RU2610536C1 - Method for simulating acute liver disease in pregnant women - Google Patents
Method for simulating acute liver disease in pregnant women Download PDFInfo
- Publication number
- RU2610536C1 RU2610536C1 RU2015145039A RU2015145039A RU2610536C1 RU 2610536 C1 RU2610536 C1 RU 2610536C1 RU 2015145039 A RU2015145039 A RU 2015145039A RU 2015145039 A RU2015145039 A RU 2015145039A RU 2610536 C1 RU2610536 C1 RU 2610536C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liver
- experimental
- animals
- days
- rats
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
- G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
- G09B23/00—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
- G09B23/28—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной патофизиологии, и может быть использовано для моделирования острого жирового гепатоза беременных (ОЖГБ).The invention relates to medicine, namely to experimental pathophysiology, and can be used to simulate acute fatty hepatosis in pregnant women (AHFS).
ОЖГБ является одним из самых тяжелых осложнений беременности, приводящих к высокой материнской и перинатальной смертности. Данная патология встречается редко, чем и обусловлены проблемы ее диагностики и лечения. Прогноз и исходы при ОЖГБ очень серьезны как для матери, так и для ребенка. Смерть обычно вызвана синдромом ДВС (диссеминированное внутрисосудистое свертывание), профузным кровотечением и печеночно-почечной недостаточностью. Успех лечения определяется, прежде всего, своевременным распознаванием этого заболевания и ранним родоразрешением, а также совершенствованием методов интенсивной терапии (именно данные мероприятия привели в последние десятилетия к увеличению показателей выживаемости).AHFS is one of the most severe pregnancy complications leading to high maternal and perinatal mortality. This pathology is rare, which is why the problems of its diagnosis and treatment are caused. The prognosis and outcomes of AHFS are very serious for both the mother and the child. Death is usually caused by DIC (disseminated intravascular coagulation), profuse bleeding, and hepatic-renal failure. The success of treatment is determined, first of all, by the timely recognition of this disease and early delivery, as well as by the improvement of intensive care methods (it is these measures that have led to an increase in survival rates in recent decades).
Этиология и патогенез ОЖГБ до настоящего времени изучены недостаточно. Согласно современным представлениям ОЖГБ относят к митохондриальным цитопатиям, при которых жировое перерождение печени является признаком системной патологии митохондрий, поражающей также почки, мышцы, нервную систему, поджелудочную железу, сердце.The etiology and pathogenesis of AHF has not been sufficiently studied to date. According to modern concepts, FGHB is classified as mitochondrial cytopathy, in which fatty degeneration of the liver is a sign of systemic pathology of mitochondria, which also affects the kidneys, muscles, nervous system, pancreas, heart.
Многие случаи ОЖГБ развивались вначале как вялотекущий гестоз, который часто бывает у беременной в III триместре, но только при ОЖГБ этот процесс приобретает совершенно другое качество. Маскируясь под вирусный гепатит, пищевую токсикоинфекцию и другие заболевания, ОЖГБ оставляет слишком мало времени для дифференциальной диагностики. В силу объективных причин лабораторные исследования зачастую «не успевают» к моменту, когда необходимо принимать решение о выборе акушерской тактики. К тому же клиническая медицина не располагает тестами, которые могли бы подтвердить развитие ОЖГБ, тесты скорее могут указать на отсутствие других заболеваний, с которыми его приходится дифференцировать. Быстрый и точный ответ на все вопросы могла бы дать пункционная биопсия печени, которую многие исследователи рекомендуют проводить с целью установления диагноза, однако угроза развития кровотечения при развивающемся синдроме ДВС ограничивает использование пункционной биопсии, к тому же далеко не во всех акушерских и инфекционных клиниках эта методика является рутинной.Many cases of AHFS developed initially as a sluggish preeclampsia, which often occurs in a pregnant woman in the third trimester, but only with AGBH this process acquires a completely different quality. Disguising itself as viral hepatitis, foodborne toxicosis, and other diseases, AHFS leaves too little time for differential diagnosis. For objective reasons, laboratory tests are often "not in time" by the time when it is necessary to decide on the choice of obstetric tactics. In addition, clinical medicine does not have tests that could confirm the development of AHFS, tests may more likely indicate the absence of other diseases with which it has to be differentiated. A quick and accurate answer to all questions could be given by a puncture biopsy of the liver, which many researchers recommend conducting a diagnosis, but the threat of bleeding in the developing syndrome of DIC limits the use of puncture biopsy, and this method is far from being available in all obstetric and infectious clinics. is a chore.
На сегодняшний день скорейшее родоразрешение больной с последующим тщательным наблюдением за ее состоянием считается средством выбора. Вместе с тем эти заболевания хорошо поддаются симптоматической терапии при условии ранней их диагностики, что способствует в конечном итоге снижению осложнений для матери и новорожденного.To date, the early delivery of the patient with subsequent careful monitoring of her condition is considered a means of choice. However, these diseases respond well to symptomatic therapy, provided they are diagnosed early, which ultimately helps to reduce complications for the mother and newborn.
Изучение патогенетических аспектов заболеваний печени, а также разработка новых подходов профилактики и лечения каждой патологии в отдельности проводится с использованием экспериментальных моделей конкретных заболеваний органов-мишеней.The study of pathogenetic aspects of liver diseases, as well as the development of new approaches to the prevention and treatment of each pathology separately, is carried out using experimental models of specific diseases of target organs.
В настоящее время существует около 20 моделей печеночной недостаточности, которые представляют собой модели наследственных дефектов печени, токсических и иммунных повреждений печени, спонтанных гепатитов, а так же хирургические модели печеночной недостаточности.Currently, there are about 20 models of liver failure, which are models of hereditary defects of the liver, toxic and immune damage to the liver, spontaneous hepatitis, as well as surgical models of liver failure.
У животных наиболее близкие к человеку морфологические изменения паренхимы печени возникают в экспериментальных условиях после интоксикации гепатотоксинами и являются наиболее эффективными моделями как для обнаружения характерных биохимических нарушений, возникающих при воздействии токсического агента, так и для поиска новых лекарственных средств, обладающих гепатотропными свойствами.In animals, the morphological changes of the liver parenchyma closest to humans occur under experimental conditions after hepatotoxin intoxication and are the most effective models both for detecting characteristic biochemical abnormalities that occur when exposed to a toxic agent, and for searching for new drugs with hepatotropic properties.
