RU2745401C1 - Method for inducing the secretion of biologically active compounds in sea snail rapana venosa val. - Google Patents
Method for inducing the secretion of biologically active compounds in sea snail rapana venosa val. Download PDFInfo
- Publication number
- RU2745401C1 RU2745401C1 RU2020124025A RU2020124025A RU2745401C1 RU 2745401 C1 RU2745401 C1 RU 2745401C1 RU 2020124025 A RU2020124025 A RU 2020124025A RU 2020124025 A RU2020124025 A RU 2020124025A RU 2745401 C1 RU2745401 C1 RU 2745401C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biologically active
- active compounds
- mollusks
- rapana
- solution
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 241000543567 Rapana venosa Species 0.000 title claims description 14
- 230000028327 secretion Effects 0.000 title claims description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title claims 2
- 241001374849 Liparis atlanticus Species 0.000 title abstract 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 26
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims abstract description 15
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 13
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims abstract description 5
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 claims description 32
- 241001147141 Rapana Species 0.000 claims description 23
- 241001506137 Rapa Species 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 4
- 230000020509 sex determination Effects 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- 241000237858 Gastropoda Species 0.000 description 10
- 241000237536 Mytilus edulis Species 0.000 description 10
- 235000020638 mussel Nutrition 0.000 description 10
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 7
- 241000984536 Dicathais orbita Species 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N benzocaine Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 4
- 241001531296 Muricidae Species 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 3
- CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N (3z)-3-(3-oxo-1h-indol-2-ylidene)-1h-indol-2-one Chemical class N/1C2=CC=CC=C2C(=O)C\1=C1/C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N Magnesium oxide Chemical compound [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 229960005274 benzocaine Drugs 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000020639 clam Nutrition 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 210000003899 penis Anatomy 0.000 description 2
- 238000006552 photochemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 241000237519 Bivalvia Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010025454 Cyclin-Dependent Kinase 5 Proteins 0.000 description 1
- 102100026805 Cyclin-dependent-like kinase 5 Human genes 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010051975 Glycogen Synthase Kinase 3 beta Proteins 0.000 description 1
- 102100038104 Glycogen synthase kinase-3 beta Human genes 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241001059627 Murex brandaris Species 0.000 description 1
- 241001531295 Muricoidea Species 0.000 description 1
- 241001147138 Mytilus galloprovincialis Species 0.000 description 1
- 241000238003 Neogastropoda Species 0.000 description 1
- 241000500459 Nucella lapillus Species 0.000 description 1
- 241000500444 Plicopurpura patula Species 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 241001672981 Purpura Species 0.000 description 1
- 206010037549 Purpura Diseases 0.000 description 1
- SATFYAMEGITBTG-UHFFFAOYSA-N Tyrindoxyl sulfate Chemical compound BrC1=CC=C2C(OS(O)(=O)=O)=C(SC)NC2=C1 SATFYAMEGITBTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 1
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- -1 choline ester Chemical class 0.000 description 1
- 239000003653 coastal water Substances 0.000 description 1
- 230000009193 crawling Effects 0.000 description 1
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000000087 hemolymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 150000002475 indoles Chemical class 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 229940055076 parasympathomimetics choline ester Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 150000003248 quinolines Chemical class 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000004648 relaxation of smooth muscle Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N sodium;5-ethyl-5-pentan-2-yl-1,3-diazinane-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
- A01K61/50—Culture of aquatic animals of shellfish
- A01K61/51—Culture of aquatic animals of shellfish of gastropods, e.g. abalones or turban snails
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и предназначено для получения натурального продукта для фармакологических целей.The invention relates to the field of biotechnology and is intended to obtain a natural product for pharmacological purposes.
Известно, что у всех моллюсков, принадлежащих к надсемейству Muricoidea, очень высокое содержание сложных эфиров, строго локализованных в средней области гипобранхиальной железы, секретирующей краситель [Andrews, 1991]. Сложные эфиры холина представлены мурексином, дигидромурексином и сенсиоилхолином. Так, у R. bezaor (Linn.), близкого вида R. venosa, содержание мурексина и сенсиоилхолина составило соответственно 400 и 100 мг·г-1 свежих мягких тканей [Roseghini et al., 1996]. Авторами установлено, что все соединения обладали сильным нервно-мышечным блокирующим действием, вызывая паралич мускулатуры беспозвоночных, в том числе паралич замыкательных мышц двустворчатых моллюсков.It is known that all mollusks belonging to the superfamily Muricoidea have a very high content of esters strictly localized in the middle region of the dye-secreting hypobranchial gland [Andrews, 1991]. Choline esters are represented by murexin, dihydromurexin and sensioylcholine. Thus, in R. bezaor (Linn.), A closely related species of R. venosa, the content of murexin and sensioylcholine was 400 and 100 mg g -1 of fresh soft tissues, respectively [Roseghini et al., 1996]. The authors found that all compounds had a strong neuromuscular blocking effect, causing paralysis of the muscles of invertebrates, including paralysis of the articular muscles of bivalve molluscs.
