RU2649406C1 - 3-n-substituted bornyl propionates used as marburg virus inhibitors - Google Patents
3-n-substituted bornyl propionates used as marburg virus inhibitors Download PDFInfo
- Publication number
- RU2649406C1 RU2649406C1 RU2017133088A RU2017133088A RU2649406C1 RU 2649406 C1 RU2649406 C1 RU 2649406C1 RU 2017133088 A RU2017133088 A RU 2017133088A RU 2017133088 A RU2017133088 A RU 2017133088A RU 2649406 C1 RU2649406 C1 RU 2649406C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- compounds
- marburg virus
- marburg
- propionates
- Prior art date
Links
- 241001115401 Marburgvirus Species 0.000 title claims abstract description 22
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 12
- -1 bornyl propionates Chemical class 0.000 title abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 35
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 19
- 241001112090 Pseudovirus Species 0.000 description 16
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000711950 Filoviridae Species 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 201000011001 Ebola Hemorrhagic Fever Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 3
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 3
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 3
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 3
- DTGKSKDOIYIVQL-QXFUBDJGSA-N (-)-borneol Chemical compound C1C[C@]2(C)[C@H](O)C[C@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-QXFUBDJGSA-N 0.000 description 2
- 229930006703 (-)-borneol Natural products 0.000 description 2
- SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-{[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl](methyl)amino}-2-(propan-2-yl)pentanenitrile Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1CCN(C)CCCC(C#N)(C(C)C)C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QEYMMOKECZBKAC-UHFFFAOYSA-N 3-chloropropanoic acid Chemical compound OC(=O)CCCl QEYMMOKECZBKAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N dl-isoborneol Natural products C1CC2(C)C(O)CC1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 229960001722 verapamil Drugs 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JEQDSBVHLKBEIZ-UHFFFAOYSA-N 2-chloropropanoyl chloride Chemical compound CC(Cl)C(Cl)=O JEQDSBVHLKBEIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTZIQBGFCYJWKA-UHFFFAOYSA-N 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 FTZIQBGFCYJWKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- INUNLMUAPJVRME-UHFFFAOYSA-N 3-chloropropanoyl chloride Chemical compound ClCCC(Cl)=O INUNLMUAPJVRME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005544 C,H correlation via long-range coupling Methods 0.000 description 1
- 108090000312 Calcium Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000003922 Calcium Channels Human genes 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- 208000007136 Filoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 1
- 206010061192 Haemorrhagic fever Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 101900000220 Lake Victoria marburgvirus Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N Licoricesaponin B2 Natural products C1C(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)CC1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000932 Marburg Virus Disease Diseases 0.000 description 1
- 201000011013 Marburg hemorrhagic fever Diseases 0.000 description 1
- 101100010166 Mus musculus Dok3 gene Proteins 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 208000034712 Rickettsia Infections Diseases 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229940125400 channel inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N dodecyl hydrogen sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS(O)(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043264 dodecyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001685 glycyrrhizic acid Substances 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005570 heteronuclear single quantum coherence Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N triethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CC ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002328 two-dimensional heteronuclear correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4453—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine only substituted in position 1, e.g. propipocaine, diperodon
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/452—Piperidinium derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
- C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
- C07D211/10—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms
- C07D211/14—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к химии и медицине, а именно к лекарственным средствам, конкретно к соединениям 3-N-замещенных борнилпропионатов общей формулы I (включая их пространственные изомеры, в том числе оптически активные формы):The invention relates to chemistry and medicine, namely to medicines, specifically to compounds of 3-N-substituted bornylpropionates of the general formula I (including their spatial isomers, including optically active forms):
где R - -СН2-, -СНМе, у которых выявлена биологическая активность, заключающаяся в ингибировании репродукции вируса Марбург. Данные соединения I могут использоваться в качестве ингибитора репродукции вируса Марбург и могут быть применены в медицине, вирусологии и фармакологии.where R - -CH 2 -, -CHMe, in which biological activity was revealed, which consists in inhibiting the reproduction of the Marburg virus. These compounds I can be used as an inhibitor of the reproduction of the Marburg virus and can be used in medicine, virology and pharmacology.
Лихорадки Марбург и Эбола относятся к геморрагическим лихорадкам, возбудителями которых являются филовирусы. Крупнейшими вспышками филовирусных лихорадок были эпидемии лихорадки Марбург в Анголе в 2004-2005 гг. и лихорадки Эбола в 2014 году в Западной Африке. Инфекция вирусами Марбург и Эбола имеет схожие клинические проявления, вирионы сходны по своей морфологии, однако имеются отличия в их антигенной структуре. Инфицирование людей происходит при контакте с биологическими жидкостями носителя вируса. В настоящее время не существует зарегистрированного патогенетического средства лечения филовирусных лихорадок, однако имеется ряд кандидатных препаратов, показавших антифиловирусную активность in vitro и in vivo на животных моделях (Kaushik A., Tiwari S., DevJayant R., Marty A., Nair M., 2016. Towards detection and diagnosis of Ebola virus disease at point-of-care. Biosens. Bioelectron. 75, 254-272).Marburg and Ebola are hemorrhagic fevers caused by filoviruses. The largest outbreaks of filovirus fever were the Marburg fever epidemic in Angola in 2004-2005. and Ebola in 2014 in West Africa. Infection with Marburg and Ebola viruses has similar clinical manifestations, virions are similar in their morphology, however, there are differences in their antigenic structure. Human infection occurs by contact with biological fluids of the virus carrier. Currently, there is no registered pathogenetic agent for treating filovirus fevers, however, there are a number of candidate drugs that have shown antiviral activity in vitro and in vivo in animal models (Kaushik A., Tiwari S., DevJayant R., Marty A., Nair M., 2016. Towards detection and diagnosis of Ebola virus disease at point-of-care. Biosens. Bioelectron. 75, 254-272).
