RU2691454C2 - Use of 3,4,5-trimethoxy-n'(2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene)benzohydrazide hydrochloride as an anxiolytic agent - Google Patents
Use of 3,4,5-trimethoxy-n'(2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene)benzohydrazide hydrochloride as an anxiolytic agent Download PDFInfo
- Publication number
- RU2691454C2 RU2691454C2 RU2016111950A RU2016111950A RU2691454C2 RU 2691454 C2 RU2691454 C2 RU 2691454C2 RU 2016111950 A RU2016111950 A RU 2016111950A RU 2016111950 A RU2016111950 A RU 2016111950A RU 2691454 C2 RU2691454 C2 RU 2691454C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tetramethyl
- ylidene
- trimethoxy
- piperidin
- compound
- Prior art date
Links
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 title claims abstract description 6
- -1 2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene Chemical group 0.000 title 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- WARCRYXKINZHGQ-UHFFFAOYSA-N benzohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CC=C1 WARCRYXKINZHGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- WPDZYGQSUPAOMV-UHFFFAOYSA-N CC1(CC(=NNC(=O)C2=CC(=C(C(=C2)OC)OC)OC)CC(N1)(C)C)C.Cl Chemical compound CC1(CC(=NNC(=O)C2=CC(=C(C(=C2)OC)OC)OC)CC(N1)(C)C)C.Cl WPDZYGQSUPAOMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 28
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 18
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WWNUCVSRRUDYPP-UHFFFAOYSA-N fabomotizole Chemical compound N1C2=CC(OCC)=CC=C2N=C1SCCN1CCOCC1 WWNUCVSRRUDYPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960000871 fabomotizole Drugs 0.000 description 9
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- QRMZSPFSDQBLIX-UHFFFAOYSA-N homovanillic acid Chemical compound COC1=CC(CC(O)=O)=CC=C1O QRMZSPFSDQBLIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N phencyclidine Chemical class C1CCCCN1C1(C=2C=CC=CC=2)CCCCC1 JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 2
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 2
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 210000005153 frontal cortex Anatomy 0.000 description 2
- LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N haloperidol Chemical compound C1CC(O)(C=2C=CC(Cl)=CC=2)CCN1CCCC(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000001722 neurochemical effect Effects 0.000 description 2
- 230000004776 neurological deficiency Effects 0.000 description 2
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FSQDURCMBCGCIK-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4-dihydroxyphenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C(O)C=C1O FSQDURCMBCGCIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NOIIUHRQUVNIDD-UHFFFAOYSA-N 3-[[oxo(pyridin-4-yl)methyl]hydrazo]-N-(phenylmethyl)propanamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNC(=O)CCNNC(=O)C1=CC=NC=C1 NOIIUHRQUVNIDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040125 5-hydroxytryptamine receptor family Human genes 0.000 description 1
- 108091032151 5-hydroxytryptamine receptor family Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000729 Fisher's exact test Methods 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- NYMGNSNKLVNMIA-UHFFFAOYSA-N Iproniazid Chemical compound CC(C)NNC(=O)C1=CC=NC=C1 NYMGNSNKLVNMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000772415 Neovison vison Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- JWUXJYZVKZKLTJ-UHFFFAOYSA-N Triacetonamine Chemical compound CC1(C)CC(=O)CC(C)(C)N1 JWUXJYZVKZKLTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SEJJYFSKEXRWOZ-UHFFFAOYSA-N acetamide;piperidine Chemical group CC(N)=O.C1CCNCC1 SEJJYFSKEXRWOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000049 anti-anxiety effect Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- FFSAXUULYPJSKH-UHFFFAOYSA-N butyrophenone Chemical group CCCC(=O)C1=CC=CC=C1 FFSAXUULYPJSKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000812 cholinergic antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000000835 electrochemical detection Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229960003878 haloperidol Drugs 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 208000021822 hypotensive Diseases 0.000 description 1
- 230000001077 hypotensive effect Effects 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 description 1
- 208000018879 impaired coordination Diseases 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229940070023 iproniazide Drugs 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000004579 marble Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 1
- 239000003176 neuroleptic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000701 neuroleptic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001962 neuropharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003057 nialamide Drugs 0.000 description 1
- 230000002090 nicotinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- WLGDAKIJYPIYLR-UHFFFAOYSA-N octane-1-sulfonic acid Chemical compound CCCCCCCCS(O)(=O)=O WLGDAKIJYPIYLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 150000003053 piperidines Chemical class 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000506 psychotropic effect Effects 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 239000012896 selective serotonin reuptake inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940124834 selective serotonin reuptake inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000000862 serotonergic effect Effects 0.000 description 1
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 1
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000002048 spasmolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012762 unpaired Student’s t-test Methods 0.000 description 1
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/15—Oximes (>C=N—O—); Hydrazines (>N—N<); Hydrazones (>N—N=) ; Imines (C—N=C)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4468—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a nitrogen directly attached in position 4, e.g. clebopride, fentanyl
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/452—Piperidinium derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/22—Anxiolytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области новых свойств биологически активного соединения, относящееся к группе 2,2,6,6-тетраметил-пиперидона:The invention relates to the field of new properties of biologically active compounds, belonging to the group 2,2,6,6-tetramethyl-piperidone:
(I): 3,4,5-триметокси-N`(2,2,6,6-тетраметил-пиперидин-4-илиден)бензогидразид гидрохлорид(I): 3,4,5-trimethoxy-N` (2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene) benzohydrazide hydrochloride
Технический результат: выявлен анксиолитический эффект соединения (I), который может применяться в медицине.Technical result: the anxiolytic effect of compound (I), which can be used in medicine, is revealed.