Хищный брюхоногий моллюск рапана Rapana venosa питается двустворчатыми моллюсками, но основным пищевым объектом являются мидии (Чухчин, 1984). Взрослые особи при нападении парализуют жертву, выделяя биотоксин сложного биохимического состава (Cesari, Mizzan, 1993). Биотоксин вырабатывается в гипобранхиальной железе, которая разделяется на три отдела: два боковых, выделяющих слизь, и средний, окрашенный в молочно-белый цвет, секретирующий краситель пурпур (Чухчин, 1970; Ponte, Modica, 2017). Известно, что фиолетовый тириан образуется из секрета гипобранхиальных желез брюхоногих моллюсков из соли-предшественника холинового эфира тириндоксилсульфата после серии ферментативных, окислительных и фотохимических реакций [Benkendorff et al., 2001]. Эти биоактивные вторичные метаболиты относятся к химическому классу индоловых алкалоидов, которые являются натуральными продуктами для производства лекарств [Grabley, Sattler, 2003]. Установлено, что производные индирубина эффективно ингибируют пролиферацию раковых клеток [Leclerc et al., 2001; Meijer et al., 2003; Kim et al., 2007], а также вызывают апоптоз в клетках рака молочной железы и простаты человека [Brown, Wouters, 1999; Nam et al., 2005; Kim et al., 2007]. Широко признано, что гибель клеток после повреждения ДНК противоопухолевыми агентами является, главным образом, результатом апоптоза [Brown, Wouters, 1999].The predatory gastropod mollusk Rapana venosa feeds on bivalve mollusks, but mussels are the main food item (Chukhchin, 1984). When attacked, adults paralyze the victim, releasing a biotoxin of a complex biochemical composition (Cesari and Mizzan, 1993). The biotoxin is produced in the hypobranchial gland, which is divided into three sections: two lateral ones that secrete mucus, and the middle one, colored milky white, secreting a dye purple (Chukhchin, 1970; Ponte, Modica, 2017). It is known that violet tyrian is formed from the secretion of the hypobranchial glands of gastropods from the precursor salt of the choline ester of tirindoxyl sulfate after a series of enzymatic, oxidative, and photochemical reactions [Benkendorff et al., 2001]. These bioactive secondary metabolites belong to the chemical class of indole alkaloids, which are natural products for the production of drugs [Grabley, Sattler, 2003]. Found that derivatives of indirubin effectively inhibit the proliferation of cancer cells [Leclerc et al., 2001; Meijer et al., 2003; Kim et al., 2007], and also induce apoptosis in human breast and prostate cancer cells [Brown, Wouters, 1999; Nam et al., 2005; Kim et al., 2007]. It is widely accepted that cell death after DNA damage by anticancer agents is mainly the result of apoptosis [Brown, Wouters, 1999].
Известно, что для получения веществ, содержащихся в гипобранхиальной железе брюхоногих моллюсков (Nucella lapillus, Murex brandaris, M. trunculus, Purpura capillus, P. patula, Dicathais orbita) ее иссекают, при этом высвобождается фермент (пурпураза), который удаляет сульфатную группу с образованием тириндоксила. Тириндоксилсульфат выделяют из желез экстракцией этанола [Cooksey, 2001].It is known that to obtain substances contained in the hypobranchial gland of gastropods (Nucella lapillus, Murex brandaris, M. trunculus, Purpura capillus, P. patula, Dicathais orbita), it is excised, while the enzyme (purpurase) is released, which removes the sulfate group the formation of tirindoxil. Tyrindoxyl sulfate is isolated from the glands by ethanol extraction [Cooksey, 2001].
Известен способ стимуляции выделения биологически активных соединений у брюхоногого моллюска Dicathais orbita Gmelin, 1781 -эндемика южной части Австралии и прибрежных вод Новой Зеландии. [Warwick James Noble. Aspects of life history and ecology of Dicathais orbita Gmelin, 1781 related to potential aquaculture for bioactive compound recovery // A thesis submitted to the Flinders University, in candidature for the degree Doctorate of Philosophy. School of Biological Sciences Flinders University. - 2014. - 156 p.https://flex.flinders.edu.au/file/20844afe-ccb6-4112-bb2a-6d3784d3ed73/l/Thesis-Noble-2014.pdf]. Для индукции секреции биологически активных соединений у моллюсков D. orbita трех размерных классов (23-33 мм, 33,5-53 мм и > 53,5 мм) были протестированы четыре химических вещества, растворенные в морской воде: 5% этанол; бензокаин, 200 мг·л-1; пентабарбитал натрия, концентрации 1 мг·л-1 и 0,5 М магния хлорид. В качестве контроля была свежая морская вода. Моллюсков погружали на один час в раствор стимулятора, причем каждый моллюск подвергался воздействию только одного вещества. Установлено, что только растворы этанола и бензокаина стимулировали выделение биологически активных соединений. Как утверждает автор, это связано с эффектом нарушения контроля нервной системой за расслаблением мышцы ноги и стрессовой реакцией у D. orbita, что приводит к изгнанию слизи, содержащей биоактивные предшественники пурпурного тириана. После воздействия указанными веществами на животных, за их питанием наблюдали еще в течение 5 дней. Однако, как утверждает автор, нельзя исключить возможность долгосрочных сублетальных последствий.A known method of stimulating the release of biologically active compounds in the gastropod mollusk Dicathais orbita Gmelin, 1781 is an endemic of southern Australia and the coastal waters of New Zealand. [Warwick James Noble. Aspects of life history and ecology of Dicathais orbita Gmelin, 1781 related to potential aquaculture for bioactive compound recovery // A thesis submitted to the Flinders University, in candidature for the degree Doctorate of Philosophy. School of Biological Sciences Flinders University. 2014. 156 p.https: //flex.flinders.edu.au/file/20844afe-ccb6-4112-bb2a-6d3784d3ed73/l/Thesis-Noble-2014.pdf]. To induce the secretion of biologically active compounds in the molluscs D. orbita of three size classes (23-33 mm, 33.5-53 mm and> 53.5 mm), four chemicals were tested, dissolved in seawater: 5% ethanol; benzocaine, 200 mg · l -1 ; sodium pentabarbital,
Задачей изобретения является разработка способа прижизненной многократной стимуляции выделения биологически активных соединений (БАС) у рапаны R. venosa.The objective of the invention is to develop a method for intravital multiple stimulation of the release of biologically active compounds (BAC) in the rapaid R. venosa.
Технический результат от решения поставленной задачи заключается в том, что разработана технология прижизненного получения биологически активных соединений у хищного брюхоногого моллюска рапаны R. venosa - сырья для производства медицинских препаратов. Такая технология разработана впервые и позволяет получать значительное количество БАС. Кроме того, дополнительным техническим результатом является возможность прижизненного определения пола моллюсков, что имеет значение и для научных целей при изучении популяционной структуры моллюсков.The technical result of solving the problem is that a technology has been developed for the in vivo production of biologically active compounds in the predatory gastropod molluscum rapana R. venosa - a raw material for the production of medicines. This technology was developed for the first time and allows obtaining a significant amount of UAS. In addition, an additional technical result is the possibility of in vivo sex determination of mollusks, which is also important for scientific purposes when studying the population structure of mollusks.
