RU2682251C1 - Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии - Google Patents
Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2682251C1 RU2682251C1 RU2017144731A RU2017144731A RU2682251C1 RU 2682251 C1 RU2682251 C1 RU 2682251C1 RU 2017144731 A RU2017144731 A RU 2017144731A RU 2017144731 A RU2017144731 A RU 2017144731A RU 2682251 C1 RU2682251 C1 RU 2682251C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- preeclampsia
- tfam
- expression index
- severity
- points
- Prior art date
Links
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 title claims abstract description 60
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims abstract description 15
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims abstract description 15
- 201000005608 severe pre-eclampsia Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 claims description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 8
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 claims description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims description 7
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 210000001136 chorion Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 4
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 2
- 101000835023 Homo sapiens Transcription factor A, mitochondrial Proteins 0.000 claims 3
- 102100026155 Transcription factor A, mitochondrial Human genes 0.000 claims 3
- 210000005152 placental membrane Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 abstract description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 9
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 9
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 5
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 5
- 208000002296 eclampsia Diseases 0.000 description 4
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 4
- 230000009984 peri-natal effect Effects 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 3
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 3
- 208000001362 Fetal Growth Retardation Diseases 0.000 description 3
- 206010070531 Foetal growth restriction Diseases 0.000 description 3
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 3
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 3
- 206010035138 Placental insufficiency Diseases 0.000 description 3
- 208000002787 Pregnancy Complications Diseases 0.000 description 3
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 3
- 208000030941 fetal growth restriction Diseases 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000037425 regulation of transcription Effects 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- 230000008347 uteroplacental blood flow Effects 0.000 description 3
- 206010061452 Complication of pregnancy Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N Magnesium oxide Chemical compound [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 230000008437 mitochondrial biogenesis Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 230000010627 oxidative phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000036266 weeks of gestation Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003671 Atrioventricular Block Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 206010056370 Congestive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 102100036951 DNA polymerase subunit gamma-1 Human genes 0.000 description 1
- 201000010046 Dilated cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000001951 Fetal Death Diseases 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical group CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 1
- 206010070538 Gestational hypertension Diseases 0.000 description 1
- 201000005624 HELLP Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 101000804964 Homo sapiens DNA polymerase subunit gamma-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000595929 Homo sapiens POLG alternative reading frame Proteins 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058558 Hypoperfusion Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000000091 Maternal Death Diseases 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 1
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 208000021738 Plummer disease Diseases 0.000 description 1
- 206010037601 Pyelonephritis chronic Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000036523 atherogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 102220357476 c.34A>T Human genes 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 201000006368 chronic pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 210000003785 decidua Anatomy 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 230000009429 distress Effects 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 231100000479 fetal death Toxicity 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002650 habitual effect Effects 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 208000021822 hypotensive Diseases 0.000 description 1
- 230000001077 hypotensive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 238000010921 in-depth analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 201000011460 mild pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 108091064355 mitochondrial RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000012268 mitochondrial disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 108010045576 mitochondrial transcription factor A Proteins 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000036314 physical performance Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 201000003868 postsurgical hypothyroidism Diseases 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006950 reactive oxygen species formation Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000035806 respiratory chain Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- MUUHXGOJWVMBDY-UHFFFAOYSA-L tetrazolium blue Chemical compound [Cl-].[Cl-].COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 MUUHXGOJWVMBDY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к патоморфологии, и может быть использовано для морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии. Изобретение представляет собой способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии путем иммуногистохимического исследования базальной децидуальной оболочки плаценты, отличающийся тем, что в цитотрофобласте определяют индекс экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК и при значении индекса экспрессии TFAM от 0,32 до 0,4 у.е. диагностируют умеренно выраженную преэклампсию, а при значении индекса экспрессии TFAM равном 0,31 у.е. или менее - тяжелую преэклампсию. Техническим результатом заявляемого способа является расширение спектра морфологических диагностических методов определения степени тяжести преэклампсии. 4 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно, к патологической анатомии, и позволяет по результатам иммуногистохимического исследования плаценты диагностировать умеренно выраженную и тяжелую преэклампсию.
