RU2675697C2 - Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма - Google Patents
Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма Download PDFInfo
- Publication number
- RU2675697C2 RU2675697C2 RU2017118069A RU2017118069A RU2675697C2 RU 2675697 C2 RU2675697 C2 RU 2675697C2 RU 2017118069 A RU2017118069 A RU 2017118069A RU 2017118069 A RU2017118069 A RU 2017118069A RU 2675697 C2 RU2675697 C2 RU 2675697C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bodies
- centrate
- alphitobius diaperinus
- mice
- agent
- Prior art date
Links
- 208000027089 Parkinsonian disease Diseases 0.000 title claims abstract description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 241001124203 Alphitobius diaperinus Species 0.000 claims abstract description 19
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 10
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 8
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims abstract description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims abstract description 4
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims abstract description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 241000238662 Blatta orientalis Species 0.000 claims description 11
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 8
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 claims description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 37
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 29
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 29
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 19
- PLRACCBDVIHHLZ-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Chemical compound C1N(C)CCC(C=2C=CC=CC=2)=C1 PLRACCBDVIHHLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 101001135571 Mus musculus Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 2 Proteins 0.000 description 14
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 206010034010 Parkinsonism Diseases 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 4
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 4
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 4
- 102000010909 Monoamine Oxidase Human genes 0.000 description 3
- 108010062431 Monoamine oxidase Proteins 0.000 description 3
- YXOLAZRVSSWPPT-UHFFFAOYSA-N Morin Chemical compound OC1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 YXOLAZRVSSWPPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 3
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 3
- 241000256844 Apis mellifera Species 0.000 description 2
- 102000006378 Catechol O-methyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 108020002739 Catechol O-methyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 241000255896 Galleria mellonella Species 0.000 description 2
- 241000254107 Tenebrionidae Species 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 235000007708 morin Nutrition 0.000 description 2
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 210000003523 substantia nigra Anatomy 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- YCYMCMYLORLIJX-UHFFFAOYSA-N 2-propyloctanoic acid Chemical compound CCCCCCC(C(O)=O)CCC YCYMCMYLORLIJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UUKWKUSGGZNXGA-UHFFFAOYSA-N 3,5-dinitrobenzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=CC([N+]([O-])=O)=C1 UUKWKUSGGZNXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OMPXTQYWYRWWPH-UHFFFAOYSA-N 4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Chemical compound C1NCCC(C=2C=CC=CC=2)=C1 OMPXTQYWYRWWPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 1
- 241000257161 Calliphoridae Species 0.000 description 1
- 206010065559 Cerebral arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- FMGYKKMPNATWHP-UHFFFAOYSA-N Cyperquat Chemical compound C1=C[N+](C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 FMGYKKMPNATWHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 1
- 102000006441 Dopamine Plasma Membrane Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010044266 Dopamine Plasma Membrane Transport Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000709785 Hermetia illucens Species 0.000 description 1
- GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N Heroin Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)OC(C)=O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4OC(C)=O GVGLGOZIDCSQPN-PVHGPHFFSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000289658 Insectivora Species 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 1
- 241000218231 Moraceae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282320 Panthera leo Species 0.000 description 1
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 1
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 208000008039 Secondary Parkinson Disease Diseases 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 241000254109 Tenebrio molitor Species 0.000 description 1
- 241000220350 Ulomoides dermestoides Species 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical class C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000000812 cholinergic antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 229960002069 diamorphine Drugs 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 239000003136 dopamine receptor stimulating agent Substances 0.000 description 1
- 210000005064 dopaminergic neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 229940124600 folk medicine Drugs 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000005851 intracranial arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 238000002803 maceration Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000008811 mitochondrial respiratory chain Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004973 motor coordination Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011859 neuroprotective therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 1
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000021395 porridge Nutrition 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- -1 s Species 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000001629 sign test Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000024033 toxin binding Effects 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 230000021542 voluntary musculoskeletal movement Effects 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/56—Materials from animals other than mammals
- A61K35/63—Arthropods
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Psychology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма. Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма предусматривает приготовление гомогенизированной сырой биомассы тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus, далее гомогенизированную биомассу тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus подвергают водной экстракции в два этапа: на первом этапе одну часть тел жука Alphitobius diaperinus заливают дистиллированной водой, настаивают, центрифугируют и отделяют фугат; на втором этапе полученный осадок заливают дистиллированной воды, настаивают, центрифугируют, отделяют фугат, полученные фугаты объединяют, пропускают объединенный фугат через бактериальный фильтр Миллипор и получают водный экстракт тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus, содержащий: урацил, тимин, изолейцин, пролин, фенилаланин, эумеланин, а иммобилизацию проводят нанесением водного экстракта на измельченный стерильный фитоноситель до достижения влажности не более 12 масс. %. Вышеописанный способ позволяет повысить эффективность средства. 1 з.п. ф-лы, 3 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к изысканию средства для профилактики и лечения болезни Паркинсона и способа его получения.
