RU2701957C1

RU2701957C1 - Strain of fungus alternaria sonchi g-52 vizra, having herbicidal activity against field milk thistle (sonchus arvensis l.)

Info

Publication number: RU2701957C1
Application number: RU2018147584A
Authority: RU
Inventors: Александр Олегович Берестецкий; Филипп Борисович Ганнибал
Priority date: 2018-12-28
Filing date: 2018-12-28
Publication date: 2019-10-02

Abstract

FIELD: microbiology.

SUBSTANCE: invention relates to microbiology. Strain of fungus Alternaria sonchi S-102-15, deposited in VIZR State Collection of Microorganisms under number G-52 VIZR, has herbicidal activity in relation to field milk thistle (Sonchus arvensis L.).

EFFECT: strain can be used for biological control of this hard-disrooted plant.

1 cl, 4 tbl, 4 ex

Description

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, в частности к области микробиологической защиты растений, а именно для борьбы с нежелательной растительностью Может быть использовано для получения микогербицида для борьбы с осотом полевым (Sonchus arvensis L).The invention relates to agricultural microbiology, in particular to the field of microbiological protection of plants, namely to combat unwanted vegetation. Can be used to obtain a microherbicide to combat field sow thistle (Sonchus arvensis L).

Осот полевой (Sonchus arvensis L) - многолетнее корнеотпрысковое сорное растение из семейства Asteraceae, которое широко распространено в РФ и других странах мира с умеренным климатом. Наряду с бодяком полевым оно является трудноискоренимым сорняком, для борьбы с которым требуются затратные защитные мероприятия, включающие многократную обработку почвы и регулярное применение химических пестицидов (Березкин, Скоролупова, 1987 |1]). Осот полевой включен в списки целевых растений для разработки биологических средств борьбы с ним в Канаде и Австралии (McClay, Peschken, 2002 [2]; Scott, McCarren, 2012 [3]) Применение химических гербицидов оправдано уже при плотности их произрастания 2-3 шт. /кв.м. (Ульянова, 2005 [4])Field sow thistle (Sonchus arvensis L) is a perennial root-weed plant from the Asteraceae family, which is widespread in the Russian Federation and other countries of the world with a temperate climate. Along with the field butyoke, it is an hardly eradicated weed, which requires costly protective measures, including repeated soil cultivation and regular use of chemical pesticides (Berezkin, Skorolupova, 1987-1). Field sow thistle is included in the lists of target plants for the development of biological control agents in Canada and Australia (McClay, Peschken, 2002 [2]; Scott, McCarren, 2012 [3]) The use of chemical herbicides is justified even with a density of 2-3 . / sq.m. (Ulyanova, 2005 [4])

В качестве продуцентов микогербицидов для борьбы с осотом полевым ранее были предложены несколько видов фитопатогенных грибов, которые имеют ряд недостатков для применения в качестве микогербицидов, например: ржавчинный гриб Miyagia pseudosphaeria (McCarren, Scott, 2008 [5]) и возбудители пятнистостей листьев Ascochyta sonchi (Evidente et al., 2006 [6]) и Phoma macrostoma (Hynes, 2018 [7]). Ржавчинный гриб Miyagia pseudosphaeria поражает растения рода Sonchus, однако этот гриб - паразит, и его невозможно получать на искусственных питательных средах (McCarren, Scott, 2017 [8]). Грибы A. sonchi (=Phoma exigua var. exigua) и Phoma macrosloma, наоборот, обладают широкой специализацией, поражая широкий круг двудольных растений, включая салат и другие культуры (Мельник, 1977 [9]; Boerema et al., 2004 [10]; Bailey et al., 2011 [11]). Таким образом, среди патогенов осота полевого штаммы фитопатогенных грибов, которые можно получать на искусственных или недорогих природных питательных субстратах и имеющих и узкую специализацию, неизвестны. Задачей изобретения является получение штамма, превосходящего указанные выше микроорганизмы, сочетая следующие свойства: рост и спороношение на искусственных или природных питательных субстратах, патогенность в отношении осота полевого, а также узкую специализацию.Several types of phytopathogenic fungi have previously been proposed as producers of myco-herbicides for combating field sow thistle, which have several disadvantages for use as myco-herbicides, for example, rust fungus Miyagia pseudosphaeria (McCarren and Scott, 2008 [5]) and leaf spot pathogens Ascochyta sonchi ( Evidente et al., 2006 [6]) and Phoma macrostoma (Hynes, 2018 [7]). The rust fungus Miyagia pseudosphaeria infects plants of the genus Sonchus, but this fungus is a parasite and cannot be obtained on artificial nutrient media (McCarren and Scott, 2017 [8]). The fungi A. sonchi (= Phoma exigua var. Exigua) and Phoma macrosloma, on the contrary, are widely specialized, affecting a wide range of dicotyledonous plants, including lettuce and other crops (Melnik, 1977 [9]; Boerema et al., 2004 [10] ; Bailey et al., 2011 [11]). Thus, among pathogens, sow thistle field strains of phytopathogenic fungi, which can be obtained on artificial or inexpensive natural nutrient substrates and having a narrow specialization, are unknown. The objective of the invention is to obtain a strain superior to the above microorganisms, combining the following properties: growth and sporulation on artificial or natural nutrient substrates, pathogenicity in relation to field sow thistle, as well as narrow specialization.