Актуальность
Преэклампсия (ПЭ) является одним из самых тяжелых осложнений беременности и занимает ведущее место в структуре причин перинатальной заболеваемости и материнской смертности. Частота ПЭ, по данным мировой статистики, составляет 2-8% (Сидорова И.С., Никитина Н.А. Гестоз или преэклампсия? // Российский вестник акушера-гинеколога. -2013. - Т. 13, №4. - С.67-73). Распространенность ПЭ в России в 2014 г составила 2,9%, из них - тяжелая ПЭ - 35,1% (Суринов А.Е. ред. Российский статистический ежегодник 2014. - М: Федеральная служба государственной статистики; 2015. - 693 с.). Ежегодно во всем мире более 50000 беременных женщин погибает из-за осложнений, связанных с ПЭ. (WHO analysis of causes of maternal death: a systematic review / Khan K.S. [et al.] // Lancet. - 2006. - Vol. 367, №1066. - P. 74). У каждого пятого ребенка при данном осложнении беременности диагностируется синдром задержки внутриутробного развития, а в тяжелых случаях данной патологии - дистресс-синдром (Secular trends in the rates of preeclampsia, eclampsia, and gestational hypertension, United States, 1987-2004 / Wallis A.B. [et al.] // Am. J. Hypertens. - 2008. - Vol. 21, №521. - P. 26.; The global impact of preeclampsia and eclampsia / L. Duley [et al.] // Semin Perinatal. - 2009. - Vol. 33, №130. - P. 37). До 18% случаев антенатальной гибели плодов связано с ПЭ (Неотложная помощь при преэклампсии и ее осложнениях (эклампсия, HELLP-синдром). Проект клинических рекомендаций / А.В. Куликов, Е.М. Шифман, СР. Беломестнов, А.Л. Левит // Тольяттинский медицинский консилиум. - 2013. - №3-4. - С. 84-108).
Патологические изменения при данном осложнении беременности развиваются во всех элементах функциональной системы «мать-плацента-плод», поэтому особую актуальность и значимость приобретает комплексная диагностика преэклампсии, включающая и патоморфологическое исследование плаценты. В соответствии с клиническими рекомендациями МЗ РФ выделяют умеренную и тяжелую преэклампсию (Клинические рекомендации «Гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и послеродовом периоде. Преэклампсия. Эклампсия». Письмо Министерства здравоохранения РФ от 07.06. 2016 г. №15-4\10\2 - 3483.).
Существуют различные способы диагностики степени тяжести преэклампсии. Известен способ диагностики степени тяжести преэклампсии (гестоза) по результатам исследования кровотока во внутрипочечных артериях методом ультразвукового сканирования с цветовым допплеровским картированием. Определяют максимальную систолическую, минимальную диастолическую скорости кровотока и индекс резистентности (RI) во внутрипочечных сегментарных и междолевых артериях. При показателях индекса резистентности 0,62-0,65% диагностируют гестоз легкой степени тяжести, при показателях RI 0,66 - 0,69% - гестоз средней тяжести и при RI 0,70% и более - гестоз тяжелой степени (Пат.2262305 Российская Федерация. Способ диагностики степени тяжести гестоза / Краснопольский Н.М., Мазурская Н.М., Логутова Л.С, Петрухин В.А. // Изобретения. Полезные модели. - 2005. - №29).
Известен способ диагностики степени тяжести преэклампсии, включающий постановку НСТ-теста. Определяют число НСТ-положительных форм и индекс активации нейтрофилов - цитологического показателя активности (ЦПА). При выделении и определении НСТ-положительных форм в выделенные лейкоциты добавляют 0,2%-ный бесцветный нитросиний тетразолий и фосфатный буфер в соотношении 1:1:1/2. При появлении более 12% НСТ-положительных клеток с темноокрашенными зернами формазана и индексе активации нейтрофилов свыше 0,28 у.е. диагностируют возникновение гестоза. При получении 12,1-17% НСТ-положительных клеток и индекса активации 0,28-0,43 у.е. в 1-3 триместрах беременности диагностируют легкое течение гестоза. При появлении 27-43% НСТ-положительных клеток с индексом активации 0,67-1,0 у.е. диагностируют тяжелое течение гестоза, во 2-3 триместрах беременности при 18-26% НСТ-положительных клеток с индексом активации 0,44-0,66 у.е. диагностируют гестоз средней тяжести- (Пат.2143694 Российская Федерация. Способ диагностики течения гестоза /Баранова И.Н., Тягунова А.В., Васильева З.В. //Изобретения. - 1999. - №36. - С. 230-231).
