RU2738480C1 - Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков - Google Patents

Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков Download PDF

Info

Publication number
RU2738480C1
RU2738480C1 RU2020115275A RU2020115275A RU2738480C1 RU 2738480 C1 RU2738480 C1 RU 2738480C1 RU 2020115275 A RU2020115275 A RU 2020115275A RU 2020115275 A RU2020115275 A RU 2020115275A RU 2738480 C1 RU2738480 C1 RU 2738480C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
test
probiotics
microorganism
test microorganism
contamination
Prior art date
Application number
RU2020115275A
Other languages
English (en)
Inventor
Николай Владимирович Шестопалов
Людмила Самуиловна Федорова
Анастасия Васильевна Ильякова
Александра Сергеевна Белова
Original Assignee
Федеральное бюджетное учреждение науки «Научно-исследовательский институт дезинфектологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное бюджетное учреждение науки «Научно-исследовательский институт дезинфектологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека filed Critical Федеральное бюджетное учреждение науки «Научно-исследовательский институт дезинфектологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority to RU2020115275A priority Critical patent/RU2738480C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2738480C1 publication Critical patent/RU2738480C1/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D1/00—Detergent compositions based essentially on surface-active compounds; Use of these compounds as a detergent
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способу определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков, относящихся к новому типу моющих средств. Предлагаемый способ включает два этапа. На первом этапе определяют время воздействия, за которое обсемененность поверхности тест-микроорганизмом снижается не менее чем на 90%, путем обработки тест-поверхности, контаминированной тест-микроорганизмом, раствором моющего средства на основе пробиотиков. Берут смывы с поверхности через определенные промежутки времени и осуществляют посевы на твердые питательные среды. На втором этапе определяют обсемененность тест-микроорганизмом путем контаминирования тест-поверхности ежедневно в течение не менее 14 дней тест-микроорганизмом. При этом в первый день наносят суспензию тест-микроорганизма, содержащую 2×109 КОЕ/мл, далее ежедневно на поверхности наносят суспензию тест-микроорганизма, содержащую 106 КОЕ/мл, после полного высыхания обрабатывают раствором моющего средства на основе пробиотиков. По истечении времени воздействия, определенного на первом этапе, на тест-поверхностях определяют обсемененность тест-микроорганизмом. Сравнивают результаты с данными, полученными с аналогично контаминированной контрольной поверхностью, обработанной стерильной водой. По результатам сравнения выносят суждение об эффективности моющего средства на основе пробиотиков при снижении обсемененности тест-микроорганизмом не менее чем на 99,99 % через 5-7 дней от начала обработки поверхностей. Способ безопасен и обеспечивает достоверность и точность определения. Изобретение позволяет повысить эффективность моющих средств на основе пробиотиков. 5 табл., 1 пр., 2 ил.

Description

Изобретение относится к области микробиологии и дезинфектологии и может быть использовано для определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков.
Моющие средства на основе пробиотиков (ПМС) представляют собой новое поколение моющих средств, которые содержат смесь спор бактерий рода Bacillus в сочетании с поверхностно-активными веществами. Их механизм действия основан на принципе «конкурентного ингибирования» (вытеснения) имеющейся на поверхностях микрофлоры и перевода ее в пассивное метаболическое состояние. Имеющиеся данные говорят о том, что ежедневная обработка поверхностей средствами на основе пробиотиков эффективно снижает уровень патогенных микроорганизмов в условиях больничной среды. Присутствие пробиотиков на поверхностях в помещениях предотвращает повторную контаминацию микроорганизмами и обуславливает поддержание стабильных гигиенических условий поверхностей.
Известен способ оценки эффективности дезинфектантов и антисептиков, заключающийся в сравнении количеств колониеобразующих единиц микроорганизмов до и после воздействия на инокулюм дезинфектанта или антисептика, причем воздействие на инокулюм дезинфектанта или антисептика проводят в цилиндре, помещенном на поверхность плотной питательной среды, содержащей естественный нейтрализатор, по истечении периода необходимой экспозиции в цилиндр вносят концентрированный искусственный нейтрализатор, через 5 мин цилиндр удаляют, и исследуемую смесь распределяют по поверхности плотной питательной среды с последующей оценкой результатов. (Патент RU №2191829, опубл. 2002).
