RU2711908C1 - Method of determining vinpocetine adsorption by liposomes - Google Patents

Method of determining vinpocetine adsorption by liposomes Download PDF

Info

Publication number
RU2711908C1
RU2711908C1 RU2019115732A RU2019115732A RU2711908C1 RU 2711908 C1 RU2711908 C1 RU 2711908C1 RU 2019115732 A RU2019115732 A RU 2019115732A RU 2019115732 A RU2019115732 A RU 2019115732A RU 2711908 C1 RU2711908 C1 RU 2711908C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
vinpocetine
liposomes
dialysis
solution
concentration
Prior art date
Application number
RU2019115732A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Юлия Александровна Полковникова
Алексей Иванович Сливкин
Елена Евгеньевна Чупандина
Original Assignee
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") filed Critical федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ")
Priority to RU2019115732A priority Critical patent/RU2711908C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2711908C1 publication Critical patent/RU2711908C1/en

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/15Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility

Abstract

FIELD: pharmaceutics.SUBSTANCE: invention relates to the field of analysis and analysis of pharmaceutical preparations, namely to a method for vinpocetine adsorption determination by liposomes, which involves quantitative determination of vinpocetine by spectrophotometry and involves dialysis at temperature of 37 °C for 12 hours in dialyzer with 12 ml of a colloidal solution of liposomes from soya bean lecithin or with an aqueous solution of chloride-hydrogen acid 0.01 M, to place a dialysis test tube filled with 3 ml of an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M, containing vinpocetine in concentration of 0.24 mg/ml, for dialysis membrane is used, transmission characteristic of which is 14 kDa; after achieving alignment, concentration of vinpocetine is measured in a dialysis test tube immersed in a dialysis unit with a liposome solution and a dialysis unit filled with a solution of acid chloride 0.01 M; vinpocetine adsorption by liposomes is determined by the difference in concentration of vinpocetine released into the dialysis medium of the dialyzer with an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M and a dialysis unit with a liposome solution. Method can be used to determine concentration of test substance when developing new dosage forms – delivery systems using spectrophotometric method.EFFECT: novel method of quantitative determination of vinpocetine on the surface of liposomes, obtained from soya bean lecithin.1 cl, 5 dwg, 1 ex

Description

Изобретение относится к области исследования и анализа веществ и может быть использовано для определения концентрации исследуемого вещества при разработке новых сложных лекарственных форм фармацевтических препаратов с использованием спектрофотометрического метода.The invention relates to the field of research and analysis of substances and can be used to determine the concentration of the analyte in the development of new complex dosage forms of pharmaceutical preparations using the spectrophotometric method.

Известен способ, который заключается в дезинтеграции липосомальных везикул нагреванием до температуры 90-100°С [Gardner S.C. "Delipidation treatment for large-scale protein purification processing" Thesis for MS in Chem. Engineering, Virginia Polytechnic Inst., 1996].A known method, which consists in the disintegration of liposomal vesicles by heating to a temperature of 90-100 ° C [Gardner S.C. "Delipidation treatment for large-scale protein purification processing" Thesis for MS in Chem. Engineering, Virginia Polytechnic Inst., 1996].

Недостатком этого способа является относительно низкая точность, поскольку возникает обратная интеграция везикул при остывании смеси. В результате липосомальные везикулы и мицеллы формируются заново и часть препарата попадает обратно в липосомы, поэтому в водном растворе можно измерить лишь оставшуюся часть реальной концентрации препарата.The disadvantage of this method is the relatively low accuracy, since there is a back integration of the vesicles during cooling of the mixture. As a result, liposomal vesicles and micelles are re-formed and part of the drug goes back to the liposomes, so only the remaining part of the real concentration of the drug can be measured in an aqueous solution.

Заслуживает внимания способ осаждения липосом, нагруженных препаратом с помощью протамина сульфата, с последующим спектрофотометрическим определением неинкапсулированного вещества в полученном супернатанте [V.Torchilin and V. Weissig, "Liposomes 2nd eds., A Practical Approach" ed. Oxford Univercity Press, 2003, 384 pp].Noteworthy is the method of sedimentation of drug-loaded liposomes with protamine sulfate, followed by spectrophotometric determination of the unencapsulated substance in the obtained supernatant [V. Torchilin and V. Weissig, "Liposomes 2nd eds., A Practical Approach" ed. Oxford Univercity Press, 2003, 384 pp].

