RU2625752C2

RU2625752C2 - Substance with anti-angiogenic activity

Info

Publication number: RU2625752C2
Application number: RU2013151320A
Authority: RU
Inventors: Сергей Борисович Середенин; Сергей Александрович Крыжановский; Татьяна Александровна Гудашева; Татьяна Алексеевна Антипова; Евгения Сергеевна Пекельдина; Александра Велериановна Сорокина; Андрей Дмитриевич Дурнев; Иосиф Борисович Цорин; Марина Борисовна Вититнова; Валерий Николаевич Столярук; Константин Викторович Алексеев
Priority date: 2013-11-19
Filing date: 2013-11-19
Publication date: 2017-07-18
Also published as: RU2013151320A

Abstract

FIELD: pharmacology.

SUBSTANCE: invention can be used for application of N-succinyl-L-glutamyl-L-lysine amide as an agent having anti-angiogenic activity.

EFFECT: invention suppresses pathological neoangiogenesis.

2 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии, и касается применения описанного ранее [С.Б. Середенин, Т.А. Гудашева. Патент РФ №2410392] низкомолекулярного пептидного миметика фактора роста нервов: амида N-сукцинил-L-глутамил-L-лизина - соединения ГК-1, обладающего антиангиогенной активностью.The invention relates to medicine, in particular to pharmacology, and for the use of the previously described [S. B. Seredenin, T.A. Gudasheva. RF patent No. 2410392] of a low molecular weight peptide mimetic of nerve growth factor: N-succinyl-L-glutamyl-L-lysine amide - compound GK-1 with antiangiogenic activity.

Изобретение относится к разделу Экспериментальная медицина и в дальнейшем может быть использовано для создания нового оригинального высокоэффективного лекарственного средства для подавления неоангиогенеза при различных патологических состояниях.The invention relates to the section of Experimental medicine and can be further used to create a new original highly effective drug for the suppression of neoangiogenesis in various pathological conditions.

