RU2634594C1

RU2634594C1 - Inhibitors of formation of glycation end products based on azo-derivative phenylsulphonic acids

Info

Publication number: RU2634594C1
Application number: RU2016146864A
Authority: RU
Inventors: Александр Алексеевич Спасов; Юрий Григорьевич Штырлин; Константин Валерьевич Балакин; Валентина Андреевна Кузнецова; Владимир Иванович Петров; Алексей Дмитриевич Стрельник
Priority date: 2016-11-30
Filing date: 2016-11-30
Publication date: 2017-11-01

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: essence of the invention are physiologically active substances of the heterocyclic series having a high antiglycating activity and representing the derivatives of 4-((pyridin-2-yl)diazenyl)phenylsulphonic acids and their salt forms of general formula

, where R¹=H, CH₃; R²=H, CH₃, C₃H₇, i-C₃H₇, C₅H₁₁, C₇H₁₅, C₈H₁₇; X⁺=H, alkali metal cations such as Na⁺, K⁺. The compounds of formula I are effective inhibitors of glycation end products formation.

EFFECT: increased efficiency.

2 tbl, 8 ex

Description

Изобретение относится к физиологически активным веществам гетероциклического ряда, обладающим высокой антигликирующей активностью (блокируют неферментативное взаимодействие белков с глюкозой и образование конечных продуктов гликирования) и представляющим собой производные 4-((пиридин-2-ил)диазенил)фенилсульфокислот и их солевые и сокристальные формы общей формулы I:The invention relates to physiologically active substances of a heterocyclic series having high antiglycation activity (they block the non-enzymatic interaction of proteins with glucose and the formation of end products of glycation) and are derivatives of 4 - ((pyridin-2-yl) diazenyl) phenylsulfonic acids and their salt and crystalline forms of common formula I:

,

,

где R¹=Н, СН₃; R²=Н, СН₃, С₃Н₇, i-C₃H₇, C₅H₁₁, С₇Н₁₅, C₈H₁₇;where R ¹ = H, CH ₃ ; R ² = H, CH ₃ , C ₃ H ₇ , iC ₃ H ₇ , C ₅ H ₁₁ , C ₇ H ₁₅ , C ₈ H ₁₇ ;

X⁺ = катионы щелочных металлов, такие как Na⁺и K⁺.X ⁺ = alkali metal cations such as Na ⁺ and K ⁺ .

Соединения формулы I являются эффективными ингибиторами образования конечных продуктов гликирования (далее КПГ) и могут найти широкое применение в медицине в области лечения социально-значимых заболеваний, а именно - осложнения сахарного диабета, атеросклероз, ревматоидный артрит, остеоартрит, нейродегенеративные заболевания, включая болезни Альцгеймера и Паркинсона.The compounds of formula I are effective inhibitors of the formation of glycation end products (hereinafter referred to as CNG) and can be widely used in medicine in the treatment of socially significant diseases, namely complications of diabetes mellitus, atherosclerosis, rheumatoid arthritis, osteoarthritis, neurodegenerative diseases, including Alzheimer's and Parkinson’s.

Гликирование (неферментативное гликозилирование, реакция Майяра) - химическая реакция, в которой карбонильные группы восстановленных сахаров связываются с аминогруппами долгоживущих белков, липидов или пептидов, с образованием конечных продуктов гликирования (КПГ) ([1] S. Khangholi, F.A. Abdul Majid, N.J.A. Berwary, F. Ahmad, R. Bin Abd Aziz, Planta Med., 2016; 82: 32-45; [2] V.P. Singh, A. Bali, N. Singh, A.S. Jaggi, Korean J. Physiol. Pharmacol., 2014, 18: 1-14).Glycation (non-enzymatic glycosylation, Maillard reaction) is a chemical reaction in which the carbonyl groups of reduced sugars bind to the amino groups of long-lived proteins, lipids or peptides, with the formation of glycation end products (CNG) ([1] S. Khangholi, FA Abdul Majid, NJA Berwary , F. Ahmad, R. Bin Abd Aziz, Planta Med., 2016; 82: 32-45; [2] VP Singh, A. Bali, N. Singh, AS Jaggi, Korean J. Physiol. Pharmacol., 2014, 18: 1-14).

Внутри- и внеклеточное накопление КПГ считают важным фактором патогенеза таких заболеваний, как атеросклероз ([3] М. Busch, S. Franke, С. Ruster, G. Wolf, European Journal of Clinical Investigation, 2010, 40 (8): 742-755), сердечная недостаточность, воспаление, ревматоидный артрит и остеоартрит, нейродегенеративные заболевания, включая болезни Альцгеймера и Паркинсона ([4] J. Li, D. Liu, L. Sun, Y. Lu, Z. Zhang, Journal of the Neurological Sciences, 2012, 317: 1-5).Intra- and extracellular accumulation of CNG is considered an important factor in the pathogenesis of diseases such as atherosclerosis ([3] M. Busch, S. Franke, C. Ruster, G. Wolf, European Journal of Clinical Investigation, 2010, 40 (8): 742- 755), heart failure, inflammation, rheumatoid arthritis and osteoarthritis, neurodegenerative diseases, including Alzheimer's and Parkinson’s diseases ([4] J. Li, D. Liu, L. Sun, Y. Lu, Z. Zhang, Journal of the Neurological Sciences 2012, 317: 1-5).

Особенно интенсивно данный процесс протекает при сахарном диабете, при этом скорость образования КПГ зависит от уровня и длительности экспозиции глюкозы ([5] R. Ramasamy, S.F. Yan, A.M. Schmidt, Ann. N.Y. Acad Sci., 2011, 1243: 88-102; [6] М.И. Балаболкин. Сахарный Диабет, 2002, 4: 8-16).This process is especially intensive in diabetes mellitus, and the rate of CNG formation depends on the level and duration of glucose exposure ([5] R. Ramasamy, SF Yan, AM Schmidt, Ann. NY Acad Sci., 2011, 1243: 88-102; [6] M.I. Balabolkin, Sugar Diabetes, 2002, 4: 8-16).

