RU2686116C1 - Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах - Google Patents
Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах Download PDFInfo
- Publication number
- RU2686116C1 RU2686116C1 RU2018123240A RU2018123240A RU2686116C1 RU 2686116 C1 RU2686116 C1 RU 2686116C1 RU 2018123240 A RU2018123240 A RU 2018123240A RU 2018123240 A RU2018123240 A RU 2018123240A RU 2686116 C1 RU2686116 C1 RU 2686116C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dihydro
- oxo
- nitro
- phenyl
- amino
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- PLYWGBLOVASAPY-UHFFFAOYSA-N 5-(4-aminopyridin-1-ium-1-yl)-3-nitro-1-phenyl-1,6-naphthyridin-2-one;chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(N)=CC=[N+]1C1=NC=CC2=C1C=C([N+]([O-])=O)C(=O)N2C1=CC=CC=C1 PLYWGBLOVASAPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 8
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 8
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 3
- -1 4-amino-1- (3-nitro-2-oxo-1-phenyl-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-5-yl) pyridine chloride Chemical compound 0.000 claims description 11
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims description 4
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 abstract description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- QPFYXYFORQJZEC-FOCLMDBBSA-N Phenazopyridine Chemical compound NC1=NC(N)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1 QPFYXYFORQJZEC-FOCLMDBBSA-N 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 229940070891 pyridium Drugs 0.000 description 9
- NUKYPUAOHBNCPY-UHFFFAOYSA-N 4-aminopyridine Chemical compound NC1=CC=NC=C1 NUKYPUAOHBNCPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 229960004979 fampridine Drugs 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 3
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003928 4-aminopyridines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 238000004638 bioanalytical method Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- WLGDAKIJYPIYLR-UHFFFAOYSA-N octane-1-sulfonic acid Chemical compound CCCCCCCCS(O)(=O)=O WLGDAKIJYPIYLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии и токсикологии, может быть использовано для количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах. Способ включает экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора калия фосфорнокислого однозамещенного, подкисленного до рН 4,0 ортофосфорной кислотой, и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%. 2 пр., 5 ил., 2 табл.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии и токсикологии, и может быть использовано для определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в различных биологических средах, в том числе в плазме крови млекопитающих.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Производное 4-аминопиридина - 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорид является действующим веществом разрабатываемого лекарственного средства для коррекции когнитивных функций при сосудистых заболеваниях головного мозга.
Одной из актуальных задач при создании нового лекарственного средства является проведение исследований фармакокинетики с целью оценки всасывания, распределения, метаболизма и экскреции. Для проведения исследований фармакокинетики требуется разработать биоаналитическую методику количественного определения действующего вещества в биологических средах, в частности в плазме крови. Для количественного определения действующего вещества в плазме крови могут быть использованы различные методы - физико-химические, иммунологические, микробиологические и другие методы, обладающие специфичностью, высокой чувствительностью, точностью и воспроизводимостью.
Одним из самых распространенных для изучения фармакокинетики лекарственного средства является метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), который обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами, а именно: высокой чувствительностью, которая позволяет определять микроколичества вещества и высокой скоростью анализа.
Высокая чувствительность методики - ключевой критерий для разработки способа количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида, поскольку его эффективная доза лежит в диапазоне 0,1-10 мг/кг в зависимости от способа введения, а при использовании таких низких доз концентрации действующего вещества в биологических средах, как правило, находятся в диапазоне очень низких концентраций от 10 до 1000 нг/мл.
В настоящее время не существует способов количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах. Для поиска возможных прототипов проведен анализ сведений о методах определения 4-аминопиридина и его производных. Описаны методы определения 4-аминопиридина.
Известен способ определения 4-аминопиридина и его метаболитов в биологических средах организма (плазме крови и моче) с использованием радиоактивной метки 14С и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (заявка на патент US 2017035742, МПК А61К 31/4409 (2013.01), опуб. 09.02.2017; Caggiano А. и соавт., 2013). Однако для определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида данный способ не применим вследствие значительных отличий в химической структуре и сложности введения радиоактивной метки 14С в структуру молекулы.
В качестве прототипа использован ранее описанный оптимизированный способ определения 4-аминопиридина в плазме крови и моче с использованием метода ВЭЖХ (Gupta R.N., Hansebout R.R., 1996), который включает экстракцию определяемого вещества смесью 35% хлорной кислоты и метанола (1:100) с последующим определением его методом ВЭЖХ с использованием в качестве подвижной фазы смеси октансульфоновой кислоты в 10 мМ растворе натрия фосфорнокислого однозамещенного (рН=4,2) с ацетонитрилом. Однако для определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида данный способ не применим вследствие значительных отличий его химической структуры и физико-химических свойств от прототипа.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Предлагаемое изобретение решает задачу разработки нового высокоэффективного способа количественного определения лекарственного средства для коррекции когнитивных функций при сосудистых заболеваниях головного мозга в биологических средах - 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида.
ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Поставленная задача решается способом количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах, включающем экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида, с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора, содержащего калий фосфорнокислый однозамещенный (рН=4,0), и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%.
Наиболее оптимальными, но не необходимыми режимами высокоэффективной жидкостной хроматографии при этом являются:
скорость подачи потока элюента - 0,1 мл/мин;
объем вводимой пробы - 20 мкл;
детектор - спектрофотометрический, 280 нм;
время анализа - 20 мин;
температура термостата колонки - 35°С.
Отсутствие источников информации, содержащих ту же совокупность признаков, что и в разработанном способе, сообщает ему соответствие критерию «новизна».
Та же совокупность признаков позволяет получить новый непредсказуемый эффект - разработка высокоэффективного способа количественного определения в биологических средах нового лекарственного средства - 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида (далее субстанция NL) и, таким образом, сообщает ему соответствие критерию «изобретательский уровень».
Проведение количественного определения нового лекарственного средства с использованием известного оборудования с помощью известных препаратов сообщает разработанному способу соответствие критерию «промышленная применимость».
Таким образом, разработанный способ соответствует всем 3 критериям охраноспособности изобретения и может быть квалифицирован как изобретение.
На Фиг. 1 представлена хроматограмма раствора субстанции NL с концентрацией 1000 нг/мл.
На Фиг. 2 представлена хроматограмма NL в плазме крови с концентрацией 1000 нг/мл при экстракции ацетонитрилом в нейтральной среде.
На Фиг. 3 представлена хроматограмма NL в плазме крови с концентрацией 1000 нг/мл при экстракции ацетонитрилом в кислой среде.
На Фиг. 4 представлена хроматограмма образца плазмы крови крысы, время забора крови 30 мин.
На Фиг. 5 представлена хроматограмма образца плазмы крови крысы, время забора крови 60 мин.
Пример 1. Подбор условий пробоподготовки
В качестве биологической среды использовали плазму крови крыс.В качестве метода извлечения NL из биологической матрицы использовали жидкостно-жидкостную экстракцию ацетонитрилом. Важнейшим и подлежащим оптимизации показателем при экстракции является степень извлечения. На степень извлечения может оказывать влияние множество внешних факторов: рН среды, температура, скорость, время перемешивания и т.д. Оптимизировали процедуру пробоподготовки по значению рН среды и времени перемешивания. При этом скорость перемешивания выбрана максимальной - 4000 об/мин, температура - комнатной. Определение степени извлечения при различных варьируемых внешних значениях осуществляли путем сравнения значений площадей пиков в растворе субстанции NL и в плазме крови аналогичных концентраций. Кислое значение рН среды создавали добавлением к плазме крови 20% раствора ортофосфорной кислоты, щелочное - 0,1 М раствора натрия гидроксида. Полученные хроматограммы представлены на фиг. 1-3, результаты подбора условий пробоподготовки представлены в таблице 1.
Из таблицы 1 видно, что наибольшая степень извлечения NL из плазмы крови крыс наблюдается при жидкостно-жидкостной экстракции ацетонитрилом при кислом значении рН среды. Также видно, что наибольшая степень извлечения наблюдается при времени перемешивания, равном 10 мин при экстракции и 5 мин при добавлении неорганической соли. Степень извлечения NL из плазмы крови животного составляет около 96%.
Для подтверждения возможности применения разработанных условий для определения NL в другой биологической среде (плазма крови кроликов) проводили исследование степени извлечения из данной матрицы методом жидкостно-жидкостной экстракции ацетонитрилом при кислом значении рН среды и времени перемешивания в течение 10 и 5 мин. Результаты исследования представлены в таблице 2.
Из таблицы 2 видно, что степень извлечения NL из плазмы крови кроликов составляет 96,4% и находится на одном уровне со степенью извлечения NL из плазмы крови крыс.Следовательно, в качестве биологической матрицы при определении NL в плазме крови животного можно использовать плазму крови как крыс, так и кроликов, ввиду одинаковой степени извлечения аналита.
Пример 2. Количественное определение субстанции NL в плазме крови.
Приготовление подвижной фазы А (ПФ А). 2,5 г калия фосфорнокислого однозамещенного помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 300 мл воды очищенной, перемешивают до полного растворения, прибавляют воду очищенную до метки и перемешивают. Доводят рН полученного раствора до 4,0 ортофосфорной кислотой.
Приготовление раствора субстанции NL с концентрацией 1 мг/мл
Около 0,01 г (точная навеска) субстанции NL помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл подвижной фазы А (ПФ А), доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.
Раствор хранят не более 3 суток при температуре 2-8°С.
