RU2602662C1 - Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб - Google Patents
Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб Download PDFInfo
- Publication number
- RU2602662C1 RU2602662C1 RU2015113691/15A RU2015113691A RU2602662C1 RU 2602662 C1 RU2602662 C1 RU 2602662C1 RU 2015113691/15 A RU2015113691/15 A RU 2015113691/15A RU 2015113691 A RU2015113691 A RU 2015113691A RU 2602662 C1 RU2602662 C1 RU 2602662C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fish
- blood serum
- physiological state
- sturgeon
- testing
- Prior art date
Links
- 241000881711 Acipenser sturio Species 0.000 title claims abstract description 11
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 238000010998 test method Methods 0.000 title abstract 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims abstract description 15
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims abstract description 7
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 6
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 abstract 1
- 241000252344 Acipenser gueldenstaedtii Species 0.000 description 8
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 241000252355 Acipenser ruthenus Species 0.000 description 4
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 241000252335 Acipenser Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- -1 18.9% Chemical compound 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 206010037569 Purulent discharge Diseases 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 238000009372 pisciculture Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ихтиологии и рыбоводству и представляет собой способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб, включающий исследование сыворотки крови рыб, отличающийся тем, что сыворотку крови исследуют методом краевой дегидратаци в аналитических ячейках и производят морфологический анализ образовавшихся структур в режиме обычной микроскопии при различных увеличениях, при этом дендритные и переходные формы являются показателями нормы гомеостаза, а наличие пластинчатых структур указывает на изменения, происходящие в организме рыб. Осуществление изобретения обеспечивает повышение эффективности оценки физиологического состояния осетровых рыб. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.
Description
Изобретение относится к ихтиологии и рыбоводству, а именно к способам оценки физиологического состояния осетровых рыб.
Известен способ оценки общего физиологического состояния осетровых рыб, в котором используют наличие в крови исследуемых рыб естественного фактора ингибиции активности антител класса М, являющихся основными у осетровых рыб, с последующей регистрацией снижения титров. Реакцию непрямой гемагглютинации проводят с эритроцитарным сальмонелезным О диагностикумом, а исследуемую сыворотку крови разводят изотоническим раствором хлористого натрия в соотношении 1:20, смешивают с равным количеством тест-сыворотки в разведении 1:20 и инкубируют при 37°C в течение 4-х часов (RU №2253970, МПК A01K 61/00, опубл. 20.06.2005).
К недостаткам известного способа можно отнести, что при его реализации используют диагностикум, требующий определенные условия хранения (4-10°C), срок хранения которого не более 1 года. Необходимы специальное оборудование и условия стерильности для постановки реакции, что также усложняет его использование.
Известно, что морфология текстур, формирующихся при фазовых переходах биологических жидкостей, отражает состояние организма и изменяется при развитии патологических процессов. На современном этапе морфотесты достаточно широко используются в медицине для динамической оценки состояния организма.
Известны способы диагностики состояния организма (RU №2312606, МПК A61B 10/00, G01N 33/48, опубл. 20.12.2007; RU №2366949, МПК G01N 33/48, A61B 10/00, опубл. 10.09.2009). В качестве биологической жидкости исследуют кровь, и/или мочу, и/или слюну, и/или пот, и/или гнойные выделения и т.д.
В указанных способах для фазового перехода используются температуры ниже нуля, что повышает их энергозатратность.
Известно, что в процессе высушивания биологических жидкостей также формируются кристаллические текстуры, изучение которых является одним из активно развивающихся направлений в медико-биологических исследованиях.
Известен способ оценки токсического действия химических веществ на органы и ткани рыб, при котором методом клиновидной дегидратации исследуется гомогенат. Для этого его в форме капли наносят на поверхность предметного стекла, высушивают при комнатной температуре в течение суток, затем полученные образцы просматривают в поляризованном свете и при появлении цветных анизотропных образований проводят оценку о токсичности химических веществ (RU №2258926, МПК G01N 33/12, опубл. 20.08.2005).
Целью изобретения является упрощение оценки физиологического состояния осетровых рыб, повышение ее эффективности.
Поставленная цель достигается тем, что для оценки физиологического состояния осетровых рыб проводится морфологический анализ кристаллических структур сыворотки крови, сформированных при краевой дегидратации в аналитических ячейках исследуемой биологической жидкости.
Способ осуществляют следующим образом.
Сыворотку крови обследуемой рыбы объемом 0,02 мл помещают между предметным и покровным стеклами. Полученные аналитические ячейки высушивают в условиях рабочей комнаты лаборатории при минимальной подвижности воздуха в течение 24-48 часов. После чего в режиме обычной микроскопии при различных увеличениях проводят морфологический анализ образовавшихся структур. Дендритные и переходные формы являются показателями нормы гомеостаза, наличие пластинчатых структур указывает на изменения, происходящие в организме рыбы.