Эффекты КПГ могут быть классифицированы как рецептор-независимые или -зависимые, и КПГ могут действовать внутриклеточно или циркулировать и действовать на рецепторы клеточной поверхности, такие как рецептор для КПГ (РКПГ). Поскольку гликирование происходит в течение длительного периода времени, КПГ влияют на долгоживущие белки. Например, главными мишенями для них являются структурные компоненты соединительной ткани, и в частности коллаген типа IV, а также другие долгоживущие белки, в том числе миелин, тубулин, кристаллин, активатор плазминогена 1, фибриноген, которые могут также подвергаться гликированию ([7] S.-Y. Goh, М.Е. Cooper. J Clin Endocrinol Metab, 2008, 93 (4): 1143-1152).The effects of CNG can be classified as receptor-independent or-dependent, and CNG can act intracellularly or circulate and act on cell surface receptors, such as receptor for CNG (RCP). Since glycation occurs over a long period of time, CNGs affect long-lived proteins. For example, the main targets for them are the structural components of connective tissue, and in particular collagen type IV, as well as other long-lived proteins, including myelin, tubulin, crystallin, plasminogen activator 1, fibrinogen, which can also undergo glycation ([7] S .-Y. Goh, M.E. Cooper. J Clin Endocrinol Metab, 2008, 93 (4): 1143-1152).

Связываясь с мембранными РКПГ, конечные продукты гликирования активируют некоторые внутриклеточные сигнальные пути. Например, усиливают транскрипцию ядерного фактора NF-кВ и его генов-мишеней, активируют протеинкиназу С и NADPH-оксидазу, что приводит к увеличению образования провоспалительных цитокинов, свободных радикалов, хемоаттрактантов ([1], [8] S.C. Но, P.W. Chang, Am. J. Plant. Sci., 2012, 3: 995 - 1002). Все вышеперечисленное лежит в основе патогенеза таких последствий сахарного диабета, как диабетические атеросклероз, нефро-, нейро-, ретино-, кардио-, ангиопатии, которые являются причиной высокого риска инвалидизации и смертности среди пациентов с сахарным диабетом.By binding to membrane RCPGs, glycation end products activate some intracellular signaling pathways. For example, they enhance the transcription of the nuclear factor NF-kB and its target genes, activate protein kinase C and NADPH oxidase, which leads to an increase in the formation of pro-inflammatory cytokines, free radicals, chemoattractants ([1], [8] SC But, PW Chang, Am J. Plant. Sci., 2012, 3: 995-1002). All of the above lies at the basis of the pathogenesis of such consequences of diabetes as diabetic atherosclerosis, nephro-, neuro-, retino-, cardio-, angiopathies, which are the cause of a high risk of disability and mortality among patients with diabetes mellitus.

Применение соединений, обладающих высокой антигликирующей активностью, позволит уменьшить образование КПГ в организме, тем самым улучшая качество жизни пациентов, снижая риск возникновения атеросклероза, ревматоидного артрита, остеоартрита, нейродегенеративных заболеваний, включая болезни Альцгеймера и Паркинсона, а также таких осложнений сахарного диабета, как диабетические атеросклероз, нефро-, нейро-, ретино-, кардио-, ангиопатии, которые являются причиной высокого риска инвалидизации и смертности среди пациентов с сахарным диабетом.The use of compounds with high anti-glycation activity will reduce the formation of CNG in the body, thereby improving the quality of life of patients, reducing the risk of atherosclerosis, rheumatoid arthritis, osteoarthritis, neurodegenerative diseases, including Alzheimer's and Parkinson’s diseases, as well as diabetes mellitus complications such as diabetic atherosclerosis, nephro-, neuro-, retino-, cardio-, angiopathies, which are the cause of a high risk of disability and mortality among patients with diabetes mellitus ohm

Все вышеперечисленное обусловливает повышенный интерес в мире к поиску ингибиторов образования конечных продуктов гликирования, поскольку препаратов, специфически угнетающих образование КПГ и разрешенных для клинического применения, на сегодняшний день в мире на дату представления настоящей заявки не существует.All of the above causes increased interest in the world in the search for inhibitors of the formation of glycation end products, since drugs that specifically inhibit the formation of CNG and are approved for clinical use do not exist in the world today.

Проведенный заявителем анализ российских и зарубежных патентных баз данных, научной литературы и Интернет-ресурсов показал, что существуют аналоги заявленного технического решения по назначению, способные ингибировать образование КПГ, которые, однако, обладают значительными недостатками, а именно недостаточно высокой эффективностью и/или существенными побочными эффектами, например высокой токсичностью и т.д.The applicant’s analysis of Russian and foreign patent databases, scientific literature and Internet resources showed that there are analogues of the claimed technical solutions for their intended purpose, which can inhibit the formation of CNG, which, however, have significant disadvantages, namely, insufficiently high efficiency and / or significant side effects effects, e.g. high toxicity, etc.

Далее заявителем приведена информация о выявленных препаратах, вышедших на стадию клинических испытаний. Первым и наиболее изученным веществом, ингибирующим гликирование белков, является аминогуанидин (АГ) ([9] A. Cerami, Р.С. Ulrich, М. Brownlee, Pat US 4758583 A, опубл. 19.07.1988). Он предназначен для предотвращения формирования КПГ и глюкозопроизводных поперечносшитых молекул коллагена. Механизм антигликирующего действия аминогуанидина связывают с его способностью захватывать реактивные дикарбонильные интермедиаты. Однако клинические испытания данного препарата были остановлены в связи с его недостаточной эффективностью и наличием побочных эффектов.Further, the applicant provides information on the identified drugs that have reached the stage of clinical trials. The first and most studied substance that inhibits glycation of proteins is aminoguanidine (AH) ([9] A. Cerami, P.C. Ulrich, M. Brownlee, Pat US 4758583 A, publ. 19.07.1988). It is designed to prevent the formation of CNG and glucose-derived cross-linked collagen molecules. The mechanism of the anti-glycation action of aminoguanidine is associated with its ability to capture reactive dicarbonyl intermediates. However, clinical trials of this drug were stopped due to its lack of effectiveness and the presence of side effects.

В настоящее время проводятся клинические испытания пиридоксамина ([10] R. Khalifah, B.G. Hudson, Pat US 6716858B1, опубл. 06.04.2004), также обладающего антигликирующими свойствами, но он тоже проявляет невысокую активность, сопоставимую с аминогуанидином, снятым с клинических испытаний. Других аналогов заявленного технического решения, используемых по назначению и вошедших на стадию клинических исследований, на дату предоставления настоящей заявки заявителем не выявлено.Clinical trials of pyridoxamine ([10] R. Khalifah, B. G. G. Hudson, Pat US 6716858B1, published April 6, 2004), which also has anti-glycation properties, are also being conducted, but it also exhibits low activity comparable to aminoguanidine withdrawn from clinical trials. Other analogues of the claimed technical solution, used for its intended purpose and included in the stage of clinical trials, at the date of submission of this application by the applicant has not been identified.

Таким образом, на дату представления заявочных материалов, проблема создания высокоактивных ингибиторов образования КПГ, разрешенных к клиническому применению, остается нерешенной не только в РФ, но и за рубежом.Thus, on the date of submission of the application materials, the problem of creating highly active inhibitors of the formation of CNG allowed for clinical use remains unresolved not only in the Russian Federation, but also abroad.

