RU2654591C2 - Способ и среда для снижения содержания селена в биомассе после ферментации содержащих со газообразных субстратов - Google Patents
Способ и среда для снижения содержания селена в биомассе после ферментации содержащих со газообразных субстратов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2654591C2 RU2654591C2 RU2015154789A RU2015154789A RU2654591C2 RU 2654591 C2 RU2654591 C2 RU 2654591C2 RU 2015154789 A RU2015154789 A RU 2015154789A RU 2015154789 A RU2015154789 A RU 2015154789A RU 2654591 C2 RU2654591 C2 RU 2654591C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- clostridium
- another aspect
- fermentation
- cells
- ppm
- Prior art date
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 52
- 239000011669 selenium Substances 0.000 title claims abstract description 52
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 50
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- 239000000758 substrate Substances 0.000 title claims abstract description 39
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 32
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 93
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 8
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 54
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 20
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 20
- 241001656809 Clostridium autoethanogenum Species 0.000 claims description 15
- 241000186566 Clostridium ljungdahlii Species 0.000 claims description 11
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 claims description 6
- 230000000789 acetogenic effect Effects 0.000 claims description 5
- 241001464894 Blautia producta Species 0.000 claims description 4
- 241001534860 Alkalibaculum bacchi Species 0.000 claims description 3
- 102100031476 Cytochrome P450 1A1 Human genes 0.000 claims description 3
- 101000941690 Homo sapiens Cytochrome P450 1A1 Proteins 0.000 claims description 3
- 241000204649 Thermoanaerobacter kivui Species 0.000 claims description 3
- 241001223493 Acetoanaerobium noterae Species 0.000 claims description 2
- 241001468163 Acetobacterium woodii Species 0.000 claims description 2
- 241001451494 Clostridium carboxidivorans P7 Species 0.000 claims description 2
- 241001171821 Clostridium coskatii Species 0.000 claims description 2
- 241000328950 Clostridium drakei Species 0.000 claims description 2
- 241001256038 Clostridium ljungdahlii DSM 13528 Species 0.000 claims description 2
- 241001468167 Clostridium magnum Species 0.000 claims description 2
- 241000193469 Clostridium pasteurianum Species 0.000 claims description 2
- 241000186587 Clostridium scatologenes Species 0.000 claims description 2
- 102100030787 ERI1 exoribonuclease 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 241000186398 Eubacterium limosum Species 0.000 claims description 2
- 241001494297 Geobacter sulfurreducens Species 0.000 claims description 2
- 101000938751 Homo sapiens ERI1 exoribonuclease 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 241000205284 Methanosarcina acetivorans Species 0.000 claims description 2
- 241000205275 Methanosarcina barkeri Species 0.000 claims description 2
- 229940082569 selenite Drugs 0.000 claims description 2
- MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-L selenite(2-) Chemical compound [O-][Se]([O-])=O MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 241000193401 Clostridium acetobutylicum Species 0.000 claims 2
- 241000620137 Carboxydothermus hydrogenoformans Species 0.000 claims 1
- 241001656810 Clostridium aceticum Species 0.000 claims 1
- 241000592830 Desulfotomaculum kuznetsovii Species 0.000 claims 1
- 241000193459 Moorella thermoacetica Species 0.000 claims 1
- 241000191758 [Clostridium] ultunense Species 0.000 claims 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 76
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 75
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 37
- 229940091258 selenium supplement Drugs 0.000 description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 18
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 239000000306 component Substances 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 11
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 9
- 238000002309 gasification Methods 0.000 description 8
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N acetyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N 0.000 description 6
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000009616 inductively coupled plasma Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 4
- BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L disodium selenite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Se]([O-])=O BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 239000011781 sodium selenite Substances 0.000 description 4
- 229960001471 sodium selenite Drugs 0.000 description 4
- 235000015921 sodium selenite Nutrition 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 3
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 3
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003546 flue gas Substances 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N tungsten Chemical compound [W] WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010937 tungsten Substances 0.000 description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- ZNOVTXRBGFNYRX-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-[(2-amino-5-methyl-4-oxo-1,6,7,8-tetrahydropteridin-6-yl)methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 ZNOVTXRBGFNYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000698 Formate Dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000178985 Moorella Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 2
- 239000000571 coke Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- -1 for example Substances 0.000 description 2
- 239000010795 gaseous waste Substances 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N glycine betaine Chemical compound C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- HYHCSLBZRBJJCH-UHFFFAOYSA-M sodium hydrosulfide Chemical compound [Na+].[SH-] HYHCSLBZRBJJCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 2
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 2
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TZBGSHAFWLGWBO-ABLWVSNPSA-N (2s)-2-[[4-[(2-amino-4-oxo-5,6,7,8-tetrahydro-1h-pteridin-6-yl)methylamino]benzoyl]amino]-5-methoxy-5-oxopentanoic acid Chemical compound C1=CC(C(=O)N[C@@H](CCC(=O)OC)C(O)=O)=CC=C1NCC1NC(C(=O)NC(N)=N2)=C2NC1 TZBGSHAFWLGWBO-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QYNUQALWYRSVHF-ABLWVSNPSA-N 5,10-methylenetetrahydrofolic acid Chemical compound C1N2C=3C(=O)NC(N)=NC=3NCC2CN1C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 QYNUQALWYRSVHF-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000008170 Aldehyde Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000620141 Carboxydothermus Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241001112696 Clostridia Species 0.000 description 1
- 241001611022 Clostridium carboxidivorans Species 0.000 description 1
- 241001611023 Clostridium ragsdalei Species 0.000 description 1
- 229910021583 Cobalt(III) fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- 108010074122 Ferredoxins Proteins 0.000 description 1
- 102000002686 Formate-Tetrahydrofolate Ligase Human genes 0.000 description 1
- 108010080982 Formate-tetrahydrofolate ligase Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010020056 Hydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021586 Nickel(II) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 241001509483 Oxobacter pfennigii Species 0.000 description 1
- 101710182361 Pyruvate:ferredoxin oxidoreductase Proteins 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940008201 allegra Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001651 autotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 239000002551 biofuel Substances 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- OWBTYPJTUOEWEK-UHFFFAOYSA-N butane-2,3-diol Chemical compound CC(O)C(C)O OWBTYPJTUOEWEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 108010031234 carbon monoxide dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000003575 carbonaceous material Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- AVWLPUQJODERGA-UHFFFAOYSA-L cobalt(2+);diiodide Chemical compound [Co+2].[I-].[I-] AVWLPUQJODERGA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BZRRQSJJPUGBAA-UHFFFAOYSA-L cobalt(ii) bromide Chemical compound Br[Co]Br BZRRQSJJPUGBAA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- YCYBZKSMUPTWEE-UHFFFAOYSA-L cobalt(ii) fluoride Chemical compound F[Co]F YCYBZKSMUPTWEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- AAQNGTNRWPXMPB-UHFFFAOYSA-N dipotassium;dioxido(dioxo)tungsten Chemical compound [K+].[K+].[O-][W]([O-])(=O)=O AAQNGTNRWPXMPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N fexofenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 1
- 238000004868 gas analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002440 industrial waste Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 101150044508 key gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 description 1
- GVALZJMUIHGIMD-UHFFFAOYSA-H magnesium phosphate Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[Mg+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O GVALZJMUIHGIMD-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000004137 magnesium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229960002261 magnesium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000157 magnesium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010994 magnesium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000010907 mechanical stirring Methods 0.000 description 1
- 238000011177 media preparation Methods 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- AHEWZZJEDQVLOP-UHFFFAOYSA-N monobromobimane Chemical compound BrCC1=C(C)C(=O)N2N1C(C)=C(C)C2=O AHEWZZJEDQVLOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003345 natural gas Substances 0.000 description 1
- QMMRZOWCJAIUJA-UHFFFAOYSA-L nickel dichloride Chemical compound Cl[Ni]Cl QMMRZOWCJAIUJA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LGQLOGILCSXPEA-UHFFFAOYSA-L nickel sulfate Chemical compound [Ni+2].[O-]S([O-])(=O)=O LGQLOGILCSXPEA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000363 nickel(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- KBJMLQFLOWQJNF-UHFFFAOYSA-N nickel(ii) nitrate Chemical compound [Ni+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O KBJMLQFLOWQJNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003342 selenium Chemical class 0.000 description 1
- 230000009919 sequestration Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910052979 sodium sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N sodium sulfide (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[S-2] GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N sodium tungstate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][W]([O-])(=O)=O XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004071 soot Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 238000000629 steam reforming Methods 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- PBYZMCDFOULPGH-UHFFFAOYSA-N tungstate Chemical compound [O-][W]([O-])(=O)=O PBYZMCDFOULPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
- C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
- C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
- C12P7/065—Ethanol, i.e. non-beverage with microorganisms other than yeasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/145—Clostridium
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ снижения содержания селена в биомассе после ферментации содержащего СО газообразного субстрата. Способ включает ферментацию СО содержащего газообразного субстрата ацетогенными бактериями, причем ферментационная среда содержит менее 1 ppm селена, от 112 до 125 мг азота на грамм клеток, от 10,5 до 15 мг фосфора на грамм клеток, от 26 до 36 мг калия на грамм клеток. Способ обеспечивает объемную производительность по этанолу и снижение содержания селена в клеточной биомассе после ферментации. 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 9 табл., 5 пр.
