RU2654605C2 - Assessment method for cytogenetic indexes of rhododendron ledebourii pojark seed quality - Google Patents
Assessment method for cytogenetic indexes of rhododendron ledebourii pojark seed quality Download PDFInfo
- Publication number
- RU2654605C2 RU2654605C2 RU2016140096A RU2016140096A RU2654605C2 RU 2654605 C2 RU2654605 C2 RU 2654605C2 RU 2016140096 A RU2016140096 A RU 2016140096A RU 2016140096 A RU2016140096 A RU 2016140096A RU 2654605 C2 RU2654605 C2 RU 2654605C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- mitosis
- metaphase
- stage
- cytogenetic
- Prior art date
Links
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 52
- 241000681975 Rhododendron ledebourii Species 0.000 title claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 claims abstract description 44
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 35
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 claims abstract description 20
- 230000031864 metaphase Effects 0.000 claims abstract description 18
- 230000031877 prophase Effects 0.000 claims abstract description 17
- 230000007170 pathology Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 230000035784 germination Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 74
- 230000003562 morphometric effect Effects 0.000 description 14
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 240000009089 Quercus robur Species 0.000 description 6
- 235000011471 Quercus robur Nutrition 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 6
- 235000018185 Betula X alpestris Nutrition 0.000 description 5
- 235000018212 Betula X uliginosa Nutrition 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 235000009109 Betula pendula Nutrition 0.000 description 1
- 241000219430 Betula pendula Species 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 241000219492 Quercus Species 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 210000000479 mitotic spindle apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 239000003415 peat Substances 0.000 description 1
- 230000008121 plant development Effects 0.000 description 1
- 238000010079 rubber tapping Methods 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 230000016853 telophase Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
- A01H1/04—Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Physiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к способам выращивания растений, а именно, к способам селекции, и может быть использовано для оценки качества семян Rhododendron ledebourii Pojark., в частности, отбора семенного потомства с высоким уровнем стабильности генетического материала, из которого могут быть получены сеянцы с лучшими морфометрическими показателями.The invention relates to methods for growing plants, namely, to methods of selection, and can be used to assess the quality of seeds of Rhododendron ledebourii Pojark., In particular, the selection of seed offspring with a high level of stability of genetic material from which seedlings with the best morphometric parameters can be obtained .
Для изучения исходного материала в селекции, а также выбора или разработки методов селекции, сортоизучения, размножения, сортоиспытания и получения быстрорастущего потомства необходима оценка качества семян. Несмотря на достигнутые успехи использования массового отбора, основные недостатки значительно снижают его эффективность. При массовом отборе на увеличение прироста в случае гетерогенности исходной популяции можно получить относительный, хотя и не очень большой эффект. Больших результатов можно ожидать при отборе на улучшение формы, а также на устойчивость к болезням. В целом, эффективность массового отбора зависит от наследуемости признака, размера популяции и ее гетерогенности (Царев А.П., Погиба С.П., Тренин В.В. Селекция и репродукция лесных древесных пород: Учебник/Под ред. А.П. Царева. - М.: Логос, 2003. - 520 с.). Однако при массовом отборе невозможно выделить конкретный ценный индивид для получения от него быстрорастущего потомства. Использование индивидуального отбора и смешанных методов (индивидуально семейного и семейно-группового) позволяет устранить данный недостаток. Однако, в свою очередь, они достаточно длительны (из-за поэтапной оценки потомства требуются десятки лет), ограничены в количестве отбираемых индивидов и не позволяют провести генетическую оценку качества семян.To study the source material in breeding, as well as to select or develop methods of breeding, variety research, propagation, variety testing and obtaining fast-growing offspring, an assessment of the quality of seeds is necessary. Despite the successes achieved using mass selection, the main disadvantages significantly reduce its effectiveness. With mass selection, a relative, although not very large effect can be obtained to increase growth in the case of heterogeneity of the initial population. Greater results can be expected in the selection for improved shape, as well as resistance to disease. In general, the effectiveness of mass selection depends on the heritability of the trait, the size of the population and its heterogeneity (Tsarev A.P., Pogiba S.P., Trenin V.V. Selection and reproduction of forest tree species: Textbook / Ed. A.P. Tsareva. - M.: Logos, 2003 .-- 520 p.). However, with mass selection, it is impossible to single out a specific valuable individual to receive from him a rapidly growing offspring. The use of individual selection and mixed methods (individually family and family-group) eliminates this drawback. However, in turn, they are quite long (due to the phased assessment of the offspring it takes decades), they are limited in the number of individuals selected and do not allow a genetic assessment of seed quality.
Чаще всего оценка качества семян осуществляется на основе исследования фенотипических показателей. Отбор в питомниках и среди семян может включать сортировку растений по величине и по массе семян. В целом, в интересах хозяйства нельзя отказываться от отбора на высокую абсолютную массу семян, потому что растения с энергичным ростом в молодом возрасте быстрее уходят от различных опасностей (сорняки, обкусывание дичью, повреждение заморозками и т.п.). Однако нельзя и преувеличивать значение сортировки семян для достижения положительных результатов (Вересин М.М. Селекционный отбор быстрорастущих форм древесных пород при лесовыращивании // Науч. зап. Воронежского лесохозяйств. ин-та. Т. IX. - Воронеж: Воронежское обл. книгоизд-во, 1946. - С. 74-103; Добринов И. Генетика и селекция на дървесните видове. - София: Земиздат, 1983. - 290 с.). При всех одинаковых условиях выращивания (размещение, масса семян и плодов и др.) сортировкой растений по величине в однолетнем и более старшем возрасте удается незначительно изменить состав наследственной массы в направлении более быстрого роста в молодом возрасте (Царев А.П., Погиба С.П., Тренин В.В. Селекция и репродукция лесных древесных пород: Учебник/Под ред. А.П. Царева. - М: Логос, 2003. - 520 с.). Сортировка семян и отбор их по абсолютной массе также не позволяет исследовать генетические особенности семенного потомства и прогнозировать ростовые способности получаемых из них сеянцев. Цитогенетическая оценка качества семян позволяет производить отбор и одновременно проверку качества семенного потомства на ранних стадиях развития потомства на основании клеточных и субклеточных характеристик.Most often, the assessment of seed quality is based on the study of phenotypic indicators. Selection in nurseries and among seeds may include sorting plants by size and weight of seeds. In general, in the interests of the economy, one cannot refuse to select for a high absolute mass of seeds, because plants with vigorous growth at a young age quickly escape from various dangers (weeds, biting game, frost damage, etc.). However, it is impossible to exaggerate the importance of sorting seeds to achieve positive results (Veresin M.M., Selection selection of fast-growing forms of tree species during forest cultivation // Scientific app. Of Voronezh Forestry Institute, T. IX. - Voronezh: Voronezh Region Book Publishing House in, 1946. - S. 74-103; Dobrinov I. Genetics and selection on the other species. - Sofia: Zemizdat, 1983. - 290 p.). Under all the same growing conditions (placement, mass of seeds and fruits, etc.) by sorting the plants in size at one year old and older, it is possible to slightly change the composition of the hereditary mass in the direction of faster growth at a young age (Tsarev A.P., Pogiba S. P., Trenin V.V. Selection and reproduction of forest tree species: Textbook / Under the editorship of A.P. Tsarev. - M: Logos, 2003. - 520 p.). Sorting seeds and selecting them by absolute weight also does not allow us to study the genetic characteristics of seed offspring and to predict the growth abilities of seedlings obtained from them. Cytogenetic assessment of seed quality allows selection and simultaneous testing of seed progeny in the early stages of offspring development based on cellular and subcellular characteristics.
