RU2672806C1 - Способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени - Google Patents
Способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени Download PDFInfo
- Publication number
- RU2672806C1 RU2672806C1 RU2017142699A RU2017142699A RU2672806C1 RU 2672806 C1 RU2672806 C1 RU 2672806C1 RU 2017142699 A RU2017142699 A RU 2017142699A RU 2017142699 A RU2017142699 A RU 2017142699A RU 2672806 C1 RU2672806 C1 RU 2672806C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- photosensitizer
- meoph
- photodynamic
- lifetime
- excited state
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims abstract description 74
- -1 3-methoxy-4-phenetyl Chemical group 0.000 claims abstract description 71
- 230000005281 excited state Effects 0.000 claims abstract description 43
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 42
- 125000001255 4-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1F 0.000 claims abstract description 28
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 24
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 125000004204 2-methoxyphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C(OC([H])([H])[H])C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 4
- 125000004172 4-methoxyphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(OC([H])([H])[H])=C([H])C([H])=C1* 0.000 claims abstract description 4
- YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N Phenanthrene Natural products C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=CC2=C1 YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N [1,10]phenanthroline Chemical compound C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- GGSUCNLOZRCGPQ-UHFFFAOYSA-N diethylaniline Chemical compound CCN(CC)C1=CC=CC=C1 GGSUCNLOZRCGPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 claims abstract 2
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 claims description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 11
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 9
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 9
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 3
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 abstract description 2
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 12
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 9
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 8
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000002292 fluorescence lifetime imaging microscopy Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 201000010106 skin squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 241000122205 Chamaeleonidae Species 0.000 description 1
- 241001575025 Larisa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241001417524 Pomacanthidae Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 125000006575 electron-withdrawing group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000000695 excitation spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000001857 fluorescence decay curve Methods 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- CPBQJMYROZQQJC-UHFFFAOYSA-N helium neon Chemical compound [He].[Ne] CPBQJMYROZQQJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000000633 nuclear envelope Anatomy 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000004621 scanning probe microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B6/00—Apparatus or devices for radiation diagnosis; Apparatus or devices for radiation diagnosis combined with radiation therapy equipment
- A61B6/08—Auxiliary means for directing the radiation beam to a particular spot, e.g. using light beams
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/41—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N5/00—Radiation therapy
- A61N5/06—Radiation therapy using light
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pathology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- High Energy & Nuclear Physics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Surgery (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и лучевой терапии, и может быть использовано для фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени. Для этого осуществляют доставку фотосенсибилизатора к опухолевым клеткам. В качестве фотосенсибилизатора используют тетрапиррольный краситель тетра(арил)тетрацианопорфиразинового ряда общей формулы:где R - заместитель, R=2-MeOPh (2-метоксифенил), или 4-MeOPh (4-метоксифенил), или 4-EtO-3-MeOPh (3-метокси-4-этоксифенил), или 3-C2H3Ph (3-винилфенил), или Phen (9-фенантренил), или Et2NPh (4-диэтиламинофенил), или 4-С3Н3ОРh (4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-C3H3O-3-MeOPh (3-метокси-4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-C3H3O-3-EtOPh (4-(2-пропинилокси)-3-этоксифенил), или 4-BnO-3-MeOPh (3-метокси-4-бензилоксифенил), или 4-BnO-EtOPh (4-бензилокси-3-этоксифенил), или 4-FBnO-3-MeOPh (3-метокси-4-фторбензилоксифенил), или 4-FBnO-3-EtOPh (4-фторбензилокси-3-этоксифенил), или 4-BnOPh (4-бензилоксифенил), или 4-BrBnO-3-MeOPh (4-(бензилокси)-3-метоксифенил), или 4-FPh (4-фторфенил), или 4-FBnOPh (4-фторбензилоксифенил), или 4-BrBnOPh (4-бромбензилоксифенил). Далее проводят флуоресцентную визуализацию опухоли и определение времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора по достижении максимального накопления в опухоли. Выполняют фотодинамическую деструкцию выявленных патологических очагов путем фракционированного поэтапного облучения с центральной длиной волны, совпадающей со спектром поглощения фотосенсибилизатора. При этом в промежутках между этапами облучения оценивают время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора. Процедуру фотодинамического облучения повторяют до увеличения времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в 1,5-2 раза относительно исходного уровня. Способ обеспечивает повышение вероятности полного удаления патологического образования за один сеанс фотодинамической терапии при минимизации негативного воздействия на здоровые ткани за счет индивидуализации режима проведения фотодинамической терапии с применением фотосенсибилизаторов со свойствами вязкостных сенсоров. 1 н. и 5 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр., 13 ил.
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к лучевой терапии с использованием света, касается способа фотодинамической терапии (ФДТ) с контролем эффективности в режиме реального времени, который может быть использован для лечения доброкачественных и злокачественных образований.
