RU2665628C1 - Device for spectral-fluorescence investigation of fluorochrome content - Google Patents

Device for spectral-fluorescence investigation of fluorochrome content Download PDF

Info

Publication number
RU2665628C1
RU2665628C1 RU2018102958A RU2018102958A RU2665628C1 RU 2665628 C1 RU2665628 C1 RU 2665628C1 RU 2018102958 A RU2018102958 A RU 2018102958A RU 2018102958 A RU2018102958 A RU 2018102958A RU 2665628 C1 RU2665628 C1 RU 2665628C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
input
fluorescence
spectral
signal
radiation
Prior art date
Application number
RU2018102958A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Екатерина Витальевна Ахлюстина
Андрей Павлович Будько
Анна Владимировна Ланцова
Кирилл Геннадьевич Линьков
Виктор Борисович Лощенов
Геннадий Александрович Меерович
Татьяна Александровна Савельева
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России)
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт общей физики имени А.М. Прохорова Российской академии наук (ИОФ РАН)
Общество с Ограниченной Ответственностью ООО "БИОСПЕК"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России), Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт общей физики имени А.М. Прохорова Российской академии наук (ИОФ РАН), Общество с Ограниченной Ответственностью ООО "БИОСПЕК" filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России)
Priority to RU2018102958A priority Critical patent/RU2665628C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2665628C1 publication Critical patent/RU2665628C1/en

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61BDIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B5/00Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
    • A61B5/0059Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons using light, e.g. diagnosis by transillumination, diascopy, fluorescence
    • A61B5/0071Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons using light, e.g. diagnosis by transillumination, diascopy, fluorescence by measuring fluorescence emission
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)

Abstract

FIELD: medicine; biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to biomedicine, and more particularly to devices for spectral-fluorescent investigation of the content of exogenous fluorochromes (in particular fluorescent preparations, for example photosensitizers) in biological tissues, in particular in the organs and tissues of experimental animals in the study of pharmacokinetics and biodistribution. Device for spectral-fluorescence investigation of the content of exogenous fluorochromes includes a light source for excitation of fluorescence, spectral-selective device, optical system for transmission of exciting radiation to the object under study and transmission of fluorescence radiation to the input of a spectral-selective device, a matrix photodetector at the output of a spectral-selective device with a signal output and a control input, a system for recording the signal of a photodetector including an analog-to-digital converter and a personal computer. Also, the device comprises a buffer memory unit, two two-input comparators, a high-level reference set-up and a reference level selector, an accumulation time control unit, a two-input accumulation correction unit.EFFECT: expanded dynamic range of measurements of the intensity of fluorescence of the device for spectral-fluorescence investigation of the content of fluorochromes is achieved.5 cl, 1 dwg

Description

Настоящее устройство относится к биомедицине, а более конкретно к устройствам для спектрально-флуоресцентного исследования содержания экзогенных флуорохромов (в частности, флуоресцирующих препаратов, например фотосенсибилизаторов) в биоткани, в частности в органах и тканях экспериментальных животных при исследованиях фармакокинетики и биораспределения.The present device relates to biomedicine, and more specifically to devices for spectral-fluorescence studies of the content of exogenous fluorochromes (in particular, fluorescent drugs, for example photosensitizers) in biological tissues, in particular in the organs and tissues of experimental animals in studies of pharmacokinetics and biodistribution.

При исследованиях фармакокинетики и биораспределения необходимо быстро и точно определять содержание введенного флуоресцирующего препарата в разных органах и тканях лабораторных животных, при том, что разница значений концентрации препарата в них может доходить до двух порядков (например, между плазмой крови или печенью, с одной стороны, и мышцами или кожей, с другой стороны). Поскольку при изучении биораспределения и концентрации измерения интенсивности флуоресценции происходят через отличающиеся по длительности интервалы времени после введения (от нескольких секунд или минут до недели), концентрация изучаемого препарата вследствие его элиминации также может изменяться в широких пределах (вплоть до двух порядков). Для адекватной оценки интегральной интенсивности и спектральной формы полосы флуоресценции важно, чтобы было обеспечено пропорциональное аналогово-цифровое преобразование как спектрального максимума, так и фронтов спектральной полосы, интенсивность которых может отличаться, по крайней мере, на порядок. Наконец, в несколько раз может отличаться доза, вводимая в разных опытах. Таким образом, для адекватного аппаратурного обеспечения необходимо с достаточно высокой точностью и линейностью проводить исследования сигналов флуоресценции, отличающихся более чем на 3 порядка.In studies of pharmacokinetics and biodistribution, it is necessary to quickly and accurately determine the content of the injected fluorescent drug in different organs and tissues of laboratory animals, despite the fact that the difference in the concentration of the drug in them can reach two orders of magnitude (for example, between blood plasma or liver, on the one hand, and muscle or skin, on the other hand). Since when studying biodistribution and concentration, measurements of fluorescence intensity occur at different time intervals after administration (from several seconds or minutes to a week), the concentration of the studied drug due to its elimination can also vary over a wide range (up to two orders of magnitude). For an adequate assessment of the integrated intensity and spectral shape of the fluorescence band, it is important that a proportional analog-to-digital conversion of both the spectral maximum and the fronts of the spectral band is ensured, the intensities of which can differ by at least an order of magnitude. Finally, the dose administered in different experiments may differ several times. Thus, for adequate hardware it is necessary to carry out studies of fluorescence signals with a sufficiently high accuracy and linearity, which differ by more than 3 orders of magnitude.

