1
- HUPQYPMULVBQDL-UHFFFAOYSA-N pentanoic acid Chemical compound CCCCC(O)=O.CCCCC(O)=O HUPQYPMULVBQDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 208000034213 recurrent susceptibility to 1 pregnancy loss Diseases 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000027272 reproductive process Effects 0.000 description 1
- 230000008672 reprogramming Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- NNNVXFKZMRGJPM-KHPPLWFESA-N sapienic acid Chemical compound CCCCCCCCC\C=C/CCCCC(O)=O NNNVXFKZMRGJPM-KHPPLWFESA-N 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 201000005665 thrombophilia Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Abstract
Изобретение касается способа лечения повторных спонтанных абортов или повторных неудачных имплантаций у пациенток-женщин, имеющих 12% или более NK клеток периферической крови среди всех клеток периферической крови пациентки, и/или где цитотоксичность NK клеток периферической крови пациентки по меньшей мере на 10% выше, чем средняя цитотоксичность контрольной популяции здоровых женщин репродуктивного возраста при отсутствии репродуктивных неудач, и которые родили по меньшей мере одного ребенка. Способ включает введение композиции, которая содержит по меньшей мере одну насыщенную, по меньшей мере одну мононенасыщенную и по меньшей мере одну полиненасыщенную длинноцепочечную жирную кислоту или ее эфиры, где по меньшей мере 50 мас.% активных ингредиентов в композиции, рассчитанные как жирные кислоты, представляют собой длинноцепочечные жирные кислоты и их сложные эфиры, при этом композицию вводят перорально в течение от 15 до 70 дней, и где общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,03 г/кг массы тела до 1 г/кг массы тела, рассчитанное как жирные кислоты. Использование способа позволяет снизить как количество, так и цитотоксичность NK клеток периферической крови, а также обеспечивает более длительный эффект уменьшения цитотоксичности NK клеток – 12-14 недель после прекращения лечения по сравнению с 6-9 недель при применении известного средства Intralipid®. При этом пероральное введение композиции не вызывает побочных эффектов, которые могут наблюдаться при внутривенном ведении Intralipid®. 12 з.п. ф-лы, 9 табл., 4 пр.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к пероральным композициям для применения в способе лечения повторных спонтанных абортов (RSA) или повторных неудачных имплантаций (RIF) после искусственного оплодотворения (ЭКО (IVF)) у субфертильных женщин, имеющих повышенное количество и/или цитотоксичность NK клеток.
Предшествующий уровень техники изобретения
Естественные клетки-киллеры (NK) представляют собой специфическую группу крупных гранулярных лимфоцитов (LGL), которые играют важную роль во врожденных иммунных ответах, а также влияют на адаптивные иммунные ответы и иммунную регуляцию (Herberman RB. Role of human natural killer cell responses in health and disease. Clin Diagn Lab Immunol 1994; 1:125-33). Они образуют 1-2% лимфоидной ткани, обнаруживаемой главным образом в селезенке. В периферической крови NK клетки составляют 5-15% всех лимфоцитов и 70-95% LGL (Stites DP, Terr AI, Parslow TG. Basic and clinical immunology. 8th edition, Appleton and Lange, Norwalk, Conn, 1994).
NK клетки экспрессируют на поверхности ряд маркеров, наиболее характерными из которых являются молекулы CD16 и CD56 (Caligiuri M. Human natural killer cells. Blood. 2008;112:461-9). На основании относительной экспрессии CD16 и CD56 NK клетки могут быть поделены на различные субпопуляции. Две основных подгруппы представляют собой CD56dim CD16bright (низкая экспрессия CD56, высокая экспрессия CD16), и CD56bright CD16dim/- (высокая экспрессия CD56, низкая или отсутствие экспрессии CD16). Клетки CD56dim CD16bright, которые составляют по меньшей мере 90% всех NK клеток периферической крови, обладают цитотоксической функцией. При активации они высвобождают перфорин и гранзимы из гранул, когда они двигаются в область воспаления в ответ на хемокины, высвобождаемые при воспалении эндотелиальными и природными иммунными клетками (Moretta A, Marcenaro E, Parolini S, Ferlazzo G, Moretta L. NK cells at the interface between innate and adaptive immunity. Cell Death Differ 2008; 15:226-33). Клетки CD56bright CD16dim/- составляют большинство NK клеток во вторичных лимфоидных тканях, они являются только слабо цитотоксичными до активации, но, под воздействием цитокинов, они немедленно продуцируют большие количества INF-γ и могут приобретать иммунорегуляторные свойства (Poli A, Michel T, Theresine M, Andres E, Hentges F, Zimmer J, CD56bright natural killer (NK) cells: an important NK cell subset. Immunology 2009 Apr;126(4):458-65). Такие клетки составляют основную клеточную популяцию лейкоцитов эндометрия (CD56 eGL: гранулоциты эндометрия), вероятно после локальной дифференцировки (Hiby SE1, King A, Sharkey AM, Loke YW, Human uterine NK cells have a similar repertoire of killer inhibitory and activatory receptors to those found in blood, as demonstrated by RT-PCR and sequencing, Mol Immunol. 1997 Apr;34(5):419-30).
NK-подобные клетки (CD56bright CD16dim/-) являются доминантной популяцией децидуальных клеток с первых стадий беременности на протяжении первого триместра. Существуют доказательства, что их пролиферация и дифференцировка синхронизированы с секреторной фазой менструального цикла, когда эстрогены и прогестерон готовят эндометрий к предполагаемой беременности. В течение этой фазы маточные стромальные лейкоциты сильно повышаются (25% с 5%) в результате притока NK клеток из крови или других тканей, или репрограммирования и дифференцировки стромальных клеток эндометрия в NK клетки (Gellersen B, Brosens IA, Brosens JJ. Decidualization of the human endometrium: mechanisms, functions, and clinical perspectives. Semin Reprod Med 2007; 25:445-53.Santoni A, Carlino C, Gismondi A. Uterine NK cell development, migration and function. Reprod Biomed Online 2008; 16:202-10). Если беременность развивается, NK-подобные клетки быстро повышаются и распределяются по децидуальной оболочке, вблизи от вневорсинчатого трофобласта (King A. Uterine leukocytes and decidualization. Hum Reprod Update 2000; 6:28-36). Из-за увеличения их количества и прямого контакта с внедряющимся трофобластом они важны для развития нормальной беременности. Существуют доказательства, что одновременно с имплантацией и децидуализацией бластоцисты маточные NK клетки становятся активированными, они продуцируют IFN-γ, перфорин и другие молекулы, включая ангиогенные факторы, так что они могут контролировать инвазию трофобласта посредством их цитотоксической активности, и также инициировать нестабильность сосудов и ремоделированиие децидуальных артерий для увеличения кровотока в фетоплацентарной единице (Ashkar AA, Di Santo JP, Croy BA. Interferon gamma contributes to initiation of uterine vascular modification, decidual integrity, and uterine natural killer cell maturation during normal murine pregnancy. J Exp Med 2000;192:259-70). Более того, децидуальные NK клетки могут быть вовлечены в цитокин-опосредованную иммунорегуляцию материнского иммунного ответа, продуцирующего цитокины Th2-типа и факторы роста, что приводит к росту плаценты и локальной иммуносупрессии и иммуномодуляции (Clark D, Arck PC, Jallili R, et al. Psycho-Neuro-Cytokine/Endocrine pathways in immunoregulation during pregnancy. Am J Reprod Immunol 1996; 35:330-7 Chaouat G, Tranchot Diallo J, Volumenie JL, et al. Immune suppression and Th1/Th2 balance in pregnancy revisited: A (very) personal tribute to Tom Wegmann. Am J Reprod Immunol 1997; 37:427-34).