Термин «молекулярные роторы» относится к соединениям, молекулы которых состоят из нескольких фрагментов, способных поворачиваться (вращаться) друг относительно друга. В большинстве случаев, молекулярный ротор состоит из электронодонорной и электроноакцепторной групп, объединенных в общую систему π-сопряжения. Такая структура создает предпосылки для внутримолекулярного переноса заряда от донора к акцептору при возбуждении молекулы светом [М.А. Haidekker, Е.А. Theodorakis. Environment-sensitive behavior of fluorescent molecular rotors. J. of Biol. Eng., 2010, 4, 1-14]. Это, в свою очередь, может привести к внутримолекулярному движению отдельных фрагментов молекулы (вращению или скручиванию). Индуцированное светом внутримолекулярное движение в значительной степени определяет фотофизические свойства молекулярного ротора, поскольку оказывает сильное влияние на баланс заселенностей излучательного и безызлучательного («темнового») состояния молекулы: вращение отдельных ее групп или скручивание фрагментов относительно друг друга приводит к увеличению заселенности «темнового» состояния молекул. Возможность безызлучательного расхода энергии возбужденного состояния посредством внутримолекулярного движения облегчается в средах с низкой вязкостью. Таким образом, в низковязких средах наблюдается сильное понижение флуоресцентных свойств красителя. И, напротив, в вязком окружении внутримолекулярное движение затруднено, и это приводит к резкому возрастанию флуоресценции и к изменению таких ее параметров, как квантовый выход и время жизни. Важно отметить также, что зависимость флуоресцентных параметров молекулярного ротора от вязкости может быть описана с помощью уравнений, полученных теоретически и подтвержденных экспериментально. Известно уравнение 
, связывающее квантовый выход флуоресценции с вязкостью растворителя
ϕ - квантовый выход,
z и α - константы,
η - вязкость.
Аналогичное уравнение существует и для другого параметра флуоресценции - времени жизни [Т. Forster, G.Hoffmann, Die Viskositatsabhangigkeit der Fluoreszenzquantenausbeuten einiger Farbstoffsysteme, Z. Phys. Chem., 1971, 75, 63].
τ - время жизни возбужденного состояния,
η - вязкость,
z и α - константы,
kr - константа скорости излучательного перехода.
Известно, что величина α, характеризующая такую зависимость для красителей, принадлежащих к классу молекулярных роторов, находится в интервале 0.3-0.6 [М.К. Kuimova. Molecular rotors image intracellular viscosity. Chimia, 2012, 66, №4, 159-165].
Наличие вязкостной чувствительности параметров флуоресценции открывает возможность использования молекулярных роторов для количественного измерения вязкости. В частности известно, что вязкость внутриклеточной среды увеличивается в процессе фотоиндуцированной смерти клеток [M. Kuimova, S. Butchway, A. Parker, H. Anderson, P. Ogiby Nature Chemistry, 1, 2009, 69-73]. Таким образом, измеряя фотофизические характеристики (квантовый выход и время жизни возбужденного состояния) молекулярных роторов можно оценить динамику течения фотодинамической реакции и ее эффективность на основании определения внутриклеточной вязкости.
Известно, что фотосенсибилизаторы из группы тетра(арил)тетрацианопорфиразинов характеризуются сильной зависимостью фотофизических свойств (времени жизни возбужденного состояния и квантового выхода флуоресценции) от вязкости среды [М. Angeles Izquierdo, Aurimas 
, Svetlana A. Lermontova, Ilya S.Grigoryev, Natalia Y. Shilyagina, Irina V. Balalaeva, Larisa G. Klapshina, Marina K. Kuimova Dual Use of Porphyrazines as Sensitizers and Viscosity Markers During Photodynamic Therapy// Journal of Materials Chemistry B. 2015. DOI: 10.1039/C4TB01678E; Lermontova S., Grigorev I., Shilyagina N., Peskova N., Balalaeva I., Shirmanova M., Klapshina L. New Porphyrazine Macrocycles with High Viscosity-Sensitive Fluorescence Parameters // Russian Journal of General Chemistry, 2016, №6, Vol. 86, p. 1011-1018; S.A. Lermontova, I.S. 
, N.N. Peskova, E.Yu. Ladilina, I.V. Balalaeva, L.G. Klapshina, V.P. Boyarskii. New promising porphyrazine-based agents for optical theranostics of cancer. Russian Journal of General Chemistry, 2017. V. 87, №3, pp 479-84 https://doi.org/10.1134/S1070363217030173] и могут быть отнесены к флуоресцентным молекулярным роторам.
После введения тетра(арил)тетрацианопорфиразины в течение 30-60 минут интенсивно накапливаются опухолевыми клетками в культуре, локализуясь в околоядерной области [Shilyagina N.Y., Peskova N.N., Lermontova S.A., Brilkina A.A., Vodeneev V.A., Yakimansky A.V., Klapshina L.G., Balalaeva I.V. Effective delivery of porphyrazine photosensitizers to cancer cells by polymer brush nanocontainers // J.Biophotonics, 2017. V. 10, №9. P. l189-1197. doi: 10.1002/jbio.201600212].
Надо отметить, что тетра(арил)тетрацианопорфиразины обнаруживают высокую фото динамическую активность при низких значениях темновой токсичности в отношении опухолевых клеток в культуре [Shilyagina N.Y., Peskova N.N., Lermontova S.A., Brilkina A.A., Vodeneev V.A., Yakimansky A.V., Klapshina L.G., Balalaeva I.V. Effective delivery of porphyrazine photosensitizers to cancer cells by polymer brush nanocontainers // J.Biophotonics, 2017. V. 10, №9. P. 1189-1197. doi: 10.1002/jbio.201600212]. Использование для фотодинамической терапии соединений, объединяющих свойства фотосенсибилизаторов и флуоресцентных молекулярных роторов обеспечит проведение лечения с контролем вязкостных свойств клеток и тканей в режиме реального времени. Это, в свою очередь, позволит расширить возможности флуоресцентного биоимиджинга и проводить процедуру лечения с индивидуализацией параметров фотодинамического воздействия с целью повышения ее эффективности.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому изобретению является способ повышения эффективности фотодинамической терапии путем определения степени выгорания фотосенсибилизатора, защищенный патентом RU 2552032 С1, кл. A61N 5/067 (2006.01), опубл. 10.06.2015 г., принятый за ближайший аналог (прототип).