Жизненный цикл вируса включает в себя несколько этапов: прикрепление к клетке, проникновение в клетку, разборка капсида, репликация, сборка вирусной частицы и выход из клетки. Вход вируса в клетку - привлекательная точка приложения для терапии, так как блокирование инфекции на начальной стадии уменьшает цитопатическое действие на клетку, связанное с репликацией вируса, снижается риск приобретения вирусом лекарственной резистентности. Так как начальные стадии инфекции, включая вход в клетку и слияние вирусной и клеточной мембран, определяются вирусными поверхностными белками, при поиске ингибиторов этого класса возможно использование псевдотипированных вирусов - рекомбинантных, биологически безопасных вирусных частиц, имеющих капсид одного вируса и поверхностный белок другого («чужого», часто, более патогенного) вируса. Использование таких частиц дает возможность осуществлять поиск специфических препаратов, ингибирующих именно начальные этапы вирусной инфекции, обусловленные «чужим белком». Биологическая безопасность псевдовирусов определяется тем, что в клетках-мишенях они не образуют вирусного потомства благодаря целенаправленному редактированию псевдовирусного генома. Таким образом, их применение особенно удобно в случае поиска ингибиторов высокопатогенных вирусов, так как работа с псевдовирусами может осуществляться в лабораториях класса BSL-2.The life cycle of a virus includes several stages: attachment to a cell, penetration into a cell, disassembly of a capsid, replication, assembly of a viral particle, and exit from the cell. The entry of the virus into the cell is an attractive point of application for therapy, since blocking the infection at the initial stage reduces the cytopathic effect on the cell associated with the replication of the virus, and the risk of the acquisition of drug resistance by the virus is reduced. Since the initial stages of infection, including entry into the cell and the fusion of the viral and cell membranes, are determined by viral surface proteins, pseudotyped viruses — recombinant, biologically safe virus particles having a capsid of one virus and a surface protein of another (“foreign ", Often a more pathogenic) virus. The use of such particles makes it possible to search for specific drugs that inhibit precisely the initial stages of a viral infection caused by a “foreign protein”. The biological safety of pseudoviruses is determined by the fact that they do not form viral progeny in target cells due to the targeted editing of the pseudovirus genome. Thus, their use is especially convenient when searching for inhibitors of highly pathogenic viruses, since work with pseudoviruses can be carried out in laboratories of the BSL-2 class.
Несмотря на то что вспышки эпидемии заболевания филовирусными инфекциями являются довольно редким явлением, разработка препаратов, обладающих специфической противовирусной активностью против данного вируса является важной задачей медицинской химии и вирусологии.Despite the fact that outbreaks of the epidemic of filovirus infections are quite rare, the development of drugs with specific antiviral activity against this virus is an important task of medical chemistry and virology.
Известно, что коэффициенты летальности во время вспышек марбургской геморрагической лихорадки варьируются в пределах от 24% до 88%. С точки зрения поиска новых соединений, обладающих высокой противовирусной активностью, особое значение имеют соединения с каркасным остовом.It is known that mortality rates during outbreaks of Marburg hemorrhagic fever vary from 24% to 88%. From the point of view of the search for new compounds with high antiviral activity, compounds with a skeleton backbone are of particular importance.
Наиболее близким к заявляемому соединению - прототипом, является глицерам - моноаммонийная соль глицирризиновой кислоты формулы II:Closest to the claimed compound, the prototype, is glycerol, a monoammonium salt of glycyrrhizic acid of formula II:
Данное соединение блокирует инфицирование клеток вирусом Марбург и активно на ранних этапах репродукции вируса Марбург (Докл. Ак. Наук, 1995, 344, 5, 709-711). Недостатком известного соединения является невысокая противовирусная активность.This compound blocks infection of cells with the Marburg virus and is active in the early stages of reproduction of the Marburg virus (Dokl. Ak. Nauk, 1995, 344, 5, 709-711). A disadvantage of the known compound is its low antiviral activity.
Задачей изобретения является расширение нового класса эффективных ингибиторов репродукции вируса Марбург.The objective of the invention is the expansion of a new class of effective inhibitors of reproduction of the Marburg virus.
Технический результат: повышение эффективности подавления репродукции вируса Марбург и расширение ассортимента ингибиторов репродукции данного вируса.Effect: increasing the efficiency of suppressing reproduction of the Marburg virus and expanding the range of inhibitors of reproduction of the virus.
Поставленная задача решается новыми соединениями общей формулы I, обладающими выраженными свойствами ингибиторов репродукции вируса Марбург:The problem is solved by new compounds of the general formula I, with pronounced properties of inhibitors of reproduction of the Marburg virus:
где R - -СН2-, -СНМе-.where R is —CH 2 -, —CHM—.
Соединения общей формулы I, после проведения углубленных фармакологических исследований, могут использоваться как в чистом виде, так и в качестве компонента новых низкотоксичных высокоэффективных против вируса Марбург лекарственных форм.The compounds of general formula I, after conducting in-depth pharmacological studies, can be used both in pure form and as a component of the new low-toxic highly effective dosage forms against the Marburg virus.
Исследования биологической активности I, проведенные с использованием псевдовирусных систем и вируса Марбург (штамм Рорр), показали их высокую эффективность как ингибиторов репродукции этого вируса.Studies of biological activity I, carried out using pseudovirus systems and the Marburg virus (Porr strain), showed their high efficiency as inhibitors of the reproduction of this virus.
Полученные количественные показатели ингибирования подтверждают высокую степень подавления трансдукции культуры клеток 293FT псевдовирусом с поверхностным белком вируса Марбург и репликации вируса Марбург в культуре клеток Vero соединениями I, превышающую тот же показатель у эталона сравнения - верапамила.The obtained quantitative indicators of inhibition confirm the high degree of suppression of the transduction of the 293FT cell culture by pseudovirus with the surface protein of the Marburg virus and the replication of the Marburg virus in the Vero cell culture by compounds I, which exceeds the same value in the reference standard verapamil.
