RU2603085C1 - Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий pseudomonas aeruginosa к бета-лактамным антибиотикам - Google Patents

Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий pseudomonas aeruginosa к бета-лактамным антибиотикам Download PDF

Info

Publication number
RU2603085C1
RU2603085C1 RU2015154551/10A RU2015154551A RU2603085C1 RU 2603085 C1 RU2603085 C1 RU 2603085C1 RU 2015154551/10 A RU2015154551/10 A RU 2015154551/10A RU 2015154551 A RU2015154551 A RU 2015154551A RU 2603085 C1 RU2603085 C1 RU 2603085C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
resistance
pseudomonas aeruginosa
nutrient medium
antibiotic
lactam antibiotics
Prior art date
Application number
RU2015154551/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Александр Александрович Баранов
Игорь Викторович Чеботарь
Николай Андреевич Маянский
Юлия Александровна Бочарова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр здоровья детей" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НЦЗД" Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр здоровья детей" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НЦЗД" Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр здоровья детей" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НЦЗД" Минздрава России)
Priority to RU2015154551/10A priority Critical patent/RU2603085C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2603085C1 publication Critical patent/RU2603085C1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к санитарной микробиологии. Дифференциально-диагностическая питательная среда содержит аланин, натрия хлорид и дистиллированную воду в заданных соотношениях компонентов. Изобретение позволяет определить порин-зависимые механизмы устойчивости к бета-лактамным антибиотикам у бактерий Pseudomonas aeruginosa. 1 табл., 1 пр.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно иммунологическим препаратам, для исследования антибиотикорезистентности бактерий. Изобретение может быть использовано в диагностических целях в клинической микробиологии.
Искусственные питательные среды являются субстанциями, которые предназначаются для решения важных микробиологических задач. В зависимости от назначения питательные среды подразделяются на несколько типов: 1) основные, 2) элективные, 3) консервирующие и транспортные, 3) дифференциально-диагностические [Поляк М.С., Сухаревич В.И., Сухаревич М.Э. Питательные среды для медицинской микробиологии. - Санкт-Петербург: НИЦФ. 2002; 80 с.]. Основные питательные среды предназначены для воспроизведения роста и размножения микроорганизмов и накопления их биомассы в микробиологии и биотехнологических процессах. Консервирующие и транспортные питательные среды предназначены для длительного сохранения жизнеспособности микроорганизмов, находящихся в этих средах. Дифференциально-диагностические среды предназначены для определения таксономической принадлежности микроорганизмов и изучения свойств микроорганизмов [Поляк М.С., Сухаревич В.И., Сухаревич М.Э. Питательные среды для медицинской микробиологии. - Санкт-Петербург: НИЦФ. 2002; 80 с.]. Свойства микроорганизмов, изучаемые при помощи дифференциально-диагностических сред, определяются на основе возможности микроорганизма воздействовать на тот или иной субстрат (сахар, аминокислоту, спирт, белок и др.), трансформируя (ферментация, окисление) или ассимилируя его.
Одним из самых распространенных и опасных бактериальных возбудителей в современной медицине является синегнойная палочка Pseudomonas aeruginosa [Руднов В. А., Бельский Д.В., Дехнич А.В. Инфекции в ОРИТ России: результаты национального многоцентрового исследования // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2011. - Т. 13. - №. 4. - С. 294-304; Rice L. В. Federal funding for the study of antimicrobial resistance in nosocomial pathogens: no ESKAPE. Journal of Infectious Diseases. - 2008. - Vol. 197. - №8. - Р. 1079-1081]. Лечение тяжелой синегнойной инфекции является неэффективным, если антибиотики назначаются без предварительного исследования устойчивости (резистентности) к антибиотикам у изолированного из патологического локуса штамма Pseudomonas aeruginosa [Лазарева А.В., Чеботарь И.В., Крыжановская О.А., Чеботарь В.