RU2601622C1 - Agent possessing endothelium protective effect in conditions of experimental diabetes mellitus and cerebral blood circulation disorder - Google Patents
Agent possessing endothelium protective effect in conditions of experimental diabetes mellitus and cerebral blood circulation disorder Download PDFInfo
- Publication number
- RU2601622C1 RU2601622C1 RU2015146798/15A RU2015146798A RU2601622C1 RU 2601622 C1 RU2601622 C1 RU 2601622C1 RU 2015146798/15 A RU2015146798/15 A RU 2015146798/15A RU 2015146798 A RU2015146798 A RU 2015146798A RU 2601622 C1 RU2601622 C1 RU 2601622C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- animals
- hydrochloride
- experimental
- diabetes mellitus
- amino
- Prior art date
Links
- 208000007241 Experimental Diabetes Mellitus Diseases 0.000 title claims abstract description 9
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 title abstract description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title abstract description 7
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 title abstract description 4
- 230000002851 endotheliumprotective effect Effects 0.000 title abstract 3
- KWTQSFXGGICVPE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)C(N)CCCN=C(N)N KWTQSFXGGICVPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 8
- MVMYNIQCBFYUJO-UHFFFAOYSA-N methyl 4-amino-3-phenylbutanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)CC(CN)C1=CC=CC=C1 MVMYNIQCBFYUJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 9
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 claims description 8
- 206010008190 Cerebrovascular accident Diseases 0.000 claims description 6
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 23
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- QGMLRHACACRFNN-UHFFFAOYSA-N methyl 4-amino-3-phenylbutanoate Chemical compound COC(=O)CC(CN)C1=CC=CC=C1 QGMLRHACACRFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 39
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 description 18
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 description 18
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 18
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical class NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000003727 cerebral blood flow Effects 0.000 description 12
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000008753 endothelial function Effects 0.000 description 9
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 9
- DAFOCGYVTAOKAJ-UHFFFAOYSA-N phenibut Chemical compound OC(=O)CC(CN)C1=CC=CC=C1 DAFOCGYVTAOKAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960004122 phenibut Drugs 0.000 description 9
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N Nitroglycerin Chemical compound [O-][N+](=O)OCC(O[N+]([O-])=O)CO[N+]([O-])=O SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000006 Nitroglycerin Substances 0.000 description 6
- DDNCQMVWWZOMLN-IRLDBZIGSA-N Vinpocetine Chemical compound C1=CC=C2C(CCN3CCC4)=C5[C@@H]3[C@]4(CC)C=C(C(=O)OCC)N5C2=C1 DDNCQMVWWZOMLN-IRLDBZIGSA-N 0.000 description 6
- HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N alloxan Chemical compound O=C1NC(=O)C(=O)C(=O)N1 HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 229960003711 glyceryl trinitrate Drugs 0.000 description 6
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 6
- MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N L-nitroarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(=N)N[N+]([O-])=O MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 5
- 229960000744 vinpocetine Drugs 0.000 description 5
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NFDXGVFXQUFNQW-UHFFFAOYSA-N 4-[bis(aziridin-1-yl)phosphoryl]morpholine Chemical compound C1CN1P(N1CCOCC1)(=O)N1CC1 NFDXGVFXQUFNQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 4
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 4
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 3
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 3
- 210000001259 mesencephalon Anatomy 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- XSYRYMGYPBGOPS-UHFFFAOYSA-N 4-amino-3-phenylbutanoic acid;hydrochloride Chemical compound [Cl-].OC(=O)CC(C[NH3+])C1=CC=CC=C1 XSYRYMGYPBGOPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 206010058842 Cerebrovascular insufficiency Diseases 0.000 description 2
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 2
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000001936 parietal effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- KPYSYYIEGFHWSV-UHFFFAOYSA-N Baclofen Chemical compound OC(=O)CC(CN)C1=CC=C(Cl)C=C1 KPYSYYIEGFHWSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002168 angioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000141 anti-hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002180 anti-stress Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229960000794 baclofen Drugs 0.000 description 1
- 238000009811 bilateral tubal ligation Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 230000001609 comparable effect Effects 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 210000003725 endotheliocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 206010062198 microangiopathy Diseases 0.000 description 1
- 210000003657 middle cerebral artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001722 neurochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001962 neuropharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 239000002840 nitric oxide donor Substances 0.000 description 1
- 239000002664 nootropic agent Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 201000010065 polycystic ovary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине и касается производных гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК), обладающих эндотелиопротекторным действием в условиях экспериментального сахарного диабета и нарушения мозгового кровообращения.The invention relates to the pharmaceutical industry and medicine, and relates to derivatives of gamma-aminobutyric acid (GABA) having endothelioprotective effect in experimental diabetes mellitus and cerebrovascular accident.
Гамма-аминомасляная кислота (ГАМК) играет важную роль в регуляции системы кровообращения, в том числе мозгового и коронарного, у млекопитающих. Поэтому поиск новых средств для лечения сосудистых заболеваний, протекающих на фоне эндотелиальной дисфункции среди производных ГАМК, является перспективным направлением медицинской химии.Gamma-aminobutyric acid (GABA) plays an important role in the regulation of the circulatory system, including cerebral and coronary, in mammals. Therefore, the search for new drugs for the treatment of vascular diseases occurring against the background of endothelial dysfunction among derivatives of GABA is a promising area of medical chemistry.
Известно, что на основе производных ГАМК созданы лекарственные препараты аминалон, фенибут, баклофен и др. Они широко используются в практической медицине, главным образом, для лечения заболеваний центральной нервной системы [1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: «Новая волна». 2012; 2. Раевский, К.С. Нейрофармакологические и нейрохимические аспекты / К.С. Раевский, В.П. Георгиев // Медиаторные аминокислоты 1986. М.: «Медицина». - 165 с.; 3. Ковалев Г.В. Ноотропные средства. Волгоград. Нижне-Волжское книжное издательство. 1990. 368 с.].It is known that, based on derivatives of GABA, the drugs aminalon, phenibut, baclofen, and others have been created. They are widely used in practical medicine, mainly for the treatment of diseases of the central nervous system [1. Mashkovsky M.D. Medicines M .: “New wave”. 2012; 2. Raevsky, K.S. Neuropharmacological and neurochemical aspects / K.S. Raevsky, V.P. Georgiev // Mediator amino acids 1986. M .: "Medicine". - 165 s .; 3. Kovalev G.V. Nootropic drugs. Volgograd. Lower Volga Book Publishing House. 1990.368 s.].
