RU2736975C1

RU2736975C1 - Ингибитор вируса гепатита В (ВГВ)

Info

Publication number: RU2736975C1
Application number: RU2019132679A
Authority: RU
Inventors: Андрей Александрович Иващенко; Александр Васильевич Иващенко; Николай Филиппович Савчук; Олег Дмитриевич Митькин; Дмитрий Владимирович Кравченко; Сергей Николаевич Коваленко; Наталья Дмитриевна Бунятян
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "Научно-исследовательский институт ХимРар", (ООО "НИИ ХимРар")
Priority date: 2019-10-15
Filing date: 2019-10-15
Publication date: 2020-11-23

Abstract

Изобретение относится к производным 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида общей формулы 1, обладающим свойствами ингибитора вируса гепатита В (ВГВ, HBV), способу их получения, фармацевтической композиции на их основе и их применению для получения лекарственного средства для лечения гепатита В. В общей формуле 1 R1 представляет собой С1-С4 алкил, R2 представляет собой водород, С1-С4 алкил, или R3 представляет собой водород, и R4 представляет собой С5 алкил, 4-изопропилбензил, фенил, замещенный 1-2 заместителями, выбранными из F, Cl, Br, метила, изопропила, метокси и COOCH3. 6 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 табл., 29 пр.

Description

Настоящее изобретение относится к ингибиторам вируса гепатита В (ВГВ, HBV) в качестве химиотерапевтических средств для лечения ВГВ.

Гепатит В - это инфекционное воспалительное заболевание печени, возникающее вследствие внедрения в организм ВГВ из семейства гепаднавирусов (ДНК-содержащие вирусы). ВГВ обладает устойчивостью к физическим и химическим влияниям, (например. ВГВ не погибает в замороженном состоянии около 20 лет, в холодильнике - 6 лет, а при комнатной температуре - около 3 месяцев). Он уничтожается при кипячении длительностью 30 минут, а при автоклавировании - через 5 минут [http://medbe.ru].

Гепатит В представляет серьезную глобальную проблему здравоохранения. Он может вызывать как острые, так и хронические заболевания и подвергать людей высокому риску смерти от цирроза и рака печени. Лечение острого и хронического гепатита В является одной из основных проблем здравоохранения. Острый гепатит В характеризуется неблагоприятным клиническим течением - в условиях стандартной терапии 1% случаев заканчивается летально, в 10% случаев заболевание переходит в хронический гепатит. Развившийся хронический гепатит приводит, в свою очередь, к циррозу и первичному раку печени.

Россия относится к странам со средней степенью распространенности ВГВ. В 2016 году смертность от вирусных гепатитов составила около 1,4 млн человек [http://www.vector.nsc.ru/virusnyie-gepatity/]. Важно отметить, что 98% смертей обусловлены развитием конечных стадий хронических гепатитов В (ХГВ) и С (ХГС). Для решения проблемы мировой эпидемии хронического гепатита В необходим постоянный поиск новых препаратов для лечения гепатита В.

Основные усилия в последние 10 лет были направлены на профилактику гепатита В путем внедрения повсеместной вакцинации. С 1982 года доступна вакцина против гепатита В. Эта вакцина эффективна в предотвращении инфекции и ее хронических последствий на 95%. Однако предотвращение инфекции не решает вопрос необходимости лечения как минимум 3 млн. больных хроническим гепатитом В в России и еще порядка 240-350 млн. в мире. Таким образом, хронический гепатит В продолжает оставаться глобальной проблемой.

В настоящее время для лечения ХГВ применяются иммуномодуляторы (препараты интерферона - интерферон альфа-2а, пэгилированный интерферон альфа-2а) или нуклеозидные и нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (АН). Оба метода имеют свои преимущества и недостатки. К преимуществам терапии интерфероном можно отнести отсутствие генотипической резистентности вируса, а к недостаткам широкий спектр противопоказаний (например, декомпенсированный цирроз печени), широкий спектр побочных эффектов, включая слабость, гриппоподобные симптомы, депрессию, подавление функций костного мозга, обострение аутоиммунных заболеваний, а также неудобство использования (часто препарат вводится подкожно) [https://ru.wikipedia.org/]. У большинства людей терапия не излечивает инфекцию ВГВ, а только подавляет репликацию вируса. Поэтому лечение ВГВ должно продолжаться в течение всей жизни [http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs204/en/].

