RU2655303C2 - Средство и способ для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте - Google Patents
Средство и способ для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2655303C2 RU2655303C2 RU2016126667A RU2016126667A RU2655303C2 RU 2655303 C2 RU2655303 C2 RU 2655303C2 RU 2016126667 A RU2016126667 A RU 2016126667A RU 2016126667 A RU2016126667 A RU 2016126667A RU 2655303 C2 RU2655303 C2 RU 2655303C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- doped
- contrast
- tumor
- magnetite
- tumors
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 201000011614 malignant glioma Diseases 0.000 title claims abstract description 19
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 125
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 claims description 89
- LGMLJQFQKXPRGA-VPVMAENOSA-K gadopentetate dimeglumine Chemical compound [Gd+3].CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O LGMLJQFQKXPRGA-VPVMAENOSA-K 0.000 claims description 50
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 43
- SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N iron(II,III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]O[Fe]=O SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 19
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000002159 nanocrystal Substances 0.000 claims description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 7
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 5
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 2
- 229910001566 austenite Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910001429 cobalt ion Inorganic materials 0.000 claims 1
- XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N cobalt(2+) Chemical compound [Co+2] XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 abstract description 66
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 abstract description 61
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 35
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 abstract description 26
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 35
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 31
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 27
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 25
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 24
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 22
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 18
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 15
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 14
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 14
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 12
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 10
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 9
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 9
- 239000002122 magnetic nanoparticle Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 230000000982 vasogenic effect Effects 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 6
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 5
- 230000005415 magnetization Effects 0.000 description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 4
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 3
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 3
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 2
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 2
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 208000029824 high grade glioma Diseases 0.000 description 2
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- -1 with stirring Substances 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010051602 Laziness Diseases 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- 241000255969 Pieris brassicae Species 0.000 description 1
- 102100021947 Survival motor neuron protein Human genes 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010064390 Tumour invasion Diseases 0.000 description 1
- ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N [9-(dimethylamino)-10-methylbenzo[a]phenoxazin-5-ylidene]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC(=[NH2+])C3=CC=CC=C3C2=NC2=C1C=C(N(C)C)C(C)=C2 ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 150000001868 cobalt Chemical class 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 229940039231 contrast media Drugs 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N iron oxide Inorganic materials [Fe]=O UQSXHKLRYXJYBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000020281 long black Nutrition 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 1
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
- 229910000859 α-Fe Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
- A61B5/05—Detecting, measuring or recording for diagnosis by means of electric currents or magnetic fields; Measuring using microwaves or radio waves
- A61B5/055—Detecting, measuring or recording for diagnosis by means of electric currents or magnetic fields; Measuring using microwaves or radio waves involving electronic [EMR] or nuclear [NMR] magnetic resonance, e.g. magnetic resonance imaging
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
- B82B3/00—Manufacture or treatment of nanostructures by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Surgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- High Energy & Nuclear Physics (AREA)
- Manufacturing & Machinery (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к экспериментальной медицине и раскрывает способ получения допированного ионами кобальта декстранферрита, а также способ раннего обнаружения сосудов, питающих опухоль. Указанные способы позволяют избирательно увеличивать число пикселей для ранней контрастной МРТ визуализации взвешенных 3D контрастных МРТ изображений путем понижения сигнала протонов нормальных тканей до гипоинтенсивного и повышения сигнала протонов опухолевых глиальных тканей с питающими их сосудами до гиперинтенсивного через 3-4 дня после прививки, что на 3-4 дня раньше известных способов выявления глиальных опухолей, и могут быть использованы для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического (МРТ) выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 16 ил., 4 табл., 5 пр.
Description
Область техники
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается получения средства и способа для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического (МРТ) выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте.
Уровень техники
Известны комбинации контрастных МРТ нанопрепаратов: аскорбатферрит-магневист (АФ-МВ), цитратферрит-магневист (ЦФ-МВ) и способ обнаружения сосудов, питающих опухоль [патент РФ №2382596, опубликовано 27.02.2010, кл. А61В 5/055, A61K 49/06]. На 6-14 день после прививки аденокарциномы молочной железы Са755, последовательно вводят в хвостовую вену комбинации: АФ-МВ или ЦФ-МВ. Контрастные МРТ изображения сосудов, питающих капсулу и опухоль аденокарциномы молочной железы Са755, визуализируют через 3,0-30,0 час после введения АФ-МВ или ЦФ-МВ [Брусенцов Н.А., Пирогов Ю.А., Брусенцова Т.Н., Учеваткин А.А., Никитин П.И., Никитин М.П. и др. Выявление сосудов, питающих опухоль. Российский биотерапевтический журнал, 9(4), с. 6, 2010].
Недостатки способа обнаружения сосудов, питающих опухоль:
- неустойчивость золей АФ и СФ в полиглюкине;
- окисление Fe2+ до Fe3+, которое приводит к уменьшению удельной намагниченности (Ms) магнитных наночастиц (МН) АФ-МВ и ЦФ-МВ, изменению их физико-химических свойств, с утратой визуализации сосудов, питающие опухоль, при КМРТ сканировании молочной железы на 3-5 день после прививки аденокарциномы Са755;
Прототипом способа синтеза МРТ контрастного средства для выявления глиальных опухолей с питающими их сосудами является способ синтеза декстранферрита [Гуляев М.В., Пирогов Ю.А., Брусенцова Т.Н., Брусенцов Н.А. Синтез декстранферрита и раннее магнитно-резонансное томографическое выявление опухоли, капсулы и сосудов, питающих опухоль, в эксперименте in vivo. Сборник тезисов докладов участников Второго международного форума по нанотехнологиям 6-8 октября 2009. Нанотехнологии в медицине. Онкология и кардиология, с. 9-11].
К недостаткам способа синтеза декстранферрита относят:
- неустойчивость золей магнетита, которые спонтанно окисляются и агрегируют в водной среде;
- окисление Fe2+ до Fe3+ в нанокристаллах магнетита, которое приводит к уменьшению удельной намагниченности (Ms) и изменению физико-химических свойств;
- неустойчивость золей декстранферрита в полиглюкине, которая приводит к образованию микротромбов в крови.
Прототипом способа раннего контрастного МРТ выявления злокачественных глиальных опухолей является метод контрастного МРТ сканирования мозга на 7-14 день после прививки с внутривенным (ВВ) введением комбинации декстран магнетит-магневист (ДМ-МВ) крысам, с получением магнитно-резонансных T1, Т2 и Т2* взвешенных контрастных МРТ изображений глиальных опухолей [М.В. Гуляев, Н.В. Анисимов, Г.М. Юсубалиева, Н.А. Брусенцов, А.А. Самойленко, Ю.А. Пирогов. Применение методов ЯМР в исследованиях глиальных опухолей у лабораторных животных. Технологии живых систем, 10(1), с. 35-40 (2013)].
К недостаткам данного способа выявления злокачественных глиальных опухолей относят позднюю визуализацию контрастных МРТ изображений злокачественных глиом, которая происходит лишь на 7-14 день после прививки.
Ранняя визуализация контрастных МРТ изображений злокачественных глиом с питающими их сосудами, после ВВ или интраперитонеального (ИП) введения комбинации ДМ-МВ на 3-5 день после прививки не происходит.
Магнитные наночастицы ДМ в полиглюкине неустойчивы при хранении в виде золей, они быстро слипаются и выпадают в осадок. Кроме того, в составе ДМ содержатся ионы Fe2+, которые окисляются кислородом воздуха. При окислении Fe2+ до Fe3+ уменьшается намагниченность МН ДМ и изменяются физико-химические свойства.
Раскрытие изобретения
Задачей изобретения является создание средства и способа для раннего (на 3-4 день после прививки) контрастного МРТ выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами.