Введение гепатотоксинов остается самым простым способом индуцирования патологий печени у лабораторных животных (Terblanche J., Hickman R. Animal model of fulminant hepatic failure. Dig. Dis. Sci. 1991; 6:15-22)Administration of hepatotoxins remains the easiest way to induce liver pathologies in laboratory animals (Terblanche J., Hickman R. Animal model of fulminant hepatic failure. Dig. Dis. Sci. 1991; 6: 15-22)
К наиболее распространенным гепатотоксинам для создания моделей повреждения печени относятся: четыреххлористый углерод, ацетаминофен, ацетон, D - галактозамин гидрохлорид, этанол, α-нафтилизотиоцианат (АНИТ) и др. вещества.The most common hepatotoxins for creating liver damage models include: carbon tetrachloride, acetaminophen, acetone, D - galactosamine hydrochloride, ethanol, α-naphthyl isothiocyanate (ANIT) and other substances.
Жировой гепатоз, представляющий наибольший интерес в отношении моделирования данной патологии, является хроническим невоспалительным заболеванием. При этом заболевании происходит чрезмерное накопление жирных кислот и триглицеридов в гепатоцитах, что приводит сначала к нарушению клеточных функций, а позднее к гибели клеток и замещению функциональной ткани печени соединительной тканью. Возникновение данного заболевания происходит в результате нарушения метаболических процессов в клетках печени, зачастую вызванное воздействием токсических агентов.Fatty hepatosis, which is of most interest in modeling this pathology, is a chronic non-inflammatory disease. With this disease, an excessive accumulation of fatty acids and triglycerides in hepatocytes occurs, which leads first to a violation of cellular functions, and later to cell death and replacement of the functional liver tissue with connective tissue. The occurrence of this disease occurs as a result of metabolic processes in the liver cells, often caused by exposure to toxic agents.
Известен способ моделирования подострого гепатоза у крыс с использованием четыреххлористого углерода (CCl4). Модель CCl4-индуцированного острого токсического гепатита рекомендована Фармакологическим комитетом РФ как основной тест при скрининге потенциальных гепатозащитных средств (Venderovskiy A.I., Markova I.V., Saratikov A.S. Preclinical study of hepatoprotective remedies. Pharmacological committee statements. 1999; 2: 9-12).A known method of modeling subacute hepatosis in rats using carbon tetrachloride (CCl 4 ). The CCl 4 -induced acute toxic hepatitis model was recommended by the Russian Pharmacological Committee as the main test for screening potential hepatoprotective agents (Venderovskiy AI, Markova IV, Saratikov AS Preclinical study of hepatoprotective remedies. Pharmacological committee statements. 1999; 2: 9-12).
Четыреххлористый углерод является политропным химическим агентом, способным взаимодействовать с различными макромолекулами и структурами клетки, индуцировать в печени оксидативный сресс, вызывать колликвационный некроз, белковую и жировую дистрофию гепатоцитов. Гепатотоксический эффект CCl4 обусловлен повреждением клеточных структур свободными радикалами, образующимися при метаболизме этого соединения в эндоплазматическом ретикулуме печени. Оральное, внутрибрюшинное или подкожное введение CCl4 приводит к острому, обратимому повреждению печени. Оно характеризуется центродолевым некрозом, который сопровождается восстановлением тканей (Забродский П.Ф., Древко Б.И., Мандыч В.Г., Германчук В.Г., Балашов С.В., Кузьмин А.В. Изменение токсичности и иммунотоксичности тетрахлорметана и карбофоса под влиянием 2,4,6-трифенил-4Н-селенопирана и их связь с Р-450-зависимой монооксигеназной системой. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2008; 71:42-4).Carbon tetrachloride is a polytropic chemical agent capable of interacting with various macromolecules and cell structures, inducing oxidative stress in the liver, causing collicative necrosis, protein and fatty degeneration of hepatocytes. The hepatotoxic effect of CCl 4 is due to damage to cell structures by free radicals formed during the metabolism of this compound in the endoplasmic reticulum of the liver. Oral, intraperitoneal, or subcutaneous administration of CCl 4 leads to acute, reversible liver damage. It is characterized by central lobar necrosis, which is accompanied by tissue repair (Zabrodsky P.F., Drevko B.I., Mandych V.G., Germanchuk V.G., Balashov S.V., Kuzmin A.V. Change in toxicity and immunotoxicity of carbon tetrachloride and karbofos under the influence of 2,4,6-triphenyl-4H-selenopyran and their connection with the P-450-dependent monooxygenase system. Experimental and clinical pharmacology. 2008; 71: 42-4).
При введении четыреххлористого углерода кроме дистрофических изменений в печени описано поражение ЦНС, почек и поджелудочной железы. При использовании данной модели гибель животных составляет около 50%. Недостатками данного моделирования являются: длительность создания экспериментальной патологической модели (основной временной показатель - 21 день) и высокая токсичность четыреххлористого углерода, способного повреждать печень при всасывании через неповрежденные кожные покровы, что ограничивает широкое применение CCl4 для экспериментального моделирования (Хильчук М.А., Есауленко Е.Е., Быков И.М. Состояние системы про-/антиоксиданты и активность пищеварительных протеиназ у крыс при острой интоксикации четыреххлористым углеродом до и после коррекции растительными маслами. Медицинские науки. 2013; 1: 567-73).With the introduction of carbon tetrachloride, in addition to dystrophic changes in the liver, damage to the central nervous system, kidneys, and pancreas is described. Using this model, the death of animals is about 50%. The disadvantages of this simulation are: the duration of the creation of an experimental pathological model (the main time indicator is 21 days) and the high toxicity of carbon tetrachloride, which can damage the liver when absorbed through intact skin, which limits the widespread use of CCl 4 for experimental modeling (Khilchuk M.A., Esaulenko EE, Bykov IM The state of the pro / antioxidant system and the activity of digestive proteinases in rats during acute intoxication with carbon tetrachloride before and after follows vegetable oils correction of Medical Science 2013; 1:.. 567-73).