Терапия аналогами нуклеотидов или нуклеозидов демонстрирует выраженное противовирусное действие, имеет удобный режим дозирования (перорально), сравнительно редкие побочные реакции. В настоящее время одобрено 5 препаратов - аналогов нуклеотидов или нуклеозидов для лечения ХГВ: ламивудин (аналог цитидина), энтекавир (нуклеозидный аналог гуанозина), телбивудин (нуклеозидный аналог тимидина), тенофовир (нуклеотидный аналог аденина), адефовир (нуклеозидный аналог аденина) [http://infectious.ru/docs/rekomendacii_gepatit_b.pdf]. Механизм действия указанных препаратов связан с ингибированием обратной транскрипции РНК вируса гепатита В в одноцепочечную ДНК. В целом, аналоги нуклеотидов или нуклеозидов хорошо переносятся пациентами, не вызывая значительных побочных эффектов. Однако, в некоторых случаях наблюдается лактатный ацидоз и нефротоксичность. Нуклеозиды ламивудин, телбивудин и нуклеотид адефовир морально устарели и не рекомендуются ввиду низкого порога резистентности и возможности формирования перекрестной резистентности вируса к энтекавиру и препаратам тенофовира соответственно. Прием энтекавира противопоказан при беременности; а тенофовир обладает нефротоксичностью [http://kna-s31.edu.27.ru/files/documents/898_gepatit_v.docx].

Основной проблемой терапии ХГВ с помощью АН является возникающая устойчивость ВГВ к препаратам. В гене обратной транскриптазы вируса происходят мутации, которые предотвращают связывание препаратов с ферментом в активном сайте. При отмене терапии наблюдается быстрый рецидив заболевания, что не позволяет спрогнозировать сроки лечения.

Ни один из известных препаратов не способен полностью очистить организм пациента от ВГВ. Они могут только остановить размножение вируса, тем самым минимизируя повреждение печени. Поэтому актуальной задачей в терапии ХГВ является разработка новых перспективных препаратов, способных воздействовать на жизненный цикл вируса в организме, которые могут быть использованы в комбинации с иммуномодулирующими агентами, что, в конечном итоге, должно привести к полной элиминации вируса из организма, недостижимой в настоящий момент.

Ниже приведены определения терминов, которые использованы в описании этого изобретения.

Термин «алкил», используемый здесь, относится к насыщенным с линейной или разветвленной цепью углеводородным радикалам, содержащим от одного до шести атомов углерода. Примеры алкильных радикалов C₁-С₆, включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил и трет-бутил.

«Арил» означает ароматическую моноциклическую или полициклическую систему, включающую от 6 до 14 атомов углерода, преимущественно от 6 до 10 атомов углерода. Арил может содержать один или более «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными.

«Галоген» означает фтор, хлор, бром и иод. Предпочтительными являются фтор, хлор и бром.

«Алкокси группа» означает группу -O-R, например, -О-СН₃.

«Карбоксил» означает группу -СО₂Н или -CO₂R.

«Карбамоил» означает группу-CONR.

«N-карбоксамид» означает группу -NCOR.

«N-сульфонамид» означает группу -NSO₂R.

Термин «необязательно замещенный» означает, что упомянутая группа может быть замещена в одном или более положениях любым одним или любой комбинацией радикалов.

Термин «кристаллическая форма» означает структуру вещества, характеризующуюся упаковкой образующих ее молекул в один из видов кристаллической решетки.

Термин «поликристаллическая форма» означает структуру вещества, имеющую поликристаллическое строение, т.е. состоящую из множества мелких монокристаллов, т.е. кристаллитов определенной кристаллической формы.

Термин «активный компонент» (лекарственное вещество) относится к физиологически активному веществу синтетического или иного (биотехнологического, растительного, животного, бактериального и так далее) происхождения, обладающему фармакологической активностью, которое является активным ингредиентом фармацевтической композиции.

«Лекарственное начало» (лекарственная субстанция лекарственное вещество, drug-substance) означает физиологически активное вещество синтетического или иного (биотехнологического, растительного, животного, микробного и прочего) происхождения, обладающее фармакологической активностью и являющееся активным началом фармацевтической композиции, используемой для производства и изготовления лекарственного препарата (средства).

«Лекарственное средство (препарат)» означает вещество (или смесь веществ в виде фармацевтической композиции), в виде таблеток капсул инъекций, мазей и др. готовых форм предназначенное для восстановления, исправления или изменения физиологических функций у человека и животных, а также для лечения и профилактики болезней, диагностики, анестезии, контрацепции, косметологии и прочего.