Одним из перспективных направлений развития психофармакологии является разработка и изучение соединений, избирательно воздействующих на обратный захват серотонина (5-НТ). В то же время, ряд авторов отмечает недостаточную клиническую эффективность известных модуляторов 5-НТ рецепторов и блокаторов обратного захвата 5-НТ (D.J. Nutt, CNS Spectr., 10, 49-56, 2005). Более того, установлено, что уменьшение содержания 5-НТ в структурах мозга вызывает снижение степени тревожности (J.D. Olivier, C.H. Vinkers, B. Olivier, Front. Pharmacol, 4, 74, 2013) тогда как использование селективных ингибиторов обратного захвата серотонина в качестве анксиолитических средств приводит к обратному эффекту, т.е. к возрастанию уровня 5-НТ (7. J. Kent, S. Mathew, J. Gorman, Biol. Psychiat, 52, 1008-1030, 2002).One of the promising areas of development of psychopharmacology is the development and study of compounds that selectively affect the reuptake of serotonin (5-HT). At the same time, a number of authors note the insufficient clinical efficacy of the known modulators of 5-HT receptors and 5-HT reuptake blockers (D.J. Nutt, CNS Spectr., 10, 49-56, 2005). Moreover, it was found that a decrease in 5-HT content in brain structures causes a decrease in anxiety (JD Olivier, CH Vinkers, B. Olivier, Front. Pharmacol, 4, 74, 2013), while the use of selective serotonin reuptake inhibitors as anxiolytic means leads to the opposite effect, i.e. to an increase in the level of 5-HT (7. J. Kent, S. Mathew, J. Gorman, Biol. Psychiat, 52, 1008-1030, 2002).
Еще с конца 50-х годов XX века значительный интерес привлекает группа производных пиперидина, представители которых обладают как нейролептической (группа бутирофенонов, в первую очередь, галоперидол), так и другими видами психотропной активности, в т.ч. антидепрессивной (ипрониазид, ниаламид и др.). Не ослабевает интерес к поиску новых соединений с антидепрессантными и анксиолитическими свойствами среди веществ данной группы и в настоящее время (J. Kent, S. Mathew, J. Gorman, Biol. Psychiat, 52, 1008-1030, 2002). Так, обнаружено противотревожное действие у веществ группы ацетамидов пиперидина (C.P. Kordik, С. Luo, M. Gutherman, Bioorg. Med. Chem. Lett., 16(11), 3065-3072, 2006). Сходными эффектами обладают и производные фенциклидина (1-(1-фенилциклогексил)пиперидин, РСР) 6. R.Hajikhani, A. Ahmadi, N. Naderi, Adv. Clin. Exp. Med., 21(3), 307-312, 2012).Since the late 50s of the 20th century, a group of piperidine derivatives, whose representatives possess both neuroleptic (butyrophenone group, primarily haloperidol), and other types of psychotropic activity, including, have attracted considerable interest. antidepressant (iproniazid, nialamide, etc.). The interest in searching for new compounds with antidepressant and anxiolytic properties among the substances of this group and at the present time continues (J. Kent, S. Mathew, J. Gorman, Biol. Psychiat, 52, 1008-1030, 2002). Thus, an anti-anxiety effect was detected in substances of the piperidine acetamide group (C. P. Kordik, S. Luo, M. Gutherman, Bioorg. Med. Chem. Lett., 16 (11), 3065-3072, 2006). Similar effects have phencyclidine derivatives (1- (1-phenylcyclohexyl) piperidine, PCP) 6. R.Hajikhani, A. Ahmadi, N. Naderi, Adv. Clin. Exp. Med., 21 (3), 307-312, 2012).