Децидуальные NK клетки, вероятно, являются основной клеточной популяцией, вовлеченной в случаи так называемых аллоиммунных абортов, когда эмбрион распознается как чужеродный и ʺотторгаетсяʺ матерью (Labarrere CA. Allogeneic recognition and rejection reactions in the placenta. Am J Reprod Immunol 1989;21:94-9 Stern JJ, Coulam CB: Current status of immunologic recurrent pregnancy loss. Curr Opin Obstet Gynecol 1993;5:252-9). Под влиянием цитокинов Th1-типа они стимулируются и становятся классическими NK клетками, экспрессирующими CD16 (CD56dim CD16bright), которые могут повреждать трофобласт или непосредственно путем высвобождения цитолитических веществ или опосредованно путем продукции воспалительных цитокинов (King A, Wheeler R, Carter NP, et al. The response of human decidual leukocytes to IL-2. Cell Immunol 1992; 141:409-42).
Клинические исследования продемонстрировали, что женщины, которые склонны к абортам, имеют повышенное количество NK клеток обычного CD3-CD56+CD16+ типа в матке (Vassiliadou N, Bulmer JN: Immunohistochemical evidence for increased numbers of 'classic' CD57+ natural killer cells in the endometrium of women suffering spontaneous early pregnancy loss. Hum Reprod 1996;11:1569-74 Kwak JY, Beer AE, Kim SH, et al. Immunopathology of the implantation site utilizing monoclonal antibodies to natural killer cells in women with recurrent pregnancy losses. Am J Reprod Immunol 1999;41:91-8), а также увеличение подгрупп NK в крови и активности NK клеток которые ассоциированы с абортом эмбрионов с нормальными хромосомами (Coulam CB, Goodman C, Roussev RG, et al. Systemic CD56+ cells can predict pregnancy outcome. Am J Reprod Immunol 1995;33:40-6 Aoki K, Kajiura S, Matsumoto Y, et al. Preconceptual natural killer cell activity as a predictor of miscarriage. Lancet 1995; 345:1340-2).
Из-за вышеуказанных данных повышенное количество и/или цитотоксичность NK клеток периферической крови (CD56bright CD16dim/-) используют в практике для диагностики аллоиммунных абортов и в качестве маркеров для выбора женщин для иммунотерапии (Coulam CB, Goodman C, Roussev RG, et al. Systemic CD56+ cells can predict pregnancy outcome. Am J Reprod Immunol 1995;33:40-6 Aoki K, Kajiura S, Matsumoto Y, et al. Preconceptual natural killer cell activity as a predictor of miscarriage. Lancet 1995; 345:1340-2).
Классически основным лечением для уменьшения активности вредных NK клеток и предотвращения абортов и/или RIF была активная иммунизация женщин с использованием лимфоцитов отца или третьего лица (Gafter U, Sredni B, Segal J, Kalechman Y. Suppressed cell-mediated immunity and monocyte and natural killer cell activity following allogeneic immunization of women with spontaneous recurrent abortion. J Clin Immunol 1997; 17:408-19), и пассивная иммунизация в форме внутривенного введения иммуноглобулина G (IVIg) (Ruiz JE, Kwak JY, Baum L, et al. Intravenous immunoglobulin inhibits natural killer cell activity in vivo in women with recurrent spontaneous abortion. Am J Reprod Immunol 1996; 35:370-5). Некоторыми известными побочными эффектами или нежелательными явлениями внутривенного иммуноглобулина являются: асептический менингит, почечная недостаточность, тромбоэмболия, гемолитические реакции, анафилактические реакции, заболевания легких, энтерит, кожные расстройства и инфекционные заболевания (Stiehm, 2013). Альтернативным методом лечения, предложенным в течение последних лет для подавления функциональной цитотоксичности NK клеток, является внутривенное введение жировых эмульсий (например, Intralipid®), включающих очищенное соевое масло, очищенный яичный фосфолипид, безводный глицерин и воду для инъекций, которые обычно используются в качестве источника энергии и незаменимых жирных кислот у пациентов с питательными или другими расстройствами, требующими парентерального питания (Natural killer cell functional activity suppression by intravenous immunoglobulin, Intralipid and soluble human leukocyte antigen-G. Am J Reprod Immunol 2007;57:262-9, Meng L, Lin J, Chen L, Wang Z, Liu M, Liu Y, Chen X, Zhu L). Лечение Intralipid® уменьшает цитотоксичность NK клеток периферической крови, но не снижает количество NK клеток периферической крови. Более того, внутривенная инфузия Intralipid® может вызывать некоторые побочные эффекты, такие как боль в мочевом пузыре, кровь в моче или мутная моча, озноб, затрудненное, жгучее или болезненное мочеиспускание, лихорадку, частые позывы на мочеиспускание, боль в пояснице или в боку, сухость во рту и рвоту. Недавние исследования показали, что внутривенное введение Intralipid® может вызывать гепатомегалию, желтуху, холестаз, спленомегалию, тромбоцитопению, лейкопению или синдром жировой нагрузки (<1% в клинических исследованиях) (FDA,2007).
И увеличение количества и повышенная цитотоксичность NK клеток периферической крови могут вызывать повторные спонтанные аборты (Am J Reprod Immunol. 2007 Nov;58(5):447-59. Decline in number of elevated blood CD3(+) CD56(+) NKT cells in response to intravenous immunoglobulin treatment correlates with successful pregnancy, van den Heuvel MJ1, Peralta CG, Hatta K, Han VK, Clark DA; An Increased NK-cell percentage 5 days after the pregnancy termination could be a marker of immune aetiology of miscarriage, as the probability of an aborter with NK >12% to have an immune-mediated abortion is almost 90%. Am J Reprod Immunol. 2008 Apr;59(4):306-15. doi: 10.1111/j.1600-0897.2007.00547.x. Epub 2008 Feb 21).