Животные модели ацетаминофен-индуцированной печеночной недостаточности используются в разработке и оценке потенциальной медикаментозной терапии для пациентов с передозировкой болеутоляющих средств (Miner D.J., Kissinger Р.Т. Evidence for the involvement of N-acetyl-p-quinoneimine in acetaminophen metabolism. Biochem Pharmacol. 1979: 28(22): 3285-90). Важнейшим агентом при повреждении печени, вызванной ацетаминофеном, считается его токсичный метаболит (N-ацетил-р-бензохинонимин), способный связываться с макромолекулами (Хубутия М.Ш., Темнов А.А., Вагабов В.А., Склифас А.Н., Рогов К.А., Жгутов Ю.А. Влияние кондиционированной среды и лизата стволовых клеток костного мозга на течение ацетаминофениндуцированной печеночной недостаточности. Клеточные технологии в биологии и медицине. 2015: 1. 3-9).Animal models of acetaminophen-induced liver failure are used in the development and evaluation of potential drug therapy for patients with an overdose of painkillers (Miner DJ, Kissinger R.T. Evidence for the participation of N-acetyl-p-quinoneimine in acetaminophen metabolism. Biochem Pharmacol. 1979 1979 : 28 (22): 3285-90). The most important agent for liver damage caused by acetaminophen is its toxic metabolite (N-acetyl-p-benzoquinoneimine) that can bind to macromolecules (Khubutia M.Sh., Temnov A.A., Vagabov V.A., Sklifas A.N. ., Rogov K.A., Zhgutov Yu.A. Influence of conditioned medium and bone marrow stem cell lysate on the course of acetaminophenin-induced liver failure. Cell technologies in biology and medicine. 2015: 1. 3-9).
Известен способ моделирования токсического поражения печени с помощью введения ацетона. Существует два метода введения: ингаляционный и внутрибрюшинный в виде раствора. Ингаляционное введение токсических веществ имеет ряд недостатков, таких как: трудности при создании и удержании на заданном уровне концентрации веществ в затравочных камерах. Все это приводит к низкой воспроизводимости результатов исследования. Внутрибрюшинное введение ацетона в виде смеси с физиологическим раствором через несколько часов вызывает развитие острого нарушения обменных процессов в печени. Результаты биохимических исследований указывают на токсическое поражение печени с достоверным нарушением белкового, углеводного и липидного обменов (Радловская Т., Губский Ю.И., Коваль М.В., Тиунова Л.В. Нарушение корреляционных отношений между гематологическими и биохимическими показателями у белых крыс при острой интоксикации ацетоном 1992. Патент SU 1767516, опубл. 07.10.1992, G09B 23/28).A known method of modeling toxic liver damage using the introduction of acetone. There are two methods of administration: inhalation and intraperitoneal in the form of a solution. Inhalation of toxic substances has several disadvantages, such as: difficulties in creating and maintaining at a given level the concentration of substances in the seed chambers. All this leads to low reproducibility of the research results. Intraperitoneal administration of acetone in the form of a mixture with saline after a few hours causes the development of acute metabolic disturbances in the liver. The results of biochemical studies indicate toxic liver damage with a significant violation of protein, carbohydrate and lipid metabolism (Radlovskaya T., Gubsky Yu.I., Koval M.V., Tiunova L.V. Violation of the correlation between hematological and biochemical parameters in white rats for acute intoxication with acetone 1992. Patent SU 1767516, publ. 07.10.1992, G09B 23/28).
Известен способ моделирования повреждения печени путем внутрижелудочного введения 40% раствора этилового спирта в течение недели. При этом повреждающее действие этанола носит полиорганный характер и приводит к морфологическим изменениям не только печени, но и миокарда, почек и др. органов. (Демидов В.И., Назаренко О.А., Егорова Е.Ю., Торшин И.Ю., Гришина Т.Р., Громова О.А. Эффективность применения препарата Прогепар при эксперементальном повреждении печени алкоголем и парацетамолом: биохимия и гистология. Фарматека. 2011; 2: 1-8).A known method of modeling liver damage by intragastric administration of a 40% solution of ethyl alcohol for a week. In this case, the damaging effect of ethanol is multi-organ in nature and leads to morphological changes not only in the liver, but also in the myocardium, kidneys and other organs. (Demidov V.I., Nazarenko O.A., Egorova E.Yu., Torshin I.Yu., Grishina TR, Gromova O.A. Efficacy of the use of Progepar in experimental liver damage with alcohol and paracetamol: biochemistry and Histology, Pharmateka. 2011; 2: 1-8).
В литературе также имеются данные о моделировании липемии, вызываемой введением препаратов Тритон WR-1339 (тилоксапол) и поликсамер 407 у мышей. Оба соединения вызывали резкое увеличение концентрации общего холестерина и триглицеридов. Эти модели используются для изучения механизма развития атеросклероза, а также представляют интерес в связи с тестированием новых гиполипидемических препаратов. Преимуществами этих моделей являются простота воспроизведения, низкая токсичность полимеров, дозозависимый эффект соединений при воспроизведении липемии разной степени выраженности (Логинова В.М., Тузиков Ф.В., Тузикова Н.А., Короленко Т.А. Сравнительная характеристика моделей липемии, вызываемых введением Тритона WR-1339 и поликсамера 407, у мышей. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2013; 2: 255-8).The literature also contains data on the modeling of lipemia caused by the administration of Triton WR-1339 (tyloxapol) and Polycamera 407 in mice. Both compounds caused a sharp increase in the concentration of total cholesterol and triglycerides. These models are used to study the mechanism of development of atherosclerosis, and are also of interest in connection with the testing of new lipid-lowering drugs. The advantages of these models are simplicity of reproduction, low toxicity of polymers, dose-dependent effect of compounds in reproducing lipemia of varying severity (Loginova V.M., Tuzikov F.V., Tuzikova N.A., Korolenko T.A. Comparative characteristics of lipemia models caused by the introduction of Triton WR-1339 and polycamera 407, in mice. Bulletin of experimental biology and medicine. 2013; 2: 255-8).
Перечисленные выше способы моделирования патологии печени в качестве объектов исследования рассматривают в большинстве случаев самцов разных видов животных (мышей, крыс, морских свинок, кроликов и др.), в то время как целью нашей работы было создание экспериментальной модели ОЖГ у самок в период беременности.The above methods of modeling liver pathology as objects of study are considered in most cases by males of different animal species (mice, rats, guinea pigs, rabbits, etc.), while the goal of our work was to create an experimental model of FGM in females during pregnancy.
Также недостатком ряда моделей является необходимость длительного введения препарата для достижения стойкого эффекта (21 день при моделировании CCl4- индуцированного острого токсического гепатита, 7 дней при алкогольной модели). Принимая во внимание, что ОЖГБ развивается у женщин в третьем триместре беременности, при экстраполяции этих сроков на продолжительность беременности грызунов (18-23 дня в зависимости от вида животных) моделирование интересующей нас патологии должно происходить в очень короткие сроки, учитывая необходимость проведения дальнейшей оценки эффективности фармакотерапии до наступления родов.Another drawback of a number of models is the need for long-term administration of the drug to achieve a lasting effect (21 days when modeling CCl 4 - induced acute toxic hepatitis, 7 days with the alcohol model). Considering that AHFS develops in women in the third trimester of pregnancy, when these terms are extrapolated to the duration of rodent pregnancy (18-23 days depending on the type of animal), the pathology we are interested in should be modeled in a very short time, given the need for a further assessment of the effectiveness pharmacotherapy before the onset of labor.
