RU2730286C1

RU2730286C1 - Dispiroindolinones based on rhodanines as p53-mdm2 inhibitors of protein-protein interaction

Info

Publication number: RU2730286C1
Application number: RU2019116999A
Authority: RU
Inventors: Анастасия Александровна Белоглазкина; Александр Георгиевич Мажуга; Елена Кимовна Белоглазкина; София Романовна Мефедова; Никита Александрович Карпов
Priority date: 2019-05-31
Filing date: 2019-05-31
Publication date: 2020-08-21

Abstract

FIELD: chemistry.

SUBSTANCE: invention relates to compounds of formula 1, where R₁ is selected from group comprising 4-ethoxyphenyl, 4-chlorophenyl, 4-bromophenyl; R₂ is selected from a group comprising phenyl, 4-ethoxyphenyl, 2-chlorophenyl, 3-chlorophenyl, 4-chlorophenyl, 4-ethylphenyl, 3,4-dimethoxyphenyl, 4-methoxyphenyl, 4-fluorophenyl, 2-methylphenyl; R₃ is selected from a group comprising a chlorine, bromine or hydrogen atom; R₄ represents a hydrogen atom or propargyl HC≡C-CH₂-. Invention also relates to a method of producing compounds of formula 1, use as protein-protein interaction inhibitor MDM2/p53, pharmaceutical composition and a medicinal agent for treating oncological disease associated with protein-protein interaction MDM2/p53 and inhibition method.

EFFECT: technical result is compounds of formula 1 as inhibitors of protein-protein interaction MDM2/p53.

7 cl, 1 tbl, 33 ex

Description

Область техникиTechnology area

Настоящее изобретение относится к области органической и медицинской химии, а также молекулярной биологии и касается новых соединений биологически активных веществ с улучшенными значениями цитотоксичности, которые являются ингибиторами белок-белкового взаимодействия MDM2/p53 и способа их получения, которые могут быть использованы в качестве активных компонентов для фармацевтических композиций и лекарственных средств для лечения онкологических заболеваний.The present invention relates to the field of organic and medicinal chemistry, as well as molecular biology and relates to new compounds of biologically active substances with improved values of cytotoxicity, which are inhibitors of protein-protein interactions MDM2 / p53 and a method for their preparation, which can be used as active components for pharmaceutical compositions and drugs for the treatment of cancer.

Уровень техникиState of the art

Последние несколько лет наблюдается повышенный интерес к поиску непептидных низкомолекулярных соединений способных препятствовать взаимодействию клеточных белков p53-MDM2. Белок р53 является опухолевым супрессором, играющим важную роль в жизненном цикле клетки и апоптозе, a MDM2 - его эндогенный ингибитор [Wu X., Bayle J.Н., Olson D., Levine A.J., Genes DeV., 1993, 7, 1126; Vogelstein В., Lane D., Levine A.J., Nature, 2000, 408, 307]. Если блокировать взаимодействие этих белков, то высвобождающийся р53 активирует процесс разрушения опухоли, что является новым направлением в терапии раковых заболеваний. Как известно, нарушение взаимодействия p53-MDM2 сопутствует большинству онкологических заболеваний [Hock, А. & Vousden, K.Н. Regulation of the р53 pathway by ubiquitin and related proteins. Int. J. Biochem. Cell Biol. 42, 1618-1621 (2010)], а повышенная концентрация белка MDM2 присутствует в 80% раковых клеток [Vogelstein, В., Lane, D. & Levine, A.J. Surfing the p53 network. Nature 408, 307-310(2000)].Over the past few years, there has been an increased interest in the search for non-peptide low molecular weight compounds capable of interfering with the interaction of cellular proteins p53-MDM2. The p53 protein is a tumor suppressor that plays an important role in the cell life cycle and apoptosis, and MDM2 is its endogenous inhibitor [Wu X., Bayle J. H., Olson D., Levine A.J., Genes DeV., 1993, 7, 1126; Vogelstein B., Lane D., Levine A. J., Nature, 2000, 408, 307]. If the interaction of these proteins is blocked, then the released p53 activates the process of tumor destruction, which is a new direction in cancer therapy. As you know, the violation of the interaction of p53-MDM2 is associated with most cancers [Hock, A. & Vousden, K.N. Regulation of the p53 pathway by ubiquitin and related proteins. Int. J. Biochem. Cell Biol. 42, 1618-1621 (2010)], and an increased concentration of MDM2 protein is present in 80% of cancer cells [Vogelstein, B., Lane, D. & Levine, A.J. Surfing the p53 network. Nature 408,307-310 (2000)].

Соединения на основе тиазолидинов и роданинов являются перспективными мишенями для исследования в органической и медицинской химии в связи с их широким спектром биологической активности. Также, известно некоторое количество медицинских препаратов на основе роданиновых гетероциклических производных, обладающих противодиабетической [Momosw Y, Maekawa Т, Yamano Т, Kawada М, Odaka Н, Ikeda Н, Sohda Т (2002) Novel5-substituted-2,4-thiazolidinedione and oxazolidinedione derivatives as insulin sensitizers with antidiabetic activity. J. Med. Chem. 45:1518-1534], противовоспалительной [Unangst PC, Connor DT, Cetenko WA, Sorenson RJ, Sircar JC, Wright CD, Schrier DJ, Dyer RD (1993) Oxazole, thiazole, and imidazole derivatives of 2,6-di-tert-butylphenol as dual 5-lipoxygenase and cyclooxygenase inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 3:1729-1734], противовирусной [Grant EB, Guiadeen D, Baum EZ, Foleno BD, Jin H, Montenegro DA, Nelson EA, Bush K, Hlasta DJ (2000) The synthesis and SAR of rhodanines as novel class β-lactamase inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett., 10:2179-2182], противогрибковой [Jiang C, Ting AT, Seed В (1998) PPAR-gamma agonists inhibit production of monocyte inflammatory cytokines. Nature, 391:82-86] и противоопухолевой активностью [Kubota T, Koshizuka K, Williamson EA, Asou H, Said JW, Holden S, Miyoshi I, Koeffler HP (1998) Ligand for peroxisome proliferator-activated receptor γ (troglitazone) has potent antitumor effects against human prostate cancer both in vitro and in vivo. Cancer Res., 58:3344-3352]. Сочетание данных двух подходов по созданию молекулы, содержащей спироиндолиноновый фрагмента, для ингибирования p53-MDM2 белок-белкового взаимодействия и 3-арилзамещенного роданинового гетероцикла, обладающим противоопухолевой актиностью, позволило создать серию диспироиндолинонов на основе 3-арилроданинов в качетвте ингибиторов p53-MDM2 белок-белкового взаимодействия.Compounds based on thiazolidines and rhodanines are promising targets for research in organic and medicinal chemistry due to their wide spectrum of biological activity. Also, a number of medicines based on rhodanine heterocyclic derivatives are known that have antidiabetic [Momosw Y, Maekawa T, Yamano T, Kawada M, Odaka N, Ikeda N, Sohda T (2002) Novel5-substituted-2,4-thiazolidinedione and oxazolidinedione derivatives as insulin sensitizers with antidiabetic activity. J. Med. Chem. 45: 1518-1534], anti-inflammatory [Unangst PC, Connor DT, Cetenko WA, Sorenson RJ, Sircar JC, Wright CD, Schrier DJ, Dyer RD (1993) Oxazole, thiazole, and imidazole derivatives of 2,6-di-tert -butylphenol as dual 5-lipoxygenase and cyclooxygenase inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 3: 1729-1734], antiviral [Grant EB, Guiadeen D, Baum EZ, Foleno BD, Jin H, Montenegro DA, Nelson EA, Bush K, Hlasta DJ (2000) The synthesis and SAR of rhodanines as novel class β-lactamase inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett., 10: 2179-2182], antifungal [Jiang C, Ting AT, Seed B (1998) PPAR-gamma agonists inhibit production of monocyte inflammatory cytokines. Nature, 391: 82-86] and antitumor activity [Kubota T, Koshizuka K, Williamson EA, Asou H, Said JW, Holden S, Miyoshi I, Koeffler HP (1998) Ligand for peroxisome proliferator-activated receptor γ (troglitazone) has potent antitumor effects against human prostate cancer both in vitro and in vivo. Cancer Res. 58: 3344-3352]. The combination of these two approaches to the creation of a molecule containing a spiroindolinone fragment for inhibition of the p53-MDM2 protein-protein interaction and a 3-aryl-substituted rhodanine heterocycle possessing antitumor activity made it possible to create a series of dispiroindolinones based on 3-arylrhodanines in p53-MDM2 protein inhibitors interactions.

Алкалоиды спиро-оксиндольного типа были впервые выделены из растений семейств Apocynaceae и Rubiacae [Galliford, С.V.; Scheidt, K.A. Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 8748]. Ключевой особенностью этих соединений является наличие индолинонового спиросодержащего фрагмента с различными заместителями в фрагментах пирролидина и индолинона.Alkaloids of the spiro-oxindole type were first isolated from plants of the families Apocynaceae and Rubiacae [Galliford, C.V .; Scheidt, K.A. Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 8748]. A key feature of these compounds is the presence of an indolinone spiro-containing fragment with various substituents in the pyrrolidine and indolinone fragments.

Так, известны соединения и способы их получения такие как, A1 (Sanofi) [Allen, J.G. et al. Discovery and optimization of chromenotriazolopyrimidines as potent inhibitors of the mouse double minute 2-tumor protein 53 protein-protein interaction. J. Med. Chem. 52, 7044-7053 (2009)], RD-37 (University of California) [Wassman, C.D. et al. Computational identification of a transiently open L1/S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)] со значением IC₅₀=124 нМ на клетках LNCaP, А2 (University of Debrecen) [Noguchi, T. et al. Affinity-based screening of MDM2/ MDMX-p53 interaction inhibitors by chemical array: identification of novel peptidic inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23, 3802-3805 (2013)] со значением IC₅₀<1 мМ на клетках Hep G2, A3 (Johnson & Johnson) [Vu, B. et al. Discovery of RG7112: a small-molecule MDM2 inhibitor in clinical development. ACS Med. Chem. Lett. 4, 466-469 (2013)]. Получение данных производных, на примере соединения A3, возможно из ацилированных 1-дезокси-β-D-глюкопиразонил цианидов путем первоначального радикального бромирования с получением соответствующих бром-производных, в последующим их восстановлением до амидов с использованием TiCl₄ в системе вода-уксусная кислота. После хроматографической очистки продукт вводили в реакцию с незамещенным тиогидантоином в присутствии 4-х эквивалентов цианата серебра или калия, в нитрометане при температуре 80°С. Побочно наблюдали образование гидроксиамида в соотношении с целевым продуктом 1:2.Thus, compounds and methods for their preparation are known, such as A1 (Sanofi) [Allen, JG et al. Discovery and optimization of chromenotriazolopyrimidines as potent inhibitors of the mouse double minute 2-tumor protein 53 protein-protein interaction. J. Med. Chem. 52, 7044-7053 (2009)], RD-37 (University of California) [Wassman, CD et al. Computational identification of a transiently open L1 / S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)] with IC ₅₀ = 124 nM on LNCaP, A2 cells (University of Debrecen) [Noguchi, T. et al. Affinity-based screening of MDM2 / MDMX-p53 interaction inhibitors by chemical array: identification of novel peptidic inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23, 3802-3805 (2013)] with IC ₅₀ <1 mM on Hep G2, A3 cells (Johnson & Johnson) [Vu, B. et al. Discovery of RG7112: a small-molecule MDM2 inhibitor in clinical development. ACS Med. Chem. Lett. 4, 466-469 (2013)]. The preparation of these derivatives, using the example of compound A3, is possible from acylated 1-deoxy-β-D-glucopyrazonyl cyanides by initial radical bromination to obtain the corresponding bromine derivatives, followed by their reduction to amides using TiCl ₄ in the water-acetic acid system. After chromatographic purification, the product was reacted with unsubstituted thiohydantoin in the presence of 4 equivalents of silver or potassium cyanate in nitromethane at a temperature of 80 ° C. The formation of hydroxyamide in the ratio with the target product 1: 2 was observed as a side effect.

Основными недостатками способа получения данных соединений является трудоемкий способ синтеза конечных соединений, использование больших количеств высокотоксичных реагентов и элюэнтов при синтезе и очистке, инертных атмосфер, в некоторых случаях при синтезе оптически-активных соединений необходимо использование дорогостоящих неорганических катализаторов, также являющихся токсичными. На некоторых из стадий авторам удавалось выделить целевые продукты с выходами 4-20%. Также нежелательным является и использование в синтезе радикальных реакций, поскольку в этом случае в смеси наблюдаются не только продукты монобромирования, но и полибромирования, что значительно понижает общий выход и эффективность реакции.The main disadvantages of the method for obtaining these compounds is the laborious method of synthesizing the final compounds, the use of large amounts of highly toxic reagents and eluents in the synthesis and purification, inert atmospheres; in some cases, the synthesis of optically active compounds requires the use of expensive inorganic catalysts, which are also toxic. At some of the stages, the authors were able to isolate the target products in 4-20% yields. It is also undesirable to use radical reactions in the synthesis, since in this case not only monobromination products, but also polybromination products are observed in the mixture, which significantly reduces the overall yield and reaction efficiency.

Из уровня техники известен способ получения ряда спиро-индолинонов с перспективной противоопухолевой активностью (например, B1-В6). Эти соединения были представлены как высокоактивные ингибиторы белок-белкового взаимодействия (PPI) MDM2/p53 [Liu, Jin-Jun; et al World Intellectual Property Organization, WO 2008055812 A1 2008-05-15]. Получение данных производных, на примере соединения В1, возможно из соответствующего рацемического (1R,2S)-6'-хлор-2-(3-хлорфенил)спиро[5-циклогексен-1,3'-[3Н]индол]-2',4(1'Н)-диона, CuCl, Ph₃P и фенилмагний бромида в атмосфере аргона в абсолютном ТГФ при 0°С. После экстракции и отделения органической фазы из смеси были выделены два изомера, которые далее были разделены на хиральной колонке. Основными недостатками получаемых производных являются сложный путь синтеза исходного рацемического (1R,2S)-6'-хлор-2-(3-хлорфенил)спиро[5-циклогексен-1,3'-[3Н]индол]-2',4(1'Н)-диона, использование дорогостоящих хиральных колонок и токсичных органических растворителей при очистке.A method for producing a number of spiro-indolinones with promising antitumor activity (for example, B1-B6) is known from the prior art. These compounds have been reported as highly potent inhibitors of protein-protein interaction (PPI) MDM2 / p53 [Liu, Jin-Jun; et al World Intellectual Property Organization, WO 2008055812 A1 2008-05-15]. Obtaining these derivatives, using the example of compound B1, is possible from the corresponding racemic (1R, 2S) -6'-chloro-2- (3-chlorophenyl) spiro [5-cyclohexene-1,3 '- [3H] indole] -2' , 4 (1'H) -dione, CuCl, Ph ₃ P and phenylmagnesium bromide in an argon atmosphere in absolute THF at 0 ° C. After extraction and separation of the organic phase from the mixture, two isomers were isolated, which were further separated on a chiral column. The main disadvantages of the derivatives obtained are the complex route of synthesis of the starting racemic (1R, 2S) -6'-chloro-2- (3-chlorophenyl) spiro [5-cyclohexene-1,3 '- [3H] indole] -2', 4 ( 1'H) -dione, the use of expensive chiral columns and toxic organic solvents for purification.