«Фармацевтическая композиция» означает композицию, включающую в себя соединение формулы 1 и, по крайней мере, один из компонентов, выбранных из группы, фармацевтически приемлемых и фармакологически совместимых наполнителей, растворителей, разбавителей, носителей, вспомогательных, распределяющих и воспринимающих средств, средств доставки, таких как консерванты, стабилизаторы, наполнители, измельчители, увлажнители, эмульгаторы, суспендирующие агенты, загустители, подсластители, отдушки, ароматизаторы, антибактериальные агенты, фунгициды, лубриканты, регуляторы пролонгированной доставки, выбор и соотношение которых зависит от природы и способа назначения и дозировки. Примерами суспендирующих агентов являются этоксилированный изостеариловый спирт, полиоксиэтилен, сорбитол и сорбитовый эфир, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, а также смеси этих веществ. Защита от действия микроорганизмов может быть обеспечена с помощью разнообразных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, таких как, парабены, хлорбутанол, сорбиновая кислота и подобные им соединения. Композиция может включать также изотонические агенты, например, сахара, хлористый натрий и им подобные. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например, моностеарат алюминия и желатин. Примерами подходящих носителей, растворителей, разбавителей и средств доставки являются вода, этанол, полиспирты, а также их смеси, растительные масла (такие, как оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (такие, как этилолеат). Примерами наполнителей являются лактоза, молочный сахар, цитрат натрия, карбонат кальция, фосфат кальция и им подобные. Примерами измельчителей и распределяющих средств являются крахмал, алгиновая кислота и ее соли, силикаты. Примерами лубрикантов являются стеарат магния, лаурилсульфат натрия, тальк, а также полиэтиленгликоль с высоким молекулярным весом. Фармацевтическая композиция для перорального, сублингвального, трансдермального, внутримышечного, внутривенного, подкожного, местного или ректального введения активного начала, одного или в комбинации с другим активным началом, может быть введена животным и людям в стандартной форме введения, в виде смеси с традиционными фармацевтическими носителями. Пригодные стандартные формы введения включают пероральные формы, такие как таблетки, желатиновые капсулы, пилюли, порошки, гранулы, жевательные резинки и пероральные растворы или суспензии, сублингвальные и трансбуккальные формы введения, аэрозоли, имплантаты, местные, трансдермальные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, интраназальные или внутриглазные формы введения и ректальные формы введения.

«Фармацевтически приемлемая соль» означает относительно нетоксичные органические и неорганические соли кислот и оснований, заявленных в настоящем изобретении. Эти соли могут быть получены in situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединений или приготовлены специально. В частности, соли оснований могут быть получены специально, исходя из очищенного свободного основания заявленного соединения и подходящей органической или неорганической кислоты. Примерами полученных таким образом солей являются гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, бисульфаты, фосфаты, нитраты, ацетаты, оксалаты, валериаты, олеаты, пальмитаты, стеараты, лаураты, бораты, бензоаты, лактаты, тозилаты, цитраты, малеаты, фумараты, сукцинаты, тартраты, мезилаты, малонаты, салицилаты, пропионаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, сульфаматы и им подобные [Berge S.M. et al., "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19). Соли заявленных кислот также могут быть специально получены реакцией очищенной кислоты с подходящим основанием, соли натрия, калия, кальция, бария, цинка, магния, лития и алюминия, наиболее желательными из которых являются соли натрия и калия. Подходящими неорганическими основаниями, из которых могут быть получены соли металлов, являются гидроксид, карбонат, бикарбонат и гидрид натрия, гидроксид и бикарбонат калия, поташ, гидроксид лития, гидроксид кальция, гидроксид магния, гидроксид цинка. В качестве органических оснований, из которых могут быть получены соли заявленных кислот, выбраны амины и аминокислоты, обладающие достаточной основностью, чтобы образовать устойчивую соль, и пригодные для использования в медицинских целях. К таким аминам относятся аммиак, метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, диэтиламин, триэтиламин, бензиламин, дибензиламин, дициклогексиламин, пиперазин, этилпиперидин, трис(гидроксиметил)-аминометан и подобные им. Кроме того, для солеобразования могут быть использованы гидроокиси тетраалкиламмония, например, такие как, холин, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний и им подобные. В качестве аминокислот могут быть использованы основные аминокислоты - лизин, орнитин и аргинин.

«Фармацевтически приемлемые эксципиенты» означает применяемые в сфере фармацевтики разбавители, вспомогательные агенты и/или фармацевтические носители.

«Фармацевтические носители» означает носители, которые применяются в сфере фармацевтики для получения распространенных форм, в том числе: в пероральных формах используются связующие вещества, смазывающие агенты, дезинтеграторы, растворители, разбавители, стабилизаторы, суспендирующие агенты, бесцветные агенты, корригенты вкуса; в формах для инъекций используются антисептические агенты, солюбилизаторы, стабилизаторы; в местных формах используются основы, разбавители, смазывающие агенты, антисептические агенты.

Предметом данного изобретения являются новые ингибиторы вируса гепатита В (ВГВ, HBV) в качестве химиотерапевтических средств для лечения ВГВ, представляющие собой производные 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида общей формулы 1, где R₁ представляет собой водород, алкил или арил, R₂ представляет собой водород, алкил, арил, карбоксил или карбамоил, R₁-C=C-R₂ может быть циклоалкил, R₃, R₄ представляют собой водород, алкил, арил, необязательно одинаковые, а также R₃-N-R₄ могут быть циклические заместители, содержащие атомы азота, кислорода или серы, например, пирролидинил, пиперидил, пиперазинил, возможно содержащие алкильные, арильные заместители или сложноэфирную или амидную группы.