Заявленное техническое решение иллюстрируется следующими материалами: схемой, на которой представлена схема синтеза целевых веществ, таблицами 1, 2, на которых представлены результаты определения антигликирующей активности заявленного технического решения по сравнению с прототипом (аминогуанидином).The claimed technical solution is illustrated by the following materials: the scheme, which shows the synthesis scheme of the target substances, tables 1, 2, which show the results of determining the antiglycating activity of the claimed technical solution in comparison with the prototype (aminoguanidine).

Задачей заявленного технического решения является создание соединений, обладающих высокой антигликирующей активностью, которые обеспечивают возможность вывода на рынок новых лекарственных средств, не имеющих аналогов в мире.The objective of the claimed technical solution is the creation of compounds with high anti-glycation activity, which provide the opportunity to market new drugs that have no analogues in the world.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание соединений, обладающих значительно более высокой антигликирующей активностью по сравнению с ингибиторами образования КПГ, вышедшими на стадию клинических исследований.The technical result of the invention is the creation of compounds with significantly higher anti-glycation activity compared with inhibitors of the formation of CNG, which entered the stage of clinical studies.

Сущность предлагаемого изобретения состоит в том, что получают производные 4-(пиридин-2-илдиазенил)фенилсульфокислот общей формулы I, обладающие более высокой (до 19 раз и более) антигликирующей активностью по сравнению с прототипом (аминогуанидином).The essence of the invention lies in the fact that receive derivatives of 4- (pyridin-2-yldiazenyl) phenylsulfonic acids of the General formula I, with a higher (up to 19 times or more) antiglycating activity compared with the prototype (aminoguanidine).

,

,

где R¹=Н, СН₃; R²=Н, СН₃, С₃Н₇, i-C₃H₇, С₅Н₁₁, С₇Н₁₅, С₈Н₁₇;where R ¹ = H, CH ₃ ; R ² = H, CH ₃ , C ₃ H ₇ , iC ₃ H ₇ , C ₅ H ₁₁ , C ₇ H ₁₅ , C ₈ H ₁₇ ;

Заявленные соединения синтезируют по реакции азосочетания семичленных ацеталей пиридоксина 1(а-з) с диазониевой солью, полученной из 4-аминобензол-1,3-дисульфоксилоты при температуре 0-5°C согласно нижеприведенной схеме:The claimed compounds are synthesized by the azo coupling reaction of seven-membered acetals of pyridoxine 1 (a3) with a diazonium salt obtained from 4-aminobenzene-1,3-disulfoxylates at a temperature of 0-5 ° C according to the following scheme:

Синтез и физико-химические характеристики новых соединений I(а-з) приведены в примерах конкретного выполнения. Спектры ЯМР ¹Н зарегистрированы на приборе «Bruker» AVANCE 400 (400 МГц). Химический сдвиг определяют относительно сигналов остаточных протонов дейтерированного растворителя. Эксперимент ВЭЖХ/МС сверхвысокого разрешения проведен с использованием масс-спектрометра TripleTOF 5600, АВ Sciex (Германия). Температуру плавления веществ определяют на приборе OptiMelt МРА100 (Stanford Research Systems).The synthesis and physicochemical characteristics of the new compounds I (a-z) are given in examples of specific performance. ¹ H NMR spectra were recorded on a Bruker AVANCE 400 instrument (400 MHz). The chemical shift is determined relative to the signals of the residual protons of the deuterated solvent. An ultra-high resolution HPLC / MS experiment was performed using a TripleTOF 5600 mass spectrometer, AB Sciex (Germany). The melting point of substances is determined on an OptiMelt MPA100 instrument (Stanford Research Systems).

Примеры конкретного выполнения заявленного технического решенияExamples of specific implementation of the claimed technical solution

Пример 1. Синтез 4-((9-гидрокси-8-метил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Ia)Example 1. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-8-methyl-1,5-dihydro [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl-1,3-disulfonate sodium (Ia)

К раствору 1,27 г (5 ммоль) 4-аминофенил-1,3-дисульфокислоты в 50 мл 0.2 М соляной кислоты, предварительно охлажденному до 5°C, добавляют 0.35 г (5 ммоль) нитрита натрия в 5 мл воды. Полученную реакционную массу перемешивают 5 мин, затем переливают ее к раствору 0.90 г (5 ммоль) ацеталя 1а и 0.8 г (20 ммоль) гидроксида натрия в 50 мл воды. Реакционную массу перемешивают 1 ч при комнатной температуре, после чего нейтрализуют 1 М соляной кислотой до pH 8. Затем растворитель отгоняют в вакууме, сухой остаток последовательно промывают 50 мл ацетона, 10 мл этилового спирта и растворяют в 20 мл ДМСО. Нерастворившийся остаток отфильтровывают. К фильтрату добавляют 150 мл хлороформа, выпавший осадок отфильтровывают, промывают хлороформом и высушивают в вакууме.To a solution of 1.27 g (5 mmol) of 4-aminophenyl-1,3-disulfonic acid in 50 ml of 0.2 M hydrochloric acid, pre-cooled to 5 ° C, 0.35 g (5 mmol) of sodium nitrite in 5 ml of water is added. The resulting reaction mass is stirred for 5 minutes, then it is poured into a solution of 0.90 g (5 mmol) of acetal 1a and 0.8 g (20 mmol) of sodium hydroxide in 50 ml of water. The reaction mass is stirred for 1 h at room temperature, and then neutralized with 1 M hydrochloric acid to pH 8. Then the solvent is distilled off in vacuo, the dry residue is washed successively with 50 ml of acetone, 10 ml of ethyl alcohol and dissolved in 20 ml of DMSO. The insoluble residue is filtered off. 150 ml of chloroform was added to the filtrate, the precipitate formed was filtered off, washed with chloroform and dried in vacuo.

