RU2629386C1 - Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis - Google Patents
Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2629386C1 RU2629386C1 RU2016124140A RU2016124140A RU2629386C1 RU 2629386 C1 RU2629386 C1 RU 2629386C1 RU 2016124140 A RU2016124140 A RU 2016124140A RU 2016124140 A RU2016124140 A RU 2016124140A RU 2629386 C1 RU2629386 C1 RU 2629386C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- eggs
- females
- trichostrongylus
- mature
- trichostrongylus colubriformis
- Prior art date
Links
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 title claims abstract description 122
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 90
- 241000243796 Trichostrongylus colubriformis Species 0.000 title claims abstract description 72
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims description 25
- 244000052769 pathogen Species 0.000 title abstract description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 37
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 claims abstract description 26
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 claims abstract description 16
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 239000012891 Ringer solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 claims description 27
- 241000243797 Trichostrongylus Species 0.000 abstract description 13
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002224 dissection Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 30
- 244000000013 helminth Species 0.000 description 26
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 18
- 241000197881 Trichocephalus Species 0.000 description 16
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 16
- 241001489151 Trichuris Species 0.000 description 15
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 14
- 206010048282 zoonosis Diseases 0.000 description 14
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 12
- 241000283898 Ovis Species 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 10
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 10
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 9
- 210000003905 vulva Anatomy 0.000 description 9
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 8
- 108010034145 Helminth Proteins Proteins 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 210000001752 female genitalia Anatomy 0.000 description 7
- 241000282988 Capreolus Species 0.000 description 6
- 208000006968 Helminthiasis Diseases 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 238000005188 flotation Methods 0.000 description 5
- 208000014837 parasitic helminthiasis infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 241000122945 Trichostrongylus axei Species 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 4
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 4
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 241001466804 Carnivora Species 0.000 description 3
- 241000272470 Circus Species 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 241001416149 Ovis ammon Species 0.000 description 3
- 241000520234 Trichostrongylus probolurus Species 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 241000283726 Bison Species 0.000 description 2
- 206010011409 Cross infection Diseases 0.000 description 2
- 235000019687 Lamb Nutrition 0.000 description 2
- 241001493546 Suina Species 0.000 description 2
- 241000122858 Trichostrongylus vitrinus Species 0.000 description 2
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 230000003108 parasitologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 241001553178 Arachis glabrata Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000282817 Bovidae Species 0.000 description 1
- 241000931178 Bunostomum Species 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241000282421 Canidae Species 0.000 description 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 241001416167 Mustela sp. Species 0.000 description 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 1
- 206010029803 Nosocomial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000510960 Oesophagostomum Species 0.000 description 1
- 241000243795 Ostertagia Species 0.000 description 1
- 241001502414 Ovis canadensis Species 0.000 description 1
- 241000565625 Ovis nivicola Species 0.000 description 1
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 1
- 241000243792 Trichostrongylidae Species 0.000 description 1
- 241000576455 Trichostrongylus capricola Species 0.000 description 1
- 241001638368 Trichuris vulpis Species 0.000 description 1
- 241000282485 Vulpes vulpes Species 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012733 comparative method Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 244000062645 predators Species 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/033—Rearing or breeding invertebrates; New breeds of invertebrates
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis. Способ заключается в том, что матриксы из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии мелких жвачных предварительно обрабатывают в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C. Затем проводят отбор 250 и более живых, активных, половозрелых 250 и более самок вида Trichostrongylus colubriformis. Отбор проводят в отдельные бактериологические чашки с раствором Ringer по 9 самок в каждую чашку. Затем их экспонируют при t = 25°C в течение 3-х часов в условиях термостата, после чего получают чистую культуру зрелых яиц Trichostrongylus colubriformis, выделенных живыми самками. Заявленный способ позволяет получить до 100% сбора только зрелых яиц от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis. 1 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарной медицины, а более конкретно - к паразитологии (= гельминтологии) к «Способу сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubrifomis», предназначенный для гельминтологических сборов только зрелых яиц от живых, половозрелых самок возбудителя гельминтозооноза вида: Trichostrongylus colubriformis, собранных при гельминтологических вскрытиях по методу академика К.И. Скрябина - [9] на мясокомбинатах, убойных пунктах, зоопарках, цирках, заповедниках, спонтанно зараженных трихостронгилюсами домашних или/и диких (снежных баранов, архаров, косуль и др.) мелких жвачных для проведения паразитологических лабораторных исследований.
