RU2613898C1 - Method for determining total content of sulphur-containing compounds in biological objects - Google Patents

Method for determining total content of sulphur-containing compounds in biological objects Download PDF

Info

Publication number
RU2613898C1
RU2613898C1 RU2015154933A RU2015154933A RU2613898C1 RU 2613898 C1 RU2613898 C1 RU 2613898C1 RU 2015154933 A RU2015154933 A RU 2015154933A RU 2015154933 A RU2015154933 A RU 2015154933A RU 2613898 C1 RU2613898 C1 RU 2613898C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
containing compounds
total content
sulphur
sulfur
blood serum
Prior art date
Application number
RU2015154933A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Елена Владимировна Дорожко
Олеся Александровна Воронова
Елена Ивановна Короткова
Дарья Александровна Вишенкова
Ксения Владимировна Дёрина
Евгений Владимирович Плотников
Original Assignee
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" filed Critical Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет"
Priority to RU2015154933A priority Critical patent/RU2613898C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2613898C1 publication Critical patent/RU2613898C1/en

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483Physical analysis of biological material
    • G01N33/487Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/48707Physical analysis of biological material of liquid biological material by electrical means

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.
SUBSTANCE: invention relates to field of medicine and describes method for quantitative determination of total content of sulphur-containing compounds in human blood serum by method of anode voltammetry. Method for determination of total content of sulphur-containing compounds in blood serum includes preliminary sample-preparation of blood serum and voltammetric determination of total content of sulphur-containing compounds at the background of borate buffer solution with pH 9.18. Anode voltammetry is performed with application of indicator mercury-film electrode with differential-pulse form of potential sweep at rate 0.03 V/s in range of potentials from -1.0 V to 0.05 V relative to saturated silver chloride reference electrode. Concentration of total content of sulphur-containing compounds in human blood serum from 1.0⋅10-4 to 1.2⋅10-3 mol/dm3 is determined by height of peak of anode current at -0.03 V potential by method of calibration graph by standard glutathione solution.
EFFECT: high selectivity, sensitivity and simplicity of determination.
2 dwg, 1 tbl

Description

Изобретение относится к области медицины и описывает способ количественного определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека методом анодной вольтамперометрии.The invention relates to medicine and describes a method for quantitative determination of the total content of sulfur-containing compounds in human serum by anode voltammetry.

Самыми распространенными методами для определения серусодержащих соединений являются хроматографические методы с разными способами детектирования.The most common methods for determining sulfur-containing compounds are chromatographic methods with different detection methods.

Известен способ определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке и плазме крови методом жидкостной хроматографии с электрохимическим детектированием при потенциале +0,75 В относительно хлорид-серебряного электрода, используя в качестве индикаторного угольно-пастовый электрод химически-модифицированный фталцианином кобальта при потенциале, предел обнаружения каждого из соединений находился на уровне 4 пмоль/л с минимальной пробоподготовкой (M.K. Halbert, R.P. Baldwin. Determination of cysteine and glutathione in plasma and blood by liquid chromatography with electrochemical detection using a chemically modified electrode containing cobalt phthalocyanine // Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. 1985. V. 345, p. 43-49).A known method for determining the total content of sulfur-containing compounds in serum and plasma by liquid chromatography with electrochemical detection at a potential of +0.75 V relative to a silver-silver electrode, using as an indicator carbon-paste electrode chemically modified cobalt phthalcyanine at a potential, the detection limit of each of the compounds was at a level of 4 pmol / L with minimal sample preparation (MK Halbert, RP Baldwin. Determination of cysteine and glutathione in plasma and blood by liquid chromatography with electroc hemical detection using a chemically modified electrode containing cobalt phthalocyanine // Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. 1985. V. 345, p. 43-49).