Известно также, что L-аргинин, как субстрат синтеза оксида азота, улучшает эндотелиальную функцию кровеносных сосудов при стенокардии, сердечно-сосудистой недостаточности, сахарном диабете и гиперхолестеринемии [1. Львова О.А. и др. К вопросу о роли оксида азота в норме и при патологии нервной системы // Electronic scientific magazine "System integration in public health services". - 2011. - C. 20.; 2. Andrew P.J., Mayer B. Enzymatic function of nitric oxide synthases // Cardiovascular research. - 1999. - T. 43. - №.3. - С. 521-531]. L-аргинин входит в состав композиций, обладающих эндотелиопротекторным, вазодилатирующим и ангиопротекторным эффектом (RU 2464019). Применение L-аргинина разрешено в виде биологически активных добавок (Вазотон) в терапии инсулинонезависимого сахарного диабета, физических и умственных перегрузках, хронической ишемической болезни сердца, атеросклерозе и др. [http://www.rlsnet.ru/baa_tn_id_31639.htm].It is also known that L-arginine, as a substrate for the synthesis of nitric oxide, improves the endothelial function of blood vessels in angina pectoris, cardiovascular failure, diabetes mellitus and hypercholesterolemia [1. Lvov O.A. et al. On the role of nitric oxide in normal and pathological conditions of the nervous system // Electronic scientific magazine "System integration in public health services". - 2011. - C. 20 .; 2. Andrew P.J., Mayer B. Enzymatic function of nitric oxide synthases // Cardiovascular research. - 1999. - T. 43. - No. 3. - S. 521-531]. L-arginine is part of compositions with endothelio-protective, vasodilating and angioprotective effects (RU 2464019). The use of L-arginine is allowed in the form of biologically active additives (Vazoton) in the treatment of non-insulin-dependent diabetes mellitus, physical and mental overload, chronic coronary heart disease, atherosclerosis, etc. [http://www.rlsnet.ru/baa_tn_id_31639.htm].
Наиболее близким по структуре к заявляемому гидрохлориду метил-4-амино3-фенилбутаноату является лекарственный препарат фенибут (гидрохлорид 4-амино-3-фенилбутановой кислоты). Он используется в медицине в качестве средства, действующего на центральную нервную систему (ЦНС) [Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: «Новая волна». 2012]. Известны его антистрессорное, антиоксидантное действия и антигипоксические свойства [1. Меерсон Ф.З. Динамика и физиологическое значение активизации ГАМК-системы в головном мозге и сердечной мышце при эмоционально-болевом стрессе / Ф.З. Меерсон, P.M. Лифшиц, В.И. Павлова // Вопросы медицинской химии. - 1981. - Т. 27, №1. - С. 35-39; 2. Ковалев Г.В. Некоторые итоги и перспективы фармакологического изучения нейроактивных аминокислот и их аналогов / Г.В. Ковалев // Фармакология и клиническое применение нейроактивных аминокислот и их аналогов / под. ред. Г.В. Ковалева. - Волгоград, 1985. - С. 11-21]. Он уменьшает вазовегетативные симптомы при неврогенных поражениях сердца и желудка и нормализует процессы пероксидации липидов. Однако фенибут не используется в качестве средства, действующего на сердечно-сосудистую систему.The closest in structure to the claimed methyl 4-amino3-phenylbutanoate hydrochloride is the drug phenibut (4-amino-3-phenylbutanoic acid hydrochloride). It is used in medicine as a means of acting on the central nervous system (CNS) [Mashkovsky M.D. Medicines M .: “New wave”. 2012]. Known for its antistress, antioxidant effects and antihypoxic properties [1. Meerson F.Z. The dynamics and physiological significance of the activation of the GABA system in the brain and heart muscle under emotional pain stress / F.Z. Meyerson, P.M. Lifshits, V.I. Pavlova // Questions of medical chemistry. - 1981. - T. 27, No. 1. - S. 35-39; 2. Kovalev G.V. Some results and prospects of the pharmacological study of neuroactive amino acids and their analogues / G.V. Kovalev // Pharmacology and clinical use of neuroactive amino acids and their analogues / under. ed. G.V. Kovaleva. - Volgograd, 1985. - S. 11-21]. It reduces vasovegetative symptoms with neurogenic lesions of the heart and stomach and normalizes lipid peroxidation. However, phenibut is not used as an agent acting on the cardiovascular system.
Современные социально-экономические условия характеризуются неуклонным ростом сердечно-сосудистых заболеваний, приводящих к инвалидизации и преждевременной смертности населения трудоспособного возраста.Modern socio-economic conditions are characterized by a steady increase in cardiovascular diseases, leading to disability and premature mortality of the working-age population.
Известно, что одним из универсальных механизмов патогенеза многих заболеваний, в том числе и таких распространенных, как атеросклероз, гипертоническая болезнь, нарушения мозгового кровообращения, сахарный диабет и связанных с ним макро- и микроангиопатий, является дисфункция эндотелиальной системы, в основе развития которой лежит снижение синтеза оксида азота (NO) в эндотелиоцитах [1. Шумахер Г.И. Роль дисфункции эндотелия в запуске иммунопатологических реакций при хронической ишемии головного мозга // Бюллетень Сибирской медицины - 2008. - №5. - 214-219; 2. Maltais S. The bone marrow-cardiac axis: role of endothelial progenitor cells in heart failure // Eur J Cardiothorac Surg. - 2011. - №39. - 368-374; 3. Задионченко B.C., Адашева Т.В. Дисфункция эндотелия и артериальная гипертония: терапевтические возможности // Российский медицинский журнал. - 2001. - 1 (145). - 11-15].It is known that one of the universal mechanisms of the pathogenesis of many diseases, including such common as atherosclerosis, hypertension, cerebrovascular accident, diabetes mellitus and related macro- and microangiopathies, is endothelial system dysfunction, which is based on a decrease synthesis of nitric oxide (NO) in endotheliocytes [1. Schumacher G.I. The role of endothelial dysfunction in triggering immunopathological reactions in chronic cerebral ischemia // Bulletin of Siberian Medicine - 2008. - No. 5. - 214-219; 2. Maltais S. The bone marrow-cardiac axis: role of endothelial progenitor cells in heart failure // Eur J Cardiothorac Surg. - 2011. - No. 39. - 368-374; 3. Zadionchenko B.C., Adasheva T.V. Endothelial dysfunction and arterial hypertension: therapeutic options // Russian Medical Journal. - 2001 .-- 1 (145). - 11-15].
Известно, что в комплексной терапии сердечно-сосудистых и эндокринных заболеваний, протекающих на фоне эндотелиальной дисфункции, применяются препараты, обладающие плейотропными эффектами.It is known that in the complex therapy of cardiovascular and endocrine diseases occurring against the background of endothelial dysfunction, drugs with pleiotropic effects are used.
Однако, несмотря на широкий спектр лекарственных средств плейотропного действия, эффективность их как эндотелиопротекторов остается низкой и, как правило, они обладают серьезными побочными эффектами, которые особенно при комбинированной терапии могут суммироваться. Кроме этого в последние годы эндотелий сосудов рассматривается как самостоятельная мишень терапевтического воздействия для профилактики и лечения различных сердечно-сосудистых заболеваний [Тюренков И.Н. и др. Эндотелиопротекторы - новый класс фармакологических препаратов // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2012. - №.7 - С. 50-57].However, despite the wide range of pleiotropic drugs, their effectiveness as endothelioprotectors remains low and, as a rule, they have serious side effects, which can be summarized especially with combination therapy. In addition, in recent years, the vascular endothelium has been considered as an independent target of therapeutic effect for the prevention and treatment of various cardiovascular diseases [Tyurenkov I.N. et al. Endothelioprotectors - a new class of pharmacological preparations // Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences. - 2012. - No. 7 - S. 50-57].
Поэтому поиск и разработка новых высокоэффективных и безопасных средств с широким спектром эндотелиопротекторной активности, позволяющих улучшить вазодилатирующую и антитромботическую функцию эндотелия и вследствие этого снижать риск развития сердечно-сосудистых осложнений, является одной из актуальных задач современной фармакологии.Therefore, the search and development of new highly effective and safe agents with a wide range of endothelial protective activity, which can improve the vasodilating and antithrombotic function of the endothelium and therefore reduce the risk of developing cardiovascular complications, is one of the urgent tasks of modern pharmacology.
