RU2675236C1 - Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы - Google Patents
Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2675236C1 RU2675236C1 RU2018106782A RU2018106782A RU2675236C1 RU 2675236 C1 RU2675236 C1 RU 2675236C1 RU 2018106782 A RU2018106782 A RU 2018106782A RU 2018106782 A RU2018106782 A RU 2018106782A RU 2675236 C1 RU2675236 C1 RU 2675236C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- metastases
- genes
- mageb1
- expression
- cancer
- Prior art date
Links
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 21
- 238000011161 development Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 45
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 37
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 101001036688 Homo sapiens Melanoma-associated antigen B1 Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 102100039477 Melanoma-associated antigen B1 Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 102100039491 X antigen family member 3 Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 101001005718 Homo sapiens Melanoma-associated antigen 2 Proteins 0.000 claims abstract 5
- 101000814497 Homo sapiens X antigen family member 3 Proteins 0.000 claims abstract 4
- 102100025081 Melanoma-associated antigen 2 Human genes 0.000 claims abstract 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 24
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 claims description 10
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 claims description 4
- BFDMCHRDSYTOLE-UHFFFAOYSA-N SC#N.NC(N)=N.ClC(Cl)Cl.OC1=CC=CC=C1 Chemical compound SC#N.NC(N)=N.ClC(Cl)Cl.OC1=CC=CC=C1 BFDMCHRDSYTOLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 2
- 238000002205 phenol-chloroform extraction Methods 0.000 claims description 2
- 101001005719 Homo sapiens Melanoma-associated antigen 3 Proteins 0.000 claims 1
- 102100025082 Melanoma-associated antigen 3 Human genes 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 16
- 102000054789 Melanoma-associated antigen 2 Human genes 0.000 description 12
- 108700035707 Melanoma-associated antigen 2 Proteins 0.000 description 12
- 101710127887 X antigen family member 3 Proteins 0.000 description 12
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 9
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- 244000309464 bull Species 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 4
- 102100039824 Pre T-cell antigen receptor alpha Human genes 0.000 description 3
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 3
- 238000009607 mammography Methods 0.000 description 3
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 3
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000040452 GAGE family Human genes 0.000 description 2
- 108091072337 GAGE family Proteins 0.000 description 2
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000883325 Homo sapiens Chitinase-3-like protein 2 Proteins 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010029098 Neoplasm skin Diseases 0.000 description 2
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010068771 Soft tissue neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 208000030381 cutaneous melanoma Diseases 0.000 description 2
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 208000030163 medullary breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 201000003708 skin melanoma Diseases 0.000 description 2
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010058546 Cyclin D1 Proteins 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102100024165 G1/S-specific cyclin-D1 Human genes 0.000 description 1
- 208000033640 Hereditary breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 101001005725 Homo sapiens Melanoma-associated antigen 10 Proteins 0.000 description 1
- 101001036406 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C1 Proteins 0.000 description 1
- 101000979748 Homo sapiens Protein NDRG1 Proteins 0.000 description 1
- 241001289721 Lethe Species 0.000 description 1
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100025049 Melanoma-associated antigen 10 Human genes 0.000 description 1
- 102100039447 Melanoma-associated antigen C1 Human genes 0.000 description 1
- 102000014160 PTEN Phosphohydrolase Human genes 0.000 description 1
- 108010011536 PTEN Phosphohydrolase Proteins 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024980 Protein NDRG1 Human genes 0.000 description 1
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 1
- 241000589500 Thermus aquaticus Species 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000001046 green dye Substances 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O guanidinium Chemical compound NC(N)=[NH2+] ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N guanidinium thiocyanate Chemical compound SC#N.NC(N)=N ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025581 hereditary breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 208000024312 invasive carcinoma Diseases 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000001365 lymphatic vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- -1 pH 4.0 Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229910052573 porcelain Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229960001455 quinapril Drugs 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы (РМЖ) на основе анализа экспрессии генов MAGEA2, MAGEB1 и XAGE3. Проводят амплификацию в режиме реального времени в присутствии красителя EvaGreen Dye с использованием высокоспецифичных праймеров для генов MAGEA2, MAGEB1, XAGE3 и GAPDH, проводят анализ первичных данных с помощью программного продукта амплификатора, рассчитывают относительную экспрессию генетических локусов по формуле 2, вычисляют коэффициент экспрессии генов - K, ККпо формуле К=E/E, где E- относительная экспрессия генов в опухолевой ткани, E- относительная экспрессия генов нормальной ткани молочной железы, и при значениях К<0,6±0,2, К<1,0±0,3 и К<1,0±0,8 прогнозируют отсутствие метастазов, а при значениях К>3,5±0,9, К>17,7±2,1 и К>14,7±1,5 прогнозируют развитие метастазов. Способ позволяет осуществить прогноз развития метастазов при раке молочной железы. 1 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно, к молекулярной биологии, онкологии, и касается способа прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы (РМЖ) на основе анализа экспрессии генов MAGEA2, MAGEB1 и XAGE3.
