RU2682874C1 - Способ поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа - Google Patents
Способ поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа Download PDFInfo
- Publication number
- RU2682874C1 RU2682874C1 RU2018109468A RU2018109468A RU2682874C1 RU 2682874 C1 RU2682874 C1 RU 2682874C1 RU 2018109468 A RU2018109468 A RU 2018109468A RU 2018109468 A RU2018109468 A RU 2018109468A RU 2682874 C1 RU2682874 C1 RU 2682874C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liver
- vibration
- hsc
- afp
- content
- Prior art date
Links
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 title claims abstract description 51
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 title abstract description 14
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 title abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 13
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims abstract description 7
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 claims abstract description 3
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 19
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 claims description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 210000003995 blood forming stem cell Anatomy 0.000 abstract 5
- 208000032984 Intraoperative Complications Diseases 0.000 abstract 1
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 abstract 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 8
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 7
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 6
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 6
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 3
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 3
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 description 3
- 229960001661 ursodiol Drugs 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 2
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 206010057573 Chronic hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 102100037114 Elongin-C Human genes 0.000 description 1
- 208000010334 End Stage Liver Disease Diseases 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 101001011859 Homo sapiens Elongin-A Proteins 0.000 description 1
- 101001011846 Homo sapiens Elongin-B Proteins 0.000 description 1
- 101000881731 Homo sapiens Elongin-C Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101000836005 Homo sapiens S-phase kinase-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010046996 Varicose vein Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002529 anti-mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000004159 blood analysis Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 208000011444 chronic liver failure Diseases 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 210000003999 epithelial cell of bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000011200 hepatorenal syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010019847 hepatosplenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 210000003228 intrahepatic bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000033667 organ regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 208000007232 portal hypertension Diseases 0.000 description 1
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 1
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 208000027185 varicose disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61H—PHYSICAL THERAPY APPARATUS, e.g. DEVICES FOR LOCATING OR STIMULATING REFLEX POINTS IN THE BODY; ARTIFICIAL RESPIRATION; MASSAGE; BATHING DEVICES FOR SPECIAL THERAPEUTIC OR HYGIENIC PURPOSES OR SPECIFIC PARTS OF THE BODY
- A61H23/00—Percussion or vibration massage, e.g. using supersonic vibration; Suction-vibration massage; Massage with moving diaphragms
- A61H23/02—Percussion or vibration massage, e.g. using supersonic vibration; Suction-vibration massage; Massage with moving diaphragms with electric or magnetic drive
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rehabilitation Therapy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использовано для поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа. Производят доставку в печень аутологичных гемопоэтических стволовых клеток (CD133+ ГСК), которую осуществляют путем чрескожной неинвазивной механической вибрации на область печени в диапазоне 0.02-10 кГц, индуцирующей опосредованное высвобождение в кровь альфа-фетопротеин (афп+CD133+ГСК) гемопоэтических стволовых клеток. Мониторируют их содержание в лимфоцитах крови не реже одного раза в неделю методом проточной цитометрии до и во время курса вибрации по показателям абсолютного содержания афп+ CD133+ ГСК и относительного их содержания в общей фракции CD133+ГСК. При этом вибрацию осуществляют ежедневно один раз в день в течение 15 минут при амплитуде вибраций 10±2 мкм и длительности каждого цикла 60±10 сек. По достижению максимального увеличения хотя бы одного из этих показателей во время курса вибрации по сравнению с их значениями до него вибрационное воздействие заканчивают, продолжая мониторирование. В случае снижения достигнутых показателей вибрационное воздействие повторяют в тех же режимах. Способ обеспечивает специфичность по отношению к печени, неинвазивность - исключение хирургической травмы, а также возможность неоднократных повторений без причинения ущерба здоровью больного, находящегося в листе ожидания трансплантации печени. 2 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине и биологии и может найти применение в трансплантологии для немедикаментозной поддержки больных с терминальными стадиями болезней печени.
