RU2712785C1 - Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8 - Google Patents

Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8 Download PDF

Info

Publication number
RU2712785C1
RU2712785C1 RU2019125218A RU2019125218A RU2712785C1 RU 2712785 C1 RU2712785 C1 RU 2712785C1 RU 2019125218 A RU2019125218 A RU 2019125218A RU 2019125218 A RU2019125218 A RU 2019125218A RU 2712785 C1 RU2712785 C1 RU 2712785C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
production
interleukin
lithium
medicine
biology
Prior art date
Application number
RU2019125218A
Other languages
English (en)
Inventor
Тамара Парфеновна Ветлугина
Дарья Николаевна Савочкина
Евгений Владимирович Плотников
Анастасия Сергеевна Бойко
Ольга Анатольевна Лобачева
Николай Александрович Бохан
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) filed Critical Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ)
Priority to RU2019125218A priority Critical patent/RU2712785C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2712785C1 publication Critical patent/RU2712785C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483—Physical analysis of biological material
    • G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/49—Blood

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области биологии и медицины. Предложено применение кристаллического аскорбата лития общей формулы LiС6Н7О6 в качестве средства, индуцирующего продукцию интерлейкина-8. Изобретение расширяет арсенал индукторов интерлейкина-8 и может быть использовано в клеточной биологии, экспериментальной медицине, фармакологии. 1 табл., 1 пр.