Известно устройство для спектрально-флуоресцентного исследования содержания экзогенных флуорохромов, например, фотосенсибилизаторов, включающее источник света для возбуждения флуоресценции, в частности, лазер, спектрально-селективное устройство, в частности, полихроматор, оптическую систему для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства, в частности, оптоволоконный зонд, содержащий осветительные световоды для доставки к биоткани возбуждающего излучения и приемные световоды для доставки излучения флуоресценции от биоткани на вход полихроматора, матричный фотоприемник на выходе спектрально-селективного устройства, в частности, ПЗС или КМОП-линейку, систему регистрации сигнала от каждой из ячеек фотоприемника, пропорционального ее заряду, включающую стандартное устройство сопряжения сигнала с компьютером (как правило, аналогово-цифровой преобразователь (АЦП)) и персональный компьютер (ПК) [ДА Рогаткин. Физические основы лазерной клинической флюоресцентной спектроскопии in vivo. Медицинская физика, 2014, №4, с. 78- 95].A device for spectral-fluorescence studies of the content of exogenous fluorochromes, for example, photosensitizers, including a light source for exciting fluorescence, in particular a laser, a spectrally selective device, in particular a polychromator, an optical system for transmitting exciting radiation to an object under study and transmitting fluorescence radiation to the input of a spectrally selective device, in particular, an optical fiber probe containing illuminating optical fibers for delivering exciting radiation and receiving optical fibers for delivering fluorescence radiation from biological tissue to the input of a polychromator, an array photodetector at the output of a spectrally selective device, in particular, a CCD or CMOS array, a system for recording a signal from each of the cells of the photodetector proportional to its charge, including a standard interface device a signal with a computer (usually an analog-to-digital converter (ADC)) and a personal computer (PC) [YES Rogatkin. Physical fundamentals of in vivo laser clinical fluorescence spectroscopy. Medical Physics, 2014, No. 4, p. 78-95].

Известно также устройство для спектрально-флуоресцентного исследования содержания экзогенных флуорохромов, например, фотосенсибилизаторов, включающее источник света для возбуждения флуоресценции, в частности, лазер, спектрально-селективное устройство, в частности, полихроматор, оптическую систему для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства, в частности, оптоволоконный зонд, содержащий осветительные световоды для доставки к биоткани возбуждающего излучения и приемные световоды для доставки излучения флуоресценции от биоткани на вход полихроматора, матричный фотоприемник на выходе спектрально-селективного устройства, в которой система регистрации сигнала от каждого из ячеек фотоприемника, пропорционального ее заряду, включает аналогово-цифровой преобразователь (АЦП) для оцифровки сигнала фотоприемника и персональный компьютер (ПК) [Ю.В. Бажанов, Г.Л. Даниелян, С.Н. Марков. Разработка малогабаритного модульного спектрометра. Сборник трудов 7 международной конференции «Прикладная оптика-2006», т. 3, с. 139-143]. При проведении спектрально-флуоресцентного исследования с использованием известного устройства излучение с выхода лазера вводится в осветительный световод оптоволоконного зонда. Выходя из дистального конца осветительного световода, это излучение облучает биологическую ткань, содержащую флуорохром, и инициирует флуоресценцию его молекул, интенсивность характеристической полосы которой, в первом приближении, пропорциональна содержанию флуорохрома в биоткани. Система передачи излучения флуоресценции передает это на вход спектрально-селективного устройства, где происходит спектральное разложение этого излучения, после чего оно попадает на матричный фотоприемник. Сигнал с выхода линейки поступает на АЦП. ПК из поступающих с выхода АЦП цифровых данных, соответствующих интенсивности сигнала из каждой ячейки линейки, и номеров ячеек линейки, которым поставлена в соответствии с результатами калибровки определенная длина волны, формирует спектральную кривую (зависимость интенсивности от длины волны), которая отображается на мониторе ПК.A device is also known for spectral-fluorescence studies of the content of exogenous fluorochromes, for example, photosensitizers, including a light source for exciting fluorescence, in particular a laser, a spectrally selective device, in particular a polychromator, an optical system for transmitting exciting radiation to an object under study and transmitting radiation fluorescence at the input of a spectrally selective device, in particular, an optical fiber probe containing illuminating optical fibers for delivering excitation to the biological tissue radiation receiving and receiving fibers for delivering fluorescence radiation from biological tissue to the input of the polychromator, a matrix photodetector at the output of a spectrally selective device, in which the signal recording system from each of the cells of the photodetector proportional to its charge includes an analog-to-digital converter (ADC) for digitizing the signal photodetector and personal computer (PC) [Yu.V. Bazhanov, G.L. Danielyan, S.N. Markov. Development of a compact modular spectrometer. Proceedings of the 7th international conference “Applied Optics-2006”, vol. 3, p. 139-143]. When conducting spectral-fluorescence studies using a known device, the radiation from the laser output is introduced into the light guide of the optical fiber probe. Coming out of the distal end of the light guide, this radiation irradiates the biological tissue containing fluorochrome and initiates the fluorescence of its molecules, the intensity of the characteristic band of which, in a first approximation, is proportional to the content of fluorochrome in the biological tissue. The fluorescence emission transmission system transmits this to the input of a spectrally selective device, where the spectral decomposition of this radiation takes place, after which it enters the matrix photodetector. The signal from the output of the line goes to the ADC. A PC from the digital data coming from the ADC output that corresponds to the signal intensity from each cell of the line and the numbers of the cells of the line that are assigned a certain wavelength in accordance with the calibration results forms a spectral curve (the dependence of the intensity on the wavelength) that is displayed on the PC monitor.