Поскольку основной проблемой в трансплантологии является сохраняющийся дефицит донорских органов, срок ожидания трансплантации увеличивается при возрастании числа нуждающихся, при этом в период ожидания функция печени неизбежно ухудшается, риск летального исхода возрастает с течением времени. Для пациентов в листе ожидания поддерживающая терапия постепенно становится мало эффективной, задача сохранения функционального состояния печени до операции является чрезвычайно актуальной. На практике подбор трансплантата занимает неопределенное время, как правило, длительное, в течение которого функция печени больного продолжает неизбежно снижаться, увеличивая риск летального исхода. Большое количество таких больных, явный недостаток донорских органов и отсутствие специализированных методов эффективной медикаментозной поддержки функции печени у пациентов в листе ожидания выдвигают задачу активного медицинского поддержания остаточной функции цирротически измененной печени в течение всего периода ожидания трансплантации.
Исследования последних лет определили современную стратегию поиска решения проблемы в сфере регенеративной клеточной терапии, основанной на недавно обнаруженном свойстве стволовых гемопоэтических клеток (ГСК) способствовать регенерации тканей другого гистотипа.
С 2005 года и по настоящее время предпринимаются попытки мобилизации выхода аутологичных ГСК из костного мозга (КМ) в кровь пациента путем стимуляции кроветворения инъекциями ростовых факторов [ClinProc. 2014 Mar; 89 (3): 414-424. doi:10.1016/j.mayocp.2013.10.023; CellTransplant. 2010; 19 (1l): 1475-86; BMJOpen. 2015 Mar 20; 5 (3): е007700],либо путемпредварительного изъятия части костного мозга и последующей реинфузииего в кровь в виде очищенной фракции ГСК с фенотипами CD133+ [STEMCELLSVolume 23, Issue 4 April 2005Pages 463-470], либо CD34+ГСК [StemCells. 2006 Jul; 24 (7): 1822-1830; J.Gastroenteroi 2007 Jun 28; 13 (24): 3359-3363; Am J Gastroenterol. 2008 Aug; 103 (8): 1952-1958; Cell Prolif. 2008 Feb; 41 Suppl 1 (): 115-25], либо в виде общей лимфоцитарно-моноцитарной взвеси клеток КМ, называемой мононуклеарной фракцией (МНФ) [EuropeanJournalof Gastroenterology & Hepatology 2010, 22: 33-42]. Длительный период этих попыток до сих пор не привел к окончательному заключению о преимуществе какого-либо из перечисленных подходов, выявил небезопасность внутрисосудистых инфузий клеточного материала при декомпенсированном циррозе в виде таких осложнений как нефропатия и гепаторенальный синдром [J. Gastroenterol. 2007 Jun 28; 13 (24): 3359-3363], но большинство авторов подтверждают необходимость дальнейших поисков использования терапевтических возможностей ГСК при циррозе печени.
Наиболее близким к предлагаемому является способ активного поддержания функции цирротической печени, описанный в работе [StemCellsTranslMed. 2016 Jan; 5 (1): 87-94. doi: 10.5966/sctm.2015-0004 PMCID: PMC4704869.].
Этот способ основан на предположении о том, что CD133+ГСК костного мозга оказывают стимулирующее регенерацию печеночных клеток действие подобно аналогичным феноменам, регистрируемым с ГСК в других тканях и органах.
Способ осуществляется путем предварительной трепанобиопсии из крыла собственной подвздошной кости пациента и аспирации 150 мл КМ, последующей изоляции из него в условиях лаборатории фракции мононуклеарных клеток (МНК) и/или фракции CD133+ГСК, и реинфузии полученных МНК или CD133+ГСК в 20 мл изотонического раствора в портальную вену пациентов под местной анестезией через катетер в течение 5-10 минут на заключительной фазе процедуры. Как отмечено авторами, анализ введения МНК восьми пациентам и трем - CD133+ГСК, не выявил отличий в основном интегральном показателе неотложности выполнения трансплантации печени (MELD) в сравнении с плацебо. Вместе с тем было отмечено временное преимущество CD133+ГСК по сравнению с МНК и плацебо, хотя и статистически недостоверное (р=0.08). Тем не менее авторы пришли к заключению о перспективности дальнейшего изучения именно CD133+ГСК.