Однако метод имеет существенные ограничения, связанные с возможностью соосаждения определяемого вещества.However, the method has significant limitations associated with the possibility of coprecipitation of the analyte.

Наиболее близким по своей сущности к предлагаемому является способ определения концентрации липосомально инкапсулированных фармацевтических препаратов цитостатиков гидрофильной природы, включающий разрушение липосомальных везикул и последующее измерение концентрации вышедшего в раствор цитостатика [Патент на изобретение №2337358 РФ/ Некоммерческое организация Учреждение «Прогрессивные медицинские исследования». - №2007112306; заявлено 03.04.07; опубл. 27.10.2009; Бюл. №30. - 10 с]. Данный способ отличается тем, что липосомальные везикулы разрушают добавлением к липосомальной суспензии, разбавленной 2 М раствором хлорида натрия в соотношении 1:1, 3-кратного объема хлороформа, после чего пробы нагревают до 50-60°С, центрифугируют при 5000 g в течение 5 мин, концентрацию вышедшего в водную фазу цитостатика определяют спектрофотометрически.Closest in essence to the proposed one is a method for determining the concentration of liposomally encapsulated pharmaceutical preparations of hydrophilic cytostatics, including the destruction of liposomal vesicles and subsequent measurement of the concentration of the cytostatic that has left the solution [Patent for invention No. 2337358 of the Russian Federation / Non-profit organization Progressive medical research institution. - No. 2007112306; stated on 04/03/07; publ. 10/27/2009; Bull. No. 30. - 10 s]. This method is characterized in that the liposomal vesicles are destroyed by adding to the liposomal suspension diluted with a 2 M sodium chloride solution in a ratio of 1: 1, 3 times the volume of chloroform, after which the samples are heated to 50-60 ° C, centrifuged at 5000 g for 5 min, the concentration of the cytostatic released into the aqueous phase is determined spectrophotometrically.

Недостатком способа является образование различных мицеллярных форм определяемого препарата, что приводит к серьезным погрешностям в измерениях и вызывает трудности в интерпретации получаемых результатов.The disadvantage of this method is the formation of various micellar forms of the drug being determined, which leads to serious measurement errors and causes difficulties in interpreting the results.

Технический результат заключается в разработке неразрушающего способа, количественного определения винпоцетина на поверхности липосом, полученных из соевого лецитина.The technical result consists in the development of a non-destructive method, the quantitative determination of vinpocetine on the surface of liposomes obtained from soya lecithin.

Технический результат достигается тем, что в способе определения величины адсорбции винпоцетина липосомами, включающем количественное определение винпоцетина методом спектрофотометрии, согласно изобретению, проводится диализ при температуре 37°С в течение 12 ч в диализаторе с 12 мл коллоидного раствора липосом с массовой долей липосом 0,1342±0,02881% из соевого лецитина или с 12 мл водного раствора кислоты хлористоводородной 0,01 М; куда помещается диализная пробирка, заполненная 3 мл водного раствора кислоты хлористоводородной 0,01 М, содержащего винпоцетин в концентрации 0,24 мг/мл, для проведения диализа используется мембрана, характеристика пропускания которой 14 кДа; после достижения равнения концентрация винпоцетина измеряется в диализной пробирке, погруженной в диализатор с раствором липосом и диализатор, заполненный раствором кислоты хлористоводородной 0,01 М; определение величины адсорбции винпоцетина липосомами осуществляется по разности концентраций винпоцетина, вышедшего в диализную среду диализатора с водным раствором кислоты хлористоводородной 0,01 М и диализатора с раствором липосом.The technical result is achieved by the fact that in the method for determining the adsorption value of vinpocetine by liposomes, including the quantitative determination of vinpocetine by spectrophotometry, according to the invention, dialysis is performed at a temperature of 37 ° C for 12 hours in a dialyzer with 12 ml of a colloidal liposome solution with a mass fraction of liposomes of 0.1342 ± 0.02881% from soya lecithin or with 12 ml of an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M; where the dialysis tube is placed, filled with 3 ml of an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M containing vinpocetine at a concentration of 0.24 mg / ml, a membrane with a transmittance of 14 kDa is used for dialysis; after equalization, the concentration of vinpocetine is measured in a dialysis tube immersed in a dialyzer with a solution of liposomes and a dialyzer filled with a solution of hydrochloric acid 0.01 M; determination of the amount of adsorption of vinpocetine by liposomes is carried out by the difference in the concentrations of vinpocetine released into the dialysis medium of a dialyzer with an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M and a dialyzer with a solution of liposomes.

