RU2752140C2

RU2752140C2 - Means and method for improving quality of life of mammals

Info

Publication number: RU2752140C2
Application number: RU2019113332A
Authority: RU
Inventors: Михаил Вячеславович Аверин; Анатолий Викторович Брушков; Владимир Павлович Мельников; Алена Александровна Мельникова
Original assignee: Михаил Вячеславович Аверин; Анатолий Викторович Брушков; Владимир Павлович Мельников; Алена Александровна Мельникова
Priority date: 2019-05-27
Filing date: 2019-05-27
Publication date: 2021-07-23
Also published as: RU2019113332A3; RU2019113332A

Abstract

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: means for improving the quality of life of mammals is proposed, including bacteria and/or lysate of the strain of microorganisms Bacillus species F RNCIM B-10130, as well as a method for improving the quality of life of mammals using the claimed means.EFFECT: group of inventions provides an expansion of the arsenal of means for slowing the onset of painful conditions related to an increase in the age of mammals.2 cl, 3 tbl, 4 ex

Description

Заявляемая группа изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с применением этого средства» относится к медицине и биотехнологии, преимущественно к медицинской генетике, а именно к средствам и способам для увеличения продолжительности жизни и может быть использовано для замедления процесса старения.The claimed group of inventions "A means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool" refers to medicine and biotechnology, mainly to medical genetics, namely to means and methods for increasing life expectancy and can be used to slow down the aging process ...

Увеличение продолжительности жизни человека является одной из важнейших задач геронтологии и, в целом, современной профилактической медицины. В последнее время большое внимание уделяется поиску и изучению препаратов, обладающих свойствами, замедляющими старение.Increasing human life expectancy is one of the most important tasks of gerontology and, in general, modern preventive medicine. Recently, much attention has been paid to the search and study of drugs with anti-aging properties.

Согласно современным представлениям, в основе старения лежит наступающая с возрастом потеря соматическими клетками организма способности к репликации (Hayflick and Moorhead, 1961, Exp.Cell Res. 25: 585-621; Hayflick, 1965, Exp.Cell Res. 37: 614-636; and Hayflick, 1970, Exp. Geront. 5: 291-303) и сопутствующее этому изменение профиля экспрессии генов в стареющих клетках (West, 1994, Arch. Derm. 130: 87-95), что ведет к нарушению их характерных функций. Наступающее с возрастом накопление подобных клеток в органах и тканях организма (причем в первую очередь это касается высокоспециализированных клеток) формирует основу проявления болезней и патологических состояний, характерных для стареющего организма.According to modern concepts, aging is based on the loss of the ability to replicate by somatic cells of the body that occurs with age (Hayflick and Moorhead, 1961, Exp. Cell Res. 25: 585-621; Hayflick, 1965, Exp. Cell Res. 37: 614-636 ; and Hayflick, 1970, Exp. Geront. 5: 291-303) and a concomitant change in the gene expression profile in senescent cells (West, 1994, Arch. Derm. 130: 87-95), leading to disruption of their characteristic functions. The accumulation of such cells in the organs and tissues of the body that occurs with age (and this primarily concerns highly specialized cells) forms the basis for the manifestation of diseases and pathological conditions characteristic of an aging organism.

Причины возрастной потери или извращения репликативной активности клеток до конца не раскрыты. В соответствии с современными представлениями в основе этого могут лежать либо механизмы, детерминирующие лимит репликативной активности клеток, (Harley, 1991, Telomere loss: Mitotic clock or genetic time bomb. Mut. Res. 256:271-282), либо вероятностные механизмы, например, связанное с возрастом накопление соматических мутаций в геноме соматических клеток (Woodruff R.C., et al., J Anti Aging Med, 2003 Spring 6: pp. 29-39).The reasons for the age-related loss or perversion of the replicative activity of cells are not fully disclosed. In accordance with modern concepts, this can be based either on mechanisms that determine the limit of cell replicative activity (Harley, 1991, Telomere loss: Mitotic clock or genetic time bomb. Mut. Res. 256: 271-282), or probabilistic mechanisms, for example age-related accumulation of somatic mutations in the genome of somatic cells (Woodruff RC, et al., J Anti Aging Med, 2003 Spring 6: pp. 29-39).

В ряде исследований, проведенных на модельных организмах, таких как мышь, дрозофила, нематода удалось показать благотворное влияние на процессы старения различных синтетических и природных антиоксидантов или индукторов антиоксидантных ферментов. В пожилом и старческом возрасте резко увеличивается вероятность проявлений различных патологий, совместимых с жизнью, но понижающих ее качество. У млекопитающих к таким патологиям относятся, в частности, потеря зрения (катаракта), ухудшение кожно-волосяного покрова (аллопеция), старческое снижение веса вследствие гибели мышечных и жировых клеток.In a number of studies carried out on model organisms such as mice, Drosophila, and nematode, it was possible to show a beneficial effect on the aging process of various synthetic and natural antioxidants or inducers of antioxidant enzymes. In old and senile age, the likelihood of manifestations of various pathologies compatible with life, but lowering its quality, sharply increases. In mammals, such pathologies include, in particular, loss of vision (cataracts), deterioration of the skin and hair (alopecia), senile weight loss due to the death of muscle and fat cells.

Известно, что витамин Е снижает количество оксидативно-поврежденных белков, липидов и ДНК млекопитающих, в частности мышей (Porta Е.А., Joun N.S., Nitta R.T. Effect of the type of dietary fat at two levels of vitamin E in Wistar male rats during development and aging. I. Life span, serum biochemical parameters and pathological changes // Mech. Ageing Dev. 1980. V. 13. P. 1-39).It is known that vitamin E reduces the amount of oxidatively damaged proteins, lipids and DNA in mammals, in particular in mice (Porta E.A., Joun NS, Nitta RT Effect of the type of dietary fat at two levels of vitamin E in Wistar male rats during I. Life span, serum biochemical parameters and pathological changes // Mech. Aging Dev. 1980. V. 13. P. 1-39).

Недостатком применения витамина E является то, что он, увеличивая качество жизни, не изменяет максимальную продолжительность жизни млекопитающих.The disadvantage of using vitamin E is that, while increasing the quality of life, it does not alter the maximum lifespan of mammals.

Известны также различные способы замедления старения, основанные на применении антиоксидантов, иммуномодуляторов, гормонов, метаболических модуляторов (Ann. N.Y. Acad. Sci., 2002; vol. 959).There are also known various methods of slowing aging, based on the use of antioxidants, immunomodulators, hormones, metabolic modulators (Ann. N.Y. Acad. Sci., 2002; vol. 959).

Известны современные способы лекарственного увеличения продолжительности жизни, которые воздействуют на внутриклеточный генетический аппарат клеток. Таковы, например, способы ингибиторования фермента поли (АДФ-рибоза) полимеразы (Патент US 5874444) или активация фермента теломеразы (Заявка: WO 0031238).Known modern methods of medicinal increase in life expectancy, which affect the intracellular genetic apparatus of cells. Such are, for example, methods for inhibiting the poly (ADP-ribose) polymerase enzyme (US Pat. No. 5,874,444) or activation of the telomerase enzyme (Application: WO 0031238).

Недостатком способов активного лекарственного воздействия на генетический аппарат стареющей клетки является опасность непредсказуемых побочных эффектов (Cellular senescence, aging and cancer. Campisi J, Scientific World Journal, 2001, Jan 11:1 Suppl 3 65).The disadvantage of methods of active drug action on the genetic apparatus of an aging cell is the danger of unpredictable side effects (Cellular senescence, aging and cancer. Campisi J, Scientific World Journal, 2001, Jan 11: 1 Suppl 3 65).

Известен штамм бактерий Bacillus subtilis 1779, близкий к используемому в заявляемом изобретении штамму, выделенный в естественных условиях, проявляющий широкий спектр антагонистической активности, а также иммуномодулирующую активность.Known bacterial strain Bacillus subtilis 1779, close to used in the claimed invention strain, isolated in vivo, exhibiting a wide range of antagonistic activity, as well as immunomodulatory activity.

Известен также штамм бактерий Bacillus macroides Excel 00, выделенный из мицелия гриба Agaricus Blazei Murill, проявляющий иммуномодулирующую активность, геропротекторные свойства, и ряд других качеств.Also known is the bacterial strain Bacillus macroides Excel 00, isolated from the mycelium of the fungus Agaricus Blazei Murill, exhibiting immunomodulatory activity, geroprotective properties, and a number of other qualities.