Синтез соединений проводили по схеме 1, выделение конечных соединений проводили методом колоночной хроматографии. Ход реакций отслеживали отбором проб и анализом хромато-масс спектров. На первой стадии проводили взаимодействие природного (-)-борнеола с хлорангидридом 2-хлорпропионовой кислоты с образованием соответствующего 3-хлорпропионата. Дальнейшая реакция последнего с насыщенными N-содержащими гетероциклами приводит к соединениям общей формулы I:Compounds were synthesized according to Scheme 1; the final compounds were isolated by column chromatography. The progress of the reactions was monitored by sampling and analysis of the chromato-mass spectra. At the first stage, natural (-) - borneol was reacted with 2-chloropropionic acid chloride to form the corresponding 3-chloropropionate. Further reaction of the latter with saturated N-containing heterocycles leads to compounds of the general formula I:
Спектральные исследования выполнены в Химическом Сервисном Центре коллективного пользования СО РАН. Величины удельного вращения определяли на спектрометре PolAAr 3005. Спектры ЯМР 1Н и 13С регистрировали на спектрометрах Bruker AV-400 (1Н: 400.13 МГц, 13С: 100.61 МГц), DRX-500 (1Н: 500.13 МГц, 13С: 125.76 МГц) и AV-600 (1Н: 600.30 МГц, 13С: 150.95 МГц). В качестве внутреннего стандарта использовали остаточные сигналы растворителя - хлороформа (1Н 7.24, 13С 76.90 м.д.). Отнесение сигналов в спектрах ЯМР проводилось с привлечение стандартных одномерных и двумерных экспериментов (COSY, HETCOR, COLOC, НМВС, HSQC). Нумерация атомов в соединениях дана для отнесения сигналов в спектрах ЯМР и не совпадает с нумерацией атомов в номенклатурном названии. Масс-спектры высокого разрешения записывали на спектрометре DFS ThermoScientific в режиме полного сканирования в диапазоне m/z 0-500, ионизация электронным ударом 70 эВ при прямом вводе образца. Разделение продуктов реакций проводили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (60-200 μ, Masherey-Nagel). Хромато-масс-спектры записывали на газовом хроматографе Agilent 7890 А с квадрупольным масс-спектрометром Agilent 5975С в качестве детектора, кварцевая колонка HP-5MS 30000 0.25 мм, газ-носитель - гелий. Удельное вращение выражено в (град⋅мл)⋅(г⋅дм)-1, концентрация раствора (г)⋅(100 мл)-1. Растворители перед использованием сушились и перегонялись.Spectral studies were performed at the Chemical Service Center for Collective Use of the SB RAS. The specific rotation values were determined on a PolAAr 3005 spectrometer. 1Н and 13С NMR spectra were recorded on Bruker AV-400 spectrometers (1Н: 400.13 MHz, 13С: 100.61 MHz), DRX-500 (1Н: 500.13 MHz, 13С: 125.76 MHz) and AV- 600 (1H: 600.30 MHz, 13C: 150.95 MHz). The residual signals of the solvent, chloroform ( 1 H, 7.24; 13 C, 76.90 ppm), were used as the internal standard. The assignment of signals in the NMR spectra was carried out using standard one-dimensional and two-dimensional experiments (COSY, HETCOR, COLOC, NMVS, HSQC). The numbering of atoms in compounds is given for assigning signals in the NMR spectra and does not coincide with the numbering of atoms in the nomenclature name. High-resolution mass spectra were recorded on a DFS ThermoScientific spectrometer in the full scan mode in the range m / z 0-500, electron impact ionization of 70 eV with direct injection of the sample. The reaction products were separated by column chromatography on silica gel (60-200 μm, Masherey-Nagel). Chromatography-mass spectra were recorded on an Agilent 7890 A gas chromatograph with an Agilent 5975C quadrupole mass spectrometer as a detector, an HP-5MS quartz column of 30,000 0.25 mm, a carrier gas — helium. Specific rotation is expressed in (deg⋅ml) ⋅ (g⋅dm) -1 , solution concentration (g) ⋅ (100 ml) -1 . The solvents were dried and distilled before use.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. Получение (1S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил 3-хлорпропаноатаExample 1. Obtaining (1S, 4S) -1,7,7-trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-yl 3-chloropropanoate