Для изучения характеристик адсорбции винпоцетина на поверхности липосом был использован метод равновесного диализа. Выбор данного метода обусловлен тем, что количественный анализ равновесной концентрации винпоцетина в дисперсионной среде, необходимый для определения величины адсорбции, затруднен присутствием дисперсной фазы - липосом. Полупроницаемая мембрана, с диаметром пор, достаточным для проникновения молекул винпоцетина, но не пропускающая липосомы, позволяет получить раствор винпоцетина с концентрацией, достаточно близкой к концентрации в дисперсионной среде липосом. Получаемый таким образом раствор может быть подвергнут количественному анализу с использованием спектрофотометрии.To study the adsorption characteristics of vinpocetine on the surface of liposomes, the equilibrium dialysis method was used. The choice of this method is due to the fact that the quantitative analysis of the equilibrium concentration of vinpocetine in a dispersion medium, which is necessary for determining the adsorption value, is hampered by the presence of a dispersed phase - liposomes. A semipermeable membrane with a pore diameter sufficient for penetration of vinpocetine molecules, but not permeable to liposomes, allows one to obtain a solution of vinpocetine with a concentration close to that in the dispersion medium of liposomes. Thus obtained solution can be subjected to quantitative analysis using spectrophotometry.

Липосомы из соевого лецитина получали методом гидратации/регидратации.Soy lecithin liposomes were prepared by hydration / rehydration.

Пример.Example.

Приготовление образцов липосом из соевого лецитинаSoy Lecithin Liposome Preparation

Для получения липосом из соевого лецитина был использован метод гидратации/регидратации. Раствор соевого лецитина (Sigma) в этиловом спирте испаряли в роторном испарителе при температуре 45°С и давлении -0,085 МПа. Затем добавляли раствор кислоты хлористоводородной 0,01 М (рН=2,0). Для получения липосом растворы были подвержены облучению на ультразвуковом дезинтеграторе в течение 15 минут. Далее липосомы были отфильтрованы через стеклянный фильтр с диаметром пор 16 мкм.To obtain liposomes from soya lecithin, the hydration / rehydration method was used. A solution of soya lecithin (Sigma) in ethyl alcohol was evaporated in a rotary evaporator at a temperature of 45 ° C and a pressure of -0.085 MPa. Then a solution of hydrochloric acid 0.01 M (pH = 2.0) was added. To obtain liposomes, the solutions were irradiated with an ultrasonic disintegrator for 15 minutes. Next, the liposomes were filtered through a glass filter with a pore diameter of 16 μm.

Приготовление рабочего стандартного образца (РСО) винпоцетинаPreparation of a working standard sample (RSO) of vinpocetine

Точную навеску винпоцетина 12 мг растворяли в водном растворе кислоты хлористоводородной 0,01 М в мерной колбе объемом 50,00 мл и доводили растворителем до метки.A precise weighed portion of 12 mg vinpocetine was dissolved in an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M in a 50.00 ml volumetric flask and adjusted to the mark with a solvent.

Определение массовой доли коллоидного раствора липосомDetermination of the mass fraction of a colloidal solution of liposomes

В сушильном шкафу при температуре 80°С высушивали чашку Петри и производили ее взвешивание на аналитических весах Radwag 220/С/2 с точностью до 4-го знака после десятичной запятой в граммах. В чашку Петри помещали коллоидный раствор липосом и взвешивали. Далее чашку Петри с раствором липосом помещали в сушильный шкаф при температуре 80°С и высушивали ее содержимое до постоянной массы. Массовую долю коллоидного раствора липосом определяли по формуле:In a drying cabinet at a temperature of 80 ° C, the Petri dish was dried and weighed on a Radwag 220 / C / 2 analytical balance with an accuracy of 4 decimal places in grams. A colloidal liposome solution was placed in a Petri dish and weighed. Next, a Petri dish with a solution of liposomes was placed in an oven at a temperature of 80 ° C and its contents were dried to constant weight. Mass fraction of colloidal liposome solution was determined by the formula:

Figure 00000001
Figure 00000001

гдеWhere

mпуст. - масса пустой чашки Петри, г;m is empty. - mass of an empty Petri dish, g;

mжидк. - масса чашки Петри с коллоидным раствором, г;m liquid - the mass of the Petri dish with colloidal solution, g;

mсух. - масса чашки Петри с сухим остатком коллоидного раствора, г.m dry - the mass of the Petri dish with the dry residue of the colloidal solution, g

Для проведения равновесного диализа использовались диализные пробирки Easy Dial-L с полупроницаемой мембраной с характеристикой пропускания 14 кДа. Для определения величины адсорбции винпоцетина липосомами проводился основной опыт (диализатор А), в котором наблюдалась адсорбция в процессе диализа, опыт сравнения (диализатор Б), в котором происходил диализ, но отсутствовали липосомы и опыт для измерения содержания свободного лецитина в дисперсионной среде (диализатор В). В диализатор А помещали 12 мл раствора липосом и диализную пробирку. В диализную пробирку помещали 3 мл раствора винпоцетина с концентрацией С0. В диализатор Б помещали 12 мл 0,01 М раствора кислоты хлористоводородной 0,01 М и диализную пробирку. В диализную пробирку помещали 3 мл раствора винпоцетина с концентрацией С0. В диализатор В помещали 12 мл раствора липосом и диализную пробирку. В диализную пробирку помещали 3 мл раствора кислоты хлористоводородной 0,01 М. Диализ проводили в термостате при температуре 37°С в течение 12 ч. После этого измеряли оптическую плотность при длине волны 313 нм растворов из диализных пробирок в диализаторах А, Б и В (DА, DБ и DВ соответственно). Для определения концентрации винпоцетина в диализной пробирке А использовалась разница оптических плотностей D=DА-DВ.Equilibrium dialysis was performed using Easy Dial-L dialysis tubes with a semi-permeable membrane with a transmittance of 14 kDa. To determine the adsorption value of vinpocetine by liposomes, the main experiment (dialyzer A) was carried out, in which adsorption was observed during dialysis, a comparison experiment (dialyzer B), in which dialysis occurred, but there were no liposomes and no experience to measure the content of free lecithin in a dispersion medium (dialyzer B ) In dialyzer A, 12 ml of liposome solution and a dialysis tube were placed. In a dialysis tube was placed 3 ml of a solution of vinpocetine with a concentration of 0 . 12 ml of a 0.01 M hydrochloric acid solution of 0.01 M and a dialysis tube were placed in dialyzer B. In a dialysis tube was placed 3 ml of a solution of vinpocetine with a concentration of 0 . Into dialyzer B were placed 12 ml of liposome solution and a dialysis tube. A 3 ml solution of hydrochloric acid 0.01 M was placed in a dialysis tube. Dialysis was carried out in a thermostat at a temperature of 37 ° C for 12 h. After this, the optical density was measured at a wavelength of 313 nm of solutions from dialysis tubes in dialyzers A, B and C ( D A, D B and D C, respectively). To determine the concentration of vinpocetine in the dialysis tube A, the difference in optical densities D = D A -D B was used .

Расчет молярной концентрации винпоцетина по результатам спектрофотометрии производился по формуле:The calculation of the molar concentration of vinpocetine according to the results of spectrophotometry was carried out according to the formula:

Figure 00000002
Figure 00000002

гдеWhere

Figure 00000003
- коэффициент молярного поглощения винпоцетина, М-1 см-1;
Figure 00000003
- the molar absorption coefficient of vinpocetine, M -1 cm -1 ;

D - оптическая плотность;D is the optical density;

1 - толщина кюветы, см.1 - the thickness of the cell, see

С использованием приведенной формулы определялась концентрация винпоцетина в диализной пробирке А (основной опыт) и Б (опыт сравнения). Для данных концентраций были введены обозначения СА и СБ соответственно.Using the above formula, the concentration of vinpocetine in the dialysis tube A (main experiment) and B (comparison experiment) was determined. For these concentrations, the designations C A and C B were introduced, respectively.