Недостатком известных описанных выше аналогов, такие как штамм бактерий Bacillus subtilis 1779, близкий к используемому штамму, выделенный в естественных условиях, проявляющий широкий спектр антагонистической активности, а также иммуномодулирующую активность и штамм бактерий Bacillus macroides Excel 00, выделенный из мицелия гриба Agaricus Blazei Murill, также проявляющий иммунную активность и геропротекторные свойства, и ряд других свойств имеют ограниченный диапазон питательных средств для культивирования и отсутствие данных о иммуномодулирующей способности и фармакокинетике в исследованиях in vivo, кроме того, сложности работы с живыми культурами вынуждают вести поиск иных микроорганизмов с более высокими потребительскими характеристиками.The disadvantage of the known analogs described above, such as the bacterial strain Bacillus subtilis 1779, close to the strain used, isolated in vivo, exhibiting a wide spectrum of antagonistic activity, as well as immunomodulatory activity and the bacterial strain Bacillus macroides Excel 00, isolated from the mycelium of the fungus Agaricus Blazei Murill, also exhibiting immune activity and geroprotective properties, and a number of other properties have a limited range of nutrients for cultivation and the lack of data on immunomodulatory ability and pharmacokinetics in in vivo studies, in addition, the difficulties of working with live cultures force us to search for other microorganisms with higher consumer characteristics ...

В настоящее время отсутствуют какие-либо способы, которые проявляли бы способствовать увеличению продолжительности жизни млекопитающих и человека или эффективно замедлить наступление болезненных состояний, связанных с увеличением возраста млекопитающих, в том числе человека. В связи с этим отсутствует возможность принять какое-либо известное техническое решение за прототип настоящего изобретения.At present, there are no methods that would help to increase the lifespan of mammals and humans or effectively slow down the onset of disease states associated with the increase in the age of mammals, including humans. In this regard, there is no possibility to accept any known technical solution for the prototype of the present invention.

Технической проблемой настоящего изобретения является создание эффективного способа замедления наступления болезненных состояний, связанных с увеличением возраста млекопитающих, при отсутствии прямого воздействия на генетический аппарат стареющих клеток, в частности снижения половой активности и способности к воспроизводству, климакса, изменения глюкозотолерантности, снижения когнитивных и/или мнестических функций, снижения резистентности к стрессу, развития склероза органов и тканей.The technical problem of the present invention is to provide an effective method for slowing down the onset of disease states associated with an increase in the age of mammals in the absence of a direct effect on the genetic apparatus of aging cells, in particular, a decrease in sexual activity and reproductive capacity, menopause, changes in glucose tolerance, a decrease in cognitive and / or mnestic functions, reducing resistance to stress, the development of sclerosis of organs and tissues.

Техническим результатом заявленной группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» является расширение арсенала средств для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и разработка способа их применения для замедления процесса старения.The technical result of the claimed group of inventions "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool" is to expand the arsenal of means to increase the lifespan of mammals and develop a method for their use to slow down the aging process.

1. Поставленный технический результат достигается тем, что, согласно изобретению, средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих содержит действующее вещество, в концентрации 15.0-20.0 мг/л, в качестве которого используют лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., причем, согласно изобретению, он включает влияние на биохимические показатели жизнедеятельности клеток действующего вещества, которое берут в концентрации 15-20 мг/л, а в качестве действующего вещества используют лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp.на протяжении всей жизни, посредством перорального введения и/или для восстановления барьерной функции кожи, посредством местного введения лизата, непосредственно, в кожу субъекта, а также используют для повышения физиологической активности и продления жизни, и применяют в качестве пищевой добавки в лиофилизированном виде и/или в качестве раствора.1. The stated technical result is achieved by the fact that, according to the invention, the agent for increasing the lifespan of mammals contains an active substance at a concentration of 15.0-20.0 mg / l, which is used as a lysate of a microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., and, according to the invention, it includes the effect on the biochemical parameters of the vital activity of cells of the active substance, which is taken at a concentration of 15-20 mg / l, and the lysate of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus is used as the active substance sp. throughout life, through oral administration and / or to restore the barrier function of the skin, through local administration of the lysate, directly into the skin of the subject, and also used to increase physiological activity and prolong life, and is used as a dietary supplement in lyophilized form and / or as a solution.

В отличие от известных аналогов штамм микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. (см. RU №2413760, опубл. 10.11.2010) по настоящему изобретению, выявленный авторами-заявителями, имеет неограниченный диапазон питательных средств для его культивирования. Благодаря многочисленным исследованиям, в данном штамме были определены иммуностимулирующие и геропротекторные свойства. Расширенный арсенал средств для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и разработка способа их применения для замедления процесса старения решает техническую проблему, и достигает поставленный технический результат посредством использования лизированного штамма реликтовых почвенных бактерий-сапрофитов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., с отчетливо выраженными иммуностимулирующими и геропротекторными свойствами. Штамм реликтовых почвенных бактерий-сапрофитов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. задепонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП ГосНИИгенетика.In contrast to the known analogs, the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. (see RU No. 2413760, publ. 10.11.2010) according to the present invention, identified by the authors-applicants, has an unlimited range of nutrients for its cultivation. Thanks to numerous studies, immunostimulating and geroprotective properties have been determined in this strain. An expanded arsenal of means for increasing the lifespan of mammals and the development of a method for their use to slow down the aging process solves a technical problem, and achieves the set technical result by using a lysed strain of relict soil bacteria-saprophytes Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., With clearly expressed immunostimulating and geroprotective properties. The strain of relict soil bacteria-saprophytes Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. Donated in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms (VKPM) FSUE GosNIIgenetics.

В отличие от аналога - штамма бактерий Bacillus subtilis 1779, близкого к используемому штамму микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., выделенному в естественных условиях, преимуществом штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., является то, что, именно, благодаря его способности индуцировать полезное действие на пищеварительный тракт человека, а также на организм в целом, которое, в свою очередь, способствует увеличению мышечной силы, физической и умственной активности, а также стимулирует деятельность иммунной системы, он может быть использован для увеличения продолжительности жизни млекопитающих, в частности мышей, крыс, кроликов и других животных, и человека, в том числе. В экспериментах с его культурой на млекопитающих наблюдается увеличение мышечной силы, увеличение физической и умственной активности, которое может быть использовано для замедления процесса старения. Таким образом, заявляемое изобретение «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» может быть использовано для увеличения качества и продолжительности жизни млекопитающих и человека. Кроме того, в отличие от аналогов, преимущества заявляемой группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» обеспечивает повышение качества жизни для млекопитающих пациентов, т.к., используя влияние биохимических показателей жизнедеятельности клеток, посредством перрорального введения действующего вещества, обеспечивает возможность менее травматичного и надежного оказания медицинских услуг, что, в свою очередь, не только дает значительное расширение области применения, но и существенно повышает качество оказания услуг, а также повышает качество жизни пациентов в целом.In contrast to the analogue - the bacterial strain Bacillus subtilis 1779, close to the used strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., Isolated in vivo, the advantage of the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp ., is that, precisely, due to its ability to induce a beneficial effect on the human digestive tract, as well as on the body as a whole, which, in turn, helps to increase muscle strength, physical and mental activity, and also stimulates the activity of the immune system, it can be used to increase the lifespan of mammals, in particular mice, rats, rabbits and other animals, including humans. In experiments with its culture on mammals, there is an increase in muscle strength, an increase in physical and mental activity, which can be used to slow down the aging process. Thus, the claimed invention "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool" can be used to increase the quality and lifespan of mammals and humans. In addition, in contrast to analogues, the advantages of the claimed group of inventions "Means for increasing the life expectancy of mammals and a method for increasing the life expectancy of mammals using this means" provides an increase in the quality of life for mammalian patients, because, using the influence of biochemical parameters of the vital activity of cells, through oral administration of the active substance, provides the possibility of less traumatic and reliable provision of medical services, which, in turn, not only provides a significant expansion of the scope, but also significantly improves the quality of services, and also improves the quality of life of patients in general.

Таким образом, можно сделать общий вывод, что заявителем достигнуты поставленный технический результат заявленной группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» в виде расширения арсенала средств для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и разработан способ применения расширенного арсенала средств для замедления процесса старения млекопитающих, продуцируемого штаммом микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. - вещества, действующего долговременно, а также достигнуто решение технической проблемы в виде создания эффективного способа замедления наступления болезненных состояний, связанных с увеличением возраста млекопитающих, при отсутствии прямого воздействия на генетический аппарат стареющих клеток, в частности замедления наступления снижения половой активности и способности к воспроизводству, климакса, изменения глюкозотолерантности, снижения когнитивных и/или мнестических функций, снижения резистентности к стрессу, замедления наступления развития склероза органов и тканей.Thus, it can be concluded that the applicant has achieved the technical result of the claimed group of inventions "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool" in the form of expanding the arsenal of means for increasing the lifespan of mammals and has developed a method of using an extended arsenal of means for slowing down the aging process of mammals produced by a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. - a substance that acts for a long time, and also achieved a solution to a technical problem in the form of creating an effective way to slow down the onset of painful conditions associated with an increase in the age of mammals, in the absence of a direct effect on the genetic apparatus of aging cells, in particular, slowing down the onset of a decrease in sexual activity and reproductive capacity menopause, changes in glucose tolerance, decreased cognitive and / or mnestic functions, reduced resistance to stress, slowing the onset of the development of sclerosis of organs and tissues.