Задача изобретения - получить высокоэффективное и малотоксичное производное ГАМК, обладающее эндотелиопротекторным действием, а также расширить ассортимент подобных средств.The objective of the invention is to obtain a highly effective and low-toxic derivative of GABA with endothelioprotective action, as well as expand the range of such agents.
Поставленная задача реализуется предлагаемым комбинированным средством, включающим гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноата и L-аргинин гидрохлорид (МЭФА). Причем соотношение гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноат : L-аргинин гидрохлорид = 1:1. При этом получают средство, обладающее эндотелиопротекторным действием в условиях экспериментального сахарного диабета и нарушении мозгового кровообращения.The task is carried out by the proposed combination tool, including methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride (MEFA). Moreover, the ratio of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride: L-arginine hydrochloride = 1: 1. In this case, an agent is obtained that has an endothelioprotective effect in experimental diabetes mellitus and cerebrovascular accident.
Лекарственное средство содержит эффективную дозу композиции гидрохлорида метил-4-амино-3-фенилбутаноата и L-аргинина гидрохлорида, фармакологически приемлемые носители и целевые добавки.The drug contains an effective dose of the composition of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride, pharmacologically acceptable carriers and target additives.
Технический результат предлагаемого изобретения заключается в том, что предлагаемое средство малотоксично и способно комплексно оказывать эндотелиопротекторное действие в условиях экспериментального сахарного диабета и нарушения мозгового кровообращения.The technical result of the invention is that the proposed tool has low toxicity and is able to comprehensively provide endothelioprotective effect in experimental diabetes mellitus and cerebrovascular accident.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
ПримерExample
Получение композиции гидрохлорида метил 4-амино-3-фенилбутаноата и гидрохлорида L-аргинина состоит из двух стадий и заключается в получении гидрохлорида метил-4-амино-3-фенилбутаноата (МАФ) путем взаимодействия 4-амино-3-фенилбутановой кислоты с метиловым спиртом в присутствии тионилхлорида и последующем добавлении к МАФ гидрохлорида L-аргинина.Obtaining a composition of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride consists of two stages and consists in obtaining methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride (MAP) by reacting 4-amino-3-phenylbutanoic acid with methyl alcohol in the presence of thionyl chloride and subsequent addition of L-arginine hydrochloride to MAP.
Гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноат. Раствор 35 г (0,16 мол) гидрохлорида 4-амино-3-фенилбутановой кислоты в 224 мл метанола охлаждают до 5°C-10°C и при перемешивании порциями добавляют 11,9 мл (0,16 мол) тионилхлорида, поддерживая ту же температуру. Затем реакционную массу нагревают в течение двух часов на водяной бане, температура бани при этом 60°C-70°C, после чего смесь охлаждают до температуры 18°C-20°C. Кристаллический продукт отфильтровывают и выделяют гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноата. Фильтрат упаривают на 2/3 первоначального объема и отделяют дополнительное количество гидрохлорида метил-4-амино-3-фенилбутаноата. Выход 34,6 г (93,5%). Т. пл. 175-176°C (метанол). Найдено %: С 57.79, 57.77; Н 7.18, 7.17; N 6.08, 6.10. C11H16NO2Cl. Вычислено %: С 57.52; Н 6.97; N 6.10. ИК спектр (ν, см-1 KBr): 3030-2785 (NH3 +); 1725 (С=O). ЯМР 1Н (ДМСО-d6, δ, м.д.): 7.21-7.27 (5Н, С6Н5), 2.46-3.06 (5Н, 2 СН2, СН), 3.43 (3Н, ОСН3), 8.17 (3Н, NH3 +). Композиция гидрохлорида метил-4-амино-3-фенилбутаноата и L-аргинина гидрохлорида. В шаровую мельницу загружают 22.95 г (0.1 моль) гидрохлорида метил-4-амино-3-фенилбутаноата и 21.05 (0.1 моль) L-аргинина гидрохлорида. Смесь тщательно перемешивают в течение 0,5-1 часа, затем выгружают полученный продукт. Выход количественный.Methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride. A solution of 35 g (0.16 mol) of 4-amino-3-phenylbutanoic acid hydrochloride in 224 ml of methanol is cooled to 5 ° C-10 ° C and 11.9 ml (0.16 mol) of thionyl chloride are added portionwise while maintaining same temperature. Then the reaction mass is heated for two hours in a water bath, the temperature of the bath being 60 ° C-70 ° C, after which the mixture is cooled to a temperature of 18 ° C-20 ° C. The crystalline product is filtered off and methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride is isolated. The filtrate was evaporated to 2/3 of the original volume and an additional amount of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride was separated. Yield 34.6 g (93.5%). T. pl. 175-176 ° C (methanol). Found%: C 57.79, 57.77; H, 7.18; 7.17; N 6.08, 6.10. C 11 H 16 NO 2 Cl. Calculated%: C 57.52; H 6.97; N 6.10. IR spectrum (ν, cm -1 KBr): 3030-2785 (NH 3 + ); 1725 (C = O). 1 H NMR (DMSO-d 6 , δ, ppm): 7.21-7.27 (5H, C 6 H 5 ), 2.46-3.06 (5H, 2 CH 2 , CH), 3.43 (3H, OCH 3 ), 8.17 (3H, NH 3 + ). Composition of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride. 22.95 g (0.1 mol) of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and 21.05 (0.1 mol) of L-arginine hydrochloride are loaded into a ball mill. The mixture is thoroughly mixed for 0.5-1 hours, then the resulting product is discharged. The output is quantitative.
Полученное таким образом комбинированное средство было изучено в опытах на животных.Thus obtained combination tool was studied in experiments on animals.
Далее приводятся примеры, иллюстрирующие специфическую активность композиции гидрохлорида метил-4-амино-3-фенилбутаноата и L-аргинина гидрохлорида (МЭФА).The following are examples illustrating the specific activity of the composition of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride (MEFA).
Для изучения эндотелиопротекторного действия использованы стандартные методы доклинических исследований лекарственных средств [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. Под ред. А.Н. Миронова. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.].To study the endothelioprotective action, standard methods of preclinical studies of drugs were used [Guidelines for preclinical studies of drugs. Part one. Ed. A.N. Mironova. M .: Grif and K, 2012.944 s.].
Обработка полученных данных проводилась с использованием статистических методов обработки результатов исследования, которые позволяют оценить степень фармакологической активности вещества.Processing of the obtained data was carried out using statistical methods for processing the results of the study, which allow us to assess the degree of pharmacological activity of the substance.
В работе использованы белые беспородные половозрелые крысы-самцы и самки, рандомизированные по массе (220-240 г), содержавшиеся в условиях лабораторного вивария, в течение не менее двух недель до начала эксперимента, на стандартном пищевом рационе, при свободном доступе к воде, при естественном световом режиме. Содержание животных проводилось с учетом правил, принятых Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (Страсбург, 1986). Освещение вивария было естественным, температурный режим соответствовал +20-+24°C при влажности воздуха до 65%. Еженедельно в помещении вивария проводилась 20 мин бактерицидная обработка. Эксперименты проводились в одно и то же время суток. Приводимые в таблицах значения показателей представляют собой среднестатистическую оценку результатов измерения параметров с учетом принятых уровней достоверности (р<0,05).We used white outbred sexually mature male and female rats, randomized by weight (220-240 g), kept under laboratory vivarium conditions, for at least two weeks before the experiment, on a standard diet, with free access to water, with natural light mode. The keeping of animals was carried out taking into account the rules adopted by the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for experimental and other scientific purposes (Strasbourg, 1986). Vivarium lighting was natural, the temperature regime corresponded to + 20- + 24 ° C with an air humidity of up to 65%. Weekly bactericidal treatment was carried out in the vivarium for 20 minutes. The experiments were carried out at the same time of day. The values of the indicators given in the tables represent the average statistical assessment of the results of the measurement of parameters, taking into account the accepted levels of reliability (p <0.05).