Возбудителями трихостронгилезов жвачных являются многочисленные виды рода Trichostrongylus Looss, 1905: Trichostrongylus axei (Cobbold, 1879), Trichostrongylus colubriformis (Giles, 1892) Trichostrongylus probolurus (Railliet, 1896), Trichostrongylus vitrinus Looss, 1905 et al. [К.И. Скрябин, Н.П. Шихобалова, Р.С. Шульц - 10; К.И. Скрябин, А.М. Петров - 11; В.Е. Пасечник и др. - 4; В.Е. Пасечник - 5; А.П. Тощев - 12]
Трихостронгилюсы имеют весьма широкое распространение, и ими почти поголовно заражены все овцы, крупный рогатый скот во всех странах света. [К.И. Скрябин, А.М. Петров - 11]
Хозяева: домашние (овцы, козы, крупный рогатый скот, верблюды) и дикие парнокопытные (антилопы, олени, бизоны, зубры и др.), лошади и человек: Trichostrongylus orientalis, Tr. probolurus, Tr. vitrinus, Tr. skrjabini, Tr. axei, Tr. colubriformis и др. [К.И. Скрябин, Н.П. Шихобалова, Р.С. Шульц - 10; К.И. Скрябин, А.М. Петров - 11; В.Е. Пасечник и др. - 4; В.Е. Пасечник - 5; В.П. Подъяпольская - 7; Н.П. Романова - 8; А.П. Тощев - 12].
Известно, что трихостронгилюсы - самые мелкие гельминты семейства Trichostrongylidae Leiper, 1912. Длина их 3-7 мм. Характеризуются отсутствием зуба в ротовой полости, головной везикулы и шейных сосочков. Спикулы относительно короткие. [К.И. Скрябин, Н.П. Шихобалова, Р.С. Шульц - 10; К.И. Скрябин, А.М. Петров - 11; В.Е. Пасечник и др. - 4]
Известны способы сбора яиц гельминтов методами копроовоскопии: флотации, комбинированные, седиментации [Г.А. Котельников - 1, В.Е. Пасечник и др. - 4] Эти способы (= методы) сбора яиц от гельминтов имеют недостаток:
неизвестен вид (диагностика устанавливается гельминтоларвоскопическим методом по обнаружению инвазионных личинок паразитических нематод (а не яиц!) в фекалиях жвачных), так как известно, что у домашних и диких жвачных, паразитируют виды: Trichostrongylus axei (Cobbold, 1879) Raillet et Henry, 1909; Trichostrongylus capricola Ransom, 1907; Trichostrongylus colubriformis (Giles, 1892); Trichostrongylus probolurus (Railliet, 1896); Trichostrongylus vitrinus Looss, 1905 и др., а это значит, что исследователю необходимо разделить (= сепарировать) яйца этих гельминтов по каждому виду, но вышеназванными способами (= методами) осуществить это невозможно, что и вынудило нас из-за этого существенного недостатка этих известных способов (флотации, седиментации, комбинированный) к поиску другого способа сбора только зрелых яиц от самок возбудителя гельминтозооноза вида: Trichostongylus colubriformis (Giles, 1892).
Известен способ [В.Е. Пасечник - 2, 3] сбора яиц для лабораторных исследований, при котором исследователи для сбора яиц от гельминтов проводят разрушение половых органов самок.
Этот способ сбора яиц имеет следующие недостатки:
1) чтобы извлечь яйца гельминтов, необходимо вскрыть половые органы самок (вульву, вагину, матку) и следовательно убить гельминтов, а это вызывает очень сильное загрязнение яиц паразитов остатками тканей половых органов самок, что в процессе опыта вызывает гниение и разрушение яиц гельминтов;
2) другой недостаток, является то, что при этом способе сбора яиц получение 100% зрелых яиц невозможно, так как основная масса жизнеспособных яиц находится в дистальной части вагины и даже в вульве (во влагалище).
3) еще один из недостатков является присутствие большого количества незрелых яиц в сборе, что значительно затрудняет лабораторные исследования.
4) для проведения экспериментов исследователям нужны для изучения в лабораторных (заражение лабораторных животных и др.) опытах сборы до 100% и иногда тысячи зрелых яиц Trichostrongylus colubriformis;
5) Trichostrongylus colubriformis, настолько малы (3-7 мм длины), что получение их путем вскрытия самок слишком сложная работа, и кроме того не дает максимального числа зрелых яиц.