Было показано, что оценка NK клеток периферической крови в момент аборта является значимой и обусловлена важной ролью повышенного количества NK клеток. (Paparistidis N1, Papadopoulou C, Chioti A, Papaioannou D, Tsekoura C, Keramitsoglou T, Kontopoulou-Antonopoulou V, Agapitos E, Balafoutas C, Varla-Leftherioti M).
Ряд исследований показали, что снижение количества и активности периферических NK клеток приводит к существенному увеличению частоты живорождений, что возникает при очень высоких дозах (Am J Reprod Immunol. 2006 Mar;55(3):232-9; High levels of peripheral blood NK cells in women suffering from recurrent spontaneous abortion are reverted from high-dose intravenous immunoglobulins (Perricone R1, Di Muzio G, Perricone C, Giacomelli R, De Nardo D, Fontana L, De Carolis C. Am J Reprod Immunol. 2010 Mar 1;63(3):263-5. doi: 10.1111/j.1600-0897.2009.00790.x. Epub 2010 Jan 8; CD3-CD56+CD16+ natural killer cells and improvement of pregnancy outcome in IVF/ICSI failure after additional IVIG-treatment. Heilmann L1, Schorsch M, Hahn T. Am J Reprod Immunol. 2007 Apr;57(4):262-9; Natural killer cell functional activity suppression by intravenous immunoglobulin, intralipid and soluble human leukocyte antigen-G.. Roussev RG1, Ng SC, Coulam CB.(Am J Reprod Immunol. 2007 Nov; 58(5):447-59; Decline in number of elevated blood CD3(+) CD56(+) NKT cells in response to intravenous immunoglobulin treatment correlates with successful pregnancy. Van den Heuvel MJ1, Peralta CG, Hatta K, Han VK, Clark DA).
Вышеупомянутые варианты лечения имеют ряд недостатков и неудобств. Например, они требуют повторной госпитализации пациентов, а также постоянного наблюдения врача. Более того, так как пациентов госпитализируют, они могут подвергнуться внутрибольничным инфекциям. Кроме того, такие методы ассоциированы с рисками и побочными эффектами интервенционного лечения (включая жизнеугрожающие, как сепсис из-за продуктов человеческого происхождения, гиперкоагуляцию из-за инфузий жировой эмульсии). Кроме того, такое лечение ассоциировано с серьезными побочными эффектами.
Настоящее изобретение решает указанные проблемы и обеспечивает ряд преимуществ по сравнению с предшествующей областью техники.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение предоставляет пероральные композиции, включающие комбинацию жирных кислот или их сложных эфиров для применения женщинами, которые имели повторные спонтанные аборты (RSA) или повторные неудачные имплантации (IVF) и имеют повышенное количество и/или цитотоксичность NK клеток периферической крови.
Композиции по настоящему изобретению включают в качестве активных ингредиентов комбинацию жирных кислот или их сложных эфиров и их можно вводить в определенных количествах и в течение определенного периода времени.
Соответственно, настоящее изобретение имеет целью предотвратить иммуноопосредованную суб-фертильность в существенно большей когорте пар, имеющих связанные проблемы, которые вне зависимости от их семейного статуса лишают их возможности родить ребенка, что также может иметь существенное социальное, психологическое и экономическое влияние.
Подробное описание изобретения
В настоящее время неожиданно было обнаружено, что пероральная композиция, включающая смесь жирных кислот или их сложных эфиров, вводимая в определенных количествах и в течение определенного периода времени, снижает количество и цитотоксичность периферических NK клеток у женщин, имеющих повторные спонтанные аборты (RSA) или повторные неудачные имплантации (RIF), и имеющих повышенное количество NK клеток периферической крови и/или повышенную цитотоксичность NK клеток периферической крови.
Следовательно, настоящее изобретение обеспечивает пероральную композицию, включающую в качестве активных ингредиентов комбинацию жирных кислот или их сложных эфиров, для применения в способе лечения повторных спонтанных абортов или повторных неудачных имплантаций у женщин, имеющих 12% или более NK клеток периферической крови среди общего количества клеток периферической крови и/или где цитотоксичность NK клеток периферической крови пациентки по меньшей мере на 10% выше, чем средняя цитотоксичность контрольной популяции здоровых женщин репродуктивного возраста без репродуктивных неудач и которые родили по меньшей мере одного ребенка, где композицию вводят перорально в течение 15-70 дней и где общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,03 г/кг массы тела до 1 г/кг массы тела, рассчитанное в виде жирных кислот.
Настоящее изобретение также обеспечивает способ лечения повторных спонтанных абортов или повторных неудачных имплантаций у женщин, имеющих 12% или более NK клеток периферической крови в общем количестве клеток периферической крови и/или где цитотоксичность NK клеток периферической крови женщины по меньшей мере на 10% выше, чем средняя цитотоксичность контрольной популяции здоровых женщин репродуктивного возраста при отсутствии репродуктивных неудач и которые родили по меньшей мере одного ребенка, включающий введение женщине пероральной композиции, содержащей в качестве активных ингредиентов комбинацию жирных кислот или их сложных эфиров, где композицию вводят перорально в течение 15-70 дней и где общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,03 г/кг массы тела до 1 г/кг массы тела, рассчитанного как жирные кислоты.
С целью оценки цитотоксичности NK клеток могут быть применены несколько методов. Хотя высвобождение 51Cr является классическим методом для определения цитотоксичности, альтернативные методы являются доступными и некоторые другие в стадии разработки. В лабораториях, где применение радиоактивных изотопов нежелательно или недопустимо, или когда используют опухолевые клетки-мишени, которые с трудом поглощают метку 51Cr, могут быть использованы тест-системы, которые используют ферменты и колориметрические или флуорометрические красители. В настоящее время наиболее частым методом для определения активности NK клеток является поточная цитометрия, способ, который может быть модифицирован относительно применения реагентов, тем не менее, результат остается прежним. (Determination of natural killer cell function by flow cytometry.Kimberly l.Kane et al, Clinical and diagnostic laboratory immunology, may 1996, p. 295-300; Evaluation of a Flow Cytometry-Based Assay for Natural Killer Cell Activity in Clinical Settings, R. Valiathan et al. 2011 The Authors. Scandinavian Journal of Immunology).
Специалист в области техники понимает, что цитотоксичность NK обычно может меняться у пациента из-за множества возможных иммунологических и эндокринных влияний на NK клетки. Следовательно, при повторном тестировании здоровых пациентов можно ожидать минимальные изменения активности NK. Различная контрольная популяция может обеспечить различные средние значения цитотоксичности NK. С целью получения статистически корректного результата чем больше контрольных образцов, тем лучше. Тем не менее, настоящее изобретение применимо к пациенткам, имеющим цитотоксичность NK клеток периферической крови по меньшей мере на 10% выше, чем средняя цитотоксичность контрольной популяции здоровых женщин репродуктивного возраста с отсутствием репродуктивных неудач, таких как выкидыш или неуспешные IVF, и у которых есть по меньшей мере один ребенок.