Динамический диапазон известных устройств определяется, в основном, диапазоном линейности фотоприемника. При высоких уровнях световых потоков, падающих на ячейку фотоприемника, может происходить зарядовое насыщение сигнала этой и прилегающих ячеек фотоприемника; при низких уровнях сигнал, связанный с падающим световым потоком, может оказаться малоразличимым на фоне аппаратных шумов устройства, в первую очередь - тепловых шумов фотоприемника. Из-за этого динамический диапазон известных устройств не превышает, как правило, двух порядков, что заметно меньше требований, которые были бы адекватными задаче точных исследований фармакокинетики и биораспределения флуоресцирующих препаратов. Это является основным недостатком известных устройств, существенно снижающим точность исследований.The dynamic range of known devices is determined mainly by the linearity range of the photodetector. At high levels of light flux incident on the cell of the photodetector, charge saturation of the signal of this and adjacent cells of the photodetector can occur; at low levels, the signal associated with the incident light flux may be indistinguishable against the background of the hardware noise of the device, primarily the thermal noise of the photodetector. Because of this, the dynamic range of known devices does not exceed, as a rule, two orders of magnitude, which is noticeably less than the requirements that would be adequate for the task of accurate studies of the pharmacokinetics and biodistribution of fluorescent drugs. This is the main disadvantage of the known devices, significantly reducing the accuracy of research.

Техническая проблема, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, состоит в недостаточной точности исследований фармакокинетики и биораспределения фотосенсибилизаторов.The technical problem, the solution of which the invention is directed, consists in the insufficient accuracy of studies of the pharmacokinetics and biodistribution of photosensitizers.

Техническим результатом является расширение динамического диапазона измерений интенсивности флуоресценции устройства для спектрально-флуоресцентного исследования содержания флуорохромов.The technical result is to expand the dynamic range of measurements of the fluorescence intensity of the device for spectral-fluorescence studies of the content of fluorochromes.