Болезнь Паркинсона - хроническое прогрессирующее дегенеративное заболевание центральной нервной системы, клинически проявляющееся, в частности, нарушением произвольных движений. Болезнь Паркинсона относится к первичному, или идиопатическому, паркинсонизму. Различают также вторичный паркинсонизм, который может быть обусловлен различными причинами, например энцефалитом, избыточным приемом некоторых лекарственных препаратов, атеросклерозом сосудов головного мозга. Понятие "паркинсонизм" применяется к любому синдрому, при котором наблюдаются характерные для болезни Паркинсона неврологические нарушения.
Лекарственная терапия болезни Паркинсона направлена на восполнение дефицита дофамина, развивающегося при болезни Паркинсона в результате гибели определенных клеток мозга, а также на затормаживание прогрессирования болезни, или гибели нейронов головного мозга - нейропротекторная терапия.
Для фармакотерапии паркинсонизма применяют холинолитические средства, производные аминоадамантана, ДОФА-содержащие средства, ингибиторы моноаминоксидазы (МАО) типа В, ингибиторы катехол-О-метилтрансферазы (КОМТ) и агонисты дофаминовых рецепторов.
Известно средство для профилактики и/или лечения болезни Паркинсона или синдрома Паркинсона, включающее в качестве активного ингредиента (R)-2-пропилоктановую кислоту, ее нетоксичную соль или гидрат. RU 2275906 С2, 10.05.2006.
Известен нейропротекторный эффект морина (3,5,7,2',4'-пентагидроксифлавона, природного флавоноида, получаемого экстракцией из растений семейства тутовых, а также присутствующий во многих травах, фруктах и вине) при экспериментальном развитии болезни Паркинсона у самцов мышей линии B57/BL. Zhen-tao ZHANG, Xue-bing CAO, Nian XIONG, Hong-cai WANG, Jin-sha HUANG, Sheng-gang SUN, Tao WANG Morin exerts neuroprotective actions in Parkinson disease models in vitro and in vivo, Acta Pharmacologica Sinica. 2010, 31, p. 900-906.
Несмотря на достаточно широкий спектр реально применяемых и находящихся в стадии исследования препаратов для терапии болезни Паркинсона продолжает оставаться актуальной задача отыскания новых средств этого назначения, что обусловлено не только недостаточной эффективностью известных средств, но и их побочными эффектами.
Насекомые давно привлекают внимание исследователей как источник биологически активных веществ. Анализ химического состава некоторых видов показал, что пчела Apis mellifera, Бакулин А.В., Велешко И.Е., Румянцева Е.В., Левов А.Н. и др. Получение хитин-меланиновых комплексов из Apis mellifera и изучение возможности их использования в качестве сорбентов радионуклидов. Доклады РАСХН. 2011, №5, с. 48-52, личинки восковой моли (Galleria mellonella), Mak P., Chmiel D., Gasek G.J. Antibacterial peptides of the moth Galleria mellonella Acta Biohim. Pol. 2001, v. 48, №4, p. 1191-1195, личинки и взрослые особи большого мучного хрущака (Tenebrio molitor), падальной мухи семейства каллифорид (Calliphoridae), черной львинки (Hermetia illucens), восковой моли, шелкопряда и др., Finke Mark D. Complete nutrient composition of commercially raised invertebrates used as food for insectivores. Zoo Biology. 2002, v. 21, p. 269-285, содержат не только протеины, жиры, но и хитин, минералы, аминокислоты, полиненасыщенные жирные кислоты и витамины, эфирные масла, другие биологически активные вещества, включая новые антимикробные пептиды. Жуки семейства Чернотелковых используются в народной медицине для лечения различных заболеваний, в том числе одной из наиболее социально значимых - болезни Паркинсона. Жук-знахарь - нетрадиционный метод лечения тяжелых заболеваний или уловка шарлатанов? 25.03.2013 [найдено 21.01.2015]. Найдено в Интернете <http://fb.ru/article/52951/juk-znahar>.