Техническим результатом является избирательно увеличивающее число вокселей для ранней контрастной МРТ визуализации взвешенных 3D контрастных МРТ изображений путем понижения сигнала протонов нормальных тканей до гипоинтенсивного и повышения сигнала протонов опухолевых глиальных тканей с питающими их сосудами до гиперинтенсивного через 3-4 дня после прививки, что на 3-4 дня раньше известных способов выявления глиальных опухолей.
Технический результат достигается за счет средства способа. Средство получают следующим способом: смесь Fe(OH)2, Fe(OH)3 и Со(ОН)2 при следующем соотношении компонентов: 1,1÷1,3:1,7÷1,9:0,1, нагревают при рН 11-12 в отсутствии кислорода при перемешивании; полученные нанокристаллы нестехиометрического магнетита общей формулы (1)
высаживают в неоднородном постоянном магнитном поле, полученную суспензию активируют концентрированной хлористоводородной кислотой до получения прозрачного светло-желтого раствора, далее полученные нанокристаллы обрабатывают декстраном до образования устойчивого в течении 15-30 минут золя в магнитном поле при 0,2-3,0 Тл, градиент 0,003 Тл/см - 0,04 Тл/см и получают допированный Со2+ декстранферрит общей формулы (2): .
Активацию концентрированной хлористоводородной кислотой проводят при рН 1,2-1,4.
Высаживание в неоднородном постоянном магнитном поле проводят при 0,2-3,0 Тл, градиент 0,003 Тл/см - 0,04 Тл/см.
Способ раннего обнаружения сосудов, питающих опухоль, включающий контрастное МРТ сканирование головного мозга, осуществляют следующим образом: за 10 мин - 48 ч до контрастного МРТ сканирования головного мозга, внутривенно или внутриартериально вводят 2-5% водный раствор допированного Со2+ декстранферрита общей формулы (2):
взятого из расчета 0,1-0,2 мл на 100 грамм веса, а за 3-6 мин до начала сканирования внутривенно вводят магневист из расчета 0,1-0,2 мл/кг и затем осуществляют визуализацию T1, Т2 и Т2* взвешенных 3D изображений злокачественных глиальных опухолей.
Осуществление изобретения
Способ получения допированного ионами кобальта (Со2+) декстранферрита (ДФСо2+) включает нагрев смеси Fe(OH)2, Fe(OH)3 и Со(ОН)2 при следующем соотношении компонентов: 1,1-1,3:1,7-1,9:0,1, с допустимой величиной погрешности, при рН 11-12 в отсутствии кислорода при перемешивании получают нанокристаллы нестехиометрического магнетита общей формулы (1)
полученные нанокристаллы высаживают в неоднородном постоянном магнитном поле. Полученную суспензию активируют концентрированной хлористоводородной кислотой до получения прозрачного светло-желтого раствора, далее полученные нанокристаллы обрабатывают декстраном до образования устойчивого в течении 15-30 минут золя в магнитном поле при 0,2-3,0 Тл, градиент 0,003 Тл/см - 0,04 Тл/см и получают дотированный Со2+ декстранферрит общей формулы (2)
где r - общее число магнитных кластеров допированного Со2+ нестехиометрического магнетита (зависит от объема и концентрации реакционной смеси);
m - количество активированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%;
r-m - количество неактивированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 95 до 65%
f - число остатков глюкозы в молекуле декстрана, имеющих прямые химические связи с молекулами допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%;
общее число остатков молекул глюкозы в молекуле декстрана 432;
q-f - число остатков глюкозы, неимеющих химические связи с молекулами допированного Со2+ магнетита от 95 до 65%
Заявляемое средство (ЗС) получают следующим образом
Водную суспензию смеси гидроксидов 1,2Fe(OH)2+1,8Fe(OH)3 (моль) перемешивают при рН 11-12, нагревают при 80°С и перемешивают до прекращения роста нанокристаллов вследствие понижения концентрации ионов железа, затем добавляют Со(ОН)2 и перемешивают 40 мин при 80-90°С. Получают водную суспензию черного цвета.
Далее суспензию очищают от исходных веществ в неоднородном постоянном магнитном поле (НПМП) индукцией 0,2 Тл, градиент 0,003 Тл/см. Получают допированный кобальтом нестехиометрический магнетит состава Fe2+ 1,2 Fe3+ 1,8O4 Co2+ 0,1O общей формулы:
который представляет собой нанокристаллы диаметром от 7 до 11 нм. Нанокристаллы активируют концентрированной хлористоводородной кислотой и обрабатывают декстраном.
Получают декстранферрит, допированный Со2+ (ДФСо2+), общей формулы (2):
где r - общее число магнитных кластеров допированного Со2+ нестехиометрического магнетита (зависит от объема и концентрации реакционной смеси); m - количество активированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%;
r-m - количество неактивированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 95 до 65%
f - число остатков глюкозы в молекуле декстрана, имеющих прямые химические связи с молекулами допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%;
q-f - число остатков глюкозы, не имеющих химические связи с молекулами допированного Со2+ магнетита от 95 до 65%.
Оно представляет собой кристаллическое вещество от темно-коричневого до черного цвета.
Далее лиофилизацией получают порошок, который в воде образует устойчивые коллоидные растворы.
ζ - потенциал наночастиц до покрытия декстраном соответствовал - 18 мВ, Т2 релаксивность (Relaxivity) 456 с-1млМ-1.
После покрытия ζ-потенциал наночастиц - 36 мВ. Релаксивность, отражающая способность контрастного МРТ препарата изменять времена протонной ядерной магнитной релаксации в зависимости от концентрации магнитных центров, понижалась после покрытия нанокристаллов декстраном до 410 с-1млМ-1.
В процессе физико-химического изучения ДФСо2+ определили два основных фактора, которые определяют усиление сигнала магнитного резонанса протонов воды в магнитном поле в присутствии контрастного препарата, ДФСо2+:
- ядро наночастицы из нестехиометрического магнетита (размер ядра и его химический состав);
- покрытие ядра наночастицы (толщина слоя и химический состав), которые могут повышать или понижать Т2 релаксивность за счет изменения интенсивности диффузии молекул воды в неоднородном магнитном поле, создаваемом МН.
Декстрановое покрытие понижает интенсивность диффузии молекул воды в неоднородном магнитном поле, создаваемом МН ДФСо2+.
Удельную намагниченность насыщения (Ms) ДФСо2+ 7,8 кА/м увеличивают введением в структуру ядра ионов Со2+, содержащих атомы с неспаренными электронами, удельная абсорбция энергии ((SAR) 280 Вт/г Fe).
Острая токсичность при внутривенном введении:
ЛД50 мышей C57B1/6j 1,03 г/кг; ЛД50 крыс Вистар 1,75 г/кг.
Декстранферрит допированный Со2+ образует устойчивые в течение 1 месяца водные золи, которые используют в качестве магнитных носителей для биомедицинских целей.
К настоящему времени решены многие технологические проблемы, связанные с технологией получения суперпарамагнитных наночастиц (СМН) [1-3]. Однако, до сих пор, не опубликована методика получения устойчивых водных золей суперпарамагнитных наночастиц нестехиометрического магнетита допированных ионами Со2+, покрытых декстраном.
Магнитные наночастицы ДФСо2+, успешно используемые in vivo, состоят из нестехиометрического магнетита (Fe3O4Co2+O), нестехиометрического магнетита (γ-Fe2O3 Со2+О) и применяются с учетом их магнитных свойств, низкой токсичности и известным путям метаболизма [1-4].
В основном СМН используются в биомедицинских исследованиях на культурах клеток и на линейных экспериментальных животных. Гидродинамический диаметр наночастиц от 30 до 700 нм. Полученный фильтрат декстранферрита, допированного ионами Со2+ (ДФСо2+), концентрируют на роторном испарителе. Получают 10% водный золь, рН 7,2, стерилизуют при температуре +100°С 1 час, разливают по 10 мл в стеклянные флаконы и используют по назначению или лиофилизируют.