В соответствии с настоящим изобретением термин ʺповторные спонтанные аборты (RSA)ʺ определяют, как две или более спонтанных потери беременности до 20й недели беременности.
В соответствии с настоящим изобретением термин ʺповторные неудачные имплантации (RIF)ʺ определяют, как отсутствие имплантации после двух повторных неудачных циклов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), или интрацитоплазматической инъекции спермы (ИКСИ) или циклов внедрения замороженных эмбрионов.
В соответствии с настоящим изобретением повышенную цитотоксичность NK клеток периферической крови определяют, как любую уничтожающую активность, которая по меньшей мере на 10% выше, чем средняя цитотоксичность контрольной популяции здоровых женщин репродуктивного возраста при отсутствии репродуктивных неудач, таких как выкидыш или неуспешные IVF, и которые родили по меньшей мере одного ребенка.
Термин ʺлечение повторных спонтанных абортов или повторных неудачных имплантацийʺ обозначает снижение риска невынашивания у леченной пациентки по сравнению с риском, который у нее может быть при отсутствии лечения, а также улучшение исходов беременности.
В соответствии с настоящим изобретением термин ʺжирная кислотаʺ обозначает алифатическую одноосновную карбоновую кислоту, имеющую насыщенную или ненасыщенную цепочку, обычно включающую от 4 до 28 атомов углерода.
В соответствии с настоящим изобретением термин ʺдлинноцепочечная жирная кислотаʺ обозначает жирную кислоту, имеющую алифатическую цепь из 13 или более атомов углерода.
В соответствии с настоящим изобретением, термин ʺсреднецепочечная жирная кислотаʺ обозначает жирную кислоту, имеющую от 6 до 12 атомов углерода.
В соответствии с настоящим изобретением термин ʺкороткоцепочечная жирная кислотаʺ обозначает жирную кислоту, имеющую менее чем 6 атомов углерода.
Композиции по настоящему изобретению содержат комбинацию жирных кислот или их сложных эфиров. Жирные кислоты включают короткоцепочечные, среднецепочечные или длинноцепочечные, насыщенные или ненасыщенные жирные кислоты. Предпочтительно композиции по настоящему изобретению включают длинноцепочечные жирные кислоты или длинноцепочечные и среднецепочечные жирные кислоты.
Примеры насыщенных длинноцепочечных жирных кислот включают пальмитиновую, стеариновую, миристиловую и арахиновую кислоту.
Примеры мононасыщенных длинноцепочечных жирных кислот включают олеиновую, докозагексаеновую (DHA), эйкозапентаеновую (EPA), пальмитоолеиновую, миристолеиловую и сапиеновую кислоту.
Примеры полинасыщенных длинноцепочечных жирных кислот включают линолевую, α-линоленовую и γ-линоленовую кислоту.
Примеры среднецепочечных жирных кислот включают лауриловую, каприновую и каприловую кислоту.
Примеры короткоцепочечных жирных кислот включают бутановую, 2-метилпропановую, пентановую и 3-метилбутановую кислоту.
Сложные эфиры жирных кислот композиции по настоящему изобретению представляют собой сложные эфиры жирных кислот с алифатическими спиртами, такими как C1-C6 спирты, глицеридами, т.е. моноглицеридами, диглицеридами или триглицеридами, фосфолипидами, такими как фосфатидовые кислоты или фосфоглицериды, сфинголипидами, сахаролипидами, восками и их смесями. Предпочтительно сложные эфиры жирных кислот представляют собой глицериды, сфинголипиды или сахаролипиды и их смеси. Более предпочтительно сложными эфирами жирных кислот являются глицериды.
В соответствии с настоящим изобретением термин ʺрассчитанный, как жирные кислотыʺ обозначает, что, когда композиция включает сложные эфиры жирных кислот, их количество необходимо преобразовывать в таковое соответствующих жирных кислот с целью определения количества пероральной композиции для введения.
Предпочтительно, композиции по настоящему изобретению содержат по меньшей мере одну насыщенную, по меньшей мере одну мононенасыщенную и по меньшей мере одну полиненасыщенную длинноцепочечную жирную кислоту или их сложный эфир.
Предпочтительно по меньшей мере 50 мас.% активных ингредиентов в композициях по настоящему изобретению, рассчитанные как жирные кислоты, представляют собой длинноцепочечные жирные кислоты или их сложные эфиры. Более предпочтительно по меньшей мере 65 мас.% активных ингредиентов в композициях по настоящему изобретению, рассчитанные как жирные кислоты, представляют собой длинноцепочечные жирные кислоты или их сложные эфиры. Еще более предпочтительно по меньшей мере 97 мас.% активных ингредиентов в композициях по настоящему изобретению, рассчитанных как жирные кислоты, представляют собой длинноцепочечные жирные кислоты или их сложные эфиры.
Жирные кислоты композиций по настоящему изобретению действуют как внутриклеточные и межклеточные медиаторы, имеющие различные эффекты на иммунный и воспалительный ответы, где вовлечены NK клетки. Жирные кислоты вовлечены через несколько механизмов в модуляцию иммунной системы, включающих (i) текучесть мембраны; (ii) продукцию липидных пероксидов; (iii) синтез эйкозаноидов; и (iv) влияние на регуляцию генов. Возможно, что иммуномодуляция жирными кислотами осуществляется не только отдельно, но также совместным действием таких факторов.
Композиции по настоящему изобретению могут включать дополнительные активные ингредиенты, такие как витамины, ионы металлов или аминокислоты. Когда такие активные ингредиенты присутствуют, их общее количество составляет предпочтительно менее чем 6% общего количества активных ингредиентов. Примеры витаминов включают витамины B1, B2, B3, B6, D, миоинозитол, инозитол и фолиевую кислоту. Ионы металлов могут включать, например, селен, магний, медь, цинк или марганец. Аминокислоты могут включать натуральные аминокислоты, такие как L-аргинин или L-глютамин. Витамины, ионы металлов или аминокислоты не влияют непосредственно на уменьшение количества и/или цитотоксической активности NK клеток, но влияют на иммунную защиту организма путем поддержки физических барьеров, клеточного иммунитета и продукции антител. Тем не менее существует мнение, что стероидный гормон 1,25-дигидроксивитамин D3 {1,25-(OH)2-D3) оказывает иммуносупрессивное действие.