Среди соединений анксиолитического профиля, наиболее широко используемых для терапии тревожных расстройств, значительный интерес представляет производное имидазола афобазол, разработанный в ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» и использованный в наших экспериментах в качестве препарата сравнения (С.Б. Середенин, М.В. Воронин, Экспер. и клин, фармакол, 72 (1), 3-10, 2009).Among the compounds of the anxiolytic profile that are most widely used for the treatment of anxiety disorders, imidazole derivative afobazole developed in the Research Institute of Pharmacology named after V.V. Zakusova ”and used in our experiments as a reference drug (S. B. Seredenin, M. V. Voronin, Exper. And wedge, pharmacol, 72 (1), 3-10, 2009).
Впервые соединение I было синтезировано в Болгарии в 1974 году. Было показано, что это вещество обладает вазодилатирующим эффектом, что было продемонстрировано на изолированном сердце кролика, а также проявляет слабое кратковременное гипотензивное и спазмолитическое и сильное центральное никотинолитическое и анальгезирующее действие. (Trudove na Nauchnoizsledovatelskiya Khimikofarmatsevtichen Institut, Vol. 9, 19-26, 1974).For the first time, compound I was synthesized in Bulgaria in 1974. It was shown that this substance has a vasodilating effect, which was demonstrated on an isolated rabbit heart, and also shows a weak short-term hypotensive and spasmolytic and strong central nicotinolytic and analgesic effect. (Trudove na Nauchnoizsledovatelskiya Khimikofarmatsevtichen Institut, Vol. 9, 19-26, 1974).
Несмотря на то, что соединение I было синтезировано достаточно давно, изучения его возможных нейрофармакологических эффектов до настоящего времени не проводилось. В связи с этим, представляется актуальным и важным выявление и изучение нейропсихотропного спектра действия этого вещества.Despite the fact that compound I was synthesized for a long time, the study of its possible neuropharmacological effects has not yet been carried out. In this regard, it seems relevant and important to identify and study the neuropsychotropic spectrum of action of this substance.
Фармакологическое изучение заявляемых соединений.Pharmacological study of the claimed compounds.
Для оценки анксиолитического эффекта заявляемых соединений были использованы базисные сертифицированные методики, рекомендуемые Фармакологическим комитетом МЗ РФ для исследования веществ, обладающих анксиолитическим действием (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению веществ с фармакологической активностью». М., Гриф и К, 2012, С. 255).To assess the anxiolytic effect of the inventive compounds, we used basic certified methods recommended by the Pharmacological Committee of the Ministry of Health of the Russian Federation for the study of substances with anxiolytic activity (Guidelines for the experimental (preclinical) study of substances with pharmacological activity. ”M., Griff and K, 2012, p. 255 ).
Для всех примеров эксперименты проводились на белых беспородных мышах-самцах массой 20-25 г., содержавшихся в условиях лабораторного вивария при 12-ти часовом световом режиме со свободным доступом к воде и стандартному корму. Для исключения влияния суточных биоритмов на скорость биосинтеза и метаболизма нейромедиаторов, эксперименты проводили между 10 и 12 часами дня. Эксперименты проводились в соответствии с этическими правилами гуманного обращения с животными, утвержденными этической комиссией ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова».For all examples, experiments were carried out on outbred male mice weighing 20–25 g and kept in a laboratory vivarium under a 12-hour light regime with free access to water and standard food. To eliminate the effect of daily biorhythms on the rate of biosynthesis and metabolism of neurotransmitters, experiments were conducted between 10 and 12 hours of the day. The experiments were carried out in accordance with the ethical rules of humane treatment of animals, approved by the ethical commission of the VV Research Institute of Pharmacology. Zakusova.
Животным опытных групп однократно внутрибрюшинно вводили соединение I в дозах 5, 10, 20 и 40 мг/кг и препарат сравнения - афобазол в дозе 5 мг/кг. Афобазол и соединение I растворяли в физиологическом растворе. Мышам контрольной группы вводили внутрибрюшинно физиологический раствор из расчета 0,4 мл/20 г массы тела. Регистрацию эффектов осуществляли через 60 минут после введения препаратов.The animals of the experimental groups were once intraperitoneally injected with compound I at doses of 5, 10, 20 and 40 mg / kg and the reference drug, afobazole at a dose of 5 mg / kg. Afobazole and Compound I were dissolved in saline. The control group was injected intraperitoneally with physiological saline at the rate of 0.4 ml / 20 g of body weight. Registration effects were carried out after 60 minutes after administration of the drugs.