Заявленный технический результат достигается благодаря тому, что в Способе индукции секреции биологически активных соединений у рапаны Rapana venosa Val., включающем стимуляцию выделения биологически активных соединений, в соответствии с изобретением моллюсков отбирают из естественной среды обитания при температуре морской воды от 17,2°С до 8,2°С. Для стимуляции используют комбинированный стимулирующий раствор, состоящий из 25%-го сульфата магния (MgSO4) и 0,04% раствора серотонина (C14H19N5O2·H2SO4), который вводят голодным рапанам шприцем в хобот или мышцу ноги. Для моллюсков с высотой раковины 46,30÷59,27 мм объем комбинированного стимулирующего раствора составляет 0,5 мл; для моллюсков с высотой раковины 60÷77 мм - 1 мл; для моллюсков с высотой раковины 114,14 мм - 1,5 мл. Комбинированный стимулирующий раствор готовят путем растворения 4 мг серотонина в 10 мл дистиллированной воды и 10 мл 25% магния сульфата, объемы которых соединяют в соотношении 1:1. Кроме того, для стимуляции выделения биологически активных соединений отбирают моллюсков с высотой раковины больше 60 мм и общим весом больше 30 г. Помимо этого, после введения комбинированного стимулирующего раствора проводят прижизненное определение пола рапаны.The claimed technical result is achieved due to the fact that in the Method for induction of the secretion of biologically active compounds in Rapana venosa Val. 8.2 ° C. For stimulation, a combined stimulating solution is used, consisting of 25% magnesium sulfate (MgSO 4 ) and 0.04% serotonin solution (C 14 H 19 N 5 O 2 H 2 SO 4 ), which is injected into the trunk of hungry rapa with a syringe or muscle of the leg. For mollusks with a shell height of 46.30 ÷ 59.27 mm, the volume of the combined stimulating solution is 0.5 ml; for mollusks with a shell height of 60 ÷ 77 mm - 1 ml; for molluscs with a shell height of 114.14 mm - 1.5 ml. The combined stimulating solution is prepared by dissolving 4 mg of serotonin in 10 ml of distilled water and 10 ml of 25% magnesium sulfate, the volumes of which are combined in a 1: 1 ratio. In addition, to stimulate the release of biologically active compounds, mollusks with a shell height of more than 60 mm and a total weight of more than 30 g are selected. In addition, after the introduction of the combined stimulating solution, an in vivo sex determination of the rapana is carried out.
Заявляемый способ соответствует критериям: новизна и изобретательский уровень, т.к. впервые предложены условия для индукции секреции биологически активных соединений у рапаны Rapana venosa, не требующие сложного и дорогостоящего оборудования или привлечения дорогостоящих химических реактивов. Проведенные патентные исследования, а также изучение доступных научных публикаций, относящихся к теме изобретения, не обнаружили решений, имеющих признаки, сходные с заявляемым техническим решением, что подтверждает выводы о соответствии критериям патентоспособности.The claimed method meets the criteria: novelty and inventive step, tk. For the first time, conditions were proposed for the induction of the secretion of biologically active compounds in Rapana venosa, which do not require complex and expensive equipment or the use of expensive chemical reagents. The conducted patent research, as well as the study of available scientific publications related to the subject of the invention, did not find solutions that have features similar to the claimed technical solution, which confirms the conclusions about compliance with the patentability criteria.
Изобретение поясняется иллюстрациями, где:The invention is illustrated by illustrations, where:
Фиг. 1 - А - садок с рапанами; Б - рапаны в лаборатории перед стимуляцией выделения биологически активных соединений;FIG. 1 - A - cage with rapa; B - rapanas in the laboratory before stimulating the release of biologically active compounds;
Фиг. 2 - Места введения стимулирующего раствора: 1 - хобот, 2 - мышца ноги;FIG. 2 - Stimulating solution injection sites: 1 - trunk, 2 - leg muscle;
Фиг. 3 - Процесс выделения биологически активных соединений рапанами после стимуляции: А - свежевыделенный секрет гипобранхиальной железы желтого цвета; Б - секрет гипобранхиальной железы после окислительных и фотохимических реакций - розового и пурпурного цвета;FIG. 3 - The process of release of biologically active compounds with rapa beans after stimulation: A - freshly isolated yellow hypobranchial gland secretion; B - the secret of the hypobranchial gland after oxidative and photochemical reactions - pink and purple;
Фиг. 4 - Выделение биологически активных соединений рапанами после стимуляции (Таблица);FIG. 4 - Isolation of biologically active compounds with rapans after stimulation (Table);
Фиг. 5 - Зависимость доли (в %) особей рапаны, выделивших биологически активные соединения, от температуры воды в море;FIG. 5 - Dependence of the proportion (in%) of the rapana specimens that have released biologically active compounds on the temperature of the water in the sea;
Фиг. 6 - Самец рапаны. Стрелкой обозначен половой орган - penis.FIG. 6 - Male rapana. The arrow indicates the penis - penis.
