RU2761617C2 - Complex of myelin lipids of central and peripheral nervous system of animals for treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating disorders and methods for its application - Google Patents
Complex of myelin lipids of central and peripheral nervous system of animals for treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating disorders and methods for its application Download PDFInfo
- Publication number
- RU2761617C2 RU2761617C2 RU2019131259A RU2019131259A RU2761617C2 RU 2761617 C2 RU2761617 C2 RU 2761617C2 RU 2019131259 A RU2019131259 A RU 2019131259A RU 2019131259 A RU2019131259 A RU 2019131259A RU 2761617 C2 RU2761617 C2 RU 2761617C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- neurodegenerative
- nervous system
- complex
- animals
- demyelinating
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/30—Nerves; Brain; Eyes; Corneal cells; Cerebrospinal fluid; Neuronal stem cells; Neuronal precursor cells; Glial cells; Oligodendrocytes; Schwann cells; Astroglia; Astrocytes; Choroid plexus; Spinal cord tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/32—Bones; Osteocytes; Osteoblasts; Tendons; Tenocytes; Teeth; Odontoblasts; Cartilage; Chondrocytes; Synovial membrane
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
Abstract
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕTECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к неврологии, и раскрывает средство для лечения или профилактики нейродегенеративных демиелинизирующих процессов центральной и периферической нервной систем, представляющее собой комплекс липидов миелина нервной ткани животных, состоящий из липидных метаболитов, холестерола, фосфолипидов, факторов роста и дифференцировки, незаменимых жирных кислот. Раскрыты фармацевтическая композиция и способ применения заявленной композиции для лечения и профилактики нейродегенеративных демиелинизирующих процессов. Заявленный комплекс может быть использован перорально для лечения и профилактики рассеянного склероза (патология центральной нервной системы (ЦНС)), синдрома Гийена-Барре, лепрозной нейропатии (патологии периферической нервной системы (ГШС)). Кроме того комплекс может быть использован и при таких заболеваниях, как различные типы склероза, и других нейродегенеративных расстройствах, связанных с «демиелинизацией», общим последствием которых является потеря липидов в оболочке аксонов нейронов с нарушением процесса проведения электрических сигналов.The present invention relates to medicine, in particular to neurology, and discloses an agent for the treatment or prevention of neurodegenerative demyelinating processes of the central and peripheral nervous systems, which is a complex of myelin lipids of the nervous tissue of animals, consisting of lipid metabolites, cholesterol, phospholipids, growth and differentiation factors, essential fatty acids. Disclosed are a pharmaceutical composition and a method of using the claimed composition for the treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating processes. The claimed complex can be used orally for the treatment and prevention of multiple sclerosis (pathology of the central nervous system (CNS)), Guillain-Barré syndrome, leprosy neuropathy (pathology of the peripheral nervous system (GHS)). In addition, the complex can be used for diseases such as various types of sclerosis and other neurodegenerative disorders associated with "demyelination", the general consequence of which is the loss of lipids in the sheath of neuronal axons with impaired conduction of electrical signals.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИLEVEL OF TECHNOLOGY
На сегодняшний день эффективного патогенетически обоснованного способа лечения и профилактики нейродистрофических демиелинизирующих заболеваний не существует. Применяемые в настоящее время средства в процессе лечения не устраняют причину данных заболеваний и обладают многими неблагоприятными побочными эффектами, вследствие чего эти заболевания приобретают длительное хроническое течение, и у значительной части больных развивается инвалидность.To date, there is no effective pathogenetically substantiated method of treatment and prevention of neurodystrophic demyelinating diseases. The currently used drugs in the course of treatment do not eliminate the cause of these diseases and have many unfavorable side effects, as a result of which these diseases acquire a long chronic course, and a significant part of patients develop disability.
Так, современные терапевтические средства для лечения демиелинизирующих состояний (интерферон, глатирамера ацетат, финголимод) эффективны лишь частично. Полезность продолжительных лечебных курсов является неопределенной и, как сообщается, часто сопровождаются летальными побочными эффектами. Например, это относится к моноклональным антителам, таким как Tysabri.Thus, modern therapeutic agents for the treatment of demyelinating conditions (interferon, glatiramer acetate, fingolimod) are only partially effective. The usefulness of long-term treatment courses is uncertain and is reported to be often accompanied by fatal side effects. For example, this applies to monoclonal antibodies such as Tysabri.
Современная химиотерапия и иммуносупрессивная терапия характеризуются использованием цитотоксических средств или иммунодепрессантов. Несмотря на свою эффективность, эти средства являются неспецифическими и, особенно в случае длительных курсов, токсичными для нормальных и быстро делящихся клеток. Более того их использование может быть ограничено присущими им неблагоприятными свойствами, среди которых острая миелосупрессия, нефротоксичность, кардиотоксичность, нейротоксичность, токсическое действие на желудочно-кишечный тракт, мочевой пузырь и легкие, которые могут привести к ухудшению состояния пациента на длительный срок.Modern chemotherapy and immunosuppressive therapy are characterized by the use of cytotoxic agents or immunosuppressants. Despite their effectiveness, these drugs are nonspecific and, especially in the case of long courses, toxic to normal and rapidly dividing cells. Moreover, their use can be limited by their inherent disadvantageous properties, including acute myelosuppression, nephrotoxicity, cardiotoxicity, neurotoxicity, toxic effects on the gastrointestinal tract, bladder and lungs, which can lead to a deterioration in the patient's condition for a long time.
Известна стимулирующая роль липидов в регенеративных процессах нервной ткани. В живых организмах липиды выполняют энергетическую и структурную функции: в жировых клетках сохраняется энергетический запас организма, а в тканях липиды являются основным компонентом клеточных мембран. Нервная ткань характеризуется высоким содержанием липидов, участвующих в функционировании клеточных мембран, которые не синтезируются организмом, и их потребность обеспечивается диетой. Развитие нервных клеток генетически запрограммировано; поэтому нервные клетки нуждаются в обеспечении адекватной поставки липидов во время их пролиферации и дифференцировки.The stimulating role of lipids in the regenerative processes of the nervous tissue is known. In living organisms, lipids perform energy and structural functions: in fat cells, the body's energy supply is preserved, and in tissues, lipids are the main component of cell membranes. Nervous tissue is characterized by a high content of lipids involved in the functioning of cell membranes, which are not synthesized by the body, and their need is provided by the diet. The development of nerve cells is genetically programmed; therefore, nerve cells need to ensure an adequate supply of lipids during their proliferation and differentiation.
Миелин представляет собой жировой слой, который окружает аксоны многих нейронов и который образован рядом спиральных складок плазматической мембраны глиальных клеток (клеток Шванна). Липиды миелиновой мембраны играют важную роль мишеней в развитии нейродегенеративных и восстановительных процессов. Особенно важно обеспечить клетки липидами при нейродегенеративных состояниях, когда потребность в них возрастает для регенерации, особенно миелина. Химическая гетерогенность как липидного, так и белкового состава миелина предполагает, что олигодендроциты (глия) и Шванновские клетки в разных отделах центральной и периферической нервной системы способны формировать различные молекулярные типы миелина, отличающиеся не только молекулярной архитектоникой, но и функциональными и иммунохимическими свойствами. Это подтверждают и патологические (демиелинизирующие) процессы, характерные только для центральной нервной системы или только для периферической нервной системы. Так, при рассеянном склерозе иммунная система организма атакует нервы центральной нервной системы, разрушая миелин головного и спинного мозга, в то время как при синдроме Гийена-Барре и лепрозной нейропатии иммунная атака направлена на миелиновую (клетки Шванна) оболочку периферических нервов, не затрагивая мозг. Следовательно, при разработке патогенетически обоснованных лечебных средств нервной системы необходимо учитывать специфичность ткани-мишени.Myelin is a fatty layer that surrounds the axons of many neurons and is formed by a series of spiral folds in the plasma membrane of glial cells (Schwann cells). Myelin membrane lipids play an important role as targets in the development of neurodegenerative and regenerative processes. It is especially important to provide cells with lipids in neurodegenerative conditions when the need for them increases for regeneration, especially myelin. The chemical heterogeneity of both lipid and protein composition of myelin suggests that oligodendrocytes (glia) and Schwann cells in different parts of the central and peripheral nervous system are able to form various molecular types of myelin, differing not only in molecular architectonics, but also in functional and immunochemical properties. This is also confirmed by pathological (demyelinating) processes characteristic only for the central nervous system or only for the peripheral nervous system. So, in multiple sclerosis, the body's immune system attacks the nerves of the central nervous system, destroying the myelin of the brain and spinal cord, while in Guillain-Barré syndrome and leprosy neuropathy, the immune attack is directed at the myelin (Schwann cells) sheath of peripheral nerves without affecting the brain. Therefore, when developing pathogenetically grounded therapeutic agents for the nervous system, it is necessary to take into account the specificity of the target tissue.