Поставленная задача была решена путем получения штамма гриба Alternaria sonchi Davis с указанными выше характеристиками. По данным литературы данный вид встречается только на растениях рода Sonchus (Simmons, 2007 [12]), но ранее не был исследован как-потенциальный микогербицидThe problem was solved by obtaining a strain of the fungus Alternaria sonchi Davis with the above characteristics. According to the literature, this species is found only on plants of the genus Sonchus (Simmons, 2007 [12]), but has not been previously investigated as a potential myco-herbicide

Из больных пятнистостью листьев осота полевого (Sonchus arvensis L.) при помощи стандартного метода, включающего поверхностную стерилизацию пораженной ткани 70%-ным этанолом и высев небольших ее кусочков на агаризованную питательную среду с антибиотиком (Методы экспериментальной микологии, 1982 [13]), была выделена чистая культура гриба Alternaria sonchi. Культивирование гриба осуществляли на стандартной картофельно-глюкозной среде (КГА), на этой же среде получали его спороношение через 1-2 недели инкубации при 24°С. Его видовую идентификацию проводили при помощи определителя грибов рода Alternaria (Simmons, 2007 [12]). Патогенность гриба была подтверждена путем искусственного заражения растений осота полевого и последующей его реизоляцией в чистую культуру. Для этого растения в фазе розетки опрыскивали конидиальной суспензией гриба (50 тыс.конидий/мл, 2 мл суспензии/растение), выдерживали 48 ч во влажной камере при 24°С, а затем инкубировали 7 суток до появления симптомов при переменном искусственном освещении (16 ч в сутки) и температуре 22С. Для реизоляции гриба кусочек пораженной ткани (размером примерно 1×1 см) помещали на 1 сутки в стерильную влажную камеру (чашка Петри с увлажненной фильтровальной бумагой) при 24°С. После появления спороношения A. sonchi кусочек пораженной ткани вынимали из влажной камеры, скотчем приклеивали к стерилизованной верхней крышке чашки Петри и накрывали чашку со средой КГА. Через сутки инкубации при 24С крышку чашки Петри с кусочком зараженной ткани листа осота, предварительно постучав по ней (это вызвало опадение конидий гриба с крышки на поверхность среды), сменили на чистую стерильную крышку, и чашку со средой инкубировали при 24°С Через неделю инкубации на КГА выросли моноконидиальные колонии гриба. Один моноконидиальный реизолят с морфологией, типичной для A. sonchi (Берестецкий и др., 2013 [14]), был депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов ФГБНУ ВИЗР как штамм Г-52 ВИЗРOf patients with leaf spotiness, field sow throat (Sonchus arvensis L.) using the standard method, including surface sterilization of the affected tissue with 70% ethanol and plating small pieces of it on an agarized nutrient medium with an antibiotic (Methods of experimental mycology, 1982 [13]), was Pure culture of Alternaria sonchi fungus was isolated. The fungus was cultured on a standard potato-glucose medium (KGA); on the same medium, its maturation was obtained after 1-2 weeks of incubation at 24 ° C. Its species identification was carried out using the determinant of fungi of the genus Alternaria (Simmons, 2007 [12]). The pathogenicity of the fungus was confirmed by artificial infection of plants with field sow thistle and its subsequent re-isolation into a pure culture. For this, plants in the rosette phase were sprayed with a conidial suspension of the fungus (50 thousand conidia / ml, 2 ml of suspension / plant), kept for 48 hours in a humid chamber at 24 ° C, and then incubated for 7 days until symptoms appeared under variable artificial lighting (16 h per day) and a temperature of 22C. To re-insulate the fungus, a piece of the diseased tissue (approximately 1 × 1 cm in size) was placed for 1 day in a sterile moist chamber (Petri dish with moistened filter paper) at 24 ° C. After the emergence of A. sonchi sporulation, a piece of the affected tissue was removed from the wet chamber, glued to the sterilized top cover of the Petri dish with tape and covered with a KGA medium. After a day of incubation at 24 ° C, the lid of the Petri dish with a piece of infected tissue of a sow thistle leaf, previously tapped on it (this caused the conidia of the fungus to fall from the lid onto the surface of the medium), was replaced with a clean sterile lid, and the cup with the medium was incubated at 24 ° С monoconidial fungal colonies grew on the KGA. One monoconidial reisolate with a morphology typical of A. sonchi (Berestetsky et al. 2013 [14]) was deposited in the State collection of microorganisms of the Federal State Budget Scientific Institution VIZR as strain G-52 VIZR