В научной литературе имеются единичные сведения о возможности медицинского применения соединений, выделенных из экстрактов жука-чернотелки Ulomoides dermestoides из семейства Tenebrionidae, являющихся источником антиоксидантных соединений, обладающих противовоспалительным и иммуномодулирующим эффектом, в качестве нутрицевтиков при лечении бронхиальной астмы и ревматоидного артрита, Santos RC, Lunardelli A, Caberlon Е, Bastos CM et al. Inflammation. 2010, v. 33, №3, p. 173-179, обладающих цитотоксичностью по отношению к клеткам А549 опухолей легочной аденокарциномы. Villaverde ML, Girotti JR, 
, 
, de Bravo MG. J Ethnopharmacol. 2011, v. l36. №l, p. 204-209.
Авторы предположили, что водный экстракт биомассы жука-чернотелки Alphitobius diaperinus из семейства Tenebrionidae может обладать активностью против токсинов на примере пронейротоксина МФТП (1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин), вызывающего проявления болезни Паркинсона у героин-зависимых наркоманов и экспериментальный паркинсонизм у черных мышей линии С57. На черных мышах линии С57 разработана и валидирована международными организациями экспериментальная модель болезни Паркинсона, вызванная подкожной инъекцией МФТП. При введении 1×40 мг/кг МФТП у мышей формируется начальная стадия болезни Паркинсона. Ugrumov M.V., Khaindrava V.G., Kozina Е.А., Kucheryanu V.G., et al. Modeling of preclinical and clinical stages of Parkinson's disease in mice. Neuroscience. 2011. v. 181, p. 175-188.
Наиболее близким аналогом к заявленному является способ получения препарата, обладающего способностью блокировать развитие экспериментального паркинсонизма, из гомогената биомассы взрослого жука чернотелки Alphitobius diaperinus, полученного с использованием лабораторного блендера Waring 800S ("Waring", США). Полученный гомогенат жука иммобилизовали на специально приготовленном сорбенте. В качестве сорбента использовали стерильные пищевые пшеничные отруби, увлажненные 1%-ным молоком до 50% влажности массы, на поверхности которых молочнокислые бактерии Enterococcus и Leuconostoc образовали биопленку в процессе твердофазной ферментации отрубей. Препарат хранится в холодильнике не более недели Н.А. Ушакова, В.М. Ковальзон, А.И. Бастраков, А.А. Козлова и др. Способность гомогената жука чернотелки Alphitobius diaperinus. иммобилизованного на фитоносителе, блокировать развитие экспериментального паркинсонизма. Биохимия, биофизика. Молекулярная биология. Доклады академии наук, 2015, т. 461, №3, с. 358-361.
К недостаткам способа следует отнести наличие компонентов жука, присутствующих в гомогенате, создающих излишний объем препаративной формы, но не являющихся активными в отношении блокирования болезни Паркинсона. Кроме того, такая форма имеет малый срок хранения.
Технической задачей заявленного изобретения является разработка способа получения средства с повышенной физиологической эффективностью, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма, вызванного введением токсина МФТП.
Технический результат, достигаемый от реализации изобретения, заключается в извлечении водорастворимых биологически активных компонентов из сырья, обеспечивающих блокирование развития мышиного паркинсонизма, вызванного введением пронейротоксина МФТП, повышении физиологической эффективности средства и срока его хранения.