Известен способ определения глутатиона в слюне человека методом гидрофильной хроматографии во взаимодействии с методом масс-спектрометрии, основанный на захвате глутатиона путем добавления N-этилмалеимида. Хроматографию проводили на колонке с диоксидом кремния (150 мм × 2,1 мм, 5 мкМ) с ацетонитрилом и формиатным буфером в качестве подвижной фазы при скорости потока 0,2 мл/мин. Калибровочная кривая линейна в диапазоне 0,1-100 мкМ (Y. Iwasaki, М. Hoshi, R. Ito, K. Saito and H. Nakazawa. Analysis of glutathione and glutathione disulfide in human saliva using hydrophilic interaction chromatography with mass spectrometry // Journal of Chromatography B, 2006, V. 839, №1-2, p. 74-79).A known method for determining glutathione in human saliva by hydrophilic chromatography in conjunction with the method of mass spectrometry, based on the capture of glutathione by adding N-ethylmaleimide. Chromatography was performed on a column of silica (150 mm × 2.1 mm, 5 μM) with acetonitrile and formate buffer as the mobile phase at a flow rate of 0.2 ml / min. The calibration curve is linear in the range of 0.1-100 μM (Y. Iwasaki, M. Hoshi, R. Ito, K. Saito and H. Nakazawa. Analysis of glutathione and glutathione disulfide in human saliva using hydrophilic interaction chromatography with mass spectrometry // Journal of Chromatography B, 2006, V. 839, No. 1-2, p. 74-79).

Несмотря на хорошую чувствительность и селективность определения серусодержащих соединений в биологических жидкостях организма человека и животных, перечисленные хроматографические методы имеют ряд недостатков: оборудование и растворители имеют высокую стоимость, для проведения специальной пробоподготовки требуются дорогостоящие реактивы.Despite the good sensitivity and selectivity of the determination of sulfur-containing compounds in biological fluids of the human and animal body, the chromatographic methods listed have a number of drawbacks: equipment and solvents are expensive, special reagents are required for special sample preparation.

Известен спектрофотометрический способ определения серусодержащих соединений, основанный на измерении общего содержания небелковых тиолов по восстановлению ими динитробензойной кислоты до тиобензойной при поглощении света 412 нм (Ellman G.L. Tissue sulfhydryl groups // Arch. Biochem. Biophys. 1959. V. 82, p. 70-81).A known spectrophotometric method for determining sulfur-containing compounds is based on measuring the total content of non-protein thiols by their reduction of dinitrobenzoic acid to thiobenzoic when absorbing light 412 nm (Ellman GL Tissue sulfhydryl groups // Arch. Biochem. Biophys. 1959. V. 82, p. 70- 81).

Недостатком способа является то, что он не позволяет проводить количественное определение суммарного содержания серусодержащих соединений с необходимой чувствительностью.The disadvantage of this method is that it does not allow the quantification of the total content of sulfur-containing compounds with the required sensitivity.

Известен спектрофотометрический способ определения серусодержащих соединений за счет образования окрашенного продукта с p-бензохиноном в области длин волн от 352 до 500 нм методом спектрофотометрии. Способ рекомендован для определения серусодержащих соединений в человеческой моче и в сыворотке крови (Dimas A.M., Zaia D.A.M., Kelly C.L., Ribas and Cassia T.B., Zaia K.C.I. Spectrophotometric determination of cysteine and/or carbocysteine in a mixture of amino acids, shampoo and pharmaceutical products using p-benzoquinone // Talanta. 1999. V. 50. №5. p. 1003-1010).A known spectrophotometric method for determining sulfur-containing compounds due to the formation of a colored product with p-benzoquinone in the wavelength range from 352 to 500 nm by spectrophotometry. The method is recommended for determination of sulfur-containing compounds in human urine and blood serum (Dimas AM, Zaia DAM, Kelly CL, Ribas and Cassia TB, Zaia KCI Spectrophotometric determination of cysteine and / or carbocysteine in a mixture of amino acids, shampoo and pharmaceutical products using p-benzoquinone // Talanta. 1999. V. 50. No. 5. p. 1003-1010).

Недостатком способа является то, что, если раствор красителя замутнен или имеет нехарактерные для спектрофотометрического анализа включения, то анализ провести невозможно.The disadvantage of this method is that if the dye solution is cloudy or has inclusions that are not characteristic for spectrophotometric analysis, then the analysis cannot be carried out.

Известен способ определения глутатиона в красных кровяных тельцах человека методом капиллярного зонного электрофореза с амперометрическим детектированием на конце колонки с помощью микроэлектрода на основе амальгамы золота без предварительного концентрирования гемоглобина (Wenrui J., Wei L., Qiang X. Capillary zone electrophoresis with electrochemical detection for the determination of glutathione' in human red blood cells without preseperation of hemoglobin // J. Chrom. Sci. 2000. V. 38, №12, p. 545-549).A known method for determining glutathione in human red blood cells by capillary zone electrophoresis with amperometric detection at the end of a column using a gold amalgam microelectrode without preliminary concentration of hemoglobin (Wenrui J., Wei L., Qiang X. Capillary zone electrophoresis with electrochemical detection for the determination of glutathione 'in human red blood cells without preseperation of hemoglobin // J. Chrom. Sci. 2000. V. 38, No. 12, p. 545-549).

