RU2700258C1 - Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте - Google Patents
Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2700258C1 RU2700258C1 RU2018117255A RU2018117255A RU2700258C1 RU 2700258 C1 RU2700258 C1 RU 2700258C1 RU 2018117255 A RU2018117255 A RU 2018117255A RU 2018117255 A RU2018117255 A RU 2018117255A RU 2700258 C1 RU2700258 C1 RU 2700258C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nerve
- autoplasma
- regeneration
- conductor
- experiment
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
- A61B17/04—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets for suturing wounds; Holders or packages for needles or suture materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M39/00—Tubes, tube connectors, tube couplings, valves, access sites or the like, specially adapted for medical use
- A61M39/08—Tubes; Storage means specially adapted therefor
-
- G—PHYSICS
- G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
- G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
- G09B23/00—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
- G09B23/28—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Surgery (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Computational Mathematics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Algebra (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Mathematical Analysis (AREA)
- Mathematical Optimization (AREA)
- Mathematical Physics (AREA)
- Pure & Applied Mathematics (AREA)
- Business, Economics & Management (AREA)
- Educational Administration (AREA)
- Educational Technology (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии, и может быть использовано для стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте. Для этого в проводник вводят аутоплазму, взятую непосредственно перед операцией, подготовленную путем центрифугирования со скоростью 1000 об/мин в течение 20 мин. Затем в аутоплазму помещают центральный и проксимальный концы пересеченного нерва. Проводник фиксируют в ложе пересеченного нерва путем наложения одиночных узловых швов на фасции окружающих тканей. Способ обеспечивает улучшение результатов посттравматической регенерации нервного волокна и восстановления двигательной и чувствительной функции в иннервируемых тканях за счёт усиления скорости направленного роста аксонов в зоне пересеченного нерва, улучшения репаративных процессов, меньшей выраженности воспалительных явлений, восстановления целостности и функции проводимости нерва в более ранние сроки после травмы. 1 ил., 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии и предназначено для стимуляции процессов регенерации концов пересеченных периферических нервов.
В настоящее время предложены различные способы стимуляции репарации поврежденных периферических нервов в сочетании с направленной тубуляцией их концов.
Среди методов направленных на катализацию регенераторных процессов при реконструкции поврежденных периферических нервов, можно выделить метод использования мезенхимных стволовых клеток жировой ткани крысы в составе фибринового клея Tissucol-Kit на модели 5 мм диастаза седалищного нерва крысы (Р.Ф. Масгутов, Г.А. Масгутова, А.А. Рогожин и др. журнал "Гены и клетки" Том X №3 2015, "Стимуляция регенерации седалищного нерва крысы с использованием тубуляции в сочетании с аллотрансплантацией мезенхимальных стромальных клеток из жировой ткани". с. 1-5), способ стимулирования регенерации нерва (патент на изобретение №2464020 от 20.10.2012 г., авторы Ю.А. Чернышев, И.С. Рагинов, Г.А. Масгутова и др.), клеточная терапия (журнал "ActaNature" том 7 №3 2015. Е.С. Петрова "Восстановление поврежденного нерва с помощью клеточной терапии", с. 42-53), применение гидрогелевого матрикса (журнал "Клеточная трансплантология и тканевая инженерия", том II, №4, 2007 г. Г.А. Фомина, Р.Ф. Масгутов, В.Г. Штырлин и др. "Гидрогелевый матрикс на основе биосовместимых карбомеров для восполнения дефектов нервной ткани", с. 63-67), трехмерный матрикс-наполнитель кондуита (Патент на изобретение №2517117 от 27.05.2014 г. - "Способ стимулирования регенерации нерва с помощью наноструктурированного матрикса и генетических конструкций").
Однако в каждой из этих методик есть и свои недостатки: негативными последствиями применения стволовых клеток являются иммунный ответ реципиента на введение чужеродных клеток, стимуляция новообразований, развитие воспалений и соединительно-тканного рубца, активация макрофагов и др. (журнал "ActaNature" том 7 №3 2015. Е.С. Петрова "Восстановление поврежденного нерва с помощью клеточной терапии", с. 42-53; М.В. Угрюмов, А.Н. Коновалов, Е.И. Гусев //Вестник РАМН. 2004. №11. с. 8-17).