Description
По настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на патент США №61/857044, поданной 22 июля 2013 г., которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.
Область техники
Предусмотрены способы и среды для снижения содержания селена в биомассе, полученной после ферментации содержащих СО газообразных субстратов. Более конкретно, предусмотрены способы и среды, которые эффективны для снижения содержания селена в биомассе после ферментации при сохранении высокого уровня производительности по этанолу.
Уровень техники
Процессы ферментации происходят в определенных жидких средах. Эти среды будут, как правило, содержать различные макро- и микроисточники питательных веществ, которые важны для улучшения продуктивности ферментации. Среды, используемые в связи с менее распространенными субстратами, такими как газообразные субстраты, требуют четко определенных сред для оптимизации производительности. Анаэробные процессы ферментации также требуют хорошо определенных сред.
Анаэробные микроорганизмы могут производить этанол из монооксида углерода (СО) путем ферментации газообразных субстратов. Ферментации с использованием анаэробных микроорганизмов из рода Clostridium производят этанол и другие полезные продукты. Например, в патенте США №5173429 описан Clostridium ljungdahlii АТСС №49587, анаэробный микроорганизм, который производит этанол и ацетат из газа для химического синтеза. В патенте США №5807722 описан способ и устройство для преобразования газообразных отходов в органические кислоты и спирты с использованием Clostridium ljungdahlii АТСС №55380. В патенте США №6136577 описан способ и устройство для преобразования газообразных отходов в этанол с использованием Clostridium ljungdahlii АТСС №55988 и 55989.
В патенте США №7285402 описаны среды, известные для использования в анаэробной ферментации газообразных субстратов для получения этанола. Различные компоненты и концентрации компонентов в среде эффективны для обеспечения высокого уровня производительности по этанолу. Устранение некоторых компонентов и уменьшение требуемых концентрационных уровней других компонентов при сохранении производительности по этанолу может обеспечить значительную экономию средств, особенно в промышленном масштабе ферментации.
Путь Вуда-Люнгдала хорошо известен в настоящей области техники и включает в себя реакции, которые могут быть разделены на две части: (1) метиловая часть и (2) карбонильная часть. Метиловая часть преобразует синтез-газ в метилтетрагидрофолат (метил-ТГФ), тогда как карбонильная часть преобразует метил-ТГФ в ацетил-КоА. Ацетил-КоА может затем быть преобразован в этанол. Ферменты катализируют реакции в пути Вуда-Люнгдала и эти ферменты требуют различных элементов для оптимальной функциональности. Например, формиатдегидрогеназа, важный фермент в пути Вуда-Люнгдала, требует наличия селена для оптимальной активности.
Сущность изобретения
Способ ферментации синтез-газа и среда ферментации обеспечивает высокую производительность по этанолу при удалении компонентов среды, которые ранее считались необходимыми. Удаление некоторых компонентов среды и снижение концентраций других компонентов среды обеспечивает значительную экономию эксплуатационных затрат в коммерческом масштабе.
Способ снижения содержания селена в клеточной биомассе после ферментации содержащего СО газообразного субстрата включает ферментацию содержащего СО газообразного субстрата в ферментационной среде. Способ эффективно обеспечивает специфическую объемную производительность, составляющую по меньшей мере приблизительно 1 г этанола/(л ⋅ день ⋅ грамм клеток), и содержание селена в клеточной биомассе, выходящей после ферментации, составляющее приблизительно 1 ppm или менее.
Способ ферментации содержащего СО газообразного субстрата включает ферментацию содержащего СО газообразного субстрата в ферментационной среде, содержащей менее чем приблизительно 1 ppm селена. Способ эффективно обеспечивает специфическую объемную производительность, составляющую по меньшей мере приблизительно 1 г этанола/(л ⋅ день ⋅ грамм клеток).
Ферментационная среда содержит по меньшей мере приблизительно 112 мг азота на грамм клеток, по меньшей мере приблизительно 10,5 мг фосфора на грамм клеток или по меньшей мере приблизительно 26 мг калия на грамм клеток. Ферментационная среда содержит менее чем приблизительно 1,04 ppm бора, менее чем приблизительно 0,16 ppm марганца, менее чем приблизительно 0,26 ppm молибдена, менее чем приблизительно 1 ppm селена или менее чем приблизительно 0,16 ppm меди.
Краткое описание чертежей
Вышеуказанные и другие аспекты, особенности и другие преимущества нескольких аспектов способа будут более очевидны из следующих чертежей.
На фиг. 1 показаны конверсии газов и плотность клеток после внесения Clostridium ljungdahlii С-01 в среду, не содержащую селен.
На фиг. 2 показаны конверсии газов и плотность клеток после внесения Clostridium ljungdahlii С-01 в среду, содержащую селен.
На фиг. 3 показано сравнение между кривыми роста культур С.autoethanogenum, выращенных в культуральных пробирках со средой, содержащей и не содержащей селен.
Подробное описание изобретения
Последующее описание не следует рассматривать в ограничительном смысле, оно приводится только с целью характеристики общих принципов иллюстративных аспектов. Объем настоящего изобретения определяется на основании формулы настоящего изобретения.
Предусмотрены способ и состав среды, которые удивительно и неожиданно обеспечивают высокий уровень производительности по этанолу даже после удаления или уменьшения концентрации селена, который раньше считался необходимым или требуемым в определенных концентрациях.