Величина адсорбции винпоцетина определялась по формуле:The amount of adsorption of vinpocetine was determined by the formula:

Figure 00000004
Figure 00000004

гдеWhere

А - величина адсорбции винпоцетина липосомами, моль/кг;And - the amount of adsorption of vinpocetine by liposomes, mol / kg;

СА и СБ - равновесные концентрации винпоцетина в диализных пробирках для основного опыта и опыта сравнения, моль/л;C A and C B — equilibrium concentrations of vinpocetine in dialysis tubes for the main experiment and the comparison experiment, mol / l;

V - суммарный объем жидкости в диализаторе, мл;V is the total volume of fluid in the dialyzer, ml;

m - масса липосом в диализаторе, кг.m is the mass of liposomes in the dialyzer, kg

Массу липосом в диализаторе определяли с учетом их массовой доли в коллоидном растворе и объема данного раствора по формуле:The mass of liposomes in the dialyzer was determined taking into account their mass fraction in a colloidal solution and the volume of this solution according to the formula:

Figure 00000005
Figure 00000005

гдеWhere

ω% - массовая доля коллоидного раствора липосом, %ω % - mass fraction of a colloidal solution of liposomes,%

Vлип. - объем раствора липосом, помещенный в диализатор, мл;V lip. - the volume of the liposome solution placed in the dialyzer, ml;

m - масса липосом, кг.m is the mass of liposomes, kg

Для определения характеристик адсорбции винпоцетина на липосомах была приготовлена серия растворов винпоцетина с различными концентрациями и проводился диализ по приведенной выше методике.To determine the adsorption characteristics of vinpocetine on liposomes, a series of solutions of vinpocetine with various concentrations was prepared and dialysis was performed according to the above procedure.

На фиг. 1 приведены равновесные концентраций винпоцетина в диализаторах А и Б, которые рассчитывались с использованием коэффициента молярного поглощения.In FIG. Figure 1 shows the equilibrium concentrations of vinpocetine in dialyzers A and B, which were calculated using the molar absorption coefficient.

На фиг. 2 приведены результаты расчета величины адсорбции винпоцетина на липосомах.In FIG. 2 shows the results of calculating the adsorption of vinpocetine on liposomes.

На фиг. 3, 4 - изображена зависимость величины адсорбции винпоцетина на липосомах от равновесной концентрации.In FIG. 3, 4 - the dependence of the adsorption of vinpocetine on liposomes on the equilibrium concentration is shown.

На фиг 5. приведены результаты определения характеристик адсорбции винпоцетина на липосомах.Figure 5. shows the results of determining the characteristics of the adsorption of vinpocetine on liposomes.

При повышении концентрации винпоцетина величина адсорбции возрастает и достигает максимума в районе 0,030-0,035 моль/кг.With increasing concentration of vinpocetine, the adsorption value increases and reaches a maximum in the region of 0.030-0.035 mol / kg.

По величинам адсорбции винпоцетина на липосомах были определены константы уравнений Фрейндлиха и Ленгмюра:The values of the adsorption of vinpocetine on liposomes were used to determine the constants of the Freundlich and Langmuir equations:

Figure 00000006
Figure 00000006

Figure 00000007
Figure 00000007

гдеWhere

А - величина адсорбции, моль/кг,And the adsorption value, mol / kg,

С - концентрация адсорбтива, моль/л,With the concentration of the adsorbent, mol / l,

k - константа уравнения Фрейндлиха, моль/кг,k is the constant of the Freundlich equation, mol / kg,

1/n - константа уравнения Фрейндлиха,1 / n is the constant of the Freundlich equation,

A - предельная адсорбция, моль/кг,A - ultimate adsorption, mol / kg,

b - концентрация адсорбтива, при которой достигается половина предельной адсорбции, моль/л.b is the concentration of the adsorbent at which half the maximum adsorption is achieved, mol / L.

Для определения констант уравнения Фрейндлиха был построен график зависимости величины адсорбции от равновесной концентрации винпоцетина в логарифмических координатах и определены коэффициенты уравнения линейной зависимости методом наименьших квадратов, показанные на фиг. 4.To determine the constants of the Freundlich equation, a graph was built of the dependence of the adsorption value on the equilibrium concentration of vinpocetine in logarithmic coordinates and the coefficients of the linear dependence equation were determined by the least squares method shown in FIG. 4.

Для полученной зависимости были определены коэффициенты линейной регрессииFor the obtained dependence, linear regression coefficients were determined

log А=(0,505919±0,108038364)* log С+(0,558169262±0,551738074).log A = (0.505919 ± 0.108038364) * log C + (0.558169262 ± 0.551738074).

Коэффициент 1/n=0,505919±0,108038364.Coefficient 1 / n = 0.505919 ± 0.108038364.

Коэффициент k=10(0,558169262±0,551738074).Coefficient k = 10 (0.558169262 ± 0.551738074) .

