RU2642593C1 - Method for determination of methyldope concentration in human blood plasma - Google Patents
Method for determination of methyldope concentration in human blood plasma Download PDFInfo
- Publication number
- RU2642593C1 RU2642593C1 RU2016143641A RU2016143641A RU2642593C1 RU 2642593 C1 RU2642593 C1 RU 2642593C1 RU 2016143641 A RU2016143641 A RU 2016143641A RU 2016143641 A RU2016143641 A RU 2016143641A RU 2642593 C1 RU2642593 C1 RU 2642593C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- concentration
- methyldopa
- plasma
- methyldope
- deproteinization
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Abstract
Description
Изобретение относится к фармации, а именно к фармацевтической химии.The invention relates to pharmacy, namely to pharmaceutical chemistry.
Метилдопа - это антигипертензивное средство центрального действия. Согласно международным и отечественным рекомендациям данный препарат является препаратом первой линии для лечения гипертонии беременных. Его применение направлено на предупреждение развития сердечно-сосудистых осложнений и улучшение ближайшего и отдаленного прогноза со стороны матери и будущего ребенка. Создание воспроизведенного препарата метилдопы может сделать данное лекарственное средство более доступным по цене для пациентов. Для подтверждения биоэквивалентности оригинального лекарственного препарата и дженерика требуются надежные методики количественного определения лекарственных веществ в плазме крови. Согласно требованиям международной нормативной документации предел количественного определения биоаналитических методик должен составлять не более 5% от максимальной концентрации лекарственного вещества в плазме крови (Cmax). Для лаборатории, которая проводит данные исследования, также важна высокая производительность процесса подготовки проб и аналитических процедур. В связи с этим большое значение имеет разработка новых точных и объективных методик, обеспечивающих высокую чувствительность при минимальной пробоподготовке.Methyldopa is a central antihypertensive drug. According to international and domestic recommendations, this drug is a first-line drug for the treatment of pregnant hypertension. Its use is aimed at preventing the development of cardiovascular complications and improving the near and distant prognosis of the mother and the unborn child. Creating a generic methyldopa drug can make this drug more affordable for patients. To confirm the bioequivalence of the original drug and generic, reliable methods for the quantitative determination of drugs in blood plasma are required. According to the requirements of international regulatory documentation, the limit of quantitative determination of bioanalytical methods should be no more than 5% of the maximum concentration of a drug substance in blood plasma (C max ). For the laboratory that conducts these studies, the high productivity of the sample preparation process and analytical procedures is also important. In this regard, the development of new accurate and objective techniques that provide high sensitivity with minimal sample preparation is of great importance.
Известен способ количественного определения метилдопы в плазме крови человека, заключающийся в том, что к плазме крови пациента добавляют раствор внутреннего стандарта фенилдопы, проводят жидкостно-жидкостную экстракцию дихлорметаном и измеряют концентрацию в диапазоне от 0,02 до 5 мкг/мл метилдопы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием по калибровочному графику (Olivera С.Н., Barrientos-Astigarraga R.E., Sucupira M.et al., Journal of Chromatography B, 768, pp. 341-348, 2002). Однако данный способ имеет ряд недостатков: длительная пробоподготовка за счет использования жидкостно-жидкостной экстакции, низкая точность.A known method for the quantitative determination of methyldopa in human plasma is that a solution of the internal standard of phenyldopa is added to the patient's blood plasma, liquid-liquid extraction is carried out with dichloromethane, and a concentration in the range from 0.02 to 5 μg / ml of methyldopa is measured by high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometric detection according to a calibration graph (Olivera S. N., Barrientos-Astigarraga RE, Sucupira M. et al., Journal of Chromatography B, 768, pp. 341-348, 2002). However, this method has several disadvantages: lengthy sample preparation through the use of liquid-liquid extraction, low accuracy.