Достоинством способа-прототипа является использование CD133+ГСК, менее изученных, но более перспективных по сравнению с МНК.
Однако способу присущ целый ряд недостатков:
- с учетом критического состояния здоровья реципиентов, ожидающих трансплантацию, выполнение инвазивной процедуры оперативного изъятия части костного мозга нежелательно ввиду травматичности и связанных с этим рисков кровотечения и инфекции;
- длительное пребывание больного в режиме ожидания может потребовать повторных инвазивных пункций КМ и его реинфузии, что еще более усугубляет отмеченные недостатки и негативно влияет на кроветворную функцию КМ;
Кроме того, способ неспецифичен, т.к. среди клеток CD 133+ГСК далеко не все специфичны к печени. У здоровых людей концентрация специфичных (коммитированных) клеток с маркерным белком печени альфа-фетопротеин (афп+CD133+ГСК) исчисляется сотыми долями процента в лимфоцитах крови, а при циррозе печени их еще меньше [Russian journal of transplantology and artificialorgans). 2015, 17 (1): 68-73; Jacobs Journal of Regenerative Medicine, 2016, 1 (3): pp. 1-9].
Технический результат настоящего изобретения состоит в повышении специфичности поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа за счет неинвазивной механической вибрации, индуцирующей опосредованное высвобождение в кровь афп+CD133+ГСК, коммитированных к печени, и снижающей травматичность способа.
Этот результат достигается тем, что в известном способе, включающем доставку в печень аутологичных CD133+ ГСК, согласно изобретению, доставку CD133+ГСК осуществляют путем чрескожной неинвазивной механической вибрации на область печени в диапазоне 0.02-10 кГц, индуцирующей опосредованное высвобождение в кровь афп+CD133+ГСК, мониторируют их содержание в лимфоцитах крови не реже одного раза в неделю методом проточной цитометрии до и во время курса вибрации по показателям абсолютного содержания афп+ CD133+ ГСК и относительного их содержания в общей фракции CD133+ГСК, при этом вибрацию осуществляют ежедневно один раз в день в течение 15 минут при амплитуде вибраций 10±2 мкм и длительности каждого цикла 60+10 сек., по достижению максимального увеличения хотя бы одного из этих показателей во время курса вибрации по сравнению с их значениями до него вибрационное воздействие заканчивают, продолжая мониторирование, и в случае снижения достигнутых показателей вибрационное воздействие повторяют в тех же режимах.
К созданию предлагаемого способа нас побудило то, что для поддержания функционального состояния цирротически измененной печени прототип и другие известные способы, как выше сказано, оказываются не только травматичными для пациентов, но и неспецифичными.
Наряду с известными многочисленными доказательствами положительного влияния циркулирующих в крови субпопуляций ГСК на регенерацию и функцию различных органов в последние годы доказано существование в общих фракциях ГСК специальных субфракций, несущих специфический для целевого органа белок, который указывает на коммитированность (специфичность) данной субфракции к этому органу - в предлагаемом способе это печень [Biol Cell. 2005, 97 (2): 133-146; USA SuttonHartPress; 2010; Shoutko AN et ah, Jacobs Journal of Regenerative Medicine, 2016, 1 (3): pp. 1-9]. Мишенями циркулирующих коммитированных афп+CD133+ГСК являются гепатобласты (гепатоциты в фазе S клеточного цикла) печени, обеспечивающие регенерацию органа и имеющие идентичные маркеры афп и CD133. Как нами показано ранее, пересадка новой печени индуцирует увеличение афп+CD133+ГСК в крови реципиента [Shoutko, A.N. etal,. Gene and Cell Therapy, 2, 7-15]. Таким образом мы пришли к заключению, что все известные подходы, включая прототип, не учитывали важной роли афп+CD133+ГСК субфракциии. Поскольку основная масса CD133+ГСК из пунктата КМ может быть нейтральной или коммитированной к другим различным тканям организма, а не только к печени, расчет на ее высокую эффективность в поддержании функционального состояния цирротически измененной печени, не оправдан.