Недостатком способа является то, что определение возможно только при низких концентрациях гемолизата (0.5 об. %).The disadvantage of this method is that the determination is possible only at low concentrations of hemolysate (0.5 vol.%).

Известен вольтамперометрический способ определения микрограммовых количеств глутатиона, в котором используют стационарный платиновый электрод на фоне 0.05 моль/дм H2SO4, при этом аналитический сигнал окисления глутатиона наблюдается при потенциале +0.95 В, диапазон линейной зависимости находится в области от 9.15⋅0-5 до 2.14⋅10-3 моль/дм3. Нижняя граница определяемых содержаний составила 1.9⋅10-5 моль/дм3 (Будников Г.К., Зиятдинова Г.К., Валитова Я.Р. Электрохимическое определение глутатиона // Журн. аналит. химии. 2004. Т. 59, №6, с. 645-648). Однако данный способ разработан только для модельных растворов.The voltammetric method for determining microgram amounts of glutathione is known, in which a stationary platinum electrode is used against a background of 0.05 mol / dm H 2 SO 4 , while the analytical oxidation signal of glutathione is observed at a potential of +0.95 V, the linear dependence range is in the range from 9.15⋅0 -5 up to 2.14⋅10 -3 mol / dm 3 . The lower limit of the determined contents was 1.9⋅10 -5 mol / dm 3 (Budnikov G.K., Ziyatdinova G.K., Valitova Ya.R. Electrochemical determination of glutathione // Journal of Analytical Chemistry. 2004. V. 59, No. 6, p. 645-648). However, this method is developed only for model solutions.

Известен способ определения суммарного содержания антиоксидантов тиоловой природы в растительных объектах методом катодной вольтамперометрии (Патент РФ №2447444 от 12.10.2010), выбранный в качестве прототипа.A known method of determining the total content of antioxidants of thiol nature in plant objects by the method of cathodic voltammetry (RF Patent No. 2447444 from 12/10/2010), selected as a prototype.

Сущность способа заключается в съемке катодных вольтамперограмм серусодержащих соединений с использованием стеклоуглеродного электрода при потенциале -0,4 В относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода на фоне боратного буферного раствора с pH 9,18 при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 0,05 В/с.The essence of the method consists in shooting cathode voltammograms of sulfur-containing compounds using a glassy carbon electrode with a potential of -0.4 V relative to a saturated silver chloride electrode against a background of a borate buffer solution with a pH of 9.18 with a constant-current form of potential sweep at a speed of 0.05 V / from.

Однако, несмотря на все достоинства, данный способ реализуется только в присутствии внесения дополнительного компонента - ионов Cu2+, который может вносить погрешность в измерение точной концентрации серусодержащих соединений в биологических объектах. Также в процессе измерения дополнительно требуется деоксигенация раствора.However, despite all the advantages, this method is implemented only in the presence of introducing an additional component - Cu 2+ ions , which may introduce an error in the measurement of the exact concentration of sulfur-containing compounds in biological objects. Also, during the measurement process, deoxygenation of the solution is additionally required.

Задачей изобретения является разработка способа количественного определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека для медицинских целей.The objective of the invention is to develop a method for the quantitative determination of the total content of sulfur-containing compounds in human serum for medical purposes.

Способ определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека, так же как в прототипе, включает пробоподготовку сыворотки крови и вольтамперометрическое определение суммарного содержания серусодержащих соединений на фоне боратного буферного раствора с pH 9,18.The method for determining the total content of sulfur-containing compounds in human blood serum, as in the prototype, includes sample preparation of blood serum and voltammetric determination of the total content of sulfur-containing compounds against the background of a borate buffer solution with a pH of 9.18.