Заявляемый способ является результатом научных исследований. Материалом для исследований послужили рапаны R. venosa с высотой раковины от 46,30 до 114,1 мм, возрастом от 2+ до 4+ лет. Моллюски были собраны в ноябре 2019 г в бухте Севастопольская на глубине от 9 до 15 м под "мидийной фермой (внешний рейд Севастопольской бухты). В дальнейшем содержание моллюсков проходило пластмассовом садке (сверху обшитом делью для предотвращения их выползания), (Фиг. 1А) и подвешенном в море на глубине 2,5 м (соленость 18%). Кормом для рапан были живые мидии размерами от 60 до 79 мм (среднее значение длины -70 мм), выращенные на мидийной ферме.The claimed method is the result of scientific research. The material for the research was the rapa shells R. venosa with a shell height of 46.30 to 114.1 mm and an age of 2+ to 4+ years. The mollusks were collected in November 2019 in the Sevastopolskaya Bay at a depth of 9 to 15 m under the "mussel farm (outer roadstead of the Sevastopol Bay). Subsequently, the mollusks were kept in a plastic cage (top sheathed with a case to prevent their crawling), (Fig. 1A) and suspended in the sea at a depth of 2.5 m (
Перед началом стимуляции определяли общий вес моллюсков (весы OHAUS, с точностью до 0,01 г). Массу мягких тканей мидий, потребленных рапанами, рассчитывали по формуле (Пиркова и др., 2019):Before the start of stimulation, the total weight of the mollusks was determined (OHAUS balance, accurate to 0.01 g). The mass of soft tissues of mussels consumed by rapa beans was calculated using the formula (Pirkova et al., 2019):
В течение 28.10.19 - 10.03.20 года с интервалом в 2-3 недели в лабораторных условиях стимулировали выделение биологически активных соединений у рапан, используя комбинированный раствор: сульфата магния (MgSO4 - 12,5%) с раствором серотонина (C14H19N5O2·H2SO4 - 0,02%). Стимулирующий раствор готовили следующим способом: 4 мг серотонина растворяли в 10 мл дистиллированной воды и добавляли 10 мл 25% магния сульфата. Состав стимулирующего раствора выбран авторами на основании сведений о синергическом действии серотонина и сульфата магния на физиологические функции моллюсков, связанные с питанием. Доказано, что серотонин является нейромодулятором, контролирующим питание у беспозвоночных животных (Dayan, Huys, 2009). Таким образом, увеличение - концентрации серотонина в гемолимфе моллюска после введения его в мышцу ноги или через хобот - в пищеварительную систему, является сигналом для стимуляции синтеза БАС. А сульфат магния (магнезия), вызывая расслабление гладкой мускулатуры и расширение сосудов (https://apteka.103.by/magnija-sulfat-instruktsiya/#3 - 02.06.2020), способствует беспрепятственному его выделению. Таким образом, комбинированный раствор серотонина и сульфата магния является эффективным стимулятором выделения биологически активных соединений у рапаны, не оказывая отрицательного влияния на жизнеспособность моллюсков,During 10/28/19 - 03/10/2020, with an interval of 2-3 weeks under laboratory conditions, the release of biologically active compounds in rapa was stimulated using a combined solution: magnesium sulfate (MgSO 4 - 12.5%) with a solution of serotonin (C 14 H 19 N 5 O 2 · H 2 SO 4 - 0.02%). The stimulating solution was prepared in the following way: 4 mg of serotonin was dissolved in 10 ml of distilled water and 10 ml of 25% magnesium sulfate was added. The composition of the stimulating solution was selected by the authors on the basis of information on the synergistic effect of serotonin and magnesium sulfate on the physiological functions of mollusks associated with nutrition. It has been proven that serotonin is a neuromodulator that controls nutrition in invertebrates (Dayan and Huys, 2009). Thus, an increase in the concentration of serotonin in the hemolymph of a mollusk after its introduction into the leg muscle or through the trunk into the digestive system is a signal to stimulate the synthesis of ALS. And magnesium sulfate (magnesia), causing relaxation of smooth muscles and vasodilation (https://apteka.103.by/magnija-sulfat-instruktsiya/#3 - 06/02/2020), promotes its unimpeded release. Thus, the combined solution of serotonin and magnesium sulfate is an effective stimulant for the release of biologically active compounds in rapana, without negatively affecting the viability of mollusks,
При помощи шприца раствор вводили в хобот или в мышцу ноги рапаны (Фиг. 2). Затем моллюсков раскладывали на поддон устьем вверх (Фиг. 1Б). После появления в устье мутно-желтой жидкости, рапаны устанавливали на бюксы или мерные стаканы вниз сифональным каналом (Фиг. 3). За период с 28.10.2019 г. по 10.03.2020 г. с интервалом в 2-3 недели было проведено 10 стимуляций выделения БАС у рапан (табл. 1).Using a syringe, the solution was injected into the trunk or into the leg muscle of the rapana (Fig. 2). Then the mollusks were laid out on a tray with the mouth up (Fig. 1B). After the appearance of a cloudy yellow liquid in the mouth, the rapans were placed on weighing bottles or measuring glasses downward with a siphonal channel (Fig. 3). For the period from 28.10.2019 to 10.03.2020, with an interval of 2-3 weeks, 10 stimulations of ALS secretion were performed in rapan (Table 1).
Экспериментально был определен оптимальный объем вводимого стимулирующего раствора в зависимости от размера моллюсков. Для моллюсков с высотой раковины от 46,30 до 59,27 мм он составил 0,5 мл; для рапан размерами от 60 до 77 мм - 1 мл; с высотой раковины 114,14 мм - 1,5 мл (№20). После введения стимулирующего раствора в мышцу ноги выделение БАС начиналось через 2-3 мин; при введении его в хобот начало выделения у разных особей было отмечено в интервале от 3 до 11 мин.The optimal volume of the injected stimulating solution was experimentally determined depending on the size of the mollusks. For mollusks with a shell height of 46.30 to 59.27 mm, it was 0.5 ml; for rapan with sizes from 60 to 77 mm - 1 ml; with a shell height of 114.14 mm - 1.5 ml (No. 20). After the introduction of the stimulating solution into the leg muscle, the release of ALS began in 2-3 minutes; when it was introduced into the trunk, the onset of excretion in different individuals was noted in the interval from 3 to 11 min.
Установлены зависимости среднего объема, выделенного БАС от высоты раковины (1) и от общего веса (2) моллюсков:The dependences of the average volume released by BAS on the shell height (1) and on the total weight (2) of the molluscs have been established:
где: V - средний объем БАС, мл; е - основание натурального логарифма (2,71828), Н - высота раковины рапаны, мм.where: V is the average volume of BAS, ml; e is the base of the natural logarithm (2.71828), H is the height of the rapana shell, mm.
где: W - общий вес рапаны, г.where: W is the total weight of the rapana, g.
Выявлено, чем больше размер или общий вес рапаны, тем больший объем биологически активных соединений он может выделить после стимуляции. Так, максимальный объем БАС (8,5 мл) был выделен рапаной высотой раковины 114,1 мм и общим весом 81,31 г; а минимальный объем (0,4 мл) был выделен рапаной с размерно-весовыми характеристиками: Н=50,32 мм и W=20,71 гIt was revealed that the larger the size or total weight of the rapana, the greater the volume of biologically active compounds it can release after stimulation. Thus, the maximum volume of BAS (8.5 ml) was isolated by a shellfish with a shell height of 114.1 mm and a total weight of 81.31 g; and the minimum volume (0.4 ml) was isolated with rapana with size and weight characteristics: H = 50.32 mm and W = 20.71 g
Исследована тенденция зависимости доли особей, выделивших БАС, от температуры воды в море: максимальная доля особей, выделивших БАС, была отмечена при температуре воды 16°С, минимальная - при 8,2°С (Фиг. 5).The tendency of the dependence of the proportion of individuals that isolated ALS on the water temperature in the sea was investigated: the maximum proportion of individuals that released ALS was observed at a water temperature of 16 ° С, the minimum - at 8.2 ° С (Fig. 5).