Применение цитогенетического метода оценки качества семян эффективно, поскольку он достаточно прост и быстр, позволяет адекватно определить стабильность генетического материала материнского растения и его семенного потомства (Вострикова Т.В. Изучение суточной митотической активности у березы повислой / Т.В. Вострикова, А.К. Буторина // Цитология. - 2004. - Т. 46. - №6. - С. 520-524; Вострикова Т.В. Цитогенетические реакции березы повислой на действие стрессовых факторов / Т.В. Вострикова, А.К. Буторина // Известия РАН. Серия биологическая. - 2006. - №2. - С. 232-238; Вострикова Т.В. Нестабильность цитогенетических показателей и нестабильность генома у березы повислой / Т.В. Вострикова // Экология. - 2007. - №2. - С. 88-92).The use of the cytogenetic method for assessing the quality of seeds is effective, since it is quite simple and fast, allows you to adequately determine the stability of the genetic material of the mother plant and its seed offspring (Vostrikova T.V. Butorina // Cytology. - 2004. - T. 46. - No. 6. - P. 520-524; Vostrikova T.V. Cytogenetic reactions of birch hanging on the action of stress factors / T.V. Vostrikova, A.K. Butorina // Proceedings of the Russian Academy of Sciences. Biological series. - 2006. - No. 2. - S. 232-23 8; Vostrikova T.V. Instability of cytogenetic indices and instability of the genome in birch sag / T.V. Vostrikova // Ecology. - 2007. - No. 2. - P. 88-92).
Оценка качества семян цитогенетическим методом включает сбор, проращивание семян, изготовление и анализ микропрепаратов. Исследование занимает 1 вегетационный сезон, т.е. значительно сокращается время постановки эксперимента по сравнению с традиционным индивидуальным отбором по морфологическим признакам.Assessment of seed quality by the cytogenetic method includes the collection, germination of seeds, the manufacture and analysis of micropreparations. The study takes 1 growing season, i.e. significantly reduces the time of the experiment compared with traditional individual selection by morphological characteristics.
Ранее были проведены работы по оценке качества семян березы повислой, на основании таких показателей как митотическая активность клеток, уровень цитогенетических нарушений группового способа отбора семенного потомства (Вострикова Т.В. Изучение суточной митотической активности у березы повислой / Т.В. Вострикова, А.К. Буторина // Цитология. - 2004. - Т. 46. - №6. - С. 520-524; Вострикова Т.В. Область использования цитогенетического метода в лесной генетике и селекции / Т.В. Вострикова // Лесное хозяйство. - 2006. - №1. - С. 30-32). Предлагаемый нами способ отличается тем, что предусматривает определение цитогенетических показателей семенного потомства, оценку качества семян каждого из материнских растений Rhododendron ledebourii Pojark. и отдельно каждого проростка (индивида), полученных от конкретного материнского экземпляра, т.е. индивидуальный сбор данных.Earlier, work was carried out to assess the quality of birch seed seeds, based on indicators such as mitotic activity of cells, the level of cytogenetic disturbances of the group method for selecting seed offspring (Vostrikova T.V. K. Butorina // Cytology. - 2004. - T. 46. - No. 6. - P. 520-524; Vostrikova T.V. Field of use of the cytogenetic method in forest genetics and selection / T.V. Vostrikova // Forestry . - 2006. - No. 1. - S. 30-32). Our proposed method is characterized in that it provides for the determination of cytogenetic indicators of seed offspring, the assessment of the quality of the seeds of each of the mother plants Rhododendron ledebourii Pojark. and separately each seedling (individual) received from a specific maternal instance, i.e. individual data collection.