В патенте RU 2679845, опубл. 2019, описан способ биологической дезинфицирующей пробиотической очистки и обеззараживания от патогенов бактерий и вирусов помещений медицинских учреждений, включающий этапы, на которых обрабатывают помещения медицинских учреждений, проводят сбор смывов в упомянутых помещениях, осуществляют посев смывов на питательные среды в «чашках Петри» для контроля текущей чистоты помещений, где обработку осуществляют следующим образом: один раз в день обрабатывают помещения медицинских учреждений пробиотиком; осуществляют смывы в разных местах помещений медицинских учреждений и осуществляют их посев на питательные среды в «чашках Петри» не ранее чем через пять часов после каждой обработки пробиотиком; при этом общая длительность процесса очистки и обеззараживания составляет 10 суток, причем пробиотик в первые пять дней представляет собой концентрат 5% водного раствора, который доводится до температуры 40°С, а во вторые пять дней - концентрат 1% водного раствора, который доводится до температуры 40°С.
Полученные результаты показали пролонгирующие свойства пробиотиков, при этом чистоту можно обеспечить без вредных для человека, особенно для лиц аллергическими явлениями, запахов.
В настоящее время не существует широко признанных стандартов качества, методических рекомендаций и способов по изучению эффективности использования моющих средств на основе пробиотиков.
Предлагаемый способ направлен на решение проблемы и достижение технического результата, состоящего в установлении эффективности использования моющих средств на основе пробиотиков, позволяющий наиболее достоверно и точно с минимальными затратами времени и средств проводить оценку качества действия пробиотиков, содержащихся в качестве активного ингредиента в моющих средствах.
В связи с отсутствием способов оценки эффективности моющих средств на основе пробиотиков в лабораторных условиях с максимально приближенными условиями практического применения, предлагаемый способ соответствует критерию «новизна».
Технический результат достигается описываемым способом определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков, включающим два этапа, при этом на первом этапе тест-поверхность, контаминированную тест-микроорганизмом, после подсушивания обрабатывают раствором моющего средства на основе пробиотиков, через определенные промежутки времени с поверхности берут смывы, осуществляют посевы на твердые питательные среды и определяют время воздействия, за которое обсемененность поверхности тест-микроорганизмом снижается не менее чем на 90%, затем на втором этапе тест-поверхности ежедневно в течение не менее 14 дней контаминируют тест-микроорганизмом, при этом в первый день наносят суспензию тест-микроорганизма, содержащую 2×109 КОЕ/мл, далее ежедневно на поверхности наносят суспензию тест-микроорганизма, содержащую 106 КОЕ/мл, и после полного высыхания обрабатывают раствором моющего средства на основе пробиотиков, затем, по истечении времени воздействия, определенного на первом этапе, на тест-поверхностях определяют обсемененность тест-микроорганизмом и сравнивают результаты с данными, полученными с аналогично контамированной контрольной поверхностью, обработанной стерильной водой, и по результатам сравнения выносят суждение об эффективности моющего средства на основе пробиотиков при снижении обсемененности тест-микроорганизмом не менее чем на 99,99 % через 5-7 дней от начала обработки поверхностей.
В известном уровне техники не обнаружено сведений о данном способе определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков, что позволяет сделать вывод о соответствии данного способа критериям охраноспособности.
Предложенный способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков основан на изучении динамики гибели бактерий и грибов после однократной обработки поверхностей пробиотиками и многократной обработки в течение длительного периода.
Сущность настоящего изобретения заключается в следующем.
В качестве тест-поверхностей используют поверхности размером 10×10 см из различных материалов (кафельную, керамическую плитку, стекло, линолеум, металл, пластик).
Тест-поверхности должны быть чистыми и стерильными.
В качестве тест-микроорганизмов используют бактерии: Escherichiacoli (штаммы АТСС 10536, №1257), Pseudomonasaeruginosa (штамм АТСС 27853 или штамм АТСС 15442), Staphylococcusaureus (штаммы АТСС 6538-Р, №906); грибы Candidaalbicans(штамм АТСС 10231).