Демиелинизирующие нейродистрофические процессы затрагивают многие компоненты миелина: фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитол, фосфатидилглицерол, фосфатидилсерин, фосфатидную кислоту, сфингомиелин, сульфатид, цереброзиды, церамид и лизофосфатидилхолин. Например, мишенью для аутоантител при рассеянном склерозе является фосфатная группа у фосфатидилсерина и окисленные производные фосфатидилхолина. Установлено, что пероральный прием указанных липидов смягчает экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит, подавляя активацию и индуцируя апоптоз аутореактивных Т-клеток. Следовательно, прием с пищей комплекса липидов, близких по характеристике миелиновым липидам клеток центральной или периферической нервной систем, является патогенетически обоснованным воздействием на процессы регенерации нервных тканей. Структурные особенности миелина и клиническое разнообразие демиелинизирующих процессов в центральной и периферической нервной системах обусловливают выбор действующих компонентов композиции. Так, заявленная фармацевтическая композиция для лечения демиелинизирующих состояний центральной нервной системы (например, рассеянный склероз) содержит липидный комплекс миелина центральной нервной системы (спинного мозга) животных. В то же время для лечения демиелинизирующих состояний периферической нервной системы (например, синдром Гийена-Барре, лепрозная нейропатия) в состав фармацевтической композиции входит липидный комплекс миелина периферической нервной системы.Demyelinating neurodystrophic processes affect many components of myelin: phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylinositol, phosphatidylglycerol, phosphatidylserine, phosphatidic acid, sphingomyelin, sulfatide, cerebrosides, ceramide and lysophosphatidylchol. For example, the target for autoantibodies in multiple sclerosis is the phosphate group on phosphatidylserine and oxidized derivatives of phosphatidylcholine. It was found that oral administration of these lipids alleviates experimental autoimmune encephalomyelitis by suppressing the activation and inducing apoptosis of autoreactive T cells. Consequently, the intake of a complex of lipids with food, which are similar in characteristics to the myelin lipids of the cells of the central or peripheral nervous systems, is a pathogenetically substantiated effect on the processes of regeneration of nerve tissues. The structural features of myelin and the clinical diversity of demyelinating processes in the central and peripheral nervous systems determine the choice of the active components of the composition. Thus, the claimed pharmaceutical composition for the treatment of demyelinating conditions of the central nervous system (for example, multiple sclerosis) contains a lipid complex of myelin of the central nervous system (spinal cord) of animals. At the same time, for the treatment of demyelinating conditions of the peripheral nervous system (for example, Guillain-Barré syndrome, leprosy neuropathy), a lipid complex of myelin of the peripheral nervous system is included in the pharmaceutical composition.
В литературе отсутствуют сведения о наличии лечебных и/или профилактических свойств у липидного комплекса миелина центральной и периферической нервной системы животных.There is no information in the literature on the presence of therapeutic and / or prophylactic properties in the lipid complex of myelin of the central and peripheral nervous systems of animals.
Без намерения быть ограниченными какой-либо теорией, изобретатели полагают, что заявленная композиция подавляет активность аутореактивных Т и В клеток, вызванное ими воспаление и удовлетворяет повышенную потребность организма в липидах в процессе регенерации нервных тканей.Without intending to be limited by any theory, the inventors believe that the claimed composition suppresses the activity of autoreactive T and B cells, the inflammation caused by them and satisfies the increased need of the body for lipids during the regeneration of nerve tissues.
Известна стимулирующая роль полиненасыщенных жирных кислот - PUFA, а именно омега-3 и/или омега-6 жирных кислот в сочетании с уридином или солями холина в отношении увеличения синтеза синаптических белков в синаптических мембранах нервной клеткой при возрастном расстройстве памяти (RU 2436571). Полиненасыщенные жирные кислоты предложено использовать для задержки начала деменции или уменьшения ее тяжести (RU 2444356). В WO 2012/131493 раскрыты композиции, содержащие длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты (PUFA), иные омега-3 PUFA и мононенасыщенные жирные кислоты. Указанные композиции предназначены для лечения неврологических нарушений. RU 2513995 описывает применение производных полиненасыщенных жирных кислот, в частности, 2-гидроксипроизводных, для лечения, помимо прочего, неврологических или нейродегенеративных расстройств. В RU 2507742 раскрыто применение композиций, содержащих длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты, соединения, высвобождающие монооксид азота, и среднецепочечные триглицериды, для усиления когнитивной функции, уменьшения или предупреждения снижения социального поведения, уменьшения или предупреждения связанных с возрастом изменений поведения, улучшения обучаемости, поддержания оптимальной функции головного мозга, облегчения обучения и запоминания, уменьшения потери памяти, замедления старения головного мозга, предупреждения или лечения инсультов и предупреждения или лечения деменции. Таким образом, качественный состав упомянутых выше средств ограничен, в основном, полиненасыщенными жирными кислотами, что снижает лечебную ценность и, соответственно, ограничивает широту применения этих средств. При этом фармакологическая активность соединений PUFA невысока.Known stimulating role of polyunsaturated fatty acids - PUFA, namely omega-3 and / or omega-6 fatty acids in combination with uridine or choline salts in relation to increasing the synthesis of synaptic proteins in synaptic membranes by a nerve cell with age-related memory disorder (RU 2436571). Polyunsaturated fatty acids have been proposed to be used to delay the onset of dementia or reduce its severity (RU 2444356). WO 2012/131493 discloses compositions containing long chain polyunsaturated fatty acids (PUFAs), other omega-3 PUFAs, and monounsaturated fatty acids. These compositions are intended for the treatment of neurological disorders. RU 2513995 describes the use of derivatives of polyunsaturated fatty acids, in particular 2-hydroxy derivatives, for the treatment, inter alia, of neurological or neurodegenerative disorders. RU 2507742 discloses the use of compositions containing long-chain polyunsaturated fatty acids, nitrogen monoxide releasing compounds, and medium-chain triglycerides to enhance cognitive function, reduce or prevent a decrease in social behavior, reduce or prevent age-related changes in behavior, improve learning ability, and maintain optimal function. brain, facilitate learning and memorization, reduce memory loss, slow down the aging of the brain, prevent or treat strokes, and prevent or treat dementia. Thus, the qualitative composition of the above agents is limited mainly by polyunsaturated fatty acids, which reduces the medicinal value and, accordingly, limits the breadth of application of these agents. At the same time, the pharmacological activity of PUFA compounds is low.
С учетом изложенного выше в данной области техники существует потребность в разработке новых эффективных базовых лечебных средств, лишенных недостатков используемых в настоящее время лекарственных средств, в частности, не вызывающих нежелательного побочного действия и не имеющих ограничений в использовании.In view of the above, there is a need in the art for the development of new effective basic therapeutic agents that do not have the drawbacks of currently used drugs, in particular, do not cause undesirable side effects and do not have restrictions in use.
РАСКРЫТИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯDISCLOSURE OF THE INVENTION
Задача, решаемая изобретением, состоит в создании нового патогенетически обоснованного средства для лечения и профилактики нейродегенеративных демиелинизирующих состояний центральной и периферической нервной системы, лишенного нежелательных побочных действий и ограничений в использовании.The problem solved by the invention is to create a new pathogenetically substantiated agent for the treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating conditions of the central and peripheral nervous system, devoid of unwanted side effects and restrictions in use.