Наиболее близким аналогом (прототипом) предлагаемого решения является способ, заключающийся в том, что плазму крови, полученную от пациента, подвергают депротеинизации метанолом, затем после центрифугирования в надосадочной жидкости проводят измерение концентрации метилдопы в диапазоне от 0,32 до 20 мкг/мл методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием при следующих условиях хроматографического разделения и ионизации (Vlase L., Mihu D., Рора D.S. et al., Studia UBB chemia, 58, pp. 31-41, 2013):The closest analogue (prototype) of the proposed solution is the method consisting in the fact that the blood plasma obtained from the patient is subjected to deproteinization with methanol, then after centrifugation in the supernatant, methyldopa concentration is measured in the range from 0.32 to 20 μg / ml using the highly effective method liquid chromatography with tandem mass spectrometric detection under the following chromatographic separation and ionization conditions (Vlase L., Mihu D., Rora DS et al., Studia UBB chemia, 58, pp. 31-41, 2013):
Колонка: Zorbax SB-C18 (150×4,6 мм, 5 мкм)Column: Zorbax SB-C18 (150 × 4.6 mm, 5 μm)
Подвижная фаза: ацетонитрил и раствор муравьиной кислоты 0,2% в объемном соотношении 98:2 соответственноMobile phase: acetonitrile and 0.2% formic acid solution in a 98: 2 volume ratio, respectively
Температура термостата: 40°СThermostat temperature: 40 ° C
Скорость потока: 0,8 мл/мин.Flow rate: 0.8 ml / min.
Способ ионизации: электрораспыление, полярность: положительнаяIonization method: electrospray, polarity: positive
Расчет концентрации проводят по калибровочному графику.Calculation of concentration is carried out according to the calibration schedule.
Однако данный способ имеет ряд недостатков: низкая чувствительность и точность.However, this method has several disadvantages: low sensitivity and accuracy.
Цель предлагаемого способа - повышение точности и объективности количественного определения метилдопы в плазме крови.The purpose of the proposed method is to increase the accuracy and objectivity of the quantitative determination of methyldopa in blood plasma.
Поставленная цель достигается тем, что для депротеинизации плазмы применяют раствор дейтерированного внутреннего стандарта метилдопы в метаноле, хроматографическое разделение компонентов матрицы проводят с использованием двух хроматографических колонок Phenomenex Lima Phenyl-Hexyl (50×3,0 мм, 5 мкм) и Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A (150×4,6 мм, 4 мкм), а электрораспылительную ионизацию осуществляют одновременно с химической ионизацией при атмосферном давлении.This goal is achieved by the fact that a solution of deuterated internal standard methyldopa in methanol is used for plasma deproteinization, chromatographic separation of the matrix components is carried out using two chromatographic columns Phenomenex Lima Phenyl-Hexyl (50 × 3.0 mm, 5 μm) and Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A (150 × 4.6 mm, 4 μm), and electrospray ionization is carried out simultaneously with chemical ionization at atmospheric pressure.
Новизна способа заключается в депротеинизации плазмы раствором дейтерированного внутреннего стандарта метилдопы в метаноле, хроматографическом разделении компонентов матрицы с использованием двух хроматографических колонок Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl (50×3,0 мм, 5 мкм) и Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A (150×4,6 мм, 4 мкм) и использовании электрораспылительной ионизации одновременно с химической ионизацией при атмосферном давлении.The novelty of the method consists in plasma deproteinization with a solution of deuterated internal standard methyldopa in methanol, chromatographic separation of the matrix components using two chromatographic columns Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl (50 × 3.0 mm, 5 μm) and Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A (150 × 4 , 6 mm, 4 μm) and the use of electrospray ionization simultaneously with chemical ionization at atmospheric pressure.
Технические решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками предлагаемого нами способа, не выявлены, что позволяет сделать вывод о соответствии предлагаемого способа критерию «изобретательский уровень».Technical solutions that have features that match the distinguishing features of our proposed method are not identified, which allows us to conclude that the proposed method meets the criterion of "inventive step".
