RU2611386C2 - Method for estimating efficiency of endotheliotropic therapy after reconstructive operations on arteries - Google Patents
Method for estimating efficiency of endotheliotropic therapy after reconstructive operations on arteries Download PDFInfo
- Publication number
- RU2611386C2 RU2611386C2 RU2015121673A RU2015121673A RU2611386C2 RU 2611386 C2 RU2611386 C2 RU 2611386C2 RU 2015121673 A RU2015121673 A RU 2015121673A RU 2015121673 A RU2015121673 A RU 2015121673A RU 2611386 C2 RU2611386 C2 RU 2611386C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- expression
- therapy
- tgf
- endotheliotropic
- level
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к сосудистой хирургии, и может быть использовано при лечении облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей (ОААНК).The invention relates to medicine, namely to vascular surgery, and can be used in the treatment of atherosclerosis obliterans of the arteries of the lower extremities (OAANK).
По данным отечественных авторов более 60% больных, которые обращаются к сосудистому хирургу по поводу перемежающей хромоты, имеют IIб стадию заболевания по классификации Фонтейна-Покровского [1]. Это пациенты, которым чаще всего выполняют реконструктивные операции. Однако в течение 5 лет до 40% протезов перестают функционировать [1]. Основной причиной тромбозов шунтов является рестеноз зоны реконструкции, вследствие гиперплазии неоинтимы, обусловленной эндотелиальной дисфункцией (ЭД) [2].According to domestic authors, more than 60% of patients who turn to a vascular surgeon for intermittent claudication have stage IIb disease according to the Fontaine-Pokrovsky classification [1]. These are patients who most often perform reconstructive surgery. However, within 5 years, up to 40% of prostheses cease to function [1]. The main cause of shunt thrombosis is restenosis of the reconstruction zone, due to neointimal hyperplasia due to endothelial dysfunction (ED) [2].
Применение спектра современных гипохолестеринемических препаратов не решает проблему коррекции эндотелиальной дисфункции, а тропные средства коррекции ЭД пока не вошли в арсенал сосудистых хирургов. Это обусловлено во многом отсутствием системных исследований и малым вниманием к возможностям медикаментозной коррекции ЭД и традиционному акценту на хирургию гемодинамически значимых результатов рестеноза.The use of a spectrum of modern hypocholesterolemic drugs does not solve the problem of correction of endothelial dysfunction, and tropic means of ED correction have not yet been included in the arsenal of vascular surgeons. This is largely due to the lack of systematic studies and the low attention to the possibilities of drug correction of ED and the traditional emphasis on the surgery of hemodynamically significant results of restenosis.
Роль же дисфункции эндотелия в прогрессировании атеросклероза и развитии гиперплазии интимы сомнений не вызывает [2].The role of endothelial dysfunction in the progression of atherosclerosis and the development of intimal hyperplasia is beyond doubt [2].
Существует целый ряд биохимических маркеров функционального состояния эндотелия (ФСЭ), определение уровня которых может не только дать ответ о тяжести эндотелиальной дисфункции, но и показать эффективность проводимой терапии [2, 10].There are a number of biochemical markers of the functional state of the endothelium (FSE), the determination of the level of which can not only give an answer about the severity of endothelial dysfunction, but also show the effectiveness of the therapy [2, 10].
Перспективным направлением является оценка иммуногистохимических тестов для определения активности внутриклеточных структур [3].A promising direction is the evaluation of immunohistochemical tests to determine the activity of intracellular structures [3].
В качестве прототипа использован патент на изобретение №2503961 от 09.04.2012 [4]. Предлагаемый способ отличается от прототипа тем, что оценку эффективности эндотелиотропной терапии осуществляют на основании уровня биохимических маркеров эндотелиальной дисфункции, динамика которых зависит от активности экспрессии внутриклеточных белков (актин, CD34 и трансформирующий фактор роста β). Это позволяет корректно интерпретировать биохимические изменения до наступления гиперплазии неоинтимы и выявить связь между уровнем биохимических маркеров и активностью внутриклеточных структур.As a prototype, a patent for the invention No. 2503961 dated 04/09/2012 [4] was used. The proposed method differs from the prototype in that the effectiveness of endotheliotropic therapy is assessed based on the level of biochemical markers of endothelial dysfunction, the dynamics of which depend on the activity of expression of intracellular proteins (actin, CD34 and transforming growth factor β). This allows one to correctly interpret biochemical changes before the onset of neointimal hyperplasia and to reveal a relationship between the level of biochemical markers and the activity of intracellular structures.
