RU2741690C1

RU2741690C1 - Method for predicting the course of low-differentiated glial tumors based on a cytokine microenvironment

Info

Publication number: RU2741690C1
Application number: RU2020119700A
Authority: RU
Inventors: Олег Иванович Кит; Елена Юрьевна Златник; Сергей Николаевич Игнатов; Наталья Васильевна Солдаткина; Эдуард Евгеньевич Росторгуев; Александр Борисович Сагакянц; Наталья Николаевна Тимошкина; Оксана Геннадьевна Шульгина; Антон Андреевич Пушкин
Priority date: 2020-06-08
Filing date: 2020-06-08
Publication date: 2021-01-28

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention relates to medicine and concerns a method for predicting the course of low-grade glial tumors based on a cytokine microenvironment, consisting in the fact that in the tumor tissue by the immunoenzymometric analysis the complex content of interleukins IL-4, IL-6, IL-8 is determined, and with their total IL-4 content within 0.5 to 1.4 pg/ml/g of protein, IL-6 from 4.4 to 50.6 pg/ml/g of protein, IL-8 from 43.7 to 125.2 pg/ml/g of protein predicted early tumor progression within 7-14 months after operation, and with their total content of IL-4 ranging from 13.1 to 28.2 pg/ml/g protein, IL-6 from 0 to 8.2 pg/ml/g protein, IL-8 from 0.3 to 19.6 pg/ml/g of the protein, progression is predicted more than 14 months after the operation.

EFFECT: invention provides predicting the course of low-grade glial tumors based on their cytokine microenvironment.

1 cl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к нейроонкологии, и может быть использовано для прогнозирования течения низкодифференцированных глиальных опухолей (HGG) на основе цитокинового микроокружения.The invention relates to medicine, namely to neurooncology, and can be used to predict the course of poorly differentiated glial tumors (HGG) based on the cytokine microenvironment.

Согласно данным CBTRUS 2012-2016 г., клиническим рекомендациям МЗ РФ по первичным опухолям центральной нервной системы от 2018 г. опухоли ЦНС составляют 1,5-2% в структуре всех онкозаболеваний. При пересчете на 100.000 населения в среднем частота выявления составляет 23,41 и имеет тенденцию к росту (Каприн А. Д., 2013).According to the data of CBTRUS 2012-2016, the clinical recommendations of the Ministry of Health of the Russian Federation for primary tumors of the central nervous system from 2018, CNS tumors account for 1.5-2% in the structure of all oncological diseases. When recalculated per 100,000 population, the average detection rate is 23.41 and has a tendency to increase (Kaprin A.D., 2013).

К глиальным опухолям относится до 60% всех опухолей ЦНС, среди которых превалируют HGG, а именно: анапластическая астроцитома и глиобластома (ГБ), которые являются наиболее часто встречаемыми злокачественными опухолями головного мозга и составляют 63,4% от злокачественных опухолей ЦНС и до 85% всех глиальных опухолей. Пациенты с ГБ, несмотря на комплексный подход в лечении, имеют общую медиану выживаемости 14-16 месяцев, а пятилетний порог преодолевают не более 5% (Davis М. Е. et al., 2018).Glial tumors include up to 60% of all CNS tumors, among which HGG prevails, namely: anaplastic astrocytoma and glioblastoma (GB), which are the most common malignant brain tumors and account for 63.4% of malignant CNS tumors and up to 85% all glial tumors. Patients with hypertension, despite an integrated approach to treatment, have an overall median survival rate of 14-16 months, and no more than 5% overcome the five-year threshold (Davis M.E. et al., 2018).

Несмотря на идентичность прогностически благоприятных факторов: возраст до 60 лет, индекс по шкале Карновского до начала лечения более 70 баллов и стандартизированных подходов к лечению, гистологическая классификация первичных опухолей ЦНС не могла объяснить наличие пациентов «долгожителей» преодолевших 5-летний барьер. В последнее десятилетие, основной упор специалистов сконцентрирован на выявлении и изучении роли молекулярно-генетических аберраций. Определение ряда мутаций, наряду с гистологическими характеристиками, нашло отражение в классификации ВОЗ, 2016 (Louis D. N. et al., 2016).Despite the identity of prognostically favorable factors: age up to 60 years, an index on the Karnofsky scale before the start of treatment, more than 70 points and standardized approaches to treatment, histological classification of primary CNS tumors could not explain the presence of long-livers patients who had overcome the 5-year barrier. In the last decade, the main emphasis of specialists has been concentrated on identifying and studying the role of molecular genetic aberrations. The definition of a number of mutations, along with histological characteristics, was reflected in the WHO classification, 2016 (Louis D. N. et al., 2016).

В настоящее время прогностически значимым является определение статуса мутации генов IDH1/2, кодирующих фермент изоцитратдегидрогеназу (Thompson С.В., 2009; Кобяков Г.Л. и соавт., 2018). При глиальных опухолях данные мутации впервые были описаны при высокодифференцированных глиальных опухолях (LGG) и выявляются более чем в 90% случаев (Cancer Genome Atlas Research, 2015; Aibaidula A. et al., 2017; Sun H. et al., 2013).Currently, it is prognostically significant to determine the mutation status of the IDH1 / 2 genes encoding the enzyme isocitrate dehydrogenase (Thompson S.V., 2009; Kobyakov G.L. et al., 2018). In glial tumors, these mutations were first described in highly differentiated glial tumors (LGG) and are detected in more than 90% of cases (Cancer Genome Atlas Research, 2015; Aibaidula A. et al., 2017; Sun H. et al., 2013).

По мнению ряда авторов, наличие мутации генов IDH1/2, вне зависимости от степени злокачественности, является предиктором лучшего ответа на комплексную терапию и, как следствие, более длительной послеоперационной выживаемости. Так пациенты с ГБ и наличием мутации в генах IDH1/2 имеют медиану выживаемости 27,1-45,6 месяцев, а пациенты с ГБ без мутации - 11,3-15 месяцев (Juratli Т.A. et al., 2012; Ahmadipour Y. et al., 2019). Suzuki et al. сообщили, что пациенты с ГБ и наличием IDH мутации имеют лучший прогноз в сравнении с высокодифференцированными глиальными опухолями без мутации в генах IDH (Suzuki Н. et al., 2015). В то же время Горяйнов и соавт. в своей работе, выполненной в Национальном научно-практическом центре нейрохирургии им. Акад. Н. Н. Бурденко, при ретроспективном анализе 84 пациентов с ГБ, проживших более 3 лет после первичной операции, не выявили достоверной разницы в их выживаемости в зависимости от наличия мутации в генах IDH1/2 (Горяйнов С.А. и соавт., 2017).According to a number of authors, the presence of the IDH1 / 2 gene mutation, regardless of the degree of malignancy, is a predictor of a better response to complex therapy and, as a consequence, a longer postoperative survival. So patients with HD and the presence of a mutation in the IDH1 / 2 genes have a median survival of 27.1-45.6 months, and patients with HD without mutation - 11.3-15 months (Juratli T.A. et al., 2012; Ahmadipour Y. et al., 2019). Suzuki et al. reported that patients with HD and the presence of an IDH mutation have a better prognosis compared to highly differentiated glial tumors without mutations in the IDH genes (Suzuki N. et al., 2015). At the same time, Goryainov et al. in his work carried out at the National Scientific and Practical Center for Neurosurgery named after Acad. N.N.Burdenko, in a retrospective analysis of 84 patients with hypertension who lived more than 3 years after primary surgery, did not reveal a significant difference in their survival, depending on the presence of a mutation in the IDH1 / 2 genes (Goryainov S.A. et al., 2017 ).

