RU2636619C1 - Method for vaginal atrophy treatment in women in postmenopause considering vaginal epithelium and microbiocenosis state - Google Patents

Method for vaginal atrophy treatment in women in postmenopause considering vaginal epithelium and microbiocenosis state Download PDF

Info

Publication number
RU2636619C1
RU2636619C1 RU2017105333A RU2017105333A RU2636619C1 RU 2636619 C1 RU2636619 C1 RU 2636619C1 RU 2017105333 A RU2017105333 A RU 2017105333A RU 2017105333 A RU2017105333 A RU 2017105333A RU 2636619 C1 RU2636619 C1 RU 2636619C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
spp
vaginal
sample
women
atrophy
Prior art date
Application number
RU2017105333A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ангелина Владиславовна Глазунова
Светлана Владимировна Юренева
Лариса Сергеевна Ежова
Дмитрий Юрьевич Трофимов
Андрей Евгеньевич Донников
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма ДНК-Технология"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации, Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма ДНК-Технология" filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority to RU2017105333A priority Critical patent/RU2636619C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2636619C1 publication Critical patent/RU2636619C1/en

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.SUBSTANCE: bio material is taken using a vaginal or urethral probe by scraping the vagina. The number of genomic equivalents of microorganism and their fraction in the total bacterial mass are determined using the "Femoflor-16" reagent kit by real-time PCR. If the proportion of Lactobacillus spp. is more than 80%, normocenosis, characterized by the dominance of normoflora is diagnosed. If the proportion of Lactobacillus spp. is less than 80%, dysbiosis is diagnosed. At vaginal atrophy against a background of normocoenosis hormonal therapy is appointed. At a vaginal atrophy against a background of dysbiosis hormonal therapy and lactic culture containing preparations are appointed.EFFECT: invention provides development of individual approaches to vaginal atrophy treatment in postmenopausal women, taking into account the state of the vaginal biocenosis.5 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии, и может использоваться для лечения атрофического вагинита у женщин в постменопаузе. Постменопауза характеризуется эстрогендефицитным состоянием у женщин, обусловленным возрастным снижением, а затем и прекращением функции яичников. Как известно, любые эпителиальные ткани реагируют на изменение окружающей их гормональной среды сходным образом, но ни одна из них не может сравниться с эпителием свода влагалища и шейки матки по скорости и отчетливости реакции на гормоны, в первую очередь на половые стероиды. Снижение концентрации женских половых гормонов приводит не только к появлению атрофии слизистой влагалища и связанным с этим неприятным симптомам в вульве и влагалище, но и к изменениям в структуре ее микрофлоры.The invention relates to medicine, in particular to gynecology, and can be used to treat atrophic vaginitis in postmenopausal women. Postmenopause is characterized by an estrogen-deficient state in women, caused by age-related decline, and then the termination of ovarian function. As you know, any epithelial tissue reacts to changes in the surrounding hormonal environment in a similar way, but none of them can be compared with the epithelium of the vaginal and cervix fornix in terms of the speed and distinctness of the reaction to hormones, primarily sex steroids. A decrease in the concentration of female sex hormones leads not only to the appearance of atrophy of the vaginal mucosa and the associated unpleasant symptoms in the vulva and vagina, but also to changes in the structure of its microflora.

Принимая во внимание патогенез заболевания, терапия эстрогенами является золотым стандартом лечения. Гормональная терапия достаточно быстро улучшает индекс созревания эпителия влагалища и толщину слизистой оболочки.Considering the pathogenesis of the disease, estrogen therapy is the gold standard in treatment. Hormone therapy quickly enough improves the maturation index of the vaginal epithelium and the thickness of the mucous membrane.

Однако подобная тактика ведения женщин акцентируется исключительно на состояние слизистой влагалища, не принимая во внимания изменения, происходящие в микрофлоре влагалища. Последние исследования демонстрируют тесную связь между последствиями гипоэстрогенного состояния у женщин в постменопаузе, особенностями биоценоза влагалища и симптомами BA. Согласно результатам последних исследований [Hummelen R, Macklaim JM, Bisanz JE, et al. Vaginal microbiome and epithelial gene array in post-menopausal women with moderate to severe dryness. PLoS One 2011; 6: e26602] сухость влагалища у женщин в постменопаузе имеет обратную корреляционную связь с численностью лактобактерий в вагинальном биотопе (p=0,00141). Отсутствие сухости влагалища либо незначительный дискомфорт во влагалище наблюдали у женщин с высоким содержанием лактобктерий в биоценозе, в то время как наиболее выраженные симптомы сопровождались трансформацией микроэкологии влагалища в сторону увеличения численности Prevotella timonensis, Porphyromonas, Peptoniphilus и Bacillus на фоне снижения лактобактериальной обсемененности. Таким образом, современные подходы лечения ВА не принимают во внимание изменения микрофлоры влагалища и тем самым упускают из виду одну из возможных патогенетический причин возникновения жалоб у женщин постменопаузе вследствие эстрогенной недостаточности.However, this tactic of women’s management focuses exclusively on the condition of the vaginal mucosa, not taking into account the changes occurring in the microflora of the vagina. Recent studies demonstrate a close relationship between the effects of a hypoestrogenic state in postmenopausal women, vaginal biocenosis, and BA symptoms. According to recent studies [Hummelen R, Macklaim JM, Bisanz JE, et al. Vaginal microbiome and epithelial gene array in post-menopausal women with moderate to severe dryness. PLoS One 2011; 6: e26602] vaginal dryness in postmenopausal women has an inverse correlation with the number of lactobacilli in the vaginal biotope (p = 0.00141). Lack of vaginal dryness or slight discomfort in the vagina was observed in women with a high content of lactobacilli in the biocenosis, while the most pronounced symptoms were accompanied by a transformation of the vaginal microecology towards an increase in the number of Prevotella timonensis, Porphyromonas, Peptoniphilus and Bacillus against the background of a decrease in lactobacilli. Thus, modern approaches to the treatment of VA do not take into account changes in the microflora of the vagina and thereby lose sight of one of the possible pathogenetic causes of complaints in postmenopausal women due to estrogen deficiency.

К аналогам предлагаемого в качестве изобретения способа можно отнести: «применение эстриола в низкой дозе» (RU 2483734), «Способ лечения климактерических расстройств у женщин во время или после менопаузы» (RU 2268035), «Способ лечения атрофического кольпита» (RU 2300370). К недостаткам аналогов относятся отсутствие дифференцированного подхода к терапии в зависимости от состояния биоценоза влагалища. Эффект лечения в данных работах оценивали по виду ороговевших клеток, определением индекса созревания влагалищного эпителия, кольпоскопии, оценке общей трофики и жалоб пациентов.The analogues of the method proposed as an invention include: “the use of estriol in a low dose” (RU 2483734), “A method for the treatment of menopausal disorders in women during or after menopause” (RU 2268035), “A method for the treatment of atrophic colpitis” (RU 2300370) . The disadvantages of analogues include the lack of a differentiated approach to therapy depending on the state of the vaginal biocenosis. The effect of treatment in these works was assessed by the appearance of keratinized cells, by determining the maturation index of the vaginal epithelium, colposcopy, and by evaluating the total trophism and patient complaints.

Исторически сложилось, что первые исследования, посвященные изучению компонентов экосистемы влагалища у женщин, проводились с помощью микроскопического и/или микробиологического (культурального) методов диагностики. Однако эти методы диагностики не лишены недостатков.Historically, the first studies on the components of the vaginal ecosystem in women were carried out using microscopic and / or microbiological (cultural) diagnostic methods. However, these diagnostic methods are not without drawbacks.

Микроскопический метод исследования позволяет идентифицировать ассоциированный с исследуемым материалом микроорганизм в фиксированном препарате, т.е. метод предоставляет лишь качественную оценку состава биоценоза. К тому же, что «эффективность обнаружения микроорганизма в препарате однозначно определяется степенью обсемененности им исследуемого материала: если при обсемененности, превышающей 106 клеток/мл, обнаружение микроорганизмов не встречает затруднений, то при обсемененности 105 клеток/мл оно становится весьма трудно разрешимой задачей, а при обсемененности, не превышающей 104 клеток/мл - фактически неразрешимой». Также известно, что многие виды и роды условно патогенных микроорганизмов имеют похожие морфотипы, что затрудняет оценить видовую характеристику бактерий в препарате, окрашенном по Граму.The microscopic research method allows you to identify the microorganism associated with the test material in a fixed preparation, i.e. the method provides only a qualitative assessment of the composition of the biocenosis. In addition, “the efficiency of detecting a microorganism in a preparation is uniquely determined by the degree of contamination of the studied material by it: if, with an insemination exceeding 106 cells / ml, the detection of microorganisms is not difficult, then when it is seeded 105 cells / ml, it becomes a very difficult task to solve, and with an insemination not exceeding 104 cells / ml - practically insoluble. " It is also known that many species and genera of conditionally pathogenic microorganisms have similar morphotypes, which makes it difficult to assess the species characteristics of bacteria in a Gram stained preparation.

Кроме того, данный метод диагностики не позволяет идентифицировать ряд этиологически значимых условно патогенных бактерий, как например, Atopobium vaginae, Megasphaera spp., Mobiluncus spp. и тд.In addition, this diagnostic method does not allow the identification of a number of etiologically significant conditionally pathogenic bacteria, such as Atopobium vaginae, Megasphaera spp., Mobiluncus spp. etc.

Вторым методом идентификации микробиома влагалища является культуральный метод, который, который позволяет установить видовой состав аэробных, факультативно анаэробных и некоторых облигатно анаэробных бактерий. К недостаткам данной методики можно отнести длительные сроки культивирования микроорганизмов (в среднем 5 дней) и необходимость сохранения их жизнеспособности до момента поступления биоматериала в лабораторию, а также отсутствие условий для культивирования таких микроорганизмов во многих лечебных учреждений практического здравоохранения. Кроме того, имеющиеся микробиологические критерии базируются лишь на оценке процентного соотношения тех или иных микроорганизмов без учета референсных значений каждого микроорганизма. Данные методы исследования были применены в нескольких работах.The second method for identifying the vaginal microbiome is the cultural method, which allows you to establish the species composition of aerobic, optional anaerobic and some obligate anaerobic bacteria. The disadvantages of this technique include the long periods of cultivation of microorganisms (on average 5 days) and the need to maintain their viability until the biomaterial arrives in the laboratory, as well as the lack of conditions for the cultivation of such microorganisms in many medical institutions of practical health care. In addition, the existing microbiological criteria are based only on assessing the percentage ratio of certain microorganisms without taking into account the reference values of each microorganism. These research methods have been applied in several works.

