RU2717343C1 - Agent possessing cytoprotective action - Google Patents

Agent possessing cytoprotective action Download PDF

Info

Publication number
RU2717343C1
RU2717343C1 RU2019105912A RU2019105912A RU2717343C1 RU 2717343 C1 RU2717343 C1 RU 2717343C1 RU 2019105912 A RU2019105912 A RU 2019105912A RU 2019105912 A RU2019105912 A RU 2019105912A RU 2717343 C1 RU2717343 C1 RU 2717343C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cytoprotective
lithium
cells
folate
effect
Prior art date
Application number
RU2019105912A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Евгений Владимирович Плотников
Нина Алексеевна Скорик
Владимир Михайлович Плотников
Original Assignee
Евгений Владимирович Плотников
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Евгений Владимирович Плотников filed Critical Евгений Владимирович Плотников
Priority to RU2019105912A priority Critical patent/RU2717343C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2717343C1 publication Critical patent/RU2717343C1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: medicine; pharmaceuticals.
SUBSTANCE: invention refers to pharmacy. Disclosed is the use of lithium folate of formula Li2C19H17N7O6⋅nH2O as a cytoprotective agent. Invention can be used in medicine and biology.
EFFECT: technical result: pronounced cytoprotective action on mononuclear cells in toxic effect of hydroperoxide.
1 cl, 1 tbl, 1 ex

Description

Изобретение относится к области биологии и медицины и представляет собой новое средство, обладающее цитопротекторной активностью. Средство может быть использовано для коррекции состояний связанных с повреждением клеток (гипоксия, окислительный стресс и др.), и в качестве защитного компонента для работы с культурами клеток.The invention relates to the field of biology and medicine and is a new tool with cytoprotective activity. The tool can be used to correct conditions associated with cell damage (hypoxia, oxidative stress, etc.), and as a protective component for working with cell cultures.

В настоящее время существует ряд соединений и составов, обладающих цитопротекторными свойствами. Известна лекарственная композиция цитопротекторного действия, содержащую инозин, никотинамид, рибофлавина мононуклеотид натрия, янтарную кислоту и димеглюмина сукцинат (Патент РФ 2651047 от 18.04.2018).Currently, there are a number of compounds and compositions with cytoprotective properties. A known cytoprotective drug composition containing inosine, nicotinamide, riboflavin sodium mononucleotide, succinic acid and dimeglumine succinate (RF Patent 2651047 from 04/18/2018).

Известно цитопротекторное действие комплекса 1-этилимидазола с аскорбатом цинка (Патент РФ 2024514 от 15.12.1994).The cytoprotective effect of the complex of 1-ethylimidazole with zinc ascorbate is known (RF Patent 2024514 from 12/15/1994).

Известно трициклическое соединение с цитопротекторным действием (Патент РФ 2404967 от 10.03.2009).A tricyclic compound with cytoprotective action is known (RF Patent 2404967 of 03/10/2009).

Целью данного изобретения является расширение спектра цитопротекторных средств.The aim of this invention is to expand the range of cytoprotective agents.

Поставленная цель достигается применением соли лития и фолиевой кислоты (фолата лития) в качестве цитопротекторного средства.This goal is achieved by using lithium salts and folic acid (lithium folate) as a cytoprotective agent.

Различные соли лития имеют широкое применение в психиатрии в качестве нормотимиков (стабилизаторов настроения) (Машковский М.Д. Лекарственные средства: в двух частях. Ч 1. - 12 изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1986. - С. 127-129).Various lithium salts are widely used in psychiatry as normotimics (mood stabilizers) (Mashkovsky M.D. Medicines: in two parts. Part 1. - 12th ed., Rev. And add. - M .: Medicine, 1986. - S. 127-129).