Определение мутации генов IDH1/2 осуществляется методом ПЦР в режиме реального времени, секвенирования. Данные методики впервые описаны Yan Н. et al. в 2009 г. Несмотря на высокую чувствительность данных методов, в нашей стране определение данной мутации доступно лишь в крупных Федеральных центрах.Determination of gene mutations IDH1 / 2 is carried out by real-time PCR, sequencing. These techniques were first described by Yan H. et al. in 2009. Despite the high sensitivity of these methods, in our country, the definition of this mutation is available only in large federal centers.

Даже несмотря на «тотальное» удаление опухоли (более 95% объема) и комплексный подход к лечению, может отмечаться прогрессирование в раннем сроке наблюдения. Быстрый опухолевый рост невозможен без формирования благоприятного для него микроокружения, в которое вносят вклад локально продуцируемые цитокины, включая обладающие иммуносупрессивным и провоспалительным действием. Установленное значение неоангиогенеза в развитии глиом предполагает негативную роль гиперпродукции провоспалительных цитокинов, традиционно не считающихся иммуносупрессивными, однако, в данных условиях способствующих росту и трансформации опухоли. Следовательно, оценка локального содержания цитокинов может оказаться одним из прогностически значимых факторов.Even despite the "total" removal of the tumor (more than 95% of the volume) and a comprehensive approach to treatment, progression can be noted in the early follow-up period. Rapid tumor growth is impossible without the formation of a favorable microenvironment for it, to which locally produced cytokines, including those with immunosuppressive and pro-inflammatory effects, contribute. The established significance of neoangiogenesis in the development of gliomas suggests a negative role of the overproduction of proinflammatory cytokines, which are traditionally not considered immunosuppressive, however, under these conditions, they promote tumor growth and transformation. Therefore, the assessment of the local content of cytokines may be one of the prognostically significant factors.

Известны способы прогнозирования течения онкологических заболеваний в зависимости от характера их иммунологического микроокружения, использованные нами в качестве аналогов (см. патент RU 2643761, опубл. 05.02.2018, Бюл. №4; RU 2712921, опубл 03.02.2020, Бюл. №4). Авторами исследованы факторы микроокружения меланомы кожи, в том числе и цитокиновый состав опухоли и перитуморальной зоны. При этом установлена прогностическая роль высокого содержания IL-6 в ткани опухоли и IL-1β и IL-2 в перитуморальной зоне для раннего прогрессирования меланомы кожи. Однако авторами не проводилось исследование низкодифференцированных глиальных опухолей.Known methods for predicting the course of oncological diseases, depending on the nature of their immunological microenvironment, we used as analogues (see patent RU 2643761, publ. 05.02.2018, bull. No. 4; RU 2712921, publ. 03.02.2020, bull. No. 4) ... The authors investigated the factors of the microenvironment of skin melanoma, including the cytokine composition of the tumor and the peritumoral zone. At the same time, the prognostic role of high levels of IL-6 in tumor tissue and IL-1β and IL-2 in the peritumoral zone for early progression of skin melanoma was established. However, the authors did not study low-grade glial tumors.

В работе Jiang Y. et al. изучали влияние снижения экспрессии IL-6 и блокирование рецепторов к IL-6 на рост глиобластомы. В этой же работе отмечено, что высокий уровень секреции IL-6, рецепторов IL-6 коррелирует с ранним рецидивированием. Возможность прогнозирования прогрессирования низкодифференцированных глиальных опухолей в зависимости от цитокинового микроокружения была показана лишь на основании изменения содержания IL-6 в ткани опухоли (Jiang Y. et al., 2017), тогда как остальные цитокины также могут быть информативными в этом плане. Данный способ прогнозирования течения HGG выбран нами в качестве прототипа.Jiang Y. et al. studied the effect of decreasing IL-6 expression and blocking IL-6 receptors on glioblastoma growth. In the same study, it was noted that a high level of secretion of IL-6, IL-6 receptors correlates with early recurrence. The possibility of predicting the progression of poorly differentiated glial tumors depending on the cytokine microenvironment was shown only on the basis of changes in the IL-6 content in the tumor tissue (Jiang Y. et al., 2017), while other cytokines can also be informative in this regard. This method of predicting the flow of HGG was chosen by us as a prototype.

При анализе базы данных ФИПС, Pubmed сообщений об иных прогностически значимых отличиях цитокинового микроокружения низкодифференцированных глиальных опухолей не выявлено.When analyzing the FIPS database, Pubmed, no reports of other prognostically significant differences in the cytokine microenvironment of poorly differentiated glial tumors were detected.

Нами были проанализированы уровни содержания в опухолевой ткани IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-α, IFN-γ, фактора некроза опухоли. В результате была обнаружена прогностическая роль содержания в опухолевой ткани IL-4, IL-6, IL-8. В результате клинических наблюдений были сформированы 2 группы пациентов. 1-я группа (п=21) с прогрессированием опухолевого роста в срок от 7 до 14 месяцев. И 2-ая группа (п=3) с прогрессированием опухолевого роста в срок от 14 месяцев.We analyzed the levels of IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-α, IFN-γ, and tumor necrosis factor in the tumor tissue. As a result, the prognostic role of the content of IL-4, IL-6, IL-8 in tumor tissue was found. As a result of clinical observations, 2 groups of patients were formed. Group 1 (n = 21) with progression of tumor growth in the period from 7 to 14 months. And the 2nd group (n = 3) with the progression of tumor growth in the period from 14 months.

Предложенный нами метод позволяет прогнозировать течение HGG не только на основании измерения концентрации IL-6, но и IL-4 и IL-8 в ткани опухоли, что предполагает повышение чувствительности метода. Он основан на описанных в литературе биологических свойствах данных цитокинов.The proposed method allows us to predict the course of HGG not only on the basis of measuring the concentration of IL-6, but also IL-4 and IL-8 in the tumor tissue, which suggests an increase in the sensitivity of the method. It is based on the biological properties of these cytokines described in the literature.

IL4 обладает противовоспалительной активностью. IL-4 секретируют Т-лимфоциты, NK-клетки, базофилы, эозинофилы, тучные клетки. IL-4 влияет на рост и дифференцировку В- и Т-лимфоцитов, тучных клеток; регулирует деятельность макрофагов; стимулирует рост Т-хелперов, преимущественно, Th 2 типа, и Т-киллеров. Совместно с IL-2 повышает пролиферацию предшественников и индуцирует дифференцировку в Т-киллеры. В HGG отмечается повышенная экспрессия рецепторов к IL-4. (Okada Н. et al., 2003; Weber F. et al., 2003). Работ, посвященных прогнозированию течения низкодифференцированных глиальных опухолей по уровню IL-4 в ткани опухоли не обнаружено.IL4 has anti-inflammatory activity. IL-4 is secreted by T-lymphocytes, NK-cells, basophils, eosinophils, mast cells. IL-4 influences the growth and differentiation of B- and T-lymphocytes, mast cells; regulates the activity of macrophages; stimulates the growth of T-helpers, mainly Th 2 type, and T-killers. Together with IL-2, it increases the proliferation of progenitors and induces differentiation into killer T cells. The HGG has an increased expression of IL-4 receptors. (Okada H. et al., 2003; Weber F. et al., 2003). No works devoted to predicting the course of poorly differentiated glial tumors by the level of IL-4 in the tumor tissue were found.