Происхождение и систематическое положение.Origin and systematic position.

Штамм Г-52 ВИЗР Alternaria sonchi выделен из больных листьев S. arvensis, собранных в Краснодарском крае в 2004 году. Этот вид относится к отделу Ascomycota, подотделу Pezizomycotina, классу Dothideomycetes. подклассу Pleosporomycetidae, порядку Pleosporales, семейству PleosporaceaeStrain G-52 VIZR Alternaria sonchi was isolated from diseased S. arvensis leaves collected in the Krasnodar Territory in 2004. This species belongs to the Ascomycota department, the Pezizomycotina subdivision, and the Dothideomycetes class. subclass Pleosporomycetidae, order Pleosporales, family Pleosporaceae

Физиолого-биохимические признаки.Physiological and biochemical characteristics.

Гриб обладает медленным ростом (около 1 мм/сут) при температуре 24°С на стандартных агаризованных питательных средах, например, картофельно-глюкозном агаре и агаре Чапека (Методы экспериментальной микологии, 1982 [13]). При культивировании на этих средах гриб образует колонии темно-оливкового цвета, с бархатистой текстурой. Цвет реверса темно-оливковый, практически черный. Конидии одиночные, обратногрушевидные, темно-бурые. Длина конидий 60±10 мкм, ширина - 16±3 мкм, с 4±1 поперечными перегородками Хранение штамма осуществляется в пробирках на скошенном картофельно-глюкозном агаре в бытовом холодильнике при температуре 5°С, а также при -80°С в 10%-ном стерильном растворе глицерина.The fungus has a slow growth (about 1 mm / day) at a temperature of 24 ° С on standard agarized nutrient media, for example, potato-glucose agar and апapek agar (Methods of experimental mycology, 1982 [13]). When cultivated on these media, the fungus forms colonies of dark olive color, with a velvety texture. The reverse color is dark olive, almost black. Conidia solitary, reverse pear-shaped, dark brown. Conidia length 60 ± 10 μm, width 16 ± 3 μm, with 4 ± 1 transverse septa. The strain is stored in test tubes on beveled potato-glucose agar in a domestic refrigerator at a temperature of 5 ° C, and also at -80 ° C in 10% sterile glycerol solution.

Пример 1. Рост и спороношение на доступных агаризованных питательных средах.Example 1. Growth and sporulation on available agarized culture media.