В своем первом аспекте предложенное изобретение относится к средству для лечения или профилактики нейродегенеративных демиелинизирующих повреждений нервной ткани, представляющего собой комплекс липидов миелина животных, содержащий липидные метаболиты, холестерол, фосфолипиды, факторы роста и дифференцировки нервной ткани, незаменимые жирные кислоты. При этом в одном из предпочтительных воплощений комплекс липидов миелина животных происходит из центральной нервной системы. В другом предпочтительном воплощении комплекс липидов миелина животных происходит из периферической нервной системы.In its first aspect, the proposed invention relates to an agent for the treatment or prevention of neurodegenerative demyelinating lesions of nervous tissue, which is a complex of animal myelin lipids containing lipid metabolites, cholesterol, phospholipids, growth factors and differentiation of nervous tissue, essential fatty acids. However, in one preferred embodiment, the animal myelin lipid complex is derived from the central nervous system. In another preferred embodiment, the animal myelin lipid complex is derived from the peripheral nervous system.
Заявленное средство обладает способностью подавлять демиелинизирующую воспалительную реакцию и, являясь источником липидных метаболитов, стимулирует процесс регенерации миелиновой оболочки клеток.The claimed agent has the ability to suppress the demyelinating inflammatory response and, being a source of lipid metabolites, stimulates the process of regeneration of the myelin sheath of cells.
В следующем аспекте заявленное изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики нейродегенеративных демиелинизирующих повреждений нервной ткани, содержащей терапевтически эффективное количество комплекса липидов миелина животных, включающего липидные метаболиты, холестерол, фосфолипиды, факторы роста и дифференцировки нервной ткани, незаменимые жирные кислоты, и фармацевтически приемлемый носитель.In a further aspect, the claimed invention relates to a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of neurodegenerative demyelinating lesions of nervous tissue, comprising a therapeutically effective amount of an animal myelin lipid complex comprising lipid metabolites, cholesterol, phospholipids, nerve tissue growth and differentiation factors, essential fatty acids, and a pharmaceutically acceptable carrier.
В одном из предпочтительных воплощений фармацевтической композиции комплекс липидов миелина происходит из центральной нервной системы животных. В другом предпочтительном воплощении фармацевтической композиции комплекс липидов миелина происходит из периферической нервной системы животных.In one preferred embodiment of the pharmaceutical composition, the myelin lipid complex is derived from the central nervous system of animals. In another preferred embodiment of the pharmaceutical composition, the myelin lipid complex is derived from the peripheral nervous system of animals.
В следующем предпочтительном воплощении фармацевтической композиции фармацевтически приемлемый носитель содержит жировую основу. В более предпочтительном воплощении жировая основа включает топленый курдючный жир.In a further preferred embodiment of the pharmaceutical composition, the pharmaceutically acceptable carrier comprises a fat base. In a more preferred embodiment, the fat base comprises rendered fat tail.
В еще одном предпочтительном воплощении фармацевтическая композиция содержит:In another preferred embodiment, the pharmaceutical composition comprises:
а) комплекс липидов миелина центральной нервной системы животных и топленый курдючный жир в массовом соотношении 1:1, илиa) a complex of myelin lipids of the central nervous system of animals and melted fat tail fat in a mass ratio of 1: 1, or
б) комплекс липидов миелина периферической нервной системы животных и топленый курдючный жир в массовом соотношении 1:1.b) a complex of myelin lipids of the peripheral nervous system of animals and melted fat tail fat in a mass ratio of 1: 1.
В следующем предпочтительном воплощении фармацевтическая композиция выполнена в виде жировой массы в капсулах для перорального применения.In a further preferred embodiment, the pharmaceutical composition is in the form of a fat mass in capsules for oral administration.
В еще одном аспекте заявленное изобретение относится к способу лечения острого демиелинизирующего состояния у пациента, нуждающегося в этом, причем способ включает пероральное введение пациенту предложенной в настоящем изобретении фармацевтической композиции в количестве 250-500 мг в расчете на комплекс липидов миелина нервной системы животных 4 раза в день в течение 6 месяцев, необязательно в комбинации с дополнительным средством для лечения острого демиелинизирующего состояния. В качестве указанного дополнительного средства могут быть использованы, в частности, стероидные противовоспалительные средства (как, например, преднизолон, метилпреднизолон и т.д.), нестероидные противовоспалительные средства (как, например, ацетилсалициловая кислота и т.д.).In another aspect, the claimed invention relates to a method for treating an acute demyelinating condition in a patient in need thereof, the method comprising orally administering to the patient a pharmaceutical composition of the present invention in an amount of 250-500 mg based on the myelin lipid complex of the nervous system of animals 4 times in a day for 6 months, optionally in combination with an adjunct to treat an acute demyelinating condition. As the specified additional agent can be used, in particular, steroidal anti-inflammatory drugs (such as prednisolone, methylprednisolone, etc.), non-steroidal anti-inflammatory drugs (such as acetylsalicylic acid, etc.).
В одном из предпочтительных воплощений заявленный способ предназначен для лечения острого демиелинизирующего состояния центральной нервной системы, причем пациенту вводят фармацевтическую композицию, содержащую комплекс липидов миелина центральной нервной системы животных. В более предпочтительном воплощении острое демиелинизирующее состояние центральной нервной системы представляет собой рассеянный склероз.In one preferred embodiment, the claimed method is intended for the treatment of an acute demyelinating condition of the central nervous system, wherein the patient is administered a pharmaceutical composition containing a complex of lipids of the myelin of the central nervous system of animals. In a more preferred embodiment, the acute demyelinating condition of the central nervous system is multiple sclerosis.
В другом предпочтительном воплощении заявленный способ предназначен для лечения острого демиелинизирующего состояния периферической нервной системы, причем пациенту вводят фармацевтическую композицию, содержащую комплекс липидов миелина периферической нервной системы животных. В более предпочтительном воплощении острое демиелинизирующее состояние периферической нервной системы представляет собой синдром Гийена-Барре или лепрозную нейропатию.In another preferred embodiment, the claimed method is intended for the treatment of an acute demyelinating condition of the peripheral nervous system, wherein the patient is administered a pharmaceutical composition comprising a myelin lipid complex of the peripheral nervous system of animals. In a more preferred embodiment, the acute demyelinating condition of the peripheral nervous system is Guillain-Barré syndrome or leprosy neuropathy.
В еще одном из аспектов заявленное изобретение касается способа профилактики нейродегенеративных обострений у пациента, нуждающегося в этом, причем способ включает пероральное введение пациенту заявленной фармацевтической композиции в количестве 250-500 мг в расчете на комплекс липидов миелина нервной системы животных 4 раза в день в течение 3-12 месяцев.In another aspect, the claimed invention relates to a method for the prevention of neurodegenerative exacerbations in a patient in need thereof, the method comprising oral administration of the claimed pharmaceutical composition to the patient in an amount of 250-500 mg based on the complex of lipids of the myelin of the nervous system of animals 4 times a day for 3 -12 months.
В одном из предпочтительных воплощений заявленный способ предназначен для профилактики нейродегенеративных обострений центральной нервной системы, причем пациенту вводят фармацевтическую композицию, содержащую комплекс липидов миелина центральной нервной системы животных. В более предпочтительном воплощении обострение нейродегенеративных заболеваний центральной нервной системы представляет собой рассеянный склероз.In one preferred embodiment, the claimed method is intended for the prevention of neurodegenerative exacerbations of the central nervous system, wherein the patient is administered a pharmaceutical composition containing a complex of myelin lipids in the central nervous system of animals. In a more preferred embodiment, the exacerbation of neurodegenerative diseases of the central nervous system is multiple sclerosis.