Согласно изобретению анодную вольтамперометрию проводят с использованием индикаторного ртутно-пленочного электрода при дифференциально-импульсной форме развертки потенциала со скоростью 0,03 В/с в диапазоне потенциалов от -1,0 В до 0,05 В относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода сравнения. Концентрацию суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека от 1,0⋅10-4 до 1,2⋅10-3 моль/дм3 определяют по высоте пика анодного тока при потенциале -0,03 В методом градуировочного графика по стандартному раствору глутатиона.According to the invention, anodic voltammetry is carried out using an indicator mercury-film electrode with a differential-pulse form of potential sweep at a speed of 0.03 V / s in the potential range from -1.0 V to 0.05 V relative to a saturated silver chloride comparison electrode. The concentration of the total content of sulfur-containing compounds in human serum from 1.0⋅10 -4 to 1.2⋅10 -3 mol / dm 3 is determined by the height of the peak of the anode current at a potential of -0.03 V using the calibration curve using a standard solution of glutathione.

На фиг. 1 представлены вольтамперограммы окисления стандартного раствора глутатиона от его концентрации в электрохимической ячейке (фоновая кривая в отсутствие (1) и присутствии стандартного раствора глутатиона 2⋅10-4 моль/дм3 (2), 6⋅10-4 моль/дм3 (3), 10⋅10-4 моль/дм3 (4)).In FIG. Figure 1 shows voltammograms of the oxidation of a standard glutathione solution versus its concentration in an electrochemical cell (background curve in the absence of (1) and the presence of a standard solution of glutathione 2⋅10 -4 mol / dm 3 (2), 6⋅10 -4 mol / dm 3 (3 ), 10⋅10 -4 mol / dm 3 (4)).

На фиг. 2 представлена градуировочная зависимость тока окисления стандартного раствора глутатиона I, мкА, от его концентрации С, моль/дм3, в электрохимической ячейке с коэффициентом корреляции R, равным 0.999.In FIG. Figure 2 shows the calibration dependence of the oxidation current of a standard solution of glutathione I, μA, on its concentration C, mol / dm 3 , in an electrochemical cell with a correlation coefficient R equal to 0.999.

В таблице 1 представлены результаты определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови здоровых людей и больных психическими расстройствами, а именно страдающими алкогольной зависимостью 2 степени.Table 1 presents the results of determining the total content of sulfur-containing compounds in the blood serum of healthy people and patients with mental disorders, namely, those suffering from alcohol dependence of 2 degrees.

Анализ проводят при следующих условиях: метод анодной вольтамперометрии при дифференциально-импульсной форме развертки потенциала в диапазоне от -1,0 В до 0,05 В со скоростью 0,03 В/с, трехэлектродная ячейка с индикаторным ртутно-пленочным электродом, насыщенным хлорид-серебряным электродом сравнения и насыщенным хлорид-серебряным вспомогательным электродом, боратный буферный раствор с pH 9,18 (натрий тетраборнокислый Na2B4O7 с концентрацией 0.01 моль/дм) в качестве фонового раствора.The analysis is carried out under the following conditions: anodic voltammetry method with a differential-pulse form of potential sweep in the range from -1.0 V to 0.05 V at a speed of 0.03 V / s, a three-electrode cell with a mercury-film indicator electrode saturated with chloride silver reference electrode and saturated silver chloride auxiliary electrode, borate buffer solution with pH 9.18 (sodium tetraborate Na 2 B 4 O 7 with a concentration of 0.01 mol / dm) as the background solution.

Для количественного определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека в качестве стандартного серусодержащего вещества используют стандартный раствор глутатиона. Аналитический сигнал окисления глутатиона при анодной развертке потенциала регистрируют в диапазоне потенциалов от -0,2 В до 0,05 В (фиг. 1). Определение концентрации суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови проводят по высоте пика анодного тока при потенциале -0,03 В методом градуировочного графика по стандартному раствору глутатиона. Градуировочная зависимость является линейной в области определяемых концентраций суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека, которая составляет от 1,0⋅10-4 до 1,2⋅10-3 моль/дм3 (фиг. 2).For the quantitative determination of the total content of sulfur-containing compounds in human serum, a standard solution of glutathione is used as a standard sulfur-containing substance. An analytical signal for the oxidation of glutathione at the anodic potential scan is recorded in the potential range from -0.2 V to 0.05 V (Fig. 1). The concentration of the total content of sulfur-containing compounds in the blood serum is determined by the height of the peak of the anode current at a potential of -0.03 V using the calibration curve using a standard solution of glutathione. The calibration dependence is linear in the region of the determined concentrations of the total content of sulfur-containing compounds in human serum, which is from 1.0 · 10 -4 to 1.2 · 10 -3 mol / dm 3 (Fig. 2).