Однако данные способы невозможно использовать для морфологической диагностики преэклампсии.
Наиболее близким по техническому решению является способ диагностики степени тяжести гестоза, включающий морфологическое и иммуногистохимическое исследование базальной децидуальной оболочки и ворсинчатого хориона плаценты с определением индекса экспрессии маркеров апоптоза р53 и bcl-2. При индексе экспрессии р53, равном или более 2,4 у.е., и bcl-2, равном или более 2,2 у.е., диагностируют гестоз тяжелой степени. При индексе экспрессии р53, равном 2,0-2,39 у.е., и bcl-2, равном 1,8-2,19 у.е., диагностируют гестоз легкой степени тяжести. (Пат. 2407008 Российская Федерация. Способ морфологической диагностики степени тяжести гестоза / Сарыева О.П., Мальгина Л.Ю., Перетятко Л.П., Панова И.А. // Изобретения. Полезные модели. - 2010. - №35).
Однако данный способ невозможно использовать для диагностики умеренно выраженной преэклампсии.
Техническим решением заявляемого способа является разработка способа морфологической диагностики умеренно выраженной и тяжелой преэклампсии, что позволит расширить спектр морфологических диагностических средств ПЭ, сократить временные затраты, объективизировать морфологическую диагностику степеней тяжести ПЭ, повысить качество патоморфологического заключения по плаценте и провести углубленный анализ причин перинатальной заболеваемости и смертности.
Технический результат достигается путем иммуногистохимического исследования базальной децидуальной оболочки плаценты с определением индекса экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК в клетках цитотрофобласта.
При индексе экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК от 0,32 до 0,4 у.е. диагностируют умеренно выраженную преэклампсию, а при индексе экспрессии TFAM равном или менее 0,31 у.е. - тяжелую.
Новизна изобретения заключается в том, что впервые для диагностики степени тяжести преэклампсии используют маркер транскрипции митохондриальной ДНК (TFAM), определяемый иммуногистохимическим методом в базальной децидуальной оболочке плаценты. TFAM - белок, участвующий в регуляции транскрипции митохондриальной ДНК. Установлено, что молекулы митохондриальной ДНК организованы в нуклеоиды, которые с помощью белков регуляции транскрипции (митохондриальный фактор активации транскрипции -TFAM), репликации (митохондриальная ДНК-полимераза гамма - POLG), геликаза (Twinkle) и др.) взаимодействуют с внутренней мембраной митохондрий, где осуществляется синтез белковых комплексов окислительного фосфорилирования. (Asin-Cayuela, J. Mitochondrial transcription and its regulation in mammalian cells [Text] / J. Asin-Cayuela, CM. Gustafsson // Trends Biochem Sci. - 2007. - Vol. 32. - P. 111-117). На сегодняшний день известно более сотни структурных перестроек митохондриальной ДНК. Причина возникновения и развития митохондриальных расстройств, в первую очередь, связана с дефектами окислительного фосфорилирования, т.е. с нарушением выработки энергии в митохондриях. Структурные перестройки митохондриальной ДНК могут приводить к повышенному образованию активных форм кислорода и к развитию оксидативного стресса. Неполноценная инвазия трофобласта в децидуальную оболочку матки, нарушение ремоделирования спиральных артерий при преэклампсии приводят к гипоперфузии плаценты и оксидативному стрессу (Значимость полиморфизма генов системы детоксикации при преэклампсии / Кан Е.Н., Беднягин Л.А., Тютюник В.Л., Ховхаева П.А., Донников А.Е., Долгушина Н.В. //Акушерство и гинекология. - 2016. - №2. - С. 8-13; Диагностика преэклампсии на современном этапе /Мирошина Е.Д., Тютюник Н.В., Храмченко Н.В., Харчекно Д.К. //Проблемы репродукции. - 2017. - №1. - С. 96-102.). Если оксидативный стресс не устраняется, то повреждаются мембраны и другие главные молекулы клеточных структур, в т.ч. и митохондриальные ДНК и РНК, развивается митохондриальная дисфункция. Основным ключевым процессом, необходимым для клеточной адаптации и восстановления митохондрий после стресса и повреждений, является митохондриальный биогенез, который включает в себя процессы репликации митохондриального генома и координированную экспрессию ядерных и закодированных в митохондриях продуктов (Scarpulla R.C., Vega R.B., Kelly D.P. Transcriptional integration of mitochondrial biogenesis // Trends in Endocrinology and Metabolism. - 2012. - Vol. 23, №9. - P. 459-466).