Согласно результатам проведенных патентных исследований и анализа научной медицинской литературы, несмотря на разнообразие существующих экспериментальных моделей патологии печени, авторы изобретения не обнаружили каких-либо упоминаний о модели печеночной недостаточности при беременности.According to the results of patent research and analysis of scientific medical literature, despite the variety of existing experimental models of liver pathology, the inventors did not find any mention of a model of liver failure in pregnancy.
Наиболее близким техническим решением является способ формирования гиперлипидемии у крыс путем введения клеточного детергента тилоксапола (Тритон WR-1339). В данном способе в качестве объекта используются крысы-самцы массой 250-300 г. Модель тритоновой гиперлипидемии вызывали при однократном внутрибрюшинном введении препарата в дозе 225 мг/кг. При этом происходит увеличение уровня холестерина в 5-6 раз, а триглицеридов - в 10-20 раз по сравнению с содержанием этих показателей у нормолипидемических животных (Окуневич И.В., Хныченко Л.К., Сапронов Н.С. / Средство, обладающее гиполипидемической и антиатеросклеротической активностью. Патент RU 2372897, опубл. 20.11.2009, А61К 31/18).The closest technical solution is a method of forming hyperlipidemia in rats by introducing the cell detergent tyloxapol (Triton WR-1339). In this method, male rats weighing 250-300 g are used as an object. The model of triton hyperlipidemia was induced with a single intraperitoneal administration of the drug at a dose of 225 mg / kg. In this case, there is an increase in cholesterol by 5-6 times, and triglycerides - by 10-20 times compared with the content of these indicators in normolipidemic animals (Okunevich I.V., Khnychenko L.K., Sapronov N.S. / Means, possessing lipid-lowering and anti-atherosclerotic activity (Patent RU 2372897, published on November 20, 2009, A61K 31/18).
Однако данный способ моделирования не предназначен для моделирования ОЖГБ, не содержит данных о возможных изменениях других биохимических показателей сыворотки крови, а также морфологическом состоянии печени модельных животных.However, this modeling method is not intended to simulate AHF, does not contain data on possible changes in other biochemical parameters of blood serum, as well as the morphological state of the liver of model animals.
Техническим результатом изобретения является оптимальный подбор дозы, кратности и сроков введения тилоксапола (Тритон WR-1339) для создания простого способа медикаментозного моделирования ОЖГБ, наиболее приближенного к клиническому течению данного заболевания, что подтверждается биохимическими показателями сыворотки крови и морфологическим состоянием печени модельных животных.The technical result of the invention is the optimal selection of the dose, multiplicity and timing of the administration of tyloxapol (Triton WR-1339) to create a simple method for drug modeling of AHFS, which is closest to the clinical course of the disease, which is confirmed by biochemical parameters of blood serum and morphological state of the liver of model animals.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе моделирования ОЖГБ, согласно изобретению, беременным самкам крыс вводят внутрибрюшинно водный раствор тилоксапола (Тритон WR-1339) в дозе 300 мг/кг ежедневно в течение четырех дней с 15-го по 18-й дни беременности.The specified technical result is achieved by the fact that in the method for simulating AHF according to the invention, pregnant female rats are injected intraperitoneally with an aqueous solution of tyloxapol (Triton WR-1339) at a dose of 300 mg / kg daily for four days from the 15th to the 18th days of pregnancy .
Известными признаками являются выбор экспериментального вида животных - крысы, а также препарат для моделирования патологии - Тритон WR-1339 (тилоксапол).Known signs are the choice of the experimental animal species - rats, as well as the drug for modeling pathology - Triton WR-1339 (tyloxapol).
Отличительными признаками являются:Distinctive features are:
- пол и состояние животных - беременные самки крыс (15-19 дни беременности);- gender and condition of animals - pregnant female rats (15-19 days of pregnancy);
- доза и кратность вводимого препарата - 300 мг/кг, в течение четырех дней с 15-го по 18-й дни беременности.- the dose and frequency of the administered drug is 300 mg / kg, for four days from the 15th to the 18th days of pregnancy.
Проведенные патентные исследования и анализ научной медицинской информации, отражающие методологию создания экспериментальных моделей патологии печени (ПП), не выявили технологий моделирования ПП на экспериментальных животных, содержащих всю совокупность существенных признаков заявленного изобретения. Таким образом, заявленное техническое решение соответствует критерию «новизна».The patent research and analysis of scientific medical information, reflecting the methodology for creating experimental models of liver pathology (PP), did not reveal technologies for modeling PP in experimental animals containing the entire set of essential features of the claimed invention. Thus, the claimed technical solution meets the criterion of "novelty."
Заявляемое изобретение может быть использовано в экспериментальной медицине и биологии согласно своему назначению и на этом основании оно соответствует критерию «промышленная применимость».The claimed invention can be used in experimental medicine and biology according to its purpose and, on this basis, it meets the criterion of "industrial applicability".
Предлагаемый способ не является простой модификацией известных способов, содержит новые признаки и дает новый технический результат, подтвержденный проведенными исследованиями.The proposed method is not a simple modification of known methods, contains new features and gives a new technical result, confirmed by studies.
Для создания модели ОЖГБ использовались белые крысы линии Вистар на 15-19 день беременности. Выбор вида экспериментальных животных объяснялся необходимостью при разработке модели ОЖГБ ежедневного взятия достаточного для биохимических исследований количества крови (1-1,5 мл) с минимальными последствиями для животных. Ежедневный анализ крови позволил вести мониторинг сывороточных показателей в зависимости от назначаемой дозы препарата и длительности его введения.White rats of the Wistar lineage were used on the 15-19th day of gestation to create an AHLH model. The choice of the type of experimental animals was explained by the need to develop a sufficient daily amount of blood (1-1.5 ml) for biochemical studies with the minimal consequences for animals when developing an AHB model. A daily blood test made it possible to monitor serum indices depending on the prescribed dose of the drug and the duration of its administration.