Технический результат достигается тем, что гомогенизированную биомассу тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus подвергают водной экстракции в два этапа, на первом из которых 1 часть биомассы тел жука Alphitobius diaperinus заливают 2 частями дистиллированной воды, настаивают в течение суток, центрифугируют в течение 20 мин при 5000 об/мин и отделяют фугат, на втором этапе полученный осадок заливают 1 частью дистиллированной воды, настаивают не менее 2 ч, центрифугируют в течение 20 мин при 5000 об/мин, отделяют фугат, полученные фугаты объединяют, пропускают объединенный фугат через бактериальный фильтр Миллипор с диаметром пор 0,22 мкм, получают водный экстракт тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus, содержащий: урацил, тимин, изолейцин, пролин, фенилаланин, эумеланин, а иммобилизацию проводят нанесением водного экстракта на измельченный стерильный фитоноситель до достижения влажности не более 12 масс. %. В качестве фитоносителя используют пшеничные отруби, ржаные отруби или свекловичный жом.
Пример осуществления изобретения
Проводят дробную мацерацию (ремацерацию), построенную на разности концентраций в сырье и экстрагенте, обеспечивающую максимальное извлечение активов из сырья.
1 этап. Готовят гомогенизированную сырую биомассу тел жука Alphitobius diaperinus, 1 часть которой - 5 г заливают 2 частями - 10 мл дистиллированной воды и настаивают сутки. После суток экстрагирования смесь центрифугируют в течение 20 мин при 5000 об/мин. Фугат, образующийся после центрифугирования, отделяют.
2 этап. Оставшийся осадок заливают 1 частью экстрагента - 5 мл дистиллированной воды. Настаивают не менее 2 ч. Центрифугируют в течение 20 мин при 5000 об/мин и сливают образовавшийся фугат Полученные фугаты объединяют и пропускают объединенный фугат через бактериальный фильтр Миллипор с диаметром пор 0,22 мкм. В полученном водном экстракте определяют качественно содержание веществ, которые удалось идентифицировать как урацил, тимин, изолейцин, пролин, фенилаланин, эумеланин. Полученный водный экстракт иммобилизуют нанесением на поверхность измельченных стерильных пищевых отрубей следующим образом:
12 мл водного экстракта жука Alphitobius diaperinus тщательно смешивают с 120 г измельченных стерильных пищевых отрубей (дробным смешением) до достижения влажности не более 12 масс. %. Полученная лабораторная препаративная форма средства сохранила свою активность по крайней мере в течение месяца при хранении в холодильнике.
Аналогично готовят препаративную форму средства, используя водный экстракт жука-чернотелки Alphitobius diaperinus, а в качестве твердого носителя - фитоноситель - ржаные отруби или свекловичный жом. Выбор фитоносителя обусловлен тем, что полученное средство используют как биологически активную добавку к кормосмеси для мышей.
Эффективность средства, полученного заявленным способом, представляющего собой водный экстракт тел жука Alphitobius diaperinus, иммобилизованный на измельченных пшеничных отрубях, показана на мышиной МФТП-модели болезни Паркинсона. Модель паркинсонического синдрома, вызванного введением пронейротоксина МФТП (4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридина), является одной из наиболее адекватных моделей паркинсонизма, поскольку МФТП избирательно повреждает дофаминергические нейроны черной субстанции. Пронейротоксин под действием фермента МАО-В в астроцитах превращается в 1-метил-4-фенилпиридиний (МФП+), который с помощью дофаминового транспортера захватывается ДА-ергическими нейронами. Эффекты МФТП обусловлены токсическим действием МФП+, вызывающим энергетическую недостаточность за счет ингибирования комплекса-1 митохондриальной дыхательной цепи. Этот эффект наиболее выражен у приматов, а у мышей - в линии C57BI/6. Feldman R.S., Meyer J.S., Quenzer L.F. Parkinson's disease and Alzheimer's disease. In: Principles of Neuropsychopharmacology, Sinauer Associates, Inc., Publishers, Massachusetts, 1997, 861-909.
5 г полученного средства вносят в 1 кг кормосмеси для мышей из расчета 40 г кормосмеси в день на 1 мышь массой 25-30 г. Кормосмесь состоит из каши, включающей отваренные овес и горох, с добавлением проса в сыром виде и растительного масла.