Пример 1. Анксиолитическое действие соединения I в условиях методики приподнятого крестообразного лабиринта (Таблица 1).Example 1. Anxiolytic effect of compound I under the conditions of the elevated plus-maze technique (Table 1).
Для оценки анксиолитического действия применялась стандартная методика приподнятого крестообразного лабиринта (ПКЛ), основанная на возникновении у животного стресса и страха при реализации ориентировочно-исследовательского поведения и норкового рефлекса в сложных условиях (новизна обстановки, страх высоты и освещенность) (S. Pellow, P. Chopin, S.E. File, M. Briley et al., J. Neurosci. Meth., 14 (3), 149-167, 1985).To evaluate the anxiolytic effect, a standardized elevated plus maze (PCL) technique was used, based on the stress and fear of an animal when implementing orienting-exploratory behavior and the mink reflex in difficult conditions (novelty of the situation, fear of height and light) (S. Pellow, P. Chopin, SE File, M. Briley et al., J. Neurosci. Meth., 14 (3), 149-167, 1985).
Крестообразный лабиринт расположен на высоте 50 см от пола и состоит из двух открытых (не имеющих стенок) (ОР) и двух закрытых (имеющих стенки высотой 20 см) рукавов (ЗР), расположенных под углом 90°, а также центральной площадки (ЦП) размерами 5×5 см. Мышь помещали на центральную площадку ПКЛ головой к открытому рукаву. В течение 5 мин регистрировали время пребывания в OP, ЗР, число заходов (пересечение границы рукава четырьмя лапами) в ОР и ЗР. Заход в рукава ПКЛ засчитывали в том случае, когда животное пересекало границу рукава четырьмя лапами. Чем активнее мыши выходят в ОР лабиринта, тем меньше степень их тревожности. Каждая доза вещества была изучена на 10-ти животных. В виду того, что эксперимент проводился трижды в разные дни, для каждого дня учитывался свой контроль (контроль 1, контроль 2, контроль 3). Статистическую обработку полученных результатов и достоверность различий определяли с помощью критерия Стьюдента. Вычисляли средние величины количества заходов и времени пребывания в отсеках для каждой группы и стандартные отклонения (Т.А. Воронина, С.Б. Середенин, М.А. Яркова, М.В. Воронин, Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая, Москва (2012), 264-275).The cross-shaped labyrinth is located at a height of 50 cm from the floor and consists of two open (no walls) (OP) and two closed (having
Установлено, что соединение I в дозах 10 и 20 мг/кг обладало выраженной анксиолитической активностью, что выражалось в значительном возрастании длительности пребывания животных в открытых рукавах ПКЛ и увеличении числа заходов в них (Таблица 1). По эффективности соединение I в дозе 10 мг/кг превосходило афобазол в дозе 5 мг/кг.It was established that compound I in doses of 10 and 20 mg / kg had a pronounced anxiolytic activity, which was expressed in a significant increase in the duration of animals in the open arms of the PCL and an increase in the number of entries into them (Table 1). The effectiveness of compound I at a dose of 10 mg / kg exceeded afobazole at a dose of 5 mg / kg.
Пример 2. Антикомпульсивный эффект соединения I в тесте закапывания шариков (Фигура 1).Example 2. Anti-compulsive effect of compound I in the balls instillation test (Figure 1).
Методика закапывания шариков (marble burying test) используется для изучения антикомпульсивного действия веществ и основана на инстинкте грызунов избавляться от инородных предметов в убежище посредством их закапывания в подстилку, что является аналогом проявления обсессивно-компульсивного синдрома у человека (C.L. Broekkamp, H.W. Rijk, D. Joly-Gelouin, Eur. J. Pharmacol., 126 (3), 223-229, 1986). Соединение I и афобазол были изучены в дозах 10 и 5 мг/кг соответственно на 9-ти животных.The marble burying test is used to study the anti-compulsive action of substances and is based on the rodent's instinct to get rid of foreign objects in a shelter by burying them in the litter, which is analogous to the manifestation of obsessive-compulsive syndrome in humans (CL Broekkamp, HW Rijk, D. Joly-Gelouin, Eur. J. Pharmacol., 126 (3), 223-229, 1986). Compound I and afobazole were studied in doses of 10 and 5 mg / kg, respectively, in 9 animals.