В другом предпочтительном воплощении заявленный способ предназначен для профилактики нейродегенеративных обострений периферической нервной системы, причем пациенту вводят фармацевтическую композицию, содержащую комплекс липидов миелина периферической нервной системы животных. В более предпочтительном воплощении обострение нейродегенеративных заболеваний периферической нервной системы представляет собой синдром Гийена-Барре или лепрозную нейропатию.In another preferred embodiment, the claimed method is intended for the prevention of neurodegenerative exacerbations of the peripheral nervous system, wherein the patient is administered a pharmaceutical composition containing the myelin lipid complex of the peripheral nervous system of animals. In a more preferred embodiment, the exacerbation of neurodegenerative diseases of the peripheral nervous system is Guillain-Barré syndrome or leprosy neuropathy.
Техническим результатом является новое, патогенетически обоснованное лечебное средство, обладающее восстанавливающим действием на демиелинизирующие повреждения нервной ткани и обеспечивающее профилактику обострений, без нежелательных побочных реакций и ограничений в использовании.The technical result is a new, pathogenetically grounded therapeutic agent that has a regenerating effect on demyelinating damage to the nervous tissue and provides prevention of exacerbations, without unwanted side reactions and restrictions on use.
ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯCARRYING OUT THE INVENTION
Средство для лечения или профилактики нейродегенеративных демиелинизирующих процессов центральной и периферической нервной ткани согласно изобретению представляет собой комплекс липидов миелина нервной ткани животных, состоящий из липидных метаболитов, холестерола, фосфолипидов, факторов роста и дифференцировки, незаменимых жирных кислот. Для получения указанного комплекса могут быть использованы как нервные ткани ЦНС, так и нервные ткани ПНС. В качестве источника нервных тканей может служить, например, крупный и мелкий рогатый скот, свиньи. Биологический материал может быть получен от мясоперерабатывающих предприятий.The agent for the treatment or prevention of neurodegenerative demyelinating processes of the central and peripheral nervous tissue according to the invention is a complex of myelin lipids of the nervous tissue of animals, consisting of lipid metabolites, cholesterol, phospholipids, growth and differentiation factors, essential fatty acids. To obtain the specified complex, both the nervous tissues of the central nervous system and the nervous tissues of the PNS can be used. As a source of nerve tissue can serve, for example, cattle and small ruminants, pigs. Biological material can be obtained from meat processing plants.
Способы выделения общей липидной фракции хорошо известны специалистам в данной области техники и включают, в частности, экстракцию органическими растворителями. Так, например, для выделения комплекса липидов может быть использована смесь хлороформ-метанол (J. Folch, М. Lees G.H. Sloane Stanley, A Simple Method for the Isolation and Purification of Total Lipides from Animal Tissues, J. Biol. Chem., 1957, Vol. 226, p. 497-509). Также могут быть использованы такие растворители, как гексан, смесь гексан-дихлорметан (RU 2505592), а также ацетон, изопропанол и трет-бутанол (RU 2236441). Предпочтительным способом выделения комплекса липидов миелина нервной ткани животных является метод сверхкритической жидкостной экстракции, в частности, с использованием CO2. При необходимости при использовании сверхкритического диоксида углерода в качестве растворителя к нему добавляют этанол (Роберте С. Динамическое программирование в процессах химической технологии и методы управления. М.: Мир, 1965, с. 496).Methods for isolating the total lipid fraction are well known to those skilled in the art and include, in particular, extraction with organic solvents. For example, a chloroform-methanol mixture can be used to isolate a complex of lipids (J. Folch, M. Lees GH Sloane Stanley, A Simple Method for the Isolation and Purification of Total Lipides from Animal Tissues, J. Biol. Chem., 1957 , Vol. 226, p. 497-509). Solvents such as hexane, a mixture of hexane-dichloromethane (RU 2505592), as well as acetone, isopropanol and tert-butanol (RU 2236441) can also be used. A preferred method for isolating the myelin lipid complex of animal nervous tissue is supercritical fluid extraction, in particular using CO 2 . If necessary, when using supercritical carbon dioxide as a solvent, ethanol is added to it (Roberts S. Dynamic programming in the processes of chemical technology and control methods. M .: Mir, 1965, p. 496).
В составе фармацевтической композиции активный ингредиент - комплекс липидов миелина нервной ткани животных - находится в смеси с фармацевтически приемлемыми носителями. Учитывая липофильный характер активного ингредиента, в качестве носителя могут быть использованы различные липофильные соединения, такие как, например, жиры и масла, которые могут быть животного, растительного или синтетического происхождения. Примерами таких носителей являются арахисовое масло, соевое масло, оливковое масло, подсолнечное масло, масло из печени рыб, масло, полученное из других морских животных или растений т.д. В качестве предпочтительного носителя в составе фармацевтической композиции может быть использован курдючный жир.In the composition of the pharmaceutical composition, the active ingredient, the myelin lipid complex of the nervous tissue of animals, is mixed with pharmaceutically acceptable carriers. Given the lipophilic nature of the active ingredient, various lipophilic compounds such as, for example, fats and oils, which can be of animal, vegetable or synthetic origin, can be used as the carrier. Examples of such carriers are peanut oil, soybean oil, olive oil, sunflower oil, fish liver oil, oil derived from other marine animals or plants, etc. As a preferred carrier in the pharmaceutical composition, fat tail fat can be used.
Фармацевтическая композиция может быть составлена в различные лекарственные формы, включая капсулы, мягкие желатиновые капсулы, твердые желатиновые капсулы, эмульсии типа вода-в-масле или масло-в-воде, пасту в тубе.The pharmaceutical composition can be formulated in various dosage forms, including capsules, soft gelatin capsules, hard gelatin capsules, water-in-oil or oil-in-water emulsions, paste in a tube.
Фармацевтическая композиция, помимо указанных фармацевтически приемлемых носителей, может дополнительно содержать фармацевтически приемлемые растворители, наполнители и другие вспомогательные вещества, хорошо известные специалистам в данной области техники. В частности, фармацевтическая композиция при необходимости может содержать различные неиногенные поверхностно-активные вещества (например, ТВИН-80) или ионогенные поверхностно-активные вещества (например, полиглицерин стеарат), как описано, например, в RU 2392949.The pharmaceutical composition, in addition to these pharmaceutically acceptable carriers, may additionally contain pharmaceutically acceptable solvents, excipients and other excipients well known to those skilled in the art. In particular, the pharmaceutical composition, if necessary, may contain various non-ionic surfactants (for example, TWIN-80) or ionic surfactants (for example, polyglycerol stearate), as described, for example, in RU 2392949.
Предпочтительная лекарственная форма, в которую может быть составлена композиция настоящего изобретения, представляет собой капсулу для перорального применения, содержащую жировую массу. Фармацевтические композиции настоящего изобретения могут вводиться перорально, а также через желудочный зонд.A preferred dosage form into which the composition of the present invention can be formulated is an oral capsule containing a fat mass. The pharmaceutical compositions of the present invention can be administered orally as well as by gavage.
Фармацевтические композиции настоящего изобретения содержат активный ингредиент - комплекс липидов миелина нервной системы животных - в терапевтически эффективном количестве. В предпочтительном воплощении фармацевтическая композиция может быть составлена так, чтобы доставлять 250-500 мг активного начала при приеме единичной лекарственной формы, такой как, например, капсула. Прием по одной такой капсуле 4 раза в день будет обеспечивать терапевтически или профилактически эффективную дозу активного ингредиента.The pharmaceutical compositions of the present invention contain the active ingredient, the myelin lipid complex of the nervous system of animals, in a therapeutically effective amount. In a preferred embodiment, the pharmaceutical composition can be formulated to deliver 250-500 mg of active principle when taken in a unit dosage form such as, for example, a capsule. Taking one such capsule 4 times a day will provide a therapeutically or prophylactically effective dose of the active ingredient.