Пример 1. Объектами изучения являлись двухлетки стерляди (Acipenser ruthenus) в количестве 10 экземпляров. Взятие крови у обследованных особей для проведения морфологического и биохимического исследования осуществлялось в апреле, после продолжительного содержания рыбы при низких температурах в период зимовки.
В результате проведенного анализа кристаллических структур сыворотки крови двухлеток стерляди методом краевой дегидратации в аналитических ячейках установлено наличие дендритных, переходных и пластинчатых форм (в 30%, 60% и 100% сл. соответственно).
Состав морфологических типов наблюдаемых структур рассматривают как тест, который свидетельствует о негативных изменениях, происходящих в организме обследованных рыб.
Возможность такого использования подтверждают результаты биохимического исследования сыворотки крови.
Результаты биохимического исследования сыворотки крови
Концентрация холестерина в сыворотке крови стерляди изменялась в пределах 3,45-8,35 ммоль/л при среднем значении 5,157±0,6483 ммоль/л, коэффициент вариации составил 37,7%.
Содержание глюкозы находилось в пределах 1,51-4,12 ммоль/л при среднем значении 3,144±0,2753 ммоль/л. Коэффициент вариации соответствовал 26,3%.
Полученные результаты биохимического исследования, а именно коэффициенты вариации свыше 25%, исследуемых параметров, свидетельствуют о пониженной устойчивости рыб данной группы к длительному периоду пониженных температур и дальнейшей затрудненной адаптации обменных процессов к изменяющимся условиям и адекватны выводам по результатам анализа кристаллических структур сыворотки крови.
Пример 2. Объектами изучения являлись двухлетки русского осетра (Acipenser gueldenstaedty) в количестве 10 экземпляров. Взятие крови у обследованных особей для проведения морфологического и биохимического исследования осуществлялось в июне, в период полной их адаптации после зимовки.
В результате проведенного анализа кристаллических структур сыворотки крови двухлеток русского осетра методом краевой дегидратации в аналитических ячейках установлено наличие дендритных и переходных форм в 100% случаев, пластинчатых в 20% случаев.
Существенное снижение числа особей, аналитические ячейки сыворотки крови которых содержат структуры пластинчатой формы, свидетельствует об удовлетворительном физиологическом состоянии организма у большинства обследованных рыб.
Возможность такого утверждения подтверждают результаты биохимического исследования сыворотки крови.
Результаты биохимического исследования сыворотки крови
Уровень холестерина варьировал в пределах 1,23-2,10 ммоль/л при среднем значении 1,586±0,0947 ммоль/л (коэффициент вариации 18,91%).
Показатели глюкозы сыворотки крови варьировали в пределах 0,6-2,9 ммоль/л при среднем значении 1,857±0,2152 ммоль/л (коэффициент вариации 18,89%).
Следовательно, невысокая вариабельность содержания холестерина и глюкозы, а именно 18,9%, свидетельствует об удовлетворительном физиологическом состоянии обследованных особей русского осетра, что соответствует выводам морфологического анализа кристаллических структур сыворотки крови исследуемых рыб.
Пример 3. Объектами изучения являлись годовики русского осетра (Acipenser gueldenstaedty) в количестве 10 экземпляров. Взятие крови у обследованных особей для проведения морфологического и биохимического исследования осуществлялось в июне.
В результате проведенного анализа кристаллических структур сыворотки крови двухлеток русского осетра методом краевой дегидратации в аналитических ячейках установлено наличие дендритных и переходных форм в 90 и 100% случаев соответственно пластинчатых в 90% случаев.
Полученная морфологическая картина сыворотки крови следующим образом соотносится с результатами ее биохимического анализа.
Результаты биохимического исследования сыворотки крови
Содержание холестерина в плазме крови годовиков русского осетра составлял от 1,42 до 2,26 ммоль/л (среднее значение 1,967±0,0978 ммоль/л). Коэффициент вариации был невысоким и составлял 14,9%.
Содержание глюкозы в плазме крови годовиков русского осетра составлял от 0,69 до 4,05 ммоль/л (среднее значение 2,101±0,3456 ммоль/л). Коэффициент вариации был высоким и составлял 46,5%.
Высокая вариативность содержания глюкозы в сыворотке крови годовиков русского осетра указывает на их низкую устойчивость к воздействию стресс-факторов, возникающих при осуществлении рыбоводных манипуляций во время выращивания.
Следовательно, существенное увеличение количества особей (до 90% случаев), аналитические ячейки сыворотки крови которых содержат структуры пластинчатой формы, служит сигналом об изменении адаптационных возможностей у данной группы рыб.
Таким образом, предлагаемый способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб по составу морфологических типов наблюдаемых структур является информативным, репрезентативным. Осуществление способа несложно в выполнении, способ реализуется с использованием незначительного количества биологического материала, что актуально для экспериментальных исследований, не требует наличия специализированной лаборатории, дорогостоящей аппаратуры, реактивов, красителей.