Острая токсичность композиции МЭФА оценивалась по выживаемости крысах-самцах и самках через 24 часа после парентерального (внутрибрюшинного) и энтерального (внутрижелудочного) введения вещества. Усредненные значения показателей ЛД50 на крысах-самцах - при парентеральном введении 365.6-489.7 мг/кг, при энтеральном - 2862.4-2947.6 мг/кг; на крысах-самках - при парентеральном введении 334.3-392.9 мг/кг, при энтеральном - 1862.4-1947.7 мг/кг.The acute toxicity of the MEFA composition was assessed by the survival of male and female rats 24 hours after parenteral (intraperitoneal) and enteral (intragastric) administration of the substance. The averaged LD 50 values in male rats - with parenteral administration of 365.6-489.7 mg / kg, with enteral - 2862.4-2947.6 mg / kg; on female rats - with parenteral administration of 334.3-392.9 mg / kg, with enteral - 1862.4-1947.7 mg / kg.
Для изучения эндотелиопротекторного действия композиции МЭФА использовали модель эндотелиальной дисфункции, вызванной экспериментальным сахарным диабетом (ЭСД) и острым нарушением мозгового кровотока (ОНМК), вызванного одномоментной билатеральной окклюзией общих сонных артерий.To study the endothelial protective effect of the MEFA composition, we used a model of endothelial dysfunction caused by experimental diabetes mellitus (ESD) and acute cerebral blood flow disorder (stroke) caused by simultaneous bilateral occlusion of the common carotid arteries.
В модели эндотелиальной дисфункции, вызванной экспериментальным ЭСД, в качестве препарата сравнения использован метформин, широко применяющийся для лечения сахарного диабета второго типа (СД2) и обладающий свойством улучшать функцию эндотелия [1. Деркач К.В. и др. Влияние длительной обработки метформином на активность аденилатциклазной системы и NO-синтаз в мозге и миокарде крыс с ожирением // Цитология. - 2015. - Т. 57. - №.5. - 360-369. 2. Agarwal N. et al. Metformin reduces arterial stiffness and improves endothelial function in young women with polycystic ovary syndrome: a randomized, placebo-controlled, crossover trial // The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. - 2010. - T. 95. - №.2. - 722-730.].In the model of endothelial dysfunction caused by experimental ESD, metformin, which is widely used for the treatment of type 2 diabetes mellitus and has the property of improving endothelial function, was used as a reference drug [1. Derkach K.V. et al. Effect of long-term treatment with metformin on the activity of the adenylate cyclase system and NO synthases in the brain and myocardium of obese rats // Tsitologiya. - 2015. - T. 57. - No. 5. - 360-369. 2. Agarwal N. et al. Metformin reduces arterial stiffness and improves endothelial function in young women with polycystic ovary syndrome: a randomized, placebo-controlled, crossover trial // The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. - 2010. - T. 95. - No. 2. - 722-730.].
В модели эндотелиальной дисфункции, вызванной острым нарушением мозгового кровообращения в качестве препаратов сравнения использованы ноотропный препарат фенибут [1. Тюренков И.Н. и др. Гравидопротекторное действие фенибута при экспериментальной преэклампсии // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2014. - Т. 77. - №.11. - 6-10; 2. Волотова Е.В. и др. Сравнительный анализ влияния β-фенильных производных глутаминовой и γ-аминомасляной кислот на мозговой кровоток и функциональное состояние эндотелия сосудов головного мозга животных после необратимой окклюзии общих сонных артерий // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2013. - Т. 76. - №.6. - С. 11-13]; препарат, стимулирующий мозговое кровообращение кавинтон [Ваизова О.Е., Венгеровский А.И., Алифирова В.М. Влияние винпоцетина (кавинтона) на функцию эндотелия у больных хронической ишемией головного мозга // Журн неврол и психиат. - 2006. - Т. 16. - С. 44-50], а также препарат метформин.In the model of endothelial dysfunction caused by acute cerebrovascular accident, the nootropic drug phenibut was used as a comparison drug [1. Tyurenkov I.N. et al. Gravidoprotective effect of phenibut in experimental preeclampsia // Experimental and Clinical Pharmacology. - 2014. - T. 77. - No. 11. - 6-10; 2. Volotova EV et al. Comparative analysis of the effect of β-phenyl derivatives of glutamic and γ-aminobutyric acids on cerebral blood flow and the functional state of the endothelium of cerebral vessels of animals after irreversible occlusion of the common carotid arteries // Experimental and Clinical Pharmacology. - 2013. - T. 76. - No. 6. - S. 11-13]; drug stimulating cerebral circulation Cavinton [Vaizova O.E., Vengerovsky A.I., Alifirova V.M. The effect of vinpocetine (cavinton) on endothelial function in patients with chronic cerebral ischemia // Journal of Neurol and Psychiatrist. - 2006. - T. 16. - S. 44-50], as well as the drug metformin.
Эндотелиопротекторный эффект композиции МЭФА изучался в дозе 10 мг/кг (внутрижелудочно), препараты сравнения: метформин - в дозе 400 мг/кг, фенибут - в клинически эффективной дозе 25 мг/кг, кавинтон - 5 мг/кг.The endothelioprotective effect of the MEFA composition was studied at a dose of 10 mg / kg (intragastrically), comparison drugs: metformin - at a dose of 400 mg / kg, phenibut - at a clinically effective dose of 25 mg / kg, cavinton - 5 mg / kg.
Эндотелиопротективное действие МЭФА сопоставлялось также с таковым для каждого компонента отдельно - гидрохлоридов метил-4-амино-3-фенилбутаноата (МАФ) и L-аргинина (АГХ) в дозах эквивалентых соотношению их в составе МЭФА: гидрохлорид МАФ - 5.2 мг/кг и L-аргинин - 4.8 мг/кг.The endothelioprotective effect of MEFA was also compared with that for each component separately — methyl 4-amino-3-phenylbutanoate (MAP) hydrochlorides and L-arginine (AGC) in doses equivalent to the ratio of MEPA in their composition: MAP hydrochloride — 5.2 mg / kg and L arginine - 4.8 mg / kg.
Влияние МЭФА на функцию эндотелия крыс с ЭСД (таблица 1)The effect of MEFA on the endothelial function of rats with ESD (table 1)
Экспериментальный сахарный диабет у животных вызывали однократным внутрибрюшинным введением 0.9% нормального солевого раствора аллоксана в дозе 150 мг/кг. В результате активации перекисного окисления липидов, гипергликемии, глюкозотоксичности и нарушений липидного обмена у животных развивается эндотелиальная дисфункция. Предварительно, за 18 часов до введения аллоксана животных не кормили.Experimental diabetes in animals was induced by a single intraperitoneal injection of 0.9% normal alloxan saline at a dose of 150 mg / kg. As a result of activation of lipid peroxidation, hyperglycemia, glucose toxicity and lipid metabolism disorders, endothelial dysfunction develops in animals. Previously, 18 hours before the administration of alloxan, animals were not fed.