В способе по прототипу во время проведения процедуры флуоресцентной диагностики при отношении флуоресцентного сигнала между опухолью и нормой более 1.0 диагностируют отсутствие выгорания. При отношении флуоресцентного сигнала между опухолью и нормой 0.8-1.0 диагностируют частичное выгорание. При отношении флуоресцентного сигнала между опухолью и нормой менее 0.8 диагностируют полное выгорание. В случае частичного выгорания или отсутствия выгорания процедуру ФДТ продолжают дополнительно с плотностью мощности 0.35 Вт/см2 путем поэтапного подведения по 50 Дж/см2 с оценкой степени выгорания после каждого этапа. При регистрации полного выгорания процедуру ФДТ завершают. Способ обеспечивает повышение эффективности ФДТ за счет объективного мониторинга проводимого лечения, подбора индивидуальных доз лазерного воздействия на основании параметров флуоресценции, что позволяет добиться полного ответа опухоли на лечение и сократить побочные эффекты и количество рецидивов.
Однако, прототип не лишен недостатков. В частности, способ повышения эффективности фотодинамической терапии основан на определении степени выгорания препарата, т.е. на определении интенсивности флуоресценции в опухоли и нормальной тканях после процедуры фотодинамической терапии. Однако известно, что интенсивность флуоресценции существенным образом зависит от концентрации препарата, таким образом, приток/отток фотосенсибилизатора из исследуемой ткани может внести искажения и привести к неверной интерпретации полученных данных.
В задачу изобретения положено создание нового способа фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени с тетрапиррольным красителем тетра(арил)тетрацианопорфиразинового ряда в качестве фотосенсибилизатора, который одновременно является эффективными фотодинамическим агентом и вязкостным сенсором.
Техническим результатом от использования предлагаемого изобретения является повышение вероятности полного удаления патологического образования за один сеанс фотодинамической терапии и минимизацию негативного воздействия на здоровые ткани за счет индивидуализации режима проведения фотодинамической терапии с применением фотосенсибилизаторов со свойствами вязкостных сенсоров.
Поставленная задача достигается тем, что способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени, включает введение фотосенсибилизатора, проведение флуоресцентной визуализации опухоли и определение времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в опухоли по достижении максимального накопления в опухоли, осуществление фотодинамической деструкции выявленных патологических очагов излучением с центральной длиной волны, совпадающей с максимумом поглощения фотосенсибилизатора, при этом в промежутках между этапами облучения оценивают время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора, процедуру фотодинамического облучения повторяют до увеличения времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в 1,5-2 раза относительно исходного уровня, в качестве фотосенсибилизатора для ФДТ используют тетрапиррольный краситель тетра(арил)тетрацианопорфиразинового ряда общей формулы:
где R - заместитель, R=2-MeOPh (2-метоксифенил), или 4-MeOPh (4-метоксифенил), или 4-EtO-3-MeOPh (3-метокси-4-этоксифенил), или 3-C2H3Ph (3-винилфенил), или Phen (9-фенантренил), или Et2NPh (4-диэтиламинофенил), или 4-C3H3OPh (4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-С3Н3О-3-MeOPh (3-метокси-4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-C3H3O-3-EtOPh (4-(2-пропинилокси)-3-этоксифенил), или 4-BnO-3-MeOPh (3-метокси-4-бензилоксифенил), или 4-BnO-EtOPh (4-бензилокси-3-этоксифенил), или 4-FBnO-3-MeOPh (3-метокси-4-((4-фтор)бензилокси)-фенил), или 4-FBnO-3-EtOPh (4-фторбензилокси)-3-этоксифенил), или 4-BnOPh (4-бензилоксифенил), или 4-BrBnO-3-MeOPh (4-бромбензилокси-3-метоксифенил), или 4-FPh (4-фторфенил), или 4-FBnOPh (4-фторбензилокси-3-метоксифенил), или 4-BrBnOPh (4-бромбензилоксифенил).
На фиг. 1 представлена структурная формула тетра(арил)тетрацианопорфиразина с различными вариантами боковых заместителей.
На фиг. 2 представлены графики зависимости квантового выхода флуоресценции (А) и времени жизни возбужденного состояния (Б) тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина (Pz XIV) от вязкости растворителя (спирто-глицериновые смеси).
На фиг. 3 представлено флуоресцентное микроскопическое изображение клеток СТ-26 (карцинома толстой кишки мыши) через один час после инкубации с 5 мкМ тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI).
На фиг. 4 представлено флуоресцентное микроскопическое изображение клеток А431 (эпидермоидная карцинома кожи человека) через один час после инкубации с 5 мкМ тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина (Pz XIV).
На фиг. 5 представлен график зависимости жизнеспособности клеток СТ-26 от концентрации в среде тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI). Метод МТТ.
На фиг. 6 представлен график зависимости жизнеспособности клеток А431 от концентрации в среде тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина (Pz XIV). Метод МТТ.