Других работ по этому вопросу нам не встречалось. В то же время именно доказанный нами факт наличия ГСК, специфичных к целевым тканям, стал основой для попытки использовать именно коммитированные клетки с целью создания нового неинвазивного подхода к поддержанию функционального состояния печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа.
Поскольку все описанные нами известные способы внутрисосудистого введения аутологичных ГСК, извлекаемых предварительно непосредственно из КМ пациента (прототип), оказались неспецифичными и потенциально опасными, мы попытались разработать более специфичный и неинвазивной способ решения данной проблемы путем дистанционной активации вывода из КМ в кровь пациента коммитированных к печени ГСК.
Занимаясь профессионально в течение многих лет вибрационными воздействиями с целью активации вывода ГСК из КМ [Патенты №2268031, №2166924], мы решили попробовать использовать эту идею для поддержания функционального состояния цирротически измененной печени.
Осуществление доставки ГСК путем неинвазивной механической вибрации печени в диапазоне 0.02-10 кГц индуцирует, что нами доказано, создание в КМ и выведение в кровь ГСК, коммитированных непосредственно к клеткам паренхимы печени. Использование неинвазивной механической вибрации печени исключает необходимость инвазивного извлечения КМ из плоских костей пациента, выделения общей фракции ГСК и последующей внутрисосудистой реинфузии этой фракции ГСК, неспецифичной для печени.
Режимы вибрационного воздействия на область печени и расположение источников вибрации - виброфонов - в специальном поясе для пациентов, удобном для закрепления его на теле в области печени, найдены нами опытным путем.
Использование цитометрического метода обеспечивает быстрое и точное определение в лимфоцитах крови абсолютного содержания коммитированных афп+CD133+ ГСК и относительного содержания их в общей фракции CD133+ГСК. Эти показатели характеризуют степень обогащения крови специфическими для печени клетками, позволяя в любой момент оценивать физиологическую связь органа с системой кроветворения. Осуществление такого опосредованного способа выведения в кровь коммитированных к клеткам паренхимы печени ГСК, как нами показано при использовании его у пациентов, находящихся в листе ожидания трансплантации органа, является, на наш взгляд, перспективным для решения поставленной нами задачи и составило предмет настоящего изобретения.
Сущность способа поясняется примерами.
Пример 1. Пациентка Б., 55 лет(1962 г.р.), обратилась 17.11.2016 г. в РНЦРХТ с диагнозом: Неверифицированный цирроз печени (МКБ-К74.6) для обследования и определения показаний к трансплантации печени.
Из анамнеза заболевания: Считает себя больной с мая 2015 г., когда впервые начала отмечать желтушность склер и кожных покровов. Обследовалась по месту жительства, на основании данных клинического и инструментального обследования установлен цирроз печени, осложненный портальной гипертензией (асцит, варикозно-расширенные вены пищевода 2 ст). В мае 2016 г. была направлена на консультацию в РНЦРХТ с целью определения показаний к трансплантации печени.
При поступлении в Центр 17.11.2016 г.противопоказаний к трансплантации печени не выявлено. Пациентка согласилась на оперативное лечение и была включена в лист ожидания. Поскольку в листе ожидания Центра находилось в это время около 140 человек, а период ожидания в среднем составлял более 8 месяцев, больной в ходе планового визита было предложено для использования в амбулаторном режиме вибрационное воздействие на область печени. После получения информированного согласия больная прошла лабораторное исследование крови: клинический, биохимический анализ крови, коагулограмма, онкомаркеры. Выполнена спиральная компьютерная томография (СКТ) грудной клетки, живота, таза с контрастным усилением, исключена онкопатология. Произведена ультразвуковая эластометрия печени, при оценке плотности в 3 сегментах печени: SIII, SV, SVI получены значения 28 кРа, 23 кРа, 21 кРа соответственно, что соответствует степени фиброз 4 (F4). Оценка по шкалам Child-Puhg 9 баллов, что соответствует классу цирроза печени В, MELD-Na 15 баллов.