Для оценки погрешности коэффициента k воспользуемся формулой связывающей погрешность функции с погрешностью ее аргументаTo estimate the error of the coefficient k, we use the formula connecting the error of the function with the error of its argument

Figure 00000008
Figure 00000008

Для расчета коэффициента k используется показательная функция, таким образом, расчет погрешности данной константы можно выполнить по формулеTo calculate the coefficient k, an exponential function is used, thus, the calculation of the error of this constant can be performed by the formula

Figure 00000009
Figure 00000009

Таким образом, получаем коэффициент k=3,615507457±1.163161619 моль/кг.Thus, we obtain the coefficient k = 3.615507457 ± 1.163161619 mol / kg.

Для определения констант уравнения Ленгмюра методом наименьших квадратов был найден свободный член уравнения линейной регрессии равный 1/А=81,30940761±36,26474441.To determine the constants of the Langmuir equation by the least squares method, a free term of the linear regression equation was found equal to 1 / A = 81.30940761 ± 36.26474441.

Для оценки погрешности коэффициента А воспользуемся формулой связывающей погрешность функции с погрешностью ее аргументаTo estimate the error of the coefficient A ∞, we use the formula connecting the error of the function with the error of its argument

Figure 00000010
Figure 00000010

тогда погрешность

Figure 00000011
then the error
Figure 00000011

Предельная адсорбция А=(1/81,30940761)±0,005485=0,0122987±0,005485 моль/кг.The maximum adsorption is A = (1 / 81.30940761) ± 0.005485 = 0.0122987 ± 0.005485 mol / kg.

Для определения константы b уравнения Ленгмюра величина 1/А удваиваласьTo determine the constant b of the Langmuir equation, the value 1 / A ∞ was doubled

2/А=162,6188152±72,52948882.2 / A = 162.6188152 ± 72.52948882.

Константа b уравнения Ленгмюра (концентрация, при которой достигается половина предельной адсорбции) подтверждает достаточно эффективную адсорбцию винпоцетина липосомами при низкой концентрации.The constant b of the Langmuir equation (the concentration at which half the maximum adsorption is achieved) confirms the rather effective adsorption of vinpocetine by liposomes at low concentration.

Claims (1)

Способ определения величины адсорбции винпоцетина липосомами, включающий количественное определение винпоцетина методом спектрофотометрии, отличающийся тем, что проводится диализ при температуре 37°С в течение 12 ч в диализаторе с 12 мл коллоидного раствора липосом с массовой долей липосом 0,1342±0,02881% из соевого лецитина или водным раствором кислоты хлористоводородной 0,01 М; куда помещается диализная пробирка, заполненная 3 мл водного раствора кислоты хлористо-водородной 0,01 М, содержащего винпоцетин в концентрации 0,24 мг/мл, для проведения диализа используется мембрана, характеристика пропускания которой 14 кДа; после достижения выравнивания концентрация винпоцетина измеряется в диализной пробирке, погруженной в диализатор с раствором липосом и диализатор, заполненный раствором кислоты хлористоводородной 0,01 М; определение величины адсорбции винпоцетина липосомами осуществляется по разности концентраций винпоцетина, вышедшего в диализную среду диализатора с водным раствором хлористоводородной 0,01 М кислоты и диализатора с раствором липосом.A method for determining the adsorption value of vinpocetine by liposomes, including the quantitative determination of vinpocetine by spectrophotometry, characterized in that dialysis is carried out at 37 ° C for 12 hours in a dialyzer with 12 ml of a colloidal liposome solution with a mass fraction of liposomes of 0.1342 ± 0.02881% of soya lecithin or an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M; where the dialysis tube is placed, filled with 3 ml of an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M containing vinpocetine at a concentration of 0.24 mg / ml, a membrane with a transmittance of 14 kDa is used for dialysis; after alignment is achieved, the concentration of vinpocetine is measured in a dialysis tube immersed in a dialyzer with a liposome solution and a dialyzer filled with 0.01 M hydrochloric acid solution; determination of the amount of adsorption of vinpocetine by liposomes is carried out by the difference in the concentrations of vinpocetine released into the dialysis medium of a dialyzer with an aqueous solution of hydrochloric acid 0.01 M acid and a dialyzer with a solution of liposomes.
RU2019115732A 2019-05-22 2019-05-22 Method of determining vinpocetine adsorption by liposomes RU2711908C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019115732A RU2711908C1 (en) 2019-05-22 2019-05-22 Method of determining vinpocetine adsorption by liposomes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019115732A RU2711908C1 (en) 2019-05-22 2019-05-22 Method of determining vinpocetine adsorption by liposomes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2711908C1 true RU2711908C1 (en) 2020-01-24