В 2002 году проведена работа по анализу микробного пейзажа у женщин в постменопаузе. Описанные результаты были получены в рамках диссертации на соискание степени кандидата медицинских наук по теме: «Клинико-патогенетические особенности вагинальной атрофии в постменопаузе» (Есефидзе Ж.Т.). Автор определил микроценоз слизистой оболочки влагалища у пациенток в постменопаузе на основании культуральной диагностики и микроскопии вагинальных мазков, окрашенных по Граму. По результатам интегральной оценки состава микрофлоры, характера вагинального эпителия и лейкоцитарной реакции у женщин выявлены различные состояния микроэкологии влагалища. «Согласно поученным данным у женщин в постменопаузе наиболее часто встречается условно нормоценоз и вагинальная атрофия (43% и 41% соответственно). Под условно нормоценозом понимали незначительное снижение титра лактобацилл на 1-2 порядка в ассоциации с умеренным или низким титром УПМ, как факультативного, так и облигатоно-анаэробного происхождения. Микробиологической особенностью вагинальной атрофии являлось элиминация или резкое снижение лактобацилл при отсутствии массивной колонизации вагинального биотопа УПМ. У 15% пациенток был выявлен бактериальный вагиноз и у 1% неспецифический вагинит» [Есефидзе Жанна Тамазовна. Клинико-патогенетические особенности вагинальной атрофии в постменопаузе. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. Москва, 2002].In 2002, work was carried out to analyze the microbial landscape in postmenopausal women. The described results were obtained as part of a dissertation for the degree of candidate of medical sciences on the topic: "Clinical and pathogenetic features of vaginal atrophy in postmenopausal women" (Yesefidze Zh.T.). The author determined the microcenosis of the vaginal mucosa in postmenopausal patients on the basis of cultural diagnosis and microscopy of vaginal smears stained by Gram. According to the results of an integrated assessment of the composition of the microflora, the nature of the vaginal epithelium and leukocyte reaction in women, various conditions of the vaginal microecology were revealed. “According to the data obtained, post-menopausal women are most likely to have conditionally normal coenosis and vaginal atrophy (43% and 41%, respectively). By conditional normocenosis was understood a slight decrease in the titer of lactobacilli by 1-2 orders of magnitude in association with a moderate or low titer of UPM, both optional and obligate-anaerobic origin. The microbiological feature of vaginal atrophy was the elimination or sharp decrease in lactobacilli in the absence of massive colonization of the UPM vaginal biotope. Bacterial vaginosis was detected in 15% of patients and nonspecific vaginitis in 1% ”[Esefidze Zhanna Tamazovna. Clinical and pathogenetic features of vaginal atrophy in postmenopausal women. The dissertation for the degree of candidate of medical sciences. Moscow, 2002].

Известен способ, описанный как «одновременный забор отделяемого и соскобного материала из влагалища, с последующим смывом из влагалища 5,0 мл 6,0% раствора полиглюкина, цитологическим исследованием окрашенного по Граму мазка соскобного материала с определением бактериальной обсемененности эпителиоцитов, количества лейкоцитов и ключевых клеток, посева отделяемого влагалища и соскобного материала из серийных разведений на питательные среды с определением количества лактобацилл, условно-патогенной факультативно-анаэробной и облигатно-анаэробной микрофлоры, определяют в смыве из влагалища концентрации IgA, sIgA, IgM и свободного секреторного компонента» (RU 2249821). В данной работе сравнивали данные, полученные в результате исследования, с критериями, установленными для нормоценоза влагалища, и делали вывод о состоянии микробиоценоза влагалища. Также известен способ комплексного микробиологического исследования пациенток с наличием жидкости в полости матки.The known method described as “simultaneous sampling of detachable and scraping material from the vagina, followed by rinsing from the vagina of 5.0 ml of 6.0% polyglucin solution, cytological examination of a gram stained smear of scraping material with determination of bacterial contamination of epithelial cells, the number of leukocytes and key cells , sowing a detachable vagina and scraping material from serial dilutions on culture media with the determination of the number of lactobacilli, conditionally pathogenic facultative anaerobic and obligate naerobnoy microflora determined in the vaginal washings of IgA concentrations, sIgA, IgM and free secretory component »(RU 2249821). In this work, the data obtained as a result of the study were compared with the criteria established for the normocenosis of the vagina, and a conclusion was made about the state of the vaginal microbiocenosis. Also known is a method of complex microbiological examination of patients with the presence of fluid in the uterine cavity.

В рамках данного исследования проводилось комплексное микробиологическое исследование, которое включало оценку микробиоценоза влагалища по данным микроскопии мазка, окрашенного по Грамму, и культурального исследования вагинального отделяемого, изучение микрофлоры аспирата из полости матки. По данным интегральной оценки состава микрофлоры, характера вагинального эпителия и лейкоцитарной реакции у обследуемых женщин в постменопаузе выявлены различные состояния микроэкологии влагалища. Согласно результатам исследования основную группу женщин на 52,8% составили пациентки с атрофическим кольпитом, в 38,6% случаев выявлен бактериальный вагиноз, и только у 8,6% женщин отмечен условно нормоценоз. Контрольную группу - 66%, составили пациентки с условно нормоценозом и 34% с атрофическим кольпитом. Микробиологический анализ аспирата из полости матки показал массивное микробное обсеменение эндометрия у большинства женщин с наличием жидкости в полости матки. Общее количество микроорганизмов достигало 5-8 ∧ КОЕ/мл. Выявлен полимикробный характер микрофлоры. Характер микрофлоры напоминает вагинальный спектр.In the framework of this study, a comprehensive microbiological study was carried out, which included an assessment of the vaginal microbiocenosis according to Gram stained smear microscopy and a culture study of the vaginal discharge, study of the microflora of the uterine cavity. According to the integrated assessment of the composition of the microflora, the nature of the vaginal epithelium and leukocyte reaction in the examined postmenopausal women, various conditions of the vaginal microecology were revealed. According to the results of the study, the main group of women was 52.8% with patients with atrophic colpitis, bacterial vaginosis was detected in 38.6% of cases, and conditionally normal coenosis was observed in only 8.6% of women. The control group - 66%, consisted of patients with conditionally normocenosis and 34% with atrophic colpitis. Microbiological analysis of aspirate from the uterine cavity showed massive microbial contamination of the endometrium in most women with fluid in the uterine cavity. The total number of microorganisms reached 5-8 ∧ CFU / ml. The polymicrobial nature of microflora was revealed. The nature of the microflora resembles the vaginal spectrum.

У пациенток контрольной группы аспираты из полости матки при бактериологическом исследовании были стерильными. На основе полученных результатов УЗИ с ЦДК и доплерометрии, микроскопических, бактериологических и цитологических исследований вагинального отделяемого и аспирата из полости матки определяли тактику врача в терапии указанных расстройств [Гасанова Мехрибан Кязим кызы. Современные подходы к диагностике и лечению серозометры в постменопаузе. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. Москва, 2008].In patients of the control group, aspirates from the uterus during sterilization were sterile. Based on the results of ultrasound with CDC and dopplerometry, microscopic, bacteriological and cytological studies of the vaginal discharge and aspirate from the uterine cavity, the doctor’s tactics in the treatment of these disorders were determined [Hasanova Mehriban Kyzim kyzy. Modern approaches to the diagnosis and treatment of postmenopausal serosometers. The dissertation for the degree of candidate of medical sciences. Moscow, 2008].

Известен способ интегральной оценки состояния микробиоты влагалища и диагностика оппортунистических вагинитов позволяет установить видовой состав аэробных, факультативно- и облигатно-анаэробных бактерий, микроаэрофилов, в том числе лактобацилл, а также дрожжевых грибов рода Candida. Данная работа выполнялась с у четом комплексного исследования вагинального отделяемого с помощью микроскопии мазка, окрашенного по Граму, и культурального исследования. При микроскопии оценивают состояние вагинального эпителия, лейкоцитарную реакцию, количественный и качественный состав микрофлоры по бактериальным морфотипам. Разработаны критерии нормы вагинальной микробиоты у женщин репродуктивного возраста: общая микробная обсемененность не превышает 106-108 КОЕ/мл; абсолютное преобладание лактобацилл; условно-патогенные микроорганизмы определяются в низком титре (менее 104 КОЕ/мл) или отсутствуют. Также приведены характеристики различных нарушений вагинальной микрофлоры (бактериальный вагиноз (БВ), кандидозный вагинит (KB), сочетание БВ и KB, бессимптомное носительство грибов, неспецифический (аэробный) вагинит, мезоценоз, цитолитический вагиноз, вагинальная эпителиальная атрофия). [Анкирская А.С., Муравьева В.В. «Интегральная оценка состояния микробиоты влагалища. Диагностика оппортунистических вагинитов» (медицинская технология). – Москва, 2011. - 19 с.].A known method for the integral assessment of the state of the vaginal microbiota and the diagnosis of opportunistic vaginitis makes it possible to establish the species composition of aerobic, facultative and obligate-anaerobic bacteria, microaerophiles, including lactobacilli, as well as yeast of the Candida genus. This work was carried out taking into account a comprehensive study of the vaginal discharge using microscopy smear, gram stained, and cultural studies. Microscopy assesses the state of the vaginal epithelium, leukocyte reaction, quantitative and qualitative composition of microflora by bacterial morphotypes. Criteria for the norm of vaginal microbiota in women of reproductive age have been developed: total microbial contamination does not exceed 10 6 -10 8 CFU / ml; the absolute predominance of lactobacilli; opportunistic microorganisms are detected in a low titer (less than 10 4 CFU / ml) or absent. The characteristics of various disorders of vaginal microflora (bacterial vaginosis (BV), candidal vaginitis (KB), a combination of BV and KB, asymptomatic carriage of fungi, nonspecific (aerobic) vaginitis, mesocenosis, cytolytic vaginosis, vaginal epithelial atrophy) are also given. [Ankirskaya A.S., Muravyova V.V. “Integral assessment of the vaginal microbiota. Diagnosis of opportunistic vaginitis "(medical technology). - Moscow, 2011. - 19 p.].