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом: из плазмы крови отбирают аликвоту объемом 100 мкл, переносят ее в пробирку, добавляют 400 мкл раствора внутреннего стандарта дейтерированной метилдопы в концентрации 0,125 мкг/мл, затем пробирку закрывают, полученную смесь перемешивают на вортексе в течение 30 с при частоте около 2400 мин-1, подвергают центрифугированию в течение 10 мин при 3500 об/мин и температуре +4°С. Затем проводят хромато-масс-спектрометрическое определение при следующих условиях:The proposed method is as follows: an aliquot of 100 μl is taken from blood plasma, transferred to a test tube, 400 μl of a solution of internal standard deuterated methyldopa is added at a concentration of 0.125 μg / ml, then the tube is closed, the resulting mixture is stirred on a vortex for 30 s at a frequency about 2400 min -1 , subjected to centrifugation for 10 min at 3500 rpm and a temperature of + 4 ° C. Then carry out chromatography-mass spectrometric determination under the following conditions:
Колонка №1: Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl, 50×3,0 мм, 5 мкм;Column No. 1: Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl, 50 × 3.0 mm, 5 μm;
Колонка №2: Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A, 150×4,6 мм, 4 мкм;Column No. 2: Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A, 150 × 4.6 mm, 4 μm;
Температура термостата: 25°С;Thermostat temperature: 25 ° С;
Объем вводимой пробы: 8 мкл;The volume of the injected sample: 8 μl;
Подвижная фаза: метанол, деионизированная вода и формиатный буферный раствор в концентрации 80 ммоль/л в объемном соотношении 4:4:2 соответственно;Mobile phase: methanol, deionized water and formate buffer solution at a concentration of 80 mmol / L in a volume ratio of 4: 4: 2, respectively;
Скорость потока насоса А: до 1,25 мин анализа - 0,4 мл/мин, с 1,25 мин по 4,25 мин - 1,0 мл/мин, с 4,25 мин до конца анализа (8 мин) - 0,4 мл/мин;Pump A flow rate: up to 1.25 min of analysis - 0.4 ml / min, from 1.25 min to 4.25 min - 1.0 ml / min, from 4.25 min to the end of analysis (8 min) - 0.4 ml / min;
Скорость потока насоса В: 0,4 мл/мин;Pump B flow rate: 0.4 ml / min;
Положения шестипортового крана: до 0,75 мин поток элюента с колонки №1 направляется на слив, с 0,75 мин до 1,05 мин поток элюента с колонки №1 направляется на колонку №2, с 1,05 мин до конца анализа поток элюента с колонки №1 направляется на слив, с колонки №2 - в масс-спектрометрический детектор;Six-port crane position: up to 0.75 min, the eluent flow from column No. 1 is sent to the drain, from 0.75 min to 1.05 min the eluent flow from column No. 1 is sent to column No. 2, from 1.05 min to the end of the analysis, the flow the eluent from column No. 1 is sent to the drain, from column No. 2 to the mass spectrometric detector;
Способ ионизации: химическая ионизация при атмосферном давлении одновременно с электрораспылительной, полярность: положительная.Ionization method: chemical ionization at atmospheric pressure simultaneously with electrospray, polarity: positive.
Для детекции аналита и внутреннего стандарта были подобраны следующие параметры масс-спектрометрического детектора:For the detection of the analyte and the internal standard, the following parameters of the mass spectrometric detector were selected:
Поток распыляющего газа: 3 л/мин;Atomizing gas flow: 3 L / min;
Поток нагревающего газа: 5 л/мин;The flow of heating gas: 5 l / min;
Поток осушающего газа: 15 л/мин;Drying gas flow: 15 l / min;
Напряжение электроспрея: 4000 Вт;Electric spray voltage: 4000 W;
Температура интерфейса: 350°С;Interface temperature: 350 ° C;
Температура нагревательного блока: 300°С;Temperature of the heating block: 300 ° C;
Температура линии десольватации: 250°С;Desolvation line temperature: 250 ° C;
Давление газа в ячейке соударений: 270 кПа;Gas pressure in the collision cell: 270 kPa;
Режим детектирования метилдопы: MRM - m/z - 211,95→138,90;Methyldopa detection mode: MRM - m / z - 211.95 → 138.90;
Режим детектирования внутреннего стандарта: MRM - m/z - 214,95→169,00.Detection mode of the internal standard: MRM - m / z - 214.95 → 169.00.