IL-8 в основном продуцируется активированными моноцитами и эпителиальными клетками. IL-8 влияет на синаптогенез, внутриклеточную концентрацию кальция и межсинаптическую передачу. Полиморфизмы гена, кодирующего IL-8, коррелируют с развитием злокачественных опухолей различной локализации, в том числе и головного мозга (Liu Н. et al., 2015). Повышение экспрессии IL-8 в крови свидетельствует о прогрессии ГБ, увеличении перитуморального отека и зон некроза (Henker С. et al., 2016). При ГБ IL-8 стимулирует неоангиогенез, повышает инвазивность опухоли (Kosmopoulos М. et al., 2018). В качестве прогностического критерия предложено повышение экспрессии IL-8 в крови, которое коррелировало с менее благоприятным прогнозом (Zhang В. et al., 2015; Muller L. et al., 2015). Однако, несмотря на то, что при проведении химиотерапии уровни IL-8 в крови снижались, прогноз пациентов с ГБ не менялся (Kosmopoulos М. et al., 2018). Работ, посвященных прогнозированию течения низкодифференцированных глиальных опухолей по уровню IL-8 в ткани опухоли не обнаружено.IL-8 is mainly produced by activated monocytes and epithelial cells. IL-8 affects synaptogenesis, intracellular calcium concentration, and intersynaptic transmission. Polymorphisms of the gene encoding IL-8 correlate with the development of malignant tumors of various localization, including the brain (Liu N. et al., 2015). An increase in the expression of IL-8 in the blood indicates the progression of hypertension, an increase in peritumoral edema and zones of necrosis (Henker S. et al., 2016). In GB, IL-8 stimulates neoangiogenesis, increases tumor invasiveness (Kosmopoulos M. et al., 2018). An increase in the expression of IL-8 in the blood, which correlated with a less favorable prognosis, was proposed as a prognostic criterion (Zhang V. et al., 2015; Muller L. et al., 2015). However, despite the fact that during chemotherapy, the levels of IL-8 in the blood decreased, the prognosis of patients with hypertension did not change (Kosmopoulos M. et al., 2018). No works on predicting the course of poorly differentiated glial tumors by the level of IL-8 in the tumor tissue have been found.

Задачей изобретения является определение на этапе хирургического удаления опухоли характера дальнейшего течения злокачественного процесса у больных с низкодифференцированными глиальными опухолями.The objective of the invention is to determine, at the stage of surgical removal of the tumor, the nature of the further course of the malignant process in patients with poorly differentiated glial tumors.

Техническим результатом данного изобретения является разработка способа прогнозирования течения низкодифференцированных глиальных опухолей на основе их цитокинового микроокружения.The technical result of this invention is to develop a method for predicting the course of poorly differentiated glial tumors based on their cytokine microenvironment.

Технический результат достигается тем, что в опухолевой ткани методом иммуноферментного анализа определяют комплексное содержание интерлейкинов IL-4, IL-6, IL-8 и при их совокупном содержании IL-4 в пределах от 0,5 до 1,4 пг/мл/г белка, IL-6 от 4,4 до 50,6 пг/мл/г белка, IL-8 от 43,7 до 125,2 пг/мл/г белка прогнозируют раннее прогрессирование опухоли в сроки 7-14 месяцев после операции, а при совокупном содержании IL-4 в пределах от 13,1 до 28,2 пг/мл/г белка, IL-6 от 0 до 8,2 пг/мл/г белка, IL-8 от 0,3 до 19,6 пг/мл/г белка прогнозируют позднее прогрессирование в сроки более 14 месяцев после операции.The technical result is achieved by the fact that the complex content of interleukins IL-4, IL-6, IL-8 is determined in the tumor tissue by the method of enzyme immunoassay and when their total content of IL-4 is in the range from 0.5 to 1.4 pg / ml / g protein, IL-6 from 4.4 to 50.6 pg / ml / g protein, IL-8 from 43.7 to 125.2 pg / ml / g protein predict early tumor progression within 7-14 months after surgery, and with the total content of IL-4 ranging from 13.1 to 28.2 pg / ml / g protein, IL-6 from 0 to 8.2 pg / ml / g protein, IL-8 from 0.3 to 19, 6 pg / ml / g protein predicts late progression over 14 months after surgery.

Изобретение «Способ прогнозирования течения низкодифференцированных глиальных опухолей на основе цитокинового микроокружения» является новым, так как оно неизвестно в нейроонкологии при прогнозировании течения низкодифференцированных глиальных опухолей.The invention "A method for predicting the course of poorly differentiated glial tumors based on the cytokine microenvironment" is new, since it is unknown in neurooncology when predicting the course of poorly differentiated glial tumors.

Новизна изобретения заключается в том, что во время операции по поводу низкодифференцированных глиальных опухолей берут фрагмент опухолевой ткани. Образцы опухолевой ткани, размером 0,5×0,5×0,5 см, подвергают механическому дроблению. Приготовленный материал погружают в одноразовый механический дезагрегатор (Medicon, USA) с отделительными экранами на 35 мкм и на 50 мкм, добавляют 2 мл промывочного раствора для клеток (Cellwash). С последующим помещением в дезинтегратор ткани BD Medimachine (США) и гомогенизацией в течение 30-60 с. Полученные гомогенизированные ткани переносят в пластиковые одноразовые пробирки и центрифугируют в течение 4 мин. при 1500 об/мин. В результате получают разделенную на две фракции смесь: жидкую полупрозрачную часть сверху (супернатант) используют для определения цитокинов. Уровни цитокинов определяют методом ИФА: концентрацию провоспалительных и противовоспалительных цитокинов с использованием тест-систем «Вектор-Бест» (Новосибирск, Россия) в соответствии с инструкциями фирмы производителя. Оценку результатов количественного определения цитокинов осуществляют на анализаторе иммуноферментных реакций АИФР-01 (УНИПЛАН, Россия). Результаты выражают в виде удельного содержания в пересчете на 1 г белка гомогената, оцениваемого биуретовым методом (пг/мл/г белка). Концентрацию общего белка определяют биуретовым методом с использованием наборов «Общий белок Ольвекс» (Ольвекс-диагностикум, Россия) в соответствии с инструкцией фирмы производителя. Результаты реакции оценивают на полуавтоматическом биохимическом анализаторе BS-3000P (Sinnowa Medical Science & Technology Co., КНР).The novelty of the invention lies in the fact that during the operation for poorly differentiated glial tumors, a fragment of tumor tissue is taken. Samples of tumor tissue, 0.5 × 0.5 × 0.5 cm in size, are subjected to mechanical crushing. The prepared material is immersed in a disposable mechanical disaggregator (Medicon, USA) with 35 µm and 50 µm separating screens, 2 ml of a cell wash solution (Cellwash) is added. With subsequent placement in a BD Medimachine tissue disintegrator (USA) and homogenization for 30-60 s. The resulting homogenized tissues are transferred into plastic disposable tubes and centrifuged for 4 minutes. at 1500 rpm. As a result, a mixture divided into two fractions is obtained: the liquid translucent part from above (supernatant) is used for the determination of cytokines. Cytokine levels are determined by ELISA: the concentration of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines using test systems "Vector-Best" (Novosibirsk, Russia) in accordance with the manufacturer's instructions. Evaluation of the results of the quantitative determination of cytokines is carried out on the analyzer of enzyme immunoassay reactions AIFR-01 (UNIPLAN, Russia). The results are expressed as the specific content per 1 g of protein of the homogenate, assessed by the biuret method (pg / ml / g protein). The concentration of total protein is determined by the biuret method using the Olvex Total Protein kits (Olvex Diagnosticum, Russia) in accordance with the manufacturer's instructions. The reaction results are evaluated on a BS-3000P semi-automatic biochemical analyzer (Sinnowa Medical Science & Technology Co., PRC).