Методом весовых аналогов были составлены 4 группы лабораторных мышей (молодые половозрелые самцы линии C57BL/6Jsto; N=15): К1 - контрольная, без воздействия (животным не вводили токсин и они не получали средство в составе кормосмеси); К2 - контрольная с токсином, но без средства (мыши, которым была сделана инъекция токсина, но в их рационе не было средства); О (Средство + токсин) (мыши, в рацион которых вводили средство и которым была сделана инъекция токсина); Гомогенат + токсин (мыши, в рацион которых вводили гомогенат жука, согласно ближайшему аналогу, и которым была сделана инъекция токсина)
В течение первой недели мыши группы О (Средство + токсин) и Гомогенат + токсин получали средство с обычным кормом. Животные контрольных групп К1 и К2 получали аналогичный корм без препарата. Затем животным групп О (Средство + токсин), Гомогенат + токсин и группы К2 был введен подкожно токсин МФТП в дозе 40 мг/кг, после чего в течение последующих двух недель мыши получали такой же корм, как и до инъекции (опытные продолжали получать средство, контрольные - нет). Группа К1 в течение всего опыта содержалась на обычном рационе, и этим мышам не вводили токсин. Спустя две недели после введения токсина оценивали координацию движений и физическую выносливость мышей с использованием аппарата «вращающийся стержень» (ротарод, Rota-Rod, фирма TSE. Швейцария/Германия). Скорость вращения стержня устанавливали 6 об/мин, продолжительность экспозиции - 10 мин. Результаты обсчитывали методами непараметрической статистики (дисперсионный анализ Крускал-Уоллиса, критерий Манна-Уитни, критерий знаков).
Средство, приготовленное к началу опыта, использовали в течение всего опыта, длившегося три недели, в то время как Гомогенат жука, согласно ближайшему аналогу, готовили еженедельно.
Результаты опытов на мышах представлены в таблице 1. У 93% мышей группы О (Средство + токсин) наблюдалось сохранение координации движений и физической выносливости в тесте вращающегося стержня, как и у всех контрольных животных (группа К1), которым не был введен токсин. Наоборот, в группе мышей, не получавших с пищей «антидот» в виде средства, но получивших токсин (группа К2), лишь 3 животных из 12 сумели продержаться на вращающемся стержне более 10 мин. Для сравнения в группе мышей, получавших Гомогенат + токсин удержались на Ротароде 87% мышей.
При оценке координации движений и физической выносливости с использованием аппарата «вращающийся стержень» (Ротарод) наивысшие результаты продемонстрировала группа О, получавшая средство - водный экстракт, иммобилизованный на пшеничных отрубях, влажностью не более 12 масс. %. Эти результаты были близки к тем, которые продемонстрировала группа контрольных мышей (группа К1, без токсина) и выше, чем результаты, полученные на группе мышей, в рационе которых применялся Гомогенат + токсин, согласно ближайшему аналогу. При этом количество дофамин-содержащих нейронов в компактной части черной субстанции головного мозга мышей группы К2+токсин почти в 2 раза меньше, чем у мышей группы К1, О (Средство + токсин) и Гомогенат + токсин. Однако показатель числа дофамин-содержащих нейронов у мышей группы О (Средство + токсин) был выше, чем у мышей группы Гомогенат + токсин, что коррелировало с более высоким числом мышей, удержавшихся на Ротароде более 10 мин.
* - число мышей, продержавшихся >10 мин на ротароде/общее число мышей в выборке (в скобках); р <0.05 при сравнении с группой "К2".
Кроме опыта с удерживанием на Ротароде, мышей тестировали также на вертикальном стрежне. В начале тестирования в клетку с мышью ставили вертикальный шест высотой 50 см и диаметром 1 см. Близко от вершины шеста на него помещали мышь так, чтобы ее голова была ориентирована вертикально вверх. Оказавшись на шесте, мышь переориентирует положение своего тела головой вертикально вниз и начинает спуск с шеста на дно клетки. С помощью секундомера фиксировали время спуска на дно клетки. С каждой мышью проводили 3 теста. Для статистического анализа отбирали максимальное для каждой мыши время спуска с шеста. Результаты экспериментов обработаны с помощью программного статистического пакета "UNISTAT 6.5.04" с использованием рангового критерия Краскела-Уоллиса; при попарных апостериорных множественных сравнениях использовался тест Коновера-Инмана. Результаты представлены в таблицах 2 и 3.