Из уровня техники известен способ получения соединений, содержащих в своей структуре один спиро фрагмент, например, серия MI-43 или ISA-27, которые в настоящее время проходят доклинические испытания и, заключающийся в первоначальной конденсации ароматического альдегида с бензилцианидами, дальнейшей циклизацией совместно с третбутиловым эфиром енамина в присутствии фторида серебра и триметиламина, гидролизом сложного эфира в трифторуксусной кислоте, дальнейшим разделением энантиомеров на хиральной колонке и конденсацией с 2-метокси-4-карбоксианилином совместно с дифенилфосфинил хлоридом. В ходе дальнейших реакций оптимизации стереохимии, замещения бензольных колец на алкильные цепочки, введения амидных связей с подбором алициклического фрагмента была получена целевая структура соединения MI-43 или ISA-27 [Gomez-Monterrey, I.; Bertamino, A.; Porta, A.; et al. J. Med. Chem. 2010, 53, 8319]. MI-43 в настоящее время находится в Фазе I клинических испытаний против рака [http://clinicaltrials.gov/show/NCT01636479]. Основными недостатками способа получения данных соединений является длительный и трудоемкий способ синтеза конечных соединений, включающий более 15 стадий, а также необходимость разделения хиральных препаратов на дорогостоящих оптически-активных препаративных колонках и использование при этом больших объемов токсичных элюэнтов и растворителей.From the prior art, a method is known for the preparation of compounds containing one spiro moiety in their structure, for example, the MI-43 or ISA-27 series, which are currently undergoing preclinical tests and, which consists in the initial condensation of an aromatic aldehyde with benzyl cyanides, followed by cyclization together with tert-butyl enamine ether in the presence of silver fluoride and trimethylamine, hydrolysis of the ester in trifluoroacetic acid, further separation of the enantiomers on a chiral column and condensation with 2-methoxy-4-carboxyaniline together with diphenylphosphinyl chloride. In the course of further reactions of stereochemistry optimization, substitution of benzene rings by alkyl chains, introduction of amide bonds with the selection of an alicyclic fragment, the target structure of compound MI-43 or ISA-27 was obtained [Gomez-Monterrey, I .; Bertamino, A .; Porta, A .; et al. J. Med. Chem. 2010, 53, 8319]. MI-43 is currently in Phase I clinical trials against cancer [http://clinicaltrials.gov/show/NCT01636479]. The main disadvantages of the method for obtaining these compounds is a long and laborious method for the synthesis of final compounds, which includes more than 15 steps, as well as the need to separate chiral drugs on expensive optically active preparative columns and the use of large volumes of toxic eluents and solvents.

Также, Daiichi Sankyo сообщает о высоко активных ингибиторах белок-белкового взаимодействия MDM2/p53 со значениями IC₅₀ в диапазоне от 24.1 нМ до 181 мкМ [Zhao, Y.; Liu, L.; Sun, W.; et al. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223]. Диспиро аналоги среди данных соединений описаны более слабо и включают арил-замещенный (3''R)-4,4-диметилдиспиро[циклогексан-1,2'-пирролидин-3',3''-индол]-2''(1''H)-он В6 [Sugimoto, Y.U.S. 20130165424 А9, 2012]. Эти агенты ингибируют белок-белковое взаимодействие MDM2/p53 со значениями IC₅₀ в диапазоне 0.001-0.05 мкМ и являются ингибиторами р53-MDM2 взаимодействия. На первом этапе синтеза целевого соединения была проведена конденсация 5-замещенного изатина с этиловым эфиром цистеина при помощи микроволнового излучения, на следующем этапе с использованием тиофосгена и триэтиламина и последующим введением производного анилина. Далее, полученное диспиропроизводное ацилировали по атому азота изатина и выделяли нужный изомер на препаративной хиральной колонке. Основными недостатками метода получения данных соединений являются сложный и длительный путь синтеза конечных препаратов, необходимость дополнительных очисток и перекристаллизаций с использованием токсичных растворителей, необходимость использования дорогостоящей препаративной колонки, а также ряд побочных эффектов самих соединений.Also, Daiichi Sankyo reports highly active inhibitors of protein-protein interaction MDM2 / p53 with IC ₅₀ values ranging from 24.1 nM to 181 μM [Zhao, Y .; Liu, L .; Sun, W .; et al. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223]. Dispiro analogs among these compounds are less well described and include aryl-substituted (3''R) -4,4-dimethyldispiro [cyclohexane-1,2'-pyrrolidine-3 ', 3''-indole] -2'''' H) -one B6 [Sugimoto, YUS 20130165424 A9, 2012]. These agents inhibit the protein-protein interaction of MDM2 / p53 with IC ₅₀ values in the range 0.001-0.05 μM and are inhibitors of the p53-MDM2 interaction. At the first stage of the synthesis of the target compound, 5-substituted isatin was condensed with ethyl cysteine ester using microwave radiation, at the next stage using thiophosgene and triethylamine, followed by the introduction of an aniline derivative. Next, the obtained dispyro derivative was acylated at the isatin nitrogen atom and the desired isomer was isolated on a preparative chiral column. The main disadvantages of the method for obtaining these compounds are the complicated and long-term synthesis of the final preparations, the need for additional purifications and recrystallizations using toxic solvents, the need to use an expensive preparative column, and a number of side effects of the compounds themselves.

Наиболее близкими к заявляемому являются диспиропроизводные соединений на основе 2-тиогидантоинов, являющиеся ингибиторами p53-MDM2 взаимодействия и способ их получения, заключающийся в трехкомпонентной реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения с изатином, саркозином и 2-тиогидантоином [(1)Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404; (2) Белоглазкина E.К., Белоглазкина A.A. Кукушкин M.E., Мажуга А.Г, Иваненков Я.А. Номер заявки ФИПС 2015113026/04(020403) от 09.04.2015]. Согласно данному способу в реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения все компоненты загружают в реактор и кипятят с обратным холодильником в течение 6-10 часов, в качестве растворителя используют токсичный метанол. Таким образом известным способом получают соединения с низкими выходами (30-60%), низкой растворимостью (0.0015 г / в 100 г воды), низкой цитотоксичностью (около 20 мкМ), высокой общей токсичностью и селективностью по отношению к клеткам рака предстательной железы, для подобных соединений отсутствует селективность по отношению к клеткам рака почек.Closest to the claimed are dispiro-derivatives of compounds based on 2-thiohydantoins, which are inhibitors of p53-MDM2 interaction and a method for their preparation, which consists in a three-component reaction of 1,3-dipolar cycloaddition with isatin, sarcosine and 2-thiohydantoin [(1) Yan A. Ivanenkov , et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404; (2) Beloglazkina E.K., Beloglazkina A.A. Kukushkin M.E., Mazhuga A.G., Ivanenkov Ya.A. FIPS application number 2015113026/04 (020403) dated 09.04.2015]. According to this method, in the reaction of 1,3-dipolar cycloaddition, all components are loaded into a reactor and refluxed for 6-10 hours, toxic methanol is used as a solvent. Thus, in a known manner, compounds are obtained with low yields (30-60%), low solubility (0.0015 g / in 100 g of water), low cytotoxicity (about 20 μM), high general toxicity and selectivity towards prostate cancer cells, for such compounds lack selectivity towards renal cancer cells.

По сравнению с близкими прототипами, получение диспироиндолинонов на основе 3-замещенных роданинов возможно путем кипячения в толуоле в течение 4-8 часов. Полученные диспиропроизводные обладают более высокими выходами (более 62%), лучшей оастворимостью (0.01 г / в 100 г воды), высокой цитотоксичностью (до 10 мкМ), низкой общей токсичностью и выоской селективностью по отношению к опухолевым клеточным линиям почек SN12C.Compared with close prototypes, the production of dispiroindolinones based on 3-substituted rhodanines is possible by boiling in toluene for 4-8 hours. The obtained dispyro derivatives have higher yields (more than 62%), better solubility (0.01 g / in 100 g of water), high cytotoxicity (up to 10 μM), low total toxicity, and high selectivity towards SN12C renal tumor cell lines.

Раскрытие изобретенияDisclosure of invention

Технической проблемой, на решение которой направлено настоящее изобретение является разработка синтез новых низкомолекулярных ингибиторов белок-белкового взаимодействия MDM2/p53.The technical problem to be solved by the present invention is the development of the synthesis of new low molecular weight inhibitors of protein-protein interactions MDM2 / p53.

Техническим результатом заявляемого изобретения является способ получения диспиропроизводных на основе 2-сульфанилиден-1,3-тиазолидин-4-онов, который позволяет получить соединения с более выходами не менее 62%.The technical result of the claimed invention is a method for producing dispyro derivatives based on 2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-4-ones, which allows to obtain compounds with more yields of at least 62%.

Также полученные диспиропроизводные на основе 2-сульфанилиден-1,3-тиазолидин-4-онов, являющихся ингибиторами белок-белкового взаимодействия MDM2/p53 с высокой активностью и селективностью действия в отношении клеток экспрессирующих белок р53 (А549 и MCF7), так и нераковых клеточных линий (HEK293T и VA13). Данное свойство позволяет использовать активный компонент для лечения заболеваний, связанных с нарушением активности белка р53, с меньшей дозировкой при избирательном действии на раковые клетки, не затрагивая при этом здоровые клетки. Полученные соединения обладают низкой общей токсичностью, о чем свидетельствует отсутствие активности на клеточной линии здоровых клеток фибробластов легких человека VA13.Also obtained dispiro derivatives based on 2-sulfanilidene-1,3-thiazolidin-4-ones, which are inhibitors of protein-protein interactions MDM2 / p53 with high activity and selectivity of action against cells expressing p53 protein (A549 and MCF7), and non-cancerous cellular lines (HEK293T and VA13). This property makes it possible to use the active ingredient for the treatment of diseases associated with a violation of the activity of the p53 protein, with a lower dosage with a selective effect on cancer cells, without affecting healthy cells. The resulting compounds have low overall toxicity, as evidenced by the lack of activity on the VA13 healthy human lung fibroblast cell line.

Техническая проблема решается новыми соединениями на основе диспироиндолинонов общей формулы 1, или их фармацевтически приемлемыми солями, или оптическими изомерами.The technical problem is solved by new compounds based on dispiroindolinones of General formula 1, or their pharmaceutically acceptable salts, or optical isomers.

где R₁ выбран из группы, включающей фенил, возможно замещенный одним заместителем, выбранными из атома галогена (хлор или бром), низшей алкокси-группы (метокси или этокси) или C₁-С₆ алкила (метил, этил, пропил, аллил). Более предпочтительным является соединение, отличающееся тем, что заместитель R₁ выбран из группы, включающей аллил, фенил С₆Н₅-, 4-этоксифенил 4-С₂Н₅О-С₆Н₄-, 4-хлорфенил 4-Cl-С₆Н₄-, 4-бромфенил 4-Br-С₆Н₄-.where R _{1 is} selected from the group consisting of phenyl, optionally substituted with one substituent selected from a halogen atom (chlorine or bromine), a lower alkoxy group (methoxy or ethoxy), or C ₁ -C ₆ alkyl (methyl, ethyl, propyl, allyl) ... More preferred is a compound characterized in that the substituent R _{1 is} selected from the group consisting of allyl, phenyl C ₆ H ₅ -, 4-ethoxyphenyl 4-C ₂ H ₅ O — C ₆ H ₄ -, 4-chlorophenyl 4-Cl- C ₆ H ₄ -, 4-bromophenyl 4-Br-C ₆ H ₄ -.

R₂ выбран из группы, включающей фенил, замещенный 1-2 заместителями, выбранными из атома галогена (фтор, хлор, бром), низшей алкокси-группы (метокси, этокси), или С₁-С₂ алкила (метил, этил); Более предпочтительным является соединение, отличающееся тем, что заместитель R₂ фенил С₆Н₅-, 4-этоксифенил 4-С₂Н₅О-С₆Н₄-, 2-хлорфенил 2-Cl-С₆Н₄-, 3-хлорфенил 3-Cl-С₆Н₄-, 4-хлорфенил 4-Cl-С₆Н₄-, 4-этилфенил 4-С₂Н₅-С₆Н₄-, 3,4-диметоксифенил 3,4-ОМе-С₆Н₃-, 4-метоксифенил 4-СН₃О-С₆Н₄-, 4-фторфенил 4-F-C₆H₄-, 2-метилфенил 2-СН₃-С₆Н₄-.R _{2 is} selected from the group consisting of phenyl substituted with 1-2 substituents selected from a halogen atom (fluoro, chloro, bromo), a lower alkoxy group (methoxy, ethoxy), or C ₁ -C ₂ alkyl (methyl, ethyl); More preferred is a compound characterized in that the substituent R ₂ phenyl C ₆ H ₅ -, 4-ethoxyphenyl 4-C ₂ H ₅ O-C ₆ H ₄ -, 2-chlorophenyl 2-Cl-C ₆ H ₄ -, 3 -chlorophenyl 3-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-chlorophenyl 4-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-ethylphenyl 4-C ₂ H ₅ -C ₆ H ₄ -, 3,4-dimethoxyphenyl 3,4- OMe-C ₆ H ₃ -, 4-methoxyphenyl 4-CH ₃ O-C ₆ H ₄ -, 4-fluorophenyl 4-FC ₆ H ₄ -, 2-methylphenyl 2-CH ₃ -C ₆ H ₄ -.

R₃ выбран из группы, включающей атом галогена, водорода. Более предпочтительным является соединение, отличающееся тем, что заместитель R₃ выбран из группы включающей атом хлора, брома или водорода.R _{3 is} selected from the group consisting of a halogen atom, hydrogen. More preferred is a compound characterized in that the R ₃ substituent is selected from the group consisting of a chlorine, bromine or hydrogen atom.

R₄ представляет собой атом водорода или алкил С₁-С₃ (метил, этил, пропил); R₄ выбран из группы, включающей атом водорода или пропаргил НС≡С-СН₂-.R ₄ represents a hydrogen atom or C ₁ -C ₃ alkyl (methyl, ethyl, propyl); R _{4 is} selected from the group consisting of a hydrogen atom or propargyl HC≡C — CH ₂ -.