Description

Изобретение относится к области биологии и медицины и представляет собой новое средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8. Средство может быть использовано в клеточной биологии, экспериментальной медицине, фармакологии.
Провоспалительный цитокин интерлейкин-8 является одним из основных цитокинов, который стимулирует миграцию лейкоцитов в очаг инфекции и воспаления и усиливает микробицидную активность нейтрофилов - основного звена первичной (врожденной) иммунной защиты. Интерлейкин-8 (ИЛ-8, interleukin-8, IL-8, chemoattractant CXCL8) относится к группе СХС хемокинов, клетками продуцентами IL-8 являются макрофаги, лимфоциты, фибробласты, эндотелиальные клетки. Хемокины вовлечены в разнообразные физиологические процессы, которые обеспечиваются балансом между их стимулирующими и супрессирующими эффектами. Нарушение этого баланса способствует развитию патофизиологических процессов и нарушению элиминации патогена, приводящему к активации аутоиммунных реакций [1]. Усиленная продукция провоспалительных цитокинов, в том числе IL-8, способствует защите организма и особенно необходима на начальных фазах воспаления. Установлено также, что повышенная продукция IL-8 при активации механизмов врожденного иммунитета не ослабляет развитие последующих адаптивных процессов долговременной антиген-специфической иммунной защиты [2].
Известен ряд средств, стимулирующих продукцию IL-8.
Сравнительное изучение секреции IL-8 эндотелиальными клетками перевиваемой человеческой линии ECV304, которые инкубировали в присутствии отдельных цитокинов и их сочетаний, показало, что клетки отвечали на инкубацию с TNF-α трехкратным усилением секреции IL-8 [3].
В эксперименте in vitro установлено, что иммуномодуляторы пептидной структуры - ГМДП (глюкозаминилмурамилдипептид) и бестим (гамма-D-глутамил-триптофан натрия) - оказывают выраженное стимулирующее действие на секрецию IL-8 нейтрофильными гранулоцитами [4].
Известно применение раково-эмбрионального антигена для индукции IL-8 в культурах цельной крови женщин с целью выявления предраковых изменений в молочной железе. Высокая продукция IL-8, индуцированная раково-эмбриональным антигеном, и высокий коэффициент отношения уровня индуцированной продукции IL-8 к уровню спонтанной продукции в супернатантах культуры крови установлен у женщин с доброкачественной опухолью - фиброаденомой. При низких значениях этих показателей выявляют предраковые изменения в молочной железе [5].
Показано, что нейтрофильные дефензины (HNP - human neutrophil peptides) индуцируют синтез хемокина IL-8 в моноцитах, макрофагах и в цельной крови человека [6].
Задачей настоящего изобретения является расширение арсенала средств, индуцирующих продукцию IL-8.
Поставленная задача решается путем применения соли лития и аскорбиновой кислоты - аскорбата лития (LiC6H7O6) в качестве индуктора IL-8.
Различные соли лития применяются в психиатрии и наркологии в качестве нормотимиков (стабилизаторов настроения) [7]. Аскорбат лития известен как антиоксидант, и применяется в экспериментальных исследованиях, ветеринарии, в медицинской практике - как биологическая активная добавка для повышения адаптационных возможностей организма [8].
При этом в патентной и научно-медицинской литературе не обнаружено указаний на применение аскорбата лития в качестве средства, индуцирующего продукцию IL-8. Способность аскорбата лития индуцировать продукцию интерлейкина-8 впервые обнаружена и доказана экспериментально.
Вновь выявленное свойство аскорбата лития индуцировать продукцию IL-8 может быть использовано в лабораторной практике, в экспериментальных исследованиях, при работе с клеточными культурами; сочетание с известным психостабилизирующим эффектом лития делает аскорбат лития перспективным при разработке новых лекарственных средств широкого спектра, обладающих нормотимическим, антиоксидантным и иммуномодулирующим действием.
Исследование влияния аскорбата лития на продукцию IL-8 в культуре цельной крови человека проводили с использованием набора реагентов «MILLIPLEX MAP «Нитап Cytokine/Chemokine Magnetic Bead Panel» (Merck, Германия) по технологии «Luminex хМАР» на мультиплексном анализаторе MAGPIX (Luminex, USA). Спонтанную продукцию IL-8 определяли в супернатантах интактной культуры клеток крови после суточной инкубации при 37°С, индуцированную продукцию IL-8 определяли в супернатантах после суточной инкубации при 37°С культуры клеток крови с добавлением аскорбата лития.
Предлагаемое изобретение осуществляется следующим образом.