Присутствие витаминов в композициях по настоящему изобретению вызывает модуляцию иммунного ответа и оказывает гомеостатический эффект на окружение, где находятся NK клетки. Целью является создание благоприятного окружения и участие в улучшении всего репродуктивного процесса, осуществляя модуляцию материнского ответа путем поддержания баланса иммунной системы. Однако, повышенный уровень витаминов может усиливать иммунную систему и увеличивать эффект NK клеток. По этой причине, когда витамины присутствуют в композициях по настоящему изобретению, их общее количество предпочтительно составляет менее чем 4% общего количества активных ингредиентов.
Композиции по настоящему изобретению могут иметь любую форму, подходящую для перорального введения. Такие формы хорошо известны в области техники и включают жидкие формы, такие как пероральные растворы, пероральные суспензии и пероральные эмульсии, пероральные гели или твердые формы, такие как таблетки, капсулы или саше. Композиции по настоящему изобретению можно вводить в виде пищевых добавок.
В добавление к активным ингредиентам композиции по настоящему изобретению могут включать одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, хорошо известных в области техники, таких как вяжущие вещества, разбавители, дезинтегрирующие вещества, суспендирующие средства, смазывающие вещества, растворители, эмульгаторы, загустители, буферы, консерванты, подсластители, красители, ароматизаторы и подобные.
Композиции могут быть получены способами, хорошо известными в области техники.
Композиции по настоящему изобретению вводят в течение от 15 до 70 дней. Предпочтительно композиции вводят в течение от 30 до 60 дней. Более предпочтительно, композиции вводят в течение от 40 до 50 дней.
Композиции по настоящему изобретению можно вводить один раз в сутки или более чем один раз в сутки, например, два раза в сутки. Тем не менее в соответствии с настоящим изобретением общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,03 г/кг массы тела до 1 г/кг массы тела, рассчитанного как жирные кислоты. Предпочтительно общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,10 г/кг массы тела до 0,70 г/кг массы тела, рассчитанного как жирные кислоты. Более предпочтительно общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,20 г/кг массы тела до 0,50 г/кг массы тела, рассчитанное как жирные кислоты.
Композиции по настоящему изобретению специфически снижают количество и цитотоксичность NK клеток периферической крови без общего подавления иммунной системы.
С помощью настоящего изобретения и цитотоксичность NK клеток и процент NK клеток в общем количестве клеток периферической крови остается на низком уровне в течение 12-14 недель после прекращения лечения, достигая длительной протекции и предотвращения RSA или RIF у субфертильных женщин, имеющих повышенное количество NK клеток периферической крови и/или повышенную активность NK клеток периферической крови. Это представляет собой существенное улучшение по сравнению с внутривенным введением Intralipid®, при котором эффект прекращается через 6-9 недель после прекращения лечения (Acacio B, Ng SC,Coulam CB., Am J Reprod Immunol. 2008 Sep;60(3):258-63. doi: 10.1111/j.1600-0897.2008.00621.x.Duration of intralipid's suppressive effect on NK cell's functional activity Roussev RG). Более того, лечение Intralipid® уменьшает цитотоксичность NK клеток периферической крови, но неизвестно чтобы оно снижало количество NK клеток периферической крови. Наоборот, настоящее изобретение уменьшает и количество и цитотоксичность NK клеток периферической крови. Кроме того, внутривенная инфузия Intralipid® может вызывать несколько побочных эффектов, таких как боль в мочевом пузыре, кровь или мутность в моче, затрудненное, жгучее или болезненное мочеиспускание, лихорадку, частые позывы на мочеиспускание, боль в пояснице или в боку, сухость во рту и рвоту, тогда как настоящее изобретение не проявляет таких побочных эффектов.
В противоположность вариантам лечения предшествующей области техники, в которых применяются внутривенные или подкожные инфузии (иммунизация лимфоцитами), в настоящем изобретении композиции вводят перорально и их компоненты потребляются через пищеварительный тракт и следуют нормальному процессу потребления и абсорбции пищи. Таким образом лечение RSA или RIF становится проще и безопаснее по сравнению с вариантами лечения в предшествующей области техники. Более того, с настоящим изобретением нет необходимости в госпитализации или постоянном наблюдении врача, что защищает женщин от внутрибольничных инфекций. Кроме того, настоящее изобретение не ассоциировано с рисками и побочными эффектами интервенционного лечения. Более того с настоящим изобретением уменьшение количества и цитотоксичности NK клеток периферической крови продолжается дольше после прекращения лечения и достигается длительная защита по сравнению с вариантами лечения в предшествующей области техники.
Примеры
Примеры 1-4 иллюстрируют эффект композиций по настоящему изобретению по уменьшению количества периферических NK клеток и их активности (цитотоксичность). Композиции вводили здоровым женщинам репродуктивного возраста (в возрасте от 25 до 46 лет), имеющим RSA или RIF, и имеющим повышенное количество и активность NK клеток периферической крови. Образцы крови от всех женщин тестировали в нулевой день до начала лечения, в день 45 и в день 70 в зависимости от случая. Все они проходили рутинное обследование через 12 недель после прекращения лечения.
Исследование образцов периферической крови на процент NK клеток среди всех лимфоидных клеток и активность NK клеток проводили поточной цитометрией с использованием ранее описанных методик. (Determination of natural killer cell function by flow cytometry.Kimberly l.Kane et al., Clinical and diagnostic laboratory immunology, may 1996, p. 295-300; Evaluation of a Flow Cytometry-Based Assay for Natural Killer Cell Activity in Clinical Settings, R. Valiathan et al. 2011 The Authors. Scandinavian Journal of Immunology). Указанный способ дает процент клеток-мишеней, уничтожаемых натуральными цитотоксическими клетками, присутствующими в PBL. Два флуоресцентных красителя использовали для отличия эффекторных и клеток мишеней и живых и мертвых клеток-мишеней. Одним является зеленый флуоресцентный краситель, 3,3'-диоктадецилоксакарбоцианин перхлорат (DiO), который используют для метки плазматических мембран K562, клеточной линии человеческих эритролейкемических опухолевых клеток, используемых в качестве популяции мишени. Второй краситель йодид пропидия (PI), непроникающий через мембраны, красный флуоресцентный краситель, который добавляют во время анализа, когда мембраны клеток мишеней разрушаются NK-подобными клетками. Интактные клетки мишени, непораженные эффекторами, были единственно позитивными (и демонстрировали только зеленую флуоресценцию), тогда как мишени, уничтожаемые эффекторами, несущие нарушенные мембраны, являются двойными позитивными (и демонстрируют и зеленую и красную флуоресценцию). Эффекторные клетки и клетки мишени добавляют в пробирки для создания различных соотношений эффектор-к-мишени (E:T) 1:50, 1:25 и 1:12,5. В следующих примерах результаты представлены в виде соотношений E:T 50:1.
(Natural killer cell functional activity suppression by intravenous immunoglobulin, intralipid and soluble human leukocyte antigen-G. Roussev RG1, Ng SC, Coulam CB. Am J Reprod Immunol. 2007 Apr; 57(4):262-9.).