*Р≤0,05
Результаты показали наличие достоверных различий между экспериментальными группами К1 и К2. Медиана времени спуска с шеста у мышей из группы К2 (контрольная + токсин) достоверно превышала этот показатель в группе К1 (контрольные мыши без воздействия) и в группе О (Средство + токсин), т.е. введение пронейротоксина МФТП значительно и достоверно снижало двигательную координацию мышей в тесте вертикального стрежня. Сравнение группы К1 с группой О (Средство + токсин) показало, что примененный экстракт оказывал выраженное противодействие пронейротоксину, сглаживая эффекты МФТП. Таким образом, иммобилизованный на фитоносителе водный экстракт жука Alphitobius diaperinus продемонстрировал способность «нейтрализовать» действие на мышей пронейротоксина МФТП, моделирующее начальную стадию болезни Паркинсона. Выраженные сенсомоторные нарушения в тесте с вертикальным шестом, возникавшие у мышей через 2 недели после системного введения 40 мг/кг МФТП, отсутствовали, если животные получали с пищей «антидот» в виде водного экстракта биомассы жука-чернотелки, иммобилизованного на фитоносителе.
Результаты оценки координации движений, физической выносливости мышей с использованием аппарата Ротарод в тесте с вертикальным шестом и гистохимических исследований мозга на мышиной МФТП-модели болезни Паркинсона подтверждают возможность предотвращения развития моторной симптоматики мышиного паркинсонизма средством, полученным заявленным способом.
Claims (2)
1. Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма, предусматривающий приготовление гомогенизированной сырой биомассы тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus, проведение иммобилизации нанесением на фитоноситель, отличающийся тем, что гомогенизированную биомассу тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus подвергают водной экстракции в два этапа, на первом из которых 1 часть тел жука Alphitobius diaperinus заливают 2 частями дистиллированной воды, настаивают в течение суток, центрифугируют в течение 20 мин при 5000 об/мин и отделяют фугат, на втором этапе полученный осадок заливают 1 частью дистиллированной воды, настаивают не менее 2 ч, центрифугируют в течение 20 мин при 5000 об/мин, отделяют фугат, полученные фугаты объединяют, пропускают объединенный фугат через бактериальный фильтр Миллипор с диаметром пор 0,22 мкм, получают водный экстракт тел жука-чернотелки Alphitobius diaperinus, содержащий: урацил, тимин, изолейцин, пролин, фенилаланин, эумеланин, а иммобилизацию проводят нанесением водного экстракта на измельченный стерильный фитоноситель до достижения влажности не более 12 масс. %.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что качестве фитоносителя используют пшеничные отруби, ржаные отруби или свекловичный жом.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017118069A RU2675697C2 (ru) | 2017-05-24 | 2017-05-24 | Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017118069A RU2675697C2 (ru) | 2017-05-24 | 2017-05-24 | Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017118069A RU2017118069A (ru) | 2018-11-26 |
| RU2017118069A3 RU2017118069A3 (ru) | 2018-11-26 |
| RU2675697C2 true RU2675697C2 (ru) | 2018-12-24 |
Family
ID=64400933
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017118069A RU2675697C2 (ru) | 2017-05-24 | 2017-05-24 | Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2675697C2 (ru) |
-
2017
- 2017-05-24 RU RU2017118069A patent/RU2675697C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| TZOMPA-SOSA, D.A. et al. Insect lipid profile: Aqueous vs organic solvent-based ex-traction methods//Food Research International. 2014, N 70, стр. 1087-1094. * |
| USHAKOVA N.A. et al. The ability of alphitobius diaperinus homogenates immobilized on plant sorbent to block the development of mouse parkinsonism// Doklady Biochemistry and Biophysics, 2015, Vol. 461, N 3, c. 358-361. * |
| КОВАЛЬЗОН В. М. и др. // Блокирование экстрактом жука-чернотелки alphitobius diaperinus сенсомоторных нарушений у мышей со стриарной дофаминергической недостаточностью // Российский физиологический журнал. 2016. т. 102, N 4. с. 436-441. * |