В мире ежегодно регистрируют приблизительно 1 млн новых случаев рака молочной железы (РМЖ) (см. Водолажский Д.И., Кутилин Д.С., Могушкова Х.А., Ващенко Л.Н., Никитина В.П., Кит О.И. Транскрипционная активность раково-тестикулярных антигенов у больных раком молочной железы люминальных подтипов А и В // Современные проблемы науки и образования. - 2017. - №4. http://science-education.ru/ru/article/view?id=26492), гетерогенного заболевания, включающего в себя как наследственные, так и спорадические формы (см. Пржедецкий Ю.В., Водолажский Д.И., Шатова Ю.С., Комова Е.А., Двадненко К.В. BRCA-мутации у больных с клиническими признаками наследственного рака молочной железы в Южном федеральном округе // Злокачественные опухоли. - 2015. - №4-2, Т. 16. - С. 196-197.). Прогнозирование развития рецидивов и метастазирования РМЖ после первичного лечения представляет собой серьезную и нерешенную проблему (см. Ahmad A. Pathways to breast cancer recurrence. ISRN Oncol, 2013, pp. 1-16).
Раково-тестикулярные антигены (РТА, Cancer Testis Antigens (СТА)) человека, экспрессируются в опухолях различного гистологического происхождения, и практически не экспрессируются в нормальных тканях (за исключением в семенников и плаценты) (см. Водолажский Д.И., Кит О.И., Могушкова Х.А., Пушкин А.А., Тимошкина Н.Н. Раковые тестикулярные антигены в иммунотерапии злокачественных опухолей. Сибирский онкологический журнал. 2017;16(2):71-81. DOI: 10.21294/1814-4861-2017-16-2-71-81).
Для некоторых РТА в результате многочисленных исследований было выявлено их прогностическое значение, которое может быть использовано для уточняющей диагностики РМЖ (см. Matkovic В., Juretic A., Spagnoli G.C., Separovic V., Gamulin М., Separovic R., Saric N., Basic-Koretic M., Novosel I., Kruslin B. Expression of MAGE-A and NY-ESO-1 cancer/testis antigens in medullary breast cancer: retrospective immunohistochemical study. Croat Med J., 2011, no 2, pp. 171-177).
MAGEA2 (Melanoma-associated antigen 2) относится к семейству РТА MAGE-A. Экспрессия генов и антигенов семейства MAGE-A в опухолях исследована наиболее полно по сравнению со всеми остальными РТ-генами и РТ-антигенами. Их экспрессия как на уровне мРНК, так и на уровне белка была детектирована при гематологических заболеваниях, меланомах, плоскоклеточном раке головы и шеи, злокачественных новообразованиях гортани, пищевода, желудка, легких, яичника, мочевого пузыря и молочной железы.
С точки зрения разработки методов уточняющей диагностики опухолевых заболеваний, наиболее интересными являются исследования, в которых была обнаружена корреляция между клиникопатологическими характеристиками и экспрессией генов или антигенов MAGE-A. Например, гены MAGE-A3, -А4 чаще экспрессируются в метастатической, чем в первичной меланоме кожи, экспрессия MAGE-А3 коррелирует с большей толщиной первичного очага, что является плохим прогностическим признаком (см. Brasseur F., Rimoldi D., Lienard D., Lethe В., Carrel S., Arienti F., Suter L., Vanwijck R., Bourlond A., Humblet Y., et al. Expression of MAGE genes in primary and metastatic cutaneous melanoma // Int J Cancer. - 1995. - 63. - №3. - P: 375-80.).