Контрольными образцами были здоровые женщины репродуктивного возраста с отсутствием репродуктивных неудач, таких как выкидыши или неудачные IVF, и которые родили по меньшей мере одного ребенка. На основании здоровой контрольной популяции средняя цитотоксичность NK составила 19% в соотношении 50:1.
Изменения цитотоксичности и количества NK клеток от дня 0 до дня 70 измеряли вышеуказанным способом. Во время введения композиций по изобретению исходный средний процент активности и количество NK клеток достоверно снижались через 45 дней и затем снижались близко к исходному уровню после 70 дней. Повторное измерение после введения пероральной композиции показало достоверное снижение и количества и цитотоксичности NK клеток.
В примерах ниже используются следующие сокращения:
LCFA - длинноцепочечные жирные кислоты,
SFA - насыщенные жирные кислоты,
MUFA - мононенасыщенные жирные кислоты,
PUFA - полиненасыщенные жирные кислоты,
MCFA - среднецепочечные жирные кислоты.
Пример 1
Группу из 15 женщин лечили один раз в сутки пероральной композицией 1 в форме перорального раствора, включающего активные ингредиенты, показанного в таблице 1a. Жирные кислоты композиции находились в форме глицеридов. Количество вводимой композиции было таковым, что общее количество жирных кислот, вводимое в сутки, составило 0,25 г/кг массы тела. Образцы крови собирали и тестировали до и через 45 дней после начала лечения.
Таблица 1a
| % активных веществ | |||
| LCFA 97,64% | SFA 14,74% | Миристиновая кислота | 0,20% |
| Пальмитиновая кислота | 4,50% | ||
| Стеариновая кислота | 10,04% | ||
| MUFA 23,39% | Олеиновая кислота | 21,39% | |
| Докозагексаеновая кислота (DHA) | 0,50% | ||
| Эйкозапентаеновая кислота (EPA) | 1,50% | ||
| PUFA 59,51% | Линолевая кислота | 49,27% | |
| γ-линоленовая | 0,50% | ||
| α-линоленовая | 9,74% | ||
| Витамины 1,64% | В1 | 0,02% | |
| В2 | 0,02% | ||
| В3 | 0,02% | ||
| В6 | 0,01% | ||
| D3 (15 мкг-600 МЕ) | 0,48% | ||
| Фолиевая кислота | 0,03% | ||
| Миоинозитол | 1,06% | ||
| Ионы металлов 0,10% | Медь | 0,01% | |
| Цинк | 0,02% | ||
| Магний | 0,06% | ||
| Марганец | 0,01% | ||
| Аминокислоты | L-глютамин | 0,62% | |
Результаты количества и активности NK клеток периферической крови показаны в таблице 1b.
Таблица 1b: (45 дней)
| Пациенты 15 |
День 0 | День 45 | Среднее снижение % | День 0 | День 45 | Среднее снижение активности % |
| NK% количество (среднее) |
NK% количество (среднее) |
NK активность | NK активность |
|||
| 20,25 | 13,59 | 31 | 46,26 | 18,54 | 59,92 |
Средний процент NK клеток периферической крови в общем количестве клеток периферической крови составил 20,25 в день 0 до лечения и 13,59 в день 45 после начала лечения. Такое различие было статистически значимым (p значение <0,0001).
Средняя активность NK клеток периферической крови в соотношении 50:1 составила 46,26 в день 0 до лечения и 18,54 в день 45 после начала лечения. Такое различие было статистически значимым (p значение <0,0001).
Пять женщин вышеупомянутой группы продолжили лечение в течение всего 70 дней. Их обследовали в день 70 в отношении активности и количества NK клеток. Результаты показаны в таблице 1c.
Таблица 1c: (70 дней)
| Пациенты 5 |
День 0 | День 70 | Среднее снижение % | День 0 | День 70 | Среднее снижение активности % |
| NK% количество (среднее) |
NK% количество (среднее) |
NK активность | NK активность |
|||
| 18,42 | 11,45 | 37,41 | 46,54 | 13,60 | 70,43 |
Средний процент NK клеток периферической крови в общем количестве клеток периферической крови составил 18,42 в день 0 до лечения и 11,45 через 70 дней после начала лечения. Указанное различие было статистически значимым (p значение <0,0001).
Средняя активность NK клеток периферической крови в соотношении 50:1 составила 46,54 в день 0 до лечения и 13,60 через 45 дней после начала лечения. Такое различие было статистически значимым (p значение <0,0001).
Все женщины, получавшие указанную композицию, в настоящее время беременны.
Пример 2
Группу из 6 женщин обследовали в день 0 и день 70 в отношении количества и активности NK клеток после введения пероральной композиции 2 один раз в сутки. Композиция находилась в форме перорального раствора, включающего активные ингредиенты, показанные в таблице 2a. Жирные кислоты композиции находились в форме глицеридов. Количество вводимой композиции было таковым, что общее количество вводимых жирных кислоты в сутки составило 0,25 г/кг массы тела.
Таблица 2a
| % активных веществ | |||
| LCFA 97,84% | SFA 11,29% | Миристиновая кислота | 3,05% |
| Пальмитиновая кислота | 6,84% | ||
| Стеатовая кислота | 1,40% | ||
| MUFA 35,85% | Олеиновая кислота | 28,85% | |
| Докозагексаеновая кислота (DHA) | 1,80% | ||
| Эйкозапентаеновая кислота (EPA) | 5,20% | ||
| PUFA 50,70% | Линолевая кислота | 29,28% | |
| γ-линоленовая | 18,69% | ||
| α-линоленовая | 2,73% | ||
| MCFA 2% | Каприновая кислота | 0,50% | |
| Каприловая кислота | 0,50% | ||
| Лауриловая кислота | 1,00% | ||
| Витамины 0,16% | D3 | 0,10% | |
| Фолиевая кислота | 0,03% | ||
| Миоинозитол | 0,03% | ||
Результаты количества и активности NK клеток периферической крови показаны в таблице 2b.
Таблица 2b
| Пациенты 6 |
День 0 | День 70 | Среднее снижение % | День 0 | День 70 | Среднее снижение активности % |
| NK% количество (среднее) |
NK% количество (среднее) |
NK активность | NK активность |
|||
| 18,45 | 12,80 | 30,62 | 43,32 | 19 | 56,14 |
Средний процент NK клеток в периферической крови из общего количества клеток периферической крови составил 18,45 в день 0 до лечения и 12,80 в день 70 после начала лечения. Указанное различие было статистически значимым (p значение 0,001).
Средняя активность NK клеток периферической крови в соотношении 50:1 составила 43,32 в день 0 до лечения и 19, в день 70 после начала лечения. Указанное различие было статистически значимым (p значение 0,001).