Учитывая имеющиеся в литературе разноречивые данные об используемой при моделировании патологии дозе тилоксапола (Тритон WR-1339), были проведены собственные пилотные исследования, которые показали, что однократное, внутрибрюшинное назначение Тритона WR-1339 (тилоксапол) в дозах менее 250 мг/кг, оказывало кратковременное и незначительное влияние на показатели сыворотки крови. Спустя вторые сутки все биохимические показатели крови экспериментальных животных, изменившиеся под влиянием введенного препарата, приходили в норму. Так авторами было установлено, что для создания стабильного эффекта требуется регулярное назначение препарата.Considering the conflicting data available in the literature about the dose of tyloxapol used in the modeling of pathology (Triton WR-1339), our own pilot studies were carried out, which showed that a single, intraperitoneal administration of Triton WR-1339 (tyloxapol) at doses less than 250 mg / kg had short-term and insignificant effect on blood serum indices. After the second day, all the biochemical blood parameters of the experimental animals, which changed under the influence of the injected drug, returned to normal. So the authors found that to create a stable effect requires regular administration of the drug.
Исследование, на котором основано изобретение, показало, что ежедневное внутрибрюшинное введение тилоксапола (Тритон WR-1339) в дозе 300 мг/кг в течение 4-х дней вызывало стойкий эффект и не приводило к гибели животных.The study on which the invention is based showed that daily intraperitoneal administration of tyloxapol (Triton WR-1339) at a dose of 300 mg / kg for 4 days caused a lasting effect and did not lead to the death of animals.
Для исследования было сформировано две группы крыс:For the study, two groups of rats were formed:
- контрольная группа (n=8) получала с 15 по 18 день беременности инъекции растворителя (вода для инъекций);- the control group (n = 8) received solvent injections (water for injection) from the 15th to the 18th day of pregnancy;
- подопытная группа (n=16) получала с 15 по 18 день беременности инъекции препарата Тритон WR-1339 (для гистологических исследований использовали материал от всех 16 животных, для биохимических - от 10 животных, что достаточно для выявления статистически значимых различий даже при повторных, множественных, сравнениях).- the experimental group (n = 16) received injections of the Triton WR-1339 preparation from the 15th to the 18th day of pregnancy (material from all 16 animals was used for histological studies, from 10 animals for biochemical studies, which is sufficient to detect statistically significant differences even after repeated multiple comparisons).
Животных обеих групп ежедневно осматривали, определяли массу тела для расчета дозы вводимого препарата и в конце эксперимента - относительной массы печени. За время опыта не было случаев падежа животных (16 выживших из 16 подопытных крыс; вероятность выживания выше 75% от общего числа, вероятность ошибки этого утверждения - 0,01, подсчитано точным биномиальным критерием). Стоит отметить, что на фоне препарата в подопытной группе по сравнению с контрольной отмечалась вялость и апатия животных. Эвтаназию всех животных осуществляли путем декапитации под эфирным наркозом в соответствии с требованиями Европейской конвенции по защите экспериментальных животных 86/609 EEC [European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for exsperimental and other scientific purposes. Strasburg: Council of Europe, 1986: 51]. Оценивались биометрические показатели: вес крысы, относительная и абсолютная масса печени. Для проведения гистологического исследования ткани печени (центральной части правой доли органа) фрагмент органа фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, приготовленного на 0,07 М фосфатном буфере (рН=6,98). Обезвоживание тканей проводили в этиловом спирте возрастающей концентрации и заливали в парапласт. Далее с помощью микротома (модель pfm Rotary 3002, Германия) готовили срезы толщиной 3-5 мкм. Для гистологических исследований срезы ткани печени окрашивали гематоксилином и эозином по Романовскому. Препараты исследовали при помощи микроскопа фирмы «01ympus СХ31» (Япония) (ув. ×400).Animals of both groups were examined daily, body weight was determined to calculate the dose of the drug administered and, at the end of the experiment, the relative liver mass. During the experiment, there were no cases of death of animals (16 survivors from 16 experimental rats; the probability of survival is above 75% of the total number, the probability of error of this statement is 0.01, calculated by the exact binomial criterion). It is worth noting that against the background of the drug in the experimental group, compared with the control group, lethargy and apathy of animals were noted. All animals were euthanized by decapitation under ether anesthesia in accordance with the requirements of the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for exsperimental and other scientific purposes. Strasburg: Council of Europe, 1986: 51]. Biometric indicators were evaluated: rat weight, relative and absolute liver mass. For histological examination of liver tissue (the central part of the right lobe of the organ), a fragment of the organ was fixed in a 10% solution of neutral formalin prepared in 0.07 M phosphate buffer (pH = 6.98). Tissue dehydration was carried out in ethanol of increasing concentration and poured into paraplast. Then, using a microtome (model pfm Rotary 3002, Germany), sections 3-5 microns thick were prepared. For histological studies, sections of liver tissue were stained with hematoxylin and eosin according to Romanovsky. The preparations were examined using a 01ympus CX31 microscope (Japan) (enlarged × 400).
При биохимических исследованиях сыворотки крови определяли 12 основных показателей: активности трансаминаз (ACT, АЛТ), содержание желчных кислот, билирубина, активности холинэстеразы, глутаматдегидрогеназы (ГлДГ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), концентрация общего белка, мочевины, триглицеридов, холестерина, активность щелочной фосфатазы (ЩФ) (фиг. 1). Далее в тексте для описания изменений используются структурные средние значения - медианы. During biochemical studies of blood serum, 12 main indicators were determined: transaminase activity (ACT, ALT), bile acid content, bilirubin, cholinesterase activity, glutamate dehydrogenase (GlDG), lactate dehydrogenase (LDH), total protein concentration, urea, triglycerides, alkaline cholesterol, (Alkaline phosphatase) (Fig. 1). The rest of the text uses structural averages — medians — to describe the changes.
Наиболее значительные изменения были отмечены для показателей липидного обмена - триглицеридов и холестерина, уровень которых вырос в 80 и 15 раз, соответственно. Также значимо выросли активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) - в 5,4 раза, концентрация желчных кислот и активность глутаматдегидрогеназы (ГлДГ) - в 3 раза, ACT - в 2 раза, АЛТ - в 1,3 раза. Повышение активности ферментов трансаминаз (АЛТ, ACT) и ЛДГ свидетельствовало о повреждении целостности клеток, развитии цитолитического синдрома. При этом наблюдалось значимое снижение в сыворотке крови экспериментальных животных концентрации холинэстеразы и уровня общего белка (в 1,5 раза). Вместе с тем активность ЩФ и уровни билирубина и мочевины оставался без значимых изменений. Подобные изменения биохимических показателей крови могут указывать на жировую дегенерацию печени, быть следствием холестаза любой этиологии, а также наблюдаться при остром вирусном, лекарственном и гипоксическом гепатите, циррозе печени.The most significant changes were noted for indicators of lipid metabolism - triglycerides and cholesterol, the level of which increased by 80 and 15 times, respectively. The activity of lactate dehydrogenase (LDH) also increased significantly - by 5.4 times, the concentration of bile acids and the activity of glutamate dehydrogenase (GlDG) - 3 times, ACT - 2 times, ALT - 1.3 times. An increase in the activity of transaminase enzymes (ALT, ACT) and LDH indicated damage to the integrity of cells, the development of cytolytic syndrome. At the same time, a significant decrease in the blood serum of experimental animals was observed in the concentration of cholinesterase and the level of total protein (1.5 times). However, the activity of alkaline phosphatase and the levels of bilirubin and urea remained unchanged. Such changes in blood biochemical parameters can indicate fatty degeneration of the liver, be a consequence of cholestasis of any etiology, and also be observed in acute viral, drug and hypoxic hepatitis, cirrhosis.