В настоящее время неоангиогенез рассматривают как сложный многостадийный процесс формирования новой капиллярной сети из эндотелиальных клеток, выстилающих внутреннюю поверхность артериол и венул [Chung A.S., Ferrara N., Annu. Rev. Cell. Dev. Biol, 2011; 27:563-584; Chu H., Wang Y., Ther. Deliv., 2012; 3(6):693-714 и др.]. В нормальных физиологических условиях неоангиогенез имеет основополагающее значение в реализации таких важных биологических процессов, как эмбриогенез [Roman B.L, Pekkan K., Biochem. Model. Mechanobiol., 2012; 11(8):1149-1168; Portal-Nunez S. et al., Histol. Histopathol., 2012; 27(5):559-566] и развитие фолликулов в яичниках [Chaves R.N. et al., Reprod. Fertil. Dev., 2012; 24(7):905-915; Pate J.L. et al., Rerprod. Domest. Anim., 2012; Suppl.4:297-303]. He менее важное значение этот феномен имеет и в адаптивных процессах, например в заживлении ран [Best T.M. et al., Br. J. Sports. Med., 2013; 47(9):556-560; Yuan Т. et al., Curr. Pharm. Biotechnol., 2012; 13(7):1173-1184] и развитии коллатерального кровообращения при инфаркте миокарда [Seiler С., Eur. J. Clin. Invest., 2010; 40(5):465-476; Silvestre J.S., Thromb. Res., 2012; Suppl.1:S90-S94]. Вместе с тем аномальное новообразование кровеносных сосудов, т.е. патологический неоангиогенез, является одним из ключевых звеньев патогенеза диабетической ретино- [Forlenza G.P., Stewart M.W., Pediatri. Endocrmol. Rev., 2012; 10(2):217-226; Virgili G. et al., Cochrane Database Syst. Rev., 2012; 12:CD007419] и нефропатии [Advani A., Gilbert R.E, Semin. Nephrol., 2012; 32(2): 199-207; Dei Cas A., Gnudi L., Metabolism, 2012; 61(12):1666-1673], глаукомы [Olmos L.C., Lee R.K., Int. Ophthalmol. Clin., 2011; 51(3):27-36; Mathew R., Barton K., Am. J. Ophthalmol., 2011; 152(1):10-15], псориаза [Armstrong A.W. et al., J. Dermatol. Sci., 2011; 63(1):1-9; Crawshaw A.A. et al., Expert. Opin. Investig. Drugs, 2012; 21(1):33-43], и, что особенно важно, злокачественных новообразований [Eveno С., Pocard M., Cell. Adh. Migr., 2012; 6(6):569-573; Perrot-Applanat M., Benedetto M., Cell. Adh. Migr., 2012; 6(6):547-553].At present, neoangiogenesis is considered as a complex multi-stage process of forming a new capillary network of endothelial cells lining the inner surface of arterioles and venules [Chung A.S., Ferrara N., Annu. Rev. Cell. Dev. Biol, 2011; 27: 563-584; Chu H., Wang Y., Ther. Deliv., 2012; 3 (6): 693-714 et al.]. Under normal physiological conditions, neoangiogenesis is fundamental in the implementation of such important biological processes as embryogenesis [Roman B.L., Pekkan K., Biochem. Model. Mechanobiol., 2012; 11 (8): 1149-1168; Portal-Nunez S. et al., Histol. Histopathol., 2012; 27 (5): 559-566] and follicular development in the ovaries [Chaves R.N. et al. Reprod. Fertil. Dev., 2012; 24 (7): 905-915; Pate J.L. et al., Rerprod. Domest. Anim., 2012; Suppl. 4: 297-303]. This phenomenon is also less important in adaptive processes, for example, in wound healing [Best T.M. et al., Br. J. Sports. Med., 2013; 47 (9): 556-560; Yuan, T. et al., Curr. Pharm. Biotechnol., 2012; 13 (7): 1173-1184] and the development of collateral circulation in myocardial infarction [Seiler C., Eur. J. Clin. Invest., 2010; 40 (5): 465-476; Silvestre J.S., Thromb. Res., 2012; Suppl. 1: S90-S94]. However, an abnormal neoplasm of the blood vessels, i.e. pathological neoangiogenesis, is one of the key links in the pathogenesis of diabetic retino- [Forlenza G.P., Stewart M.W., Pediatri. Endocrmol. Rev. 2012; 10 (2): 217-226; Virgili G. et al., Cochrane Database Syst. Rev. 2012; 12: CD007419] and nephropathy [Advani A., Gilbert R. E, Semin. Nephrol., 2012; 32 (2): 199-207; Dei Cas A., Gnudi L., Metabolism, 2012; 61 (12): 1666-1673], glaucoma [Olmos L.C., Lee R.K., Int. Ophthalmol. Clin., 2011; 51 (3): 27-36; Mathew R., Barton K., Am. J. Ophthalmol., 2011; 152 (1): 10-15], psoriasis [Armstrong A.W. et al., J. Dermatol. Sci., 2011; 63 (1): 1-9; Crawshaw A.A. et al., Expert. Opin. Investig. Drugs, 2012; 21 (1): 33-43], and, most importantly, malignant neoplasms [Eveno C., Pocard M., Cell. Adh. Migr., 2012; 6 (6): 569-573; Perrot-Applanat M., Benedetto M., Cell. Adh. Migr., 2012; 6 (6): 547-553].