Выход 28%. Т. пл 250°C (с разложением). ЯМР ¹H (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 2.20 (с, CH₃., 3Н); 4.78 (с, CH₂, 2Н); 4.92 (с, CH₂, 2Н); 5.30 (с, CH₂, 2Н); 7.50, 7.58 (АВХ, ³J_AB=8.0 Гц, ⁴J_AX=-1.8 Гц, 2СН., 2Н); 7.65 (с, ОН, 1H); 8.13 (д. АВХ, ⁴J_AX=-1.8 Гц, СН, 1Н). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, D₂O), δ, м.д: 18.80 (с, CH₃.); 65.81 (с, CH₂); 66.02 (с, CH₂); 97.51 (с, С); 119.64 (с, C_ar.); 125.54 (с, C_ar.); 129.80 (с, C_ar.); 133.70 (с, C_ar.); 138.39 (с, C_ar.); 138.73 (с, C_ar.); 142.23 (с, C_ar.); 144.10 (с, C_ar.); 151.05 (с, C_ar..); 152.47 (с, C_ar.); 166.30 (с, C_ar.). HRMS-ESI: найдено [M-2Na+H]^- 444.0177, C₁₅H₁₄N₃O₉S₂, рассчитано [M-2Na+H]^- 444.0177.Yield 28%. T. pl. 250 ° C (decomposition). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 2.20 (s, CH _3. , 3H); 4.78 (s, CH ₂ , 2H); 4.92 (s, CH ₂ , 2H); 5.30 (s, CH ₂ , 2H); 7.50, 7.58 ( AB X, ³ J _AB = 8.0 Hz, ⁴ J _AX = -1.8 Hz, 2CH., 2H); 7.65 (s, OH, 1H); 8.13 (d. AB X , ⁴ J _AX = -1.8 Hz, CH, 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, D ₂ O), δ, ppm: 18.80 (s, CH _3. ); 65.81 (s, CH ₂ ); 66.02 (s, CH ₂ ); 97.51 (s, C); 119.64 (s, C _ar. ); 125.54 (s, C _ar. ); 129.80 (s, C _ar. ); 133.70 (s, C _ar. ); 138.39 (s, C _ar. ); 138.73 (s, C _ar. ); 142.23 (s, C _ar. ); 144.10 (s, C _ar. ); 151.05 (s, C _ar ..); 152.47 (s, C _ar. ); 166.30 (s, C _ar. ). HRMS-ESI: found [M-2Na + H] ^- 444.0177, C ₁₅ H ₁₄ N ₃ O ₉ S ₂ , calculated [M-2Na + H] ^- 444.0177.

Пример 2. Синтез 4-((9-гидрокси-3,8-диметил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Iб)Example 2. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-3,8-dimethyl-1,5-dihydro [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl-1,3 sodium disulphonate (IB)

Синтезируют и разрабатывают аналогично соединению Ia, используя ацеталь Iб вместо ацеталя 1а. Выход 46%. ЯМР ¹H (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 1.30 (д, ³J=5.0 Гц., CH₃., 3Н); 2.19 (с, CH_3., 3Н); 4.53, 5.02 (АВ, ²J_нн=-15 Гц, CH₂, 2Н); 5.03, 5.54 (АВ, ²J_нн=-14.8 Гц, CH₂, 2Н); 5.10 (к, ³J=5.0 Гц., СН., 1Н); 7.50, 7.58 (АВХ, ³J_AB=8.4 Гц, ⁴J_AX=-1.7 Гц, 2СН, 2Н); 8.13 (АВХ, ⁴J_AX=-1.7 Гц, СН., 1H). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, D₂O), δ, м.д: 19.46 (с, CH_3.); 20.08 (с, CH_3.); 62.74 (с, CH₂); 63.05 (с, CH₂); 101.92 (с, С); 116.09 (с, C_ar.); 125.51 (с, C_ar.); 127.11 (с, C_ar.); 129.77 (с, C_ar.); 139.58 (с, C_ar.), 139.89 (с, C_ar.); 140.56 (с, C_ar.); 145.10 (с, C_ar.); 150.38 (с, C_ar.); 151.10 (с, C_ar.); 170.30 (с, C_ar.).Synthesize and develop similarly to compound Ia, using acetal IB instead of acetal 1a. The yield is 46%. ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 1.30 (d, ³ J = 5.0 Hz., CH _3. , 3H); 2.19 (s, CH _3. , 3H); 4.53, 5.02 (AB, ² J _nn = -15 Hz, CH ₂ , 2H); 5.03, 5.54 (AB, ² J _nn = -14.8 Hz, CH ₂ , 2H); 5.10 (q, ³ J = 5.0 Hz., CH., 1H); 7.50, 7.58 ( AB X, ³ J _AB = 8.4 Hz, ⁴ J _AX = -1.7 Hz, 2CH, 2H); 8.13 (AB X , ⁴ J _AX = -1.7 Hz, CH., 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, D ₂ O), δ, ppm: 19.46 (s, CH _3. ); 20.08 (s, CH _3. ); 62.74 (s, CH ₂ ); 63.05 (s, CH ₂ ); 101.92 (s, C); 116.09 (s, C _ar. ); 125.51 (s, C _ar. ); 127.11 (s, C _ar. ); 129.77 (s, C _ar. ); 139.58 (s, C _ar. ), 139.89 (s, C _ar. ); 140.56 (s, C _ar. ); 145.10 (s, C _ar. ); 150.38 (s, C _ar. ); 151.10 (s, C _ar. ); 170.30 (s, C _ar. ).

Пример 3. Синтез 4-((9-гидрокси-3-пропил-8-метил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Iв)Example 3. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-3-propyl-8-methyl-1,5-dihydro [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl-1 Sodium 3-disulfonate (Ic)