Заявляемый способ осуществляют следующим образом:
- для анестезии крысам вводят интраперитонеально 0,01 г/кг «Zoletil 100», (фирмы Virbac);
- перед прививкой глиальных опухолей проводят предварительное контрастное МРТ сканирование головного мозга 4 нормальных крыс;
- находят участки мозга, в которые планируют имплантировать опухолевые клетки;
- определяют переносимые млекопитающими дозы МН ДФ и МН ЗС, достаточные для визуализации КМРТ изображений тканей мозга высокого разрешения и контраста;
- 2 крысам вводят ВВ от 0,1 до 1,0 мл/кг 5% золь МН декстранферрита в полиглюкине в комбинации с магневистом (МВ) (ДФ-МВ), другим 2 крысам вводят ВВ от 0,1 до 1,0 мл/кг 5% водный золь МН заявляемого средства в комбинации с магневистом (ЗС-МВ), от 0,1 до 0,2 мл/кг. Контрастным МРТ сканированием мозга визуализируют КМРТ изображения (КМРТИ), фиг. 1 (а, b);
- сравнивают информативность и качество КМРТ изображений нормального головного мозга, полученных с помощью ДФ-МВ и ЗС-МВ до прививки опухолей.
Внутрисосудистым введением ЗС-МВ визуализируют более информативные КМРТИ высокого разрешения и контраста, фиг. 1 (b).
Для разработки способа раннего, контрастного МРТ выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами отбирают 80 половозрелых самок крыс Вистар весом 180-200 г разводки вивария ФГБНУ "РОНЦ им Н.Н. Блохина", делят их на 2 партии 1 и 2, по 40 особей в каждой. Стереотаксически, в стерильных условиях 40 самкам крыс 1 партии имплантируют интрацеребрально на глубину 3 мм суспензию 106 жизнеспособных клеток глиобластомы 101/8 в 0,015 мл питательной среды 199 при рН 7,4.
Глиому С6 имплантируют 40 самкам крыс 2 партии и изучают развитие опухолей аналогично глиоболастоме 101/8.
Из 40 крыс Вистар с опухолями глиобластомы 101/8 выбирают 25 крыс, делят на 4 группы: 1, 2, 3, 4. В 1 контрольной группе - 10 крыс, в опытных группах - по 5 крыс.
Из 40 крыс Вистар с опухолями глиомы С6 выбирают 25 крыс, делят на 4 группы: 1', 2', 3', 4'. В 1' контрольной группе - 10 крыс, в опытных группах - по 5 крыс.
Через 72 час после прививки опухолей 10 крысам 1 и 10 крысам 1' контрольных групп до проведения раннего контрастного МРТ сканирования в период от 6 мин до 30 час внутривенно вводят 0,9% раствор NaCl от 0,1 до 1,0 мл/кг, проводят МРТ сканирование мозга. Мозг сканируют in vivo на биоспектротомографе (Bruker) в режимах получения Ti взвешенных {500/15 (время повторения, мс/время эхо, мс), Т2 взвешенных (1900/80) спин-эхо и Т2-взвешенных градиент-эхо (500/15)} изображений, Т2* взвешенных {500/15 [время повторения, мс/время эхо, мс]. МРТ изображения ранних форм глиальных опухолей не визуализируются, см. фиг. 2 (а', b'). Однако через 7-14 дней в местах прививки визуализируются МРТИ распространенных форм глиальных опухолей - фиг. 3 (а', b', с') и фиг. 4. В процессе МРТ сканирования мозга осуществляют мониторинг частоты сердечных сокращений и ритма дыхания крыс с помощью Model 1025 smol Animal Monitoring and Gating System (Operation Mammal SA Instruments, Inc.).
В опытных группах 2, 2'; 3, 3'; и 4, 4' за такой же период времени перед ранним контрастным МРТ сканированием внутривенно вводят:
- крысам 2, 2' групп от 0,1 до 0,2 мл/кг магневист;
- крысам 3, 3' групп от 0,1 до 2,0 мл/кг комбинации 5% золя декстранферрита в полиглюкине, магневист (МВ), (ДФ-МВ);
- крысам 4, 4' групп от 0,1 до 2,0 мл/кг комбинации 5% водного золя заявляемого средства и от 0,1 до 0,2 мл/кг - магневист, см. табл. 1.
Контрастные магнитно-резонансные томографические изображения (КМРТИ) глиальных опухолей визуализируют на 3-5 день после прививки опухоли внутрисосудистым введением комбинации заявленного средства с магневистом, фигуры: 5 (b'); 6 (b'); 7 (b); 8 (b); 9 (а', b', с', d'); 10 (a', b', с', d'); 11 (а, b, с); 12 (а', b', с'); 13 (а, b, с, d); 14 (a', b', с') и 15.
Через 60-168 час после прививки злокачественных глиальных опухолей, через 1-24 час после внутрисосудистого введения заявляемого средства в комбинации с МВ, мозг 50 самок крыс Вистар сканируют с визуализацией КМРТ изображений злокачественных глиальных опухолей, с питающими их сосудами. Визуализируют МРТ и КМРТ изображения мозга крыс с привитыми опухолями, которые точнее отражают изменения, тканей мозга, вызванные опухолевой малигнизацией, чем комбинации ДФ-МВ, фигуры 5 (b'), 6 (b'), 7 (b), 8 (b). Визуализируют МРТИ ранних, а также распространенных форм глиальных опухолей с питающими их сосудами 9 (а', b', с', d'); 10 (а', b', с', d'); 11 (a, b, с); 12 (а', b', с'); 13 (а, b, c, d); 14 (а', b', с'), 15.
Визуализируют КМРТ изображения ранних форм опухолей глиомы С6, фиг. 5 (а', b') и фиг. 6 (а', b') и глиобластомы 101/8, фиг. 7 (а, b) и фиг. 8 (а, b).
По результатам сравнения КМРТ изображений определяют, что ВВ введение магневиста или комбинации ДФ-МВ приводит к изображениям низкого контраста и разрешения, фигуры: 5 (а'); 6 (а'); 7 (а); 8 (а). ВВ введение комбинации ЗС-МВ приводит к МРТ изображениям высокого разрешения и контраста, фигуры: 5 (b'); 6 (b'); 7 (b); 8 (b).
Таким образом, внутрисосудистое введение комбинации ЗС-МВ визуализирует КМРТИ глиальных опухолей более высокого разрешения и контраста.
Оптимальные количества заявленного средства, визуализирующие КМРТ изображения: от 0,1 до 1,0 мл/кг в виде водного 5% золя заявляемого средства, в комбинации с 0,2 мл/кг магневиста определяют по таблицам 1-4.
Таблица 2. Зависимость контраста, разрешения и яркости КМРТ изображений ранних форм опухолей глиобластомы 101/8 от времени, прошедшего после прививки и количества введенного заявляемого средства в комбинации с магневистом.
КМРТ изображения злокачественных глиальных опухолей, с питающими их сосудами, визуализируют у 12 крыс через 72-96 час после прививки опухолей, путем внутрисосудистого введения от 1,0 до 2,0 мл/кг 5% водного золя заявляемого средства и 0,2 мл/кг магневиста за 3-6 мин до КМРТ сканирования мозга крыс.
Таблица 3. Зависимость контраста, разрешения и яркости контрастных МРТ изображений ранних опухолей глиомы С6 от количества введенного заявляемого средства и магневиста.
КМРТ изображения злокачественных глиальных опухолей, с питающими их сосудами, визуализируют у 9 крыс с привитыми опухолями через 1-24 час после внутрисосудистого введения заявляемого средства и за 3-10 мин до КМРТ сканирования опухоли путем введения магневиста от 0,1 до 0,2 мл/кг.
Таблица 4. Зависимость контраста, разрешения и яркости МРТ изображений опухолей от времени, прошедшего после введения 1,0 мл/кг водного золя 5% заявляемого средства в комбинации с 0,2 мл/кг магневиста.