Технический результат достигается тем, что в устройстве для спектрально-флуоресцентного исследования содержания экзогенных флуорохромов, включающем источник света для возбуждения флуоресценции, спектрально-селективное устройство, оптическую систему для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства, матричный фотоприемник на выходе спектрально-селективного устройства с сигнальным выходом и управляющим входом, систему регистрации сигнала фотоприемника, включающую аналогово-цифровой преобразователь (АЦП) и персональный компьютер (ПК), устройство содержит дополнительно блок буферной памяти, два двухвходовых компаратора, задатчик опорного сигнала верхнего уровня и задатчик опорного сигнала нижнего уровня, блок управления временем накопления, двухвходовой блок коррекции накопления, вход блока буферной памяти соединен с сигнальным выходом матричного фотоприемника, выход блока буферной памяти соединен с сигнальными входами компараторов и сигнальным входом блока коррекции накопления, задатчик опорного сигнала верхнего уровня соединен с опорным входом первого компаратора, задатчик опорного сигнала нижнего уровня соединен с опорным входом второго компаратора, выходы компараторов соединены со входом блока управления временем накопления, выход блока управления временем накопления соединен с управляющим входом матричного фотоприемника и управляющим входом блока коррекции накопления, выход блока коррекции накопления соединен со входом АЦП системы регистрации сигнала фотоприемника.The technical result is achieved by the fact that in the device for spectral-fluorescence studies of the content of exogenous fluorochromes, including a light source for exciting fluorescence, a spectrally selective device, an optical system for transmitting exciting radiation to the object under study and transmitting fluorescence radiation to the input of a spectrally selective device, matrix a photodetector at the output of a spectrally selective device with a signal output and a control input, a system for registering a signal a receiver including an analog-to-digital converter (ADC) and a personal computer (PC), the device further comprises a buffer memory unit, two two-input comparators, a reference signal setter for the upper level and a reference signal setter for the lower level, the accumulation time control unit, the two-input accumulation correction unit, the input of the buffer memory unit is connected to the signal output of the matrix photodetector, the output of the buffer memory unit is connected to the signal inputs of the comparators and the signal input of the lane, the reference signal of the upper level is connected to the reference input of the first comparator, the reference signal of the lower level is connected to the reference input of the second comparator, the outputs of the comparators are connected to the input of the accumulation time control unit, the output of the accumulation time control unit is connected to the control input of the matrix photodetector and control input the accumulation correction unit, the output of the accumulation correction unit is connected to the ADC input of the photodetector signal registration system.

Технический результат достигается также тем, что источник света для возбуждения флуоресценции флуорохрома представляет собой лазер с длиной волны в полосе возбуждения флуорохрома.The technical result is also achieved by the fact that the light source for excitation of fluorescence fluorochrome is a laser with a wavelength in the excitation band of fluorochrome.

Технический результат достигается также тем, что матричный фотоприемник представляет собой ПЗС- или КМОП-линейку.The technical result is also achieved by the fact that the matrix photodetector is a CCD or CMOS array.

Технический результат достигается также тем, что спектрально-селективное устройство представляет собой полихроматор.The technical result is also achieved by the fact that the spectrally selective device is a polychromator.

Технический результат достигается также тем, что оптическая система для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства представляет собой оптоволоконный зонд, содержащий осветительные световоды для доставки к биоткани возбуждающего излучения и приемные световоды для доставки излучения флуоресценции от биоткани на вход полихроматора.The technical result is also achieved by the fact that the optical system for transmitting exciting radiation to the object under study and transmitting fluorescence radiation to the input of a spectrally selective device is an optical fiber probe containing illuminating optical fibers for delivering exciting radiation to biological tissue and receiving optical fibers for delivering fluorescence radiation from biological tissue to polychromator input.

Сущность изобретения поясняется Фиг. 1.The invention is illustrated in FIG. one.

Использованы следующие обозначения:The following notation is used:

1 - источник света для возбуждения флуоресценции;1 - a light source for exciting fluorescence;

2 - оптическая система для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства;2 - an optical system for transmitting exciting radiation to the object under study and transmitting fluorescence radiation to the input of a spectrally selective device;

3 - биологическая ткань;3 - biological tissue;

4 - спектрально-селективное устройство;4 - spectrally selective device;

5 - матричный фотоприемник;5 - matrix photodetector;

6 - блок буферной памяти;6 - block buffer memory;

7 - компаратор;7 - a comparator;

8 - задатчик опорного сигнала верхнего уровня;8 - master reference signal of the upper level;

9 - компаратор;9 - a comparator;

10 - задатчик опорного сигнала нижнего уровня;10 - setpoint reference signal of the lower level;

11 - блок управления временем накопления;11 - accumulation time control unit;

12 - блок коррекции накопления;12 - block correction accumulation;

13 - аналого-цифровой преобразователь [АЦП);13 - analog-to-digital Converter [ADC);

14 - персональный компьютер.14 - personal computer.

Устройство для спектрально-флуоресцентных исследований содержит источник света для возбуждения флуоресценции 1, излучение которого через оптическую систему 2 облучает биологическую ткань 3. Флуоресцентное излучение фотосенсибилизатора через оптическую систему 2 поступает на вход спектрально-селективного устройства 4, а после спектрально-селективного устройства - на матричный фотоприемник 5. Сигнал с выхода матричного фотоприемника 5 поступает на вход блока 6 буферной памяти, а с блока буферной памяти на сигнальные входы компараторов 7 и 9, опорные входы которых соединены с выходами задатчиков 8 и 10. Выходы компараторов соединены со входами блока управления временем накопления 11. Выходы блока управления временем накопления 11 соединены со входом блока коррекции накопления 12, выход блока коррекции накопления соединен со входом АЦП 13 системы регистрации сигнала фотоприемника, выход АЦП соединен со входом персонального компьютера 14. Предлагаемое устройство работает следующим образом.A device for spectral fluorescence studies contains a light source for exciting fluorescence 1, the radiation of which through the optical system 2 irradiates the biological tissue 3. The fluorescent radiation of the photosensitizer through the optical system 2 is fed to the input of a spectrally selective device 4, and after a spectrally selective device, to a matrix photodetector 5. The signal from the output of the matrix photodetector 5 is fed to the input of the buffer memory unit 6, and from the buffer memory unit to the signal inputs of the comparators 7 and 9, the reference inputs of which are connected to the outputs of the setters 8 and 10. The outputs of the comparators are connected to the inputs of the accumulation time control unit 11. The outputs of the accumulation time control unit 11 are connected to the input of the accumulation correction unit 12, the output of the accumulation correction unit is connected to the ADC input 13 of the signal registration system a photodetector, the ADC output is connected to the input of a personal computer 14. The proposed device operates as follows.