Приведенные примеры осуществления заявленной группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» показывают эффективность лизата и бактерий штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. при использовании по назначению в области ветеринарии и медицины. Применение заявленной группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» при медицинском вмешательстве основано на применении средств для увеличения продолжительности жизни и разработки способа применения этих средств для замедления процесса старения, продуцируемого штаммом микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. - вещества, действующего долговременно, с наименьшим ущербом для здоровья пациентов, с повышением их (пациентов) качества жизни. Таким образом, заявленная группа изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» удовлетворяет критерию «новизна», предъявляемому к изобретениям, так как при определении уровня техники не обнаружены средства для увеличения продолжительности жизни для млекопитающих, в том числе и человека, и способа их применения для замедления процесса старения, с применением лизата и бактерий предлагаемого продуцируемого штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. - вещества, действующего долговременно, которому присущи признаки, идентичные (то есть совпадающие по исполняемой ими функции и форме выполнения этих признаков) всем признакам, перечисленным в описании изобретения, включая характеристику назначения. Применение по основному назначению заявленной группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства», в том числе для замедления процесса старения, с применением лизата и бактерий продуцируемого штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., как вещества, действующего долговременно, которому присущи признаки, идентичные (то есть совпадающие по исполняемой ими функции и форме выполнения этих признаков) всем признакам, перечисленным в формуле изобретения при медицинском вмешательстве, имеет изобретательский уровень, поскольку не выявлены технические решения, имеющие признаки, совпадающие с признаками заявленного технического решения, и не установлена известность влияния этих признаков на указанный технический результат.The above examples of the implementation of the claimed group of inventions "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool" show the effectiveness of the lysate and bacteria of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. when used as directed in the field of veterinary medicine and medicine. The use of the claimed group of inventions "An agent for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this agent" in medical intervention is based on the use of agents for increasing the lifespan and the development of a method for using these agents to slow down the aging process produced by a strain of microorganisms Bacillus species F , VKPM B-10130, genera Bacillus sp. - a substance that acts for a long time, with the least damage to the health of patients, with an increase in their (patients') quality of life. Thus, the claimed group of inventions "An agent for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this agent" meets the criterion of "novelty" presented to the inventions, since when determining the level of technology, no means were found to increase the lifespan of mammals, including humans, and the method of their use to slow down the aging process, using the lysate and bacteria of the proposed produced strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. - a substance that acts for a long time, which has features that are identical (that is, coincide in the function they perform and the form of these features) to all the features listed in the description of the invention, including the characteristics of the purpose. Application for the main purpose of the claimed group of inventions "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool", including for slowing down the aging process, using the lysate and bacteria of the produced strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130 , of the genera Bacillus sp., as a substance that acts for a long time, which has characteristics that are identical (that is, coincide in the function they perform and the form of performing these characteristics) to all the characteristics listed in the claims in medical intervention, has an inventive step, since no technical solutions having features that coincide with the features of the claimed technical solution, and the knowledge of the influence of these features on the specified technical result has not been established.

Заявленная группа изобретений может быть реализована в промышленном производстве в деятельности организаций животноводства и здравоохранения, посредством использования известных стандартных технических устройств и оборудования. Это соответствует критерию «промышленная применимость», предъявляемому к заявляемой группе изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства».The claimed group of inventions can be implemented in industrial production in the activities of animal husbandry and health care organizations, through the use of well-known standard technical devices and equipment. This corresponds to the criterion of "industrial applicability" applied to the claimed group of inventions "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool."

Сущность заявленной группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» поясняется примерами конкретного выполнение и заключается в том, что оно относится, непосредственно, к применению бактерии и полученного лизата бактерии штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp.The essence of the claimed group of inventions "An agent for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this agent" is illustrated by examples of specific implementation and lies in the fact that it relates directly to the use of bacteria and the resulting bacterial lysate of a bacterial strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp.

Данные примеров конкретного применения средства отражены в таблицах 1, 2, 3 (см. в графической части).The data of examples of specific application of the tool are reflected in tables 1, 2, 3 (see in the graphic part).

Из бактерий штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., которые предварительно выращивали в условиях культивирования, готовили лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., которым являлся стерильный фильтрат культуральной жидкости. Лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. приготавливали следующим образом. Первоначально бактерии штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. культивировали в течение 2-х месяцев при температуре 37°С, после чего их спонтанно лизировали, культуральную жидкость фильтровали и затем выделяли полученный продукт, для чего полученный стерильный фильтрат высушивали. Из высушенного стерильного фильтрата изготавливали «наружное лекарственное средство», т.е. лекарственное средство, содержащее лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp, который наносили на кожу млекопитающих или человека. Предпочтительно, предложенное наружное лекарственное средство заявляемой группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с использованием этого средства» может быть использовано для увеличения качества и продолжительности жизни млекопитающих и человека.From bacteria of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., Which were preliminarily grown under cultivation conditions, a lysate of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., Which was a sterile filtrate of the culture liquid, was prepared. Lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. prepared as follows. Initially, bacteria of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. cultivated for 2 months at a temperature of 37 ° C, after which they were spontaneously lysed, the culture liquid was filtered and then the resulting product was isolated, for which the resulting sterile filtrate was dried. From the dried sterile filtrate, an "external drug" was prepared, i. E. a medicinal product containing a lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp, which was applied to the skin of mammals or humans. Preferably, the proposed external drug of the claimed group of inventions "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool" can be used to increase the quality and lifespan of mammals and humans.

В средстве для увеличения продолжительности жизни млекопитающих лизат пробиотической бактерии продуцируемого штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. применяли также перорально как пищевую добавку для повышения физиологической активности и продления жизни, а также для местного нанесения на кожу для улучшения и/или восстановления барьерной функции кожи. В способе увеличения продолжительности жизни млекопитающих для повышения физиологической активности и продления жизни млекопитающих применяли указанный лизат. Кроме того, указанный лизат использовали для улучшения и/или восстановления барьерной функции кожи в составе косметической композиции, фармацевтической композиции для местного применения, композиции, составленной для введения в кожу.In the means for increasing the lifespan of mammals, the lysate of the probiotic bacterium of the produced strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, of the genera Bacillus sp. was also used orally as a food supplement to increase physiological activity and prolong life, as well as for topical application to the skin to improve and / or restore the barrier function of the skin. In the method of increasing the lifespan of mammals, the specified lysate was used to increase the physiological activity and prolong the life of mammals. In addition, the specified lysate was used to improve and / or restore the barrier function of the skin in the composition of a cosmetic composition, a pharmaceutical composition for topical use, a composition formulated for administration to the skin.

Также указанный лизат использовали в составе противобактериальной композиции для применения в кишечнике при инфекциях сальмонеллы и стафилококка (Salmonella и Staphylococcus). Поскольку кишечник млекопитающихся является интенсивно колонизированным бактериями, микробиота кишечника играет множество ролей в нормальной физиологии, включая нутриентную секвестрацию (Backhed, F., R.E. Ley, J.L. Sonnenburg, D.A Peterson, and J.I. Gordon. 2005. Host-Bacterial Mutualism in the Human Intestine. Science 307:1915-1920) и развитие нормальных иммунных ответов (Helgeland, L, J.T. Vaage, В. Rolstad, Т. Midtvedt, and P. Brandtzaeg. 1996. Microbial colonization influences composition and T-cell receptor V beta repertoire of intraepithelial lymphocytes in rat intestine. Immunology 89:494-501).Also, the specified lysate was used in the composition of the antibacterial composition for use in the intestine for infections of Salmonella and Staphylococcus (Salmonella and Staphylococcus). Because the mammalian gut is heavily colonized by bacteria, the gut microbiota plays many roles in normal physiology, including nutrient sequestration (Backhed, F., RE Ley, JL Sonnenburg, DA Peterson, and JI Gordon. 2005. Host-Bacterial Mutualism in the Human Intestine. Science 307: 1915-1920) and the development of normal immune responses (Helgeland, L, JT Vaage, B. Rolstad, T. Midtvedt, and P. Brandtzaeg. 1996. Microbial colonization influences composition and T-cell receptor V beta repertoire of intraepithelial lymphocytes in rat intestine Immunology 89: 494-501).