К раствору 3-хлорпропановой кислоты в CH2Cl2 добавили избыток (COCl)2 и каплю ДМФА. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч в атмосфере Ar. Избыток (COCl)2 удалили на ротационном испарителе, полученный хлорангидрид использовали свежеприготовленный. Далее к раствору (-)-борнеола 0.03 моль и Et3N 0.03 моль в 20 мл сухого CH2Cl2 в атмосфере Ar прибавляли 0.03 моль свежеприготовленного хлорангидрида 3-хлорпропановой кислоты. Реакционную смесь перемешивали и оставили на 24 ч при 23-25°C. Осадок гидрохлорида триэтиламина отфильтровывали, в фильтрат добавляли CH2Cl2, промывали насыщ. NaCl, сушили безводным Na2SO4. Осушитель отфильтровали, растворитель упарили. Выход 69%. (1S,4S)-1,7,7-Триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил 3-хлорпропаноат (промежуточное соединение) имеет следующую формулу:To a solution of 3-chloropropanoic acid in CH 2 Cl 2 was added an excess of (COCl) 2 and a drop of DMF. The reaction mixture was stirred at room temperature for 4 hours under Ar atmosphere. Excess (COCl) 2 was removed on a rotary evaporator, the resulting acid chloride was used freshly prepared. Then, 0.03 mol of freshly prepared 3-chloropropanoic acid chloride was added to a solution of (-) - borneol 0.03 mol and Et 3 N 0.03 mol in 20 ml of dry CH 2 Cl 2 in an Ar atmosphere. The reaction mixture was stirred and left for 24 hours at 23-25 ° C. The precipitate of triethylamine hydrochloride was filtered off, CH 2 Cl 2 was added to the filtrate, washed with sat. NaCl, dried with anhydrous Na 2 SO 4 . The desiccant was filtered, the solvent was evaporated. Yield 69%. (1S, 4S) -1,7,7-Trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-yl 3-chloropropanoate (intermediate) has the following formula:
ЯМР 1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 0.80 (3Н, с, Ме-9), 0.84 (3Н, с, Me-10), 0.87 (3Н, с, Ме-8), 0.97 (1Н, дд, 2J=13.7, J2н, 1к=3.5, Н-2эндо), 1.16-1.33 (2Н, м, Н-4эндо, Н-5экзо), 1.65 (1Н, дд, J3, 2к=J3, 4к=4.6, Н-3), 1.67-1.77 (1Н, м, Н-4экзо), 1.89 (1Н, ддд, 2J=12.9, J5н, 4н=9.3, J5н, 4к=4.4, Н-5эндо), 2.33 (1Н, м, Н-2экзо), 2.77 (2Н, т, J=6.6 Гц, Н-12), 3.74 (2Н, т, J=6.6 Гц, Н-13), 4.91 (1Н, ддд, J1к, 2к=10.0, J1к, 2н=3.5, J1к, 5к=2.2, Н-1экзо). ЯМР 13С (125 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 170.40 с (С-11), 80.50 д (С-1), 48.69 с (С-6), 47.69 с (С-7), 44.71 д (С-3), 39.18 д (С-13), 37.80 д (С-12), 36.54 т (С-2), 27.85 т (С-4), 26.97 т (С-5), 19.55 к (Ме-9), 18.69 к (Ме-10), 13.34 к (Ме-8). = -36.2 (CHCl3, с=0.7). Найдено: m/z 244.1225 [М]+ C13H21O2Cl. Вычислено: М=244.1222.1 H NMR (400 MHz, CDCl 3, δ, ppm): 0.80 (3H, s, Me-9), 0.84 (3H, s, Me-10), 0.87 (3H, s, Me-8), 0.97 (1H, dd, 2J = 13.7, J2n, 1k = 3.5, H-2endo), 1.16-1.33 (2H, m, H-4 endo, H-5exo), 1.65 (1H, dd, J3, 2k = J3,4k = 4.6, H-3), 1.67-1.77 (1H, m, H-4exo), 1.89 (1H, ddd, 2J = 12.9, J5n, 4n = 9.3, J5n, 4k = 4.4, H-5endo), 2.33 ( 1H, m, H-2exo), 2.77 (2H, t, J = 6.6 Hz, H-12), 3.74 (2H, t, J = 6.6 Hz, H-13), 4.91 (1H, ddd, J1k, 2k = 10.0, J1k, 2n = 3.5, J1k, 5k = 2.2, H-1exo). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ, ppm): 170.40 s (C-11), 80.50 d (C-1), 48.69 s (C-6), 47.69 s (C-7), 44.71 d (C-3), 39.18 d (C-13), 37.80 d (C-12), 36.54 t (C-2), 27.85 t (C-4), 26.97 t (C-5), 19.55 k (Me -9), 18.69 k (Me-10), 13.34 k (Me-8). = -36.2 (CHCl3, c = 0.7). Found: m / z 244.1225 [M] + C13H21O2Cl. Calculated: M = 244.1222.
Пример 2. Получение (1S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил-3-(пиперидин-1-ил)пропаноатаExample 2. Obtaining (1S, 4S) -1,7,7-trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-yl-3- (piperidin-1-yl) propanoate
Смесь 1 экв. (1S,4S)-1,7,7-триметилбицикло [2.2.1]гептан-2-ил 3-хлорпропаноата, 1.1 экв. соответствующего амина и 1 экв Et3N в 15 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в течение суток, затем растворитель упарили. К сухому остатку добавили 20 мл EtOAc и промыли насыщенным раствором NaCl, водный слой еще раз экстрагировали EtOAc. Объединенный органический слой сушили безводным Na2SO4 и упарили. Остаток хроматографировали на SiO2, используя в качестве элюента гексан/этилацетат (100:0→0:100)+метанол (1%). Выход 74%.A mixture of 1 eq. (1S, 4S) -1,7,7-trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-yl 3-chloropropanoate, 1.1 equiv. the corresponding amine and 1 equiv of Et 3 N in 15 ml of MeOH was stirred at room temperature for one day, then the solvent was evaporated. 20 ml of EtOAc was added to the dry residue and washed with saturated NaCl, the aqueous layer was extracted again with EtOAc. The combined organic layer was dried with anhydrous Na 2 SO 4 and evaporated. The residue was chromatographed on SiO 2 using hexane / ethyl acetate (100: 0 → 0: 100) + methanol (1%) as eluent. Yield 74%.
