RU2750639C1 - Substituted spiro androstenes-17, 6'[1,3,4]thiadiazines with antiviral activity - Google Patents

Substituted spiro androstenes-17, 6'[1,3,4]thiadiazines with antiviral activity Download PDF

Info

Publication number
RU2750639C1
RU2750639C1 RU2021111981A RU2021111981A RU2750639C1 RU 2750639 C1 RU2750639 C1 RU 2750639C1 RU 2021111981 A RU2021111981 A RU 2021111981A RU 2021111981 A RU2021111981 A RU 2021111981A RU 2750639 C1 RU2750639 C1 RU 2750639C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
antiviral activity
compounds
thiadiazines
androstenes
antiviral
Prior art date
Application number
RU2021111981A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Андрей Геннадьевич Малых
Андрей Рэмович Павлов
Юлия Алексеевна Волкова
Александр Владимирович Комков
Леонид Геннадьевич Менчиков
Игорь Викторович Заварзин
Original Assignee
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН) filed Critical ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (ИОХ РАН)
Priority to RU2021111981A priority Critical patent/RU2750639C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2750639C1 publication Critical patent/RU2750639C1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J33/00—Normal steroids having a sulfur-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
    • C07J33/005—Normal steroids having a sulfur-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton spiro-condensed

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention relates to substituted spiroandrostene-17,6`[1,3,4]thiadiazines of the general formula (1), in which R=N or F.
EFFECT: new compounds of formula (1) with antiviral activity against herpes viruses, with low cellular toxicity, were obtained.
Figure 00000011
2 cl, 2 tbl, 5 ex

Description

Изобретение относится к новым неописанным биологически активным соединениям, конкретно, к замещенным спироандростен-17,6'[1,3,4]тиадиазинам общей формулы:The invention relates to new, undescribed biologically active compounds, in particular, to substituted spiroandrostene-17,6 '[1,3,4] thiadiazines of the general formula:

Figure 00000001
Figure 00000001

где R=Η или F.where R = Η or F.

Предлагаемые соединения обладают противовирусной активностью в отношении вирусов герпеса и могут найти применение в медицине, ветеринарии и в биотехнологиях.The proposed compounds have antiviral activity against herpes viruses and can be used in medicine, veterinary medicine and biotechnology.

Ранее в литературе были описаны соединения, изомерные по структуре к заявляемым [Komendantova A.S., Scherbakov А.М., Komkov Α.V., Chertkova V.V., Gudovanniy Α.Ο., Chemoburova Ε.I., Sorokin D.V., Dzichenka Y.U., Shirinian V.Z., Volkova Υ.Α., Zavarzin I.V. Novel steroidal 1,3,4-thiadiazines: Synthesis and biological evaluation in androgen receptor-positive prostate cancer 22Rv1 cells // Bioorganic Chemistry. - 2019. - T. 91. - C. 103142] общей формулы:Earlier in the literature, compounds were described that are isomeric in structure to the claimed [Komendantova AS, Scherbakov AM, Komkov Α.V., Chertkova VV, Gudovanniy Α.Ο., Chemoburova Ε.I., Sorokin DV, Dzichenka YU, Shirinian VZ, Volkova Υ.Α., Zavarzin IV Novel steroidal 1,3,4-thiadiazines: Synthesis and biological evaluation in androgen receptor-positive prostate cancer 22Rv1 cells // Bioorganic Chemistry. - 2019. - T. 91. - C. 103142] of the general formula:

Figure 00000002
Figure 00000002

где R=Η или F.where R = Η or F.

Однако эти изомерные соединения при испытании не проявили противоопухолевую активность, а противовирусная активность для них не известна.However, these isomeric compounds did not show antitumor activity when tested, and the antiviral activity is not known for them.

Предлагаемые соединения являются новыми, неописанными соединения и отличаются от известных соединений стереохимией ОН-группы при атоме C16 стероидного фрагмента.The proposed compounds are new, undescribed compounds and differ from the known compounds by the stereochemistry of the OH group at the C16 atom of the steroid fragment.