Для выполнения исследования были сформированы следующие группы животных по 6 крыс в каждой: контрольная группа 1 - группа позитивного контроля (интактные животные, которые перорально получали физиологический раствор); контрольная группа 2 - группа негативного контроля (животные, которым вводили аллоксан и соответственно массе получали перорально физиологический раствор); опытная группа 3 - животные с ЭСД, получавшие композицию МЭФА в дозе 10 мг/кг; опытная группа 4 - животные с ЭСД, получавшие гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноат (МАФ) в дозе 5.2 мг/кг; опытная группа 5 - крысы с ЭСД, получавшие L-аргинин гидрохлорид (АГХ) в дозе 4.8 мг/кг; опытная группа 6 - крысы с ЭСД, получавшие метформин в дозе 400 мг/кг.To carry out the study, the following groups of animals were formed, 6 rats each: control group 1 — positive control group (intact animals that received physiological saline orally); control group 2 — negative control group (animals that were injected with alloxan and, accordingly, received orally physiological saline); experimental group 3 - animals with ESD treated with MEFA composition at a dose of 10 mg / kg; Experimental group 4 — animals with ESD treated with methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride (MAF) at a dose of 5.2 mg / kg; experimental group 5 - rats with ESD treated with L-arginine hydrochloride (AGH) at a dose of 4.8 mg / kg; experimental group 6 - rats with ESD treated with metformin at a dose of 400 mg / kg.
Изучено влияние МЭФА на вазодилатирующую функцию эндотелия сосудов в условиях ЭСД. Исследование вазодилатирующей функции эндотелия у животных осуществляли в проекции среднемозговой артерии в теменной области мозга крыс при внутривенном введении ацетилхолина (АЦХ, производитель Sigma-Aldrich) в дозе 0.01 мг/кг (для анализа стимулируемой выработки оксида азота) и блокатора синтеза оксида азота - нитро-L-аргинина (производитель Sigma-Aldrich) в дозе 10 мг/кг (для анализа базальной выработки оксида азота). Для оценки эндотелий-независимой вазодилатации вводили нитроглицерин (0.007 мг/кг, МТХ, Москва). Тестирование эндотелиальной дисфункции осуществлялось на 14-й день после ежедневного введения композиции МЭФА, ее компонентов, взятых по отдельности и препарата сравнения [ультразвуковой допплерограф, ООО «СП-Минимакс», г. Санкт-Петербург]. Эндотелий-зависимую вазодилатацию под влиянием МЭФА оценивали по изменению мозгового кровотока (МК) у экспериментальных животных после введения модификаторов синтеза оксида азота [Тюренков И.Н., Воронков А.В. Методический подход к оценке эндотелиальной дисфункции в эксперименте // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2008. - Т. 71. - №. 1. - С. 49-51]. Уровень изменения мозгового кровотока после введения ацетилхолина, нитро-L-аргинина, нитроглицерина представлен в процентах относительно исходного уровня, принятого 100% (табл. 1, 2).The effect of MEPA on the vasodilating function of vascular endothelium under ESD conditions was studied. The study of vasodilating endothelial function in animals was carried out in the projection of the midbrain artery in the parietal region of the rat brain with intravenous administration of acetylcholine (SAC, manufacturer Sigma-Aldrich) at a dose of 0.01 mg / kg (for analysis of stimulated production of nitric oxide) and nitric oxide synthesis blocker - nitro L-arginine (manufacturer Sigma-Aldrich) at a dose of 10 mg / kg (for analysis of basal production of nitric oxide). To assess endothelium-independent vasodilation, nitroglycerin (0.007 mg / kg, MTX, Moscow) was administered. Testing of endothelial dysfunction was carried out on the 14th day after daily administration of the MEFA composition, its components, taken separately and the comparison drug [ultrasound dopplerograph, LLC SP-Minimaks, St. Petersburg]. Endothelium-dependent vasodilation under the influence of MEPA was evaluated by changes in cerebral blood flow (MK) in experimental animals after administration of nitric oxide synthesis modifiers [Tyurenkov IN, Voronkov AV A methodological approach to assessing endothelial dysfunction in an experiment // Experimental and Clinical Pharmacology. - 2008. - T. 71. - No. 1. - S. 49-51]. The level of change in cerebral blood flow after the administration of acetylcholine, nitro-L-arginine, nitroglycerin is presented as a percentage of the initial level taken at 100% (Tables 1, 2).
Степень развития эндотелиальной дисфункции оценивали по величине индекса эндотелиальной дисфункции (ИЭД) - соотношение между эндотелий-зависимой (ЭЗВД) и эндотелий-независимой (ЭНЗВД) вазодилатацией. При этом, чем ближе значения ИЭД к 1, тем выше степень развития эндотелиальной дисфункции. ИЭД рассчитывали по формуле: ИЭД=[1-(ЭЗВД/ЭНЗВД)].The degree of development of endothelial dysfunction was assessed by the value of the index of endothelial dysfunction (IED) - the ratio between endothelium-dependent (EDVD) and endothelium-independent (ENZVD) vasodilation. Moreover, the closer the IED values are to 1, the higher the degree of development of endothelial dysfunction. IED was calculated according to the formula: IED = [1- (EDVD / ENZVD)].
Результаты эксперимента показали, что у интактных животных контрольной группы 1 при введении АЦХ наблюдался прирост мозгового кровотока (МК) на 38.4±3.6% от исходного (табл. 1). У животных контрольной группы 2 введение АЦХ вызывало в 3.7 раза меньшее (на 10.4±0.4%) увеличение мозгового кровотока, что является показателем выраженного уменьшения вазодилатирующей функции эндотелия. У животных опытных групп 3, 4, 5 и 6 при введении АЦХ наблюдалось увеличение МК на 25.2%, 13.5, 16.2 и 26.6% соответственно по сравнению с исходными показателями, что значительно выше, чем у животных контрольной группы 2 (табл. 1). Таким образом, композиция МЭФА (опытная группа 3) по влиянию на стимулируемую выработку оксида азота оказывала сопоставимый эффект с препаратом сравнения метформином (опытная группа 6).The experimental results showed that in intact animals of control group 1, with the introduction of ACC, an increase in cerebral blood flow (MK) was observed by 38.4 ± 3.6% of the initial value (Table 1). In animals of the control group 2, the introduction of ACC caused a 3.7 times smaller (10.4 ± 0.4%) increase in cerebral blood flow, which is an indicator of a pronounced decrease in the vasodilating function of the endothelium. In animals of experimental groups 3, 4, 5, and 6, with the introduction of ACC, an increase in MK was observed by 25.2%, 13.5, 16.2, and 26.6%, respectively, compared with the initial indices, which is significantly higher than in animals of the control group 2 (Table 1). Thus, the MEFA composition (experimental group 3) had a comparable effect on the stimulated production of nitric oxide with the comparison drug metformin (experimental group 6).