Пример 3
В указанной группе образцы крови 6 пациенток собирали и тестировали до и через 45 дней после введения пероральной композиции 3 один раз в сутки. Композиция находилась в форме перорального раствора, включающего активные ингредиенты, показанные в таблице 3a. Жирные кислоты композиции находились в форме глицеридов. Количество вводимой композиции было таким, что общее количество жирных кислот, вводимое в сутки, составило 0,25 г/кг массы тела.
Таблица 3a
| % активных веществ | |||
| LCFA 100% | SFA 25% | Миристиновая кислота | 10% |
| Пальмитиновая кислота | 10% | ||
| Стеатовая кислота | 5% | ||
| MUFA 50% | Олеиновая кислота | 28,85% | |
| Докозагексаеновая кислота (DHA) | 1,80% | ||
| Эйкозапентаеновая кислота (EPA) | 5,20% | ||
| Миристолеиловая кислота | 0,2% | ||
| Пальмитолеиновая кислота | 2,6% | ||
| Сапиеновая кислота | 0,2% | ||
| PUFA 25% | Линолевая кислота | 12% | |
| γ-линоленовая | 5% | ||
| α-линоленовая | 8% | ||
Результаты количества или активности NK клеток периферической крови показаны в таблице 3b.
Таблица 3b
| Пациенты 6 |
День 0 | День 45 | Среднее снижение % | День 0 | День 45 | Среднее снижение активности % |
| NK% количество (среднее) |
NK% количество (среднее) |
NK активность | NK активность |
|||
| 17,84 | 12,40 | 30,48 | 36 | 16,6 | 53,88 |
Средний процент NK клеток периферической крови из общего количества клеток периферической крови составил 17,84 в день 0 до лечения и 12,40 в день 45 после начала лечения. Указанное различие было статистически значимым (p значение <0,001).
Средняя активность NK клеток периферической крови в соотношении 50:1 составила 36 в день 0 до лечения и 16,6 в день 45 после начала лечения. Указанное различие было статистически значимым (p значение 0,001).
Три из шести женщин, получавших лечение указанной композицией, родили и 2 являются беременными.
Пример 4
В этой группе образцы крови 8 пациенток собирали и тестировали до и через 45 дней после введения пероральной композиции 4 один раз в сутки. Композиция находилась в форме перорального раствора, включающего активные ингредиенты, показанные в таблице 4a. Жирные кислоты композиции находились в форме глицеридов. Количество вводимой композиции было таким, что общее количество жирных кислот, вводимое в сутки, составило 0,25 г/кг массы тела.
Таблица 4a
| % активных веществ | |||
| LCFA 65% | SFA 6,43% | Миристиновая кислота | 1,00% |
| Пальмитиновая кислота | 3,00% | ||
| Стеариновая кислота | 1,40% | ||
| MUFA 45,71% | Олеиновая кислота | 45,71% | |
| PUFA 12,86% | Линолевая кислота | 10,03% | |
| γ-линоленовая | 1,93% | ||
| α-линоленовая | 1,93% | ||
| MCFA 30,71% | Каприновая кислота | 5,00% | |
| Каприловая кислота | 8,71% | ||
| Лауриловая кислота | 17,00% | ||
| Витамины 3,06% | D3 | 0,80% | |
| В1 | 0,11% | ||
| В2 | 0,11% | ||
| В3 | 0,13% | ||
| В6 | 0,11% | ||
| Фолиевая кислота | 0,10% | ||
| Инозитол | 1,7% | ||
| Ионы металлов 0,83% | Медь | 0,10% | |
| Цинк | 0,13% | ||
| Магний | 0,50% | ||
| Марганец | 0,10% | ||
| Аминокислоты 1,04% | L-глютамин | 0,54% | |
| L-аригинин | 0,50% | ||
Результаты количества NK клеток периферической крови показаны в таблице 4b.
Таблица 4b
| Пациенты 8 |
День 0 | День 45 | Среднее снижение % |
| NK% количество (среднее) |
NK% количество (среднее) |
||
| 18,97 | 14,55 | 23,29 |
Средний процент NK клеток периферической крови среди всех клеток периферической крови составил 18,97 в день 0 до лечения и 14,55 в день 45 после начала лечения. Указанное различие было статистически значимым (p значение <0,017).
Пять из восьми женщин, получавших указанную пероральную композицию, родили здоровых детей, 2 в настоящее время беременны больше 25 недель и у 1 был аборт.
Claims (13)
1. Способ лечения повторных спонтанных абортов или повторных неудачных имплантаций у пациенток-женщин, имеющих 12% или более NK клеток периферической крови среди всех клеток периферической крови пациентки, и/или где цитотоксичность NK клеток периферической крови пациентки по меньшей мере на 10% выше, чем средняя цитотоксичность контрольной популяции здоровых женщин репродуктивного возраста при отсутствии репродуктивных неудач, и которые родили по меньшей мере одного ребенка, где способ включает введение композиции, которая содержит по меньшей мере одну насыщенную, по меньшей мере одну мононенасыщенную и по меньшей мере одну полиненасыщенную длинноцепочечную жирную кислоту или ее эфиры, где по меньшей мере 50 мас.% активных ингредиентов в композиции, рассчитанные как жирные кислоты, представляют собой длинноцепочечные жирные кислоты и их сложные эфиры, при этом композицию вводят перорально в течение от 15 до 70 дней, и где общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,03 г/кг массы тела до 1 г/кг массы тела, рассчитанное как жирные кислоты.
2. Способ по п. 1, где общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,10 г/кг массы тела до 0,70 г/кг массы тела, рассчитанное как жирные кислоты.
3. Способ по п. 2, где общее количество жирных кислот или их сложных эфиров, вводимое в сутки, составляет от 0,20 г/кг массы тела до 0,50 г/кг массы тела, рассчитанное как жирные кислоты.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где композицию вводят в течение 30-60 дней.
5. Способ по любому из пп. 1-4, где композицию вводят в течение 40-50 дней.
6. Способ по любому из пп. 1-5, где жирные кислоты выбраны из группы, состоящей из длинноцепочечных жирных кислот, среднецепочечных жирных кислот, короткоцепочечных жирных кислот и их смесей.
7. Способ по п. 6, где длинноцепочечные жирные кислоты выбраны из группы, состоящей из пальмитиновой, стеариновой, миристиновой, арахиновой, олеиновой, докозагексаеновой, эйкозапентаеновой, пальмитоолеиновой, миристолеиловой, сапиеновой, линоленовой, α-линоленовой, γ-линоленовой кислоты и их смесей.
8. Способ по п. 6, где среднецепочечные жирные кислоты выбраны из группы, состоящей из лауриловой, каприновой, каприловой кислоты и их смесей.
