RU2760740C1 - Питательная среда для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза - Google Patents
Питательная среда для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2760740C1 RU2760740C1 RU2021113490A RU2021113490A RU2760740C1 RU 2760740 C1 RU2760740 C1 RU 2760740C1 RU 2021113490 A RU2021113490 A RU 2021113490A RU 2021113490 A RU2021113490 A RU 2021113490A RU 2760740 C1 RU2760740 C1 RU 2760740C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acid
- potassium
- nutrient medium
- hydrochloride
- complexes
- Prior art date
Links
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 title claims abstract description 24
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 title claims abstract description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 title claims abstract 3
- 235000021038 drupes Nutrition 0.000 title 1
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 24
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 16
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 16
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 8
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 8
- 229960000344 thiamine hydrochloride Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 7
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 claims abstract description 7
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims abstract description 6
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 5
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N [14c]-nicotinamide Chemical compound N[14C](=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000011572 manganese Substances 0.000 claims abstract description 4
- WAEMQWOKJMHJLA-UHFFFAOYSA-N Manganese(2+) Chemical compound [Mn+2] WAEMQWOKJMHJLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 235000010338 boric acid Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 235000007715 potassium iodide Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 3
- BAERPNBPLZWCES-UHFFFAOYSA-N (2-hydroxy-1-phosphonoethyl)phosphonic acid Chemical compound OCC(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O BAERPNBPLZWCES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000004575 stone Substances 0.000 claims description 7
- VYPKFHFVKFKHMK-UHFFFAOYSA-N 2-(1h-indol-2-yl)butanoic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C(C(O)=O)CC)=CC2=C1 VYPKFHFVKFKHMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 claims description 6
- 239000005982 Indolylbutyric acid Substances 0.000 claims description 6
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 6
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 6
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960004172 pyridoxine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 5
- 235000019171 pyridoxine hydrochloride Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011764 pyridoxine hydrochloride Substances 0.000 claims description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 claims description 3
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 claims description 3
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N cobalt(2+) Chemical compound [Co+2] XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- DBVJJBKOTRCVKF-UHFFFAOYSA-N Etidronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(O)(C)P(O)(O)=O DBVJJBKOTRCVKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 3
- 229960004585 etidronic acid Drugs 0.000 abstract 3
- JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N indole-3-butyric acid Chemical compound C1=CC=C2C(CCCC(=O)O)=CNC2=C1 JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 abstract 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 abstract 1
- MEFBJEMVZONFCJ-UHFFFAOYSA-N molybdate Chemical compound [O-][Mo]([O-])(=O)=O MEFBJEMVZONFCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 16
- 241001290151 Prunus avium subsp. avium Species 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000220225 Malus Species 0.000 description 1
- 235000011430 Malus pumila Nutrition 0.000 description 1
- 235000015103 Malus silvestris Nutrition 0.000 description 1
- 240000006711 Pistacia vera Species 0.000 description 1
- 241000220304 Prunus dulcis Species 0.000 description 1
- 235000017002 Prunus dulcis x Prunus persica Nutrition 0.000 description 1
- 241001499810 Prunus dulcis x Prunus persica Species 0.000 description 1
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 1
- 240000001987 Pyrus communis Species 0.000 description 1
- 235000002357 Ribes grossularia Nutrition 0.000 description 1