Количество суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке здоровых людей варьируется в пределах (2,8±0,02) 10-4 моль/дм3.The amount of the total content of sulfur-containing compounds in the serum of healthy people varies in the range (2.8 ± 0.02) 10 -4 mol / dm 3 .

Пример. Для определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови здоровых людей и больных психическими расстройствами первоначально отбирали кровь из локтевой вены.Example. To determine the total content of sulfur-containing compounds in the blood serum of healthy people and patients with mental disorders, blood was originally taken from the ulnar vein.

Донорами «контрольной» группы являлись 50 здоровых людей в возрасте до 40 лет мужского пола (без видимых патологий). Группа «патология» включала 50 пациентов мужского пола в возрасте от 23 до 42 лет с психическим расстройством (диагноз: синдром алкогольной зависимости 2 степени).The donors of the “control” group were 50 healthy people under the age of 40 years of the male sex (without visible pathologies). The “pathology” group included 50 male patients aged 23 to 42 years with a mental disorder (diagnosis: alcohol dependence syndrome 2 degrees).

У пациентов с диагнозом алкоголизма для отслеживания изменений состояния в динамике забор крови проводили двукратно с интервалом в 10 дней. У здоровых добровольцев забор крови проводили однократно.In patients diagnosed with alcoholism, blood sampling was performed twice with an interval of 10 days to monitor changes in the state of the dynamics. In healthy volunteers, blood sampling was performed once.

Венозную кровь, полученную без антикоагулянтов, помещали в центрифужную стеклянную пробирку и отстаивали при комнатной температуре в течение 30 минут до полного образования сгустка. По окончании образования сгустка с помощью тонкой стеклянной палочки проводили отделение столбика сгустка от стенок пробирки. Сыворотку сливали в другую пробирку, которую подвергали центрифугированию в настольной лабораторной центрифуге в течение 10 минут при скорости вращения 2000 об/мин. После центрифугирования образцов произвели отбор сыворотки в пробирки Эппендорфа и маркировали образцы. Центрифугат отбирали в объеме 1,0-1,5 см для дальнейшего исследования.Venous blood obtained without anticoagulants was placed in a centrifuge glass tube and settled at room temperature for 30 minutes until a clot formed. After the formation of the clot with a thin glass rod, the column of the clot was separated from the walls of the tube. The serum was poured into another tube, which was centrifuged in a benchtop laboratory centrifuge for 10 minutes at a rotation speed of 2000 rpm. After centrifugation of the samples, serum was taken into Eppendorf tubes and the samples were labeled. The centrifugate was taken in a volume of 1.0-1.5 cm for further research.

В электрохимическую ячейку вносили раствор фонового электролита (10 см). В качестве фонового электролита использовали боратный буферный раствор с pH 9,18 (натрий тетраборнокислый Na2B4O7 с концентрацией 0.01 моль/дм). Трехэлектродная ячейка состоит из индикаторного ртутно-пленочного электрода, насыщенного хлорид-серебряного электрода сравнения и насыщенного хлорид-серебряного вспомогательного электрода. Электроды опускали в раствор фонового электролита и подключали к вольтамперометрическому анализатору (ТА-2, ООО Томьаналит, Томск). Использовали постоянно-токовый режим анодной вольтамперометрии, скорость развертки потенциала 0,03 В/с, рабочий диапазон потенциалов от -1.0 В до 0.05 В, время перемешивания раствора 10 с, время успокоения 20 с. Регистрировали фоновую анодную вольтамперограмму, отсутствие посторонних пиков свидетельствует о чистоте фона.A background electrolyte solution (10 cm) was introduced into the electrochemical cell. A borate buffer solution with pH 9.18 (sodium tetraborate Na 2 B 4 O 7 with a concentration of 0.01 mol / dm) was used as the background electrolyte. The three-electrode cell consists of a mercury-film indicator electrode, a saturated silver-silver reference electrode, and a saturated silver-silver auxiliary electrode. The electrodes were lowered into a background electrolyte solution and connected to a voltammetric analyzer (TA-2, Tomanalit LLC, Tomsk). We used a constant current mode of anodic voltammetry, a potential sweep rate of 0.03 V / s, a working range of potentials from -1.0 V to 0.05 V, a solution mixing time of 10 s, a settling time of 20 s. The background anode voltammogram was recorded; the absence of extraneous peaks indicates the purity of the background.