КМРТ изображения злокачественных глиальных опухолей, с питающими их сосудами, визуализируют у 9 крыс с привитыми опухолями через 1-24 час после внутрисосудистого введения заявляемого средства и за 5 мин до КМРТ сканирования опухоли вводят магневист от 0,1 до 0,2 мл/кг.
Раннее контрастное МРТ сканирование проводят на 3-5 день после прививки опухолей с получением T1 взвешенных изображений (ВИ) 600/15 (время повторения / время эха, GRE), Т2 взвешенных 1,900/80 спиновое эхо, Т2 взвешенных градиентное эхо (GRE) 600/15 и Т2* взвешенных 500/15 контрастных МРТ изображений.
С увеличением плотности опухолевых клеток в мозге на 7-14 день после прививки глиома С6 и глиобластома 101/8 хорошо визуализируются на Т2 взвешенных изображениях, благодаря разнице во временах поперечной релаксации Т2 по сравнению с белым веществом мозга. Различия в протонной плотности (PD) и времени продольной релаксации T1 для глиальных опухолей и здоровых тканей на 7-14 лень после прививки менее выражены. Это четко проявляется на параметрических картах, построенных по изображениям, полученным методом спинового эха при варьировании параметров TR и ТЕ в пределах - 0,95-5,0 мс и 13-170 мс, соответственно.
На 3-5 день после прививки опухолей из-за низкой плотности опухолевых клеток в мозге не удается визуализировать МРТИ глиомы С6 и глиобластомы 101/8. Для их визуализации в хвостовую вену крыс вводят 1,0 мл/кг 5% золь декстранферрита в полиглюкине, измеряют интенсивность сигнала и проводят визуальный анализ изображений.
Определяют:
- для глиобластомы 101/8 отсутствие МРТ визуализации ранних форм опухолей с питающими их сосудами;
- для глиомы С6 отсутствие МРТ визуализации ранних форм опухолей с питающими их сосудами.
Внутрисосудистым ведением комбинации заявляемого средства с магневистом визуализируют:
- на 3-5 день после прививки опухолей КМРТИ ранних форм опухолей, фигуры: 9 (а', b'); 10 (а', b') и ранних форм опухолей с питающими их сосудами, 11 (а); 12 (а'); 13 (а); 14 (а', b', с');
- на 7-14 день после прививки опухолей - КМРТИ распространенных форм глиальных опухолей, 9 (с', d'); 10 (с', d');
- распространенных форм глиальных опухолей с питающими их сосудами, 11 (b, с); 12 (b', с'); 13 (b, с, d); 15.
Кроме того, КМРТ изображения опухолей, полученные в результате внутрисосудистого введения комбинации ЗС-МВ, точнее отражают изменения, тканей мозга, вызванные опухолевой малигнизацией, чем комбинации ДФ-МВ, фигуры 5 (b'), 6 (b'), 7 (b), 8 (b).
В опытах in vivo до 10 часов сохраняется высокое разрешение КМРТ изображений опухолей с питающими их сосудами. Информативность КМРТИ, после введения комбинации ЗС-МВ, выше информативности КМРТИ, которые визуализируют крысам ДФ-МВ.
Введением комбинации ЗС-МВ в сонную артерию на 3-5 день после прививки визуализируют контрастные МРТ изображения ранних форм опухолей глиобластомы 101/8 и глиомы С6 с питающими их сосудами, фигуры: 11 (а); 12 (а'); 13 (а).
Введением комбинации ЗС-МВ в сонную артерию на 7-14 день после прививки визуализируют контрастные МРТ изображения распространенных форм глиобластомы 101/8 и глиомы С6 с питающими их сосудами, фигуры: 11 (b, с); 12 (b', с'); 13 (b, с, d).
Внутривенным введением комбинации ЗС-МВ через 72 час после прививки визуализируют контрастные МРТ изображения ранних форм опухолей глиомы С6 с питающими их сосудами, фиг. 14 (а', b', с').
Внутривенное введение комбинации ЗС-МВ через 168 час после прививки визуализирует контрастные МРТ изображения распространенной формы глиомы С6 с питающими сосудами, фиг. 15.
Все упомянутые КМРТИ визуализируют при ослаблении сигналов протонов нормальных тканей заявляемым средством и при усилении сигналов протонов опухолевых тканей магневистом.
Визуализируют контрастные МРТ изображения высокого разрешения, контраста и яркости, фигуры: 5 (а', b'), 6 (а', b'), 7 (а, b), 8 (а, b); 9 (а', b', с', d'); 10 (а', b', с', d'); 11 (а, b, с); 12 (а', b', с'); 13 (а, b, с, d); 14 (а', b', с') и 15.
Зависимость разрешения, контраста и яркости, контрастных МРТ изображений ранних форм опухолей от времени, прошедшего после введения комбинации 1,0 мл/кг водного 5% золя заявляемого средства, и оптимальное время визуализации контрастных МРТ изображений высокого разрешения для ранних форм злокачественных глиальных опухолей от 30 минут до 30 часов после ВВ введения заявляемого средства определяют на крысах, табл. 2-4.
Полученные результаты обрабатывают статистически. За достоверные принимают различия при ρ<0,05 [О.Ю. Реброва. Статистический анализ медицинских данных. Медиа Сфера, Москва (2002)].
Заявляемый способ иллюстрируется: примерами 1-5 и таблицами 1-4.
Пример 1. Приготовление растворов солей и синтез декстранферрита, допированного Со2+, проводят в дистиллированной, свежепрокипяченной воде в атмосфере азота. Готовят раствор смеси 1,2FeCl2 6Н2О и 1,8FeCl3 7H2O в 250 мл воды, фильтруют через стеклянный фильтр, получают фильтрат №1.
Растворяют 0,1CoCl2⋅6Н2О в 50 мл воды и фильтруют через стеклянный фильтр, получают фильтрат №2.
К фильтрату №1 прибавляют рассчитанное количество 25% раствора гидроксида аммония, перемешивают при рН 10-11 30 мин с контролем образовавшихся кристаллов, при перемешивании прибавляют фильтрат №2, перемешивают, при перемешивании прибавляют 20% водный раствора гидроксида натрия до рН 11-12 и перемешивают до полного превращения соли кобальта в гидроксид Со(ОН)2:
Водную суспензию смеси полученных гидроксидов нагревают 40 мин при 80-90°С. Получают допированный кобальтом нестехиометрический магнетит состава:
который представляет собой нанокристаллы диаметром от 7 до 11 нм. Размеры нанокристаллов определяют просвечивающей электронной микроскопией. При хранении нанокристаллы спонтанно превращаются в конгломераты, поэтому 2(Fe3O4Co0,1O) активируют концентрированной хлористоводородной кислотой рН 1,2-1,4 и обрабатывают декстраном.
где r - общее число магнитных кластеров допированного Со2+ нестехиометрического магнетита (зависит от объема и концентрации реакционной смеси);
m - количество активированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%;
r-m - количество неактивированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 95 до 65%
f - число остатков глюкозы в молекуле декстрана, имеющих прямые химические связи с молекулами допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%;
общее число остатков молекул глюкозы в молекуле декстрана 432;
q-f - число остатков глюкозы, неимеющих химические связи с молекулами допированного Со2+ магнетита от 95 до 65%
При взаимодействии поверхности нанокристаллов допированного кобальтом нестехиометрического магнетита (Fe3O4Co0,1°) с концентрированной хлористоводородной кислотой происходит окисление nFe2+, находящихся на поверхности, до nFe3+ с образованием наночастиц допированного кобальтом активированного нестехиометрического магнетита (Fe3O4Co0,1O)r-m (Fe2O3Co0,1OFeOCl)m.