Синтезируют и разрабатывают аналогично соединению Ia, используя ацеталь Iв вместо ацеталя 1а. Выход 24%. Т. пл. 250°C (с разложением). ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 0.92 (т, ³J_нн=7.1 Гц, CH₃, 3Н); 1.34-1.43 (м, CH₂, 2Н); 1.58-1.64 (м, CH₂, 2Н); 2.20 (с, CH₃, 3Н); 4.54, 5.02 (АВ, ²J_нн=-16 Гц, CH₂, 2Н); 5.03, 5.55 (АВ, ²J_нн=-14 Гц, CH₂, 2Н); 4.90 (т, ³J_нн=5.6 Гц, СН, 1H); 7.50, 7.56 (АВХ, ³J_AB=10.0 Гц, ⁴J_AX=-2.0 Гц, 2CH_ar., 2Н); 7.65 (с, OH, 1Н); 8.13 (АВХ, ⁴J_AX=-2.0 Гц, CH_ar., 1Н). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, D₂O), δ, м.д.: 13.33 (с, CH₃); 17.61 (с, CH₂); 19.05 (с, CH₃); 34.78 (с, CH₂); 63.75 (с, CH₂); 63.92 (с, CH₂); 106.61 (с, С); 117.19 (с, C_ar.); 125.52 (с, C_ar.); 129.86 (с, C_ar.); 133.35 (с, C_ar.); 136.95 (с, C_ar.); 138.55 (с, C_ar.); 144.14 (с, C_ar.); 147.38 (с, C_ar.); 151.22 (с, C_ar.); 154.40 (с, C_ar.); 165.16 (с, C_ar.). HRMS-ESI: найдено [М-2Na+H]^- 486.0646, C₁₈H₂₀N₃O₉S₂, вычислено [M-2Na+H]^- 486.0646.Synthesize and develop similarly to compound Ia, using acetal Ib instead of acetal 1a. 24% yield. T. pl. 250 ° C (with decomposition). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 0.92 (t, ³ J _nn = 7.1 Hz, CH ₃ , 3H); 1.34-1.43 (m, CH ₂ , 2H); 1.58-1.64 (m, CH ₂ , 2H); 2.20 (s, CH ₃ , 3H); 4.54, 5.02 (AB, ² J _nn = -16 Hz, CH ₂ , 2H); 5.03, 5.55 (AB, ² J _nn = -14 Hz, CH ₂ , 2H); 4.90 (t, ³ J _nn = 5.6 Hz, CH, 1H); 7.50, 7.56 ( AB X, ³ J _AB = 10.0 Hz, ⁴ J _AX = -2.0 Hz, 2CH _ar. , 2H); 7.65 (s, OH, 1H); 8.13 (AB X , ⁴ J _AX = -2.0 Hz, CH _ar. , 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, D ₂ O), δ, ppm: 13.33 (s, CH ₃ ); 17.61 (s, CH ₂ ); 19.05 (s, CH ₃ ); 34.78 (s, CH ₂ ); 63.75 (s, CH ₂ ); 63.92 (s, CH ₂ ); 106.61 (s, C); 117.19 (s, C _ar. ); 125.52 (s, C _ar. ); 129.86 (s, C _ar. ); 133.35 (s, C _ar. ); 136.95 (s, C _ar. ); 138.55 (s, C _ar. ); 144.14 (s, C _ar. ); 147.38 (s, C _ar. ); 151.22 (s, C _ar. ); 154.40 (s, C _ar. ); 165.16 (s, C _ar. ). HRMS-ESI: found [M-2Na + H] ^- 486.0646, C ₁₈ H ₂₀ N ₃ O ₉ S ₂ , calculated [M-2Na + H] ^- 486.0646.

Пример 4. Синтез 4-((9-гидрокси-3-изо-пропил-8-метил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино [5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Ir)Example 4. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-3-iso-propyl-8-methyl-1,5-dihydro- [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl -1,3-sodium disulfonate (Ir)

Синтезируют и разрабатывают аналогично соединению Ia, используя ацеталь 1г вместо ацеталя 1а. Выход 32%. Т.пл. 243°C (с разложением). ЯМР ¹H (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 0.91 (д, ³J_нн=6.8 Гц, CH₃, 3Н); 0.93 (д, ³J_нн=6.8 Гц, CH₃, 3Н); 1.91-2.03 (м, СН, 1Н); 2.29 (с, CH₃, 3Н); 4.55, 4.82 (AB, ²J_нн=-14 Гц, CH₂, 2Н); 4.97, 5.29 (AB, ²J_нн=-16 Гц, CH₂, 2Н); 4.52 (д, ³J_нн=6.9 Гц, СН, 2Н); 7.49, 7.57 (АВХ, ³J_AB=8.0 Гц, 2CH_ar., 2Н); 7.98 (д. АВХ, CH_ar., 1Н). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 18.04 (с, CH₃); 19.91 (с, CH₃); 30.10 (с, СН); 61.13 (с, CH₂); 61.90 (с, CH₂); 108.69 (с, С); 114.32 (с, C_ar.); 125.46 (с, C_ar.); 127.77 (с, C_ar.); 133.54 (с, C_ar.); 134.24 (с, C_ar.); 137.24 (с, C_ar.); 137.40 (с, C_ar.); 143.08 (с, C_ar.); 145.35 (с, C_ar.); 160.45 (с, C_ar.); 176.81 (с, C_ar.). HRMS-ESI: найдено [M-2Na+H]^- 486.0646, C₁₈H₂₀N₃O₉S₂, вычислено [M-2Na+H]^- 486.0646.Synthesize and develop similarly to compound Ia, using acetal 1g instead of acetal 1a. Yield 32%. Mp 243 ° C (with decomposition). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 0.91 (d, ³ J _nn = 6.8 Hz, CH ₃ , 3H); 0.93 (d, ³ J _nn = 6.8 Hz, CH ₃ , 3H); 1.91-2.03 (m, CH, 1H); 2.29 (s, CH ₃ , 3H); 4.55, 4.82 (AB, ² J _nn = -14 Hz, CH ₂ , 2H); 4.97, 5.29 (AB, ² J _nn = -16 Hz, CH ₂ , 2H); 4.52 (d, ³ J _nn = 6.9 Hz, CH, 2H); 7.49, 7.57 ( AB X, ³ J _AB = 8.0 Hz, 2CH _ar. , 2H); 7.98 (d. AB X , CH _ar. , 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 18.04 (s, CH ₃ ); 19.91 (s, CH ₃ ); 30.10 (s, CH); 61.13 (s, CH ₂ ); 61.90 (s, CH ₂ ); 108.69 (s, C); 114.32 (s, C _ar. ); 125.46 (s, C _ar. ); 127.77 (s, C _ar. ); 133.54 (s, C _ar. ); 134.24 (s, C _ar. ); 137.24 (s, C _ar. ); 137.40 (s, C _ar. ); 143.08 (s, C _ar. ); 145.35 (s, C _ar. ); 160.45 (s, C _ar. ); 176.81 (s, C _ar. ). HRMS-ESI: found [M-2Na + H] ^- 486.0646, C ₁₈ H ₂₀ N ₃ O ₉ S ₂ , calculated [M-2Na + H] ^- 486.0646.

Пример 5. Синтез 4-((9-гидрокси-3-пентил-8-метил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино [5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Iд)Example 5. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-3-pentyl-8-methyl-1,5-dihydro [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl-1 Sodium 3-disulfonate (Id)