Затем в электрохимическую ячейку с раствором фонового электролита вносили аликвоту (0,5 см3) сыворотки крови и снимали вольтамперограмму при тех же условиях. Регистрировали анодный пик в диапазоне потенциалов от -0,2 В до 0.05 В. Концентрацию суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови определяли методом градуировочного графика по стандартному раствору глутатиона по высоте пика анодного тока при потенциале -0,03 В.Then, an aliquot (0.5 cm 3 ) of blood serum was introduced into the electrochemical cell with a background electrolyte solution and a voltammogram was taken under the same conditions. The anode peak was recorded in the potential range from -0.2 V to 0.05 V. The concentration of the total content of sulfur-containing compounds in the blood serum was determined by the calibration curve using a standard solution of glutathione by the height of the peak of the anode current at a potential of -0.03 V.

Количество суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке здоровых людей варьируется в пределах (2,8±0,02) 10-4 моль/дм3, что ниже, чем у больных психическими расстройствами (таблица 1).The amount of the total content of sulfur-containing compounds in the serum of healthy people varies within (2.8 ± 0.02) 10 -4 mol / dm 3 , which is lower than in patients with mental disorders (table 1).

Предложенный способ определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека отличается простотой, не требует больших трудозатрат, значительного количества реактивов. Оценка суммарного содержания серусодержащих соединений, используя метод градуировочного графика, отличается высокой селективностью и чувствительностью определения.The proposed method for determining the total content of sulfur-containing compounds in human serum is simple, does not require large labor costs, a significant number of reagents. Estimation of the total content of sulfur-containing compounds using the calibration graph method is characterized by high selectivity and sensitivity of determination.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУММАРНОГО СОДЕРЖАНИЯ СЕРУСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКАMETHOD FOR DETERMINING THE TOTAL CONTENT OF SERUS-CONTAINING COMPOUNDS IN HUMAN BLOOD SERUM

Figure 00000001
Figure 00000001

Claims (1)

Способ определения суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека, включающий пробоподготовку сыворотки крови и вольтамперометрическое определение суммарного содержания серусодержащих соединений на фоне боратного буферного раствора с pH 9,18, отличающийся тем, что проводят анодную вольтамперометрию с использованием индикаторного ртутно-пленочного электрода при дифференциально-импульсной форме развертки потенциала со скоростью 0,03 В/с в диапазоне потенциалов от -1,0 В до 0,05 В относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода сравнения, а концентрацию суммарного содержания серусодержащих соединений в сыворотке крови человека от 1,0⋅10-4 до 1,2⋅10-3 моль/дм3 определяют по высоте пика анодного тока при потенциале -0,03 В методом градуировочного графика по стандартному раствору глутатиона.A method for determining the total content of sulfur-containing compounds in human blood serum, including sample preparation of blood serum and voltammetric determination of the total content of sulfur-containing compounds against a borate buffer solution with a pH of 9.18, characterized in that anode voltammetry is carried out using an indicator mercury-film electrode with differential pulse form of potential sweep at a speed of 0.03 V / s in the potential range from -1.0 V to 0.05 V relative to saturated chloride -silver reference electrode, and the concentration of the total content of sulfur-containing compounds in human serum from 1.0⋅10 -4 to 1.2⋅10 -3 mol / dm 3 is determined by the height of the peak of the anode current at a potential of -0.03 V using the calibration method graphics for a standard solution of glutathione.
RU2015154933A 2015-12-21 2015-12-21 Method for determining total content of sulphur-containing compounds in biological objects RU2613898C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015154933A RU2613898C1 (en) 2015-12-21 2015-12-21 Method for determining total content of sulphur-containing compounds in biological objects

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015154933A RU2613898C1 (en) 2015-12-21 2015-12-21 Method for determining total content of sulphur-containing compounds in biological objects

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2613898C1 true RU2613898C1 (en) 2017-03-21

Family

ID=58453139

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015154933A RU2613898C1 (en) 2015-12-21 2015-12-21 Method for determining total content of sulphur-containing compounds in biological objects