Излучение с выхода источник света 1 через оптическую систему 2 облучает биологическую ткань 3, содержащую флуорохром, и инициирует флуоресценцию его молекул. Интенсивность характеристической полосы флуоресценции флуорохрома, в первом приближении, пропорциональна содержанию флуорохрома в биоткани. Оптическая система 2 передает излучение флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства 4, где происходит спектральное разложение этого излучения, после чего оно попадает на матричный фотоприемник 5. Сигнал с выхода матричного фотоприемника 5 поступает на вход блока 6 буферной памяти, а с блока 6 буферной памяти на сигнальные входы компараторов 7 и 9. На опорный вход компаратора 7 поступает напряжение верхнего уровня сигнала из задатчика 8 опорного сигнала верхнего уровня.The radiation from the output of the light source 1 through the optical system 2 irradiates the biological tissue 3 containing the fluorochrome and initiates the fluorescence of its molecules. To a first approximation, the intensity of the characteristic fluorescence band of fluorochrome is proportional to the content of fluorochrome in biological tissue. The optical system 2 transmits the fluorescence radiation to the input of a spectrally selective device 4, where this radiation is spectrally decomposed, after which it reaches the array photodetector 5. The signal from the output of the array photodetector 5 is fed to the input of the buffer memory unit 6, and from the buffer memory unit 6 the signal inputs of the comparators 7 and 9. The reference input of the comparator 7 receives the voltage of the upper level signal from the master 8 of the reference signal of the upper level.

Если сигнал какой-нибудь из ячеек матричного фотоприемника меньше напряжения опорного сигнала, поступающего на опорный вход компаратора 7 из задатчика 8 опорного сигнала верхнего уровня, или больше напряжения опорного сигнала, поступающего на опорный вход компаратора 9 из задатчика 10 опорного сигнала нижнего уровня, совокупность сигналов, соответствующая спектру флуоресценции, из блока 6 буферной памяти подается на умножитель 12, и далее без изменения на АЦП 13, после чего поступает в цифровом виде на вход ПК 14 для построения и отображения спектра.If the signal of any of the cells of the matrix photodetector is less than the voltage of the reference signal supplied to the reference input of the comparator 7 from the master 8 of the reference signal of the upper level, or more than the voltage of the reference signal supplied to the reference input of the comparator 9 from the host 10 of the reference signal of the lower level, the set of signals corresponding to the fluorescence spectrum from block 6 of the buffer memory is supplied to the multiplier 12, and then without change to the ADC 13, after which it is digitally input to the PC 14 for construction and display with pektra.

Если сигнал от какой-нибудь из ячеек матричного фотоприемника 5 больше напряжения опорного сигнала, поступающего на вход компаратора 7 из задатчика 8 опорного сигнала верхнего уровня, команда из компаратора 7 подается на блок управления временем накопления 11, который подает на матричный фотоприемник 5 команду уменьшения длительности времени накопления. При уменьшенном времени накопления сигнал с выхода матричного фотоприемника 4, уменьшенный пропорционально времени накопления, поступает на вход блока 6 буферной памяти, а с блока буферной памяти - на сигнальные входы компараторов 7 и 9. Если при уменьшенном времени накопления сигнал от любой из ячеек матричного фотоприемника меньше напряжения опорного сигнала, поступающего на вход компаратора 7 из задатчика 8 опорного сигнала верхнего уровня, совокупность сигналов, соответствующая спектру флуоресценции, из блока буферной памяти 6 подается на блок коррекции накопления 12, где изменяется (увеличивается) обратно пропорционально времени накопления, затем поступает на АЦП 13, после чего поступает в цифровом виде на вход ПК 14 для построения и отображения спектра.If the signal from any of the cells of the matrix photodetector 5 is greater than the voltage of the reference signal supplied to the input of the comparator 7 from the master 8 of the reference signal of the upper level, the command from the comparator 7 is sent to the accumulation time control unit 11, which sends a reduction duration command to the photodetector 5 accumulation time. With a reduced accumulation time, the signal from the output of the matrix photodetector 4, reduced in proportion to the accumulation time, is fed to the input of the buffer memory unit 6, and from the buffer memory unit, to the signal inputs of the comparators 7 and 9. If, with a reduced accumulation time, the signal from any of the cells of the matrix photodetector less than the voltage of the reference signal supplied to the input of the comparator 7 from the master 8 of the reference signal of the upper level, the set of signals corresponding to the fluorescence spectrum is supplied from the buffer memory 6 I go to the accumulation correction block 12, where it changes (increases) inversely with the accumulation time, then it goes to the ADC 13, and then it goes digitally to the input of the PC 14 to build and display the spectrum.