Известно, что в стероидах среди многочисленных изомеров биологическую активность часто проявляет только один из изомеров, тогда как остальные изомеры малоактивны или не активны вовсе, как и в случае соединений 2. Вирусные заболевания и вызываемые вирусами опухоли представляют одну из наиболее серьезных проблем современной медицины. Для лечения вирусных заболеваний применяют комбинации нескольких препаратов (часто используют одновременно 3-5 различных препаратов). Это необходимо а) для повышения эффективности лечения и б) для предупреждения появления новых лекарственно устойчивых патогенных вирусов, которые легко появляются при использовании монопрепаратов.It is known that among the numerous isomers in steroids, only one of the isomers often exhibits biological activity, while the remaining isomers are inactive or inactive at all, as in the case of compounds 2. Viral diseases and tumors caused by viruses are one of the most serious problems of modern medicine. Combinations of several drugs are used to treat viral diseases (3-5 different drugs are often used simultaneously). This is necessary a) to increase the effectiveness of treatment and b) to prevent the emergence of new drug-resistant pathogenic viruses that easily appear when using monopreparations.

В связи с этим актуальной задачей является расширение арсенала противовирусных средств. Эта задача особенно актуальна и потому, что для лечения далеко не всех видов вирусных заболеваний существуют даже единичные препараты. В частности, вирус Эпштейна-Барра (ВЭБ), один из основных вирусов герпеса человека, был открыт более 50 лет назад как первый опухолевый вирус человека. Однако до сих пор не существует эффективной вакцины против ВЭБ, а его лечение ограничено использованием таких малоэффективных препаратов, как ацикловир.In this regard, an urgent task is to expand the arsenal of antiviral drugs. This task is especially relevant because for the treatment of far from all types of viral diseases there are even single drugs. In particular, the Epstein-Barr virus (EBV), one of the main human herpes viruses, was discovered more than 50 years ago as the first human tumor virus. However, there is still no effective vaccine against EBV, and its treatment is limited to the use of such ineffective drugs as acyclovir.

Для лечения заболеваний, вызванных вирусами герпеса, в частности, вирусом Эпштейна-Барра, в настоящее время не существует эффективных терапевтических методик ввиду отсутствия комплекса противовирусных препаратов. Преодолеть этот недостаток возможно только путем создания новых антивирусных средств для комплексной терапии герпесвирусных инфекций одновременно несколькими противовирусными препаратами. Наиболее близким к заявленным соединениям по свойствам в ряду стероидных структур является стероидный диуретик спиронолактон структурной формулы:For the treatment of diseases caused by herpes viruses, in particular, the Epstein-Barr virus, there are currently no effective therapeutic methods due to the lack of a complex of antiviral drugs. To overcome this drawback is possible only by creating new antiviral agents for the complex therapy of herpesvirus infections simultaneously with several antiviral drugs. The closest to the claimed compounds in terms of properties in a series of steroid structures is the steroidal diuretic spironolactone of the structural formula:

Figure 00000003
Figure 00000003

противовирусная активность которого была обнаружена недавно. Известно, что спиронолактон снижает выработку вируса Эпштейна-Барра in vitro [Verma D., Thompson J., Swaminathan S. Spironolactone blocks Epstein-Barr virus production by inhibiting EBV SM protein function // Proceedings of the National Academy of Sciences (PNAS). - 2016. - T. 113, №13. - C. 3609-3614], а также он активен в отношении альфа-герпесвирусов лошадей [Thieulent С., Hue Ε.S., Sutton G., Fortier C., Dallemagne P., Zientara S., Munier-Lehmann H., Hans Α., Paillot R.., Vidalain P.-O., Pronost S. Identification of antiviral compounds against equid herpesvirus-1 using real-time cell assay screening: Efficacy of decitabine and valganciclovir alone or in combination // Antiviral Research. - 2020. -T. 183.-C. 104931].the antiviral activity of which was discovered recently. It is known that spironolactone reduces the production of the Epstein-Barr virus in vitro [Verma D., Thompson J., Swaminathan S. Spironolactone blocks Epstein-Barr virus production by inhibiting EBV SM protein function // Proceedings of the National Academy of Sciences (PNAS). - 2016. - T. 113, No. 13. - C. 3609-3614], and it is also active against equine herpesviruses [Thieulent C., Hue Ε.S., Sutton G., Fortier C., Dallemagne P., Zientara S., Munier-Lehmann H. , Hans Α., Paillot R .., Vidalain P.-O., Pronost S. Identification of antiviral compounds against equid herpesvirus-1 using real-time cell assay screening: Efficacy of decitabine and valganciclovir alone or in combination // Antiviral Research ... - 2020. -T. 183.-C. 104931].

Технической задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента соединений, обладающих противовирусной активностью в отношении вирусов герпеса.The technical problem of the present invention is to expand the range of compounds with antiviral activity against herpes viruses.