Критика аналогов
Наряду с работами, в которых отмечено влияние клеточной терапии на реципиента, опубликованы данные о том, что эффект применения клеточной терапии незначителен или отсутствует вовсе (Shi W., YaoJ., ChenX. //Artif. CellsBlood. Substil. Immobil. Biotechnol. 2010. V. 38. №1. P.299-37). Возможно, что этот эффект проявляется непродолжительное время, как в случае использования стволовых клеток на других экспериментальных моделях, что требует дальнейшего изучения.
Прототип
В качестве прототипа нами выбран способ стимуляции восстановления поврежденного нерва мезенхимальными стволовыми клетками (журнал Медицинские новости №10 2011. Д.Ю. Петрова, В.Н. Подгайский, М.К. Недзьведь и др. "Возможность восстановления поврежденных периферических нервов при трансплантации мезенхимальных стволовых клеток ". с. 9-72. Техника стимуляции репарации мезенхимальными стволовыми клетками поврежденных периферических нервов состоит в следующем: В просвет анастомоза вводят суспензию мезенхимальных стволовых клеток (МСК) в количестве 1х106/мл. Вводимые клетки предварительно окрашивали витальным красителем РКН-26, для определения их локализации в просвете протеза после трансплантации.
Техника выделения МСК из жировой ткани. Проводится промывание липоаспират стерильным раствором Хенкса с инкубацией в течении 45 мин. с 0,075%-ым раствором коллагеназы I типа ("Sigma", Германия) в PBS (фосфатный буфер). Нейтрализацию фермента проводят равным объемом среды DMEM, содержащий 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС) (НИИ ЭиМ, РБ). Клетки отмывают 2 раза центрифугированием, клеточный осадок ресуспендируют и в среде DMEM, содержащий 10% ЭТС, 1% антибиотика и 1% глутамина, и засевают в культуральные чашки диаметром 60 мм. Через 24 часа производят смену культуральной среды для удаления не прикрепившихся клеток. В дальнейшем смена среды производится каждые четвертые сутки. По достижении культурами 70-80% конфлюэнтности, клетки их снимают с поверхности культурного пластика с помощью трипсина/ЭДТА, затем активность трипсина ингибируют добавлением среды DMEM, содержащей 10% ЭТС и после двукратного отмывания центрифугированием клетки засевают в культурные чашки для получения первого пассажа.
Недостатками прототипа являются: 1) сложная, длительная и дорогостоящая технология приготовления мезенхимальных стволовых клеток (МСК). 2) введение эмбриональных закладок или стволовых клеток в поврежденные нервные стволы нередко приводит к опухолевым перерождениям трансплантируемых в нерв стволовых клеток. 3) в технике приготовления используют 10% эмбриональную телячью сыворотку (ЭТС), что может вызвать иммунный ответ у реципиента.
Целью изобретения является улучшения результатов посттравматической регенерации периферического нерва в виде более полного восстановления двигательной и чувствительной функции в иннервируемых тканях, преодоление протяженных разрывов нерва, сокращения сроков пребывания больных в стационаре и повышения качества жизни больных данного контингента.
Сущность изобретения.
Сущность предлагаемого способа иллюстрирована на фиг. 1, где фиг. поз. 1 - проводник, фиг. 1 поз. 2 - аутоплазма, фиг. 1 поз. 3 - центральный конец пересеченного нерва, фиг. 1 поз. 4 - проксимальный конец пересеченного нерва.
Под общей и местной анестезией в зоне расположения скуловой и щечной ветвей лицевого нерва экспериментального животного проводится разрез длиной 1,5-2 см. После послойного рассечения тканей и обнажения искомых ветвей, проводится выделение их из окружающих тканей в зоне от околоушной слюнной железы до угла рта. Путем иссечения участка длиной 13 мм создается модель дефекта, которая исключает возможность использования прямой нейрорафии. Проводник (фиг. 1 поз. 1) наполняют аутоплазмой (фиг. 1 поз. 2). В проводник помещают центральный конец пересеченного нерва (фиг. 1 поз. 3), и проксимальный конец пересеченного нерва (фиг. 1 поз. 4).
Аутоплазму получают из крови животного, взятой непосредственно перед операцией, путем центрифугирования (со скоростью 1000 об/мин в течение 20 мин.). Аутоплазму вводят шприцом в просвет проводника, который затем помещают в ложе иссеченного нерва и фиксируют узловыми швами к окружающим фасциям. Рана послойно ушивается.
Как показали сравнительные исследования, аутоплазма в проводнике оказывает стимуляцию регенераторных процессов, что проявляется в ускорении роста аксонов центрального конца нерва и составляет 1,5 мм в сутки, в то время как в пустом проводнике 1 мм в сутки.