Для приготовления рабочей суспензии тест-микроорганизма используют 18-24 часовую культуру бактерий и стерильную питьевую воду.
При приготовлении рабочих растворов моющего средства на основе пробиотиков (ПМС) используют теплую воду с температурой 40-50°С.
Способ включает два этапа.
На первом этапе на тест-поверхности, расположенные горизонтально, стерильной пипеткой наносят взвесь тест-микроорганизма из расчета 0,5 мл микробной взвеси, содержащей 2×109 КОЕ/мл, на площадь в 100 см2 и равномерно распределяют ее по поверхности стерильным стеклянным шпателем. Поверхности подсушивают до полного высыхания при температуре окружающей среды (18-20)°C и относительной влажности воздуха (50-60)%, затем обрабатывают рабочим раствором ПМС.
Контрольные поверхности, контаминированные тест-микроорганизмом, после подсушивания обрабатывают стерильной водопроводной водой.
Через определенные промежутки времени (1 час; 2 часа; 4 часа; 24 часа) с поверхностей берут смывы, осуществляют посевы на твердые питательные среды и определяют для опытных поверхностей общее микробное число, обсемененность тест-микроорганизмом и спорами, а для контрольных поверхностей - обсемененность тест-микроорганизмом.
За критерий эффективности берут снижение обсемененности поверхностей тест-микроорганизмом не менее чем на 90% по отношению контролю.
На втором этапе тест-поверхности ежедневно в течение не менее 14 дней контаминируют тест-микроорганизмом и обрабатывают раствором ПМС.
В первый день на тест-поверхности пипеткой наносят суспензию тест-микроорганизма из расчета 0,5 мл взвеси, содержащей 2×109 КОЕ/мл, на 100 см2.
С последующего дня ежедневно на поверхности наносят суспензию тест-микроорганизма из расчета 0,5 мл взвеси, содержащей 106 КОЕ/мл, на 100 см2,
подсушивают до полного высыхания и затем опытные поверхности обрабатывают раствором ПМС.
По истечении времени воздействия, выбранного на 1-ом этапе, на одной поверхности определяют общее микробное число и обсемененность тест-микроорганизмом и спорами. Остальные поверхности оставляют для последующих экспериментальных дней.
Контрольные поверхности, аналогично опытным, ежедневно заражают тест-микроорганизмом и обрабатывают водой с последующим определением количества тест-микроорганизма.
Контроль эффективности обеззараживания тест-поверхностей проводят следующим образом: марлевой салфеткой (размером 5×5 см2), смоченной в растворе универсального нейтрализатора (содержащий Твин-80 (3%), сапонин (0,3-3,0%), гистидин (0,1%), цистеин (0,1%), тщательно протирают тест-поверхность, затем салфетку погружают в 10 мл этого же нейтрализатора, находящегося в пробирке с бусами. Время отмыва марлевой салфетки 10 мин при постоянном встряхивании. Отмывную жидкость сеют (на 2-3 чашки по 0,1-0,2 мл в каждую) на твердые дифференциально-диагностические питательные среды или используют пластины 3М «Petrifilm», представляющие собой готовые системы с культуральной средой, содержащей стандартный набор питательных веществ, гелеобразующий агент, тетразолиевый индикатор, и предназначенные для ускоренного определения бактерий.
В зависимости от вида тест-микроорганизма посевы выращивают в термостате при температуре 37°С.
Учет результатов осуществляют через 2 суток путем подсчета количества выросших колоний, затем рассчитывают плотность контаминации 100 см2 поверхности и % снижения уровня обсемененности тест-микроорганизма, принимая количество колоний, снятых с контрольных поверхностей, за 100%.
За критерий эффективности моющего средства на основе пробиотиков принимают снижение обсемененности тест-микроорганизмом не менее чем на 99,99 % через 5-7 дней от начала обработки поверхностей.
Изобретение иллюстрируется следующим примером.