Для более детальной характеристики микрофлоры влагалища требуются молекулярные методы исследования, такие как полимеразная цепная реакция с детекцией результатов в режиме реального времени и секвенирование гена 16S рРНК, обладающая высокой чувствительностью и специфичностью. Суть метода ПЦР в режиме «реального времени» заключается в том, что с помощью метода ПЦР в «реальном времени» в исследуемой биопробе определяют общее число геномов микроорганизмов, характерных для конкретного биотопа, число геномов нормобиоты и условно-патогенной биоты.A more detailed characterization of the vaginal microflora requires molecular research methods, such as polymerase chain reaction with real-time detection of results and sequencing of the 16S rRNA gene, which is highly sensitive and specific. The essence of the real-time PCR method is that, using the real-time PCR method, the total number of microorganisms genomes characteristic of a particular biotope, the number of normobiota and conditionally pathogenic biomes are determined in the studied bioassay.

Одним из ближайших аналогов для оценки микробного спектра слизистой влагалища у женщин в постменопаузе является способ оценки состояния микробиоты влагалища среди женщин репродуктивного возраста [Л.Д. Андросова, Медицинский Альманах №4 (13), ноябрь 2010, с. 177-179]. Суть данного способа диагностики дисбаланса микробиоты различных биотопов человека и степени его выраженности (RU 2362808), заключающийся в том, что с помощью метода полимеразной цепной реакции в «реальном времени» в исследуемой биопробе определяют общее число геномов бактерий, характерных для конкретного биотопа, число геномов нормобиоты и условно-патогенной биоты. Полученные величины сравнивают между собой, определяют соотношение между числом геномов нормобиоты и условно-патогенной биоты и при превышении числа геномов нормобиоты относительно числа геномов условно-патогенной биоты в 1000 раз констатируют отсутствие дисбаланса, оценивая данный показатель как вариант нормы. При значении данного показателя менее чем 1000 раз диагностируют дисбаланс и устанавливают степень его выраженности путем определения соотношения между числом геномов нормобиоты и общим числом геномов бактерий, присутствующих в исследуемой пробе, а также между числом геномов условно-патогенной биоты и нормобиоты. При снижении числа геномов нормобиоты относительно общего числа геномов бактерий в 10-100 раз и снижении числа геномов условно-патогенной биоты относительно числа геномов нормобиоты в 100-1000 раз устанавливают легкую степень дисбаланса, а при превышении числа геномов нормобиоты относительно общего числа геномов микроорганизмов более чем в 100 раз и превышении числа геномов условно-патогенной биоты относительно числа геномов нормобиоты в 10 раз и более раз или менее этой величины устанавливают выраженную степень дисбаланса.One of the closest analogues for assessing the microbial spectrum of the vaginal mucosa in postmenopausal women is a method for assessing the state of the vaginal microbiota among women of reproductive age [L.D. Androsova, Medical Almanac No. 4 (13), November 2010, p. 177-179]. The essence of this method for diagnosing the imbalance of the microbiota of various human biotopes and the degree of its severity (RU 2362808), which consists in the fact that using the method of polymerase chain reaction in "real time" in the studied bioassay determine the total number of bacterial genomes characteristic of a particular biotope, the number of genomes normobiotics and opportunistic biota. The obtained values are compared with each other, the ratio between the number of normobiota and opportunistic biota genomes is determined, and when the number of normobiota genomes exceeds the number of opportunistic biota genomes 1000 times, the absence of imbalance is noted, evaluating this indicator as a normal variant. If the value of this indicator is less than 1000 times, an imbalance is diagnosed and its severity is established by determining the ratio between the number of normobiota genomes and the total number of bacterial genomes present in the test sample, as well as between the number of conditionally pathogenic biota and normobiota genomes. With a decrease in the number of normobiota genomes relative to the total number of bacterial genomes by 10-100 times and a decrease in the number of opportunistic biota genomes with respect to the number of normobiota genomes by 100-1000 times, a slight degree of imbalance is established, and when the number of normobiota genomes exceeds the total number of microorganism genomes more than 100 times and when the number of genomes of conditionally pathogenic biota is exceeded relative to the number of normobiota genomes 10 times or more times or less than this value, a pronounced degree of imbalance is established.

Также известен другой способ диагностики инфекционно-воспалительных урогенитальных заболеваний у женщин, основанный на ПЦР в «реальном времени» [Болдырева М.Н., Липова Е.В., Витвицкая Ю.Г. Урогенитальные инфекции у женщин, обусловленные условно-патогенной биотой: способы выявления и коррекция // Научные исследования. - 2010. №2. - С. 26-31]. С помощью вышеописанной методики авторы определяют общую бактериальную массу, количественное и качественное содержание содержание Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae, Streptococcus spp., Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp., Lachnobacterium spp. / Clostridium spp., Peptostococcus spp., Eubacterium spp., Prevotella bivia / Porphyromonas spp., Megasphera spp. / Veilonella spp. / Dialister spp., Sneathia spp. / Leptotrihia spp. / Fusobacterium spp., Atopobium vaginae, Gardnerella vaginalis, Candida albicans. В зависимости от качественного и количественного состава микрофлоры авторы проводят микробиологическую диагностику (анаэробный вагиноз, аэробный вагинит, смешанный аэробно-анаэробный вагинит), а также оценивают степень выраженности нарушений: 1 степень (слабовыраженная) или 2 степень (выраженная).Another method for diagnosing infectious and inflammatory urogenital diseases in women is also known, based on real-time PCR [Boldyreva MN, Lipova EV, Vitvitskaya Yu.G. Urogenital infections in women caused by opportunistic biota: methods for detection and correction // Scientific research. - 2010. No. 2. - S. 26-31]. Using the above methodology, the authors determine the total bacterial mass, quantitative and qualitative content of Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae, Streptococcus spp., Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp., Lachnobacterium spp. / Clostridium spp., Peptostococcus spp., Eubacterium spp., Prevotella bivia / Porphyromonas spp., Megasphera spp. / Veilonella spp. / Dialister spp., Sneathia spp. / Leptotrihia spp. / Fusobacterium spp., Atopobium vaginae, Gardnerella vaginalis, Candida albicans. Depending on the qualitative and quantitative composition of microflora, the authors conduct microbiological diagnostics (anaerobic vaginosis, aerobic vaginitis, mixed aerobic-anaerobic vaginitis), and also assess the severity of disorders: 1 degree (mild) or 2 degree (expressed).

В рамках диссертации на соискание степени кандидата медицинских наук по теме: «Патогенетическое обоснование дифференцированного лечения рецидивирующих сращений малых половых губ в периоде раннего детства» проведена работа по анализу микробного пейзажа у девочек от 0 до 3 лет (№2545897). С помощью ПЦР-исследования в режиме реального времени оценивали состояние микроценоза слизистой оболочки влагалища для здоровых девочек в возрасте от 0 до 3 лет, по результатам которого авторы установили такие параметры как общую бактериальную обсемененность в центильном интервале от 105,1 до 106,2 ГЭ/образец с представительством микроорганизмов: Prevotella bivia/Porphiromonas ГЭ/обр от 103,0 до 106,0, Enterobacterium spp. ГЭ/обр от 102,0 до 105,0, Eubacterium spp. ГЭ/обр от 103,0 до 106,0, Megasphaera spp/Velionella spp/Dialister ГЭ/обр от 103,0 до 105,0, Peptostreptococcus spp. ГЭ/обр от 103,0 до 105,0, Streptococcus spp. ГЭ/обр от 103,0 до 105,0, Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp. ГЭ/обр от 103,0 до 105,0, Snethia spp / Fusobacterium spp / Leptotrihia ГЭ/обр от 102,0 до 105,0, Lachnobacterium spp / Clostridium spp. ГЭ/обр от 103,0 до 104,0, Staphylococcus spp. ГЭ/обр от 103,0 до 104,0, Gardnerella vaginalis ГЭ/обр от 0 до 103,0, Lactobacillus spp.ГЭ/обр от 0 до 102,0, Bifidobacterium ГЭ/обр от 0 до 103,0, Enterococcus spp. ГЭ/обр от 0 до 104,0, Atopobium vaginae ГЭ/обр от 0 до 103,0 при отсутствии ДНК патогенных микроорганизмов.In the framework of the dissertation for the degree of candidate of medical sciences on the topic: “Pathogenetic justification for the differentiated treatment of recurrent fusion of the labia minora in early childhood”, work was carried out to analyze the microbial landscape in girls from 0 to 3 years old (No. 2545897). Using real-time PCR studies, the state of the microcenosis of the vaginal mucosa for healthy girls aged 0 to 3 years was evaluated, according to the results of which the authors established parameters such as total bacterial contamination in the centile range from 10 5.1 to 10 6.2 GE / sample with the representation of microorganisms: Prevotella bivia / Porphiromonas GE / arr from 10 3.0 to 10 6.0 , Enterobacterium spp. GE / arr from 10 2.0 to 10 5.0 , Eubacterium spp. GE / arr from 10 3.0 to 10 6.0 , Megasphaera spp / Velionella spp / Dialister GE / ar from 10 3.0 to 10 5.0 , Peptostreptococcus spp. GE / arr from 10 3.0 to 10 5.0 , Streptococcus spp. GE / arr from 10 3.0 to 10 5.0 , Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp. GE / arr from 10 3.0 to 10 5.0 , Snethia spp / Fusobacterium spp / Leptotrihia GE / ar from 102.0 to 10 5.0 , Lachnobacterium spp / Clostridium spp. GE / arr from 10 3.0 to 10 4.0 , Staphylococcus spp. GE / arr from 10 3.0 to 10 4.0 , Gardnerella vaginalis GE / ar from 0 to 10 3.0 , Lactobacillus spp. GE / ar from 0 to 10 2.0 , Bifidobacterium GE / ar from 0 to 10 3 0 , Enterococcus spp. GE / arr from 0 to 10 4.0 , Atopobium vaginae GE / ar from 0 to 10 3.0 in the absence of DNA of pathogenic microorganisms.

Данный способ, как и описанный выше, ориентированы на изучение микробиоты влагалища у женщин репродуктивного возраста и девочек в возрасте от 0 до 3 лет и не учитывают возможные особенности микробного пейзажа слизистой оболочки влагалища у женщин постменопаузального периода.This method, as described above, is aimed at studying the microbiota of the vagina in women of reproductive age and girls aged 0 to 3 years and does not take into account the possible features of the microbial landscape of the vaginal mucosa in postmenopausal women.

Задачей изобретения является разработка индивидуальных подходов лечения вагинальной атрофии у женщин в постменопаузе с учетом состояния биоценоза влагалища при использовании ПЦР-РВ.The objective of the invention is to develop individual approaches for the treatment of vaginal atrophy in postmenopausal women, taking into account the state of the vaginal biocenosis when using PCR-RV.