Ферментацию синтез-газа проводили в биореакторах с описанными в настоящем документе средой и ацетогенными бактериями, которые эффективно обеспечивают конверсию СО в синтез-газе в спирты и другие продукты. Согласно этому аспекту производительность может быть выражена как STY (объемная производительность, выраженная как г общего спирта/(л ⋅ день). Согласно этому аспекту способ эффективно обеспечивает STY (объемную производительность), составляющую по меньшей мере приблизительно 10 г или более общего спирта/(л ⋅ день). Возможные значения STY включают в себя от приблизительно 10 г общего спирта/(л ⋅ день) до приблизительно 200 г общего спирта/(л ⋅ день), согласно другому аспекту от приблизительно 10 г общего спирта/(L ⋅ день) до приблизительно 160 г общего спирта/(л ⋅ день), согласно другому аспекту от приблизительно 10 г общего спирта/(л ⋅ день) до приблизительно 120 г общего спирта/(л ⋅ день), согласно другому аспекту от приблизительно 10 г общего спирта/(л ⋅ день) до приблизительно 80 г общего спирта/(л ⋅ день), согласно другому аспекту от приблизительно 20 г общего спирта/(л ⋅ день) до приблизительно 140 г общего спирта/(л ⋅ день), согласно другому аспекту от приблизительно 20 г общего спирт/(л ⋅ день) до приблизительно 100 г общего спирта/(л ⋅ день), согласно другому аспекту от приблизительно 40 г общего спирта/(л ⋅ день) до приблизительно 140 г общего спирта/(л ⋅ день) и согласно другому аспекту от приблизительно 40 г общего спирта/(л ⋅ день) до приблизительно 100 г общего спирта/(л ⋅ день).
Определения
Если не указано иное, следующие термины, используемые в настоящем описании для настоящего изобретения, определяются следующим образом и могут включать формы либо единственного, либо множественного числа определенных ниже определений.
Термин "приблизительно", модифицирующий любое количество, относится к изменению в количестве, встречающемуся в реальных условиях, например, в лаборатории, на опытном заводе или производственном объекте. Например, количество ингредиента или измерение, используемое в смеси, или количество при модификации с помощью "приблизительно", включает изменение и степень, обычно используемую в измерении в экспериментальных условиях в производственной установке или лаборатории. Например, количество компонента продукта при модификации с помощью "приблизительно" включает изменение между партиями в нескольких экспериментах на заводе или в лаборатории и вариацию, присущую аналитическому способу. При наличии модификации или без нее с помощью "приблизительно" количества включают эквиваленты этих сумм. Любая величина, указанная в настоящем документе и модифицированная с помощью "приблизительно", может быть также использована в настоящем изобретении, так как количество не модифицировано с помощью "приблизительно".
Термин "газообразный субстрат" используется в неограничивающем смысле, чтобы включить в себя субстраты, содержащие или полученные из одного или нескольких газов.
Термин "синтез-газ" или "синтетический газ" означает газ для химического синтеза, который представляет собой название, данное газовой смеси, содержащей различные количества монооксида углерода и водорода. Примеры способов производства включают паровой риформинг природного газа или углеводородов для получения водорода, газификацию угля, а в некоторых видах установки газификации отходов в энергию. Название происходит от их использования в качестве промежуточных соединений в создании синтетического природного газа (SNG) и для получения аммиака или метанола. Синтез-газ представляет собой горючий и часто используется в качестве источника топлива или в качестве промежуточного продукта для производства других химических веществ.
Термин "ферментер" включает устройство ферментации, состоящее из одного или нескольких расположенных определенным образом сосудов и/или башен или трубопроводов, которые включают в себя непрерывный реактор с мешалкой (CSTR), иммобилизованный клеточный реактор (ICR), реактор с орошаемым слоем (TBR), биопленочный реактор с плавающей загрузкой (MBBR), барботажную колонку, газлифтный ферментер, мембранный реактор, такой как биореактор с системой полых волокон (HFMBR), статический смеситель или другой сосуд или другое устройство, подходящее для контакта газ-жидкость.
Термины "ферментация", "способ ферментации" или "реакция ферментации" и т.п. предназначены для охвата, как фазы роста, так и фазы биосинтеза продукта способа. Согласно одному аспекту ферментация относится к конверсии СО в спирт.
Термин "плотность клеток" означает массу клеток микроорганизмов на единицу объема ферментационного бульона, например, г/л.
Термин "повышение эффективности", "повышенная эффективность" и т.п. при использовании в отношении способа ферментации включает увеличение одного или нескольких из следующего: скорость роста микроорганизмов при ферментации, объем или масса требуемого продукта (такого как спирты), полученного на потребленную единицу объема или массу субстрата (такого как окись углерода), скорость производства или уровень производства требуемого продукта и относительная доля полученного желательного продукта по сравнению с другими побочными продуктами ферментации.
Используемый в настоящем документе термин "общий спирт" включает этанол, бутанол, пропанол и метанол. Согласно одному аспекту общий спирт может содержать по меньшей мере приблизительно 75 массовых процентов или более этанола, согласно другому аспекту приблизительно 80 массовых процентов или более этанола, согласно другому аспекту приблизительно 85 массовых процентов или более этанола, согласно другому аспекту приблизительно 90 массовых процентов или более этанола и согласно другому аспекту приблизительно 95 массовых процентов или более этанола. Согласно другому аспекту общий спирт может включать в себя приблизительно 25 массовых процентов или менее бутанола.
Термин "специфическое поглощение СО" означает количество СО в ммоль, потребляемых единицей массы клеток микроорганизмов (г) за единицу времени в минуты, т.е. ммоль/г/мин.
Содержащий СО субстрат
Содержащий СО субстрат может содержать любой газ, который содержит СО. Согласно этому аспекту содержащий СО газ может включать синтез-газы, промышленные газы и их смеси.
Синтез-газ может быть получен из любого известного источника. Согласно одному аспекту синтез-газ может быть получен путем газификации углеродсодержащих материалов. Газификация включает частичное сжигание биомассы в ограниченном доступе кислорода. Полученный газ в основном содержит СО и Н2. Согласно этому аспекту синтез-газ будет содержать по меньшей мере приблизительно 10 мольных % СО, согласно одному аспекту по меньшей мере приблизительно 20 мольных %, согласно одному аспекту приблизительно от 10 до 100 мольных %, согласно другому аспекту приблизительно от 20 до 100 мольных % СО, согласно другому аспекту от приблизительно 30 до приблизительно 90 мольных % СО, согласно другому аспекту от приблизительно 40 до приблизительно 80 мольных % СО и согласно другому аспекту приблизительно от 50 до 70 мольных % СО. Некоторые примеры подходящих способов и устройство газификации предусмотрены в патентах США с серийными номерами 61/516667, 61/516704 и 61/516646, каждый из которых был подан 6 апреля 2011 г., и в патентах США с серийными номерами 13/427144, 13/427193 и 13/427247, каждый из которых был подан 22 марта 2012 г., и каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки.
Согласно другому аспекту способ характеризуется применением для поддержания производства спирта из газообразных субстратов, таких как большие объемы содержащих СО промышленных дымовых газов. Согласно некоторым аспектам газ, который содержит СО, получают из углеродсодержащих отходов, например, промышленных отходов газов или газификацией других отходов. Таким образом, процессы представляют собой эффективные процессы для захвата углерода, которые иначе должны были быть выделены в окружающую среду. Примеры промышленных дымовых газов включают в себя газы, произведенные в ходе производства продуктов из черных металлов, производства продуктов из цветных металлов, процессов переработки нефти, газификации угля, газификации биомассы, производства электроэнергии, производства сажи, производства аммиака, метанола и производства производственного кокса.