Поэтому использование маркеров транскрипции митохондриальной ДНК позволяет на молекулярном уровне диагностировать одно из основных звеньев патогенеза ПЭ - митохондриальную дисфункцию цитотрофобласта плаценты, а также степень тяжести данного осложнения беременности.
В литературе крайне скудно освещены вопросы митохондриальной дисфункции в плаценте и отсутствуют данные о митохондриальном факторе регуляции транскрипции митоходриальной ДНК в связующем звене функциональной системы «мать-плацента-плод».
В единичных работах представлены данные о маркерах регуляции транскрипции митохондриальной ДНК. Так, имеются сведения о снижении экспрессии TFAM при ишемической болезни сердца (Жейкова, Т.В. Ассоциация полиморфизма Thr12Ser гена митохондриального фактора транскрипции A TFAM с ишемической болезнью сердца / Т.В. Жейкова // Бюллетень сибирской медицины. - 2012. - №6. - С. 47-50). В эксперименте показано, что при разрушении TFAM у нокаутированных мышей развивается мозаичная кардиоспецифичная недостаточность дыхательной цепи, дилатационная кардиомиопатия и атриовентрикулярная блокада (Судаков, Н.П. Митохондриальная дисфункция в механизмах атерогенеза / Н.П. Судаков, С.Б. Никифоров, Ю.М. Константинов и др. // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2007. - №2. - С. 119-123). Показано, что физические нагрузки приводят к увеличению экспрессии TFAM. (Ахметов И.И. Ассоциация полиморфизма гена митохондриального транскрипционного фактора (TFAM) с физической работоспособностью спортсменов / И.И. Ахметов // Физиология человека. - 2010. - Т. 36, №2. - С. 121-125).
Ранее маркеры белков, участвующих в транскрипции митохондриальной ДНК, не исследовались в плаценте в качестве маркеров митохондриальной дисфункции и не использовались для диагностики как преэклампсии, так и степени тяжести данного осложнения беременности. Отличительные признаки способа: изготавливают срезы базальной децидуальной оболочки плаценты с суббазально расположенным ворсинчатым хорионом, проводят иммуногистохимическую реакцию, после чего срезы окрашивают DAB-хромогеном, докрашивают гематоксилином Майера и оценивают в10 полях зрения микроскопа, в 100 клетках препарата при увеличении х400, затем высчитывают процент антиген-положительных клеток и оценивают интенсивность иммуногистохимической реакции по трехбалльной системе: слабая - 1 балл - слабое или минимальное окрашивание, продукт реакции светло-коричневого цвета; умеренная - 2 балла - коричневого цвета; выраженная или максимальная - 3 балла - темно-коричневого цвета; отсутствие экспрессии в клетках оценивают в 0 баллов; индекс экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК высчитывают по формуле:
Индекс экспрессии = ∑ Р(i)⋅i/100 у.е.,
где i - интенсивность окрашивания в баллах от 0 до 3;
P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью;
и при значении индекса экспрессии TFAM от 0,32 до 0,4 у.е. диагностируют умеренно выраженную преэклампсию, а при значении индекса экспрессии TFAM равном 0,31 у.е. или менее - тяжелую преэклампсию».