И., Маянский НА. Pseudomonas aeruginosa: патогенность, патогенез и патология. - Клин микробиол антимикроб химиотер. - 2015. - Т. 17. №3. - С. 170-186]. Полное исследование антибиотикорезистентности должно включать в себя не только выявление факта резистентности, но и определение механизмов ее формирования [EUCAST Expert rules in antimicrobial susceptibility testing. Данные с сайта «The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST); режим доступа:http:www.eucast.org»]. Самые важные механизмы резистентности бактерий к антибиотикам, в том числе и Pseudomonas aeruginosa, возникают за счет: 1) фермент-зависимого разрушения антибиотика, 2) нарушения транспорта антибиотика внутрь клетки через мембранные порины или порин-зависимой резистентности, 3) активации выведения (эффлюкс) препарата из клетки во внешнюю среду [Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии / под ред. Л.С. Страчунского, Ю.Б. Белоусова, С.Н. Козлова. - Смоленск: НИИАХ СГМА, 2002. - 586 с.]. Особенно значимым является определение уровня и механизмов резистентности Pseudomonas aeruginosa к β-лактамным антибиотикам [Livermore D.М. Role of beta-lactamase and impermeability in the resistance of Pseudomonas aeruginosa // Antibiotics and chemotherapy. - 1989. - T. 42. - C. 257-263].
Для оценки антибиотикорезистентности бактерий Pseudomonas aeruginosa in vitro применяются различные варианты питательных сред:
1. К наиболее известной группе относятся обычные питательные среды, на которых подавление роста бактерий осуществляется под воздействием антибиотика, который диффундирует в питательные среду из внешнего объекта. Самым известным и распространенным является способ определения антибиотикорезистентности, основанный на диффузии антибиотика в плотную питательную среду из предварительно обработанных антибиотиком дисков. При помощи таких сред реализуется диско-диффузионный способ оценки антибиотикорезистентности [Клинические рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам». Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации. Москва, Ноябрь 2014]. Способ заключается в том, что на поверхность плотной питательной среды (например, агар Мюллера-Хинтона) в чашке Петри наносят бактериальную суспензию тестируемого микроорганизма определенной плотности, затем на поверхность этой питательной среды помещают диски, содержащие антибиотик. Диффузия антибиотика в плотную питательную среду приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. Результат учитывается по величине диаметра зоны подавления роста вокруг диска, измеренной в миллиметрах. Результат интерпретируется согласно принятым нормативным документам [Клинические рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам». Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации. Москва, Ноябрь 2014; EUCAST Clinical breakpoints - bacteria. Данные с сайта «The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST)»; режим доступа: http://www.eucast.org]. Указанные питательные среды позволяют количественно оценить резистентность изучаемой бактерии к какому-либо антибиотику, но имеют существенный недостаток, который заключается в том, что их использование не позволяет вскрыть ни один из механизмов антибиотикорезистентности конкретной бактерии.
2. Другим известным примером сред для определения антибиотикорезистентности, являются среды, в состав которых добавлен антибиотик. При помощи таких сред осуществляется способ последовательных (серийных) разведений [ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010. Клинические лабораторные исследования и диагностические тест-системы in vitro. Исследование чувствительности инфекционных агентов и оценка функциональных характеристик изделий для исследования чувствительности к антимикробным средствам. Часть 1. Референтный метод лабораторного исследования активности антимикробных агентов против быстрорастущих аэробных бактерий, вызывающих инфекционные болезни]. Способ основан на определении минимальной концентрации (МПК) антибиотика, подавляющего размножение бактерий изучаемого штамма путем тестирования двукратных разведений антибиотика в питательной среде в диапазоне концентраций от 512 до 0,125 мкг/мл. Способ последовательных (серийных) разведений выполняется