Более предпочтительным является соединение, выбранное из группы, включающей:More preferred is a compound selected from the group consisting of:

4'-(2-хлорфенил)-1'-метил-4''-(проп-2-ен-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.1);4 '- (2-chlorophenyl) -1'-methyl-4' '- (prop-2-en-1-yl) -5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine -3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.1);

5-бром-4'-(3-хлорфенил)-1'-метил-4''-(проп-2-ен-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.2);5-bromo-4 '- (3-chlorophenyl) -1'-methyl-4' '- (prop-2-en-1-yl) -5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indol-3, 2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.2);

5-хлор-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-4''-(проп-2-ен-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.3);5-chloro-4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-4' '- (prop-2-en-1-yl) -5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indol-3, 2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.3);

5-бром-4'-(2-хлорфенил)-1'-метил-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.4);5-bromo-4 '- (2-chlorophenyl) -1'-methyl-4' '- phenyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 ' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.4);

5-бром-1'-метил-4'-(2-метилфенил)-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.5);5-bromo-1'-methyl-4 '- (2-methylphenyl) -4' '- phenyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 ' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.5);

4'-(4-этилфенил)-1'-метил-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.6);4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-4' '- phenyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 '' - [1 , 4] thiazolidine] -2,3 "- dione (1.6);

5-бром-4'-(3,4-диметоксифенил)-1'-метил-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.7);5-bromo-4 '- (3,4-dimethoxyphenyl) -1'-methyl-4' '- phenyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.7);

4''-(4-этоксифенил)-4'-(4-метоксифенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.8);4 '' - (4-ethoxyphenyl) -4 '- (4-methoxyphenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 ' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.8);

5-хлор-4'-(4-хлорфенил)-4''-(4-этоксифенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.9);5-chloro-4 '- (4-chlorophenyl) -4' '- (4-ethoxyphenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.9);

4''-(4-бромфенил)-4'-(4-метоксифенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.10);4 '' - (4-bromophenyl) -4 '- (4-methoxyphenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 ' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.10);

5-бром-4''-(4-бромфенил)-1'-метил-4'-(2-метилфенил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.11);5-bromo-4 '' - (4-bromophenyl) -1'-methyl-4 '- (2-methylphenyl) -5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.11);

4''-(4-бромфенил)-4'-(4-этилфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.12);4 '' - (4-bromophenyl) -4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 ' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.12);

5-бром-4',4''-бис(4-хлорфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.13);5-bromo-4 ', 4' '- bis (4-chlorophenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 '' - [1,4] thiazolidine] -2,3 "- dione (1.13);

5-бром-4''-(4-хлорфенил)-4'-(4-фторфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.14);5-bromo-4 '' - (4-chlorophenyl) -4 '- (4-fluorophenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.14);

5-хлор-4''-(4-хлорфенил)-4'-(4-этилфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.15);5-chloro-4 '' - (4-chlorophenyl) -4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanilidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.15);

4'-(4-этилфенил)-1'-метил-4''-фенил-1-(проп-2-ин-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-дион (1.16).4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-4' '- phenyl-1- (prop-2-yn-1-yl) -5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indol-3, 2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.16).

Также техническая проблема решается способом получения диспироиндолинонов на основе различных классов гетероциклов, заключающийся в трехкомпонентной реакции между соответствующим 1,3-тиазолидин-4-оном, замещенным по 3-му или 5-му положению или незамещенным или 5-галогензамещенным изатином и сакозином в одноатомном ароматическом спирте. При этом способ получения диспиро-индолинонов общей формулы 1, заключается в том, что 1±0.1 мольных экв. соответствующего имидазолидин-4-она растворяют в толуоле, взятого в количестве 10 мл на 0.5±0.1 ммоль и кипятят при температуре 100±10°С в течение 10±2 минут после закипания образовавшегося раствора, затем в кипящую смесь добавляют саркозин, взятый из расчета 2±0.2 экв. и соответствующего изатина, взятого в количестве 2±0.2 экв по отношению к соответствующему имидазолидин-4-ону, полученную смесь кипят до окончания реакции, затем смесь охлаждают до комнатной температуры, выпавший осадок отфильтровывают на вакууме со стеклянным пористым фильтром и колбой Бунзена.Also, the technical problem is solved by a method for producing dispiroindolinones based on various classes of heterocycles, which consists in a three-component reaction between the corresponding 1,3-thiazolidin-4-one substituted at the 3rd or 5th position or unsubstituted or 5-halogen-substituted isatin and sacosine in monoatomic aromatic alcohol. In this case, the method of obtaining dispiro-indolinones of general formula 1, is that 1 ± 0.1 molar equiv. the corresponding imidazolidin-4-one is dissolved in toluene, taken in an amount of 10 ml per 0.5 ± 0.1 mmol and boiled at a temperature of 100 ± 10 ° C for 10 ± 2 minutes after the resulting solution boils, then sarcosine is added to the boiling mixture, taken from the calculation 2 ± 0.2 equiv. and the corresponding isatin, taken in an amount of 2 ± 0.2 equiv with respect to the corresponding imidazolidin-4-one, the resulting mixture is boiled until the reaction is complete, then the mixture is cooled to room temperature, the precipitate formed is filtered off under vacuum with a porous glass filter and a Bunsen flask.

Техническая проблема решается также активным компонентом, обладающим свойством ингибитора белок-белкового взаимодействия MDM2/p53, представляющим собой соединение общей формулы 1.The technical problem is also solved by an active component having the property of an inhibitor of protein-protein interactions MDM2 / p53, which is a compound of general formula 1.

Также техническая проблема решается фармацевтической композицией для профилактики и лечения онкологического заболевания, связанного с нарушением белок-белкового взаимодействием MDM2/p53, включающей в качестве лекарственного начала соединения общей формулы 1, или их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты, в терапевтически эффективном количестве или содержащая в эффективном количестве активный компонент по настоящему изобретению. Более предпочтительной является фармацевтическая композиция, где онкологическое заболевание представляет собой рак легких или почек.Also, the technical problem is solved by a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of oncological disease associated with a violation of the protein-protein interaction MDM2 / p53, including as a drug base compounds of General formula 1, or their pharmaceutically acceptable salts and / or hydrates, in a therapeutically effective amount or containing in an effective amount, the active ingredient of the present invention. More preferred is a pharmaceutical composition wherein the cancer is lung or kidney cancer.

Также техническая проблема решается лекарственным средством для профилактики и лечения пролиферативных заболеваний, связанных с белок-белковым взаимодействием MDM2/p53, выполненным в виде таблеток, капсул или инъекций,помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, содержащее в эффективном количестве активный компонент, представляющий собой соединение общей формулы 1 или фармацевтическую композицию, включающую в качестве лекарственного начала соединение общей формулы 1.Also, the technical problem is solved by a drug for the prevention and treatment of proliferative diseases associated with the protein-protein interaction MDM2 / p53, made in the form of tablets, capsules or injections placed in a pharmaceutically acceptable package containing an active ingredient in an effective amount, which is a compound of the general formula 1 or a pharmaceutical composition comprising, as a drug principle, a compound of general formula 1.

Техническая проблема также решается способом ингибирования белок-белкового взаимодействия MDM2/p53, включающим стадию введения в клетку соединения общей формулы 1 по настоящему изобретению.The technical problem is also solved by a method for inhibiting the protein-protein interaction of MDM2 / p53, which includes the step of introducing a compound of general formula 1 according to the present invention into a cell.

Осуществление изобретенияImplementation of the invention

Ниже приведены определения терминов, которые используются в описании настоящего изобретения.Below are definitions of terms that are used in the description of the present invention.

«IC₅₀» (ПК₅₀) - концентрация соединения, при которой наблюдается 50% ингибирование ферментативной активности"IC ₅₀ " (PC ₅₀ ) - the concentration of the compound at which there is 50% inhibition of enzymatic activity

«Алифатический заместитель» (алкил, алкенил, алкинил) означает алифатическую углеводородную линейную или разветвленную группу с 1-12 атомами углерода в цепи, необязательно содержащий двойную или тройную связь. Разветвленная означает, что алкильная цепь имеет один или несколько «низших алкильных» заместителей. Алкил, алкенил, алкинил могут иметь один или несколько одинаковых или различных заместителей («алкильных заместителей») включая галоген, алкенилокси, циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил, ароил, циано, гидрокси, алкокси, карбокси, алкинилокси, аралкокси, арилокси, арилоксикарбнил, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, арилсульфонил, алкилсульфонилгетероаралкилокси, аннелированный гетероарилциклоалкенил, аннелированный гетероарилциклоалкил, аннелированный гетероарилгетероцикленил, аннелированный гетероарилгетероциклил, аннелированный арилциклоалкенил, аннелированный арилциклоалкил, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R_k ^aR_k+1 ^aN-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=O)-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=S)-, R_k ^aR_k+1 ^aNSO₂-, где R_k ^a и R_k+1 ^a независимо друг от друга представляют собой «заместители амино группы», например, атом водорода, алкил, арил, аралкил, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или R_k ^a и R_k+1 ^a вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через R_k ^a и R_k+1 ^a 4-7 членный гетероциклил или гетероцикленил. Предпочтительными алкильными группами являются метил, трифторметил, циклопропилметил, циклопентилметил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, 3-пентил, метоксиэтил, карбоксиметил, метоксикарбонилметил, этоксикарбонилметил, бензилоксикарбонилметил метоксикарбонилметил и пиридилметилоксикарбнилметил. Предпочтительными «алкильными заместителями» являются циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил, гидрокси, алкокси, алкоксикарбонил, аралкокси, арилокси, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, алкилсульфонил, арилсульфонил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R_k ^aR_k+1 ^aN-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=O)-, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил.An “aliphatic substituent” (alkyl, alkenyl, alkynyl) means an aliphatic hydrocarbon linear or branched group with 1-12 carbon atoms in the chain, optionally containing a double or triple bond. Branched means that the alkyl chain has one or more "lower alkyl" substituents. Alkyl, alkenyl, alkynyl may have one or more of the same or different substituents ("alkyl substituents") including halogen, alkenyloxy, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, aroyl, cyano, hydroxy, alkoxy, carboxy, alkynyloxy, aralkoxy, aryloxy, aryloxycarbynyl , alkylthio, heteroarylthio, aralkylthio, arylsulfonyl, alkilsulfonilgeteroaralkiloksi, annelated heteroarylcycloalkenyl, annelated heteroarylcycloalkyl, annelated heteroarylheterocyclenyl, annelated heteroarylheterocyclyl, annelated arylcycloalkenyl, annelated arylcycloalkyl, annelated arylheterocyclenyl, annelated arylheterocyclyl, alkoxycarbonyl, aralkoxycarbonyl, geteroaralkiloksikarbonil or R _{_k} ^a R _k _{+ 1} ^a N -, R _k ^a R _{k + 1} ^a NC (= O) -, R _k ^a R _{k + 1} ^a NC (= S) -, R _k ^a R _{k + 1} ^a NSO ₂ -, where R _k ^a and R _{k + 1} ^a independently of each other represent "amino group substituents", for example, hydrogen atom, alkyl, aryl, aralkyl, heteroaralkyl, heterocyclyl or heteroaryl, or R _k ^a and R _{k + 1} ^a together with the N atom to which they are bonded form through R _k ^a and R _{k + 1} ^{a a} 4-7 membered heterocyclyl or heterocyclenyl. Preferred alkyl groups are methyl, trifluoromethyl, cyclopropylmethyl, cyclopentylmethyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, tert-butyl, n-pentyl, 3-pentyl, methoxyethyl, carboxymethyl, methoxycarbonylmethyl, ethoxycarbonylcarbomethyl, methyloxyridoxybonylmethyl ... The preferred "alkyl substituents" are cycloalkyl, aryl, heteroaryl, heterocyclyl, hydroxy, alkoxy, alkoxycarbonyl, aralkoxy, aryloxy, alkylthio, heteroarylthio, aralkylthio, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, alkoxycarbonyl, aralkoxycarbonyl, geteroaralkiloksikarbonil or R _{_k} ^a R _k _{+ 1} ^a N- , R _k ^a R _{k + 1} ^a NC (= O) -, annelated arylheterocyclenyl, annelated arylheterocyclyl.

Предпочтительными алкильными группами в данном изобретении являются аллил, циклопропил, циклогексил и 4-этилморфолин.Preferred alkyl groups in this invention are allyl, cyclopropyl, cyclohexyl and 4-ethylmorpholine.

«Арил» означает ароматическую моноциклическую или полициклическую систему, включающую от 6 до 14 атомов углерода, преимуществено от 6 до 10 атомов углерода. Арил может содержать один или более «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными. Представителями арильных групп являются фенил или нафтил, замещенный фенил или замещенный нафтил. Арил может быть аннелирован с ароматической и неароматической циклической системой или гетероциклом, включая арил, ароил, аралкокси, арилгидрокси, арилокси, арилоксикарбонил, аралкилтио, арилсульфонил, арилгалоген, гетероарил гетероциклил, гетероаралкилокси, гетероарилтио, аннелированный гетероарилциклоалкенил, аннелированный гетероарилциклоалкил, аннелированный гетероарилгетероцикленил, аннелированный гетероарилгетероциклил, аннелированный арилциклоалкенил, аннелированный арилциклоалкил, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R_k ^aR_k+1 ^aN-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=O)-, R_k ^aR_k+1 ^aNC(=S)-, R_k ^aR_k+1 ^aNSO₂-, где R_k ^a и R_k+1 ^a независимо друг от друга представляют собой «заместители амино группы», значение которых определено в данном разделе."Aryl" means an aromatic monocyclic or polycyclic system containing from 6 to 14 carbon atoms, preferably from 6 to 10 carbon atoms. Aryl may contain one or more "ring system substituents" which may be the same or different. Representatives of aryl groups are phenyl or naphthyl, substituted phenyl or substituted naphthyl. Aryl could be annelated with aromatic and nonaromatic cyclic system or heterocycle, including aryl, aroyl, aralkoxy, arilgidroksi, aryloxy, aryloxycarbonyl, aralkylthio, arylsulfonyl, arilgalogen, heteroaryl, heterocyclyl, heteroaralkyloxy, heteroarylthio, annelated heteroarylcycloalkenyl, annelated heteroarylcycloalkyl, annelated heteroarylheterocyclenyl, annelated heteroarylheterocyclyl , annelated arylcycloalkenyl, annelated arylcycloalkyl, annelated arylheterocyclenyl, annelated arylheterocyclyl, alkoxycarbonyl, aralkoxycarbonyl, geteroaralkiloksikarbonil or R _{_k} ^a R _k _{+ 1} ^{_{^{_{a N-, R k a R k}}}} + ₁ ^{a NC (= O) -,} R k a R k ₊₁ ^a NC (= S) -, R _k ^a R _{k + 1} ^a NSO ₂ -, where R _k ^a and R _{k + 1} ^a independently of each other represent "amino group substituents", the meaning of which is defined in this section ...

Предпочтительными арильными группами в данном изобретении являются фенил С₆Н₅-, 3-хлор-4-фторфенил 3-Cl-4-F-С₆Н₃-, 4-этоксифенил 4-С₂Н₅О-С₆Н₄-, 3-хлор-4-этоксифенил 3-Cl-4- С₂Н₅О-С₆Н₃-, 2-хлорфенил 2-Cl-С₆Н₄-, 4-хлорфенил 4-Cl-С₆Н₄-, 4-этилфенил 4-С₂Н₅-С₆Н₄-, 3,4-диметоксифенил 3,4-ОМе-С₆Н₃-,4-метоксифенил 4-СН₃О-С₆Н₄-, 4-фторфенил 4-F-C₆H₄-, 4-бромфенил 4-Br-С₆Н₄-, 4-пропилоксифенил 4-O(iC₃H₇)С₆Н₄, циклопентоксибензил.Preferred aryl groups in this invention are phenyl C ₆ H ₅ -, 3-chloro-4-fluorophenyl 3-Cl-4-F-C ₆ H ₃ -, 4-ethoxyphenyl 4-C ₂ H ₅ O-C ₆ H ₄ -, 3-chloro-4-ethoxyphenyl 3-Cl-4- C ₂ H ₅ O-C ₆ H ₃ -, 2-chlorophenyl 2-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-chlorophenyl 4-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-ethylphenyl 4-C ₂ H ₅ -C ₆ H ₄ -, 3,4-dimethoxyphenyl 3,4-OMe-C ₆ H ₃ -, 4-methoxyphenyl 4-CH ₃ O-C ₆ H ₄ - , 4-fluorophenyl 4-FC ₆ H ₄ -, 4-bromophenyl 4-Br-C ₆ H ₄ -, 4-propyloxyphenyl 4-O (iC ₃ H ₇ ) C ₆ H ₄ , cyclopentoxybenzyl.