Согласно данному изобретению предпочтительными ингибиторами ВГВ общей формулы 1 являются соединения формул 1.1-1.18:

N-(4-бром-2-метилфенил)-4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.1;

4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-изопропилбензил)тиофен-2-сульфонамид 1.2;

N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.3;

4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.4;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-изопропилфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.5;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.6;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.7;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-фтор-4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.8;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,4-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.9;

4-(4-трет-6утил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-этоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.10;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметилфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.11;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-изопентилтиофен-2-сульфонамид 1.12;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3,4-дифторфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.13;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-фтор-3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.14;

4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-метоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.15;

N-(4-бром-3-метилфенил)-4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.16;

N-(4-изопропилфенил)-4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.17;

метиловый эфир 4-[4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамидо]бензойной кислоты 1.18.

Более предпочтительными ингибиторами ВГВ общей формулы 1 являются N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.3, 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.4, 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.6, 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.7, выбранные из ряда соединений 1.1-1.18 и их гидратов и/или сольват

4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамиды 1 подпадают под общую формулу соединений, уменьшающих уровень активности HSF1, что может быть полезно для лечения нейродегенератвных заболеваний [WO 2016022538 A1, Duke University, (US), 11.02.2016, US 20170227553 A1, Duke University, (US), 10.08.2017].

Однако в научной и патентной литературе отсутствуют данные о биологической активности 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамидов 1 в отношении ВГВ инфекции. Отсутствуют источники, в которых соединения общей формулы 1 были бы описаны в качестве лекарственного средства для лечения вирусного гепатита. Авторы неожиданно выявили и патентуют их новое свойство, а именно, способность ингибировать вирус гепатита В (ВГВ, HBV), что является техническим решением в качестве предмета «применение продукта или способа по определенному (новому) назначению», а именно, в качестве лекарственного средства для лечения вирусного гепатита В, и таким образом 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамиды общей формулы 1 обладают новизной и изобретательским уровнем.

Способ получения 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамидов 1.1-1.18 представлен на схеме 1. Он заключается в конденсации тиофен-3-карботиоамида 2 с α-галогенкарбонильными соединениями 3.1-3.5, ведущей к образованию 2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазолов 4.1-4.5. Последующая обработка продуктов 4.1-4.5 ClSO₃H приводит к 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфохлоридам 5.1-5.5, взаимодействие которых с аминами 6.1-6.18 дает заявляемые 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамиды 1.1-1.18.

Схема 1. Получение 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамидов 1.1-1.18.

Согласно данному изобретению новый ингибитор ВГВ общей формулы 1, его гидрат и/или сольват представляет собой лекарственное начало для приготовления фармацевтической композиции и готовой лекарственной формы для профилактики и лечения инфекции ВГВ у теплокровных животных и людей.

Предметом настоящего изобретения является активный компонент, обладающий свойством ингибитора ВГВ, представляющий собой 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид общей формулы 1.

Предпочтительно активный компонент представляет собой N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.3 или 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.4 или 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.6 или 4-(4-трет-6утил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.7 в терапевтически эффективном количестве.

Предметом настоящего изобретения является способ профилактики и лечения гепатита В и/или других вирусных инфекций посредством введения в эффективном количестве соединения общей формулы 1 или фармацевтической композиции нуждающемуся в этом реципиенту.

Предметом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для лечения инфекции гепатита В, включающая в свой состав ингибитор ВГВ общей формулы 1, его гидрат и/или сольват в терапевтически эффективном количестве. Фармацевтическая композиция наряду с ингибитором общей формулы 1 или его гидратом и/или сольватом по настоящему изобретению может включать и другие активные субстанции, при условии, что они не вызывают нежелательных эффектов.

Предпочтительно предметом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция в которой соединение общей формулы 1 содержится в количестве от 1 до 1000 мг.

Предметом настоящего изобретения является способ получения фармацевтической композиции смешением с инертным наполнителем и/или растворителем, по крайней мере, одного ингибитора ВГВ общей формулы 1 или его гидрата и/или сольвата в терапевтически эффективном количестве.

Предметом настоящего изобретения являются также терапевтические коктейли для лечения инфекции ВГВ, включающие в качестве одного из компонентов новое лекарственное средство общей формулы 1, его гидрат и/или сольват или новую фармацевтическую композицию, содержащую в качестве активного компонента по крайней мере один ингибитор ВГВ общей формулы 1 или его гидрат и/или сольват.

Терапевтический коктейль для лечения инфекции ВГВ, наряду с фармацевтической композицией по данному изобретению, может включать другие известные препараты, предназначенные для лечения ВГВ, ВГС, ВИЧ или препараты, усиливающие иммунную систему пациента.