Способ осуществляется следующим образом: из плаценты иссекают базальную децидуальную оболочку с суббазально расположенным ворсинчатым хорионом в виде кусочков размерами 10×10×3 мм. Материал забирают не позднее 30-60 минут от окончания последового периода и фиксируют в 10% забуференном формалине в течение 12-24 часов (Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. - Казань: Титул, 2004. - 456 с.). Иммуногистохимическое исследование проводят на парафиновых срезах, толщиной 4-5 микрон. После депарафинации микропрепаратов осуществляют демаскировку антигена путем двукратного кипячения в цитратном буфере по 5 минут в СВЧ - печи при мощности 650 Вт. Эндогенную пероксидазу блокируют 1% раствором перекиси водорода с последовательной инкубацией во влажной камере с первичными и биотинилированными вторичнымиантителами. В промежутках между инкубацией срезы промывают в трех сменах фосфатного буфера, в качестве первичных антител используют козлиные поликлональные антитела фирмы «Santa cruz», USA к маркеру транскрипции митохондриальной ДНК (TFAM), в рабочем разведении 1:200.
Визуализация комплексов антиген антитело осуществляется при помощи системы детекции UltraVision Quanto Detection System HRP («Thermo scientific)), USA). Далее срезы окрашивают DAB-хромогеном, докрашивают гематоксилином Майера. С целью исключения вероятности получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов каждое иммуногистохимическое исследование проводят с постановкой положительного и отрицательного контроля. Отрицательный контроль исключал специфическое окрашивание препаратов. Положительный контроль подтверждал специфичность поставленной иммуногистохимической реакции с данными антителами.
Результаты иммуногистохимической реакции оценивают в 10 полях зрения микроскопа, в 100 клетках препарата при увеличении х400. В готовых срезах высчитывают процент антиген-положительных клеток и оценивают интенсивность иммуногистохимической реакции по трехбалльной системе: слабая (1 балл) - слабое или минимальное окрашивание, продукт реакции светло-коричневого цвета; умеренная (2 балла) - коричневого цвета; выраженная или максимальная (3 балла) - темно-коричневого цвета. Отсутствие экспрессии в клетках оценивают в 0 баллов. Индекс экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК высчитывают по формуле:
Индекс экспрессии = ∑ P(i)⋅i/100 у.е.,
где i - интенсивность окрашивания в баллах от 0 до 3;
P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью.
(Tavassoli F.A. Pathology of the best. - 2 - nd et. - New York, 1999).
Результат рассчитывают в условных единицах.
Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.
Пример 1. Женщина А. 23 лет, беременность 37 недель, предстоят вторые роды. Поступила в стационар с жалобами на повышение артериального давления. В соматическом анамнезе - наличие хронического пиелонефрита, ожирение 1 степени. При беременности АД в пределах 120/70-130/80 мм. рт.ст. При поступлении - артериальное давление 150/100 мм. рт.ст., в однократной порции мочи - протеинурия 1,16 г/л. По данным УЗИ плод соответствует 37 неделям гестации, расширены межворсинчатые пространства. Состояние плода по данным дополнительного обследования (допплер и кардиотокография) - удовлетворительное. Поставлен диагноз - «Беременность 37 недель. Умеренная преэклампсия. Плацентарная недостаточность». Женщине назначена гипотензивная и улучшающая маточно-плацентарный кровоток терапия. На фоне проводимой терапии АД нормализовалось, протеинурия не нарастала.
Данная беременность завершилась своевременными родами через естественные родовые пути в 38 недель. Родился мальчик с массой тела 3000 г, ростом 52 см., оценка по шкале Апгар 7/8 баллов.
При патоморфологическом исследовании выявлены гипоплазия плаценты II ст., краевое прикрепление пупочного канатика и нарушения маточно-плацентарного кровотока в виде среднеочаговых ишемических инфарктов краевых отделов плаценты и очагового тромбоза межворсинчатого пространства центральных зон.
При иммуногистохимическом исследовании индекс экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК составил 0,4 у.е.. Клинический диагноз умеренной преэклампсии подтвержден морфологически.
Пример 2. Беременная 26 лет, предстоят первые роды, срок беременности при поступлении в стационар 39 недель. На учете в женской консультации с 11 недель. Общая прибавка массы тела составила 10 кг. За время наблюдения в женской консультации АД 130/80 мм рт.ст. В анализе мочи отклонений от нормы не выявлено. Женщина осмотрена терапевтом: здорова. При поступлении в стационар состояние удовлетворительное. АД 120/70-130/80 мм рт.ст. По данным УЗИ плод соответствует сроку доношенной беременности, смешанное ягодичное предлежание плода.