Если сигнал от какой-нибудь из ячеек матричного фотоприемника 5 меньше напряжения опорного сигнала, поступающего на вход компаратора 9 из задатчика 10 опорного сигнала нижнего уровня, команда из компаратора 9 подается на блок управления временем накопления 11, который в свою очередь подает на линейку 5 команду увеличения длительности времени накопления. При увеличенном времени накопления сигнал с выхода матричного фотоприемника 5, увеличенный пропорционально времени накопления, поступает на вход блока 6 буферной памяти, а с блока буферной памяти на сигнальные входы компараторов 7 и 9. Если при увеличенном времени накопления сигнал от всех ячеек матричного фотоприемника больше напряжения опорного сигнала, поступающего на вход компаратора 9 из задатчика 10 опорного сигнала нижнего уровня, совокупность сигналов, соответствующая спектру флуоресценции, из блока 6 буферной памяти подается на блок коррекции накопления 12, где уменьшается обратно пропорционально времени накопления, затем поступает на АЦП 13, после чего поступает в цифровом виде на вход ПК 14 для построения и отображения спектра.If the signal from any of the cells of the matrix photodetector 5 is less than the voltage of the reference signal supplied to the input of the comparator 9 from the low-level reference signal setter 10, a command from the comparator 9 is sent to the accumulation time control unit 11, which in turn sends a command to line 5 increase the duration of the accumulation time. When the accumulation time is increased, the signal from the output of the matrix photodetector 5, increased in proportion to the accumulation time, is fed to the input of the buffer memory unit 6, and from the buffer memory unit to the signal inputs of the comparators 7 and 9. If, with the increased accumulation time, the signal from all cells of the matrix photodetector is more than the voltage the reference signal supplied to the input of the comparator 9 from the setter 10 of the reference signal of the lower level, the set of signals corresponding to the fluorescence spectrum from block 6 of the buffer memory is fed to accumulation correction lock 12, where it decreases inversely with the accumulation time, then it is transmitted to the ADC 13, after which it is transmitted digitally to the input of PC 14 for constructing and displaying the spectrum.

В наиболее предпочтительном варианте источник света для возбуждения флуоресценции 1 представляет собой лазер с длиной волны в полосе возбуждения флуорохрома.In a most preferred embodiment, the light source for exciting fluorescence 1 is a laser with a wavelength in the excitation band of fluorochrome.

В наиболее предпочтительном варианте спектрально-селективного устройство представляет собой полихроматор, а на его выходе в качестве матричного фотоприемника установлена ПЗС или КМОП-линейка.In the most preferred embodiment, the spectrally selective device is a polychromator, and a CCD or CMOS array is installed at its output as an array photodetector.

В качестве оптической системы для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства наиболее предпочтительно использовать оптоволоконный зонд, содержащий осветительные световоды для доставки к биоткани возбуждающего излучения и приемные световоды для доставки излучения флуоресценции от биоткани на вход полихроматора.As an optical system for transmitting exciting radiation to the object under study and transmitting fluorescence radiation to the input of a spectrally selective device, it is most preferable to use a fiber probe containing illuminating optical fibers for delivering exciting radiation to biological tissue and receiving optical fibers for delivering fluorescence radiation from biological tissue to the input of the polychromator.

Как показали проведенные авторами исследования, предлагаемое устройство при исследовании фармакокинетики и биораспределения флуоресцирующих фотосенсибилизаторов на основе производных фталоцианинов и бактериохлоринов благодаря расширенному за счет предлагаемого изобретения динамическому диапазону обеспечило возможность точной регистрации интенсивности сигналов флуоресценции органов и тканей экспериментальных животных, отличающихся по интенсивности практически на 4 порядка.As the studies conducted by the authors showed, the proposed device for the study of the pharmacokinetics and biodistribution of fluorescent photosensitizers based on derivatives of phthalocyanines and bacteriochlorins, thanks to the dynamic range expanded due to the invention, made it possible to accurately register the intensity of fluorescence signals of organs and tissues of experimental animals, which differ in intensity by almost 4 orders of magnitude.