Настоящее изобретение далее будет описано в связи с определенными вариантами осуществления, которые не предназначены для ограничения его объема. Напротив, настоящее изобретение охватывает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем формулы изобретения. Таким образом, следующие примеры, которые включают в себя конкретные варианты, иллюстрируют, но не ограничивают настоящее изобретение.

Пример 1. Синтез 4,5-диметил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.1.

Раствор тиофен-3-карботиоамида 2 (14,3 г, 0,1 моль), 3-бром-2-бутанона 3.1 (15,1 г, 0,1 моль) и триэтиламина (10,1 г, 0,1 моль) в этаноле (100 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения смесь выливали в воду (500 мл). Образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали водой (50 мл), сушили и перекристаллизовывали из EtOH (50 мл). Получали 15,6 г (80%) 4,5-диметил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.1.

Пример 2. Синтез 4-изопропил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.2.

Аналогично примеру 1 из тиофен-3-карботиоамида 2 (14,3 г, 0,1 моль) и 1-бром-3-метилбутан-2-она 3.2 (16,5 г, 0,1 моль) получали 17,6 г (84%) 4-изопропил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.2.

Пример 3. Синтез 4-изобутил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.3.

Аналогично примеру 1 из тиофен-3-карботиоамида 2 (14,3 г, 0,1 моль) и 1-бром-4-метилпентан-2-она 3.3 (17,9 г, 0,1 моль) получали 18,5 г (83%) 4-изобутил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.3.

Пример 4. Синтез 4-трет-бутил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.4.

Аналогично примеру 1 из тиофен-3-карботиоамида 2 (14,3 г, 0,1 моль) и 1-бром-3,3-диметилбутан-2-она 3.4 (17,9 г, 0,1 моль) получали 18,1 г (81%) 4-трет-бутил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.4.

Пример 5. Синтез 4-метил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.5.

Аналогично примеру 1 из тиофен-3-карботиоамида 2 (14,3 г, 0,1 моль) и хлорацетона 3,5 (9,25 г, 0,1 моль) получали 14,5 г (80%) 4-метил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.5.

Пример 6. Синтез 4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.1.

К охлажденной до 0°С хлорсульфоновой кислоте (58,2 г, 0,5 моль) при интенсивном перемешивании прибавляли по порциям 4,5-диметил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазол 4.1 (15,6 г, 0,08 моль) при 0-5°С. Затем реакционную массу нагревали до 60°С и выдерживали при этой температуре в течение 1 часа. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь выливали в смесь льда и воды (500 мл). Образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали водой и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, используя хлороформ в качестве элюента. Получали 14,6 г (62%) 4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.1.

Пример 7. Синтез 4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.2.

Аналогично примеру 6 из 4-изопропил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.2 (16,7 г, 0,08 моль) получали 14,8 г (60%) 4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.2.

Пример 8. Синтез 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.3.

Аналогично примеру 6 из 4-изобутил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.3 (17,8 г, 0,08 моль) получали 15,7 г (61%) 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.3.

Пример 9. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4.

Аналогично примеру 6 из 4-трет-бутил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.4 (17,8 г, 0,08 моль) получали 16,2 г (63%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4.

Пример 10. Синтез 4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.5.

Аналогично примеру 6 из 4-метил-2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазола 4.5 (14,5 г, 0,08 моль) получали 14,3 г (64%) 4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.5.

Пример 11. Синтез N-(4-бром-2-метилфенил)-4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.1.

К раствору 4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.1 (0,294 г, 1 ммоль) в диоксане (5 мл) при комнатной температуре добавляли 4-бром-2-метиланилин 6.1 (0,195 г, 1,05 ммоль) и триэтиламин (0,11 г, 1,1 ммоль). Реакционную массу перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, затем разбавляли водой (30 мл). Образовавшийся осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из изопропанола (10 мл). Получали 0,333 г (75%) N-(4-бром-2-метилфенил)-4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.1. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 9,90 (с, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,34 (с, 1Н), 7,13 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,00 (д, J=7,5 Гц, 1H), 2,36 (с, 3Н), 2,28 (с, 3Н), 2,03 (с, 3Н).

Пример 12. Синтез 4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-изопропилбензил)тиофен-2-сульфонамида 1.2.

Аналогично примеру 11 из 4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.1 (0,294 г, 1 ммоль) и 4-изопропилбензиламина 6.2 (0,156 г, 1,05 ммоль) получали 0,386 г (95%) 4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-изопропилбензил)тиофен-2-сульфонамида 1.2. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 8,25 (ш, 1H), 8,11 (с, 1Н), 7,77 (с, 1H), 7,17 (д, J=7,4 Гц, 2Н), 7,10 (д, J=7,4 Гц, 2Н), 4,07 (с, 2Н), 2,81 (сп, J=7,0 Гц, 1H), 2,36 (с, 3Н), 2,28 (с, 3Н), 1,18 (д, J=7,0 Гц, 6Н).