| КОВАЛЬЗОН В. М. и др. // Блокирование экстрактом жука-чернотелки alphitobius diaperinus сенсомоторных нарушений у мышей со стриарной дофаминергической недостаточностью // Российский физиологический журнал. 2016. т. 102, N 4. с. 436-441. УШАКОВА Н.А. и др. Способность гомогената жука чернотелки Alphitobius diaperinus. иммобилизованного на фитоносителе, блокировать развитие экспериментального паркинсонизма// Биохимия, биофизика. Молекулярная биология. Доклады академии наук, 2015, т. 461, N 3, с. 358-361. USHAKOVA N.A. et al. The ability of alphitobius diaperinus homogenates immobilized on plant sorbent to block the development of mouse parkinsonism// Doklady Biochemistry and Biophysics, 2015, Vol. 461, N 3, c. 358-361. TZOMPA-SOSA, D.A. et al. Insect lipid profile: Aqueous vs organic solvent-based ex-traction methods//Food Research International. 2014, N 70, стр. 1087-1094. * |
| УШАКОВА Н.А. и др. Способность гомогената жука чернотелки Alphitobius diaperinus. иммобилизованного на фитоносителе, блокировать развитие экспериментального паркинсонизма// Биохимия, биофизика. Молекулярная биология. Доклады академии наук, 2015, т. 461, N 3, с. 358-361. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017118069A (ru) | 2018-11-26 |
| RU2017118069A3 (ru) | 2018-11-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5584937B2 (ja) | ステビア抽出物またはステビア抽出物構成物質を含有する新規な栄養補給食品組成物およびその使用 | |
| EP2289528A1 (en) | Novel nutraceutical compositions containing black pepper or its constituents improving mental performance | |
| WO2011105568A1 (ja) | 学習・記憶障害および運動障害などを伴う中枢神経変性疾患を改善する乾燥植物組織および植物組織抽出物ならびにこれらを含有する医薬品および食品 | |
| US20210038662A1 (en) | Algal extract comprising sulphated and non-sulphated polyanionic polysaccharides and uses thereof | |
| EP2992933B1 (en) | Ginsenoside f2 for prophylaxis and treatment of liver disease | |
| EP3622952A1 (en) | Agent for promoting decomposition and excretion of amyloid- | |
| CN101686919A (zh) | 瓜氨酸用于治疗与蛋白质羰基化增加相关的病理学状态的用途 | |
| US9737494B2 (en) | Method of regulating circadian rhythm, and method of preparing circadian rhythm regulatory agent | |
| Shahraki et al. | The antinociceptive effects of hydroalcoholic extract of Borago officinalis flower in male rats using formalin test | |
| RU2675697C2 (ru) | Способ получения средства, способного блокировать развитие экспериментального паркинсонизма | |
| Devarasetti et al. | Adaptogenic Ashwagandha root extract modulates inflammatory markers in feline stress management: a double-blind placebo-controlled clinical trial | |
| WO2017119481A1 (ja) | 環状ジペプチド含有神経性疾患予防用組成物 | |
| CA2912611C (en) | Homotaurine compounds, compositions and formulations for animal care | |
| JP5849368B2 (ja) | 認知力のためのチモールおよび／またはｐ−シメンまたは植物抽出物を含有する新規な栄養補給食品組成物 | |
| Setyawan et al. | Therapeutic potential of stingless bee pollen: A review | |
| Ufelle et al. | Potential haematopoietic properties of crude methanolic seed extract of Pentaclethra macrophylla in Wistar rats | |
| Alkhateeb | Evaluation of antidiabetic, antioxidant and antilipidemic potential of natural dietary product prepared from Cyphostemma digitatum in rats’ model of diabetes | |
| RU2775079C1 (ru) | Адаптогенное гуминовое средство | |
| RU2170096C1 (ru) | Иммуностимулирующее средство | |
| EP3981471A1 (en) | Grape skin extract | |
| Alsaadi et al. | Study the variation in biochemical parameters of post colic surgical horses which treated with chamomile flowers | |
| Liao et al. | Buffalo Milk Can Rescue Fatigue in Young Mice, Alleviate Oxidative Stress and Boost Learning and Memory in Aging Mice | |
| Sirinupong et al. | Effect of Edible Bird’s Nest on Protecting against Cognitive Deficit and Ameliorating Beta‐Amyloid in Hippocampal Rats’ Model of Cerebral Ischemia | |
| CN117159603A (zh) | 清明花乙酸乙酯萃取部位在制备抗炎镇痛药物中的应用 | |
| Ukachukwu et al. | Acute toxicity of castor oil bean extract and tolerance level of raw castor oil bean (Ricinus communis L) by broilers |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200525 |