Методика исследованияResearch Methodology

При выполнении данного исследования нами было обследовано 136 женщин в постменопаузе. Критериями отбора в группу обследуемых явились: отсутствие менструаций в течение последнего года, длительность менопаузы от 1 года до 20 лет. Критерии исключения были: гормонозависимые опухоли; влагалищное кровотечение неясной этиологии; тромбозы (венозные и артериальные), в т.ч. в анамнезе; прием ЗГТ в течение 6 месяцев до начала проведения исследования; системная и местная антибактериальная терапия в течение 1 месяца до начала проведения исследования; сахарный диабет; склероатрофический лихен; ИППП; дисплазия шейки матки средней и тяжелой степени, отказ пациентки от участия в исследовании на любом этапе.In this study, we examined 136 postmenopausal women. The selection criteria for the group of subjects were: the absence of menstruation during the last year, the duration of menopause from 1 year to 20 years. Exclusion criteria were: hormone-dependent tumors; vaginal bleeding of unknown etiology; thrombosis (venous and arterial), including in the anamnesis; taking HRT for 6 months before the start of the study; systemic and local antibiotic therapy within 1 month before the start of the study; diabetes; scleroatrophic lichen; STI moderate and severe cervical dysplasia, the patient's refusal to participate in the study at any stage.

Всем пациенткам проводили диагностику ВА с помощью цитологического метода исследования. Цитологический соскоб стенки влагалища производили из верхней трети с помощью урогенитального зонда. В дальнейшем вагинальный мазок подвергали окрашиванию согласно технике по Папаниколау и подсчету индекса созревания эпителия влагалища (ИСЭВ). ИСЭВ рассчитывали на основе процентного соотношения эпителиальных клеток: поверхностных; промежуточных; базальных и парабазальных: ИСЗВ = 0,5 × кол-во промежуточных клеток (%) + 1 × кол-во поверхностных клеток (%); (Норма - ≥65%; <65 - вагинальная атрофия).All patients were diagnosed with VA using the cytological method of research. Cytological scraping of the vaginal wall was performed from the upper third using an urogenital probe. Subsequently, the vaginal smear was stained according to the Papanicolaou technique and the vaginal epithelium maturation index (ISEV) was calculated. ISES was calculated based on the percentage of epithelial cells: surface; intermediate; basal and parabasal: ISIS = 0.5 × number of intermediate cells (%) + 1 × number of surface cells (%); (Norm - ≥65%; <65 - vaginal atrophy).

Симптомы ВА оценивали с помощью валидизированной анкеты «Vulvovaginal Symptoms Questionnaire (VSQ)».VA symptoms were evaluated using the validated questionnaire “Vulvovaginal Symptoms Questionnaire (VSQ)”.

Для оценки интенсивности симптомов BA использовали 5-ти бальную систему D. Barlow.A 5-point D. Barlow system was used to assess the intensity of BA symptoms.

1 балл - незначительная проблема, не оказывающая влияния на повседневную жизнь;1 point - a minor problem that does not affect everyday life;

2 балла - дискомфорт, периодически влияющий на повседневную жизнь;2 points - discomfort periodically affecting everyday life;

3 балла - выраженная рецидивирующая проблема, влияющая на повседневную жизнь;3 points - a pronounced recurrent problem that affects everyday life;

4 балла - выраженные проблема, постоянно влияющая на повседневную жизнь;4 points - a pronounced problem that constantly affects everyday life;

5 баллов - крайне выраженная проблема, мешающая жить.5 points - a very pronounced problem that interferes with life.

Для оценки состояния микробиоценоза влагалища проводилась ПЦР-диагностика мазка-соскоба. Забор биологического материала стенки влагалища осуществлялся при помощи стерильного уро-гинекологического зонда. Перед началом анализа количественного и качественного состава биоты исследуемого региона подтверждалось соблюдение техники получения соскоба эпителиоцитов. Показателем адекватности процедуры получения биоматериала являлось достаточное количество геномной ДНК человека (контроль взятия материала - КВМ), попадающей в пробу из эпителиальных клеток, при правильной технике взятия биоматериала. Показатель КВМ оценивался в абсолютных значениях (геном-эквивалент на образец, ГЭ/обр.), за минимально достаточный уровень принимался показатель, равный 104 ГЭ. При снижении данного показателя результат ПЦР в режиме реального времени считался недостоверным. Уровень КВМ, был валиден во всех случаях, что подтверждает объективность последующего анализа полученных результатов.To assess the condition of the vaginal microbiocenosis, PCR diagnostics of a smear-scraping was performed. The biological material of the vaginal wall was taken using a sterile urogynecological probe. Before starting the analysis of the quantitative and qualitative composition of the biota of the studied region, compliance with the technique for producing scrapings of epithelial cells was confirmed. An indicator of the adequacy of the procedure for obtaining biomaterial was a sufficient amount of human genomic DNA (control of material sampling - CME) falling into the sample from epithelial cells, with the correct technique of biomaterial sampling. The KVM index was estimated in absolute values (genome equivalent per sample, GE / sample), the indicator equal to 10 4 GE was taken as the minimum sufficient level. With a decrease in this indicator, the result of real-time PCR was considered unreliable. The KVM level was valid in all cases, which confirms the objectivity of the subsequent analysis of the results.

При исследовании микробиоценоза влагалища также учитывалась оценка состояния нормофлоры. Для оценки нормоценоза в зависимости от процентного соотношения доли лактобактерий в составе ОБМ были сформировано три группы: 1 - Lactobacillus spp.больше 80%, 2 - содержание Lactobacillus spp. от 20% до 80%, 3 - Lactobacillus spp. меньше 20%. В качестве нормоценоза был принят вариант биоценоза с высоким содержанием лактобактерий, т.е. 1 группа. 2 группа расценивалась как умеренный дисбиоз влагалища и 3 - как выраженный дисбиоз влагалища [«Применение метода полимеразной цепной реакции в реальном времени для оценки микробиоценоза урогенитального тракта у женщин (тест Фемофлор®)». Москва 2011]. Для удобства интерпретации данных из-за малочисленности 2 группы, 2 и 3 группы были объединены.In the study of vaginal microbiocenosis, the assessment of the state of normoflora was also taken into account. To assess the normocenosis, depending on the percentage of the share of lactobacilli in the MBP, three groups were formed: 1 - Lactobacillus spp. More than 80%, 2 - the content of Lactobacillus spp. from 20% to 80%, 3 - Lactobacillus spp. less than 20%. A variant of biocenosis with a high content of lactobacilli, i.e. 1 group. Group 2 was regarded as moderate vaginal dysbiosis and 3 as pronounced vaginal dysbiosis ["The use of the real-time polymerase chain reaction method for assessing the microbiocenosis of the urogenital tract in women (Femoflor® test)." Moscow 2011]. For the convenience of data interpretation, due to the paucity, 2 groups, 2 and 3 groups were combined.

На последнем этапе проводили статистический анализ полученных клинико-лабораторных данных.At the last stage, a statistical analysis of the obtained clinical and laboratory data was performed.

Полученные результатыResults

В исследовании приняли участие 136 женщин в возрасте от 40 до 75 лет (средний возраст - 55,3±5,8 года) в постменопаузе с длительностью постменопаузы от 1 года до 19 лет (средняя длительность постменопаузы - 6,4±5,2 года).The study involved 136 women aged 40 to 75 years (average age - 55.3 ± 5.8 years) in postmenopausal women with a duration of postmenopause from 1 year to 19 years (average postmenopausal duration - 6.4 ± 5.2 years )

1 этап. Всем пациенткам провели цитологическое исследование стенки влагалища (вагинальная атрофия подтвердилась у 84 пациенток), анкетирование для уточнения наличия жалоб и их интенсивности, а также количественно определяли общую бактериальную массу, Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/ Porhyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp. / Leptotrihia spp. / Fusobacterium spp., Megasphaera spp. / Veillonella spp. / Dialister spp., Lachnobacterium spp. / Clostridium spp., Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae, Mycoplasma (hominis/genitalium), Ureaplasma (urealyticum + parvum), Candida spp (ФЕМОФЛОР 16, («ДНК-Технология», Россия).Stage 1. All patients underwent cytological examination of the vaginal wall (vaginal atrophy was confirmed in 84 patients), questionnaires to clarify the presence of complaints and their intensity, and the total bacterial mass, Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Gardnerella vaginalis / Prevotella bivia / Porhyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp. / Leptotrihia spp. / Fusobacterium spp., Megasphaera spp. / Veillonella spp. / Dialister spp., Lachnobacterium spp. / Clostridium spp., Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae, Mycoplasma (hominis / genitalium), Ureaplasma (urealyticum + parvum), Candida spp (FEMOFLOR 16, (DNA-Technology, Russia).

ДНК Mycoplasma hominis/genitalium и Candida spp. не были обнаружена ни в одном из образцов.DNA of Mycoplasma hominis / genitalium and Candida spp. were not detected in any of the samples.

В дальнейшем результаты исследований подвергли корреляционному анализу, в котором учитывались следующие показатели: интенсивность всех симптомов, доля лактобактерий от ОБМ, индекс созревания. При проведении корреляционного анализа Пирсона нами было установлено, что наибольшая зависимость прослеживалась между интенсивностью симптомов и долей лактобактерий в ОБМ (таб. 1). Таким образом, нами отмечено, что жалобы пациенток в большей степени зависят от состояния биоценоза влагалища, чем от индекса созревания эпителия.Subsequently, the research results were subjected to correlation analysis, which took into account the following indicators: the intensity of all symptoms, the proportion of lactobacilli from MBP, and the maturation index. When conducting a Pearson correlation analysis, we found that the greatest dependence was traced between the intensity of symptoms and the proportion of lactobacilli in MBP (Table 1). Thus, we noted that the complaints of patients are more dependent on the state of the vaginal biocenosis than on the maturation index of the epithelium.