Поставлен диагноз: «Беременность 39 недель. Смешанное ягодичное предлежание плода». Беременность завершилась своевременными родами путем операции кесарева сечения. Родился мальчик массой 3600 г, ростом 53 см с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов.
В плаценте при гистологическом исследовании выявлены очаговый стаз в межворсинчатом пространстве центральных зон, мелкоочаговые дистрофические и некротические изменения эпителия ворсин с отложением фибрина и фибриноида.
Индекс экспрессии митохондриальной ДНК составил 0,42 у.е.. Таким образом, по результатам патоморфологического исследования плаценты и с использованием индекса экспрессии маркера транскрипции митохондриальной ДНК подтверждено отсутствие преэклампсии.
Пример 3. Женщина К., 31 год, беременность 3-я, наступила спонтанно, после периода вторичного бесплодия в течение 2 лет, в анамнезе - 2 погибшие беременности в сроке 10-12 недель, предстоят первые роды. Поступила в стационар в сроке беременности 35 недель с жалобами на повышение АД до 150/90 мм. рт.ст. В анамнезе субтотальная резекция щитовидной железы по поводу диффузного токсического зоба, послеоперационный гипотиреоз, компенсированный. При поступлении: отечность лица, голеней, АД 145/90-150/90 мм. рт.ст. Протеинурия в однократной порции мочи - 2,5 г/л. По данным УЗИ плод соответствует сроку беременности. Состояние плода по данным дополнительного обследования (допплер и кардиотокография) - удовлетворительное. Выставлен диагноз: «Беременность 35 недель. Умеренная преэклампсия. Отягощенный акушерско-гинекологический анамнез (вторичное бесплодие 2 года). Привычное невынашивание. Первородящая в 31 год». Начата гипотензивная терапия.
Через сутки произошло дородовое излитие околоплодных вод. Учитывая отягощенный акушерско-гинекологический анамнез у первородящей в 31 год, была произведена операция кесарева сечения. Извлечен недоношенный мальчик массой 2500 г, ростом 48 см с оценкой по шкале Апгар 7/8 баллов, переведен на детское отделение.
При патоморфологическом исследовании плаценты были выявлены нарушения маточно-плацентарного кровотока в виде хронических геморрагических инфарктов и изменения сосудистого русла ворсинчатого хориона. При этом индекс экспрессии TFAM составил 0,32 у.е. Таким образом, на основании клинико-морфологических данных и с использованием индекса экспрессии маркера транскрипции митохондриальной ДНК подтверждена умеренная преэклампсия.
Пример 4. Беременная Н. 30 лет, поступила в стационар в 26 недель гестации. Данная беременность вторая. В анамнезе - погибшая беременность в сроке 7-8 нед. За время наблюдения в женской консультации - артериальное давление 120/80-130/80 мм рт.ст., протеинурии не было. Соматически здорова.
При поступлении - артериальное давление 170/110 мм рт.ст., выраженные отеки голеней, одутловатость лица, жалобы на головную боль. Протеинурия в однократной порции мочи 6,6 г/л. Женщина госпитализирована в палату интенсивной терапии. По данным УЗИ: плацентарная недостаточность, внутриутробная задержка роста плода. По данным допплеровского исследования - нарушение гемодинамики III ст., по данным КТГ - снижение компенсаторных возможностей плода. Поставлен диагноз: «Беременность 26 недель. Тяжелая преэклампсия. Плацентарная недостаточность, декомпенсация. Задержка роста плода. Отягощенный акушерско-гинекологический анамнез». Учитывая выраженное внутриутробное страдание плода у женщины с тяжелой преэклампсией, показано родоразрешение путем операции кесарева сечения.