в двух вариантах - на плотных питательных средах (агарах) и на жидких питательных средах (бульонах). Результаты учитываются на основе визуальной либо аппаратной оценки микробного роста и интерпретируется согласно принятым нормативным документам [ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010. Клинические лабораторные исследования и диагностические тест-системы in vitro. Исследование чувствительности инфекционных агентов и оценка функциональных характеристик изделий для исследования чувствительности к антимикробным средствам. Часть 1. Референтный метод лабораторного исследования активности антимикробных агентов против быстрорастущих аэробных бактерий, вызывающих инфекционные болезни; Клинические рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам». Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации. Москва, Ноябрь 2014; EUCAST Clinical breakpoints - bacteria. Данные с сайта «The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST)»; режим доступа: http://www.eucast.org]. Указанные питательные среды позволяют количественно оценить резистентность изучаемой бактерии к какому-либо антибиотику, но имеют существенный недостаток, который заключается в том, что их использование не позволяет вскрыть ни один из механизмов антибиотикорезистентности конкретной бактерии.
3. Известно использование сред с антибиотиком серии Uro-Quick, производимых компанией Alifax и предложенных к использованию для быстрого определения анти-биотикорезистентности [Pezzati Е., Marengo S., Roveta S., Cassanelli С., Maioli E., Cavallini F., Cagnacci S., Gualco L., Marchese A., Debbia E. A. Evaluation of the Uro-Quick system for antibiotic susceptibility tests of strains collected from intensive care units // Annals of microbiology. - 2006. - T. 56. - №. 2. - C. 179-183]. Каждая среда состоит из помещенного в стеклянный флакон бульона Мюллера-Хинтона (2 мл) и добавленного в него антибиотика. В качестве антибиотиков используются ампициллин, амоксициллин, пиперациллин-тазобактам, цефотаксим, цефтриаксон, цефуроксим, цефтазидим, имипенем, азтреонам, гентамицин, амикацин, ципрафлоксацин и др. Исследуемая бактериальная культура инокулируется во флакон со средой, и при помощи лазерного углового светорассеяния учитывается размножение бактерий во флаконах с разными антибиотиками. Задержка роста говорит о чувствительности бактерий к исследуемому антибиотику, отсутствие задержки роста говорят о резистентности бактерий к конкретному антибиотику, находящемуся во флаконе со средой. Питательные среды серии Uro-Quick позволяют количественно оценить резистентность изучаемой бактерии к какому-либо антибиотику, но имеют существенный недостаток, который заключается в том, что их использование не позволяет вскрыть ни один из механизмов антибиотикорезистентности конкретной бактерии.
4. Известна питательная среда, в которую вносят антибиотик совместно со специальными добавками, нейтрализующими действие факторов, за счет которых формируется тот или иной вид резистентности. Таким образом, получают данные, которые позволяют оценить резистентность микробов к конкретному антибиотику и дают возможность определить некоторые механизмы резистентности. В частности, известно применение питательной среды со специальными добавками для изучения антибиотикорезистентности, включающее определение роли эффлюкс-механизмов и участия металло-β-лактамаз в формировании антибиотикорезистентности, при котором проводится одновременное определение МПК антибиотика способом последовательных разведений (см. выше) и определение снижения МПК под воздействием ингибитора эффлюкса либо под воздействием ингибитора металло-β-лактамаз [Zhao, W. Н., Hu, Z., Chen, G., Ito, R., & Hu, Z. Q. Contributions of IMP-10 metalloo-β-lactamase, the outer membrane barrier and the MexAB-OprM efflux system to high-level carbapenem resistance in Pseudomonas aeruginosa // Chemotherapy. - 2009. - T. 55. - №. 