Поставленная техническая задача достигается новыми 2'-(N-замещенными) производными 5'-метил-3β,16β-дигидроксиспироандрост-5-ен-17,6'[1,3,4]тиадиазинов общей формулы:The technical problem posed is achieved by new 2 '- (N-substituted) derivatives of 5'-methyl-3β, 16β-dihydroxyspiroandrost-5-ene-17,6' [1,3,4] thiadiazines of the general formula:

Figure 00000004
Figure 00000004

где R=Η или F, обладающих противовирусной активностью в отношении вирусов герпеса.where R = Η or F, which have antiviral activity against herpes viruses.

По результатам скрининга биологической активности предлагаемые соединения общей формулы 1 продемонстрировали антивирусную активность - ингибирование высвобождения вируса герпеса при минимальной цитотоксичности.According to the results of screening of biological activity, the proposed compounds of general formula 1 demonstrated antiviral activity - inhibition of the release of the herpes virus with minimal cytotoxicity.

Предлагаемые соединения общей формулы 1 получают взаимодействием 16β,17β-эпокси-17-изопрегн-5-ен-3β-ол-20-она с тиогидразидами оксаминовой кислоты под действием n-толуолсульфокислоты при 40°С в течение 10 часов. Процесс протекает по следующей схеме:The proposed compounds of general formula 1 are prepared by the reaction of 16β, 17β-epoxy-17-isopregn-5-en-3β-ol-20-one with oxamic acid thiohydrazides under the action of n-toluenesulfonic acid at 40 ° C for 10 hours. The process proceeds according to the following scheme:

Figure 00000005
Figure 00000005

где R=H (1a), F(1b).where R = H (1a), F (1b).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами, не ограничивающими его объем.The invention is illustrated by the following non-limiting examples.