Культивирование штамма проводили на агаризованных (1.5% агар-агара) питательных средах (на 1 л воды): среда Чапека (сахароза - 15 г, NaNO₃ - 3 г, K₂НРО₄- 1 г, KCL - 0,5, MgSO₄⋅7Н₂О - 0,5 г, FeSO₄⋅7Н₂О - 0,01 г), картофельно-сахарозный агар (КСА - отвар 200 г картофеля, 20 г сахарозы) и модифицированная среда V8 (200 мл овощного сока «J7», СаСО₃ - 3 г). Засев среды осуществляли в центр чашки Петри агаровым блоком (диаметром 5 мм), вырезанным пробочным сверлом из активно растущей культуры гриба. Инкубацию осуществляли при температуре 24°С в течение 2 недель.The strain was cultured on agarized (1.5% agar-agar) growth media (per 1 liter of water): Chapek's medium (sucrose - 15 g, NaNO ₃ - 3 g, K ₂ NRA ₄ - 1 g, KCL - 0.5, MgSO ₄ ⋅ 7Н ₂ О - 0.5 g, FeSO ₄ ⋅ 7Н ₂ О - 0.01 g), potato-sucrose agar (KSA - decoction of 200 g of potato, 20 g of sucrose) and modified V8 medium (200 ml of vegetable juice " J7 ", CaCO ₃ - 3 g). Inoculation of the medium was carried out in the center of the Petri dish with an agar block (5 mm in diameter) cut with a cork drill from an actively growing fungus culture. Incubation was carried out at a temperature of 24 ° C for 2 weeks.

Испытанные агаризованные питательные среды оказались пригодными для роста штамма A. sonchi Г-52 ВИЗР. Максимальный суточный прирост наблюдали на среде КСА, который составлял 1.6 мм/сут (табл. 1). Спороношение A sonchi формировалось на всех испытанных искусственных (среда Чапека) и полусинтетических (V8 и КСА) питательных средах Высокая интенсивность спороношения гриба (около 300 тыс. конидий/см²) была отмечена на среде Чапека и среде V-8 (табл. 1).The tested agarized growth media were found to be suitable for the growth of A. sonchi G-52 VIZR strain. The maximum daily increase was observed on KSA medium, which was 1.6 mm / day (Table 1). Sporulation of A sonchi was formed on all tested artificial (Chapek medium) and semisynthetic (V8 and KSA) nutrient media. High sporulation rate of the fungus (about 300 thousand conidia / cm ² ) was noted on Chapek medium and V-8 medium (Table 1). .

*После среднего значения указана стандартная ошибка* After the average value, the standard error is indicated

Пример 2. Рост и спороношение на доступных сыпучих субстратах.Example 2. Growth and sporulation on available bulk substrates.

Одним из основных экономичных способов наработки грибного инокулюма для микогербицидов является культивирование грибов на зерновых субстратах.One of the main economical methods for producing fungal inoculum for mycoherbicides is the cultivation of mushrooms on cereal substrates.