При инвазивном раке протоков молочной железы экспрессия антигенов MAGE-A прямо коррелировала с инвазией лимфатических сосудов, некрозом внутри опухоли. У пациентов с медуллярным РМЖ общая выживаемость была значительно ниже при экспрессии MAGE-A, MAGE-A1 или NY-ESO-1. В группе пациентов с MAGE-А11-негативными опухолями молочной железы общая выживаемость была выше, чем в группе с MAGE-A11-положительными опухолями. Для MAGEA10 не было обнаружено корреляции с выживаемостью. Экспрессия MAGEC1 также не имела прогностического значения (см. Lian Y., Sang М., Ding С, Zhou X., Fan X., Xu Y., Lu W., Shan B. Expressions of MAGE-A 10 and MAGE-A 11 in breast cancers and their prognostic significance: a retrospective clinical study // J Cancer Res Clin Oncol. - 2012. - 138. - №3. - P:519-27.).
XAGE3 (X Antigen Family Member 3) является членом подсемейства XAGE, принадлежащего к семейству GAGE. Гены GAGE экспрессируются в различных опухолях и в некоторых репродуктивных тканях. XAGE3 экспрессируется в плаценте, печени и селезенке плода.
Белок, кодируемый этим геном, имеет сходство в последовательности с других белков GAGE/PAGE. В метастатических опухолях гены семейства GAGE экспрессируются чаще (36-41%), чем в первичных опухолях (13-29%) (см. De Backer О., Arden K.С., Boretti М., Vantomme V., De Smet С, Czekay S.,Viars C.S., De Plaen E., Brasseur F., Chomez P., Van den Eynde В., Boon Т., van der Bruggen P. Characterization of the GAGE genes that are expressed in various human cancers and in normal testis // Cancer Res. - 1999. - 59. - №13. - P: 3157-65).
MAGEB1 (Melanoma Antigen Family B1) относится к семейству MAGEB, информация о прогностическом потенциале отсутсвует ( см. NCBI)/
Анализ патентных источников показал наличие следующих (близких по тематике данному) изобретений:
1. Патент RU №2623869 (опубл. 29.06.2017, Бюл. №19) «Способ прогнозирования безрецидивной выживаемости у больных раком молочной железы», основан на определении уровня экспрессии гена YKL-39 по технологии TaqMan с помощью метода Pfaffl относительно референсного гена GAPDH, причем в качестве калибратора используют нормальную ткань молочной железы.
2. Патент RU №2578462 (опубл. 27.03.2016, Бюл. №9) «Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при двухсторонней синхронной инвазивной карциноме неспецифического типа молочных желез», основан на гистологическом исследовании препаратов ткани новообразований, определении количества клеточных тубулярных структур в опухолевой ткани молочной железы на светооптическом уровне, причем проводят гистологическое исследование обеих молочных желез, при котором проводят гистологическую оценку инфильтративного компонента ткани новообразования, где подсчитывают количество разных типов структур (от 1 до 5), среди которых дополнительно учитывают альвеолярные, трабекулярные, солидные структуры и дискретные группы опухолевых клеток
3. Патент RU №2632115 (опубл. 02.10.2017, Бюл. №8) «Способ прогнозирования риска лимфогенного метастазирования при раке молочной железы на основе экспрессии гена белка YKL-39» (является аналогом Патент RU №2623869 (29.06.2017), п. №1).
4. Патент RU №2609199 (опубл. 30.01.2017, Бюл. №4) «Способ определения вероятности рецидивирования рака молочной железы», основан на измерении уровня экспрессии РНК-транскриптов KI67, CCND1, PTEN, NDRG1, TERT в биологическом образце, содержащем опухолевые клетки, относительно референсного значения.
Описанные изобретения используют более трудоемкие и сложные в анализе способы и алгоритмы расчета результатов, при этом обладающие меньшей чувствительностью и специфичностью (из-за выбранных генетических локусов), чем предлагаемый нами.
Изобретение «Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы» является новым, так как относительная экспрессия данных РТА-генов ранее не использовалась для заявленной в способе цели.