Figure 00000001
Figure 00000001

2 этап. Из 84 человек, у которых подтвердился диагноз вагинальная атрофия, были отобраны 44 пациентки, которые вошли в группы лечения. Длительность наблюдения составила 3 месяца. С помощью блочной рандомизации участницы исследования были разделены на 2 группы по 22 человека в каждой. В первой группе применяли препарат, в состав которого входил эстриол в дозе 0,5 мг (Овипол Клио), во второй группе использовали препарат, содержащий лиофилизированную культуру лактобактерий L. casei rhamnosus Doderleini - 341 мг.; эстриол - 0,2 мг.; прогестерон - 2,0 мг. (Триожиналь). Для пациенток обеих групп были разработаны схемы лечения с одинаковой курсовой дозой эстриола, составившая 9,8 мг (Группа 1: 0,5 мг эстриола через день - 3 недели, после по 0,5 мг × 1 раз в неделю - 9 недель; Группа 2: лиофилизированная культура лактобактерий L. casei rhamnosus Doderleini - 341 мг; эстриол - 0,2 мг; прогестерон - 2,0 мг ежедневно - 2 недели, далее через день - 10 недель). Из 44 пациенток трехмесячный курс лечения закончили 41 (93%). Две пациентки (9%) из первой группы и одна пациентка из второй группы (9%) прекратили прием препаратов в связи с побочными явлениями. Причиной отказа от приема терапии в первой группе послужили жалобы на зуд о влагалище (4,5%) и обострение цистита (4,5%). Во 2 группе пациентка также прекратила прием препарата в связи с появлением зуда во влагалище (4,5%). Исходно и в конце лечения всем пациенткам проводили цитологическое исследование стенки влагалища, анкетирование для уточнения наличия жалоб и их интенсивности, а также ПЦР-диагностику микрофлоры влагалища.2 stage. Of the 84 people who confirmed the diagnosis of vaginal atrophy, 44 patients who were included in the treatment group were selected. The follow-up was 3 months. Using block randomization, study participants were divided into 2 groups of 22 people each. In the first group, a drug was used, which included estriol in a dose of 0.5 mg (Ovipol Clio), in the second group, a drug containing a lyophilized culture of L. casei rhamnosus Doderleini lactobacilli was used - 341 mg .; estriol - 0.2 mg .; progesterone - 2.0 mg. (Triozhinal). For patients of both groups, treatment regimens with the same course dose of estriol of 9.8 mg were developed (Group 1: 0.5 mg of estriol every other day for 3 weeks, after 0.5 mg × 1 time per week for 9 weeks; Group 2: lyophilized culture of lactobacilli L. casei rhamnosus Doderleini - 341 mg; estriol - 0.2 mg; progesterone - 2.0 mg daily - 2 weeks, then every other day - 10 weeks). Of the 44 patients, 41 (93%) completed the three-month course of treatment. Two patients (9%) from the first group and one patient from the second group (9%) stopped taking the drugs due to side effects. The reason for refusing therapy in the first group was complaints of itching about the vagina (4.5%) and exacerbation of cystitis (4.5%). In group 2, the patient also stopped taking the drug due to the appearance of itching in the vagina (4.5%). Initially and at the end of treatment, all patients underwent cytological examination of the vaginal wall, questionnaires to clarify the presence of complaints and their intensity, as well as PCR diagnostics of the vaginal microflora.

После 3 месяцев лечения в группах наблюдения отмечена высокая эффективность препаратов по параметру ИСЭВ. В 1 группе ИСЭВ среднем составил 76,8±12,9 (p<0,0001), во второй группе - 79,4±19,6 (p<0,0001).After 3 months of treatment in the observation groups, high efficacy of the drugs according to the ISES parameter was noted. In the 1st group, ISES averaged 76.8 ± 12.9 (p <0.0001), in the second group - 79.4 ± 19.6 (p <0.0001).

Важно отметить, что после лечебного курса пациентки обеих групп отметили значимое улучшение своего состояния, облегчение или исчезновение жалоб. Как видно из представленных данных в таблице 2, в группах лечения пациентки были сопоставимы по частоте встречаемости жалоб как до, так и после лечения. В обеих группах по истечении срока лечения были пациентки, у которых сохранились жалобы. Однако интенсивность жалоб у пациенток 2 группы статистически значимо снизилась по сравнению с участницами из 2 группы. В первой группе исходно интенсивность симптомов составила 2,05±1,3, после лечения 1,57±1,3 (p=0,135). Во второй группе исходно интенсивность симптомов составила 2,04±1,43, после лечения - 0,95±1,32(p=0,013).It is important to note that after the treatment course, patients of both groups noted a significant improvement in their condition, relief or disappearance of complaints. As can be seen from the data presented in table 2, in the treatment groups, the patients were comparable in the frequency of complaints both before and after treatment. In both groups, at the end of the treatment period, there were patients who complained. However, the intensity of complaints in patients of group 2 decreased statistically significantly compared to participants from group 2. In the first group, the initial intensity of the symptoms was 2.05 ± 1.3, after treatment 1.57 ± 1.3 (p = 0.135). In the second group, the initial intensity of the symptoms was 2.04 ± 1.43, after treatment - 0.95 ± 1.32 (p = 0.013).

Figure 00000002
Figure 00000002

По данным ПЦР диагностики микробиоценоз слизистой оболочки влагалища исходно у женщин в группах лечения характеризовался резким снижением количества лактобактерий (1 группа - 0,0% (0,0 - 89,9); 2 группа - 0,0% (0,0 - 2,8)). После проведенного курса лечения отмечено повышение количества лактобактерий (1 группа - 17,9% (0,0 - 99,9) (p=0,178); 2 группа - 86% (8,0 - 99,2)) (p=0,014) табл. 3 и 4.According to the PCR diagnostic of microbiocenosis of the vaginal mucosa, initially in women in the treatment groups was characterized by a sharp decrease in the number of lactobacilli (group 1 - 0.0% (0.0 - 89.9); group 2 - 0.0% (0.0 - 2 ,8)). After the course of treatment, an increase in the number of lactobacilli was noted (group 1 - 17.9% (0.0 - 99.9) (p = 0.178); group 2 - 86% (8.0 - 99.2)) (p = 0.014 ) tab. 3 and 4.

Figure 00000003
Figure 00000003

Figure 00000004
Figure 00000004

Figure 00000005
Figure 00000005

Figure 00000006
Figure 00000006

Важно отметить, что к концу терапии эстриолсодержащими препаратами увеличилась доля лактобактерий в ОБМ, что привело к повышению частоты выявления нормоценоза в исследуемых группах (табл. 5). Однако в первой группе частота встречаемости нормоценоза увеличилась лишь на 10%, в то время как во 2 группе лечения почти на 40%.It is important to note that by the end of therapy with estriol-containing drugs, the proportion of lactobacilli in MBP increased, which led to an increase in the incidence of normocenosis in the studied groups (Table 5). However, in the first group, the incidence of normocenosis increased by only 10%, while in the 2nd group of treatment by almost 40%.

Figure 00000007
Figure 00000007

Суммируя вышепредставленные данные, мы видим, что на фоне применения комбинированного препарата во 2 группе у пациенток после проведенного курса лечения чаще наблюдали нормализацию биоценоза влагалища и, несмотря на сохранение жалоб, интенсивность жалоб была ниже, чем в 1 группе.Summarizing the above data, we see that, against the background of using the combined preparation in group 2, after the course of treatment, patients more often observed normalization of the vaginal biocenosis and, despite the persistence of complaints, the intensity of complaints was lower than in group 1.

Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.

Биоматериал со слизистой с заднего или боковых сводов влагалища, взятого с помощью вагинального или уретрального зонда путем соскоба с поверхности эпителия, помещают в отдельные одноразовые пластиковые пробирки типа Эппендорф с транспортной средой (1,5 мл с 300 мкл стерильного физиологического раствора или в пробирки с реагентом ПРОБА-РАПИД (ООО «НПО ДНК-Технология»).Biomaterial from the mucosa from the posterior or lateral arches of the vagina taken with a vaginal or urethral probe by scraping from the surface of the epithelium is placed in separate disposable plastic Eppendorf tubes with a transport medium (1.5 ml with 300 μl of sterile saline or in reagent tubes TEST-RAPID (LLC NPO DNA-Technology).

С помощью ПЦР в режиме реального времени исследуют микрофлору влагалища и определяют количество геном-эквивалентов микроорганизмов, применяя следующую диагностическую панель: Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Gardnerella vaginalis / Prevotella bivia / Porhyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp. / Leptotrihia spp. / Fusobacterium spp., Megasphaera spp. / Veillonella spp. / Dialister spp., Lachnobacterium spp. / Clostridium spp., Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae, Mycoplasma (hominis/genitalium), Ureaplasma (urealyticum + parvum), Candida spp., при этом осуществляют контроль взятия материала (КВМ) и оценивают общую бактериальную массу (ОБМ) (ФЕМОФЛОР 16, («ДНК-Технология», Россия). Интерпретация результатов с анализа показателя КВМ. Этот показатель отражает количество ДНК клеток человека, попавших в пробирку с биологическим материалом. Для получения адекватных результатов исследования величина КВМ должна быть больше 104 ГЭ/образец, в этом случае можно переходить к дальнейшему анализу. Если КВМ меньше 104 ГЭ/образец, то забор материала необходимо повторить. Следующим этапом заключается в оценке ОБМ. Величина ОБМ должна находиться в пределах от 105 до 107 ГЭ/образец. Если ОБМ меньше 105 ГЭ/образец, то соотношения различных микроорганизмов могут определяться с большой погрешностью. Далее проводится оценка состояния нормофлоры: количества Lactobacillus spp. относительно ОБМ. В зависимости от этого показателя различают: 1. Lactobacillus spp.больше 80% - состояние нормоценоза (физиологического микробиоценоза влагалища) характеризующегося доминированием нормофлоры. И Lactobacillus spp. менее 80% - дисбиоз влагалища.Using real-time PCR, the vaginal microflora is examined and the number of genomic equivalents of microorganisms is determined using the following diagnostic panel: Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Gardnerella vaginalis / Prevotella biviaaspperium porromium / Porromium / Porromium / Porromium / Porromium / Porium. spp., Sneathia spp. / Leptotrihia spp. / Fusobacterium spp., Megasphaera spp. / Veillonella spp. / Dialister spp., Lachnobacterium spp. / Clostridium spp., Mobiluncus spp. / Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae, Mycoplasma (hominis / genitalium), Ureaplasma (urealyticum + parvum), Candida spp. , (DNA-Technology, Russia). Interpretation of results from the analysis of the KVM indicator. This indicator reflects the amount of DNA of human cells that entered the test tube with biological material. To obtain adequate research results, the KVM value should be more than 10 4 GE / sample, in in this case, we can proceed to further analysis. 10 4 GE / sample, then the sampling should be repeated.The next step is to evaluate the BMP. The value of MBP should be in the range of 10 5 to 10 7 GE / sample. If the BMP is less than 10 5 GE / sample, then the ratios of different microorganisms can be determined Next, an assessment of the normoflora state is carried out: the amounts of Lactobacillus spp. relative to BMP. ory. And Lactobacillus spp. less than 80% - vaginal dysbiosis.