Анализ полученных данных позволит оценить эффективность проводимой эндотелиотропной терапии, проводить коррекцию терапии до развития гиперплазии неоинтимы.An analysis of the data obtained will allow us to evaluate the effectiveness of the endotheliotropic therapy and to correct the therapy before the development of neointimal hyperplasia.
Цель изобретения - оценка эффективности эндотелиотропной терапии после реконструктивных операций на артериях и прогнозирование развития гиперплазии неоинтимы до наступления морфологических изменений.The purpose of the invention is the evaluation of the effectiveness of endotheliotropic therapy after reconstructive operations on the arteries and predicting the development of neointimal hyperplasia before the onset of morphological changes.
Способ заключается в следующем: экспериментальным животным проводилось моделирование L-NAME индуцированной эндотелиальной дисфункции, затем выполнялась операция аллопластика инфраренального отдела брюшной аорты, назначалась эндотелиотропная терапия, наблюдение составляло 1 месяц, с последующим выводом животных из эксперимента, забором зоны пластики и выполнением трансмиссионной электронной микроскопии, иммуногистохимических и биохимических тестов.The method consists in the following: experimental animals simulated L-NAME-induced endothelial dysfunction, then alloplasty of the infrarenal section of the abdominal aorta was performed, endotheliotropic therapy was prescribed, the observation was 1 month, followed by the animals being withdrawn from the experiment, the plastic zone was taken and transmission electron microscopy was performed, immunohistochemical and biochemical tests.
Животные были разделены на 2 равнозначные группы. В первой (контрольной) группе животные в послеоперационном периоде не получали эндотелиотропной терапии. Во второй группе животные в послеоперационном периоде с целью коррекции эндотелиальной дисфункции получали L-аргинин в дозе 200 мг/кг в сутки.Animals were divided into 2 equivalent groups. In the first (control) group, animals in the postoperative period did not receive endotheliotropic therapy. In the second group, animals in the postoperative period for the correction of endothelial dysfunction received L-arginine at a dose of 200 mg / kg per day.
В первый день эксперимента осуществляли забор крови из подкожной вены правой передней конечности животного в количестве 4-5 мл в стерильные пробирки для определения следующих показателей: малоновый диальдегид (МДА), супероксиддисмутаза (СОД), оксид азота (II) (NO).On the first day of the experiment, 4-5 ml of blood was taken from the saphenous vein of the right forelimb of the animal into sterile tubes to determine the following parameters: malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), nitric oxide (II) (NO).
Через 3 дня от начала эксперимента под наркозом выполнялась операция - аллопластика брюшного отдела аорты.After 3 days from the start of the experiment, an operation was performed under anesthesia - alloplasty of the abdominal aorta.
Моделирование L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции осуществлялось путем введения в течение 7 дней N-нитро-L-аргинин метилового эфира (L-NAME) один раз в сутки внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг. Для подтверждения получения модели повторно проводился забор крови и определение биохимических показателей.Modeling of L-NAME-induced endothelial dysfunction was carried out by introducing for 7 days N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) once a day intraperitoneally at a dose of 25 mg / kg To confirm the receipt of the model, blood sampling and determination of biochemical parameters were repeated.
В процессе наблюдения в различные сроки (до операции и через 1 месяц после вмешательства) проводится лабораторный контроль биохимических показателей с целью оценки функционального состояния эндотелия (определение малонового диальдегида колориметрическим методом по реакции 2-тиобарбитуровой кислотой [5]; определение активности супероксиддисмутазы спектрофотометрическим (кверцитиновым) методом (Бурмистров C.O., 1997) в модификации [5]; количественное определение стабильных конечных метаболитов оксида азота (II) [6].During the observation process, at various times (before the operation and 1 month after the intervention), laboratory monitoring of biochemical parameters is carried out in order to assess the functional status of the endothelium (determination of malondialdehyde by the colorimetric method by reaction with 2-thiobarbituric acid [5]; determination of superoxide dismutase activity by spectrophotometric (quercetin) method (Burmistrov CO, 1997) as modified [5], quantitative determination of stable final metabolites of nitric oxide (II) [6].
Через 1 месяц наблюдения животные наркотизируются и выводятся из исследования, зона пластики изучается с помощью трансмисионной электронной микроскопии и определения экспрессии иммуногистохимических (ИГХ) маркеров: актин, CD34 и TGFβ на тканевых срезах [6].After 1 month of observation, the animals are anesthetized and removed from the study, the plastic zone is examined using transmission electron microscopy and determination of the expression of immunohistochemical (IHC) markers: actin, CD34, and TGF β on tissue sections [6].