Известно использование группового способа отбора семян и оценки стабильности генетического материала семенного потомства по 16-18 цитогенетическим показателям (Артюхов В.Г., Калаев В.Н., Карпова С.С. Цитогенетический полиморфизм семенного потомства деревьев березы повислой (Betula pendula Roth.), произрастающих в различных экологических условиях // Экологическая генетика. 2009. Т. 7. №1. С. 30-40; Калаев В.Н., Попова А.А. Цитогенетический полиморфизм проростков семян деревьев дуба черешчатого (Quercus Robur L.) на территориях с разным уровнем антропогенного загрязнения // Проблемы региональной экологии. 2014 а. №2. С. 176-190). Для определения цитогенетических характеристик и морфологических показателей семенного потомства деревьев дуба черешчатого (Quercus robur L.) (Калаев В.Н., Попова А.А. Цитогенетические характеристики и морфологические показатели семенного потомства деревьев дуба черешчатого (Quercus robur L.), произрастающих на территориях с разным уровнем антропогенного загрязнения // Вестник Воронежского государственного университета. Серия Химия. Биология. Фармация. 2014, б. №4. С. 63-72) с каждой территории собирали около 150-200 семян, проращивали их во влажном песке, когда корешки проростков достигали длины 2-3 см, производилась их фиксация в смеси 96% этилового спирта и ледяной уксусной кислоты (3:1) в 22 ч (зимнее время), когда наблюдаются пики митотической активности и патологических митозов. После чего корешки проростков окрашивали ацетогематоксилином, изготавливали давленые препараты, проводили просмотр и на каждом препарате учитывали общее количество просмотренных клеток, количество делящихся клеток, находящихся в той или иной стадии митоза, количество и тип патологических митозов. На основании полученных данных определяли митотический индекс (доля делящихся клеток, %), долю патологических митозов среди общего числа делящихся клеток (%), распределения клеток по стадиям митоза (доля про-, мета-, ана-, телофаз, %), также была вычислена частота встречаемости различных по площади типов ядрышек (%). Была установлена связь между цитогенетическими показателями и ростовыми характеристиками у аборигенного вида - дуба черешчатого, однако для растений-инродуцентов такие данные отсутствуют.It is known to use a group method of selecting seeds and assessing the stability of the genetic material of seed offspring according to 16-18 cytogenetic indicators (Artyukhov V.G., Kalaev V.N., Karpova S.S. Cytogenetic polymorphism of seed offspring of birch trees hanging (Betula pendula Roth.) growing in various environmental conditions // Ecological Genetics. 2009. V. 7. No. 1. P. 30-40; Kalayev V.N., Popova A.A. Cytogenetic polymorphism of seedlings of pedunculate oak trees (Quercus Robur L.) in territories with different levels of anthropogenic pollution Senia // Problems of Regional Ecology. 2014 a. No. 2. P. 176-190). To determine the cytogenetic characteristics and morphological parameters of the seed offspring of pedunculate oak trees (Quercus robur L.) (Kalaev V.N., Popova A.A. Cytogenetic characteristics and morphological parameters of the seed offspring of pedunculate oak trees (Quercus robur L.) growing in the territories with different levels of anthropogenic pollution // Bulletin of the Voronezh State University. Series Chemistry. Biology. Pharmacy. 2014, b. No. 4. P. 63-72) about 150-200 seeds were collected from each territory, germinated in wet sand, when and the roots of the seedlings reached a length of 2-3 cm, they were fixed in a mixture of 96% ethyl alcohol and glacial acetic acid (3: 1) at 22 h (winter time), when peaks of mitotic activity and pathological mitoses were observed. After that, the roots of the seedlings were stained with acetohematoxylin, squeezed preparations were made, scanning was performed, and on each preparation the total number of cells scanned, the number of dividing cells at a particular stage of mitosis, the number and type of pathological mitoses were taken into account. Based on the data obtained, we determined the mitotic index (fraction of dividing cells,%), the proportion of pathological mitoses among the total number of dividing cells (%), the distribution of cells by the stages of mitosis (the proportion of pro-, meta-, ana-, telophases,%), was also the frequency of occurrence of different types of nucleoli in area (%) was calculated. A connection was established between the cytogenetic indices and growth characteristics of the native species, the oak oak, however, such data are not available for the alien plants.
Таким образом, определение уровня нарушений генетического материала, митотической активности клеток, числа клеток на стадиях митоза, ядрышковых характеристик (уровень клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза, площадь поверхности одиночных ядрышек), прямо или косвенно свидетельствующих о цитогенетической стабильности материнских растений и их семенного потомства, позволяет отбирать материнские экземпляры, продуцирующие сеянцы с лучшими морфометрическими показателями.Thus, the determination of the level of violations of the genetic material, the mitotic activity of cells, the number of cells at the stages of mitosis, nucleolar characteristics (the level of cells with residual nucleoli at the metaphase-telophase stage of mitosis, the surface area of single nucleoli) directly or indirectly indicate the cytogenetic stability of mother plants and their seed offspring, allows you to select maternal specimens producing seedlings with the best morphometric indicators.
Задача изобретения - оценка по цитогенетическим показателям качества семян Rhododendron ledebourii Pojark. для получения сеянцев с лучшими морфометрическими показателями.The objective of the invention is the assessment of cytogenetic indicators of seed quality Rhododendron ledebourii Pojark. for seedlings with the best morphometric indicators.
Технический результат заключается в разработке относительно быстрого и простого способа оценки качества семян Rhododendron ledebourii Pojark. по цитогенетическим характеристикам для отбора семенного потомства с высоким уровнем стабильности генетического материала и получения сеянцев с лучшими морфометрическими показателями.The technical result consists in the development of a relatively quick and easy way to assess the quality of the seeds of Rhododendron ledebourii Pojark. according to cytogenetic characteristics for selecting seed offspring with a high level of stability of genetic material and obtaining seedlings with the best morphometric indicators.
Технический результат достигается тем, что в способе оценки по цитогенетическим показателям качества семян Rhododendron ledebourii Pojark. для получения сеянцев с лучшими морфометрическими показателями, включающем сбор и проращивание семян фенотипически здоровых материнских растений Rhododendron ledebourii Pojark., приготовление постоянно-давленного микропрепарата из корешка каждого проростка длиной 0,5-1 см, анализ цитогенетических показателей каждого микропрепарата, таких как «митотическая активность» как отношение числа делящихся клеток к общему числу подсчитанных клеток (%), «доля клеток на стадии профазы митоза» (%) как отношение числа клеток в профазе к числу делящихся клеток, «доля клеток на стадии метафазы митоза» (%) как отношение числа клеток в метафазе к числу делящихся клеток, «доля клеток на стадии анафазы-телофазы митоза» (%) как отношение числа клеток в анафазе-телофазе к числу делящихся клеток, «уровень патологий митоза» как отношение числа клеток с нарушениями митоза к общему числу делящихся клеток (%), ядрышковые характеристики «уровень клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза» как отношение числа клеток с остаточными ядрышками к общему числу клеток на указанных стадиях (%) и «средняя площадь поверхности одиночных ядрышек» (мкм2), согласно изобретению, сбор семян производят от каждого материнского растения в отдельности, проводят анализ не менее 19 микропрепаратов и не менее 500 клеток каждого микропрепарата, «средняя площадь поверхности одиночных ядрышек» определяется по 200 клеткам на каждом микропрепарате, полученные значения цитогенетических показателей сравнивают со значениями для мутабильной или слабомутабильной групп, причем показатель «митотическая активность» относится к мутабильной группе при значении не более 8%, «доля клеток на стадии профазы митоза» - при значении свыше 45%, «доля клеток на стадии метафазы митоза» - при значении свыше 25%, «доля клеток на стадии анафазы-телофазы митоза» - при значении не более 30%, «уровень клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза» - при значении свыше 8%, «средняя площадь поверхности одиночных ядрышек» - при значении от 76 мкм2 и более, в противном случае показатели относятся к слабомутабильной группе; если более 3 показателей оказались в мутабильной группе, то и проросток относят к мутабильной группе, а если 3 и менее - то к слабомутабильной; если не менее половины проростков оказались в слабомутабильной группе, качество семян материнского растения оценивается как высокое, если менее половины - то как низкое.The technical result is achieved by the fact that in the method of evaluation by cytogenetic indicators of the quality of the seeds of Rhododendron ledebourii Pojark. to obtain seedlings with the best morphometric parameters, including the collection and germination of seeds of phenotypically healthy maternal plants Rhododendron ledebourii Pojark., the preparation of constantly-pressed micropreparations from the roots of each seedling 0.5-1 cm long, analysis of cytogenetic parameters of each micropreparation, such as mitotic activity "As the ratio of the number of dividing cells to the total number of counted cells (%)," the proportion of cells at the prophase stage of mitosis "(%) as the ratio of the number of cells in prophase to the number of dividing cells," to I of cells at the metaphase metaphase stage ”(%) as the ratio of the number of cells in the metaphase to the number of dividing cells,“ the proportion of cells at the anaphase-telophase stage of mitosis ”(%) as the ratio of the number of cells in the anaphase-telophase to the number of dividing cells,“ pathology level mitosis ”as the ratio of the number of cells with mitotic disorders to the total number of dividing cells (%), nucleolar characteristics“ the level of cells with residual nucleoli at the metaphase-telophase stage of mitosis ”as the ratio of the number of cells with residual nucleoli to the total number of cells at the indicated stages (%) and "environments the surface area of single nucleoli "(μm 2 ), according to the invention, the seeds are collected from each parent plant separately, analysis of at least 19 micropreparations and at least 500 cells of each micropreparation," the average surface area of single nucleoli "is determined by 200 cells per each micropreparation, the obtained values of cytogenetic indicators are compared with the values for the mutable or weakly stable groups, and the indicator "mitotic activity" refers to the mutable group at and not more than 8%, “the proportion of cells at the stage of mitosis prophase” - with a value of more than 45%, “the proportion of cells at the stage of mitosis metaphase” - with a value of more than 25%, “the proportion of cells at the stage of mitophilic anaphase-telophase” - with a value not more than 30%, "the level of cells with residual nucleoli at the metaphase-telophase stage of mitosis" - with a value of more than 8%, "the average surface area of single nucleoli" with a value of 76 μm 2 or more, otherwise the indicators belong to a weakly stable group; if more than 3 indicators were in the mutable group, then the seedling is also referred to as a mutable group, and if 3 or less - then to a weakly stable one; if at least half of the seedlings are in a weakly stable group, the quality of the seeds of the mother plant is assessed as high, if less than half - then as low.
В предлагаемом нами способе исследуется семенное потомство от индивидуального материнского растения и число исследуемых цитогенетических показателей, по которым адекватно оценивают уровень стабильности генетического материала проростков, уменьшено до 7, что значительно упрощает и ускоряет получение научных данных и позволяет внедрить результаты анализа в производство.In our proposed method, we study seed progeny from an individual mother plant and the number of cytogenetic indicators studied, which adequately assess the level of stability of the genetic material of seedlings, is reduced to 7, which greatly simplifies and speeds up the receipt of scientific data and allows you to introduce the results of the analysis into production.
Использование в качестве критериев оценки качества семян и отбора быстрорастущего семенного потомства Rhododendron ledebourii Pojark. цитогенетических характеристик позволяет оценивать стабильность генетического материала проростков и выделять материнские растения, продуцирующие сеянцы с лучшими морфометрическими показателями.The use of Rhododendron ledebourii Pojark as a criterion for assessing the quality of seeds and selecting fast-growing seed offspring. of cytogenetic characteristics allows us to evaluate the stability of the genetic material of seedlings and isolate mother plants producing seedlings with the best morphometric indicators.
В таблице 1 приведены критерии отнесения цитогенетических показателей семенного потомства Rhododendron ledebourii Pojark. к группам с разной стабильностью генетического материала.Table 1 shows the criteria for assigning cytogenetic indicators of seed offspring of Rhododendron ledebourii Pojark. to groups with different stability of the genetic material.
Также приведены таблицы 2 и 3 цитогенетических характеристик семенного потомства материнского растения Rhododendron ledebourii Pojark. №1 (продуцирующего цитогенетически стабильное семенное потомство) и материнского растения Rhododendron ledebourii Pojark. №2 (продуцирующего цитогенетически нестабильное семенное потомство), где № пр. - № препарата; МИ, % - митотический индекс; П, % - % клеток в стадии профазы; М, % - % клеток в стадии метафазы; А-Т, % - % клеток в стадии анафазы-телофазы; ПМ, % - уровень патологий митоза; ОЯ, % - уровень клеток с остаточными ядрышками; площадь - средняя площадь поверхности одиночных ядрышек, мкм2; № гр - № группы: 1 - мутабильная, 2 - слабомутабильная.Tables 2 and 3 of the cytogenetic characteristics of the seed progeny of the mother plant Rhododendron ledebourii Pojark are also shown. No. 1 (producing cytogenetically stable seed offspring) and the parent plant Rhododendron ledebourii Pojark. No. 2 (producing cytogenetically unstable seed offspring), where No. pr. - No. of the drug; MI,% - mitotic index; P,% -% of cells in the prophase stage; M,% -% of cells in the metaphase stage; AT,% -% of cells in the stage of anaphase-telophase; PM,% - level of mitosis pathologies; ОЯ,% - level of cells with residual nucleoli; area - the average surface area of single nucleoli, μm 2 ; No. gr - group number: 1 - mutable, 2 - weakly stable.
Приведена таблица 4 обобщенных цитогенетических характеристики семенного потомства Rhododendron ledebourii Pojark., где различия цитогенетических характеристик материнского растения 1 и 2 достоверны: ** Р<0,01; *** Р<0,001.Table 4 summarizes the cytogenetic characteristics of the seed offspring of Rhododendron ledebourii Pojark., Where the differences in the cytogenetic characteristics of the mother plant 1 and 2 are significant: ** P <0.01; *** P <0.001.