В тесте использовалось 6 клеток размерами 17×28 см и высотой 12 см. Перед посадкой мыши в клетку на слой плотно утрамбованных опилок толщиной 5 см выкладывалось 9 пластиковых шариков диаметром 1,5 см. Животное помещалось в один из углов и клетка накрывалась решеткой. Через 30 минут подсчитывалось количество закопанных шариков. Шарик считался закопанным при погружении на 2/3 своего объема в опилки. При статистической обработке данных вычисляли среднее количество закопанных шариков для каждой группы животных, их процентное отношение к общему числу шариков и стандартные отклонения. Достоверность различий между группами определяли с помощью точного критерия Фишера.In the test, 6 cells measuring 17 × 28 cm and 12 cm high were used. Before landing the mouse in a cage on a layer of densely compacted sawdust 5 cm thick, 9 plastic balls 1.5 cm in diameter were laid out. The animal was placed in one of the corners and the cage was covered with a grid. After 30 minutes, the number of buried balls was counted. The ball was considered buried when immersed by 2/3 of its volume in sawdust. When statistical data were calculated, the average number of buried balls for each group of animals, their percentage ratio to the total number of balls and standard deviations were calculated. The significance of differences between groups was determined using Fisher's exact test.
В тесте закапывания шариков установлено, что животные контрольной группы закапывают 61% от общего количества шариков. Мыши, которым вводили афобазол в дозе 5 мг/кг, закапывают 38% от общего количества шариков, а грызуны, получавшие соединение I в дозе 10 мг/кг - 32%.In the test of the instillation of the balls, it was established that the animals of the control group instilled 61% of the total number of balls. Mice that were administered afobazole at a dose of 5 mg / kg, instilled 38% of the total number of beads, and rodents treated with compound I at a dose of 10 mg / kg - 32%.
Таким образом, соединение I в дозе 10 мг/кг обладает антикомпульсивным действием и по эффективности превосходит афобазол в дозе 5 мг/кг.Thus, compound I at a dose of 10 mg / kg has an anticompulsive effect and is superior in efficiency to afobazole at a dose of 5 mg / kg.
Пример 3. Изучение острой токсичности и возможных побочных эффектов соединений.Example 3. The study of acute toxicity and possible side effects of compounds.
Острая токсичность соединения I при внутрибрюшинном однократном введении в дозе 200 мг/кг оценивалась в опытах на беспородных мышах-самцах массой 20-25 г. (Е.В. Арзамасцев, И.В. Березовская, Т.А. Гуськова и др. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая, Москва (2012), 13-25.). Оценка общего состояния, поведения и гибели животных проводилась через 1 ч, 24 ч, 4 сут, 10 сут и 14 сут после введения соединений. Степень нарушения координации движений оценивали по способности животных удерживаться на вращающемся стержне Rota Rod. Животных помещали на горизонтальный стержень диаметром 2,5 см, вращающийся с постоянной скоростью 10 оборотов в минуту. Регистрировали время удерживания животных на вращающемся стержне (максимально в течение 300 с).Acute toxicity of Compound I with intraperitoneal single injection at a dose of 200 mg / kg was evaluated in experiments on outbred male mice weighing 20-25 g. (EV Arzamastsev, IV Berezovskaya, TA Guskova, etc. on conducting preclinical studies of drugs. Part one, Moscow (2012), 13-25.). Assessment of the general condition, behavior and death of animals was carried out after 1 h, 24 h, 4 days, 10 days and 14 days after the administration of the compounds. The degree of impaired coordination of movements was assessed by the ability of the animals to hold on to the rotating rod of the Rota Rod. Animals were placed on a horizontal rod with a diameter of 2.5 cm, rotating at a constant speed of 10 revolutions per minute. Recorded the retention time of animals on a rotating rod (maximum 300 s).
При изучении возможных побочных эффектов соединения I в дозе 200 мг/кг (т.е. в 20 раз превышающей терапевтическую (10 мг/кг)) было показано, что данное вещество не вызывает развития побочных эффектов и признаков неврологического дефицита как через 1 ч, так и в более отдаленные сроки (24 ч, 4 сут, 10 сут и 14 сут) после введения соединений. Соединение I в дозе 200 мг/кг не нарушает координации движений животных (100% мышей удерживаются на вращающемся стержне в течение 5 минут).When studying the possible side effects of compound I at a dose of 200 mg / kg (ie, 20 times higher than therapeutic (10 mg / kg)), it was shown that this substance does not cause side effects and signs of neurological deficiency after 1 h, and in more remote periods (24 hours, 4 days, 10 days, and 14 days) after administration of the compounds. Compound I at a dose of 200 mg / kg does not interfere with the coordination of movements of animals (100% of mice are held on a rotating rod for 5 minutes).
Пример 4. Изучение нейрохимических эффектов соединения.Example 4. The study of the neurochemical effects of the compounds.