Перед вибрационным воздействием у больной в лимфоцитах крови цитометрически определили содержание афп+CD133+ГСК и CD133+ГСК (Табл. 1).
12.12.2016 г. начали вибрационное воздействие один раз в день в течение 15 минут при амплитуде вибраций 10±2 мкм и длительности каждого цикла 60±10 сек. Такое воздействие на область печени проводили с помощью терапевтического блока (ТБ), подключенного к серийному сертифицированному источнику электромеханических колебаний - аппарату виброакустического воздействия «ВИТАФОН-5», Гост50444-92 и ТУ9444-009-23138557-2009. ТБ для контактной чрескожной передачи механических микровибраций к тканям печени изготовлен в ООО «ВИТАФОН» и состоит из 8-ми виброфонов диаметром 45 мм стандартного комплекта аппарата «ВИТАФОН-5», которые расположены в ТБ в два ряда (по четыре в каждом). Расстояния между центрами рядов 75 мм и центрами виброфонов внутри каждого ряда 55 мм. Таким образом образуется активное прямоугольное поле размером 12×22 см, объединенное плоским матерчатым каркасом с 8 фиксирующими гнездами и регулируемыми мягкими креплениями для фиксации на теле человека. Такой ТБ размещается на правом боку пациента таким образом, чтобы блок виброфонов плотно покрывал проекцию области печени, а нижний край его совпадал с нижней границей ребер.
Процедуру больная перенесла удовлетворительно, осложнений не наблюдалось. Вибрационные воздействия продолжали ежедневно по 1 разу в день в тех же режимах с одновременным мониторированием ГСК не реже одного раза в неделю вплоть до 19.12.2016 г., когда показатели ГСК достигли максимума. Эти данные приведены в Таблице 1 в виде процентного содержания коммитированных афп+CD133+ГСК в лимфоцитах (строка 1) и общих CD133+ГСК (строка 2), а также процентного содержания коммитированных афп+CD133+ ГСК в общих CD133+ ГСК (строка 3).
Как видно из таблицы, положительный ответ получили 19.12.2016 г. (через неделю) в виде увеличения абсолютного содержания
афп+CD133+коммитированных ГСК в 1,7 раза и относительного их содержания во фракции CD133+ГСК - в 1,9 раза.
Вибрационное воздействие было прекращено, а мониторирование продолжено. К 02.02.2016 г.показатели существенно снизились (см. Табл. 1), поэтому вибрационное воздействие возобновили в тех же режимах. К 20.02.2017 г. (через 3 недели) было получено существенное - 5-кратное увеличение афп+CD133+коммитированных СГК и 2-кратное увеличение их в общей фракции CD133+ГСК, после чего воздействие вновь прервали.
26.04.2017 г.после очередного снижения показателей вибрационное воздействие было начато снова. Через 5 недель воздействия (вплоть до 29.05.2017 г.) было достигнуто почти 3-х кратное увеличение коммитированных афп+ГСК и 2-х кратное увеличение их в общей фракции CD133+ГСК.
В связи с отсутствием больной (с 29.05.2017 г.по 17.01.2018 г) наблюдение за нею было прервано.
18.01.2018 г.было обнаружено существенное снижение показателей - до 0,0009 и 3,4 соответственно. Вибрационное воздействие возобновили и в течение 2-х недель показатели были увеличены в 2,8 раза для афп+CD133+коммитированных ГСК и в 2,1 раза для их содержания в общей фракции CD133+ГСК.
За время наблюдения за больной состояние оставалось удовлетворительным, ухудшения функции печени не было получено, по окончании воздействия в мае 2017 г. (29.05.17) показатель Child-Pugh 6 баллов, что соответствует классу тяжести цирроза A, a MELD - 12 баллов. Таким образом, прогностические показатели существенно улучшились. В период отсутствия вибрационного воздействия при продолжении амбулаторного лечения по месту жительства субъективного ухудшения самочувствия больная не отметила, однако, выявлены изменения в виде увеличения концентрации билирубина в крови, MELD 15 баллов, по шкале Child-Pugh 7 баллов, что соответствует тяжести цирроза класс В, то есть вновь фиксировалось состояние, как при обращении, но после каждого выполнения ей вибрационного воздействия, прогностические показатели существенно улучшались.