Известен способ прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis [Пасечник В.Е. - 6], который имеет некоторые недостатки:
1. Trichuris (= Trichocephalus) vulpis является паразитом типичным для домашних и диких хищных, но не для домашних и диких жвачных (что было доказано нами проведенными перекрестными заражениями в предыдущие годы [В.Е. Пасечник - 2, 3], a Trichostrongylus colubriformis является типичным гельминтом домашних и диких жвачных [Г.А. Котельников - 1; В.Е. Пасечник и др. - 4; В.Е. Пасечник - 5; Н.П. Романова - 8; К.И. Скрябин, Н.П. Шихобалова, Р.С. Шульц - 10; К.И. Скрябин, А.М. Петров - 11; А.П. Тощев - 12]. Следовательно эти гельминты Т. vulpis (паразит плотоядных) и Tr. colubriformis (паразит жвачных) имеют разные условия паразитирования в хозяине: 1 й в организме хищных (= плотоядных), а 2-й в организме жвачных, поэтому и условия в лабораторной среде (применяемые растворы, температурный режим и время экспозиции) для этих 2-х видов самок гельминтов: Trichuris (= Trichocephalus) vulpis и Trichostrongylus colubriformis будут резко отличаться;
2. другой недостаток этого способа является необходимость использования пробирок, что значительно затрудняет посевы яиц Trichostrongylus colubriformis, для культивирования до инвазионной стадии и соответственно удлиняет рабочее время экспериментаторов;
3. еще один из недостатков является, то что, по указанному выше способу исследователь, применял официнальный изотонический раствор (0,9%) хлорида натрия и получал оплодотворенные яйца от самок возбудителя паразитарного зооноза хищных: Trichuris (= Trichocephalus) vulpis, однако применение в предлагаемом нами способе этого раствора к самкам жвачных Trichostrongylus colubriformis нецелесообразно, так как количество яиц при указанном выше известном способе сбора оплодотворенных яиц, значительно уступает предлагаемому нами способу;
4. температурный режим при этом известном способе прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis, значительно выше (t=37,5 С - 39 С), а это так же является недостатком, и влияет существенно на количество получаемых яиц по предлагаемому нами способу от самок жвачных животных Trichostrongylus colubriformis, так как при t> выше 30 С в разы уменьшается количество яиц выделяемой живой, половозрелой самкой Trichostrongylus colubriformis в официнальный изотонический раствор (0,9%) хлорида натрия, что неприемлемо для проведения качественных исследований, так как часто экспериментаторам необходимы для заражения каждого экспериментального животного (ягненка, козленка) тысячи яиц с инвазионными личинками.;
5. еще одним из существенных недостатков этого известного способа является отсутствие предварительной обработки матриксов изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C в период отбора из них гельминтов, а это имеет большое значение при сборе максимального количества (250 и более) живых и активных половозрелых самок жвачных Trichostrongylus colubriformis, что влияет на количество отбираемых в опыт самок Trichostrongylus colubriformis, что также неприемлемо для сбора только зрелых яиц от самок жвачных Tr. colubriformis по предлагаемому нами способу.
Следовательно, исследователю по указанным выше причинам собрать указанными выше способами в большом количестве до 100% только зрелые яйца от самок возбудителя гельминтозооноза вида: Trichostrongylus colubriformis, для проведения экспериментов в лабораторных условиях невозможно.
Целью изобретения является использование впервые разработанного нами «Способа сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis», от домашних или/и диких мелких жвачных для экспериментов: культивирования до инвазионной стадии, проведения морфологических исследований для изучения микроструктуры, ультраструктуры яиц, для заражения лабораторных животных, с получением культуры только зрелых яиц в стерильных условиях, т.е. без загрязнений кусочками тканей матки, вагины, вульвы и без занесения секундарной микрофлоры из половых органов и внешней среды и самое главное получить максимальное количество in vitro до 100% только зрелые яйца от живых, половозрелых самок Trichostrongylus colubriformis, отобранных из матриксов при гельминтологических вскрытиях по методу академика К.И. Скрябина - [9] и предварительно идентифицированных до вида в лабораторных условиях из множества других видов гельминтов рода Trichostrongylus Looss, 1905.
Поставленная цель достигается тем, что при проведении сбора яиц от трихостронгилюсов, применяют разработанный нами впервые «Способ сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis», заключающийся в том, что матриксы из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии мелких жвачных предварительно обрабатывают в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C, затем проводят отбор 250 и более живых, активных, половозрелых 250 и более самок вида: Trichostrongylus colubriformis, отбор проводят в отдельные бактериологические чашки с раствором Ringer по 9 самок в каждую чашку, которые затем экспонируют при t = 25°C в течение 3-х часов в условиях термостата, после чего получают чистую культуру зрелых яиц Trichostrongylus colubriformis, выделенных живыми самками, отличающийся от:
1) известных копроовоскопических (флотации, седиментации, комбинированных) способов (= методов) сбора яиц, тем что:
известен вид самки паразита: Trichostrongylus colubriformis, а при копроовоскопических способах (= методах) сбора яиц вид гельминта неизвестен, так как у домашних и диких жвачных паразитируют различные виды трихостронгилюсов, и иногда с большой экстенсивностью и интенсивностью инвазии. Так в Иркутской и Читинской областях у овец и коз отмечались с интенсивностью инвазии ИИ = до 4273 экземпляров вида: Trichostrongylus probolurus, а у крупного рогатого скота в Иркутской области с интенсивностью инвазии ИИ = до 3241 экз. вида: Tr. colubriformis [А.П. Тощев - 12] и у архаров, поступивших в Московский зоопарк и вскрытых после гибели с интенсивностью инвазии ИИ = до 3732 экземпляров вида: Tr. colubriformis на 1 вскрытое животное [Н.П. Романова - 8].