На следующем этапе исследований было проведено изучение эффектов соединения I на нейрохимический профиль структур мозга (Таблица 2, Таблица 3). Опыты проведены на 20 беспородных мышах массой тела 20-24 г. (питомник РАМН "Столбовая"), содержавшихся в условиях лабораторного вивария при 12-ти часовом световом режиме со свободным доступом к воде и стандартному корму.At the next stage of research, the effects of compound I on the neurochemical profile of brain structures were studied (Table 2, Table 3). The experiments were conducted on 20 outbred mice weighing 20-24 g (nursery RAMS "Stolbovaya"), kept in a laboratory vivarium at 12-hour light mode with free access to water and standard food.
Вещества вводились однократно внутрибрюшинно в дозе 10 мг/кг за 1 час до декапитации животных. Мышам контрольной группы вводили изотонический раствор 0,9% NaCl. Каждая экспериментальная группа состояла из 10 животных.Substances were administered intraperitoneally once at a dose of 10 mg / kg 1 hour prior to decapitation of animals. The control mice were injected with an isotonic solution of 0.9% NaCl. Each experimental group consisted of 10 animals.
Животных декапитировали при помощи гильотины, после чего структуры мозга (фронтальная кора (ФК), гипоталамус, стриатум и гиппокамп) извлекались на льду, замораживались в жидком азоте и взвешивались. Перед экспериментами по определению содержания нейротрансмиттеров пробы размельчали в гомогенизаторе Поттера (тефлон-стекло) в 1 мл 0,1 н HCIO4 с добавлением 3,4-диоксибензиламина (0,5 нмоль/мл) в качестве внутреннего стандарта. Пробы центрифугировали при 10000 g в течение 10 мин. Содержание моноаминов и их метаболитов определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (ВЭЖХ/ЭД) на хроматографе LC-304T (ВAS, США) с аналитической колонкой ReproSil-Pur ODS (C18, 100×4 мм, 3 мкм) (Dr.Maisch, Германия), при скорости элюции подвижной фазы 1,0 мл/мин и давлении до 200 атм. Мобильная фаза состояла из: 0.1 М цитратно-фосфатного буфера, содержащего 1.1 mM октансульфоновой кислоты, 0.1 mM ЭДТА и 9% ацетонитрила (pH 3.0). Измерение проводили с помощью электрохимического детектора LC-4B (ВAS США) на двойном стеклоугольном электроде (+0.85 V)против электрода сравнения Ag/AgCl. Регистрация образцов проводилась с применением аппаратно-програмного комплекса МУЛЬТИХРОМ 1,5 (АМПЕРСЕНД). Все использовавшиеся для анализа реактивы были высокой степени чистоты: о.с.ч., х.ч. или analytical grade.The animals were decapitated using a guillotine, after which the brain structures (frontal cortex (FC), hypothalamus, striatum and hippocampus) were removed on ice, frozen in liquid nitrogen and weighed. Before experiments to determine the content of neurotransmitters, samples were ground in a Potter homogenizer (Teflon glass) in 1 ml of 0.1 n HCIO4 with the addition of 3,4-dioxybenzylamine (0.5 nmol / ml) as an internal standard. Samples were centrifuged at 10,000 g for 10 min. The content of monoamines and their metabolites was determined by high performance liquid chromatography with electrochemical detection (HPLC / ED) on an LC-304T chromatograph (BAS, USA) with an ReproSil-Pur ODS analytical column (C18, 100 × 4 mm, 3 μm) (Dr.Maisch , Germany), at the rate of elution of the mobile phase of 1.0 ml / min and pressure up to 200 atm. The mobile phase consisted of: 0.1 M citrate-phosphate buffer containing 1.1 mM octane sulfonic acid, 0.1 mM EDTA and 9% acetonitrile (pH 3.0). The measurement was performed using an LC-4B electrochemical detector (USA BAS) on a double glass-carbon electrode (+0.85 V) against an Ag / AgCl reference electrode. Samples were recorded using the MULTIHROM 1.5 hardware and software complex (AMPERSEND). All reagents used for the analysis were of high purity: o.c.ch., h.ch. or analytical grade.
Обработку полученных данных проводили с использованием непарного t-критерия Стьюдента в программе Excel 2003. Подсчитывались средние значения и стандартные ошибки среднего (M±s.e.m.). Различия между экспериментальными группами считались статистически достоверными при p<0,05; на уровне тенденции - при 0,05<p<0,1.The obtained data was processed using the unpaired Student's t-test in Excel 2003. Mean values and standard errors of the mean (M ± s.e.m.) Were calculated. Differences between experimental groups were considered statistically significant at p <0.05; at the trend level - at 0.05 <p <0.1.