К 200 мл 2,1% суспензии наночастиц допированного кобальтом активированного нестехиометрического магнетита (диаметр наночастиц от 5 до 11 нм, рН суспензии 1,5) прибавляют раствор 28,0 г декстрана Т 70, фирмы Sigma, в 150 мл H2O. Реакционную смесь интенсивно перемешивают при 100°С в атмосфере азота в течение 50 мин. На поверхности наночастиц допированного кобальтом нестехиометрического магнетита образуются химические связи между молекулами γ - окиси железа и декстрана с выделением HCl и образованием устойчивого водного золя наночастиц заявляемого средства (ДФСо2+). Ионы Со2+ более устойчивы к окислению кислородом воздуха чем ионы Fe2+, защищают поверхность допированных нанокристаллов от окисления и увеличивают релаксивность при получении Т2 взвешенных контрастных МРТ изображений. Полученный золь обрабатывают на роторном испарителе. Золь, содержащий от 5% до 15% ДФСо2+, концентрируют в неоднородном постоянном магнитном поле (НПМП) индукцией 0,2 Тл, градиент 0,012 Тл/см, разбавляют водой в 10 раз и центрифугируют 5 мин при 2000 оборотов/мин. Полученный супернатант фильтруют через бумажный фильтр и систему фильтров Миллипор (диаметр пор от 200 до 1000 нм). 0,01 мл полученного фильтрата разбавляют до содержания МН от 0,01 до 0,0001% и определяют гидродинамический диаметр наночастиц, который составляет от 30 до 700 нм.
Полученный фильтрат декстранферрита, допированного ионами Со2+ (ДФСо2+), концентрируют на роторном испарителе. Получают 10% водный золь, рН 7,2 стерилизуют при температуре +100°С 1 час, разливают по 10 мл в стеклянные флаконы объемом 20 мл, замораживают при температуре - 80°С, лиофильно высушивают, заполняют азотом, закрывают резиновыми пробками с металлическими колпачками. Острая токсичность на самках мышей BDFi LD 50 4,1 г/кг, на крысах 3,4 г/кг. Хранят при комнатной температуре во флаконах. Срок хранения 10 лет.
Низкая острая токсичность заявляемого средства на млекопитающих и высокая эффективность при ранней диагностике злокачественных глиальных опухолей являются основанием для планирования ограниченных предклинических испытаний средства и способа для раннего выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте.
Приготовление 5% золя декстранферрита, допированного ионами Со2+ (ДФСо2+). К 0,5 г декстранферрита, допированного ионами Со2+, прибавляют 1,5 мл воды, выдерживают в ультразвуковой бане 10 мин, доводят объем полученного золя до 10 мл, получают 5% водный золь, черного цвета, рН 7,2, удельная намагниченность, Ms 5,8 кА/м. 1%-5% золь ДФСо2+ вводят крысам Вистар с привитыми глиальными опухолями внутриартериально (ВА), ВВ или интраперитонеально (ИП) в качестве негативного МРТ контрастного препарата - заявляемого средства.
За 30 мин - 30 часов до КМРТ сканирования головного мозга млекопитающим вводят внутривенно или внутриартериально заявляемое средство от 0,1 до 1,0 мл/кг в виде 1,5-5% водного золя наночастиц диаметром от 30 до 900 нм самостоятельно, или в комбинации с магневистом. Магневист вводят за 3 мин - 6 мин до проведения контрастного МРТ сканирования.
Пример 2. Через 3-5 дней после прививки глиобластомы 101/8, за 6 минут до проведения магнитно-резонансного сканирования, в хвостовую вену крыс 1 группы вводят от 0,1 до 1,0 мл 0,9% NaCl, периодически проводят МРТ сканирование мозга T1, Т2 и Т2* взвешенные 3D МРТИ последовательностей ранних форм опухолей с питающими их сосудами не визуализируются, табл. 1, фигуры 2 (а', b'). Однако через 7-14 дней в результате увеличения протонной плотности (PD) опухолевых тканей происходит визуализация распространенных опухолей, фигуры 3 (а', b', с') и 4.
Пример 3. Мониторинг развития глиобластомы 101/8 путем внутриартериального (в общую сонную артерию) введения комбинации заявляемого средства и магневиста. Через 72 час после прививки глиобластомы 101/8, за 15 мин до раннего контрастного МРТ сканирования, в общую сонную артерию крыс вводят 1,0 мл/кг 1,5% водного золя заявляемого средства (0,015 г/кг), (диаметр наночастиц 30-900 нм), ЛД50 1,0 г/кг, и за 5 мин до сканирования вводят магневист 0,2 мл/кг с последующим проведением T1, Т2 и Т2* взвешенных 3D сканирований.
Визуализируют МРТ изображения ранних форм опухолей высокого разрешения, яркости и контраста с питающими их сосудами. При анализе структуры опухолей и мозга выявляют расширенные артерии, питающие опухолевые ткани, этим на 3-4 дня сокращают время постановки диагноза.
Через 120 час после прививки глиобластомы 101/8 и через 12 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства и 0,2 мл/кг магневиста, на КМРТИ, в местах скопления опухолевых клеток, сосуды расширены в результате вазогенного отека и малигнизации. Опухолевые ткани соединены с множеством питающих сосудов.
Через 144 час после прививки и через 13 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства и 0,2 мл/кг магневиста, сосуды расширены в результате вазогенного отека и малигнизации, опухоль состоит из тканей, соединенных с множеством питающих сосудов.
На ранних стадиях развития глиальных опухолей параллельно с увеличением объема опухолей увеличивается число и диаметр сосудов, питающих центры опухолевой пролиферации, табл. 1, фигуры: 11 (а, b, с) и 13 (а, b, с, d).
Пример 4. Мониторинг развития глиомы С6 путем внутриартериального введения комбинации заявляемого средства и магневиста. Через 72 час после прививки глиомы С6, за 5 мин до раннего контрастного МРТ сканирования в общую сонную артерию крыс вводят 1,0 мл/кг 1,5% водного золя заявляемого средства (0,015 г/кг), (диаметр наночастиц 30-900 нм), ЛД50 1,0 г/кг, и за 6 минут до сканирования вводят магневист 0,2 мл/кг с последующим проведением T1, Т2 и Т2* взвешенных 3D сканирований.
Визуализируют МРТ изображения ранних форм опухолей высокого разрешения, яркости и контраста с питающими их сосудами. При анализе структуры опухолей и мозга выявляют расширенные артерии, питающие опухолевые ткани, этим на 3-4 дня сокращают время постановки диагноза.
На ранних стадиях развития глиальных опухолей (72 час) параллельно с увеличением объема опухолей увеличивается число и диаметр сосудов, питающих центры опухолевой пролиферации, табл. 1, фигура 12 (а'), этим на 3-4 дня сокращают время постановки диагноза. Через 7-14 дней после прививки в результате внутриартериального введения комбинации заявляемого средства и магневиста, увеличивающих контраст, пространственное разрешение и яркость МРТ изображений, визуализируют опухоли глиомы С6 в виде T1, Т2 и Т2* взвешенных 3D изображений с питающими их сосудами, фигура 12 (b', с').
Пример 5. За 25 часов до раннего контрастного МРТ сканирования в хвостовую вену крыс вводят 1,0 мл/кг 5% водного золя заявляемого средства 1,0 мл/кг 5% водного золя заявляемого средства (0,05 г/кг), (диаметр наночастиц 30-900 нм), ЛД50 4,0 г/кг, и за 5 минут до сканирования внутривенно вводят 0,2 мл/кг магневиста, визуализируют T1, Т2 и Т2* взвешенные изображения. Ранняя контрастная МРТ визуализация глиальных опухолей с питающими их сосудами достигается ослаблением сигналов протонов нормальных тканей заявляемым средством и усилением сигналов протонов опухолевых тканей магневистом. Разрешение, контраст и яркость МРТ изображений высокие, фигуры: 14 (а', b', с').
Для получения высокоинформативных контрастных МРТ изображений ранних форм глиальных опухолей коррекцию количества вводимых в организм крысы контрастных МРТ средств, времени введения и выдержки животного после введения комбинанантов заявляемого средства и магневиста проводят по таблицам 2-4.