(1S,4S)-1,7,7-Триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил-3-(пиперидин-1-ил)пропаноат имеет следующую формулу (Ia):(1S, 4S) -1,7,7-Trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-yl-3- (piperidin-1-yl) propanoate has the following formula (Ia):
ЯМР1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д): 0.79 (3Н, с, Me-10), 0.83 (3Н, с, Ме-8), 0.86 (3Н, с, Ме-9), 0.94 (1Н, дд, 2J=13.7, J2н, 1к=3.5, Н-2эндо), 1.15-1.30 (2Н, м, Н-4эндо, Н-5экзо), 1.33-1.43 (2Н, м, Н-16), 1.49-1.57 (4Н, м, 2Н-15, 2Н-17), 1.63 (1Н, дд, J3, 2к=J3, 4к=4.6, Н-3), 1.65-1.76 (1Н, м, Н-4экзо), 1.85-1.94 (1Н, ддд, 2J=12.9, J5н, 4н=9.3, J5н, 4к=4.4, Н-5эндо), 2.30 (1H, м, Н-2экзо), 2.31-2.42 (4Н, уш. сиг, 2Н-14, 2Н-18), 2.43-2.53 (2Н, м, Н-12), 2.57-2.66 (2Н, м, Н-13), 4.86 (1Н, ддд, J1к, 2к=10.0, J1к, 2н=3.5, J1к, 5к=2.2, Н-1экзо). ЯМР 13С (125 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 172.62 с (С-11), 79.28 д (С-1), 54.02 т (С-13), 53.78 т (С-14, С-18), 48.32 с (С-6), 47.32 с (С-7), 44.73 д (С-3), 36.21 т (С-2), 32.33 т (С-12), 27.57 т (С-4), 26.66 т (С-5), 25.52 т (С-15, С-17), 23.87 т (С-16), 19.23 к (Ме-9), 18.38 к (Ме-10), 13.01 к (Ме-8). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3 , δ, ppm): 0.79 (3H, s, Me-10), 0.83 (3H, s, Me-8), 0.86 (3H, s, Me-9), 0.94 (1Н, dd, 2 J = 13.7, J 2Н, 1к = 3.5, Н-2 endo), 1.15-1.30 (2Н, m, Н-4 endo, Н-5exo), 1.33-1.43 (2Н, m, Н- 16), 1.49-1.57 (4Н, m, 2Н-15, 2Н-17), 1.63 (1Н, dd, J 3, 2к = J 3 , 4к = 4.6, Н-3), 1.65-1.76 (1Н, m , H-4exo), 1.85-1.94 (1H, ddd, 2 J = 12.9, J 5n, 4n = 9.3, J 5n , 4k = 4.4, H-5endo), 2.30 (1H, m, H-2exo), 2.31 -2.42 (4H, br.sig, 2H-14, 2H-18), 2.43-2.53 (2H, m, H-12), 2.57-2.66 (2H, m, H-13), 4.86 (1H, ddd, J 1k , 2k = 10.0, J 1k , 2n = 3.5, J 1k , 5k = 2.2, H-1exo). 13 C NMR (125 MHz, CDCl 3 , δ, ppm): 172.62 s (C-11), 79.28 d (C-1), 54.02 t (C-13), 53.78 t (C-14, C -18), 48.32 s (S-6), 47.32 s (S-7), 44.73 d (S-3), 36.21 t (S-2), 32.33 t (S-12), 27.57 t (S-4) ), 26.66 t (С-5), 25.52 t (С-15, С-17), 23.87 t (С-16), 19.23 k (Me-9), 18.38 k (Me-10), 13.01 k (Me -8).
Найдено: m/z 293.2356 [M]+ C18H31O2N. Вычислено: М=293.2349.Found: m / z 293.2356 [M] + C 18 H 31 O 2 N. Calculated: M = 293.2349.
Пример 3. Получение (1S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил-3-(4-метилпиперидин-1-ил)пропаноат (Iб)Example 3. Obtaining (1S, 4S) -1,7,7-trimethylbicyclo [2.2.1] heptan-2-yl-3- (4-methylpiperidin-1-yl) propanoate (IB)
ЯМР 1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д): 0.79 (3Н, с, Me-10), 0.84 (3Н, с, Ме-8), 0.87 (3Н, с, Ме-9), 0.89 (3Н, д, J=12.1, Me-17), 0.94 (1H, дд, 2J=13.7, J2н, 1к=3.5, Н-2эндо), 1.15-1.37 (5Н, м, Н-4эндо, Н-5экзо, Н-15а, Н-16, Н-18а), 1.53-1.61 (2Н, м, Н-15э, Н-18э), 1.63 (1Н, дд, J3, 2к=J3, 4к=4.6, Н-3), 1.65-1.76 (1Н, м, Н-4экзо), 1.84-1.97 (3Н, м, Н-5эндо, Н-14а, Н-19а), 2.30 (1Н, м, Н-2экзо), 2.45-2.52 (2Н, м, Н-12), 2.60-2.68 (2Н, м, Н-13), 2.79-2.86 (2Н, м, Н-14э, Н-19э), 4.86 (1Н, ддд, J1к, 2к=10.0, J1к, 2н=3.5, J1к, 5к=2.2, Н-1экзо). ЯМР 13С (125 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 172.61 с (С-11), 79.28 д (С-1), 53.67 т (С-13), 53.26 и 53.22 т (С-14, С-19), 48.32 с (С-6), 47.32 с (С-7), 44.43 д (С-3), 36.22 т (С-2), 33.89 и 33.87 т (С-15, С-18), 32.49 т (С-12), 30.25 д (С-16), 27.57 т (С-4), 26.67 т (С-5), 21.42 к (Ме-17), 19.24 к (Ме-9), 18.38 к (Ме-10), 13.01 к (Ме-8). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3 , δ, ppm): 0.79 (3H, s, Me-10), 0.84 (3H, s, Me-8), 0.87 (3H, s, Me-9), 0.89 (3H, d, J = 12.1, Me-17), 0.94 (1H, dd, 2 J = 13.7, J 2n, 1k = 3.5, H-2endo), 1.15-1.37 (5H, m, H-4endo, H-5exo, H-15a, H-16, H-18a), 1.53-1.61 (2H, m, H-15e, H-18e), 1.63 (1H, dd, J 3, 2k = J 3, 4k = 4.6, H-3), 1.65-1.76 (1H, m, H-4exo), 1.84-1.97 (3H, m, H-5endo, H-14a, H-19a), 2.30 (1H, m, H-2exo ), 2.45-2.52 (2Н, m, Н-12), 2.60-2.68 (2Н, m, Н-13), 2.79-2.86 (2Н, m, Н-14э, Н-19э), 4.86 (1Н, ddd , J 1k , 2k = 10.0, J 1k, 2n = 3.5, J 1k, 5k = 2.2, H-1exo). 13 C NMR (125 MHz, CDCl 3 , δ, ppm): 172.61 s (C-11), 79.28 d (C-1), 53.67 t (C-13), 53.26 and 53.22 t (C-14 , S-19), 48.32 s (S-6), 47.32 s (S-7), 44.43 d (S-3), 36.22 t (S-2), 33.89 and 33.87 t (S-15, S-18 ), 32.49 t (C-12), 30.25 d (C-16), 27.57 t (C-4), 26.67 t (C-5), 21.42 k (Me-17), 19.24 k (Me-9), 18.38 k (Me-10), 13.01 k (Me-8).