Пример 1. К раствору 330 мг 16β,17β-эпокси-17-изопрегн-5-ен-3β-ол-20-она (2) и 235 мг 2-гидразинил-N-фенил-2-тиоксоацетамида (R=Н) в сухом диоксане (15 мл) прибавили n-толуолсульфокислоту (20 мкл, 30 мол.%) при комнатной температуре. Реакционную смесь далее нагревали при 40°С в течение 10 часов и затем охлаждали до комнатной температуры. По окончании реакции органический слой обрабатывали 5% водным раствором Na2CO3 (20 мл) и экстрагировали хлороформом (3×40 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4. Полученный продукт (1а) очищали колоночной хроматографией: элюент - смесь петролейный эфир/этилацетат (3:1). Выход (3S,8R,9S,10R,13S,14S,16R,17R)-5'-метил-[2'-(N-фенилкарбамоил)]-3,16-дигидроксиспироандрост-5-ен-17,6'[1,3,4]-тиадиазина (1a) составил 305 мг (60%), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 188-190°С.1H NMR (600 МГц, ДМСО-d6): δ 0.78 (ддд, J=4.8, 12.3, 15.5 Гц, 1Н, 9-СН), 0.85 (с, 3Н, 18-СН3), 0.87 (с, 3Н, 19-СН3), 0.86-0.98 (м, 2Н, 1-СН2, 12-СН2), 1.03-1.10 (м, 1H, 12-СН2), 1.17-1.40 (м, 4Н, 2-СН2, 8-СН, 11-СН2), 1.47-1.70 (м, 4Н, 1-СН2, 2-СН2, 7-СН2, 15-СН2), 1.78 (ддд, J=2.2, 10.4, 11.1 Гц, 1Н, 14-СН), 1.83-1.96 (м, 2Н, 7-СН2, 15-СН2), 2.04 (дд, J=8.7, 13.1 Гц, 1Н, 4-СН2), 2.12 (дд, J=5.0, 13.1 Гц, 1Н, 4-СН2), 2.47 (с, 3Н, СН3), 3.18-3.22 (м, 1Н, 3-СН), 4.55 (д, J=4.2 Гц, 1Н, 3-ОН), 5.22-5.26 (м, 2Н, 6-СН, 16-СН), 5.66 (д, J=4.8 Гц, 1Н, 16-ОН), 7.12 (т, J=7.8 Гц, 1Н, Ph), 7.34 (т, J=7.8 Гц, 2Н, Ph), 7.85 (д, J=7.8 Гц, 2Н, Ph), 10.5 (уш.с, 1Н, NH). 13С NMR (150.9 МГц, ДМСО-d6): δ 14.8 (18-СН3), 19.0 (19-СН3), 19.9 (11-СН2), 23.5 (СН3), 31.2 (8-СН), 31.2 (7-СН2), 31.3 (2-СН2), 33.7 (15-СН2), 34.6 (12-СН2), 35.9 (10-С), 36.6 (1-СН2), 42.0 (4-СН2), 46.0 (14-СН), 48.8 (9-СН), 51.2 (13-С), 62.2 (17-С), 69.9 (3-СН), 72.5 (16-СН), 119.9 (6-СН), 120.3 (2СН, Ph), 124.1 (СН, Ph), 128.6 (2СН, Ph), 137.9 (С, Ph), 141.2 (5-С), 152.9 (2'-С), 153.9 (5'-С), 160.0 (СО).Example 1. To a solution of 330 mg 16β, 17β-epoxy-17-isopregn-5-en-3β-ol-20-one (2) and 235 mg of 2-hydrazinyl-N-phenyl-2-thioxoacetamide (R = H) in dry dioxane (15 ml), n-toluenesulfonic acid (20 μl, 30 mol%) was added at room temperature. The reaction mixture was further heated at 40 ° C for 10 hours and then cooled to room temperature. After the completion of the reaction, the organic layer was treated with 5% aqueous Na 2 CO 3 solution (20 ml) and extracted with chloroform (3 × 40 ml). The combined organic layers were dried over Na 2 SO 4 . The resulting product (1а) was purified by column chromatography: eluent - a mixture of petroleum ether / ethyl acetate (3: 1). Yield (3S, 8R, 9S, 10R, 13S, 14S, 16R, 17R) -5'-methyl- [2 '- (N-phenylcarbamoyl)] - 3,16-dihydroxyspiroandrost-5-ene-17,6' [ 1,3,4] -thiadiazine (1a) was 305 mg (60%), purity 98% (by NMR). M.p. 188-190 ° C. 1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ): δ 0.78 (ddd, J = 4.8, 12.3, 15.5 Hz, 1H, 9-CH), 0.85 (s, 3H, 18-CH 3 ), 0.87 (s, 3H, 19-CH 3 ), 0.86-0.98 (m, 2H, 1-CH 2 , 12-CH 2 ), 1.03-1.10 (m, 1H, 12-CH 2 ), 1.17-1.40 (m, 4H, 2 -CH 2 , 8-CH, 11-CH 2 ), 1.47-1.70 (m, 4H, 1-CH 2 , 2-CH 2 , 7-CH 2 , 15-CH 2 ), 1.78 (ddd, J = 2.2 , 10.4, 11.1 Hz, 1H, 14-CH), 1.83-1.96 (m, 2H, 7-CH 2 , 15-CH 2 ), 2.04 (dd, J = 8.7, 13.1 Hz, 1H, 4-CH 2 ) , 2.12 (dd, J = 5.0, 13.1 Hz, 1H, 4-CH 2 ), 2.47 (s, 3H, CH 3 ), 3.18-3.22 (m, 1H, 3-CH), 4.55 (d, J = 4.2 Hz, 1H, 3-OH), 5.22-5.26 (m, 2H, 6-CH, 16-CH), 5.66 (d, J = 4.8 Hz, 1H, 16-OH), 7.12 (t, J = 7.8 Hz , 1H, Ph), 7.34 (t, J = 7.8 Hz, 2H, Ph), 7.85 (d, J = 7.8 Hz, 2H, Ph), 10.5 (br.s, 1H, NH). 13 С NMR (150.9 MHz, DMSO-d 6 ): δ 14.8 (18-СН 3 ), 19.0 (19-СН 3 ), 19.9 (11-СН 2 ), 23.5 (СН 3 ), 31.2 (8-СН) , 31.2 (7-CH 2 ), 31.3 (2-CH 2 ), 33.7 (15-CH 2 ), 34.6 (12-CH 2 ), 35.9 (10-C), 36.6 (1-CH 2 ), 42.0 ( 4-CH 2 ), 46.0 (14-CH), 48.8 (9-CH), 51.2 (13-C), 62.2 (17-C), 69.9 (3-CH), 72.5 (16-CH), 119.9 ( 6-СН), 120.3 (2СН, Ph), 124.1 (СН, Ph), 128.6 (2СН, Ph), 137.9 (С, Ph), 141.2 (5-С), 152.9 (2'-С), 153.9 ( 5'-C), 160.0 (CO).