Приведена таблица 5 морфометрических показателей сеянцев материнских растений Rhododendron ledebourii Pojark., продуцирующих цитогенетически стабильное (экземпляр 1) и цитогенетически нестабильное (экземпляр 2) семенное потомство, причем 1-й замер производили в марте, через 2 месяца после посева, 2-й замер - в сентябре (через полгода после посева), 3-й замер - в сентябре следующего года (через полтора года после посева), а различия показателей сеянцев материнского растения 1 и 2 достоверны: * Р<0,05; ** Р<0,01.Table 5 shows the morphometric parameters of seedlings of mother plants Rhododendron ledebourii Pojark., Producing cytogenetically stable (instance 1) and cytogenetically unstable (instance 2) seed offspring, and the 1st measurement was made in March, 2 months after sowing, the 2nd measurement - in September (six months after sowing), the third measurement - in September of the following year (one and a half years after sowing), and the differences in the seedlings of the mother plant 1 and 2 are significant: * P <0.05; ** P <0.01.
Способ реализуется следующим образом.The method is implemented as follows.
Для цитогенетического исследования семенного потомства Rhododendron ledebourii Pojark. используют зрелые семена, собранные от каждого в отдельности фенотипически здорового материнского растения (без визуальных повреждений паразитами). Семена проращивают в чашках Петри при температуре +25°С. По достижении корешками длины 0,5-1 см их фиксируют в 9 часов утра в ацетоалкоголе - смеси 96% этилового спирта и ледяной уксусной кислоты (3:1), после чего материал хранят в холодильнике при температуре +4°С. Из корешков проростков готовят постоянно-давленные микропрепараты с использованием жидкости Гойера, описанный ранее (Вострикова Т.В. Изучение суточной митотической активности у березы повислой / Т.В. Вострикова, А.К. Буторина // Цитология. - 2004. - Т. 46. - №6. - С. 520-524).For cytogenetic studies of seed offspring of Rhododendron ledebourii Pojark. use mature seeds collected from each phenotypically healthy mother plant separately (without visual damage by parasites). Seeds germinate in Petri dishes at a temperature of + 25 ° C. When the roots reach a length of 0.5-1 cm, they are fixed at 9 o’clock in the morning in acetalcohol - a mixture of 96% ethyl alcohol and glacial acetic acid (3: 1), after which the material is stored in a refrigerator at a temperature of + 4 ° С. Constant-pressed micropreparations are prepared from rootlets of seedlings using the Goyer liquid described earlier (T.V. Vostrikova. Study of daily mitotic activity in birch bent / T.V. Vostrikova, A.K. Butorina // Cytology. - 2004. - T. 46. - No. 6. - S. 520-524).
Корешки проростков подвергают мацерации в 18% растворе НСl при 60°С в течение 1-2 минут. Затем промывают в растворе 45% уксусной кислоты 15 минут. Корешки окрашивают ацетогематоксилином в течение 1-1,5 часов, ополаскивают дистиллированной водой и готовят давленные микропрепараты с использованием жидкости Гойера по методике: 1) отделить кончик корешка проростка (1-3 мм) препаровальной иглой; 2) поместить его на предметное стекло в каплю жидкости Гойера; 3) накрыть покровным стеклом и слегка подогреть над пламенем спиртовки (для лучшего распределения клеток); 4) придавить кончик корешка, постукивая легкими ударами ручкой препаровальной иглы.Roots of seedlings are macerated in an 18% HCl solution at 60 ° C for 1-2 minutes. Then washed in a solution of 45% acetic acid for 15 minutes. The roots are stained with acetohematoxylin for 1-1.5 hours, rinsed with distilled water and pressure micropreparations are prepared using Goyer liquid according to the procedure: 1) separate the tip of the root of the seedling (1-3 mm) with a dissecting needle; 2) place it on a glass slide in a drop of Goyer's liquid; 3) cover with a coverslip and slightly warm over the flame of an alcohol lamp (for better distribution of cells); 4) to press the tip of the spine, tapping with light strokes with the handle of the dissecting needle.
Анализируют цитогенетические характеристики нечетного числа проростков семян от каждого экземпляра материнского растения, не менее 19. Препараты изучают с помощью микроскопа LABOVAL-4 (Carl Zeiss, Jena) при общем увеличении 40×1,5×10. В каждом микропрепарате (1 препарат соответствует 1 корешку и одному проростку) анализируют около 500-700 клеток.Analyze the cytogenetic characteristics of an odd number of seedlings from each instance of the mother plant, at least 19. The drugs are studied using a LABOVAL-4 microscope (Carl Zeiss, Jena) with a total magnification of 40 × 1.5 × 10. About 500-700 cells are analyzed in each micropreparation (1 preparation corresponds to 1 root and one seedling).
На микропрепаратах подсчитывают общее число клеток, число клеток на стадиях митоза: в профазе, метафазе, анафазе-телофазе; число клеток с нарушениями деления (число делящихся клеток с аберрациями); число клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза. Остаточные ядрышки выглядят как отдельные круглые или каплеобразные тельца, соединенные с хромосомами на стадии метафазы-анафазы митоза.On micropreparations, the total number of cells is counted, the number of cells at the stages of mitosis: in prophase, metaphase, anaphase-telophase; the number of cells with dysfunctions (the number of dividing cells with aberrations); the number of cells with residual nucleoli at the metaphase-telophase stage of mitosis. The residual nucleoli look like separate round or drop-shaped bodies connected to chromosomes at the metaphase-anaphase stage of mitosis.