Готовятся стоковые растворы аскорбата лития и препарата сравнения - карбоната лития - в удобной для дальнейшей работы концентрации на физиологическом растворе. Цельную кровь разводят 1:1 полной средой RPMI-1640 с добавлением гентамицина; определенный объем разведенной крови вносят в лунки культурального планшета (24-Well, Eppendorf). Для получения индуцированной продукции IL-8 в параллельные лунки дополнительно вносят стоковые растворы аскорбата лития и соли сравнения карбоната лития до конечной концентрации Li+1,2 ммоль/л; пробы инкубируют в течение суток при 37°С в CO2 - инкубаторе. Параллельно в тех же условиях инкубируют клетки крови в той же среде для получения спонтанной продукции IL-8. После инкубации осторожно отбирают супернатанты, разливают по аликвотам и хранят в низкотемпературной камере при -80°С до исследования. Уровень продукции IL-8 определяют по его концентрации в супернатантах суточных культур клеток крови.
Пример 1. Супернатант суточной культуры образца периферической крови человека (№13-14): концентрация IL-8 в нагрузочной пробе с аскорбатом лития - 31,82 pg/ml; концентрация IL-8 в нагрузочной пробе с карбонатом лития - 11,27 pg/ml; концентрация IL-8 в контрольной пробе (спонтанная продукция) - 8,91 pg/ml.
Оценку влияния солей лития на продукцию IL-8 провели на образцах периферической крови человека, взятой из вены (выборка N=24). В качестве препарата сравнения использовали карбонат лития, лекарственные средства на основе которого чаще всего применяются в медицине.
Статистический анализ полученных данных проводили по критерию Манна-Уитни, определяли медиану (Me), квартили (Q1; Q3) и достоверность различия р.
Результаты представлены в таблице.
Figure 00000001
Из таблицы видно, что внесение в культуру клеток крови аскорбата лития, в отличие от соли сравнения карбоната лития, приводило к выраженному усилению продукции интерлейкина-8, и его концентрация в супернатантах нагрузочных проб с аскорбатом лития (индуцированная продукция IL-8) достоверно превышала соответствующий показатель как в контрольных пробах - спонтанная продукция IL-8 - (p1=0,0010), так и в пробах с карбонатом лития (р2=0,0036). Отношение медианы уровня индуцированной аскорбатом лития продукции IL-8 к медиане уровня спонтанной продукции составляет 2,52.
Таким образом, впервые выявлено новое свойство аскорбата лития, характеризующее его как средство, индуцирующее продукцию IL-8, что позволит расширить арсенал индукторов данного цитокина.
Список литературы
1. Москалев А.В., Рудой А.С., Апчел В.Я. Хемокины, их рецепторы и особенности развития иммунного ответа. Вестник Российской военно-медицинской академии. 2017, 2 (58). С. 182-187. https://elibrary.ru/item.asp?id=29729031).
2. Меняйло М.Е., Малащенко В.В., Шмаров В.А., Газатова Н.Д., Тодосенко Н.М., Мелащенко О.Б., Гончаров А.Г., Селедцов В.И. Прямое влияние интерлейкина-8 на активацию Т-клеток. Российский иммунологический журнал 2016; 10(2): 174-178. https://elibrary.ru/item.asp?id=26741491).
3. Соколов Д.И., Кузнецова С.А., Котов А.Ю., Симбирцев А.С., Барышников А.Ю., Полосухина Е.Р., Шейкин Ю.А., Фрейдлин И.С. Цитокиновая регуляция экспрессии адгезионных молекул ICAM-1 и продукции хемокина IL-8 эндотелиальными клетками. Медицинская иммунология. 2000, Т2, №1. С. 25-33. https://elibrary.ru/item.asp?id=913 0688
4. Нестерова И.В., Синельникова Б.Ю., Швыдченко И.Н. Пептидная регуляция продукции интерлейкина-8 нейтрофильными гранулоцитами в эксперименте in vitro. Иммунология. 2006. Т. 27. №5. С. 274-278. https://elibrary.ru/item.asp?id=9432003
5. Патент (ru) №2623857. Способ выявления предраковых изменений в молочной железе. Аутеншлюс А.И., Кунц Т.А., Карпухина К.В., Михайлова Е.С., Вараксин Н.А. Заявка: №2016125024/ 22.06.2016; опубл. 29.06.2017 Бюл. №19.
6. Чалый Ю.В., Нашкевич Н.Н. Ингибирующий эффект антагонистов рецептора Р2Х7 на продукцию интерлейкина-8 макрофагами человека в ответ на действие нейтрофильных α-дефензинов. Журнал Белорусского государственного университета. Биология. 2017. №2. С. 25-30. https://elibrary.ru/item.asp?id=36665614
7. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 16-е изд. М.: Новая Волна, 2017. 1200 с. ISBN 978-5-7864-0287-3.
8. Громова О.А., Торшин И.Ю., Сардарян И.С., Остренко К.С., Пронин А.В., Стельмащук Е.В., Хаспеков Л.Г. Аскорбат лития улучшает адаптацию к стрессу на моделях in vitro и in vivo. Фармакокинетика и фармакодинамика. 2016. №3. С. 13-20. https://elibrary.ru/item.asp?id=28790807