В зависимости от состава содержащего СО субстрата содержащий СО субстрат может быть предусмотрен непосредственно в способе ферментации или может быть дополнительно модифицирован, чтобы включать соответствующее молярное отношение Н2 к СО. Согласно одному аспекту содержащий СО субстрат, помещенный в ферментер, характеризуется молярным отношением Н2 к СО, составляющим приблизительно 0,2 или более, согласно другому аспекту 0,25 или более и согласно другому аспекту приблизительно 0,5 или более. Согласно другому аспекту содержащий СО субстрат, помещенный в ферментер, может содержать приблизительно 40 мольных процентов или более СО плюс Н2 и приблизительно 30 мольных процентов или менее СО, согласно другому аспекту приблизительно 50 мольных процентов или более СО плюс Н2 и приблизительно 35 мольных процентов или менее СО, и согласно другому аспекту приблизительно 80 мольных процентов или более СО плюс Н2 и приблизительно 20 мольных процентов или менее СО.
Согласно одному аспекту содержащий СО субстрат содержит в основном СО и Н2. Согласно этому аспекту содержащий СО субстрат содержит по меньшей мере приблизительно 10 мольных % СО, согласно одному аспекту по меньшей мере приблизительно 20 мольных %, согласно одному аспекту приблизительно от 10 до 100 мольных %, согласно другому аспекту от приблизительно 20 до приблизительно 100 мольных % СО, согласно другому аспекту от приблизительно 30 до приблизительно 90 мольных % СО, согласно другому аспекту от приблизительно 40 до приблизительно 80 мольных % СО и согласно другому аспекту приблизительно от 50 до 70 мольных % СО. Содержащий СО субстрат будет характеризоваться соотношением СО/СО2, составляющим по меньшей мере приблизительно 0,75, согласно другому аспекту по меньшей мере приблизительно 1,0 и согласно другому аспекту по меньшей мере приблизительно 1,5.
Согласно одному аспекту газовый сепаратор выполняют с возможностью по существу отделять по меньшей мере одну часть газового потока, причем часть содержит один или несколько компонентов. Например, газовый сепаратор может отделять СО2 из газового потока, содержащего следующие компоненты: СО, СО2, Н2, причем СО2 может быть передан в устройство для удаления СО2, а остальная часть газового потока (содержащего СО и Н2) может быть передана в биореактор. Может быть использован любой газовый сепаратор, известный в настоящей области техники. Согласно этому аспекту, помещенный в ферментер синтез-газ будет характеризоваться содержанием СО2, составляющим приблизительно 10 мольных % или менее, согласно другому аспекту приблизительно 1 мольный % или менее СО2 и согласно другому аспекту приблизительно 0,1 мольного % или менее СО2.
Некоторые газовые потоки могут содержать высокую концентрацию СО и низкие концентрации Н2. Согласно одному аспекту может быть желательно оптимизировать состав потока субстрата с целью достижения более высокой эффективности производства спирта и/или общего улавливания углерода. Например, концентрация Н2 в потоке субстрата может быть увеличена перед тем, как поток пропускают в биореактор.
В соответствии с конкретными аспектами настоящего изобретения потоки из двух или более источников могут быть объединены и/или смешаны с получением желаемого и/или оптимизированного потока субстрата. Например, поток, содержащий высокую концентрацию СО, такой как выхлопной поток на преобразователе сталелитейного завода, может быть объединен с потоком, содержащим высокие концентрации Н2, таким как отходящий газ из металлургическом коксовой печи.
В зависимости от состава газового содержащего СО субстрата, также может быть желательно обработать его, чтобы удалить ненужные примеси, такие как частицы пыли, перед введением в ферментацию. Например, газообразный субстрат может быть отфильтрован или очищен с использованием известных способов.
Разработка и эксплуатация биореактора
Описания разработок ферментеров охарактеризованы в патентах США с серийными номерами 13/471827 и 13/471858, оба поданные 15 мая 2012 г., и в патенте США с серийным номером 13/473167, поданном 16 мая 2012 г., каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки.
В соответствии с одним аспектом способ ферментации начинается с добавления среды в реакционный сосуд. Некоторые примеры состава среды описаны в патентах США с серийными номерами 61/650098 и 61/650093, поданных 22 мая 2012 г., и в патенте США №7285402, поданном 23 июля 2001 г., каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки. Среда может быть стерилизована для удаления нежелательных микроорганизмов, и в реактор вносят желаемые микроорганизмы. Стерилизация не всегда требуется.
Согласно одному аспекту используемые микроорганизмы включают в себя ацетогенные бактерии. Примеры полезных ацетогенных бактерий включают в себя бактерии из рода Clostridium, такие как штаммы Clostridium ljungdahlii, включающие в себя те, которые описаны в публикации международной заявки 2000/68407, Европейском патенте 117309, патентах США №5173429, 5593886 и 6368819, публикации международной заявки 1998/00558 и публикации международной заявки 2002/08438, штаммы Clostridium autoethanogenum (DSM 10061 и DSM 19630 в DSMZ, Германия), включая в себя те, которые описаны в публикации международной заявки 2007/117157 и публикации международной заявки 2009/151342, и Clostridium ragsdalei (P11, АТСС ВАА-622) и Alkalibaculum bacchi (СР11, АТСС ВАА-1772), включая в себя те, которые описаны, соответственно, в патенте США №7704723 и "Biofuels and Bioproducts from Biomass-Generated Synthesis Gas", Hasan Atiyeh, представленном на ежегодной государственной конференции EPSCoR в Оклахоме 29 апреля 2010 г., и Clostridium carboxidivorans (АТСС РТА-7827), описанные в заявке на патент США №2007/0276447. Другие подходящие микроорганизмы включают в себя микроорганизмы из рода Moorella, включающие в себя Moorella sp. HUC22-1 и из рода Carboxydothermus. Каждая из этих ссылок включена в настоящий документ посредством ссылки. Могут быть использованы смешанные культуры двух или более микроорганизмов.
Некоторые примеры полезных бактерий включают в себя Acetogenium kivui, Acetoanaerobium noterae, Acetobacterium woodii, Alkalibaculum bacchi CP11 (ATCC BAA-1772), Blautia producta, Butyribacterium methylotrophicum, Caldanaerobacter subterraneous, Caldanaerobacter subterraneous pacificus, Carboxydothermus hydrogenoformans, Clostridium aceticum, Clostridium acetobutylicum, Clostridium acetobutylicum P262 (DSM 19630 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 19630 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 10061 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 23693 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 24138 из DSMZ, Германия), Clostridium carboxidivorans P7 (АТСС PTA-7827), Clostridium coskatii (АТСС РТА-10522), Clostridium drakei, Clostridium ljungdahlii PETC (ATCC 49587), Clostridium ljungdahlii ERI2 (ATCC 55380), Clostridium ljungdahlii C-01 (ATCC 55988), Clostridium ljungdahlii O-52 (ATCC 55889), Clostridium magnum, Clostridium pasteurianum (DSM 525 of DSMZ Germany), Clostridium ragsdali P11 (ATCC BAA-622), Clostridium scatologenes, Clostridium thermoaceticum, Clostridium ultunense, Desulfotomaculum kuznetsovii, Eubacterium limosum, Geobacter sulfurreducens, Methanosarcina acetivorans, Methanosarcina barkeri, Morrella thermoacetica, Morrella thermoautotrophica, Oxobacter pfennigii, Peptostreptococcus productus, Ruminococcus productus, Thermoanaerobacter kivui и их смеси.