При введении нитро-L-аргинина (блокатора синтеза NO) у крыс контрольной группы 1 наблюдалось значительное снижение на (41.8±3.1%) скорости МК от исходного уровня, у контрольной группы 2 - лишь на 12.6±0.9%, по сравнению с исходными данными (табл. 1). У животных опытных групп 3 и 6 после введения нитро-L-аргинина наблюдалось уменьшение МК на 28.5±1.8% и 31.5±1.2% соответственно, а в опытных группах 4 и 5 этот показатель снижался в меньшей степени - на 13.3±2.4% и 16.6±2% соответственно (табл. 1).With the introduction of nitro-L-arginine (a blocker of NO synthesis) in rats of control group 1, a significant decrease (41.8 ± 3.1%) in the MK speed from the initial level was observed, in control group 2 - only by 12.6 ± 0.9%, compared with the initial data (tab. 1). In animals of experimental groups 3 and 6, after the introduction of nitro-L-arginine, a decrease in MK was observed by 28.5 ± 1.8% and 31.5 ± 1.2%, respectively, and in experimental groups 4 and 5, this indicator decreased to a lesser extent - by 13.3 ± 2.4% and 16.6 ± 2%, respectively (table. 1).
Эндотелий-независимая вазодилатация (ЭНЗВД), вызванная введением нитроглицерина, как донатора NO, во всех группах животных была сопоставимой: скорость кровотока в проекции среднемозговой артерии увеличивалась на 48.3±3.9% (группа 1), 47.3±5.2% (группа 2), 45.5±3.8% (группа 3), 46.4±5.8% (группа 4), 41.5±2.7% (группа 5) и 48.8±4.5% (группа 6), что свидетельствует о сохранении ЭНЗВД у животных с ЭСД (табл. 1).Endothelium-independent vasodilation (ENVAS), caused by the administration of nitroglycerin as an NO donor, was comparable in all groups of animals: the blood flow velocity in the projection of the midbrain artery increased by 48.3 ± 3.9% (group 1), 47.3 ± 5.2% (group 2), 45.5 ± 3.8% (group 3), 46.4 ± 5.8% (group 4), 41.5 ± 2.7% (group 5) and 48.8 ± 4.5% (group 6), which indicates the preservation of ENVD in animals with ESD (Table 1).
Сравнительная оценка индекса эндотелиальной дисфункции показала, что наивысшее значение ИЭД наблюдалось у животных контрольной группы 2, а у крыс опытных групп 3 и 6 - наиболее выраженное его снижение.A comparative evaluation of the index of endothelial dysfunction showed that the highest IED was observed in animals of control group 2, and in rats of experimental groups 3 and 6 - its most pronounced decrease.
Таким образом, композиция МЭФА улучшает нарушенную вазодилатирующую функцию эндотелия у экспериментальных животных.Thus, the MEFA composition improves impaired vasodilating endothelial function in experimental animals.
Параметры прироста и падения скорости МК при активации и блокаде синтеза NO у животных опытной группы 3, а также значения индекса эндотелиальной дисфункции свидетельствуют, что заявляемое средство МЭФА обладает эндотелиопротекторным действием. Оно способно увеличивать стимулируемый и базальный синтез оксида азота в значительно большей степени, чем ее компоненты гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноат и L -аргинин гидрохлорид (АГХ) и сопоставимо по действию с метморфином.The parameters of the increase and decrease in the rate of MK during activation and blockade of NO synthesis in animals of experimental group 3, as well as the values of the endothelial dysfunction index indicate that the claimed MEFA agent has an endothelial protective effect. It is able to increase the stimulated and basal synthesis of nitric oxide to a much greater extent than its components, methyl-4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride (AGC) and is comparable in action to metmorphine.
Влияние МЭФА на функцию эндотелия крыс в условиях острого нарушения мозгового кровотока (таблица 2)The effect of MEFA on the function of rat endothelium in conditions of acute cerebrovascular accident (table 2)
Острое нарушение мозгового кровотока (ОНМК) моделировалось следующим образом: наркотизированным хлоралгидратом (400 мг/кг внутрибрюшинно) животных осуществлялась одномоментная двусторонняя перевязка общих сонных артерий (ОСА). За 24 часа до операции животных не кормили и сохраняли свободный доступ к воде.Acute cerebral blood flow disorder (ONMC) was modeled as follows: anesthetized chloral hydrate (400 mg / kg ip) of animals was performed simultaneously with bilateral bilateral ligation of the common carotid arteries (OSA). 24 hours before the operation, the animals were not fed and maintained free access to water.
Исследование вазодилатирующей функции эндотелия у животных осуществляли в проекции среднемозговой артерии в теменной области мозга крыс при внутривенном введении ацетилхолина (АЦХ) в дозе 0.01 мг/кг (для анализа стимулируемой выработки оксида азота), и нитроглицерина в дозе 0.007 мг/кг (для оценки эндотелий-независимой вазодилатации). Изменение церебрального кровотока регистрировали через 72 часа после окклюзии с помощью ультразвукового допплерографа (ООО «СП-Минимакс», г. Санкт-Петербург), с использованием датчика с рабочей частотой в 25 Гц. Введение модуляторов синтеза оксида азота производилось в верхнюю хвостовую вену животного.The study of vasodilating endothelial function in animals was carried out in the projection of the midbrain artery in the parietal region of the rat brain with intravenous administration of acetylcholine (ACC) at a dose of 0.01 mg / kg (for analysis of stimulated production of nitric oxide) and nitroglycerin at a dose of 0.007 mg / kg (for evaluating endothelium -independent vasodilation). Changes in cerebral blood flow were recorded 72 hours after occlusion using an ultrasound dopplerograph (LLC SP-Minimaks, St. Petersburg), using a sensor with an operating frequency of 25 Hz. Nitric oxide synthesis modulators were introduced into the superior tail vein of the animal.
Для проведения эксперимента были сформированы следующие группы животных по 6 крыс в каждой: контрольная группа 1 - группа позитивного контроля (ложнооперированные животные, которым после подведения лигатуры под сосуды общие сонные артерии не затягивались); контрольная группа 2 - группа негативного контроля (животные с одномоментной окклюзией сонных артерий, получавшие дистиллированную воду); опытная группа 3 - животные с ишемией, получавшие композицию МЭФА; опытная группа 4 - животные с ишемией, получавшие гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноат (МАФ); опытная группа 5 - крысы с ишемией, получавшие L-аргинин гидрохлорид (АГХ); опытная группа 6 - крысы с ишемией, получавшие фенибут, опытная группа 7 - крысы с ишемией, получавшие кавинтон; опытная группа 8 - крысы с ишемией, получавшие метформин.For the experiment, the following groups of animals were formed, 6 rats each: control group 1 — positive control group (false-operated animals, to which the common carotid arteries did not drag out after ligating the vessels); control group 2 — negative control group (animals with simultaneous occlusion of the carotid arteries receiving distilled water); experimental group 3 - animals with ischemia treated with MEFA composition; Experimental group 4 — animals with ischemia treated with methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride (MAF); experimental group 5 - rats with ischemia treated with L-arginine hydrochloride (AGH); experimental group 6 — rats with ischemia receiving phenibut; experimental group 7 — rats with ischemia receiving cavinton; experimental group 8 - rats with ischemia treated with metformin.