Найдено: m/z 307.2503 [M]+ C19H33O2N. Вычислено: М=307.2506. Выход 77%.Found: m / z 307.2503 [M] + C 19 H 33 O 2 N. Calculated: M = 307.2506. Yield 77%.
Пример 4. Определение цитотоксичности соединений на клетках линии 293FTExample 4. Determination of cytotoxicity of compounds on 293FT cell line
Стоковые растворы соединений в ДМСО (в концентрации 100 мМ) добавлялись в ростовую среду к клеткам-мишеням линии 293FT в различных концентрациях - от 10 мкМ до 500 мкМ - на 48 ч. По окончании инкубации клеток с веществами, к культурам клеток добавляли тетразолиевый краситель МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-тетразолиум бромид) до рабочей концентрации 0.5 мг/мл и инкубировали в течение 4 ч. Образующийся осадок формазана растворяли добавлением в ростовую среду 10% раствора додецилсульфата натрия с 0.01 М соляной кислотой. Количество формазана (пропорциональное количеству жизнеспособных клеток) определяли спектрофотометрически, измеряя абсорбцию при длине волны света 570 нм. Процент жизнеспособных клеток в культурах, содержащих разные концентрации исследуемых веществ [I], определяли по отношению к контролю (который представлял из себя культуру клеток 293FT, инкубируемую в ростовой среде с ДМСО в отсутствие соединений), пользуясь формулой:Stock solutions of the compounds in DMSO (at a concentration of 100 mM) were added to the growth medium to target cells of the 293FT line at various concentrations — from 10 μM to 500 μM — for 48 hours. After incubation of the cells with substances, MTT tetrazolium dye was added to the cell cultures (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-tetrazolium bromide) to a working concentration of 0.5 mg / ml and incubated for 4 hours. The resulting formazan precipitate was dissolved by adding 10% dodecyl sulfate solution to the growth medium sodium with 0.01 M hydrochloric acid. The amount of formazan (proportional to the number of viable cells) was determined spectrophotometrically, measuring the absorption at a wavelength of light 570 nm. The percentage of viable cells in cultures containing different concentrations of the studied substances [I] was determined in relation to the control (which was a 293FT cell culture incubated in a growth medium with DMSO in the absence of compounds) using the formula:
% жизнеспособных клеток [I]=ОП[I]/ОП [ДМСО].% viable cells [I] = OD [I] / OD [DMSO].
За величину CD50 (50% цитотоксическая концентрация) принимали концентрацию вещества, при которой выживало 50% клеток по сравнению с контролем.The CD50 value (50% cytotoxic concentration) was taken as the concentration of the substance at which 50% of the cells survived compared to the control.
Пример 5. Получение псевдовирусов на основе рекомбинантного капсида вируса везикулярного стоматита (ВВС), экспрессирующего на поверхности гликопротеины вирусов МарбургExample 5. Obtaining pseudoviruses based on a recombinant capsid of vesicular stomatitis virus (BBC) expressing Marburg virus glycoproteins on the surface
Рекомбинантный вирус везикулярного стоматита, псевдотипированный поверхностным гликопротеином G ВВС - pBBC-ΔG-G - представляет собой коммерчески доступный вирусный препарат для получения на его основе рекомбинантных вирусов везикулярного стоматита, псевдотипированных поверхностными гликопротеинами других вирусов. Для возможности количественного анализа инфекции такими псевдовирусами в геном рекомбинантного ВВС встроен репортерный ген люциферазы светлячка. Для получения псевдовируса, экспрессирующего поверхностный гликопротеин вируса Марбург (штамм Мусоке), клетки-продуценты линии 293FT сначала трансфицировались плазмидой, кодирующей ген этого гликопротеина (pcDNA3-MarVGP) (в количестве 5 мкг плазмиды на 60 мм чашку клеток-продуцентов). Через 24 ч после трансфекции, клетки-продуценты заражались 5 мкл (~106 трансдуцирующих единиц) pBBC-ΔG-G. Через 4 ч после инфекции инфицирующий псевдовирус отмывался, а среда заменялась на свежую. Препарат нового псевдовируса, экспрессирующего гликопротеин вируса Марбург - pBBC-ΔG-MarVGP - собирали через 24 ч после инфекции. Препараты псевдовирусов хранили при температуре -80°C.The recombinant vesicular stomatitis virus pseudotyped by surface BBC surface glycoprotein G pBBC-ΔG-G is a commercially available viral preparation for the production of recombinant vesicular stomatitis viruses pseudotyped by surface glycoproteins of other viruses. To allow quantitative analysis of infection with such pseudoviruses, the firefly luciferase reporter gene is built into the recombinant air force genome. To obtain a pseudovirus expressing the Marburg virus surface glycoprotein (Musoke strain), 293FT line producer cells were first transfected with a plasmid encoding the gene of this glycoprotein (pcDNA3-MarVGP) (in the amount of 5 μg plasmid per 60 mm producer cell plate). 24 hours after transfection, producer cells were infected with 5 μl (10 10 6 transducing units) of pBBC-ΔG-G. 4 hours after infection, the infecting pseudovirus was washed off and the medium was replaced with fresh. The preparation of a new pseudovirus expressing the Marburg virus glycoprotein - pBBC-ΔG-MarVGP - was collected 24 hours after infection. Pseudovirus preparations were stored at a temperature of -80 ° C.