Поэтому еще одним из существенных отличий предлагаемого способа от известных копроовоскопических является то, что при этих способах исследователям необходимо культивировать личинки до инвазионной стадии и уточнять виды паразитов и сепарировать их по видам, выбирая себе для проведения экспериментов определенный вид или виды гельминтов, что практически очень сложно и занимает иногда несколько рабочих дней, а это нецелесообразно;
отличающийся от известного способа сбора яиц путем разрушения половых органов самок (вульвы, вагины, матки) гельминтов тем, что:
отбираются из тонких кишок, только половозрелые, активные и живые самки: Trichostrongylus colubriformis (в отличие от известного метода сбора яиц путем разрушения половых органов самок, когда исследователь отбирает подряд самок и иногда погибших);
копулятивные органы самок Trichostrongylus colubriformis не разрушаются для получения яиц паразитов (в отличие от известного способа сбора яиц путем разрушения половых органов самок);
происходит естественная (= произвольная) откладка только зрелых яиц самками трихостронгилюсов (и без загрязнения материала частицами разрушенных половых органов самок паразитов: вагины, матки, вульвы) и секундарной микрофлорой и тем самым получают чистый сбор из 100% только зрелых яиц не разрушая половые органы самок Tr. colubriformis и не загрязняя секундарной микрофлорой экспериментальный материал и тем самым предотвращая гниение и разрушение полученной культуры яиц от самок возбудителя гельминтозооноза вида: Trichostrongylus colubriformis от домашних и/или диких мелких жвачных;
отличающийся от известного «Способа прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis», тем, что:
1-е отличие: самки Trichostrongylus colubriformis собираются не в пробирки, а в бактериологические чашки, что позволяет непосредственно в бактериологических чашках культивировать и наблюдать развитие личинок Trichostrongylus colubriformis до инвазионной стадии под микроскопом, что значительно облегчает экспериментальные работы;
2-е отличие: оптимальный температурный режим для сбора яиц от живых, активных и половозрелых самок возбудителя гельминтозооноза вида Trichostrongylus colubriformis равен t = 25°C, что увеличивает до 100% сборы только зрелых яиц, а при температурном режиме по известному способу в t = 37°C и более, количество зрелых яиц откладываемых самками Tr. colubriformis в сборах уменьшается существенно, что неприемлемо для качественного проведения экспериментов;
3-е отличие: в предлагаемом нами способе сбора только зрелых яиц обязательным условием является необходимость предварительной обработки матриксов в период отбора самок Trichostrongylus colubriformis изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C, что активизирует жизнеспособность самок Trichostrongylus colubriformis, а этот этап в проведении сборов по известному способу прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis отсутствует, что в разы уменьшает количество собираемых зрелых яиц от самок Trichostrongylus colubriformis.
Собранные по нашему предлагаемому способу яйца Trichostrongylus colubriformis, являются только зрелыми до 100% случаев.
Сопоставительный анализ заявляемого технического решения с прототипом, известными способами сбора яиц: копроовоскопическими; секционирования (= разрушения) половых органов самок гельминтов, прижизненного сбора яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis, показывает, что заявляемый способ отличается от известных тем, что:
матриксы из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии мелких жвачных предварительно обрабатывают в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C, затем проводят отбор 250 и более живых, активных, половозрелых 250 и более самок вида: Trichostrongylus colubriformis, отбор проводят в отдельные бактериологические чашки с раствором Ringer по 9 самок в каждую чашку, которые затем экспонируют при t=25°С в течение 3-х часов в условиях термостата, после чего получают чистую культуру только зрелых яиц Trichostrongylus colubriformis, выделенных живыми самками.
Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «новизна». Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, не выявлены в других технических решениях, и поэтому они обеспечивают заявляемому техническому решению соответствие критерию «существенные отличия».
технических решениях, и поэтому они обеспечивают заявляемому техническому решению соответствие критерию «существенные отличия».
Примеры конкретного выполнения предлагаемого способа.
Пример1. С мясокомбинатов, убойных пунктов Российской Федерации (Московская область), Республики Молдова, привозили тонкие отделы кишечника от 25 овец, 5-и коз, и кишечники от 3-х косуль (добытых охотниками в Р. Молдова), и из матриксов от этих животных были собраны более 500 живых, половозрелых самок Trichostrongylus colubriformis и получали яйца по двум способам:
1-й (опыт) по предлагаемому способу сбора яиц использовали 250 самок Trichostrongylus colubriformis, которые были собраны из тонкого отдела кишечника (овец, коз, косуль) при предварительной обработке матриксов изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия при t=37°C, и помещали по возможности быстрее, чтобы не потерять большое количество яиц по 9 живых, половозрелых и активных самок Trichostrongylus colubriformis в каждую бактериологическую чашку с раствором Ringer при t=25°C в течение 3-х часов в условиях термостата;
и 2-м (контроль) известным способом прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis [по В.Е. Пасечнику - 6], который заключается в отборе 250 живых, половозрелых и активных самок Trichostrongylus colubriformis из матриксов мелких жвачных (овец, коз, косуль) и без предварительной обработке матриксов изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия и экспозицией пробирок с самками при t=37,5°C в течение 5 часов в условиях термостата.