Пример
Для исследования выбрано моющее средство Heavy Duty Sanitar Cleaner, производства «CHRISALNV», Бельгия, предназначенное для мытья различных поверхностей в санитарных помещениях и санитарно-технического оборудования в медицинских организациях.
Пробиотические культуры в составе препарата абсолютно безвредны при использовании и официально классифицированы как безопасные, согласно документам производителя.
Средство представляет собой розовую жидкость, в состав которой входят энзимы, пробиотические культуры, биоразлагаемые поверхностно-активные вещества (ПАВ) и вода.
В качестве пробиотиков в средстве используются бактерии рода Bacillus, количество которых в 2,0%-ном растворе составляет от 3·105 до 5·105 КОЕ/мл.
Готовят рабочий 2%-ный раствор средства на теплой (40-45°С) водопроводной питьевой воде.
В качестве тест-поверхностей использовали кафельную плитку, а в качестве тест-микроорганизма: Staphylococcus aureus АТСС 6538-Р -  для оценки бактерицидной активности в отношении грамположительных бактерий, Escherichia coli АТСС 10536, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853 - для оценки бактерицидной активности в отношении грамотрицательных бактерий, грибы Candida albicans АТСС 10231 - для оценки антимикробной активности в отношении грибов и дрожжеподобных грибов. 
Тест-поверхности располагали горизонтально. При обработке поверхностей способом протирания норма расхода рабочего раствора составляла 100 мл/м2 поверхности.
На 1-м этапе на опытные поверхности наносили 0,5 мл суспензии тест-микроорганизмов в 2·109 КОЕ/мл. После подсушивания поверхности обрабатывали 2%-ным раствором средства. Через 1 час, 2 часа, 4 часа, 24 часа отбирали смывы марлевой салфеткой и делали высевы на плотные питательные среды для подсчета общего микробного числа (мясо-пептонный агар), Staphylococcus aureus АТСС 6538-Р (желточно-солевой агар), E.coli (агар Эндо), P.aeruginosa (мясо-пептонный или казеиновый агар), C.albicans (агар Сабуро) и помещали их в термостат. Через двое суток проводят подсчет выросших колоний.
Контрольные поверхности обрабатывают стерильной водой и также через 1 час, 2 часа, 4 часа и 24 часа определяют обсемененность тест-культурой.
Эксперименты ставили не менее чем в трех повторности. Статистическую обработку данных проводили с помощью программы Excel. Различия считали статистически значимыми при р<0,05.
Результаты исследований представлены в Таблице 1.
Таблица 1. Микробная обсемененность поверхностей, контаминированных тест-микроорганизмами, при обработке 2,0%-ным раствором средства
Тест-микроорганизм Экспозиция, час Контроль,
КОЕ/см2 		Количество тест-микроорганизмов на опытных поверхностях,
КОЕ/см2 		Общее микробное число КОЕ/см2
Staphylococcus aureus АТСС 6538-Р 1 3,5·105 2,7·103 3,4·103
2 3,1·105 2,3·102 4,2·103
4 3,2·105 129 3,7·105
24 2,5·105 23 3,5·105
Escherichia coli АТСС 10536 1 2,5·105 2,5·103 2,9·103
2 3,1·104 2,5·102 5,2·103
4 3,0·104 167 2,8·105
24 2,5·104 68 3,2·105
Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853 1 3,2·105 2,9·103 3,1·103
2 3,1·105 3,3·102 3,7·103
4 3,0·105 134 2,7·105
24 2,8·105 98 3,3·105
Candida albicans АТСС 10231 1 3,5·105 3,7·103 3,2·103
2 3,1·105 2,7·102 4,3·103
4 3,2·105 119 2,2·105
24 2,5·105 73 3,7·105
Анализ результатов исследований показал, что споры бактерий рода Bacillus способны прорастать на неживых поверхностях и подавляют рост тест-микроорганизмов.
Как следует из представленных данных, при отборе смывов через 4 часа обсемененность поверхностей микроорганизмами начинает снижаться и увеличивается общее микробное число.