Спектр HRMS (ESI) для C29H38N3O3S ([M+H]+): вычислено 508.2628, найдено 508.2626.HRMS (ESI) spectrum for C 29 H 38 N 3 O 3 S ([M + H] + ): calculated 508.2628, found 508.2626.

Изомерная структура полученного соединения установлена с помощью 2D ЯМР спектров NOESY, HSQC и НМВС. Ниже приведена структурная формула соединения 1а, на которой показана корреляция протонов в 2D ЯМР спектрах для доказательства изомерной структуры.The isomeric structure of the obtained compound was established using 2D NMR spectra of NOESY, HSQC and HMBC. Below is the structural formula of compound 1а, which shows the correlation of protons in 2D NMR spectra to prove the isomeric structure.

Структурная формула соединения 1а:Structural formula of compound 1а:

Figure 00000006
Figure 00000006

Пример 2. Аналогично из 330 мг 16β,17β-эпокси-17-изопрегн-5-ен-3β-ол-20-она (2) и 255 мг N-(4-фторфенил)-2-гидразинил-2-тиоксоацетамида (R=F) получено 355 мг (выход 65%) (3S,8R,9S,10R,13S,14S,16R,17R)-5'-метил-[2'-(N-(4-фторфенил)карбамоил)]-3,16-дигидроксиспироандрост-5-ен-17,6'[1,3,4]тиадиазина (1b), чистота 98% (по ЯМР). Т.пл. 188-190°С. 1H NMR (600 МГц, ДМСО-d6): δ 0.78 (ддд, J=4.9, 12.4, 15.4 Гц, 1Н, 9-СН), 0.85 (с, 3Н, 18-СН3), 0.87 (с, 3Н, 19-СН3), 0.86-0.98 (м, 2Н, 1-СН2, 12-СН2), 1.03-1.10 (м, 1Н, 12-СН2), 1.17-1.40 (м, 4Н, 2-СН2, 8-СН, 11-СН2), 1.47-1.70 (м, 4Н, 1-СН2, 2-СН2, 7-СН2, 15-СН2), 1.79 (ддд, J=2.3, 10.4, 11.2 Гц, 1Н, 14-СН), 1.84-1.97 (м, 2Н, 7-СН2, 15-СН2), 2.04 (дд, J=8.7, 13.3 Гц, 1H, 4-СН2), 2.13 (дд, J=4.9, 13.3 Гц, 1Н, 4-СН2), 2.47 (с, 3Н, 21-СН3), 3.19-3.22 (м, 1Н, 3-СН), 4.50 (уш.с, 1Н, 3-ОН), 5.22-5.28 (м, 2Н, 6-СН, 16-СН), 5.67 (уш.с, 1H, 16-ОН), 7.18 (дд, J=8.4, 9.0 Гц, 2Н, Аг), 7.89 (dd, J=4.8, 8.4 Гц, 2Н, Ar), 10.6 (уш.с, 1Н, NH). 13С NMR (150.9 МГц, ДМСО-d6): δ 14.8 (18-СН3), 19.0 (19-CH3), 20.0 (11-CH2), 23.5 (СН3), 31.1 (8-СН), 31.2 (7-CH2), 31.3 (2-CH2), 33.7 (15-CH2), 34.6 (12-CH2), 35.9 (10-С), 36.6 (1-СН2), 42.1 (4-СН2), 46.0 (14-СН), 48.8 (9-СН), 51.2 (13-С), 62.2 (17-С), 69.9 (3-СН), 72.5 (16-СН), 115.1 (д, JC-F=23.0 Гц, 2СН, Ar), 120.0 (6-СН), 122.3 (д, JC-F=6.9 Гц, 2СН, Ar), 134.4 (С, Ar), 141.2 (5-С), 152.8 (2'-С), 154.0 (5'-С), 158.5 (д, JC-F.=240.9 Гц, С, Ar), 160.0 (СО). Изомерная структура полученного соединения установлена аналогично примеру 1 с помощью 2D ЯМР спектров ROESY, HSQC и НМВС. Спектр HRMS (ESI) для C29H36FN3O3SNa ([M+Na]+): вычислено 548.2354, найдено 548.2345.Example 2. Similarly, from 330 mg of 16β, 17β-epoxy-17-isopregn-5-en-3β-ol-20-one (2) and 255 mg of N- (4-fluorophenyl) -2-hydrazinyl-2-thioxoacetamide ( R = F) 355 mg was obtained (65% yield) (3S, 8R, 9S, 10R, 13S, 14S, 16R, 17R) -5'-methyl- [2 '- (N- (4-fluorophenyl) carbamoyl)] -3,16-dihydroxyspiroandrost-5-ene-17,6 '[1,3,4] thiadiazine (1b), purity 98% (by NMR). M.p. 188-190 ° C. 1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ): δ 0.78 (ddd, J = 4.9, 12.4, 15.4 Hz, 1H, 9-CH), 0.85 (s, 3H, 18-CH 3 ), 0.87 (s, 3H, 19-CH 3 ), 0.86-0.98 (m, 2H, 1-CH 2 , 12-CH 2 ), 1.03-1.10 (m, 1H, 12-CH 2 ), 1.17-1.40 (m, 4H, 2 -CH 2 , 8-CH, 11-CH 2 ), 1.47-1.70 (m, 4H, 1-CH 2 , 2-CH 2 , 7-CH 2 , 15-CH 2 ), 1.79 (ddd, J = 2.3 , 10.4, 11.2 Hz, 1H, 14-CH), 1.84-1.97 (m, 2H, 7-CH 2 , 15-CH 2 ), 2.04 (dd, J = 8.7, 13.3 Hz, 1H, 4-CH 2 ) , 2.13 (dd, J = 4.9, 13.3 Hz, 1H, 4-CH 2 ), 2.47 (s, 3H, 21-CH 3 ), 3.19-3.22 (m, 1H, 3-CH), 4.50 (br.s , 1H, 3-OH), 5.22-5.28 (m, 2H, 6-CH, 16-CH), 5.67 (br.s, 1H, 16-OH), 7.18 (dd, J = 8.4, 9.0 Hz, 2H , Ar), 7.89 (dd, J = 4.8, 8.4 Hz, 2H, Ar), 10.6 (br.s, 1H, NH). 13 С NMR (150.9 MHz, DMSO-d 6 ): δ 14.8 (18-СН 3 ), 19.0 (19-CH 3 ), 20.0 (11-CH 2 ) , 23.5 (СН 3 ), 31.1 (8-СН) , 31.2 (7-CH 2 ), 31.3 (2-CH 2 ), 33.7 (15-CH 2 ), 34.6 (12-CH 2 ), 35.9 (10-С), 36.6 (1-CH 2 ), 42.1 ( 4-CH 2 ), 46.0 (14-CH), 48.8 (9-CH), 51.2 (13-C), 62.2 (17-C), 69.9 (3-CH), 72.5 (16-CH), 115.1 ( d, J CF = 23.0 Hz, 2СН, Ar), 120.0 (6-СН), 122.3 (d, J CF = 6.9 Hz, 2СН, Ar), 134.4 (С, Ar), 141.2 (5-С), 152.8 (2'-C), 154.0 (5'-C), 158.5 (d, J CF. = 240.9 Hz, C, Ar), 160.0 (CO). The isomeric structure of the resulting compound was established analogously to example 1 using 2D NMR spectra ROESY, HSQC and HMBC. HRMS (ESI) spectrum for C 29 H 36 FN 3 O 3 SNa ([M + Na] + ): calculated 548.2354, found 548.2345.