Пример 6. Определение полуингибирующих концентраций соединений в отношении псевдовирусов pBBC-ΔG-MarVGP и pBBC-ΔG-G, расчет значений индекса селективности (SI) и коэффициента специфичности ингибитора (SC)Example 6. Determination of semi-inhibitory concentrations of compounds against pseudoviruses pBBC-ΔG-MarVGP and pBBC-ΔG-G, calculation of selectivity index (SI) and inhibitor specificity coefficient (SC)
Для определения инфекционной способности псевдовирусов использовали клетки-мишени линии НЕК293, рассаженные в 96-луночный планшет при плотности монослоя 80-90%. Определение инфекционности псевдовирусов в присутствии ингибиторов и в контрольных (неингибированных) образцах производили люминометрией через 24 ч после инфекции, все измерения производили в тройных повторах с определением среднего значения и стандартного отклонения. Для всех исследованных соединений определялись концентрации 50% ингибирования (IC50) для обоих псевдовирусов pBBC-ΔG-MarVGP и pBBC-ΔG-G. В дальнейшем, для каждого соединения рассчитывался индекс селективности (SI) - отношение токсичности соединения и ингибирующей активности против вируса Марбург (CD50/ICMarV50) и коэффициент специфичности ингибитора (SC), представляющий собой отношение полуингибирующих концентраций для двух псевдовирусов (ICMarV50 к ICVSV50). В качестве референсного соединения, ингибирующего инфекцию филовирусов, но не влияющего на инфекцию ВВС в терапевтических концентрациях, выбран ингибитор кальциевых каналов верапамил. Значения ICMarV50, ICVSV50, CD50, SI и SC для всех исследуемых веществ приведены в табл. 1.To determine the infectious ability of pseudoviruses, HEK293 target cells were used, which were placed in a 96-well plate at a monolayer density of 80-90%. The infectivity of pseudoviruses in the presence of inhibitors and in the control (uninhibited) samples was determined by luminometry 24 hours after infection, all measurements were performed in triplicate with determination of the average value and standard deviation. For all compounds tested, 50% inhibition concentrations (IC50) were determined for both pBBC-ΔG-MarVGP and pBBC-ΔG-G pseudoviruses. Subsequently, for each compound, a selectivity index (SI) was calculated - the ratio of the toxicity of the compound and the inhibitory activity against the Marburg virus (CD50 / IC MarV 50) and the coefficient of specificity of the inhibitor (SC), which is the ratio of half-inhibiting concentrations for two pseudoviruses (IC MarV 50 to IC VSV 50). A verapamil calcium channel inhibitor was chosen as the reference compound that inhibits the infection of filoviruses, but does not affect the infection of the BBC at therapeutic concentrations. The values of IC MarV 50, IC VSV 50, CD50, SI and SC for all test substances are given in table. one.
Пример 7. Определение противовирусного действия соединений Ia-б в отношении вируса Марбург штамм Рорр in vitro на культуре клеток VeroExample 7. Determination of the antiviral effect of compounds Ia-b against the virus Marburg strain Porr in vitro in Vero cell culture
В работе был использован вирус Марбург штамм Рорр, полученный из Государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ БВ «Вектор» Роспотребнадзора в виде культуральной жидкости (титр вируса 4,5 lgTCD50/ml).We used the Marburg strain Porr virus obtained from the State collection of causative agents of viral infections and rickettsioses of the Federal State Budget Scientific Center BV “Vector” of Rospotrebnadzor in the form of a culture fluid (virus titer 4.5 lgTCD50 / ml).
Определение эффективных (1С50) концентраций соединений было проведено в тесте снижения цитопатического действия вируса Марбург на клетки в трех повторах. Метод основан на способности жизнеспособных клеток поглощать и накапливать суправитальный краситель нейтральный красный.The determination of effective (1C50) concentrations of the compounds was carried out in a test of reducing the cytopathic effect of the Marburg virus on cells in triplicate. The method is based on the ability of viable cells to absorb and accumulate a neutral red supravital dye.
Культура клеток Vero была выращена в 96-луночных культуральных планшетах с конфлюэнтностью не менее 90%. Готовили последовательные понижающиеся трехкратные разведения соединений, начиная с концентрации 100 мкг/мл. В эксперименте использовали вирус Марбург с множественностью заражения 0,01 (эквивалентно дозе 100 TCD50 на лунку).Vero cell culture was grown in 96-well culture plates with a confluency of at least 90%. Serial decreasing triplicate dilutions of the compounds were prepared, starting at a concentration of 100 μg / ml. The experiment used the Marburg virus with a multiplicity of infection of 0.01 (equivalent to a dose of 100 TCD50 per well).
Определение ингибирующей активности и токсической концентрации соединений проводили одновременно. Для этого в культуральный планшет с монослоем клеток вносили разведения соединений, затем вносили поддерживающую среду без вируса (для определения токсической концентрации соединений) и жидкость содержащую вирус (для определения ингибирующей активности соединений). Культуральные планшеты инкубировали при 37°C в течение 7 суток, затем окрашивали нейтральным красным. Учет результатов проводили на планшетном анализаторе (Thermo Scientific Multiskan FC), обработку данных осуществляли при помощи программы SOFTmax PRO 4.0 с использованием 4-параметрического метода анализа. Для всех исследованных соединений определены 50% токсическая концентрация (CD50) и концентрации 50% ингибирования (IC50). В дальнейшем, для каждого соединения рассчитывался индекс селективности (SI) - отношение токсичности соединения и ингибирующей активности против вируса Марбург (CD50/IC50) (табл. 2).The determination of the inhibitory activity and toxic concentration of the compounds was carried out simultaneously. For this, dilutions of the compounds were added to the culture plate with a monolayer of cells, then a virus-free support medium (to determine the toxic concentration of the compounds) and a virus-containing liquid (to determine the inhibitory activity of the compounds) were added. The culture plates were incubated at 37 ° C for 7 days, then stained with neutral red. The results were taken into account on a tablet analyzer (Thermo Scientific Multiskan FC), data processing was performed using the SOFTmax PRO 4.0 program using a 4-parameter analysis method. For all compounds tested, 50% toxic concentration (CD50) and 50% inhibition concentration (IC50) were determined. Subsequently, for each compound, the selectivity index (SI) was calculated — the ratio of the toxicity of the compound and the inhibitory activity against the Marburg virus (CD50 / IC50) (Table 2).