Композицию МЭФА, ее компоненты (гидрохлорид метил 4-амино-3-фенилбутаноата и L-аргинин гидрохлорид) и препараты сравнения фенибут и кавинтон вводили внутрижелудочно через 2 часа после окклюзии и далее один раз в сутки в течение трех дней. Активность МЭФА и препаратов сравнения оценивали по изменению мозгового кровотока в проекции средней мозговой артерии и значению индекса эндотелиальной дисфункции [соотношение между эндотелий-зависимой (ЭЗВД) и эндотелий-независимой (ЭНЗВД) вазодилатацией].The MEFA composition, its components (methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride) and phenibut and cavinton comparison preparations were administered intragastrically 2 hours after occlusion and then once a day for three days. The activity of MEFA and comparison drugs was evaluated by the change in cerebral blood flow in the projection of the middle cerebral artery and the value of the index of endothelial dysfunction [ratio between endothelium-dependent (EDVD) and endothelium-independent (ENZVD) vasodilation].
Результаты исследования показали, что уровень локального мозгового кровотока (МК) после ОСА у животных контрольной группы 2 (2.52 у.е.) был достоверно ниже, чем контрольной группы 1 (4.67 у.е.) (табл. 2). При введении композиции МЭФА у животных опытной группы 3 уровень МК был значительно выше (3.54±0.18 у.е.) по сравнению с таковым контрольной группы 2. При введении АЦХ у животных контрольной группы 1 наблюдался прирост мозгового кровотока на 36.9% от исходного. У крыс контрольной группы 2 почти в два раза меньше - 17.1%. У животных опытных групп 3, 4, 5, 6, 7 и 8 при введении АЦХ наблюдалось увеличение МК на 31.4, 22.3, 23.1, 23.9, 24.7 и 26.2%) соответственно по сравнению с исходными показателями, что выше, чем у крыс контрольной группы 2 (табл. 2).The results of the study showed that the level of local cerebral blood flow (MK) after OSA in animals of control group 2 (2.52 cu) was significantly lower than that of control group 1 (4.67 cu) (Table 2). With the introduction of the MEFA composition in animals of experimental group 3, the MK level was significantly higher (3.54 ± 0.18 cu) compared with that of control group 2. With the introduction of ACC in animals of control group 1, an increase in cerebral blood flow by 36.9% of the initial value was observed. In rats of control group 2, almost two times less - 17.1%. In animals of the experimental groups 3, 4, 5, 6, 7, and 8, with the introduction of ACC, an increase in MK was observed by 31.4, 22.3, 23.1, 23.9, 24.7, and 26.2%), respectively, compared with the initial values, which is higher than in rats of the control group 2 (tab. 2).
При введении нитро-L-аргинина (блокатора синтеза NO) у крыс контрольной группы 1 наблюдалось значительное снижение на (38.2±1%) скорости МК от исходного уровня, у контрольной группы 2 - на 9.6±0.9%, по сравнению с исходными данными (табл. 2). В группе животных опытной группы 3 после введения нитро-L-аргинина наблюдалось уменьшение МК на 30.9±1.7%, а у крыс опытных групп 4, 5, 6, 7, 8 этот показатель снижался в меньшей степени - от 13.3 до 23.3% (табл. 2).With the introduction of nitro-L-arginine (a blocker of NO synthesis) in rats of control group 1, a significant decrease (38.2 ± 1%) in the MK speed from the initial level was observed, in control group 2, by 9.6 ± 0.9%, compared with the initial data ( table 2). In animals of experimental group 3, after administration of nitro-L-arginine, a decrease in MK by 30.9 ± 1.7% was observed, and in rats of experimental groups 4, 5, 6, 7, 8 this indicator decreased to a lesser extent - from 13.3 to 23.3% (table . 2).
Таким образом, введение композиции МЭФА повышало степень эндотелий-зависимой вазодилатации у животных опытной группы 3 по сравнению с группой крыс негативного контроля 2 (табл. 2). Сохранность адекватного уровня мозгового кровотока и близкая к нормальной реакция эндотелия мозговых сосудов на введение ацетилхолина, в опытной группе 3 свидетельствует о церебровазодилатирующей активности МЭФА и способности улучшать вазодилатирующую функцию эндотелия.Thus, the introduction of the MEFA composition increased the degree of endothelium-dependent vasodilation in animals of experimental group 3 compared with the group of rats of negative control 2 (Table 2). The preservation of an adequate level of cerebral blood flow and a close to normal reaction of the cerebral vascular endothelium to the administration of acetylcholine in experimental group 3 indicates cerebro-vasodilating activity of MEPA and the ability to improve vasodilating endothelial function.
Для оценки эндотелий-независимой вазодилатации животным вводился нитроглицерин (табл. 2). При введении нитроглицерина увеличение МК было статистически сопоставимым во всех экспериментальных группах животных (табл. 2). При этом процентное соотношение прироста МК на введение индукторов эндотелий-зависимой и эндотелий-независимой вазодилатации показало, что выраженность эндотелиальной дисфункции значительно меньше у животных опытной группы 3.To evaluate endothelium-independent vasodilation, animals were injected with nitroglycerin (Table 2). With the administration of nitroglycerin, an increase in MK was statistically comparable in all experimental groups of animals (Table 2). Moreover, the percentage ratio of MK growth to the introduction of inducers of endothelium-dependent and endothelium-independent vasodilation showed that the severity of endothelial dysfunction is significantly less in animals of experimental group 3.
Сравнительная оценка индекса эндотелиальной дисфункции показала, что у животных контрольной группы 2 значение ИЭД в 3.5 раза выше (0.56) чем в группе животных контрольной группы 1 (0.16), в то время как у крыс опытных групп 4 и 5 оно снижалось до 0.42 и 0.39, соответственно (табл. 2). Наибольшее снижение ИЭД, по сравнению с контрольной группой 2, наблюдалось у животных опытной группы 3 (0.25) (табл. 2), что свидетельствует о значительном снижении выраженности эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных.A comparative evaluation of the endothelial dysfunction index showed that in animals of the control group 2, the IED is 3.5 times higher (0.56) than in the group of animals in the control group 1 (0.16), while in rats of the experimental groups 4 and 5 it decreased to 0.42 and 0.39 , respectively (table. 2). The largest decrease in IED, compared with control group 2, was observed in animals of experimental group 3 (0.25) (Table 2), which indicates a significant decrease in the severity of endothelial dysfunction in experimental animals.
Результаты проведенного эксперимента показали, что композиция МЭФА при введении модификаторов синтеза эндогенного оксида азота (NO) животным в условиях сахарного диабета и недостаточности мозгового кровообращения, не изменяя эндотелий-независимую, увеличивает эндотелий-зависимую вазодилатацию церебральных сосудов, снижая индекс эндотелиальной дисфункции. Эти результаты свидетельствуют, что заявляемое комбинированное средство усиливает NO-синтезирующую функцию и обладает эндотелиопротекторным действием в условиях экспериментального сахарного диабета и нарушения мозгового кровообращения, при этом по влиянию на ЭЗВД превосходит ее компоненты - гидрохлорид метил-4-амино-3-фенилбутаноат и L-аргинин гидрохлорид и препараты сравнения - фенибут, кавинтон, метформин.The results of the experiment showed that the MEFA composition with the introduction of modifiers for the synthesis of endogenous nitric oxide (NO) in animals under conditions of diabetes mellitus and cerebrovascular insufficiency, without changing endothelium-independent, increases endothelium-dependent cerebral vasodilation, reducing the index of endothelial dysfunction. These results indicate that the inventive combination agent enhances the NO-synthesizing function and has an endothelioprotective effect in experimental diabetes mellitus and cerebrovascular accident, while in terms of its effect on EDVD it exceeds its components - methyl-4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L- arginine hydrochloride and comparison drugs - phenibut, cavinton, metformin.