Испытания предлагаемых соединений на противовирусную активности.Tests of the proposed compounds for antiviral activity.

Пример 3. Испытания противовирусной активности в отношении вируса Эпштейна-Барра.Example 3. Tests of antiviral activity against the Epstein-Barr virus.

Испытания противовирусной активности проводили непосредственно на клетках обезьяны (Saguinus oedipus) В95-8, продуцирующих вирус Эпштейна-Барра. Высвобождение вируса оценивали количественно путем измерения внеклеточной вирусной ДНК в среде для культивирования клеток методом ПНР. В таблице 1 представлены результаты испытаний через 14 дней после обработки культуры клеток предлагаемыми соединениями 1a (R=Н) и 1b (R=F), а также спиронолактоном в концентрации 25 мкМ по сравнению с контрольным опытом (культура клеток без добавления дополнительных веществ).Antiviral activity tests were performed directly on monkey (Saguinus oedipus) B95-8 cells producing the Epstein-Barr virus. Virus release was quantified by measuring the extracellular viral DNA in a cell culture medium by the PCR method. Table 1 shows the test results 14 days after treatment of the cell culture with the proposed compounds 1a (R = H) and 1b (R = F), as well as spironolactone at a concentration of 25 μM compared to the control experiment (cell culture without adding additional substances).