Исходные значения показателей подчеркнуты.
ВЫВОД: Благодаря вибрационным воздействиям у больной более года удавалось поддерживать функциональное состояние печени без прогрессирования цирроза.
Пример 2.
Больной Я., 54 года (1963 г.р.), обратился в РНЦРХТ 14.09.2016 г.
по рекомендации врача-гастроэнтеролога, с диагнозом: Первичный билиарный цирроз (ПБЦ) печени (МКБ-К74.3) для обследования и определения показаний к трансплантации печени.
Из анамнеза заболевания: Считает себя больным с 2014 г., когда впервые начал отмечать желтушность склер и кожных покровов. Обследован в клинике СЗГМУ им. Мечникова, установлен диагноз ПБЦ на основании лабораторных исследований (высокие билирубин, АЛТ, ACT, щелочная фосфатаза) и иммунологических тестов (антимитохондриальные антитела). Назначены препараты урсодезоксихолевой кислоты (УДХК). В динамике на фоне лечения УДХК без улучшения, после чего назначен преднизолон в суточной дозе 60 мг, что позволило достичь биохимической ремиссии, но сохранялись гепатоспленомегалия, расширение внутрипеченочных желчных протоков. В сентябре 2017 г.был направлен на консультацию в РНЦРХТ с целью определения показаний к трансплантации печени.
В результате обследования в клинике по протоколу отбора на трансплантацию противопоказаний не выявлено. Пациент согласился на оперативное лечение и был включен в лист ожидания. Учитывая длительные сроки ожидания, больному в ходе планового визита предложено для использования в амбулаторном режиме вибрационное воздействие на область печени с целью стимуляции выделения в кровь из КМ коммитированных к ткани печени стволовых гемопоэтческих клеток.
При обследовании перед началом вибрационного воздействия установлены значения основных прогностических показателей: MELD 18 баллов, Child-Pugh 8 баллов, что определяло класс тяжести цирроза печени как В. Далее процедуры подготовки больного и вибрационного воздействия выполнялись аналогично Примеру 1. Осложнений при проведении процедур не было. Результаты цитометрического мониторирования представлены в Таблице 2.
Исходные значения показателей подчеркнуты.
За относительно небольшое время наблюдения показатели функции печени не изменились, а уровень билирубина снизился с 80 до 62 мкмоль/л. MELD снизился с 18 до 16 баллов. Таким образом, ухудшения состояния больного нет, вибрационное воздействие может быть продолжено.
Еженедельное мониторирование показателей функции печени показали, что максимальное увеличение абсолютного содержания афп+CD133+коммитированных клеток в лимфоцитах (с 0,0011 до 0,032) и их относительного содержания во фракции CD133+ СГК (с 1,96 до 25,1) произошло через 4 недели.
Выводы: Благодаря вибрационным воздействиям у больного получено 3-кратное увеличение коммитированных к печени клеток в лимфоцитах и более чем 12-кратное увеличение их содержание в общей фракции ГСК. Пациент продолжает наблюдаться.
К настоящему времени предлагаемый способ использован у 7 пациентов, у всех из них удается поддерживать функциональное состояние печени без прогрессирования цирроза.
Предлагаемый способ по сравнению с известными имеет ряд существенных преимуществ, основными из которых являются специфичность по отношению к целевому органу, неинвазивность - исключение хирургической травмы -, а также возможность неоднократных повторений без причинения ущерба здоровью больного с терминальной стадией болезни печени.
Способ разработан в группе трансплантологии совместно с лабораторией методов повышения эффективности терапии РНЦРХТ и ООО «ВИТАФОН» и прошел клиническую апробацию у 7 потенциальных реципиентов с положительным результатом.