Техническим результатом заявляемого изобретения является создание нового, простого в исполнении, не дорогостоящего и более точного способа прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы.
Технический результат достигается тем, что проводят амплификацию в режиме реального времени в присутствии красителя EvaGreen Dye с использованием высокоспецифичных праймеров для генов MAGEA2, MAGEB1, XAGE3 и GAPDH, проводят анализ первичных данных с помощью программного продукта амплификатора, рассчитывают относительную экспрессию генетических локусов по формуле 2-ΔCt, где Ct - медиана по трем повторам для целевого локуса и референсного GAPDH, величина ΔCt=Ct{ген мишень)-Ct(GAPDH), вычисляют коэффициент экспрессии генов - КMAGEA2, КMAGEB1, КXAGE3 по формуле К=Ecancer/Enormal, где Ecancer - относительная экспрессия генов в опухолевой ткани, Enormal - относительная экспрессия генов нормальной ткани молочной железы, и при значениях KMAGEA2<0,6±0,2, КMAGEB1<1,0±0,3 и КХАСЕ3<1,0±0,8 прогнозируют отсутствие метастазов, а при значениях КМАGЕА2>3,5±0,9, КMAGEB1>17,7±2,1 и КXAGE3>14,7±1,5 прогнозируют развитие метастазов.
Уровень экспрессии данных генов отличается у пациенток с метастазами и без метастазов: при значениях KMAGEA2<0,6±0,2, КMAGEB1<1,0±0,3 и КXAGE3<1,0±0,8 прогнозируют отсутствие метастазов (чувствительность 75%), а при значениях KMAGEA2>3,5±0,9, КMAGEB1>17,7±2,1 и КXAGE3>14,7±1,5 прогнозируют развитие метастазов (чувствительность 75%).
Заявленный способ включает следующие приемы: выделение тотальной РНК из тканевых проб с помощью метода гуанидин-тиоционат-фенол-хлороформной экстракции; определение относительной экспрессии генетических локусов методом ПЦР-РВ в присутствии красителя EvaGreen Dye и специфичных праймеров на матрице синтезированной кДНК; анализ первичных данных с помощью программного продукта амплификатора; расчет экспрессии гена на основании соотношения сигналов, продуцируемых ампликонами изучаемой и референсной последовательностей, и обработка данных на соответствие значениям коэффициентов экспрессии, характерным для групп пациенток с метастазами или без метастазов в лимфоузлы.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
На первом этапе отбирают образцы тканей пациенток - опухолевые и условно здоровые, из операционного или биопсийного материала.
Образцы для транспортировки в лабораторию и хранения замораживают в жидком азоте.
Фрагменты ткани измельчают скальпелем и/или ножницами, дополнительно растирают в фарфоровых ступках в присутствии лизирующего раствора, содержащего 4 М гуанидин тиоцианат, 25 мМ цитрат натрия, 0,5% саркозил и 0,1 М 2-меркаптоэтанол.
Затем в лизат добавляют 1М цитрат Na рН 4,0, кислый фенол и смесь хлороформ/изоамиловый спирта, перемешивают на вортексе и охлаждают образцы при 0°С в течение 15 мин.
Дальнейшее выделение РНК из тканей проводят по методу по Р. Chomczynski & N. Sacchi (2006) (см. Chomczynski Р, Sacchi N. The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroforrn extraction: twenty-something years on. Nat Protoc. 2006; 1 (2):581-5).
Выделенная РНК обрабатывается ДНКазой. Перед проведением реакции обратной транскрипции для проверки качества выделенной РНК проводят электрофорез в 2% геле агарозы по методу Masek Т. et al. (2005). Также перед проведением реакции обратной транскрипции необходимо измерить концентрацию полученных препаратов РНК на флюориметре и нормолизовать ее до 2 нг/мкл.
Синтез кДНК можно проводить с использованием коммерческих наборов основанных на применении обратной транскриптазы M-MuLV Reverse Transcriptase и случайных праймеров (random hexamer).
Реакцию обратной транскрипции проводили при 37°С в течение 30 минут.