Клинические примерыClinical examples

Пример 1. Пациентка A, 51 года, обратилась с жалобами на сухость во влагалище. При анализе интенсивности жалоб, пациентка оценила ощущаемый дискомфорт как крайне выраженную проблему, мешающую жить. На основании цитологического исследования, был выставлен диагноз «Вагинальная атрофия», ИСЭВ составил 51,5. Произведено взятие биоматериала для исследования с помощью ПЦР в «реальном времени». При этом выявлено: КВМ - 4,65 ГЭ/образец, ОБМ - 7,53 ГЭ/образец Lactobacillus spp. - 7,38 ГЭ/образец. УПМ были представлены: Enterobacteriaceae - 2,53 ГЭ/образец, Streptococcus spp. - 2,97 ГЭ/образец, Staphylococcus spp. - 3,62 ГЭ/образец, Eubacterium spp. - 3,03 ГЭ/образец, Gardnerella vaginalis - 0,00 ГЭ/образец, Prevotella bivia/Porphyromonas spp. - 2,65 ГЭ/образец, Mycoplasma hominis - 0,00 ГЭ/образец, Ureaplasma urealyticum - 0,00 ГЭ/образец; Candida spp. - 0,00 ГЭ/образец. Состояние биоценоза влагалища было расценено, как норомценоз. В дальнейшем пациентке была назначена локальная гормональная терапия (препарат Овипол клио). После проведенного курса лечение, длительность которого составила 3 месяца, пациентку не беспокоила сухость во влагалище. Согласно данным повторного цитологического исследования стенки влагалища ИСЭВ составил 94. При повторной ПЦР-диагностике соскоба влагалища выявлено: КВМ - 4,65 ГЭ/образец, ОБМ - 7,44 ГЭ/образец Lactobacillus spp. - 7,26 ГЭ/образец. УПМ были представлены: Enterobacteriaceae -1,26 ГЭ/образец, Streptococcus spp. - 0,00 ГЭ/образец, Staphylococcus spp. - 2,09 ГЭ/образец, Eubacterium spp. - 1,94 ГЭ/образец, Gardnerella vaginalis - 0,00 ГЭ/образец, Prevotella bivia/Porphyromonas spp. - 2,47 ГЭ/образец, Mycoplasma hominis - 0,00 ГЭ/образец, Ureaplasma urealyticum - 0,00 ГЭ/образец; 0,00 ГЭ/образец. Состояние биоценоза влагалища было расценено как нормоценоз.Example 1. Patient A, 51 years old, complained of dryness in the vagina. When analyzing the intensity of complaints, the patient assessed the perceived discomfort as an extremely pronounced problem that interferes with life. Based on a cytological study, a diagnosis of “Vaginal Atrophy” was made, ISES was 51.5. Biomaterial was taken for research using real-time PCR. In this case, the following were revealed: KVM - 4.65 GE / sample, OBM - 7.53 GE / sample Lactobacillus spp. - 7.38 GE / sample. UPM were presented: Enterobacteriaceae - 2.53 GE / sample, Streptococcus spp. - 2.97 GE / sample, Staphylococcus spp. - 3.62 GE / sample, Eubacterium spp. - 3.03 GE / sample, Gardnerella vaginalis - 0.00 GE / sample, Prevotella bivia / Porphyromonas spp. - 2.65 GE / sample, Mycoplasma hominis - 0.00 GE / sample, Ureaplasma urealyticum - 0.00 GE / sample; Candida spp. - 0.00 GE / sample. The condition of the vaginal biocenosis was regarded as norocenosis. Subsequently, the patient was prescribed local hormone therapy (Ovipol Clio drug). After the course of treatment, the duration of which was 3 months, the patient was not bothered by dryness in the vagina. According to the data of repeated cytological examination of the vaginal wall, ISEV was 94. During repeated PCR diagnostics of the vaginal scraping, KVM - 4.65 GE / sample, OBM - 7.44 GE / sample Lactobacillus spp. - 7.26 GE / sample. UPM were presented: Enterobacteriaceae -1.26 GE / sample, Streptococcus spp. - 0.00 GE / sample, Staphylococcus spp. - 2.09 GE / sample, Eubacterium spp. - 1.94 GE / sample, Gardnerella vaginalis - 0.00 GE / sample, Prevotella bivia / Porphyromonas spp. - 2.47 GE / sample, Mycoplasma hominis - 0.00 GE / sample, Ureaplasma urealyticum - 0.00 GE / sample; 0.00 GE / sample. The condition of the vaginal biocenosis was regarded as a normocenosis.

Пример 2. Пациентка Б, 47 лет, обратилась с жалобами на зуд, жжение, боль, раздражение, сухость во влагалище, наличие выделений из половых путей с неприятным запахом и диспареунию. При анализе интенсивности жалоб пациентка оценила ощущаемый дискомфорт как крайне выраженную проблему, мешающую жить. На основании цитологического исследования был выставлен диагноз «Вагинальная атрофия», ИСЭВ составил 60. Произведено взятие биоматериала для исследования с помощью ПЦР в «реальном времени». При этом выявлено: КВМ - 4,88 ГЭ/образец, ОБМ - 6,06ГЭ/образец Lactobacillus spp .- 0,62 ГЭ/образец. УПМ были представлены: Enterobacteriaceae - 3,06ГЭ/образец, Streptococcus spp. - 6,24 ГЭ/образец, Staphylococcus spp. - 2,65 ГЭ/образец, Eubacterium spp. - 3,76 ГЭ/образец, Gardnerella vaginalis - 0,00 ГЭ/образец, Prevotella bivia/Porphyromonas spp. - 3,65 ГЭ/образец, Mycoplasma hominis - 0,00 ГЭ/образец, Ureaplasma urealyticum - 0,00 ГЭ/образец; 0,00 ГЭ/образец. Состояние биоценоза влагалища было расценено как дисбиоз. В дальнейшем пациентке была назначена локальная гормональная терапия (препарат Триожиналь), содержащая лактокультуру. После проведенного лечения пациентка отметила улучшение состояния. После проведенного курса лечение, длительность которого составила 3 месяца, из вышеперечисленных жалоб сохранилась сухость во влагалище, однако интенсивность данной жалобы пациентка расценила как незначительную проблему, не оказывающую влияния на повседневную жизнь. Согласно данным повторного цитологического исследования стенки влагалища ИСЭВ составил 85. При повторной ПЦР-диагностике соскоба влагалища выявлено: КВМ - 4,65 ГЭ/образец, ОБМ - 7,24 ГЭ/образец Lactobacillus spp. - 4,94 ГЭ/образец. УПМ были представлены: Enterobacteriaceae - 0,00ГЭ/образец, Streptococcus spp. - 7,35 ГЭ/образец, Staphylococcus spp. - 1,50 ГЭ/образец, Eubacterium spp. - 2,47 ГЭ/образец, Gardnerella vaginalis - 0,00 ГЭ/образец, Prevotella bivia/Porphyromonas spp. - 0,00 ГЭ/образец, Mycoplasma hominis - 0,00 ГЭ/образец, Ureaplasma urealyticum - 0,00 ГЭ/образец; Candida spp. - 0,00 ГЭ/образец. Состояние биоценоза влагалища было расценено как нормоценоз.Example 2. Patient B, 47 years old, complained of itching, burning, pain, irritation, dryness in the vagina, the presence of discharge from the genital tract with an unpleasant odor and dyspareunia. When analyzing the intensity of complaints, the patient assessed the perceived discomfort as an extremely pronounced problem that interferes with life. Based on a cytological study, a diagnosis of “Vaginal Atrophy” was made, ISES amounted to 60. Biomaterial was taken for research using PCR in “real time”. In this case, the following were revealed: CME - 4.88 GE / sample, OBM - 6.06 GE / sample Lactobacillus spp. - 0.62 GE / sample. UPM were presented: Enterobacteriaceae - 3.06 GE / sample, Streptococcus spp. - 6.24 GE / sample, Staphylococcus spp. - 2.65 GE / sample, Eubacterium spp. - 3.76 GE / sample, Gardnerella vaginalis - 0.00 GE / sample, Prevotella bivia / Porphyromonas spp. - 3.65 GE / sample, Mycoplasma hominis - 0.00 GE / sample, Ureaplasma urealyticum - 0.00 GE / sample; 0.00 GE / sample. The condition of the vaginal biocenosis was regarded as dysbiosis. Subsequently, the patient was prescribed local hormone therapy (Triozhinal drug) containing lactic culture. After the treatment, the patient noted an improvement. After the course of treatment, the duration of which was 3 months, out of the above complaints, the vagina was dry, however, the patient regarded the intensity of this complaint as a minor problem that did not affect everyday life. According to the data of repeated cytological examination of the vaginal wall, ISEV was 85. During repeated PCR diagnostics of vaginal scraping, KVM - 4.65 GE / sample, OBM - 7.24 GE / sample Lactobacillus spp. - 4.94 GE / sample. UPM were presented: Enterobacteriaceae - 0.00GE / sample, Streptococcus spp. 7.35 GE / sample, Staphylococcus spp. - 1.50 GE / sample, Eubacterium spp. - 2.47 GE / sample, Gardnerella vaginalis - 0.00 GE / sample, Prevotella bivia / Porphyromonas spp. - 0.00 GE / sample, Mycoplasma hominis - 0.00 GE / sample, Ureaplasma urealyticum - 0.00 GE / sample; Candida spp. - 0.00 GE / sample. The condition of the vaginal biocenosis was regarded as a normocenosis.