Рапана - раздельнополый моллюск. Половую принадлежность рапаны ранее определяли, разрушая раковину рапаны (Чухчин, 1984; Savini et all., 2004; Saglam et all., 2009; Saglam et all., 2015; Бондарев, 2016). Авторами изобретения установлено, что после введения стимулирующего раствора, когда тело моллюска расслаблено и легко отодвигается крышечка ноги, можно прижизненно определить пол у рапаны, как показано на Фиг. 6. В исследуемой выборке соотношение полов равное и составило: 
Сигналом для выделения биотоксина (или биологически активных соединений) рапаной является физиологическая потребность в пище и наличие корма. По данным В.Д. Чухчина (1984), интенсивность питания зависит от размера рапаны и температуры воды. Перерыв между потреблением пищи может составлять около 4 дней. По данным автора при температуре воды ниже 10°С моллюски прекращали питаться (Чухчин, 1984).The signal for the release of biotoxin (or biologically active compounds) by rapa is the physiological need for food and the availability of food. According to V.D. Chukhchina (1984), the intensity of feeding depends on the size of the rapana and the temperature of the water. The break between meals can be about 4 days. According to the author's data, at water temperatures below 10 ° C, mollusks stopped feeding (Chukhchin, 1984).
В течение опыта температура воды в море изменялась в осенне-зимний период от 17,2 до 8,2°С. Количество потребленных рапанами мидий не зависело от температуры воды в пределах указанных значений. Так, при температуре 9,8°С, количество мидий, потребленных за две недели 20 рапанами, составило 10 экз. (при среднем значении рациона - 0,22 г·экз-1·сут-1), а при температуре 16,0; 8,2 и 10,4°С за аналогичный период наблюдений - 1 мидия (или 0,02 г·экз-1·сут-1). Известно, что при температуре воды 10,0°С происходит остановка линейного роста рапаны (Чухчин, 1984). По разнице между смежными значениями общего веса, можно определить моллюсков, которые недавно питались. Такие особи, как правило, не выделяли БАС после стимуляции. Следовательно, индукцию БАС рекомендуется выполнять у голодных рапан.During the experiment, the sea water temperature changed in the autumn-winter period from 17.2 to 8.2 ° C. The amount of mussels consumed by rapanas did not depend on the water temperature within the specified values. So, at a temperature of 9.8 ° C, the number of mussels consumed in two weeks by 20 rapans was 10 specimens. (with an average value of the diet - 0.22 g · specimen -1 · day -1 ), and at a temperature of 16.0; 8.2 and 10.4 ° С for the same observation period - 1 mussel (or 0.02 g · specimen -1 · day -1 ). It is known that at a water temperature of 10.0 ° C, the linear growth of the rapana stops (Chukhchin, 1984). By the difference between adjacent total weight values, you can determine the shellfish that have recently eaten. Such individuals, as a rule, did not excrete ALS after stimulation. Therefore, ALS induction is recommended to be performed in hungry rapa.
После введения стимулирующего раствора, рапаны выделяют биологически активные соединения в виде мутно-желтоватого вещества (см. Фиг. 3А). В зависимости от интенсивности света и продолжительности контакта с воздухом, желтый цвет БАС, превращается в розовый или красный, а затем в пурпурный (см. Фиг. 3). Образование пурпура сопровождалось выделением летучего вещества с резким запахом, как указывал В.Д. Чухчин (1970) - меркаптана.After the introduction of the stimulating solution, the rapans secrete biologically active compounds in the form of a cloudy yellowish substance (see Fig. 3A). Depending on the intensity of light and the duration of exposure to air, the yellow color of the BAS turns to pink or red, and then to purple (see Fig. 3). The formation of purple was accompanied by the release of a volatile substance with a pungent odor, as pointed out by V.D. Chukhchin (1970) - mercaptan.
В течение всего периода исследования выживаемость моллюсков составила 100%.During the entire study period, the survival rate of molluscs was 100%.
Пример реализации способа.An example of the implementation of the method.
Рапаны R. venosa были собраны в ноябре 2019 г в бухте Севастопольская в количестве 20 экз. на глубине от 9 до 15 м под мидийной фермой (внешний рейд Севастопольской бухты). Размеры раковин - моллюсков составили от 46,30 до 114,1 мм, а возраст - от 2+ до 4+ лет.Rapana R. venosa were collected in November 2019 in the Sevastopolskaya Bay in the amount of 20 specimens. at a depth of 9 to 15 m under the mussel farm (outer roadstead of the Sevastopol Bay). The sizes of shells - mollusks ranged from 46.30 to 114.1 mm, and the age - from 2+ to 4+ years.