Пример 13. Синтез N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.3.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.2 (0,308 г, 1 ммоль) и 4-бром-2-фторанилина 6.3 (0,20 г, 1,05 ммоль) получали 0,323 г (70%) N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.3. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,52 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,44 (дд, J₁=8,6 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,35 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,28 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,19 (с, 1H), 3,08 (сп, J=7,0 Гц, 1H), 1,30 (д, J=7,0 Гц, 6Н).

Пример 14. Синтез 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.4.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.3 (0,322 г, 1 ммоль) и 3-хлоранилина 6.4 (0,134 г, 1,05 ммоль) получали 0,322 г (78%) 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.4. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,70 (с, 1H), 8,26 (с, 1H), 7,88 (с, 1Н), 7,28 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 7,21-7,05 (м, 4Н), 2,63 (д, J=7,0 Гц, 2Н), 2,05 (сп, J=7,0 Гц, 1H), 0,99 (д, J=7,0 Гц, 6Н).

Пример 15. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-изопропилфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.5.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 2-изопропиланилина 6.5 (0,142 г, 1,05 ммоль) получали 0,294 г (70%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-изопропилфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.5. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 9,84 (с, 1H), 8,23 (с, 1H), 7,71 (с, 1Н), 7,27 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,21-7,14 (м, 2Н), 7,06 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 6,97 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 3,31 (сп, J=7,0 Гц, 1H), 1,33 (с, 9Н), 1,07 (д, J=7,0 Гц, 6Н).

Пример 16. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.6.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 4-хлоранилина 6.6 (0,134 г, 1,05 ммоль) получали 0,33 г (80%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.6. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,55 (с, 1Н), 8,25 (с, 1H), 7,85 (с, 1H), 7,29 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 7,21-7,14 (м, 3Н), 1,33 (с, 9Н).

Пример 17. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)-тиофен-2-сульфонамида 1.7.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 2,5-диметоксианилина 6.7 (0,161 г, 1,05 ммоль) получали 0,316 г (72%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)-тиофен-2-сульфонамида 1.7. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 9,73 (с, 1H), 8,22 (с, 1H), 7,85 (с, 1H), 7,17 (с, 1H), 6,90 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 6,84 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,69 (дд, J₁=7,6 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 3,70 (с, 3Н), 3,58 (с, 3Н), 1,33 (с, 9Н).

Пример 18. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-фтор-4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.8.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 2-фтор-4-хлоранилина 6.8 (0,153 г, 1,05 ммоль) получали 0,306 г (71%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-фтор-4-хлорфенил)-тиофен-2-сульфонамида 1.8. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,55 (с, 1H), 8,28 (с, 1Н), 7,83 (с, 1Н), 7,39-7,16 (м, 4Н), 1,33 (с, 9Н).

Пример 19. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,4-диметоксифенил)-тиофен-2-сульфонамида 1.9.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 2,4-диметоксианилина 6.9 (0,161 г, 1,05 ммоль) получали 0,32 г (73%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,4-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамида 1.9. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 9,48 (с, 1H), 8,20 (с, 1Н), 7,74 (с, 1H), 7,17 (с, 1H), 7,13 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,49-6,42 (м, 2Н), 3,74 (с, 3Н), 3,52 (с, 3Н), 1,33 (с, 9Н).

Пример 20. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-этоксифенил)тиофен-2-сульфонамида 1.10.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 4-этоксианилина 6.10 (0,144 г, 1,05 ммоль) получали 0,342 г (81%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-этоксифенил)тиофен-2-сульфонамида 1.10. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 9,98 (с, 1H), 8,20 (с, 1Н), 7,76 (с, 1Н), 7,15 (с, 1H), 7,04 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 6,77 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 3,96 (кв, J=7,0 Гц, 2Н), 1,36-1,25 (м, 12Н).

Пример 21. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметилфенил)-тиофен-2-сульфонамида 1.11.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 2,5-диметиланилина 6.11 (0,127 г, 1,05 ммоль) получали 0,297 г (73%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметилфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.11. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 9,70 (с, 1H), 8,25 (с, 1H), 7,70 (с, 1Н), 7,15 (с, 1Н), 7,03 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,94 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 6,86 (с, 1H), 2,24 (с, 3Н), 2,06 (с, 3Н), 1,33 (с, 9Н).

Пример 22. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-изопентилтиофен-2-сульфонамида 1.12.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 3-метилбутан-1-амина 6.12 (0,096 г, 1,1 ммоль) получали 0,343 г (92%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-изопентилтиофен-2-сульфонамида 1.12. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 8,25 (с, 1Н), 7,88 (с, 1Н), 7,78 (т, J=7,0 Гц, 1Н), 7,17 (с, 1Н), 2,86 (кв, J=7,0 Гц, 2Н), 1,64 (сп, J=7,0 Гц, 1Н), 1,40-1,25 (м, 11Н), 0,85 (д, J=7,0 Гц, 6Н).