На фиг. 7 представлены изображения клеток MCF-7 (аденокарцинома молочной железы человека) через различные периоды времени после фотодинамического воздействия, сенсибилизированного 5 мкМ тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразином (Pz XVI), и соответствующие гистограммы распределения усредненного времени жизни возбужденного состояния тау (черная кривая - для необлученного участка, красная - для облученного). Метод FLIM. При проведении фотодинамического воздействия поле зрения микроскопа было поделено на две равные части - верхняя часть изображения подвергалась фотодинамическому воздействию (594 нм, доза 50 Дж/см2), нижняя не подвергалась. Облученный и необлученный участки разделены пунктиром. При получении изображений была использована псевдоцветовая палитра, которая отражает усредненное время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора (τaν) в каждом пикселе.
На фиг. 8 представлены изображение клеток А431 через различные периоды времени после фотодинамического воздействия (594 нм, 50 Дж/см2), сенсибилизированного 5 мкМ тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина (Pz XIV). Метод FLIM. Область облучения выделена белым квадратом.
На фиг. 9 представлены фотографическое изображение животного-опухоленосителя (А) и изображение, полученное методом поверхностного флуоресцентного имиджинга (Б), через три часа после внутривенного введения 15 мг/кг тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI). Стрелкой показан опухолевый узел.
На фиг. 10 представлена диаграмма динамики роста объема опухолевого узла у животных в контрольной (контроль) и опытных группах: 150 Дж/см2 - световое воздействие в дозе 150 Дж/см2; Pz XVI-ПЩ - внутривенное введение тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI), солюбилизированного в водной среде добавками полимерных щеток, 15 мг/кг; Pz XVI-ПЩ+150 Дж/см2 - внутривенное введение тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI), солюбилизированного в водной среде добавками полимерных щеток, 15 мг/кг и световое воздействие в дозе 150 Дж/см2. Планки погрешностей представлены стандартной ошибкой среднего. * - р<0.005, # р<0.0001, тест Манна-Уитни (n=5).
На фиг. 11 представлены фотографические изображения животного до и после фотодинамической терапии с тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразином (Pz XVI), солюбилизированного в водной среде добавками полимерных щеток, 15 мг/кг и 150 Дж/см2.
На фиг. 12 представлен график изменения времени жизни τ1 возбужденного состояния тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI), солюбилизированного в водной среде добавками полимерных щеток, в опухоли и норме до и после фотодинамического воздействия. Фотодинамическое воздействие в дозе 150 Дж/см2 осуществлялось через 3 часа (начало ФДТ показано черной стрелкой, окончание ФДТ показано синей стрелкой).
На фиг. 13 представлены кривые выживаемости Каплана-Мейера в контрольной и опытных группах. Выживание определяется как время, прошедшее с момента ФДТ до достижения опухолью объема 2500 мм3.
Предлагаемый способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени осуществляют следующим образом.
Для осуществления способа в качестве фотосенсибилизатора используют тетрапиррольный краситель тетра(арил)тетрацианопорфиразинового ряда общей формулы:
где R - заместитель, R=2-MeOPh (2-метоксифенил), или 4-MeOPh (4-метоксифенил), или 4-EtO-3-MeOPh (3-метокси-4-этоксифенил), или 3-C2H3Ph (3-винилфенил), или Phen (9-фенантренил), или Et2NPh (4-диэтиламинофенил), или 4-C3H3OPh (4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-C3H3O-3-MeOPh (3-метокси-4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-С3Н3О-3-EtOPh (4-(2-пропинилокси)-3-этоксифенил), или 4-BnO-3-MeOPh (3-метокси-4-бензилоксифенил), или 4-BnO-EtOPh (4-бензилокси-3-этоксифенил), или 4-FBnO-3-MeOPh (3-метокси-4-фторбензилоксифенил), или 4-FBnO-3-EtOPh (4-фторбензилокси-3-этоксифенил), или 4-BrBnOPh (4-бензилоксифенил), или 4-BrBnO-3-MeOPh (4-(бромбензилокси)-3-метоксифенил), или. 4-FPh (4-фторфенил), или 4-FBnOPh (4-фторбензилокси-3-метоксифенил), или 4-BrBnOPh (4-бромбензилоксифенил).
Используемый фотосенсибилизатор характеризуется сильной зависимостью фотофизических свойств (времени жизни возбужденного состояния и квантового выхода флуоресценции) от вязкости среды. Например, на фиг. 2 показаны зависимость квантового выхода флуоресценции (А) и времени жизни возбужденного состояния (Б) тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина (Pz XIV) от вязкости растворителя (спирто-глицериновые смеси). Коэффициент α, который количественно характеризует вязкостную чувствительность параметров флуоресценции красителя, равен 0.74 и 0.49 для квантового выхода флуоресценции и времени жизни возбужденного состояния соответственно. Приведенные значения α, позволяют отнести полученные красители к флуоресцентным молекулярным роторам.
Используемый фотосенсибилизатор обнаруживает высокую фотодинамическую активность при низких значениях темновой токсичности в отношении опухолевых клеток в культуре. Например, на фиг. 5 и 6 представлены графики зависимости жизнеспособности клеток СТ-26 от концентрации в среде тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI) и клеток А431 от концентрации в среде тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина (Pz XIV) соответственно. IC50(темнота) составляет более 50 мкМ для тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI) и более 10 мкМ для тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина при IC 50 (свет) 11 и 1 мкМ соответственно. Многократная разница между ингибирующими концентрациями соединения в темноте и при световом воздействии подтверждает высокую фотодинамическую активность используемого фотосенсибилизатора.