Все штаммы этой группы характеризуются размером генома, составляющим приблизительно 4,2 Мбит (Kорkе et al., 2010), и составом GC, равным приблизительно 32% моль (Abrini et al., 1994; Kорkе et al., 2010; Tanner et al., 1993) (публикация международной заявки 2008/028055; патент США №2011/0229947), и законсервированными основными ключевыми генными оперонами, кодирующими ферменты пути Вуда-Люнгдала (дегидрогеназу монооксида углерода, формилтетрагидрофолатсинтетазу, метилентетрагидрофолатдегидрогеназу, формилтетрагидрофолатциклогидролазу, метилентетрагидрофолатредуктазу и дегидрогеназу монооксида углерода/ацетил-КоА-синтазу) гидрогеназу, формиатдегидрогеназу, Rnf комплекс (rnfCDGEAB), пируват : ферредоксин оксидоредуктазу, альдегид : ферредоксин оксидоредуктазу (Kорkе et al., 2010, 2011). Было обнаружено, что организация и количество генов пути Вуда-Люнгдала, ответственных за поглощение газа, одинаково у всех видов, несмотря на различия в последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот (Kорkе et al., 2011).
Все штаммы характеризуются аналогичной морфологией и размером (логарифмические растущие клетки составляют от 0,5 до 0,7×3-5 мкм), представляют собой мезофильные (оптимальная температура роста от 30 до 37°С) и строго анаэробные (Abrini et al., 1994; Tanner et al., 1993) (публикация международной заявки 2008/028055). Кроме того, все они разделяют одни и те же основные филогенетические черты, такие как одинаковый диапазон рН (рН 4-7,5, с оптимальным начальным рН 5,5-6), сильный автотрофный рост на содержащих СО газах с аналогичными темпами роста и метаболический профиль с этанолом и уксусной кислотой в качестве основного конечного продукта ферментации, с небольшими количествами 2,3-бутандиола и молочной кислоты, образованными при определенных условиях (Abrini et al., 1994; Kорkе et al., 2011; Tanner et al., 1993) (публикация международной заявки 2008/028055). Продукция индола наблюдалась у всех видов. Тем не менее, виды различаются в утилизации субстрата в виде различных сахаров (например, рамнозы, арабинозы), кислот (например, глюконат, цитрат), аминокислот (например, аргинин, гистидин) или других субстратов (например, бетаин, бутанол). Некоторые из видов оказались ауксотрофами к некоторым витаминам (например, тиамину, биотину), а другие нет.
Описанные черты, поэтому, не относятся к одному организму, подобному С. autoethanogenum или С. ljungdahlii, но представляют собой общие черты для карбоксидотрофных, синтезирующих этанол Clostridia. Таким образом, можно ожидать, что настоящее изобретение будет работать с помощью этих штаммов, хотя могут быть различия в производительности.
Способ ферментации желательно проводить в соответствующих условиях для получения желаемой ферментации (например, СО до этанола). Условия реакции, которые следует учитывать, включают в себя давление, температуру, расход газа, скорость потока жидкости, рН сред, окислительно-восстановительный потенциал сред, скорость перемешивания (если происходит с использованием реактора с механическим перемешиванием), содержание высеваемого материала, максимальные концентрации газового субстрата, чтобы обеспечить то, что СО в жидкой фазе не станет ограничивающим, и максимальные концентрации продукта, чтобы избежать ингибирования продукции.
Способы согласно настоящему изобретению могут быть использованы для поддержания жизнеспособности микробной культуры, причем микробная культура ограничена в СО, так что скорость передачи СО в раствор меньше, чем скорость поглощения культурой. Такие ситуации могут возникнуть, когда субстрат, содержащий СО, обеспечивается не непрерывно для микробной культуры; скорость переноса массы низкая или недостаточно СО в потоке субстрата для поддержания жизнеспособности культуры при оптимальной температуре. Согласно таким вариантам осуществления микробная культура будет быстро истощать СО, растворенный в жидкой питательной среде, и становиться ограниченной в субстрате, поскольку дополнительный субстрат не может быть обеспечен достаточно быстро.
Запуск: После внесения начальная скорость подачи исходного газа устанавливается эффективной для поддержания исходной популяции микроорганизмов. Выходящий газ анализируют для определения содержания выходящего газа. Результаты анализа газа используются для управления скоростью подаваемого газа. Согласно этому аспекту способ включает расчетное соотношение концентрации СО к исходной плотности клеток, составляющее от приблизительно 0,5 до приблизительно 0,9, согласно другому аспекту от приблизительно 0,6 до приблизительно 0,8, согласно другому аспекту от приблизительно 0,5 до 0,7 и согласно другому аспекту от приблизительно 0,5 до приблизительно 0,6.
Согласно другому аспекту способ ферментации включает предоставление синтез-газа в ферментационную среду в таком количестве, которое эффективно обеспечивает начальную расчетную концентрацию СО в ферментационной среде, составляющую от приблизительно 0,15 мМ до приблизительно 0,70 мМ, согласно другому аспекту от приблизительно 0,15 мМ до приблизительно 0,50 мМ, согласно другому аспекту от приблизительно 0,15 мМ до приблизительно 0,35 мМ, согласно другому аспекту от приблизительно 0,20 мМ до приблизительно 0,30 мМ и согласно другому аспекту от приблизительно 0,23 мМ до приблизительно 0,27 мМ. Способ представляет собой эффективный для повышения плотности клеток, по сравнению с начальной плотностью клеток.
После запуска: При достижении желаемого содержания, жидкую фазу и клеточный материал извлекают из реактора и пополняют средой. Способ эффективно повышает плотность клеток до приблизительно 2,0 г/л или более, согласно другому аспекту от приблизительно 2 до приблизительно 30 г/л, согласно другому аспекту от приблизительно 2 до приблизительно 25 г/л, согласно другому аспекту от приблизительно 2 до приблизительно 20 г/л, согласно другому аспекту от приблизительно 2 до приблизительно 10 г/л, согласно другому аспекту от приблизительно 2 до приблизительно 8 г/л, согласно другому аспекту от приблизительно 3 до приблизительно 30 г/л, согласно другому аспекту от приблизительно 3 до приблизительно 6 г/л и согласно другому аспекту от приблизительно 4 до приблизительно 5 г/л.
Состав среды
Согласно одному аспекту среда содержит по меньшей мере один или несколько источников азота, по меньшей мере один или несколько источника фосфора и по меньшей мере один или несколько источников калия. Среда может содержать любой из трех, любую комбинацию из трех и согласно одному важному аспекту содержит все три. Источник азота может включать источник азота, выбранный из группы, состоящей из хлорида аммония, гидроксида аммония, фосфата аммония, сульфата аммония, нитрата аммония и их смесей. Источник фосфора может включать источник фосфора, выбранный из группы, состоящей из фосфорной кислоты, фосфата аммония, фосфата калия и их смесей. Источник калия может включать источник калия, выбранный из группы, состоящей из хлорида калия, фосфата калия, нитрата калия, сульфата калия и их смесей.