Еще одним доказательством развития модели ОЖГ у беременных животных послужило морфологическое исследование образцов печени самок крыс получавших с 15-го дня беременности четырехдневные внутрибрюшинные инъекции тилоксапола (Тритон WR-1339).Morphological study of liver samples of female rats who received four-day intraperitoneal injections of tyloxapol (Triton WR-1339) from the 15th day of pregnancy also provided further evidence for the development of an FGM model in pregnant animals.
При макроскопическом исследовании печень подопытных крыс была рыхлая, с оливковым оттенком и наличием вкраплений.При этом масса органа не отличалась при сравнении с контрольной группой (медианы в контрольной и подопытной группе составили 4,32 и 4,30 г на 100 г массы животного соответственно). Macroscopic examination of the liver of experimental rats was loose, with an olive tint and the presence of inclusions. However, the mass of the organ did not differ when compared with the control group (the medians in the control and experimental groups were 4.32 and 4.30 g per 100 g of animal weight, respectively) .
Во всех исследуемых образцах печени животных контрольной группы гистологическое строение органа было представлено балочным строением. Выявлялось небольшое число гепатоцитов с кариопикнозом ядер, наиболее часто отмечаемое в периферической зоне долек. Центральные вены характеризовались округлым строением, синусоидные капилляры имели узкий просвет и умеренное или слабо выраженное кровенаполнение. Отмечалась скудная мононуклеарная инфильтрация, пролиферация печеночных макрофагов отсутствовала.In all studied samples of the liver of animals of the control group, the histological structure of the organ was represented by the beam structure. A small number of hepatocytes with karyopiches of nuclei were detected, most often noted in the peripheral zone of the lobules. The central veins were characterized by a rounded structure, sinusoidal capillaries had a narrow lumen and moderate or weakly expressed blood filling. Scanty mononuclear infiltration was noted, proliferation of hepatic macrophages was absent.
Гистологическое исследование образцов печени экспериментальной группы показало, что балочное строение сохранено лишь в половине исследуемых случаев. При этом в трети случаев отмечалось нарушение балочного строения с хаотичным распределением гепатоцитов и в каждом десятом случае балочная структура печени была сохранена только в перицентральных зонах печеночных долек. В одном из образцов был обнаружен диффузный некроз.Histological examination of liver samples of the experimental group showed that the beam structure was preserved in only half of the studied cases. Moreover, in one third of cases, there was a violation of the beam structure with a random distribution of hepatocytes and in every tenth case, the beam structure of the liver was preserved only in the pericentral zones of the hepatic lobules. In one of the samples, diffuse necrosis was detected.
Дистрофические изменения гепатоцитов выявлены во всех исследуемых образцах. В 22,2% случаев была обнаружена слабая степень зернистой дистрофии гепатоцитов в перицентральной зоне, а также в 33,3% выявлена умеренная степень дистрофических изменений гепатоцитов как с перицентральной, так и с периферической локализацией. Чуть менее чем в половине случаев в гепатоцитах выявлялись слабые кариопикнотические изменения, такие гепатоциты располагались диффузно и очагово среди неизмененных клеток. В 27,8% случаев обнаруживалось сочетание кариопикнотических и кариолитических изменений. Кариолитические изменения выявлялись в трети образцах как в виде мелко, так и в виде крупноочаговых скоплений.Dystrophic changes in hepatocytes were detected in all studied samples. In 22.2% of cases, a weak degree of granular degeneration of hepatocytes in the pericentral zone was detected, and also in 33.3% a moderate degree of degenerative changes in hepatocytes with both pericentral and peripheral localization was revealed. In slightly less than half the cases, weak karyopiknotic changes were detected in the hepatocytes; such hepatocytes were located diffusely and focally among the unchanged cells. In 27.8% of cases, a combination of karyopicnotic and karyolytic changes was detected. Cariolytic changes were detected in one third of the samples both in the form of small and large focal clusters.
Паренхиматозная жировая дистрофия печени присутствовала в 44,4% случаев. Выявлялось ожирение с некробиозом гепатоцитов и ожирение с мезенхимально-клеточной реакцией без перестройки дольковых структур печени. Превалировала мелкокапельная и крупнокапельная жировая дистрофия, определяющаяся в 75,0 и 25,0% случаев соответственно.Parenchymal fatty degeneration of the liver was present in 44.4% of cases. Obesity was revealed with necrobiosis of hepatocytes and obesity with a mesenchymal-cell reaction without restructuring of lobular structures of the liver. Small droplet and large droplet fatty degeneration prevailed, which was determined in 75.0 and 25.0% of cases, respectively.
Сосудистый компонент: в трети исследуемых образцов выявлялась деформация центральных вен за счет расширения перицентральных синусоидальных капилляров с преобладанием слабой степени расширения в 66,7%. Умеренная степень изменений синусоидальных капилляров выявлялась в 33,3% случаев, причем в одном из образцов с лимфостазами. Расширение синусоидальных капилляров без деформации центральных вен преобладала во всех исследуемых образцах. Умеренная степень расширения синусоидальных капилляров отмечалась в 88,9% от общего числа патологического процесса, не затрагивающего перицентральное сосудистое русло, и лишь в одном случае была выявлена слабая степень расширения. Патологические изменения со стороны синусоидальных капилляров отсутствовали в 16,7% образцах.Vascular component: in one third of the studied samples, deformation of the central veins was detected due to the expansion of pericentral sinusoidal capillaries with a predominance of a weak degree of expansion of 66.7%. A moderate degree of changes in sinusoidal capillaries was detected in 33.3% of cases, moreover, in one of the samples with lymphostases. The expansion of sinusoidal capillaries without deformation of the central veins prevailed in all the studied samples. A moderate degree of expansion of sinusoidal capillaries was observed in 88.9% of the total number of the pathological process that does not affect the pericentral vascular bed, and only in one case a weak degree of expansion was detected. Pathological changes from the sinusoidal capillaries were absent in 16.7% of the samples.