В течение 28.10.19 - 10.03.20 года с интервалом в 2-3 недели в лабораторных условиях стимулировали выделение биологически активных соединений у рапан (всего проведено 10 стимуляций). Для индукции секреции биологически активных соединений (БАС) использовали комбинированный раствор: сульфата магния (MgSO4 - 12,5%) с раствором серотонина (C14H19N5O2·H2SO4 - 0,02%). Стимулирующий раствор готовили непосредственно перед проведением стимуляции следующим способом: 4 мг серотонина растворяли в 10 мл дистиллированной воды и добавляли 10 мл 25% сульфата магния. При помощи шприца раствор вводили в хобот или в мышцу ноги рапаны. Объем вводимого раствора зависел от размера моллюсков: с высотой раковины от 46,30 до 59,27 мм он составил 0,5 мл; с высотой раковины 114,14 мм - 1,5 мл (№20); для рапан размерами от 60 до 77 мм - 1 мл. После введения стимулирующего раствора в мышцу ноги выделение БАС начиналось через 2-3 мин; при введении его в хобот начало выделения у разных особей было отмечено в интервале от 3 до 11 минут в виде мутно-желтой жидкости, заполняющей устье моллюска. После чего рапан устанавливали на бюксы или мерные стаканы вниз сифональным каналом для сбора БАС. Положительно на стимуляцию отвечали голодные моллюски.During 10/28/19 - 03/10/2020, with an interval of 2-3 weeks in laboratory conditions, the release of biologically active compounds in rapa was stimulated (a total of 10 stimulations were carried out). To induce the secretion of biologically active compounds (BAC), a combined solution was used: magnesium sulfate (MgSO 4 - 12.5%) with a serotonin solution (C 14 H 19 N 5 O 2 · H 2 SO 4 - 0.02%). The stimulating solution was prepared immediately before the stimulation in the following way: 4 mg of serotonin was dissolved in 10 ml of distilled water and 10 ml of 25% magnesium sulfate was added. Using a syringe, the solution was injected into the trunk or into the leg muscle of the rapana. The volume of the injected solution depended on the size of the mollusks: with a shell height from 46.30 to 59.27 mm, it was 0.5 ml; with a shell height of 114.14 mm - 1.5 ml (No. 20); for rapan with sizes from 60 to 77 mm - 1 ml. After the introduction of the stimulating solution into the leg muscle, the release of ALS began in 2-3 minutes; when it was introduced into the trunk, the onset of excretion in different individuals was noted in the interval from 3 to 11 minutes in the form of a cloudy yellow liquid filling the mouth of the mollusk. After that, the rapan was placed on weighing cups or measuring glasses downward with a siphonal channel to collect BAS. Hungry mollusks responded positively to stimulation.
Объем БАС зависел от размера (общего живого веса) рапаны: максимальный объем - 8,5 мл одноразово был выделен рапаной с высотой раковины 114,1 мм и общим весом 81,31 г; а минимальный - 0,4 мл был выделен рапаной с высотой раковины 50,32 мм и общим весом 20,71 г. В результате 10 стимуляций индукции биологически активных соединений от 20 экз. рапан получено 137,45 мл БАС.The volume of BAS depended on the size (total live weight) of the rapana: the maximum volume - 8.5 ml was isolated once with the rapana with a shell height of 114.1 mm and a total weight of 81.31 g; and the minimum - 0.4 ml was isolated with rapa with a shell height of 50.32 mm and a total weight of 20.71 g. As a result of 10 stimulations of induction of biologically active compounds from 20 specimens. rapan received 137.45 ml of BAS.
Источники литературы, принятые во внимание:Literature sources taken into account:
1. Бондарев И.П. Структура популяций Rapana venosa (Gastropoda, Muricidae) Севастопольских бухт (Черное море) // Морской биологический журнал. 2016. Т. 1, №3. С. 14-21.1. Bondarev I.P. Population structure of Rapana venosa (Gastropoda, Muricidae) of Sevastopol bays (Black Sea) // Marine Biological Journal. 2016.Vol. 1, No. 3. S. 14-21.
2. Голиков А.Н., Старобогатов Я.И. Класс брюхоногие моллюски - Gastropoda // В сб.: Определитель фауны Черного и Азовского морей / Отв. ред. Водяницкий В.А. Киев: «Наукова думка», 1972. С. 65-167.2. Golikov AN, Starobogatov Ya.I. Class gastropods - Gastropoda // In collection: Keys to the fauna of the Black and Azov seas / Otv. ed. Vodyanitskiy V.A. Kiev: "Naukova Dumka", 1972. S. 65-167.
3. Пиркова А.В., Ладыгина Л.В., Щуров С.В. Формирование поселений мидий Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819) на коллекторах фермы в бухте Ласпи в зависимости от экологических факторов // Ученые записки Крымского федерального университета им. В.И. Вернадского. Биология. Химия. 2019. Т. 5 (71), №1. С. 92-106.3. Pirkova A.V., Ladygina L.V., Shchurov S.V. Formation of colonies of mussels Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819) on the collectors of the farm in Laspi Bay, depending on environmental factors. IN AND. Vernadsky. Biology. Chemistry. 2019.Vol. 5 (71), No. 1. S. 92-106.
4. Чухчин В.Д. Функциональная морфология рапаны. Киев: Наукова думка, 1970. 138 с.4. Chukhchin V.D. Functional morphology of rapana. Kiev: Naukova Dumka, 1970.138 p.
5. Чухчин В.Д. Экология брюхоногих моллюсков Черного моря. Киев: Наукова думка, 1984. 176 с.5. Chukhchin V.D. Ecology of gastropods of the Black Sea. Kiev: Naukova Dumka, 1984.176 p.
6. Andrews Е.В. The fine structure and function of fhe salivary glands of Nucella lapillus (Gastropoda: Muricidae) // Journal of Molluscan Studies. 1991. Vol. 57, is. LP. 111-126.6. Andrews E.V. The fine structure and function of fhe salivary glands of Nucella lapillus (Gastropoda: Muricidae) // Journal of Molluscan Studies. 1991. Vol. 57, is. LP. 111-126.
7. Benkendorff K, Bremner J.В., Davis A.R. Indole derivatives from the egg masses of muricid molluscs. Molecules, 2001, 6, 70-78.7. Benkendorff K, Bremner J. B., Davis A.R. Indole derivatives from the egg masses of muricid molluscs. Molecules, 2001, 6, 70-78.
8. Brown J.M., Wouters B.G. Apoptosis, p53, and tumor cell sensitivity to anticancer agents. Cancer Research. 1999. vol. 59, no. 7, pp. 1391-1399.8. Brown J.M., Wouters B.G. Apoptosis, p53, and tumor cell sensitivity to anticancer agents. Cancer Research. 1999. vol. 59, no. 7, pp. 1391-1399.
9. Dayan P., Huys Q.J.M. Serotonin in affective control. Annual Review Neuroscience 2009, vol. 32. pp. 95-126.9. Dayan P., Huys Q.J.M. Serotonin in affective control. Annual Review Neuroscience 2009, vol. 32. pp. 95-126.