Пищевые композиции настоящего изобретения включают продукты, предназначенные для удовлетворения потребностей человека в питательных веществах. Пищевые композиции могут быть в различных формах, включая твердую, жидкую и полутвердую. Твердые формы пищевых композиций могут быть приготовлены, в частности, в виде батончика (типа питательного батончика), чипсов, хлебобулочного изделия, крекера. Жидкие формы могут включать напитки, выполненные в форме суспензий, эмульсий, растворов. Полутвердые формы пищевых продуктов могут быть представлены, в частности, пастами, кремами, муссами, мороженым, жевательными продуктами на основе желатина.The food compositions of the present invention include foods designed to meet human nutritional requirements. The food compositions can be in a variety of forms, including solid, liquid, and semi-solid. Solid forms of food compositions can be prepared, in particular, in the form of a bar (such as a food bar), chips, baked goods, cracker. Liquid forms can include drinks made in the form of suspensions, emulsions, solutions. Semi-solid forms of food products can be represented, in particular, by pastes, creams, mousses, ice creams, gelatin-based chewing products.
Пищевые композиции настоящего изобретения содержат эффективное количество комплекса липидов миелина нервной системы животных и пищевой компонент. По существу пищевая композиция согласно изобретению представляет собой любой продукт питания, обогащенный комплексом липидов миелина нервной системы животных.The food compositions of the present invention comprise an effective amount of an animal nervous system myelin lipid complex and a food component. Essentially, the food composition according to the invention is any food product enriched in the myelin lipid complex of the nervous system of animals.
Пищевая добавка означает питательную композицию, которая, как правило, удовлетворяет потребности человека в отдельных питательных веществах, но не вносит существенный вклад в удовлетворение общих потребностей человека в питательных веществах. Пищевые добавки могут быть обеспечены в различных формах, например, в форме пилюли, таблетки. Пищевая добавка настоящего изобретения содержит в качестве основного компонента комплекс липидов миелина нервной системы животных.Nutritional supplement means a nutritional composition that generally satisfies a person's specific nutrient requirements but does not significantly contribute to meeting a person's overall nutrient requirements. Nutritional supplements can be provided in various forms, for example, in the form of a pill, a tablet. The nutritional supplement of the present invention contains, as a main component, the myelin lipid complex of the nervous system of animals.
Приведенные ниже примеры служат для иллюстрации отдельных наиболее предпочтительных воплощений заявленного изобретения, но не предназначены для ограничения объема притязаний, который определяется приведенной ниже формулой изобретения.The following examples serve to illustrate some of the most preferred embodiments of the claimed invention, but are not intended to limit the scope of the claims, which is defined by the following claims.
Пример 1. Получение комплекса липидов миелина нервной системы животных.Example 1. Obtaining a complex of myelin lipids of the nervous system of animals.
Средство настоящего изобретения вырабатывают из ткани крупного рогатого скота, свиней. Спинной мозг (для комплекса липидов миелина ЦНС), нервы седалищного, грудного сплетения (для комплекса липидов миелина ПНС) выделяют от забитых здоровых животных на бойнях. После отделения соединительнотканных, сосудистых оболочек ткани измельчают пропусканием через мясорубку и при необходимости хранят до дальнейшего использования в замороженном виде при - 20°С. Затем ткани подвергают сушке в замороженном виде под вакуумом. Для облегчения экстракции фосфолигшдов к высушенной ткани добавляют 70 % этиловый спирт в количестве 10 % по объему. Далее проводят экстракцию общих липидов методом суперкритической экстракции СО2 (680-800 бар при 80°С). Полученный экстракт смешивают с растопленным курдючным жиром (180°С) в соотношении 1:1. После охлаждения до 50°С расфасовывают в желатиновые капсулы.The agent of the present invention is produced from the tissue of cattle and pigs. The spinal cord (for the CNS myelin lipid complex), the sciatic and thoracic plexus nerves (for the PNS myelin lipid complex) are isolated from slaughtered healthy animals in slaughterhouses. After the separation of the connective tissue, vascular membranes, the tissues are crushed by passing through a meat grinder and, if necessary, stored frozen at -20 ° C until further use. The tissues are then frozen dried under vacuum. To facilitate the extraction of phospholiges, 70% ethyl alcohol is added to the dried tissue in an amount of 10% by volume. Then, total lipids are extracted by supercritical CO 2 extraction (680-800 bar at 80 ° C). The resulting extract is mixed with melted fat tail fat (180 ° C) in a 1: 1 ratio. After cooling to 50 ° C, it is filled into gelatin capsules.
Пример 2. Оценка нейрозащитной активности комплекса липидов миелина периферической нервной системы (ЛАОШВАНН) на модели экспериментального аутоиммунного неврита крыс (ЭАН)Example 2. Evaluation of neuroprotective activity of the complex of lipids of myelin of the peripheral nervous system (LAOSCHVANN) on the model of experimental autoimmune neuritis in rats (EAN)
Комплекс миелиновых липидов периферической нервной системы (ЛАОШВАНН) исследовали на лабораторной модели синдрома Гийена-Барре - экспериментальном аутоиммунном неврите (Hahn AF, et al., Experimental allergic neuritis (EAN) as a model for the immune-mediated demyelinating neuropathies. Rev. Neurol. (Paris). 1996, May; 152(5):328-32).The complex of myelinated lipids of the peripheral nervous system (LAOSCHWANN) was studied in a laboratory model of Guillain-Barré syndrome - experimental autoimmune neuritis (Hahn AF, et al., Experimental allergic neuritis (EAN) as a model for the immune-mediated demyelinating neuropathies.Rev. Neurol. (Paris) 1996 May; 152 (5): 328-32).
Самки крыс линии Вистар массой 200 - 230 г. из Питомника РАН взяты в исследование после 2-недельного карантина и распределены на следующие группы:Female Wistar rats weighing 200-230 g from the Russian Academy of Sciences Nursery were taken into the study after a 2-week quarantine and divided into the following groups:
1. Контрольная группа - 12 голов (К1), принимающие «плацебо» (кукурузное масло) с 1-го дня.1. Control group - 12 goals (K 1 ), taking "placebo" (corn oil) from the 1st day.
2. Контрольная группа - 8 голов (К2), принимающие «плацебо» с начала развития симптомов ЭАН.2. Control group - 8 goals (K 2 ), taking "placebo" from the beginning of the development of EAN symptoms.
3. Опытная - профилактическая группа - 12 голов (О3), принимающие ЛАОШВАНН с 1-го дня иммунизации.3. Experienced - prophylactic group - 12 heads (O 3 ), taking LAOSCHVAN from the 1st day of immunization.
4. Опытная - лечебная группа - 12 голов (О4), принимающие ЛАОШВАНН с начала развития симптомов ЭАН.4. Experienced - treatment group - 12 heads (O 4 ), taking LAOSCHVANN from the beginning of the development of EAN symptoms.
В 1-й день животным под анестезией ввели п/к в задние лапы 200 мкл смеси 6 мг миелина периферических нервов быка в 100 мкл фосфатного буфера (ФБ), эмульгированного с 100 мкл полного адъюванта Фрейнда («Дифко»), содержащего 1 мг/мл инактивированных микобактерий туберкулеза (H37Ra). Дополнительно ввели внутривенно 3 мкг коклюшного токсина в ФБ на 3-й день после иммунизации. Все животные были размещены в клетках по 4 головы и обеспечены свободным доступом к корму и воде. Животные были взвешены, и проводился ежедневный осмотр клинических признаков заболевания. Все эксперименты проведены согласно регламенту РФ для экспериментов на животных.On the 1st day, animals under anesthesia were injected sc into the hind legs with 200 μl of a mixture of 6 mg of bovine peripheral nerve myelin in 100 μl of phosphate buffer (PB) emulsified with 100 μl of Freund's complete adjuvant (Difco) containing 1 mg / ml of inactivated mycobacterium tuberculosis (H37Ra). Additionally, 3 µg of pertussis toxin was injected intravenously into FB on the 3rd day after immunization. All animals were housed in 4-head cages and provided with free access to food and water. The animals were weighed and clinical signs of disease were examined daily. All experiments were carried out in accordance with the regulations of the Russian Federation for experiments on animals.