В экспериментах использовали широкодоступные зерновые субстраты (ячмень, пшено, рис и перловая крупа). Крупу (10 г) и воду (7 мл) смешивали в 100-мл конических колбах и стерилизовали автоклавированием в течение 15 мин при 121°С. Инокуляцию субстрата проводили агаровым блоком, вырезанным из края растущей колонии Alternaria sonchi Г-52 ВИЗР на среде КСА. Культивирование гриба проводили при температуре 24°С в темноте при периодическом встряхивании культур для предотвращения комкования и улучшения их аэрации. Через 2 недели инкубации отбирали точную навеску (около 1 г) обросшего грибом субстрата, помещали в пробирку с 10 мл 0.01%-ного раствора Твин-80, встряхивали и при помощи камеры Горяева определяли титр конидий в суспензии, после чего пересчитывали уровень споропродуктивности гриба на 1 г субстрата. Кроме того, помимо свежего биоматериала использовали и высушенный: навеску твердофазной культуры высушивали током воздуха при комнатной температуре в течение суток, а затем помещали во влажную камеру (чашку Петри, выстланную влажной фильтровальной бумагой), инкубировали при температуре 24°С в темноте двое суток, а затем определяли выход конидий как описано выше.In the experiments, widely available grain substrates (barley, millet, rice and pearl barley) were used. Croup (10 g) and water (7 ml) were mixed in 100 ml conical flasks and autoclaved for 15 min at 121 ° C. Inoculation of the substrate was performed with an agar block excised from the edge of the growing colony of Alternaria sonchi G-52 VIZR on KSA medium. The fungus was cultured at a temperature of 24 ° C in the dark with occasional shaking of crops to prevent clumping and improve their aeration. After 2 weeks of incubation, the exact weighed portion (about 1 g) of the substrate overgrown with the fungus was selected, placed in a test tube with 10 ml of a 0.01% Tween-80 solution, shaken, and the conidia titer in suspension was determined using a Goryaev chamber, after which the level of spore productivity of the fungus was recounted for 1 g of substrate. In addition, in addition to fresh biomaterial, dried was also used: a sample of solid-phase culture was dried with an air flow at room temperature for a day, and then placed in a humid chamber (a Petri dish lined with wet filter paper), incubated for two days at a temperature of 24 ° C, and then the yield of conidia was determined as described above.

Интенсивность спороношения при двухнедельном культивировании A. sonchi Г-52 ВИЗР на пшене, рисе и перловой крупе составляла 5.1, 5.9 и 6.6 тыс. конидий/г, соответственно (таблица 2). На зерне ячменя гриб развивался плохо и не спороносил. После последовательного высушивания колонизированного грибом субстрата и помещения его во влажную камеру выход конидий гриба увеличился в 10-40 раз. Максимальный выход конидий отметили на пшене - на уровне 200 тыс. конидий/г субстрата (таблица 2).The sporulation rate during two-week cultivation of A. sonchi G-52 VIZR on millet, rice and pearl barley was 5.1, 5.9 and 6.6 thousand conidia / g, respectively (table 2). On barley grain, the mushroom did not develop well and did not spore. After successively drying the substrate colonized by the fungus and placing it in a humid chamber, the yield of conidia of the fungus increased 10–40 times. The maximum yield of conidia was noted on millet - at the level of 200 thousand conidia / g of substrate (table 2).

Пример 3. Патогенность Alternaria sonchi Г-52 ВИЗРExample 3. Pathogenicity of Alternaria sonchi G-52 VIZR

Растения осота получали из отрезков подземных побегов в условиях теплицы. Выращивание растений проводили в сосудах объемом 0.5 л в искусственной почвенной смеси (торф-песок 1:1, рН 6) в течение месяца в тепличных условиях. Типично на один сосуд приходилось в среднем 3 растения. Их заражение проводили в фазе розетки.Sow thistle plants were obtained from sections of underground shoots in a greenhouse. The plants were grown in 0.5 L vessels in an artificial soil mixture (peat sand 1: 1, pH 6) for a month under greenhouse conditions. Typically, a single vessel accounted for an average of 3 plants. Their infection was carried out in the phase of the outlet.

Конидии гриба смывали с чашек Петри с двухнедельными колониями штамма А. sonchi Г-52 ВИЗР, полученными на среде V8 Полученную суспензию доводили до концентрации 1 тыс. конидий/мл, 10 тыс. конидий/мл, 100 тыс. конидий/мл в 0.01%-ном растворе Твин-80. Полученную конидиальную суспензию распыляли на растения по 2 мл на растение и ставили во влажную камеру на 24 ч или 48 ч при температуре 24°С. Затем растения инкубировали при контролируемых условиях: 16 ч день (24°С), 8 ч ночь (20°С). Учет развития болезни (площадь пораженной ткани) через 7 дней после инокуляцииConidia of the fungus were washed from Petri dishes with two-week-old colonies of A. sonchi G-52 strain VIZR obtained on V8 medium. The resulting suspension was brought to a concentration of 1 thousand conidia / ml, 10 thousand conidia / ml, 100 thousand conidia / ml in 0.01% solution of Tween-80. The resulting conidial suspension was sprayed onto plants of 2 ml per plant and placed in a humid chamber for 24 hours or 48 hours at a temperature of 24 ° C. Then the plants were incubated under controlled conditions: 16 hours a day (24 ° C), 8 hours a night (20 ° C). Accounting for the development of the disease (area of affected tissue) 7 days after inoculation