Figure 00000007
Figure 00000007

Таким образом, фторзамещенный 1b показал наибольшую эффективность ингибирования, которая на 14 день оказалась примерно на 50% выше по сравнению со спиронолактоном.Thus, fluorine-substituted 1b showed the highest inhibition efficiency, which on day 14 was approximately 50% higher compared to spironolactone.

Пример 4. Испытания противовирусной активности в отношении вируса герпеса лошадей EHV-1.Example 4. Tests of antiviral activity against equine herpesvirus EHV-1.

Испытания противовирусной активности проводили непосредственно на клетках Vero с использованием вируса EHV-1 (Kentucky D). Культуры клеток обрабатывали соединениями 1а,b в концентрации 25 мкМ. Высвобождение вируса оценивали путем измерения внеклеточной ДНК в среде для культивирования клеток методом ПЦР. В таблице 2 представлены результаты испытаний через 7 дней после обработки культуры клеток предлагаемыми соединениями 1a (R=Н) и 1b (R=F) в концентрации 25 мкМ по сравнению с контрольным опытом. По результатам испытаний фторзамещенный 1b также оказался наиболее эффективным.Antiviral activity tests were performed directly on Vero cells using the EHV-1 virus (Kentucky D). Cell cultures were treated with compounds 1а, b at a concentration of 25 μM. Virus release was assessed by measuring extracellular DNA in a cell culture medium by PCR. Table 2 shows the test results 7 days after treatment of the cell culture with the proposed compounds 1a (R = H) and 1b (R = F) at a concentration of 25 μM in comparison with the control experiment. According to the test results, fluorine-substituted 1b also proved to be the most effective.

Figure 00000008
Figure 00000008

Пример 5. Испытания цитотоксичности.Example 5. Testing cytotoxicity.

Соединения 1а,b были протестированы на цитотоксичность на клетках В95-8 при концентрации 25 мкМ в течение 14 дней. Скорость роста клеток была одинаковой для протестированных соединений и контрольного опыта. Таким образом, соединения 1а,b не обладают клеточной токсичностью. Техническим результатом предлагаемого изобретения является получение новых химических соединений общей формулы 1, обладающих противовирусным действием в отношении вирусов герпеса, патогенных для человека (пример 3) и животных (пример 4) при низкой клеточной токсичности и высокой степени (эффективности) ингибирования, примерно на 50% выше по сравнению со спиронолактоном для соединеия 1b.Compounds 1a, b were tested for cytotoxicity on B95-8 cells at a concentration of 25 μM for 14 days. The growth rate of the cells was the same for the tested compounds and the control experiment. Thus, compounds 1а, b do not exhibit cellular toxicity. The technical result of the proposed invention is to obtain new chemical compounds of general formula 1 with antiviral action against herpes viruses pathogenic for humans (example 3) and animals (example 4) with low cellular toxicity and a high degree (efficiency) of inhibition, by about 50% higher compared to spironolactone for compound 1b.

Claims (4)

1. Замещенные спироандростен-17,6'[1,3,4]тиадиазины общей формулы:1. Substituted spiroandrostene-17,6 '[1,3,4] thiadiazines of the general formula:
Figure 00000009
Figure 00000009
 где R=Η или F.where R = Η or F. 2. Соединения общей формулы по п. 1, обладающие противовирусной активностью в отношении вирусов герпеса.2. Compounds of the general formula according to claim 1, having antiviral activity against herpes viruses.
RU2021111981A 2021-04-27 2021-04-27 Substituted spiro androstenes-17, 6'[1,3,4]thiadiazines with antiviral activity RU2750639C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021111981A RU2750639C1 (en) 2021-04-27 2021-04-27 Substituted spiro androstenes-17, 6'[1,3,4]thiadiazines with antiviral activity

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021111981A RU2750639C1 (en) 2021-04-27 2021-04-27 Substituted spiro androstenes-17, 6'[1,3,4]thiadiazines with antiviral activity

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2750639C1 true RU2750639C1 (en) 2021-06-30

Family

ID=76755846

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021111981A RU2750639C1 (en) 2021-04-27 2021-04-27 Substituted spiro androstenes-17, 6'[1,3,4]thiadiazines with antiviral activity

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2750639C1 (en)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA018632B1 (en) * 2007-06-20 2013-09-30 Бионейчэ Е.А. Лтд. Neurosteroid compounds

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA018632B1 (en) * 2007-06-20 2013-09-30 Бионейчэ Е.А. Лтд. Neurosteroid compounds