«Белок-белковое взаимодействие» означает установление связей между белками р53 и MDM2 в результате их взаимодействий за счет электростатических, гидрофобных или гидрофильных контактов."Protein-protein interaction" means the establishment of bonds between proteins p53 and MDM2 as a result of their interactions through electrostatic, hydrophobic or hydrophilic contacts.

«Галоген» означает фтор, хлор, бром и йод. Предпочтительными являются фтор, хлор и бром."Halogen" means fluorine, chlorine, bromine and iodine. Fluorine, chlorine and bromine are preferred.

«Гетероциклил» (гетероциклический заместитель) означает ароматическую или неароматическую насыщенную моноциклическую или полициклическую систему, включающую от 3 до 10 атомов углерода, преимущественно от 5 до 6 атомов углерода, в которой один или несколько атомов углерода заменены на гетероатом, такой как азот, кислород, сера. Приставка «аза», «окса» или «тиа» перед гетероциклилом означает наличие в циклической системе, атома азота, атома кислорода или атома серы, соответственно. Гетероциклил может иметь один или несколько «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными. Атомы азота и серы, находящиеся в гетероциклиле могут быть окислены до N-оксида, S-оксида или S-диоксида. Представителями гетероциклилов являются пиперидин, пирролидин, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, тиазолидин, 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или R_k ^a и R_k+1 ^a вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через R_k ^a и R_k+1 ^a 4-7 членный гетероцикл."Heterocyclyl" (heterocyclic substituent) means an aromatic or non-aromatic saturated monocyclic or polycyclic system containing 3 to 10 carbon atoms, preferably 5 to 6 carbon atoms, in which one or more carbon atoms are replaced by a heteroatom such as nitrogen, oxygen, sulfur. The prefix "aza", "oxa" or "thia" before a heterocyclyl means the presence of a nitrogen atom, an oxygen atom or a sulfur atom in the cyclic system, respectively. Heterocyclyl may have one or more "cyclic system substituents" which may be the same or different. The nitrogen and sulfur atoms in the heterocyclyl can be oxidized to N-oxide, S-oxide, or S-dioxide. Representatives of heterocyclyls are piperidine, pyrrolidine, piperazine, morpholine, thiomorpholine, thiazolidine, 1,4-dioxane, tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene, heteroaralkyl, heterocyclyl or heteroaryl, or R _k ^a and R _{k + 1} ^a , to which they are bonded to the atom , form ^a 4-7 membered heterocycle through R _k ^a and R _{k + 1} ^a .

Предпочтительной гетероциклической группой в данном изобретении является пиридин.The preferred heterocyclic group in this invention is pyridine.

«Гидрат» означает сольват, в котором вода является молекулой или молекулами растворителя."Hydrate" means a solvate in which water is a solvent molecule or molecules.

«Заместитель» означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду (фрагменту), например, «заместитель алкильный», «заместитель амино группы», «заместитель карбамоильный», «заместитель циклической системы», значения которых определен в данном разделе.“Substituent” means a chemical radical that is attached to a scaffold (moiety), for example, “alkyl substituent”, “amino group substituent”, “carbamoyl substituent”, “cyclic system substituent”, the meanings of which are defined in this section.

«Лекарственное начало» (активный компонент, лекарственная субстанция лекарственное вещество, drag-substance) означает физиологически активное вещество синтетического или иного (биотехнологического, растительного, животного, микробного и прочего) происхождения, обладающее фармакологической активностью и являющееся активным началом фармацевтической композиции, используемой для производства и изготовления лекарственного препарата (средства)."Medicinal principle" (active ingredient, drug substance, drug substance, drag-substance) means a physiologically active substance of synthetic or other (biotechnological, plant, animal, microbial and other) origin, which has pharmacological activity and is the active principle of a pharmaceutical composition used for the production and the manufacture of a medicinal product (agent).

«Лекарственное средство (препарат)» - вещество (или смесь веществ в виде фармацевтической композиции), в виде таблеток капсул инъекций, мазей и др. готовых форм предназначенное для восстановления, исправления или изменения физиологических функций у человека и животных, а также для лечения и профилактики болезней, диагностики, анестезии, контрацепции, косметологии и прочего."Medicinal product (preparation)" - a substance (or a mixture of substances in the form of a pharmaceutical composition), in the form of tablets, capsules of injections, ointments and other ready-made forms intended for the restoration, correction or change of physiological functions in humans and animals, as well as for the treatment and disease prevention, diagnostics, anesthesia, contraception, cosmetology and others.

«Фармацевтическая композиция» обозначает композицию, включающую в себя соединение формулы 1 и, по крайней мере, один из компонентов, выбранных из группы, состоящей из фармацевтически приемлимых и фармакологически совместимых наполнителей, растворителей, разбавителей, носителей, вспомогательных, распределяющих и воспринимающих средств, средств доставки, таких как консерванты, стабилизаторы, наполнители, измельчители, увлажнители, эмульгаторы, суспендирующие агенты, загустители, подсластители, отдушки, ароматизаторы, антибактериальные агенты, фунгициды, лубриканты, регуляторы пролонгированной доставки, выбор и соотношение которых зависит от природы и способа назначения и дозировки. Примерами суспендирующих агентов являются этоксилированный изостеариловый спирт, полиоксиэтилен, сорбитол и сорбитовый эфир, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, а также смеси этих веществ. Защита от действия микроорганизмов может быть обеспечена с помощью разнообразных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, таких как, парабены, хлорбутанол, сорбиновая кислота и подобные им соединения. Композиция может включать также изотонические агенты, например, сахара, хлористый натрий и им подобные. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например, моностеарат алюминия и желатин. Примерами подходящих носителей, растворителей, разбавителей и средств доставки являются вода, этанол, полиспирты, а также их смеси, растительные масла (такие, как оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (такие, как этилолеат). Примерами наполнителей являются лактоза, молочный сахар, цитрат натрия, карбонат кальция, фосфат кальция и им подобные. Примерами измельчителей и распределяющих средств являются крахмал, алгиновая кислота и ее соли, силикаты. Примерами лубрикантов являются стеарат магния, лаурилсульфат натрия, тальк, а также полиэтиленгликоль с высоким молекулярным весом. Фармацевтическая композиция для перорального, сублингвального, трансдермального, внутримышечного, внутривенного, подкожного, местного или ректального введения активного начала, одного или в комбинации с другим активным началом, может быть введена животным и людям в стандартной форме введения, в виде смеси с традиционными фармацевтическими носителями. Пригодные стандартные формы введения включают пероральные формы, такие как таблетки, желатиновые капсулы, пилюли, порошки, гранулы, жевательные резинки и пероральные растворы или суспензии, сублингвальные и трансбуккальные формы введения, аэрозоли, имплантаты, местные, трансдермальные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, интраназальные или внутриглазные формы введения и ректальные формы введения."Pharmaceutical composition" means a composition comprising a compound of formula 1 and at least one of the components selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable and pharmacologically compatible excipients, solvents, diluents, carriers, auxiliary, dispensing and receiving agents, agents delivery agents such as preservatives, stabilizers, fillers, grinders, humectants, emulsifiers, suspending agents, thickeners, sweeteners, fragrances, flavors, antibacterial agents, fungicides, lubricants, sustained delivery regulators, the choice and ratio of which depends on the nature and method of administration and dosage ... Examples of suspending agents are ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene, sorbitol and sorbitol ether, microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar-agar and tragacanth, and mixtures of these substances. Protection against the action of microorganisms can be provided by a variety of antibacterial and antifungal agents, such as parabens, chlorobutanol, sorbic acid, and the like. The composition may also include isotonic agents such as sugars, sodium chloride and the like. The prolonged action of the composition can be provided by agents that slow down the absorption of the active principle, for example, aluminum monostearate and gelatin. Examples of suitable carriers, solvents, diluents and delivery vehicles are water, ethanol, polyalcohols, as well as mixtures thereof, vegetable oils (such as olive oil) and injectable organic esters (such as ethyl oleate). Examples of fillers are lactose, milk sugar, sodium citrate, calcium carbonate, calcium phosphate, and the like. Examples of grinders and spreading agents are starch, alginic acid and its salts, silicates. Examples of lubricants are magnesium stearate, sodium lauryl sulfate, talc, and high molecular weight polyethylene glycol. A pharmaceutical composition for oral, sublingual, transdermal, intramuscular, intravenous, subcutaneous, topical or rectal administration of an active principle, alone or in combination with another active principle, can be administered to animals and humans in a standard administration form, as a mixture with traditional pharmaceutical carriers. Suitable unit forms of administration include oral forms such as tablets, gelatin capsules, pills, powders, granules, chewing gums and oral solutions or suspensions, sublingual and buccal administration forms, aerosols, implants, topical, transdermal, subcutaneous, intramuscular, intravenous, intranasal or intraocular administration forms and rectal administration forms.

«Фармацевтически приемлемая соль» означает относительно нетоксичные органические и неорганические соли кислот и оснований, заявленных в настоящем изобретении. Эти соли могут быть получены in situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединений, или приготовлены специально. В частности, соли оснований могут быть получены специально, исходя из очищенного свободного основания заявленного соединения и подходящей органической или неорганической кислоты. Примерами полученных таким образом солей являются гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, бисульфаты, фосфаты, нитраты, ацетаты, оксалаты, валериаты, олеаты, пальмитаты, стеараты, лаураты, бораты, бензоаты, лактаты, тозилаты, цитраты, малеаты, фумараты, сукцинаты, тартраты, мезилаты, малонаты, салицилаты, пропионаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, сульфаматы и им подобные (Подробное описание свойств таких солей дано в Berge S.M., et al., "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci. 1977, 66: 1-19). Соли заявленных кислот также могут быть специально получены реакцией очищенной кислоты с подходящим основанием, при этом могут быть синтезированы соли металлов и аминов. К металлическим относятся соли натрия, калия, кальция, бария, цинка, магния, лития и алюминия, наиболее желательными из которых являются соли натрия и калия. Подходящими неорганическими основаниями, из которых могут быть получены соли металлов, являются гидроксид, карбонат, бикарбонат и гидрид натрия, гидроксид и бикарбонат калия, поташ, гидроксид лития, гидроксид кальция, гидроксид магния, гидроксид цинка. В качестве органических оснований, из которых могут быть получены соли заявленных кислот, выбраны амины и аминокислоты, обладающие достаточной основностью, чтобы образовать устойчивую соль, и пригодные для использования в медицинских целях (в частности, они должны обладать низкой токсичностью). К таким аминам относятся аммиак, метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, диэтиламин, триэтиламин, бензиламин, дибензиламин, дициклогексиламин, пиперазин, этилпиперидин, трис(гидроксиметил)аминометан и подобные им. Кроме того, для солеобразования могут быть использованы гидроокиси тетраалкиламмония, например, такие как, холин, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний и им подобные. В качестве аминокислот могут быть использованы основные аминокислоты - лизин, орнитин и аргинин."Pharmaceutically acceptable salt" means the relatively non-toxic organic and inorganic salts of acids and bases disclosed in the present invention. These salts can be obtained in situ during the synthesis, isolation or purification of compounds, or they can be specially prepared. In particular, base salts can be specially prepared starting from the purified free base of the claimed compound and a suitable organic or inorganic acid. Examples of the salts obtained in this way are hydrochlorides, hydrobromides, sulfates, bisulfates, phosphates, nitrates, acetates, oxalates, valeriates, oleates, palmitates, stearates, laurates, borates, benzoates, lactates, tosylates, citrates, maleates, fumarates, succinates, tartrates mesylates, malonates, salicylates, propionates, ethanesulfonates, benzenesulfonates, sulfamates and the like (For a detailed description of the properties of such salts, see Berge SM, et al., "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci. 1977, 66: 1-19). Salts of the claimed acids can also be specially prepared by reacting a purified acid with a suitable base, whereby metal and amine salts can be synthesized. Metallic salts include sodium, potassium, calcium, barium, zinc, magnesium, lithium and aluminum salts, the most desirable of which are sodium and potassium salts. Suitable inorganic bases from which metal salts can be derived are sodium hydroxide, carbonate, bicarbonate and hydride, potassium hydroxide and bicarbonate, potash, lithium hydroxide, calcium hydroxide, magnesium hydroxide, zinc hydroxide. As organic bases from which salts of the claimed acids can be obtained, amines and amino acids are selected that are basic enough to form a stable salt and are suitable for medical use (in particular, they must have low toxicity). Such amines include ammonia, methylamine, dimethylamine, trimethylamine, ethylamine, diethylamine, triethylamine, benzylamine, dibenzylamine, dicyclohexylamine, piperazine, ethylpiperidine, tris (hydroxymethyl) aminomethane, and the like. In addition, tetraalkylammonium hydroxides such as, for example, choline, tetramethylammonium, tetraethylammonium, and the like, can be used for salt formation. The basic amino acids, lysine, ornithine and arginine, can be used as amino acids.

«Циклоалкил» означает не ароматическую моно- или полициклическую систему, включающую от 3 до 10 атомов углерода. Циклоалкил может иметь один или несколько «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными. Представителями циклоалкильных групп являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, декалин, адамант-1-ил и т.п. Циклоалкил может быть аннелирован с ароматическим циклом или гетероциклом.“Cycloalkyl” means a non-aromatic mono- or polycyclic system containing from 3 to 10 carbon atoms. Cycloalkyl may have one or more "cyclic system substituents" which may be the same or different. Representatives of cycloalkyl groups are cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, decalin, adamant-1-yl, etc. Cycloalkyl can be annelated with an aromatic ring or a heterocycle.