Инокуляция растений осота конидиями гриба приводила к появлению симптомов заболевания в виде бурых некрозов с темной иногда бордовой каймой. При этом симптомы заболевания проявлялись сильнее всего на листьях нижнего яруса и приводили к их усыханию. На верхних листочках появлялись многочисленные мелкие разбросанные пятна

Inoculation of plants with sow thistle by conidia of the fungus led to the appearance of disease symptoms in the form of brown necrosis with sometimes dark burgundy border. In this case, the symptoms of the disease manifested themselves most strongly on the leaves of the lower tier and led to their drying out. Numerous small scattered spots appeared on the upper leaves.

Среди трех испытанных концентрациях наиболее эффективной оказалась максимальная - 100 тыс. конидий/мл. В этом случае степень поражения листьев в зависимости от периода увлажнения составила 45 - 60%. При более низких концентрациях степень поражения листьев осота была существенно ниже и варьировала в пределах от 0 до 55%. При всех испытуемых концентрациях уровень поражения растений при 48-часовом периоде увлажнения листьев был существенно выше в сравнении с периодом увлажнения 24 часа. Различия в проявлении заболевания по этому показателю составляли 10 - 15% (Таблица 3)Among the three tested concentrations, the most effective was the maximum - 100 thousand conidia / ml. In this case, the degree of leaf damage depending on the wetting period was 45-60%. At lower concentrations, the degree of damage to leaves of sow thistle was significantly lower and ranged from 0 to 55%. At all tested concentrations, the level of plant damage during the 48-hour period of leaf moistening was significantly higher in comparison with the moistening period of 24 hours. Differences in the manifestation of the disease in this indicator were 10-15% (Table 3)

Пример 4. Специализация Alternaria sonchi.Example 4. Specialization of Alternaria sonchi.

Узкая специализация штамма (в пределах рода или нескольких родов растений) -одно из условий для создания селективного микогербицида.The narrow specialization of the strain (within the genus or several genera of plants) is one of the conditions for the creation of selective myco-herbicide.

Для исследования специализации A sonchi провели искусственное заражение 6 видов растений (бодяк, осот, цикорий, салат, томат, пшеница) конидиями гриба. Растения выращивали в тепличных условиях высевом семян в описанную выше почвенную смесь. Получение растений осота описаны выше. Каждый вариант опыта был представлен 5 повторностями (горшками).To study the specialization of A sonchi, 6 species of plants were artificially infected (thistle, sow thistle, chicory, lettuce, tomato, wheat) with fungal conidia. Plants were grown under greenhouse conditions by sowing seeds into the soil mixture described above. Obtaining plants sow thistle described above. Each experiment was represented by 5 replicates (pots).

Заражение трехнедельных растений проводили конидиальной суспензией гриба в концентрации 50 тыс. конидий/мл способом, описанным в Примере 3 Полученную конидиальную суспензию распыляли на растения по 6 мл на культуральный сосуд и ставили во влажную камеру на 24 ч при температуре 24°С. Затем растения инкубировали при контролируемых условиях: 16 ч день (24°С), 8 ч ночь (20°С). Учет развития болезни (площадь пораженной ткани) через 7 дней после инокуляцииThree-week-old plants were infected with a conidial suspension of the fungus at a concentration of 50 thousand conidia / ml by the method described in Example 3. The resulting conidial suspension was sprayed onto 6 ml plants per culture vessel and placed in a humid chamber for 24 hours at a temperature of 24 ° C. Then the plants were incubated under controlled conditions: 16 hours a day (24 ° C), 8 hours a night (20 ° C). Accounting for the development of the disease (area of affected tissue) 7 days after inoculation