С целью предоперационной подготовки проводилась магнезиальная и гипотензивная терапия в течение 4-х часов. Артериальное давление стабилизировалось до 140/90 мм. рт.ст. Произведено родоразрешение путем операции кесарево сечение. Извлечен мальчик массой 630,0 г, ростом - 30,0 см, с оценкой по шкале Апгар - 3 балла, Даунса - 5 баллов. После проведения комплекса первичной реанимации ребенок переведен в отделение реанимации и интенсивной терапии новорожденных.
При патоморфологическом исследовании последа выявлена гипоплазия плаценты III ст., диагностировано нарушение созревания ворсинчатого хориона, вариант промежуточных незрелых ворсин, пролиферативный виллузит и поствоспалительная гиповаскуляризация промежуточных ворсин. При иммуногистохимическом исследовании плаценты индекс экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК составил 0,31 у.е. Таким образом, на основании клинико-морфологических данных и с использованием индекса экспрессии маркера транскрипции митохондриальной ДНК подтверждена тяжелая преэкламспия.
Преимущества предлагаемого способа.
1. Является объективным и достоверным методом морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии.
2. В диагностике используется иммуногистохимический маркер, позволяющий на молекулярном уровне диагностировать преэклампсию и провести дифференциальную диагностику степеней тяжести данного осложнения беременности.
3. Повышает качество гистологического заключения по плаценте. Позволяет диагностировать плацентарные факторы перинатальной заболеваемости и смертности при ПЭ.
4. Расширяет арсенал средств морфологической диагностики степеней тяжести преэклампсии.
5. Заявляемый способ высокоинформативен и прост в оценке результатов.
6. Не требует дорогостоящего оборудования.
7. Может быть использован в работе патологоанатомического отделения и бюро судебно-медицинской экспертизы.
Применение предлагаемого способа диагностики степени тяжести ПЭ в практическом здравоохранении позволит врачам - патологоанатомам использовать информацию, необходимую для совершенствования подходов к комплексному патоморфологическому исследованию плаценты и оформлению гистологического заключения по плаценте, а акушерам-гинекологам - данные для разработки персо-инфицированного подхода при реабилитации женщин в послеродовом периоде и в дальнейшем при планировании будущей беременности.
Claims (5)
- Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии путем иммуногистохимического исследования базальной децидуальной оболочки плаценты, отличающийся тем, что изготавливают срезы базальной децидуальной оболочки плаценты с суббазально расположенным ворсинчатым хорионом, проводят иммуногистохимическую реакцию, после чего срезы окрашивают DAB-хромогеном, докрашивают гематоксилином Майера и оценивают в 10 полях зрения микроскопа, в 100 клетках препарата при увеличении х400, затем высчитывают процент антиген-положительных клеток и оценивают интенсивность иммуногистохимической реакции по трехбалльной системе: слабая 1 балл - слабое или минимальное окрашивание, продукт реакции светло-коричневого цвета; умеренная 2 балла - коричневого цвета; выраженная или максимальная 3 балла - темно-коричневого цвета; отсутствие экспрессии в клетках оценивают в 0 баллов; индекс экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК высчитывают по формуле
- Индекс экспрессии=∑ P(i)⋅i/100 у.е.,
- где i - интенсивность окрашивания в баллах от 0 до 3;
- P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью;
- и при значении индекса экспрессии TFAM от 0,32 до 0,4 у.е. диагностируют умеренно выраженную преэклампсию, а при значении индекса экспрессии TFAM равном 0,31 у.е. или менее - тяжелую преэклампсию.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017144731A RU2682251C1 (ru) | 2017-12-19 | 2017-12-19 | Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017144731A RU2682251C1 (ru) | 2017-12-19 | 2017-12-19 | Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2682251C1 true RU2682251C1 (ru) | 2019-03-18 |
Family
ID=65806056
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017144731A RU2682251C1 (ru) | 2017-12-19 | 2017-12-19 | Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2682251C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2730958C1 (ru) * | 2019-07-16 | 2020-08-26 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России) | Способ диагностики тяжелой преэклампсии у беременных |
| RU2790923C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2023-02-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ морфологической диагностики функционирующего артериального протока у глубоконедоношенных новорожденных с массой тела при рождении менее 1500 г |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2250468C2 (ru) * | 2003-07-04 | 2005-04-20 | Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей | Способ оценки тяжести преэклампсии у беременных |