Анализируемые последовательности генетических локусов амплифицировали в 25 мкл ПЦР-смеси, содержащей 12 нг кДНК, 0,25 мМ dNTPs, 2,5 мМ MgCl2, 1х-ый ПЦР-буфер и 0,1 еа ДНК-полимеразы Thermus aquaticus, краситель EVA-Green и по 530 нМ прямого и обратного праймеров для референтного гена {GAPDH) или гена-мишени. Прямые и обратные праймеры были разработаны с использованием референсных последовательностей NCBI GenBank (см. таблица 1).
Количественную ПЦР-РВ амплификацию проводили на термоциклере в соответствии с инструкциями производителя по следующей программе. Первичная денатурация: t=95°C в течение 3 мин. 40 циклов: t=95°C в течение 10 с, t=58°C в течение 30 с, t=72°C в течение 15 с.
В одной постановке в качестве матрицы использовали одновременно кДНК опытной (опухоль) и контрольной (условно здоровая ткань) пробы для определения сигналов, продуцируемых амплификатами РТА-генов и референсного GAPDH, каждого в трех повторностях.
Относительная экспрессия генетических локусов вычислялась следующим образом:
- рассчитывали медиану Ct по трем повторам для целевого локуса и референсного GAPDH,
- далее рассчитывали величину ΔCt=Ct(ген мишень)-Ct(GAPDH)
- относительную экспрессию генетического локуса (Е) рассчитывали по формуле 2-ΔCt.
Вывод об изменении экспрессии гена делали, сравнивая показатели относительной экспрессии генетических локусов в опухолевой и условно здоровой ткани.
Для этого вычисляли медиану Е cancer опухолевых образцов и медиану Enormal контрольных (условно здоровая ткань) для каждого генетического локуса и рассчитывали соотношение относительной экспрессии генов в опухолевой ткани по отношению к нормальной ткани молочной железы:
К=Ecancer/Enormal.
Для доказательства прогностической ценности генов MAGEA2, MAGEB1 и XAGE3 приводим две выписки из историй болезни.
1) Больная К., 56 лет, госпитализирована в феврале 2016 г. в отделение опухолей костей, кожи, мягких тканей и молочной железы ООККМТМЖ №1 РНИОИ с верифицированным диагнозом рак правой молочной железы после пункционной биопсии опухоли, УЗИ молочных желез, маммографии.
Результаты молекулярно-генетического анализа образцов биопсии: КMAGЕА2=4,5; КMAGEB1=20,1 и КXAGE3=16,4 соответствуют прогностическим коэффициентам развития метастазов, что подтверждено результатами послеоперационного гистологического анализа - T2N3M0.
Больной было выполнено хирургическое вмешательство согласно стандарту лечения радикальная мастэктомия по Маддену с пластическим компонентом справа после секторальной резекции.
Морфологический анализ после операции: инфильтрирующий дольковый рак, гистологический анализ: метастазы рака в 9-ти подключичных, 17-ти подкрыльцовых и 7-и подлопаточных лимфатических узлах (T2N3M0).
После консультации специалистов (радиолога и химиотерапевта) показаны курсы АПХТ и адъювантная лучевая терапия.
Состояние при выписке: удовлетворительное, заживление раны первичным натяжением, послеоперационный период без осложнений.
2) Больная Д., 57 лет, госпитализирована в феврале 2016 г. в отделение опухолей костей, кожи, мягких тканей и молочной железы ООККМТМЖ №1 РНИОИ с верифицированным диагнозом рак правой молочной железы после пункционной биопсии опухоли, УЗИ молочных желез, маммографии.
Результаты молекулярно-генетического анализа образцов биопсии: KMAGEA2=0,4, КMAGEB1=0,6 и КXAGE3=0,2 соответствуют прогностическим коэффициентам отсутствия метастазов, что подтверждено результатами послеоперационного гистологического анализа - T2N0M0.
При осмотре в правой молочной железе в верхне-наружном квадранте пальпировалась плотная опухоль до 3 см, сосок ротирован в сторону опухоли. По результатам маммографии - рак правой молочной железы, по результатам УЗИ молочных желез также рак правой молочной железы.
Проведено хирургическое лечение - секторальная резекция правой молочной железы, радикальная мастэктомия справа с пластическим компонентом, обезболивающая терапия (кетонал), антибактериальная терапия (Азаран 2 г).
Гистологические исследование: умеренно-дифференцированная аденокарцинома, метастазов нет.