- 244000171263 Ribes grossularia Species 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 1
- 235000021073 macronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- VLAPMBHFAWRUQP-UHFFFAOYSA-L molybdic acid Chemical compound O[Mo](O)(=O)=O VLAPMBHFAWRUQP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 1
- -1 oxyethylene diphosphonic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000020233 pistachio Nutrition 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000012492 regenerant Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Fertilizers (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Предлагается питательная среда, содержащая (мг/л): неорганические соединения из группы: аммоний азотнокислый, калий азотнокислый, кальций хлористый, магний сернокислый, калий фосфорнокислый, борная кислота, калий йодистый, а также комплексы марганца (II), цинка(II), молибдена (VI), меди(П), кобальта(П) с оксиэтилидендифосфоновой кислотой (ОЭДФ), комплекс железа (III) с трилоном Б, и органическую составляющую, включающую миоинозит, тиамин гидрохлорид, пиродоксин гидрохлорид, никотинамид, индолилмасляную кислоту, при следующем весовом соотношении компонентов смеси, мг/л: аммоний азотнокислый 825.0, калий азотнокислый 950.0, кальций хлористый 220.0, магний сернокислый 185.0, калий фосфорнокислый 85.0, борную кислоту 6.2, калий йодистый 0.83, комплексы микроэлементов с оксиэтилидендифосфоновой кислотой: железный(III) 24.5- 27.6, марганцевый 26.4-29.3, цинковый 8.2- 9.1, молибденовокислый 0.33-0.37, медный 0.027-0.030, кобальтовый 0.029 -0.032, а также органическую составляющую, включающую миоинозит 0.5, тиамин гидрохлорид 0.5, пиродоксин гидрохлорид 0.5, индолилмасляную кислоту 0.2, сахарозу 15000, агар-агар 6000 и остальное - вода до 1 л. Предлагаемая питательная среда характеризуется высокой эффективностью для размножения вишни ВЦ-13 in vitro на стадии ризогенеза, которая заключается в обеспечении практически количественной степени укоренения растений-регенерантов с образованием коротких прочных корней, которые легко отмываются. 1 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и сельского хозяйства и непосредственно касается питательной среды, содержащей наряду с макро- и мезо-элементами, регуляторами роста и другими добавками, комплексы микроэлементов с оксиэтилендифосфоновой кислотой (ОЭДФ), которая может быть использована при размножении in vitro подвоя косточковой культуры ВЦ-13 (вишня).
Питательные среды различного минерального и органического состава, предназначенные для размножения in vitro ягодных культур, были описаны ранее, например, в широко известных протоколах Мурасиге-Скуга, Коврина-Лепуавра и других информационных источниках [Murashige Т., Skoog F. А revised medium for rapid growth and bioassays with tobaco tissue culture. Physiol. Plantarum. 1962, V. 15. №3. P. 473-497; М.Г. Упадышев. Питательная среда для размножения ягодных и плодовых культур. Пат. 2063682 RU; Hunkova G, Libiakova G, Fejer J., Vugovic T. // Genetika. 2018. V. 50. №1. P. 351-356].
Микроэлементы наряду с макро- и мезо-элементами являются необходимыми компонентами подобных питательных сред. При этом в качестве микроэлементов используются их минеральные соли. Исключение составляет железо (III), которое вводится в питательные растворы вместе с динатриевой солью этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) (трилон Б) и позиционируется как комплекс Fe(III) ЭДТА. Существует, однако, высокая вероятность отсутствия комплекса в растворе, поскольку для комплексообразования требуются специальные условия (температура, рН, продолжительность реакции).
При использовании подобных питательных растворов при размножении in vitro косточковых культур (яблони, груши, крыжовник, вишня) на стадии ризогенеза не удается преодолеть трудности по укоренению микрорастений-регенерантов и последующей адаптации к нестерильным условиям, являющиеся основным препятствием размножения растений [Vaez-Livari В., Salehi-Soghadi Z.2006.IV-th IS on Pistachios and Almonds Eds.: A Javanshan et al. // Acta Hort.ln vitro Rooting of Hybrid GF677(Prunus dulcis x Prunus persica),P.726; Tsipouridies C, Thomidis Т., Bladenopoulou S. 2006. // Scientia Horticulturae,V. 108. Rhizogenesis of GF677, Early Crest, May Crest].
Это в полной мере относится и к питательным растворам по протоколу Мурасиге-Скуга (MS) [Physiol. Plantarum. 1962. V. 15. P. 473-497].
Задачей, на решение которой направлено изобретение, является увеличение степени укоренения и количества качественных корней клонового подвоя косточковой культуры ВЦ-13(вишня) на стадии ризогенеза.