До настоящего времени использование фолата лития в качестве цитопротектора не известно. Соединение лития и витамина группы В - фолиевой кислоты, позволяет получить новые свойства, в частности цитопротекторный эффект.To date, the use of lithium folate as a cytoprotector is not known. The combination of lithium and vitamin B group - folic acid, allows to obtain new properties, in particular the cytoprotective effect.

Исследование цитопротекторных свойств фолата лития было проведено на культуре мононуклеаров периферической крови человека при цитотоксическом воздействии гидроперекиси трет-бутила в концентрации 50 мкмоль/л. Детекцию клеточных повреждений выполняли с использованием набора флуоресцентных красителей, набор Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit, (Abeam, Великобритания) на проточном цитометре «CytoFlex» (Beckman Coulter, США). Оценивали интенсивность клеточной гибели на культуре мононуклеаров после 24 часов инкубации при 37°С.The study of the cytoprotective properties of lithium folate was carried out on a culture of human peripheral blood mononuclear cells under the cytotoxic effect of tert-butyl hydroperoxide at a concentration of 50 μmol / L. Cell damage was detected using a fluorescent dye kit, Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit, (Abeam, UK) on a CytoFlex flow cytometer (Beckman Coulter, USA). The intensity of cell death in a mononuclear culture was evaluated after 24 hours of incubation at 37 ° C.

Метод оценки цитотоксического воздействия на культуру заключался в определении количества живых клеток, клеток в состоянии апоптоза и мертвых клеток по уровню флуоресценции и виду красителя (аннексии V - FITC, пропидий иодид). При этом различают живые клетки (отрицательные по обоим красителям), клетки в состоянии апоптоза (аннексии V-FITC-положительные), а клетки, окрашиваемые только пропидий иодидом, определяются как погибшие (некротические).The method for assessing the cytotoxic effect on the culture was to determine the number of living cells, cells in a state of apoptosis and dead cells by the level of fluorescence and type of dye (annexation V - FITC, propidium iodide). At the same time, they distinguish living cells (negative for both dyes), cells in a state of apoptosis (annexations are V-FITC-positive), and cells stained only with propidium iodide are defined as dead (necrotic).

Реализация изобретения показана следующим примером.The implementation of the invention is shown by the following example.

Пример 1.Example 1

С целью оценки цитопротекторного действия готовили рабочий раствор для чего 100 мг фолата лития растворяли в 10 мл дистиллированной воды. Предварительно готовили тестовую суспензию клеток для чего из периферической крови здоровых доноров центрифугированием на градиенте фиколла выделяют мононуклеарную фракцию, с последующим отмыванием, ресуспендированием в среде RPMI 1640 и внесением в соответствующие лунки 96-луночного планшета. Оценивают собственное влияние фолата на клетки для чего добавляют раствор фолата лития с расчетом на конечную концентрацию в лунке 1,2 ммоль/л., для оценки цитопротекторного действия добавляют в лунки с фолатом лития (1,2 ммоль/л) раствор гидроперекиси трет-бутила с расчетом на конечную концентрацию в лунке 50 мкмоль/л. В качестве отрицательного контроля используют интактную суспензию клеток, в качестве положительного контроля суспензию клеток с добавлением гидроперекиси трет-бутила с расчетом на конечную концентрацию в лунке 50 мкмоль/л. Клетки инкубируют в течение 24 часов при 37°С в среде 5% углекислого газа. Цитопротекторное действие оценивалось по количеству живых клеток, клеток в апоптозе и погибших клеток в культуре в процентах к общему количеству клеток.In order to evaluate the cytoprotective effect, a working solution was prepared for which 100 mg of lithium folate was dissolved in 10 ml of distilled water. A test suspension of cells was preliminarily prepared, for which a mononuclear fraction was isolated from the peripheral blood of healthy donors by centrifugation on a ficoll gradient, followed by washing, resuspension in RPMI 1640 medium and a 96-well plate was added to the corresponding wells. The folate’s own effect on the cells is evaluated. For this purpose, a lithium folate solution is added with a final concentration in the well of 1.2 mmol / L. To assess the cytoprotective effect, a solution of tert-butyl hydroperoxide is added to the wells with lithium folate (1.2 mmol / L). with the expectation of a final concentration in the well of 50 μmol / L. An intact cell suspension is used as a negative control, a cell suspension with the addition of tert-butyl hydroperoxide with a final concentration in the well of 50 μmol / L is used as a positive control. Cells are incubated for 24 hours at 37 ° C in 5% carbon dioxide. The cytoprotective effect was evaluated by the number of living cells, cells in apoptosis and dead cells in culture as a percentage of the total number of cells.