10. Cesari P., Mizzan. L. Osservazioni su Rapana venosa (Valenciennes, 1846) in cattivita (Gastropoda: Muricidae, Thaidinae // Bollettino del Museo Civico di Storia Naturalea di Venezia. 1993. №42. P. 9-21.10. Cesari P., Mizzan. L. Osservazioni su Rapana venosa (Valenciennes, 1846) in cattivita (Gastropoda: Muricidae, Thaidinae // Bollettino del Museo Civico di Storia Naturalea di Venezia. 1993. No. 42. P. 9-21.
11. Cooksey C.J. Tyrian Purple: 6,6'-Dibromoindigo and Related Compounds. Molecules 2001, 6(9), 736-769; https://doi.org/10.3390/6090073611. Cooksey C.J. Tyrian Purple: 6,6'-Dibromoindigo and Related Compounds. Molecules 2001,6 (9), 736-769; https://doi.org/10.3390/60900736
12. Grabley S., Sattler I. Natural products for lead identification: Nature is a valuable resource for providing tools. Modern Methods of Drug Discovery. 2003. vol. 93. pp 87-107.12. Grabley S., Sattler I. Natural products for lead identification: Nature is a valuable resource for providing tools. Modern Methods of Drug Discovery. 2003. vol. 93. pp 87-107.
13. Kim S.-A., Kim Y.-C, Kim S.-W., Lee S.-H, Min J.-J., Ahn S.-G., Yoon J.-H. Antitumor activity of novel indirubin derivatives in rat tumor model. Clinical Cancer Research. 2007. vol. 13, no. 1, pp. 253-259.)13. Kim S.-A., Kim Y.-C, Kim S.-W., Lee S.-H, Min J.-J., Ahn S.-G., Yoon J.-H. Antitumor activity of novel indirubin derivatives in rat tumor model. Clinical Cancer Research. 2007. vol. 13, no. 1, pp. 253-259.)
14. Leclerc S., Garnier M., Garnier M. Indirubins inhibit glycogen synthase kinase-3β and CDK5/P25, two protein kinases involved in abnormal tau phosphorylation in Alzheimer's disease. A property common to most cyclin-dependent kinase inhibitors? Journal of Biological Chemistry. 2001. vol. 276, no. 1, pp. 251-260.14. Leclerc S., Garnier M., Garnier M. Indirubins inhibit glycogen synthase kinase-3β and CDK5 / P25, two protein kinases involved in abnormal tau phosphorylation in Alzheimer's disease. A property common to most cyclin-dependent kinase inhibitors? Journal of Biological Chemistry. 2001. vol. 276, no. 1, pp. 251-260.
15. Meijer L., Skaltsounis A.-L.; Skaltsounis A.-L. GSK-3-selective inhibitors derived from tyrian purple indirubins. Chemistry and Biology. 2003. vol. 10, no. 12, pp. 1255-1266.15. Meijer L., Skaltsounis A.-L .; Skaltsounis A.-L. GSK-3-selective inhibitors derived from tyrian purple indirubins. Chemistry and Biology. 2003. vol. 10, no. 12, pp. 1255-1266.
16. Michel R.H., Lazar J, McGovem P.E. The chemical composition of the indigoid dyes derived from the hypobranchial glandular secretions of Murex molluscs. J. Soc. Dyers and Colourists 1992. 108. 145-150.16. Michel R.H., Lazar J, McGovem P.E. The chemical composition of the indigoid dyes derived from the hypobranchial glandular secretions of Murex molluscs. J. Soc. Dyers and Colourists 1992.108.145-150.
17. Nam S., Buettner R., Buettner R. Indirubin derivatives inhibit Stat3 signaling and induce apoptosis in human cancer cells," Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2005. vol. 102, no. 17, pp.5998-6003.17. Nam S., Buettner R., Buettner R. Indirubin derivatives inhibit Stat3 signaling and induce apoptosis in human cancer cells, "Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2005. vol. 102, no. 17 , pp. 5998-6003.
18. Ponte G., Modica M.V. Glands in Predatory Mollusks: Evolutionary Considerations // Frontiers in Physiology. 2017. Vol.8. P. 1-8.18. Ponte G., Modica M.V. Glands in Predatory Mollusks: Evolutionary Considerations // Frontiers in Physiology. 2017. Vol.8. P. 1-8.
19. Roseghini M., Severini C, Erspamer G.F., Erspamer V. Choline esters and biogenic amines in the hypobranchial gland of 55 molluscan species of the neogastropod Muricoidea superfamily // Toxicon. 1996. 34(1). P. 33-55.19. Roseghini M., Severini C, Erspamer G.F., Erspamer V. Choline esters and biogenic amines in the hypobranchial gland of 55 molluscan species of the neogastropod Muricoidea superfamily // Toxicon. 1996.34 (1). P. 33-55.
20. Saglam H., Duzgunes E., Ogut H. Reproductive ecology of the invasive whelk Rapana venosa Valenciennes, 1846, in the southeastern Black Sea (Gastropoda: Muricidae) // ICES Journal of Marine Science. 2009. Vol.66. №9. P. 1865-1867.20. Saglam H., Duzgunes E., Ogut H. Reproductive ecology of the invasive whelk Rapana venosa Valenciennes, 1846, in the southeastern Black Sea (Gastropoda: Muricidae) // ICES Journal of Marine Science. 2009. Vol.66. No. 9. P. 1865-1867.
21. Saglam H., Kutlu S., Dagtekin M. Population biology of Rapana venosa (Valenciennes, 1846) (Gastropoda: Neogastropoda) in the south-eastern Black Sea of Turkey // Cahiers De Biologie Marine. 2015. Vol. 56. №4. P. 363-368.21. Saglam H., Kutlu S., Dagtekin M. Population biology of Rapana venosa (Valenciennes, 1846) (Gastropoda: Neogastropoda) in the south-eastern Black Sea of Turkey // Cahiers De Biologie Marine. 2015. Vol. 56. No. 4. P. 363-368.
22. Savini D.M., Castellazzi M.F., Ambrogi A.O. The alien mollusk Rapana venosa (Valenciennes, 1846; Gastropoda, Muricidae) in the northern Adriatic Sea: population structure and shell morphology. // Chem. Ecol. 2004. Vol.20. P. 411-424.22. Savini D.M., Castellazzi M.F., Ambrogi A.O. The alien mollusk Rapana venosa (Valenciennes, 1846; Gastropoda, Muricidae) in the northern Adriatic Sea: population structure and shell morphology. // Chem. Ecol. 2004. Vol.20. P. 411-424.