Приготовление раствора субстанции NL с концентрацией 0,01 мг/мл
1 мл раствора субстанции NL с концентрацией 1 мг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ А до метки и перемешивают.1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ А до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.
Приготовление градуировочных растворов субстанции NL
Из раствора субстанции NL с концентрацией 0,01 мг/мл методом параллельно-последовательного разбавления готовят растворы субстанции NL с концентрациями: 20, 10, 7, 5, 2, 1, 0,5, 0,25 мкг/мл. Растворы используют свежеприготовленными.
Приготовление градуировочных образцов NL в плазме крови животных
В пластиковую центрифужную микропробирку типа «Эппендорф» вместимостью 2 мл помещают 450 мкл холостой плазмы крови крыс, не содержащей NL, прибавляют 50 мкл исходного калибровочного раствора субстанции соответствующей концентрации и перемешивают. Затем прибавляют 1 мл ацетонитрила и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 10 мин. К полученной смеси прибавляют 0,1-0,2 г натрия хлорида и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 5 мин. Полученный раствор центрифугируют при 13000 об/мин в течение 10 мин. Водную фазу отбрасывают, а органическую упаривают под вакуумом до сухого остатка при температуре 45°С в течение 90-100 мин. К сухому остатку прибавляют 500 мкл подвижной фазы А (ПФ А), перемешивают на встряхивателе в течение 5 мин и центрифугируют. Надосадочную жидкость используют для анализа.
Подготовка пробы
В пластиковую центрифужную микропробирку типа «Эппендорф» вместимостью 2 мл помещают 500 мкл плазмы крови крыс, содержащей NL, прибавляют 1 мл ацетонитрила и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 10 мин. К полученной смеси прибавляют 0,1-0,2 г натрия хлорида и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 5 мин. Полученный раствор центрифугируют при 13000 об/мин в течение 10 мин. Водную фазу отбрасывают, а органическую упаривают под вакуумом до сухого остатка при температуре 45°С в течение 90-100 мин. К сухому остатку прибавляют 500 мкл подвижной фазы А (ПФ А), перемешивают на встряхивателе в течение 5 мин и центрифугируют. Надосадочную жидкость используют для анализа.
Проверка пригодности хроматографической системы
Готовят модельный раствор NL в плазме крови животного с концентрацией 1000 нг/мл.
Время удерживания NL должно составлять около 9,6 мин, относительное стандартное отклонение времени удерживания не должно превышать 10%, соотношение сигнал/шум должно быть не менее 160/1, среднее квадратическое отклонение выходного сигнала не должно превышать 5%.
Анализируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Далее анализируют градуировочные растворы. По результатам анализа градуировочных растворов строят градуировочный график зависимости площади пика анализируемого вещества от его концентрации в плазме крови животных. Концентрацию NL в исследуемых образцах определяют по градуировочному графику.
Хроматограммы, полученные при анализе образцов плазмы крови крыс после внутрижелудочного введения субстанции NL представлены на фиг. 4 и фиг. 5.
Как видно из приведенных примеров, предлагаемое изобретение позволяет получить необходимую и достоверную информацию о способе количественного определения субстанции 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах.
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1 Caggiano A., Blight А., Рапу T.J. (2013) Identification of metabolites of dalfampridine (4-aminopyridine) in dog and rat. Journal of Drug Assessment, 2:1, 72-80, DOI: 10.3109/21556660.2013.794143.
2 Заявка на патент US 2017035742.
3 Gupta R.N., Hansebout R.R. Optimization of the determination of 4-aminopyridine in human serum and urine by column liquid chromatography. Journal of Chromatography B, 677 (1996) 183-189.