Claims (1)

  1. Применение аскорбата лития общей формулы LiC6H7O6 в качестве средства, индуцирующего продукцию интерлейкина-8.
RU2019125218A 2019-08-07 2019-08-07 Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8 RU2712785C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019125218A RU2712785C1 (ru) 2019-08-07 2019-08-07 Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019125218A RU2712785C1 (ru) 2019-08-07 2019-08-07 Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2712785C1 true RU2712785C1 (ru) 2020-01-31

Family

ID=69625470

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019125218A RU2712785C1 (ru) 2019-08-07 2019-08-07 Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2712785C1 (ru)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2351326C2 (ru) * 2006-03-09 2009-04-10 Петр Прокопьевич Балашов Средство, обладающее гематопротекторным действием
RU2618394C1 (ru) * 2016-02-24 2017-05-03 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт психического здоровья" Средство для защиты биомолекул плазмы крови от воздействия этанола

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2351326C2 (ru) * 2006-03-09 2009-04-10 Петр Прокопьевич Балашов Средство, обладающее гематопротекторным действием
RU2618394C1 (ru) * 2016-02-24 2017-05-03 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт психического здоровья" Средство для защиты биомолекул плазмы крови от воздействия этанола

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Plotnikov, E.A. et al, "Lithium salts of krebs cycle substrates as potential normothymic antioxidant agents", Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences, 2018, 10(4), pages 240-245. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Bakheet et al. CXCR3 antagonist AMG487 suppresses rheumatoid arthritis pathogenesis and progression by shifting the Th17/Treg cell balance
Paulissen et al. The role and modulation of CCR6+ Th17 cell populations in rheumatoid arthritis
Cohen et al. Interleukin‐10 rescues T cells from apoptotic cell death: association with an upregulation of Bcl‐2
Chen et al. Restricted cytokine expression in rheumatoid arthritis
Oghumu et al. Role of chemokines in regulation of immunity against leishmaniasis
Gouwy et al. Synergy in cytokine and chemokine networks amplifies the inflammatory response
Dehqanzada et al. Assessing serum cytokine profiles in breast cancer patients receiving a HER2/neu vaccine using Luminex® technology
Zhang et al. CCR2 identifies a stable population of human effector memory CD4+ T cells equipped for rapid recall response
Shahid et al. The connection between the Th17 cell related cytokines and cancer stem cells in cancer: Novel therapeutic targets
Tang et al. Rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes co-cultured with PBMC increased peripheral CD4+ CXCR5+ ICOS+ T cell numbers
Zhang et al. Factors determining the formation and release of bioactive IL-12: regulatory mechanisms for IL-12p70 synthesis and inhibition
RU2712785C1 (ru) Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8
Ibrahim et al. Deficiency of lymph node-resident dendritic cells (DCs) and dysregulation of DC chemoattractants in a malnourished mouse model of Leishmania donovani infection
Liu et al. Expression of interleukin-2 receptor gamma chain on human neutrophils
Olivier et al. CCDC88B is required for mobility and inflammatory functions of dendritic cells
Guo et al. Blockade of TNF-α/TNFR2 signalling suppresses colorectal cancer and enhances the efficacy of anti-PD1 immunotherapy by decreasing CCR8+ T regulatory cells
Wang et al. Pyroptosis executioner gasdermin D contributes to host defense and promotes Th 1 immune response during Neospora caninum infection
Yao et al. Exogenous IL-9 ameliorates experimental autoimmune myasthenia gravis symptoms in rats
RU2498821C1 (ru) Способ стимуляции эндогенной продукции цитокинов и гемопоэтических факторов
US20200138861A1 (en) Methods and compositions of natural killer cell adoptive transfer therapy
Shibata et al. IL-17A in oncology
Jiang et al. Mechanism of IFN-γ in regulating OPN/Th17 pathway during vascular collagen remodeling of hypertension induced by ANG II
Yao et al. Interleukin-2 enhances the cytotoxic activity of circulating natural killer cells in patients with chronic heart failure
Hadi et al. Study the levels of cytokines (IL-12, IFN-γ) and human Proflin-1 (PFN-1) in the sera of aborted women with Toxoplasmosis and healthy women (non-pregnant and pregnant women)
Taghavi et al. The efficacy of zymosan in pro-inflammatory cytokine production by peritoneal macrophages of melanoma-bearing mice