Сильная зависимость фотофизических свойств (времени жизни возбужденного состояния и квантового выхода флуоресценции) от вязкости среды (коэффициент α) и высокая фотодинамическая активность при низких значениях темновой токсичности в отношении опухолевых клеток в культуре характерна для всей серии соединений тетрапиррольных красителей тетра(арил)тетрацианопорфиразинового ряда (Таблица 1).
Осуществляют доставку фотосенсибилизатора к опухолевым клеткам. Например, при работе in vitro фотосенсибилизатор добавляют в среду инкубации, при работе in vivo фотосенсибилизатор вводят внутривенно. Для обеспечения доставки гидрофобных фотосенсибилизаторов возможно использование солюбилизаторов. Введенный фотосенсибилизатор накапливается в опухолевых клетках через 30-60 минут при работе in vitro, и через 3 часа при работе in vivo. С целью подтверждения накопления фотосенсибилизатора опухолевыми клетками проводят флуоресцентную микроскопию in vitro, либо флуоресцентный имиджинг при работе in vivo.
После подтверждения накопления фотосенсибилизатора опухолевыми клетками проводят регистрацию времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в области, которая в дальнейшем будет подвергаться фотодинамическому воздействию. При работе с клеточными культурами время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора оценивают с помощью метода время-разрешенной флуоресцентной микроскопии (FLIM). Данный метод позволяет получить пространственное распределение времени жизни возбужденного состояния молекул в пределах микроскопических изображений. Для регистрации времени жизни фотосенсибилизатора возбуждение осуществляют с помощью импульсного лазера с длиной волны соответствующей спектру однофотонного или многофотонного возбуждения фотосенсибилизатора, регистрацию осуществляют в диапазоне, который соответствует спектру флуоресценции фотосенсибилизатора.
При работе in vivo возбуждение флуоресценции осуществляют с помощью импульсного лазера с длиной волны, соответствующей спектру однофотонного возбуждения фотосенсибилизатора. Сигнал флуоресценции регистрируется с помощью фотоэлектронного умножителя, работающего в режиме счета фотонов.
Для полученных кривых затухания флуоресценции осуществляется их аппроксимация экспоненциальной функцией, или суммой нескольких экспоненциальных функций. В последнем случае определяются времена жизни для каждой из экспонент (τ1, τ2 и т.д.) и усредненное временя жизни возбужденного состояния (τaν). Все перечисленные показатели могут быть использованы для оценки состояния облучаемого участка. Затем осуществляют фотодинамическое воздействие путем фракционированного поэтапного облучения по 10 Дж/см2 при работе in vitro и по 50 Дж/см2 при работе in vivo.
Фотодинамическое воздействие осуществляется с помощью светодиодной установки или лазера. Центральная длина волны оптического излучения должна соответствовать спектру возбуждения фотосенсибилизатора. Для исключения влияния излучения на здоровые ткани животное накрывается светозащитной тканью и облучение опухоли осуществляется локально через отверстие, размер которого соответствует размеру опухолевого узла.
После первого акта фотодинамического воздействия регистрируют время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора. Далее процедуру фотодинамического облучения повторяют до увеличения времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в 1,5-2 раза относительно исходного уровня.
Время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора оценивают в промежутках между этапами облучения.
Увеличение времени жизни возбужденного состояния в полтора-два раза относительно исходного уровня указывает на эффективность осуществляемого фотодинамического воздействия.
Следует отметить, что такой параметр как время жизни возбужденного состояния не зависит от концентрации фотосенсибилизатора в ткани. В отличие от интенсивности флуоресценции, время жизни является собственным свойством флуорофора, и, следовательно, на измерение этого параметра не влияет нестабильность возбуждающего света и фотообесцвечивание. Измерения с временным разрешением позволяют получить динамическую информацию о микроокружении флуорофора и его взаимодействии с другими молекулами.
За счет индивидуализации режима проведения фотодинамической терапии с применением фотосенсибилизаторов со свойствами вязкостных сенсоров предлагаемый способ обеспечивает повышение вероятности полного удаления патологического образования за один сеанс фотодинамической терапии и минимизацию негативного воздействия на здоровые ткани.
Ниже представлены примеры осуществления предлагаемого изобретения.
Пример 1.
Эксперимент in vitro осуществляли на клеточных культурах СТ-26 (карцинома толстой кишки мыши), А431 (эпидермоидная карцинома кожи человека) и MCF-7 (аденокарцинома молочной железы человека).
При работе с клеточными культурами фотосенсибилизатор добавляли в среду инкубации в концентрации 5 мкМ.
Введенный фотосенсибилизатор накапливался в опухолевых клетках через 30-60 минут. С целью подтверждения накопления опухолевыми клетками фотосенсибилизатора проводили флуоресцентную микроскопию. Например, по интенсивному сигналу флуоресценции в красной области спектра определяли, что введенный фотосенсибилизатор накапливался в цитоплазме клеток возле ядра и в ядерной оболочке клеток СТ-26 (карцинома толстой кишки мыши) через один час после инкубации с тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразином (Pz XVI) и клеток А431 (эпидермоидная карцинома кожи человека) через один час после инкубации с тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразином (Pz XIV) (фиг. 3 и 4).
После подтверждения накопления фотосенсибилизатора опухолевыми клетками проводили регистрацию времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в области, которую в дальнейшем подвергали фотодинамическому воздействию.