Данные параметры индивидуальны для каждой модели масс-спектрометрического детектора.These parameters are individual for each model of the mass spectrometric detector.
Расчет концентрации метилдопы проводят путем сравнения соотношения площадей пиков метилдопы и дейтерированного внутреннего стандарта метилдопы со значениями данных соотношений в калибровочной зависимости, которая построена предварительно перед проведением анализа на модельных смесях в диапазоне от 0,020 до 3 мкг/мл, и если полученное соотношение площадей пиков укладывается в диапазон значений соотношений калибровочной зависимости, то концентрация метилдопы в плазме рассчитывается по линейному уравнению данной зависимостиThe calculation of the concentration of methyldopa is carried out by comparing the ratio of the peak areas of methyldopa and the deuterated internal standard of methyldopa with the values of these ratios in the calibration dependence, which was preliminarily constructed before analysis on model mixtures in the range from 0.020 to 3 μg / ml, and if the obtained ratio of peak areas fits into range of values of the ratios of the calibration dependence, the concentration of methyldopa in the plasma is calculated by the linear equation of this dependence
x=(y-b)/а,x = (y-b) / a,
где x - измеренная концентрация метилдопы в плазме;where x is the measured plasma concentration of methyldopa;
y - соотношение площадей пиков "аналит-внутренний стандарт";y is the ratio of peak areas "analyte-internal standard";
a - наклон калибровочной кривой;a is the slope of the calibration curve;
b - свободный член.b is a free member.
В рамках апробации способа проводилось определение концентрации метилдопы при исследовании биоэквивалентности препаратов таблеток "Метилдопа" в дозировке 250 мг (ЗАО «Р-Фарм», Россия, серия 20614) и таблеток "Допегит", содержащих метилдопу в дозировке 250 мг (ОАО "Фармацевтический завод ЭГИС", Венгрия, серии D358N1014 и A358N0813) на 24 испытуемых.As part of the testing of the method, methyldopa concentration was determined in the study of the bioequivalence of preparations of methyldopa tablets in a dosage of 250 mg (ZAO R-Pharm, Russia, series 20614) and Dopegit tablets containing methyldopa in a dosage of 250 mg (OJSC Pharmaceutical Plant EGIS ", Hungary, series D358N1014 and A358N0813) for 24 subjects.
В процессе разработки способа была проведена его валидация на модельных смесях по показателям селективность, нижний предел количественного определения, линейность калибровочных кривых, внутрисерийная и межсерийная прецизионность и точность, эффект переноса предыдущей пробы, степень извлечения, тест на разведение образца, оценка эффекта матрицы, стабильность согласно руководству ЕМЕА (Guideline on bioanalytical method validation, EMEA, 192217, 2009) и руководству по экспертизе лекарственных средств (А.Н. Миронов (ред.), Руководство по экспертизе лекарственных средств, т. 1, Москва, 2013). Данный способ соответствует всем установленным требованиям.In the process of developing the method, it was validated on model mixtures in terms of selectivity, lower limit of quantification, linearity of calibration curves, serial and inter-series precision and accuracy, transfer effect of the previous sample, degree of extraction, dilution test of the sample, evaluation of the matrix effect, stability according to Guidelines on EMEA (Guideline on bioanalytical method validation, EMEA, 192217, 2009) and Guidelines for the examination of medicines (A.N. Mironov (eds.), Guidelines for the examination of drugs tv, v. 1, Moscow, 2013). This method meets all the established requirements.