При комплексном содержании IL-4 в пределах от 0,5 до 1,4 пг/мл/г белка, IL-6 от 4,4 до 50,6 пг/мл/г белка, IL-8 от 43,7 до 125,2 пг/мл/г белка прогнозируют раннее прогрессирование опухоли в сроки 7-14 месяцев, а при совокупном содержании IL-4 в пределах от 13,1 до 28,2 пг/мл/г белка, IL-6 от 0 до 8,2 пг/мл/г белка, IL-8 от 0,3 до 19,6 пг/мл/г белка прогнозируют позднее прогрессирование в сроки более 14 месяцев.With a complex content of IL-4 ranging from 0.5 to 1.4 pg / ml / g protein, IL-6 from 4.4 to 50.6 pg / ml / g protein, IL-8 from 43.7 to 125 , 2 pg / ml / g protein predict early tumor progression within 7-14 months, and with a total IL-4 content ranging from 13.1 to 28.2 pg / ml / g protein, IL-6 from 0 to 8 , 2 pg / ml / g protein, IL-8 from 0.3 to 19.6 pg / ml / g protein predict late progression over 14 months.

Изобретение «Способ прогнозирования течения низкодифференцированных глиальных опухолей на основе цитокинового микроокружения» является промышленно применимым и может быть многократно воспроизведен в здравоохранении в лечебных учреждениях специализированного профиля для лечения онкологических больных с данной локализацией злокачественного процесса.The invention "A method for predicting the course of poorly differentiated glial tumors based on the cytokine microenvironment" is industrially applicable and can be repeatedly reproduced in healthcare in specialized medical institutions for the treatment of cancer patients with a given localization of the malignant process.

Способ прогнозирования течения низкодифференцированных глиальных опухолей на основе цитокинового микроокружения выполняется следующим образом.A method for predicting the course of poorly differentiated glial tumors based on the cytokine microenvironment is performed as follows.

Интраоперационно производят забор опухолевой ткани. Далее методом ИФА в опухолевой ткани определяют уровень IL-4; IL-6; IL-8. При совокупном содержании IL-4 в пределах от 0,5 до 1,4 пг/мл/г белка, IL-6 от 4,4 до 50,6 пг/мл/г белка, IL-8 от 43,7 до 125,2 пг/мл/г белка прогнозируют раннее прогрессирование опухоли в сроки 7-14 месяцев, а при совокупном содержании IL-4 в пределах от 13,1 до 28,2 пг/мл/г белка, IL-6 от 0 до 8,2 пг/мл/г белка, IL-8 от 0,3 до 19,6 пг/мл/г белка прогнозируют позднее прогрессирование в сроки более 14 месяцев.Intraoperatively, tumor tissue is collected. Next, the level of IL-4 is determined by ELISA in the tumor tissue; IL-6; IL-8. With a total content of IL-4 ranging from 0.5 to 1.4 pg / ml / g protein, IL-6 from 4.4 to 50.6 pg / ml / g protein, IL-8 from 43.7 to 125 , 2 pg / ml / g protein predict early tumor progression within 7-14 months, and with a total IL-4 content ranging from 13.1 to 28.2 pg / ml / g protein, IL-6 from 0 to 8 , 2 pg / ml / g protein, IL-8 from 0.3 to 19.6 pg / ml / g protein predict late progression over 14 months.

В ходе исследования нами установлено, что у больных с поздним прогрессированием низкодифференцированных глиальных опухолей тканевой уровень IL-4 был в 29,4 раз выше, чем у больных с ранним прогрессированием: 0,86 (0,5; 1,4) против 25,3 (13,1; 28,2). При этом уровни IL-6 и IL-8, напротив, были ниже (IL-6 в 30,9 раза: 30,9 (4,4; 50,6) против 0 (0; 8,2); IL-8 в 288,6 раз: 101 (43,7; 125,2) против 0,35 (0,3; 19,6). Все различия статистически достоверны, р<0,05. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета STATISTICA 13 (StatSoftlnc, США). Результаты представляли в виде центральной тенденции медианы (Me) и интерквартильного размаха - 25 и 75 процентили (Me [LQ; UQ]). Достоверность отличий между выборками оценивали с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни. Результаты представлены в таблице 1.During the study, we found that in patients with late progression of poorly differentiated glial tumors, the tissue level of IL-4 was 29.4 times higher than in patients with early progression: 0.86 (0.5; 1.4) versus 25, 3 (13.1; 28.2). At the same time, the levels of IL-6 and IL-8, on the contrary, were lower (IL-6 30.9 times: 30.9 (4.4; 50.6) versus 0 (0; 8.2); IL-8 288.6 times: 101 (43.7; 125.2) versus 0.35 (0.3; 19.6). All differences are statistically significant, p <0.05. Statistical data processing was performed using the STATISTICA 13 package (StatSoftlnc, USA) The results were presented as the central trend of the median (Me) and the interquartile range - 25 and 75 percentiles (Me [LQ; UQ]) The significance of differences between the samples was assessed using the nonparametric Mann-Whitney test. The results are presented in the table one.

Полученные результаты указывают на наличие статистически значимых отличий в содержании провоспалительных (IL-6: IL-8) и противовоспалительного (IL-4) интерлейкинов. С учетом их биологических функций микроокружение больных 1 группы может быть охарактеризовано как иммуносупрессивное и ростостимулирующее.The results obtained indicate the presence of statistically significant differences in the content of pro-inflammatory (IL-6: IL-8) and anti-inflammatory (IL-4) interleukins. Taking into account their biological functions, the microenvironment of patients of group 1 can be characterized as immunosuppressive and growth-stimulating.

Клиническое применение способа позволит уже на этапе хирургического вмешательства выделять группы больных с высоким риском прогрессирования заболевания и прогнозировать хирургические, терапевтические и диагностические мероприятия в послеоперационном периоде.Clinical application of the method will allow already at the stage of surgical intervention to identify groups of patients with a high risk of disease progression and predict surgical, therapeutic and diagnostic measures in the postoperative period.

Приводим примеры клинического наблюдения. Пример №1Here are some examples of clinical observation. Example # 1

Пациентка В., 28.06.1991 г. р., поступила в отделение нейроонкологии ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России 17.10.2018 с жалобами на нарастающие по интенсивности головные боли, тошноту, периодическое нарушение речи.Patient V., born on June 28, 1991, was admitted to the neurooncology department of the National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the Russian Federation on October 17, 2018 with complaints of increasing intensity headaches, nausea, and periodic speech disorders.