Использована шкала оценки ЭАН: 0 = нет симптомов болезни, 1+ = вялость хвоста, 2+ = умеренный парез конечностей, 3+ = тяжелый парез, 4+ = тетрапарез, 5+ = смерть в результате развития невропатии.The EAN rating scale was used: 0 = no symptoms of the disease, 1+ = tail lethargy, 2+ = moderate paresis of the extremities, 3+ = severe paresis, 4+ = tetraparesis, 5+ = death due to the development of neuropathy.
Для оценки профилактического действия опытная группа из 12 крыс (с индуцированным ЭАН) получала 50 мг ЛАОШВАНН через желудочный зонд каждый день, начиная с 1-го дня иммунизации. Контрольная группа - К1 из 12 крыс получала то же количество плацебо (кукурузное масло). Для оценки терапевтического действия 12 крыс получали ЛАОШВАНН после начала развития клинических симптомов, т.е. с 13 дня после иммунизации. Контрольная группа - К2 из 8 животных получала то же количество плацебо после начала развития симптомов ЭАН.To assess the prophylactic effect, an experimental group of 12 rats (with induced EAN) received 50 mg of LAOSCHVANN via a gastric tube every day, starting from the 1st day of immunization. Control group - K 1 of 12 rats received the same amount of placebo (corn oil). To evaluate the therapeutic effect, 12 rats received LAOSCHVANN after the onset of the development of clinical symptoms, i.e. from day 13 after immunization. Control group - K 2 of 8 animals received the same amount of placebo after the onset of EAN symptoms.
Результатыresults
Через две недели (на 13-14 день) у всех 12 животных контрольной - К1 группы (плацебо) развились признаки ЭАН: начиная от вялости хвостов и вплоть до развития парезов к 18 дню, одно животное пало на 20 день, (симптомы группы 3,08±0,93), а у оставшихся животных острота симптомов стала стихать к 30 дню наблюдения (симптомы группы 2.36±0.48). Отмечена потеря массы тела на 10 %.Two weeks later (on days 13-14), all 12 animals of the control group K 1 (placebo) developed signs of EAN: starting from lethargy of tails and up to the development of paresis by 18 days, one animal died on 20 days, (symptoms of group 3 , 08 ± 0.93), and in the remaining animals, the severity of symptoms began to subside by the 30th day of observation (group symptoms 2.36 ± 0.48). There was a 10% loss in body weight.
Все 12 крыс опытной группы - О3, получавшие профилактически ЛАОШВАНН с 1-го дня иммунизации, оказались защищенными от развития клинических симптомов ЭАН до конца периода наблюдения (до 30 дня). Было отмечено лишь отставание в наборе массы тела на 5 %.All 12 rats of the experimental group - O 3 , receiving prophylactic LAOSCHVANH from the 1st day of immunization, were protected from the development of clinical symptoms of EAN until the end of the observation period (up to 30 days). Only a 5% lag in weight gain was noted.
В группе - О4 опытных животных, получавших ЛАОШВАНН с начала развития клинических симптомов, т.е. терапевтически, у 1 крысы патологический процесс ЭАН прогрессировал с 14 дня, и животное пало на 28 день с признаками тетрапареза. У остальных 11 крыс ЭАН протекал в легкой форме 1+ (вялость хвостов) с 14 дня и закончился заметным улучшением на 30 день. Симптомы группы к 30 дню 1.09±0.5.In the group - O 4 experimental animals that received LAOSCHVANN from the beginning of the development of clinical symptoms, i.e. therapeutically, in 1 rat the pathological process of EAN progressed from day 14, and the animal died on day 28 with signs of tetraparesis. In the remaining 11 rats, EAN proceeded in a mild form 1+ (flaccidity of tails) from day 14 and ended with a noticeable improvement on day 30. Group symptoms by day 30 1.09 ± 0.5.
В группе - К2 контрольных животных, получавших плацебо с начала развития клинических симптомов, процесс прогрессировал с 13 дня до 20 дня. Симптомы группы к 30 дню 3.25±0.49. Одна крыса из 8 пала на 20 день.In group K 2 control animals, who received placebo from the onset of clinical symptoms, the process progressed from day 13 to day 20. Group symptoms by day 30 3.25 ± 0.49. One rat out of 8 died on day 20.
Выводы: Результаты плацебо-контролируемого исследования ЛАОШВАНН на лабораторных животных с ЭАН показали достоверно выраженную нейрозащитную эффективность. Липидный комплекс оказывал тормозящее действие на развитие симптомов экспериментального неврита, как при профилактическом (до развития симптомов ЭАН), так и терапевтическом (с начала развития симптомов ЭАН) приеме внутрь, без нежелательных побочных реакций.Conclusions: The results of the placebo-controlled study of Laoschwann in laboratory animals with EAN showed a significantly pronounced neuroprotective efficacy. The lipid complex had an inhibitory effect on the development of symptoms of experimental neuritis, both during prophylactic (before the development of EAN symptoms) and therapeutic (from the onset of EAN symptoms) ingestion, without unwanted side reactions.
Пример 3. Оценка нейрозащитной активности комплекса липидов миелина центральной нервной системы (ЛАОГЛИЯ) на модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭАЭ) крыс.Example 3. Evaluation of the neuroprotective activity of the complex of lipids of the myelin of the central nervous system (LAOGLIA) on the model of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) of rats.
Комплекс миелиновых липидов центральной нервной системы (ЛАОГЛИЯ) исследовали на лабораторной модели рассеянного склероза - экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите (ЭАЭ) Kpbic. (Cris S. Constantinescu et al., Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) as a model for multiple sclerosis (MS), Br. J. Pharmacol. 2011 Oct; 164(4): 1079-1106).The complex of myelin lipids of the central nervous system (LAOGLIA) was investigated on a laboratory model of multiple sclerosis - experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) Kpbic. (Cris S. Constantinescu et al., Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) as a model for multiple sclerosis (MS), Br. J. Pharmacol. 2011 Oct; 164 (4): 1079-1106).
В опытах использованы самки крыс линии Вистар из Питомника РАН. После 2-недельного содержания в карантине животные распределены на следующие группы.The experiments used female Wistar rats from the Nursery of the Russian Academy of Sciences. After 2 weeks of quarantine, the animals are divided into the following groups.
1. Контрольная группа - 12 голов (К1), принимающие «плацебо» (кукурузное масло) с 1-го дня.1. Control group - 12 goals (K 1 ), taking "placebo" (corn oil) from the 1st day.
2. Контрольная группа - 8 голов (К2), принимающие «плацебо» с начала развития симптомов ЭАЭ2. Control group - 8 goals (K 2 ), taking "placebo" from the onset of EAE symptoms
3. Опытная - профилактическая группа - 12 голов (О3), принимающие ЛАОГЛИЯ с 1-го дня иммунизации.3. Experienced - prophylactic group - 12 heads (O 3 ), taking LAOGLIA from the 1st day of immunization.
4. Опытная - лечебная группа - 12 голов (О4), принимающие ЛАОГЛИЯ с начала развития симптомов ЭАЭ.4. Experienced - treatment group - 12 heads (O 4 ), taking LAOGLIA from the beginning of the development of EAE symptoms.
В 1-й день животным под анестезией ввели п/к в задние лапы 200 мкл смеси 6 мг миелина спинного мозга быка в 100 мкл фосфатного буфера (ФБ), эмульгированного с 100 мкл полного адъюванта Фрейнда («Дифко»), содержащего 1 мг/мл инактивированных микобактерий туберкулеза (H37Ra). Дополнительно ввели внутривенно 3 мкг коклюшного токсина в ФБ на 3-й день после иммунизации. Все животные были размещены в клетках по 4 головы и обеспечены свободным доступом к корму и воде. Животные были взвешены, и проводился ежедневный осмотр клинических признаков заболевания. Все эксперименты проведены согласно регламенту РФ для экспериментов на животных.On the 1st day, animals under anesthesia were injected sc into the hind legs with 200 μl of a mixture of 6 mg of bovine spinal cord myelin in 100 μl of phosphate buffer (PB) emulsified with 100 μl of Freund's complete adjuvant (Difco) containing 1 mg / ml of inactivated mycobacterium tuberculosis (H37Ra). Additionally, 3 µg of pertussis toxin was injected intravenously into FB on the 3rd day after immunization. All animals were housed in 4-head cages and provided with free access to food and water. The animals were weighed and clinical signs of disease were examined daily. All experiments were carried out in accordance with the regulations of the Russian Federation for experiments on animals.