Фундаментальные исследования, посвященные изучению патологического ангиогенеза, составили теоретическую основу для поиска лекарственных средств, обладающих антиангиогенной активностью. Наиболее перспективным в этом плане представляется разработка и внедрение в клиническую практику модифицированных экзогенных аналогов эндогенных биологически активных веществ и/или химических соединений, обладающих способностью подавлять ангиогенную активность эндогенных факторов роста сосуда. Исторически большинство исследований было направлено на создание веществ, подавляющих и/или препятствующих реализации ангиогенных эффектов фактора роста эндотелия сосудов - VEGF [Meadows K.L., Hurwitz H.I., Cold. Spring. Harb. Perspect. Med., 2012; 2(10):pii: a006577; Kaiser P.K. et al., Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol., 2012; 250(11):1563-1571], поскольку последний рассматривали как основной сигнальный белок, активирующий ангиогенез [Breuss J.M., Uhrin P., Cell. Adh. Migr., 2012; 6(6):535-615; Bautch V.L., Cold. Spring. Harb. Perspect. Med., 2012; 2(9):a006452]. Однако в последнее время получены убедительные данные, свидетельствующие о том, что помимо VEGF одна из ключевых ролей в регуляции ангиогенеза принадлежит другому сигнальному белку - фактору роста нервов - NGF [Sone Y. et al., Yakugaku Zasshi, 2012; 132(2):157-160; Karatzas A. et al., J. Cardiovasc. Pharmacol., 2013; 62(3):270-277]. He менее важным представляется и тот факт, что NGF не только инициирует ангиогенез посредством активации специфичных для него TrkA рецепторов, но и активирует сигнальные каскады, опосредованные VEGF [Nakamura K. et al., Mol. Cell. Neurosci., 2011; 46(2):498-506; Kim Y.S. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 2013, 431(4):740-745].Basic research on pathological angiogenesis has provided the theoretical basis for the search for drugs with antiangiogenic activity. The most promising in this regard seems to be the development and implementation in clinical practice of modified exogenous analogues of endogenous biologically active substances and / or chemical compounds with the ability to suppress the angiogenic activity of endogenous vessel growth factors. Historically, most studies have focused on the creation of substances that suppress and / or impede the realization of the angiogenic effects of vascular endothelial growth factor VEGF [Meadows K.L., Hurwitz H.I., Cold. Spring Harb. Perspect. Med., 2012; 2 (10): pii: a006577; Kaiser P.K. et al., Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol., 2012; 250 (11): 1563-1571], since the latter was considered as the main signaling protein that activates angiogenesis [Breuss J.M., Uhrin P., Cell. Adh. Migr., 2012; 6 (6): 535-615; Bautch V.L., Cold. Spring Harb. Perspect. Med., 2012; 2 (9): a006452]. However, recently convincing evidence has been obtained that, in addition to VEGF, one of the key roles in the regulation of angiogenesis belongs to another signaling protein, the nerve growth factor, NGF [Sone Y. et al., Yakugaku Zasshi, 2012; 132 (2): 157-160; Karatzas A. et al., J. Cardiovasc. Pharmacol., 2013; 62 (3): 270-277]. Not less important is the fact that NGF not only initiates angiogenesis by activating its specific TrkA receptors, but also activates signaling cascades mediated by VEGF [Nakamura K. et al., Mol. Cell. Neurosci., 2011; 46 (2): 498-506; Kim Y.S. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 2013, 431 (4): 740-745].

В результате фундаментальных исследований в ФГБУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» РАМН синтезирован ряд пептидных миметиков NGF, один из которых - амид N-сукцинил-L-глутамил-L-лизина - соединение ГК-1, - проявляет антагонистические свойства в отношении TrkA рецепторов [Гудашева Т.А. Доклады Академии наук, 2010, 434 (4); 549-551] и обладает антиангиогенной активностью.As a result of fundamental research at the Federal State Budgetary Institution Scientific Research Institute of Pharmacology named after V.V. Zakusova "RAMS synthesized a number of peptide mimetics of NGF, one of which is the amide N-succinyl-L-glutamyl-L-lysine - compound GK-1 - exhibits antagonistic properties against TrkA receptors [Gudasheva T.A. Reports of the Academy of Sciences, 2010, 434 (4); 549-551] and has anti-angiogenic activity.

Следующие примеры иллюстрируют антиангиогенную активность амида N-сукцинил-L-глутамил-L-лизина - соединения ГК-1.The following examples illustrate the anti-angiogenic activity of the amide N-succinyl-L-glutamyl-L-lysine, compound GK-1.

Пример 1. Изучение влияния соединения ГК-1 на формирование трубчатых структур (тубулогенез) в культуре клеток эндотелия человека HUVEC.Example 1. The study of the effect of compounds GK-1 on the formation of tubular structures (tubulogenesis) in the culture of human endothelial cells HUVEC.

Оценку антиангиогенной активности соединения ГК-1 в экспериментах in vitro проводили на культуре изолированных клеток эндотелия человека HUVEC. Такой подход обусловлен тем, что согласно литературным данным образование трубчатых структур (тубулогенез) является начальной стадией ангиогенеза [De Smer F. et al., Atheroscler Thromb Vase Biol 2009; 29:639-649].Evaluation of the antiangiogenic activity of the compound GK-1 in in vitro experiments was performed on a culture of isolated human endothelial cells HUVEC. This approach is due to the fact that, according to published data, the formation of tubular structures (tubulogenesis) is the initial stage of angiogenesis [De Smer F. et al., Atheroscler Thromb Vase Biol 2009; 29: 639-649].