Регистрацию времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора осуществляли на системе лазерной сканирующей микроскопии Axio Observer Z1 LSM-710 DUO NLO (Carl Zeiss, Германия) с модулем FLIM (Becker & Hickl, Германия) при двухфотонном возбуждении фемтосекундным лазером Chameleon (Coherent, США).
Затем осуществляли фотодинамическое воздействие путем фракционированного поэтапного облучения по 10 Дж/см2.
Фотодинамическое воздействие осуществляли путем сканирования участка образца гелий-неоновым лазером 594 нм, мощность на объективе 160 мкВт, в течение 8-20 минут, в зависимости от площади облучаемого участка. Доза облучения составляла 50 Дж/см2.
После первого акта фотодинамического воздействия регистрировали время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора.
Далее процедуру фотодинамического облучения повторяли до увеличения времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в полтора-два раза относительно исходного уровня.
В эксперименте in vitro установили, что тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразин (Pz XVI), солюбилизированный в водной среде добавками полимерных щеток, характеризуется высокой фотодинамической активностью. Например, на фиг. 5 и 6 представлены графики зависимости жизнеспособности клеток СТ-26 от концентрации в среде тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI) и клеток А431 от концентрации в среде тетра(4-бензилоксифенил) тетрацианопорфиразина (Pz XIV) соответственно. IC 50 (темнота) составляет более 50 мкМ для тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI) и более 10 мкМ для тетра(4- бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина при IC 50 (свет) 11 и 1 мкМ соответственно. Многократная разница между ингибирующими концентрациями соединения в темноте и при световом воздействии подтверждает высокую фотодинамическую активность используемого фотосенсибилизатора.
Кроме этого, на фиг. 7 хорошо видно, что через 90 минут после фотодинамического воздействия (594 нм, 50 Дж/см2) в облучаемой зоне культуры опухолевых клеток MCF-7 (аденокарцинома молочной железы человека), сенсибилизированных 5 мкМ тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразином (Pz XVI), регистрируется увеличение времени жизни возбужденного состояния фтосенсибилизатора - τaν изменяется с 370 пс до 530 пс через 90 минут после начала воздействия. Также, мониторинг, проведенный с помощью FLIM (фиг. 8) показал, что после фотодинамического воздействия в облученной области происходит увеличение времени жизни возбужденного состояния тетра(4-бензилоксифенил)тетрацианопорфиразина (Pz XIV): короткоживущая компонента τ1 увеличивается с 300 до 370 пс, долгоживущая компонента τ2 - с 1849 до 2484 пс, данные представлены в таблице 2.
Пример 2.
Эксперимент in vivo осуществляли на лабораторных мышах линии Balb/c с подкожной опухолью СТ-26 (номер по каталогу АТСС® CRL-2638™). Для получения экспериментальных опухолей животным подкожно в область задней поверхности левого бедра вводили суспензию опухолевых клеток в количестве 500000 клеток в 50 мкл 10 мМ фосфатно-солевого буфера (PBS). Исследования начинались по достижении опухолями объема ~0,5 см3, через 7 дней после прививки опухоли.
Инъекцию фотосенсибилизатора, солюбилизированного в водной среде добавками полимерных щеток, проводили через хвостовую вену в концентрации 15 мг/кг. Облучение проводили через 3 часа после инъекции фотосенсибилизатора.
Наблюдали, что введенный фотосенсибилизатор у животных-опухоленосителей накапливается в опухоли в максимальной концентрации через 3 часа. С целью подтверждения накопления фотосенсибилизатора в опухоли проводили флуоресцентный имиджинг. Например, на флуоресцентном изображении животного-опухоленосителя, полученном методом поверхностного флуоресцентного имиджинга через три часа после внутривенного введения 15 мг/кг тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI), на фиг. 9Б хорошо видно, что в области опухоли регистрируется интенсивный флуоресцентный сигнал, соответствующий флуоресценции тетра(4-фторфенил) тетрацианопорфиразина (Pz XVI).
После подтверждения накопления фотосенсибилизатора в опухоли проводили регистрацию времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в области, которую в дальнейшем подвергали фотодинамическому воздействию.
Регистрация времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в опухоли и нормальных тканях проводилась с помощью установки для время-коррелированного счета одиночных фотонов на основе платы SPC-150 (Becker & Hickle, Германия). Возбуждение флуоресценции фотосенсибилизатора осуществляли с помощью импульсного лазера Fianium SC-450 в спектральном диапазоне 590-595 нм.
Затем осуществляли фотодинамическое воздействие на опухоль путем фракционированного поэтапного облучения по 50 Дж/см2.
Фотодинамическое воздействие на опухоль проводилось с помощью светодиодного источника излучения с центральной длиной волны 640 нм. Доза облучения в эксперименте составляла 150 Дж/см2. Дозу облучения при этом регулировали временем воздействия. Для исключения влияния излучения на нормальные ткани животное накрывалось светозащитной тканью, облучение опухоли осуществлялось локально через отверстие, размер которого соответствовал размеру опухолевого узла.
После первого акта фотодинамического воздействия регистрировали время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора.
Далее процедуру фотодинамического облучения повторяли до увеличения времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в полтора-два раза относительно исходного уровня.