Результаты оценки цитопротекторного действия представлены в таблице 1 после 24 часов инкубации мононуклеаров при воздействии фолатом лития и без него.The results of the evaluation of cytoprotective effects are presented in table 1 after 24 hours of incubation of mononuclear cells with and without lithium folate.

Как видно из таблицы 1 при добавлении фолата лития отмечалось выраженное цитопротекторное действие, что проявлялось в снижении уровня клеточной гибели и увеличении пула жизнеспособных клеток при токсическом воздействии гидроперекиси.As can be seen from table 1, when lithium folate was added, a pronounced cytoprotective effect was noted, which was manifested in a decrease in the level of cell death and an increase in the pool of viable cells under the toxic effects of hydroperoxide.

Figure 00000001
Figure 00000001

*р<0.05 в отношении контроля в присутствии гидроперекиси трет-бутила* p <0.05 with respect to control in the presence of tert-butyl hydroperoxide

Claims (1)

Применение фолата лития общей формулы Li2C19H17N7O6⋅nH2O в качестве цитопротекторного средства.The use of lithium folate of the general formula Li 2 C 19 H 17 N 7 O 6 ⋅nH 2 O as a cytoprotective agent.
RU2019105912A 2019-03-01 2019-03-01 Agent possessing cytoprotective action RU2717343C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019105912A RU2717343C1 (en) 2019-03-01 2019-03-01 Agent possessing cytoprotective action

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019105912A RU2717343C1 (en) 2019-03-01 2019-03-01 Agent possessing cytoprotective action

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2717343C1 true RU2717343C1 (en) 2020-03-23

Family

ID=69943043

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019105912A RU2717343C1 (en) 2019-03-01 2019-03-01 Agent possessing cytoprotective action

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2717343C1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2072504A (en) * 1980-03-27 1981-10-07 Coppen A J Pharmaceutical compositions
RU2222329C2 (en) * 1998-04-24 2004-01-27 Скариста Лимитед Treatment of depression and pharmaceutical preparations applied for this purpose
RU2602738C2 (en) * 2010-12-03 2016-11-20 Рауф РЕКИК Combination of folic acid and ramipril: cytoprotective, neuroprotective and retinoprotective ophthalmic compositions

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2072504A (en) * 1980-03-27 1981-10-07 Coppen A J Pharmaceutical compositions
RU2222329C2 (en) * 1998-04-24 2004-01-27 Скариста Лимитед Treatment of depression and pharmaceutical preparations applied for this purpose
RU2602738C2 (en) * 2010-12-03 2016-11-20 Рауф РЕКИК Combination of folic acid and ramipril: cytoprotective, neuroprotective and retinoprotective ophthalmic compositions