Claims (2)
1. Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб, включающий исследование сыворотки крови рыб, отличающийся тем, что сыворотку крови исследуют методом краевой дегидратаци в аналитических ячейках и производят морфологический анализ образовавшихся структур в режиме обычной микроскопии при различных увеличениях, при этом дендритные и переходные формы являются показателями нормы гомеостаза, а наличие пластинчатых структур указывает на изменения, происходящие в организме рыб.
2. Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб по п. 1, отличающийся тем, что сыворотку крови объемом 0,02 мл помещают между предметным и покровным стеклами, а полученные аналитические ячейки высушивают в условиях рабочей комнаты при минимальной подвижности воздуха в течение 24-48 часов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015113691/15A RU2602662C1 (ru) | 2015-04-13 | 2015-04-13 | Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015113691/15A RU2602662C1 (ru) | 2015-04-13 | 2015-04-13 | Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2602662C1 true RU2602662C1 (ru) | 2016-11-20 |
Family
ID=57760254
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015113691/15A RU2602662C1 (ru) | 2015-04-13 | 2015-04-13 | Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2602662C1 (ru) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2253970C2 (ru) * | 2001-10-04 | 2005-06-20 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Каспийский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства" | Способ оценки общего физиологического состояния осетровых рыб |
-
2015
- 2015-04-13 RU RU2015113691/15A patent/RU2602662C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2253970C2 (ru) * | 2001-10-04 | 2005-06-20 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Каспийский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства" | Способ оценки общего физиологического состояния осетровых рыб |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КОРОТЕНКО А.В. / Оценка физиологического состояния рыб -; объектов аквакультуры при различных стрессорных воздействиях и поиск адаптогенов / Автореф. дисс..; канд. биол. наук / Астрахань, 2012;КОРАБЕЛЬНИКОВА О.В. / Физиолого-биохимические показатели осетровых рыб (Acipenseridae Bonaparte, 1832) при выращивании в индустриальных хозяйствах / Автореф. дисс..; канд. биол. наук / Москва, 2009;ХАБАРОВ М.В. / Альбуминовая система сыворотки крови разных по экологии видов осетровых рыб / Автореф. дисс..; канд. биол. наук / Ярославль, 2005. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mugoni et al. | Analysis of oxidative stress in zebrafish embryos | |
| Teuscher et al. | Assessing collagen deposition during aging in mammalian tissue and in Caenorhabditis elegans | |
| CN104007103A (zh) | 精液的检测方法及其试剂盒 | |
| CN102023207B (zh) | 在整体斑马鱼上进行酶联免疫吸附检测的方法及其应用 | |
| WO2024131012A1 (zh) | 一种分析海洋刺胞生物中微塑料含量与分布的方法 | |
| RU2602662C1 (ru) | Способ тестирования физиологического состояния осетровых рыб | |
| CN102590488A (zh) | 调控斑马鱼卵黄蛋白原水平的方法 | |
| Balasooriya et al. | The biochemical changes in pericardial fluid after death. An investigation of the relationship between the time since death and the rise or fall in electrolyte and enzyme concentrations and their possible usefulness in determining the time of death | |
| Bastami et al. | A comparative study on the biochemical parameters of seminal and blood plasma and their correlation in the wild common carp (Cyprinus carpio) | |
| Červenka et al. | The relationship between the mercury concentration in fish muscles and scales/fins and its significance | |
| Annese et al. | IKOSA® CAM Assay Application to Quantify Blood Vessels on Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) | |
| CN102435734A (zh) | 卵巢癌原发化疗敏感性测评试剂盒及其应用 | |
| Li et al. | Non-lethal determination of sex and reproductive condition of Eastern oysters Crassostrea virginica Gmelin using protein profiles of hemolymph by Proteinchip® and SELDI-TOF-MS technology | |
| Bracke et al. | Chick heart invasion assay | |
| Steiner et al. | Sexing of turkey poults by Fourier transform infrared spectroscopy | |
| Akchurin et al. | Application of luminescence spectral assay for assessment of the functional state of birds’ gastrointestinal tract by nucleic acids content in cells | |
| CN109705110A (zh) | 一种高特异性检测gsh的荧光探针及应用 | |
| DE19900135A1 (de) | Verfahren zur Bestimmung der Temperatur einer einzelnen Zelle in einer Zellprobe oder Gewebebiopsie sowie Verfahren zu dessen Verwendung | |
| Sakas | Understanding avian laboratory tests | |
| Lockwood et al. | Intracellular potassium in diffuse proctocolitis | |
| RU2711990C1 (ru) | Способ определения генотоксичности наночастиц | |
| Jensen et al. | Laboratory Animal Pathology in Relation to Spontaneous Infections | |
| RU2801049C1 (ru) | Способ установления возрастной принадлежности неизвестного человека при проведении судебно-медицинской экспертизы | |
| RU2623145C1 (ru) | Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров | |
| RU2469296C1 (ru) | Люминесцентно-микроскопический способ оценки состояния внутриклеточного обмена органических веществ в стенке железистого желудка птиц при клебсиеллезе |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180414 |