В эксперименте in vivo установили, что тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразин (Pz XVI), солюбилизированный в водной среде добавками полимерных щеток, характеризуется высокой фотодинамической активностью. Например, фотодинамическое воздействие с тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразином (Pz XVI), солюбилизированным в полимерных щеках, вызывает существенное (10-20 раз) уменьшение объемов опухолевого узла у животных в опытных группах по сравнению с другими экспериментальными группами (фиг. 10), что свидетельствует о его высокой фотодинамической активности in vivo. Коэффициент торможения опухолевого роста при фотодинамическом воздействии с тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразином (Pz XVI), рассчитанный на основе полученных данных (фиг. 10) составил около 95%.
Наблюдали, что у животного через 4 недели после терапии происходит полная регрессия опухолевого узла (фиг. 11), что подтверждает эффективность тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI) как фотодинамического агента. Кроме этого, при эффективном фотодинамическом воздействии с использованием тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI), солюбилизированного в водной среде добавками полимерных щеток, происходит увеличение времени жизни его возбужденного состояния в облученных опухолевых клетках. Например, после фотодинамического воздействия с тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразином (Pz XVI) в области опухоли происходит увеличение времени жизни возбужденного состояния в 1.5-2 раза по сравнению с исходным уровнем, при этом в необлученной нормальной ткани таковых изменений не происходит (фиг. 12). Фотодинамическая терапия с применением тетра(4-фторфенил)тетрацианопорфиразина (Pz XVI), солюбилизированного в полимерных щеках, значительно увеличивает продолжительность жизни животных-опухоленосителей по сравнению с животными, которые не подвергались лечению (фиг. 13). Выживание определяется как время, прошедшее с момента ФДТ, до достижения опухолью объема 2500 мм3.
Claims (8)
1. Способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени, включающий доставку фотосенсибилизатора к опухолевым клеткам, проведение флуоресцентной визуализации опухоли и определение времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора по достижении максимального накопления в опухоли, осуществление фотодинамической деструкции выявленных патологических очагов путем фракционированного поэтапного облучения с центральной длиной волны, совпадающей со спектром поглощения фотосенсибилизатора, при этом в промежутках между этапами облучения оценивают время жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора, процедуру фотодинамического облучения повторяют до увеличения времени жизни возбужденного состояния фотосенсибилизатора в 1,5-2 раза относительно исходного уровня, в качестве фотосенсибилизатора используют тетрапиррольный краситель тетра(арил)тетрацианопорфиразинового ряда общей формулы:
где R - заместитель, R=2-MeOPh (2-метоксифенил), или 4-MeOPh (4-метоксифенил), или 4-EtO-3-MeOPh (3-метокси-4-этоксифенил), или 3-C2H3Ph (3-винилфенил), или Phen (9-фенантренил), или Et2NPh (4-диэтиламинофенил), или 4-С3Н3ОРh (4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-C3H3O-3-MeOPh (3-метокси-4-(2-пропинилокси)фенил), или 4-C3H3O-3-EtOPh (4-(2-пропинилокси)-3-этоксифенил), или 4-BnO-3-MeOPh (3-метокси-4-бензилоксифенил), или 4-BnO-EtOPh (4-бензилокси-3-этоксифенил), или 4-FBnO-3-MeOPh (3-метокси-4-фторбензилоксифенил), или 4-FBnO-3-EtOPh (4-фторбензилокси-3-этоксифенил), или 4-BnOPh (4-бензилоксифенил), или 4-BrBnO-3-MeOPh (4-(бензилокси)-3-метоксифенил), или 4-FPh (4-фторфенил), или 4-FBnOPh (4-фторбензилоксифенил), или 4-BrBnOPh (4-бромбензилоксифенил).
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что при работе in vitro фотосенсибилизатор добавляют в среду инкубации, при работе с in vivo фотосенсибилизатор вводят внутривенно.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для подтверждения накопления опухолевыми клетками фотосенсибилизатора проводят флуоресцентную микроскопию при работе in vitro либо флуоресцентный имиджинг при работе in vivo.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что осуществляют фракционированное поэтапное облучение по 10 Дж/см2 при in vitro и по 50 Дж/см2 при работе in vivo.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что фотодинамическое воздействие производят либо с помощью светодиодов, либо с помощью лазеров.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что увеличение времени жизни возбужденного состояния в 1,5-2 раза относительно исходного уровня указывает на эффективность осуществляемого фотодинамического воздействия.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017142699A RU2672806C1 (ru) | 2017-12-07 | 2017-12-07 | Способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017142699A RU2672806C1 (ru) | 2017-12-07 | 2017-12-07 | Способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2672806C1 true RU2672806C1 (ru) | 2018-11-19 |
Family
ID=64328097
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017142699A RU2672806C1 (ru) | 2017-12-07 | 2017-12-07 | Способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2672806C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2725641C1 (ru) * | 2019-12-11 | 2020-07-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт металлоорганической химии им. Г.А. Разуваева Российской академии наук | Тетра(пирен-1-ил)тетрацианопорфиразин как мультифункциональный агент терапии злокачественных новообразований |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002086472A1 (en) * | 2001-01-12 | 2002-10-31 | Regents Of The University Of California | Molecular rotor derivatives and methods of use |