Ранее был проведен синтез разнообразных гетероциклических диспиро соединений [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404.], а также биологические испытания этих соединений в экспериментах с клеточными линиями HepG2, Hek, MCF-7, SiHa, HCT p53(+,+) и HCT р53(-,-), РС3 и LNCap. Заявляемые соединения обладают выраженной активностью по отношению к клеточным линиям, экспрессирующим р53. Были найдены новые производные 2-сульфанилиден-1,3-тиазолидин-4-онов. Отсутствие в целевой молекуле кислого NH протона в роданиновом цикле по сравнению с известным тиогидантоиновым аналогом, делает целевую молекулу болеее устройчивой в щелочной и кислой среде. Кроме того, меньшая электроотрицательность атома серы по сравнению с азотом препятствует протеканию гидролиза тионного фрагмента до карбонильного в водных растворах в кислых и щелочных условиях, что осложняет использование близких соединений-прототипов в условиях, близких к физиологическим. Также была проведена оптимизация способа получения 2-сульфанилиден-1,3-тиазолидин-4-онов в виде оснований и фармакологически приемлемых солей и гидратов, обладающие свойствами низкомолекулярных ингибиторов белок-белкового взаимодействия MDM2/p53. Получение данных соединений является экономичным и включает в себя две-пять стадий в зависимости от заместителей, не требует применения больших объемов растворителей, в ходе реакции сразу образуется оптически-активная молекула, которая не требует применения дорогостоящих хиральных катализаторов и дальнейшего разделения на хиральных колонках. Эффективность по отношению к белку р53 подтверждается активностью как активностью на опухолевых клеточных линиях, экспрессирующих данный белок (MCF7, А549 и SN12C), так и полным отсутствием цитотоксического эффекта на нераковых клеточных линиях HEK293T и VA13. Дополнительно для соединений данного типа была проведена оценка цитотоксичности и селективности по отношению к 60 различным опухолевым клеточным линиям (National Cancer Institute, USA), которая продемонстировала селективность диспироиндолинонов по отноешнию к клеточным линиям рака почек SN12C.Previously, the synthesis of various heterocyclic dispiro compounds was carried out [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404.], as well as biological tests of these compounds in experiments with cell lines HepG2, Hek, MCF-7, SiHa, HCT p53 (+, +) and HCT p53 (-, -), PC3 and LNCap. The compounds according to the invention have a pronounced activity against cell lines expressing p53. New derivatives of 2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-4-ones have been found. The absence of an acidic NH proton in the target molecule in the rhodanine cycle, in comparison with the known thiohydantoin analog, makes the target molecule more resilient in alkaline and acidic environments. In addition, the lower electronegativity of the sulfur atom in comparison with nitrogen prevents the hydrolysis of the thionic fragment to the carbonyl fragment in aqueous solutions under acidic and alkaline conditions, which complicates the use of closely related prototype compounds under conditions close to physiological. The optimization of the method for producing 2-sulfanilidene-1,3-thiazolidin-4-ones in the form of bases and pharmacologically acceptable salts and hydrates, which have the properties of low molecular weight inhibitors of protein-protein interaction MDM2 / p53, was also carried out. The preparation of these compounds is economical and includes two to five stages, depending on the substituents, does not require the use of large volumes of solvents; during the reaction, an optically active molecule is immediately formed, which does not require the use of expensive chiral catalysts and further separation on chiral columns. The efficacy against the p53 protein is confirmed by the activity both on tumor cell lines expressing this protein (MCF7, A549, and SN12C), and the complete absence of cytotoxic effect on the non-cancerous cell lines HEK293T and VA13. Additionally, cytotoxicity and selectivity for 60 different tumor cell lines (National Cancer Institute, USA) was assessed for compounds of this type, which demonstrated the selectivity of dyspiroindolinones in relation to SN12C kidney cancer cell lines.

Известно, что применяемые ингибиторы белок-белкового взаимодействия р53-MDM2 в экспериментах на аналогичных клеточных линиях показывают худшую активность [Zhao, Y.; Liu, L.; Sun, W.; Lu, J.; McEachern, D.; Li, X.; Yu, S.; Bernard, D.; Ochsenbein, P.; Ferey, V.; Carry, J.-C; Deschamps, J.R.; Sun, D.; Wang, S. Diastereomeric spirooxindoles as highly potent and efficacious MDM2 inhibitors. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223- 7734], однако в настоящее время они проходят дальнейшие клинические испытания в терапии онкологических заболеваний, что свидетельствует о перспективности исследуемых в настоящей заявке ингибиторов. В настоящий момент, на основании предложенной ранее методики получения диспиропроизводных на основе 2-арил-5-арилметилидензамещенных тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404] была произведена их оптимизация и получены новые ингибиторы p53-MDM2 взаимодействия на основе 2-сульфанилиден-1,3-тиазолидин-4-онов. В ходе оптимизации было подобрано соотношение реагентов на конечной стадии образования диспиропрозводного, заключающееся в двукратном избытке изатина и саркозина по отношению к исходному 2-сульфанилиден-1,3-тиазолидин-4-онов; был оптимизирован порядок добавления реагентов (первоначальное добавлениие саркозина в кипящий раствор с последующим добавлением изатина, а также улучшение биодоступности и цитотоксичности путем варьирования заместителей в молекуле. Полученные параметры позволили улучить выходы конечных ингибиторов в 1,5-3 раза, а также улучшить значения цитотоксичности на два порядка.It is known that the used inhibitors of protein-protein interaction p53-MDM2 in experiments on similar cell lines show the worst activity [Zhao, Y .; Liu, L .; Sun, W .; Lu, J .; McEachern, D .; Li, X .; Yu, S .; Bernard, D .; Ochsenbein, P .; Ferey, V .; Carry, J.-C; Deschamps, J.R .; Sun, D .; Wang, S. Diastereomeric spirooxindoles as highly potent and efficacious MDM2 inhibitors. J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 7223-7734], however, they are currently undergoing further clinical trials in the treatment of oncological diseases, which indicates the promise of the inhibitors investigated in this application. At the moment, on the basis of the previously proposed method of obtaining dispiro derivatives based on 2-aryl-5-arylmethylidene-substituted tetrahydro-4H-imidazol-4-ones [Yan A. Ivanenkov, et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 25, 2, 2015, 404], they were optimized and new inhibitors of p53-MDM2 interaction based on 2-sulfanilidene-1,3-thiazolidin-4-ones were obtained. In the course of optimization, the ratio of the reagents at the final stage of the formation of the dispiroprosovate was selected, which consists in a twofold excess of isatin and sarcosine in relation to the initial 2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-4-ones; the order of addition of the reagents was optimized (the initial addition of sarcosine to the boiling solution followed by the addition of isatin, as well as the improvement of bioavailability and cytotoxicity by varying the substituents in the molecule. two orders.

Для получения заявляемых соединений 1±0.1 экв. соответствующего тиазолидин-4-она растворяют в толуоле, взятом в количестве 10 мл на 0.5±0.1 ммоль и кипятят при температуре 100±10°С в течение 10±2 минут после закипания образовавшегося раствора, затем в кипящую смесь добавляют саркозин, взятый из расчета 2±0.2 экв. и соответствующего изатина, взятого в количестве 2±0.2 экв по отношению к соответствующему тиазолидин-4-ону. Полученную смесь кипят до окончания реакции, окончание реакции определяют по возникновению пятна нового продукта на ТСХ в системе петролейный эфир : этилацетат = 3:1. В среднем реакция протекает в течение 6±2 часов. После охлаждения смеси до комнатной температуры на воздухе наблюдают выпадение белого осадка. Затем выпавший осадок отфильтровывают на вакууме со стеклянным пористым фильтром и колбой Бунзена.To obtain the claimed compounds 1 ± 0.1 eq. the corresponding thiazolidin-4-one is dissolved in toluene, taken in an amount of 10 ml per 0.5 ± 0.1 mmol and boiled at a temperature of 100 ± 10 ° C for 10 ± 2 minutes after the resulting solution boils, then sarcosine is added to the boiling mixture, taken from the calculation 2 ± 0.2 equiv. and the corresponding isatin, taken in an amount of 2 ± 0.2 equiv in relation to the corresponding thiazolidin-4-one. The resulting mixture is boiled until the end of the reaction, the end of the reaction is determined by the appearance of a spot of a new product on TLC in the system petroleum ether: ethyl acetate = 3: 1. On average, the reaction proceeds within 6 ± 2 hours. After cooling the mixture to room temperature in air, a white precipitate was observed to form. Then the precipitate that formed is filtered off under vacuum with a porous glass filter and a Bunsen flask.

Общая схема синтеза получаемых соединений исходя из 3-замещенных тиазолидин-4-онов представлена на следующей синтетической схеме:The general scheme for the synthesis of the obtained compounds based on 3-substituted thiazolidin-4-ones is presented in the following synthetic scheme:

Таким образом, за счет использования двукратного избытка компонентов на конечной стадии, последовательности введения реагентов, экологичной температуры 100±10°С, были синтезированы диспиропроизводные на основе 2-сульфанилиден-1,3-тиазолидин-4-онов. Цитотоксичность получаемых соединений была оценена не только на клеточных линиях экспрессирующих белок р53, в частности линия раковых клеток молочной железы MCF-7, линию аденокарциномы легких человека А549 и линию клеток рака почек SN12C, но и на нераковых клеточных линиях почек VA13 и эмбриональных трансфицированных клеток почек НЕК293Т.Thus, due to the use of a twofold excess of components at the final stage, the sequence of the introduction of reagents, an environmentally friendly temperature of 100 ± 10 ° C, the dispiro derivatives based on 2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-4-ones were synthesized. The cytotoxicity of the obtained compounds was evaluated not only on cell lines expressing the p53 protein, in particular the MCF-7 breast cancer cell line, the A549 human lung adenocarcinoma line and the SN12C kidney cancer cell line, but also on non-cancerous VA13 kidney cell lines and embryonic transfected kidney cells HEK293T.

Для получения солей была использована методика, разработанная авторами ранее [Белоглазкина Е.К., Белоглазкина А.А. Кукушкин М.Е., Мажуга А.Г, Иваненков Я.А., заявка РФ №2015113026/04(020403) от 9.04.2015].To obtain salts, a technique was used that was developed by the authors earlier [Beloglazkina EK, Beloglazkina AA. Kukushkin M.E., Mazhuga A.G., Ivanenkov Ya.A., RF application No. 2015113026/04 (020403) dated 9.04.2015].

Фармацевтические композиции могут включать фармацевтически приемлемые эксципиенты. Под фармацевтически приемлемым эксципиентами подразумеваются применяемые в сфере фармацевтики разбавители, вспомогательные агенты и/или носители. Фармацевтическая композиция наряду с соединением общей формулы 1, или его фармацевтически приемлемой солью и/или гидратом по настоящему изобретению, может включать и другие активные субстанции, в том числе обладающие противоопухолевой активностью, при условии, что они не вызывают нежелательных эффектов.Pharmaceutical compositions can include pharmaceutically acceptable excipients. By pharmaceutically acceptable excipients is meant diluents, auxiliary agents and / or carriers used in the pharmaceutical field. The pharmaceutical composition along with the compound of general formula 1, or its pharmaceutically acceptable salt and / or hydrate according to the present invention, may include other active substances, including those with antitumor activity, provided that they do not cause undesirable effects.

При необходимости использования фармацевтической композиции по настоящему изобретению в клинической практике она может смешиваться с традиционными фармацевтическими носителями.If necessary, the use of the pharmaceutical composition of the present invention in clinical practice, it can be mixed with conventional pharmaceutical carriers.

Носители, используемые в фармацевтических композиций по настоящему изобретению, представляют собой носители, которые применяются в сфере фармацевтики для получения распространенных форм, в том числе: в пероральных формах используются связующие вещества, смазывающие агенты, дезинтеграторы, растворители, разбавители, стабилизаторы, суспендирующие агенты, бесцветные агенты, корригенты вкуса; в формах для инъекций используются антисептические агенты, солюбилизаторы, стабилизаторы; в местных формах используются основы, разбавители, смазывающие агенты, антисептические агенты.The carriers used in the pharmaceutical compositions of the present invention are those used in the pharmaceutical field to produce common forms, including: in oral forms, binders, lubricants, disintegrants, solvents, diluents, stabilizers, suspending agents, colorless agents, flavoring agents; antiseptic agents, solubilizers, stabilizers are used in injection forms; in local forms, bases, diluents, lubricants, antiseptic agents are used.

Лекарственное средство для профилактики и лечения пролиферативных заболеваний, связанных с белок-белковым взаимодействием MDM2/p53, а именно рак простаты и колоректальный рак, являющиеся наиболее распространенными заболеваниями данного типа, в виде таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, содержащее в эффективном количестве активный компонент или фармацевтическую композицию по настоящему изобретению.A drug for the prevention and treatment of proliferative diseases associated with protein-protein interactions MDM2 / p53, namely prostate cancer and colorectal cancer, which are the most common diseases of this type, in the form of tablets, capsules or injections, placed in a pharmaceutically acceptable package containing in an effective amount of the active ingredient or pharmaceutical composition of the present invention.

В соответствии с данным изобретением способ профилактики или лечения пролиферативных заболеваний, связанных с белок-белковым взаимодействием MDM2/p53 у животных и людей, заключается во введении пациенту нового лекарственного средства или новой фармацевтической композиции.In accordance with this invention, a method for the prevention or treatment of proliferative diseases associated with protein-protein interactions MDM2 / p53 in animals and humans, consists in the introduction to the patient of a new drug or new pharmaceutical composition.

Лекарственные средства могут вводиться перорально или парентерально (например, внутривенно, подкожно, внутрибрюшинно или местно). Клиническая дозировка средства, содержащего соединение общей формулы 1, у пациентов может корректироваться в зависимости от терапевтической эффективности и биодоступности активных ингредиентов в организме, скорости их обмена и выведения из организма, а также в зависимости от возраста, пола и стадии заболевания пациента, при этом суточная доза у взрослых обычно составляет 10~500 мг, предпочтительно - 50~300 мг. Поэтому во время приготовления из фармацевтической композиции лекарственного средства по настоящему изобретению в виде единиц дозировки необходимо учитывать вышеназванную эффективную дозировку, при этом каждая единица дозировки препарата должна содержать 10~500 мг средства общей формулы 1, предпочтительно - 50~300 мг. В соответствии с указаниями врача или фармацевта данные препараты могут приниматься несколько раз в течение определенных промежутков времени (предпочтительно - от одного до шести раз) до достижения терапевтического эффекта.Medicines can be administered orally or parenterally (eg, intravenously, subcutaneously, intraperitoneally, or topically). The clinical dosage of the agent containing the compound of the general formula 1 in patients can be adjusted depending on the therapeutic efficacy and bioavailability of the active ingredients in the body, the rate of their metabolism and excretion from the body, as well as depending on the age, sex and stage of the patient's disease, while the daily the adult dose is usually 10 ~ 500 mg, preferably 50 ~ 300 mg. Therefore, during the preparation of the drug according to the present invention from the pharmaceutical composition in the form of dosage units, it is necessary to take into account the above-mentioned effective dosage, while each dosage unit of the drug should contain 10 ~ 500 mg of the agent of general formula 1, preferably 50 ~ 300 mg. In accordance with the instructions of a physician or pharmacist, these drugs can be taken several times during certain periods of time (preferably from one to six times) until a therapeutic effect is achieved.

Представленные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают настоящее изобретение.The examples below illustrate but do not limit the present invention.

Пример 1. Получение 4'-(2-хлорфенил)-1'-метил-4''-(проп-2-ен-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.1).Example 1. Obtaining 4 '- (2-chlorophenyl) -1'-methyl-4' '- (prop-2-en-1-yl) -5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indol-3, 2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.1).