В рамках валидации проводилась оценка показателей «калибровочная кривая» и «нижний предел количественного определения» путем анализа модельных смесей плазмы, содержащей метилдопу, на 8 уровнях концентраций в диапазоне от 0,02 до 3 мкг/мл. Для приготовления данных модельных смесей к 950 мкл плазмы добавляли 50 мкл стандартного раствора метилдопы в ацетонитриле. Концентрации стандартных растворов представлены в таблице 1:As part of the validation, the “calibration curve” and “lower limit of quantitative determination” indicators were evaluated by analyzing model plasma mixtures containing methyldopa at 8 concentration levels ranging from 0.02 to 3 μg / ml. To prepare these model mixtures, 50 μl of a standard solution of methyldopa in acetonitrile was added to 950 μl of plasma. The concentration of standard solutions are presented in table 1:
Каждую пробу анализировали 6 раз: измеряли соотношение площадей пиков «аналит / внутренний стандарт». По средним значениям данных соотношений был построен калибровочный график, уравнение которого: x=(y-0,0514)/1,4679, где y - соотношение площадей пиков «аналит-внутренний стандарт», x - измеренная концентрация метилдопы в плазме. По данному уравнению рассчитывались концентрации данных градуировочных образцов: значения не менее 75% концентраций должны быть в пределах ±15% от номинальных значений (для нижнего предела количественного определения в пределах ±20%), коэффициент вариации (CV) не должен превышать 15% (для нижнего предела количественного определения - 20%). Полученные результаты представлены в таблице 2.Each sample was analyzed 6 times: the ratio of peak areas “analyte / internal standard” was measured. Based on the average values of these ratios, a calibration graph was constructed, the equation of which is x = (y-0.0514) / 1.4679, where y is the ratio of peak areas “analyte-internal standard”, x is the measured plasma concentration of methyldopa. According to this equation, the concentrations of these calibration samples were calculated: values of at least 75% of the concentrations should be within ± 15% of the nominal values (for the lower limit of quantification within ± 20%), the coefficient of variation (CV) should not exceed 15% (for the lower limit of quantification - 20%). The results are presented in table 2.
Из данных, приведенных в таблицы 2, видно, что способ соответствует критериям приемлемости по показателям «калибровочная кривая» и «нижний предел количественного определения».From the data shown in table 2, it can be seen that the method meets the eligibility criteria for the indicators "calibration curve" and "lower limit of quantification".
Оценка внутрисерийной и межсерийной точности и прецизионности способа оценивалась на 6 уровнях концентрации: 0,02, 0,06, 0,30, 1,20, 2,40, 3,00 мкг/мл. Для приготовления данных модельных смесей к 950 мкл плазмы добавляли 50 мкл стандартного раствора метилдопы в ацетонитриле. Концентрации стандартных растворов представлены в таблице 3.The evaluation of the intra-series and inter-series accuracy and precision of the method was evaluated at 6 concentration levels: 0.02, 0.06, 0.30, 1.20, 2.40, 3.00 μg / ml. To prepare these model mixtures, 50 μl of a standard solution of methyldopa in acetonitrile was added to 950 μl of plasma. The concentration of standard solutions are presented in table 3.