Вычисляют следующие цитогенетические показатели: митотическую активность, показателем которой является митотический индекс - отношение числа делящихся клеток к общему числу подсчитанных клеток (в %), % клеток в профазе (отношение числа клеток в профазе к числу делящихся клеток), % клеток в метафазе (отношение числа клеток в метафазе к числу делящихся клеток), % клеток в анафазе-телофазе (отношение числа клеток в анафазе-телофазе к числу делящихся клеток), уровень патологий митоза (как отношение числа клеток с нарушениями митоза к общему числу делящихся клеток, в %), уровень клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза (как отношение числа клеток с остаточными ядрышками от общего числа клеток на указанных стадиях, в %). Классификацию патологических митозов проводят по И.А. Алову (Алов И.А. Цитофизиология и патология митоза. М.: Медицина, 1972. 264 с.). Для изучения ядрышковых характеристик в клетках корневой меристемы семенного потомства Rhododendron ledebourii Pojark. производят измерение диаметра одиночных ядрышек с помощью окулярмикрометра (анализируют по 200 клеток на каждом препарате) и высчитывают среднюю площадь поверхности одиночных ядрышек (в мкм2).The following cytogenetic indicators are calculated: mitotic activity, the indicator of which is the mitotic index - the ratio of the number of dividing cells to the total number of counted cells (in%),% of cells in prophase (ratio of the number of cells in prophase to the number of dividing cells),% of cells in metaphase (ratio the number of cells in metaphase to the number of dividing cells),% of cells in anaphase-telophase (the ratio of the number of cells in anaphase-telophase to the number of dividing cells), the level of mitosis pathologies (as the ratio of the number of cells with mitosis disorders to the total number dividing cells, in%), the level of cells with residual nucleoli at the metaphase-telophase stage of mitosis (as the ratio of the number of cells with residual nucleoli from the total number of cells at the indicated stages, in%). The classification of pathological mitoses is carried out according to I.A. Alov (Alov I.A. Cytophysiology and pathology of mitosis. M: Medicine, 1972.264 s.). To study the nucleolar characteristics in the cells of the root meristem of the seed progeny of Rhododendron ledebourii Pojark. they measure the diameter of single nucleoli using an ocular micrometer (analyze 200 cells on each preparation) and calculate the average surface area of single nucleoli (in μm 2 ).
Увеличение числа клеток в профазе свидетельствует о задержке клеток на данной стадии в связи с нарушениями митотического аппарата и работой системы checkpoint-контроля целостности генетического материала (Л.И. Лебедева, И.Н. Федорова С.А., Трунова С.А., Омелъянчук Л.В. Митоз. Регуляция и организация деления клеточного ядра // Генетика. - 2004. - т. 40. - №12. - С. 1589-1608). Однако иногда повышается число клеток на стадии метафазы. Увеличение числа клеток на стадии профазы и метафазы, согласно И.А. Алову, можно рассматривать как патологию митоза, связанную с хромосомными аберрациями, что говорит о повреждениях генетического материала и неспособности клеток перейти на следующую стадию митоза.An increase in the number of cells in prophase indicates a cell delay at this stage due to violations of the mitotic apparatus and the work of the checkpoint-control system for the integrity of genetic material (L.I. Lebedeva, I.N. Fedorova S.A., Trunova S.A., Omelyanchuk L.V. Mitosis, Regulation and organization of cell nucleus division // Genetics. - 2004. - V. 40. - No. 12. - P. 1589-1608). However, sometimes the number of cells in the metaphase stage increases. An increase in the number of cells at the prophase and metaphase stages, according to I.A. Alova can be considered as a pathology of mitosis associated with chromosomal aberrations, which indicates damage to the genetic material and the inability of cells to proceed to the next stage of mitosis.
В качестве критериев оценки качества семян используется совокупность цитогенетических характеристик (митотическая активность клеток (в %), число клеток на стадиях митоза (в %), уровень клеток с патологиями митоза (в %), уровень клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза (в %), площадь поверхности одиночных ядрышек (мкм2)) семенного потомства.A set of cytogenetic characteristics (mitotic cell activity (%), number of cells at the stages of mitosis (%), level of cells with mitotic pathologies (%), level of cells with residual nucleoli at the metaphase-telophase stage of mitosis is used as criteria for assessing the quality of seeds. (in%), surface area of single nucleoli (μm 2 )) of seed progeny.
Полученные цитогенетические показатели каждого проростка сравнивают со значениями, представленными в таблице 1, и относят проросток к мутабильной или слабомутабильной группе. Если по некоторым цитогенетическим показателям проросток можно отнести к одной группе, а по другим к другой, то проросток относят к мутабильной или слабомутабильной группе по большинству исследованных цитогенетических характеристик.The obtained cytogenetic parameters of each seedling are compared with the values presented in table 1, and the seedling is classified as a mutable or weakly stable group. If, according to some cytogenetic indicators, the seedling can be attributed to one group, and according to others to another, then the seedling is classified as a mutable or weakly stable group according to most of the studied cytogenetic characteristics.
Качество семян материнских растений оценивается по количеству мутабильных и слабомутабильных экземпляров у семенного потомства. При преобладании слабомутабильных проростков материнское растение относится к экземплярам, продуцирующим слабомутабильное потомство и проростки с лучшими морфометрическими показателями. Если большинство проростков относится к мутабильной группе, то материнский экземпляр можно считать продуцирующим мутабильное потомство и проростки с худшими морфометрическими показателями.The seed quality of maternal plants is estimated by the number of mutable and weakly stable specimens in seed offspring. With the prevalence of weakly stable seedlings, the mother plant belongs to the instances producing weakly stable offspring and seedlings with the best morphometric indices. If most seedlings belong to the mutable group, then the maternal specimen can be considered producing mutable offspring and seedlings with worse morphometric indices.
ПримерExample
Использовали зрелые семена Rhododendron ledebourii Pojark., собранные от каждого в отдельности фенотипически здорового материнского растения (без визуальных повреждений паразитами). Семена разделили на две части. Для цитогенетического исследования в чашках Петри при температуре +25°С проращивали одну часть семян. По достижении корешками длины 0,5-1 см их фиксировали в 9 часов утра в ацетоалкоголе - смеси 96% этилового спирта и ледяной уксусной кислоты (3:1), после чего материал хранили в холодильнике при температуре +4°С. Из корешков проростков готовили постоянно-давленные микропрепараты с использованием жидкости Гойера.Used mature seeds of Rhododendron ledebourii Pojark., Collected from each individually phenotypically healthy mother plant (without visual damage by parasites). Seeds were divided into two parts. For cytogenetic studies in Petri dishes at a temperature of + 25 ° C, one part of the seeds was germinated. When the roots reached a length of 0.5-1 cm, they were fixed at 9 a.m. in acetoalcohol - a mixture of 96% ethyl alcohol and glacial acetic acid (3: 1), after which the material was stored in a refrigerator at a temperature of + 4 ° С. Constant-pressed micropreparations using Goyer's fluid were prepared from the roots of seedlings.