3. - C. 168-174]. В качестве ингибитора эффлюкса используют карбонил-цианид-3-хлорфенилгидразон, который добавляется в питательную среду до конечной концентрации 0,25-0,5 мМ. В качестве ингибиторов металло-β-лактамаз используют этилендиаминтетраацетат (ЭДТА), который добавляется в питательную среду до конечной концентрации 0,25-1,0 мМ, либо натрия меркаптоацетат, который добавляется в питательную среду до конечной концентрации 0,25-1,0 мМ. На жидкую питательную среду (бульон Мюллера-Хинтона), содержащую антибиотик в двукратных последовательных разведениях (см. выше) и один из перечисленных ингибиторов либо их сочетания, производят посев изучаемой бактерии (Pseudomonas aeruginosa), инкубируют 24 часа при температуре 35°C. В контроле используют аналогичные бульоны без антибиотика либо без перечисленных ингибиторов. Затем визуально оценивают рост бактерий, одновременно определяя МПК антибиотика в отсутствие ингибиторов и уровень снижения МПК под воздействием каждого ингибитора. Штаммы, для которых карбонил-цианид-β-хлорфенилгидразон вызывает снижение МПК антибиотика, расцениваются как штаммы с формированием антибиотикорезистентности с участием эффлюкс-механизмов. Штаммы, для которых ЭДТА или натрия меркаптоацетат вызывает снижение МПК β-лактамных антибиотиков, расцениваются как штаммы с формированием антибиотикорезистентности к β-лактамным антибиотикам с участием металло-β-лактамаз. Указанный тип питательных сред позволяет количественно оценить резистентность изучаемой бактерии к какому-либо антибиотику и определить вклад металло-β-лактамаз и эффлюкс-механизмов в формирование резистентности, но имеют существенный недостаток, который заключается в том, что использование сред в указанном способе не позволяет оценить роль другого важного механизма антибиотикорезистентности, а именно - порин-зависимой резистентности.
Таким образом, недостатком всех типов известных питательных сред, применяемых для изучения микробной резистентности, является то, что ни одна из них не может быть использована для определения механизма резистентности, возникающего за счет нарушения транспорта антибиотика внутрь клетки через мембранные порины - порин-зависимой резистентности.
Задачей предлагаемого изобретения является создание новой эффективной дифференциально-диагностической питательной среды для выявления важного типа резистентности к β-лактамным антибиотикам у Pseudomonas aeruginosa, возникающего за счет нарушения транспорта β-лактамных антибиотиков внутрь клетки через мембранные порины.
Технический результат изобретения заключается:
- в достижении эффекта роста/размножения на предлагаемой питательной среде чувствительных к β-лактамамным антибиотикам штаммов Pseudomonas aeruginosa, у которых сохраняется способность проникновения β-лактамных антибиотиков внутрь клетки через мембранные порины;
- в отсутствии роста/размножения на предлагаемой питательной среде резистентных (устойчивых) к β-лактамамным антибиотикам штаммов, у которых способность проникновения β-лактамных антибиотиков внутрь клетки нарушена.
Задача решается путем использования следующего состава дифференциально-диагностической питательной среды:
- жидкая питательная среда, включающая в свой состав: 1) от 0,25% до 4,0% аланина, 2) 0,9% натрия хлорида, 3) дистиллированной воды до 100%.
Эффективность от использования предлагаемой дифференциально-диагностической питательной среды подтверждена следующим примером.
Пример 1
Для определения порин-зависимой резистентности штаммов Pseudomonas aeruginosa к β-лактамным антибиотикам были использованы 6 вариантов жидкой питательной среды:
1. Жидкая питательная среда с 0,2% аланина, включающая в свой состав: 1) 0,2% аланина, 2) 0,9% натрия хлорида, 3) дистиллированной воды до 100%.
2. Жидкая питательная среда с 0,25% аланина, включающая в свой состав: 1) 0,25% аланина, 2) 0,9% натрия хлорида, 3) дистиллированной воды до 100%.
3. Жидкая питательная среда с 1,0% аланина, включающая в свой состав: 1) 1,0% аланина, 2) 0,9% натрия хлорида, 3) дистиллированной воды до 100%.
4. Жидкая питательная среда с 2,0% аланина, включающая в свой состав: 1) 2,0% аланина, 2) 0,9% натрия хлорида, 3) дистиллированной воды до 100%.
5. Жидкая питательная среда с 4,0% аланина, включающая в свой состав: 1) 4,0% аланина, 2) 0,9% натрия хлорида, 3) дистиллированной воды до 100%.
6. Жидкая питательная среда с 4,5% аланина, включающая в свой состав: 1) 4,5% аланина, 2) 0,9% натрия хлорида, 3) дистиллированной воды до 100%.