Синтезируют и разрабатывают аналогично соединению Ia, используя ацеталь 1д вместо ацеталя 1а. Выход 21%. Т.пл. 280°C (с разложением). ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 0.88 (т, ³J_нн=6.7 Гц, CH₃., 3Н); 1.25-1.42 (м, 3CH₂, 6Н); 1.55-1.66 (м, CH₂, 2Н); 2.19 (с, CH₃, 3Н); 4.53, 5.01 (AB, ²J_нн=-16 Гц, CH₂, 2Н); 5.01, 5.55 (AB, ²J_нн=-16 Гц, CH₂, 2Н); 4.88 (т, ³J_нн=5.8 Гц, СН, 1H); 7.50, 7.58 (АВХ, ³J_AB=8.0 Гц, ⁴J_AX=-1.9 Гц, 2CH_ar., 2Н); 8.12 (д. АВХ, ⁴J_AX=-1.9 Гц, CH_ar., 1Н). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, D₂O), δ, м.д.: 13.51 (с, CH₃); 18.81 (с, CH₃); 22.12 (с, CH₂); 23.76 (с, CH₂); 30.95 (с, CH₂); 32.69 (с, CH₂); 63.72 (с, CH₂); 63.91 (с, CH₂); 106.84 (с, С); 119.56 (с, C_ar.); 125.53 (с, C_ar.); 129.75 (с, C_ar.); 133.31 (с, C_ar.); 138.47 (с, C_ar.); 138.76 (с, C_ar.); 142.32 (с, C_ar.); 144.17 (с, C_ar.); 151.24 (с, C_ar.); 152.48 (с, C_ar.); 166.36 (с, C_ar.). HRMS-ESI: найдено [M-2Na+H]^- 514.0959, C₂₀H₂₄N₃O₉S₂, вычислено [M-2Na+H]^- 514.0959.Synthesize and develop similarly to compound Ia, using acetal 1d instead of acetal 1a. Yield 21%. Mp 280 ° C (with decomposition). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 0.88 (t, ³ J _nn = 6.7 Hz, CH _3. , 3H); 1.25-1.42 (m, 3CH ₂ , 6H); 1.55-1.66 (m, CH ₂ , 2H); 2.19 (s, CH ₃ , 3H); 4.53, 5.01 (AB, ² J _nn = -16 Hz, CH ₂ , 2H); 5.01, 5.55 (AB, ² J _nn = -16 Hz, CH ₂ , 2H); 4.88 (t, ³ J _nn = 5.8 Hz, CH, 1H); 7.50, 7.58 ( AB X, ³ J _AB = 8.0 Hz, ⁴ J _AX = -1.9 Hz, 2CH _ar. , 2H); 8.12 (d. AB X , ⁴ J _AX = -1.9 Hz, CH _ar. , 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, D ₂ O), δ, ppm: 13.51 (s, CH ₃ ); 18.81 (s, CH ₃ ); 22.12 (s, CH ₂ ); 23.76 (s, CH ₂ ); 30.95 (s, CH ₂ ); 32.69 (s, CH ₂ ); 63.72 (s, CH ₂ ); 63.91 (s, CH ₂ ); 106.84 (s, C); 119.56 (s, C _ar. ); 125.53 (s, C _ar. ); 129.75 (s, C _ar. ); 133.31 (s, C _ar. ); 138.47 (s, C _ar. ); 138.76 (s, C _ar. ); 142.32 (s, C _ar. ); 144.17 (s, C _ar. ); 151.24 (s, C _ar. ); 152.48 (s, C _ar. ); 166.36 (s, C _ar. ). HRMS-ESI: found [M-2Na + H] ^- 514.0959, C ₂₀ H ₂₄ N ₃ O ₉ S ₂ , calculated [M-2Na + H] ^- 514.0959.

Пример 6. Синтез 4-((9-гидрокси-3-гептил-8-метил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино [5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Ie)Example 6. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-3-heptyl-8-methyl-1,5-dihydro [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl-1 , 3-sodium disulfonate (Ie)

Синтезируют и разрабатывают аналогично соединению Ia, используя ацеталь 1е вместо ацеталя 1а. Выход 30%. Т.пл. 290°C (с разложением). ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 0.87 (т, ³J_нн=6.8 Гц, CH₃, 3Н); 1.22-1.42 (м, 5CH₂, 10Н); 1.57-1.65 (м, CH₂, 2Н); 2.19 (с, CH₃, 3Н); 4.53, 5.00 (AB, ²J_нн=-16 Гц, CH₂, 2Н); 5.00, 5.54 (АВ, ²J_нн=-14 Гц, CH₂, 2Н); 4.88 (т, ³J_нн=6.3 Гц, СН, Н); 7.49, 7.57 (АВХ, ³J_AB=8.0 Гц, ⁴J_AX=-2.3 Гц, 2CH_ar., 2Н); 8.13 (д. АВХ, ⁴J_AX=-2.3 Гц, CH_ar., 1H). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 13.99 (с, CH₃); 19.42 (с, CH₃); 22.10 (с, CH₂); 24.38 (с, CH₂); 28.68 (с, CH₂); 28.84 (с, CH₂); 31.24 (с, CH₂); 33.11 (с, CH₂); 63.05 (с, CH₂); 63.17 (с, CH₂); 105.20 (с, С); 116.01 (с, C_ar.); 125.49 (с, C_ar.); 127.03 (с, C_ar.); 129.68 (с, C_ar.); 139.59 (с, C_ar.); 139.75 (с, C_ar.); 140.52 (с, C_ar.); 145.21 (с, C_ar.); 150.31 (с, C_ar.); 151.07 (с, C_ar.); 170.42 (с, C_ar.). HRMS-ESI: найдено [M-2Na+H]^- 542.1272, C₂₂H₂₈N₃O₉S₂, вычислено [M-2Na+H]^- 542.1272.Synthesize and develop similarly to compound Ia, using acetal 1e instead of acetal 1a. Yield 30%. Mp 290 ° C (decomposed). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 0.87 (t, ³ J _nn = 6.8 Hz, CH ₃ , 3H); 1.22-1.42 (m, 5CH ₂ , 10H); 1.57-1.65 (m, CH ₂ , 2H); 2.19 (s, CH ₃ , 3H); 4.53, 5.00 (AB, ² J _nn = -16 Hz, CH ₂ , 2H); 5.00, 5.54 (AB, ² J _nn = -14 Hz, CH ₂ , 2H); 4.88 (t, ³ J _nn = 6.3 Hz, CH, H); 7.49, 7.57 ( AB X, ³ J _AB = 8.0 Hz, ⁴ J _AX = -2.3 Hz, 2CH _ar. , 2H); 8.13 (d. AB X , ⁴ J _AX = -2.3 Hz, CH _ar. , 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 13.99 (s, CH ₃ ); 19.42 (s, CH ₃ ); 22.10 (s, CH ₂ ); 24.38 (s, CH ₂ ); 28.68 (s, CH ₂ ); 28.84 (s, CH ₂ ); 31.24 (s, CH ₂ ); 33.11 (s, CH ₂ ); 63.05 (s, CH ₂ ); 63.17 (s, CH ₂ ); 105.20 (s, C); 116.01 (s, C _ar. ); 125.49 (s, C _ar. ); 127.03 (s, C _ar. ); 129.68 (s, C _ar. ); 139.59 (s, C _ar. ); 139.75 (s, C _ar. ); 140.52 (s, C _ar. ); 145.21 (s, C _ar. ); 150.31 (s, C _ar. ); 151.07 (s, C _ar. ); 170.42 (s, C _ar. ). HRMS-ESI: found [M-2Na + H] ^- 542.1272, C ₂₂ H ₂₈ N ₃ O ₉ S ₂ , calculated [M-2Na + H] ^- 542.1272.