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ZAL F. et al. Antioxidant ameliorating effects against H2O2-induced cytotoxicity in primary endometrial cells. Toxicol. Mech.Methods. 2018 Feb; 28(2): 122-129. Pеферат [он-лайн] [найдено 10.10.2019] (Найдено из Интернет: pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/28849685). *
ZAL F. et al. Antioxidant ameliorating effects against H2O2-induced cytotoxicity in primary endometrial cells. Toxicol. Mech.Methods. 2018 Feb; 28(2): 122-129. Pеферат [он-лайн] [найдено 10.10.2019] (Найдено из Интернет: pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/28849685). ВОСТРЕЦОВА Е.А. и др. Адсорбция из водных растворов органических веществ на наноалмазе. Полифункциональные химические материалы и технологии. Материалы Международной научной конференции 21-22 мая 2015 г. Томск 2015. Издательский дом Томского государственного университета. с.55-57, реферат, с.56 4-й абзац. *
ВОСТРЕЦОВА Е.А. и др. Адсорбция из водных растворов органических веществ на наноалмазе. Полифункциональные химические материалы и технологии. Материалы Международной научной конференции 21-22 мая 2015 г. Томск 2015. Издательский дом Томского государственного университета. с.55-57, реферат, с.56 4-й абзац. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Alonso-de Castro et al. Riboflavin as a Bioorthogonal Photocatalyst for the Activation of a Pt IV Prodrug
Lenzen et al. Alloxan derivatives as a tool for the elucidation of the mechanism of the diabetogenic action of alloxan
Fajkusova et al. Anti-infective and herbicidal activity of N-substituted 2-aminobenzothiazoles
AR067106A1 (en) IMIDAZO DERIVATIVES [2,1-B] TIAZOL MODULATORS OF SIRTUINA
Guo et al. Extracellular ATPs produced in seminal plasma exosomes regulate boar sperm motility and mitochondrial metabolism
JP2017014276A (en) Antiangiogenic small molecules and methods of use
Rodrigues et al. In vitro mechanistic studies on α-amanitin and its putative antidotes
Slator et al. Triggering autophagic cell death with a di-manganese (II) developmental therapeutic
Xu et al. Polychlorinated biphenyl quinone induces endoplasmic reticulum stress, unfolded protein response, and calcium release
Rharass et al. Oxidative stress does not play a primary role in the toxicity induced with clinical doses of doxorubicin in myocardial H9c2 cells
WO2016109470A1 (en) Small molecule stimulators of steroid receptor coactivator proteins and their use in the treatment of cancer
Aru et al. A translational study of a silicon phthalocyanine substituted with a histone deacetylase inhibitor for photodynamic therapy
Linhartova et al. The in vitro effect of duroquinone on functional competence, genomic integrity, and oxidative stress indices of sterlet (Acipenser ruthenus) spermatozoa
Venu et al. Metformin prevents hyperglycemia-associated, oxidative stress-induced vascular endothelial dysfunction: essential role for the orphan nuclear receptor human nuclear receptor 4A1 (Nur77)
Patel et al. Inhibition of the anti-apoptotic Bcl-2 family by BH3 mimetics sensitize the mitochondrial permeability transition pore through Bax and Bak
RU2717343C1 (en) Agent possessing cytoprotective action
JP7419260B2 (en) Coelenterazine compound as a NanoLuc suicide substrate
Ivasechko et al. Molecular design, synthesis and anticancer activity of new thiopyrano [2, 3-d] thiazoles based on 5-hydroxy-1, 4-naphthoquinone (juglone)
Sukhramani et al. Biological cytotoxicity evaluation of spiro [azetidine-2, 3’-indole]-2’, 4 (1’H)-dione derivatives for anti-lung and anti-breast cancer activity
Bouwer et al. NMS-873 functions as a dual inhibitor of mitochondrial oxidative phosphorylation
Vlaski et al. Hypoxia/hypercapnia‐induced adaptation maintains functional capacity of cord blood stem and progenitor cells at 4° C
Sukhramani et al. In-vitro cytotoxicity evaluation of novel N-substituted bis-benzimidazole derivatives for anti-lung and anti-breast cancer activity
Zhang et al. A macrocyclic molecule with multiple antioxidative activities protects the lens from oxidative damage
CZ2011782A3 (en) Use of polymethine salts as mitochondrial probes
US10330672B2 (en) Method for screening activator of mitochondrial activity

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20210302