В микробиоте нормального кишечника имеются так называемые пробиотические бактерии. Их прием внутрь предотвращает или лечит желудочно-кишечные нарушения, такие как ассоциированная с антибиотиком диарея (Valdez, J.С, М.С. Peral, М. Rachid, М. Santana, and G. Perdigon. 2005. Interference of Lactobacillus plantarum with Pseudomonas aeruginosa in vitro and in infected burns: the potential use of probiotics in wound treatment. Clinical Microbiology & Infection 11:472-479) и воспалительные заболевания кишечника (Peral, М.С, М.М. Rachid, N.M. Gobbato, M.A. H. Martinez, and J.C. Valdez. 2009. Interleukin-8 production by polymorphonuclear leukocytes from patients with chronic infected leg ulcers treated with Lactobacillus plantarum. Clinical Microbiology and Infection 16:281-286). Механизмы, лежащие в основе этих эффектов, являются, по большей части, неизвестными, тем не менее, в ходе исследований было предположено, что пробиотики могут ингибировать колонизацию кишечника патогенами.The microbiota of the normal intestine contains the so-called probiotic bacteria. Ingestion prevents or treats gastrointestinal disorders such as antibiotic-associated diarrhea (Valdez, J. C, M. S. Peral, M. Rachid, M. Santana, and G. Perdigon. 2005. Interference of Lactobacillus plantarum with Pseudomonas aeruginosa in vitro and in infected burns: the potential use of probiotics in wound treatment.Clinical Microbiology & Infection 11: 472-479) and inflammatory bowel diseases (Peral, M.S., M.M. Rachid, NM Gobbato, MAH Martinez , and JC Valdez. 2009. Interleukin-8 production by polymorphonuclear leukocytes from patients with chronic infected leg ulcers treated with Lactobacillus plantarum. Clinical Microbiology and Infection 16: 281-286). The mechanisms underlying these effects are largely unknown, however, studies have suggested that probiotics may inhibit pathogen colonization of the intestine.

В работе in vitro было предположено, что пробиотики используют различные механизмы для ингибирования патогенов, включая прямое конкурирование за связывающие участки на эпителиальных клетках (Coconnier, М.Н., M.F. Bernet, S. Kernels, G. Chauviere, J. Fourniat, and A.L. Servin. 1993. Inhibition of adhesion of enteroinvasive pathogens to human intestinal Caco-2 cells by Lactobacillus acidophilus strain LB decreases bacterial invasion. FEMS microbiology letters 110:299-306) и конкурирование с патогенными бактериями за нутриенты. Пробиотические организмы также способны вырабатывать ингибирующие вещества, такие как бактериоцины и органические кислоты (Karska-Wysocki, В., М. Bazo, and W. Smoragiewicz. 2010. Antibacterial activity of Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Microbiological Research 165:674-86), которые могут уничтожать или ограничивать рост патогенов.In vitro work has suggested that probiotics use a variety of mechanisms to inhibit pathogens, including direct competition for binding sites on epithelial cells (Coconnier, M.N., MF Bernet, S. Kernels, G. Chauviere, J. Fourniat, and AL Servin. 1993. Inhibition of adhesion of enteroinvasive pathogens to human intestinal Caco-2 cells by Lactobacillus acidophilus strain LB decreases bacterial invasion. FEMS microbiology letters 110: 299-306) and competition with pathogenic bacteria for nutrients. Probiotic organisms are also capable of producing inhibitory substances such as bacteriocins and organic acids (Karska-Wysocki, B., M. Bazo, and W. Smoragiewicz. 2010. Antibacterial activity of Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSAccus aureus) Microbiological Research 165: 674-86) that can kill or limit the growth of pathogens.

Некоторые пробиотики повышающе регулируют выработку муцина эпителиальными клетками, тем самым предотвращая прикрепление патогена (Mack, D.R., S. Michail, S. Wei, L. McDougall, and M. A. Hollingsworth. 1999. Probiotics inhibit enteropathogenic E. coll adherence in vitro by inducing intestinal mucin gene expression. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 276:G941-950).Some probiotics up-regulate epithelial cell mucin production, thereby preventing pathogen attachment (Mack, DR, S. Michail, S. Wei, L. McDougall, and MA Hollingsworth. 1999. Probiotics inhibit enteropathogenic E. coll adherence in vitro by inducing intestinal mucin gene expression Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 276: G941-950).

Пробиотики могут также вырабатывать биологические поверхностно-активные вещества, которые позволяют прикрепление пробиотика к клеткам, при этом ингибируя прикрепление патогенных бактерий к клеткам (Peral, М.С, М.М. Rachid, N.M. Gobbato, М.А. Н. Martinez, and J.C. Valdez. 2009. lnterleukin-8 production by polymorphonuclear leukocytes from patients with chronic infected leg ulcers treated with Lactobacillus plantarum. Clinical Microbiology and Infection 16:281-286).Probiotics can also produce biological surfactants that allow the attachment of the probiotic to cells while inhibiting the attachment of pathogenic bacteria to cells (Peral, M.S., M.M. Rachid, NM Gobbato, M.A.H. Martinez, and JC Valdez. 2009. lnterleukin-8 production by polymorphonuclear leukocytes from patients with chronic infected leg ulcers treated with Lactobacillus plantarum. Clinical Microbiology and Infection 16: 281-286).

Следует отметить, что ряд бактерий, живущих в кишечнике, обитают и в окружающей среде, в частности, в мерзлых породах. К ним относятся и некоторые представители рода Bacillus, в том числе и пробиотические бактерии продуцируемого штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. В криосфере Земли во льду, мерзлых породах и отрицательно-температурных водах (криопэгах) установлены многочисленные и разнообразные живые палеомикроорганизмы: прокариоты, зеленые водоросли, цианобактерии, актиномицеты, грибы и дрожжи. Это единственные известные организмы, сохранившие жизнеспособность в течение геологического времени. Они обнаружены во всех полярных регионах до глубин 400 м (Канадская Арктика), среднегодовых температурах до пород до -250С (Антарктида) и концентрации солей NaCl до 170-300 г/л (Колымская низменность), Возраст их соответствует возрасту льда или длительности пребывания пород в мерзлом состоянии, а самые древние предположительно датируются 3 млн. лет в погребенных ледниках и заключенных в них грунтовых горизонтах в Антарктиде. Предлагаемый штамм микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. при 370°С палочковидный, спорообразующий, споры центрально-терминальные.It should be noted that a number of bacteria living in the intestines also live in the environment, in particular, in frozen rocks. These include some representatives of the genus Bacillus, including probiotic bacteria of the produced strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. In the cryosphere of the Earth, in ice, frozen rocks and freezing-temperature waters (cryopegs), numerous and diverse living paleomicroorganisms have been established: prokaryotes, green algae, cyanobacteria, actinomycetes, fungi and yeasts. These are the only organisms known to have survived geological time. They are found in all polar regions to depths of 400 m (Canadian Arctic), average annual temperatures down to 250C (Antarctica) and NaCl salt concentrations up to 170-300 g / L (Kolyma lowland), Their age corresponds to the age of ice or the duration of the stay of rocks in a frozen state, and the most ancient are supposedly dated to 3 million years in buried glaciers and the ground horizons enclosed in them in Antarctica. The proposed strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. at 370 ° C rod-shaped, spore-forming, spores are central-terminal.