Таким образом, заявленные соединения обладают противовирусной активностью в отношении вируса Марбург штамм Рорр.Thus, the claimed compounds possess antiviral activity against the virus Marburg strain Porr.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017133088A RU2649406C1 (en) | 2017-09-21 | 2017-09-21 | 3-n-substituted bornyl propionates used as marburg virus inhibitors |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017133088A RU2649406C1 (en) | 2017-09-21 | 2017-09-21 | 3-n-substituted bornyl propionates used as marburg virus inhibitors |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2649406C1 true RU2649406C1 (en) | 2018-04-03 |
Family
ID=61867066
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017133088A RU2649406C1 (en) | 2017-09-21 | 2017-09-21 | 3-n-substituted bornyl propionates used as marburg virus inhibitors |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2649406C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697716C1 (en) * | 2019-04-01 | 2019-08-19 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) | Hydrochloride 1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]heptan-2-yl 3-(piperidin-1-yl)propionate used as an ebola virus inhibitor |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0486280A2 (en) * | 1990-11-13 | 1992-05-20 | Merck & Co. Inc. | Piperidinylcamphorsulfonyl oxytocin antagonists |
| RU94031753A (en) * | 1993-09-02 | 1996-07-20 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) | Phenylalkanol amine derivatives |
| RU2088232C1 (en) * | 1995-02-14 | 1997-08-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Inhibitor of marburg virus reproduction |
| EA013965B1 (en) * | 2002-05-17 | 2010-08-30 | Дипартмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисез | Substituted ethylene diamines derivative for the treatment of microbacterial infections and a pharmaceutical composition based thereon |
-
2017
- 2017-09-21 RU RU2017133088A patent/RU2649406C1/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0486280A2 (en) * | 1990-11-13 | 1992-05-20 | Merck & Co. Inc. | Piperidinylcamphorsulfonyl oxytocin antagonists |
| RU94031753A (en) * | 1993-09-02 | 1996-07-20 | Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) | Phenylalkanol amine derivatives |
| RU2088232C1 (en) * | 1995-02-14 | 1997-08-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Inhibitor of marburg virus reproduction |
| EA013965B1 (en) * | 2002-05-17 | 2010-08-30 | Дипартмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисез | Substituted ethylene diamines derivative for the treatment of microbacterial infections and a pharmaceutical composition based thereon |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697716C1 (en) * | 2019-04-01 | 2019-08-19 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) | Hydrochloride 1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]heptan-2-yl 3-(piperidin-1-yl)propionate used as an ebola virus inhibitor |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6513853B2 (en) | Preparation of (S, S) -secoisolariciresinol diglucoside and (R, R) -secoisolariciresinol diglucoside | |
| RO121815B1 (en) | Substituted pentacyclic derivatives, pharmaceutical composition containing the same and use thereof as neuraminidase inhibitors | |
| EP2128125B1 (en) | Caffeoyl quinic acid derivatives containing nitrogen, and preparation method, pharmaceutically composition and usage thereof | |
| JP7031002B2 (en) | Crystal form, salt type and method for producing the pyridinoimidazole compound | |
| CN1950376A (en) | Curcumol derivatives, compositions comprising the same and use in manufacture of medicament | |
| EA027363B1 (en) | Derivatives of betulin | |
| US11638713B2 (en) | Patentiflorin A analogs as antiviral agents | |
| CN111410661B (en) | Cap-dependent endonuclease inhibitors and uses thereof | |
| UA122973C2 (en) | Mono- or di-substituted indole derivatives as dengue viral replication inhibitors | |
| Kovaleva et al. | Synthesis of D-(+)-camphor-based N-acylhydrazones and their antiviral activity | |
| UA120527C2 (en) | 4-substituted benzoxaborole compounds and uses thereof | |
| Kang et al. | Design and synthesis of new hybrids from 2-cyano-3, 12-dioxooleana-9-dien-28-oic acid and O2-(2, 4-dinitrophenyl) diazeniumdiolate for intervention of drug-resistant lung cancer | |
| Marvadi et al. | 5-Chloro-2-thiophenyl-1, 2, 3-triazolylmethyldihydroquinolines as dual inhibitors of Mycobacterium tuberculosis and influenza virus: Synthesis and evaluation | |
| RU2649406C1 (en) | 3-n-substituted bornyl propionates used as marburg virus inhibitors | |
| JP4482883B2 (en) | Compound having antiviral action and its combination | |
| RU2554934C1 (en) | IMINE COMPOUNDS OF CAMPHOR - EFFECTIVE INHIBITORS OF REPRODUCTION OF FLU VIRUS (A/California/07/09 (H1N1)pdm09 STRAIN) | |
| CN112592252B (en) | Cedrol derivative, preparation method and application thereof | |
| JP2019514843A (en) | Uridines phosphoramide prodrugs, process for their preparation and their use in medicine | |
| RU2607451C1 (en) | IMINE DERIVATIVES OF CAMPHOR, CONTAINING AROMATIC OR HETEROAROMATIC FRAGMENT - INHIBITORS OF REPRODUCTION OF FLU VIRUS (STRAIN A/CALIFORNIA/07/09(H1N1)pdm09) | |
| Dai et al. | Anti human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) agents 1. Discovery of benzyl phenyl ethers as new HIV-1 inhibitors in vitro | |
| RU2697716C1 (en) | Hydrochloride 1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]heptan-2-yl 3-(piperidin-1-yl)propionate used as an ebola virus inhibitor | |
| CN109836477B (en) | Phenylalanine derivative containing benzothiadiazine-3-ketone 1, 1-dioxide and preparation method and application thereof | |
| CN109867709B (en) | Preparation method and application of glycyrrhetinic acid series derivatives (TOGA-X) with anti-tumor effect | |
| EP2513060A1 (en) | Alpha-crystalline form of carbabenzpyride | |
| Vinoth et al. | Synthesis of novel chalcones through palladium-catalyzed CO cross-coupling reaction of bromo-chalcones with ethyl acetohydroxamate and their antiplasmodial evaluation against Plasmodium falcipuram in vitro |