Claims (5)

1. Устройство для спектрально-флуоресцентного исследования содержания экзогенных флуорохромов, включающее источник света для возбуждения флуоресценции, спектрально-селективное устройство, оптическую систему для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства, матричный фотоприемник на выходе спектрально-селективного устройства с сигнальным выходом и управляющим входом, систему регистрации сигнала фотоприемника, включающую аналогово-цифровой преобразователь (АЦП) и персональный компьютер (ПК), устройство содержит дополнительно блок буферной памяти, два двухвходовых компаратора, задатчик опорного сигнала верхнего уровня и задатчик опорного сигнала нижнего уровня, блок управления временем накопления, двухвходовой блок коррекции накопления, вход блока буферной памяти соединен с сигнальным выходом матричного фотоприемника, выход блока буферной памяти соединен с сигнальными входами компараторов и сигнальным входом блока коррекции накопления, задатчик опорного сигнала верхнего уровня соединен с опорным входом первого компаратора, задатчик опорного сигнала нижнего уровня соединен с опорным входом второго компаратора, выходы компараторов соединены со входом блока управления временем накопления, выход блока управления временем накопления соединен с управляющим входом матричного фотоприемника и управляющим входом блока коррекции накопления, выход блока коррекции накопления соединен со входом АЦП системы регистрации сигнала фотоприемника.1. A device for spectral-fluorescence studies of the content of exogenous fluorochromes, including a light source for exciting fluorescence, a spectrally selective device, an optical system for transmitting exciting radiation to the object under study and transmitting fluorescence radiation to the input of the spectrally selective device, an array photodetector at the output of the spectral selective device with a signal output and a control input, a system for recording a photodetector signal, including an analog-digital pre an educator (ADC) and a personal computer (PC), the device further comprises a buffer memory unit, two two-input comparators, a high-level reference signal adjuster and a low-level reference signal adjuster, an accumulation time control unit, a two-input accumulation correction unit, the input of the buffer memory unit is connected to the signal output of the matrix photodetector, the output of the buffer memory unit is connected to the signal inputs of the comparators and the signal input of the accumulation correction unit, the reference signal adjuster of the upper the level is connected to the reference input of the first comparator, the reference signal setter of the lower level is connected to the reference input of the second comparator, the outputs of the comparators are connected to the input of the accumulation time control unit, the output of the accumulation time control unit is connected to the control input of the matrix photodetector and the control input of the accumulation correction unit, block output accumulation correction is connected to the ADC input of the photodetector signal registration system. 2. Устройство по п. 1, отличающееся тем, что источник света для возбуждения флуоресценции флуорохрома представляет собой лазер с длиной волны в полосе возбуждения флуорохрома.2. The device according to claim 1, characterized in that the light source for exciting fluorochrome fluorescence is a laser with a wavelength in the fluorochrome band. 3. Устройство по п. 1, отличающееся тем, что матричный фотоприемник представляет собой ПЗС- или КМОП-линейку.3. The device according to claim 1, characterized in that the matrix photodetector is a CCD or CMOS array. 4. Устройство по п. 1, отличающееся тем, что спектрально-селективное устройство представляет собой полихроматор.4. The device according to claim 1, characterized in that the spectrally selective device is a polychromator. 5. Устройство по п. 1, отличающееся тем, что оптическая система для передачи возбуждающего излучения на изучаемый объект и передачи излучения флуоресценции на вход спектрально-селективного устройства представляет собой оптоволоконный зонд, содержащий осветительные световоды для доставки к биоткани возбуждающего излучения и приемные световоды для доставки излучения флуоресценции от биоткани на вход полихроматора.5. The device according to claim 1, characterized in that the optical system for transmitting exciting radiation to the object under study and transmitting fluorescence radiation to the input of a spectrally selective device is an optical fiber probe containing illuminating optical fibers for delivering exciting radiation to biological tissue and receiving optical fibers for delivery radiation of fluorescence from biological tissue to the input of a polychromator.
RU2018102958A 2018-01-25 2018-01-25 Device for spectral-fluorescence investigation of fluorochrome content RU2665628C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018102958A RU2665628C1 (en) 2018-01-25 2018-01-25 Device for spectral-fluorescence investigation of fluorochrome content

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018102958A RU2665628C1 (en) 2018-01-25 2018-01-25 Device for spectral-fluorescence investigation of fluorochrome content

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2665628C1 true RU2665628C1 (en) 2018-09-03

Family

ID=63459812

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018102958A RU2665628C1 (en) 2018-01-25 2018-01-25 Device for spectral-fluorescence investigation of fluorochrome content