При МРТ сканировании мозга крыс на 3-5 день после прививки опухолей, после внутрисосудистого введения заявляемого средства и магневиста происходит усиление контрастных МРТ изображений и визуализация ранних форм опухолей с питающими их сосудами: глиобластомы 101/8, фигуры: 7 (b); 8 (b); 11 (а); 13 (а), и глиомы С6, фигуры, 5 (b'); 6 (b'); 9 (а', b'); 10 (а', b'); 12 (а'); 14 (а', b', с').
На 7-14 день после прививки опухолей на контрастных МРТ изображениях ГМ выявляют распространенные формы глиальных опухолей с питающими их сосудами, фигуры: 9 (с', d'), 10 (с', d'); 11 (b, с); 12 (b', с'); 13 (b, с, d) и 15.
Краткое описание чертежей
Фигуры: 1 (а, b). Контрастные Т2 взвешенные МРТ изображения головного мозга крысы Вистар до прививки опухоли: (а) через 24 час после ВВ последовательного введения комбинации 1,0 мл/кг декстранферрита в полиглюкине, и за 5 минут до КМРТС 0,2 мл/кг магневиста визуализируют КМРТИ мозга низкого контраста, разрешения и яркости; (b) через 24 час после ВВ последовательного введения комбинации 1,0 мл/кг заявляемого средства, и за 5 минут до КМРТС вводят магневист 0,2 мл/кг, визуализируют структуру головного мозга высокого контраста, разрешения и яркости in vivo.
Фигуры 2 (a', b'). МРТ изображение головного мозга самки крысы Вистар через 3 дня после интрацеребральной прививки глиомы С6: (а') место введения опухолевых клеток (стрелка); (b') место введения опухолевых клеток, Х2 (стрелка). После ВВ введения 0,9% раствора натрия хлорида МРТИ ранних форм опухолей не визуализируются. До введения ДФ и заявляемого средства МРТ изображения ранних форм опухолей глиомы С6 не визуализируются.
Фигуры 3 (а', b', с'). МРТ изображения мозга самки крысы Вистар через 7 дней после интрацеребральной прививки глиомы С6: (a') PD (протонная плотность) изображение глиомы С6 (пунктирная стрелка); (b') Ti взвешенное изображение глиомы С6 (пунктирная стрелка); (с') Т2 взвешенное изображение глиомы С6 (пунктирная стрелка). На полученных МРТ изображениях 1/3 объема мозга малигнизирована, структура остального мозга разрушена.
Фигура 4. МРТ изображение мозга самки крысы Вистар на 14 день после интрацеребральной прививки глиобластомы 101/8: распространенная форма глиобластомы до введения заявляемого средства (стрелка); инвазия опухоли в нормальные ткани мозга (пунктирные стрелки). На полученном изображении 1/4 объема мозга малигнизирована (большая стрелка), 1/4 - пролиферирует (между двумя короткими стрелками), остальной мозг инфильтрирован клетками глиобластомы (пунктирные стрелки).
Фигуры: 5 (а', b'). Контрастные Т2 взвешенные МРТ изображения головного мозга крысы Вистар через 72 час после прививки злокачественной глиомы С6: (а') с последующим ВВ введением комбинации 1,0 мл/кг 5% декстранферрита в полиглюкине и 0,2 мл/кг магневиста; (b') через 72 час после ВВ введения комбинации 1,0 мл/кг заявляемого средства и 0,2 мл/кг магневиста, визуализируют центры опухолевой пролиферации (между 2 пунктирными стрелками). В отличие от (а') на (b') дополнительно визуализируют центры опухолевой пролиферации.
Фигуры: 6 (a', b'). Контрастные МРТ T1 взвешенные изображения головного мозга крысы Вистар через 96 час после прививки злокачественной глиомы С6: (а') с последующим ВВ введением комбинации 1,0 мл/кг 5% декстранферрита в полиглюкине; (b') через 24 час после ВВ введения комбинации 1,0 мл/кг 5% заявляемого средства, и 0,2 мл/кг магневиста визуализируют опухолевые инфильтраты и центры пролиферации (между 2 пунктирными стрелками). В отличие от (а') на (b') дополнительно визуализируют опухолевые инфильтраты и центры пролиферации (между 2 пунктирными стрелками).
Фигуры: 7 (а, b). Контрастные МРТ Ti взвешенные изображения головного мозга крысы Вистар через 96 час после прививки злокачественной глиобластомы 101/8: (а) с последующим ВВ введением комбинации 1,0 мл/кг 5% декстранферрита в полиглюкине; (b) через 24 час после ВВ введения комбинации 1,0 мл/кг 5% заявляемого средства, и 0,2 мл/кг магневиста визуализируют опухолевые инфильтраты и центры пролиферации (между 2 пунктирными стрелками), в отличие от (а) на (b) дополнительно визуализируют опухолевые инфильтраты и центры пролиферации (между 2 пунктирными стрелками).
Фигуры: 8 (а, b). Контрастные Т2 взвешенные МРТ изображения головного мозга крысы Вистар через 120 час после прививки злокачественной глиобластомы 101/8: (а) через 8 час после ВВ введения комбинации 2,0 мл/кг декстранферрита в полиглюкине и за 5 минут до КМРТ сканирования вводят 0,2 мл/кг магневиста; (b) через 8 час после ВВ введения комбинации 200 мл/кг заявляемого средства, и за 5 минут до КМРТ сканирования вводят 0,2 мл/кг магневиста. В отличие от (а) на (b) дополнительно визуализируют центр опухолевой пролиферации на месте прививки (между 2 пунктирными стрелками).
Фигуры: 9 (а', b', с', d'). Контрастные МРТ изображения ранних форм опухолей ГМ через 48-120 часов (2-5 суток) и опухолей, развившихся через 168-336 часов (7-14 суток) после прививки глиомы С6: (a') T1 взвешенное контрастное МРТ изображение ранних форм опухолей глиомы С6, визуализируют через 30 часов после введения в хвостовую вену крыс 1,0 мл/кг 5% заявляемого средства и 0,2 мл/кг магневиста (МВ), структура ГМ частично сохраняется, на месте прививки визуализируется светлый слой опухолевых клеток глиомы С6 2,0×2,5 мм, (белая стрелка), по границе светлого слоя визуализируются малигнизированные капилляры (черная стрелка); (b') через 72 часа после прививки визуализируются структурные изменения ГМ, (черные стрелки), вызванные вазогенным отеком, малигнизацией и пролиферацией неоплазмы в правой половине ГМ, (между белыми наружными стрелками); (с') через 98 часов после прививки увеличилась плотность клеток глиомы С6 и сигнал протонов, на месте прививки визуализировался светлый слой 7×5 мм (между белыми стрелками); (d') через 240 часов после прививки глиомы С6 продолжалась пролиферация неоплазмы и разрушение структуры ГМ (между белыми стрелками), на месте прививки визуализировался светлый слой инфильтрирующей опухоли 13×15 мм (между концами черных стрелок) и темный слой (длинная черная стрелка).
Фигуры: 10 (а', b', с', d'). Асимметрия правой и левой контралатеральных половин ГМ, на контрастных МРТ изображениях ГМ - результат прививки глиомы С6: (а') контрастное МРТ изображение структуры левой (контрольной) половины головного мозга на 3 день после прививки глиомы С6, через 20 час после ВВ введения заявляемого средства (между четырьмя белыми длинными стрелками), контрастные МРТ изображения разрушенных структур правой половины ГМ (черная стрелка), пролиферация опухолей (концы белых толстых стрелок и 2 маленькие наружные стрелки); (b') изменения опухолей левой половины ГМ под давлением опухоли, развившейся в правой половине головного мозга на 4 день после прививки глиомы С6 (между четырьмя белыми короткими стрелками), разрушение структур правой половины ГМ в результате пролиферации опухоли (между четырьмя длинными стрелками); (с') на 7 день после прививки глиомы С6 визуализируются светлые слои опухолевых клеток в правой половине ГМ (между четырьмя черными стрелками), под давлением которых разрушается структура левой половины ГМ, сосуды, снабжающие ГМ (между белыми стрелками); (d') первичная опухоль в правой контралатеральной половине ГМ на 9 день после прививки (между стрелками) и инфильтрация в нормальный мозг (пунктирные стрелки).