В качестве бактерий, для которых должна быть определена порин-зависимая резистентность к антибиотикам, при помощи предлагаемого способа были использованы музейные (референсные) штаммы Pseudomonas aeruginosa двух типов: 1) штаммы с нормальной, ненарушенной мембранной проницаемостью для β-лактамных антибиотиков - чувствительные к β-лактамам штаммы Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853, Pseudomonas aeruginosa 48-1558, Pseudomonas aeruginosa 48-1330; 2) мутантные штаммы с нарушенной мембранной проницаемостью для β-лактамных антибиотиков - резистентные (устойчивые) β-лактамам штаммы Pseudomonas aeruginosa 46-3109, Pseudomonas aeruginosa 46-306, Pseudomonas aeruginosa 58-348. В экспериментах были использованы суточные культуры указанных штаммов, культивированные на триптиказо-соевом агаре при 37°С; из бактерий были получены взвеси в 0,9%-ном растворе натрия хлорида и стандартизованы по концентрации до 0,5 ед. по МакФарланду общепринятым методом денситометрии. 0,05 мл полученной взвеси было инокулировано в 0,25 мл предлагаемой жидкой дифференциально-диагностической среды для определения порин-зависимых механизмов устойчивости к β-лактамным антибиотикам. Эксперименты выполнялись в 96-луночных плоскодонных планшетах Costar производства Corning-Costar. В качестве положительного контроля вместо предлагаемой жидкой дифференциально-диагностической среды для определения порин-зависимых механизмов устойчивости к β-лактамным антибиотикам использовали бульон Мюллера-Хинтона. В качестве отрицательного контроля использовали 0,9%-ный раствор натрия хлорида в дистиллированной воде. Каждая проба выполнялась в трех повторениях, результаты по каждой пробе усреднялись. Пробы инкубировались 300 мин при 37°С. После инкубации спектрофотометрически (светопоглощение при длине волны 600 нм) учитывалась интенсивность роста и размножения бактерий на спектрофлуориметре Infinite F200 (Tecan). Учет и интерпретация результатов были основаны на известном факте положительной корреляции между количеством бактерий в среде и уровнем светопоглощения этой среды. Полученные результаты отражены в Таблице 1. Результаты показывают, что на предлагаемой питательной среде наблюдается рост чувствительных к β-лактамным антибиотикам штаммов Pseudomonas aeruginosa с нормальной мембранной проницаемостью в случаях, когда среда содержит от 0,25% до 4,5% аланина. На предлагаемой питательной среде отсутствует рост резистентных штаммов Pseudomonas aeruginosa с нарушенной для β-лактамных антибиотиков проницаемостью в случаях, когда среда содержит от 0,2% до 4% аланина (или от 2,5 до 40 г аланина на 1 кг среды), при концентрации аланина в среде 4,5% резистентные к β-лактамам штаммы Pseudomonas aeruginosa с нарушенной для β-лактамных антибиотиков проницаемостью начинают демонстрировать размножение. На бульоне Мюллера-Хинтона (положительный контроль) наблюдался рост всех штаммов Pseudomonas aeruginosa, в 0,9%-ном растворе натрия хлорида в дистиллированной воде (отрицательный контроль) не размножался ни один из исследованных штаммов.
Таким образом, при использовании жидкой дифференциально-диагностической среды для определения порин-зависимых механизмов устойчивости к β-лактамным антибиотикам при содержании аланина от 0,2% до 4% достигнут эффект, который заключается в том, что в этой среде наблюдается рост/размножение чувствительных к β-лактамным антибиотикам штаммов Pseudomonas aeruginosa, у которых сохраняется способность проникновения β-лактамных антибиотиков внутрь клетки через мембранные порины, и отсутствует рост/размножение резистентных (устойчивых) к β-лактамным антибиотикам штаммов Pseudomonas aeruginosa, у которых способность проникновения β-лактамных антибиотиков внутрь клетки нарушена. Таким образом, при помощи предлагаемой жидкой дифференциально-диагностической среды может быть определено наличие порин-зависимых механизмов устойчивости к β-лактамным антибиотикам у бактерий вида Pseudomonas aeruginosa.
Изготовление предлагаемой среды технически достижимо как при единичном изготовлении, так и при массовом производстве.
Среда может быть стерилизована общепринятыми методами, например, фильтрацией, имеет достаточный срок хранения без потери полезных свойств и не требует особых условий утилизации после использования.
Figure 00000001