При выполнении оценки межсерийной прецизионности и точности результаты тестов, проведенных в разные дни разными лаборантами, сравниваются между собой. Прецизионность метода выражалась коэффициентами вариации. Точность оценивалась путем соотношения значения, полученного по результатам измерения, и номинального значения. Расчет концентраций выполнялся по калибровочному графику, уравнение которого: x=(y-0,0514)/1,4679, где y - соотношение площадей пиков «аналит - внутренний стандарт», x - измеренная концентрация метилдопы в плазме. Значения измеренных концентраций должны быть в пределах ±15% от номинальных значений (для нижнего предела количественного определения в пределах ±20%), коэффициент вариации (CV) не должен превышать 15% (для нижнего предела количественного определения - 20%). Полученные результаты представлены в таблице 4.When evaluating interservice precision and accuracy, the results of tests conducted on different days by different laboratory assistants are compared. The precision of the method was expressed by the coefficients of variation. Accuracy was estimated by correlating the value obtained from the measurement results with the nominal value. The concentrations were calculated according to the calibration graph, the equation of which is x = (y-0.0514) / 1.4679, where y is the ratio of peak areas “analyte - internal standard”, x is the measured plasma concentration of methyldopa. The values of the measured concentrations should be within ± 15% of the nominal values (for the lower limit of quantitation within ± 20%), the coefficient of variation (CV) should not exceed 15% (for the lower limit of quantitation - 20%). The results are presented in table 4.
Из данных, приведенных в таблице 4, видно, что способ соответствует критериям приемлемости по показателям внутрисерийная и межсерийная прецизионность и точность.From the data shown in table 4, it can be seen that the method meets the criteria for acceptability in terms of intra-serial and inter-series precision and accuracy.
Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами использования.The proposed method is illustrated by the following examples of use.
Пример 1. Испытуемый М., 25 лет, принял 1 таблетку "Допегит", содержащую метилдопу в дозировке 250 мг. Затем у него проводился забор крови из вены предплечья через установленный катетер через 5 мин, 15 мин, 30 мин, 45 мин, 1 ч, 1 ч 15 мин, 1 ч 30 мин, 1 ч 45 мин, 2 ч, 2 ч 15 мин, 2 ч 30 мин, 3 ч, 4 ч, 6 ч, 9 ч, 12 ч, 18 ч, 24 ч после приема лекарственного препарата. После отбора крови пробирки направляли на центрифугирование для отделения плазмы. Затем из данных образцов отбирали аликвоту объемом 100 мкл, переносили ее в пробирку, добавляли 400 мкл раствора внутреннего стандарта дейтерированной метилдопы в концентрации 0,125 мкг/мл, затем пробирку закрывали, полученную смесь перемешивали на вортексе в течение 30 с при частоте около 2400 мин-1, подвергали центрифугированию в течение 10 мин при 3500 об/мин и температуре +4°С. Хромато-масс-спектрометрическое определение концентрации метилдопы в надосадочной жидкости проводили с применением двух хроматографических колонок Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl (50×3,0 мм, 5 мкм) и Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A (150×4,6 мм, 4 мкм) и использовании электрораспылительной ионизации одновременно с химической ионизацией при атмосферном давлении. Для расчета концентрации метилдопы применялся калибровочный график, уравнение которого: х=(у+0,021)/1,3512, где y - соотношение площадей пиков «аналит - внутренний стандарт», x - измеренная концентрация метилдопы в плазме. Полученные значения концентраций представлены в таблице 5.Example 1. Subject M., 25 years old, took 1 tablet "Dopegit" containing methyldopa in a dosage of 250 mg. Then he took blood from the vein of the forearm through an installed catheter after 5 minutes, 15 minutes, 30 minutes, 45 minutes, 1 hour, 1 hour 15 minutes, 1 hour 30 minutes, 1 hour 45 minutes, 2 hours, 2 hours 15 minutes , 2 hours 30 minutes, 3 hours, 4 hours, 6 hours, 9 hours, 12 hours, 18 hours, 24 hours after taking the drug. After blood sampling, the tubes were sent for centrifugation to separate the plasma. Then, an aliquot of 100 μl was taken from these samples, transferred to a test tube, 400 μl of a solution of internal standard deuterated methyldopa was added at a concentration of 0.125 μg / ml, then the test tube was closed, the resulting mixture was vortexed for 30 s at a frequency of about 2400 min -1 were subjected to centrifugation for 10 min at 3500 rpm and a temperature of + 4 ° C. Chromatography-mass spectrometric determination of the concentration of methyldopa in the supernatant was carried out using two chromatographic columns Phenomenex Luna Phenyl-Hexyl (50 × 3.0 mm, 5 μm) and Phenomenex Synergi Fusion - RP 80A (150 × 4.6 mm, 4 μm ) and the use of electrospray ionization simultaneously with chemical ionization at atmospheric pressure. To calculate the concentration of methyldopa, a calibration graph was used, the equation of which is x = (y + 0.021) / 1.3512, where y is the ratio of peak areas “analyte - internal standard”, x is the measured concentration of methyldopa in plasma. The obtained concentration values are presented in table 5.