Фигуры: 11 (а, b, с). 3D контрастные МРТ изображения сосудов, питающих опухоль глиобластомы 101/8 в реальном времени: (а) через 72 час после прививки опухоли и через 30 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл/кг магневиста, сосуды, питающие опухоль, расширены в результате вазогенного отека и малигнизации (между 2 пунктирными стрелками); (b) через 120 час после прививки глиобластомы 101/8 и через 30 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства и 0,2 мл/кг магневиста, сосуды расширены в результате вазогенного отека и малигнизации, опухолевые ткани соединены с множеством питающих сосудов, (между 2 пунктирными стрелками); (с) через 144 час после прививки глиобластомы 101/8 и через 30 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл/кг магневиста, сосуды расширены в результате вазогенного отека и малигнизации, опухоль состоит из тканей, соединенных с множеством питающих сосудов, (между 2 пунктирными стрелками).
Фигуры: 12 (а', b', с'). 3D контрастные МРТ изображения сосудов, питающих опухоль, глиомы С6 в реальном времени: (а') через 72 час после прививки опухоли и через 9 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл магневиста, малигнизация сосудов и тканей мозга (между 2 пунктирными стрелками); (b') через 120 час после прививки глиомы С6 и через 9 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл магневиста, сосуды, питающие опухоль, расширены в результате вазогенного отека и малигнизации, сеть сосудов, питающих опухолевые ткани, (между 2 пунктирными стрелками); (с') через 144 час после прививки глиомы С6 и через 9 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,0 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл/кг магневиста, сосуды, питающие опухоль расширены в результате вазогенного отека и малигнизации, опухоль представлена тканями с множеством деградирующих сосудов, (между 2 пунктирными стрелками).
Фигуры: 13 (а, b, с, d). 3D контрастные МРТ изображения сосудов, питающих глиобластому 101/8 в реальном времени: (а) через 60 час после прививки опухоли и через 10 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,1 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл магневиста, (между 2 пунктирными стрелками); (b) через 96 час после прививки глиобластомы 101/8 и через 30 мин после введения в общую сонную артерию комбинации 1,1 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл/кг магневиста, сосуды, питающие опухоль, расширены, опухолевые ткани пронизаны сетью питающих сосудов, (между 2 пунктирными стрелками); (с) через 120 час после прививки глиобластомы 101/8 и через 3 час после введения в общую сонную артерию комбинации 1,1 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл/кг магневиста, сосуды, питающие опухоль, расширены (между 2 пунктирными стрелками); (d) через 144 час после прививки глиобластомы 101/8 и через 3 час после введения в общую сонную артерию комбинации 1,1 мл/кг 1,5% заявляемого средства (ЛД50 1,0 г/кг) и 0,2 мл магневиста, сосуды, питающие опухоль, расширены, опухоль состоит из тканей, пронизанных расширенными сосудами, (между 2 пунктирными стрелками).
Фигуры: 14 (а', b', с'). 3D контрастные МРТ изображения сосудов, питающих опухоль, через 96 час после прививки глиомы С6 и 30 час после ВВ введения заявляемого средства: (а') сосуды, питающие опухоль утолщены в результате вазогенного отека и малигнизации (между маленькими черными стрелками), ранняя опухоль состоит из разнородных тканей соединенных с множеством питающих сосудов, (между 4 большими черными стрелками); опухоль глиомы С6 находится в тонкой капсуле, вместе с которой ее можно изъять из мозга пинцетом. Капсула покрыта полупрозрачным слоем, в этом слое отсутствуют светлые пятна, образованные другими опухолями (между 4 большими белыми наружными стрелками); (b') сосуды, питающие раннюю опухоль глиомы С6, (вид справа); (с') сосуды, питающие раннюю опухоль глиомы С6, (вид слева).
Фигура 15. 3D контрастное магнитно-резонансное томографическое изображение опухоли глиомы С6 через 14 дней после прививки, через 30 часов после ВВ введения 1,0 мл/кг заявляемого средства, через 6 мин после введения 0,2 мл/кг магневиста и за 24 минуты до контрастного МТР сканирования (между двумя концами черных стрелок); сосуды, питающие опухоль и мелкие островки пролиферирующей опухоли, расположенные по периметру опухоли глиомы С6 (светлые линии и точки); тромбированные опухолевыми клетками сосуды (между тонкими стрелками); извитые опухолевые сосуды (толстая наружная стрелка); сосуды с утолщенными стенками (пунктирная стрелка); нормальные ткани и сосуды ГМ (между двумя толстыми, маленькими наружными стрелками).
Фигуры: 16 (а, b, с, d', е'). Визуальный анализ гистологических препаратов глиобластомы 101/8 (ГБ 101/8): (а) общий вид ГБ 101/8, заметны опухолевые клетки, инфильтрирующие пограничные ткани «нормального» мозга (маленькие стрелки), слой некроза ГБ 101/8, (белая стрелка), слой пролиферации (черная стрелка), слой инфильтрации клеток ГБ 101/8 в «нормальный» мозг (пунктирная стрелка), окраска, гематоксилин и эозин, Х200; (b) малигнизированные сосуды, образовавшиеся в процессе неоангиогенеза (черные стрелки), лимфоциты и моноциты (белые стрелки), окраска по Перлсу, Х600; (с) клетки ГБ 101/8 (белые маленькие стрелки), макрофаги и лейкоциты (черные стрелки); депозиты наночастиц феррита в цитоплазме клеток и в межклеточных пространствах (синие точки, линии и пятна), окраска по Перлсу, XI000. При визуальном анализе изображений гистологических препаратов тканей глиомы С6 определяют: (d') пере- и интравазальную инфильтрацию клеток глиомы С6 (между стрелками); (е') переневральную инфильтрацию клеток глиомы С6 (стрелки). Окраска, крезиловый фиолетовый и толуидиновый синий, Х200.
Claims (11)
1. Способ получения допированного ионами кобальта (Со2+) декстранферрита (ДФСо2+), характеризующийся тем, что смесь Fe(OH)2, Fe(OH)3 и Со(ОН)2 при следующем мольном соотношении компонентов: 1,1÷1,3:1,7÷1,9:0,1, нагревают при рН 11-12 в отсутствие кислорода при перемешивании;
- полученные нанокристаллы нестехиометрического магнетита общей формулы (1)
высаживают в неоднородном постоянном магнитном поле, полученную суспензию активируют концентрированной хлористоводородной кислотой до получения прозрачного светло-желтого золя, далее полученные нанокристаллы обрабатывают декстраном до образования устойчивого в течение 15-30 минут золя в магнитном поле при 0,2-3,0 Тл, градиент 0,003 Тл/см - 0,04 Тл/см, и получают допированный Со2+ декстранферрит общей формулы (2):
где r - общее число магнитных кластеров допированного Со2+ нестехиометрического магнетита, зависит от объема и концентрации реакционной смеси; m - количество активированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%; r-m - количество неактивированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 95 до 65%; f - число остатков глюкозы в молекуле декстрана, имеющих прямые химические связи с молекулами допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%; q-f - число остатков глюкозы, не имеющих химические связи с молекулами допированного Со2+ магнетита от 95 до 65%.
2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что активацию концентрированной хлористоводородной кислотой проводят при рН 1,2-1,4.
3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что высаживание в неоднородном постоянном магнитном поле проводят при 0,2-3,0 Тл, градиент 0,003 Тл/см - 0,04 Тл/см.