Лекарственное средство, содержащее в качестве действующего вещества, композицию гидрохлорида метил-4-амино-3-фенилбутаноата и L-аргинина гидрохлорида, в зависимости от выбранных носителей и целевых добавок, может быть изготовлено в любой твердой или жидкой лекарственной форме.A drug containing, as an active ingredient, a composition of methyl 4-amino-3-phenylbutanoate hydrochloride and L-arginine hydrochloride, depending on the chosen carriers and target additives, can be prepared in any solid or liquid dosage form.
Таким образом, предлагаемое средство обладает выраженными эндотелиопротекторными свойствами при эндотелиальной дисфункции различного генеза, вызванной сахарным диабетом и недостаточностью мозгового кровообращения, имеет низкую токсичность, что предполагает возможность его длительного применения у больных с различными сердечно-сосудистыми заболеваниями, а также для профилактики и лечения сосудистых осложнений сахарного диабета и др.Thus, the proposed tool has pronounced endothelial protective properties for endothelial dysfunction of various origins caused by diabetes mellitus and cerebrovascular insufficiency, has low toxicity, which suggests the possibility of its long-term use in patients with various cardiovascular diseases, as well as for the prevention and treatment of vascular complications diabetes mellitus, etc.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015146798/15A RU2601622C1 (en) | 2015-10-29 | 2015-10-29 | Agent possessing endothelium protective effect in conditions of experimental diabetes mellitus and cerebral blood circulation disorder |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015146798/15A RU2601622C1 (en) | 2015-10-29 | 2015-10-29 | Agent possessing endothelium protective effect in conditions of experimental diabetes mellitus and cerebral blood circulation disorder |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2601622C1 true RU2601622C1 (en) | 2016-11-10 |
Family
ID=57278292
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015146798/15A RU2601622C1 (en) | 2015-10-29 | 2015-10-29 | Agent possessing endothelium protective effect in conditions of experimental diabetes mellitus and cerebral blood circulation disorder |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2601622C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2694527C1 (en) * | 2018-02-06 | 2019-07-16 | Шмуэль Борис Левит | Combination for regenerative therapy of type 1 diabetes mellitus |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2216322C1 (en) * | 2002-02-28 | 2003-11-20 | Закрытое акционерное общество "АСГЛ-Фармацевтические Инновации" | Agent eliciting anti-ischemic, hypotensive, anti- -arrhythmic and nootropic activity |
| US20040005306A1 (en) * | 1999-10-29 | 2004-01-08 | Joseph Loscalzo | Methods of treating vascular diseases characterized by nitric oxide insufficiency |
| RU2460529C1 (en) * | 2011-06-30 | 2012-09-10 | Елена Геннадьевна Цублова | Drug possessing actoprotective, antihypoxic, neuroprotective, antiamnestic and thermoprotective activity |
-
2015
- 2015-10-29 RU RU2015146798/15A patent/RU2601622C1/en active IP Right Revival
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20040005306A1 (en) * | 1999-10-29 | 2004-01-08 | Joseph Loscalzo | Methods of treating vascular diseases characterized by nitric oxide insufficiency |
| RU2216322C1 (en) * | 2002-02-28 | 2003-11-20 | Закрытое акционерное общество "АСГЛ-Фармацевтические Инновации" | Agent eliciting anti-ischemic, hypotensive, anti- -arrhythmic and nootropic activity |
| RU2460529C1 (en) * | 2011-06-30 | 2012-09-10 | Елена Геннадьевна Цублова | Drug possessing actoprotective, antihypoxic, neuroprotective, antiamnestic and thermoprotective activity |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| И.Н. Тюренков и др. "Теоретическое обоснование применения ГАМК-ергических средств для лечения ишемии мозга", Биомедицина, номер 4, том 1, 2006, стр.117-118, найдено в Интернет на сайте:http://cyberleninka.ru/article/n/teoreticheskoeobosnovanie- primeneniya-gamk-ergicheskih-sredstv-dlya-lecheniyaishemii- mozga. И.В. Антонова "Сахарный диабет и нарушения мозгового кровообращения", Журнал "Медицинские новости" N 7, 2004, стр.7-14, найдено в Интернет на сайте: http://www.mednovosti.by/journal.aspx?article=1781. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2694527C1 (en) * | 2018-02-06 | 2019-07-16 | Шмуэль Борис Левит | Combination for regenerative therapy of type 1 diabetes mellitus |
| US11116768B2 (en) | 2018-02-06 | 2021-09-14 | Levicure Ltd. | Combination treatment for the regenerative therapy of type 1 diabetes mellitus patients |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2159231C2 (en) | 2,4-DISULFONYL-α-PHENYL-TERT-BUTYLNITRON, PHARMACEUTICALLY ACCEPTABLE SALTS THEREOF, FORM OF FREE ACID OR SALT FORM THEREOF, PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS AND METHODS OF MEDICAL TREATMENT | |
| JP6462045B2 (en) | Isolation and purification of sulforaphane | |
| KR20120055692A (en) | Sigma ligands for the prevention or treatment of pain induced by chemotherapy | |
| EP1961420B1 (en) | Agent for prevention and treatment of acute renal failure | |
| US20230286974A1 (en) | Composition and Method for Treating Metabolic Disorders | |
| US20160129030A1 (en) | Treatment of mtor hyperactive related diseases and disorders | |
| JP5810084B2 (en) | Nitric oxide production regulator | |
| WO2008065044A1 (en) | Use of phosphoenolpyruvate derivatives for treating necrosis of cardiac muscle tissue | |
| NL8602933A (en) | MEDICINE FOR TREATING DEMENTIA. | |
| EP1598072A1 (en) | Medical drug containing fine particle of noble metal | |
| TWI481401B (en) | Medicament | |
| FR3107897A1 (en) | MONONUCLEOTID NICOTINAMIDE DERIVATIVES | |
| RU2601622C1 (en) | Agent possessing endothelium protective effect in conditions of experimental diabetes mellitus and cerebral blood circulation disorder | |
| CA2251226C (en) | Use of 2,5-dihydroxybenzenesulphonic derivatives in the manufacture of drugs for normalising the endothelial function and treating sexual dysfunctions, the vascular complications of diabetes and vascular disorders of endothelial origin | |
| US20090318454A1 (en) | Novel antioxidants and methods of treatment | |
| EP4331583A1 (en) | Blood carnitine-increasing agent | |
| Shabanov et al. | Hypoxia and antihypoxants, focus on brain injury | |
| JPS60120995A (en) | Production of new amino acid derivative | |
| EP0928191A1 (en) | Pharmaceutical compositions comprising s-alkylisothiouronium derivatives | |
| CN114699401A (en) | Application of isorhamnetin in preparation of thoracic aorta vasodilation drugs | |
| FR2651230A1 (en) | DERIVATIVES OF 5-AMINO-1,2,3,4 TETRAHYDRO-ACRIDINE AND APPLICATIONS AS DRUGS. | |
| TW200539859A (en) | Methods for increasing neurotransmitter levels using hydroxycitric acid | |
| US11957665B1 (en) | Pharmaceutical composition for preventing or treating alopecia areata acting as a functional antagonist for S1PR1 and S1PR4 | |
| JP7327788B2 (en) | Saccharification product production inhibitor and pharmaceutical composition | |
| JP2756941B2 (en) | Use of 2-chloro-3-arylamino-1,4-naphthoquinone derivatives as platelet aggregation inhibitors |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20171030 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20181211 |