Пример 7. Синтез 4-((9-гидрокси-3-октил-8-метил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино [5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Iж)Example 7. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-3-octyl-8-methyl-1,5-dihydro [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl-1 Sodium 3-disulfonate (Izh)

Синтезируют и разрабатывают аналогично соединению Ia, используя ацеталь 1ж вместо ацеталя 1а. Выход 29%. Т.пл. 300°C (с разложением). ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 0.86 (т, ³J_нн=7.5 Гц, CH₃, 3Н); 1.24-1.40 (м, 6CH₂, 12Н); 1.57-1.65 (м, CH₂,2Н); 2.19 (с, CH₃, 3Н); 4.53, 5.00 (AB, ²J_нн=-14 Гц, CH₂, 2Н); 5.01, 5.54 (АВ, ²J_нн=-14 Гц, CH₂, 2Н); 4.88 (т, ³J_нн=5.8 Гц, СН, 1H); 7.50, 7.57 (АВХ, ³J_AB=8.4 Гц, ⁴J_AX=-2.2 Гц, 2CH_ar., 2Н); 8.12 (д. АВХ, ⁴J_AX=-2.2 Гц, CH_ar., 1H). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 13.99 (с, CH₃); 19.44 (с, CH₃); 22.12 (с, CH₂); 24.37 (с, CH₂); 28.66 (с, CH₂); 28.89 (с, CH₂); 28.99 (с, CH₂); 31.30 (с, CH₂); 33.12 (с, CH₂); 63.04 (с, CH₂); 63.17 (с, CH₂); 105.20 (с, С); 116.05 (с, C_ar.); 125.50 (с, C_ar.); 127.06 (с, C_ar.); 129.77 (с, C_ar.); 139.60 (с, C_ar.); 139.83 (с, C_ar.); 140.54 (с, C_ar.); 145.16 (с, C_ar.); 150.33 (с, C_ar.); 151.08 (с, C_ar.); 170.35 (с, C_ar.). HRMS-ESI: найдено [M-2Na+H]^- 556.1429, C₂₃H₃₀N₃O₉S₂, вычислено [M-2Na+H]^- 556.1429.Synthesize and develop similarly to compound Ia, using acetal 1g instead of acetal 1a. Yield 29%. Mp 300 ° C (with decomposition). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 0.86 (t, ³ J _nn = 7.5 Hz, CH ₃ , 3H); 1.24-1.40 (m, 6CH ₂ , 12H); 1.57-1.65 (m, CH ₂ , 2H); 2.19 (s, CH ₃ , 3H); 4.53, 5.00 (AB, ² J _nn = -14 Hz, CH ₂ , 2H); 5.01, 5.54 (AB, ² J _nn = -14 Hz, CH ₂ , 2H); 4.88 (t, ³ J _nn = 5.8 Hz, CH, 1H); 7.50, 7.57 ( AB X, ³ J _AB = 8.4 Hz, ⁴ J _AX = -2.2 Hz, 2CH _ar. , 2H); 8.12 (d. AB X , ⁴ J _AX = -2.2 Hz, CH _ar. , 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 13.99 (s, CH ₃ ); 19.44 (s, CH ₃ ); 22.12 (s, CH ₂ ); 24.37 (s, CH ₂ ); 28.66 (s, CH ₂ ); 28.89 (s, CH ₂ ); 28.99 (s, CH ₂ ); 31.30 (s, CH ₂ ); 33.12 (s, CH ₂ ); 63.04 (s, CH ₂ ); 63.17 (s, CH ₂ ); 105.20 (s, C); 116.05 (s, C _ar. ); 125.50 (s, C _ar .); 127.06 (s, C _ar. ); 129.77 (s, C _ar. ); 139.60 (s, C _ar. ); 139.83 (s, C _ar. ); 140.54 (s, C _ar. ); 145.16 (s, C _ar. ); 150.33 (s, C _ar. ); 151.08 (s, C _ar. ); 170.35 (s, C _ar. ). HRMS-ESI: found [M-2Na + H] ^- 556.1429, C ₂₃ H ₃₀ N ₃ O ₉ S ₂ , calculated [M-2Na + H] ^- 556.1429.

Пример 8. Синтез 4-((9-гидрокси-3,3,8-триметил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино [5,6-с]пиридин-6-ил)диазенил)фенил-1,3-дисульфоната натрия (Iз)Example 8. Synthesis of 4 - ((9-hydroxy-3,3,8-trimethyl-1,5-dihydro [1,3] dioxepino [5,6-c] pyridin-6-yl) diazenyl) phenyl-1 Sodium 3-disulfonate (Ih)

Синтезируют и разрабатывают аналогично соединению Ia, используя ацеталь 1з вместо ацеталя 1а. Выход 28%. Т.пл. 264°C (с разложением). ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 1.42 (с, 2CH₃, 6Н); 2.18 (с, CH₃, 3Н); 4.69 (с, CH₂, 2Н); 5.24 (с, CH₂, 2Н); 7.75, 7.82 (АВХ, ³J_AB=8.0 Гц, ⁴J_AX=-1.9 Гц, 2CH_ar., 2Н), 7.65 (с, OH, 1H), 8.13 (д. АВХ, ⁴J_AX=-1.9 Гц, CH_ar., 1Н). ЯМР ¹³С {Н} (100 МГц, D₂O), δ, м.д.: 18.42 (с, CH₃); 23.14 (с, CH₃); 59.99 (с, CH₂); 60.53 (с, CH₂); 103.76 (с, С); 119.60 (с, C_ar.); 125.53 (с, C_ar.); 129.80 (с, C_ar.); 133.12 (с, C_ar.); 137.39 (с, C_ar.); 138.41 (с, C_ar.); 142.29 (с, С_аг.); 144.16 (с, C_ar.); 149.95 (с, C_ar.); 152.56 (с, C_ar.); 166.16 (с, C_ar.). HRMS-ESI: найдено [M-2Na+H]^- 472.0490, C₁₇H₁₈N₃O₉S₂, вычислено [M-2Na+H]^- 472.0490.Synthesize and develop similarly to compound Ia, using acetal 1s instead of acetal 1a. Yield 28%. Mp 264 ° C (decomposed). NMR ¹ H (400 MHz, DMSO-d6), δ, ppm: 1.42 (s, 2CH ₃ , 6H); 2.18 (s, CH ₃ , 3H); 4.69 (s, CH ₂ , 2H); 5.24 (s, CH ₂ , 2H); 7.75, 7.82 ( AB X, ³ J _AB = 8.0 Hz, ⁴ J _AX = -1.9 Hz, 2CH _ar. , 2H), 7.65 (s, OH, 1H), 8.13 (d. AB X , ⁴ J _AX = - 1.9 Hz, CH _ar. , 1H). NMR ¹³ C {H} (100 MHz, D ₂ O), δ, ppm: 18.42 (s, CH ₃ ); 23.14 (s, CH ₃ ); 59.99 (s, CH ₂ ); 60.53 (s, CH ₂ ); 103.76 (s, C); 119.60 (s, C _ar. ); 125.53 (s, C _ar. ); 129.80 (s, C _ar. ); 133.12 (s, C _ar. ); 137.39 (s, C _ar. ); 138.41 (s, C _ar. ); 142.29 (s, C _ag. ); 144.16 (s, C _ar. ); 149.95 (s, C _ar. ); 152.56 (s, C _ar. ); 166.16 (s, C _ar. ). HRMS-ESI: found [M-2Na + H] ^- 472.0490, C ₁₇ H ₁₈ N ₃ O ₉ S ₂ , calculated [M-2Na + H] ^- 472.0490.