Из анамнеза: считает себя больной в течение 2-х лет, когда при МРТ головного мозга выявлена опухоль левой лобной доли. От предложенного дообследования и лечения в 2017 г. пациентка отказалась. В связи с появившимися в сентябре 2018 г. речевыми нарушениями повторно обратилась в НМИЦ онкологии. По шкале Карновского 90 баллов.From the anamnesis: considers himself ill for 2 years, when MRI of the brain revealed a tumor of the left frontal lobe. The patient refused the proposed follow-up examination and treatment in 2017. In connection with the speech disorders that appeared in September 2018, she again applied to the National Medical Research Center of Oncology. On the Karnofsky scale, 90 points.

Данные обследования. При выполнении МРТ головного мозга с и без контрастного усиления от 12.10.2018 определяется опухоль левой лобной доли, размерами 3,6×3,0×3,4 см. Дислокации срединных структур нет. При контрастном усилении отмечаются единичные участки накопления контраста.Survey data. When performing MRI of the brain with and without contrast enhancement from 10/12/2018, a tumor of the left frontal lobe with dimensions of 3.6 × 3.0 × 3.4 cm is determined.Midian structures are not dislocated. With contrast enhancement, single areas of contrast accumulation are noted.

С диагнозом: (С71.1) Глиальная опухоль левой лобной доли, клиническая группа 2 госпитализирована для проведения оперативного лечения.Diagnosed with (C71.1) Glial tumor of the left frontal lobe, clinical group 2, was hospitalized for surgical treatment.

19.10.2018 выполнена операция - костнопластическая краниотомия в левой лобной области, удаление опухоли левой лобной доли головного мозга в пределах видимых здоровых тканей с интраоперационным пробуждением пациента и применением нейрофизиологического мониторинга. Интраоперационно взят фрагмент опухолевой ткани для ИФА.On October 19, 2018, the operation was performed - osteoplastic craniotomy in the left frontal region, removal of the tumor of the left frontal lobe of the brain within the visible healthy tissues with intraoperative awakening of the patient and the use of neurophysiological monitoring. Intraoperatively taken a fragment of tumor tissue for ELISA.

Послеоперационный период протекал без особенностей.The postoperative period was uneventful.

При гистологическом и иммуногистохимическом исследовании определяется анапластическая астроцитома, WHO Gr III. Индекс пролиферативной активности Ki 67 - 25%. При молекулярно-генетическом исследовании методом ПЦР определена мутация гена IDH1. Уровень метилирования промотора MGMT составил 35%.Histological and immunohistochemical examination determines anaplastic astrocytoma, WHO Gr III. The index of proliferative activity Ki 67 - 25%. A molecular genetic study by PCR revealed a mutation in the IDH1 gene. The methylation level of the MGMT promoter was 35%.

При проведении ИФА опухолевой ткани с определением комплекса интерлейкинов были получены следующие данные: IL-4: 25,26 пг/мл/г белка; IL-6: 0 пг/мл/г белка; IL-8: 0,33 пг/мл/г белка.When conducting ELISA of tumor tissue with the determination of the complex of interleukins, the following data were obtained: IL-4: 25.26 pg / ml / g protein; IL-6: 0 pg / ml / g protein; IL-8: 0.33 pg / ml / g protein.

При выполнении МРТ головного мозга от 08.11.2018 с и без контрастного усиления данных за остаточную опухоль не выявлено.When performing MRI of the brain from 08.11.2018 with and without contrast enhancement, no data for residual tumor were detected.

С 12.11.2018 по 18.12.2019 проведена лучевая терапия (СОД 60 Гр., РОД 2,19 Гр., №27) и химиотерапия темозоломидом в дозировке 120 мг.1 р/д в дни лучевой терапии. Далее рекомендовано продолжить химиотерапию темозоломидом в дозировке 150-200 мг/м в 1-5 дни с интервалом в 23 дня. Всего проведено 6 курсов химиотерапии.From 12.11.2018 to 18.12.2019, radiation therapy (SOD 60 Gy, ROD 2.19 Gy, No. 27) and chemotherapy with temozolomide at a dosage of 120 mg 1 r / day were performed on the days of radiation therapy. Further, it is recommended to continue chemotherapy with temozolomide at a dosage of 150-200 mg / m2 on days 1-5 with an interval of 23 days. A total of 6 courses of chemotherapy were carried out.

При выполнении МРТ головного мозга от 14.03.2019, 05.06.2019, 03.10.2019 и 22.02.2020 с и без контрастного усиления признаков продолженного роста нет.When performing MRI of the brain from 03/14/2019, 06/05/2019, 10/03/2019 and 02/22/2020 with and without contrast enhancement, there are no signs of continued growth.

Приведенный клинический пример демонстрирует возможность прогнозирования течения низкодиффернцированной глиальной опухоли с развитием продолженного роста в сроки от 14 месяцев и определения объема симптоматической и химиотерапии, диагностических мероприятий.The given clinical example demonstrates the possibility of predicting the course of a poorly differentiated glial tumor with the development of continued growth over a period of 14 months and determining the volume of symptomatic and chemotherapy, diagnostic measures.

Пример №2.Example # 2.

Пациент С, 04.01.1952 г.р., поступил в отделение нейроонкологии ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России 17.12.2018 с жалобами на нарушение понимания обращенной речи, нарастающие по интенсивности головные боли, тошноту, рвоту.Patient C, born on 04.01.1952, was admitted to the neurooncology department of the National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of Russia on 17.12.2018 with complaints of impaired understanding of addressed speech, increasing in intensity headaches, nausea, and vomiting.

Из анамнеза: считает себя больным в течение 1 месяца. При выполнении МРТ головного мозга выявлена опухоль левой височной и теменной долей. Далее за мед. помощью обратилась в НМИЦ онкологии. По шкале Карновского 80 баллов.From the anamnesis: considers himself sick for 1 month. MRI of the brain revealed a tumor in the left temporal and parietal lobes. Further for honey. she turned to the National Medical Research Center of Oncology with help On the Karnofsky scale, 80 points.

Данные обследования. При выполнении МРТ головного мозга с и без контрастного усиления от 10.12.2018 определяется опухоль левой височной и теменной долей, 4,2×4,6×5,5 см. Дислокации срединных структур нет. При контрастном усилении отмечаются единичные участки накопления контраста.Survey data. When performing MRI of the brain with and without contrast enhancement from December 10, 2018, a tumor of the left temporal and parietal lobes, 4.2 × 4.6 × 5.5 cm, is determined.Midian structures are not dislocated. With contrast enhancement, single areas of contrast accumulation are noted.

С диагнозом: (С71.0) Глиальная опухоль левой височной и теменной долей, клиническая группа 2 госпитализирован для проведения оперативного лечения.Diagnosed with (C71.0) Glial tumor of the left temporal and parietal lobes, clinical group 2, was hospitalized for surgical treatment.

19.12.2018 выполнена операция - костно-пластическая краниотомия в левой теменной области, удаление глиальной опухоли с применением интраоперационного нейрофизиологического мониторинга.On December 19, 2018, the operation was performed - osteoplastic craniotomy in the left parietal region, removal of the glial tumor using intraoperative neurophysiological monitoring.

Интраоперационно взят фрагмент опухолевой ткани для ИФА.Intraoperatively taken a fragment of tumor tissue for ELISA.

При гистологическом и иммуногистохимическом исследовании определяется анапластическая астроцитома, WHO Gr III. Индекс пролиферативной активности Ki 67 - 20%. При молекулярно-генетическом исследовании методом ПНР мутация генов IDH установить гн удалось. Уровень метилирования промотора MGMT 15%.Histological and immunohistochemical examination determines anaplastic astrocytoma, WHO Gr III. The index of proliferative activity Ki 67 - 20%. Molecular genetic research by the PNR method revealed the IDH gene mutation. The methylation level of the MGMT promoter is 15%.