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2665628C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2777486C1 (en) * 2021-06-24 2022-08-04 Общество с ограниченной ответственностью "БИОСПЕК" Device for photodynamic therapy with the possibility of simultaneous spectral-fluorescent control of photobleaching of a photosensitizer

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060275775A1 (en) * 1998-05-14 2006-12-07 The General Hospital Corporation Intramolecularly-quenched near infrared fluorescent probes
EP2098157A1 (en) * 2006-12-28 2009-09-09 Olympus Corporation Fluorescent endoscope system
CA2402352C (en) * 2000-03-03 2012-08-28 Phanos Technologies, Inc. Fluorescent membrane intercalating probes and methods for their use
US9332942B2 (en) * 2008-01-28 2016-05-10 The General Hospital Corporation Systems, processes and computer-accessible medium for providing hybrid flourescence and optical coherence tomography imaging
RU2596723C2 (en) * 2013-08-28 2016-09-10 Джонсон Энд Джонсон Вижн Кэа, Инк. Ophthalmic lens and system for fluorescence analysis of fluid medium of eye

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060275775A1 (en) * 1998-05-14 2006-12-07 The General Hospital Corporation Intramolecularly-quenched near infrared fluorescent probes
CA2402352C (en) * 2000-03-03 2012-08-28 Phanos Technologies, Inc. Fluorescent membrane intercalating probes and methods for their use
EP2098157A1 (en) * 2006-12-28 2009-09-09 Olympus Corporation Fluorescent endoscope system
US9332942B2 (en) * 2008-01-28 2016-05-10 The General Hospital Corporation Systems, processes and computer-accessible medium for providing hybrid flourescence and optical coherence tomography imaging
RU2596723C2 (en) * 2013-08-28 2016-09-10 Джонсон Энд Джонсон Вижн Кэа, Инк. Ophthalmic lens and system for fluorescence analysis of fluid medium of eye

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2777486C1 (en) * 2021-06-24 2022-08-04 Общество с ограниченной ответственностью "БИОСПЕК" Device for photodynamic therapy with the possibility of simultaneous spectral-fluorescent control of photobleaching of a photosensitizer

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Buttafava et al. A compact two-wavelength time-domain NIRS system based on SiPM and pulsed diode lasers
Fang et al. Time-domain laser-induced fluorescence spectroscopy apparatus for clinical diagnostics
Siegel et al. Studying biological tissue with fluorescence lifetime imaging: microscopy, endoscopy, and complex decay profiles
Kandurova et al. Fiber-optic system for intraoperative study of abdominal organs during minimally invasive surgical interventions
Chitnis et al. Towards a wearable near infrared spectroscopic probe for monitoring concentrations of multiple chromophores in biological tissue in vivo
Althobaiti et al. Recent developments in instrumentation of functional near-infrared spectroscopy systems
US20170290515A1 (en) Tissue classification method using time-resolved fluorescence spectroscopy and combination of monopolar and bipolar cortical and subcortical stimulator with time-resolved fluorescence spectroscopy
Shao et al. Photoacoustic lifetime imaging for direct in vivo tissue oxygen monitoring
Meier et al. Time-resolved laser-induced fluorescence spectroscopy as a diagnostic instrument in head and neck carcinoma
Pera et al. Diffuse fluorescence fiber probe for in vivo detection of circulating cells
Šćepanović et al. A multimodal spectroscopy system for real-time disease diagnosis
Belau et al. Noninvasive observation of skeletal muscle contraction using near-infrared time-resolved reflectance and diffusing-wave spectroscopy
Mizeret et al. Instrumentation for real-time fluorescence lifetime imaging in endoscopy
Liu et al. Experimental validation of an inverse fluorescence Monte Carlo model to extract concentrations of metabolically relevant fluorophores from turbid phantoms and a murine tumor model
Serafino et al. Direct frequency domain fluorescence lifetime imaging using field programmable gate arrays for real time processing
Schulmerich et al. Optical clearing in transcutaneous Raman spectroscopy of murine cortical bone tissue
US7386335B2 (en) Body activity measurement device
RU2665628C1 (en) Device for spectral-fluorescence investigation of fluorochrome content
Becker Introduction to Multi-dimensional TCSPC
Davies et al. Photobiomodulation reduces hippocampal apoptotic cell death and produces a Raman spectroscopic “signature”
Hwang et al. Improved excitation light rejection enhances small-animal fluorescent optical imaging
Swartling et al. Dynamic time-resolved diffuse spectroscopy based on supercontinuum light pulses
Munro et al. Multi-modality optical neural imaging using coherence control of VCSELs
Zhang et al. Simultaneous recording of neuronal and vascular activity in the rodent brain using fiber-photometry
Lange et al. The use of supercontinuum laser sources in biomedical diffuse optics: unlocking the power of multispectral imaging