Пример 3. Пациентка В, 54 лет, обратилась с жалобами на зуд, жжение, сухость во влагалище, наличие выделений из половых путей. При анализе интенсивности жалоб пациентка оценила ощущаемый дискомфорт как крайне выраженную проблему, мешающую жить. На основании цитологического исследования был выставлен диагноз «Вагинальная атрофия», ИСЭВ составил 51,5. Произведено взятие биоматериала для исследования с помощью ПЦР в «реальном времени». При этом выявлено: КВМ - 5,53 ГЭ/образец, ОБМ - 3,85 ГЭ/образец Lactobacillus spp. - 0,00 ГЭ/образец. УПМ были представлены: Enterobacteriaceae - 1,88 ГЭ/образец, Streptococcus spp. - 2,24 ГЭ/образец, Staphylococcus spp. - 2,85 ГЭ/образец, Eubacterium spp. - 3,21 ГЭ/образец, Gardnerella vaginalis - 0,00 ГЭ/образец, Prevotella bivia/Porphyromonas spp. - 3,65 ГЭ/образец, Mycoplasma hominis - 0,00 ГЭ/образец, Ureaplasma urealyticum - 0,00 ГЭ/образец; Candida spp. - 0,00 ГЭ/образец. Состояние биоценоза влагалища было расценено как дисбиоз. В дальнейшем пациентке была назначена локальная гормональная терапия (препарат Овипол клио). После проведенного курса лечение, длительность которого составила 3 месяца, из вышеперечисленных жалоб сохранились сухость во влагалище и зуд. Интенсивность данных жалоб пациентка расценила как выраженную рецидивирующую проблему, влияющую на повседневную жизнь. Согласно данным повторного цитологического исследования стенки влагалища ИСЭВ составил 71. При повторной ПЦР-диагностике соскоба влагалища выявлено: КВМ - 5,21 ГЭ/образец, ОБМ - 4,56 ГЭ/образец Lactobacillus spp. - 0,00 ГЭ/образец. УПМ были представлены: Enterobacteriaceae - 2,24 ГЭ/образец, Streptococcus spp. - 3,44 ГЭ/образец, Staphylococcus spp. - 2,50 ГЭ/образец, Eubacterium spp. - 4,24 ГЭ/образец, Gardnerella vaginalis - 2,09 ГЭ/образец, Prevotella bivia/Porphyromonas spp. - 3,97 ГЭ/образец, Mycoplasma hominis - 0,00 ГЭ/образец, Ureaplasma urealyticum - 0,00 ГЭ/образец; Candida spp. - 0,00 ГЭ/образец. Состояние биоценоза влагалища было расценено, как дисбиоз.Example 3. Patient B, 54 years old, complained of itching, burning, dryness in the vagina, the presence of discharge from the genital tract. When analyzing the intensity of complaints, the patient assessed the perceived discomfort as an extremely pronounced problem that interferes with life. Based on a cytological study, a diagnosis of “Vaginal Atrophy” was made, ISES was 51.5. Biomaterial was taken for research using real-time PCR. In this case, it was revealed that: CME - 5.53 GE / sample, OBM - 3.85 GE / sample Lactobacillus spp. - 0.00 GE / sample. UPM were presented: Enterobacteriaceae - 1.88 GE / sample, Streptococcus spp. 2.24 GE / sample, Staphylococcus spp. - 2.85 GE / sample, Eubacterium spp. - 3.21 GE / sample, Gardnerella vaginalis - 0.00 GE / sample, Prevotella bivia / Porphyromonas spp. - 3.65 GE / sample, Mycoplasma hominis - 0.00 GE / sample, Ureaplasma urealyticum - 0.00 GE / sample; Candida spp. - 0.00 GE / sample. The condition of the vaginal biocenosis was regarded as dysbiosis. Subsequently, the patient was prescribed local hormone therapy (Ovipol Clio drug). After the course of treatment, the duration of which was 3 months, from the above complaints, dryness in the vagina and itching remained. The patient regarded the intensity of these complaints as a pronounced recurring problem that affects everyday life. According to the data of repeated cytological examination of the vaginal wall, ISEV was 71. During repeated PCR diagnostics of the vaginal scraping, KVM - 5.21 GE / sample, OBM - 4.56 GE / sample Lactobacillus spp. - 0.00 GE / sample. UPM were presented: Enterobacteriaceae - 2.24 GE / sample, Streptococcus spp. - 3.44 GE / sample, Staphylococcus spp. - 2.50 GE / sample, Eubacterium spp. - 4.24 GE / sample, Gardnerella vaginalis - 2.09 GE / sample, Prevotella bivia / Porphyromonas spp. - 3.97 GE / sample, Mycoplasma hominis - 0.00 GE / sample, Ureaplasma urealyticum - 0.00 GE / sample; Candida spp. - 0.00 GE / sample. The condition of the vaginal biocenosis was regarded as dysbiosis.

ЛитератураLiterature

1. Андросова Л.Д., Медицинский Альманах №4 (13), ноябрь 2010, с.1 77-179.1. Androsova L.D., Medical Almanac No. 4 (13), November 2010, p.1 77-179.

2. Анкирская А.С., Муравьева В.В. Опыт микробиологической диагностики оппортунистических инфекций влагалища // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерпия. - 2001. - том 3. - №2. - С. 190-194.2. Ankirskaya A.S., Muravyova V.V. The experience of microbiological diagnosis of opportunistic infections of the vagina // Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy. - 2001. - Volume 3. - No. 2. - S. 190-194.

3. Анкирская А.С., Муравьева В.В. «Интегральная оценка состояния микробиоты влагалища. Диагностика оппортунистических вагинитов» (медицинская технология). – М.: 2011. - 19 с.3. Ankirskaya A.S., Muravyova V.V. “Integral assessment of the vaginal microbiota. Diagnosis of opportunistic vaginitis "(medical technology). - M .: 2011. - 19 p.

4. Болдырева М.Н., Липова Е.В., Витвицкая Ю.Г. Урогенитальные инфекции у женщин, обусловленные условно-патогенной биотой: способы выявления и коррекция // Научные исследования. - 2010. №2 - с. 26-31.4. Boldyreva M.N., Lipova E.V., Vitvitskaya Yu.G. Urogenital infections in women caused by opportunistic biota: methods for detection and correction // Scientific research. - 2010. No. 2 - p. 26-31.

5. Воропаева Е.А., Караулов А.В., Афанасьев С.С. и др. Оценка микробиоценоза влагалища при акушерской и гинекологической патологии (новая медицинская технология). – М.-Астрахань: АГМА. - 2012. - 50 с.5. Voropaeva EA, Karaulov A.V., Afanasyev S.S. et al. Evaluation of vaginal microbiocenosis in obstetric and gynecological pathology (new medical technology). - M.-Astrakhan: AGMA. - 2012 .-- 50 s.

6. Ворошилина Е.С., Тумбинская Л.В., Донников А.Е., Плотко Е.Э., Хаютин Л.В. Биоценоз влагалища с точки зрении количественной полимеразно-цепной реакции: что есть норма? // Акушерство и гинекология. - 2011. - №1. - с. 57-656. Voroshilina E.S., Tumbinskaya L.V., Donnikov A.E., Plotko E.E., Khayutin L.V. Vaginal biocenosis in terms of quantitative polymerase chain reaction: what is the norm? // Obstetrics and gynecology. - 2011. - No. 1. - from. 57-65

7. Шипицына Е.В., Мартикайнен З.М., Воробьева Н.Е., Ерошкина М.С., Степанова О.С., Донников А.Е., и др. Применение теста Фемофлор для оценки микробиоценоза влагалища // Журнал акушерства и женских болезней. - 2009. - том LVIII. - выпуск 3. - с. 44-50.7. Shipitsyna E.V., Martikainen Z.M., Vorobyeva N.E., Eroshkina M.S., Stepanova O.S., Donnikov A.E., et al. Application of the Femoflor test to assess vaginal microbiocenosis // Journal of Obstetrics and Women's Diseases. - 2009. - Volume LVIII. - Issue 3. - p. 44-50.

8. Есефидзе Жанна Тамазовна. Клинико-патогенетические особенности вагинальной атрофии в постменопаузе. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. – М.: 2002.8. Yesefidze Zhanna Tamazovna. Clinical and pathogenetic features of vaginal atrophy in postmenopausal women. The dissertation for the degree of candidate of medical sciences. - M.: 2002.

9. Гасанова Мехрибан Кязим кызы. Современные подходы к диагностике и лечению серозометры в постменопаузе. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. – М.: 2008.9. Hasanova Mehriban Kyazim kyzy. Modern approaches to the diagnosis and treatment of postmenopausal serosometers. The dissertation for the degree of candidate of medical sciences. - M.: 2008.

10. Батырова Залина Кимовна. Патогенетическое обоснование дифференцированного лечения рецидивирующих сращений малых половых губ в периоде раннего детства. – М.: 2014.10. Batyrova Zalina Kimovna. Pathogenetic substantiation of the differential treatment of recurrent fusion of the labia minora in early childhood. - M.: 2014.

11. «Применение метода полимеразной цепной реакции в реальном времени для оценки микробиоценоза урогенитального тракта у женщин (тест Фемофлор®)». – М.: 201111. "The use of the real-time polymerase chain reaction method for assessing the microbiocenosis of the urogenital tract in women (Femoflor® test)." - M .: 2011

12. Урогенитальные расстройства в климактерии (клиника, диагностика, заместительная гормонотерапия). Дис. д-ра мед. наук. - М.: 1998.12. Urogenital disorders in menopause (clinic, diagnosis, hormone replacement therapy). Dis. Dr. med. sciences. - M.: 1998.

13. The North American Menopause Society. Management of symptomatic vulvovaginal atrophy: 2013 position statement of The North American Menopause Society. 2013; 20(9): 888-902.13. The North American Menopause Society. Management of symptomatic vulvovaginal atrophy: 2013 position statement of The North American Menopause Society. 2013; 20 (9): 888-902.

14. Rebecca M. Brotman, PhD, MPH,1,2 Michelle D. Shardell, PhD,2 Pawel Gajer, PhD,1 Doug Fadrosh, MS,1 Kathryn Chang, RN,3 Michelle I. Silver, ScM,3 Raphael P. Viscidi, MD,4 Anne E. Burke, MD, MPH,5 Jacques Ravel, PhD,1,6 and Patti E. Gravitt, PhD, MS3. Association between the vaginal microbiota, menopause status, and signs of vulvovaginal atrophy. Menopause, Vol. 21, No. 5, 2014.14. Rebecca M. Brotman, PhD, MPH, 1,2 Michelle D. Shardell, PhD, 2 Pawel Gajer, PhD, 1 Doug Fadrosh, MS, 1 Kathryn Chang, RN, 3 Michelle I. Silver, ScM, 3 Raphael P Viscidi, MD, 4 Anne E. Burke, MD, MPH, 5 Jacques Ravel, PhD, 1,6 and Patti E. Gravitt, PhD, MS3. Association between the vaginal microbiota, menopause status, and signs of vulvovaginal atrophy. Menopause, Vol. 21, No. 5, 2014.

15. Bomar L, Maltz M, Colston S, Graf J. Directed culturing of microorganisms using metatranscriptomics. mBio 2011; 2: e00012-e00011.e37818.15. Bomar L, Maltz M, Colston S, Graf J. Directed culturing of microorganisms using metatranscriptomics. mBio 2011; 2: e00012-e00011.e37818.