На 2-м этапе тест-поверхности ежедневно (в течение 20-28 дней) контаминировали тест-микроорганизмами из расчета 0,5 мл взвеси, содержащей 106 КОЕ/мл, на 100 см2, подсушивали и обрабатывали 2,0% раствором средства. Контрольные поверхности обрабатывали водой. Через 5 мин поверхности протирали увлажненными водой салфетками, затем с поверхностей через 4 и 24 часа отбирали смывы и делали высевы на плотные питательные среды для подсчета общего микробного числа (мясо-пептонный или казеиновый агар), S.aureus (желточно-солевой агар), E.coli (агар Эндо), P.aeruginosa (мясо-пептонный или казеиновый агар), C.albicans (агар Сабуро) и помещали их в термостат. Через двое суток проводили подсчет выросших колоний.
Результаты исследований представлены в Таблицах 2-5.
Таблица 2. Микробная обсемененность поверхностей, контаминированных Staphylococcus aureus АТСС 6538-Р, при обработке 2,0%-ным раствором средства
Сутки Экспозиция, час Контроль,
КОЕ/см2 		S.aureus,
КОЕ/см2 		Общее микробное число КОЕ/см2
1 4
24 		5,2·105
2,1·103 		1,2·103
96		 7,4·103
5,5·103
2 4
24 		6,1·103
1,2·102 		1,8·103
51		 7,3·103
9,8·102
3 4
24 		4,1·103
2,9·102 		2,1·102
25		 1,1·104
9,1·103
4 4
24 		7,5·103
2,1·102 		1,1·102
8		 9,3·103
8,4·103
8 4
24 		3,6·103
1,4·102 		27
5		 1,0·104
7,5·103
9 4
24		 4,1·103
2,9·102 		15
2		 8,7·103
8,4·103
10 4
24		 4,1·103
2,9·102 		21
0		 9,2·103
8,4·103
11 4
24		 4,1·103
2,9·102 		13
0		 9,1·103
8,4·103
15 4
24 		4,8·103
1,03·102 		22
1		 8,1·103
6,5·103
16 4
24		 3,8·103
2,9·102 		8
0		 9,9·103
8,4·103
17 4
24		 4,2·103
2,9·102 		9
0		 8,0·103
6,3·103
18 4
24		 4,1·103
2,5·102 		6
0		 3,2·103
2,9·103
21 4
24 		3,9·103
2,8·102 		7
0		 7,3·103
6,4·103
24 4
24 		3,1·103
1,8·102 		5
0		 7,2·103
6,9·103
25 4
24		 2,6·103
1,7·102 		4
0		 7,1·103
6,3·103
26 4
24		 3,2·103
1,9·102 		6
0		 7,2·103
5,9·103
27 4
24		 2,7·103
1,4·102 		7
0		 7,9·103
6,9·103
28 4
24		 3,2·103
1,5·102 		3
0		 8,0·103
6,3·103
Таблица 3. Микробная обсемененность поверхностей, контаминированных E.coli АТСС 10536, при обработке 2,0% раствором средства
Сутки Экспозиция Контроль,
КОЕ/см2 		E.coli,
КОЕ/см2 		Общее микробное число
1 4
24 		3,9·102
0		 1,2·102
0		 5,2·103
6,2·103
2 4
24 		3,2·102
0		 1,1·102
0		 7,5·103
2,3·103
3 4
24		 3,4·102
0		 1,2·102
0		 7,5·103
2,3·103
4 4
24 		3,6·102
1		 210
0		 8,1·103
8,0·103
10 4
24 		3,7·102
0		 12
0		 9,1·102
1,0·103
14 4 2,2·102 3 1,6·103
21 4 1,8·102 2 4,4·102
27 4 2,4·102 6 3,9·102
Таблица 4. Микробная обсемененность поверхностей, контаминированных P.aeruginosa АТСС 27853, при обработке 2,0% раствором средства
Сутки Экспозиция Контроль,
КОЕ/см2 		P.aeruginosa,
КОЕ/см2 		Общее микробное число
1 4
24 		5,6·102
94		 2,3·102
2		 6,5·103
6,2·103
2 4
24 		6,6·102
1,13·102 		3,8·102
1		 7,4·103
7,9·103
4 4
24 		4,1·102
82		 24
0		 8,7·103
8,3·103
8 4
24 		1,2·102
1,04·102 		31
0		 7,4·103
6,5·103
11 4 3,8·102 27 8,9·103
15 4 7,2·102 22 7,8·103
17 4 6,3·102 34 7,1·103
Таблица 5. Микробная обсемененность поверхностей, контаминированных C.albicans АТСС 10231, при обработке 2,0% раствором средства
Сутки Экспозиция Контроль,
КОЕ/см2 		C.albicans,
КОЕ/см2 		Общее микробное число