Family

ID=69184060

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019115732A RU2711908C1 (en) 2019-05-22 2019-05-22 Method of determining vinpocetine adsorption by liposomes

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2711908C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2750383C1 (en) * 2020-09-08 2021-06-28 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Method for determining the amount of adsorption of cinnarizine by liposomes

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0524788B1 (en) * 1991-07-23 1997-02-12 Wako Pure Chemical Industries Ltd Process for lysing liposome membrane
RU2337358C1 (en) * 2007-04-03 2008-10-27 Некоммерческая организация Учреждение "ПРОГРЕССИВНЫЕ МЕДИЦИНСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ" Method of spectrophotometric determination of concentration of liposomally bagged pharmaceutical preparations
RU2574926C2 (en) * 2004-05-03 2016-02-10 Хермес Байесайенсиз, Инк. Liposomal compositions applicable for drug delivery

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0524788B1 (en) * 1991-07-23 1997-02-12 Wako Pure Chemical Industries Ltd Process for lysing liposome membrane
RU2574926C2 (en) * 2004-05-03 2016-02-10 Хермес Байесайенсиз, Инк. Liposomal compositions applicable for drug delivery
RU2337358C1 (en) * 2007-04-03 2008-10-27 Некоммерческая организация Учреждение "ПРОГРЕССИВНЫЕ МЕДИЦИНСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ" Method of spectrophotometric determination of concentration of liposomally bagged pharmaceutical preparations

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2750383C1 (en) * 2020-09-08 2021-06-28 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Method for determining the amount of adsorption of cinnarizine by liposomes

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Andreasen et al. Determination of furosemide in blood plasma and its binding to proteins in normal plasma and in plasma from patients with acute renal failure
EP2449129B1 (en) Methods of determining the presence and/or concentration of an analyte in a sample
Fettiplace et al. Water permeability of lipid membranes.
Gibson et al. The kinetics of human haemoglobin in solution and in the red cell at 37 C
RU2711908C1 (en) Method of determining vinpocetine adsorption by liposomes
Bobek et al. Removal of neutrophil gelatinase‐associated lipocalin by extracorporeal therapies
Brenner et al. On estimating colloid osmotic pressure in pre-and postglomerular plasma in the rat
Bisera et al. An" oncometer" of clinical measurement of colloid osmotic pressure of plasma.
Rodriguez et al. Effect of dialysis and ultrafiltration on osmolality, colloid osmotic pressure, and vascular refilling rate
Liu et al. Gambogic acid induces G0/G1 cell cycle arrest and cell migration inhibition via suppressing PDGF receptor β tyrosine phosphorylation and Rac1 activity in rat aortic smooth muscle cells
RU2750383C1 (en) Method for determining the amount of adsorption of cinnarizine by liposomes
Bonomini et al. Removal of uraemic plasma factor (s) using different dialysis modalities reduces phosphatidylserine exposure in red blood cells
Adams et al. The diffusion coefficient of human hemoglobin at high concentrations
Golper et al. Gentamicin and phenytoin sieving through hollow–fiber polysulfone hemofilters
Nyberg et al. Determination of free fractions of tricyclic antidepressants
Negrini et al. Permeability-surface area product and reflection coefficient of the parietal pleura in dogs
Smith et al. Microfluidic DNA-based potassium nanosensors for improved dialysis treatment
Austin et al. DETERMINATION OF CHLORIDES IN WHOLE BLOOD.
Funder et al. Combined effects of digitalis therapy and of plasma bicarbonate on human red cell sodium and potassium
Polkovnikova Adsorption of Vinpocetine on the Surface of Liposomes Obtained from Soy Lecithin
CN114660188A (en) Method for detecting contents of mPEG2000-DSPE, DOPE and M5 in composite phospholipid liposome
CN111122802A (en) Method for measuring release curve of propofol fat emulsion injection
Gueler et al. Biocompatibility parameters of different dialysis membranes assessed during systemic inflammation
Polkovnikova Research Article: Study of vinpocetine adsorption on the surface of liposomes obtained from soya lecitine
Polkovnikova Degree of cinnarizine involvement into liposomes of soya-bean lecithin