16. Brotman R, Gajer P, Sakamoto J, et al. Temporal dynamics of vaginal bacterial communities. International Society for Sexually Transmitted Disease Research, July 10 to 13, 2011, Quebec City, Canada.16. Brotman R, Gajer P, Sakamoto J, et al. Temporal dynamics of vaginal bacterial communities. International Society for Sexually Transmitted Disease Research, July 10 to 13, 2011, Quebec City, Canada.

17. Elisabeth A. Erekson et al. The Vulvovaginal Symptoms Questionnaire: a questionnaire for measuring vulvovaginal symptoms in postmenopausal women. Menopause: The Journal of The North American Menopause Society Vol. 20, No. 9, pp. 973/979.17. Elisabeth A. Erekson et al. The Vulvovaginal Symptoms Questionnaire: a questionnaire for measuring vulvovaginal symptoms in postmenopausal women. Menopause: The Journal of The North American Menopause Society Vol. 20, No. 9, pp. 973/979.

18. Hummelen R, Macklaim JM, Bisanz JE, et al. Vaginal microbiome and epithelial gene array in post-menopausal women with moderate to severe dryness. PLoS One 2011; 6: e26602.18. Hummelen R, Macklaim JM, Bisanz JE, et al. Vaginal microbiome and epithelial gene array in post-menopausal women with moderate to severe dryness. PLoS One 2011; 6: e26602.

19. Sturdee DW, Panay N. Recommendations for the management of postmenopausal vaginal atrophy. Climacteric 2010; 13: 509-522.19. Sturdee DW, Panay N. Recommendations for the management of postmenopausal vaginal atrophy. Climacteric 2010; 13: 509-522.

20. Santiago Palacios. Managing urogenital atrophy.// Maturitas. - 2009; 63: 315-31820. Santiago Palacios. Managing urogenital atrophy.// Maturitas. - 2009; 63: 315-318

21. James H. Pickar. Emerging therapies for postmenopausal vaginal atrophy. // Maturitas. - 2013; 75: 3-6.21. James H. Pickar. Emerging therapies for postmenopausal vaginal atrophy. // Maturitas. - 2013; 75: 3-6.

22. Camil Castelo-Branco, Maria Jes'us Cancelo, Jose Villero, Francisco Nohales, Maria Dolores Juli'a. Management of post-menopausal vaginal atrophy and atrophic vaginitis. // Maturitas. - 2005; 52: 46-52.22. Camil Castelo-Branco, Maria Jes'us Cancelo, Jose Villero, Francisco Nohales, Maria Dolores Juli'a. Management of post-menopausal vaginal atrophy and atrophic vaginitis. // Maturitas. - 2005; 52: 46-52.

23. Kingsberg SA, Krychman ML. Resistance and barriers to local estrogen therapy in women with atrophic vaginitis. // J Sex Med. - 2013; 1567-74.23. Kingsberg SA, Krychman ML. Resistance and barriers to local estrogen therapy in women with atrophic vaginitis. // J Sex Med. - 2013; 1567-74.

Claims (1)

Способ лечения вагинальной атрофии у женщин в постменопаузе, отличающийся тем, что терапию подбирают с учетом состояние биоценоза влагалища, биоматериал со слизистой с заднего или боковых сводов влагалища, взятый с помощью вагинального или уретрального зонда путем соскоба с поверхности эпителия, исследуют методом ПЦР в режиме реального времени с помощью комплекта реагентов «Фемофлор-16» и определяют количество геном-эквивалентов и долю в общей бактериальной массе Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/ Porhyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrihia spp./ Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Lachnobacterium spp./Clostridium spp., Mobiluncus spp./Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae, Mycoplasma (hominis/genitalium), Ureaplasma (urealyticum + parvum), Candida spp., полученные результаты оценивают следующим образом: доля Lactobacillus spp. больше 80% - нормоценоз, характеризующийся доминированием нормофлоры; доля Lactobacillus spp. менее 80% - дисбиоз влагалища, и при вагинальной атрофии на фоне нормоценоза влагалища назначают гормональную терапию, а при вагинальной атрофии на фоне дисбиоза назначают гормональную терапию и препараты, содержащие лактокультуру.A method of treating vaginal atrophy in postmenopausal women, characterized in that the therapy is selected taking into account the state of the vaginal biocenosis, the mucosal biomaterial from the posterior or lateral vaginal arches, taken with a vaginal or urethral probe by scraping from the surface of the epithelium, is examined by real-time PCR time using the reagent kit "Femoflor-16" and determine the number of genome equivalents and the share in the total bacterial mass of Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Gardnerella vaginalis / Prevotella bivia / Porhyrom onas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrihia spp./ Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Lachnobacterium spp ./Clostridium spp., Mobiluncus sppcus Pepp./ ., Atopobium vaginae, Mycoplasma (hominis / genitalium), Ureaplasma (urealyticum + parvum), Candida spp., The results are evaluated as follows: the proportion of Lactobacillus spp. more than 80% - normocenosis, characterized by the dominance of normoflora; share of Lactobacillus spp. less than 80% - vaginal dysbiosis, and hormonal therapy is prescribed for vaginal atrophy against a background of vaginal normocenosis, and hormonal therapy and preparations containing lactic culture are prescribed for vaginal atrophy against a background of dysbiosis.
RU2017105333A 2017-02-20 2017-02-20 Method for vaginal atrophy treatment in women in postmenopause considering vaginal epithelium and microbiocenosis state RU2636619C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017105333A RU2636619C1 (en) 2017-02-20 2017-02-20 Method for vaginal atrophy treatment in women in postmenopause considering vaginal epithelium and microbiocenosis state

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017105333A RU2636619C1 (en) 2017-02-20 2017-02-20 Method for vaginal atrophy treatment in women in postmenopause considering vaginal epithelium and microbiocenosis state

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2636619C1 true RU2636619C1 (en) 2017-11-24

Family

ID=63853304

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017105333A RU2636619C1 (en) 2017-02-20 2017-02-20 Method for vaginal atrophy treatment in women in postmenopause considering vaginal epithelium and microbiocenosis state

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2636619C1 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2268035C2 (en) * 2000-07-21 2006-01-20 Хормос Медикал Корпорейшн Method for treating climacteric disorders in women either during or after menopause
EA014878B1 (en) * 2004-10-20 2011-02-28 Эндорешерш, Инк. Sex steroid precursors alone or in combination with a selective estrogen receptor modulator and/or with estrogens and/or a type 5 cgmp phosphodiesterase inhibitor for the prevention and treatment of vaginal dryness and sexual dysfunction in postmenopausal women

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2268035C2 (en) * 2000-07-21 2006-01-20 Хормос Медикал Корпорейшн Method for treating climacteric disorders in women either during or after menopause
EA014878B1 (en) * 2004-10-20 2011-02-28 Эндорешерш, Инк. Sex steroid precursors alone or in combination with a selective estrogen receptor modulator and/or with estrogens and/or a type 5 cgmp phosphodiesterase inhibitor for the prevention and treatment of vaginal dryness and sexual dysfunction in postmenopausal women

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
АНДОСОВА Л.Д. и др. Характеристика биоценозов урогенитального тракта у женщин репродуктивного возраста с применением теста "Фемофлор". Медицинский альманах. 2010; 4(13): 177-179. ШЕВЧЕНКО Е.П. и др. Диагностика урогенитальных нарушений у женщин, обусловленных условно-патогенными микроорганизмами, с применением метода полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Украiнський журнал дерматологіi, венерологіi, косметологіi. 2012; 2(45): 121-126. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. Translocation of vaginal microbiota is involved in impairment and protection of uterine health
Eckert et al. The antimicrobial treatment of subacute endometritis: a proof of concept study
Mitchell et al. Colonization of the upper genital tract by vaginal bacterial species in nonpregnant women
Falk et al. Signs and symptoms of urethritis and cervicitis among women with or without Mycoplasma genitalium or Chlamydia trachomatis infection
Fan et al. Aerobic vaginitis and mixed infections: comparison of clinical and laboratory findings
Mohammadzadeh et al. Diagnostic value of Amsel’s clinical criteria for diagnosis of bacterial vaginosis
Foxman et al. Mycoplasma, bacterial vaginosis–associated bacteria BVAB3, race, and risk of preterm birth in a high-risk cohort
Hollman et al. Screening for Trichomonas vaginalis in high-risk adolescent females with a new transcription-mediated nucleic acid amplification test (NAAT): associations with ethnicity, symptoms, and prior and current STIs
Bump et al. The prevalence, six-month persistence, and predictive values of laboratory indicators of bacterial vaginosis (nonspecific vaginitis) in asymptomatic women
Gad¹ et al. Evaluation of different diagnostic methods of bacterial vaginosis
Simoes et al. Clinical diagnosis of bacterial vaginosis
Vergaro et al. Vaginal microbiota profile at the time of embryo transfer does not affect live birth rate in IVF cycles with donated oocytes
Menard et al. Self-collected vaginal swabs for the quantitative real-time polymerase chain reaction assay of Atopobium vaginae and Gardnerella vaginalis and the diagnosis of bacterial vaginosis
Fang et al. Evaluation of self-collected vaginal swab, first void urine, and endocervical swab specimens for the detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae in adolescent females
Kampan et al. Evaluation of BV® Blue Test Kit for the diagnosis of bacterial vaginosis
Chen et al. Alterations of vaginal microbiota in women with infertility and Chlamydia trachomatis infection
Nwadioha et al. Prevalence of bacterial vaginosis and its risk factors in HIV/AIDS patients with abnormal vaginal discharge
Budilovskaya et al. Differential expression of local immune response genes in the vagina: implication for the diagnosis of vaginal infections
RU2458993C1 (en) Differential diagnostic technique for manifest and asymptomatic forms of urethritis caused by opportunistic microorganisms in males of reproductive age
RU2636619C1 (en) Method for vaginal atrophy treatment in women in postmenopause considering vaginal epithelium and microbiocenosis state
Schwope et al. The effect of a chlorhexidine-based surgical lubricant during pelvic examination on the detection of group B Streptococcus
RU2563182C1 (en) Integrated diagnostic technique for bacterial inflammatory process in vulva and vaginal in girls aged 0 to 8 years
Eckert et al. Histologic endometritis in asymptomatic human immunodeficiency virus–infected women: characterization and effect of antimicrobial therapy
Baptista et al. Diagnosis of vaginitis: time to improve and move on
Rafiq et al. Diagnosis of bacterial vaginosis in females with vaginal discharge using Amsel’s clinical criteria and Nugent scoring

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20190221