Материал для исследования ИГХ методами фиксировали в 10% нейтральном формалине течение 24 ч заливали в парафин, готовили срезы толщиной 4 мкм, которые наносили на высокоадгезивные стекла и высушивали при температуре 37°С в течение 18 часов. Восстановление антигенной активности проводили в миниавтоклаве «2100Retrieval» («Pick Cell») при температуре 121°С в течение 20 мин с последующим остыванием на протяжении 90 мин. Остывшие стекла помещали во влажные камеры (для предотвращения высыхания срезов) и инкубировали 15 мин с 3% раствором перекиси водорода. Восстановление проводили в нитратном буфере с рН 6,0. В качестве детекционной системы применяли систему «EnVision» («Dako Cytomation»), в качестве хромогена - диаминобензидин (LSAB, Dako Cytomation) и АБС (LSAB, Dako Cytomation). Для получения результатов, пригодных для количественной обработки реакции, проводили с помощью автоматического иммуногистостейнера «Autosteiner Dako».The material for studying IHC by methods was fixed in 10% neutral formalin for 24 h, embedded in paraffin, sections were prepared with a thickness of 4 μm, which were applied to highly adhesive glasses and dried at a temperature of 37 ° C for 18 hours. The restoration of antigenic activity was carried out in a 2100 Retrieval mini-autoclave (Pick Cell) at a temperature of 121 ° C for 20 minutes, followed by cooling for 90 minutes. The cooled glasses were placed in wet chambers (to prevent drying of the slices) and incubated for 15 min with a 3% hydrogen peroxide solution. Recovery was carried out in nitrate buffer with a pH of 6.0. The EnVision system (Dako Cytomation) was used as a detection system, diaminobenzidine (LSAB, Dako Cytomation) and ABS (LSAB, Dako Cytomation) were used as a chromogen. To obtain results suitable for quantitative processing of the reaction, an Autosteiner Dako automatic immunohistostiner was performed.
Для ИГХ-реакций ставили положительные (в соответствии с рекомендациями фирмы-производителя) и отрицательные (без первичных антител) контроли. Оценка результатов ИГХ-исследования проводилась следующим способом: интенсивность реакций с цитоплазматической экспрессией оценивали полуколичественным способом по балльной шкале от 0 до 3 (0 - отсутсвие экспрессии, 1 - слабая экспрессия - менее 20% клеток экспрессируют искомый антиген, 2 - умеренная экспрессия - 50% экспрессируют искомый антиген, 3 - сильная экспрессия - 70% клеток экспрессируют искомый антиген).For IHC reactions, positive (in accordance with the recommendations of the manufacturer) and negative (without primary antibodies) controls were set. Evaluation of the results of the IHC study was carried out in the following way: the intensity of reactions with cytoplasmic expression was evaluated semi-quantitatively on a scale of 0 to 3 (0 - lack of expression, 1 - weak expression - less than 20% of the cells express the desired antigen, 2 - moderate expression - 50% Express the desired antigen, 3 - strong expression - 70% of the cells express the desired antigen).
Результаты, полученные в ходе исследования, представлены в таблицах 1 и 2.The results obtained during the study are presented in tables 1 and 2.
Из таблицы 1 наглядно видно, что на фоне введения L-NAME до операции наблюдается снижение секреции оксида азота (II) и высокое содержание СОД и МДА, что является убедительным признаком развития нарушения функционального состояния эндотелия. При этом наблюдается изменение экспрессии искомых антигенов, проявляющееся в усилении экспрессии а-ГМА, TGFβ и снижении экспрессии CD34. Дальнейшее колебание изучаемых биохимических показателей отражает тот факт, что на протяжении 1 месяца секреция оксида азота, как основного маркера эндотелиальной дисфункции, остается подавленной, активность МДА высокой. Также наблюдается усиление экспрессии а-ГМА, TGFβ и снижение экспрессии CD34.Table 1 clearly shows that against the background of the introduction of L-NAME before surgery, there is a decrease in the secretion of nitric oxide (II) and a high content of SOD and MDA, which is a convincing sign of the development of a functional disorder of the endothelium. In this case, there is a change in the expression of the desired antigens, manifested in an increase in the expression of α-GMA, TGF β and a decrease in the expression of CD34. Further fluctuation of the studied biochemical parameters reflects the fact that for 1 month the secretion of nitric oxide, as the main marker of endothelial dysfunction, remains suppressed, MDA activity is high. There is also an increase in the expression of α-GMA, TGF β and a decrease in the expression of CD34.