Пример №1
Белая беспородистая крыса массой 200 гр. Под ингаляционным эфирным наркозом, создавалась модель повреждения двух мышечных ветвей лицевого нерва (скуловой и щечной) путем иссечения их участка лезвием протяженностью 13 мм.
В предварительно подготовленный проводник, с помощью инсулинового шприца, вводился наполнитель (аутоплазма), который затем устанавливался в адекватную позицию в ложе иссеченного участка нерва, после чего в него вводились поврежденные концы ветвей лицевого нерва. Фиксация проводника проводилась путем наложения одиночных узловых швов на фасции окружающих тканей. Рана послойно ушивалась.
Результаты: После вскрытия трубчатого проводника в содержащейся в нем аутоплазме находились проросшие через нее волокна, длина которых на 6-е сутки составляла 7 мм, что составило 1,5 мм в сутки.
Пример: №2
Белая беспородистая крыса массой 220 гр. Модель дефекта мышечных ветвей (скуловой и щечной) лицевого нерва длинной 13 мм, создавалась по аналогичной этапности.
В проводник вводилась аутоплазма, после чего проводник устанавливался в ложе дефекта нерва и в него вводились поврежденные концы нерва. Фиксация проводилась одиночными узловыми швами, накладываемыми на окружающие ткани. Рана послойно ушивалась
Результаты: После вскрытия трубчатого проводника в содержащейся в нем аутоплазме находились проросшие через нее волокна, длина которых на 8-е сутки составляла 10 мм, что составило 1,5 мм в сутки.
Признаки изобретения отличительные от прототипа:
1. В предлагаемом способе для стимуляции посттравматической регенерации используется аутоплазма крови.
В прототипе с этой целью применяется суспензия с мезенхимальными стволовыми клетками.
2. по предлагаемому способу для приготовления аутоплазмы используют кровь, взятую непосредственно перед операцией. Добавление консервантов не требуется.
3. скорость регенерации нервов в просвете проводника в аутоплазме составляет 1,5 мм, что составляет 1,5 мм в сутки, в то время как в проводнике без аутоплазмы рост составляет 1 мм в сутки.
Технический эффект от применения предлагаемого способа
Использование предлагаемого способа стимуляции регенерации нерва при тубулизации по сравнению с существующими способами имеет следующие преимущества: усиление скорости направленного роста аксонов в зоне пересеченного нерва, что подтверждает анализ гистопрепаратов с более выраженными процессами регенерации в результате усиления ангиогенеза с образованием продольно ориентированных пучков нежных коллагеновых волокон и пучков леммоцитов. Помимо восстановления целостности и проводимости нервов в более ранние сроки после травмы, репаративные процессы протекают лучше, воспалительные изменения менее выражены, что ведет к улучшению регенерации нервного волокна.
Скорость регенерации нервов в просвете проводника в аутоплазме составляет 1,5 мм в сутки.
Экономическая эффективность и технологическая доступность методики получения и применения аутоплазмы, непосредственно перед или во время операции. Минимален риск иммунных реакций организма на введение стимулятора.
Положительным эффектом предлагаемого способа является усиление регенераторных процессов направленного роста аксонов, особенно при наличии протяженных дефектов между концами поврежденного периферического нерва.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что заявляемый способ позволяет эффективно стимулировать регенерацию миелиновых волокон, улучшая восстановление функции проводимости нерва при его разрывах, за счет использования адекватного биосовместимого наполнителя внутри проводника в зоне потенциального пространства регенерации нерва.
Актуальность предлагаемой методики связана с важностью вопроса ранней посттравматической реконструкции поврежденного периферического нерва с последующим полноценным восстановлением функции иннервируемых им тканей.
Информация принятая во внимание
Способ стимуляции восстановления поврежденного нерва мезенхимальными стволовыми клетками (журнал Медицинские новости №10 2011. Д.Ю. Петрова, В.Н. Подгайский, М.К. Недзьведь и др. "Возможность восстановления поврежденных периферических нервов при трансплантации мезенхимальных стволовых клеток". с. 9-72).