Пример 9. Определение антигликирующей активности.Example 9. Determination of anti-glycation activity.

Реакцию гликирования воспроизводят по методу A. Jedsadayanmata ([11] А. Jedsadayanmata, Naresuan University Journal, 2005, 13(2): 35-41). Реакционная смесь содержит растворы бычьего сывороточного альбумина (1 мг/мл) и глюкозы (500 мМ) в фосфатном буфере (pH 7.4). Для предупреждения бактериального роста в буферный раствор вносят азид натрия в конечной концентрации 0.02%. Все вещества растворяют в диметилсульфоксиде (ДМСО). В экспериментальные образцы добавляют 30 мкл раствора изучаемых веществ в различных концентрациях, в контрольные образцы добавляют ДМСО в аналогичном объеме. Все экспериментальные образцы инкубируют в течение 24 часов при 60°C. По истечении срока инкубации проводят определение специфической флуоресценции гликированного бычьего сывороточного альбумина (БСА) на спектрофлуориметре F-7000 (Hitachi, Япония) при длине волны возбуждения 370 нм и испускания 440 нм. В качестве вещества сравнения используют известный ингибитор гликирования аминогуанидин (таблица 1) ([12] P.J. Thornalley, Archives of Biochemistry and Biophysics, 2003, 419: 31-40).The glycation reaction is reproduced according to the method of A. Jedsadayanmata ([11] A. Jedsadayanmata, Naresuan University Journal, 2005, 13 (2): 35-41). The reaction mixture contains solutions of bovine serum albumin (1 mg / ml) and glucose (500 mM) in phosphate buffer (pH 7.4). To prevent bacterial growth, sodium azide in a final concentration of 0.02% is added to the buffer solution. All substances are dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO). In experimental samples add 30 μl of a solution of the studied substances in various concentrations, in the control samples add DMSO in the same volume. All experimental samples were incubated for 24 hours at 60 ° C. At the end of the incubation period, specific fluorescence of glycated bovine serum albumin (BSA) is determined on an F-7000 spectrofluorimeter (Hitachi, Japan) at an excitation wavelength of 370 nm and an emission of 440 nm. A known glycation inhibitor aminoguanidine is used as a reference substance (Table 1) ([12] P.J. Thornalley, Archives of Biochemistry and Biophysics, 2003, 419: 31-40).

Статистическую обработку результатов проводят с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни, табличного редактора Microsoft Excel 2007 и программы GraphPad Prism 5.0. Расчет показателя IC₅₀ проводят методом регрессионного анализа (таблица 2).Statistical processing of the results is carried out using the nonparametric Mann-Whitney test, Microsoft Excel 2007 spreadsheet editor and GraphPad Prism 5.0. The calculation of the indicator IC ₅₀ carried out by regression analysis (table 2).

Анализ данных, приведенных в таблице 1 и таблице 2, позволяет сделать вывод, что заявленные вещества проявляют высокий уровень антигликирующей активности (таблица 1), что позволяет определить зависимость их эффекта от концентрации и рассчитать показатель IC₅₀ (таблица 2).Analysis of the data shown in table 1 and table 2 allows us to conclude that the claimed substances exhibit a high level of antiglycation activity (table 1), which allows us to determine the dependence of their effect on concentration and calculate the IC ₅₀ index (table 2).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что все заявленные вещества по активности превосходят прототип аминогуанидин в 7-19 раз.Thus, the results obtained indicate that all the claimed substances in activity exceed the prototype aminoguanidine by 7-19 times.

Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод, что заявленное техническое решение позволяет создать новые высокоэффективные и безопасные лекарственные средства профилактики и лечения микро- и макрососудистых осложнений сахарного диабета, атеросклероза, нейродегенеративных заболеваний, тем самым улучшая качество жизни пациентов.Based on the foregoing, it can be concluded that the claimed technical solution allows you to create new highly effective and safe drugs for the prevention and treatment of micro- and macrovascular complications of diabetes, atherosclerosis, neurodegenerative diseases, thereby improving the quality of life of patients.

Заявленное техническое решение соответствует критерию «новизна», предъявляемому к изобретениям, так как из исследованного уровня техники не выявлены технические решения, обладающие заявленной совокупностью отличительных признаков, обеспечивающих достижение заявленных результатов.The claimed technical solution meets the criterion of "novelty" presented to the inventions, as the technical solutions have not been identified from the prior art that have the claimed combination of distinctive features that ensure the achievement of the stated results.

Заявленное техническое решение соответствует критерию «изобретательский уровень», предъявляемому к изобретениям, так как не является очевидным для специалиста в данной области науки и техники.The claimed technical solution meets the criterion of "inventive step" for inventions, as it is not obvious to a specialist in this field of science and technology.

Заявленное техническое решение соответствует критерию «промышленная применимость», т.к. может быть реализовано на любом специализированном предприятии с использованием стандартного оборудования, известных отечественных материалов и технологий.The claimed technical solution meets the criterion of "industrial applicability", because can be implemented at any specialized enterprise using standard equipment, well-known domestic materials and technologies.

Claims

Derivatives of 4 - ((pyridin-2-yl) diazenyl) phenylsulfonic acids and their salt forms of the general formula I

where R ¹ = H, CH ₃ ;

R ² = H, CH ₃ , C ₃ H ₇ , iC ₃ H ₇ , C ₅ H ₁₁ , C ₇ H ₁₅ , C ₈ H ₁₇ ;

X ⁺ = alkali metal cations such as Na ⁺ and K ⁺ ,

possessing anti-glycation activity.