Часть результатов определения концентраций метилдопы в плазме была подтверждена с помощью способа-прототипа (Vlase L., Mihu D., Рора D.S. et al., Studia UBB chemia, 58, pp. 31-41, 2013). Так концентрация метилдопы через 1 час после отбора составила 1,040 мкг/мл - расхождение составило 2,11%, через 4 часа - 0,460 мкг/мл - расхождение составило 2,6%, что укладывается в допустимый диапазон точности: ±15% от измеренной концентрации.A part of the results of determining the concentration of methyldopa in plasma was confirmed using the prototype method (Vlase L., Mihu D., Rora D.S. et al., Studia UBB chemia, 58, pp. 31-41, 2013). So, the concentration of methyldopa 1 hour after selection was 1.040 μg / ml - the difference was 2.11%, after 4 hours - 0.460 μg / ml - the difference was 2.6%, which fits into the acceptable accuracy range: ± 15% of the measured concentration .
Таким образом, разработанный способ позволяет измерить концентрацию метилдопы в плазме крови пациента в диапазоне от 0,02 до 3 мкг/мл.Thus, the developed method allows you to measure the concentration of methyldopa in the patient’s blood plasma in the range from 0.02 to 3 μg / ml.
Предлагаемый способ применен для определения концентрации метилдопы в плазме крови в лаборатории ООО "Квинта-Аналитика Ярославль".The proposed method is used to determine the concentration of methyldopa in blood plasma in the laboratory of LLC Quinta-Analytics Yaroslavl.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016143641A RU2642593C1 (en) | 2016-11-07 | 2016-11-07 | Method for determination of methyldope concentration in human blood plasma |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016143641A RU2642593C1 (en) | 2016-11-07 | 2016-11-07 | Method for determination of methyldope concentration in human blood plasma |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2642593C1 true RU2642593C1 (en) | 2018-01-25 |
Family
ID=61023920
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016143641A RU2642593C1 (en) | 2016-11-07 | 2016-11-07 | Method for determination of methyldope concentration in human blood plasma |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2642593C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114814018A (en) * | 2022-04-18 | 2022-07-29 | 合肥创新医药技术有限公司 | Method for determining doxylamine in human plasma through LC-MS/MS |
-
2016
- 2016-11-07 RU RU2016143641A patent/RU2642593C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| H.F.MARTINS1 et al. Development of a HPLC/MS/MS methodology for determining 3-O-methyldopa in human plasma and its application in a bioequivalence study / Rev Inst Adolfo Lutz., 2014; 73(1), pages 96-105. * |
| H.F.MARTINS1 et al. Development of a HPLC/MS/MS methodology for determining 3-O-methyldopa in human plasma and its application in a bioequivalence study / Rev Inst Adolfo Lutz., 2014; 73(1), pages 96-105. H.M.Jones et al. A STUDY OF THE TRANSFER OF a-METHYLDOPA TO THE HUMAN FOETUS AND NEWBORN INFANT / Br J Clin Pharmacol., 1978 Nov; 6(5), pages 432-434. И.Г.Зенкевич и др. ОСОБЕННОСТИ ВЭЖХ-МС ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОНОЭТАНОЛАМИНА В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ МЕТОДОМ СТАНДАРТНОЙ ДОБАВКИ / Аналитика и контроль, 2012, т. 16, N 2, стр. 181-187. * |
| H.M.Jones et al. A STUDY OF THE TRANSFER OF a-METHYLDOPA TO THE HUMAN FOETUS AND NEWBORN INFANT / Br J Clin Pharmacol., 1978 Nov; 6(5), pages 432-434. * |