Через 5 часов были сравнены результаты эффективности этих двух способов сбора яиц от самок гельминтозооноза вида: Trichostrongylus colubriformis. В результате, было выяснено, что:
по известному способу (2-й контроль) то есть без предварительной обработки матриксов изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия и экспозицией пробирок с самками вида: Trichostrongylus colubriformis количество яиц выделенных 250 самками в официнальный изотонический раствор (0,9%) хлорида натрия:
при t=37,5°C составило 2950 яиц при экспозиции 5 часов в условиях термостата.
А по предлагаемому нами способу (1-й опыт) отобранные 250 самок из предварительно обработанных матриксов изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия при t=37°C в раствор Ringer и помещенных по 9 живых, половозрелых самок вида: Trichostrongylus colubriformis в бактериологические чашки и экспозицией в термостате при t=25°C в течение 3-х и 5 часов:
при t=25°C составило 9925 яиц в течение 3-х часов и 21550 яиц в течение 5 часов.
Анализируя результаты сравнительных способов известного (2-й контроль) и предлагаемого (1-й опыт), отчетливо видно, что разработанный нами способ сбора яиц при отработанных параметрах отбора из матриксов (предварительная обработка матриксов изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия при t=37°С; сбора живых, половозрелых самок Trichostrongylus colubriformis, не в пробирки, а в бактериологические чашки - что позволяет исследователю сохранить большее количество зрелых яиц и непосредственно в бактериологических чашках проводить культивирование до получения инвазионных личинок Trichostrongylus colubriformis) инвазированных диких (снежных баранов, архаров, косуль и др) или/и домашних (овец, коз) мелких жвачных, соблюдение температурного режима (не при t=37,5°C, а при t=25°C) и применение другого раствора (не официнального изотонического раствора (0,9%) хлорида натрия, а раствора Ringer), и экспозиции (не в течение 5 часов, а в течение 3-х часов) имеет явное преимущество перед известным способом, что и было подтверждено экспериментально.
Количество яиц при использовании предлагаемого нами метода превышает известный метод в 7,3 раза по эффективности при экспозиции в течение 5 часов. Кроме того, полученные предлагаемым способом сбора яйца при экспозиции в течение 3-х часов более жизнеспособны (зрелые до 100%), а полученные известным способом (контроль) яйца Trichostrongylus colubriformis менее жизнеспособны, так как при экспозиции 5 часов и более, начинают выделяться уже незрелые яйца (до 50%) из матки самок гельминтов, что безусловно существенно влияет на возможность проведения качественных экспериментов и противоречит поставленной перед нами цели, а именно получения максимального количества только зрелых яиц от живых, половозрелых самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis.
Следовательно, предлагаемый нами способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis, имеет явное преимущество перед известным способом прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis, особенно если экспериментатору необходимо большое количество зрелых яиц с инвазионными личинками и учитывая что для заражения лабораторных животных требуется иногда большое количество тысячи и десятки тысяч зрелых яиц вида: Trichostrongylus colubriformis, то этот известный способ пригоден для сборов яиц от самок паразитов хищных (собак - Canis familiaris, хорьков - Mustela sp., лисиц - Vulpes vulpes) и практически непригоден для сбора зрелых яиц от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis, так как 2950 яиц собранные этим известным способом слишком мало и при экспозиции 5 часов и более сбор содержит большое количество незрелых яиц (до 50%), в отличие от предлагаемого впервые способа сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis, для проведения качественных экспериментов в лабораторных условиях.
Пример 2. При исследовании на мясокомбинатах, убойных пунктах органов убитых домашних мелких жвачных (коз, овец), в Российской Федерации (Московская область), Республике Молдова, были собраны только живые, половозрелые 500 самок возбудителя гельминтозооноза вида: Trichostrongylus colubriformis. Собранные живые, половозрелые самки вида Tr. colubriformis были использованы для получения сборов яиц по двум способам:
1-й (опыт) по нашему предлагаемому способу сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis, заключающийся в отборе только живых, половозрелых 250 самок вида: Trichostrongylus colubriformis из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами от убитых и исследованных гельминтологическими методами на вскрытии мелких домашних или/и диких жвачных, с предварительной обработкой матриксов в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t=37°C, что увеличивает жизнеспособность самок паразита, и помещают по 9 живых, активных самок в отдельные бактериологические чашки с раствором Ringer и экспозицией их при t=25°C в течение 3-х часов, в условиях термостата (в этих условиях и при таком температурном режиме, живые, половозрелые самки вида: Trichostrongylus colubriformis, становятся активными и более жизнеспособными и произвольно откладывают практически только зрелые яйца в бактериологические чашки с раствором Ringer в период экспозиции их при t=25°С в течение 3-х часов в условиях термостата).