Диагноз заключительный клинический рак правой молочной железы, cT2NxM0, pT2N0M0, ст. II А, состояние после хирургического лечения, кл. гр. 2.
Больная наблюдается по настоящее время без признаков рецидива и метастазов.
Предлагаемым способом было осуществлено прогнозирование метастазов у 25 пациенток с диагностированным раком молочной железы.
Заявляемый способ является экономически оправданным, осуществляется в условиях стандартной лаборатории молекулярной биологии, без использования специального дорогостоящего оборудования; обладает высокой чувствительностью и специфичностью, универсален, его осуществление возможно с операционными биоптатами, регистрацию результатов производят однократно в конце исследования, способ занимает менее 8 часов.
Claims (1)
- Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы, включающий выделение тотальной РНК из тканевых проб молочной железы с помощью метода гуанидин-тиоционат-фенол-хлороформной экстракции, получение кДНК с помощью реакции обратной транскрипции на матрице РНК, отличающийся тем, что проводят амплификацию в режиме реального времени в присутствии красителя EvaGreen Dye с использованием высокоспецифичных праймеров для генов MAGEA2, MAGEB1, XAGE3 и GAPDH, проводят анализ первичных данных с помощью программного продукта амплификатора, рассчитывают относительную экспрессию генетических локусов по формуле 2-ΔCt, где С1 - медиана по трем повторам для целевого локуса и референсного GAPDH, величина ΔCt=Ct(ген мишень)-Ct(GAPDH), вычисляют коэффициент экспрессии генов - КMAGEA2, КMAGEB1, КХАGE3 по формуле К=Ecancer/Enormal, где Ecancer - относительная экспрессия генов в опухолевой ткани, Enormal - относительная экспрессия генов нормальной ткани молочной железы, и при значениях КMAGЕА2<0,6±0,2, КMAGEB1<1,0±0,3 и КХАGE3<1,0±0,8 прогнозируют отсутствие метастазов, а при значениях КMAGEA2>3,5±0,9, КMAGEB1>17,7±2,1 и КMAGE3>14,7±1,5 прогнозируют развитие метастазов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018106782A RU2675236C1 (ru) | 2018-02-22 | 2018-02-22 | Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018106782A RU2675236C1 (ru) | 2018-02-22 | 2018-02-22 | Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2675236C1 true RU2675236C1 (ru) | 2018-12-18 |
Family
ID=64753291
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018106782A RU2675236C1 (ru) | 2018-02-22 | 2018-02-22 | Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2675236C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2736163C1 (ru) * | 2019-05-29 | 2020-11-12 | Федеральное Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Дагестанский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации Даггосмедуниверситет | Способ интраоперационной диагностики рака молочной железы |
| RU2755242C1 (ru) * | 2020-03-25 | 2021-09-14 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр" Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ прогнозирования степени риска развития гематогенных метастазов при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы на основе оценки экспрессии белка LIMCH1 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005100606A2 (en) * | 2004-04-09 | 2005-10-27 | Genomic Health, Inc. | Gene expression markers for predicting response to chemotherapy |
| RU2611352C1 (ru) * | 2015-10-28 | 2017-02-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования выживаемости больных раком тела матки на основании уровня экспрессии гена ESR1 |
-
2018
- 2018-02-22 RU RU2018106782A patent/RU2675236C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005100606A2 (en) * | 2004-04-09 | 2005-10-27 | Genomic Health, Inc. | Gene expression markers for predicting response to chemotherapy |
| RU2611352C1 (ru) * | 2015-10-28 | 2017-02-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования выживаемости больных раком тела матки на основании уровня экспрессии гена ESR1 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| WONG PP et al., Identification of MAGEA antigens as causal players in the development of tamoxifen-resistant breast cancer. Oncogene. 2014 Sep 11; N33(37), c. 4579-88, PMID:24662835. * |
| ВОДОЛАЖСКИЙ Д.И. и др., Влияние доксорубицина на транскрипционный профиль раково-тестикулярных антигенов клеточной линии Hela ССL-2, Успехи молекулярной онкологии, Материалы III Всероссийской конференции, 2017, Том 4, с. 132. * |