Смесь 0.1 г (1.0 ммоль, 1±0.1 экв.) соответствующего (Z)-3-аллил-5-(2-хлорбензилиден)-2-тиоксотиазолидин-4-она растворяли в 10 мл толуола и кипятили в течение 10 минут при температуре 80°С, после чего добавляли 0.06 г (2.0 ммоль, 2±0.2 экв.) саркозина и 0.15 г (2.0 ммоль, 2±0.2 экв.) 5-бромизатина и кипятили в течение 7 часов (окончание реакции определяют по ТСХ). Затем выпавший осадок отфильтровывали и промывали при необходимости спиртом. Выход составил 59%. Т_пл=256°С.A mixture of 0.1 g (1.0 mmol, 1 ± 0.1 eq.) Of the corresponding (Z) -3-allyl-5- (2-chlorobenzylidene) -2-thioxothiazolidin-4-one was dissolved in 10 ml of toluene and refluxed for 10 minutes at a temperature 80 ° С, after which 0.06 g (2.0 mmol, 2 ± 0.2 eq.) Of sarcosine and 0.15 g (2.0 mmol, 2 ± 0.2 eq.) Of 5-bromisatin were added and the mixture was refluxed for 7 hours (the end of the reaction was determined by TLC). Then the precipitate that formed was filtered off and washed, if necessary, with alcohol. The yield was 59%. T _pl = 256 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.05 (с, 1Н, NH-индолинон), 7.78 (д, J=7.8 Гц, 1Н, Ar), 7.42-7.53 (м, 3Н, Ar), 7.35 (т, J=7.8 Гц, 1Н, Ar), 7.19 (s, 1Н, Ar), 6.82 (д, J=8.2 Гц, 1Н, Ar), 5.45-5.57 (м, 1Н, allyl), 5.05 (д, J=10.4 Гц, 1Н, allyl), 4.66 (т, J=8.2 Гц, 1Н, пирролидин-Н³), 4.76 (д, J=17.4 Гц, 1H, allyl), 4.37 (д, J=4.3 Гц, 2Н, allyl), 4.08 (т, J=9.0 Гц, 1H, allyl, пирролидин-Н²), 3.56 (т, J=7.8 Гц, 1Н, СН, пирролидин-Н¹), 2.14 (с, 3Н, NCH₃). Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₃H₁₉BrClN₃O₂S₂, М+Н: 546.9831, масса найденная (М+Н): 546.9837. ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.05 (s, 1H, NH-indolinone), 7.78 (d, J = 7.8 Hz, 1H, Ar), 7.42-7.53 (m , 3H, Ar), 7.35 (t, J = 7.8 Hz, 1H, Ar), 7.19 (s, 1H, Ar), 6.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H, Ar), 5.45-5.57 (m, 1H , allyl), 5.05 (d, J = 10.4 Hz, 1H, allyl), 4.66 (t, J = 8.2 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 4.76 (d, J = 17.4 Hz, 1H, allyl), 4.37 (d, J = 4.3 Hz, 2H, allyl), 4.08 (t, J = 9.0 Hz, 1H, allyl, pyrrolidine-H ² ), 3.56 (t, J = 7.8 Hz, 1H, CH, pyrrolidine-H ¹ ) , 2.14 (s, 3H, NCH ₃ ). High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₃ H ₁₉ BrClN ₃ O ₂ S ₂ , M + H: 546.9831, found mass (M + H): 546.9837.

Пример 2. Получение 5-бром-4'-(3-хлорфенил)-1'-метил-4''-(проп-2-ен-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.2).Example 2. Obtaining 5-bromo-4 '- (3-chlorophenyl) -1'-methyl-4 "- (prop-2-en-1-yl) -5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [ indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.2).

В результате реакции 0.1 г (1 ммоль) соответствующего роданина, 0.12 г (2 ммоль) 5-бромизатина и 0.06 г (2 ммоль) саркозина получили 0.13 г (81%) соединения в виде белого порошка. Тпл=210°С.The reaction of 0.1 g (1 mmol) of the corresponding rhodanine, 0.12 g (2 mmol) of 5-bromisatin, and 0.06 g (2 mmol) of sarcosine gave 0.13 g (81%) of the compound as a white powder. Mp = 210 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.07 (с, 1H, NH-индолинон), 7.55 (с, 1Н, Ar), 7.36-7.42 (м, 4Н, Ar), 7.06 (д, J=2.2 Гц, 1Н, Ar), 6.88 (д, J=8.3 Гц, 1Н, Ar), 5.38-5.48 (м, 1Н, Allyl), 4.96 (д, J=10.4 Гц, 1H, Allyl), 4.58 (д, J=17.2 Гц, 1Н, Allyl), 4.45 (т, J=8.7 Гц, 1Н, пирролидин-Н3), 4.37 (м, 2Н, Allyl), 3.80 (т, J=9.6 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.58 (т, J=8.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.11 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.07 (s, 1H, NH-indolinone), 7.55 (s, 1H, Ar), 7.36-7.42 (m, 4H, Ar) , 7.06 (d, J = 2.2 Hz, 1H, Ar), 6.88 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 5.38-5.48 (m, 1H, Allyl), 4.96 (d, J = 10.4 Hz, 1H , Allyl), 4.58 (d, J = 17.2 Hz, 1H, Allyl), 4.45 (t, J = 8.7 Hz, 1H, pyrrolidine-H3), 4.37 (m, 2H, Allyl), 3.80 (t, J = 9.6 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.58 (t, J = 8.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.11 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₃H₁₉Cl₂N₃O₂S₂, М+Н: 503.0347, масса найденная (М+Н): 503.0343.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₃ H ₁₉ Cl ₂ N ₃ O ₂ S ₂ , M + H: 503.0347, found mass (M + H): 503.0343.

Пример 3. Получение 5-хлор-4'-(4-хлорфенил)-1'-метил-4''-(проп-2-ен-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.3).Example 3. Obtaining 5-chloro-4 '- (4-chlorophenyl) -1'-methyl-4' '- (prop-2-en-1-yl) -5' '- sulfanilidene-1,2-dihydrodispiro [ indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.3).

В результате реакции 0.1 г (1 ммоль) соответствующего роданина, 0.15 г (2 ммоль) 5-бромизатина и 0.06 г (2 ммоль) саркозина получили 0.13 г (78%) соединения в виде белого порошка. Тпл=245°С.As a result of the reaction of 0.1 g (1 mmol) of the corresponding rhodanine, 0.15 g (2 mmol) of 5-bromisatin, and 0.06 g (2 mmol) of sarcosine, 0.13 g (78%) of the compound was obtained in the form of a white powder. Mp = 245 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.08 (с, 1H, NH-индолинон), 7.49 (дд, J₁=2.2 Гц, J₂=8.3 Гц, 1H, Ar), 7.45 (м, 4Н, Ar), 7.19 (д, J=2.0 Гц, 1Н, Ar), 6.82 (д, J=8.3 Гц, 1H, Ar), 5.40-5.50 (м, 1Н, Allyl), 4.98 (д, J=10.4 Гц, 1Н, Allyl), 4.58 (д, J=17.2 Гц, 1Н, Allyl), 4.45 (т, J=8.9 Гц, 1Н, пирролидин-Н³), 4.37 (д, J=5.1 Гц, 2Н, Allyl), 3.82 (т, J=9.6 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.56 (т, J=8.5 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.11 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.08 (s, 1H, NH-indolinone), 7.49 (dd, J ₁ = 2.2 Hz, J ₂ = 8.3 Hz, 1H, Ar ), 7.45 (m, 4H, Ar), 7.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H, Ar), 6.82 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 5.40-5.50 (m, 1H, Allyl), 4.98 (d, J = 10.4 Hz, 1H, Allyl), 4.58 (d, J = 17.2 Hz, 1H, Allyl), 4.45 (t, J = 8.9 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 4.37 (d, J = 5.1 Hz, 2H, Allyl), 3.82 (t, J = 9.6 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.56 (t, J = 8.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.11 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C23H19BrClN3O2S2, М+Н: 546.9831, масса найденная (М+Н): 546.9831.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C23H19BrClN3O2S2, M + H: 546.9831, found mass (M + H): 546.9831.

Пример 4. Получение 5-бром-4'-(2-хлорфенил)-1'-метил-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.4).Example 4. Preparation of 5-bromo-4 '- (2-chlorophenyl) -1'-methyl-4 "- phenyl-5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.4).

Смесь 0.06 г (0.5 ммоль, 1±0.1 экв.) соответствующего (Z)-3-аллил-5-(2-хлорбензилиден)-2-тиоксотиазолидин-4-она растворяли в 10 мл толуола и кипятили в течение 10 минут при температуре 80°С, после чего добавляли 0.03 г (1.0 ммоль, 2±0.2 экв.) саркозина и 0.08 г (1.0 ммоль, 2±0.2 экв.) 5-бромизатина и кипятили в течение 7 часов (окончание реакции определяют по ТСХ). Затем выпавший осадок отфильтровывали и промывали при необходимости спиртом. Выход составил 84%. Т_пл=258°С.A mixture of 0.06 g (0.5 mmol, 1 ± 0.1 eq.) Of the corresponding (Z) -3-allyl-5- (2-chlorobenzylidene) -2-thioxothiazolidin-4-one was dissolved in 10 ml of toluene and boiled for 10 minutes at a temperature 80 ° С, after which 0.03 g (1.0 mmol, 2 ± 0.2 eq.) Of sarcosine and 0.08 g (1.0 mmol, 2 ± 0.2 eq.) Of 5-bromisatin were added and the mixture was refluxed for 7 hours (the end of the reaction was determined by TLC). Then the precipitate that formed was filtered off and washed, if necessary, with alcohol. The yield was 84%. T _pl = 258 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.12 (с, 1Н, NH-индолинон), 7.82 (д, J=7.8 Гц, 1Н, Ar), 7.62 (дд, J₁=1.8 Гц, J₂=8.3 Гц, 1Н, Ar), 7.56-7.53 (м, 5Н, Ar), 7.48 (т, J=7.7 Гц, 1Н, Ar), 7.39 (т, J=7.7 Гц, 1H, Ar), 7.12 (д, J=1.7 Гц, 1Н, Ar), 6.91 (д, J=8.3 Гц, 2Н, Ar), 4.88 (т, J=8.5 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 4.14 (т, J=8.7 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.58 (т, J=8.7 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.17 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.12 (s, 1H, NH-indolinone), 7.82 (d, J = 7.8 Hz, 1H, Ar), 7.62 (dd, J ₁ = 1.8 Hz, J ₂ = 8.3 Hz, 1H, Ar), 7.56-7.53 (m, 5H, Ar), 7.48 (t, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.39 (t, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.12 (d, J = 1.7 Hz, 1H, Ar), 6.91 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 4.88 (t, J = 8.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 4.14 (t, J = 8.7 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.58 (t, J = 8.7 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.17 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₆H₁₉BrClN₃O₂S₂, М+Н: 582.9783, масса найденная (М+Н): 582.9785.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₆ H ₁₉ BrClN ₃ O ₂ S ₂ , M + H: 582.9783, found mass (M + H): 582.9785.

Пример 5. Получение 5-бром-1'-метил-4'-(2-метилфенил)-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.5).Example 5. Obtaining 5-bromo-1'-methyl-4 '- (2-methylphenyl) -4 "- phenyl-5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.5).

В результате реакции 0.1 г (0.7 ммоль) соответствующего роданина, 0.145 г (1.4 ммоль) 5-бромизатина и 0.057 г (1.4 ммоль) саркозина получили 0.18 г (65%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе ПЭ:ЭА=20:1-5:1.Т_пл=271°С.As a result of the reaction of 0.1 g (0.7 mmol) of the corresponding rhodanine, 0.145 g (1.4 mmol) of 5-bromisatin, and 0.057 g (1.4 mmol) of sarcosine, 0.18 g (65%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in the PE: EA = 20: 1-5: 1 system, _mp = 271 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.12 (с, 1H, NH-индолинон), 7.74 (д, J=8.0 Гц, 1Н, Ar), 7.62 (д, J=8.0 Гц, 1H, Ar), 7.50 (с, 3Н, Ar), 7.29-7.32 (м, 1H, Ar), 7.21-7.23 (м, 4Н, Ar), 7.08 (с, 1Н, Ar), 6,91 (д, J=8.1 Гц, 1Н, Ar), 4.82 (т, J=8.2 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 4.00 (т, J=8.1 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.52 (т, J=8.5 Гц, 2Н, пирролидин-Н¹), 2.23 (с, 3Н, CH₃),2.15 (c, 3H, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.12 (s, 1H, NH-indolinone), 7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H, Ar), 7.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H, Ar), 7.50 (s, 3H, Ar), 7.29-7.32 (m, 1H, Ar), 7.21-7.23 (m, 4H, Ar), 7.08 (s, 1H, Ar), 6 , 91 (d, J = 8.1 Hz, 1H, Ar), 4.82 (t, J = 8.2 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 4.00 (t, J = 8.1 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.52 (t, J = 8.5 Hz, 2H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.23 (s, 3H, CH ₃ ), 2.15 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₇H₂₂BrN₃O₂S₂, М+Н: 563.0325, масса найденная (М+Н): 563.0327.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₇ H ₂₂ BrN ₃ O ₂ S ₂ , M + H: 563.0325, found mass (M + H): 563.0327.

Пример 6. Получение 4'-(4-этилфенил)-1'-метил-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.6).Example 6. Preparation of 4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-4 "- phenyl-5" - sulfanilidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3', 2 ' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.6).

В результате реакции 0.1 г (0.7 ммоль) соответствующего роданина, 0.145 г (1.4 ммоль) 5-бромизатина и 0.057 г (1.4 ммоль) саркозина получили 0.11 г (64%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=246°С.As a result of the reaction of 0.1 g (0.7 mmol) of the corresponding rhodanine, 0.145 g (1.4 mmol) of 5-bromisatin, and 0.057 g (1.4 mmol) of sarcosine, 0.11 g (64%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 246 ° C.

Спектр ¹H ЯМР (DMSO-d₆,400 МГц, δ, м.д): 11.13 (с, 1Н, NH-индолинон), 7.60 (дд, J₁=8.2 Гц, J₂=1.9 Гц, 1Н, Ar), 7.42-7.48 (м, 7Н, Ar), 7.24 (д, J=7.9 Гц, 2Н, Ar), 7.06 (д, J=1.9 Гц, 1Н, Ar), 6,91 (д, J=8.3 Гц, 1Н, Ar), 4.51 (т, J=8.8 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 3.87 (т, J=9.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.54 (т, J=8.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.61 (кв, J=7.5 Гц, 2Н, СН₂), 2.12 (с, 3Н, NCH₃), 1.18 (т, J=7.6 Гц, 3Н, СН₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.13 (s, 1H, NH-indolinone), 7.60 (dd, J ₁ = 8.2 Hz, J ₂ = 1.9 Hz, 1H, Ar ), 7.42-7.48 (m, 7H, Ar), 7.24 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 7.06 (d, J = 1.9 Hz, 1H, Ar), 6.91 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 4.51 (t, J = 8.8 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.87 (t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.54 (t, J = 8.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.61 (q, J = 7.5 Hz, 2H, CH ₂ ), 2.12 (s, 3H, NCH ₃ ), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H, CH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₈H₂₄BrN₃O₂S₂, М+Н: 577.0549, масса найденная (М+Н): 577.0545.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₈ H ₂₄ BrN ₃ O ₂ S ₂ , M + H: 577.0549, found mass (M + H): 577.0545.

Пример 7. Получение 5-бром-4'-(3,4-диметоксифенил)-1'-метил-4''-фенил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.7).Example 7. Preparation of 5-bromo-4 '- (3,4-dimethoxyphenyl) -1'-methyl-4 "- phenyl-5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine -3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.7).