и 2-м (контроль) известным способом сбора яиц путем секционирования (=разрушения) вульвы, вагины, матки 250 самок вида: Trichostrongylus colubriformis.
В последующем по 1500 яиц в опыте и контроле вида: Trichostrongylus colubriformis, (через 3 часа) культивировали в термостате при t=20°-25°С в течение 5-6 дней, и просматривали под микроскопом инвазионные личинки, которые вылупились из яиц и дозрели до инвазионной стадии, чтобы сравнить наш предлагаемый новый способ сбора яиц (1-й - опыт) и известный способ - путем разрушения (секционирования) женских половых органов гельминтов: матки, вагины, вульвы (2-й - контроль).
В результате выяснилось, что в сборе яиц по известному способу (2-й - контроль) яйца начали загнивать, а при нашем предлагаемом способе (1-й опыт) естественном сборе, яйца до 100% случаев были живыми и развивались без наличия секундарной микрофлоры.
Таким образом, результаты культивирования яиц собранные по разработанному нами способу (1-й - опыт) подтвердили данные, полученные при использовании предлагаемого «Способа сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis», от диких (снежные бараны, арахары, косули и др.) или/и домашних мелких (овец, коз) жвачных, которые были выявлены нами впервые.
Использование предлагаемого «Способа сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis» от мелких жвачных, обеспечивает по сравнению с существующими: копроовоскопии (флотации, седиментации, комбинированные); способа сбора яиц путем разрушения женских половых органов (вульвы, вагины, матки) самок гельминтов; способа прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis, следующие преимущества:
1) известен вид самки паразита (в данном случае вид: Trichostrongylus colubriformis) и соответственно от какого вида самок (вид: Tr. colubriformis) получены яйца (в отличие от известных методов (= способов) копроовоскопии: флотации, седиментации, комбинированные, при которых вид самки неизвестен, так как в огромной массе яиц различных родов и видов гельминтов (Род: Habertia Railliet et Henry, 1909; род: Bunostomum Railliet, 1902; род: Oesophagostomum Molin, 1861; род: Trichostrongylus Looss, 1905 (виды: Trichostrongylus axei (Cobbold, 1879) Railliet et Henry, 1909; Tr. colubriformis (Giles, 1892), Tr. probolurus (Railliet, 1896) Looss, 1905 et al); род: Ostertagia Ransom, 1907; присутствующих в пробах фекалий от домашних и диких жвачных, сепарировать именно этот вид паразитов: Trichostrongylus colubriformis, практически невозможно) В.Е. Пасечник и др. - [4];
2) сокращает время и снижает трудоемкость исследований за счет исключения необходимости проведения секционирования (= вскрытия = разрушения) женских половых органов: вульвы, вагины, матки Trichostrongylus colubriformis (в отличие от известного способа сбора яиц путем вскрытия женских половых органов гельминтов);
3) исключает загрязненность полученного сбора (= культуры) яиц обрывками частиц тканей женских половых органов от самок Trichostrongylus colubriformis (в отличие от известного способа сбора яиц путем вскрытия женских половых органов самок гельминтов);
4) исключает загнивание и развитие секундарной бактериальной инфекции в культуре полученной предлагаемым нами способа естественного сбора только зрелых яиц от самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis (в отличие от известного способа сбора яиц путем вскрытия половых органов самок гельминтов);
5) одним из очень важных преимуществ предлагаемого способа является то, что для поддержания активности и жизнедеятельности самок гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis, при сборе паразитов, матриксы предварительно обрабатывают изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия при t=37°C, что имеет большое значение для сбора 250 и более живых и активных самок Trichostrongylus colubriformis (в отличие от известного способа прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis, при котором этот этап проведения сборов яиц отсутствует);
6) другое преимущество предлагаемого способа сбора яиц, это то, что живых, половозрелых самок собирают не в пробирки, а в бактериологические чашки и по 9 самок в каждую бактериологическую чашку, что позволяет исследователю культивировать полученные предлагаемым способом зрелые яйца непосредственно в бактериологических чашках и наблюдать под микроскопом развитие личинок до инвазионной стадии, что также повышает эффективность и количество сбора зрелых яиц от живых, активных самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis (в отличие от известного способа прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза: Trichuris (= Trichocephalus) vulpis, при котором применяют пробирки для сбора самок паразита из матриксов, а это снижает эффективность сбора, в результате потери большого количества яиц в процессе закладки их для культивирования до инвазионной стадии);
7) еще одним из преимуществ предлагаемого способа является температурный режим в 25°C, так как при t (выше) >30°C в разы уменьшается количество яиц выделяемые живыми, активными и половозрелыми самками Trichostrongylus colubriformis в официнальный изотонический раствор (0,9%) хлорида натрия, (в отличие от известного способа прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (= Trichocephalus) vulpis), что неприемлемо для проведения качественных исследований, так как часто исследователям необходимы для заражения каждого лабораторного (ягненка, козленка и др.) животного тысячи яиц с инвазионными личинками;
8) предлагаемый способ сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis, легко осуществим в лабораторных условиях;
9) предлагаемый способ обеспечивает in vitro до 100% естественный сбор только зрелых, чистых яиц гельминта, без обрывков частиц тканей половых органов самок (и именно того вида самок из множества других видов рода Trichostrongylus Looss, 1905: Trichostrongylus axei (Cobbold, 1879) Railliet et Henry, 1909; Tr. capricola Ransom, 1907; Tr. colubriformis (Giles, 1892); Tr. orientalis Jimbo, 1914; Tr. probolurus (Railliet, 1896); Tr. rugatus 1925; Tr. vitrinus Looss, 1905, который был идентифицирован предварительно в лаборатории) возбудителя гельминтозооноза: Trichostrongylus colubriformis для экспериментальных паразитологических исследований в лабораторных условиях.