Claims (1)
- Способ поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа, включающий доставку в печень аутологичных гемопоэтических стволовых клеток (CD133+ ГСК), отличающийся тем, что доставку CD133+ГСК осуществляют путем чрескожной неинвазивной механической вибрации на область печени в диапазоне 0.02-10 кГц, индуцирующей опосредованное высвобождение в кровь альфа-фетопротеин (афп+CD133+ГСК) гемопоэтических стволовых клеток, мониторируют их содержание в лимфоцитах крови не реже одного раза в неделю методом проточной цитометрии до и во время курса вибрации по показателям абсолютного содержания афп+ CD133+ ГСК и относительного их содержания в общей фракции CD133+ГСК, при этом вибрацию осуществляют ежедневно один раз в день в течение 15 минут при амплитуде вибраций 10±2 мкм и длительности каждого цикла 60±10 сек, по достижению максимального увеличения хотя бы одного из этих показателей во время курса вибрации по сравнению с их значениями до него вибрационное воздействие заканчивают, продолжая мониторирование, и в случае снижения достигнутых показателей вибрационное воздействие повторяют в тех же режимах.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018109468A RU2682874C1 (ru) | 2018-03-16 | 2018-03-16 | Способ поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018109468A RU2682874C1 (ru) | 2018-03-16 | 2018-03-16 | Способ поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2682874C1 true RU2682874C1 (ru) | 2019-03-21 |
Family
ID=65858535
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018109468A RU2682874C1 (ru) | 2018-03-16 | 2018-03-16 | Способ поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2682874C1 (ru) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2166924C1 (ru) * | 1999-11-10 | 2001-05-20 | Центральный научно-исследовательский рентгенорадиологический институт | Способ обогащения крови стволовыми кроветворными клетками |
| RU2268031C1 (ru) * | 2005-04-20 | 2006-01-20 | Центральный научно-исследовательский рентгено-радиологический институт МЗ РФ (ЦНИРРИ МЗ РФ) | Способ коррекции отдаленных последствий радиационного воздействия в малых дозах |
| WO2010003223A1 (en) * | 2008-07-11 | 2010-01-14 | Simon Fraser University | Randomic vibration for treatment of blood flow disorders |
| RU2413493C1 (ru) * | 2009-06-30 | 2011-03-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "МИКРОЭПМ" | Устройство виброакустического массажа |
| US7909785B2 (en) * | 2003-02-24 | 2011-03-22 | Podrazhansky Yury M | Method and apparatus for improving local blood and lymph circulation using low and high frequency vibration sweeps |
| RU2494404C1 (ru) * | 2012-07-10 | 2013-09-27 | ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "РОССИЙСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР РАДИОЛОГИИ И ХИРУРГИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (ФГБУ "РНЦРХТ" Минздравсоцразвития России) | Способ динамической оценки состояния реципиента после трансплантации трупной печени |
| CN103830844A (zh) * | 2013-03-08 | 2014-06-04 | 牛欣 | 低频电磁振动调制的红外肝藏气机血流调理仪 |
-
2018
- 2018-03-16 RU RU2018109468A patent/RU2682874C1/ru active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2166924C1 (ru) * | 1999-11-10 | 2001-05-20 | Центральный научно-исследовательский рентгенорадиологический институт | Способ обогащения крови стволовыми кроветворными клетками |
| US7909785B2 (en) * | 2003-02-24 | 2011-03-22 | Podrazhansky Yury M | Method and apparatus for improving local blood and lymph circulation using low and high frequency vibration sweeps |
| RU2268031C1 (ru) * | 2005-04-20 | 2006-01-20 | Центральный научно-исследовательский рентгено-радиологический институт МЗ РФ (ЦНИРРИ МЗ РФ) | Способ коррекции отдаленных последствий радиационного воздействия в малых дозах |
| WO2010003223A1 (en) * | 2008-07-11 | 2010-01-14 | Simon Fraser University | Randomic vibration for treatment of blood flow disorders |
| RU2413493C1 (ru) * | 2009-06-30 | 2011-03-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "МИКРОЭПМ" | Устройство виброакустического массажа |