Было обнаружено, что вещество вызывало значительный рост величины комплексных показателей во фронтальной коре, характеризующих скорость превращения дофамина (ДА) в его метаболиты диоксифенилуксусную (ДОФУК) и гомованилиновую (ГВК) кислоты, ДОФУК/ДА и ГВК/ДА - до 170 и 233% соответственно. Достоверных эффектов изучаемого вещества на тонус серотонинергической системы выявлено не было.It was found that the substance caused a significant increase in the value of complex indicators in the frontal cortex, which characterize the rate of conversion of dopamine (DA) to its metabolites dioxyphenyl acetic acid (DOPAH) and homovanillic acid (HBV) acids, DOPHF / DA and GVK / DA to 170 and 233% respectively . No significant effects of the studied substance on the tone of the serotonergic system have been identified.
Таким образом, соединение I в дозе 10 мг/кг обладает выраженной анксиолитической и антикомпульсивной активностью, не вызывая при этом неврологического дефицита и превосходит афобазол в дозе 5 мг/кг по эффективности.Thus, compound I at a dose of 10 mg / kg has a pronounced anxiolytic and anti-compulsive activity, without causing neurological deficiency and exceeds the afobazole at a dose of 5 mg / kg in effectiveness.
Описание чертежа.Description of the drawing.
Фигура 1. Антикомпульсивный эффект соединения I в сравнении с афобазолом в тесте закапывания шариков.Figure 1. Anti-compulsive effect of compound I in comparison with afobazole in the balls instillation test.
По оси OX (абсцисс) - экспериментальные группы: 1 столбец - контроль, 2 столбец - аофбазол 5 мг/кг, 3 столбец - соединение I 10 мг/кгOn the axis OX (abscissa) - experimental groups: 1 column - control, 2 column - aofbazole 5 mg / kg, 3 column - compound I 10 mg / kg
По оси ОУ (ординат) - количество зарытых шариков в процентах по отношению к общему числу шариковOn the axis of the shelter (ordinate) - the number of balls buried in percent relative to the total number of balls
* - достоверность различий по сравнению с контролем при p<0,05 (сравнение двух выборочных долей вариант)* - significance of differences compared with control at p <0.05 (comparison of two sample fractions is an option)
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016111950A RU2691454C2 (en) | 2016-03-30 | 2016-03-30 | Use of 3,4,5-trimethoxy-n'(2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene)benzohydrazide hydrochloride as an anxiolytic agent |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016111950A RU2691454C2 (en) | 2016-03-30 | 2016-03-30 | Use of 3,4,5-trimethoxy-n'(2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene)benzohydrazide hydrochloride as an anxiolytic agent |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016111950A RU2016111950A (en) | 2017-10-05 |
| RU2016111950A3 RU2016111950A3 (en) | 2019-04-25 |
| RU2691454C2 true RU2691454C2 (en) | 2019-06-14 |
Family
ID=60047511
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016111950A RU2691454C2 (en) | 2016-03-30 | 2016-03-30 | Use of 3,4,5-trimethoxy-n'(2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene)benzohydrazide hydrochloride as an anxiolytic agent |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2691454C2 (en) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2142952C1 (en) * | 1991-06-13 | 1999-12-20 | Х.Лундбекк А/С | Method of preparing pharmaceutical composition for treatment of patients with anxiety state, piperidine derivatives, pharmaceutical composition for treatment of patients with anxiety state or epilepsy |
| WO2007056159A2 (en) * | 2005-11-03 | 2007-05-18 | Redpoint Bio Corporation | Hydrazone derivatives and uses thereof |
| RU2421222C2 (en) * | 2009-06-26 | 2011-06-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова РАМН | Agent for prevention and correction of motor, extrapyramidal disturbances induced by neuroleptics |
| RU2519191C1 (en) * | 2013-02-19 | 2014-06-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "МедФармСинтез" | Medication, possessing anxiolytic activity |
-
2016
- 2016-03-30 RU RU2016111950A patent/RU2691454C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2142952C1 (en) * | 1991-06-13 | 1999-12-20 | Х.Лундбекк А/С | Method of preparing pharmaceutical composition for treatment of patients with anxiety state, piperidine derivatives, pharmaceutical composition for treatment of patients with anxiety state or epilepsy |
| WO2007056159A2 (en) * | 2005-11-03 | 2007-05-18 | Redpoint Bio Corporation | Hydrazone derivatives and uses thereof |