При исследовании печеночной триады в исследуемом материале патологические изменения были выявлены более чем в половине случаев. Среди изменений со стороны структуры в 55,6% случаев отмечалась эктазия печеночных вен как в сочетании с эктазией желчевыводящих протоков, так и в самостоятельной форме, в отдельных случаях отмечался периваскулярный некроз гепатоцитов. Частота выявления эктазии печеночных вен составила 70,0%.When examining the hepatic triad in the test material, pathological changes were detected in more than half of the cases. Among structural changes, ectasia of the hepatic veins was noted in 55.6% of cases, both in combination with ectasia of the bile duct and in an independent form; in some cases, perivascular necrosis of hepatocytes was noted. The detection rate of hepatic vein ectasia was 70.0%.
Помимо патологических изменений среди структурных компонентов печени самок крыс отдельно стоит отметить наличие инфильтрации как пролиферативного и экссудативного, так и смешанного типа.In addition to pathological changes among the structural components of the liver of female rats, it is worth noting separately the presence of infiltration of both proliferative, exudative, and mixed type.
Таким образом, гистологическое исследование показало, что на фоне беременности позднего срока (15-18 дни беременности) четырехдневные инъекции тилоксапола (Тритон WR-1339) приводят к патологическим изменениям печени со стороны гепатоцитов и их ядер, балочного строения долек печени и сосудистого компонента.Thus, histological examination showed that, against the background of late pregnancy (15-18 days of pregnancy), four-day injections of tyloxapol (Triton WR-1339) lead to pathological changes in the liver from hepatocytes and their nuclei, the beam structure of the liver lobules and the vascular component.
По совокупности результатов биохимических и гистологических исследований можно сделать вывод о том, что 4-дневное внутрибрюшинное введение беременным крысам (на 15-18 день беременности) тилоксапола (Тритон WR-1339) в дозе 300 мг/кг приводит к токсическому поражению печени по типу ОЖГ.Based on the totality of the results of biochemical and histological studies, it can be concluded that 4-day intraperitoneal administration of tyloxapol (Triton WR-1339) at a dose of 300 mg / kg to pregnant rats (Triton WR-1339) leads to toxic liver damage by the type of fat burning .
Способ иллюстрируется фиг. 1-5, где:The method is illustrated in FIG. 1-5, where:
На фиг. 1 представлены результаты биохимического исследования сыворотки крови контрольных и подопытных животных. Горизонтальная линия внутри бокса - медиана; верхняя и нижняя границы бокса - третий и первый квартили соответственно; усы - нулевой и четвертый квартили; отдельные точки - выбросы.In FIG. 1 presents the results of a biochemical study of blood serum of control and experimental animals. The horizontal line inside the box is the median; the upper and lower boundaries of boxing are the third and first quartiles, respectively; mustache - zero and fourth quartiles; individual points are emissions.
На фиг. 2 изображен гистологический срез ткани печени крыс подопытной группы. На препарате представлен кариопикноз и кариолизис ядер гепатоцитов. Окраска гематоксилин и эозин, ×400.In FIG. 2 shows a histological section of the liver tissue of rats of the experimental group. The preparation presents karyopyknosis and karyolysis of hepatocyte nuclei. Coloring hematoxylin and eosin, × 400.
На фиг. 3 изображен гистологический срез ткани печени крыс подопытной группы. На препарате показана деформация центральной вены, нарушение балочного строения с эктазией синусоидных капилляров и пролиферация печеночных макрофагов. Окраска гематоксилин и эозин, ×400.In FIG. 3 shows a histological section of the liver tissue of rats of the experimental group. The preparation shows the deformation of the central vein, violation of the beam structure with ectasia of the sinusoidal capillaries and proliferation of hepatic macrophages. Coloring hematoxylin and eosin, × 400.
На фиг. 4 изображен гистологический срез ткани печени крыс подопытной группы. На препарате показана мелкокапельная жировая дистрофия гепатоцитов. Окраска гематоксилин и эозин, ×400.In FIG. 4 shows a histological section of the liver tissue of rats of the experimental group. The drug shows small-drop fatty degeneration of hepatocytes. Coloring hematoxylin and eosin, × 400.
Созданная модель ОЖГБ имеет несомненную экономическую привлекательность, т.к. разработана на наиболее доступном биологическом виде животных - крысах, и проводится с выживаемостью животных выше 75% (р=0,01). Создание такой модели делает возможным проведение экспериментов, постановка которых в клинике является практически неосуществимой. Новая модель ГШ может быть использована для проведения скрининга как вновь синтезированных, так и применяющихся в клинике фармакологических средств, обладающих гепатотропной активностью.The created OZHGB model has undoubted economic attractiveness, because It was developed on the most accessible animal species — rats, and is performed with animal survival rates above 75% (p = 0.01). The creation of such a model makes it possible to conduct experiments, the formulation of which in the clinic is practically impossible. The new GS model can be used to screen both newly synthesized and used in the clinic pharmacological agents with hepatotropic activity.