В результате реакции 0.19 г (1.1 ммоль) соответствующего роданина, 0.37 г (2.2 ммоль) 5-бромизатина и 0.146 г (2.2 ммоль) саркозина получили 0.18 г (54%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:МеОН=40:1. Т_пл=229°С.As a result of the reaction of 0.19 g (1.1 mmol) of the corresponding rhodanine, 0.37 g (2.2 mmol) of 5-bromisatin, and 0.146 g (2.2 mmol) of sarcosine, 0.18 g (54%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : MeOH = 40: 1. T _pl = 229 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.15 (с, 1H, NH-индолинон), 7.60 (д, J=8.3 Гц, 1Н, Ar), 7.48 (с, 5Н, Ar), 7.25 (с, 1Н, Ar), 7.06 (с, 1Н, Ar), 7.03 (д, J=8.3 Гц, 1Н, Ar), 6.90-6.96 (м, 2Н, Ar), 4.47 (т, J=8.7 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 3.85 (т, J=9.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.78 (с, 3Н, ОСН₃), 3.75 (с, 3Н, ОСН₃), 3.56 (т, J=8.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.17 (с, 3H, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.15 (s, 1H, NH-indolinone), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 7.48 (s, 5H , Ar), 7.25 (s, 1H, Ar), 7.06 (s, 1H, Ar), 7.03 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 6.90-6.96 (m, 2H, Ar), 4.47 (t , J = 8.7 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.85 (t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.78 (s, 3H, OCH ₃ ), 3.75 (s, 3H, OCH ₃ ) , 3.56 (t, J = 8.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.17 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₈H₂₄BrN₃O₄S₂, М+Н: 609.0427, масса найденная (М+Н): 609.0429.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₈ H ₂₄ BrN ₃ O ₄ S ₂ , M + H: 609.0427, found mass (M + H): 609.0429.

Пример 8. Получение 4''-(4-этоксифенил)-4'-(4-метоксифенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.8).Example 8. Obtaining 4 "- (4-ethoxyphenyl) -4 '- (4-methoxyphenyl) -1'-methyl-5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.8).

В результате реакции 0.2 г (1 ммоль) соответствующего роданина, 0.18 г (1 ммоль) 5-бромизатина и 0.09 г (1 ммоль) саркозина получили 0.22 г (74%) соединения в виде белого порошка. Т_пл=267°С.As a result of the reaction of 0.2 g (1 mmol) of the corresponding rhodanine, 0.18 g (1 mmol) of 5-bromisatin, and 0.09 g (1 mmol) of sarcosine, 0.22 g (74%) of the compound were obtained in the form of a white powder. T _pl = 267 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.14 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.58 (д, J=8.2 Гц, 4Н, Ar), 7.43-7.51 (м, 3Н, Ar), 6.89-7.01 (м, 4Н, Ar), 4.56 (т, J=8.4 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 4.37 (т, J=8.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 4.05 (кв, J=6.9 Гц, 2Н, ОСН₂), 3.58 (т, J=9.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.13 (с, 3Н, NCH₃), 1.33 (т, J=7.0 Гц, 3Н, СН₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.14 (us, 1H, NH-indolinone), 7.58 (d, J = 8.2 Hz, 4H, Ar), 7.43-7.51 (m , 3H, Ar), 6.89-7.01 (m, 4H, Ar), 4.56 (t, J = 8.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 4.37 (t, J = 8.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ) , 4.05 (q, J = 6.9 Hz, 2H, OCH ₂ ), 3.58 (t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.13 (s, 3H, NCH ₃ ), 1.33 (t, J = 7.0 Hz, 3H, CH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₈H₂₃Cl₂N₃O₃S₂, М+Н: 583.0631, масса найденная (М+Н): 583.0633.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₈ H ₂₃ Cl ₂ N ₃ O ₃ S ₂ , M + H: 583.0631, found mass (M + H): 583.0633.

Пример 9. Получение 5-хлор-4'-(4-хлорфенил)-4''-(4-этоксифенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.9).Example 9. Obtaining 5-chloro-4 '- (4-chlorophenyl) -4 "- (4-ethoxyphenyl) -1'-methyl-5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2' -pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.9).

В результате реакции 0.2 г (1 ммоль) роданина, 0.27 г (1 ммоль) 5-бромизатина и 0.09 г (1 ммоль) саркозина получили 0.1 г (30%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=239°С.As a result of the reaction of 0.2 g (1 mmol) of rhodanine, 0.27 g (1 mmol) of 5-bromisatin, and 0.09 g (1 mmol) of sarcosine, 0.1 g (30%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 239 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.12 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.70 (д, J=8.8 Гц, 2Н, Ar), 7.58 (дд, J₁=6.3 Гц, J₂=2.1 Гц, 1H, Ar), 7.46 (д, J=8.8 Гц, 2Н, Ar), 7.01 (с, 2Н, Ar), 6.95 (д, J=8.8 Гц, 2Н, Ar), 6.90 (д, J=8.3 Гц, 2Н, Ar), 4.48 (т, J=9.3 Гц, 1Н, пирролидин-Н³), 3.82 (т, J=9.3 Гц, 1H, пирролидин-Н²), 3.64 (с, 3Н, СН³), 3.54 (т, J=8.5 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.11 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.12 (us, 1H, NH-indolinone), 7.70 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Ar), 7.58 (dd, J ₁ = 6.3 Hz, J ₂ = 2.1 Hz, 1H, Ar), 7.46 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Ar), 7.01 (s, 2H, Ar), 6.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Ar), 6.90 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 4.48 (t, J = 9.3 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.82 (t, J = 9.3 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ) , 3.64 (s, 3H, CH ³ ), 3.54 (t, J = 8.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.11 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₇H₂₁Br₂N₃O₃S₂, М+Н: 656.9397, масса найденная (М+Н): 656.9393.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₇ H ₂₁ Br ₂ N ₃ O ₃ S ₂ , M + H: 656.9397, found mass (M + H): 656.9393.

Пример 10. Получение 4''-(4-бромфенил)-4'-(4-метоксифенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.10).Example 10. Preparation of 4 '' - (4-bromophenyl) -4 '- (4-methoxyphenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.10).

В результате реакции 0.2 г (1 ммоль) роданина, 0.15 г (1 ммоль) изатина и 0.09 г (1 ммоль) саркозина получили 0.15 г (52%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:МеОН=40:1. Т_пл=246°C.As a result of the reaction of 0.2 g (1 mmol) of rhodanine, 0.15 g (1 mmol) of isatin, and 0.09 g (1 mmol) of sarcosine, 0.15 g (52%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : MeOH = 40: 1. T _pl = 246 ° C.

Спектр ¹H ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 10.94 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.67 (д, J=8.8 Гц, 2Н, Ar), 7.61(д, J=8.1 Гц, 2Н, Ar), 7.45 (д, J=8.8 Гц, 2Н, Ar), 7.35-7.39 (м, 1H, Ar), 6.90-7.02 (м, 5Н, Ar), 4.50 (т, J=9.3 Гц, 1Н, пирролидин-Н³), 3.87 (т, J=9.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.76 (с, 3Н, СН₃), 3.52 (т, J=8.3 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.09 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 10.94 (us, 1H, NH-indolinone), 7.67 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Ar), 7.61 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ar), 7.45 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Ar), 7.35-7.39 (m, 1H, Ar), 6.90-7.02 (m, 5H, Ar), 4.50 (t, J = 9.3 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.87 (t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.76 (s, 3H, CH ₃ ), 3.52 (t, J = 8.3 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.09 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₇H₂₂BrN₃O₃S₂ М+Н: 579.0347, масса найденная (М+Н): 579.0349.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₇ H ₂₂ BrN ₃ O ₃ S ₂ M + H: 579.0347, found mass (M + H): 579.0349.

Пример 11. Получение 5-бром-4''-(4-бромфенил)-1'-метил-4'-(2-метилфенил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона(1.11).Example 11. Preparation of 5-bromo-4 "- (4-bromophenyl) -1'-methyl-4 '- (2-methylphenyl) -5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2' -pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.11).

В результате реакции 0.15 г (0.8 ммоль) роданина, 0.18 г (1.6 ммоль) 5-бромизатина и 0.08 г (1.6 ммоль) саркозина получили 0.15 г (58%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=207°С.As a result of the reaction of 0.15 g (0.8 mmol) of rhodanine, 0.18 g (1.6 mmol) of 5-bromisatin, and 0.08 g (1.6 mmol) of sarcosine, 0.15 g (58%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 207 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.12 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.72 (д, J=9.1 Гц, 3Н, Ar), 7.60 (дд, J₁=6.2 Гц, J₂=2.0 Гц, 1Н, Ar), 7.30 (д, J=7.7 Гц, 1Н, Ar), 7.19-7.25 (м, 3Н, Ar), 7.03 (с, 1Н, Ar), 6.91 (д, J=8.3 Гц, 2Н, Ar), 4.38 (т, J=8.0 Гц, 1Н, пирролидин-Н³), 3.97 (т, J=9.3 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.54 (т, J=8.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.24 (с, 3Н, СН₃), 2.14 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.12 (us, 1H, NH-indolinone), 7.72 (d, J = 9.1 Hz, 3H, Ar), 7.60 (dd, J ₁ = 6.2 Hz, J ₂ = 2.0 Hz, 1H, Ar), 7.30 (d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 7.19-7.25 (m, 3H, Ar), 7.03 (s, 1H, Ar), 6.91 (d, J = 8.3 Hz, 2H, Ar), 4.38 (t, J = 8.0 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.97 (t, J = 9.3 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.54 ( t, J = 8.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.24 (s, 3H, CH ₃ ), 2.14 (s, 3H, NCH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₇H₂₁Br₂N₃O₂S₂, М+Н: 640.9405, масса найденная (М+Н): 640.9407.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₇ H ₂₁ Br ₂ N ₃ O ₂ S ₂ , M + H: 640.9405, found mass (M + H): 640.9407.

Пример 12. Получение 4''-(4-бромфенил)-4'-(4-этилфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.12).Example 12. Preparation of 4 '' - (4-bromophenyl) -4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanilidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2' '- [1,4] thiazolidine] -2.3' '- dione (1.12).

В результате реакции 0.15 г (0.8 ммоль) роданина, 0.12 г (1.6 ммоль) изатина и 0.08 г (1.6 ммоль) саркозина получили 0.16 г (69%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=254°С.As a result of the reaction of 0.15 g (0.8 mmol) of rhodanine, 0.12 g (1.6 mmol) of isatin, and 0.08 g (1.6 mmol) of sarcosine, 0.16 g (69%) of the compound was obtained as a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 254 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 10.93 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.67 (д, J=8.8 Гц, 1Н, Ar), 7.43 (д, J=8.0 Гц, 2Н, Ar), 7.37 (д, J=8.0 Гц, 1Н, Ar),7.23 (д, J=7.9 Гц, 2Н, Ar), 6.97-7.02 (м, 4Н, Ar), 6.92 (д, J=7.7 Гц, 1Н, Ar), 6.92 (д, J=7.8 Гц, 1Н, Ar), 4.51 (т, J=9.1 Гц, 1Н, пирролидин-Н³), 3.89 (т, J=9.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.52 (т, J=8.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.60 (м, 2Н, СН₂), 2.10(с, 3Н, NCH₃), 1.18 (с, 3Н, СН₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 10.93 (us, 1H, NH-indolinone), 7.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H, Ar), 7.43 (d, J = 8.0 Hz, 2H, Ar), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H, Ar), 7.23 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ar), 6.97-7.02 (m, 4H, Ar), 6.92 ( d, J = 7.7 Hz, 1H, Ar), 6.92 (d, J = 7.8 Hz, 1H, Ar), 4.51 (t, J = 9.1 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.89 (t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.52 (t, J = 8.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.60 (m, 2H, CH ₂ ), 2.10 (s, 3H, NCH ₃ ), 1.18 (s , 3H, CH ₃ ).

Масс-спектр высокого разрешения (ESI, m/Z): масса рассчитанная для C₂₈H₂₄BrN₃O₂S₂, М+Н: 577.0541, масса найденная (М+Н): 577.0545.High resolution mass spectrum (ESI, m / Z): mass calculated for C ₂₈ H ₂₄ BrN ₃ O ₂ S ₂ , M + H: 577.0541, found mass (M + H): 577.0545.

Пример 13. Получение 5-бром-4',4''-бис(4-хлорфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.13).Example 13. Preparation of 5-bromo-4 ', 4' '- bis (4-chlorophenyl) -1'-methyl-5' '- sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2'-pyrrolidine-3' , 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.13).

В результате реакции 0.15 г (0.8 ммоль) роданина, 0.17 г (1.6 ммоль) 5-бромизатина и 0.08 г (1.6 ммоль) саркозина получили 0.25 г (97%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=232°С.As a result of the reaction of 0.15 g (0.8 mmol) of rhodanine, 0.17 g (1.6 mmol) of 5-bromisatin, and 0.08 g (1.6 mmol) of sarcosine, 0.25 g (97%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 232 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆,400 МГц, δ, м.д): 11.03 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.50-7.63 (м, 7Н, Ar), 7.39-7.48 (м, 2Н, Ar), 6.99 (д, J=7.2 Гц, 1Н, Ar), 7.89 (д, J=7.2 Гц, 1Н, Ar), 4.61 (т, J=9.1 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 3.79 (т, J=9.4 Гц, 1H, пирролидин-Н²), 3.56 (т, J=8.5 Гц, 1H, пирролидин-Н¹), 2.16 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.03 (us, 1H, NH-indolinone), 7.50-7.63 (m, 7H, Ar), 7.39-7.48 (m, 2H, Ar), 6.99 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7.89 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 4.61 (t, J = 9.1 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.79 ( t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.56 (t, J = 8.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.16 (s, 3H, NCH ₃ ).

Пример 14. Получение 5-бром-4''-(4-хлорфенил)-4'-(4-фторфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.14).Example 14. Preparation of 5-bromo-4 "- (4-chlorophenyl) -4 '- (4-fluorophenyl) -1'-methyl-5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2' -pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.14).

В результате реакции 0.14 г (0.8 ммоль) роданина, 0.17 г (1.6 ммоль) 5-бромизатина и 0.08 г (1.6 ммоль) саркозина получили 0.19 г (87%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=237°С.As a result of the reaction of 0.14 g (0.8 mmol) of rhodanine, 0.17 g (1.6 mmol) of 5-bromisatin, and 0.08 g (1.6 mmol) of sarcosine, 0.19 g (87%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 237 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.13 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.47-7.63 (м, 7Н, Ar), 7.17-7.25 (м, 2Н, Ar), 6.98 (д, J=7.1 Гц, 1H, Ar), 6.89 (д, J=7.1 Гц, 1H, Ar), 4.53 (т, J=9.6 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 3.79 (т, J=9.4 Гц, 1H, пирролидин-Н²), 3.56 (т, J=8.5 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.17 (с, 3Н, NCH₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.13 (us, 1H, NH-indolinone), 7.47-7.63 (m, 7H, Ar), 7.17-7.25 (m, 2H, Ar), 6.98 (d, J = 7.1 Hz, 1H, Ar), 6.89 (d, J = 7.1 Hz, 1H, Ar), 4.53 (t, J = 9.6 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.79 ( t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.56 (t, J = 8.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.17 (s, 3H, NCH ₃ ).

Пример 15. Получение 5-хлор-4''-(4-хлорфенил)-4'-(4-этилфенил)-1'-метил-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.15).Example 15. Preparation of 5-chloro-4 "- (4-chlorophenyl) -4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [indole-3,2' -pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.15).