Источники информации, принятые во внимание при составлении заявки:
1. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. // Справочник. - М.: Колос - 1984. - 208 с.
2. Пасечник В.Е. Перекрестное заражение трихоцефалами приотарных собак и овец в Молдавии. // Бюл. Всесоюзного института гельминтологии. - М. - 1984. - Вып. - 37. - С. 57.
3. Пасечник В.Е. Дисс. … кандидата ветеринарных наук. // М. - ВИГИС. - 2000. - 185 с.
4. Пасечник В.Е., Успенский А.В., Микулец Ю.И., Жданова В.Ю. Методические рекомендации по диагностике, профилактике и мерам борьбы с гельминтозами цирковых животных. // М. - Изд. Россельхозакадемии (РАСХН). - 2008. - С. 124-125.
5. Пасечник В.Е. Паразитозы редких и исчезающих видов парнокопытных в условиях зоопарка и цирка. // Сборник Материалов научной конференции «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». - М. - 2010. - Вып. 11. - С. 348-351.
6 Пасечник В.Е. Способ прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза Trichuris (=Trichocephalus) vulpis // Бюллетень Федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам Российской Федерации. - М. - 2015. - №21. (Патент на изобретение №2557973).
7. Подъяпольская В.П. Обнаружение Trichostrongylus instabilis в кишечнике ребенка. // Русский журнал тропической медицины. - 1923. - №2. - С. 64-65.
8. Романова Н.П. Гельминтофауна архаров (Ovis polii karelini) Московского зоопарка. // Труды Московского зоопарка. - Т. V. - С. 270-272.
9. Скрябин К.И. Метод полных гельминтологических вскрытий позвоночных, включая человека. // Изд. 1-го Московского государственного университета. - М. - 1928.
10. Скрябин К.И., Шихобалова Н.П., Шульц Р.С. Трихостронгилиды животных и человека. // Изд Академии наук СССР. - М. - 1954. - Т. III - 683 с.
11. Скрябин К.И., Петров A.M. Основы ветеринарной нематодологии. Изд. - «Колос». - М. - 1964. - 527 с.
12. Тощев А.П. Гельминтологический статус домашних животных Восточной Сибири. // Дисс. кандидата ветеринарных наук - М. - ВИГИС. - 1948. - 147 с.
Claims (1)
- Способ сбора зрелых яиц in vitro от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis, заключающийся в том, что матриксы из тонких кишок спонтанно зараженных трихостронгилюсами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии мелких жвачных предварительно обрабатывают в изотоническом растворе (0,9%) хлорида натрия при t = 37°C, затем проводят отбор 250 и более живых, активных, половозрелых 250 и более самок вида Trichostrongylus colubriformis, отбор проводят в отдельные бактериологические чашки с раствором Ringer по 9 самок в каждую чашку, которые затем экспонируют при t = 25°C в течение 3-х часов в условиях термостата, после чего получают чистую культуру зрелых яиц Trichostrongylus colubriformis, выделенных живыми самками.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016124140A RU2629386C1 (ru) | 2016-06-17 | 2016-06-17 | Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016124140A RU2629386C1 (ru) | 2016-06-17 | 2016-06-17 | Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2629386C1 true RU2629386C1 (ru) | 2017-08-29 |
Family
ID=59797943
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016124140A RU2629386C1 (ru) | 2016-06-17 | 2016-06-17 | Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2629386C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2712892C1 (ru) * | 2019-05-28 | 2020-01-31 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр-Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) | Способ сбора яиц in vitro от возбудителя трихоцефалёза домашних и диких жвачных Trichuris (=Trichocephalus) ovis |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2193310C1 (ru) * | 2001-03-30 | 2002-11-27 | Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны Российской Федерации | Способ культивирования яиц трематод |
UA79560U (ru) * | 2012-10-31 | 2013-04-25 | Національний Університет Біоресурсів І Природокористування України | Способ культивирования личинок, яиц гельминтов и ооцист простейших |
WO2015156844A1 (en) * | 2014-04-10 | 2015-10-15 | MEP Equine Solutions LLC | Method for the quantification of parasite eggs in feces |
-
2016