| RU2494404C1 (ru) * | 2012-07-10 | 2013-09-27 | ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "РОССИЙСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР РАДИОЛОГИИ И ХИРУРГИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (ФГБУ "РНЦРХТ" Минздравсоцразвития России) | Способ динамической оценки состояния реципиента после трансплантации трупной печени |
| CN103830844A (zh) * | 2013-03-08 | 2014-06-04 | 牛欣 | 低频电磁振动调制的红外肝藏气机血流调理仪 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| MOHAMADNEJAD M. et al. Intraportal infusion of bone marrow mononuclear or CD133+ cells in patients with decompensated cirrhosis: a double-blind randomized controlled trial. Stem Cells Transl Med. 2016, 5(1), p. 87-94. * |
| ШУТКО А.Н. и др. Фракции гематопоэтических стволовых клеток крови реципиентов до и после трансплантации печени. Медицинский Академический Журнал, 2013, том 13, N4, стр. 66-70. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Phillips et al. | Transient hypertension after spinal cord injury leads to cerebrovascular endothelial dysfunction and fibrosis | |
| Andrews et al. | Results of a pilot study involving the use of an antisense oligodeoxynucleotide directed against the insulin-like growth factor type I receptor in malignant astrocytomas | |
| Nehra et al. | Mechanisms of venous leakage: a prospective clinicopathological correlation of corporeal function and structure | |
| Muragaki et al. | Phase I/IIa trial of autologous formalin-fixed tumor vaccine concomitant with fractionated radiotherapy for newly diagnosed glioblastoma | |
| CN116747241A (zh) | 子宫内膜病理状况中的干细胞治疗 | |
| Mand et al. | The role of ultrasonography in the differentiation of the various types of filaricele due to bancroftian filariasis | |
| WO2016164821A1 (en) | Systems, apparatus, and assembling method thereof for administering a substance | |
| Mattioni et al. | Management of mycetomas in France | |
| Bieri et al. | Phase I and registry study of autologous bone marrow concentrate evaluated in PDE5 inhibitor refractory erectile dysfunction | |
| Warmink et al. | Mesenchymal stem/stromal cells-derived extracellular vesicles as a potentially more beneficial therapeutic strategy than MSC-based treatment in a mild metabolic osteoarthritis model | |
| Abu-Eshy | Clinical characteristics, diagnosis and surgical management of hydatid cysts | |
| RU2682874C1 (ru) | Способ поддержания функционального состояния цирротически измененной печени у пациентов в листе ожидания трансплантации органа | |
| Sakata et al. | Monitoring transplanted islets by high-frequency ultrasound | |
| Ohba et al. | Computer tomography diagnosis of meningoencephalocele in a calf | |
| RU2671560C1 (ru) | Способ замедления прогрессирования цирроза печени у реципиентов в листе ожидания трансплантации печени | |
| Konishi et al. | A long-term survival case of Erdheim–Chester disease on maintenance hemodialysis | |
| UA141000U (uk) | Спосіб комбінованого лікування еректильної дисфункції | |
| RU2795173C1 (ru) | Способ лечения язв прямой кишки у пациентов с болезнью крона путем аутотрансплантации гемопоэтических стволовых клеток | |
| Sattar | Coexisting HLA-B27 positive spondyloarthritis and polyarteritis nodosa. | |
| Kiyohara et al. | Diabetic scleroedema successfully treated by topical hyaluronidase injection: efficacy of magnetic resonance imaging | |
| Panev et al. | Giant Lipoma of the Distal Forearm Including the Muscles of the First Extensor Compartment | |
| AKDEMİR et al. | The Role of Computerized Tomography Angiography in the Management of Cases with Erectile Dysfunction with Penile Revascularization | |
| Akdemίr et al. | The role of computerized tomography angiography in the management of cases undergoing penile revascularization due to erectile dysfunction: prospective cohort study | |
| Xian | Surgical excision as a first-line treatment for venous malformations | |
| He et al. | Amplification of Plasma MicroRNAs for Non-invasive Early Detection of Acute Rejection after Heart Transplantation With Ultrasound-Targeted Microbubble Destruction |