| И.Г.Зенкевич и др. ОСОБЕННОСТИ ВЭЖХ-МС ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОНОЭТАНОЛАМИНА В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ МЕТОДОМ СТАНДАРТНОЙ ДОБАВКИ / Аналитика и контроль, 2012, т. 16, N 2, стр. 181-187. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114814018A (en) * | 2022-04-18 | 2022-07-29 | 合肥创新医药技术有限公司 | Method for determining doxylamine in human plasma through LC-MS/MS |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Koal et al. | Challenges in mass spectrometry based targeted metabolomics | |
| Shen et al. | Developing urinary metabolomic signatures as early bladder cancer diagnostic markers | |
| Ma et al. | Determination of duloxetine in human plasma via LC/MS and subsequent application to a pharmacokinetic study in healthy Chinese volunteers | |
| Jeong et al. | Simultaneous determination of sildenafil, tadalafil, and vardenafil in pharmaceutical preparations by high-temperature gas chromatography/mass spectrometry | |
| Wang et al. | Simultaneous determination of creatine phosphate, creatine and 12 nucleotides in rat heart by LC–MS/MS | |
| Peake et al. | Improved separation and analysis of plasma amino acids by modification of the MassTrak™ AAA Solution Ultraperformance® liquid chromatography method | |
| CN102253129A (en) | Method for simultaneously testing plasma concentration of multiple anti-human-immunodeficiency-virus (HIV) medicaments | |
| CN113092601B (en) | Method for detecting betamethasone 17-propionate and betamethasone 21-propionate in cosmetics | |
| RU2642593C1 (en) | Method for determination of methyldope concentration in human blood plasma | |
| CN107957467B (en) | Method for separating and measuring lysophosphatidylcholine in pharmaceutical preparation | |
| Zhang et al. | Validated LC-MS/MS method for the determination of rosuvastatin in human plasma: application to a bioequivalence study in Chinese volunteers | |
| Wiriyakosol et al. | A LC/MS/MS method for determination of tenofovir in human plasma and its application to toxicity monitoring | |
| Banda et al. | Determination of mesalazine, a low bioavailability olsalazine metabolite in human plasma by UHPLC–MS/MS: Application to a pharmacokinetic study | |
| Wang et al. | Quantitative determination of famotidine in human maternal plasma, umbilical cord plasma and urine using high‐performance liquid chromatography–mass spectrometry | |
| WO2016049828A1 (en) | Obese population specific biomarker composition and use thereof | |
| Zhang et al. | In situ calibration of direct analysis in real time-mass spectrometry for direct quantification: urine excretion rate index creatinine as an example | |
| Wang et al. | A liquid chromatography method with single quadrupole mass spectrometry for quantitative determination of indomethacin in maternal plasma and urine of pregnant patients | |
| Pourkarim et al. | Determination of verapamil in exhaled breath condensate by using microextraction and liquid chromatography | |
| Rudrapal et al. | Bioanalysis: methods, techniques, and applications | |
| Ren et al. | Determination of lomerizine in human plasma by liquid chromatography/tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetic study | |
| Makvandi et al. | Detection of anabolic androgenic steroids in serum samples | |
| RU2642288C1 (en) | Method for determination of mycophenolic acid concentration in human blood plasma | |
| Yu et al. | Validation and comparison of a rapid liquid chromatography tandem mass spectrometry method for serum 25OHD with the efficiency of separating 3-epi 25OHD3 | |
| Lee et al. | Development of liquid chromatography tandem mass spectrometry method for determination of spironolactone in human plasma: application to a bioequivalence study of Daewon Spiracton tablet®(spironolactone 50 mg) | |
| CN102621267A (en) | Method for measuring D-sorbitol in plasma or urine |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181108 |