- 2016-06-17 RU RU2016124140A patent/RU2629386C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2193310C1 (ru) * | 2001-03-30 | 2002-11-27 | Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны Российской Федерации | Способ культивирования яиц трематод |
UA79560U (ru) * | 2012-10-31 | 2013-04-25 | Національний Університет Біоресурсів І Природокористування України | Способ культивирования личинок, яиц гельминтов и ооцист простейших |
WO2015156844A1 (en) * | 2014-04-10 | 2015-10-15 | MEP Equine Solutions LLC | Method for the quantification of parasite eggs in feces |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
КОТЕЛЬНИКОВ Г.А. Диагностика гельминтозов животных. М., "Колос", 1974, с.55-57, 193-194.. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2712892C1 (ru) * | 2019-05-28 | 2020-01-31 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр-Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) | Способ сбора яиц in vitro от возбудителя трихоцефалёза домашних и диких жвачных Trichuris (=Trichocephalus) ovis |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Martínez-Páramo et al. | Cryobanking of aquatic species | |
EFSA Panel on Animal Health and Welfare (AHAW) | Scientific Opinion on lumpy skin disease | |
Ćirović et al. | First records of Dirofilaria repens in wild canids from the region of Central Balkan | |
van Doorn et al. | Autochthonous Angiostrongylus vasorum infection in dogs in The Netherlands | |
Rafique et al. | Identification of Three Species of Ticks Hyalomma anatolicum Anatolicum, Hyalomma aegyptium and Dermacenter andersoni in Quetta Cityof Balochistan, Pakistan | |
RU2629386C1 (ru) | Способ сбора только зрелых яиц (in vitro) от самок возбудителя гельминтозооноза Trichostrongylus colubriformis | |
RU2557973C1 (ru) | СПОСОБ ПРИЖИЗНЕННОГО СБОРА ОПЛОДОТВОРЕННЫХ ЯИЦ (in vitro) ОТ ВОЗБУДИТЕЛЯ ПАРАЗИТАРНОГО ЗООНОЗА Trichuris (=Trichocephalus) vulpis | |
Kopecna et al. | The wildlife hosts of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in the Czech Republic during the years 2002–2007 | |
Hall et al. | Genetic diversity of populations of Old World screwworm fly, Chrysomya bezziana, causing traumatic myiasis of livestock in the Gulf region and implications for control by sterile insect technique | |
RU2556132C1 (ru) | СПОСОБ СБОРА ОПЛОДОТВОРЕННЫХ ЯИЦ (in vitro) ОТ ВОЗБУДИТЕЛЯ Fasciola hepatica ПРИ ЖИЗНИ | |
Green et al. | Disease monitoring and biosecurity | |
Salih et al. | Natural infection rates and transmission of Theileria annulata by Hyalomma anatolicum anatolicum ticks in the Sudan | |
Fuehrer et al. | Endoparasites of rodents from the Chittagong Hill Tracts in Southeastern Bangladesh. | |
Rubini et al. | Veterinary forensic sciences to solve a fatal case of predation on flamingos (Phoenicopterus roseus) | |
Lat-Lat et al. | Lungworm of cattle in Malaysia. | |
RU2712892C1 (ru) | Способ сбора яиц in vitro от возбудителя трихоцефалёза домашних и диких жвачных Trichuris (=Trichocephalus) ovis | |
Cardillo et al. | Larval development of Aelurostrongylus abstrusus in experimentally infected Rumina decollata snails | |
RU2609145C2 (ru) | Способ сбора максимального количества зрелых (=оплодотворённых) яиц (in vitro) от самок возбудителя паразитарного зооноза trichuris (=trichocephalus) suis | |
Yohanna et al. | Prevalence of Helminth Parasites of Ruminants in Abattoir Market Jos, Jos South Local Government Area, Plateau State, Nigeria | |
Mukaratirwa et al. | Prevalence of Libyostrongylus douglassii in commercially reared ostriches in the highveld region of Zimbabwe | |
Yagoob et al. | Prevalence of Toxocara cati in pet cats by fecal examination in Tabriz city, Iran | |
Woldstad et al. | Restricted evaluation of Trichodectes canis (Phthiraptera: Trichodectidae) detection methods in Alaska gray wolves | |
Sivajothi et al. | Effect of Ivermectin against Psoroptic mange in rabbits | |
Erwanas et al. | Vectors of veterinary importance in Malaysia: a survey of biting flies in relation to trypanosomiasis in Perak | |
Altaee | Investigation of Microfilaria in Buffalo Blood and Fly Types in Their Barns |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180618 |