Claims (1)
- Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах, включающий экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора калия фосфорнокислого однозамещенного, подкисленного до рН 4,0 ортофосфорной кислотой, и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018123240A RU2686116C1 (ru) | 2018-06-27 | 2018-06-27 | Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018123240A RU2686116C1 (ru) | 2018-06-27 | 2018-06-27 | Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2686116C1 true RU2686116C1 (ru) | 2019-04-24 |
Family
ID=66314567
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018123240A RU2686116C1 (ru) | 2018-06-27 | 2018-06-27 | Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2686116C1 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU941890A1 (ru) * | 1979-10-02 | 1982-07-07 | Алма-Атинский Государственный медицинский институт | Способ определени лекарственных препаратов-производных пиридина |
| US20170035742A1 (en) * | 2009-09-04 | 2017-02-09 | Acorda Therapeutics, Inc. | Durable treatment with 4-aminopyridine in patients with demyelination |
-
2018
- 2018-06-27 RU RU2018123240A patent/RU2686116C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU941890A1 (ru) * | 1979-10-02 | 1982-07-07 | Алма-Атинский Государственный медицинский институт | Способ определени лекарственных препаратов-производных пиридина |
| US20170035742A1 (en) * | 2009-09-04 | 2017-02-09 | Acorda Therapeutics, Inc. | Durable treatment with 4-aminopyridine in patients with demyelination |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| GUPTA R.N. et al. Optimization of the determination of 4-aminopyridine in human serum and urine by column liquid chromatography // Journal of Chromatography B, 1996, 677(1):183-189. * |
| КУЗНЕЦОВА А.В. Фармакопейный анализ производных фурана, пиррола, пиразола, имидазола, пиридина, хинолина // Учебное пособие для студентов IV курса специальности "Фармация", Пемза, 2013, ;[он-лайн], [найдено 24.10.2018]. Найдено из Интернет: URL: https://dep_oikf.pnzgu.ru/files/dep_oikf.pnzgu.ru/furany_posobie.pdf. * |
| КУЗНЕЦОВА А.В. Фармакопейный анализ производных фурана, пиррола, пиразола, имидазола, пиридина, хинолина // Учебное пособие для студентов IV курса специальности "Фармация", Пемза, 2013, ;[он-лайн], [найдено 24.10.2018]. Найдено из Интернет: URL: https://dep_oikf.pnzgu.ru/files/dep_oikf.pnzgu.ru/furany_posobie.pdf. GUPTA R.N. et al. Optimization of the determination of 4-aminopyridine in human serum and urine by column liquid chromatography // Journal of Chromatography B, 1996, 677(1):183-189. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nikolin et al. | High perfomance liquid chromatography in pharmaceutical analyses | |
| Chung et al. | In vitro and in vivo assessment of ADME and PK properties during lead selection and lead optimization–guidelines, benchmarks and rules of thumb | |
| Shoup et al. | Determination of urinary normetanephrine, metanephrine, and 3-methoxytyramine by liquid chromatography, with amperometric detection. | |
| Purdie et al. | Analytical applications of circular dichroism | |
| Poklis et al. | High‐performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for the determination of 2CC‐NBOMe and 25I‐NBOMe in human serum | |
| Goryński et al. | SPME as a promising tool in translational medicine and drug discovery: From bench to bedside | |
| Álvarez-Freire et al. | Determination of benzodiazepines in pericardial fluid by gas chromatography–mass spectrometry | |
| Hemmati et al. | Benefits of microsampling and microextraction for metabolomics studies | |
| Bongaerts et al. | Sensitive targeted methods for brain metabolomic studies in microdialysis samples | |
| Świądro et al. | Development of a new method for drug detection based on a combination of the dried blood spot method and capillary electrophoresis | |
| Vandergrift et al. | Condensed phase membrane introduction mass spectrometry with in situ liquid reagent chemical ionization in a liquid electron ionization source (CP-MIMS-LEI/CI) | |
| Guo et al. | A rapid, sensitive, and widely applicable method for quantitative analysis of underivatized amino acids in different biological matrices by UHPLC‐MS/MS | |
| Al-Qurain et al. | Simultaneous LC-MS/MS quantification of oxycodone, tramadol and fentanyl and their metabolites (noroxycodone, oxymorphone, O-desmethyltramadol, N-desmethyltramadol, and norfentanyl) in human plasma and whole blood collected via venepuncture and volumetric absorptive micro sampling | |
| RU2686116C1 (ru) | Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах | |
| Yen et al. | Quantitation of 1, N 6-ethenoadenine in rat urine by immunoaffinity extraction combined with liquid chromatography/electrospray ionization mass spectrometry | |
| Lwin et al. | A new LC-MS/MS bioanalytical method for perindopril and perindoprilat in human plasma and milk | |
| Orlova et al. | Simultaneous determination of sulfur mustard adducts with guanine and acetylcysteine in urine by high-resolution high-performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry | |
| Orsulak et al. | Determination of urinary normetanephrine and metanephrine by radial-compression liquid chromatography and electrochemical detection. | |
| Cooper et al. | Determination of eletriptan in plasma and saliva using automated sequential trace enrichment of dialysate and high-performance liquid chromatography | |
| Salunke et al. | Separation of Dyes by Mixed Hydrotropic Thin Layer Chromatography | |
| Swamy et al. | Stability-indicating HPLC determination of rifampicin in bulk drug and dosage form | |
| Baños et al. | A novel clean-up method for urine analysis of low-molecular mass aldehydes by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection | |
| Kammoun et al. | LC-MS/MS determination of glimepiride in human plasma with a high recovery at picogram scale: Pharmacokinetic study after oral administration | |
| Bertucci et al. | HSA binding of HIV protease inhibitors: a high‐performance affinity chromatography study | |
| Kaklamanos et al. | Determination of dapsone in muscle tissue and milk using high-performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20210629 Effective date: 20210629 |