Наиболее восприимчивым к Alternaria sonchi Г-52 ВИЗР видом растений оказался осот полевой, на котором некрозы достигали около 40% листовой поверхности. На других видах сложноцветных растений (цикорий и бодяк полевой) развитие болезни было несущественным: был поражено не более 5% листовой поверхности. Листья салата (Lactuca saliva L.) были невосприимчивыми к заболеванию. Представители семейств пасленовые (томат) и злаковые (пшеница) оказались иммунными. Эти результаты подтверждают наблюдения о встречаемости гриба только на растениях рода Sonchus (Simmons, 2007 [12]; Берестецкий и др., 2013 [14]).The most susceptible plant species to Alternaria sonchi G-52 VIZR was field sow thistle, on which necrosis reached about 40% of the leaf surface. On other species of complex plants (chicory and cirsium field), the development of the disease was insignificant: no more than 5% of the leaf surface was affected. Lettuce (Lactuca saliva L.) was immune to the disease. Representatives of the nightshade (tomato) and cereal (wheat) families were immune. These results confirm observations of the occurrence of the fungus only on plants of the genus Sonchus (Simmons, 2007 [12]; Berestetskiy et al., 2013 [14]).

Таким образом, штамм Г-52 ВИЗР Alternaria sonchi превосходит аналоги (фитопатогенные грибы Miyagia pseudosphaeria, Ascochyta sonchi и Phoma macrostoma) no следующим параметрам одновременно: во-первых, способностью к спороношению на искусственных (среда Чапека) и полусинтетических (среда V8) агаризованных питательных средах или недорогих природных субстратах (пшено), во-вторых, узкой специализацией в пределах рода Sonchus.Thus, strain G-52 VIZR Alternaria sonchi surpasses analogues (phytopathogenic fungi Miyagia pseudosphaeria, Ascochyta sonchi and Phoma macrostoma) by the following parameters simultaneously: firstly, the ability to sporulation on artificial (Chapek's medium) and semi-synthetic (medium V8) agarized nutrient environments or inexpensive natural substrates (millet), and secondly, a narrow specialization within the genus Sonchus.

ЛитератураLiterature

1 Березкин Ю.Н., Скоролупова Т.Б. Двудольные многолетние корнеотпрысковые1 Berezkin Yu.N., Skorolupova TB Dicotyledonous perennial root shoots

сорняки // Защита растений, 1987, №8. С. 22.weeds // Plant Protection, 1987, No. 8. S. 22.

2. McClay A.S., Peschken D P. // Biological Control Programmes in Canada, 1981-2000 /2. McClay A.S., Peschken D P. // Biological Control Programs in Canada, 1981-2000 /

Ed P.G Mason, J. Theodore Oxon, NY: CABI International, 2002. P 416-424Ed P. G Mason, J. Theodore Oxon, NY: CABI International, 2002. P 416-424

3 Scott J K, McCarren K. // Biological Control of Weeds in Australia / Ed. M.H. Julien, R.E. McFadyen, J. Cullen. Melbourn: CSIRO Publishing, 2012. P. 563-568.3 Scott J K, McCarren K. // Biological Control of Weeds in Australia / Ed. M.H. Julien, R.E. McFadyen, J. Cullen. Melbourn: CSIRO Publishing, 2012. P. 563-568.

4 Ульянова Т.Н. Сорные растения во Флоре России и сопредельных государств. Барнаул. 2005. С. 296.4 Ulyanova T.N. Weed plants in the flora of Russia and neighboring states. Barnaul. 2005.S. 296.

5. McCarren K.L, Scott J.K. Two biological control options for Sonchus oleraceus in Australia // Proceedings of the 16th Australian Weeds Conference, Cairns Convention Centre, North Queensland, Australia, 18-22 May, 2008. Queensland Weed Society Queensland Australia. 2008. P. 259-261.5. McCarren K.L., Scott J.K. Two biological control options for Sonchus oleraceus in Australia // Proceedings of the 16th Australian Weeds Conference, Cairns Convention Center, North Queensland, Australia, May 18-22, 2008. Queensland Weed Society Queensland Australia. 2008.P. 259-261.