Таким образом, проведенные исследования позволили получить новый способ моделирования ОЖГБ, наиболее приближенный к клиническому течению заболевания, подтвержденный морфологическим анализом печени и биохимическими показателями крови. Предложенная модель проста в исполнении и характеризуется высокой выживаемостью экспериментальных животных.Thus, the studies carried out allowed us to obtain a new method for the modeling of GBV, which is closest to the clinical course of the disease, confirmed by morphological analysis of the liver and biochemical blood parameters. The proposed model is simple to implement and is characterized by high survivability of experimental animals.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015145039A RU2610536C1 (en) | 2015-10-20 | 2015-10-20 | Method for simulating acute liver disease in pregnant women |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015145039A RU2610536C1 (en) | 2015-10-20 | 2015-10-20 | Method for simulating acute liver disease in pregnant women |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2610536C1 true RU2610536C1 (en) | 2017-02-13 |
Family
ID=58458581
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015145039A RU2610536C1 (en) | 2015-10-20 | 2015-10-20 | Method for simulating acute liver disease in pregnant women |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2610536C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2732873C1 (en) * | 2019-08-06 | 2020-09-24 | Федеральное Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Дагестанский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for simulating non-developing pregnancy in rats under experimental conditions |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2372897C1 (en) * | 2008-04-18 | 2009-11-20 | Государственное учреждение Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Российской Академии медицинских наук (ГУ НИИЭМ РАМН) | Agent with hypolipidemic and antiatherosclerotic action |
| JP2010051277A (en) * | 2008-08-29 | 2010-03-11 | Noribumi Kawada | Non-human disordered model animal deleted in cytoglobin gene function |
| RU2487421C1 (en) * | 2011-11-10 | 2013-07-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Пятигорский государственный научно-исследовательский институт курортологии Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУ ПГНИИК ФМБА России) | Method for simulating carbon tetrachloride-induced toxic damage in toxicological experiment |
| JP2014036613A (en) * | 2012-08-16 | 2014-02-27 | Toyama Univ | Model animal of cholestatic disorder and preparation method thereof |
| RU2013146757A (en) * | 2013-10-18 | 2015-04-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации | METHOD FOR MODELING NSAID-HEPATOPATHY IN EXPERIMENT |
-
2015
- 2015-10-20 RU RU2015145039A patent/RU2610536C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2372897C1 (en) * | 2008-04-18 | 2009-11-20 | Государственное учреждение Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Российской Академии медицинских наук (ГУ НИИЭМ РАМН) | Agent with hypolipidemic and antiatherosclerotic action |
| JP2010051277A (en) * | 2008-08-29 | 2010-03-11 | Noribumi Kawada | Non-human disordered model animal deleted in cytoglobin gene function |
| RU2487421C1 (en) * | 2011-11-10 | 2013-07-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Пятигорский государственный научно-исследовательский институт курортологии Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУ ПГНИИК ФМБА России) | Method for simulating carbon tetrachloride-induced toxic damage in toxicological experiment |
| JP2014036613A (en) * | 2012-08-16 | 2014-02-27 | Toyama Univ | Model animal of cholestatic disorder and preparation method thereof |
| RU2013146757A (en) * | 2013-10-18 | 2015-04-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации | METHOD FOR MODELING NSAID-HEPATOPATHY IN EXPERIMENT |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| KWON RH et al. Protection of Saururus Chinensis Extract against Liver Oxidative Stress in Rats of Triton WR-1339-induced Hyperlipidemia. Toxicol Res. 2014 Dec;30(4):291-6. ROUSSEL C Influence of hepatic intoxication on the reactions of the pregnant rat subjected to a teratogenic agent, Triton W.R. 1339]. C R Seances Soc Biol Fil. 1967;161(4):758-62. * |
| ПУНГИНА М. Ю. и др. Дифференциальная диагностика холестатического гепатоза беременных и реабилитация в послеродовом периоде. Российский вестник акушера-гинеколога, 2006, Т. 6, N 3, С. 60-65. * |
| ПУНГИНА М. Ю. и др. Дифференциальная диагностика холестатического гепатоза беременных и реабилитация в послеродовом периоде. Российский вестник акушера-гинеколога, 2006, Т. 6, N 3, С. 60-65. KWON RH et al. Protection of Saururus Chinensis Extract against Liver Oxidative Stress in Rats of Triton WR-1339-induced Hyperlipidemia. Toxicol Res. 2014 Dec;30(4):291-6. ROUSSEL C Influence of hepatic intoxication on the reactions of the pregnant rat subjected to a teratogenic agent, Triton W.R. 1339]. C R Seances Soc Biol Fil. 1967;161(4):758-62. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2732873C1 (en) * | 2019-08-06 | 2020-09-24 | Федеральное Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Дагестанский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for simulating non-developing pregnancy in rats under experimental conditions |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Acuff-Smith et al. | Stage-specific effects of prenatal d-methamphetamine exposure on behavioral and eye development in rats | |
| Ciaranello et al. | Effect of dexamethasone on phenylethanolamine N‐methyltransferase in chromaffin tissue of the neonatal rat | |
| Klein et al. | The use of cultured rat embryos to evaluate the teratogenic activity of serum: cadmium and cyclophosphamide | |
| Ahmad et al. | Lithium induced toxicity in rats: blood serum chemistry, antioxidative enzymes in red blood cells and histopathological studies | |
| Peleg-Raibstein et al. | Amphetamine sensitization in rats as an animal model of schizophrenia | |
| TW200538738A (en) | Molecular flux rates through critical pathways measured by stable isotope labeling in vivo, as biomarkers of drug action and disease activity | |
| Boini et al. | Instigation of NLRP3 inflammasome activation and glomerular injury in mice on the high fat diet: role of acid sphingomyelinase gene | |
| Wang et al. | Curcumin prevents the non-alcoholic fatty hepatitis via mitochondria protection and apoptosis reduction | |
| EA034524B1 (en) | Oxygenated cholesterol sulfates for treating attenuated leptin activity | |
| Lim et al. | Young Ossabaw pigs fed a western diet exhibit early signs of diabetic retinopathy | |
| Kook et al. | Effects of iatrogenic hypercortisolism on gallbladder sludge formation and biochemical bile constituents in dogs | |
| Jiang et al. | Acetyl-11-keto-β-boswellic acid extracted from Boswellia serrata promotes Schwann cell proliferation and sciatic nerve function recovery | |
| RU2610536C1 (en) | Method for simulating acute liver disease in pregnant women | |
| Aguilar-Arredondo et al. | Memory retrieval-induced activation of adult-born neurons generated in response to damage to the dentate gyrus | |
| TWI544921B (en) | Use of osthole for manufacturing composition for treating focal segmental glomerulosclerosis | |
| Loomba et al. | Combination therapies including cilofexor and firsocostat for bridging fibrosis and cirrhosis due to NASH | |
| TW202304494A (en) | Use of terpenoids in the treatment or prevention of fibrotic diseases | |
| Windsor et al. | An investigation of routes of administration of heparin other than injection | |
| RU2453002C1 (en) | Method of simulating multiple organ pathology in rats | |
| RU2598351C1 (en) | Method of simulating non-alcoholic steatohepatitis in rats | |
| Xiao et al. | Thirty-day rat toxicity study reveals reversible liver toxicity of mifepristone (RU486) and metapristone | |
| RU2487421C1 (en) | Method for simulating carbon tetrachloride-induced toxic damage in toxicological experiment | |
| Temiz et al. | Effect of sodium phenytoin concentration on neural tube development in the early stages of chicken embryo development | |
| Martin et al. | Multiple system atrophies: a neuropathological and neurochemical study | |
| Diamond et al. | Ameliorative effects of dietary protein restriction in chronic aminonucleoside nephrosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181021 |