Спорообразование активное на твердой агаризованной среде. Значительно хуже спорулирует в жидкой среде. На плотных питательных средах образуют непрозрачные блестящие мягкие колонии желтоватого цвета. Морфологические признаки: неподвижные прямые палочки с закругленными концами, 1-1,2×3-10 мкм, по 1-2, цепочки до 7, эндоспоры бациллярного типа. Грамположительные. При пассировании через кровь животных клетки утолщаются и становятся короче (до 3 мкм). Изначальный анализ штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp.выявил криптическую копийную плазмиду размером приблизительно 2 тпо и обладает высокой устойчивостью к разрушению ультразвуком и ферментативной обработке. Хорошо хранится. Лиофильное высушивание в среде САЖ (желатин - 12 г/л, сахароза - 100 г/л) - хранение при 4-10°С. Хранение в 15% глицерине при (-60°С). Проведено тестирование штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. на млекопитающих, в частности на лабораторных мышах, у которых оценивалось его влияние на продолжительность жизни и на морфофизиологическую активность тимуса и селезенки, активность клеточного и гуморального иммунитета, мышечная сила, поведенческие реакции др. показатели. Кроме того, штамм микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. исследовали в качестве иммуномодулирующих биокорректоров, способных запускать врожденный иммунный ответ и вызывать противоопухолевое действие на животных моделях млекопитающих. Активация врожденного иммунного ответа была исследована в экспериментах: 1) - по изменению метаболической активности макрофагов под действием клеток штаммов микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., введенных интраперитонеально мышам линии СВА (самкам); 2) - по изменению неспецифического цитотоксического действия Т-лимфоцитов, активированных путем интраперитонеального введения штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. мышам линии СВА, против клеток опухоли RLS. Установлено, что интраперитонеальное введение его животным, в диапазоне доз 10⁴-5×10⁶ микробных тел на животное, приводит к дозозависимой активации метаболизма интраперитонеальных макрофагов в 1.3-2.3 раза. Цитотоксическое действие Т-лимфоцитов, полученных из селезенки животных после интраперитонеального введения штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. в диапазоне доз 10⁴-5×10⁶ микробных тел, было исследовано in vitro против клеток лимфосаркомы мыши RLS. Было обнаружено, что достоверная активация неспецифического клона Т-лимфоцитов происходит при дозе 5×10⁶ микробных тел: цитотоксическое действие таких Т-лимфоцитов против клеток лимфосаркомы мыши RLS было в 1.8 раз выше, чем действие Т-лимфоцитов без активации бактериями. Таким образом, усиление метаболизма макрофагов и активация цитотоксического действия Т-лимфоцитов под действием штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp.свидетельствует об активации врожденного иммунитета. Эксперименты по противоопухолевому действию штамма, проведенные на модели гепатомы А1 мышей (мыши линии A/Sn), показали, что подкожное однократное введение в дозе 2×10⁴ микробных тел на животное приводит к снижению веса опухоли у самок (на 10-20%).Active spore formation on a solid agar medium. It sporulates much worse in a liquid medium. On solid nutrient media, they form opaque shiny soft yellowish colonies. Morphological features: motionless straight rods with rounded ends, 1-1.2 × 3-10 microns, 1-2 each, chains up to 7, bacillary-type endospores. Gram positive. When passaged through the blood of animals, the cells thicken and become shorter (up to 3 microns). Initial analysis of the Bacillus species F strain of microorganisms, VKPM B-10130, of the genera Bacillus sp. Revealed a cryptic copy plasmid of approximately 2 mbp and is highly resistant to sonication and enzymatic treatment. Stores well. Freeze drying in a SAG medium (gelatin - 12 g / l, sucrose - 100 g / l) - storage at 4-10 ° C. Store in 15% glycerin at (-60 ° C). Testing of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. on mammals, in particular on laboratory mice, in which its effect on life expectancy and on the morphophysiological activity of the thymus and spleen, the activity of cellular and humoral immunity, muscle strength, behavioral reactions, and other indicators was assessed. In addition, the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. investigated as immunomodulatory biocorrectors capable of triggering an innate immune response and causing an antitumor effect in animal models of mammals. The activation of the innate immune response was investigated in experiments: 1) - by the change in the metabolic activity of macrophages under the influence of cells of microorganism strains Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., Injected intraperitoneally in CBA mice (females); 2) - by changing the nonspecific cytotoxic action of T-lymphocytes activated by intraperitoneal administration of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. CBA mice, against RLS tumor cells. It has been established that its intraperitoneal administration to animals, in the dose range of 10 ⁴ -5 × 10 ⁶ microbial bodies per animal, leads to a dose-dependent activation of the metabolism of intraperitoneal macrophages by 1.3-2.3 times. The cytotoxic effect of T-lymphocytes obtained from the spleen of animals after intraperitoneal administration of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. in the dose range of 10 ⁴ -5 × 10 ⁶ microbial bodies, was investigated in vitro against RLS mouse lymphosarcoma cells. It was found that significant activation of a nonspecific clone of T-lymphocytes occurs at a dose of 5 × 10 ⁶ microbial bodies: the cytotoxic effect of such T-lymphocytes against lymphosarcoma cells in RLS mice was 1.8 times higher than the effect of T-lymphocytes without activation by bacteria. Thus, an increase in the metabolism of macrophages and activation of the cytotoxic effect of T-lymphocytes under the influence of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. Indicates the activation of innate immunity. Experiments on the antitumor effect of the strain, carried out on a model of hepatoma A1 of mice (mice of the A / Sn line), showed that a single subcutaneous injection at a dose of 2 × 10 ⁴ microbial bodies per animal leads to a decrease in tumor weight in females (by 10-20%) ...

Таким образом, проведенные эксперименты подтвердили, что действие штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. повышает качества и жизни млекопитающих и он может быть использован для увеличения продолжительности жизни, т.е. для замедления процесса старения.Thus, the experiments carried out confirmed that the action of the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, of the genera Bacillus sp. improves the quality and life of mammals and it can be used to increase life expectancy, i.e. to slow down the aging process.

Лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. является продуктом расщепления бактериальных клеток на фрагменты, которые включают в себя фрагменты клеточной стенки бактерий и их внутриклеточного содержимого. Частички клеточной стенки взаимодействуют с рецепторами иммунокомпетентных клеток, то есть тех клеток, которые, находясь в разных слоях слизистой оболочки дыхательных путей и в покрывающей ее слизи обеспечивают защиту дыхательных путей от вирусов и бактерий, проникающих вместе с вдыхаемым воздухом, т.е. бактериальные лизаты штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. подходят для лечения детей, так как они не наносят вреда микрофлоре, не вызывают побочных реакций и хорошо сочетаются с другими лекарствами: жаропонижающими, сосудосуживающими, антибиотиками. При лечении неосложненных инфекций они помогают вообще избежать применения антибиотиков. Иммуномодуляторы на основе лизатов бактерий штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. эффективны на любой стадии болезни. Применение упомянутых лизатов для профилактики ОРВИ снижает риск развития неприятных осложнений. Кроме того, лизаты штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. не могут вызывать воспалительную реакцию, т.к. не являются живыми микроорганизмами, и распознаются вполне однозначно рецепторами иммунных клеток, как угроза к развитию заболевания. Кожные симбионты могут ограничивать колонизацию кожи патогенными бактериями (Vanderhoof, J.A., D.B. Whitney, D.L. Antonson, T.L. Hanner, J.V. Lupo, and R.J. Young. 1999. Lactobacillus GG in the prevention of antibiotic-associated diarrhoea in children. The Journal of Pediatrics 135:564-568).Lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. is the product of the cleavage of bacterial cells into fragments, which include fragments of the bacterial cell wall and their intracellular contents. Particles of the cell wall interact with the receptors of immunocompetent cells, that is, those cells that, being in different layers of the mucous membrane of the respiratory tract and in the mucus covering it, protect the respiratory tract from viruses and bacteria that penetrate along with the inhaled air, i.e. bacterial lysates of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. are suitable for the treatment of children, since they do not harm the microflora, do not cause side reactions and are well combined with other drugs: antipyretic, vasoconstrictor, antibiotics. When treating uncomplicated infections, they help avoid the use of antibiotics altogether. Immunomodulators based on lysates of bacteria of the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. effective at any stage of the disease. The use of these lysates for the prevention of ARVI reduces the risk of developing unpleasant complications. In addition, lysates of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. cannot cause an inflammatory reaction, because are not living microorganisms, and are recognized quite unambiguously by the receptors of immune cells as a threat to the development of the disease. Cutaneous symbionts can limit pathogenic bacteria colonization of the skin (Vanderhoof, JA, DB Whitney, DL Antonson, TL Hanner, JV Lupo, and RJ Young. 1999. Lactobacillus GG in the prevention of antibiotic-associated diarrhoea in children. The Journal of Pediatrics 135: 564-568).