Согласно одному аспекту среда содержит одно или несколько из следующего: железо, вольфрам, никель, кобальт, магний, сера и тиамин. Среда может содержать любой из этих компонентов, любую их комбинацию и согласно одному важному аспекту содержит все эти компоненты. Железо может включать источник железа, выбранный из группы, состоящей из хлористого железа, сульфата железа и их смесей. Источник вольфрама может включать источник вольфрама, выбранный из группы, состоящей из вольфрамата натрия, вольфрамата кальция, вольфрамата калия и их смесей. Источник никеля может включать источник никеля, выбранный из группы, состоящей из хлорида никеля, сульфата никеля, нитрата никеля и их смесей. Источник кобальта может включать источник кобальта, выбранный из группы, состоящей из хлорида кобальта, фторида кобальта, бромида кобальта, иодида кобальта и их смесей. Источник магния может включать источник магния, выбранный из группы, состоящей из хлорида магния, сульфата магния, фосфата магния и их смесей. Источник серы может включать в себя цистеин, сульфид натрия и их смеси.
Концентрации различных компонентов таковы:
Процесс работы поддерживает рН в диапазоне от приблизительно 4,2 до приблизительно 4,8. Среда содержит менее чем приблизительно 0,01 г/л дрожжевого экстракта и менее чем приблизительно 0,01 г/л углеводов.
Согласно этому аспекту среда может характеризоваться сниженными концентрациями одного или нескольких питательных веществ, которые включают в себя B, Mn, Mo и Cu. Концентрации питательных веществ в среде могут быть следующими:
В: менее чем приблизительно 1,04 ppm В, согласно другому аспекту менее, чем приблизительно 1,0 ppm В, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,75 ppm В, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,5 ppm В и согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,025 ppm В;
Mn: менее чем приблизительно 0,16 ppm Mn, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,15 ppm Mn, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,10 ppm Mn, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,05 ppm Mn и согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,0025 м.д. Mn;
Mo: менее чем приблизительно 0,26 ppm Mo, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,25 ppm Mo, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,20 ppm Mo, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,10 ppm Mo и согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,001 ppm Mo или
Cu: менее чем приблизительно 0,16 ppm Cu, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,15 ppm Cu, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,10 ppm Cu, согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,05 ppm Cu и согласно другому аспекту менее чем приблизительно 0,01 ppm Cu.
Согласно другому аспекту массовые соотношения могут быть следующими:
NH4 + к В: приблизительно 625:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 650:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 675:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 700:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 750:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 800:1 или более или
NH4 + к Mn: приблизительно 4050:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4100:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4200:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4300:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4400:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 4500:1 или более; или
NH4 + к Mo: приблизительно 2500:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 2600:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 2700:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 2800:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 2900:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 3000:1 или более; или
NH4 + к Cu: приблизительно 4050:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4100:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4200:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4300:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 4400:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 4500:1 или более; или
Р к B: приблизительно 30:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 35:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 40:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 45:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 50:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 100:1 или более; или
Р к Mn: приблизительно 190:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 200:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 225:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 250:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 275:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 300:1 или более; или
Р к Мо: приблизительно 120:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 130:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 140:1 или более, согласно другому аспекту 150:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 175:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 200:1 или более; или
Р к Cu: приблизительно 190:1 или более; согласно другому аспекту приблизительно 200:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 225:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 250:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 275:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 300:1 или более; или
К к B: приблизительно 35:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 40:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 45:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 50:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 75:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 100:1 или более; или
К к Mn: приблизительно 245:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 250:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 260:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 270:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 280:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 300:1 или более; или
К к Mo: приблизительно 150:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 250:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 260:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 270:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 280:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 300:1 или более; или
К к Cu: приблизительно 245:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 250:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 260:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 270:1 или более, согласно другому аспекту приблизительно 280:1 или более и согласно другому аспекту приблизительно 300:1 или более.
Согласно другому аспекту способ и среды эффективно обеспечивают конверсию по меньшей мере от приблизительно 5% до приблизительно 99% СО, согласно другому аспекту от приблизительно 10% до приблизительно 90%, согласно другому аспекту от приблизительно 20% до приблизительно 80%, согласно другому аспекту от приблизительно 30% до приблизительно 70% и согласно другому аспекту от приблизительно 40% до приблизительно 90%.
Согласно другому аспекту способ и среда эффективно обеспечивают содержание селена в биомассе, выходящей из ферментации, составляющее приблизительно 1 ppm или менее. Согласно другому аспекту приблизительно 0,75 ppm или менее и согласно другому аспекту приблизительно 0,5 ppm или менее, все на основе сухой массы. Согласно другому аспекту содержание селена в биомассе после выхода из ферментации может составлять приблизительно от 0,01 до приблизительно 1 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,9 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,75 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,5 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,25 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,025 до приблизительно 1 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,025 до приблизительно 0,9 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,025 до приблизительно 0,75 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,025 до приблизительно 0,5 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,5 до 1 ppm, согласно другому аспекту от приблизительно 0,5 до приблизительно 0,9 ppm и согласно другому аспекту от приблизительно 0,5 до 0,75 ppm. Согласно одному аспекту Se может включать другие формы селена, включающие в себя состояния окисления -2, +2, +4 и +6, и может включать, например, Селенит и селенат. Указанные диапазоны относятся к эквивалентам Se.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Оценка роста культуры в среде с селенитом натрия
Получение среды: Среду получали следующим образом:
Засевание и поддерживание реактора: реактор серии BioFlo 310 (Нью-Брансуик) настраивали для анаэробной ферментации, чтобы включить проведение газа, как внутрь, так и наружу, продувку культуры, проведение питания и систему рециркуляции клеток, включающую в себя вытяжку фильтрата. Перед посевом реактор заполняли средой в объеме 2 л и продували синтез-газом в течение по меньшей мере 2 часов, температуру повышали до 38°С и рН доводили до и поддерживали между 4,4 и 4,7 с использованием 0,5 М NH4OH. Гидросульфид натрия (0,2% об./об.) смешивали с реакторной средой до конечной концентрации 9×10-4% об./об. На протяжении эксперимента перемешивание поддерживали при 800 оборотах в минуту.
В реактор вносили экспоненциально растущие клетки из исходного реактора для достижения начальной концентрации клеток 0,3 г/л (сухая масса клеток). Начиная со скорости потока газа 15 мл/мин синтез-газа (30% СО, 15% Н2, 10% СО2), 10% увеличение скорости потока газа выполняли на почасовой основе для поддержания роста клеток и поддерживали конверсию Н2 и СО >25% и >80%, соответственно, что определено способом газовой хроматографии (ГХ, SRI 8610С). На протяжении эксперимента скорость потока газа поддерживали между 250-300 мл/мин. Средний поток доводили до достижения 18-24 ч времени удерживания жидкости и плотность клеток контролировали с использование клеточной регенерационной системы на основе полого волокна. Гидросульфид натрия (0,2% об./об.) непрерывно смешивали непосредственно с реакторной средой с постоянной скоростью 0,2 мл/мин. После того как культура достигала плотности клеток от 2,5 до 3 г/л сухой массы клеток (определяемая OD580), систему рециркуляции клеток отключали и реактор работал как прямоточная система. Для анализа образования продукта жидкие образцы отбирали каждые 4 часа и анализировали с помощью жидкой ГХ, Shimadzu GC-2014. Реакторы поддерживали в устойчивом состоянии на протяжении по меньшей мере 5 дней.