4. Способ раннего обнаружения сосудов, питающих опухоль, включающий контрастное МРТ сканирование головного мозга, характеризующийся тем, что за 10 мин - 48 ч до контрастного МРТ сканирования головного мозга внутривенно или внутриартериально вводят 2-5% водного золя допированного Со2+ декстранферрита по п. 1 общей формулы (γ-Fe3+ 2O3Co0,1O)r-m(Fe2O3Co0,1OFe)m(C6H9O5)f(C6H10O5)q-f,
где r - общее число магнитных кластеров допированного Со2+ нестехиометрического магнетита, зависит от объема и концентрации реакционной смеси; m - количество активированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%; r-m - количество неактивированных молекул допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 95 до 65%; f - число остатков глюкозы в молекуле декстрана, имеющих прямые химические связи с молекулами допированного Со2+ нестехиометрического магнетита от 5 до 35%; q-f - число остатков глюкозы, не имеющих химические связи с молекулами допированного Со2+ магнетита от 95 до 65%.
из расчета 0,1-0,2 мл на 100 г веса, а за 3-6 мин до начала сканирования внутривенно вводят магневист из расчета 0,1-0,2 мл/кг и затем осуществляют визуализацию следующих взвешенных 3D изображений злокачественных глиальных опухолей: T1 взвешенное изображение {500/15} (время повторения, мс/время эхо, мс), Т2 взвешенное изображение {1900/80} спин-эхо, Т2* взвешенное изображение {500/15} (время повторения, мс/время эхо, мс).
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016126667A RU2655303C2 (ru) | 2016-07-04 | 2016-07-04 | Средство и способ для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016126667A RU2655303C2 (ru) | 2016-07-04 | 2016-07-04 | Средство и способ для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2655303C2 true RU2655303C2 (ru) | 2018-05-24 |
Family
ID=62202492
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016126667A RU2655303C2 (ru) | 2016-07-04 | 2016-07-04 | Средство и способ для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2655303C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2761827C1 (ru) * | 2020-08-06 | 2021-12-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова» (МГУ) | Средство и способ комбинированной контрастной магнитно-резонансной томографической визуализации изображений биомеханики процессов инфильтрации, инвазии и метастазирования злокачественных клеток |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009156445A2 (en) * | 2008-06-26 | 2009-12-30 | Colorobbia Italia S.P.A. | Use of cobalt ferrites as contrast agents for magnetic resonance |
RU2382596C1 (ru) * | 2008-09-29 | 2010-02-27 | Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН | Способ обнаружения сосудов, питающих опухоль, в эксперименте |
CN103893128A (zh) * | 2014-04-28 | 2014-07-02 | 中国科学院宁波材料技术与工程研究所 | 一种肿瘤治疗复合纳米材料及其制备 |
-
2016
- 2016-07-04 RU RU2016126667A patent/RU2655303C2/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009156445A2 (en) * | 2008-06-26 | 2009-12-30 | Colorobbia Italia S.P.A. | Use of cobalt ferrites as contrast agents for magnetic resonance |
RU2382596C1 (ru) * | 2008-09-29 | 2010-02-27 | Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН | Способ обнаружения сосудов, питающих опухоль, в эксперименте |
CN103893128A (zh) * | 2014-04-28 | 2014-07-02 | 中国科学院宁波材料技术与工程研究所 | 一种肿瘤治疗复合纳米材料及其制备 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
ГУЛЯЕВ М.В. и др. Применение методов ЯМР в исследованиях глиальных опухолей у лабораторных животных. Технологии живых систем, 10(1), 2013, с. 35-40. * |
ГУЛЯЕВ М.В. и др. Синтез декстранферрита и раннее магнитно-резонансное томографическое выявление опухоли, капсулы и сосудов, питающих опухоль, в эксперименте in vivo. Сборник тезисов докладов участников Второго международного форума по нанотехнологиям 6-8 октября 2009. Нанотехнологии в медицине. Онкология и кардиология, с. 9-11. * |
ГУЛЯЕВ М.В. и др. Синтез декстранферрита и раннее магнитно-резонансное томографическое выявление опухоли, капсулы и сосудов, питающих опухоль, в эксперименте in vivo. Сборник тезисов докладов участников Второго международного форума по нанотехнологиям 6-8 октября 2009. Нанотехнологии в медицине. Онкология и кардиология, с. 9-11. ГУЛЯЕВ М.В. и др. Применение методов ЯМР в исследованиях глиальных опухолей у лабораторных животных. Технологии живых систем, 10(1), 2013, с. 35-40. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2761827C1 (ru) * | 2020-08-06 | 2021-12-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова» (МГУ) | Средство и способ комбинированной контрастной магнитно-резонансной томографической визуализации изображений биомеханики процессов инфильтрации, инвазии и метастазирования злокачественных клеток |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Dadfar et al. | Iron oxide nanoparticles: Diagnostic, therapeutic and theranostic applications | |
Shabestari Khiabani et al. | Magnetic nanoparticles: preparation methods, applications in cancer diagnosis and cancer therapy | |
CN103212093B (zh) | 一种具有细胞靶向性的磁性纳米材料及其生物医学应用 | |
CN104258425A (zh) | 一种rgd修饰的超小磁性氧化铁纳米颗粒的制备方法及其应用 | |
Chen et al. | Improving sensitivity of magnetic resonance imaging by using a dual-targeted magnetic iron oxide nanoprobe | |
US20050025971A1 (en) | Magnetic nanoparticle | |
US20150165070A1 (en) | Magnetic nanoparticles dispersion, its preparation and diagnostic and therapeutic use | |
Luo et al. | Hyaluronic acid-mediated multifunctional iron oxide-based MRI nanoprobes for dynamic monitoring of pancreatic cancer | |
Wang et al. | Magnetic resonance tracking of nanoparticle labelled neural stem cells in a rat’s spinal cord | |
Low et al. | Stimuli-controllable iron oxide nanoparticle assemblies: Design, manipulation and bio-applications | |
Lei et al. | Stem cell labeling with superparamagnetic iron oxide nanoparticles using focused ultrasound and magnetic resonance imaging tracking | |
Kim et al. | A highly sensitive magnetite nanoparticle as a simple and rapid stem cell labelling agent for MRI tracking | |
Huang et al. | Advances of functional nanomaterials for magnetic resonance imaging and biomedical engineering applications | |
Bell et al. | Functionalised iron oxide nanoparticles for multimodal optoacoustic and magnetic resonance imaging | |
Li et al. | Safe and efficient magnetic resonance imaging of acute myocardial infarction with gadolinium-doped carbon dots | |
RU2655303C2 (ru) | Средство и способ для раннего контрастного магнитно-резонансного томографического выявления злокачественных глиальных опухолей с питающими их сосудами в эксперименте | |
Bao et al. | Magnetic vortex nanoring coated with gadolinium oxide for highly enhanced T1-T2 dual-modality magnetic resonance imaging-guided magnetic hyperthermia cancer ablation | |
Song et al. | A multifunctional nanoprobe based on europium (iii) complex–Fe 3 O 4 nanoparticles for bimodal time-gated luminescence/magnetic resonance imaging of cancer cells in vitro and in vivo | |
Gong et al. | A dual ligand targeted nanoprobe with high MRI sensitivity for diagnosis of breast cancer | |
CN101474414B (zh) | 高分子包裹磁性纳米粒子造影剂的制备及应用 | |
Su et al. | In vivo magnetic resonance and fluorescence dual-modality imaging of tumor angiogenesis in rats using GEBP11 peptide targeted magnetic nanoparticles | |
RU2692579C2 (ru) | Средство для раннего контрастного мрт выявления центров злокачественной пролиферации с питающими сосудами, границами диффузной инфильтрации и определение стадий их развития в динамике | |
US20210138088A1 (en) | Bismuth-iron oxide contrast agents | |
CN111110869B (zh) | 一种内嵌金属碳点及其制备方法和应用 | |
Fakhardo et al. | Heparin-coated iron oxide nanoparticles: application as a liver contrast agent, toxicity and pharmacokinetics |