1 4
24 		2,6·103
194		 2,3·102
12		 5,5·103
5,9·103
2 4
24 		4,3·103
1,13·102 		3,8·102
9		 6,4·103
7,2·103
4 4
24 		6,1·102
98		 74
12		 8,3·103
8,1·103
8 4
24 		1,2·102
1,04·102 		31
5		 7,8·103
7,9·103
11 4 3,8·102 34 7,4·103
15 4 7,2·102 18 7,2·103
17 4 6,3·102 23 7,9·103
После обработки раствором моющего средства на основе пробиотиков общая численность микроорганизмов увеличилась и достигла до 10000 микробных тел в 1 см2, которая состояла из спор бактерий рода Bacillus, а количество тест-микроорганизма резко снижалось. Как следует из полученных данных, при отборе смывов через 4 часа (Таблицы 2-4) обсемененность поверхностей тест-микроорганизмами начинает снижаться уже в 1-е сутки после начала использования средства и через 10 суток на поверхностях остаются единичные тест-микробы. При отборе смывов через 24 часа S.aureus и P.aeruginosa не обнаруживались на опытных поверхностях уже через 3-4 суток, на контрольных поверхностях КОЕ/см2 для S.aureus через трое суток составляло 2,9·102, а для P.aeruginosa – 82, для C.albicans - 98. Культура E.coli через 24 часа не была выявлена как в смывах с опытных поверхностей, так и в смывах с контрольных поверхностей. Общее микробное число на опытных поверхностях, складывающееся из споровой микрофлоры пробиотика и тест-культуры, колебалось в пределах от 102 до 104 КОЕ/см2.
Фиг. 1. Динамика обсемененности S.aureus и общего микробного числа на поверхностях.
Фиг. 2. Динамика обсемененности S.aureus и общее микробное число на поверхностях.
Таким образом, проведенные исследования показали, что применение для мытья поверхностей моющего средства на основе спорообразующих бактерий рода Bacillus приводит к значительному снижению обсемененности поверхностей тест-микроорганизмами.

Claims (1)

  1. Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков, включающий два этапа, заключающийся в том, что на первом этапе тест-поверхность, контаминированную тест-микроорганизмом, после подсушивания обрабатывают раствором моющего средства на основе пробиотиков, через определенные промежутки времени с поверхности берут смывы, осуществляют посевы на твердые питательные среды и определяют время воздействия, за которое обсемененность поверхности тест-микроорганизмом снижается не менее чем на 90%, затем на втором этапе тест-поверхности ежедневно в течение не менее 14 дней контаминируют тест-микроорганизмом, при этом в первый день наносят суспензию тест-микроорганизма, содержащую 2×109 КОЕ/мл, далее ежедневно на поверхности наносят суспензию тест-микроорганизма, содержащую 106 КОЕ/мл, после полного высыхания обрабатывают раствором моющего средства на основе пробиотиков, затем, по истечении времени воздействия, определенного на первом этапе, на тест-поверхностях определяют обсемененность тест-микроорганизмом и сравнивают результаты с данными, полученными с аналогично контаминированной контрольной поверхностью, обработанной стерильной водой, по результатам сравнения выносят суждение об эффективности моющего средства на основе пробиотиков при снижении обсемененности тест-микроорганизмом не менее чем на 99,99 % через 5-7 дней от начала обработки поверхностей.