Уровень СОД сохраняется высоким на протяжении всего периода наблюдения. СОД катализирует реакцию превращения супероксида в H2O2. Оксид азота (II) и СОД конкурируют за супероксид-анион. Высокая концентрация СОД в сыворотке крови животных говорит об активности антиоксидантной системы.The level of SOD remains high throughout the observation period. SOD catalyzes the conversion of superoxide to H 2 O 2 . Nitric oxide (II) and SOD compete for superoxide anion. A high concentration of SOD in the blood serum of animals indicates the activity of the antioxidant system.
Малоновый диальдегид является конечным продуктом перекисного окисления липидов. Повышение активности ПОЛ ведет к угнетению секреции NO и его повышенному разрушению, что создает благоприятные условия для прогрессирования атеросклероза и развития рестеноза.Malondialdehyde is the final product of lipid peroxidation. An increase in LPO activity leads to inhibition of NO secretion and its increased destruction, which creates favorable conditions for the progression of atherosclerosis and the development of restenosis.
Решающая роль в патологических изменениях сосудов при различной патологии отводится факторам роста - полипептидным химическим агентам, продуцируемым in situ клетками стенки сосуда (эндотелиальными, гладкомышечными клетками) и клетками крови (тромбоцитами, лейкоцитами). Семейство фактора роста фибробластов (FGF) представлено 22 сходными по структуре полипептидными соединениями, играющими важную роль в процессах эмбрионального развития, ангиогенеза, васкулогенеза и заживления ран. Все представители семейства FGF воздействуют на клетку путем активации специфических трансмембранных тирозинкиназных рецепторов.The decisive role in pathological changes in blood vessels with various pathologies is assigned to growth factors - polypeptide chemical agents produced in situ by vascular wall cells (endothelial, smooth muscle cells) and blood cells (platelets, leukocytes). The family of fibroblast growth factor (FGF) is represented by 22 structurally similar polypeptide compounds that play an important role in the processes of embryonic development, angiogenesis, vasculogenesis and wound healing. All members of the FGF family act on the cell by activating specific transmembrane tyrosine kinase receptors.
Трансформирующий фактор роста β (TGFβ) - фактор роста тромбоцитов в совокупности с другими факторами роста способны действовать как агенты "компетентности", повышая пролиферативную активность клеток-мишеней, или как агенты "прогрессии", стимулируя синтетическую деятельность компетентных клеток. Процессы клеточной миграции, пролиферации и биосинтеза или распада межклеточного вещества приводят к структурным изменениям стенки сосуда [7-8].Transforming growth factor β (TGF β ), a platelet growth factor in combination with other growth factors, can act as agents of "competence", increasing the proliferative activity of target cells, or as agents of "progression", stimulating the synthetic activity of competent cells. The processes of cell migration, proliferation, and biosynthesis or decay of the intercellular substance lead to structural changes in the vessel wall [7-8].
CD 34 - это мембранный белок, играющий роль на ранних этапах гемопоэза. Максимальная экспрессия данного маркера осуществляется пролиферирующими эндотелиальными клетками [8].CD 34 is a membrane protein that plays a role in the early stages of hematopoiesis. The maximum expression of this marker is carried out by proliferating endothelial cells [8].
Существование гладкомышечных клеток (ГМК) сосудистой стенки поддерживается путем их постоянного развития из малодифференцированных, но способных к усиленной пролиферации форм, до высокодифференцированных сократительных элементов. Поскольку высокодифференцированные ГМК синтезируют большое количество α-актина - белка, отвечающего за их сократительную функцию, - снижение содержания этого белка непосредственно коррелирует с дедифференцировкой ГМК и их переходом в более пролиферирующее состояние. Было показано, что при развитии гиперплазии неоинтимы происходит активировация дифференцировки ГМК и их переход в стабильное состояние путем воздействия на ФИ-3-киназный путь, а также значительно повышается экспрессия α-актина - маркера дифференцировки ГМК сосудов [8].The existence of smooth muscle cells (GMS) of the vascular wall is supported by their continuous development from poorly differentiated, but capable of enhanced proliferation forms, to highly differentiated contractile elements. Since highly differentiated HMCs synthesize a large amount of α-actin, the protein responsible for their contractile function, a decrease in the content of this protein directly correlates with dedifferentiation of HMCs and their transition to a more proliferating state. It was shown that with the development of neointima hyperplasia, the differentiation of MMCs is activated and their transition to a stable state by affecting the PHI-3 kinase pathway, and the expression of α-actin, a marker of differentiation of MMCs of vessels, is also significantly increased [8].