В следующей таблице приведены характеристики стационарного состояния ферментации в среде, содержащей селен (Se(+)), и на фиг. 1 показан рост клеток и конверсии газа с течением времени.
Пример 2. Оценка роста культуры в среде без селенита натрия
Получение среды: Среду без селена (-) готовили, как в примере 1, за исключением того, что селенит натрия был опущен из рецепта.
Засевание и поддерживание реактора: Использовали установку, которая описана в примере 1.
В следующей таблице приведено выполнение ферментации в среде без селена (Se (-)) и на фиг. 2 показан рост клеток и конверсии газов с течением времени.
Пример 3: Количественное определение Se в клеточной массе.
Во время остановки реактора, 200 мл культуры удаляли и центрифугировали при 4000 оборотов в минуту в течение 5 мин при 4°С в центрифуге Allegra 25R (Beckman Coulter). Затем осадок промывали и ресуспендировали в охлажденном льдом 0,8% растворе хлорида натрия объемом 50 мл и снова центрифугировали. Полученный осадок хранили при -80°С до обработки. Параллельно образцы среды анализировали на наличие Se с использованием стандартного способа анализа индуктивно-связанной плазмы (ICP), как описано в "Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater" 19th edition, A.D. Eaton, L.S. Clesceri и A.E. Greenberg, 1995, pp 3-34 Chapter 3120 B.
Клеточный анализ: Содержание селена клеток определяли с использованием анализа индуктивно-связанной плазмы (ICP). Образцы первоначально расщепляли с азотной кислотой (5% об./об.) и Н2О2 (10% об./об.) при 120°С в течение 2 часов, чтобы растворить клетки ('Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater" 19th edition, A.D. Eaton, L.S. Clesceri and A.E. Greenberg, 1995, pp 3-5,Chapter 3030 E) и полученный продукт расщепления подвергали ICP.
Результаты: Оценка содержания селена в средах. В таблице ниже приведено содержание металла в среде с селеном Se (+) и без Se, используемой в эксперименте. Обратите внимание, что содержание селена в среде без Se находится на пределе обнаружения, используя стандартный анализ ICP и представляет собой 0,03 ppm (*)
Результаты: Оценка содержания селена в клетках. Анализ Se в клетках показывает, что клетки, выращенные в отсутствие селенита натрия, характеризуются содержанием Se, составляющим 484 частицы на миллиард (~ 0,5 частиц на миллион) по сравнению с 34 частицами на миллион в клетках, выращенных в присутствии соли селена. Это представляет собой снижение на 98,5% содержания Se клеток.
Пример 4: Оценка скорости клеточного роста С. autoethanogenum в свободной от Se среде с использованием культуральных пробирок.
Следующую среду (1% MES) использовали для роста в пробирках с культурой.
В культуральные пробирки, наполненные 4 мл соответствующей среды, вносили замороженный запас С. autoethanogenum (DSM #10061) и создавали повышенное давление синтез-газом до 4 атм. Для подготовки посевных культур в пробирки подавали синтез-газ ежедневно до тех пор, пока культура не достигала OD580 1,2. Четыре мл 1% MES +Se и/или 1% MES -Se засевали живыми клетками и создавали давление синтез-газа. Посевной материал первый раз центрифугировали при 3000 оборотах в минуту для осаждения клеток в анаэробных условиях. Осадок затем ресуспендировали в свежей среде Se(+) или Se(-) и использовали для засеянных новых культуральных пробирок при необходимой OD580 = 0,3. Затем культуры оставляли расти при 37°С в инкубаторе при встряхивании, составляющем 70 оборотов в минуту. Культуральные пробирки с засеянными С. autoethanogenum при начальной OD580 = 0,3 в среде 1% MES Se(+) или Se(-) наблюдали в течение долгого времени. Оптическую плотность каждой пробирки измеряли непосредственно после засевания и один раз в день после этого. Как видно на фиг. 3, клетки в обеих средах выросли до OD580 >1. Во время экспоненциальной фазы обе среды поддерживали ту же скорость роста.
Пример 5: Оценка функционирования и продуктивности ферментации С.autoethanogenum со средой без Se в биореакторе.
Культуру С. autoethanogenum использовали для внесения в посевной реактор, содержащий лабораторную среду (реактор объемом 1 л, биореактор с мешалкой SR0700ODLS, DASGIP). Внесение и поддерживание реактора осуществлялось по существу, как описано в примере 1. После того, как эта культура достигала стационарного состояния, ее использовали для засевания второго реактора, содержащего лабораторную среду без селена. Дочерней культуре позволяли достичь устойчивого состояния и в течение не менее 72 часов выдерживали в этом состоянии. Исходный реактор так же контролировали в это время в качестве сравнения.
В следующей таблице приведен состав среды для экспериментов с С. autoethanogenum.
Примечание: Отдельный MPFN готовили без Na2SeO3 для части эксперимента, в котором культуру выращивали в среде, не содержащей селен.
В таблице ниже представлены данные о функциональности ферментации С. autoethanogenum в стационарном состоянии в средах Se(+) и Se(-). Параметры в обоих случаях упали в пределах ожидаемого диапазона функциональности и не показали существенных различий между ними.
Аналогичные тенденции можно наблюдать в производительности каждой культуры, как показано ниже.
Хотя раскрытое в настоящем документе настоящее изобретение было описано с помощью конкретных аспектов, примеров и приложений, специалистами в настоящей области техники могут быть сделаны многочисленные модификации и вариации, не выходя за пределы объема настоящего изобретения, изложенного в формуле настоящего изобретения.
Claims (13)
1. Способ снижения содержания селена в клеточной биомассе после ферментации содержащего СО газообразного субстрата, включающий:
ферментацию содержащего СО газообразного субстрата в ферментационной среде с ацетогенными бактериями;
причем ферментационная среда содержит менее чем 1 ppm селена и ферментационная среда содержит:
от 112 до 125 мг азота на грамм клеток,
от 10,5 до 15 мг фосфора на грамм клеток или
от 26 до 36 мг калия на грамм клеток;
причем способ обеспечивает специфическую STY, составляющую по меньшей мере 1 г этанола/(л ⋅ день ⋅ грамм клеток), и
причем способ обеспечивает содержание селена в биомассе клеток, выходящей из ферментации, равное 1 ppm или менее.
2. Способ по п. 1, при котором рН ферментационной среды поддерживают в интервале от 4,2 до 4,8.
3. Способ по п. 1, при котором синтез-газ характеризуется соотношением СО/СО2, составляющим по меньшей мере 0,75.
4. Способ по п. 1, при котором селен находится в виде селенита.
5. Способ по п. 1, при котором селен находится в виде селената.