9. Способ по любому из пп. 1-8, где по меньшей мере 65 мас.% активных ингредиентов в композиции, рассчитанные как жирные кислоты, представляют собой длинноцепочечные жирные кислоты и их сложные эфиры.
10. Способ по п. 9, где по меньшей мере 97 мас.% активных ингредиентов в композиции, рассчитанные как жирные кислоты, представляют собой длинноцепочечные жирные кислоты и их сложные эфиры.
11. Способ по любому из пп. 1-10, где сложные эфиры жирных кислот выбраны из группы, состоящей из моноглицеридов, диглицеридов, триглицеридов, фосфолипидов, сфинголипидов, сахаролипидов и их смесей.
12. Способ по п. 11, где сложные эфиры жирных кислот выбраны из группы, состоящей из моноглицеридов, диглицеридов, триглицеридов и их смесей.
13. Способ по любому из пп. 1-12, где композиция дополнительно содержит один или более витаминов, ионов металлов, аминокислот или их смесей.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GR20160100572 | 2016-11-07 | ||
| GR20160100572A GR1009657B (el) | 2016-11-07 | 2016-11-07 | Συνθεσεις για χορηγηση απο το στομα με ανοσοτροποποιητικη δραση στα φυσικα φονικα κυτταρα |
| PCT/GR2017/000064 WO2018083508A1 (en) | 2016-11-07 | 2017-11-03 | Oral compositions with immunomodulating effect on natural killer cells |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019117597A RU2019117597A (ru) | 2020-12-07 |
| RU2019117597A3 RU2019117597A3 (ru) | 2021-03-05 |
| RU2776373C2 true RU2776373C2 (ru) | 2022-07-19 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014136677A (ja) * | 2013-01-15 | 2014-07-28 | Univ Of Tokyo | 早産治療剤 |
| WO2016113679A1 (en) * | 2015-01-13 | 2016-07-21 | Lo.Li.Pharma S.R.L. | Lipoic acid for treating or preventing threatened miscarriage or preterm delivery |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014136677A (ja) * | 2013-01-15 | 2014-07-28 | Univ Of Tokyo | 早産治療剤 |
| WO2016113679A1 (en) * | 2015-01-13 | 2016-07-21 | Lo.Li.Pharma S.R.L. | Lipoic acid for treating or preventing threatened miscarriage or preterm delivery |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BRAVERMAN J. "Intralipid Therapy for Reccurent Pregnancy Loss-Controversies and Future Directions 34 th Annual Meeting of the American Society for Reproductive Immunology June 2-5, 2014" 02.06.2014[онлайн], [найдено 02.03.2021], Найдено из Интернет: URL: https://www.preventmiscarriage.com/images/intralipid-therapy-for-recurrent-pregnancy-loss-v19.pptx. ROUMEN G. ROUSSEV et al. Natural Killer Cell Functional Activity Suppression By Intravenous Immunoglobulin, Intralipid and Soluble Human Leukocyte Antigen-G. American Journal of Reproductive Immunology, 2007, N. 57, pp. 262-269, [онлайн], [найдено 02.03.2021], Найдено из Интернет: URL:;https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1111/j.1600-0897.2007.00473.x. SACHIKO JUMAN et al. Effects of Long-Term Oral Administration of Arachidonic Acid and Docosahexaenoic Acid on the Immune Functions of Young Rats. Nutrients, 2013, V. 5, pp. 1949-1961 [онлайн], [найдено 02.03.2021], doi:10.3390/nu5061949. YAMASHITA N. et al. Inhibition of natural kil * |
| МУРАШКО А.В. и др. Омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты во время беременности: цифры и факты. Фарматека, 2015, N. 12;[онлайн], [найдено 04.03.2021]. Найдено из Интернет: URL: https://pharmateca.ru/ru/archive/article/31729.. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Fatemi et al. | Implantation in assisted reproduction: a look at endometrial receptivity | |
| Qian et al. | Distinct pattern of Th17/Treg cells in pregnant women with a history of unexplained recurrent spontaneous abortion | |
| Chamley et al. | where is the maternofetal interface? | |
| Wedekind et al. | Altered cytokine network in gestational diabetes mellitus affects maternal insulin and placental–fetal development | |
| Gao et al. | Increased CD56 (+) NK cells and enhanced Th1 responses in human unexplained recurrent spontaneous abortion | |
| Colazo et al. | Reproductive performance of dairy cows is influenced by prepartum feed restriction and dietary fatty acid source | |
| Bezemer et al. | Decidual macrophages and Hofbauer cells in fetal growth restriction | |
| Hashem et al. | Effect of vitamin A or C on physiological and reproductive response of Rahmani ewes during subtropical summer breeding season | |
| Bansal et al. | The basis and value of currently used immunomodulatory therapies in recurrent miscarriage | |
| Liu et al. | Natural killer, natural killer T, helper and cytotoxic T cells in the decidua from recurrent spontaneous abortion with normal and abnormal chromosome karyotypes | |
| Akerele et al. | A diet enriched in longer chain omega-3 fatty acids reduced placental inflammatory cytokines and improved fetal sustainability of C57BL/6 mice | |
| Toth et al. | NK cell subsets in idiopathic recurrent miscarriage and renal transplant patients | |
| RU2776373C2 (ru) | Пероральные композиции с иммуномодулирующим эффектом в отношении естественных клеток-киллеров | |
| US12023314B2 (en) | Oral composition with immunomodulating effect on natural killer cells | |
| Wang et al. | Improvement of fertility with adoptive CD25+ natural killer cell transfer in subfertile non-obese diabetic mice | |
| Danek et al. | Changes in domestic animals after endotoxin administration a review | |
| RU2160602C1 (ru) | Способ лечения синдрома задержки внутриутробного развития плода | |
| Hadfield | Characterization of the immune response to lipopolysaccharide in early pregnant ewes as a model to study bacterial infection induced embryonic loss | |
| Brodzki et al. | The influence of probiotic administration on selected leukocyte subpopulations and the serum amyloid A concentration in the peripheral blood of dairy cows during different lactation periods | |
| Shelrud | Mechanisms Behind the Luteoprotective Effects of Fish Meal Supplementation in Bovine: Cytokine Sensitivity and Luteal Blood Flow | |
| Miedema | The role of regulatory T-cells (Tregs) in pregnancy, pre-eclampsia and beyond | |
| Groome | The role of macrophages in vascular adaptation to pregnancy in mice | |
| Ehrentraut | Unraveling the potential of Human Chorionic Gonadotropin as an approach for the treatment of Multiple Sclerosis using a mouse model | |
| Akyol | Changing of alcohol-induced oxidative stress and cytokine levels in alcoholic pregnant rats and their offspring | |
| Ritchie | Consumption of Cannabis Oil During Pregnancy Disrupts Implantation Site Remodelling and Causes Fetal Abnormalities at Term |