RU2731287C1

RU2731287C1 - Test tube for cryopreservation of ovary tissue

Info

Publication number: RU2731287C1
Application number: RU2019137614A
Authority: RU
Inventors: Николай Николаевич Рухляда; Татьяна Александровна Либова
Priority date: 2019-11-21
Filing date: 2019-11-21
Publication date: 2020-09-01

Abstract

FIELD: medicine.SUBSTANCE: invention relates to medicine. Test tube for cryopreservation of a tissue of ovaries is offered. Test tube consists of a plastic capsule with a cover. Lid is fitted with a L-shaped needle for fixation of ovarian tissues in a test tube in a suspended state, and a capsule is made in the capsule bottom.EFFECT: invention ensures preservation of viability and structural integrity of ovarian tissue for an unlimited period of time.1 cl, 1 dwg

Description

Изобретение относится к медицине, в частности, к акушерству, гинекологии и онкологии и может применяться для криоконсервации тканей яичника у девочек и женщин репродуктивного возраста.The invention relates to medicine, in particular to obstetrics, gynecology and oncology, and can be used for cryopreservation of ovarian tissue in girls and women of reproductive age.

Известен газонепроницаемый герметичный контейнер для индивидуальных трансплантатов (пат. США №5040677). Этот контейнер требует, чтобы пласт клеток эпителия был прикреплен к липкому субстрату или продублирован с использованием зажимов. Однако этот патент описывает способ криоконсервации для пластов кератиноцитов, который использует криоконсервант из не полностью проникающего в клетки агента.Known gas-tight sealed container for individual grafts (US Pat. US No. 5040677). This container requires a sheet of epithelial cells to be attached to a sticky substrate or duplicated using clamps. However, this patent discloses a cryopreservation method for keratinocyte sheets that uses a cryopreservation agent from an incompletely permeating agent.

Известен контейнер, разработанный для однослойных систем, таких как пласты эпителия (пат. США №5298417).Known is a container designed for single-layer systems such as epithelial layers (US Pat. No. 5,298,417).

Описанные устройства имеют следующие недостатки:The described devices have the following disadvantages:

1. Сложно сохранить при криогенных температурах культивированные эквиваленты тканей, в частности, потому, что они относительно толсты и состоят из гетерогенных слоев клеток.1. It is difficult to maintain cultured tissue equivalents at cryogenic temperatures, in particular because they are relatively thick and consist of heterogeneous cell layers.

2. Они не обеспечивают полное и равномерное проникновение газов в страйп.2. They do not provide complete and uniform penetration of gases into the stripe.

3. Понижение температуры оказывает влияние на взаимодействие между белками и двойным липидным слоем клеточной мембраны, что приводит к нарушению мембранного транспорта и может вызвать гибель клеток.3. Lowering the temperature affects the interaction between proteins and the double lipid layer of the cell membrane, which leads to disruption of membrane transport and can cause cell death.

4. Высокая стоимость (около 800 долларов)4. High cost (about $ 800)

Ближайшим к заявляемому является контейнер для криоконсервации тканей (Пат. RU №2178865) с герметично завинчивающейся крышкой. Внутри контейнера расположена сетка, на которую кладется страйп ткани. Имеется поддон, непосредственно корпуса и крышки контейнера. Ткань укладывается на сетку, далее она погружается в раствор криоконсерванта, который перемешивается. После этого контейнер закрывается.Closest to the claimed is a container for cryopreservation of tissues (US Pat. RU No. 2178865) with a hermetically screwed lid. Inside the container there is a mesh on which the fabric stripe is placed. There is a pallet, directly the body and container lids. The tissue is laid on the mesh, then it is immersed in a cryopreservative solution, which is mixed. The container is then closed.

Недостатком устройства, выбранного в качестве прототипа, является то, что ткань укладывается на поддон, что не может обеспечить полного и равномерного проникновения растворов в ткань. Это также отражается на процессах разморозки ткани, в которой образуются кристаллы, в дальнейшем нарушающие структуру ткани.The disadvantage of the device selected as a prototype is that the fabric is stacked on a pallet, which cannot provide complete and uniform penetration of solutions into the fabric. This also affects the processes of tissue thawing, in which crystals are formed, which further disrupt the tissue structure.

Другим недостатком прототипа является то, что материал не подвешен, а лежит на сетке, в результате вся поверхность страйпа соприкасается с сеткой. Из-за этого газы и растворы не полностью проникают в ткань, что снижает ее выживаемость, и в дальнейшем она становится непригодной для трансплантации.Another disadvantage of the prototype is that the material is not suspended, but lies on the mesh, as a result of which the entire stripe surface is in contact with the mesh. Because of this, gases and solutions do not completely penetrate the tissue, which reduces its survival rate, and subsequently it becomes unsuitable for transplantation.

Задача изобретения - сохранение жизнеспособности и структурной целостности ткани яичников на неограниченный период времени.The objective of the invention is to maintain the viability and structural integrity of ovarian tissue for an unlimited period of time.

Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в пробирке для криоконсервации ткани яичников, состоящей из пластиковой капсулы с крышкой, на крышке закреплена L-образная игла, предназначенная для фиксации тканей яичников в пробирке, а в дне капсулы выполнен кран.The technical result of the task is achieved by the fact that in a test tube for cryopreservation of ovarian tissue, consisting of a plastic capsule with a lid, an L-shaped needle is fixed on the lid, designed to fix ovarian tissue in the test tube, and a tap is made at the bottom of the capsule.

L-образная игла служит для лучшей фиксации материала, минимизации контакта со стенками пробирки, лучшего проникновения кардиоплегического раствора в ткань. Благодаря L-образной форме иглы ткань в пробирке сохраняется в подвешенном состоянии, что позволяет обеспечить свободный доступ к ткани газов и растворов. The L-shaped needle serves for better fixation of the material, minimization of contact with the walls of the tube, and better penetration of the cardioplegic solution into the tissue. Due to the L-shaped shape of the needle, the tissue in the test tube is kept suspended, which allows gases and solutions to be freely accessible to the tissue.

Кран, выполненный в дне капсулы, необходим для удаления кардиоплегического раствора и закачивания инертных газов. При необходимости, вся стандартная смена растворов происходит посредством открывания крана в дне капсулы, а не через крышку с вмонтированной «L» образной иглой. Крышка пробирки закрывается один раз, при помещении страйпа ткани внутрь.The valve, made in the bottom of the capsule, is necessary to remove the cardioplegic solution and pump inert gases. If necessary, the entire standard change of solutions takes place by opening the tap in the bottom of the capsule, and not through the lid with the built-in “L” shaped needle. The cap of the tube is closed once by placing the tissue stripe inside.

Наличие L-образной иглы в крышке дает возможность контролировать скорость охлаждения и замораживания, а также правильно распределять криоконсервант в равном объеме и ниже культивированной ткани, подлежащей криоконсервации. Это способствует меньшему контакту ткани с окружающей средой и большему выживанию ткани.The presence of an L-shaped needle in the lid makes it possible to control the rate of cooling and freezing, as well as to correctly distribute the cryopreservative in an equal volume and below the cultured tissue to be cryopreserved. This promotes less tissue contact with the environment and greater tissue survival.

На рис. 1 показано заявляемое устройство, где 1 - герметично закрывающаяся крышка, 2 - L-образная игла, 3 - пластиковая капсула, 4 - кран.In fig. 1 shows the inventive device, where 1 is a hermetically sealed cover, 2 is an L-shaped needle, 3 is a plastic capsule, 4 is a tap.

Устройство применяется следующим образом. В ходе операции выполняется резекция ткани яичника, открывается крышка 1 капсулы, страйп ткани накалывается на L-образную иглу 2, вмонтированную в крышку 1 капсулы. Далее крышка соединяется с корпусом 3 капсулы. Капсула закрывается один раз. Через кран 4 в дне капсулы последняя заполняется раствором для транспортировки. Через кран 4 в дне капсулы происходит смена раствора и газа внутри пробирки.The device is used as follows. During the operation, the ovarian tissue is resected, the cap of 1 capsule is opened, the stripe of the tissue is pricked onto the L-shaped needle 2, mounted in the cap of 1 of the capsule. Next, the lid is connected to the capsule body 3. The capsule closes once. Through valve 4 at the bottom of the capsule, the latter is filled with a solution for transportation. Through valve 4 at the bottom of the capsule, the solution and gas inside the tube are changed.

Заявляемое устройство сохраняет жизнеспособность и структурную целостность ткани яичников на неограниченный период времени. Оно обеспечивает процесс криоконсервации, включающий замораживание и последующее хранение тканей или клеток при сверхнизких температурах с сохранением их жизнеспособности после размораживания и может широко применяться для сохранения генетического материала.The inventive device maintains the viability and structural integrity of ovarian tissue for an unlimited period of time. It provides a cryopreservation process that includes freezing and subsequent storage of tissues or cells at ultra-low temperatures while maintaining their viability after thawing and can be widely used to preserve genetic material.

Заявляемое устройство является простым, экономически выгодным по сравнению с аналогами. Он позволяет эффективно осуществлять процесс криоконсервации.The claimed device is simple, cost-effective in comparison with analogues. It allows you to effectively carry out the cryopreservation process.

Устройство не требует дорогостоящего оборудования и проведения большого количества лабораторных и инструментальных исследований.The device does not require expensive equipment and a large number of laboratory and instrumental studies.

Применение заявляемого устройства дает возможность не только эффективно осуществлять процесс криоконсервации, но и дальнейшей трансплантации тканей. Оно обеспечивает успешное длительное хранение страйпа ткани, необходимое для дальнейшей трансплантации, полное и равномерное проникновение газов в страйп, высокую выживаемость клеток тканей, имеет низкую стоимость.The use of the proposed device makes it possible not only to effectively carry out the cryopreservation process, but also to further tissue transplantation. It ensures successful long-term storage of the tissue stripe, which is necessary for further transplantation, full and uniform penetration of gases into the stripe, high tissue cell survival, and has a low cost.

Claims

A test tube for cryopreservation of ovarian tissue, consisting of a plastic capsule with a lid, characterized in that an L-shaped needle is attached to the lid, designed to fix ovarian tissues in a test tube in a suspended state, and a tap is made at the bottom of the capsule.