Для выполнения поставленной задачи предлагается питательная среда для размножения ВЦ-13(вишня) in vitro на стадии ризогенеза, содержащая аммоний азотнокислый, калий азотнокислый, кальций хлористый, магний сернокислый, калий фосфорнокислый, борную кислоту, калий йодистый, а также комплексы железа (III), марганца (II), цинка(II), молибдена (VI), меди(II) и кобальта(II) с оксиэтилидендифосфоновой кислотой (ОЭДФ) и органическую составляющую, включающую миоинозит, тиамин гидрохлорид, пиродоксин гидрохлорид, никотинамид, индолилмасляную кислоту при следующем весовом соотношении компонентов, мг/л: аммоний азотнокислый 825.0, калий азотнокислый 950.0, кальций хлористый 220.0, магний сернокислый 185.0, калий фосфорнокислый 85.0, борная кислота 6.2, калий йодистый 0.83, комплексы микроэлементов с ОЭДФ: железный(III) 24.5-27.6, марганцевый 26.4-29.3, цинковый 8.2-9.1, молибденовокислый 0.33-0.37, медный 0.027-0.030, кобальтовый 0.029-0.032, а также органическая составляющая, включающая миоинозит 0.5, тиамин гидрохлорид 0.5, пиродоксин гидрохлорид 0.5, индолилмасляную кислоту 0.2, сахарозу 15000, агар-агар 6000, и воду до 1 л.
Основное отличие предлагаемой среды от известных питательных сред, применяемых для размножения плодовых и ягодных культур, является то, что взамен минеральных солей микроэлементов в состав данной среды в качестве источников микроэлементов вводятся их комплексы с ОЭДФ и при этом редуцируется среда MS до
по макроэлементам.
В предлагаемой питательной среде подобраны оптимальные концентрации всех входящих элементов, что позволило при использовании предложенной питательной среды для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13(вишня) достичь высокой степени укоренения (80-100%) и образования качественных корней на стадии ризогенеза. Полученные результаты в сопоставлении с результатами, получаемыми на питательной среде MS, представлены в табл. 1.
Результаты использования предложенной питательной среды для микроразмножения клонового подвоя косточковой культуры ВЦ-13(вишня) на стадии ризогенеза подтверждают высокую эффективность новой питательной среды для данной культуры, а именно достижение высокой (80-100%) степени укоренения и числа (5-6 ш.) качественных корней. Для сравнения эффективности комплексов микроэлементов с ОЭДФ в составе питательного раствора с аналогичными ранее известными комплексами этих элементов с трилоном Б были проведены дополнительные исследования, которые показали полное отсутствие эффекта в случае трилонатных комплексов в интервале исследованных концентраций.
Ниже приводятся примеры составов предлагаемой питательной среды (Питательная среда I и Питательная среда II) и способы их использования.
Пример 1.
Питательная среда I содержит (мг/л): аммоний азотнокислый 825.0, калий азотнокислый 950.0, кальций хлористый 220.0, магний сернокислый 185.0, калий фосфорнокислый 85.0, борная кислота 6.2, калий йодистый 0.83, комплексы микроэлементов с ОЭДФ: железный(III) 27.6, марганцевый 29.3, цинковый 9.1, молибденовокислый 0.37, медный 0.030, кобальтовый 0.032, миоинозит 0.5, тиамин гидрохлорид 0.5, пиродоксин гидрохлорид 0.5, индолилмасляная кислота 0.2, сахароза 15000, агар-агар 6000, остальное вода до 1 л.
Питательную среду I получают внесением компонентов в указанных выше концентрациях, объем раствора доводят до 1 л и при нагревании растворяют агар-агар. Питательную среду разливают в культуральные сосуды (стеклянные банки объемом 100 мл с покрытием из пленки) по 30 мл в каждый и подвергают стерилизации в автоклаве в течение 20 мин и давлении 0.2 МПа. В ламинарном боксе в каждый сосуд помещают по 5 микрочеренков длиной 2-3 узла. Субкультивирование опытных микрорастений проводят в культуральной комнате при интенсивном облучении 2500 люкс, 16-часовом фотопериоде, температуре 20-22°С. На 30 день субкультивирования проводят учет укореняемости и развития растений-регенерантов. Повторность опытов трехкратная по 12 эксплантов в одной повторности.