Исходя из этого, выявленное в контрольной группе усиление экспрессии α-ГМА, TGFβ и снижение экспрессии CD34 в послеоперационном периоде является предиктором развития гиперплазии интимы до наступления морфологических изменений.Based on this, the increase in the expression of α-GMA, TGF β and the decrease in the expression of CD34 in the postoperative period revealed in the control group is a predictor of the development of intimal hyperplasia before morphological changes occur.
Из таблицы 2 видно, что прием L-аргинина ведет к коррекции эндотелиальной дисфункции. Отмечается повышение секреции оксида азота (II) и уровня супероксиддисмутазы, снижение уровня малонового диальдегида. Отмеченная тенденция характеризует нормализацию функционального состояния эндотелия и является прогностически благоприятным эффектом эндотелиотропной терапии.Table 2 shows that taking L-arginine leads to the correction of endothelial dysfunction. There is an increase in the secretion of nitric oxide (II) and the level of superoxide dismutase, a decrease in the level of malondialdehyde. The noted tendency characterizes the normalization of the functional state of the endothelium and is a prognostically favorable effect of endotheliotropic therapy.
На фоне приема L-аргинина снижается активность экспрессии а-ГМА, усиление экспрессии CD34 при низкой экспрессии TGFβ.Against the background of taking L-arginine, the activity of α-GMA expression decreases, the expression of CD34 is increased with low expression of TGF β .
Между результатами биохимических анализов через 1 месяц от выполнения операции и показателями иммуногистохимических тестов проводился корреляционный анализ. Изучалась корреляционная связь между изучаемыми биохимическими показателями (МДА, СОД, NO) и экспрессией внутриклеточных белков (а-ГМА, CD34, TGFβ) (табл. 3).Between the results of biochemical analyzes after 1 month from the operation and indicators of immunohistochemical tests, a correlation analysis was performed. The correlation between the studied biochemical parameters (MDA, SOD, NO) and the expression of intracellular proteins (α-GMA, CD34, TGF β ) was studied (Table 3).
Полученные результаты свидетельствуют об обратной зависимости между уровнем NO и а-ГМА, TGFβ, прямой зависимости между NO и CD34, обратной зависимости между уровнем МДА, СОД и CD34 и прямой зависимости между МДА, СОД и а-ГМА, TGFβ. Корреляция значима.The results indicate an inverse relationship between the levels of NO and a-GMA, TGF β , a direct relationship between NO and CD34, an inverse relationship between the levels of MDA, SOD and CD34, and a direct relationship between MDA, SOD and a-GMA, TGF β . Correlation is significant.
Таким образом, в случае высокого уровня метаболитов NO, наблюдается низкая активность гладкомышечных клеток, о чем свидетельствует его низкая экспрессия в ткани, высокая экспрессия CD34, при отсутствии экспрессии трансформирующего фактора роста. Представленный способ позволяет оценить экспрессию в стенке сосуда белков, ответственных за запуск процессов формирования неоинтимы, на основании уровня биохимических маркеров, отражающих ФСЭ, до наступления морфологических изменений и признаков, характерных для гиперплазий неоинтимы.Thus, in the case of a high level of NO metabolites, low activity of smooth muscle cells is observed, as evidenced by its low expression in tissue, high expression of CD34, in the absence of expression of transforming growth factor. The presented method allows to evaluate the expression in the vessel wall of the proteins responsible for triggering the formation of neointima, based on the level of biochemical markers reflecting FSE, before the onset of morphological changes and signs characteristic of neointima hyperplasia.
Приводим экспериментальное наблюдение.We give an experimental observation.
До операции проводился забор крови из вен тыльной поверхности передней лапы. Были получены следующие результаты: NO=10,1 уе; СОД=0,173 (уе) на мg Hb, МДА=14,2 (уе) на мg Hb. Через 2 дня выполнялось оперативное вмешательство.Before the operation, blood was taken from the veins of the dorsum of the forepaw. The following results were obtained: NO = 10.1 ye; SOD = 0.173 (ye) per mg Hb, MDA = 14.2 (ye) per mg Hb. After 2 days, surgery was performed.