Клетки эндотелия человека рассаживали в среде ДМЕМ, содержащей 20 мМ Hepes, 2 мМ L-глутамина, гепарин (5 Ед/мл), ECGF (20 мкг/мл), 10% FBS с плотностью 3,5 тыс. на 96-луночные планшеты, покрытые полилизином. Соединение ГК-1 (10^-5 М) вносили через 30 мин после рассеивания клеток на планшеты и затем каждые 48 часов (всего 3 внесения). После чего для оценки влияния соединения ГК-1 на формирование трубчатых структур эндотелиальные клетки фотографировали с использованием фотокамеры Canon инвертированного микроскопа Nikon Eclips TS-100F. Для обработки данных, полученных при оценке интенсивности тубулогенеза, использовали программу Image J. Измеряли длину микротрубочек в 5 полях зрения каждой лунки.Human endothelial cells were seeded in DMEM containing 20 mM Hepes, 2 mM L-glutamine, heparin (5 U / ml), ECGF (20 μg / ml), 10% FBS with a density of 3.5 thousand per 96-well plates coated with polylysine. Compound GK-1 (10 ^-5 M) was added 30 minutes after the cells were scattered onto the plates and then every 48 hours (3 applications total). Then, to assess the effect of the GK-1 compound on the formation of tubular structures, endothelial cells were photographed using a Canon Nikon Eclips TS-100F inverted microscope camera. Image J software was used to process the data obtained in assessing the intensity of tubulogenesis. Microtubule length was measured in 5 fields of view of each well.

В отдельной серии экспериментов оценивали влияния соединения ГК-1 (10^-5 М) на стимулированный ангиогенез. Для стимуляции ангиогенеза использовали агонист TrkA рецепторов низкомолекулярный дипептидный миметик NGF соединение ГК-2 [Гудашева Т.А. Доклады Академии наук, 2010, 434 (4); 549-551], который по своей ангиогенной активности не уступает эталонному сигнальному белку NGF [заявка на патент РФ №2013122696]. В этом случае соединение ГК-1 (10^-5 М) вносили в среду на фоне предварительного внесения стимулятора ангиогенеза соединения ГК-2 (10^-8 М). Эксперименты и обработку результатов проводили так же, как и в первой серии.In a separate series of experiments, the effects of GK-1 compound (10 ^-5 M) on stimulated angiogenesis were evaluated. To stimulate angiogenesis, a TrkA receptor agonist low molecular weight dipeptide mimetic NGF compound GK-2 was used [Gudasheva T.A. Reports of the Academy of Sciences, 2010, 434 (4); 549-551], which in its angiogenic activity is not inferior to the reference signal protein NGF [patent application of the Russian Federation No. 2013122696]. In this case, the compound GK-1 (10 ^-5 M) was introduced into the medium against the background of preliminary application of the stimulator of angiogenesis of the compound GK-2 (10 ^-8 M). The experiments and processing of the results were carried out in the same way as in the first series.

Как следует из полученных данных (см. табл.1), соединение ГК-1 статистически значимо подавляет как базальный (р≈0,012), так и стимулированный (р≈0,015) ангиогенез.As follows from the data obtained (see Table 1), the compound GK-1 statistically significantly suppresses both basal (p≈0.012) and stimulated (p≈0.015) angiogenesis.

Таким образом, результаты экспериментов in vitro свидетельствуют о том, что антагонист TrkA рецепторов низкомолекулярный пептидный миметик NGF соединение ГК-1 проявляет выраженную антиангиогенную активность, т.е. обладает способностью подавлять новообразование сосудов.Thus, the results of in vitro experiments indicate that the TrkA receptor antagonist low molecular weight peptide mimetic NGF compound GK-1 exhibits pronounced antiangiogenic activity, i.e. has the ability to suppress vascular neoplasm.

Пример 2. Изучение антиангиогенной активности соединения ГК-1 в экспериментах in vivo.Example 2. The study of the antiangiogenic activity of compounds GK-1 in in vivo experiments.