Использована шкала оценки симптомов ЭАЭ: 0 = нет симптомов болезни, 1+ = вялость хвоста, 2+ = умеренный парез конечностей, 3+ = тяжелый парез, 4+ = тетрапарез, 5+ = смерть в результате развития невропатии.The EAE symptom assessment scale was used: 0 = no disease symptoms, 1+ = tail lethargy, 2+ = moderate limb paresis, 3+ = severe paresis, 4+ = tetraparesis, 5+ = death due to neuropathy.
Для оценки профилактического действия опытная группа из 12 крыс (с индуцированным ЭАЭ) получала 50 мг ЛАОГЛИИ через желудочный зонд, каждый день, начиная с 1-го дня иммунизации. Контрольная группа - К1 из 12 крыс получала то же количество плацебо (кукурузное масло). Для оценки терапевтического действия 12 крыс получали ЛАОГЛИЮ после начала развития клинических симптомов, т.е. с 10 дня после иммунизации. Контрольная группа - К2 из 8 животных получала то же количество плацебо после начала развития симптомов ЭАЭ.To assess the prophylactic effect, an experimental group of 12 rats (with induced EAE) received 50 mg of LAOGLIA through a gastric tube, every day, starting from the 1st day of immunization. Control group - K 1 of 12 rats received the same amount of placebo (corn oil). To evaluate the therapeutic effect, 12 rats received LAOGLIA after the onset of the development of clinical symptoms, i.e. from 10 days after immunization. Control group - K 2 of 8 animals received the same amount of placebo after the onset of EAE symptoms.
Результатыresults
Через 10-11 день у всех 12 животных контрольной - К1 группы (плацебо) развились признаки ЭАЭ: начиная от умеренного пареза и вплоть до развития тетрапарезов к 18 дню, 3 животных пали на 24 день, (симптомы группы 3.41±0.51), а у оставшихся животных острота симптомов стала стихать незначительно. К 30 дню наблюдения симптомы группы из 9 крыс 3.1±1.1. Отмечена потеря массы тела на 15 %.After 10-11 days, all 12 animals of the control group K 1 (placebo) developed signs of EAE: starting from moderate paresis and up to the development of tetraparesis by day 18, 3 animals died on day 24, (group symptoms 3.41 ± 0.51), and in the remaining animals, the severity of symptoms began to subside slightly. By the 30th day of observation, the symptoms of a group of 9 rats were 3.1 ± 1.1. Weight loss was noted by 15%.
Все 12 крыс опытной группы - О3, получавшие профилактически ЛАОГЛИЮ с 1-го дня иммунизации, оказались защищенными от развития клинических симптомов ЭАЭ до конца периода наблюдения (до 30 дня). Было отмечено лишь отставание в наборе массы тела на 15 %.All 12 rats of the experimental group - O 3 , receiving prophylactic LAOGLIA from the 1st day of immunization, were protected from the development of clinical symptoms of EAE until the end of the observation period (up to 30 days). There was only a 15% lag in weight gain.
В группе - О4 опытных животных, получавших ЛАОГЛИЮ с начала развития клинических симптомов, т.е. терапевтически, патологический процесс ЭАЭ прогрессировал с 10-го по 15 день. Симптомы достигли максимальных показателей к 15 дню (3.0±0.66) и стали медленно стихать. Симптомы группы к 30 дню 1.83±0.73.In the group - O 4 experimental animals that received LAOGLIA from the beginning of the development of clinical symptoms, i.e. therapeutically, the pathological process of EAE progressed from the 10th to the 15th day. Symptoms peaked at day 15 (3.0 ± 0.66) and slowly subsided. Group symptoms by day 30 1.83 ± 0.73.
В группе - К2 контрольных животных, получавших плацебо с начала развития клинических симптомов, процесс прогрессировал с 13 дня до 20 дня. Симптомы группы к 30 дню 3.50±0.54. Две крысы из 8 пали на 20 день.In group K 2 control animals, who received placebo from the onset of clinical symptoms, the process progressed from day 13 to day 20. Group symptoms by day 30 3.50 ± 0.54. Two out of 8 rats died on day 20.
Выводы: Результаты плацебо-контролируемого исследования ЛАОГЛИИ на лабораторных животных с ЭАЭ показали достоверно выраженную нейрозащитную эффективность. Липидный комплекс оказывал тормозящее действие на развитие симптомов экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита, как при профилактическом (до развития симптомов ЭАЭ), так и терапевтическом (с начала развития симптомов ЭАН) приеме внутрь, без нежелательных побочных реакций.Conclusions: The results of a placebo-controlled study of LAOGLIA in laboratory animals with EAE showed a significantly pronounced neuroprotective efficacy. The lipid complex had an inhibitory effect on the development of symptoms of experimental autoimmune encephalomyelitis, both during prophylactic (before the development of EAE symptoms) and therapeutic (from the beginning of the development of EAE symptoms) ingestion, without unwanted side reactions.
Пример 4. Схема комбинированного лечения с использованием дополнительных противовоспалительных средств.Example 4. Combined treatment regimen using additional anti-inflammatory drugs.
Для лечения обострения нейродегенеративного процесса - лепрозной узловатой эритемы (реакция Типа-2) может быть использована следующая схема.For the treatment of exacerbation of the neurodegenerative process - leprosy erythema nodosum (Type-2 reaction), the following scheme can be used.
1. Метилпреднизолон 250 мг в день внутривенно 3 дня подряд.1. Methylprednisolone 250 mg intravenously daily for 3 consecutive days.
2. Преднизолон в таблетках 40 мг в день, начиная с 4-го дня со ступенчатым снижением дозы до 5 мг.2. Prednisolone tablets 40 mg per day, starting from the 4th day with a stepwise dose reduction to 5 mg.
3. Аспирин в таблетках 100 мг в день.3. Aspirin tablets 100 mg per day.
4. Комплекс липидов миелина периферической нервной системы (ЛАОШВАНН) в капсулах по 250 мг 4 раза в день в течение 3 месяцев.4. Complex of lipids of myelin of the peripheral nervous system (LAOSCHVANN) in capsules of 250 mg 4 times a day for 3 months.
Пример 5. Применение комплекса липидов миелина для профилактики прогрессирования лепрозной нейропатии.Example 5. The use of a complex of myelin lipids for the prevention of the progression of leprosy neuropathy.
Для защиты от обострений нейродегенеративного процесса - (реакции Типа-1 и Типа-2) в процессе проведения специфической комбинированной антимикобактериальной терапии больных лепрой может быть использована следующая схема.To protect against exacerbations of the neurodegenerative process - (Type-1 and Type-2 reactions) in the process of carrying out specific combined antimycobacterial therapy for patients with leprosy, the following scheme can be used.
1. Даспон 100 мг в день (6 месяцев для ТТ форм и 12 месяцев для ЛЛ форм).1. Daspon 100 mg per day (6 months for TT forms and 12 months for LL forms).
2. Рифампицин 600 мг 1 раз в месяц (6 месяцев для ТТ форм и 12 месяцев для ЛЛ форм).2. Rifampicin 600 mg once a month (6 months for TT forms and 12 months for LL forms).
3. Комплекс липидов миелина периферической нервной системы (ЛАОШВАНН) в капсулах по 250 мг 4 раза в день (6 месяцев для ТТ форм и 12 месяцев для ЛЛ форм).3. Complex of lipids of myelin of the peripheral nervous system (LAOSCHVANN) in capsules of 250 mg 4 times a day (6 months for TT forms and 12 months for LL forms).