Другую часть семян, собранных с каждого экземпляра анализируемых материнских растений, высевали в ящики с торфом в условиях закрытого грунта в трех повторностях по 100 штук (Доспехов Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований). - М.: Колос, 1979. - 416 с.) Морфометрические показатели сеянцев Rhododendron ledebourii Pojark. определяли в каждой повторности: 1-й замер производили в марте, через 2 месяца после посева, 2-й замер - в сентябре (через полгода после посева), 3-й замер - в сентябре следующего года (через полтора года после посева). Длину корня, высоту побега измеряли с помощью линейки. Число листьев считается наиболее объективным признаком степени развития растения, поэтому этот показатель учитывается как основной морфометрический критерий оценки ростовой активности сеянцев.Another part of the seeds collected from each instance of the analyzed mother plants was sown in boxes of peat in closed ground in triplicate in 100 pieces each (Dospekhov B.A. Field experiment methodology (with the basics of statistical processing of research results). - M .: Kolos , 1979. - 416 p.) Morphometric indicators of seedlings Rhododendron ledebourii Pojark. determined in each repetition: the first measurement was made in March, 2 months after sowing, the second measurement was in September (six months after sowing), the third measurement was in September of the following year (one and a half years after sowing). The root length, shoot height was measured using a ruler. The number of leaves is considered the most objective sign of the degree of plant development, therefore this indicator is taken into account as the main morphometric criterion for assessing the growth activity of seedlings.
Проводили компьютерную статистическую обработку данных с помощью пакета программ "Stadia". Процедура группировки данных и их обработка изложены в работе А.П. Кулаичева, Методы и средства комплексного анализа данных (А.П. Кулаичев. - М.: ФОРУМ: ИНФА-М, 2006. - 512 с.). Сравнение выборок по уровню патологий митоза и уровню клеток с остаточными ядрышками проводили с использованием Х-критерия рангов Ван-дер-Вардена, так как данный признак не подчиняется нормальному распределению. Сравнение выборок по остальным цитогенетическим и по каждому морфометрическому показателю производили по t-критерию Стьюдента.We performed computer statistical data processing using the Stadia software package. The procedure for grouping data and their processing are described in the work of A.P. Kulaicheva, Methods and means of complex data analysis (A.P. Kulaichev. - M.: FORUM: INFA-M, 2006. - 512 p.). Comparison of samples according to the level of mitosis pathologies and the level of cells with residual nucleoli was carried out using the X-criterion of van der Waerden ranks, since this trait does not obey the normal distribution. Comparison of the samples for the rest of the cytogenetic and for each morphometric indicator was performed according to the Student t-test.
Результаты анализа цитогенетических характеристик семенного потомства материнских растений представили в виде таблицы (табл. 2-3).The results of the analysis of the cytogenetic characteristics of the seed offspring of the mother plants were presented in table form (tab. 2-3).
В соответствии со значениями цитогенетических показателей, указанными в таблице 1, семенное потомство тестируемых материнских растений было разделено на две группы: мутабильную и слабомутабильную. Однако не во всех случаях цитогенетические показатели проростков строго соответствовали определенной группе. Например, проростки №2, 3, 7, 8, 11, 12, 13 материнского экземпляра №1 имели низкий митотический индекс и высокий % клеток в стадии профазы, как в мутабильной группе (табл. 1). Остальные характеристики данных проростков соответствовали слабомутабильной группе, поэтому по большинству цитогенетических показателей их относили к слабомутабильной группе.In accordance with the values of cytogenetic indicators indicated in Table 1, the seed progeny of the tested mother plants were divided into two groups: mutable and weakly stable. However, not in all cases the cytogenetic parameters of the seedlings strictly corresponded to a certain group. For example, seedlings No. 2, 3, 7, 8, 11, 12, 13 of the maternal specimen No. 1 had a low mitotic index and a high% of cells in the prophase stage, as in the mutable group (Table 1). The remaining characteristics of these seedlings corresponded to a weakly stable group; therefore, according to most cytogenetic parameters, they were assigned to a weakly stable group.
Все проростки материнского экземпляра 1 соответствовали слабомутабильной группе, проростки материнского экземпляра 2 относились к мутабильной группе.All seedlings of maternal instance 1 corresponded to a weakly stable group, and seedlings of maternal instance 2 belonged to a mutable group.
Анализируя результаты исследования цитогенетических характеристик Rh. ledebourii, авторами установлено, что многие из них различались у семенного потомства материнских растений (табл. 4). Анализ цитогенетических характеристик семенного потомства материнского растения 1 показал, что оно обладает более высоким уровнем стабильности генетического материала: высоким митотическим индексом, меньшим числом клеток в профазе, большим числом клеток в анафазе-телофазе, низким уровнем патологий митоза и уровнем клеток с остаточными ядрышками на стадии метафазы-телофазы митоза, меньшей площадью поверхности одиночных ядрышек.Analyzing the results of a study of the cytogenetic characteristics of Rh. ledebourii, the authors found that many of them differed in the seed offspring of maternal plants (Table 4). An analysis of the cytogenetic characteristics of the seed progeny of the mother plant 1 showed that it has a higher level of stability of the genetic material: a high mitotic index, fewer cells in prophase, a large number of cells in anaphase-telophase, a low level of mitosis pathologies and a level of cells with residual nucleoli at the stage metaphase-telophase mitosis, a smaller surface area of single nucleoli.
Таким образом, на основании исследования цитогенетических характеристик семенного потомства Rh. ledebourii можно отметить, что более материнское растение (экземпляр 1) продуцирует семенное потомство с высокой стабильностью генетического материала. Материнское растение (экземпляр 2) продуцирует семенное потомство с низкой стабильностью генетического материала.Thus, based on a study of the cytogenetic characteristics of the seed offspring of Rh. ledebourii it can be noted that a more maternal plant (instance 1) produces seed offspring with high stability of genetic material. The mother plant (instance 2) produces seed offspring with low stability of the genetic material.
Все морфометрические характеристики сеянцев от материнского растения (экземпляр 1), продуцирующего цитогенетически стабильное семенное потомство, были выше, чем у сеянцев, выращенных из семян материнского растения (экземпляр 2), продуцирующего цитогенетически нестабильное семенное потомство (различия достоверны, Р<0,05; Р<0,01; табл. 5).All morphometric characteristics of seedlings from the mother plant (instance 1) producing cytogenetically stable seed offspring were higher than those of seedlings grown from seeds of the mother plant (instance 1) producing cytogenetically unstable seed offspring (significant differences, P <0.05; P <0.01; table 5).