Пример 23. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3,4-дифторфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.13.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 3,4-дифторанилина 6.13 (0,135 г, 1,05 ммоль) получали 0,319 г (77%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3,4-дифторфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.13. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,60 (с, 1H), 8,27 (с, 1Н), 7,87 (с, 1Н), 7,28 (кв, J=7,8 Гц, 1Н), 7,18 (с, 1H), 7,15-7,10 (м, 1H), 7,01-6,94 (м, 1H), 1,33 (с, 9Н).

Пример 24. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-фтор-3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамида 1.14.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 2-фтор-3-хлоранилина 6.14 (0,153 г, 1,05 ммоль) получали 0,302 г (70%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-фтор-3-хлорфенил)-тиофен-2-сульфонамида 1.14. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,62 (с, 1H), 8,29 (с, 1Н), 7,85 (с, 1Н), 7,38-7,12 (м, 4Н), 1,33 (с, 9Н).

Пример 25. Синтез 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-метоксифенил)тиофен-2-сульфонамида 1.15.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.4 (0,322 г, 1 ммоль) и 2-метоксианилина 6.15 (0,13 г, 1,05 ммоль) получали 0,286 г (70%) 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2-метоксифенил)тиофен-2-сульфонамида 1.15. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 9,68 (с, 1H), 8,20 (с, 1H), 7,79 (с, 1H), 7,30 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,18-7,12 (м, 2Н), 6,94-6,88 (м, 2Н), 3,58 (с, 3Н), 1,33 (с, 9Н).

Пример 26. Синтез N-(4-бром-3-метилфенил)-4-(4,5-диметил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.16.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.5 (0,28 г, 1 ммоль) и 4-бром-3-метиланилина 6.16 (0,195 г, 1,05 ммоль) получали 0,352 г (82%) N-(4-бром-3-метилфенил)-4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.16. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,50 (с, 1H), 8,27 (с, 1H), 7,86 (с, 1H), 7,42 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 7,20 (с, 1H), 7,10 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 6,95 (дд, J₁=7,6 Гц, J₂=2,0 Гц, 1Н), 2,40 (с, 3Н), 2,28 (с, 3Н).

Пример 27. Синтез N-(4-изопропилфенил)-4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.17.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.5 (0,28 г, 1 ммоль) и 4-изопропиланилина 6.17 (0,142 г, 1,05 ммоль) получали 0,284 г (75%) N-(4-изопропилфенил)-4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида 1.17. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,24 (с, 1Н), 8,25 (с, 1H), 7,79 (с, 1Н), 7,20 (с, 1Н), 7,14-7,04 (м, 4Н), 2,82 (сп, J=7,0 Гц, 1Н), 2,38 (с, 3Н), 1,14 (д, J=7,0 Гц, 6Н).

Пример 28. Синтез метилового эфира 4-[4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамидо]бензойной кислоты 1.18.

Аналогично примеру 11 из 4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)-тиофен-2-сульфохлорида 5.5 (0,28 г, 1 ммоль) и метилового эфира 4-аминобензойной кислоты 6.18 (0,159 г, 1,05 ммоль) получали 0,30 г (76%) метилового эфира 4-[4-(4-метил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамидо]бензойной кислоты 1.18. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ: 10,96 (с, 1Н), 8,27 (с, 1Н), 7,93 (с, 1H), 7,86 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 7,29 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 7,17 (с, 1H), 3,79 (с, 3Н), 2,40 (с, 3Н).

Пример 29. Исследование подавления развития ВГВ в культуре гепатомы человека HepG2 и цитотоксического эффекта ингибиторов ВГВ общей формулы 1.

В экспериментальной in vitro модели инфекции вируса гепатита В использовалась линия гепатомы человека HepG2, которая для способности к инфицированию ВГВ и поддержанию полного цикла его репликации in vitro стабильно трансфицирована геном NTCP.

В качестве источника инфекционных вирусных частиц для инфицирования клеточной линии HepG2/NTCP была выбрана клеточная линия гепатомы человека HepAD38, несущая стабильно интегрированный геном вируса ВГВ под контролем тетрациклин-регулируемого промотора, и секретирующая вирусные частицы в культуральную среду в отсутствие терациклина.