При проведении ИФА опухолевой ткани с определением комплекса интерлейкинов были получены следующие данные: IL-4 0,72 пг/мл/г белка; IL-6 22,6 пг/мл/г белка; IL-8 94,2 пг/мл/г белка.When conducting ELISA of tumor tissue with the determination of the interleukin complex, the following data were obtained: IL-4 0.72 pg / ml / g protein; IL-6 22.6 pg / ml / g protein; IL-8 94.2 pg / ml / g protein.

При выполнении МРТ головного мозга от 09.01.2019 с и без контрастного усиления данных за остаточную опухоль не выявлено.When performing MRI of the brain from 01/09/2019 with and without contrast enhancement, no data for residual tumor were detected.

С 28.01.2019 по 04.03.2019 проведена лучевая терапия (СОД 60 Гр., РОД 2 Гр., №30) и химиотерапия темозоломидом в дозировке 150 мг 1 р/д в дни лучевой терапии. Далее рекомендовано продолжить химиотерапию темозоломидом в дозировке 150 мг/м в 1-5 дни с интервалом в 23 дня.From 28.01.2019 to 04.03.2019, radiation therapy (SOD 60 Gy, ROD 2 Gy, No. 30) and chemotherapy with temozolomide at a dosage of 150 mg 1 r / day on the days of radiation therapy were performed. Further, it is recommended to continue chemotherapy with temozolomide at a dosage of 150 mg / m2 on days 1-5 with an interval of 23 days.

25.07.2019 у пациента впервые развился первично генерализованный судорожный приступ. Начата противосудорожная терапия. При выполнении МРТ головного мозга от 27.07.2019 с и без контрастного усиления, отмечается зона накопления контраста размерами 1×1,5×0,7 см - продолженный рост. Продолжена химиотерапия темозоломидом в дозировке 300 мг в 1-5 дни с интервалом в 23 дня.On July 25, 2019, the patient first developed a primary generalized convulsive seizure. Anticonvulsant therapy was started. When performing an MRI of the brain on July 27, 2019 with and without contrast enhancement, a contrast accumulation zone with dimensions of 1 × 1.5 × 0.7 cm is noted - continued growth. Chemotherapy was continued with temozolomide at a dosage of 300 mg on days 1-5 with an interval of 23 days.

В связи с развитием тромбоцитопении пациент наблюдался у гематолога, проводилась ее коррекция.In connection with the development of thrombocytopenia, the patient was observed by a hematologist, and its correction was carried out.

При выполнении ПЭТ КТ с метионином от 29.07.2019 отмечается зона повышенного метаболизма, размерами 1,2×1,7×0,9 см. Данные свидетельствуют о продолженном росте. Продолжена химиотерапия темозоломидом. Всего проведено 9 курсов.When performing PET CT with methionine on July 29, 2019, a zone of increased metabolism is noted, measuring 1.2 × 1.7 × 0.9 cm.The data indicate continued growth. Chemotherapy with temozolomide was continued. A total of 9 courses were held.

При выполнении МРТ головного мозга от 23.10.2019 и 02.02.2020 очаг накопления контраста без динамики.When performing MRI of the brain from 10/23/2019 and 02/02/2020, the focus of contrast accumulation was unchanged.

Приведенный клинический пример демонстрирует возможность прогнозирования течения низкодифференцированной глиальной опухоли с развитием продолженного роста в сроки от 7 до 14 месяцев и, как следствие, необходимость более длительного курса симптоматической и химиотерапии, проведения большего объема диагностических мероприятий.The given clinical example demonstrates the possibility of predicting the course of a poorly differentiated glial tumor with the development of continued growth in a period of 7 to 14 months and, as a consequence, the need for a longer course of symptomatic and chemotherapy, and a larger amount of diagnostic measures.

Технико-экономическая эффективность «Способ прогнозирования течения низкодифференцированных глиальных опухолей на основе цитокинового микроокружения» заключается в том, что совокупные уровни IL-4; IL-6; IL-8 в ткани опухоли могут являться прогностическим критерием прогрессирования опухоли и при персонифицированном подходе к ведению этих пациентов снизить экономические затраты на лечение прогрессирования опухоли.The technical and economic efficiency "A method for predicting the course of poorly differentiated glial tumors based on the cytokine microenvironment" is that the cumulative levels of IL-4; IL-6; IL-8 in tumor tissue can be a predictor of tumor progression and, with a personalized approach to the management of these patients, reduce the economic costs of treating tumor progression.

Список литературыList of references

1. Ahmadipour Y., Jabbarli R., Gembruch О., Pierscianek D., Darkwah Oppong M., Dammann P., Wrede K., Ozkan N., Mtiller O., Sure U., El Hindy N. Impact of multifocality and molecular markers on survival of glioblastoma. World Neurosurg 2019 Feb; 122. https://doi.org/10.1016/j.wneu.2018.10.075.1. Ahmadipour Y., Jabbarli R., Gembruch O., Pierscianek D., Darkwah Oppong M., Dammann P., Wrede K., Ozkan N., Mtiller O., Sure U., El Hindy N. Impact of multifocality and molecular markers on survival of glioblastoma. World Neurosurg 2019 Feb; 122. https://doi.org/10.1016/j.wneu.2018.10.075.

2. Aibaidula A., Chan A.K., Shi Z., Li Y., Zhang R., Yang R., Li K.K, Chung N.Y., Yao Y., Zhou L., Wu J., Chen H., Ng H.K. Adult IDH wild-type lower-grade gliomas should be further stratified. Neuro Oncol. 2017 Oct 1; 19(10): 1327-1337. doi: 10.1093/neuonc/nox078.2. Aibaidula A., Chan A.K., Shi Z., Li Y., Zhang R., Yang R., Li K.K, Chung N.Y., Yao Y., Zhou L., Wu J., Chen H., Ng H.K. Adult IDH wild-type lower-grade gliomas should be further stratified. Neuro Oncol. 2017 Oct 1; 19 (10): 1327-1337. doi: 10.1093 / neuonc / nox078.

3. Cancer Genome Atlas Research.Comprehensive, Integrative Genomic Analysis of Diffuse Lower-Grade Gliomas. N Engl J Med. 2015 Jun 25; 372(26): 2481-2498. doi: 10.1056/NEJMoa1402121.3. Cancer Genome Atlas Research.Comprehensive, Integrative Genomic Analysis of Diffuse Lower-Grade Gliomas. N Engl J Med. 2015 Jun 25; 372 (26): 2481-2498. doi: 10.1056 / NEJMoa1402121.

4. Davis M.E. Epidemiology and Overview of Gliomas. Semin Oncol Nurs. 2018 Dec; 34(5): 420-429. doi: 10.1016/j.soncn.2018.10.001.4. Davis M.E. Epidemiology and Overview of Gliomas. Semin Oncol Nurs. 2018 Dec; 34 (5): 420-429. doi: 10.1016 / j.soncn.2018.10.001.