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2613898C1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2326189C1 (en) * 2006-09-04 2008-06-10 Марина Борисовна Лопатина Method of manufacturing mercuric film electrode
RU2441225C1 (en) * 2010-10-12 2012-01-27 Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации Method of determining glutathione in biologically active additives using cathode voltammetry technique
RU2447444C1 (en) * 2010-10-12 2012-04-10 Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации Method for determining total content of thiol antioxidants in plant objects by cathodic voltammetry

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2326189C1 (en) * 2006-09-04 2008-06-10 Марина Борисовна Лопатина Method of manufacturing mercuric film electrode
RU2441225C1 (en) * 2010-10-12 2012-01-27 Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации Method of determining glutathione in biologically active additives using cathode voltammetry technique
RU2447444C1 (en) * 2010-10-12 2012-04-10 Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации Method for determining total content of thiol antioxidants in plant objects by cathodic voltammetry

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
СЕРЕБРЕННИКОВА Н. В. и др., Вольтамперометрия, ГОУ ВПО "Кемеровский госуниверситет", Кемерово, Кузбассвузиздат, 2007, стр. 8-15, найдено 20.10.2016 в Интернете [on-line] на сайте http://kit.chem.kemsu.ru/files/u4mater/AnChem/Voltammetry.pdf. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Iriyama et al. Simultaneous determination of uric and ascorbic acids in human serum by reversed-phase high-performance liquid chromatography with electrochemical detection
Hodáková et al. Sensitive determination of glutathione in biological samples by capillary electrophoresis with green (515 nm) laser-induced fluorescence detection
Muñoz et al. Gold electrodes from compact discs modified with platinum for amperometric determination of ascorbic acid in pharmaceutical formulations
De Souza et al. The use of a gold disc microelectrode for the determination of copper in human sweat
Brainina et al. Platinum electrode regeneration and quality control method for chronopotentiometric and chronoamperometric determination of antioxidant activity of biological fluids
Farhadi et al. Electrochemical behavior and determination of clozapine on a glassy carbon electrode modified by electrochemical oxidation
Wang et al. Tween 20-capped gold nanoparticles for selective extraction of free low-molecular-weight thiols in saliva followed by capillary electrophoresis with contactless conductivity detection
Al-Ghamdi et al. Electrochemical determination of Cephalothin antibiotic by adsorptive stripping voltammetric technique
Al-Ghamdi et al. Electrochemical determination of rosiglitazone by square-wave adsorptive stripping voltammetry method
Ramos et al. Portable amperometric method for selective determination of caffeine in samples with the presence of interfering electroactive chemical species
Song et al. Quantification of lactate in synovia by microchip with contactless conductivity detection
Ghoneim et al. Assay of anti-coagulant drug warfarin sodium in pharmaceutical formulation and human biological fluids by square-wave adsorptive cathodic stripping voltammetry
RU2613898C1 (en) Method for determining total content of sulphur-containing compounds in biological objects
Chandra et al. Poly (Naphthol Green B) film based sensor for resolution of dopamine in the presence of uric acid: a voltammetric study
Campanella et al. Salicylic acid determination in cow urine and drugs using a bienzymatic sensor
Liu et al. Design and evaluation of capillary electrophoresis in dynamically coated capillaries coupled with chemiluminescence detection
Deng et al. Pharmacokinetics of amoxicillin in human urine using online coupled capillary electrophoresis with electrogenerated chemiluminescence detection
RU2633086C1 (en) Method of express determination of cardiomyoglobin in blood plasma using electrochemical sensor based on carbon nanotubes and molecular imprinted poly-o-phenylenediamine as bioaffinity reagent
Turunc et al. Electrochemical determination of glutathione in plasma at carbon nanotubes based screen printed electrodes
CN110308121A (en) The fluorescence detection method of antiepileptic --- Tiagabine Hydrochloride (TGB)
Liao et al. Development of a method for total plasma thiols measurement using a disposable screen-printed carbon electrode coupled with a MnO2 reactor
CN115326990B (en) Method for detecting hydrogen sulfide in biological sample and application thereof
CN106404874B (en) Method for detecting reduced glutathione based on electrochemical probe
Moldoveanu et al. Analysis of L-thyroxine and 3, 3’, 5-triiodo-L-thyronine using potentiometric microsensors
Kumari et al. Voltammetric detection of trimethoprim at CTAB modified carbon paste electrode

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20181222