6. Evidente A., Berestetskiy A., Andolfi A., Zonno M.C, Cimmino A, Vurro M. Relation between in vitro production of ascosonchine and virulence of strains of the potential mycoherbicide Ascochyta sonchi: a method for its quantification in complex samples // Phytochem. Analysis. 2006 Volume 17, Issue5 Pages 357-3646. Evidente A., Berestetskiy A., Andolfi A., Zonno MC, Cimmino A, Vurro M. Relation between in vitro production of ascosonchine and virulence of strains of the potential mycoherbicide Ascochyta sonchi: a method for its quantification in complex samples / / Phytochem. Analysis 2006 Volume 17, Issue5 Pages 357-364

7. Hynes R.K. Phoma macrostoma: as a broad spectrum bioherbicide for turfgrass and agricultural applications// CAB Reviews 2018. Vol. 13, N. 5. P. 1-97. Hynes R.K. Phoma macrostoma: as a broad spectrum bioherbicide for turfgrass and agricultural applications // CAB Reviews 2018. Vol. 13, N. 5. P. 1-9

8 McCarren K.L., Scott J.K. Host range and potential distribution of the rust fungus, Miyagia pseudosphaeria, a biological control agent for Sonchus species // Australasian Plant Pathol. (2017) Vol. 46, №5. p. 473-482. "8 McCarren K.L., Scott J.K. Host range and potential distribution of the rust fungus, Miyagia pseudosphaeria, a biological control agent for Sonchus species // Australasian Plant Pathol. (2017) Vol. 46, No. 5. p. 473-482. "

9. Мельник В.А. Определитель грибов рода Ascochyta Lib. Л, Наука, 1977. 246 с9. Melnik V.A. Key to fungi of the genus Ascochyta Lib. L, Nauka, 1977.246 s

10. Boerema G.H, Gruyter J, Noordeloos M.E, Harriers M.A. Phoma Identification Manual Differentiation of10. Boerema G.H., Gruyter J, Noordeloos M.E., Harriers M.A. Phoma Identification Manual Differentiation of

specific and infraspecific taxa in culture Cambridge: CABI Publishing, 2004 448 ppspecific and infraspecific taxa in culture Cambridge: CABI Publishing, 2004 448 pp

11. Bailey, K.L., Pitt, W.M., Falk, S., & Derby,.1 (2011). The effects of Phoma macrostoma11. Bailey, K. L., Pitt, W. M., Falk, S., & Derby, .1 (2011). The effects of phoma macrostoma

on nontarget plant and target weed species. Biological Control, 58(3), 379-386.on nontarget plant and target weed species. Biological Control, 58 (3), 379-386.

12. Simmons E.G. Alternaria: an identification manual. Utrecht. CBS. CBS Biodiversity12. Simmons E.G. Alternaria: an identification manual. Utrecht. CBS Cbs biodiversity

Series. 2007. Vol. 6. 775 pp.Series. 2007. Vol. 6.775 pp.

13. Методы экспериментальной микологии. (Ред. Билай В.И.) Справочник Киев, "Наукова думка", 1982. - 550 с. 13. Methods of experimental mycology. (Ed. Bilay V.I.) Handbook Kiev, "Science Dumka", 1982. - 550 p.

14. Берестецкий А.О., Терлецкий В.М, Ганнибал Ф.Б., Казарцев И.А, Ходорковский М.А. Характеристика евразийских изолятов Alternaria sonchi по морфолого-культуральным, молекулярным и физиолого-биохимическим признакам // Микология и фитопатология, 2013. Том. 47, №2. С. 120-128.14. Berestetsky A.O., Terletsky V.M., Hannibal F.B., Kazartsev I.A., Khodorkovsky M.A. Characterization of Eurasian isolaria Alternaria sonchi by morphological-cultural, molecular and physiological-biochemical characteristics // Mycology and Phytopathology, 2013. Vol. 47, No. 2. S. 120-128.

Claims

The strain of the fungus Alternaria sonchi G-52 VIZR with herbicidal activity against field sow thistle (Sonchus arvensis L.).