5. Henker С, Kriesen Т., Furst K., Goody D., Glass A., Putzer B.M., Piek J. Effect of 10 different polymorphisms on preoperative volumetric characteristics of glioblastoma multiforme. J. Neurooncol., 2016; 126(3): 585-592. doi: 10.1007/s 11060-015-2005-9.5. Henker C, Kriesen T., Furst K., Goody D., Glass A., Putzer B.M., Piek J. Effect of 10 different polymorphisms on preoperative volumetric characteristics of glioblastoma multiforme. J. Neurooncol., 2016; 126 (3): 585-592. doi: 10.1007 / s 11060-015-2005-9.

6. Jiang Y., Han S., Cheng W., Wang Z., Wu A. NFATI-regulated IL6 signalling contributes to aggressive phenotypes of glioma. Cell Commun Signal. 2017 Dec; 15(1): 54. doi: 10.1186/s 12964-017-0210-1.6. Jiang Y., Han S., Cheng W., Wang Z., Wu A. NFATI-regulated IL6 signaling contributes to aggressive phenotypes of glioma. Cell Commun Signal. 2017 Dec; 15 (1): 54.doi: 10.1186 / s 12964-017-0210-1.

7. Juratli T. A., Kirsch M, Geiger K., Klink В., Leipnitz E., Pinzer Т., Soucek S., Schrock E., Schackert G., Krex D. The prognostic value of IDH mutations and MGMT promoter status in secondary high-grade gliomas. J Neurooncol 2012; 110:325-33.doi: 10.1007/s11060-012-0977-2.7. Juratli TA, Kirsch M, Geiger K., Klink B., Leipnitz E., Pinzer T., Soucek S., Schrock E., Schackert G., Krex D. The prognostic value of IDH mutations and MGMT promoter status in secondary high-grade gliomas. J Neurooncol 2012; 110: 325-33.doi: 10.1007 / s11060-012-0977-2.

8. Kosmopoulos M., Christofides A., Drekolias D., Zavras P., Antonios N., Gargalionis, Piperi C. Critical Role of IL-8 Targeting in Gliomas. Current Medicinal Chemistry, 2018; 25: 1954-1967. doi: 10.2174/0929867325666171129125712.8. Kosmopoulos M., Christofides A., Drekolias D., Zavras P., Antonios N., Gargalionis, Piperi C. Critical Role of IL-8 Targeting in Gliomas. Current Medicinal Chemistry, 2018; 25: 1954-1967. doi: 10.2174 / 0929867325666171129125712.

9. Liu H., Mao P., Xie C, Xie W., Wang M., Jiang H. Association between interleukin 8-251 T/A and +781 C/T polymorphisms and glioma risk. Diagn. Pathol., 2015, 10: 138. doi: 10.1186/s13000-015-0378-x.9. Liu H., Mao P., Xie C, Xie W., Wang M., Jiang H. Association between interleukin 8-251 T / A and +781 C / T polymorphisms and glioma risk. Diagn. Pathol., 2015, 10: 138. doi: 10.1186 / s13000-015-0378-x.

10. Louis D.N., Perry A., Reifenberger G., von Deimling A., Figarella-Branger D., Cavenee W.K., Ohgaki H., Wiestler O.D., Kleihues P., Ellison D.W. The 2016 World Health Organization classification of tumors of the central nervous system: a summary. Acta Neuropathol 2016; 131: 803-20.doi: 10.1007/s00401-016-1545-1.10. Louis D.N., Perry A., Reifenberger G., von Deimling A., Figarella-Branger D., Cavenee W.K., Ohgaki H., Wiestler O.D., Kleihues P., Ellison D.W. The 2016 World Health Organization classification of tumors of the central nervous system: a summary. Acta Neuropathol 2016; 131: 803-20.doi: 10.1007 / s00401-016-1545-1.

11. Muller L., Muller-Haegele S., Mitsuhashi M., Gooding W., Okada H., Whiteside T. L. Exosomes isolated from plasma of glioma patients enrolled in a vaccination trial reflect antitumor immune activity and might predict survival. Oncolmmunology, 2015; 4(6): el008347. doi: 10.1080/2162402X.2015.1008347.11. Muller L., Muller-Haegele S., Mitsuhashi M., Gooding W., Okada H., Whiteside T. L. Exosomes isolated from plasma of glioma patients enrolled in a vaccination trial reflect antitumor immune activity and might predict survival. Oncolmmunology, 2015; 4 (6): el008347. doi: 10.1080 / 2162402X.2015.1008347.

12. Okada H., Lieberman F.S., Edington H.D., Witham T.F., Wargo M.J., Cai Q., Elder E.H., Whiteside T.L., Schold S.C. Jr., Pollack I.F. Autolologous glioma cell vaccine admixed with interleukin-4 gene transfected fibroblasts in the treatment of recurrent glioblastoma: preliminary observations in a patient with a favorable response to therapy. J Neurooncology 2003; 64:125-137. doi: 10.1186/1479-5876-5-67.12. Okada H., Lieberman F.S., Edington H.D., Witham T.F., Wargo M.J., Cai Q., Elder E.H., Whiteside T.L., Schold S.C. Jr., Pollack I.F. Autolologous glioma cell vaccine admixed with interleukin-4 gene transfected fibroblasts in the treatment of recurrent glioblastoma: preliminary observations in a patient with a favorable response to therapy. J Neurooncology 2003; 64: 125-137. doi: 10.1186 / 1479-5876-5-67.

13. Sun H., Yin L., Li S., Han S., Song G., Liu N., Yan C. Prognosti csignificance of IDH mutation in adult low-grade gliomas: a meta-analysis. J Neurooncol 2013; 113:277-284. doi: 10.1007/s11060-013-1107-5.13. Sun H., Yin L., Li S., Han S., Song G., Liu N., Yan C. Prognosis csignificance of IDH mutation in adult low-grade gliomas: a meta-analysis. J Neurooncol 2013; 113: 277-284. doi: 10.1007 / s11060-013-1107-5.

14. Suzuki H., Aoki K., Chiba K., Sato Y., Shiozawa Y., Shiraishi Y., Shimamura Т., Niida A., Motomura K., Ohka F., Yamamoto Т., Tanahashi K., Ranjit M., Wakabayashi Т., Yoshizato Т., Kataoka K., Yoshida K., Nagata Y., Sato-Otsubo A., Tanaka H., Sanada M., Kondo Y., Nakamura H., Mizoguchi M., Abe Т., Muragaki Y., Watanabe R., Ito I., Miyano S., Natsume A., Ogawa S. Mutational landscape and clonal architecture in grade II and III gliomas. Nat Genet 2015; 47: 458-468. doi: 10.1038/ng.3273.14. Suzuki H., Aoki K., Chiba K., Sato Y., Shiozawa Y., Shiraishi Y., Shimamura T., Niida A., Motomura K., Ohka F., Yamamoto T., Tanahashi K., Ranjit M., Wakabayashi T., Yoshizato T., Kataoka K., Yoshida K., Nagata Y., Sato-Otsubo A., Tanaka H., Sanada M., Kondo Y., Nakamura H., Mizoguchi M., Abe T., Muragaki Y., Watanabe R., Ito I., Miyano S., Natsume A., Ogawa S. Mutational landscape and clonal architecture in grade II and III gliomas. Nat Genet 2015; 47: 458-468. doi: 10.1038 / ng.3273.

15. Thompson С.B. Metabolic enzymes as oncogenes or tumor suppressors. N Engl J Med. 2009; 360:813-815.15. Thompson C.B. Metabolic enzymes as oncogenes or tumor suppressors. N Engl J Med. 2009; 360: 813-815.