| RU2342666C1 (ru) * | 2007-07-02 | 2008-12-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения степени тяжести гестоза |
| RU2478966C1 (ru) * | 2012-01-24 | 2013-04-10 | Олег Валентинович Радьков | Способ оценки тяжести преэклампсии |
-
2017
- 2017-12-19 RU RU2017144731A patent/RU2682251C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2250468C2 (ru) * | 2003-07-04 | 2005-04-20 | Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей | Способ оценки тяжести преэклампсии у беременных |
| RU2342666C1 (ru) * | 2007-07-02 | 2008-12-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения степени тяжести гестоза |
| RU2478966C1 (ru) * | 2012-01-24 | 2013-04-10 | Олег Валентинович Радьков | Способ оценки тяжести преэклампсии |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| MAGED A.M. et al. Association of biochemical markers with the severity of pre-eclampsia // Int J Gynaecol Obstet. - 2017. - Vol.136, No.2. - P.138-144. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2730958C1 (ru) * | 2019-07-16 | 2020-08-26 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России) | Способ диагностики тяжелой преэклампсии у беременных |
| RU2790923C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2023-02-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ морфологической диагностики функционирующего артериального протока у глубоконедоношенных новорожденных с массой тела при рождении менее 1500 г |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Conde-Agudelo et al. | Predictive accuracy of changes in transvaginal sonographic cervical length over time for preterm birth: a systematic review and metaanalysis | |
| Tanacan et al. | A cut‐off value for systemic immune‐inflammation index in the prediction of adverse neonatal outcomes in preterm premature rupture of the membranes | |
| Mangla et al. | Unusual clinical presentations of choriocarcinoma: A systematic review of case reports | |
| Salihu et al. | Perinatal mortality associated with abruptio placenta in singletons and multiples | |
| Martinez-Portilla et al. | Maternal serum interleukin-6: a non-invasive predictor of histological chorioamnionitis in women with preterm-prelabor rupture of membranes | |
| Bottomley et al. | Diagnosing miscarriage | |
| Bouzari et al. | Does proteinura in preeclampsia have enough value to predict pregnancy outcome | |
| Li et al. | Reduced expression of survivin, the inhibitor of apoptosis protein correlates with severity of preeclampsia | |
| Ben-Ami et al. | Infertility following retained products of conception: is it the surgical procedure or the presence of trophoblastic tissue? | |
| Ridout et al. | Cervical length and quantitative fetal fibronectin in the prediction of spontaneous preterm birth in asymptomatic women with congenital uterine anomaly | |
| RU2577759C1 (ru) | Способ прогнозирования исхода беременности у женщин с тромбофилией | |
| Markou et al. | Macroscopic deciduosis in pregnancy is finally a common entity | |
| Morimune et al. | The association between chronic deciduitis and preeclampsia | |
| RU2369331C1 (ru) | Способ прогнозирования перинатальной заболеваемости | |
| RU2682251C1 (ru) | Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии | |
| Stubblefield et al. | The clinical content of preconception care: reproductive history | |
| Köleli | Mean platelet volume in early diagnosis of adnexal torsion | |
| Ayogu et al. | Risk factors for hypertensive disorders of pregnancy in Abuja, Nigeria: A prospective case‑control study | |
| Minh et al. | The success rate and associate factors of vaginal birth after cesarean section at Tu Du Hospital in Vietnam | |
| Buschmann et al. | Maternal and pregnancy-related death: causes and frequencies in an autopsy study population | |
| Sayama et al. | Possible risks and benefits of adenomyomectomy on pregnancy outcomes: A retrospective analysis | |
| Sadek et al. | Three dimensional color Doppler transvaginal ultrasound morphologic features of uterine septum and residual cavity in women with reproductive failure | |
| Furuta et al. | Differences in maternal morbidity concerning risk factors for obstetric hemorrhage | |
| Momot et al. | The role of APC-resistance for predicting venous thrombosis and pregnancy complicationsin carriers of factor V Leiden (1691) G/A mutation | |
| Stubert et al. | Prediction of spontaneous preterm birth in at-risk women using Thrombospondin 1 from cervicovaginal fluid: a prospective observational study |