Опыты проводили на беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Животных содержали в индивидуальных клетках в виварии в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 09.06.2003 «Об учреждении правил лабораторной практики» с предоставлением брикетированного корма ad libitum при регулируемом 12/12 световом режиме. Животных рандомизировали на 2 группы: контрольную (n=23) и основную (n=18). Ишемию задних конечностей у анестезированных крыс (тиопентал натрия, 50 мг/кг, в/б) вызывали путем одномоментной резекции участка бедренной артерии, после чего рану послойно ушивали. Изучаемое соединение (4 мг/кг) вводили внутрибрюшинно в течение 14 дней от момента резекции бедренной артерии. Первую инъекцию осуществляли через 1 час после окончания операции. Контрольным животным по аналогичной схеме внутрибрюшинно вводили 0,3 мл изотонического раствора натрия хлорида. Через сутки после последней инъекции животных забивали и извлекали икроножную мышцу из ишемизированной конечности. Для визуализации капилляров за 5 минут до забоя животных вводили 1% раствор синьки Эванса. После фиксации мышцы в 10% растворе формалина с помощью микротома готовили срезы, которые окрашивали гематоксилин-эозином. Срезы изучали при помощи световой микроскопии в проходящем свете. На каждом срезе оценивали по 3 поля зрения, для каждого поля зрения рассчитывали суммарную длину сосудов и их количество в 1 мм². О степени васкуляризации судили по величине индекса васкуляризации, за который принимали произведение длины капилляров на их количество в 1 мм² ишемизированной ткани. При статистической обработке результатов с помощью критерия Шапиро-Уилка определяли нормальность распределения. Так как распределение всех анализированных показателей значительно отличалось от нормального, статистическую значимость различий между выборок рассчитывали с помощью двухстороннего критерия Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при р≤0,05. Выборки описывали с помощью медиан и нижнего и верхнего квартилей.The experiments were performed on outbred male rats weighing 180-200 g. The animals were kept in individual cages in a vivarium in accordance with the order of the Ministry of Health of the Russian Federation No. 267 of 06/09/2003 "On the establishment of laboratory practice rules" with the provision of ad libitum briquetted feed with 12/12 adjustable light mode. Animals were randomized into 2 groups: control (n = 23) and main (n = 18). Hind limb ischemia in anesthetized rats (sodium thiopental, 50 mg / kg, ip) was caused by simultaneous resection of the femoral artery, after which the wound was sutured in layers. The studied compound (4 mg / kg) was administered intraperitoneally for 14 days from the moment of resection of the femoral artery. The first injection was carried out 1 hour after the end of the operation. Control animals in a similar manner were injected intraperitoneally with 0.3 ml of isotonic sodium chloride solution. One day after the last injection, the animals were sacrificed and the calf muscle was removed from the ischemic limb. To visualize the capillaries 5 minutes before the animals were slaughtered, 1% Evans blue solution was injected. After muscle fixation in a 10% formalin solution, sections were prepared using a microtome, which were stained with hematoxylin-eosin. Sections were studied using light microscopy in transmitted light. For each section, 3 fields of view were evaluated, for each field of view, the total length of the vessels and their number in 1 mm ^{2 were} calculated. The degree of vascularization was judged by the value of the vascularization index, which was taken as the product of the length of the capillaries by their number in 1 mm ^{2 of} ischemic tissue. When the results were statistically processed, the normality of the distribution was determined using the Shapiro-Wilk test. Since the distribution of all the analyzed indicators was significantly different from the normal one, the statistical significance of the differences between the samples was calculated using the two-sided Mann-Whitney test. Differences were considered statistically significant at p≤0.05. Samples were described using medians and lower and upper quartiles.

Согласно данным световой микроскопии у контрольных животных основу ткани составляет некробиотически измененная мышца с участками восковидного некроза. Саркоплазма ярко окрашена, гомогенна, поперечная исчерченность отсутствует. Отмечается большое количество воспалительных инфильтратов. Ядра поперечно-полосатых мышц мелкие, гиперхромные или отсутствуют. Сосуды полнокровны, околососудистый отек хорошо выражен, капилляры извитые, мелкие, тонкие, плохо различимы. Таким образом, в результате удаления участка бедренной артерии в икроножной мышце наблюдаются выраженные некротические и некробиотические изменения, сопровождающиеся воспалительной реакцией и расстройством кровообращения. У животных, получавших соединение ГК-1, в микроскопической картине икроножной мышцы также преобладают некробиотические процессы, однако количество и площадь участков восковидного некроза у них существенно больше.According to light microscopy data in control animals, the basis of the tissue is necrobiotic muscle with areas of waxy necrosis. Sarcoplasm is brightly colored, homogeneous, transverse striation is absent. A large number of inflammatory infiltrates are noted. The nuclei of striated muscles are small, hyperchromic or absent. The vessels are full-blooded, the perivascular edema is well defined, the capillaries are convoluted, small, thin, and poorly distinguishable. Thus, as a result of the removal of the femoral artery in the gastrocnemius muscle, pronounced necrotic and necrobiotic changes are observed, accompanied by an inflammatory reaction and circulatory disorder. In animals treated with compound GK-1, necrobiotic processes also predominate in the microscopic picture of the gastrocnemius muscle, however, the number and area of sites of waxy necrosis are much larger.