16. Weber F., Asher A., Bucholz R., Berger M., Prados M., Chang S., Bruce J., Hall W., Rainov N.G., Westphal M., Warnick R.E., Rand R. W., Floeth F., Rommel F., Pan H., Hingorani V. N., Puri R. K. Local convection enhanced delivery of IL4-Pseudomonas exotoxin (NBI-3001) for treatment of patients with recurrent malignant glioma. Acta Neurochir Suppl.2003; 88: 93-103. PMID: 14531567. doi: 10.1007/978-3-7091-6090-9J5.16. Weber F., Asher A., Bucholz R., Berger M., Prados M., Chang S., Bruce J., Hall W., Rainov NG, Westphal M., Warnick RE, Rand RW, Floeth F. , Rommel F., Pan H., Hingorani VN, Puri RK Local convection enhanced delivery of IL4-Pseudomonas exotoxin (NBI-3001) for treatment of patients with recurrent malignant glioma. Acta Neurochir Suppl. 2003; 88: 93-103. PMID: 14531567.doi: 10.1007 / 978-3-7091-6090-9J5.

17. Yan H., Parsons W., Jin G., McLendon R., Rasheed A., Yuan W., Kos I., Batinic-Haberle I., Jones S., Riggins G.J., Friedman H, Friedman A., Reardon D., Herndon J., Kinzler K.W., Velculescu V.E., Vogelstein В., Bigner D.D. IDH1 and IDH2 Mutations in Gliomas. N Eng J Med. 2009; 360: 765-73.17. Yan H., Parsons W., Jin G., McLendon R., Rasheed A., Yuan W., Kos I., Batinic-Haberle I., Jones S., Riggins GJ, Friedman H, Friedman A., Reardon D., Herndon J., Kinzler KW, Velculescu VE, Vogelstein B., Bigner DD IDH1 and IDH2 Mutations in Gliomas. N Eng J Med. 2009; 360: 765-73.

18. Zhang В., Shi L., Lu S., Sun X., Liu Y., Li H., Wang X., Zhao C, Zhang H., Wang Y. Autocrine IL-8 promotes F-actin polymerization and mediate mesenchymal transition via ELMO1-NF-KB-Snail signaling in glioma. Cancer Biol. Ther., 2015; 16(6): 898-911. doi: 10.1080/15384047.2015.1028702.18. Zhang B., Shi L., Lu S., Sun X., Liu Y., Li H., Wang X., Zhao C, Zhang H., Wang Y. Autocrine IL-8 promotes F-actin polymerization and mediate mesenchymal transition via ELMO1-NF-KB-Snail signaling in glioma. Cancer Biol. Ther. 2015; 16 (6): 898-911. doi: 10.1080 / 15384047.2015.1028702.

19. Горяйнов С.А., Гольдберг M.Ф., Голанов А.В., Золотова С.В., Шишкина Л.В., Рыжова М.В., Пицхелаури Д.И., Жуков В.Ю., Усачев Д.Ю., Беляев А.Ю., Кондратов А.В., Шурхай В.А., Потапов А.А. Феномен длительной выживаемости пациентов с глиобластомами. Часть I: роль клинико-демографических факторов и мутации IDH1 (R 132 Н) Вопросы нейрохирургии 2017; 3: 5-16. [Goryaynov S.A., Gol'dberg М. F., Golanov А.V., Zolotova S.V., Shishkina L.V., Ryzhova M.V., Pitskhelauri D.I., Zhukov V. Yu., Usachev D. Yu., Belyaev A. Yu., Kondrashov A.V., Shurkhay V.A., Potapov A.A. The phenomen on of long-term survival in glioblastoma patients. Part I: the role of clinical and demographic factors and an IDH1 mutation (R 132 H). Burdenko's J. of Neurosurgery 2017; 3: 5-16. (In Russian)].19. Goryainov S.A., Goldberg M.F., Golanov A.V., Zolotova S.V., Shishkina L.V., Ryzhova M.V., Pitskhelauri D.I., Zhukov V.Yu., Usachev D.Yu., Belyaev A.Yu., Kondratov A.V., Shurkhay V.A., Potapov A.A. The phenomenon of long-term survival in patients with glioblastomas. Part I: the role of clinical and demographic factors and IDH1 mutations (R 132 H) Problems of neurosurgery 2017; 3: 5-16. [Goryaynov SA, Gol'dberg M. F., Golanov A. V., Zolotova SV, Shishkina LV, Ryzhova MV, Pitskhelauri DI, Zhukov V. Yu., Usachev D. Yu., Belyaev A. Yu., Kondrashov AV , Shurkhay VA, Potapov AA The phenomenal on of long-term survival in glioblastoma patients. Part I: the role of clinical and demographic factors and an IDH1 mutation (R 132 H). Burdenko's J. of Neurosurgery 2017; 3: 5-16. (In Russian)].

20. Каприн А.Д. Злокачественные новообразования в России в 2013 году (заболеваемость и смертность) / А.Д. Каприн, В.В. Старинский, Г.В. // филиал ФГБУ «ФМИЦ им. П.А. Герцена» Минздрава России. - Москва. - 2015. - С.250.20. Kaprin A.D. Malignant neoplasms in Russia in 2013 (morbidity and mortality) / A.D. Kaprin, V.V. Starinsky, G.V. // branch of the Federal State Budgetary Institution "FMITS im. P.A. Herzen »of the Ministry of Health of Russia. - Moscow. - 2015. - S.250.

21. Кобяков Г.Л., Абсалямова О.В., Поддубский А.А., Лодыгина К.С, Кобякова Е.А. Классификация ВОЗ первичных опухолей центральной нервной системы 2016 г.: взгляд клинициста. Вопросы нейрохирургии 2018; 3: 88-96. [Kobyakov G. L., Absalyamova О. V., Poddubskiy A.A., Lodygina K.S., Kobyakov Е.A. The 2016 WHO classification of primary tumors of the central nervous system: a clinician's opinion. Burdenko's J. of Neurosurgery 2018; 3: 88-96. (In Russian)].21. Kobyakov G.L., Absalyamova O.V., Poddubskiy A.A., Lodygina KS, Kobyakova E.A. 2016 WHO classification of primary tumors of the central nervous system: a clinician's view. Neurosurgery Issues 2018; 3: 88-96. [Kobyakov G. L., Absalyamova O. V., Poddubskiy A.A., Lodygina K.S., Kobyakov E.A. The 2016 WHO classification of primary tumors of the central nervous system: a clinician's opinion. Burdenko's J. of Neurosurgery 2018; 3: 88-96. (In Russian)].

Claims

A method for predicting the course of poorly differentiated glial tumors based on the cytokine microenvironment, which consists in the fact that the complex content of interleukins IL-4, IL-6, IL-8 is determined in the tumor tissue by the method of enzyme immunoassay and when their total content of IL-4 ranges from 0, 5 to 1.4 pg / ml / g protein, IL-6 from 4.4 to 50.6 pg / ml / g protein, IL-8 from 43.7 to 125.2 pg / ml / g protein predict early progression tumors within 7-14 months after surgery, and with their total content of IL-4 ranging from 13.1 to 28.2 pg / ml / g protein, IL-6 from 0 to 8.2 pg / ml / g protein , IL-8 from 0.3 to 19.6 pg / ml / g protein predict late progression over 14 months after surgery.