| ВОДОЛАЖСКИЙ Д.И. и др., Влияние доксорубицина на транскрипционный профиль раково-тестикулярных антигенов клеточной линии Hela ССL-2, Успехи молекулярной онкологии, Материалы III Всероссийской конференции, 2017, Том 4, с. 132. WONG PP et al., Identification of MAGEA antigens as causal players in the development of tamoxifen-resistant breast cancer. Oncogene. 2014 Sep 11; N33(37), c. 4579-88, PMID:24662835. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2736163C1 (ru) * | 2019-05-29 | 2020-11-12 | Федеральное Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Дагестанский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации Даггосмедуниверситет | Способ интраоперационной диагностики рака молочной железы |
| RU2755242C1 (ru) * | 2020-03-25 | 2021-09-14 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр" Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Способ прогнозирования степени риска развития гематогенных метастазов при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы на основе оценки экспрессии белка LIMCH1 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Risinger et al. | Global expression analysis of cancer/testis genes in uterine cancers reveals a high incidence of BORIS expression | |
| Lezhnina et al. | Novel robust biomarkers for human bladder cancer based on activation of intracellular signaling pathways | |
| Mahmoud | Cancer testis antigens as immunogenic and oncogenic targets in breast cancer | |
| Zhang et al. | Interferon regulatory factor 8 functions as a tumor suppressor in renal cell carcinoma and its promoter methylation is associated with patient poor prognosis | |
| Janostiak et al. | Loss of c-KIT expression in breast cancer correlates with malignant transformation of breast epithelium and is mediated by KIT gene promoter DNA hypermethylation | |
| Sang et al. | Multiple MAGE-A genes as surveillance marker for the detection of circulating tumor cells in patients with ovarian cancer | |
| Heawchaiyaphum et al. | Peroxiredoxin-2 and zinc-alpha-2-glycoprotein as potentially combined novel salivary biomarkers for early detection of oral squamous cell carcinoma using proteomic approaches | |
| Zheng et al. | Expression and clinical implications of homeobox gene Six1 in cervical cancer cell lines and cervical epithelial tissues | |
| US10633712B2 (en) | Assays and methods relating to the treatment of melanoma | |
| Sun et al. | Differential expression patterns of capping protein, protein phosphatase 1, and casein kinase 1 may serve as diagnostic markers for malignant melanoma | |
| Martin et al. | Evaluation of salivary transcriptome markers for the early detection of oral squamous cell cancer in a prospective blinded trial | |
| RU2675236C1 (ru) | Способ прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы | |
| Gao et al. | Icotinib, a potent and specific EGFR tyrosine kinase inhibitor, inhibits growth of squamous cell carcinoma cell line A431 through negatively regulating AKT signaling | |
| Aristizábal-Pachón et al. | Detection of human mammaglobin A mRNA in peripheral blood of breast cancer patients before treatment and association with metastasis | |
| Padín-Iruegas et al. | Prognostic value of changes in the expression of stem cell markers in the peripheral blood of patients with colon cancer | |
| Huang et al. | Gene expressions of HMGI-C and HMGI (Y) are associated with stage and metastasis in colorectal cancer | |
| Ciavattini et al. | Unfolded protein response, a link between endometrioid ovarian carcinoma and endometriosis: A pilot study | |
| Tuttle et al. | Senescence-associated gene YPEL3 is downregulated in human colon tumors | |
| Olbryt et al. | Melanoma-associated genes, MXI1, FN1, and NME1, are hypoxia responsive in murine and human melanoma cells | |
| Zhai et al. | Reduced expression levels of the death‑associated protein kinase and E-cadherin are correlated with the development of esophageal squamous cell carcinoma | |
| Tsujimoto et al. | Postoperative infections are associated with adverse outcome after resection with curative intent for colorectal cancer | |
| Jiang et al. | Promoter hypermethylation and downregulation of trefoil factor 2 in human gastric cancer | |
| Vodolazhsky et al. | Specific features of transcription activity of cancer-testis antigens in patients with metastatic and non-metastatic breast cancer | |
| RU2611352C1 (ru) | Способ прогнозирования выживаемости больных раком тела матки на основании уровня экспрессии гена ESR1 | |
| Cruz et al. | Nucleolin as a potential biomarker for canine malignant neoplasia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200223 |