Способы и композиции, раскрытые в данном описании, не ограничиваются конкретными методиками, процедурами и реагентами, приведенными в данном описании, поскольку, как будет понятно специалисту в данной области техники, их можно изменять. Кроме того, терминология, используемая в данном описании, имеет целью только описание определенных воплощений и не предназначена для ограничения объема притязаний, который определяется формулой изобретения.The methods and compositions disclosed herein are not limited to the specific techniques, procedures, and reagents disclosed herein, since, as one skilled in the art will understand, they can be varied. In addition, the terminology used in this description is intended only to describe certain embodiments and is not intended to limit the scope of the claims, which is defined by the claims.
Если не указано иное, все научно-технически термины и сокращения, используемые в данном описании, имеют значения, которые им обычно придают специалисты в области техники, к которой относится изобретение, или в области техники, в которой указанные термин или сокращение применяются. В данном описании представлены предпочтительные композиции, способы, изготовленные изделия или другие средства или материалы, при этом должно быть понятно, что при осуществлении данного изобретения могут быть использованы иные композиции, способы, изготовленные изделия или иные средства или материалы, подобные или эквивалентные описанным в данном описании, оставаясь при этом в объеме притязаний, определяемом формулой изобретения.Unless otherwise indicated, all scientific and technical terms and abbreviations used in this description have the meanings that are usually assigned to them by those skilled in the art to which the invention relates, or in the field of technology in which the specified term or abbreviation is used. Preferred compositions, methods, manufactured articles, or other means or materials are presented herein, and it should be understood that other compositions, methods, manufactured articles, or other means or materials similar or equivalent to those described herein may be used in the practice of this invention. description, while remaining within the scope of the claims defined by the claims.
Все патенты, заявки на патенты, научно-технические и иные публикации, цитированные в данном описании, включены в него посредством отсылки. При этом не предполагается, что они составляют уровень техники в отношении заявленного изобретения.All patents, patent applications, scientific, technical and other publications cited in this description are incorporated by reference. However, they are not intended to constitute prior art in relation to the claimed invention.
Claims (25)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019131259A RU2761617C2 (en) | 2019-10-04 | 2019-10-04 | Complex of myelin lipids of central and peripheral nervous system of animals for treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating disorders and methods for its application |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019131259A RU2761617C2 (en) | 2019-10-04 | 2019-10-04 | Complex of myelin lipids of central and peripheral nervous system of animals for treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating disorders and methods for its application |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019131259A RU2019131259A (en) | 2021-04-05 |
| RU2019131259A3 RU2019131259A3 (en) | 2021-04-05 |
| RU2761617C2 true RU2761617C2 (en) | 2021-12-13 |
Family
ID=75345942
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019131259A RU2761617C2 (en) | 2019-10-04 | 2019-10-04 | Complex of myelin lipids of central and peripheral nervous system of animals for treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating disorders and methods for its application |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2761617C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20080200368A1 (en) * | 2000-08-21 | 2008-08-21 | Apitope Technology (Bristol) Ltd. | Peptide composition |
| RU2448685C2 (en) * | 2009-11-30 | 2012-04-27 | Российская Федерация в лице Министерства промышленности и торговли Российской Федерации | Liposomes containing oligopeptides - fragments of myelin basic protein, pharmaceutical composition and method of treating multiple sclerosis |
| RU2631887C2 (en) * | 2015-09-07 | 2017-09-28 | Вагиф Султанович Султанов | Active drug ingredient, drug, pharmaceutical composition and method for treatment of demyelinating diseases of living organism, including disease prevention |
-
2019
- 2019-10-04 RU RU2019131259A patent/RU2761617C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20080200368A1 (en) * | 2000-08-21 | 2008-08-21 | Apitope Technology (Bristol) Ltd. | Peptide composition |
| RU2448685C2 (en) * | 2009-11-30 | 2012-04-27 | Российская Федерация в лице Министерства промышленности и торговли Российской Федерации | Liposomes containing oligopeptides - fragments of myelin basic protein, pharmaceutical composition and method of treating multiple sclerosis |
| RU2631887C2 (en) * | 2015-09-07 | 2017-09-28 | Вагиф Султанович Султанов | Active drug ingredient, drug, pharmaceutical composition and method for treatment of demyelinating diseases of living organism, including disease prevention |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| MIN Y., KRISTIANSEN K., BOGGS J. M., et al., Interaction forces and adhesion of supported myelin lipid bilayers modulated by myelin basic protein // Proc Natl Acad Sci USA. - 2009. - Vol. 106, no. 9. - P. 3154-3159. * |
| MIN Y., KRISTIANSEN K., BOGGS J. M., et al., Interaction forces and adhesion of supported myelin lipid bilayers modulated by myelin basic protein // Proc Natl Acad Sci USA. - 2009. - Vol. 106, no. 9. - P. 3154-3159. ЧЕХОНИН В.П. и др. Основной белок миелина. Строение, свойства, функции, роль в диагностике демиелинизирующих заболеваний // Вопросы медицинской химии, 2000, 46(6), стр. 549-563. * |
| ЧЕХОНИН В.П. и др. Основной белок миелина. Строение, свойства, функции, роль в диагностике демиелинизирующих заболеваний // Вопросы медицинской химии, 2000, 46(6), стр. 549-563. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2019131259A (en) | 2021-04-05 |
| RU2019131259A3 (en) | 2021-04-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2021508343A (en) | Lysophosphatidylcholine composition | |
| AU595276B2 (en) | Use of a hydrophobic substance for preparing an enteric preparation for treatment of obesity and an enteric preparation | |
| JP2020090499A (en) | pH DEPENDENT CARRIERS FOR TARGETED RELEASE OF PHARMACEUTICALS ALONG GASTROINTESTINAL TRACT, COMPOSITIONS THEREFROM, AND MAKING AND USING SAME | |
| KR20070040371A (en) | USE OF alpha-KETOGLUTARATE AND RELATED COMPOUNDS FOR LOWERING PLASMA LIPIDS | |
| Lima et al. | Effects of “bacuri” seed butter (platonia insignis Mart.) on metabolic parameters in hamsters with diet-induced hypercholesterolemia | |
| EP1090635B1 (en) | Use of ferulic acid for treating hypertension | |
| KR101522123B1 (en) | Concomitant drug for improving cognitive function | |
| RU2761617C2 (en) | Complex of myelin lipids of central and peripheral nervous system of animals for treatment and prevention of neurodegenerative demyelinating disorders and methods for its application | |
| JP2010222284A (en) | Blood gip increase inhibitor | |
| KR100304312B1 (en) | Zinc Supplemented Prostate Extract | |
| WO2012143860A1 (en) | Ameliorating cognitive decline | |
| US20040006048A1 (en) | Combination of lecithin with ascorbic acid | |
| AU763995B2 (en) | Treatment of dyspepsia | |
| AU2014360255B2 (en) | Serine glycerophospholipid preparation and method for treatment of seizures | |
| WO2018102914A1 (en) | Use of medium-chain triglycerides for the management of metabolic conditions | |
| JP7294147B2 (en) | Composition for prevention or amelioration of nociceptive pain | |
| WO2013005834A1 (en) | Anti-obesity agent comprising high-purity epa | |
| RU2631887C2 (en) | Active drug ingredient, drug, pharmaceutical composition and method for treatment of demyelinating diseases of living organism, including disease prevention | |
| KR20190003570A (en) | Methods for Determining Infectious Conditions of Safe, Stable Plasma Genogens, Agents and Dyslipidemia | |
| US20050154059A1 (en) | Method of treating type III hypersensitive reaction-related diseases and conditions by using conjugated linoleic acid | |
| CN112691089B (en) | Application of 1-phenyl-1-propanol in preparation of medicine for treating hyperlipidemia and/or diabetes | |
| BR112019012741A2 (en) | composition, formulation, method for preventing and / or treating cachexia in an individual, use of the composition, and, special medical use product, health specific food product, special medical food product, food use product special dietary, medical nutrition product and medical food product. | |
| EA019268B1 (en) | Combined preparation manifesting hepatoprotective action | |
| EP3727404A1 (en) | Lipid combinations | |
| JP2021001153A (en) | Novel use of curcumin |