| RU2421222C2 (en) * | 2009-06-26 | 2011-06-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова РАМН | Agent for prevention and correction of motor, extrapyramidal disturbances induced by neuroleptics |
| RU2519191C1 (en) * | 2013-02-19 | 2014-06-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "МедФармСинтез" | Medication, possessing anxiolytic activity |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Zhelyazko L.; Bikova N. et al.: "Synthesis and pharmacological study of new N-acyl-N1-(2,2,6,6-tetramethyl-4-piperidilidene)hydrazine", Trudove na Nauchnoizsledovatelskiya Khimikofarmatsevtichen Institut, Bulgarian, 1974, vol.9, pp.19-26. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016111950A (en) | 2017-10-05 |
| RU2016111950A3 (en) | 2019-04-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McCurdy et al. | Antinociceptive profile of salvinorin A, a structurally unique kappa opioid receptor agonist | |
| Cohen et al. | SSR591813, a novel selective and partial α4β2 nicotinic receptor agonist with potential as an aid to smoking cessation | |
| US8741949B2 (en) | Inhibitors of carnitin-palmitoyl-tranferase-1 for the treatment and prevention of disorders caused by delipidation of neural tissue | |
| Morgan et al. | Δ9‐Tetrahydrocannabinol (Δ9‐THC) attenuates mouse sperm motility and male fecundity | |
| Dekundy et al. | Pharmacological characterization of MRZ-8676, a novel negative allosteric modulator of subtype 5 metabotropic glutamate receptors (mGluR5): focus on L-DOPA-induced dyskinesia | |
| Cassel et al. | Ethanol, 3, 4-methylenedioxymethamphetamine (ecstasy) and their combination: long-term behavioral, neurochemical and neuropharmacological effects in the rat | |
| Han et al. | Study on antrodia camphorata polysaccharide in alleviating the neuroethology of PD mice by decreasing the expression of NLRP3 inflammasome | |
| Dantas et al. | Anti-inflammatory and antinociceptive effects of the isatin derivative (Z)-2-(5-chloro-2-oxoindolin-3-ylidene)-N-phenyl-hydrazinecarbothioamide in mice | |
| Ruggieri et al. | Differential involvement of opioidergic and serotonergic systems in the antinociceptive activity of N-arachidonoyl-phenolamine (AM404) in the rat: comparison with paracetamol | |
| Sun et al. | AMPK activator C24 inhibits hepatic lipogenesis and ameliorates dyslipidemia in HFHC diet-induced animal models | |
| Hedgecock et al. | Molecular mechanisms and applications of a reserpine-induced rodent model [molecular mechanisms and applications of a reserpine-induced rodent model] | |
| Li et al. | Activation of brain lactate receptor GPR81 aggravates exercise-induced central fatigue | |
| Fakiha et al. | Amitriptyline prevents CPT-11-induced early-onset diarrhea and colonic apoptosis without reducing overall gastrointestinal damage in a rat model of mucositis | |
| RU2691454C2 (en) | Use of 3,4,5-trimethoxy-n'(2,2,6,6-tetramethyl-piperidin-4-ylidene)benzohydrazide hydrochloride as an anxiolytic agent | |
| Correa-Netto et al. | An ontogenic study of the behavioral effects of chronic intermittent exposure to ayahuasca in mice | |
| AU2016235093B2 (en) | Toll-like receptor 4 antagonists and use in autoimmune liver diseases | |
| Coelho et al. | 7-Epiclusianone, a tetraprenylated benzophenone, relaxes airway smooth muscle through activation of the nitric oxide-cGMP pathway | |
| Namiki et al. | Underlying mechanism of combined effect of methamphetamine and morphine on lethality in mice and therapeutic potential of cooling | |
| Wąsik et al. | Comparison of the effects of acute and chronic administration of tetrahydroisoquinoline amines on the in vivo dopamine release: a microdialysis study in the rat striatum | |
| Wang et al. | Combined transcriptomics and metabolomics analyses in grass carp under anesthetic stress | |
| EP3226851B1 (en) | Arylalkylamine compounds for use in the prevention or treatment of cancer | |
| Cavallini et al. | Nociceptin inhibition of acetylcholine efflux from different brain areas | |
| Shams et al. | Effects of Papaver rhoeas extract on the tolerance development to analgesic effects of morphine in mice | |
| Shams et al. | Ameliorative effects of berberine and selenium against paracetamol-induced hepatic toxicity in rats | |
| Ivanova et al. | Low-affinity NMDA receptor antagonist hemantane in a topical formulation attenuates arthritis induced by Freund’s Complete Adjuvant in rats |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20210331 |