Использование разработанной питательной среды обеспечивает 100%-ную степень укоренения растений-регенерантов, при этом образуется 5-6 коротких прочных корней, которые легко отмываются с последующей высадкой на этап адаптации к нестерильным условиям (табл. 1) полученные результаты успешно проверены в большем объеме.
Пример 2.
Питательная среда II, содержащая (мг/л): аммоний азотнокислый 825.0, калий азотнокислый 950.0, кальций хлористый 220.0, магний сернокислый 185.0, калий фосфорнокислый 85.0, борная кислота 6.2, калий йодистый 0.83, комплексы микроэлементов с ОЭДФ: железный(III) 24.5, марганцевый 26.4-, цинковый 8.2, молибденовокислый 0.33, медный 0,0270, кобальтовый 0.029, миоинозит 0.5, тиамин гидрохлорид 0.5, пиродоксин гидрохлорид 0.5, индолилмасляная кислота 0.2, сахароза 15000, агар-агар 6000, остальное вода до 1 л.
Питательную среду II получают аналогично примеру 1 внесением компонентов состава в указанных выше концентрациях, объем раствора доводят до 1 л и при нагревании растворяют агар-агар и далее аналогично примеру 1.
Результаты размножения на предлагаемой среде представлены в табл. 1. Предложенная среда обеспечивает 80%-ную степень укоренения растений-регенерантов также с образование коротких прочных корней (4-5 шт.) (табл. 1)
При более низких концентрациях комплексов микроэлементов по сравнению с предложенным диапазоном концентраций значительно снижается степень укоренения растений-регенерантов.
Полученные результаты свидетельствуют о достижении высокой эффективности предлагаемой питательной среды для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза, заключающуюся в обеспечении практически количественной степени укоренения растений-регенерантов с образованием коротких прочных корней, которые легко отмываются. На стадии ризогенеза это является основными показателями эффективности действия предлагаемой питательной среды.
Claims (2)
- Питательная среда для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза, содержащая аммоний азотнокислый, калий азотнокислый, кальций хлористый, магний сернокислый, калий фосфорнокислый, борную кислоту, калий йодистый, а также комплексы железа (III), марганца (II), цинка(II), молибдена (VI), меди(II) и кобальта(II) с оксиэтилидендифосфоновой кислотой и органическую составляющую, включающую миоинозит, тиамин гидрохлорид, пиродоксин гидрохлорид, никотинамид, индолилмасляную кислоту, при следующем весовом соотношении компонентов, мг/л:
-
• Аммоний азотнокислый 825.0 • Калий азотнокислый 950.0 • Кальций хлористый 220.0 • Магний сернокислый 185.0 • Калий фосфорнокислый 85.0 • Борная кислота 6.2 • Калий йодистый 0.83 • Комплексы микроэлементов с оксиэтилидендифосфоновой кислотой: • железный(III) 24.5-27.6 • марганцевый 26.4-29.3 • цинковый 8.2-9.1 • молибденовокислый 0.33-0.37 • медный 0.027-0.030 • кобальтовый 0.029-0.032 • Миоинозит, 100.0 • Никотинамид, 0.5 • Тиамин гидрохдорид, 0.5 • Пиродоксин гидрохлорид 0.5 • Индолилмасляная кислота 0.2 • Сахароза 30000 • Агар-агар 6000 • Вода до 1 л
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021113490A RU2760740C1 (ru) | 2021-05-12 | 2021-05-12 | Питательная среда для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021113490A RU2760740C1 (ru) | 2021-05-12 | 2021-05-12 | Питательная среда для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2760740C1 true RU2760740C1 (ru) | 2021-11-30 |
Family
ID=79174015
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021113490A RU2760740C1 (ru) | 2021-05-12 | 2021-05-12 | Питательная среда для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2760740C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2852063C1 (ru) * | 2024-11-27 | 2025-12-02 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Северо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия" | Питательная среда для размножения подвоя яблони СК 7 in vitro |