RU2020115275A 2020-04-30 2020-04-30 Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков RU2738480C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020115275A RU2738480C1 (ru) 2020-04-30 2020-04-30 Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020115275A RU2738480C1 (ru) 2020-04-30 2020-04-30 Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2738480C1 true RU2738480C1 (ru) 2020-12-14

Family

ID=73835173

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020115275A RU2738480C1 (ru) 2020-04-30 2020-04-30 Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2738480C1 (ru)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2171118C2 (ru) * 1999-07-22 2001-07-27 Калужское опытно-конструкторское бюро Научно-производственного объединения им. С.А.Лавочкина Способ дезинфекции помещений
RU2435864C1 (ru) * 2010-08-17 2011-12-10 Федеральное Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Саратовский Государственный Аграрный Университет Имени Н.И. Вавилова" Способ пробиотической обработки клеток с содержащимися в них мелкими непродуктивными животными в условиях ветеринарного госпиталя
RU2679845C2 (ru) * 2017-03-30 2019-02-13 Виталий Александрович Гройсман Способ биологической дезинфицирующей пробиотической очистки и обеззараживания от патогенов бактерий и вирусов помещений медицинских учреждений

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2171118C2 (ru) * 1999-07-22 2001-07-27 Калужское опытно-конструкторское бюро Научно-производственного объединения им. С.А.Лавочкина Способ дезинфекции помещений
RU2435864C1 (ru) * 2010-08-17 2011-12-10 Федеральное Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Саратовский Государственный Аграрный Университет Имени Н.И. Вавилова" Способ пробиотической обработки клеток с содержащимися в них мелкими непродуктивными животными в условиях ветеринарного госпиталя
RU2679845C2 (ru) * 2017-03-30 2019-02-13 Виталий Александрович Гройсман Способ биологической дезинфицирующей пробиотической очистки и обеззараживания от патогенов бактерий и вирусов помещений медицинских учреждений

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Fredell Biological properties and applications of cationic surfactants
US5863882A (en) Cleaner and sanitizer formulation
US20120189493A1 (en) Anti-microbial systems and methods
CA2884060C (en) A prolonged disinfectant composition for non-biological surfaces comprising silver ion water and aloe vera
Gregory et al. The mycobactericidal efficacy of ortho-phthalaldehyde and the comparative resistances of Mycobacterium bovis, Mycobacterium terrae, and Mycobacterium chelonae
US20200128822A1 (en) Hyperprotonation Compositions And Methods Of Use For Cleaning, Disinfection, And Sterilization
RU2738480C1 (ru) Способ определения эффективности моющих средств на основе пробиотиков
Suwa et al. Efficacy of disinfectants against naturally occurring and artificially cultivated bacteria
Wichelhaus et al. Effective disinfection of orthodontic pliers
CA2298982A1 (en) Disinfectant composition
Chinedu et al. Comparative studies of the efficacy of some disinfectants on human pathogens
Enitan et al. Assessment of the microbiological quality and efficacy of two common disinfectants used in hospital laboratory
US11425911B2 (en) Method for disinfection of items and spaces
Lind et al. A carrier method for the assessment of the effectiveness of disinfectants against Mycobacterium tuberculosis
Sondawale et al. Evaluation and Comparison of Disinfectant Activity of Some Commercial Brands by Using Standard Methods
Oliveira et al. Disinfectant use in the hospital environment for microorganisms control
RU2807338C1 (ru) Способ оценки антимикробного пролонгированного действия дезинфектантов на основе полимеров
Capla et al. Sanitation process optimalization in relation to the microbial biofilm of Pseudomonas fluorescens
Eissa et al. Study of antimicrobial power of amphoteric disinfectants of Tego series used in pharmaceutical industry
MOHIELDIN et al. Efficacy assessment for disinfection process in Buraidah Maternity Hospital–Saudi Arabia
Singh et al. Comparative efficacy of disinfectant against routine lab bacterial contaminants
Devleeschouwer et al. An in vitro test for the evaluation of the efficacy of disinfectants
Obi et al. Antimicrobial activities of some household Disinfectants on selected human pathogens in Umuahia, Abia state, Nigeria
Malveaux et al. Relative effectiveness of certain chemosterilizers on selected microbial species
Styaningsih et al. Effectiveness of Disinfectant A and B on the Growth of Bacteria in the Area of Central Surgical Installation of Hospital X in Kudus City.