Препарат ВГВ получали с использованием линии HepAD38 по следующему протоколу: Клетки HepAD38 пассировали в среде ДМЕМ, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки, пенициллин/стрептомицин и заменимые аминокислоты. Культуральную среду отбирали раз в 2 дня, осветляли центрифугированием (200 g, 15 мин) и хранили при 4°С не дольше 7 дней. Далее к культуральным средам добавляли сухой ПЭГ 8000 до конечной концентрации 7,5%, и инкубировали при 4°С на ротационной платформе в течение ночи. Вирусный преципитат отделяли центрифугированием (2000 g, 30 мин) и осадок суспендировали в 1/100 первоначального объема в среде OPTI-MEM. Полученный таким образом вирусный препарат аликвотировали и хранили при -80°С.

Инфицирование проводили следующим образом: Клеточную суспензию HepG2-NTCP распределяли по 96-луночным планшетам по 2000 клеток на каждую лунку. После прикрепления клеток (в тот же или на следующий день) исходный раствор удаляли аспирацией и к каждой лунке добавляли по 50 мкл раствора тестируемых соединений, растворенных в среде OPTI-MEM (с финальной концентрацией ДМСО 2%), или OPTI-MEM с 2% ДМСО (в лунки положительного и отрицательного контролей инфекции) и по 50 мкл препарата ВГВ, разведенного в среде OPTI-MEM с 2% ДМСО (кроме отрицательного контроля инфекции). После инкубации в течение 24 часов в увлажненной атмосфере, содержащей 5% углекислого газа CO₂, среду с ВГВ удаляли аспирацией и к культурам добавляли 200 мкл культуральной среды ДМЕМ, содержащей соответствующие тестируемые соединения в интересующей концентрации. Клетки инкубировали дополнительно в течение 6 дней при 37°С в увлажненной атмосфере, содержащей 5% углекислого газа CO₂. Далее, клеточные супернатанты (50 мкл) исследовали на содержание вирусного антигена ИФА анализом при помощи коммерческого набора HBeAg ELISA 4.0 (Creative Diagnostics, каталожный номер DEIA003) по протоколу производителя набора и измеряли оптическую плотность каждой анализируемой лунки при длине волны 450 нм, используя планшетный денситометр.

Результаты приведены в Таблице 1. Ингибирование инфекции ВГВ в присутствии соединений общей формулы 1.

Claims

1. Соединение, представляющее собой производное 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамида общей формулы 1

где R₁ представляет собой С1-С4 алкил;

R₂ представляет собой водород, С1-С4 алкил; или

R₃ представляют собой водород, и

R4 представляет собой С5 алкил, 4-изопропилбензил, фенил, замещенный 1-2 заместителями, выбранный из F, Cl, Br, метила, изопропила, метокси и СООСН₃.

2. Соединение по п. 1, обладающее свойствами ингибитора вируса гепатита В (ВГВ, HBV).

3. Соединение по п. 1, представляющее собой N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.3, 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.4, 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.6, 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-2,5-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.7

4. Способ получения 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамидов общей формулы 1, заключающийся в конденсации тиофен-3-карботиоамида 2 с α-галогенкарбонильными соединениями 3.1-3.5, ведущей к образованию 2-(тиофен-3-ил)-1,3-тиазолов 4.1-4.5, последующая обработка продуктов 4.1-4.5 ClSO₃H дает 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфохлориды 5.1-5.5, взаимодействие которых с аминами 6.1-6.18 дает заявляемые 4-(1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамиды, причем Hal означает галоген, R1-R4 имеют значения, указанные в п. 1

5. Соединение общей формулы 1 по п. 1 в качестве активного компонента для фармацевтической композиции, обладающей свойствами ингибитора ВГВ.

6. Соединение по п. 5 в качестве активного компонента для фармацевтической композиции, где соединение представляет собой N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.3 или 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.4, или 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.6, или 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.7.

7. Фармацевтическая композиция, обладающая свойствами ингибитора ВГВ, для применения в лечении инфекции гепатита В, содержащая в терапевтически эффективном количестве соединение общей формулы 1 по п. 1 и фармацевтически приемлемые добавки.

8. Фармацевтическая композиция по п. 7, где соединение общей формулы 1 представляет собой N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.3 или 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.4, или 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.6, или 4-(4-тирет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.7.

9. Фармацевтическая композиция по пп. 7-8, в которой фармацевтически приемлемые добавки выбирают из применяемых в сфере фармацевтики разбавителей, вспомогательных агентов и носителей.

10. Соединение по любому из пп. 1-3 для применения для лечения гепатита В.

11. Соединение по п. 10, в котором соединение общей формулы 1 представляет собой N-(4-бром-2-фторфенил)-4-(4-изопропил-1,3-тиазол-2-ил)тиофен-2-сульфонамид 1.3 или 4-(4-изобутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(3-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.4, или 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(4-хлорфенил)тиофен-2-сульфонамид 1.6, или 4-(4-трет-бутил-1,3-тиазол-2-ил)-N-(2,5-диметоксифенил)тиофен-2-сульфонамид 1.7.

12. Применение соединения общей формулы 1 по пп. 1-3 для получения лекарственного средства для лечения гепатита В.