Claims (1)

  1. Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий Pseudomonas aeruginosa к β-лактамным антибиотикам, включающая в свой состав от 0,25% до 4,0% аланина, 0,9% натрия хлорида, дистиллированной воды до 100%.
RU2015154551/10A 2015-12-21 2015-12-21 Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий pseudomonas aeruginosa к бета-лактамным антибиотикам RU2603085C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015154551/10A RU2603085C1 (ru) 2015-12-21 2015-12-21 Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий pseudomonas aeruginosa к бета-лактамным антибиотикам

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015154551/10A RU2603085C1 (ru) 2015-12-21 2015-12-21 Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий pseudomonas aeruginosa к бета-лактамным антибиотикам

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2603085C1 true RU2603085C1 (ru) 2016-11-20

Family

ID=57760171

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015154551/10A RU2603085C1 (ru) 2015-12-21 2015-12-21 Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий pseudomonas aeruginosa к бета-лактамным антибиотикам

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2603085C1 (ru)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ZHAO W.H., HU Z., CHEN G., HU Z.Q., Contributions of IMP-10 metallo-beta- lactamase, the outer membrane barrier and the Me[FB-OprM effkux system to high- level carbapenem resistance in Pseudomonas aeruginosa, Chemotherapy, 2009, 55(3), p. 168-174;ELISABETTA PEZZATI, SONIA MARENGO, SIMONA ROVETA., CLARA CASSANELLI et.al., Evalution of the Uro- Quick system for antibiotic susceptibility tests of strains collcted from ibtensive care units., Annals of microbiology., 2006, 56(2), p. 179-183;L. SURESH BABU, Prevalence of MRSA and its antibiotic susceptibility pattern in Ujjain, MP, european journal of biophysics, 2013, 1(5), p. 37-40. ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010, 2011, СТАНДАРТ ИНФОРМ, стр.3-11;KEITH POOLE, Pseudomonas aeruginosa: resistance to the max., Frontiers in Microbiology. Cellular and infection Microbiology, april, 2011, v.2, p. 1-13. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20220243248A1 (en) Method for the rapid determination of susceptibility or resistance of bacteria to antibiotics
Aditi et al. A study on the microbiological status of mineral drinking water
WO2007096639A2 (en) Selective culture medium
Said et al. Isolation, identification and antibiotic susceptibility pattern of urinary tract infection bacterial isolates
RU2603085C1 (ru) Дифференциально-диагностическая питательная среда для определения порин-зависимых механизмов устойчивости бактерий pseudomonas aeruginosa к бета-лактамным антибиотикам
Poudel et al. Multi-drug resistant bacterial isolates associated with blood stream infection
Chukwu et al. Microbiological and antimicrobial analysis of hospital wastewater discharged into the soil environment
Chandola et al. Detecting carbapenemase production amongst Gram negative isolates and its role in appropriate antibiotic selection
Shukla et al. Biofilm Production and its Association with Multi Drug Resistance in Pseudomonas aeruginosa among ICU Patients with Special Reference to ESBL, AmpC and MBL production.
Greta Antibiotic susceptibility and some persistence factors of Gram-negative bacilli isolated from trophic ulcers
Rodulfo et al. Negative correlation between virulence and multidrug resistance in intrahospital and community acquired infections by Proteus mirabilis, in Eastern Venezuela.
Khaleque et al. Molecular characterization of extended spectrum β-lactamase producing bacteria isolated from urinary tract infected patients, Bangladesh.
Sultana et al. Prevalence of multi-drug resistance pattern of Escherichia coli in different ages and gender of urinary tract infected patients
Khan et al. A Study on Escherichia Coli Isolated from Urogenital Tract Infections, Emphasizing their Occurrence and Antibiograms
Greta The bacterial strains isolated from trophic ulcers and their persistence factors
Mohammed et al. Pseudomonas that Causes Otitis in Dogs: An Increasing Opposition
Chukwuma et al. Antibiogram of biofilm producing bacteria isolated from urine of patients in Three Hospitals in Port Harcourt, Rivers State
Rao et al. Effect of Lead on Microorganisms with Respect to Antibiogram, Glucose and Amino Acid Metabolism.
Khan et al. ANTIBIOTIC SUSCEPTIBILITY OF MARINE BACTERIA ISOLATED FROM KARACHI COAST
Sivalingam et al. Isolation and Identification of Multiple Drug Resistant Bacterial Pathogens from Well Water Samples in and Around Wolaita Sodo Town, Southern Ethiopia
Hatem Investigation of Virulence Factors of Staphylococcus. Aureus That Isolated from Different Clinical Infections in Baladroz City (Iraq)
Michael et al. Detection of Multidrug-Resistant Acinetobacter baumannii among Gram-Negative Bacteria Isolated from Clinical Samples
Hatif Relationship between Antimicrobial-Resistant Bacterial Isolates and Biofilm Formation in Burn Patients
Jafar et al. 61. Prevalence and antimicrobial susceptibility patterns of extended spectrum β-lactamase producers and non-producers Pseudomonas aeruginosa in Peshawar
Tejasvi et al. Detection of carbapenamase production by rapid carba NP test among Enterobacteriaceae isolates in tertiary care hospital