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. S. Komendantova et al. "Novel steroidal 1,3,4-thiadiazines: Synthesis and biological evaluation in androgen receptor-positive prostate cancer 22Rv1 cells" Bioorganic Chemistry, 91, 2019, 103142. *
C. Thieulent et al. "Identification of antiviral compounds against equid herpesvirus-1 using real-time cell assay screening: Efficacy of decitabine and valganciclovir alone or in combination" Antiviral Research, 183, 2020, 104931. *
D. Verma et al. "Spironolactone blocks Epstein-Barr virus production by inhibiting EBV SM protein function" Proceedings of the National Academy of Sciences, 113(13), 2016, 3609-3614. *
D. Verma et al. "Spironolactone blocks Epstein-Barr virus production by inhibiting EBV SM protein function" Proceedings of the National Academy of Sciences, 113(13), 2016, 3609-3614. A. S. Komendantova et al. "Novel steroidal 1,3,4-thiadiazines: Synthesis and biological evaluation in androgen receptor-positive prostate cancer 22Rv1 cells" Bioorganic Chemistry, 91, 2019, 103142. C. Thieulent et al. "Identification of antiviral compounds against equid herpesvirus-1 using real-time cell assay screening: Efficacy of decitabine and valganciclovir alone or in combination" Antiviral Research, 183, 2020, 104931. Антонов Я. С. Синтез стероидных структур, содержащих гетероциклические фрагменты. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук, Москва, 2013. *
Антонов Я. С. Синтез стероидных структур, содержащих гетероциклические фрагменты. Авто диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук, Москва, 2013. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111511722B (en) Method for preparing oxa-goril intermediate and composition thereof
EP2334686B1 (en) Cortistatin analogues and syntheses therof
RU2769050C1 (en) Crystalline form and salt form of a pyridoimidazole compound and a corresponding method of producing
SU980627A3 (en) Process for producing n-desmethylvinblastine, vincristine, n-desmethylleurosine, h-dimethyl-n-formylleurosine, n-dismethyl-n-(ethoxymethyl)-vinblastine, n-desmethyl-n-(ethoxymethyl)-leurosine or their salts
RU2750639C1 (en) Substituted spiro androstenes-17, 6'[1,3,4]thiadiazines with antiviral activity
WO2023202052A1 (en) Method for preparing 10-oxo-nonadecanedioic acid
KR102388809B1 (en) Methods for preparing bile acids
CN108017621B (en) Morpholinyl acetamido dimethoxy benzo [ d ] aza-based quinazoline compound and preparation and application thereof
CN107698648B (en) Naphthylimide derivative containing cholesterol and synthesis and application thereof
RU2620084C1 (en) 2-ethyl-6-oxaestra-1,3,5(10),8,14-pentenes sulfamates as mcf-7 tumour cells proliferation inhibitors
Earl et al. Chemical investigations of citraconimide
CN108125962B (en) Application of benzo [ d ] aza-quinazoline compound in preparation of drugs for treating lung cancer
CN108101892B (en) Chrysin non-natural amino acid derivative and preparation method and application thereof
CN110072873B (en) Industrial method for synthesizing nomegestrol acetate
Anastasiou et al. On the formation of homo‐azasteroidal esters of N, N‐bis (2‐chloroethyl) aminobenzoic acid isomers and their antitumor activity
CN108329300B (en) Nitrobenzo [ d ] aza-quinazoline compound and preparation method and application thereof
CN112920241B (en) Benzimidazole derivative BI308 and preparation method and application thereof
CN115141244B (en) Chenodeoxycholic acid methylprednisolone ester compound as well as preparation method and application thereof
Fonken Cycloethylene Ketals of Δ4, 6-3-Ketosteroids
CN112812145B (en) Benzimidazole derivative BI293 and preparation method and application thereof
RU2807870C1 (en) Phosphoryl substituted 3-keto-androst-4-ene-[16,17-d]pyridazines and method of their preparation
AU2014100813A4 (en) 2'-Epi-uscharin from the Latex of Calotropis gigantea with HIF-1 Inhibitory Activity
Novichikhina et al. Synthesis of a novel series of 1, 2-dihydroquinoline-8-glyoxylamide derivatives
CN114907437B (en) Androstanol derivative with anti-tumor activity and preparation method and application thereof
CN112703190B (en) Crystal forms of HDAC6 selective inhibitor and uses thereof