Claims (4)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020124025A RU2745401C1 (en) | 2020-07-13 | 2020-07-13 | Method for inducing the secretion of biologically active compounds in sea snail rapana venosa val. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020124025A RU2745401C1 (en) | 2020-07-13 | 2020-07-13 | Method for inducing the secretion of biologically active compounds in sea snail rapana venosa val. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2745401C1 true RU2745401C1 (en) | 2021-03-24 |
Family
ID=75159238
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020124025A RU2745401C1 (en) | 2020-07-13 | 2020-07-13 | Method for inducing the secretion of biologically active compounds in sea snail rapana venosa val. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2745401C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115362963A (en) * | 2022-09-09 | 2022-11-22 | 青岛普瑞邦生物工程有限公司 | Production method of diarrhea shellfish poison quality control sample of Mytilus edulis and quality control sample |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU94045435A (en) * | 1994-12-27 | 1996-10-20 | Южный научно-исследовательский институт морского рыбного хозяйства и океанографии (UA) | Method for processing shellfish into bioglycane |
| RU2188637C2 (en) * | 1995-06-29 | 2002-09-10 | Фарма Мар, С.А. | Method for applying lamellarine class alcaloids for treating diseases |
| RU2244547C2 (en) * | 1998-05-19 | 2005-01-20 | Рисерч Дивелопмент Фаундейшн | Triterpene compositions and methods for their applying |
-
2020
- 2020-07-13 RU RU2020124025A patent/RU2745401C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU94045435A (en) * | 1994-12-27 | 1996-10-20 | Южный научно-исследовательский институт морского рыбного хозяйства и океанографии (UA) | Method for processing shellfish into bioglycane |
| RU2188637C2 (en) * | 1995-06-29 | 2002-09-10 | Фарма Мар, С.А. | Method for applying lamellarine class alcaloids for treating diseases |
| RU2244547C2 (en) * | 1998-05-19 | 2005-01-20 | Рисерч Дивелопмент Фаундейшн | Triterpene compositions and methods for their applying |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115362963A (en) * | 2022-09-09 | 2022-11-22 | 青岛普瑞邦生物工程有限公司 | Production method of diarrhea shellfish poison quality control sample of Mytilus edulis and quality control sample |
| CN115362963B (en) * | 2022-09-09 | 2023-12-29 | 青岛普瑞邦生物工程有限公司 | Production method of perna canaliculus diarrhea shellfish poison quality control sample and quality control sample |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Barnabe | Aquaculture: biology and ecology of cultured species | |
| Khalil | Larval nematodes in the herring (Clupea harengus) from British coastal waters and adjacent territories | |
| Vogt | Suitability of the clonal marbled crayfish for biogerontological research: a review and perspective, with remarks on some further crustaceans | |
| Guo et al. | Occurrence of Hysterothylacium and Anisakis nematodes (Ascaridida: Ascaridoidea) in the tanaka’s snailfish Liparis tanakae (Gilbert & Burke)(Scorpaeniformes: Liparidae) | |
| Kuhlmann et al. | Predator-induced defenses in ciliated protozoa | |
| Toledo et al. | Recent advances in the biology of echinostomes | |
| RU2745401C1 (en) | Method for inducing the secretion of biologically active compounds in sea snail rapana venosa val. | |
| Giusti et al. | THE REPRODUCTIVE CYCLE AND THE GLOCHIDIUM OF ANODONTA CYGNE A L. FROM LAGO TRASIMENO (CENTRAL ITALY) | |
| Begum et al. | Comparison of tissue specific esterase isozyme banding pattern in the larvae and adult of Heteropneustes fossilis | |
| Stabell et al. | Socializing makes thick-skinned individuals: on the density of epidermal alarm substance cells in cyprinid fish, the crucian carp (Carassius carassius) | |
| Murwantoko et al. | 1811 Life Cycle of Marine Leech from Cultured “Cantik” Hybrid Grouper (Ephinephelus sp.) and Their Susceptibility Against Chemicals | |
| Gorji et al. | Survey on parasites in sparrows of Amol (Mazandaran Province, Iran) | |
| Gao et al. | Reproduction strategy of nocturnal marine molluscs: Running for love | |
| Shadrin et al. | Embryonic and larval development and some reproductive-biology features of Dendrochirus zebra (Scorpaenidae) | |
| Sugahara | Cyclostomes (lamprey and hagfish) | |
| Yoshimizu et al. | Oncogenic viruses: Oncorhynchus masou virus and Cyprinid herpesvirus. | |
| Isah et al. | PREVALENCE OF ECTO AND ENDO PARASITES OF WHITE CATFISH (AMEIURUS CATUS) IN UKE RIVER, KARU LOCAL GOVERNMENT AREA OF NASARAWA STATE, NIGERIA | |
| Almashay | Study on Some Types of Parasitic Nematodes, Anisakis simplex, Contracaecum multipapllatium and Hysterothylacium aduncum Affecting Fish, Mullus surmuletus in the Beach City of Sirte-Libya. | |
| Horosheltseva et al. | Bothriocephalosis in the South of Russia: actual methods of diagnosis and treatment | |
| Bardan et al. | REVIEW ARTICLE ABOUT PARASITES IN BONY FISH | |
| Amachree et al. | Effects of Different Physiological Saline Concentrations on the Reproductive Performance of Clarias gariepinus (Burchell, 1822) | |
| Silali et al. | Zoonotic helminths and protozoa infesting commercially important marine crustaceans along the Kenyan coast | |
| Taylakov et al. | Spread of Cattle Paramphistamatosis In the Conditions of the Republic of Karakalpakstan, Testing Some Antgelmintics In the Treatment | |
| Lam | Variation in thermoregulation and linking whole organism behavior to thermosensory neurophysiology in the porcelain crab, Petrolisthes cinctipes | |
| Mioara et al. | RESEARCH ON EMBRYONIC AND POSTEMBRYONIC DEVELOPMENT TO THE PADDLEFISH (POLYODON SPATHULA) IN THE ACCLIMATIZATION AREA |