Под наркозом выполнялась полная срединная лапаротомия, выделялась брюшная аорта, продольная аортотомия, аллопластика брюшной аорты (рис. 1-3). Послойное ушивание раны.Under anesthesia, a complete median laparotomy was performed, the abdominal aorta, longitudinal aortotomy, and alloplasty of the abdominal aorta were isolated (Fig. 1-3). Layer wound closure.
Животные содержались в виварии с соблюдением необходимых условий содержания и пищевого рациона. С целью коррекции дисфункции эндотелия принимали L-аргинин в дозе 200 мг/кг в сутки.Animals were kept in a vivarium in compliance with the necessary conditions of detention and diet. In order to correct endothelial dysfunction, L-arginine was taken at a dose of 200 mg / kg per day.
Через 1 месяц проводился забор крови с целью оценки уровня биохимических показателей: NO=28,34 уе; СОД=2,69 (уе) на мg Hb, МДА=9,85 (уе) на мg Hb.After 1 month, blood was taken to assess the level of biochemical parameters: NO = 28.34 ye; SOD = 2.69 (ye) per mg Hb, MDA = 9.85 (ye) per mg Hb.
Затем животное наркотизировалось и выводилось из исследования, зона пластики изучалась с помощью трансмисионной электронной микроскопии и определялась экспрессия иммуногистохимических маркеров: актин, CD34 и TGFβ на тканевых срезах.Then the animal was anesthetized and removed from the study, the plastic zone was studied using transmission electron microscopy and the expression of immunohistochemical markers: actin, CD34 and TGF β was determined on tissue sections.
Были получены следующие результаты (рис. 4): низкая экспрессии а-ГМА (1 балл), выраженная экспрессия CD34 (3 балла) и отсутствие экспрессии TGFβ (0 баллов).The following results were obtained (Fig. 4): low expression of a-GMA (1 point), pronounced expression of CD34 (3 points) and lack of expression of TGF β (0 points).
Согласно полученным данным, на фоне приема L-аргинина отмечается улучшение функционального состояния эндотелия, проявляющееся высоким уровнем секреции NO и СОД и низким уровнем МДА. По данным иммуногистохимического исследования также наблюдается низкая экспрессия а-ГМА, отсутствие экспрессии TGFβ и выраженная экспрессия CD34, что говорит об отсутствии предпосылок для развития гиперплазии интимы и эффективности проводимой эндотелиотропной терапии.According to the data obtained, while taking L-arginine, an improvement in the functional state of the endothelium is observed, which is manifested by a high level of secretion of NO and SOD and a low level of MDA. According to immunohistochemical studies, low expression of a-GMA, lack of expression of TGF β and expressed expression of CD34 are also observed, which indicates the absence of prerequisites for the development of intimal hyperplasia and the effectiveness of endotheliotropic therapy.
Источники информации, принятые во вниманиеSources of information taken into account
1) Клиническая ангиология: Руководство / Под ред. А.В. Покровского. В двух томах. - М.: ОАО Издательство «Медицина», 2004. - 1400 с.: ил.1) Clinical Angiology: A Guide / Ed. A.V. Pokrovsky. In two volumes. - M.: Publishing House "Medicine", 2004. - 1400 p .: ill.
2) Киричук В.Ф., Глыбочко П.В., Пономарева А.И. Дисфункция эндотелия. - Саратов: Изд-во Саратовского мед. ун-та, 2008, - 129 с.2) Kirichuk V.F., Glybochko P.V., Ponomareva A.I. Endothelial dysfunction. - Saratov: Publishing house of the Saratov honey. University, 2008, - 129 p.
3) Значение сосудистых факторов роста в развитии рестеноза коронарных артерий у больных ИБС после интервенционных вмешательств / в соавт. с Бузиашвили Ю.И., Асымбековой Э.У., Мацкеплишвили С.Т., Ариповым М.А. // Материалы Международной конференции «Неинвазивная диагностика ишемической болезни сердца: настоящее и будущее». - Москва, 2001 (25-26 октября). - С. 53.3) The value of vascular growth factors in the development of coronary artery restenosis in patients with coronary artery disease after interventional interventions / et al. with Buziashvili Yu.I., Asymbekova E.U., Matskeplishvili S.T., Aripov M.A. // Materials of the International Conference "Non-invasive diagnosis of coronary heart disease: present and future." - Moscow, 2001 (October 25-26). - S. 53.