Исследования показывают, что некоторые кожные заболевания (такие как вульгарные угри и атопический дерматит) могут быть связаны с разрушениями нормальной микрофлоры (Balma-Mena, А., I. Lara-Corrales, J. Zeller, S. Richardson, M.J. McGavin, M. Weinstein, and E. Pope. 2011. Colonization with community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus in children with atopic dermatitis: a cross-sectional study. International Journal of Dermatology 50:682-688). (Bek-Thomsen, M., H.B. Lomholt, and M. Kilian. 2008. Acne is Not Associated with Yet-Uncultured Bacteria. Journal of Clinical Microbiology 46:3355-3360), (Burkhart, C. N.. and C.G. Burkhart. 2003. Microbiology's principle of biofilms as a major factor in the pathogenesis of acne vulgaris. International Journal of Dermatology 42:925-927). Следовательно, кожная микрофлора может подвергаться модуляции с применением специфических кожных симбионтов для стимулирования здоровья или ингибирования заболевания (Lai, Y., A.L. Cogen, K.А. Radek, H.J. Park, D.T. MacLeod, A. Leichtle, A.F. Ryan, A. Di Nardo, and R.L. Gallo. 2010. Activation of TLR2 by a Small Molecule Produced by Staphylococcus epidermidis Increases Antimicrobial Defense against Bacterial Skin Infections. J Invest Dermatol 30:2211-2221). (Lai, Y., A. Di Nardo, T. Nakatsuji, A. Leichtle, Y. Yang, A. L. Cogen, Z.-R. Wu, L.V. Hooper, R. R. Schmidt, S. von Aulock, K.A. Radek, C.-M. Huang, A.F. Ryan, and R.L. Gallo. 2009. Commensal bacteria regulate Toll-like receptor 3-dependent inflammation after skin injury. Nat Med 15:1377-1382). Однако, кожные симбиотические бактерии при некоторых обстоятельствах могут являться патогенными (Edmond, М.В., S.E. Wallace, D.K. McClish, M.A. Pfaller, R.N. Jones, and R.P. Wenzel. 1999. Nosocomial Bloodstream Infections in United States Hospitals: A Three-Year Analysis. Clinical Infectious Diseases 29:239-244). В отличие от этого, пробиотики, как правило, считаются безопасными (GRAS) и, следовательно, такие бактерии потенциально могут быть применены местно, если они имеют терапевтическое значение (FAO/WHO. 2002. Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food: Report of a Joint FAO/WHO Working Group on Drafting Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food).Studies show that some skin diseases (such as acne vulgaris and atopic dermatitis) may be associated with the destruction of normal microflora (Balma-Mena, A., I. Lara-Corrales, J. Zeller, S. Richardson, MJ McGavin, M. Weinstein, and E. Pope. 2011. Colonization with community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus in children with atopic dermatitis: a cross-sectional study. International Journal of Dermatology 50: 682-688). (Bek-Thomsen, M., HB Lomholt, and M. Kilian. 2008. Acne is Not Associated with Yet-Uncultured Bacteria. Journal of Clinical Microbiology 46: 3355-3360), (Burkhart, CN. And CG Burkhart. 2003. Microbiology's principle of biofilms as a major factor in the pathogenesis of acne vulgaris. International Journal of Dermatology 42: 925-927). Therefore, skin microflora can be modulated using specific skin symbionts to promote health or inhibit disease (Lai, Y., AL Cogen, K.A. Radek, HJ Park, DT MacLeod, A. Leichtle, AF Ryan, A. Di Nardo , and RL Gallo. 2010. Activation of TLR2 by a Small Molecule Produced by Staphylococcus epidermidis Increases Antimicrobial Defense against Bacterial Skin Infections. J Invest Dermatol 30: 2211-2221). (Lai, Y., A. Di Nardo, T. Nakatsuji, A. Leichtle, Y. Yang, AL Cogen, Z.-R. Wu, LV Hooper, RR Schmidt, S. von Aulock, KA Radek, C.- M. Huang, AF Ryan, and RL Gallo. 2009. Commensal bacteria regulate Toll-like receptor 3-dependent inflammation after skin injury. Nat Med 15: 1377-1382). However, skin symbiotic bacteria can be pathogenic under some circumstances (Edmond, M. V., SE Wallace, DK McClish, MA Pfaller, RN Jones, and RP Wenzel. 1999. Nosocomial Bloodstream Infections in United States Hospitals: A Three-Year Analysis Clinical Infectious Diseases 29: 239-244). In contrast, probiotics are generally considered safe (GRAS) and, therefore, such bacteria can potentially be applied topically if they are of therapeutic value (FAO / WHO. 2002. Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food: Report of a Joint FAO / WHO Working Group on Drafting Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food).

Общепринятые пробиотические бактерии могут иметь существенное значение при применении на кожу. Например, местное нанесение лизата штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp.или В. longum reuter индуцирует клиническое улучшение "реактивной кожи", которая представляет собой кожу, более чувствительную к физическим изменениям, таким как атмосферная температура, и к химическим изменениям, таким как наблюдаемые с наносимыми местно продуктами (Gueniche, А., Р. Bastien, J.M. Ovigne, М. Kermici, G. Courchay, V. Chevalier, L. Breton, and I. Castiel-Higounenc. 2010. Bifidobacterium longum lysate, a new ingredient for reactive skin. Experimental Dermatology 19:e1-e8). Местное нанесение описанного лизата штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. демонстрирует, что улучшается восстановление тканей в мышиной модели ожога и предотвращается инфекция в хронических ножных язвах, а также улучшается восстановление тканей при ожогах у людей (Peral, М.С, M.A. Huaman Martinez, and J.С.Valdez. 2009. Bacteriotherapy with Lactobacillus plantarum in burns. International Wound Journal 6:73-81). Peral, М.С, M.M. Rachid, N.M. Gobbato, M.A. H. Martinez, and J.C. Valdez. 2009. Interleukin-8 production by polymorphonuclear leukocytes from patients with chronic infected leg ulcers treated with Lactobacillus plantarum. Clinical Microbiology and Infection 16:281-286). (Shornikova, A.V., I.A. Casas, E. Isolauri, H. Mykkanen, and T. Vesikari. 1997. Lactobacillus reuteri as a therapeutic agent in acute diarrhoea in young children. J Pediatr Gastroenterol Nutr 24:399-404).Common probiotic bacteria can be significant when applied to the skin. For example, topical application of a lysate from a microbial strain of Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., Or B. longum reuter induces a clinical improvement in "reactive skin", which is skin that is more sensitive to physical changes such as atmospheric temperature, and to chemical changes such as those observed with topically applied products (Gueniche, A., P. Bastien, JM Ovigne, M. Kermici, G. Courchay, V. Chevalier, L. Breton, and I. Castiel-Higounenc. 2010. Bifidobacterium longum lysate, a new ingredient for reactive skin. Experimental Dermatology 19: e1-e8). Local application of the described lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. demonstrates improved tissue repair in the mouse burn model and prevention of infection in chronic leg ulcers and improved tissue repair in burns in humans (Peral, MC, MA Huaman Martinez, and J.C. Valdez. 2009. Bacteriotherapy with Lactobacillus plantarum in burns. International Wound Journal 6: 73-81). Peral, M.C, M.M. Rachid, N.M. Gobbato, M.A. H. Martinez, and J.C. Valdez. 2009. Interleukin-8 production by polymorphonuclear leukocytes from patients with chronic infected leg ulcers treated with Lactobacillus plantarum. Clinical Microbiology and Infection 16: 281-286). (Shornikova, A. V., I. A. Casas, E. Isolauri, H. Mykkanen, and T. Vesikari. 1997. Lactobacillus reuteri as a therapeutic agent in acute diarrhoea in young children. J Pediatr Gastroenterol Nutr 24: 399-404).

Для решения поставленной задачи авторы-заявители использовали лизированный штамм микроорганизмов реликтовых почвенных бактерий-сапрофитов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. с отчетливо выраженными иммуностимулирующими и геропротекторными свойствами, депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП ГосНИИгенетика. Тестирование лизата культуры штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. на высших организмах осуществлялось в Тюменском научном центре СО РАН, в Институте химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН. В частности, эксперименты на мышах F1 CBA/Black-6 показали, что штамм микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. в лизированной культуре способствует увеличению индексов тимуса и селезенки. Культура в малой дозе стимулирует фагоцитарную активность селезеночных макрофагов, во всех дозах способствует увеличению функциональной активности и активизации клеточного и гуморального иммунитета. При этом вес тела у животных опытной группы оказался выше, чем у животных контрольной группы, на 60% увеличилась мышечная сила, и наблюдались другие позитивные реакции. О повышении у млекопитающих способности к ориентации в пространстве и исследовательской активности свидетельствовало более частое посещение ими внутренних секторов открытого поля, увеличение числа вертикальных стоек, посещения норок, и другие показатели. Увеличилась продолжительность жизни мышей, в среднем на 20%, что, однозначно, свидетельствует о присутствии в культуре штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. геропротекторов, что подтверждает увеличения продолжительности жизни млекопитающих при использовании заявляемой группы изобретений. Кроме того, Лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., как уже упоминалось, характеризуется также высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно патогенных микроорганизмов, в том числе и сальмонеллы. Подтверждены предположения о его антивирусной и противоопухолевой активности. Оптимальные количества микробных клеток штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. в 1 мл физиологического раствора составляют лизированных клеток 10⁹-10¹⁰, при их объемном содержании 92-98%. Дальнейшее увеличение количества микробных клеток в лизате не изменяет существенным образом специфическую активность препарата. Препарат характеризуется безвредностью для млекопитающих, его летальные дозы в экспериментах установить не удалось.To solve the problem, the authors-applicants used a lysed strain of microorganisms of relict soil bacteria-saprophytes Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. with pronounced immunostimulating and geroprotective properties, deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms (VKPM) FSUE GosNIIgenetics. Testing of the lysate of a culture of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. on higher organisms was carried out at the Tyumen Scientific Center of the SB RAS, at the Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine of the SB RAS. In particular, experiments on F1 CBA / Black-6 mice showed that the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, of the genera Bacillus sp. in a lysed culture, it increases the thymus and spleen indices. A culture in a small dose stimulates the phagocytic activity of splenic macrophages, in all doses it contributes to an increase in functional activity and activation of cellular and humoral immunity. At the same time, the body weight in the animals of the experimental group turned out to be higher than in the animals of the control group, muscle strength increased by 60%, and other positive reactions were observed. Increased spatial orientation and exploratory activity in mammals was evidenced by their more frequent visits to internal sectors of the open field, an increase in the number of upright racks, visits to burrows, and other indicators. The lifespan of mice increased by an average of 20%, which, unambiguously, indicates the presence in the culture of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. geroprotectors, which confirms the increase in the life expectancy of mammals when using the claimed group of inventions. In addition, the Lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., As already mentioned, is also characterized by high antagonistic activity against a wide range of pathogenic and opportunistic microorganisms, including salmonella. The assumptions about its antiviral and antitumor activity were confirmed. The optimal numbers of microbial cells of the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. in 1 ml of saline are lysed cells 10 ⁹ -10 ¹⁰ , with a volume content of 92-98%. A further increase in the number of microbial cells in the lysate does not significantly change the specific activity of the drug. The drug is characterized by harmlessness to mammals, its lethal doses have not been established in experiments.