В результате реакции 0.16 г (0.8 ммоль) роданина, 0.15 г (1.6 ммоль) 5-хлоризатина и 0.08 г (1.6 ммоль) саркозина получили 0.21 г (86%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=242°С.As a result of the reaction of 0.16 g (0.8 mmol) of rhodanine, 0.15 g (1.6 mmol) of 5-chloroisatin, and 0.08 g (1.6 mmol) of sarcosine, 0.21 g (86%) of the compound were obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 242 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 11.11 (ус, 1Н, NH-индолинон), 7.55 (д, J=8.5 Гц, 2Н, Ar), 7.46 (д, J=8.5 Гц, 1Н, Ar), 7.43 (д, J=7.7 Гц, 2Н, Ar),7.20-7.26 (м, 4Н, Ar), 6.94 (д, J=8.3 Гц, 1Н, Ar), 6.88 (д, J=8.3 Гц, 1Н, Ar), 4.50 (т, J=9.8 Гц, 1Н, пирролидин-Н³), 3.84 (т, J=9.4 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.53 (т, J=9.0 Гц, 1Н, пирролидин-Н¹), 2.59 (кв, J=7.6 Гц, 2Н, СН₂), 2.11 (с, 3Н, NCH₃), 1.12-1.22 (м, 3Н, СН₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 11.11 (us, 1H, NH-indolinone), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ar), 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 1H, Ar), 7.43 (d, J = 7.7 Hz, 2H, Ar), 7.20-7.26 (m, 4H, Ar), 6.94 (d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 6.88 ( d, J = 8.3 Hz, 1H, Ar), 4.50 (t, J = 9.8 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.84 (t, J = 9.4 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.53 (t, J = 9.0 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.59 (q, J = 7.6 Hz, 2H, CH ₂ ), 2.11 (s, 3H, NCH ₃ ), 1.12-1.22 (m, 3H, CH ₃ ).

Пример 16. Получение 4'-(4-этилфенил)-1'-метил-4''-фенил-1-(проп-2-ин-1-ил)-5''-сульфанилиден-1,2-дигидродиспиро[индол-3,2'-пирролидин-3',2''-[1,4]тиазолидин]-2,3''-диона (1.16).Example 16. Obtaining 4 '- (4-ethylphenyl) -1'-methyl-4 "- phenyl-1- (prop-2-yn-1-yl) -5" - sulfanylidene-1,2-dihydrodispiro [ indole-3,2'-pyrrolidine-3 ', 2 "- [1,4] thiazolidine] -2.3" - dione (1.16).

В результате реакции 0.17 г (0.8 ммоль) роданина, 0.19 г (1.6 ммоль) N-пропаргилизатина и 0.08 г (1.6 ммоль) саркозина получили 0.14 г (68%) соединения в виде белого порошка. Продукт очищали колоночной хроматографией в системе CHCl₃:ЭА=40:1. Т_пл=219°С.As a result of the reaction of 0.17 g (0.8 mmol) of rhodanine, 0.19 g (1.6 mmol) of N-propargylisatin, and 0.08 g (1.6 mmol) of sarcosine, 0.14 g (68%) of the compound was obtained in the form of a white powder. The product was purified by column chromatography in CHCl ₃ : EA = 40: 1. T _pl = 219 ° C.

Спектр ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц, δ, м.д): 7.77 (д, J=8.4 Гц, 1Н, Ar), 7.46-7.34 (м, 6Н, Ar), 7.23-7.01 (м, 4Н, Ar), 4.57-4.63 (м, 2Н), 4.46 (с, 1Н), 3.86 (т, J=9.5 Гц, 1H, пирролидин-Н³), 3.58 (т, J=8.5 Гц, 1Н, пирролидин-Н²), 3.51 (т, J=8.5 Гц, 1H, пирролидин-Н¹), 2.60 (м, 2Н, СН₂), 2.08 (с, 3Н, NCH₃), 1.17 (с, 3Н, СН₃). ¹ H NMR spectrum (DMSO-d ₆ , 400 MHz, δ, ppm): 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H, Ar), 7.46-7.34 (m, 6H, Ar), 7.23-7.01 (m , 4H, Ar), 4.57-4.63 (m, 2H), 4.46 (s, 1H), 3.86 (t, J = 9.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ³ ), 3.58 (t, J = 8.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ² ), 3.51 (t, J = 8.5 Hz, 1H, pyrrolidine-H ¹ ), 2.60 (m, 2H, CH ₂ ), 2.08 (s, 3H, NCH ₃ ), 1.17 (s, 3H, CH ₃ ).

Пример 31. Получение солей (в виде гидрохлоридов)Example 31. Obtaining salts (in the form of hydrochlorides)

Для получения солей диспиро-индолинонов формулы 1 полученные соединения 1.1-1.30 растворяют в спирте, добавляют к ним насыщенный спиртовой раствор хлороводорода. После окончания реакции выпавший осадок отфильтровывают. Получают кристаллы гидрохлоридов соединений 1.1-1.16.To obtain salts of dispiro-indolinones of formula 1, the obtained compounds 1.1-1.30 are dissolved in alcohol, a saturated alcoholic solution of hydrogen chloride is added to them. After the end of the reaction, the precipitate formed is filtered off. Crystals of the hydrochlorides of compounds 1.1-1.16 are obtained.

Пример 32. Биологические испытания.Example 32. Biological tests.

Все представленные диспиро-индолиноны формулы 1 были протестированы на их способность блокировать клеточный рост и вызывать апоптоз на различных штаммах опухолевых клеточных линий.All presented dispiro-indolinones of formula 1 were tested for their ability to block cell growth and induce apoptosis in various strains of tumor cell lines.

Эти модели включают дифференцированные клетки эмбриональные трансфицированные клетки почек (НЕК293Т), линию раковых клеток молочной железы (MCF-7), а также линии аденокарциномы легких человека А549, линию клеток рака почек SN12C и нормальный клеточной линии почек VA13. Цитотоксичность этих вещества оценивали с помощью стандартного МТТ-теста с (3- (4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил тетразолий бромидом. Результаты биологических испытаний представлены ниже в Таблице 1.These models include differentiated embryonic transfected kidney cells (HEK293T), breast cancer cell line (MCF-7) as well as human lung adenocarcinoma lines A549, kidney cancer cell line SN12C, and normal kidney cell line VA13. The cytotoxicity of these substances was assessed using a standard MTT assay with (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide. The results of the biological tests are shown below in Table 1).

Известно, что в клеточной линии LNCAp белок р53 экспрессирован в большей концентрации по сравнению с клеточной линией РС3 [Wassman, C.D. et al. Computational identification of a transiently open L1/S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)]. Таким образом, имея различия в значениях цитотоксичности соединений на этих двух линиях более, чем на один порядок, мы можем судить о эффективности полученных соединений как ингибиторов p53-MDM2 для терапии рака простаты. Как видно из данных Таблицы 1, соединение 1.2 обладает значительным цитототоксическим эффектом на клеточных линиях всех типов, проявляя селективность пот отношению к линии А549 со значением IC₅₀ 5.6±0.4 мкМ, при этом показывая отсутствие цитотоксичности на нераковой клеточной линии VA13; соединение 1.6, также проявляет селективность по отношению к линии А549 со значением IC₅₀ 4.2±0.5 мкМ и также имеет слабовыраженный цитотоксический эффект на клеточной линии VA13. Соединение 1.10 проявляет цитотоксический эффект по отношению к линии А549 со значением IC₅₀ 6.2±0.5 мкМ, а также соединение 1.16 имеет значение IC₅₀ 5.0±0.4 мкМ на той же клеточной линии. Данные соединения имеют высокие значения цитотоксичности на нераковых клеточных линиях VA13 и могут быть использованы как противоопухолевые препараты для терапии рака легкого.The p53 protein is known to be expressed at a higher concentration in the LNCAp cell line compared to the PC3 cell line [Wassman, CD et al. Computational identification of a transiently open L1 / S3 pocket for reactivation of mutant p53. Nature Commun. 4, 1407 (2013)]. Thus, having differences in the values of the cytotoxicity of compounds on these two lines by more than one order of magnitude, we can judge the effectiveness of the obtained compounds as inhibitors of p53-MDM2 for the treatment of prostate cancer. As can be seen from the data in Table 1, compound 1.2 has a significant cytotoxic effect on cell lines of all types, exhibiting sweat selectivity in relation to the A549 line with an IC ₅₀ value of 5.6 ± 0.4 μM, while showing the absence of cytotoxicity on the non-cancerous VA13 cell line; Compound 1.6 also exhibits selectivity towards the A549 line with an IC ₅₀ value of 4.2 ± 0.5 μM and also has a weakly pronounced cytotoxic effect on the VA13 cell line. Compound 1.10 exhibits a cytotoxic effect against the A549 line with an IC ₅₀ value of 6.2 ± 0.5 μM, and also compound 1.16 has an IC ₅₀ value of 5.0 ± 0.4 μM on the same cell line. These compounds have high cytotoxicity values on non-cancerous VA13 cell lines and can be used as antineoplastic drugs for the treatment of lung cancer.

Дополнительно было проведено исследование цитотоксичности на клеточных линиях рака почек SN12C, экспрессирующей белок р53. Как видно из Таблицы 1, соединения 1.1, 1.7, 1.8 и 1.15 имеют средние значения цитоксичности IC₅₀ на клеточной линии рака почек SN12C 6.5±1.2, 5.2±1.4, 6.1±1.3 и 3.4±0.5 мкМ соответственно. Наилучший цитотоксический проявляют соединения 1.3, 1.12 и 1.14 которые имеют IC₅₀ 1.3±0.2, 2.1±0.4 и 2.1±0.6 мкМ на опухолевой клеточной линии SN12C. Данные соединения могут быть использованы как противоопухолевые препараты для терапии рака почек.Additionally, a cytotoxicity study was performed on SN12C kidney cancer cell lines expressing p53 protein. As can be seen from Table 1, compounds 1.1, 1.7, 1.8, and 1.15 have average cytoxicity IC ₅₀ values on the SN12C renal cancer cell line of 6.5 ± 1.2, 5.2 ± 1.4, 6.1 ± 1.3, and 3.4 ± 0.5 μM, respectively. Compounds 1.3, 1.12, and 1.14 exhibit the best cytotoxic activity, which have IC ₅₀ values of 1.3 ± 0.2, 2.1 ± 0.4, and 2.1 ± 0.6 μM on the SN12C tumor cell line. These compounds can be used as antineoplastic drugs for the treatment of kidney cancer.

Пример 33. Протокол исследования цитотоксичности.Example 33. Protocol for the study of cytotoxicity.

Цитотоксичность тестируемых веществ оценивали с помощью стандартного МТТ-теста с использованием 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил тетразолий бромида[Ciapetti G, Cenni Е, Pratelli L, Pizzoferrato А. 1993. In vitro evaluation of cell/biomaterial interaction by MTT assay. Biomaterials 14:359-364]. Для этого рассевают 4000 клеток на лунку в 130 мкл среды DMEM в 96-луночном планшете и выдерживают в инкубаторе при температуре 37°С с 5% СО₂ в течение первых 24 ч без обработки. Затем в плашки добавляют 15 мкл растворов вода-ДМСО испытуемых веществ к клеткам (восемь разведений от 50 нМ до 100 мкМ) и инкубируют клетки 72 ч, используя в качестве контроля доксорубицин (восемь разведений от 3 нМ до 6 мкмоль). После этого добавляют МТТ с концентрацией 0,5 мг/мл в среде, инкубируют клетки 2 ч с последующим удалением среды и добавлением 100 мкл ДМСО и измеряют пропускание при 565 нм с использованием планшетного ридера. IC₅₀ рассчитывают с использованием "GraphPad Prism 6" software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA).The cytotoxicity of the test substances was assessed using a standard MTT test using 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide [Ciapetti G, Cenni E, Pratelli L, Pizzoferrato A. 1993. In vitro evaluation of cell / biomaterial interaction by MTT assay. Biomaterials 14: 359-364]. For this, 4000 cells per well are plated in 130 μl of DMEM medium in a 96-well plate and incubated at 37 ° C with 5% CO ₂ for the first 24 hours without treatment. Then, 15 μl of water-DMSO solutions of the test substances are added to the cells (eight dilutions from 50 nM to 100 μM) and the cells are incubated for 72 h using doxorubicin as a control (eight dilutions from 3 nM to 6 μmol). Thereafter, MTT with a concentration of 0.5 mg / ml in the medium is added, the cells are incubated for 2 h, followed by the removal of the medium and the addition of 100 μl of DMSO, and the transmittance at 565 nm is measured using a plate reader. IC _{50 is} calculated using "GraphPad Prism 6" software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA).

Настоящее изобретение может быть использовано для синтеза соединений для терапии онкологических заболеваний.The present invention can be used to synthesize compounds for the treatment of cancer.

Claims

1. Dispiroindolinones of general formula 1

where

R _{1 is} selected from the group consisting of 4-ethoxyphenyl 4-C ₂ H ₅ O-C ₆ H ₄ -, 4-chlorophenyl 4-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-bromophenyl 4-Br-C ₆ H ₄ -;

R _{2 is} selected from the group consisting of phenyl C ₆ H ₅ -, 4-ethoxyphenyl 4-C ₂ H ₅ O-C ₆ H ₄ -, 2-chlorophenyl 2-Cl-C ₆ H ₄ -, 3-chlorophenyl 3-Cl -C ₆ H ₄ -, 4-chlorophenyl 4-Cl-C ₆ H ₄ -, 4-ethylphenyl 4-C ₂ H ₅ -C ₆ H ₄ -, 3,4-dimethoxyphenyl 3,4-ОМе-C ₆ H ₃ -, 4-methoxyphenyl 4-CH ₃ O-C ₆ H ₄ -, 4-fluorophenyl 4-FC ₆ H ₄ -, 2-methylphenyl 2-CH ₃ -C ₆ H ₄ -;

R _{3 is} selected from the group consisting of a chlorine, bromine or hydrogen atom;

R ₄ represents a hydrogen atom or propargyl HC≡C — CH ₂ -.

2. The method of obtaining dispiroindolinones of General formula 1 according to claim 1, characterized in that 1 ± 0.1 molar equiv. the corresponding imidazolidin-4-one is dissolved in toluene, taken in an amount of 10 ml per 0.5 ± 0.1 mmol, and boiled at a temperature of 100 ± 10 ° С for 10 ± 2 minutes after the resulting solution boils, then sarcosine taken from calculation 2 ± 0.2 equiv. and the corresponding isatin, taken in the amount of 2 ± 0.2 eq. with respect to the corresponding imidazolidin-4-one, the resulting mixture is boiled until the end of the reaction, then the mixture is cooled to room temperature, the precipitate formed is filtered off under vacuum with a porous glass filter and a Bunsen flask.

3. Use of a compound of general formula 1 according to claim 1 as an inhibitor of protein-protein interactions MDM2 / p53.

4. A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of oncological disease associated with protein-protein interactions MDM2 / p53, containing in an effective amount a compound according to claim 1.

5. The pharmaceutical composition of claim 4, wherein the cancer is lung or kidney cancer.

6. A drug for the prevention and treatment of proliferative diseases associated with protein-protein interactions MDM2 / p53, in the form of tablets, capsules or injections, placed in a pharmaceutically acceptable package, containing in an effective amount a compound according to claim 1 or a pharmaceutical composition according to claim 1. 4.

7. A method for inhibiting protein-protein interactions MDM2 / p53, comprising introducing a compound according to claim 1 into a cell.