4) Патент на изобретение №2503961 от 09.04.2012 / Способ оценки функционального состояния эндотелия экспериментальных животных после реконструктивных операций на брюшной аорте / Калинин Р.Е., Сучков И.А., Мнихович М.В. / Опубликовано 10.01.2014 бюл. №1.4) Patent for the invention No. 2503961 from 04/09/2012 / Method for assessing the functional state of the endothelium of experimental animals after reconstructive operations on the abdominal aorta / Kalinin R.E., Suchkov I.A., Mnikhovich M.V. / Published on January 10, 2014 bull. No. 1.
5) Коробойникова Э.Н. Модификация определения продуктов ПОЛ в реакции с тиобарбитуровой кислотой // Лаб. дело - 1989 - №7.- С. 8-9.5) Koroboinikova E.N. Modification of the determination of lipid peroxidation products in reaction with thiobarbituric acid // Lab. case - 1989 - No. 7.- S. 8-9.
6) Звягина В.И., Калинин Р.Е., Пшенников А.С., Сучков И.А., Матвеева И.В. Фотоколориметрический метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке крови. // Астраханский медицинский журнал. Астрахань - 2010. Т. 5, №1. С. 188-189.6) Zvyagina V.I., Kalinin R.E., Pshennikov A.S., Suchkov I.A., Matveeva I.V. Photocolorimetric method for determining the level of serum nitric oxide metabolites. // Astrakhan medical journal. Astrakhan - 2010.V. 5, No. 1. S. 188-189.
7) Петрова С.В., Райхлин Н.Т. под ред. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. Издание 3-е, дополненное и переработанное. - Казань, 2004. - 456 с., ил.7) Petrova S.V., Raykhlin N.T. under the editorship of Guidelines for the immunohistochemical diagnosis of human tumors. 3rd edition, revised and revised. - Kazan, 2004 .-- 456 p., Ill.
8) Хайтлина С.Ю. Механизмы сегрегации изоформ актина в клетке // Цитология. - 2007. - Т. 49, №5. - С. 345-354.8) Khaitlina S.Yu. The mechanisms of segregation of actin isoforms in a cell // Cytology. - 2007. - T. 49, No. 5. - S. 345-354.
9) Федорченко Н.П., Федорченко Н.Н. Теоретические и морфологические закономерности патогенеза атеросклероза и основных его осложнений. Новые подходы к их профилактике и лечению // Морфология - 2009 - Т. 3 - №1 - С. 14-21.9) Fedorchenko N.P., Fedorchenko N.N. Theoretical and morphological patterns of the pathogenesis of atherosclerosis and its main complications. New approaches to their prevention and treatment // Morphology - 2009 - T. 3 - No. 1 - P. 14-21.
10) Эндотелиальная дисфункция и способы ее коррекции при облитерирующем атеросклерозе / Калинин Р.Е., Сучков И.А., Пшенников А.С. // Москва, изд. Дом «ГЕОТАР-МЕД», 2014, 151 с.10) Endothelial dysfunction and methods for its correction in obliterating atherosclerosis / Kalinin R.E., Suchkov I.A., Pshennikov A.S. // Moscow, ed. House "GEOTAR-MED", 2014, 151 p.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015121673A RU2611386C2 (en) | 2015-06-05 | 2015-06-05 | Method for estimating efficiency of endotheliotropic therapy after reconstructive operations on arteries |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015121673A RU2611386C2 (en) | 2015-06-05 | 2015-06-05 | Method for estimating efficiency of endotheliotropic therapy after reconstructive operations on arteries |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015121673A RU2015121673A (en) | 2016-12-20 |
| RU2611386C2 true RU2611386C2 (en) | 2017-02-21 |
Family
ID=57759206
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015121673A RU2611386C2 (en) | 2015-06-05 | 2015-06-05 | Method for estimating efficiency of endotheliotropic therapy after reconstructive operations on arteries |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2611386C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720815C1 (en) * | 2019-10-11 | 2020-05-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of endothelial dysfunction correction in patients with secondary lymphedema of lower extremities |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050085548A1 (en) * | 1997-04-10 | 2005-04-21 | Kaesemeyer Wayne H. | Method and formulation for treating vascular disease |
| RU2306930C1 (en) * | 2005-12-28 | 2007-09-27 | Михаил Владимирович Покровский | Method for correction of endothelial dysfunction with combination of losartan and l-arginine in l-name-induced nitrogen deficit |
| RU2503961C2 (en) * | 2012-04-09 | 2014-01-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" (ГБОУ ВПО "РязГМУ Минздравсоцразвития России") | Method for assessing functional status of endothelium in experimental animals after reconstructive surgeries of abdominal aorta |