Для приготовления средства для увеличения продолжительности жизни млекопитающих применяли бактерии и или лизат продуцируемого штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. в виде - 55%й смеси, а также растворенные в 98% этиловом спирте 45% смеси аминокислот, белков, нуклеиновых оснований полисахаридов, пептидогликанов и других биологически активных веществ. Таким образом, полученное средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих настоящего изобретения содержит лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp в смеси с другими вспомогательными компонентами. Эксперименты применения средства - лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. для увеличения продолжительности жизни млекопитающих, в частности, на мышах F1 CBA/Black-6 подтвердили, что штамм микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. в лизированной культуре способствует увеличению индексов тимуса и селезенки. Культура в малой дозе стимулирует фагоцитарную активность селезеночных макрофагов и во всех дозах способствует увеличению функциональной активности и активизации клеточного и гуморального иммунитета. Продолжительности жизни млекопитающих, в частности мышей, увеличилась, в среднем на 20%, что свидетельствует о присутствии в культуре штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. геропротекторов, что подтверждает решение поставленной технической проблемы у заявленной группы изобретений и также решает поставленный технический результат. Лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., как уже отмечалось, характеризуется также высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно патогенных микроорганизмов, в том числе сальмонеллы. На основании проведенных экспериментов сделан вывод не только о его антивирусной активности, но и противоопухолевой активности. Эксперименты с млекопитающими (мышами) показали, также то, что заявляемое средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих характеризуется безвредностью для всем исследуемых животных.To prepare a means for increasing the lifespan of mammals, bacteria and or a lysate of the produced strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, of the genera Bacillus sp. in the form of a 55% mixture, as well as 45% mixture of amino acids, proteins, nucleic acid bases of polysaccharides, peptidoglycans and other biologically active substances dissolved in 98% ethyl alcohol. Thus, the resulting agent for increasing the lifespan of mammals of the present invention contains a lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genus Bacillus sp in a mixture with other auxiliary components. Experiments on the use of the agent - lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. to increase the lifespan of mammals, in particular, in F1 CBA / Black-6 mice, it was confirmed that the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, of the genera Bacillus sp. in a lysed culture, it increases the thymus and spleen indices. Culture in a small dose stimulates the phagocytic activity of splenic macrophages and in all doses promotes an increase in functional activity and activation of cellular and humoral immunity. The lifespan of mammals, in particular mice, increased by an average of 20%, which indicates the presence in the culture of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. geroprotectors, which confirms the solution of the technical problem posed for the claimed group of inventions and also solves the technical result set. The lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp., As already noted, is also characterized by high antagonistic activity against a wide range of pathogenic and opportunistic microorganisms, including salmonella. Based on the experiments carried out, a conclusion was drawn not only about its antiviral activity, but also about its antitumor activity. Experiments with mammals (mice) have also shown that the claimed agent for increasing the lifespan of mammals is characterized by harmlessness for all studied animals.

Таким образом, неоднократно подтверждается достижение технического результата настоящего изобретения, которым является расширение арсенала средств для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и разработка способа их применения для замедления процесса старения.Thus, the achievement of the technical result of the present invention, which is the expansion of the arsenal of means for increasing the lifespan of mammals and the development of a method for their use to slow down the aging process, is repeatedly confirmed.

Предпочтительно, эффективное количество средства для увеличения продолжительности жизни млекопитающих составляет от 0,45 до 0,50 мас.%. Более предпочтительно от 0,50 до 0,55 мас.%. Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих может дополнительно содержать вспомогательные компоненты, например, такие компоненты включают, но не ограничиваются, гелеобразователями, консервантами, красителями, отдушками, регуляторами рН, регуляторами осмоляльности, антиоксидантами. Предпочтительно, содержание вспомогательных компонентов в средстве для увеличения продолжительности жизни млекопитающих фармацевтической композиции настоящего изобретения составляет 0,45 до 1,5 мас. %, более предпочтительно 0,5 до 1,5 мас. %.Preferably, the effective amount of the agent for increasing the longevity of mammals is from 0.45 to 0.50% by weight. More preferably 0.50 to 0.55 wt%. The agent for increasing the lifespan of mammals may additionally contain auxiliary components, for example, such components include, but are not limited to, gelling agents, preservatives, dyes, perfumes, pH regulators, osmolality regulators, antioxidants. Preferably, the content of auxiliary components in the agent for increasing the lifespan of mammals of the pharmaceutical composition of the present invention is 0.45 to 1.5 wt. %, more preferably 0.5 to 1.5 wt. %.

Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих, согласно изобретению, может быть приготовлено в виде различных лекарственных форм. Примеры таких форм включают, но не ограничиваются, растворами, гелями, эмульсиями, мазями, пластырями, или формами, позволяющими осуществлять контролируемое высвобождение активных компонентов штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp.The agent for increasing the longevity of mammals according to the invention can be prepared in various dosage forms. Examples of such forms include, but are not limited to, solutions, gels, emulsions, ointments, patches, or forms that allow controlled release of active components of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp.

Гелеобразователи относится к веществам или композициям веществ, обладающих способностью в определенных условиях образовывать гели. Примерами гелеобразователей являются сополимеры акриловой кислоты (Карбополы), карбоксиэтилцеллюлоза, полисахариды, хитозан, и другие гидрофильные полимеры, способные к образованию структурированной дисперсной системы с водной дисперсионной средой.Gelling agents refer to substances or compositions of substances that have the ability to form gels under certain conditions. Examples of gelling agents are copolymers of acrylic acid (Carbopol), carboxyethyl cellulose, polysaccharides, chitosan, and other hydrophilic polymers capable of forming a structured disperse system with an aqueous dispersion medium.

В средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих входят компоненты лизата штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp., которые очень хорошо абсорбируются кожей и органами пищеварения млекопитающих, а также человека в терапевтически эффективных концентрациях, вследствие чего средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих с компонентами лизата штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. в целом эффективно, как при наружном, так и при внутреннем применении.The agent for increasing the lifespan of mammals includes the components of the lysate of the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, the genera Bacillus sp., Which are very well absorbed by the skin and digestive organs of mammals, as well as humans in therapeutically effective concentrations, as a result of which the agent for increasing the duration life of mammals with components of the lysate of the strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. generally effective, both externally and internally.

Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих, по настоящему изобретению, приготавливают способами, хорошо известными из уровня техники. Например, лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-1030, родов Bacillus sp. бензалкония хлорид в качестве консерванта, и карбоксиэтилцеллюлоза в качестве гелеобразователя растворяются в очищенной воде, взятой в качестве фармацевтически приемлемого разбавителя. Полученный гель формуется в виде единичных дозированных форм.The agent for increasing the longevity of mammals according to the present invention is prepared by methods well known in the art. For example, a lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-1030, genera Bacillus sp. benzalkonium chloride as a preservative and carboxyethyl cellulose as a gelling agent are dissolved in purified water as a pharmaceutically acceptable diluent. The resulting gel is molded into unit dosage forms.

Сущность заявляемой группы изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с применением этого средства» подтверждается примерами конкретного выполнения, в которых демонстрируют применение заявленного изобретения. Примеры конкретного выполнения средства для увеличения продолжительности жизни млекопитающих представлены только для иллюстрации, и, никоим образом, не ограничивают пределы изобретения.The essence of the claimed group of inventions "An agent for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this agent" is confirmed by examples of specific implementation, which demonstrate the application of the claimed invention. Examples of the specific implementation of the means for increasing the longevity of mammals are presented for illustration only, and in no way limit the scope of the invention.

Пример 1Example 1

Демонстрирует средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих, содержащее лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp, изготовленное в форме геля для наружного применения. Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих включает: лизат штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. карбоксиэтилцеллюлоза в качестве гелеобразователя, бензалконий хлорид, ЭДТА вносятся в воду и перемешиваются. Полученный в форме геля продукт помещается в тубы.Demonstrates an agent for increasing the lifespan of mammals containing a lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, of the genus Bacillus sp, made in the form of a gel for external use. Means for increasing the lifespan of mammals include: lysate of a strain of microorganisms Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. carboxyethyl cellulose as a gelling agent, benzalkonium chloride, EDTA are introduced into water and mixed. The product obtained in the form of a gel is placed in tubes.