-
2021
- 2021-05-12 RU RU2021113490A patent/RU2760740C1/ru active
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| MURASHIGE Т., SKOOG F., А revised medium for rapid growth and bioassays with tobaco tissue culture. Physiol. Plantarum. 1962, V. 15. N 3. P. 473-497. * |
| VAEZ-LIVARI В.IV-th IS on Pistachios and Almonds Eds.: A Javanshan et al., Acta Hort.ln vitro Rooting of Hybrid GF677(Prunus dulcis x Prunus persica), 2006, P.726. * |
| РОГОВАЯ В.В., и др., Особенности микроклонального размножения косточковых культур в условиях in vitro, Известия Российского государственного педагогического университета имени А.И. Герцена, том 5, N 13, 2005, с. 291-302. * |
| РОГОВАЯ В.В., и др., Особенности микроклонального размножения косточковых культур в условиях in vitro, Известия Российского государственного педагогического университета имени А.И. Герцена, том 5, N 13, 2005, с. 291-302. VAEZ-LIVARI В.IV-th IS on Pistachios and Almonds Eds.: A Javanshan et al., Acta Hort.ln vitro Rooting of Hybrid GF677(Prunus dulcis x Prunus persica), 2006, P.726. MURASHIGE Т., SKOOG F., А revised medium for rapid growth and bioassays with tobaco tissue culture. Physiol. Plantarum. 1962, V. 15. N 3. P. 473-497. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2852063C1 (ru) * | 2024-11-27 | 2025-12-02 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Северо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия" | Питательная среда для размножения подвоя яблони СК 7 in vitro |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4666844A (en) | Process for regenerating cereals | |
| US7157620B2 (en) | Enhanced transformation and regeneration of transformed embryogenic pine tissue | |
| Bell et al. | Effect of nutrient media on axillary shoot proliferation and preconditioning for adventitious shoot regeneration of pears | |
| US5731204A (en) | Method for regeneration of coniferous plants by somatic embryogenesis employing polyethylene glycol | |
| Rosati et al. | In Vitro Propagation of Japanese Plum (Prunus salicina Lindl. cv. Calita) 1 | |
| EP0177738A1 (en) | Process for regenerating corn | |
| US20220142076A1 (en) | An in vitro rescue method for immature embryo of avocado | |
| US5731191A (en) | Method for regeneration of coniferous plants by somatic embryogenesis employing polyethylene glycol | |
| RU2760740C1 (ru) | Питательная среда для размножения in vitro косточковой культуры ВЦ-13 (вишня) на стадии ризогенеза | |
| CA1270648A (en) | Process for regenerating corn | |
| CN113068615B (zh) | 荔枝离体再生的方法、产品及其应用 | |
| CN112616668B (zh) | 荔枝“岭南15号”品种离体再生的方法 | |
| Bonga | The effect of various culture media on the formation of embryo-like structures in cultures derived from explants taken from mature Larix decidua | |
| JPS63129983A (ja) | 胚形成によるヒマワリの再生法 | |
| US5750401A (en) | Cultural medium for bamboo shoot sprouting and multiplication and a method for sprouting and multiplication of bamboo plantlets | |
| Kukharchyk et al. | Embryo rescue techniques in Prunus L. breeding | |
| Tilkat et al. | In Vitro Rooting Improvement of Adult Pistachio, Pistacia vera L.'Atli' | |
| Coleman | LONG‐TERM MAINTENANCE OF FERTILE ALGAL CLONES: EXPERIENCE WITH PANDORINA (CHLOROPHYCEAE) 1, 2 | |
| WO1994022286A1 (en) | Method of causing somatic hybridization between two species of algae | |
| US4843005A (en) | Process for regenerating corn | |
| JP2688621B2 (ja) | 有機酸を用いる改良された不定胚形成方法及び培地 | |
| RU2729832C1 (ru) | Способ получения подвойного материала Гизела 5 и ВСЛ-2 в in vitro | |
| Jumin | Plant Regeneration via Somatic Embryogenesis from Protoplast of Clausena Harmandiana (Engl.) Swing and M. Kell | |
| Ancu et al. | In vitro propagation protocol for new stone fruit rootstocks | |
| CN116584391B (zh) | 一种成熟高粱种子体细胞胚胎的诱导方法 |