6. Способ по п. 1, при котором ацетогенные бактерии выбирают из группы, состоящей из Acetogenium kivui, Acetoanaerobium noterae, Acetobacterium woodii, Alkalibaculum bacchi CP11 (ATCC BAA-1772), Blautia producta, Butyribacterium methylotrophicum, Caldanaerobacter subterraneous, Caldanaerobacter subterraneous pacificus, Carboxydothermus hydrogenoformans, Clostridium aceticum, Clostridium acetobutylicum, Clostridium acetobutylicum P262 (DSM 19630 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 19630 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 10061 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 23693 из DSMZ, Германия), Clostridium autoethanogenum (DSM 24138 из DSMZ, Германия), Clostridium carboxidivorans P7 (ATCC PTA-7827), Clostridium coskatii (АТСС РТА-10522), Clostridium drakei, Clostridium ljungdahlii PETC (ATCC 49587), Clostridium ljungdahlii ERI2 (ATCC 55380), Clostridium ljungdahlii C-01 (ATCC 55988), Clostridium ljungdahlii O-52 (ATCC 55889), Clostridium magnum, Clostridium pasteurianum (DSM 525 из DSMZ, Германия), Clostridium ragsdali P11 (ATCC BAA-622), Clostridium scatologenes, Clostridium thermoaceticum, Clostridium ultunense, Desulfotomaculum kuznetsovii, Eubacterium limosum, Geobacter sulfurreducens, Methanosarcina acetivorans, Methanosarcina barkeri, Morrella thermoacetica, Morrella thermoautotrophica, Oxobacter pfennigii, Peptostreptococcus productus, Ruminococcus productus, Thermoanaerobacter kivui и их смесей.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361857044P | 2013-07-22 | 2013-07-22 | |
US61/857,044 | 2013-07-22 | ||
US14/331,326 US10760101B2 (en) | 2013-07-22 | 2014-07-15 | Process and medium for reducing selenium levels in biomass from fermentation of co-containing gaseous substrates |
US14/331,326 | 2014-07-15 | ||
PCT/US2014/047200 WO2015013132A1 (en) | 2013-07-22 | 2014-07-18 | A process and medium for reducing selenium levels in biomass from fermentation of co-containing gaseous substrates |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2015154789A RU2015154789A (ru) | 2017-08-25 |
RU2654591C2 true RU2654591C2 (ru) | 2018-05-21 |
Family
ID=52343875
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015154789A RU2654591C2 (ru) | 2013-07-22 | 2014-07-18 | Способ и среда для снижения содержания селена в биомассе после ферментации содержащих со газообразных субстратов |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10760101B2 (ru) |
EP (1) | EP3024938B1 (ru) |
CN (1) | CN105473725B (ru) |
BR (1) | BR112015030745A2 (ru) |
CA (1) | CA2914716A1 (ru) |
DK (1) | DK3024938T3 (ru) |
ES (1) | ES2689853T3 (ru) |
RU (1) | RU2654591C2 (ru) |
WO (1) | WO2015013132A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201508759B (ru) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107779477B (zh) * | 2016-08-25 | 2021-10-12 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种食气厌氧菌利用合成气发酵产醇的培养体系和培养方法 |
CN116888268A (zh) * | 2020-12-08 | 2023-10-13 | 巨鹏生物(香港)有限公司 | 控制乙醇生产的方法和组合物 |
EP4349993A1 (en) | 2022-10-06 | 2024-04-10 | SecondCircle ApS | Optimised fermentation of anaerobic bacteria |
CN116333948B (zh) * | 2023-05-24 | 2023-07-28 | 山东格研生物技术有限公司 | 一种食气梭菌增菌培养基及其制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EA200300158A1 (ru) * | 2000-07-25 | 2003-08-28 | Биоэнжиниринг Рисосиз, Инк. | Способ увеличения выработки этанола методом микробной ферментации |
WO2010064932A1 (en) * | 2008-12-01 | 2010-06-10 | Lanzatech New Zealand Limited | Optimised fermentation media |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2609206A4 (en) * | 2010-08-26 | 2014-07-09 | Lanzatech New Zealand Ltd | PROCESS FOR THE PRODUCTION OF ETHANOL AND ETHYLENE BY FERMENTATION |
US20130149693A1 (en) * | 2011-12-12 | 2013-06-13 | Ineos Bio Sa | Management of ethanol concentration during syngas fermentation |
US9193947B2 (en) * | 2012-05-22 | 2015-11-24 | Ineos Bio Sa | Process for culturing microorganisms on a selected substrate |
US10100336B2 (en) | 2012-05-22 | 2018-10-16 | Ineos Bio S.A. | Syngas fermentation process and medium |
-
2014
- 2014-07-15 US US14/331,326 patent/US10760101B2/en active Active
- 2014-07-18 WO PCT/US2014/047200 patent/WO2015013132A1/en active Application Filing
- 2014-07-18 EP EP14747484.5A patent/EP3024938B1/en not_active Not-in-force
- 2014-07-18 DK DK14747484.5T patent/DK3024938T3/en active
- 2014-07-18 BR BR112015030745A patent/BR112015030745A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-07-18 RU RU2015154789A patent/RU2654591C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-07-18 CN CN201480041389.2A patent/CN105473725B/zh active Active
- 2014-07-18 CA CA2914716A patent/CA2914716A1/en not_active Abandoned
- 2014-07-18 ES ES14747484.5T patent/ES2689853T3/es active Active
-
2015
- 2015-11-30 ZA ZA2015/08759A patent/ZA201508759B/en unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EA200300158A1 (ru) * | 2000-07-25 | 2003-08-28 | Биоэнжиниринг Рисосиз, Инк. | Способ увеличения выработки этанола методом микробной ферментации |
WO2010064932A1 (en) * | 2008-12-01 | 2010-06-10 | Lanzatech New Zealand Limited | Optimised fermentation media |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
SAXENA J., TANNER R.S. "Effect of trace metals on ethanol production from synthesis gas by the ethanologenic acetogen, Clostridium ragsdalei".// Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology, 2011, vol.38, p.513-521. * |
SAXENA J., TANNER R.S. "Effect of trace metals on ethanol production from synthesis gas by the ethanologenic acetogen, Clostridium ragsdalei".// Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology, 2011, vol.38, p.513-521. YING GUO ET AL, "Medium optimization for ethanol production with Cloctridium autoethanogenum with carbon monoxide as sole carbon source".// Bioresource Technology, 2010, vol.101, p.8784-8789. * |
YING GUO ET AL, "Medium optimization for ethanol production with Cloctridium autoethanogenum with carbon monoxide as sole carbon source".// Bioresource Technology, 2010, vol.101, p.8784-8789. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ZA201508759B (en) | 2017-03-29 |
CA2914716A1 (en) | 2015-01-29 |
CN105473725B (zh) | 2020-01-14 |
DK3024938T3 (en) | 2018-10-22 |
BR112015030745A2 (pt) | 2017-07-25 |
CN105473725A (zh) | 2016-04-06 |
WO2015013132A1 (en) | 2015-01-29 |
US20150024449A1 (en) | 2015-01-22 |
RU2015154789A (ru) | 2017-08-25 |
EP3024938A1 (en) | 2016-06-01 |
US10760101B2 (en) | 2020-09-01 |
EP3024938B1 (en) | 2018-07-11 |
ES2689853T3 (es) | 2018-11-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2623170C2 (ru) | Способ управления процессом ферментации синтез-газа | |
TWI835832B (zh) | 一氧化碳及二氧化碳之生物轉換方法 | |
TWI729364B (zh) | 合成氣發酵法及培養基(二) | |
TWI654307B (zh) | 合成氣發酵法及培養基(一) | |
RU2654591C2 (ru) | Способ и среда для снижения содержания селена в биомассе после ферментации содержащих со газообразных субстратов | |
AU2014278580B2 (en) | A process for fermenting CO-containing gaseous substrates in a low phosphate medium effective for reducing water usage | |
TWI729866B (zh) | 在厭氧發酵中之導電度的控制 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200719 |