Таким образом, применение цитогенетического метода оценки качества семян позволяет выявлять материнские растения, продуцирующие семенное потомство с лучшими морфометрическими показателями. Оценку качества семян по цитогенетическим показателям рекомендуется использовать в селекции древесных растений.Thus, the use of the cytogenetic method for assessing seed quality allows the identification of maternal plants producing seed offspring with the best morphometric indicators. Assessment of seed quality by cytogenetic indicators is recommended for use in breeding of woody plants.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016140096A RU2654605C2 (en) | 2016-10-11 | 2016-10-11 | Assessment method for cytogenetic indexes of rhododendron ledebourii pojark seed quality |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016140096A RU2654605C2 (en) | 2016-10-11 | 2016-10-11 | Assessment method for cytogenetic indexes of rhododendron ledebourii pojark seed quality |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016140096A RU2016140096A (en) | 2018-04-13 |
| RU2654605C2 true RU2654605C2 (en) | 2018-05-21 |
Family
ID=61974498
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016140096A RU2654605C2 (en) | 2016-10-11 | 2016-10-11 | Assessment method for cytogenetic indexes of rhododendron ledebourii pojark seed quality |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2654605C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2716112C1 (en) * | 2019-05-22 | 2020-03-05 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") | Method for selection of betula pendula maternal trees producing seed offspring with different germination and stability of genetic material of somatic cells, according to biochemical parameters |
-
2016
- 2016-10-11 RU RU2016140096A patent/RU2654605C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| АРТЮХОВ В.Г., и др., Цитогенетический полиморфизм семенного потомства деревьев березы повислой (Betula pendula roth), произрастающих в различных экологических условиях, Экологическая генетика, том VII, N 1, 2009, с.30-40. * |
| АРТЮХОВ В.Г., и др., Цитогенетический полиморфизм семенного потомства деревьев березы повислой (Betula pendula roth), произрастающих в различных экологических условиях, Экологическая генетика, том VII, N 1, 2009, с.30-40. МАШКИНА О.С., и др., Цитогенетические реакции семенного потомства сосны обыкновенной на комбинированное антропогенное загрязнение в районе новолипецкого металлургического комбината, Экологическая генетика, том VII, N 3, 2009, с.17-29. КАЛАЕВ В.Н., и др., Цитогенетические характеристики и морфологические показатели семенного потомства деревьев дуба черешчатого (Quercus robur L.), произрастающих на территориях с разным уровнем антропогенного загрязнения, Вестник ВГУ, серия: химия, биология, фармация. * |
| КАЛАЕВ В.Н., и др., Цитогенетические характеристики и морфологические показатели семенного потомства деревьев дуба черешчатого (Quercus robur L.), произрастающих на территориях с разным уровнем антропогенного загрязнения, Вестник ВГУ, серия: химия, биология, фармация. * |
| МАШКИНА О.С., и др., Цитогенетические реакции семенного потомства сосны обыкновенной на комбинированное антропогенное загрязнение в районе новолипецкого металлургического комбината, Экологическая генетика, том VII, N 3, 2009, с.17-29. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2716112C1 (en) * | 2019-05-22 | 2020-03-05 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") | Method for selection of betula pendula maternal trees producing seed offspring with different germination and stability of genetic material of somatic cells, according to biochemical parameters |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016140096A (en) | 2018-04-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wilson | Quinua biosystematics I: domesticated populations | |
| CN102187774A (en) | System for identifying and evaluating seedling resistance of malus | |
| Tosun et al. | Investigations of suitable pollinator for 0900 Ziraat sweet cherry cv.: pollen performance tests, germination tests, germination procedures, in vitro and in vivo pollinations | |
| Amanov et al. | Dependence of Growth Period, Yield Elements and Grain Quality of Winter Bread Wheat Varieties and Lines on Different Soil and Climate Conditions. | |
| Yavar | Suitable in vitro medium for studying pollen viability in some of the Iranian hawthorn genotypes | |
| Ferrara et al. | Production of total and stainable pollen grains in Olea europaea L | |
| RU2654605C2 (en) | Assessment method for cytogenetic indexes of rhododendron ledebourii pojark seed quality | |
| Glišić et al. | Examination of self-compatibility in promising plum (Prunus domestica L.) genotypes developed at the Fruit Research Institute, Čačak | |
| RU2662650C2 (en) | Method of selection of parent plants rhododendron ledebourii pojark., producing seed progeny with different levels of stability of the genetic material | |
| Candan | Some observations on plant karyology and investigation methods | |
| Koyuncu et al. | Evaluation of pollen viability and germination capacity of some sweet cherry cultivars grown in Isparta, Turkey | |
| RU2715644C1 (en) | Method for selection of betula pendula maternal plants producing seed offspring with different somatic cell genetic material stability, by level of fluctuating asymmetry of the leaf plate | |
| RU2681105C1 (en) | Producing seed progeny with the genetic material different stability levels and the best morphometric parameters picea pungens engelm. mother plants selection method | |
| Zarchi et al. | Supernumerary chromosomes and chiasma distribution in Triticum speltoides | |
| RU2716112C1 (en) | Method for selection of betula pendula maternal trees producing seed offspring with different germination and stability of genetic material of somatic cells, according to biochemical parameters | |
| Vaknin et al. | Pollen production and pollen viability in male jojoba plants | |
| Pagalla et al. | Induction of microspore embryogenesis of eggplant (Solanum melongena L.)‘Gelatik’ | |
| Kalpani et al. | Selection of superior genotypes at early stage of the rubber (Hevea brasiliensis) breeding cycle | |
| Ladner et al. | Polyploidy and Genome Size Variation in Phlox nana (Polemoniaceae) from the Pecos Plains of New Mexico and the Davis Mountains of West Texas, USA | |
| Gharabi et al. | Morphological and biochemical behavior of the olive tree in semi-arid areas of Algeria. | |
| Korunoska et al. | EXAMINING THE STATUS CYTOGENETIC ON SOME AUTOCHTHONOUS VARIETIES A GRAPEVINE IN R. MACEDONIA ACCORDING OIV SYSTEM | |
| Arockiasamy et al. | Anther culture in Jatropha curcas L.: a tree species | |
| Aabd et al. | Study of compatibility and determination of the suitable pollinizer for Argane tree (Argania spinosa L.) | |
| Vostrikova et al. | Cytogenetic Characteristics of Seed Seedlings of Rhododendron ledebourii, Introduced in the Botanical Garden of Voronezh State University | |
| Sedel’nikova et al. | Karyological Study of an Isolated Scots Pine (Pinus sylvestris) Population in Shirinskaya Steppe of the Republic of Khakassia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191012 |