Млекопитающему пациенту (белая мышь) с пролежнями и старческими пятнами наносили 1 мл геля на участок кожи один раз в день в течение 7 дней. На восьмой день исчезли пролежни, старческие пятна стали значительно светлее.A mammalian patient (white mouse) with bedsores and age spots was applied 1 ml of the gel to the skin area once a day for 7 days. On the eighth day, the bedsores disappeared, the age spots became much lighter.

Пример 2Example 2

Трем женщинам 35, 40 и 50 лет наносили средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих с составом, соответствующим примеру 1, ежедневно 2 мл геля в одно и то же время, в течение четырех недель на кожу лица. После окончания курса нанесения средства значительно улучшились внешний вид кожи лица, улучшилась функция сальных желез, исчезли морщины под глазами и носогубные складки. У женщины возраста 50 лет старческое пятно (2 см в диаметре) на щеке обесцветилось.Three women 35, 40 and 50 years old applied an agent for increasing the longevity of mammals with a composition corresponding to example 1, daily 2 ml of the gel at the same time for four weeks on the skin of the face. After the end of the course of applying the product, the appearance of the skin of the face improved significantly, the function of the sebaceous glands improved, wrinkles under the eyes and nasolabial folds disappeared. A 50-year-old woman has a discolored spot (2 cm in diameter) on her cheek.

Пример 3Example 3

Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих, с составом, соответствующим примеру 1, и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с применением этого средства продемонстрированы на примере 3. Эффективность средства для увеличения продолжительности жизни млекопитающих, с составом, соответствующим примеру 1, была изучена в клинических испытаниях. В исследовании участвовали 25 особей белых мышей, из них 10 мужских особей в возрасте от 4,2 до 4,5 лет и 15 женских от 2,8 до 3-х лет. Легкая степень тяжести больных животных облысение в области живота и шеи, средняя - коросты и язвы от драк и тяжелая - новообразования (качественные опухоли) между пальцев лапок больных мышей. Длительность заболевания составляла от 0,5 до 3 лет.An agent for increasing the lifespan of mammals, with the composition corresponding to example 1, and a method for increasing the lifespan of mammals using this agent are demonstrated in example 3. The effectiveness of the agent for increasing the lifespan of mammals, with a composition corresponding to example 1, was studied in clinical trials. The study involved 25 white mice, of which 10 males aged 4.2 to 4.5 years and 15 females from 2.8 to 3 years. Mild severity of sick animals is baldness in the abdomen and neck, medium - scabs and ulcers from fights and severe - neoplasms (quality tumors) between the toes of sick mice. The duration of the disease ranged from 0.5 to 3 years.

Гель наносили всем особям ежедневно 4 раза в день, соответственно, в течение двух недель (7+7 дней) на предварительно обработанную антисептиком кожу. Кроме того, в первый день лечения внутримышечно вводили 0,1 мл, 5% раствора геля в дистиллированной воде животным с легкой степенью тяжести. Животным со средней степенью тяжести в течение первых 5 дней внутримышечно вводили 0,2 мл, 5% раствора геля в дистиллированной воде. Животным с тяжелой степенью тяжести в течение первых 10 дней, вводили 0,2 мл. 5% раствора геля в дистиллированной воде. Значительное улучшение наблюдали у всех больных животных с легкой степенью тяжести (100%) и в большинстве случаев у больных (84%) со средней степенью тяжести. У животных с тяжелой степенью тяжести улучшение наблюдали у (68%) больных. Хорошую переносимость препарата и отсутствие местных реакций наблюдали в 94,7% случаев. В качестве побочных эффектов, судя по поведению животных, наблюдался кратковременный зуд в области нанесения геля. Не наблюдалось характерных для внутримышечного введения побочных эффектов, таких как раздражение и боль в месте укола, пирогенный эффект, и наличие нежелательного системного иммуномодулирующего эффекта. При этом эффективность лечения при наружном применении была не ниже, чем описываемая в литературе для внутримышечного применения.The gel was applied to all individuals 4 times a day daily, respectively, for two weeks (7 + 7 days) on the skin pretreated with an antiseptic. In addition, on the first day of treatment, a 0.1 ml, 5% solution of the gel in distilled water was injected intramuscularly to animals with mild severity. Animals with moderate severity during the first 5 days were injected intramuscularly with 0.2 ml, 5% gel solution in distilled water. Animals with severe severity were injected with 0.2 ml during the first 10 days. 5% gel solution in distilled water. Significant improvement was observed in all sick animals with mild severity (100%) and in most cases in patients (84%) with moderate severity. In animals with severe severity, improvement was observed in (68%) patients. Good tolerability of the drug and the absence of local reactions were observed in 94.7% of cases. As side effects, judging by the behavior of the animals, there was a short-term itching in the area of application of the gel. There were no side effects characteristic of intramuscular administration, such as irritation and pain at the injection site, pyrogenic effect, and the presence of an undesirable systemic immunomodulatory effect. At the same time, the effectiveness of treatment for external use was not lower than that described in the literature for intramuscular use.

Пример 4Example 4

Для определения возможности иммунологической активности заявляемого способа оценивали влияние штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. по отдельности, и взятых в соотношении (1:1) на продукцию IFN-гамма с применением планшетной иммуноферментной тест-системы производства ООО «Цитокин» (Россия). Для исследования продукции ООО «Цитокин» (цитокинов) IFN-гамма с применением планшетной иммуноферментной тест-системы использовали цельную кровь, взятую у млекопитающих и (из локтевой вены добровольца - одного из авторов-заявителей) в силиконовые пробирки с гепарином. Оптическую плотность определяли на иммуноферментном анализаторе. Расчет количества IFN-гамма (в пг/мл) проводили стандартно по калибровочной кривой. Используя уровни спонтанной и индуцированной продукции цитокинов, рассчитывали индекс влияния (ИВ) лизата штамма микроорганизмов Bacillus species F, ВКПМ В-10130, родов Bacillus sp. при добавлении его на продукцию цитокинов вычисляли, как отношение показателя спонтанной или индуцированной секреции IFN-гамма при инкубации с препаратом, к показателю спонтанной продукции без препарата. Данные исследования продукции цитокинов, где использовали цельную кровь, показали, что смесь лизатов (1:1) проявляет более выраженную иммуномодулирующую активность в конечной концентрации 0,01%, чем отдельные лизаты, взятые каждый в той же конечной концентрации 0,01%.To determine the possibility of immunological activity of the proposed method, the influence of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, genera Bacillus sp. separately, and taken in the ratio (1: 1) for the production of IFN-gamma using a plate-based enzyme-linked immunosorbent assay system produced by LLC "Cytokin" (Russia). To study the products of LLC "Cytokine" (cytokines) IFN-gamma using a plate enzyme-linked immunosorbent assay system, whole blood was taken from mammals and (from the cubital vein of a volunteer - one of the applicants) into silicone tubes with heparin. Optical density was determined on an enzyme immunoassay analyzer. Calculation of the amount of IFN-gamma (in pg / ml) was carried out as standard according to the calibration curve. Using the levels of spontaneous and induced cytokine production, the influence index (IR) of the lysate of the microorganism strain Bacillus species F, VKPM B-10130, of the genera Bacillus sp. when added to cytokine production, it was calculated as the ratio of the rate of spontaneous or induced IFN-gamma secretion upon incubation with the drug to the rate of spontaneous production without the drug. The data of studies of cytokine production, where whole blood was used, showed that a mixture of lysates (1: 1) exhibits more pronounced immunomodulatory activity at a final concentration of 0.01% than individual lysates taken each at the same final concentration of 0.01%.

Таким образом, предложенная группа изобретений «Средство для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и способ увеличения продолжительности жизни млекопитающих с применением этого средства» позволяет решить поставленную техническую проблему по созданию эффективного способа замедления наступления болезненных состояний, связанных с увеличением возраста млекопитающих, а также достичь поставленного технического результата в виде расширения арсенала средств для увеличения продолжительности жизни млекопитающих и разработки способа их применения для замедления процесса старения.Thus, the proposed group of inventions "Means for increasing the lifespan of mammals and a method for increasing the lifespan of mammals using this tool" allows you to solve the technical problem posed to create an effective way to slow down the onset of painful conditions associated with an increase in the age of mammals, as well as to achieve the set technical result in the form of expanding the arsenal of means for increasing the lifespan of mammals and developing a method for their use to slow down the aging process.

Claims

1. Means for improving the quality of life of mammals, characterized by the content of the active substance in an effective amount, which is used as bacteria and / or lysate of a strain of microorganisms Vasillus species F VPKM B-10130.

2. A method of improving the quality of life of mammals, characterized in that the agent according to claim 1 is used in a concentration of at least 5 × 10 ⁶ CFU / ml by oral administration and / or local administration of the lysate directly into the skin of a subject, or as a food additive in a lyophilized form, or as a solution throughout life.