| WO2010028780A2 (en) * | 2008-09-09 | 2010-03-18 | Universität Zürich | Preparation and uses of guanidinium-modified porphyrins and phthalocyanines |
| RU2012139381A (ru) * | 2012-09-13 | 2014-03-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО НижГМА Минздравсоцразвития России) | Способ фотодинамической терапии опухоли |
| RU2552032C1 (ru) * | 2014-04-22 | 2015-06-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная медицинская академия" Министерства Здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО НижГМА Минздрава России) | Способ фотодинамической терапии |
| RU2576823C1 (ru) * | 2015-03-10 | 2016-03-10 | государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ фотодинамической терапии центрального рака легкого и контроля ее эффективности |
-
2017
- 2017-12-07 RU RU2017142699A patent/RU2672806C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002086472A1 (en) * | 2001-01-12 | 2002-10-31 | Regents Of The University Of California | Molecular rotor derivatives and methods of use |
| WO2010028780A2 (en) * | 2008-09-09 | 2010-03-18 | Universität Zürich | Preparation and uses of guanidinium-modified porphyrins and phthalocyanines |
| RU2012139381A (ru) * | 2012-09-13 | 2014-03-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО НижГМА Минздравсоцразвития России) | Способ фотодинамической терапии опухоли |
| RU2552032C1 (ru) * | 2014-04-22 | 2015-06-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная медицинская академия" Министерства Здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО НижГМА Минздрава России) | Способ фотодинамической терапии |
| RU2576823C1 (ru) * | 2015-03-10 | 2016-03-10 | государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ фотодинамической терапии центрального рака легкого и контроля ее эффективности |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| БАЛАЛАЕВА И.В. и др. "Неинвазивный мониторинг ответа на фотодинамическое воздействие с применением чувствительного к вязкости флуоресцентного сенсора" // "V съезд биофизиков России" - материалы докладов, том 2, Ростов-на-Дону, изд-во ЮФУ, 2015, стр.132. ЛЕРМОНТОВА С.А. "Новые флюоресцентные порфиразиновые свободные основания и металлокомплексы для применения в фотонике и биофотонике" - дисс. на соиск. уч.ст. к.х.н., НижН., 2014. ШИЛЯГИНА Н.Ю. "Исследование тетраарилтетрацианопорфиразинов в качестве потенциальных фотосенсибилизаторов для фотодинамической терапии и флуоресцентной диагностики" - автореф. дисс. на соиск. уч. ст. к.б.н., Воронеж, 2014. SHIMOLINA L E et al. "Imaging tumor microscopic viscosity in vivo using molecular rotors". Sci Rep. 2017;7: 41097. Published online 2017 Jan 30, Free text, найдено 07.08.2018 из PubMed PMCID: PMC5278387 (PMID: 28134273). * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2725641C1 (ru) * | 2019-12-11 | 2020-07-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт металлоорганической химии им. Г.А. Разуваева Российской академии наук | Тетра(пирен-1-ил)тетрацианопорфиразин как мультифункциональный агент терапии злокачественных новообразований |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Del Rosal et al. | Strategies to overcome autofluorescence in nanoprobe‐driven in vivo fluorescence imaging | |
| Celli et al. | Imaging and photodynamic therapy: mechanisms, monitoring, and optimization | |
| Karotki et al. | Simultaneous two‐photon excitation of photofrin in relation to photodynamic therapy | |
| Wagnieres et al. | In vivo fluorescence spectroscopy and imaging for oncological applications | |
| Jarvi et al. | Singlet oxygen luminescence dosimetry (SOLD) for photodynamic therapy: current status, challenges and future prospects | |
| JP2001503748A (ja) | 分子薬の光活性における選択性改善と検出のための方法 | |
| Letuta et al. | Delayed luminescence of erythrosine in biological tissue and photodynamic therapy dosimetry | |
| Shen et al. | Indirect imaging of singlet oxygen generation from a single cell | |
| Kolesnikov et al. | Water-soluble multimode fluorescent thermometers based on porphyrins photosensitizers | |
| Piffaretti et al. | Optical fiber-based setup for in vivo measurement of the delayed fluorescence lifetime of oxygen sensors | |
| Scholz et al. | The singlet-oxygen-sensitized delayed fluorescence in mammalian cells: a time-resolved microscopy approach | |
| Wilson | Photodynamic therapy/diagnostics: principles, practice, and advances | |
| CN109054807A (zh) | 一种双细胞器靶向的纳米探针及其制备及应用 | |
| RU2672806C1 (ru) | Способ фотодинамической терапии с контролем эффективности в режиме реального времени | |
| Wilson et al. | Correlation of in vivo tumor response and singlet oxygen luminescence detection in mTHPC-mediated photodynamic therapy | |
| Ghasemi et al. | Optical spectroscopic methods to discriminate in-Vitro Hodgkin cancerous and normal tissues | |
| Meerovich et al. | Photosensitizer for PDT based on phosphonate phthalocyanine derivative | |
| Singh et al. | Imaging of mitochondria/lysosomes in live cells and C. elegans | |
| Istomin et al. | Uptake and phototoxicity of tricarbocyanine indolenine dye covalently bound with glucose (TICS) under acidification of tumor cells environment | |
| Sharova et al. | Sapphire implant based neuro-complex for deep-lying brain tumors phototheranostics | |
| Kamalov et al. | Selective effect of laser radiation on cancer cells and laser spectroscopy of the cell | |
| Rueck et al. | FLIM and SLIM for molecular imaging in PDT | |
| Hwang et al. | Large field of view scanning fluorescence lifetime imaging system for multimode optical imaging of small animals | |
| Glazov et al. | Journal of Applied and Laser Spectroscopy | |
| RU2355285C2 (ru) | Способ флуоресцентной диагностики поражений роговицы |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201208 |