Данные морфометрии свидетельствуют о том, что у животных, получавших соединение ГК-1, плотность капиллярного русла статистически значимо (р<0,001) меньше, чем у контрольных животных - 8053 (5683÷10851) и 14383 (11323÷16318) мкм/мм² соответственно (см. табл.2). Количество сосудов в 1 мм² ишемизированной ткани у животных, получавших соединение ГК-1, также было меньше, чем в контроле - 35 (21÷35) и 57 (50÷71) соответственно (р<0,011; см. табл.2). Математический анализ полученных результатов свидетельствует о том, что интенсивность васкуляризации ишемизированной ткани у животных, получавших соединение ГК-1, практически в 3 раза ниже, чем в контроле - 5051 (2540÷7862) и 16425 (11236÷20559) соответственно (р<0,001; см. табл.2).Morphometric data indicate that in animals treated with compound GK-1, the density of the capillary bed is statistically significantly (p <0.001) less than in control animals - 8053 (5683 ÷ 10851) and 14383 (11323 ÷ 16318) μm / mm ² respectively (see table 2). The number of vessels in 1 mm ^{2 of} ischemic tissue in animals treated with compound GK-1 was also less than in the control — 35 (21–35) and 57 (50–71), respectively (p <0.011; see Table 2) . A mathematical analysis of the results indicates that the intensity of ischemic tissue vascularization in animals treated with the GK-1 compound is almost 3 times lower than in the control - 5051 (2540 ÷ 7862) and 16425 (11236 ÷ 20559), respectively (p <0.001 ; see table 2).

Таким образом, полученные данные свидетельствует о том, что соединение ГК-1 проявляет выраженную антиангиогенную активность и потенциально может быть использовано для создания нового оригинального лекарственного средства для подавления патологического неоангиогенеза при диабетической ретино- и нефропатии, глаукоме, псориазе, злокачественных новообразованиях и др.Thus, the data obtained indicate that the GK-1 compound exhibits pronounced antiangiogenic activity and can potentially be used to create a new original drug for suppressing pathological neoangiogenesis in diabetic retino- and nephropathy, glaucoma, psoriasis, malignant neoplasms, etc.

Таблица 1Table 1 Влияние соединения ГК-1 (10^-5 М) и композиции ГК-1+ГК-2 (10^-5 М и 10^-8 М, соответственно) на формирование микротрубочек в культуре изолированных клеток эндотелия человека - HUVEC (указаны средние арифметические и их стандартные ошибки)The effect of the compound GK-1 (10 ^-5 M) and the composition GK-1 + GK-2 (10 ^-5 M and 10 ^-8 M, respectively) on the formation of microtubules in the culture of isolated human endothelial cells - HUVEC (arithmetic means and their standard errors) ПоказательIndicator Экспериментальные группыExperimental groups Контроль, n=9Control, n = 9 ГК-1, n=16GK-1, n = 16 ГК-1+ГК-2, n=15GK-1 + GK-2, n = 15 Суммарная длина микротрубочек, мкмThe total length of microtubules, microns 34,5±3,234.5 ± 3.2 26,4±2,026.4 ± 2.0 25,5±1,525.5 ± 1.5 р≈0,012p≈0.012 р≈0,015p≈0.015 р - указано по отношению к контролюp - indicated in relation to control

Таблица 2table 2 Влияние соединения ГК-1 (4 мг/кг/сутки в течение 14 дней, в/б) на ангиогенез в икроножной мышце крыс в условиях ишемии (указаны медианы, нижний и верхний квартили)The effect of compound GK-1 (4 mg / kg / day for 14 days, ip) on angiogenesis in the gastrocnemius muscle of rats under ischemic conditions (medians, lower and upper quartiles are indicated) ГруппаGroup nn Плотность сосудистого русла в мкм/мм² The density of the vascular bed in microns / mm ² Кол-во сосудов на 1 мм² Number of vessels per 1 mm ² Индекс васкуляризацииVascularization index контрольthe control 2323 1438314383 5757 1642516425 11323÷1631811323 ÷ 16318 50÷7150 ÷ 71 11236÷2055911236 ÷ 20559 ГК-1GK-1 18eighteen 80538053 3535 50515051 5683÷108515683 ÷ 10851 21÷3521 ÷ 35 2540÷78622540 ÷ 7862 р<0,001p <0.001 p=0,011p = 0.011 р=0,001p = 0.001 р - указано по отношению к контролюp - indicated in relation to control

Claims

The use of the amide N-succinyl-L-glutamyl-L-lysine as an agent with antiangiogenic activity.