-
2015
- 2015-06-05 RU RU2015121673A patent/RU2611386C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050085548A1 (en) * | 1997-04-10 | 2005-04-21 | Kaesemeyer Wayne H. | Method and formulation for treating vascular disease |
| RU2306930C1 (en) * | 2005-12-28 | 2007-09-27 | Михаил Владимирович Покровский | Method for correction of endothelial dysfunction with combination of losartan and l-arginine in l-name-induced nitrogen deficit |
| RU2503961C2 (en) * | 2012-04-09 | 2014-01-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации" (ГБОУ ВПО "РязГМУ Минздравсоцразвития России") | Method for assessing functional status of endothelium in experimental animals after reconstructive surgeries of abdominal aorta |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| СУЧКОВ И. А., Коррекция эндотелиальной дисфункции в комплексном лечении больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей, Рязань, 2013, автореф. дис. д. м.н., с.48.. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720815C1 (en) * | 2019-10-11 | 2020-05-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of endothelial dysfunction correction in patients with secondary lymphedema of lower extremities |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2015121673A (en) | 2016-12-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| He et al. | TFEB-driven autophagy potentiates TGF-β induced migration in pancreatic cancer cells | |
| Schreml et al. | Luminescent dual sensors reveal extracellular pH-gradients and hypoxia on chronic wounds that disrupt epidermal repair | |
| Yu et al. | MARK4 controls ischaemic heart failure through microtubule detyrosination | |
| Manetti et al. | The IL1-like cytokine IL33 and its receptor ST2 are abnormally expressed in the affected skin and visceral organs of patients with systemic sclerosis | |
| Greenhalgh | Models of wound healing | |
| Zhang et al. | Epidermal growth factor receptor plays an anabolic role in bone metabolism in vivo | |
| US5976782A (en) | In-vitro angiogenesis assay | |
| JP2021519302A (en) | How to treat microresidual cancer | |
| Crump et al. | The reversible formation of cysteine sulfenic acid promotes B‐cell activation and proliferation | |
| Latzer et al. | Blocking VEGF by bevacizumab compromises electrophysiological and morphological properties of hippocampal neurons | |
| Walraven et al. | In vitro cultured fetal fibroblasts have myofibroblast-associated characteristics and produce a fibrotic-like environment upon stimulation with TGF-β1: Is there a thin line between fetal scarless healing and fibrosis? | |
| Lee et al. | Netrin-1-induced stem cell bioactivity contributes to the regeneration of injured tissues via the lipid raft-dependent integrin α6β4 signaling pathway | |
| Nunez‐Toldra et al. | Mechanosensitive molecular mechanisms of myocardial fibrosis in living myocardial slices | |
| Kuo et al. | Biochemical indicators of implantation success of tissue-engineered oral mucosa | |
| RU2611386C2 (en) | Method for estimating efficiency of endotheliotropic therapy after reconstructive operations on arteries | |
| Aw et al. | Microphysiological model of PIK3CA-driven vascular malformations reveals a role of dysregulated Rac1 and mTORC1/2 in lesion formation | |
| JP2013540276A (en) | Metakaryotic stem cells that heal wounds and methods of use thereof | |
| JP5560203B2 (en) | Method for in vitro maturation of follicles | |
| Kodama et al. | Sarpogrelate hydrochloride reduced intimal hyperplasia in experimental rabbit vein graft | |
| JP5016676B2 (en) | Methods for detecting the degree of immune system activation or cell death | |
| Fonfara et al. | The potential role of myocardial serotonin receptor 2B expression in canine dilated cardiomyopathy | |
| Yu et al. | The myristoylated alanine-rich C kinase substrate differentially regulates kinase interacting with stathmin in vascular smooth muscle and endothelial cells and potentiates intimal hyperplasia formation | |
| Koike et al. | Dynamic change of histone H2AX phosphorylation independent of ATM and DNA-PK in mouse skin in situ | |
| Kulikov et al. | Cardioprotective Effect of Soy Protein on a High-Salt Diet in Cynomolgus Monkeys | |
| Sevilla-Montero et al. | Direct effects of cigarette smoke in pulmonary arterial cells alter vascular tone through arterial remodeling and Kv7. 4 channel dysregulation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170606 |