Claims (1)
- Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте, отличающийся тем, что в проводник вводят аутоплазму, взятую непосредственно перед операцией, путем центрифугирования со скоростью 1000 об/мин в течение 20 мин, затем в аутоплазму помещают центральный и проксимальный концы пересеченного нерва, проводник фиксируют в ложе пересеченного нерва путем наложения одиночных узловых швов на фасции окружающих тканей.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018117255A RU2700258C1 (ru) | 2018-05-08 | 2018-05-08 | Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018117255A RU2700258C1 (ru) | 2018-05-08 | 2018-05-08 | Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2700258C1 true RU2700258C1 (ru) | 2019-09-13 |
Family
ID=67989765
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018117255A RU2700258C1 (ru) | 2018-05-08 | 2018-05-08 | Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2700258C1 (ru) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2376650C1 (ru) * | 2008-07-21 | 2009-12-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Дагестанская государственная медицинская академия федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ направленной регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте |
CN106267348A (zh) * | 2016-08-26 | 2017-01-04 | 于海龙 | 修复脊髓或脊神经损伤的蛋白胶复合物及制备、使用方法 |
RU2614722C2 (ru) * | 2010-03-11 | 2017-03-28 | Антуан ТУРЗИ | Способ, пробирка и устройство для приготовления композиции для заживления ран |
-
2018
- 2018-05-08 RU RU2018117255A patent/RU2700258C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2376650C1 (ru) * | 2008-07-21 | 2009-12-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Дагестанская государственная медицинская академия федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ направленной регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте |
RU2614722C2 (ru) * | 2010-03-11 | 2017-03-28 | Антуан ТУРЗИ | Способ, пробирка и устройство для приготовления композиции для заживления ран |
CN106267348A (zh) * | 2016-08-26 | 2017-01-04 | 于海龙 | 修复脊髓或脊神经损伤的蛋白胶复合物及制备、使用方法 |
Non-Patent Citations (5)
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Hu et al. | Long-term outcome of the repair of 50 mm long median nerve defects in rhesus monkeys with marrow mesenchymal stem cells-containing, chitosan-based tissue engineered nerve grafts | |
Apel et al. | Peripheral nerve regeneration using a keratin-based scaffold: long-term functional and histological outcomes in a mouse model | |
Ortved | Regenerative medicine and rehabilitation for tendinous and ligamentous injuries in sport horses | |
Markoski | Advances in the use of stem cells in veterinary medicine: from basic research to clinical practice | |
Ullah et al. | Transplantation of human dental pulp-derived stem cells or differentiated neuronal cells from human dental pulp-derived stem cells identically enhances regeneration of the injured peripheral nerve | |
Lv et al. | In vivo repair of rat transected sciatic nerve by low-intensity pulsed ultrasound and induced pluripotent stem cells-derived neural crest stem cells | |
US8728809B2 (en) | Use of pressure waves for stimulation, proliferation, differentiation and post-implantation viability of stem cells | |
CN102387824B (zh) | 可植入的天然或合成的细胞生长支持支架用于制备植入物的用途 | |
US8911963B2 (en) | Conditioned medium obtained from stem cells and its use in therapy | |
Choi et al. | Intra-articular injection of alginate-microencapsulated adipose tissue-derived mesenchymal stem cells for the treatment of osteoarthritis in rabbits | |
de Souza Lucena et al. | Experimental considerations concerning the use of stem cells and tissue engineering for facial nerve regeneration: a systematic review | |
Liard et al. | Adult-brain-derived neural stem cells grafting into a vein bridge increases postlesional recovery and regeneration in a peripheral nerve of adult pig | |
US20160250385A1 (en) | Neuronal replacement and reestablishment of axonal connections | |
Prahm et al. | Blood supply and microcirculation of the peripheral nerve | |
de Assis et al. | Stem cells and tissue engineering-based therapeutic interventions: promising strategies to improve peripheral nerve regeneration | |
US20120171172A1 (en) | Methods Of Engineering Neural Tissue | |
Zhu et al. | Peripheral nerve defects repaired with autogenous vein grafts filled with platelet-rich plasma and active nerve microtissues and evaluated by novel multimodal ultrasound techniques | |
US20150044259A1 (en) | Scaffold for enhanced neural tissue regeneration | |
RU2700258C1 (ru) | Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте | |
AU2003294621A1 (en) | Method for the treatment of diseased, degenerated, or damaged tissue using three-dimensional tissue produced in vitro in combination with tissue cells and/or exogenic factors | |
Platonova et al. | Equine tendinopathy therapy using mesenchymal stem cells | |
KR101518651B1 (ko) | 골 및 신생혈관 형성능이 향상된 줄기세포 공배양 방법 | |
Li et al. | Olfactory ensheathing cells in facial nerve regeneration | |
De Francesco et al. | Reevolution of tissue regeneration: from recent advances in adipose stem cells to novel therapeutic approaches | |
Arun et al. | Nerve regeneration in vascularized composite allotransplantation: current strategies and future directions |